儿童过敏性紫癜尿微量蛋白检测对肾损伤早期诊断的临床价值
[摘要]目的:通过98例过敏性紫癜(HSP)患儿尿微量蛋白变化的分析,探讨尿微量蛋白在HSPN早期诊断中的价值。方法:98例HSP患儿急性期分别做尿常规、尿微量蛋白并尿常规检查随访6个月,据尿常规检查结果分为单纯过敏性紫癜和紫癜性肾炎组,对照组为体检的健康儿童20例,统计分析三组间急性期尿微量蛋白表达差异。结果:HSPN组及HSP组尿β2-MG较正常对照组明显升高(P<0.05),但两组间无显著性差异。尿微量白蛋白和免疫球蛋白HSPN组及HSP组均较正常组增高(P<0.05),HSPN组较HSP组明显增高(P<0.05)。结论:尿微量蛋白的检测具有无创和简单易行的特点,作为紫癜性肾炎的早期预测指标具有临床价值。
[关键词]尿微量蛋白;紫癜;过敏性;早期肾损伤;儿童
过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)是由免疫复合物介导的全身中小血管炎,是全身性疾患累及肾脏的常见原因之,紫癜肾炎(henoch-schonleinpurpurane-phritis,HSPN)是儿科最常见的继发性肾小球疾病,其严重程度直接影响过敏性紫癜的预后。早期发现并进行干预或治疗,将延缓疾病进展,改善疾病预后,但是肾脏具有强大储备功能,同时过敏性紫癜肾脏损伤症状出现的滞后性、隐匿性以及肾脏活检的有创性给紫癜性肾炎的早期诊断带来困难,本文分析并评价了98例HSP患儿肾脏受累的情况及与尿液系列蛋白变化的相关性,旨在探讨尿液系列蛋白在HSPN早期诊断中的价值。
1 对象和方法
1.1 临床资料:选取2005年1月～2008年12月我院确诊的HSP患儿98例为研究对象,随访6个月。HSP确诊均有典型的HSP出血性皮疹,符合《实用儿科学》第7版HSP诊断标准[1]。尿常规蛋白定性阳性和(或)红细胞﹥3/高倍视野诊断为紫癜性肾炎[2]。本组病例中男62例,女36例,年龄2～14岁,平均8.2岁;病程1d～2月。98例HSP患儿急性期(皮肤紫癜出现)分别做尿常规、尿微量白蛋白(M-Alb)、免疫球蛋白G(U-IgG)、β2微球蛋白(β2-MG)含量。并尿常规检查随访6个月,据尿常规检查结果分为单纯过敏性紫癜和紫癜性肾炎组,对照组随机抽取门诊体检的健康儿童20例,年龄性别与研究组无统计学差异。统计分析三组间急性期尿微量蛋白表达差异。
1.2 方法:取患儿晨起新鲜中段尿10ml,采用放射免疫分析检测尿微量M-Alb、U-IgG、β2-MG含量。
小鼠尿微量白蛋白(ALB）酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆,相关液体样本尿微量白蛋白(ALB）含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠尿微量蛋白(ALB)水平。用纯化的小鼠尿微量蛋白(ALB)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入尿微量蛋白(ALB)，再与HRP标记的ALB抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的尿微量蛋白(ALB)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠尿微量蛋白(ALB)浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存 说明书1份1份 封板膜2片（48）2片（96） 密封袋1个1个 酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：540μg/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞
第十一章肌红蛋白尿 第一节肌红蛋白尿得定义 尿内含有游离得肌红蛋白称为肌红蛋白尿。正常时血浆中肌红蛋白含量甚微,需用放免测定始能发现。一旦血浆中出现肌红蛋白,就迅速地由肾小球滤出,其浓度超过肾阈,尿中即可出现,尿液呈粉红色,但很快变为棕色或棕黑色。 第二节诊断思路 (一)询问病史 1.疑有血红蛋白尿时,应询问有无广泛软组织损伤(如挤压伤、严重烧伤、电 灼伤等)、肌细胞缺氧(如大动脉栓塞)、肌肉炎症(如皮肌炎、多发性肌炎等)、中毒(如蛇毒、蜂毒、蜘蛛毒与重度乙醇中毒等)、剧烈肌痉挛、恶性高热、剧烈运动得病史。 2。对阵发性肌红蛋白尿得患者应注意询问有无先天性磷酸化酶、磷酸果糖激酶或肉毒碱软脂酰基转移酶缺乏等情况,此类病人常在急性感染后(儿童起病)或运动后(成人)出现肌红蛋白尿。 (二) 体格检查 尿色异常本身并无特别得体征,但就是引起肌红蛋白尿得病因应做相应得体格检查。 (三)相关检查 1、疑为肌红蛋白尿者,联苯胺试验阳性,但在尿中加入３。2moｌ硫酸胺不生 成异常色素沉淀,无血管内溶血得各项表现,可出现肌肉受损得表现(如磷酸肌酸激酶与转氨酶等肌酶增高)。 2、以及疑为其她可能病因时应作针对病因得相关检查。 3、本症常引起急性肾功能不全,注意相应肾功能检查。急性肾功能衰竭:肌 红蛋白尿常可引起急性肾功能衰竭,其发生机理仍未了解,可能与以下诸因 素有关:肾小管梗阻;损伤得肌肉释放蛋白溶解酶激活血管收缩物质,造成肾 脏缺血;肌红蛋白分解产物铁色素等得直接肾毒性作用损伤肾小管。 (四)病情评估 肌红蛋白尿可引起急性肾功能不全,处理不及时可引起严重后果。同时,病情严重程度还取决于基础病得病情程度。 第三节鉴别诊断 诊断思路如下: 一、明确就是否为尿色异常
尿检微量白蛋白高是怎么回事呢? 一般来说，当人体感觉到不适且去医院接受检查的时候，通常会对尿液进行检测，如果尿液中蛋白的含量比较高，就说明身体状况出现了问题，因为正常尿液中蛋白的含量很少，基本上没有，只有肾功能出现问题时，才会让蛋白有机会渗透到尿液中，那么尿检微量白蛋白高是怎么回事呢? 微量白蛋白是指在人体尿中出现微量白蛋白。白蛋白是一种血液中的正常蛋白质，但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。微量白蛋白尿则反映人体肾脏异常渗漏蛋白质。 一般情况下来说，人体代谢症状，尿中基本没有蛋白，具体到每升尿白蛋白不超过20mg(<20mg/L)，所以叫微量白蛋白。如果在体检后发现尿中的微量白蛋白在20mg/L-200mg/L范围内，就属于微量白蛋白尿。尿微量白蛋白高证明肾病患者已有大量白蛋白漏出，可能出现低蛋白血症，要及早进行规范治疗。
