酵母菌分類
根據荷蘭Lodder & Kreger-van Rij 所著“The Yeasts, A Taxonomy Study”
分類主要依據是
1. 形態
2. 對硝酸鹽或碳源的利用
3. 對糖的發酵性
形態與大小：因酵母種類不同而不同，同一種也會因培養條件或發育時期不同而有異，一般直徑約在5 μm，顯微鏡40X及100X接物鏡下皆可觀察到。
cerevisiae型：球形與卵形(如啤酒酵母Saccharomyces cereviisiae)
ellipsoideus型：橢圓形(如葡萄酒酵母Saccharomyces ellipsoideus)
pastorianus型：香腸形
apiculatus型：檸檬形
trigonopsis型：三角形
增殖法：主要為營養增殖(即出芽生殖(budding))，偶而發生有性生殖時則行子囊胞子來增殖。
母細胞(mother cell)：原來的細胞
子細胞daughter cell)：增殖後的細胞
多極出芽(multilateral budding)：同一個細胞上數個地方可以出芽者
兩極出芽(bipolar budding)：只有細胞兩端才會出芽者(如Kloeckera spp.)
偽菌絲(pseudomycelium)：出芽後的細胞一直連成很長，呈菌絲狀者(如Candida spp.)
真菌絲(true mycelium)：有些酵母會形成如同黴菌具有隔膜(septum)的真菌絲(如Endomycopsis spp., Trichosporum spp.)
分裂酵母(fission yeast)：非出芽，而是在細胞中央形成隔膜再分裂成兩個細胞者(如Schizosaccharomyces spp.)
出芽分裂(bud fission)：出芽後基部不縮小，在子細胞與母細胞之間直接分裂的酵母謂之(如Saccharomycodes spp.)
子囊孢子(ascospore)：在不利的環境下，在酵母的生活史中某一部分會形成子囊孢子
有孢子酵母(sporogenous yeasts)：能產生子囊孢子的酵母稱之
無孢子酵母(asporogenous yeasts)：不形成子囊孢子之酵母
一倍體營養細胞(haploid)：
由二個一倍體細胞接合後再形成子囊胞子者(如Schizosaccharomyces)
出芽時分裂的二個核融合後在母細胞內形成子囊孢子者(如Debaryomyces)
母細胞與出芽細胞間融合後的核，移到另一個出芽細胞內形成子囊孢子者(如Nadsonia)
二倍體營養細胞(diploid)：環境不合適時，停止出芽生殖，直接減數分裂產生子囊胞子(如Saccharomycodes(孢子能在子囊內直接接合成兩倍體)或Saccharomyces(發芽後的胞子間才接合成兩倍體))
子囊(ascus) 內的孢子數，普通為2 or 4，多者可8 or 16，偶而會有奇數，其形狀有：
無孢子的酵母則無核融合或細胞接合，且營養細胞上突出的小柄(sterigma)長出子細胞，並以彈射的方式形成射出孢子(ballistospore) (如Sporobolomyces)，有些會形成特有的厚膜休眠孢子(teliospore) (如Rhodosporidium)，這類的酵母都是屬於擔子菌類(Basidiomycetes)。
酵母的分類
Basidiomycetaceous Yeasts (擔子菌酵母)：
Ustilaginales
Rhodosporidium
Leucosporidium
Ascomycetaceous Yeasts (子囊菌酵母)：
Endomycetales (具有ascus)
Saccharomycetaceae：子囊的形狀為球形或橢圓形
Schizosaccharomyceoideae：分裂生殖
Schizosaccharomyces
Nadsonioideae：兩極出芽
Saccharomycodes
Hanseniaspora
Saccharomycoideae：多極出芽
Saccharomyces
Kluyveromyces
Pichia
Hansennula
Debaryomyces
Lipomycetoideae：母細胞突出形成袋狀的子囊
Lipomyces
Spermophthoraceae：子囊形狀為針形或紡錘形
Nematospora
Fungi imperfecti yeast (不完全菌酵母)：
Moniliales
Sporobolomycetaceae (具ballistospore，與擔子菌有密切關係) Bullera
Sporobolomyces
Sporidiobolus
Cryptococcaceae：無ascus
Bettanomyces
Candida
Cryptococcus
Kloeockera
Oosporidium
Pityrosporum
Rhodotorula
Schizoblastosporium
Sterigmatomyces
Torulopsis
Trichosporon
Trigonopsis
brewer’s yeast 啤酒酵母
sake yeast 清酒酵母
wine yeast 葡萄酒酵母
alcohol yeast 酒精酵母
baker’s yeast 麵包酵母
soysauce yeast 醬油酵母
fodder yeast 飼料酵母
petroleum yeast 石油酵母
top yeast 啤酒發酵中，酵母會浮在液面上層者(英國)
bottom yeast 啤酒發酵中，酵母會沈在液面底層者(德國)
red yeast 紅色酵母(如Rhodotorula or Sporobolomyces)
black yeast 黑色酵母
film yeast 產膜酵母：在液面形成皮膜來增殖者(如Pichia, Hansenula)
主要酵母菌的屬介紹：
1. Schizosaccharomyces屬：營養細胞圓筒形，分裂生殖形成子囊，主要在熱帶代表種S. pombe：是從非洲人的Pombe酒中分離出的酵母，酒精發酵能力很強。Schizosaccharomyces octosporus：主要由果實中分離出。
Schizosaccharomyces pombe
2. Saccharomycodes屬：出芽分裂的酵母，此屬只一種S. ludwigii，蔗糖會發酵，但對maltose不會發酵，故麥汁的發酵因maltose會殘留可釀成具有甜味的酒。
3. Hanseniaspora屬：檸檬形兩極出芽，為果實上之野生酵母，在葡萄酒釀造初期會出現，不久即被淘汰。代表種為H. valbyensis。
4. Saccharomyces屬：酒精發酵能力很強，為酵母中最重要的屬，是傳統以來各類酒、製造酒精、製造麵包等所使用的。細胞有球形、卵形或橢圓形，多極出芽。代表種有：
S. cerevisiae
=S. sake
=S. ellipsoideus
=S. cerevisiae var. ellipsoideus
=S. formosensis ? (or =S. cerevisiae var. formosensis? 早期台研396釀酒精菌種)
為製造啤酒、葡萄酒、清酒、酒精、麵包等最常使用之菌種。
S. carlsbergensis
=S. uvarum
從Carlberg的啤酒釀造場所分離之下面酵母(bottom yeast)。
S. bayanus
=S. pastorianus
為不良酵母，造成啤酒發酵過程中有臭氣產生，嚴重影響啤酒品質(有害菌)。S. diastaticus
會分解dextrin & starch，不利於啤酒發酵，為啤酒製造過程中之有害菌。
S. rouxii
=Zygosaccharomyces major (醬油有益菌)
=Z. soya (醬油有益菌)
=Z. salus (有害菌，會於醬油表面形成皮膜)
=Z. japonicus (有害菌，會於醬油表面形成皮膜)
為耐鹽性酵母，在醬油膠中常被發現，為一種有用酵母
5. Kluyveromyces屬：具有可使乳糖發酵產生酒精或乳酸。
代表種：
K. fragillis = Saccharomyces fragilis (從乳酒中分離出者)
