7.88 Lecture Notes - 7
7.24/7.88J/5.48J
The Protein Folding Problem
Tropomyosin and S-peptide
? Sequence determinants of Coiled Coil Structure
? Tropomyosin
? Circular Dichroism
? Tropomyosin thermal denaturation/renaturation
? Chain Recognition, Association, Registration
A. Revisit Sequence determination of Coiled Coils
H – X – X -H – P – X - P – H – X – X – H – P – X - P- H – X – X - H-P – X -P
Lets draw as helical wheel:
Note side chain interactions above and below plain:
Now lets flip the sequence 18:
Sequence:
? 1,4 residues: hydrophobic core
? 5,7: selectivity, polarity
? 2,3, 6: Quaternary interactions; cellular functions
Perhaps: But for TM and other coiled coils, easy to see that they encode:
Lets review muscle structure:
Theta in degrees;
Light waves are transverse vibrations; can be vibrating in various planes
perpendicular to direction of propagation.
B. Tropomyosin
IN vitro unfolding/refolding of a coiled-coil: Tropomyosin:
Properties of Tropomyosin
Denaturation/Renaturation of TM
Reversibility
Coupling of secondary and tertiary structure
From thermal denaturation curve: Conformation = f (sequence + environment)
Possible pathways
Question: Is this conformation/subunit organization encoded by amino acid
sequence; perhaps protein folds in association with other components of muscle structure?
However, for these structures, only fiber diffraction; no 3-D crystals, no high res structure; not in PDB. In fact in first edition of Branden and Tooze no mention of coiled coils, because not present among globular soluble proteins!!
Why tropomyosin: Given that alpha helices are critical conformation of keratin
polypeptide chains:
What about examining keratin folding into keratin helices using the in vitro
methodology of Anfinsen???
Not possible: severe limitations in these systems;
Mature fibrils highly covalently crosslinked
Solubilization requires severe treatment and does not yield homogenous population of protein chains.
Only just recently has it been possible to obtain the precursor forms of keratin chains prior to folding and assembly into hair - from tissue culture and from products of cloned genes:
Tropomysoin function and organization:
Remind you of structure of striated muscle:
? Thin filaments from M band
? Thick filaments which are bipolar:
Tropomyosin Structure:
? rodlike, 2nm x 41 nm when observed in the electron microscope as soluble molecules.
? molecular weight 65.5 kd.
? two chains of 284 residues, a and b, with slight differences in sequence (39 residues)
? Almost 100% alpha helical and consists of two alpha helical chains wrapping around each other.
? Linear: No turns
? Relatively high concentration of charged amino acids, but unusually stable to changes in Ph on both acid and alkaline sides, indicating that electrostatic
interactions not important for maintenance of alpha helical coiled coil structure ? Interact with actin filaments to form long filamentous structures that lie in each of the two long period grooves on opposite sides of thin filaments in muscle.
? pack head to tail with an 8-9 residue overlap
? Bind Troponin Subunit - Troponin the other regulatory protein in the thin filaments is bound to each tropomyosin molecule.
? Actin : tropomysoin : troponin present in 7:1:1 stoichiometry.
Its function is control rod restricting axis of myosin head groups to actin filament;
moving back and forth during muscle contraction cycle; regulated by calcium
Purified Tropomyosin has never been observed to form three D crystals; So no
crystal structure; (not even in Index of Branden and Tooze) However forms 2-D open crystal nets;
Original structural data came from X-ray scattering and electron microscopy of
unusual two dimensional crystalline form; kite-like
C. Circular dichroism
Light represents transverse vibration; can be polarized, restricted to certain planes;
A plane polarized beam is one in which electric vector vibrates in just a single
direction in plane perpendicular to propagation
Plane of polarization can rotate, so circularly polarized, either clockwise or not, left or right; polaroids have crystallites which absorb one component not opposite; formed under stress so that crystallites are aligned;
Chiral L amino acids differentially absorb light with beams of left and right circularly polarized vectors; two components therefore travel at different speeds through
polypeptides and proteins, which results in rotation of the plane of polarization
Differential absorption of left and right circularly polarized light;
? Far UV signal (200-230)- Monitors backbone conformation peptide bond itself, ? near UV - ring absorption at longer wavelength –
Function of wavelength; so scan ellipticity versus wavelength
Analogous to absorption spectra; scan versus wavelength
Expressed as theta, Molar ellipiticity, measure differences between left and right polarized light compared to input light.
For helical proteins, net negative, so more negative, more helical:
Best for alpha helix because of a double dip ; Distinguishes alpha helices, beta
sheets and random coils reasonable well.
D. Denaturation and Renaturation of Tropomyosin
First: Consider thermal-denaturation for proteins you are familiar with:
? Egg white: lysozyme plus ovalbumen?
? Milk: Casein + alphal lactalbumen?
? Collagen (gelatin) ?
? Gluten?
? Actin
Outcome of thermal denaturation processes depend on protein itself, not generally feature of polypeptide chains;
Now lets consider the folding and association of purified tropomyosin chains:
Does tropomyosin refold from the denatured state?? That is, does tropomyosin
amino acid sequence by itself determine coiled-coil conformation??
Equilibrium Denaturation: All measurements after process has come to equilibrium or steady state; often confused in the literature, but I will be presenting true
equilibrium data.
These are to be distinguished from kinetic analysis; reaction as a function of time.
This was RNase data.
Tropomyosin exhibits distinct melting transition when heated:
Lori L. Isom, Marilyn Emerson Holtzer and Alfred Holtzer (1984) alpha-helix to Random-Coil Transition of Two-Chain, Coiled Coils. Experiments on the Thermal Denaturation of alpha-Tropomyosin and beta-Tropomyosin Macromolecules, 17 2445-2447.
Purified reduced tropomyosin:
Rabbit cardiac muscle:
? Two chains alpha and beta;
? differ by 39 residues,
? 11 of which are at hydrophobic positions:
Each point sits 10 minutes, fully reversible; true equilibrium;
Draw test-tubes: change water bath:
Or multiple samples put in different water baths:
Tm is around 50oC.
What is state of polypeptide chain??
Certainly not alpha helix: but amino acid sequence remains the same; but we said sequence determines fold!!??
Fold = f (Sequence ; environment)
However, when cool (draw dashed line); identical curve:
It is possible to determine the molecular weight of the molecules in these samples by a number of techniques:
? Light scattering
? Sedimentation velocity
? Sedimentation equilibrium
Determine molecular weight above Tm= equals 1/2 of starting MW.