造成微量蛋白过量的原因可能是：1.体位性蛋白尿，2.组织性蛋白尿，3.肾小管性蛋白尿，4.肾小球性蛋白尿。体位性蛋白尿可能是生理性的，当然要排除病理性，才能认为是生理性的。组织性蛋白尿内见肾自身分泌蛋白。肾小球能滤过蛋白，正常情况下只能滤过小分子蛋白，病理时通过的蛋白分子变大，量多。 肾小管能重吸收肾小球滤过蛋白，一般只能重吸收小分子蛋白。你是微量蛋白过量，如果大分子蛋白不过量，那可以认为肾小球滤过功能正常，而肾小管重吸收能力出现问题。建议：查肾脏B超，肾功能，24小时尿蛋白定量，尿常规，必要时肾穿刺。当出现尿微量白蛋白偏高时，要及时到医院进行检查确诊。判断是微量白蛋白后，应抓紧时间治疗。 通过上面的介绍，大家对尿检微量白蛋白高是怎么回事也都很清楚了，其实在做尿检的时候还有很多的指标也是需要参考一下的，这样综合分析判断，才能对自身的病情和健康状况有更清楚深入的了解，也就可以放心防治了。
第一部分 尿微量白蛋白（U-Albumin）的临床意义 1982年Viberti等发现了糖尿病患者尿中总蛋白在正常范围，而尿白蛋白排泄增加的现象，首先提出了尿微量白蛋白的观点，并指出了这种蛋白的出现是肾病发生的早期预兆。 随着检测技术的进步，目前主要用于对糖尿病、高血压患者早期检测发现微量蛋白尿，以便及时采取保护肾功能的措施，如限制蛋白的摄入量、禁烟、及时控制血糖和血压。 因此及时检测尿微量白蛋白，对控制和防止早期肾病的发生极为重要。 1、微量白蛋白尿的基本概念 多种疾病可引起尿白蛋白排泄率持续增加，尿中用常规方法不能检测到，叫微量白蛋白。其含量在20－200mg/L，此时如能及时治疗，肾脏损害处在尚可逆转的时期，这种常并发于糖尿病，高血压病人中的尿蛋白，称微量白蛋白。 2、尿正常代谢及尿蛋白的形成 尿是在肾脏内形成的。体内血流经肾小球毛细管时，其中的细胞、大分子蛋白质和脂类等胶体被截留，其余成份则经半透膜滤过进入肾小球中此称为原尿。原尿通过肾小管时，绝大部分水分及电介质和葡萄糖等物质又被吸收回血，同时肾小管也分泌一些物质加入尿中，最后生成终尿。经输尿管、膀胱、尿道排出体外。 病理情况下，由于肾小球内压力增高滤过增加或是基底膜改变，导致高滤过率而出现蛋白尿。 3、微量白蛋白正常值： 健康成年人尿微量白蛋白参考区间 24h尿：＜30mg/L（24h最高量） (摘自卫生部医政司“全国临床检验操作规程”2006,第三版p356) 与定性法比较有下列优点： *敏感性高，可测出定性法阴性的标本 *精密度CV5－8％ *定量结果测定范围广5－200mg/L *标本量少，20ul尿液 *特异性强能抗尿中多种物质的干扰 *测量时间快，3分钟报告结果 4、尿微量白蛋白测定的临床意义 (1) 、对高血压病的应用价值
尿微量白蛋白的临床检测的注意事项 欧阳嵘 目前，我国患糖尿病、高血压、心脑血管病的人数日益增多。随着病程的发展，肾脏受累的可能性与受累的程度也不断上升。通常情况下血尿素和血肌酐的测定值正常时并不能排除肾脏的受损, 而尿 常规蛋白测定结果为阳性时,肾脏的损伤往往已达到不可恢复的阶段，尿微量白蛋白(MAU) 的测定已越来越多地用做肾组织损伤的早期诊断指标,其临床意义也已日益为临床医生所重视。若在发生微量白蛋白尿的这一阶段积极有效地控制血糖、降压、降脂、减少蛋白摄入量、改善生活方式，仍有希望阻止病情向大量蛋白尿发展或延缓其发展速度，同时也能减少心血管事件的发生[1-2]。但在临床实际操作中，尿微量白蛋白的测定亦有很多需要注意的相关事项，值得我们临床医生去关注。 1、尿微量白蛋白的定义 1982年Viberti等发现1型糖尿病时尿总蛋白在参考范围内，而尿白蛋白排泄却增加，由此提出了“微量白蛋白尿”的概念，并把它作为糖尿病早期肾损害一个敏感指标[3]。其特征是尿白蛋白浓度为 20-200mg/L或白蛋白排泄率20-200μg/min（或30-300mg/24小时），或白蛋白/肌酐比率30-300mg/每克肌酐）。此时尿常规试纸条检测蛋白为阴性。尿常规试纸条检测蛋白为阳性时白蛋白浓度已大于 200mg/L（或白蛋白排泄率大于200μg/min），称为大量白蛋白尿。因尿蛋白浓度受主客观因素影响比较大，故临床上更多采用白蛋白排