K. lactis = S. lactis (從牛乳或cheese中分離出者)
6. Pichia屬：在釀造物表面常會形成皺紋狀薄膜的產膜酵母，多半為有害菌。
代表種為P. membranaefaciens，會消耗ethanol，對糖無發酵能力，常在鹽漬物液的表面形成皮膜，是啤酒及葡萄酒發酵過程中的有害菌。
7. Hansenula屬：同Pichia為產膜酵母，但Pichia不利用硝酸鹽，而Hansenula則可以利用硝酸鹽。對酒精生成ester的能力很強，代表種為H. anomala，ascospore為帽子形。會消耗酒精的有害菌，但對清酒的芳香生成有關，故又稱為清酒後熟酵母。
8. Debaryomyces屬：會形成表面有突起的子囊胞子，無發酵性，耐鹽(會有皮膜，如鹽漬或醃肉常見)及耐糖能力很強，會產生riboflavin。代表種為 D. hansenii，從cheese & sausage中分離出者。
9. Lipomyces屬：細胞具粘性莢膜，老細胞會有很大的脂肪球，故又稱脂肪酵母。代表種為L. starkeyi，乾燥菌體中含有60%脂肪，為將來可能具有油脂生成能力的潛力菌種。
10. Brettanomyces屬：在好氣情形下使糖產生醋酸，細胞常呈特有的尖頭橢圓形狀，無ascus產生。代表種為B. bruxellensis，為下面發酵啤酒的有害菌，與上面發酵啤酒的後發酵有關。
11. Candida屬：細胞球形、卵形或圓筒形，易產生偽菌絲，具酒精發酵能力之種
很多。常見的種有：
C. utilis
=Torulopsis utilis
=Torula utilis
能利用xylose，故可以利用亞硫酸紙漿之廢液來培養菌體當飼料酵母，也可當inosinic acid的原料。
C. tropicalis為飼料酵母，具利用碳化氫能力。
C. lipolytica具利用碳化氫能力，為重要的石油酵母，主要是生產菌體以獲得蛋白質，也能由n-paraffin產生多量的α-ketoglutaric acid or citric acid。(ps. Citric acid亦可由糖的生化反應來生產)
C. guilliermondii & C. robusta為生產riboflavin，尤其C. robusta能利用acetic acid為單一碳源來生產大量的riboflavin。
C. albicans為引起人類及動物皮膚及粘膜病變(Candida症)的病原菌。
12. Cryptococcus屬：為球狀或卵形之細胞，無偽菌絲，細胞具粘性莢膜，無發酵能力，能形成starch-like物質。C. neoformans可感染人畜Cryptococcus症的病原菌。
13. Kloeckera屬：只會發酵glucose，常見於果實及果汁中，檸檬形兩極出芽細胞，代表種為K. apiculata。
14. Rhodotorula屬：會產生carotenoid色素，故稱紅色酵母，無發酵能力，但會污染食品。代表種為R. glutinis，乾燥菌體內脂肪量可達60%以上，與Lipomyces屬同為具有油脂生產能力之潛力菌種。
會產生carotenoid紅色色素的酵母還有Sporobolomyces屬(具ballistospore)及Rhodosporidium屬(會形成teliospore)。
15. Torulopsis屬：小型球形或卵形細胞，無ascus，亦無pseudomycelium，故能與Candida屬區別，又不形成starch-like物質，故能與Cryptococcus屬區別。代表種T. versatilis
=T. etchellsii
為好鹽性，會產生醬油的芳香成分，為醬油後熟的重要酵母。
酵母菌的种类及它们各自的作用：
工业用酵母菌分类
母菌是单细胞真核微生物，在自然界中普遍存在，主要分布于含糖质较多的偏酸性环境中，如水果、蔬菜、花蜜和植物叶子上，以及果园土壤中。石油酵母较多地分布在油田周图的土壤中。酵母菌大多为腐生。生长最适温度为25~30℃。工业上常用的酵母菌有以下几种：1，啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)
啤酒酵母是酵母属中应用较广泛的一个种。
在麦芽汁培养基上生长的啤酒酵母，其细胞为圆形、卵圆形或椭圆形。细胞单生、双生或成短串或成团。酵母细胞大型的约5~10×6~12μm，小型的约3~9×4.5~10μm。
细胞的长宽比例为1~2左右。
根据啤酒酵母细胞长与宽的比例，可把它们分为三组：第一组酵母的细胞多为圆形、卵圆形，长宽比例为1~2。这个组的酵母主要供生产啤酒、白酒和酒精以及面包用。第二组酵母的细胞大多是卵形或长卵形，长宽比例为2。包括啤酒酵母的一些变种，如葡萄酒酵母等菌种，一般多为供生产葡萄酒、果酒用。第三组酵母的细胞为长圆形，长宽比例大于2。这组的酵母耐高渗透压，供发酵甘蔗糖蜜生产酒精用。
在麦芽汁琼脂培养基上，菌落为白色，有光泽、乎坦、边缘整齐。在液体培养基中的生长行为有两类，工业上把发酵度较高，不易凝集沉淀，浮于上面的酵母称为上面酵母；把易于凝集沉淀，发酵度较低的酵母称为下面酵母。
啤酒酵母的无性繁殖为芽殖，有性繁殖能形成子囊孢子。一般每个子囊内含有1、4个圆形、卵圆形的表面光滑的子囊孢子。
啤酒酵母能发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖及半乳糖，不能发酵乳糖及蜜二糖。对棉子糖只能发酵1／3左右。在氮源中能利用硫酸铵，不能利用硝酸钾。
啤酒酵母的应用范围十分广泛，常用于传统的发酵行业，如啤酒、白酒、果酒、酒精、药用酵母片以及制造面包等，所以又称为酿酒酵母。近几年来，还利用啤酒酵母提取核酸、麦角固醇、细胞色素C、凝血质和辅酶A等。由于酵母菌体内的维生素、蛋白质含量较高，食用安全，所以啤酒酵母作为一种单细胞蛋白(SCP)可作食用、药用和饲料用酵母。它的转化酶可用于转化蔗糖，制造酒心巧克力。在维生素的微生物法测定中，啤酒酵母常被用于测定生物素、泛酸、硫胺素、肌醇等的含量。
2，葡萄汁酵母（Saccharomyces uvarum）
在麦芽汁中25℃培养3天，细胞图形、卵形、椭圆形或腊肠形。在麦芽汁琼脂培养基上菌落为乳白色，平滑、有光泽、边缘整齐。
能产生子囊抱子，每个子囊内有孢子1、4个。孢子呈圆形或椭圆形，表面光滑。此菌发酵能力甚强，在液体培养中常出现混浊现象。
葡萄汁酵母与酿酒酵母相似。主要的区别在于它能发酵棉子糖和蜜二糖。葡萄汁酵母也能发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和半乳糖。不能发酵乳糖。能利用硫酸铵，不能利用硝酸钾。葡萄汁酵母常用于啤酒酿造的底层发酵，也可食用、药用或作饲料。
3，汉逊酵母(Hansenula)
此属酵母营养细胞的形态多样，为圆形、椭圆形、卵圆形、腊肠形不等。多边芽殖。有的种类能形成假菌丝。
子囊形状与营养细胞相同。子囊孢子1、4个，形状为帽形、土星形、圆形、半圆形，表面光滑。
异常汉逊酵母异常变种是汉逊酵母属中一个常见的种。细胞圆形，直径4~7μm。也有腊肠形的，为2.5~6×4.5~20μm。腊肠形中也有长达30μm者。多边芽殖，能由细胞直接形成子囊，每个子囊内有1、4个子囊抱子，但大多数为2个。子囊孢子礼帽形，由子囊内放出后常不散开。该变种生长在麦芽汁琼脂斜面上的菌落平坦，呈乳白色、无光泽，边缘丝状。在麦芽汁中培养后，波面有白色菌璞，培养液变成混浊，底部有菌体沉淀。不能发酵乳糖及蜜二糖。对麦芽糖及半乳糖或弱发酵或不发酸。能同化硝酸盐，氧化烃类能力亦强，能利用煤油作碳源。
此属酵母多能产生乙酸乙酯，从而增加产品香味，可用于酿酒和食品工业。但由于它们能利用酒精作碳源，又能在饮料表面产生干皱的菌璞，所以又是酒精生产的有害菌。
4，球拟酵母(Toruiopsis)
球拟酵母的细胞为球形、卵形成略长。多边出芽繁殖。
在麦芽汁斜面上菌落为乳白色，表面皱褶，无光泽，边缘整齐或不整齐。在液体培养基中有沉渣及酵母环出现，有时亦能产生菌璞。