This material is half the molecular weight of starting material!!
So it is monomeric.
What is its conformation: not alpha helical, “disordered, random”
Thus alpha helicity is coupled to dimerization, and vice versa, loss of alpha helicity is coupled to dissociation.
What is Pathway for Coiled Coil Formation??
What would you predict as the physical state under these conditions?
So What are steps in reaction?
How could you test model?
Is there evidence for gain of alpha helicity prior to increase in molecular weight?? No.
Concentration dependence: Might depend on square of concentration? Diluted by two; No change??
In fact dilute by 1,000 - not easy detect: Questionable:
More direct route: Use light scattering to follow size of molecule:
Data: L Number of chains versus temperature for reduced or block chains, to prevent air oxidation cross linking.
Light scattering curve follows CD curve exactly:
Denaturation and dissociation tightly coupled:
NB: These alpha helical amino acid sequences are not alpha helices when free in solution:
secondary structure is function of tertiary structure (!?): Important to avoid intellectual error of thinking that conformation is simple
f(sequence);
always f(sequence/environment)
So:
? Registration information built into amino acid sequence:
? What would one predict about helicity;
? Pathway: Form helices then associate:
? What prediction: helicity versus temperature??
? Pathway: No helix until associate: Stability should be f(concentration)
? Yes: But very hard to detect;
? We will come back to this
In fact tropomyosin molecules pack parallel, in register.
Could these helices associate if in register??
So not just Folding, Association, but also Registration!
Could there be out of register intermediates??
1....14. (284)
1.....14. (284)
Tropomyosins differ in different muscle, for example between Striated skeletal
muscle, and smooth cardiac muscle; variation is generated by differential splicing at messenger RNA level: 13 exons
Note that lots of sequence available to do other stuff:
What is Role of Remaining Sites in Sequence??
Residues "b,c and f" lie on the outermost surface of the coiled coil molecule and
probably have a special role in the aggregation of the coiled coil molecule into a
larger assembly and in the function of the molecules.
In muscle this is clear: these sites are involved in interaction with actin monomers in actin filament!
Conclusion: Folding information dispersed through Amino Acid Sequence!!
In order to understand rules, need to know which amino acids carry the information for conformation.
If heptad repeat determines coiled coil structure, and any heptad repeat can form
coiled coil, how do they find their correct partners?
Recognition/ specificity in chain association; But since association not uncoupled
form folding, can’t uncouple folding from recognition.
In the 1980s there were significant advances in the design and construction of
spectrometers that could measure circular dichroism, and also a more sophisticated appreciation of the coiled coil structure:
To give you a sense of this aspect of problem, let me describe more recent studies on tropomyson, and how alpha recognizes beta chain: A very penetrating study was carried out by Sherwood Lehrere and colleagues at the Boston Biomedical Research Institute: They were interested in the question initially of whether in muscle there were
different populations of tropomysins: playing different regulatory roles; skeletal
muscle versus cardiac muscle
? Alpha/alpha
? Beta/beta
? Or alpha beta:
It became clear that in the muscle major species was alpha/beta; That raised the
question of how alpha and beta chains select heteropartner over homopartner: Sherwin S. Lehrer, Yude Qian and Soren Hvidt (1989)
“Assembly of the Native Heterdoimer of Rana esculenta Tropomysoin by Chain Exchange” Science, 246, 926-928.
Lehrer’s experiments were done with TM from Frog Rana
Equilibrium unfolding: Incubate sample at temperature for set amount of time; record spectra; express as % helix:
Curve for alpha/alpha: 50oC
Curve for beta/beta = 36oC
Curve for alpha beta; looked like two populations: but physical characterization
indicated one.
How think about midpoints: could be two stable populations; but very rare:
Aha: Not a single transition; two transitions; one at lower temperature 36o second sharper one at higher temperature, midpoint 50oC.
Possibilities:
? Heterogeneity in sample: TM is a mixture of two species:
? Homogenous sample: Two different domains, one high tm, other low tm On cooling, observed higher temperature transition, but lost lower temperature
transition, and didn’t regain same level of helicity as wild type:
Perhaps one domain refolds, other doesn’t; or one species refolds, or other doesn’t Proceeded to purify by ion exchange chromotography (different salts) alpha chains and beta chains.
Under physiological conditions alpha/alpha dimmers, β/β dimers:
Carry out melting:
? Alha/alpha shows single transition with midpoint about 50oC
? β/β shows transition at much lower temperature: around 30oC Both indicate that dissociation of dimer is coupled to loss of alpha helicity:
The unfolding of the refolded material; curve fit perfectly by sum of alpha/alpha and beta/beta
Under these conditions; two chains fold back to homo dimers; melting curve is of mixture:
The first transition of native TM alp[ha/beta must be an exchange reaction of the form
2alpha/beta >> alpha/alpha + 2 β
since losing helicity; but still have a species present that shows cooperative
transition identical to alpha/alpha
Under conditions where native structure being destabilized; fast equilibrium between
[Native}2 , > ?[I]n < > 2 [U]2
No species long lived enough to directly characterize:
Lets examine the rate of this process: takes about 50-100 seconds to cool from 60oC to 34oC;
Helicity regained rapidily:
Now continue to incubate for another 5,000 seconds about 8 hours:
Helicity and thermostability returns
E. Chain Recognition, Association, Registration
Recognition process; initiation of helicity > registration> propogation>
Careful investigation of Chain Recognition:
Erin O’shea, Rheba Rutkowski, Walter F. Stafford III, Peter S. Kim (1989)
Preferential Heterodimer Formation by Isolated Leucine Zippers from Fos and Jun Science, 245, 646-648.
DNA binding proteins Fos and Jun each contain leucine zipper regions with five leucines at every seventh residues. Partial homology to GCN$.
Synthesized peptides with cysteines and two glycines as spacers at N-terminus.
Run on HPLC;
Reduced, two single peaks of each peptide;
Oxidized, single peak;
So no fos/fos or jun/jun at eqilibirum under these condtions;
Control: denature in GuHCL, oxidize, now recover all three species
Prepare all three dimers, examine by circular dichroisims:
All three very helical:
What happens if mix together homodimers;
In absence of oxidizing agent:
In presence of oxidizing agent - Only heterodimer!