泄率或尿白蛋白/肌酐比率来表示尿白蛋白的值。国际上多采用白蛋白排泄率表示尿中白蛋白的排出量。 2、尿微量白蛋白发生的机理 白蛋白(Albumin)占血浆总蛋白量的60％，分子量为69kD，是一种带有负电荷的大分子蛋白。正常情况下在肾小球滤过膜上有许多小孔起机械屏障作用，膜孔直径为5.5nm,限制大分子物质(如血细胞和大分子蛋白质)的滤过。在滤过膜上还存在着带负电荷糖蛋白和硫酸乙酰肝素，这些带负电荷的结构形成了滤过膜的电子学屏障，限制了带负电荷的分子滤过。血浆白蛋白分子量69 kD，且由于其带负电荷，所以正常情况下只有极少部分能滤过，经肾小球滤过的蛋白质几乎全部被近曲小管以主动方式重吸收，因此最后随着尿液而排出的白蛋白只有极少量。正常情况下，绝大部分蛋白不能通过滤过膜。但在病理情况下[4]，如各种炎症、代谢异常和免疫损伤，使肾小球血流动力学异常，肾小球滤过膜损害是造成尿微量白蛋白排出量增加的重要原因。糖尿病病人由于长期高血糖使非酶糖酰化速率增加，导致缺氧，血液黏度增高，同时内皮细胞释放内皮素和一氧化氮等血管活性物质使肾小球毛细血管张力改变，进而引起肾血流动力学变化，使肾小球处于高滤过状态并导致肾损害，同时糖尿病患者肾小球滤过膜上硫酸乙酰肝素合成减少，硫酸肝素分子带有许多阴离子侧链，对于维持基底膜电荷和孔径的大小起重要作用，导致肾小球滤过膜电荷选择性屏障受损，使尿微量白蛋白在尿中排出增加[。再加上糖尿病病人存在三多一少症状，近曲小管内的尿流速增加，导致被滤出的白蛋白又不
尿微量白蛋白临床检验的意义及诊断价值 发表时间：2018-01-10T13:30:33.237Z 来源：《医药前沿》2017年12月第35期作者：冯德光 [导读] 综上所述，临床检测尿微量白蛋白，可有效判定高血压和糖尿病疾病者肾功能状况，临床应用价值较高。 （重庆市合川区宏仁医院检验科重庆 401520） 【摘要】目的：分析研讨尿微量白蛋白临床检验的意义及诊断价值。方法：采用随机抽签方式，从我院2014年5月至2016年7月期间收治的糖尿病和高血压患者中，各抽取40例纳入到讨论中（40例糖尿病患者、40例高血压病患者），另外选取同时期来我院体检健康的40例人员纳入到对照组中，三组研讨对象均接受尿微量白蛋白检验，对比分析三组检测结果。结果：经检测后发现，高血压组、糖尿病组疾病者尿微量白蛋白指数和阳性率均比对照组要高，组间数据有统计学意义（P<0.05）；而对比高血压组和糖尿病组患者尿微量白蛋白指数和阳性率，也存在显著性差异，有统计学意义（P<0.05）。结论：临床检测尿微量白蛋白，可有效判定高血压和糖尿病疾病者肾功能状况，临床应用价值较高。 【关键词】诊断；尿微量白蛋白；检验；高血压；糖尿病 【中图分类号】R587.1;R446.12 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）35-0139-02 高血压和糖尿病疾病者均会对其肾脏功能造成严重性损伤，此类状况下，患者尿液内蛋白指数会比正常人群要高[1-2]，所以，测定尿微量白蛋白指数对确诊糖尿病及高血压疾病者均有较大意义。此研究将三组研讨对象纳入到讨论中，其目的为研讨尿微量白蛋白临床检验的意义及诊断价值。具体报告如下。 1.