此属酵母有一定的经济意义，有些种能产生不同比例的甘油、赤鲜醇、D—阿拉伯糖醇，有时还有甘露醇。在适宜条件下，能将40％葡萄糖转化成多元醇。还有的能产生有机酸、油脂等。有的能利用烃类生产蛋白质。，
此属菌酒精发酵能力较弱，能产生乙酸乙酯(因菌种而异)，增加白酒和酱油的风味。
5，假丝酵母(Candida)
细胞圆形、卵形或长形。多边出芽繁殖。能形成假菌丝。在麦芽汁琼脂培养基上菌落为乳白色，平滑，有光泽，边缘整齐或菌丝状。液体培养的能形成浮膜。
能发酵葡萄糖、蔗糖、棉子糖。不能发酵麦芽糖、半乳糖、乳糖、蜜二糖。不分解脂肪。能同化硝酸盐。
假丝酵母的蛋白质和维生素B含量都比啤酒酵母高。它能以尿素和硝酸盐作氮源，在培养基中不加其它因子即可生长。它能利用造纸工业中的亚硫酸废液，也能利用糖蜜、马铃薯淀粉和木材水解液等。因此能利用假丝酵母来处理工业和农副产品加工业的废弃物，生产可食用的蛋白质，在综合利用中很有价值。此属中有的菌能转化50％的糖成为甘油。
假丝酵母也是脂肪酶的生产菌种，在工业上可用于绢纺原料的脱脂。
6，毕赤氏酵母(Pichia)
细胞为椭圆形、长椭圆形或腊肠形，单个或成短链。异形接合形成子囊孢子。予囊孢子椭圆形。在麦芽汁琼脂上菌落为乳白色，无光泽，边缘有细缺口。在麦芽汁中培养，培养液表面有白而皱的粗糙的菌璞，底内有菌体沉淀。
此菌分解糖的能力弱，不产生酒精。能氧化酒精，能耐高或较高浓度酒精。常使酒类和酱油产生白花，形成浮膜，为酿造工业中的有害菌，如粉状毕赤氏酵母。
7，红酵母(Rhodotorula)
细胞圆形、卵形或长形。多边芽殖，有明显的红色或黄色色素。很多种因由荚膜而形成粘质状菌落。本属中有较好产脂肪的菌种，可由菌体提取大量脂肪。有的种对烃类有弱氧化作用，并能合成β—胡萝卜索。如粘红酵母粘红变种能氧化烷烃生产脂肪，含量可达干生物量的50~60％。在一定条件下还能产生α—丙氨酸和谷氨酸，产蛋氨酸的能力也狠强，可达干生物量的1％。
8，棉病针孢酵母（Nematspora gossypii）
又名棉病囊霉。在麦芽汁和马铃留培养基上26℃培养良好。开始时湿润的匍匐菌丝蔓延生长；菌落无色或灰白色，2—3天后渐趋淡黄色，5天后呈柠橙黄色，7~10天后菌落周围的培养基因核黄素的扩散而呈黄绿色。生物素是促进该菌生长的重要因素，甘氨酸对核黄素的产生有促进作用。曾有人报道，用猪油或玉米油可以代替所有碳源培养该菌。且生长良好；棉病囊霉能危害许多重要的经济作物，如棉花、柑桔、蕃茄等。最早是从染病的棉桃上分离而来。该菌具有大量合成核黄素的能力，产量可达4187μg／m1，因此它是核黄素生产的重要菌种。
9，白地霉(Geotrichum candidum)
白地霉是地霉属中常见的一个种。裂殖。节孢子单个或连接成链，长筒形、方形，也有椭圆形，末端钝圆。节孢子绝大多数为4.9~9.6×5.4~16.6μm。
在麦芽汁中，28~30℃培养一天，生白色璞。毛绒状或粉状，韧或易碎，为真菌丝。生长温度33~37℃。对葡萄糖、甘露糖、果糖等发酵较弱。能同化甘油、乙醇；山梨醇、甘露醇。能分解果胶、油脂等。不同化硝酸盐。菌体细胞含有丰富的蛋白质、脂肪、维生素和大量的核酸。它具有适应性强、生长快、产量大、培养方法简单等特点。
白地霉菌体的蛋白质营养价值很高，可供食用和饲料用，也可用来提取核酸，在废料废水的综合利用上很有价值。在制曲中，白地霉的污染会降低糠化力，直接影响出酒率，所以它是白酒生产中的有害菌。
酵母菌和霉菌教学设计Teaching design of yeast and mould
酵母菌和霉菌教学设计 前言：小泰温馨提醒，生物学又称生命科学、生物科学，是一门由经验主义出发，广泛的 研究生命的所有面向之自然科学，内容包括生命起源、演化、分布、构造、发育、功能、 行为、与环境的互动关系，以及生物分类学等。本教案根据生物课程标准的要求和针对教 学对象是初中生群体的特点，将教学诸要素有序安排，确定合适的教学方案的设想和计划、并以启迪发展学生智力为根本目的。便于学习和使用，本文下载后内容可随意修改调整及 打印。 1.了解（青霉或曲霉）的形态结构，营养方式和生殖方式及酵母 菌和霉菌对自然界的意义和与人类的关系。 2.通过指导学生观察酵母菌、青霉或曲霉，继续培养学生的 动手实验能力和观察能力。 3.通过了解酵母菌和霉菌与人类的关系，学会用一分为二的 方法分析事物。 重点、难点分析 1.酵母菌和霉菌的形态结构和生活特点，酵母菌和霉菌对自 然界的意义和与人类的关系是本章的重点知识。因为： （1）通过学习酵母菌和霉菌的形态结构，让学生与所学过 的植物细胞结构、细菌细胞结构进行比较分析，归纳总结出它们 在细胞结构上的异同。这样有利于培养学生的分析和综合能力。 （2）通过学习酵母菌和霉菌的生活特点，有利于了解酵母 菌和霉菌对自然界的意义和与人类的关系，使学生懂得研究微生 物的重要任务之一就是用其利，避其害。了解真菌在经济上所蕴
藏的潜在价值是巨大而多样的。 2.酵母菌的营养方式是本章的教学难点： 酵母菌既是异养（腐生）厌氧型真菌，又是异养需氧型真菌，由于初一学生知识水平有限，教师要讲清酵母菌获得能量的方式一定难度。 教学过程设计 一、本课题参考课时为一课时。 二、第一课时： 1.课前准备： 教师首先做好酵母菌的培养。酵母菌的简易培养方法如下： ①提前2～3天用3％～5％的蔗糖或2％葡萄糖溶液放入鲜酵母或一小块发面，恒温22℃培养。 ②将苹果皮切碎或用散发酒味的水果皮，装入瓶内，注意瓶子不要太大，轻轻压实，加入凉开水浸没，不用接种，在较温暖的地方培养2～3天镜检，即能找到酵母菌。 2.教学过程： （1）关于酵母菌形态结构的教学，可以用边讲述边实验的方法进行，有条件的学校最好在实验室上课。课上教师首先指导学生制作含有大量酵母菌的临时装片，并指导学生用显微镜观察酵母菌的形态结构；如果无实验室条件，在教室上课，课前教师可事先做好1～2台观察酵母菌的示范镜。这样学生通过对酵母菌形态结构的观察，对酵母菌建立感性认识。如果不具备以上条件
酵母提取物 酵母抽提物 通过自溶作用和其他几种技术，可以将酵母细胞部分或全部地溶解。经过进一步的加工，酵母泥可以转化成各种制剂和产品，它们可以提供给实验室中使用，还可以作食品、饲料和发酵培养基的各种成分。生要的产品中含有浓缩的酵母转化酶和, ,半乳糖苷酶，液体状、膏状、粉状或预粒状的可溶性酵母成分，另外还有酵母细胞成分中分离出的成份，比如通过机械粉碎细胞而释放出的蛋白质和细胞壁(聚糖)。 生要的工业产品是澄清的、可溶于水的提取物，一般称之为酵母抽提物，自溶酵母抽提物，酵母水解物。有些厂家用谷氨酸一钠(味精)和5, ,核苷酸来强化抽提物，或将抽提物和水解植物蛋白(Rosenthal和Pinkalla，1960)和改变性的乳清固体(Corbeff，1978)混合起来生产出不同风味的混合物。商业中将水解植物蛋白称为HVP(这些东西是从大豆渣，小麦谷蛋白，玉米谷蛋白，大米人谷蛋白酵母以及酪蛋白的Hydrolysed Vergetable Proteins )和HPP(Hydrolysed Plant Protein)酸水解过程中而得到的。 酵母抽提物作为食品和药物管理局所批准使用的天然调味品(Aron，1973a，b)可在肉制品、汤类、卤汁、干酪烘焙食品、调味料、蔬菜制品和海味品中用作调料。酵母抽提物作为多肽、氨基酸、微量元素、B族维生素的可靠而经济的来源，在食品保健、儿童食品、饲料营养补充剂，以及微生物生产和培养基和其他生物培养系统的营养补充剂中，是营养添加剂。当和酚醛抗氧化剂配合时，自溶物和水解物具有增效剂的作用(Bishor 和Henick，1975)。 制取酵母抽提物的生物体生要取自啤酒厂过剩的啤酒，其次取自初生酵母，其中包括可以在糖蜜中生长的面包酵母(Saccharomyees Cerersiae)，在乳清液中生