So exchanging below melting transition;
Examine stability:
? Fos/jun Tm around 54
? Jun/Jun around 53
? Fos/fos 37C.
Fos is +4 net charge:
Jun is –4 net charge;
So electrostatic stabilization from heterodimer
Electrostatic repulsion in homodimers;
Classes of helices:
? Fibrous proteins – Insoluble, helicity deduced
? In globular proteins, observed by X-ray diffraction –ridges into grooves packing
? In coiled/coils, X-ray scattering and diffraction – is this packing ridges into groves??
? isolated??
Coiled Coils stabilized by:
? Hydrophobic strip
? Charge charge interactions/salt bridges
? H- bonds
? buried hydrophobic core
Today we will focus on the formation of an alpha helix within a non helical polypeptide chain and the sequence specific interactions which stabilize and destabilize such species.
通天河生物产业园配套 行政中心工程 二 次 结 构 工 程 施 工 方 案 施工单位：河北志旺建筑工程有限公司
目录 一、编制依据 (2) 二、工程概况 (2) 三、施工准备 (3) 四、施工部署 (4) 五、施工方法 (7) 六、质量标准 (11) 七、成品保护 (13) 八、质量通病及防范 (13) 九、安全注意事项 (14) 一、编制依据 1、主要规程、规范
2、本工程施工图纸、施工组织设计； 3、施工合同文件。 二、工程概况 本工程是保定市重点建设项目，位于保定市唐县石门乡，我公司参加的通天河生物产业园配套行政中心工程，结构形式为框架结构（基础部分为独立基础形式，上部结构框架结构），-0.100以下待建成及场地完成设计回填后为掩埋结构。地上围护结构墙体外墙采用蒸压粉煤灰加气混凝土砌块MU5（天然容重≤14.5KN/m3），内墙采用蒸压粉煤灰加气混凝土砌块MU3.5（天然容重≤9.0KN/m3），砌筑
砂浆采用M5水泥砂浆，本工程总建筑面积4304.89㎡。 本次招标活动实行土建总包、安装分包，基坑围护及部分土方开挖工程列入总包范围，并对各专业分包（钢木结构、所有门窗、玻璃栏杆、等室内二次精装饰）、安装等工程实行总包配合、管理，室外道路及管线工程、园林绿化不属于本次发包内容。 建设（招标）单位：河北未名生物技术有限公司 设计单位：重庆博建建筑规划设计有限公司（结构设计）监理单位：重庆建新建设工程监理咨询有限公司 施工单位：河北志旺建筑工程有限公司 三、施工准备 3．1质量目标 本工程质量目标为合格。二次结构工程的质量目标为：各分项工程合格率100%。 3．2施工顺序 根据现场实际情况，二次结构整体施工先后顺序为：从上向下。 二次结构砌筑前先做样板墙及样板间，经建设、监理、施工单位三方验收合格后方可进行全面施工。 3．3施工准备工作任务划分 3. 3. 1管理人员 由现场经理进行总安排，测量人员及时放线、施工员现场监督、质检员做好质量检测、技术人员在看图纸根据现场施工及时准确做好问题处理。 3．3．2劳动力配置 劳动力均衡需求量如下：
大经街西区旧城（二期）住宅小区·A标段 二次结构施工方案 编制人： 校对人： 审核人： 审批人： 日期： 中天建设集团有限公司河北分公司 大经街西区旧城（二期）住宅小区·A标段项目部
目录 1、编制依据 (2) 2、工程概况 (2) 2.1工程简介 (2) 2.2二次结构工程概况 (2) 3. 施工总体安排 (3) 3.1总体部署 (3) 3.2质量目标 (4) 3.3计划工期 (4) 3.4现场布置 (4) 4. 施工准备 (4) 4.1机械、工具准备 (4) 4.2人员准备 (4) 4.3技术准备 (5) 5. 主要施工方法 (5) 5.1施工范围的确定 (5) 5.2砌筑施工方法 (5) 5.4现浇混凝土构造模板施工方法 (12) 5.5脚手架 (13) 5.6线管开槽 (13) 6. 质量标准 (14) 7. 安全文明施工措施 (15) 7.1安全施工措施 (15) 7.2文明施工与环保措施 (16)
1、编制依据 2、工程概况 2.1工程简介 2.2二次结构工程概况 建筑物±0.000以下采用小型混凝土空心砌块（其构造和技术要求见05J102-1），±0.000以上采用加气混凝土砌块（其构造和技术要求见05J3-4），厚度见施工图。 后砌填充墙重度不得大于7.5kN/m3，砌块强度等级为MU5，采用DM5混合砂浆砌筑。填充墙均应后砌，并与顶部梁板顶紧砌筑。室外部分地面以下砌体材料采用MU7.5实心砖，DM5水泥砂浆砌筑。
设计概况 3. 施工总体安排 3.1 总体部署 本工程由楼层划分流水段，先上而下独自进行流水作业。
3.2 质量目标 满足工程的总体质量目标 3.3 计划工期 计划工期共177d。其中3#计划工期80d,4#、7#计划工期132d，1#、2#计划工期144d。 3.4 现场布置 本工程采用商品DM5混合砂浆和DM5水泥砂浆砌筑。砂浆存储罐和砌块加工厂分别布置于2#楼东南角和3#楼南侧。半成品加工好后用手推车运至施工电梯，经施工电梯运至相应楼层后，再由手推车运至所需部位。 4. 施工准备 4.1 机械、工具准备 4.2 人员准备
康泰博17#化学实验楼等3项 二次结构施工方案 编制人： 审核人： 审批人： 中国新兴保信建设总公司五公司2013年10月19日
目录 第1章编制依据 (2) 第2章工程概况 (3) 2.1与二次结构混凝土有关的设计概况 (3) 2.2施工图 (3) 第3章施工安排 (4) 3.1施工部位及工期要求 (4) 3.2预拌混凝土 (4) 3.3砌块及砂浆 (5) 3.4劳动组织 (5) 第4章施工准备 (7) 4.1技术准备 (7) 4.2机具准备 (8) 4.3材料准备 (8) 第5章主要施工方法 (10) 5.1流水段划分 (10) 5.2二次结构砌筑施工 (10) 5.3二次结构混凝土施工 (21) 第6章成品保护要求 (24) 第7章质量要求 (25) 第8章安全注意事项 (28) 附图： （1）地下室二次结构构造柱位置示意图 （2）首层二次结构构造柱位置示意图 （3）标准层二次结构构造柱位置示意图
第1章编制依据
第2章工程概况 2.1 与二次结构混凝土有关的设计概况 表2.1 与混凝土有关的设计概况 2.2 施工图 （1）地下室构造柱、过梁、配筋带位置图 后附地下室二次结构构造柱位置图。 （2）标准层构造柱、过梁、配筋带位置图 后附地上首层、标准层的二次结构构造柱设置示意图。