资料及方法 1.1 一般资料 采用随机抽签方式，从我院2014年5月至2016年7月期间收治的糖尿病和高血压患者中，各抽取40例纳入到讨论中（40例糖尿病患者、40例高血压病患者），另外选取同时期来我院体检健康的40例人员纳入到对照组中。高血压组内21例男性，19例女性，年龄为（43.3±7.2）岁；糖尿病组内22例男性，18例女性，年龄为（43.6±7.1）岁；对照组内20例男性，20例女性，年龄为（43.9±7.1）岁。三组研讨对象一般资料（年龄、性别构成等）无明显差异（P>0.05），具有可比性。 1.2 方法 此研究中使用特定尿微量白蛋白测定试剂和蛋白仪检测其具体指标，各工作人员需采集研讨对象10毫升尿液为样本，测定中，各环节均需严格依据试剂和仪器的说明书落实，因检测尿微量白蛋白存在相应难度，若不依据相应规定细节进行操作，则可能造成结果误差，或得不到检测结果。 1.3 指标判定 整个研讨过程中，需记录三组研讨对象尿微量白蛋白指数测定结果，计算阳性率，对比讨论数据。 1.4 统计学方法 用SPSS 13.0软件分析所得数据，计数资料（χ2）、计量资料（t）分别采用（n，%）、（x-±s）来表示，差异有统计学意义 （P<0.05）。 2.结果 经检测后发现，高血压组、糖尿病组疾病者尿微量白蛋白指数和阳性率均比对照组要高，组间数据有统计学意义（P<0.05）；而对比高血压组和糖尿病组患者尿微量白蛋白指数和阳性率，也存在显著性差异，有统计学意义（P<0.05）。详见表1。 表1 对比三组研讨对象尿微量白蛋白测定结果（x-±s） 3.讨论 近年来，糖尿病疾病者不断上升，各类慢性并发症也有逐步提高趋势，特别对肾脏损伤有加大作用，确诊肾脏早期损伤，对肾脏病理学检查存在有利作用，此检查为有创性。正常人群尿液内存在少量白蛋白，若损伤肾脏，则会加大尿微量白蛋白，因选择性丢失肾小球滤过膜负电荷[3-4]。损伤肾脏肾小球后，改变血流动力学，升高肾小球毛细血管血压，进而让血液内葡萄糖和蛋白接触后，非酶糖酰化速率有所增加，进而让其基底膜屏障得到改善。糖尿病肾病早期具有一定隐匿性，若不及时给予相应治疗，肾损伤存在可逆性。所以，测定尿微量白蛋白指数诊断价值较大。 高血压持续下去会对人体靶器官造成影响，尤其是肾脏。高血压疾病诱发MAU上升的一个主要因素则为高血压会诱发小动脉疾病病变，包含肾血管，让肾脏血流动力学出现变化，肾小球高压毛细血管出现硬化，损害滤过膜，增强通透性，加大排除尿微量白蛋白。 同时，尿微量白蛋白指数也属于血管损伤、心脑等器官损伤的一个重要性指标，对形成动脉硬化有促进作用，可列为早期诊断动脉硬化的指标之一[5]。可能因肾小球基底膜部位聚集非酶糖化蛋白质，进而增强肾小球滤过屏障通透性，最终在尿液内发生微量白蛋白。 随着社会经济状况不断发展，人们生活水平有所提升，饮食结构和日常生活均有较大改变，且人口老龄化趋势不断加剧，造成我国高血压和糖尿病疾病发病也呈逐年攀升状态。高血压和糖尿病疾病者会严重性损伤患者肾功能，特别是老年疾病者，此人群身体各项器官和功能均有所降低，糖尿病和高血压疾病者会持续加大老年疾病者肾功能负担，导致肾脏功能异常或发生衰竭。医学研究证实，此类疾病者一般状况下，尿微量白蛋白指数比健康人群要高，所以，临床上检验此项指标对高血压或糖尿病疾病者肾功能损伤检验上存在重要性作用。尿微量白蛋白检测结果对协助各医护工作人员及时针对性制定相应治疗计划，进而让患者肾功能损伤状况得到缓解。人体血液内蛋白质含量最高的一种则为白蛋白，和肾小球基底膜孔径直径对比，前者半径要大，所以，人体肾脏作用健康状况下，白蛋白不会穿透肾小球基底膜孔径屏障。但患者肾功能户可因患高血压或糖尿病疾病后发生损伤，会逐渐扩大体内肾小球基底膜孔径，让白蛋白存在进而到肾脏位置的可能性，增高尿微量白蛋白指数。高血压和糖尿病疾病发病早期无显著性症状，但此并不表明各指数均处于正常，而病变逐步处于