酵母菌的营养方式及细菌的作用 酵母菌适用于酿造生产，通过发酵能使物体膨胀，酵母菌的营养方式也各不相同，除了在物体上起作用外，对身体也有好处，但是酵母菌要使用正确，不然也会引起危害。并且我们要了解酵母菌的作用，从而更好的运用此病菌，那么我们就一起来了解酵母菌的营养方式及细菌的作用。 酵母菌的基本结构有细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核，大液泡，没有叶绿体.因此不能进行光合作用，必须依靠现成的有机物维持生活，因此营养方式是异养腐生。 保护肝脏 酵母分为鲜酵母、干酵母两种，是一种可食用的、营养丰富的单细胞微生物，营养学上把它叫做“取之不尽的营养源”。除了蛋白质、碳水化合物、脂类以外，酵母还富含多种维生素、矿物质和酶类。有实验证明，每1公斤干酵母所含的蛋白质，相当于5公斤大米、2公斤大豆或2.5公斤猪肉的蛋白质含量。因此，馒头、面包中所含的营养成分比大饼、面条要高出3—4倍，蛋白质增加近2倍。 发酵后的酵母还是一种很强的抗氧化物，可以保护肝脏，有一定的解毒作用。酵母里的硒、铬等矿物质能抗衰老、抗肿瘤、预防动脉硬化，并提高人体的免疫力。发酵后，面粉里一种影响钙、镁、铁等元素吸收的植酸可被分解，从而
提高人体对这些营养物质的吸收和利用。 制品疏松 酵母在面团发酵中产生大量的二氧化碳，并由于面筋网络组织的形成，而被留在网状组织内，使烘烤食品组织疏松多孔，体积增大。 酵母还有增加面筋扩展的作用，使发酵时所产生的二氧化碳能保留在面团内，提高面团的持气能力。如用化学数疏松剂则无此作用。 改善风味 面团在发酵过程中，经历了一系列复杂的生物化学反应，产生了面包制品特有的发酵香味。同时，便形成了面包制品所特有的芳香，浓郁，诱人食欲的烘烤香味。 增加营养 因为酵母的主要成分是蛋白质，几乎占了酵母干物质的一半含量，而且人体必需氨基酸含量充足，尤其是谷物中较缺乏的赖氨酸含量较多。另一方面，含有大量的维生素B1，维生素B2及尼克酸。所以，酵母能提高发酵食品的营养价值。 以上为大家介绍的就是酵母菌的营养方式及细菌的作用，当我们知道了酵母菌的营养方式后，就能有效的运用酵母菌，当然人们还要了解酵母菌的使用方式，在生活中才能更好的利用酵母菌，而使过程中必须注意卫生，不然会导致
《观察酵母菌和霉菌》教案 封丘县曹岗乡第一初中张立柱一．教学目标 1.让学生利用显微镜和放大镜，观察酵母菌和霉菌 2.让学生掌握酵母菌、霉菌的结构以及显着的区别，让学生熟练的操作酵母菌的染色，看到细胞核及突起物。 3.学生看到霉菌的结构会说出孢子的颜色，菌丝的表现，总结出霉菌的结构特点。 二．教学重点难点 1.教学重点：让学生自己总结出酵母菌、霉菌的结构，霉菌、蘑菇等真菌的细胞里都有细胞核，是真核生物。 2. 教学难点：在显微镜下观察酵母菌和霉菌后写出实验报告以及小组合作的效果。 三．教学过程 1.导语 同学们，我们已经知道了细菌的结构、特点和作用，但是你们知道不知道真菌的结构呢？我们都吃过蘑菇，蘑菇的种类很多，最有代表性的蘑菇是黑木耳、白木耳，又叫做银耳、香菇、牛肝菌，还有我们叫不出名字的野蘑菇，我们这里下过雨以后在路边、树林都会发现默默无闻的可爱的蘑菇，他们有的像把雨伞，有的像个蒙古房，它们都是真菌长出来的，它们没有叶绿素，没有根茎叶的分化，他们由菌盖、菌柄、菌丝，菌褶构成，菌褶处存在有孢子，孢
子是蘑菇的后代，靠风传播。有的蘑菇能吃，有的有毒，但能提取兴奋剂，真菌种类多，但不外乎几大类，正如人一样，有黑人、白人、黄种人。有人从霉菌培养皿中提取一种药物，他把它叫做青霉素，并获得了诺贝尔奖，青霉素的药效是抑制病菌的生长和发育，可以治疗咳嗽、发热，还可以治疗淋病。真菌也有坏处，如让人手长手癣、脚气。 真菌又小又可爱，我们用肉眼直接看不到它们，今天我们上实验课，借助显微镜来观察，我为大家配置好的酵母菌、霉菌，大家分小组一起观察，最后写出实验报告 2.目的要求 认识酵母菌和霉菌的结构，并且知道它们属真菌。 3.材料用具 酵母菌的培养液，橘子皮上的霉菌，吸管，镊子，显微镜，解剖针，载玻片，盖玻片，放大镜，碘液，吸水纸。 4.实验步骤 （1）观察酵母菌 a.取一滴酵母菌的培养液，滴在载玻片上，盖上盖玻片，用显微镜观察。 b.在盖玻片一侧滴上一滴碘液，以防碘液过多从另一侧流出，可以用吸水纸吸引，千万不要把碘液滴在实验台上，在显微镜下观察。 结论：①看到酵母菌是椭圆形，液泡。 ②经染色看到细胞核，淀粉粒，大小突起是酵母菌，出芽生
酵母抽提物又叫酵母味素、酵母精、酵母浸膏，是以食用酵母为原料，利用现代生物技术将酵母菌体内的蛋白质、核酸类物质进行降解，再经过一些精制工序得到的粉末、膏状或液体状的产品，具有强烈的呈味功能。它含有肽类化合物、人体所需的18种氨基酸、多种核苷酸、糖分、B族维生素、麦角甾醇、各种微量元素等，不含胆固醇及饱和脂肪酸，同时还具有营养、辅助医疗的作用。它们的主要成分是：A氨基酸、肽及多肽，它们是由食用酵母中存在的天然酶使肽键发生分解而产生的；B酵母细胞的水溶性成分，在加工过程中可加入符合标准的盐，自溶抽提物可以为液体状、膏状、粉状或颗粒状。 酵母抽提物的生产实质是酵母的自溶或酶解过程，酵母细胞自溶是控制一定的条件激活酵母细胞内的自溶酶类酶原，继而产生一系列消化自身结构的分解反应，细胞内的蛋白质降解为氨基酸、核酸降解为核苷酸，从而形成酵母抽提物特有的营养和风味成分。可以生产酵母抽提物的原料有面包酵母、啤酒酵母、假丝酵母、乳酸酵母，目前国内用面包酵母较多。酵母菌体内营养丰富、氨基酸组成齐全，且富含各种维生素，提取使其中成分酶解及溶出，再进而分离、浓缩成为酵母抽提物。现已形成了多种较为成熟的工艺来生产酵母抽提物，由于科技新成果的不断推出及各生产单位生产规模及条件的限制，在国内外生产酵母抽提物工艺上目前还没有一个统一的固定模式。现介绍一种工艺流程。 1．酵母自溶自溶原理是借助酵母菌体内的内源酶（蛋白酶、核酸酶、碳水化合物水解酶等），将酵母菌体内的高分子物质水解成可溶解的小分子物质。酵母细胞最外层有牢固的细胞壁为保护层，制取抽提物时需先将酵母的细胞破壁。破壁的方法有水解法（酸解、碱解）、机械破壁法、自身消化法、加细胞壁溶解酶法、超声波振动法、高压均质法等多种方法，以上方法各有优缺点，各单位可根据自身条件选择使用。然后将破壁后的酵母加水、搅拌配制成10~15%的酵母悬浮液。调节悬浮液酸碱度、温度使之适合酵母细胞体内的蛋白酶和核酸酶类的作用，PH值为5.5~6.5，自溶温度40-55℃，时间24-28小时。在酵母悬浮液中，加入某些自溶促进料，如0.1%硫胺素+5%的葡萄糖或1%的Nacl,可以缩短自溶时间,提高抽提率,增加氨基酸和呈味核苷酸的含量。在自溶开始或进行到一定阶段，加入蛋白酶和5′-磷酸二酯酶会更有利于蛋白质、核酸的降解及抽提率的提高。2．加热灭酶自溶结束后，升温80-90℃、0.5-1小时，使酵母细胞内的酶类失活，否则成品中的氨基酸、核苷酸等会在酶的作用下被继续分解而使成品变质。3．离心分离灭酶的半成品冷却，在3500-5000r/min转速下离心30min，得到自溶上清液，去除酵母残渣，残渣里还含有7-9%没被酶解的蛋白质，经烘干、粉碎后可以调成各类高蛋白的饲料。 4．浓缩干燥将离心所得的自溶上清液，控制温度60℃减压浓缩成干物质浓
1 进修生 收稿日期:2001-04-103种酵母样真菌鉴定方法的比较农生洲 韦柳宏1 陈松峰 (广西壮族自治区人民医院检验科 南宁 530021) 为综合评价目前我国实验室常规手工发酵鉴定法(常规法)、生物梅里埃A T B Fug us卡鉴定法(仪器法)和近年国内开始应用的科玛嘉(CHRo M ag ar)酵母样真菌显色培养基鉴定法(显色法)等3种酵母样真菌鉴定方法的优劣。我们同时用这3种方法对实验室保存的122株酵母样真菌标准菌株进行了鉴定比较,报道如下。 1 材料与方法 1.1 菌株来源:122株实验菌为实验室历年保存的标准菌株,其中白假丝酵母菌53株,热带假丝酵母菌31株,光滑球假丝酵母菌18株,近平滑假丝酵母菌11株,克柔氏假丝酵母菌3株,季也蒙假丝酵母菌、葡萄牙假丝酵母菌各2株,粘红假丝酵母菌、酿酒假丝酵母菌各1株。 1.2 试剂:沙氏培养基和各种手工用发酵管均购自杭州天和微生物试剂公司;Fug us卡及其配套仪器A T B Ex pressio n 为法国生物梅里埃公司产品;显色培养基则购自郑州搏赛科技有限责任公司。 