第3章施工安排 3.1 施工部位及工期要求 表3.1 工期统计表 3.2 预拌混凝土 本工程混凝土全部采用北京市第五建筑工程有限公司混凝土分公司的预拌混凝土浇筑二次结构混凝土。商品砼搅拌站应提供下列资料： （1）随车提供预拌混凝土运输单、配合比通知单、混凝土氯化物和碱含量计算书。 （2）32天内提供预拌混凝土出厂合格证。 （3）商品砼搅拌站还应保证以下资料的可追溯性： 试配记录、水泥出厂合格证、水泥复试报告、砂子试验报告、碎（卵）石试验报告、轻集料试验报告、外加剂产品合格证、外加剂材料试验报告、掺合料试验报告、混凝土开盘鉴定（搅拌单位使用）、混凝土抗压强度报告、混凝土抗渗试验报告、混凝土坍落度测试记录（搅拌单位测试记录）、有害物检测报告。 按以下规定留置试块：每栋楼每次浇筑、每个部位、每种标号取样1次。砼试样应在砼浇筑地点随机抽取而不允许在泵车料斗内取样，每100m3的同配比砼取样一次，每次浇筑同配比砼不足100m3时仍应取样一次。 每次取样留置三组试件：一组标养、两种同条件（一组送试，一组备用），
手把手教你WPA2加密无线网络 【IT168专稿】随着无线技术的逐步成熟以及无线设备价格的平民化大众化，越来越多的家庭开始使用WLAN这种无线局域网的方式实现随时随地上网冲浪。不过网络安全问题也随之诞生，虽然一些有一定计算机和网络安全水平的用户开始使用WEP或WPA密钥来加密传输的数据包，但是WEP的破解相当容易，据说国外专业人士可以在2分钟内通过工具截获WEP加密过的数据包并解析出WEP密钥来。而以前一直让我们百分之百放心的WPA加密也不再安全。今天我们就来了解下如何暴力破解WPA加密密钥，让用户体会一次盾坚矛更利的感受。 一、实验环境网络拓扑简介： 本文主要采取的是暴力破解WPA加密密钥的方法，这就需要网络中存在足够多的经过WPA加密过的数据包，因此本人选择了一台计算机专门提供这种加密过的数据包，即该计算机与网络中的无线路由器通过WPA验证后不停的通讯。在此基础上再通过另外一台计算机窃取加密数据包并暴力破解。具体设备如下。 AP：D-Link DWL-2000AP+A，负责设置WPA加密信息。 无线客户端：笔记本+D-Link DWL-G122无线网卡，负责保证持续不断的WPA 数据通讯。 监听/破解机：笔记本+NetGear WAG511v2无线网卡，担任捕捉登陆‘握手’会话并破解出KEY的机器。 二、手把手教你暴力破解WPA密文： 不管是破解WPA加密数据还是WEP加密数据我们都需要找到专门的监听和分析软件，类似于有线网络中的sniffer，在无线网络中我们破解主要使用名为
WinAirCrack的强大工具。我们在以前讲解破解WEP密文时已经为各位介绍了该软件的简单使用以及软件下载地址，感兴趣的读者可以查询之前的文章。 安全危机轻松破解无线网络WEP密码上篇 安全危机轻松破解无线网络WEP密码下篇 WinAircrackPack－－下载 第一步：下载WinAirCrack程序并解压缩，然后根据之前的文章下载自己无线网卡对应的驱动，将驱动升级为基于atheros芯片的无线网卡。具体方法需要我们到https://www.doczj.com/doc/0d6810133.html,/support/downloads/drivers这个地址下载适合自己无线网卡品牌的驱动。 第二步：无线网卡准备工作完毕后打开WinAirCrack程序安装主目录，运行其中的airdump.exe。
二次结构专项施工 方案
二次结构专项施工方案 1、编制依据 1.1、《混凝土结构加固设计规范》GB50367- 1.2、《混凝土结构工程施工质量验收规范》GB 50204- 1.3、《砌体工程施工质量验收规范》GB50203- 1.4、《建筑机械使用安全技术规程》JGJ33- 1.5、《施工现场临时用电安全技术规范》JGJ46- 1.6、《建筑工程施工质量验收统一标准》GB50300－ 1.7、钢筋混凝土过梁 13G322-3标准执行 1.8、工程施工图纸 1.9、施工组织设计方案 2、工程概况 工程名称：利保商贸中心 工程地点：顺德区龙江镇121省道与325国道交汇处 建设单位：佛山市利保置业投资有限公司 设计单位：佛山建筑设计院有限公司 监理单位：广东海外建设监理有限公司 施工单位：龙元建设集团股份有限公司 本工程地处佛山市顺德区龙江镇121省道与325国道交汇处东南侧，建筑总面积为178484.68m2，地下三层，地上十六层至二十四层，共包括三个单体项目，其中1#楼为24层，总高度
123.2米、2#楼为21层，总高度105米、3#楼为16层，总高度为89米，地下二、三层层高为3.6米、地下一层层高为8.5m。裙楼商铺部分首层层高6米，二层层高5m,1#塔楼8、18层层高为3.6m，标准层层高均为5m；2#塔楼四至九层层高3.5m，十至二十一层层高5m；3#塔楼层高为5m。 3 施工部署 3.1 施工准备 3.1.1 技术准备 1）施工前应对认真图纸审核，了解各部位的材料选择、做法和技术要求。 2）基础、主体结构验收合格后方可进行砌体工程施工。 3）做好书面的技术（安全）交底，施工前由施工员进行现场交底。 4）砌体材料的复试和砂浆配合比确定的准备工作。 5）试验用具的准备。 6）绘制砌块排列图： 按砌块排列图在墙体线范围内分块定尺、划线，排列砌块的方法和要求如下： （1）砌块在砌筑前，应根据工程设计施工图，结合砌块的品种规格绘制砌体砌块的排列图，二次结构应预先设计好配筋带（或圈梁）、接顶方法等，经审核无误，按图排列砌块砌筑施工。
岁末年初安全生产工作总结2篇 Summary of work safety at the end of the year and the beginni ng of the year 汇报人：JinTai College
岁末年初安全生产工作总结2篇 前言：工作总结是将一个时间段的工作进行一次全面系统的总检查、总评价、总分析，并分析不足。通过总结，可以把零散的、肤浅的感性认识上升为系统、深刻的理性认识，从而得出科学的结论，以便改正缺点，吸取经验教训，指引下一步工作顺利展开。本文档根据工作总结的书写内容要求，带有自我性、回顾性、客观性和经验性的特点全面复盘，具有实践指导意义。便于学习和使用，本文档下载后内容可按需编辑修改及打印。 本文简要目录如下：【下载该文档后使用Word打开，按住键盘Ctrl键且鼠标单击目录内容即可跳转到对应篇章】 1、篇章1：岁末年初安全生产工作总结 2、篇章2：岁末年初安全生产工作总结 篇章1:岁末年初安全生产工作总结 根据《XX市安全生产委员会关于开展岁末年初安全生产大检查工作的通知》（惠安[20xx]16号）精神，我局结合实际，配合牵头单位在全县开展全方位的安全生产大检查，同时加强对我局全体干部职工的安全生产教育管理，提升了其安全生产意识，为全局各项工作开展提供了坚实保障。现将有关工作总结如下： 一、高度重视，精心组织
为加强对岁末年初安全生产大检查的组织领导，我局成 立了岁末年初安全生产大检查工作领导小组，由局长何岸灵同志任组长，邓振坤、李少基、罗尧增、陈远健、陈惠文同志任副组长，张燕聪、严师聪、李赟、赖帝恩、何耀国、戴阳曾、李庆文为成员，领导小组下设办公室，办公室负责日常工作，办公室主任由严师聪同志兼任，具体负责学习宣贯活动组织、协调等工作。此外，为更好地推进此项工作，我局还结合实际，对岁末年初安全生产工作进行了研究部署，制定了《惠东县发改局开展岁末年初安全生产大检查实施方案》,明确了工作任 务及有关安排。 二、结合实际，抓好落实 一是配合牵头单位在全县开展全方位的安全生产大检查。在督促企业全面自查自纠的基础上，突出事故易发多发、事故隐患突出的重点地区，突出道路交通、消防、建筑施工、危险化学品、烟花爆竹、非煤矿山和尾矿库、水上交通、渔业船舶、职业健康、旅游、特种设备、铁路、冶金有色、水利电力、 农业机械、民爆器材等重点行业领域，突出春节等重点时段，突出劳动密集型企业和人员密集场所，突出反复发生、长期悬而未决的重点问题，深入开展检查。