尿微量白蛋白 微量白蛋白尿：指在尿中出现微量白蛋白，定义是24小时尿白蛋白排泄率在30-300mg；微量白蛋白尿反映肾脏异常渗漏蛋白质。 检测方法：临床上主要使用免疫透视比浊法尿微量白蛋白进行检测。除此之外，放射免疫法、酶联免疫法和化学发光等方法。 免疫透视比浊法：抗原抗体结合后，形成免疫复合物，在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时，可被免疫复合物吸收。免疫复合物量越多，光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。利用比浊计测定光密度值，复合物的含量与光密度值成正比，同样当抗体量一定时，光密度值也与抗原含量成正比。本法较单向琼脂扩散试验和火箭电泳等一般免疫化学定量方法敏感、快速简便，但要求免疫复合物的数量和分子量达到一定高度，否则就难以测出。该方法注意事项：1、抗原或抗体量大大过剩，可出现可溶性复合物，造成误差。2、应维持反应管中抗体蛋白始终过剩。3、易受到脂血的影响。 意义：正常情况下，由于肾小球滤过膜电荷选择性屏障的静电同性排斥作用，MAU大部分不能通过滤过膜，而各种炎症、代谢异常和免疫损伤均可导致滤过膜上负电荷减少，静电排斥力下降，造成MAu从尿中漏出增多；尿微量白蛋白是早期发现肾病最敏感、最可靠的诊断指标，判断肾小球受损程度的重要蛋白，是糖尿病肾病最早期的生化表现，也是肾病进展和发生心血管事件危险性的一个重要标记。 24小时尿蛋白 24小时尿蛋白：包括尿液中出现的所有蛋白（分子量最小的白蛋白，分子量较中-大的免疫球蛋白、转铁蛋白、β2一微球蛋白等）； 检测方法：24小时尿蛋白定量检测前必须排除泌尿系感染、运动等影响，要先用量杯量总尿量，然后搅匀，取出一小杯测定每100毫升的蛋白量，再根据实际尿量进行计算，可计出24小时的蛋白量，检测方法为双缩脲比色法、比浊法和染料结合法；意义：24小时尿蛋白可以反映各期肾炎、肾病等早期病变、治疗效果及转归化时； 两者区别 微量白蛋白主要是指白蛋白，主要早期反映肾小球滤膜的损害； 尿蛋白是包括白蛋白，还包括分子量较中-大的免疫球蛋白、转铁蛋白、β2一微球蛋白等，尿蛋白异常反映可能为肾小球损害，也可能为肾小管损害。
人尿微量白蛋白(m-Alb)检测试剂盒(透射比浊法) 简介： Viberti 等人发现尿中白蛋白排泄的增加率，可以提示胰岛素依赖性糖尿病肾病发作，但此时尿中总蛋白排泄正常，尿常规蛋白定性实验为阴性，而尿白蛋白排泄增加，称之为微量白蛋白(microablumin ，m-Alb)尿。 Leagene 人尿微量白蛋白(m-Alb)检测试剂盒(透射比浊法)其检测原理是尿液中的白蛋白与抗白蛋白特异抗体在液相中反应生成m-Alb 抗原抗体复合物，使反应液呈一定浊度。本试剂盒专门用于人尿液中的微量白蛋白含量测定。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备试剂：临用前，各种试剂均应平衡至室温。 