1.3 鉴定方法:常规法鉴定按卫生部医政司颁发的《全国临床检验操作规程》进行;Fug us卡法按配套的操作手册取菌制成悬液,加样后置37℃培养24h后上机鉴定;显色法则取F ugus卡法剩余的悬液直接接种于显色培养基制成的平板上,置37℃培养,每隔24h观察一次结果,据菌落颜色进行判定;翠绿色为白假丝酵母菌,兰灰色为热带假丝酵母菌,紫红色边缘模糊有微毛为克柔氏假丝酵母菌菌,整个菌落湿润且紫红色为光滑球假丝酵母菌,白色为其它假丝酵母菌。 2 结 果 2.1 培养鉴定耗时:常规法和仪器法需预先用沙氏培养基培养出真菌,平均耗时大约72h,再加上鉴定耗时又分别平均约需72h和24h,常规法培养鉴定总共平均约需6d,仪器法约需4d;显色法集培养与鉴定于一体,耗时平均约需4 d。 2.2 鉴定结果:122株酵母样真菌的鉴定中,三法对53株白假丝酵母菌鉴定全部正确。其它69株菌中,常规法有11株无法鉴定到种,占总株数9.0%(11/122)。此外有5株热带假丝酵母菌鉴定错误,3株错定为光滑球假丝酵母菌,2株错定为近平滑假丝酵母菌。有3株光滑球假丝酵母菌鉴定错误,1株误定为热带假丝酵母菌,2株误定为近平滑假丝酵母菌。有2株近平滑假丝酵母菌鉴定错误,1株误为热带假丝酵母菌,1株误为光滑球假丝酵母菌。除无法鉴定到种的11株菌后,鉴定错误率仍有9.0%(10/111);显色法对白假丝酵母菌等该法能鉴定的6种酵母样真菌鉴定准确率达100%,其它菌株却无法鉴定到种,占总株数4.1%(5/122); F ugus卡法全部菌株均可鉴定到种,且准确率达100%。详见表1。 表1 122株酵母菌样真菌3种方法鉴定结果比较(株) 菌名菌株数常规法显色法仪器法 白假丝酵母菌 53 53 53 53 热带假丝酵母菌31273131 光滑球假丝酵母菌18171818 近平滑假丝酵母菌11111111 克柔氏假丝酵母菌3133 粘红假丝酵母菌1111 季也蒙假丝酵母菌2102 葡萄牙假丝酵母菌2002 酿酒假丝酵母菌1001 2.3 成本核算:常规法鉴定每一株菌平均约需10元,仪器法平均约需50元,显色法平均约需15元。 3 讨 论 当前酵母样真菌引起的临床感染正呈逐步增加之势,临床医师急需实验室准确快速地检出病原体以协助诊治[1]。纵观本试验结果,加上预先真菌培养时间常规法鉴定耗时总共需要至少6d左右,且操作繁琐,生化结果判定较困难,即使是标准菌株,结果仍极易出错。而如F ugus卡等仪器测试卡法,虽然鉴定耗时较短,操作也简便,鉴定结果准确率又高且可配套进行体外药敏试验,但因仪器和试卡均为进口产品,价格昂贵,只适合在有大量标本的大型综合性医院应用。从本研究可看出,显色法培养加鉴定耗时平均仅需48h,与应用仪器法耗时基本相等,且培养基制备方便,价格适中,结果判定简便快速准确,虽然有一部分菌株无法鉴定到种,但已能鉴定出目前临床感染95%以上的3～4种酵母样真菌感染[2],故不失为一种替代常规法在中小医院普及开展的酵母样真菌检验方法。 参 考 文 献 1 周贵民,谢 灵.国内酵母菌感染和实验室诊断的现状及建议.中华医学检验杂志,1996,19(5):301-303. 2Pfaller M A,Housto n A,Co ffman S.A pplicatio n of CHR OM ag ar Ca ndida for r apid scr eening o f clinical specimens for Candida A lbicans,Candida tro picalis, Candida K rusei,and Candida(T or ulopsis)glabrata.J Clin M icr o bilo l,1996,34(1):58-61. ? 764?广西医科大学学报 JOURNA L OF GU ANGXI M EDICAL UNIVERSIT Y 2002Oct;19(5)
微生物发酵行业缘何青睐“酵母浸出物”？ 为微生物量身定制“食品”和“营养品”--微生物营养 微生物是包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它个体微小，却与人类生活关系密切，广泛涉及健康、食品、医药、工农业、环保等诸多领域。 人类往往通过特定的手段筛选出适合工业化生产的微生物菌株，通过适当的营养条件、发酵设备和工艺手段，使微生物的数量快速积累，进而规模化生产各种微生物制品（如酸奶中的乳酸菌、双歧杆菌）以及合成有用的化学物质（如食品和饲料中添加氨基酸，维生素，酶等）。而在这个过程中，微生物需要一定的营养条件支持自身快速生长或高效合成有用化学物质。这种所谓的营养条件由“微生物培养基”来提供。 微生物培养基是供微生物生长和维持用的人工配制的固体或者液体养料，一般含有碳水化合物（碳源）、含氮物质（氮源）、无机盐（包括微量元素）以及生长因子和水等微生物必须的营养物质。微生物研究人员和发酵工程师们通过对微生物营养需求的不断探索，用各种不同的原料以不同的比例配制成各种不同的培养基，以满足不同微生物的需求。微生物培养基，就是人们为不同的微生物量身定制的“食品”和“营养品”。 在这些“食品”和“营养品”中，碳源、氮源和生长因子的作用尤为重要；碳源可以比作微生物所需的富含碳水化合物的主食--“米饭、馒头和面条”，氮源可以比作微生物需的富含蛋白质或多肽的主菜—“鸡蛋、肉和大豆”，生长因子可以比作微生物所需的富含氨基酸、维生素或核酸的辅食—“水果、蔬菜、牛奶和鱼”。各种营养物质的合理搭配方可保障微生物的生长和合成。其中，氮源的作用非常关键，通常来说，微生物含有大约14%的氮元素，而微生物体内的含氮物质包括蛋白质、多肽、氨基酸、核酸、酶，这些含氮物质对微生物的生长和代谢起着至关重要的作用。因此，好的氮源应当包含易于被微生物吸收和利用的含量丰富的氮元素以及各类可溶的含氮有机物，我们称之为有机氮源。 有机氮源的“进化史” 1879年，Naegeli最先发现微生物在含有部分水解蛋白质的培养基上生长良好，标识着有机氮源作为微生物培养的一个重要组分正式为人类所认识。1880年，他将此研究过程撰写成论文并发表，1882年，他将此部分水解物命名为“蛋白胨”。距Naegeli发现“蛋白胨”130多年后生物技术与产业高速发展的今天，有机氮源已经被广泛应用于微生物发酵领域。有机氮源在微生物发酵中的重要性也被越来越多的发酵行业从业者们所认识。 最初，有机氮源主要直接来源于动物组织和植物萃取液，如马铃薯培养基、麦芽汁培养基，但受制于来源、稳定性很差，并存在安全风险，不适合大规模工业发酵，现在仅在菌种保藏、摇瓶培养阶段使用。而后，农畜产品加工的副产品，通过特定处理，加工成有机氮源，这类有机氮源得益于其经济性和稳定的原料供应在发酵行业得到广泛应用。1945年，Knigt SG 开始使用玉米浆作为氮源在Penicillin发酵中应用；上个世纪50年代，豆粕最先作为氮源在螺旋霉素发酵中使用。随后，各种不同组织来源的有机氮源逐步被开发应用在微生物发酵过程中。譬如动物来源的各种类型蛋白胨，毛发水解液，脑心提取物等等；植物来源的大豆蛋白胨、小麦水解蛋白、花生饼粉、棉子粉；微生物来源的酵母粉、酵母水解物、酵母浸出物、各种发酵菌粉等。