框架结构施工方案 技术准备 1:项目经理部组织人员建立测量组，检查验收红线桩，做好施工现场平面、高程控制桩的设置，以及自然地坪高程网络测量记录等测量准备工作。 2:组织项目经理部施工管理人员学习有关图集、图纸、施工规范以及技术文件。 3:公司主任工程师牵头，组织学习工程图纸、审查工作，做好图纸会审、设计交底工作。 4:翻样进行本工程钢筋、铁件、模板的翻样工作。 5:图纸会审内容，在开工前完善施工组织设计的调整编制工作。 6:各分部项目工艺卡，以及主要分项工程冬雨季施工措施。 7:品加工（门、窗及埋件等）加工、订货计划、明确进场时间。 现场准备 1:主要求的时间，组织及时进场，进一步按计划进行现场改造。 2:现场给定的水、电源，按施工现场平面布置图布置现场。 3:设计有计划地组织机械料具进场。 4:施工队伍进场施工。 5:部施工员实施定位放线，设置坐标控制网并埋设控制标桩。 6:场地做好排水组织。 7:配备消防器具，确保消防安全。 8:移动电话，连接天气预报通讯台。 施工程序 基础工程→主体结构（柱梁板）→屋面板→填充墙→屋面工程→楼地面工程→内墙粉刷→门窗工程→外墙粉刷→零星工程→室外工程。 注：其中水电、设备安装穿插施工。 主体结构施工方案
本工程为五层框架结构，由于层高较高，因此柱子砼需分层浇筑。其施工流程为：框架柱钢筋绑扎→支模→浇砼柱→柱（屋）面梁板支模→柱砼浇灌→楼（屋）梁板钢筋绑扎→楼（屋）面梁板砼浇灌→轴线标高垂直传递和复测。 脚手架工程 本工程外脚手架均用ф48钢管搭设而成。 本工程全高为17.4米,局部达到22.17米，所以用四根6米钢管对接，搭设正式外脚手前，必须认真处理其下部的地基，使之密实，并检查钢管、扣件的质保书是否符合要求；搭设时每一立杆的下部垫50mm厚，300mm宽，长度不得小于1.5m的木板。 脚手架内外杆的间距1m,排距1.5∽1.8m,步高1.8m,内设杆距墙面的距离为20∽30cm,大小横杆的两端伸出构架10∽20cm,落在屋面上的脚手架下端要加垫木。外脚手架必须随着施工层的升高而超高一层搭设，搭设好的脚手架应及时在其外侧满挂密目安全网，挂安全网时，须用不小于10#的镀锌9.1钢筋工程 钢筋制作： 钢材进场后必须按要求取样试验，送试验室进冷拉、冷弯试验。质量不合格、不检验的钢材严禁使用，钢材下料严格按图纸施工，要根据不同钢筋长短搭配，统筹排料，减少接头，如需钢筋代换，必需经设计院同意方可。 钢筋焊接： 钢筋焊接前首先进行可焊性试验，试验合格后方可成批焊接，并且按规定抽样送检，柱主筋采用电渣压力焊，梁筋采用闪光对焊，板筋采用电弧焊。 钢筋绑扎： 钢筋绑扎严格按规范要求施工，严禁漏扎，绑扎接头的搭接长度，接头的布置必须符合设计要求。为了保证梁、柱节点处箍筋安放质量，可按下列方法施工，当梁骨架钢筋在楼盖上绑扎时，将预先焊好的成品“套箍（按设计要求，几个箍筋按规范间距焊接而成）放入，以便当梁骨架沉入时能满足设计要求的间距施工。对135度/135度的箍筋施工，因其安放难度较大，制作时先做成135度/90度的箍筋，待其绑扎好后再用小扳手将90度弯钩扳成135度，所有板负弯筋必须用小马凳搁置，浇灌砼时，严禁破坏小马凳，确保负弯筋的位置正确。 钢筋保护层： 基础保护层为：有垫时保护层是40mm，无垫层时保护层是50 mm；柱梁的保护层均为25mm，板的保护层为15mm，在工程开工时，预先制作一部分与砼同标号的砂浆垫块，垫块厚分成25mm和15mm，中间预埋1个扎丝，以便柱梁钢筋施工时使用。
如何破解无线网络密码 随着社会的进步！WIFI上网日益普及,特别是大城市中随便在一个小区搜索一下就能找到好多热点,搜索到热点然后链接上去那么我们就可以尽情的享受免费上网服务了。 不过除了公共场所以及菜鸟用户之外几乎所有的WIFI信号都是加密的,很简单换作是你你也不愿意把自己的带宽免费拿出来给别人用,所以如果你搜索到你附近有热点想免费上网的话请仔细往下学习... 破解静态WEP KEY全过程 首先通过NetStumbler确认客户端已在某AP的覆盖区内，并通过AP信号的参数进行‘踩点’（数据搜集）。
通过上图的红色框框部分内容确定该SSID名为demonalex的AP为802.11b类型设备，Encryption属性为‘已加密’，根据802.11b所支持的算法标准，该算法确定为WEP。有一点需要注意：NetStumbler对任何有使用加密算法的STA[802.11无线站点]都会在Encryption属性上标识为WEP算法，如上图中SSID为gzpia的AP使用的加密算法是WPA2-AES。 我们本次实验的目的是通过捕捉适当的数据帧进行IV （初始化向量）暴力破解得到WEP KEY，因此只需要使用airodump.exe（捕捉数据帧用）与WinAircrack.exe（破解WEP KEY用）两个程序就可以了。 首先打开ariodump.exe程序，按照下述操作：
首先程序会提示本机目前存在的所有无线网卡接口，并要求你输入需要捕捉数据帧的无线网卡接口编号，在这里我选择使用支持通用驱动的BUFFALO WNIC---编号 ‘26’；然后程序要求你输入该WNIC的芯片类型，目前大多国际通用芯片都是使用‘HermesI/Realtek’子集的，因此选择‘o’；然后需要输入要捕捉的信号所处的频道，我们需要捕捉的AP所处的频道为‘6’；提示输入捕捉数据帧后存在的文件名及其位置，若不写绝对路径则文件默认存在在winaircrack的安装目录下，以.cap 结尾，我在上例中使用的是‘last’； 最后winaircrack提示：‘是否只写入/记录IV[初始化向量]到cap文件中去？’，我在这里选择‘否/n’；确定以上步骤后程序开始捕捉数据包。 下面的过程就是漫长的等待了，直至上表中‘Packets’列的总数为300000时即可满足实验要求。根据实验的经验所得：当该AP的通信数据流量极度频繁、数据流量极大时，‘Packets’所对应的数值增长的加速度越大。当程序运行至满足 ‘Packets’=300000的要求时按Ctrl+C结束该进程。 此时你会发现在winaircrack
六安中梁·香缇学府二标段工程二次结构工程施工方案 安徽华力建设集团有限公司 二○一七年十月
目录 一、工程概况.................................................................................................................. 二、编制依据：.............................................................................................................. 三、控制要点：.............................................................................................................. （一）构造柱、圈梁、过梁、配筋带：.............................................................. （三）窗台压顶....................................................................................................... （四）放线预留洞口的封闭................................................................................... （五）植筋............................................................................................................... （六）填充外墙：页岩模数砖砌筑....................................................................... （七）填充内墙：蒸压加气混凝土砌块砌筑....................................................... 