Product Information Protease Inhibitor Cocktail (EDTA-Free, 100X in DMSO) I. Kit Contents: Components Information 1,10-Phenanthroline Metalloprotease inhibitor AEBSF Serine protease inhibitor E-64 Cysteine protease inhibitor, irreversible Pepstatin A Aspartic proteinases inhibitor II. Introduction: Endogenous proteins are produced and degraded in a balanced state, so their cellular levels are stable under stable environmental conditions. Crude cell extracts contain a number of endogenous enzymes, such as phosphatases and proteases, which are capable of degrading proteins in the extracts. Protein production is greatly halted and degradation is increased when proteins are extracted from cells and tissues in vitro. The best way to increase the yield of intact proteins is to add inhibitors of those enzymes known to be present. Protease inhibitor cocktail is used with fungal and yeast extracts to increase protein stability. The cocktail functions to inhibit proteases that would degrade either non-phosphorylated or phosphorylated protein substrates. This protease inhibitor cocktail contains individual components, including AEBSF, 1,10-Phenanthroline, E-64 and Pepstatin A with a broad specificity for cysteine, serine, aspartic, and metalloproteases. This cocktail has been optimized and tested for fungal and yeast cell use. This protease inhibitor cocktail is supplied as a ready-to-use solution in DMSO. III. Protocol: Thaw at room temperature; add at 1:100 (v/v) dilution to solution samples (such as yeast extracts) before assaying. Applications: WB, Co-IP, pull-down, IF, IHC, kinase assay and etc. IV. Storage: Stored at -20°C, and stable for at least 12 months. For research use only! Not to be used in humans. Our promise If the product does not perform as described on this datasheet, we will offer a refund or replacement. For more details, please visit https://www.doczj.com/doc/0113098998.html,/ or contact our technical team.
酶制剂在酵母提取物生产中的应用 日本天野酶制品株式会社酵母提取物是一种天然的调味料，它富含肌苷酸（IMP）和鸟苷酸（GMP）以及氨基酸和短肽。正是因为具有这些成分，酵母提取物才具有了非常鲜美的味道，并成为了一种非常好的调味料。酵母提取物主要通过两种方法制成：自己消化法和酶处理法。而通过酶处理法制造的酵母提取物的味道更加的鲜美。 酶处理法生产酵母提取物的三步骤： 1．酵母细胞壁的溶解和RNA的抽提（细胞溶解酶YL-NL“Amano”） 2．降解RNA（核糖核酸酶Enzyme RP-1G） 核酸核苷酸（5`-GMP和5`-AMP） 3．将5`-AMP转化成5`-IMP（AMP-脱氨基酶Deamizyme 50000G） 5`-AMP 5`-IMP 酶处理法生产酵母提取物具体方法： 1．啤酒酵母（面包酵母）的悬浊液（PH7.0） 2．热处理 3．添加细胞溶解酶YL-NL“Amano”（PH7.0，50度） 4．添加核糖核酸酶Enzyme RP-1G（PH5.0 70度） 5．添加AMP-脱氨基酶Deamizyme 50000G（PH6.0 50度） 6．热处理 7．离心过滤或者压滤机过滤，然后干燥 8．酵母抽提物成品 如果酵母抽提物能够通过以上方法生产制造，其味道和风味会变的更加的鲜美。 1．细胞溶解酶YL-NL“Amano”的酵母溶解效果 细胞溶解酶YL-NL“Amano”（以下简称YL-NL）含有中性蛋白酶，因此它是通过溶解酵母细胞壁上的蛋白质来溶解酵母细胞的。YL-NL可以溶解啤酒酵母，面包酵母以及圆酵母。 方法和步骤： 将10%的酵母悬浊液（PH7.0）和YL-NL在50度反应16小时。通过凯氏(测定氮)法测定
霉菌和酵母菌介绍及检测方法 一、霉菌和酵母菌介绍： 霉菌和酵母菌及其检验酵母菌是真菌中的一大类，通常是单细胞，呈圆形,卵圆形、腊肠形或杆状。霉菌也是真菌，能够形成疏松的绒毛状的菌丝体的真菌称为霉菌。 霉菌和酵母广泛分布于自然界并可作为食品中正常菌相的一部分。长期以来，人们利用某些霉菌和酵母加工一些食品，如用霉菌加工干酪和肉，使其味道鲜美；还可利用霉菌和酵母酿酒、制酱；食品、化学、医药等工业都少不了霉菌和酵母。但在某些情况下，霉菌和酵母也可造成中腐败变质。由于它们生长缓慢和竞争能力不强，故常常在不适于细菌生长的食品中出现，这些食品是pH低、湿度低、含盐和含糖高的食品、低温贮藏的食品，含有抗菌素的食品等。由于霉菌和酵母能抵抗热、冷冻，以及抗菌素和辐照等贮藏及保藏技术，它们能转换某些不利于细菌的物质，而促进致病细菌的生长；有些霉菌能够合成有毒代谢产物－霉菌毒素。霉菌和酵母往往使食品表面失去色、香、味。例如，酵母在新鲜的和加工的食品中繁殖，可使食品发生难闻的异味，它还可以使液体发生混浊，产生气泡，形成薄膜，改变颜色及散发不正常的气味等。因此霉菌和酵母也作为评价食品卫生质量的指示菌，并以霉菌和酵母计数来制定食品被污染的程度。目前已有若干个国家制订了某些食品的霉菌和酵母限量标准。我国已制订了一些食品中霉菌和酵母的限量标准。 二、检验方法： 霉菌和酵母的计数方法，与菌落总数的测定方法基本相似。主要步骤为：将样品制作成10倍梯度的稀释液，选择3个合适的稀释度，吸取1mL于平皿，倾注培养基后，培养观察，计数。对霉菌的计数，还可以采用显微镜直接镜检计数的方法。 具体检测标准参见： GB4789.15-94，《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验霉菌和酵母计数》三、说明： 1．样品的处理。为了准确测定霉菌和酵母数，真实反映被检食品的卫生质量，首先应注意样品的代表性。对大的固体食品样品，要用灭菌刀或镊子从不同部位采取试验材料，再混合磨碎。如样品不太大，最好把全部样品放到灭菌均质器杯内搅拌2min。液体或半固体样品可用迅速颠倒容器25次来混匀。 2．样品的稀释：为了减少榈稀释倍数的误差，在连续递增稀释时，每一稀释度应更换一根吸管。在稀释过程中，为了使霉菌的孢子充分散开，需用灭菌吸管反复吹吸50次。 3．培养基的选择：在霉菌和酵母计数中，主要使用以下几种选择性培养基。 马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基（PDA）：霉菌和酵母在PDA培养基上生长良好。用PDA作平板计数时，必项加入抗菌素以抑制细菌。 孟加拉红（虎红）培养基：该培养基中的孟加拉红和抗菌素具有抑制细菌的作用。孟加拉红还可抑制霉菌菌落的蔓延生长。在菌落背面由孟加拉红产生的红色有助于霉菌和酵母菌落的计数。 高盐察氏培养基：粮食和食品中常见的曲霉和青霉在该培养基上分离效果良好，它具有抑制细菌和减缓生长速度快的毛霉科菌种的作用。 4．倾注培养。每个样品应选择3个适宜的稀释度，每个稀释度倾注2个平皿。培养基熔化后冷却至45℃，立即倾注并旋转混匀，先向一个方向旋转，再转向相反方向，充分混合均匀。培养基凝固后，把平皿翻过来放温箱培养。大多数霉菌和酵母在25－30℃的情况下生长良好，因此培养温度25~28℃。培养3d后开始观察菌落生长情况，共培养5d观察记录结果。 5．菌落计数及报告：选取菌落数10~150之间的平板进行计数。一个稀释度使用两个平
酵母抽提物 通过自溶作用和其他几种技术，可以将酵母细胞部分或全部地溶解。经过进一步的加工，酵母泥可以转化成各种制剂和产品，它们可以提供给实验室中使用，还可以作食品、饲料和发酵培养基的各种成分。生要的产品中含有浓缩的酵母转化酶和β－半乳糖苷酶，液体状、膏状、粉状或预粒状的可溶性酵母成分，另外还有酵母细胞成分中分离出的成份，比如通过机械粉碎细胞而释放出的蛋白质和细胞壁（聚糖）。 生要的工业产品是澄清的、可溶于水的提取物，一般称之为酵母抽提物，自溶酵母抽提物，酵母水解物。有些厂家用谷氨酸一钠（味精）和5'－核苷酸来强化抽提物，或将抽提物和水解植物蛋白（Rosenthal和Pinkalla，1960）和改变性的乳清固体（Corbeff，1978）混合起来生产出不同风味的混合物。商业中将水解植物蛋白称为HVP（这些东西是从大豆渣，小麦谷蛋白，玉米谷蛋白，大米人谷蛋白酵母以及酪蛋白的Hydrolysed Vergetable Proteins ）和HPP（Hydrolysed Plant Protein）酸水解过程中而得到的。 酵母抽提物作为食品和药物管理局所批准使用的天然调味品（Aron，1973a，b）可在肉制品、汤类、卤汁、干酪烘焙食品、调味料、蔬菜制品和海味品中用作调料。酵母抽提物作为多肽、氨基酸、微量元素、B族维生素的可靠而经济的来源，在食品保健、儿童食品、饲料营养补充剂，以及微生物生产和培养基和其他生物培养系统的营养补充剂中，是营养添加剂。当和酚醛抗氧化剂配合时，自溶物和水解物具有增效剂的作用（Bishor 和Henick，1975）。 制取酵母抽提物的生物体生要取自啤酒厂过剩的啤酒，其次取自初生酵母，其中包括可以在糖蜜中生长的面包酵母（Saccharomyees Cerersiae），在乳清液中生长的Kluyveromyces Fragilis 和乳酸酵母（Sacch Lactis）以及在木糖和乙醇中生产的产朊假丝酵母（Cardida Utclis）。 酵母细胞组分的释放和分解可以通过许多方法来实现，其中包括细胞的机械破碎、化学和酶处理，巴氏杀菌、自溶、质壁分离和水解。在这些方法中，一般将后四种方法结合起来，用于制取工业酵母抽提物。在适当的热处理、自溶、和质壁分离过程中，细胞中的胞内酶，主要是糖酶和蛋白酶，分解蛋白质成分。实际上这种分解作用相对较慢（1～20小时不等）它需要无菌条件，而产量很低（约为原始酵母固溶物的48％）在制取酵母水解物时，浓缩酵母浆与强酸一起加热（100℃）直到50%～60％的蛋白质转化为多肽和氨基酸。经过中和和浓缩后干燥的成噪中含有多到50％的氯化钠。 由于工业上设有普遍使用的标准（Select Commiffee On Generally Regarded At Safe Substances 1976），蛋白质的水解制品的规格和成分在不同的制品厂是不同的，并且同一工厂生产的产品也不尽相同。但对本章讨论的酵母抽提物，国际水解蛋白委员
酵母样真菌鉴定及应用 发表时间：2010-12-08T15:24:38.397Z 来源：《中外健康文摘》2010年第32期供稿作者：赵立春 [导读] 近年来随着广谱抗生素、免疫抑制剂广泛应用和机会致病菌的医院感染包括临床深部真菌感染增多 赵立春（黑龙江省哈尔滨市香坊区结核病防治所化验室150036） 【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2010）32-0440-01 近年来随着广谱抗生素、免疫抑制剂广泛应用和机会致病菌的医院感染包括临床深部真菌感染增多，特别是肺结核病人或肺部疾病患者，因药物治疗时间长，在杀死致病菌的同时，也杀死正常菌群，造成人体内微生态障碍，菌群失调，在肺结核等肺部疾患基础上继发支气管肺部酵母样菌感染，所以从肺部疾患病人中分离酵母样真菌，快速鉴定并及时治疗非常有意义。 我国现在快速、准确鉴定酵母样真菌的方法很少，近年国外开发的手工和自动化微量鉴定系统已大大简化了传统鉴定程序，但难已在中小医疗机构推广应用，我们研制的微量鉴定系统，通过与传统鉴定方法及生物梅里埃Api20c鉴定系统对比性评价，并经数家医疗单位临床应用，证明本系统具有可靠、快速、简便和价廉等优点，可推广为临床常规方法，报道如下： 1 材料与方法 1.1 菌株来源：主要来自香坊区结核病防治所，治疗一个月以上肺结核、脑膜炎、慢性支气管炎等患者，从痰中分离出2-3次同一种菌株。标准菌株为中国科学院微生物研究所“真菌国家开放专业实验室质控菌株。 1.2 试剂：葡萄糖、乳糖、半乳糖、麦芽糖、蔗糖、木糖、密二糖、纤维二糖、肌醇、棉子糖、海藻糖、卫矛醇、草糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖醇、赤藓醇、山梨醇、尿素、KNO3、KH2P4、NaHPO4和MgSo4、7H2O系分析纯。优质琼脂粉、玉米粉、酵母浸膏和吐温80。 1.3 90mm培养皿或U形塑料凹孔盒、新华Ⅲ号滤纸、打孔器等。 1.4 生物梅里埃公司生产的API——20C鉴定卡。 1.5 酵母菌编码鉴定手册：0.5麦氏单位，1麦氏单位、2麦氏单位比浊管。 2 微量鉴定系统制备 2.1 基础培训基：琼脂20g、酵母浸膏0.2g、MgSo4、7H2O0.5g、PH6.8PBS加至1000ml。加热溶解，分装后经8P、15分钟灭菌。存于4℃可用2个月。 2.2 玉米吐温琼脂：制成小安瓶备用。 2.3 生化基质制备：糖醇配方：糖或醇2.0g、B族维生索0.2mg、2％溴甲酚紫0.2ml，蒸馏水加至10ml。尿素配方：尿素5.0g、葡萄糖0.1g、B族维生素0.1mg，蒸馏水至10ml。硝酸盐配方：KNO32.0g、葡萄糖0.5g、B族维生素0.1mg，蒸馏水至10ml。阴性对照配方：不含糖、醇、尿素和硝酸盐，余皆相同。将6×6mm滤纸圆片浸入上述各基质液中，10分钟，取出置70℃烤干，经随机抽样无菌试验后，分装于小瓶中密封，-20℃可用一年以上。 2.4 沙保弱培养基按常规自配。 3 实验程序 3.1基础菌悬液制备：排取沙保弱氏之新鲜培养菌落以生理盐水制成0.5麦氏单位的菌悬液。基础培养基经隔热煮沸溶解，冷却至50℃，与菌悬液等量混合，置于50℃水溶备用。 3.2 操作步骤：各种基质纸片、阴性对照纸片按顺序置于分格的无菌平皿底部或U形塑料盒之凹内。消毒试器吸取上述菌悬液，每种纸片上滴加3滴，接种针挑取少许培养菌穿刺接种于玉米粉吐温琼脂。置于温盒、30℃孵育。 3.3 结果读取和判断：绝大部分酵母样真菌在24—48小时即可读取结果，个别种属需72小时。碳源同化阳性：培养基呈黄色与对照相比呈+～3+混浊；阴性呈紫色且不混浊。尿素水解阳性为红色；阴性为淡黄色不变。硝酸盐还原需以常规硝酸盐还原甲、乙两液依次加2滴，显红色为阳性；不显红色为阴性。玉米粉吐温球脂脂生长菌落用显微镜观察厚孢子、孢子及菌丝体。 4 评价方法 4.1 传统方法：包括形态学的质膜孢子、孢子、菌丝体及芽管形形成，糖醇同化，糖醇发酵（制成安瓶封装），尿素水解（安瓶封装），硝酸盐还原，氮源同化等。 4.2 标准菌株与传统鉴定方法．API20C鉴定止，微量鉴定系统鉴定比较。 4.3 41株临床分离酵母菌用APl20C鉴定卡与微量鉴定系统鉴定比较。 4.4 98株临床分离醇母菌用传统法与微量鉴定系统鉴定比较。 5 结果 5.1 6种标准酵母株用传统鉴定方法，APl20C鉴定卡与微量鉴定系统三种方法鉴定符合率100％。 5.2 与APl20C鉴定卡鉴定结果比较：对6种41株临床分离酵母菌用两种方法分别进行鉴定,两者的符合率为95.1％，两法结果不符的两株菌经传统方法鉴定和微量法重要鉴定是由于木糖、棉子糖、卫矛醇生化基质含量不均匀所致的鉴定错误。 