四、质量标准.................................................................................................................. 五、质量通病防治.......................................................................................................... 六、雨期施工措施.......................................................................................................... 七、水电管线的埋设......................................................................................................
岁末年初安全生产工作总结2020 根据《XX市安全生产委员会关于开展岁末年初安全生产大检查工作 ___》(惠安[20xx]16号)精神，我局结合实际，配合牵头单位在全县开展全方位的安全生产大检查，同时加强对我局全体干部职工的安全生产教育管理，提升了其安全生产意识，为全局各项工作开展提供了坚实保障。现将有关工作总结如下： 为加强对岁末年初安全生产大检查的组织领导，我局成立了岁末年初安全生产大检查工作领导小组，由局长何岸灵同志任组长，邓振坤、李少基、罗尧增、陈远健、陈惠文同志任副组长，张燕聪、严师聪、李赟、赖帝恩、何耀国、戴阳曾、李庆文为成员，领导小组下设办公室，办公室负责日常工作，办公室主任由严师聪同志兼任，具体负责学习宣贯活动组织、协调等工作。此外，为更好地推进此项工作，我局还结合实际，对岁末年初安全生产工作进行了研究部署，制定了《惠东县发改局开展岁末年初安全生产大检查实施方案》，明确了工作任务及有关安排。 一是配合牵头单位在全县开展全方位的安全生产大检查。在督促企业全面自查自纠的基础上，突出事故易发多发、事故隐患突出的重点地区，突出道路交通、消防、建筑施工、危险化学品、烟花爆竹、非煤矿山和尾矿库、水上交通、渔业船舶、职业健康、旅游、特种设备、铁路、冶金有色、水利电力、农业机械、民爆器材等重点行业领
域，突出春节等重点时段，突出劳动密集型企业和人员密集场所，突出反复发生、长期悬而未决的重点问题，深入开展检查。 二是加强火灾隐患排查，提高全体干部职工火灾防患意识。对办公室设备故障、老化短路、线路接触不良、通风散热、用电负荷及纸张资料易燃物品摆放等问题进行重点排查，对存在问题集中整改。将各办公室电脑、饮水机、打印机等用电设备落实到人头，做到管理清晰、责任明确。 1、进一步做好安全隐患检查和整改工作。 在当前安全生产大检查工作的基础上，进一步加大安全隐患排查和整改力度，全力排查各类安全隐患，对检查中发现的问题，我们要坚决按照“四不放过”的要求落实整改，并积极探索建立和完善安全隐患的排查整改监督检查长效机制。 2.进一步加大安全生产宣传培训力度。 进一步加强安全生产法律法规宣传力度，努力营造安全生产氛围，积极组织开展安全专项教育培训，组织全体干部职工学习各项规章制度，开展多种形式的教育活动，努力建设“以人为本、关注安全、关注生命”的安全文化。
目录 1、编制依据 (2) 1.1设计、技术文件 (2) 1.2主要规范、规程、标准、图集 (2) 2、工程概况 (2) 2.1工程主要简介 (2) 2.2二次结构概况 (3) 3、施工准备 (4) 3.1技术准备 (4) 3.2实验计划 (4) 3.3施工作业条件 (5) 4、施工安排 (5) 4.1施工任务划分 (5) 4.2施工总体安排 (5) 4.3施工现场布置 (5) 4.4样板计划 (5) 4.5施工管理组织及分工 (6) 5、主要施工方法和工艺 (6) 5.1二次结构放线 (6) 5.2钢筋植筋与绑扎 (7) 5.3蒸压加气混凝土砌块施工工艺 (10) 6、质量要求 (12) 6.1钢筋植筋与绑扎质量标准 (12) 6.2砌块砌筑质量标准 (13) 7、成品保护 (15) 8、安全、环保、文明措施 (15) 8.1安全保证措施 (15) 8.2环境保护措施 (16) 8.3文明施工措施 (16)
1、编制依据 1.1设计、技术文件 1.2主要规范、规程、标准、图集 2、工程概况 2.1工程主要简介 工程名称：凤祥铭居住宅小区二期工程 工程地点：连云港市凤凰新城学院路西、新建路北。
建设单位：连云港市凤祥铭居房地产开发有限公司 监理单位：北京中景恒基工程管理有限公司 设计单位：江苏华新城市规划市政设计研究院有限公司 勘察单位：江苏省地质工程勘察院 施工单位：中国能源建设集团安徽电力建设第一工程有限公司 本工程基础采用预应力管桩+承台地梁+筏板，地下室为框架剪力墙结构，主楼部分为剪力墙。 2.2二次结构概况
3、施工准备 3.1技术准备 3.1.1施工前，项目部技术质量科针对本工程实际特点进行施工方案技术交底工作，使每个操作人员在施工前能够清楚施工方法、技术要点、质量标准、安全要求等，以及清楚施工薄弱环节应加强处理的部位。 3.1.2工长必须认真熟悉图纸，按图纸和施工方案及规范要求，合理组织安排施工，并组织技术人员对施工操作者进行现场技术交底工作。 3.1.3提前组织材料进场及验收工作，按建筑工程资料管理规程中试验项目及相应取样规定进行试验，经复试试验合格后方可使用。 3.1.4组织施工员提前做好砌筑墙体位置线的校合。依据图纸要求计算出门窗过梁、构造柱、拉结筋、圈梁的位置，做好砌筑质量的预控工作。 3.1.5工序施工前必须严格按照“样板先行制度”落实，并留存样板验收纪录，在样板验收纪录上，必须有关于此样板项的验收标准。 3.2实验计划 3.2.1加气混凝土砌块、混凝土空心砌块：以每次进场数量且不超过10000块为一验收批，不足10000块也按一批计。 3.2.2砂浆：同一砂浆强度等级，同配合比，同种原材料每一楼层为一个取样单位，每取样单位标准养护试块的留置不得少于一组（每组3块）。 3.2.3构造柱、圈梁等砼（本工程全部采用商品混凝土）：计划每层浇筑1次，制作一组试块（每组3块）。 3.2.4钢筋原材：根据现场实际情况，每次进场的各种规格钢筋的吨位较难确定，为实现对钢筋的双控，钢筋进场后，按照每种规格不大于60吨取样1组，监理见证取样和送检次数达到100%。 3.2.5钢筋植筋拉拔试验：每种钢筋型号做一组拉拔试验，且植3000根钢筋做一组拉拔试验。 3.2.6试验员做好试件的制作、养护、送检工作，及时将试件资料整理完好，报送资料员归档。
北外滩水城十六街区工程 二次结构施工方案 编制人： 审核人： 审批人： 江苏中南建筑产业集团有限责任公司 北外滩水城十六街区项目部 2015年7 月1日
目录 一、编制依据 (3) 二、工程概况 (3) 三、施工准备 (4) 3.1技术准备 (4) 3.2机械、用具准备 (5) 3.3材料准备 (5) 四、施工条件 (6) 五、后砌隔墙构造要求 (6) 六、施工工艺及方法 (8) 七、质量控制 (9) 八、半成品、成品保护 (12) 九、应注意的质量问题 (13) 十、机械安全操作规程及管理 (13) 十一、现场安全文明施工管理 (16)
一、编制依据 1. 本工程设计图纸 2.《砌体结构工程施工质量验收规范》GB50203-2011 3.《砌体结构构造详图》02G01-1 4.《加气混凝土砌块墙》05J3-5 5.《建筑物抗震构造详图》11G329-2 6.《混凝土结构工程施工质量验收规范》GB50204-2002 7.《混凝土结构工程施工规范》GB50666-2011 8.《墙身-加气混凝土》08J2-3（2008） 9.《钢筋混凝土过梁》 03G322-1~4 10.《建筑工程施工质量验收统一标准》GB50300-2013 二、工程概况 工程名称：XXX 建设单位：XXX 监理单位：XXX 基坑设计: XXX 主体设计：XXX 总承包单位：XXX 拟建的北外滩水城十六街区项目，33层高层住宅11栋（1-11#楼）,4层社区服务用房1栋,3层幼儿园（9班）1栋；其中10#是沿街商业网点，11#楼下设置物业用房。高层住宅10#、11#楼为框架、剪力墙结构体系，1#~9#高层住宅为剪力墙结构，配套公建用房（社区服务用房、幼儿园等）和地下室为框架结构体系。 本工程二次结构实体要求：后浇过梁、构造柱等混凝土为C20；钢筋涉及HPB300、HPB400；±0.00以下采用填充墙采用200厚MU10.0灰砂砖，砌筑。内墙体选用A3.5蒸压加气混凝土砌块，M7.5专用干粉砂浆砌筑。±0.00以上外墙、卫生间、水电风管井采用MU7.5混凝土空心砌块M5.0混合砂浆砌筑，水电井等混凝土门槛、卫生间周边、
xxxxx建筑工程施工 二 次 结 构 砌 筑 施 工 方 案 编制人： 审核人： 批准人： xx建筑工程有限公司年月日
目录 一、编制依据............................................................................................................................ - 2 - 二、工程概况.............................................................................................................................. - 2 - 三、施工准备.............................................................................................................................. - 2 - 四、施工部署.............................................................................................................................. - 4 - 五、施工方法.............................................................................................................................. - 7 - 六、质量标准............................................................................................................................ - 10 - 七、成品保护............................................................................................................................ - 11 - 八、质量通病及防范................................................................................................................ - 12 - 九、安全注意事项.................................................................................................................... - 13 -
东岸阳光DK-2 6#楼 二次结构砌筑工程专项施工方案 审批： 审核： 编制： 陕西航天建筑工程有限公司三公司七部 2016年6月21日
目录 第一章工程慨况 0 第二章编制依据 0 第三章施工部署 (1) 第四章施工准备 (1) 第五章施工方法 (4) 第六章主要施工管理措施 (14) 第七章砌筑指导性图片 (23)
第一章工程慨况 1.1、工程简介 本工程由陕西石家街城中村改造项目有限公司开发，陕西省现代建筑设计研究设计，西安市智信建设工程项目管理咨询有限公司，陕西航天建筑工程有限公司施工。工程建设地点西安市东二环与东元路十字，本工程总建筑面积41336㎡,建筑高度：99.8米,结构类型：框剪结构，抗震设防烈度为8度。 1.2、工程结构设计概况一览表： 为加强砌筑过程的质量控制，结合工程现场施工的实际情况，特编制本方案，以指导现场的砌筑施工。 第二章编制依据
第三章施工部署 现场共布置2 台施工电梯，为人货两用梯，用作人员上落及材料运输，地下室施工时还可以使用结构内的车道进行运输。现场还布置2台塔式起重机配合吊运物料，工作范围覆盖整个施工场地。根据设计图纸，按后浇带位置区分为3个施工区域，分层分段由远及近组织流水施工。 第四章施工准备 4.1、材料准备及要求： 4.1.1、由于本工程现场场地狭小，在确保材料及时供应的情况下，根据施工进度和材料计划分期分批的组织砌块材料进场。砌块堆放场地应平整清洁、无积水，砌块不应被油污等污染。装卸砌块时严禁翻斗倾卸和丢掷。砌块应按品种、规格、强度等级及砌块生产日期分别堆码整齐，高度不应超过2 m。砌块堆垛上应设有标志，堆垛间应留有通道。 4.1.2、进入施工现场的加气混凝土砌块应提交产品出厂合格证和检测报告。砌块的规格尺寸、外观质量、强度级别和密度级别必须符合设计要求。材
北流碧桂园六期A标段总承包工程北流碧桂园六期总承包工程 二次结构施工专项方案 编制人： 审核人： 审批人： 编制单位: 电白二建集团有限公司 日期： 2016年7月10日
目录 一、编制依据 (2) 二、工程概况 (2) 三、施工准备 (4) 四、主要施工方法 (7) 五、质量标准和控制 (14) 六、成品保护措施 (18) 七、安全保障措施 (18) 八、环境保护措施 (18) 九、文明施工措施 (18)