5.3临床应用评价：徽量鉴定系统与传统方法之间的鉴定符合率达98％，其中2株鉴定错误的原因是由于接种菌悬液不符合要求致乳糖、密二糖、肌醇、棉子糖的同化结果变异。厚膜孢子和菌丝形成不良。经重点鉴定均可纠正，故提示其误差属随机性。 6 讨论 我们研究设计了以20种生化试剂辅之形态学观察的微量鉴定系统。本系统试剂制备的技术关键是在基础和纸片基体中加入了营养性添加剂和适当缓冲容量的缓冲剂。前者能够提高对基质利用菌的生长速率，但不改变其性质，大部分生长较快的酵母菌，在24—48小时即可显示阳性结果，少数生长缓慢者如隐球菌属在72小时亦可呈现阳性结果。后者可以防止酸性琼脂和孵育过程中CO2溶入培养基引起假性颜色改变，缓冲容量初确定因各种试剂的批号和来源不同，不可一概而论，一般应为0.015mo1／l。其容量应仅能缓冲各种基础试剂．基质试剂和CO2溶入的酸碱效应而又不缓冲醇母样菌分解碳源产生的酸。本法各种同化反应是以生长浊度和PH改变的双重指示判断结果，所以，试验结果具有较高的可靠性。经实验证明鉴定具有快速、简便和价廉等优点，适合中、小型实验室使用。 试验过程中，应注意无菌操作，接种菌悬液的最终浓度相当1／4麦氏单位，过浓过淡均不利于结果的判断。
注意：由于实验内容较多，所以我们只要把蓝色字体部分写在实验报告上即可，黑体字部分自己看一下。由于11-13周为教学质量检查周，督导随时可能来查，所以预习报告还是要写。 细菌、酵母菌、放线菌和真菌接种方法和形态观察 一、微生物的接种技术 1 目的 1.1学习掌握微生物的几种接种技术 1.2 建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节 2 基本原理 将微生物培养物或含有微生物的样品在无菌条件下移植到培养基上的操作技术称为接种。接种的关键是严格进行无菌操作。常用的接种方法有斜面接种、液体接种、穿刺接种、平板接种和固体接种等。 3 实验材料 3.1 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、玫瑰暗黄链球菌、曲霉、荨麻青霉的斜面培养物 3.2 培养基：营养琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基及高氏1号培养基的斜面和平板3.3 试剂：5ml无菌生理盐水试管 3.4 仪器与其他用品 酒精灯、记号笔、试管、橡胶塞、试管架、接种环、培养皿、超净台等。 4 操作步骤 4.1 斜面接种法 斜面接种法主要用于传代活化、纯化培养、鉴定或保存菌种。通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落，或挑取斜面，液体培养基中的纯培养物接种到斜面培养基上。操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行。 4.1.1准备工作 将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指、中指及无名指之间，菌种管在外侧，接种管在内侧，斜面向上管口对齐，并能清楚地看到两个试管的斜面，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。 4.1.2接种环灭菌 右手持接种环柄，将接种环垂直放在火焰上灼烧。镍铬丝部分（环和丝）必须烧红，以达到灭菌目的，然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍。 4.1.3拔管塞和烧烤试管口 用右手的小指和手掌之间及无名指和小指之间拨出试管棉塞，将试管口在火焰上通过，以杀灭可能沾污的微生物。
法国S p r i n g e r （斯宾格）公司介绍 法国springer （斯宾格）公司是全球第一的酵母抽提物生产商，隶属于法国Lesaffer （乐斯福）集团，乐斯福集团是全球第一的活性烘焙酵母生产商。 Springer 公司的发展历程： 1872 Springer 伯爵在法国Maisons Alfort 创立酵母工厂 1959 Springer 开始生产酵母抽提物 1972 Lesaffre 集团收购 1994 法国Strasbourg 开办第二家酵母抽提物工厂 2000 在巴西收购Prodesa 工厂，生产啤酒酵母抽提物 2006 与一品鲜建立合资公司，成为中国主要的酵母抽提物生产商 2010 广西来宾新的酵母抽提物工厂投产运行，主要生产酵母抽提物 法国Springer 酵母抽提物是面包酵母在糖蜜培养基上经过特殊的培养，经过自溶后喷雾干燥得到的，含有丰富的氨基酸和多肽以及促进微生物和细胞生长矿物质和生长因子，是生物发酵工业中广泛应用的有机氮源。 Springer 酵母抽提物的主要特点： · 含有丰富的氨基酸、多肽、维生素、微量元素和生长因子 · 完全可溶、色泽浅 · 良好的过滤性、透明度、光亮度 · 利于下游工艺的提取纯化 · 高安全性、无动物来源、低内毒素 · 优良的产品质量稳定性和良好的批次间稳定性
Springer（斯宾格）公司的产品广泛应用于生物制药（抗生素、干扰素、胰岛素）、培养基、生物原材料（透明质酸、L-乳酸）、益生菌、酶制剂等，能有效的促进微生物的培育和生长，提高目标产物的表达。 上海诺民生物科技有限公司一直致力于为国内客户引进来自欧美的先进技术和产品，有着丰富的营销和运营的经验，并且有来自各方面的专业技术支持，能最大程度的瞒足客户的需求。自与Springer公司合作以来，作为Springer公司在中国的代理商，成功的拓展了生物发酵领域。 鉴于国内生物发酵和细胞培养等领域对高品质、高性价比的酵母抽提物的需求不断提升，上海诺民公司将利用自身的优势以及Springer公司先进的技术和高品质的产品全力服务于中国的生物企业。
酵母 英语名称：yeast 酵母菌是一些单细胞真菌，并非系统演化分类的单元。目前已知有1000多种酵母，根据酵母菌产生孢子(子囊孢子和担孢子)的能力，可将酵母分成三类：形成孢子的株系属于子囊菌和担子菌。不形成孢子但主要通过芽殖来繁殖的称为不完全真菌，或者叫“假酵母”。目前已知大部分酵母被分类到子囊菌门。酵母菌主要的生长环境是潮湿或液态环境，有些酵母菌也会生存在生物体内。 【生理】 和乙醇来获取能量。 酵母营专性或兼性好氧生活，目前未知专性厌氧的酵母。在缺乏氧气时，发酵型的酵母通过将糖类转化成为二氧化碳 C6H12O6 （葡萄糖）→2C2H5OH + 2CO2 在酿酒过程中，乙醇被保留下来；在烤面包或蒸馒头的过程中，二氧化碳将面团发起，而酒精则挥发。 【特征】 多数酵母可以分离于富含糖类的环境中，比如一些水果（葡萄、苹果、桃等）或者植物分泌物（如仙人掌的汁）。一些酵母在昆虫体内生活。酵母菌是单细胞真核微生物。酵母菌细胞的形态通常有球形、卵圆形、腊肠形、椭圆形、柠檬形或藕节形等。比细菌的单细胞个体要大得多，一般为1~5微米′5~30微米。酵母菌无鞭毛，不能游动。酵母菌具有典型的真核细胞结构,有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质、液泡、线粒体等，有的还具有微体。酵母菌的细胞形态酵母菌的细胞形态酵母菌细胞结构的显微照片酵母菌的菌落。 大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似，但比细菌菌落大而厚，菌落表面光滑、湿润、粘稠，容易挑起，菌落质地均匀，正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一，菌落多为乳白色，少数为红色，个别为黑色。啤酒酵母的菌落红酵母的菌落各种酵母菌的菌落。 【生殖】 酵母可以通过出芽进行无性生殖，也可以通过形成子囊孢子进行有性生殖。无性生殖即在环境条件适合时，从母细胞上长出一个芽，逐渐长到成熟大小后与母体分离。在营养状况不好时，一些可进行有性生殖的酵母会形成孢子（一般是四个），在条件适合时再萌发。一些酵母，如假丝酵母（或称念珠菌，Candida）不能进行无性繁殖。 【酵母菌的生长条件】