一、编制依据 1、《混凝土结构工程施工质量验收规范》GB50204-2015 2、《砌体工程施工质量验收规范》GB50203-2011 3、《建筑工程施工质量验收统一标准》GB50010-2010 4、《砌体结构工程施工规范》GB 50924-2014 5、《普通混凝土小型砌块》GB/T 8239-2014 6、《建筑工程施工质量验收统一标准》 GB50300-2013 7、《砌体填充墙结构构造》12G614-1 8、《混凝土后锚固技术规程》JGJ145-2013 9、《建筑施工安全检查标准》GJ59-2011 10、《建筑施工扣件式钢管脚手架安全技术规范》JGJ130-2011 11、《建筑施工模板安全技术规范》JGJ162-2008 12、《建筑施工手册》第四版 13、北流碧桂园六期设计图纸 14、设计交底及图纸会审答疑 15、《广西区域结构图纸优化收集库》2016.7.06 二、工程概况 1、工程概况 本工程为北流碧桂园六期别墅区结构形式为框架结构，局部地下1层，地上3层；高层结构形式为剪力墙结构，地上18层，地下1层。室内地坪以下墙体、阳台砖砌拦河以及天面女儿墙砌体均采用MU15烧结页岩实心砖，M10水泥砂浆砌筑;室内地坪以上墙体采用A5.0级蒸压加气混凝土砌块(容重≤7.5kN/m 3 ),Ma5专用砂浆砌筑，砌体的施工质量控制等级为B级。框架柱（剪力墙）与填充墙之间的拉结筋、构造柱、门窗洞口边框钢筋均采用后植筋。 2、构造柱设置要求
二次结构 施 工 方 案 XX工程公司 年月日
目录 编制依据 ________________________________________________________________________ 4分项工程概况_____________________________________________________________________ 4施工安排 ________________________________________________________________________ 4进度计划安排___________________________________________________________________ 4施工现场安排___________________________________________________________________ 5劳动力安排_____________________________________________________________________ 5施工准备 ________________________________________________________________________ 5技术准备_______________________________________________________________________ 5机械、用具准备_________________________________________________________________ 6材料准备_______________________________________________________________________ 6施工方法 ________________________________________________________________________ 7施工顺序_______________________________________________________________________ 7测量放线_______________________________________________________________________ 7 胀锚螺栓法拉结构造施工_________________________________________________________ 7构造柱、水平系梁的设置_________________________________________________________ 7抱框的设置____________________________________________________________________ 10填充墙拉结筋设置______________________________________________________________ 11过梁设置______________________________________________________________________ 11 植筋法拉结构造施工____________________________________________________________ 12 陶粒混凝土空心砌块施工________________________________________________________ 13工艺流程______________________________________________________________________ 13隔墙施工技术要求______________________________________________________________ 13墙体砌筑______________________________________________________________________ 14水电处理______________________________________________________________________ 15质量标准______________________________________________________________________ 16成品保护______________________________________________________________________ 16 二次结构混凝土施工____________________________________________________________ 17钢筋绑扎______________________________________________________________________ 17构造柱、抱框模板施工__________________________________________________________ 17混凝土施工____________________________________________________________________ 17 陶粒混凝土预制板施工__________________________________________________________ 17材料要求______________________________________________________________________ 17作业条件______________________________________________________________________ 18工艺流程______________________________________________________________________ 18隔墙板安装____________________________________________________________________ 18隔墙板节点做法________________________________________________________________ 19质量标准______________________________________________________________________ 20成品保护______________________________________________________________________ 21