2、 绘制标准曲线：取白蛋白标准(198mg/L)，依次稀释后供标准曲线用，其浓度分别为 198mg/L 、99.0mg/L 、49.5mg/L 、19.8mg/L 、9.9mg/L 。 3、 m-Alb 测定操作：分光光度计手工或半自动生化分析仪检测，按下表依次加入试剂： 4、 充分混匀, 盖上塑料膜，37℃孵育。 5、 再次混匀，分光光度计测定340nm 波长处的吸光度。以空白管调零，读取标准管和各 待测管的最终吸光度为A 2。 6、 绘制标准曲线：以上述5种浓度的标准液，分别制作5个标准管，同上操作，测定吸 编号 名称 TC068950T Storage 试剂(A): m-Alb buffer 50ml RT 试剂(B): 白蛋白标准(198mg/L) 0.2ml -20℃ 试剂(C): m-Alb 抗体工作液 0.5ml -20℃ 试剂(D): m-Alb 生理盐水 30ml RT 使用说明书 1份 标准管 待测管 m-Alb buffer(ml) 1.0 1.0 白蛋白标准(μl) 100 待测样本(μl) 100 混匀，m-Alb 生理盐水调零，读取起始吸光度A 1，然后加入： m-Alb 抗体工作液(μl) 100 100
尿微量白蛋白 微量白蛋白尿是指在尿中出现微量白蛋白。白蛋白是一种血液中的正常蛋白质，但在生理条件下尿液中仅出现极少量白蛋白。微量白蛋白尿反映肾脏异常渗漏蛋白质。英文缩写:mAlb 参考值:0﹒49～2﹒05mg/mmol·Cr或4﹒28－18﹒14mg/g·Cr。当患者有高血压或糖尿病或同时患有这两种疾病(经常同时发生)时，肾脏血管会发生病变改变了肾脏滤过蛋白质(尤其是白蛋白)的功能，这使得蛋白质渗漏到尿中。微量白蛋白尿是糖尿病影响肾脏的早期征象，为糖尿病肾病。 尿微量白蛋白，是糖尿病肾病、高血压肾病等的早期肾脏受损的表征。无论哪种疾病引起的尿微量白蛋白都是因起始原因不同造成的肾脏固有细胞的损伤，使肾脏固有细胞的结构发生改变，功能随结构的变化而变化，在尿液中的体现。 对于微量白蛋白尿的治疗，目前西医应用的很广泛是激素进行抗炎，减轻肾脏固有细胞的渐进性损伤。激素治疗微量白蛋白尿，短时期，会产生较好的效果。但是，由于已受损的肾脏固有细胞没有修复。所以，通常会在遇到感冒、感染的影响时，导致病情反复并进行性加重。 微量白蛋白尿也是整个血管系统改变的征象，并可认为是动脉病变的“窗口”，因为它是肾脏和心血管系统改变的早期指征。临床中，通常应用尿微量蛋白指标来监测肾病的发生。尿微量蛋白的检测是早期发现肾病最敏感、最可靠的诊断指标。通过尿微量白蛋白的数值，结合发病情况、症状以及病史述就可以较为准确的诊断病情。判断病
情进入了纤维化那个阶段。所以，定期检测尿微量白蛋白(U-MA)，普通人应当每年一次，而已增高的患者应每3个月测试一次。这样，对于肾病的预防及早期治疗都起的了积极作用。 尿微量白蛋白正常值 尿微量白蛋白是评估肾脏受损程度：当发现尿微量白蛋白在 20mg/L-200mg/L围，尿常规尿蛋白的显示为阴性(-)或(+-)，就属于微量白蛋白尿，这个时候说明肾脏已经损伤，如果患者能够经过规的修复肾单位，逆转纤维化治疗，尚可彻底修复肾小球，消除蛋白尿。而当尿中微量白蛋白超过200mg/L时，尿常规测试尿蛋白阳性(+)~(+++)，就应该警惕了，此时证明机体已有大量白蛋白漏出，可能出现低蛋白血症，肾病发展离不可逆期只有一步之遥，如果不及时进行医治，就会进入尿毒症期。 了解尿微量白蛋白尿检查 预防糖尿病肾病，应该更多的了解尿微量白蛋白这一检查，因为尿白蛋白检查是及时发现糖尿病肾病的首选指标，早期的糖尿病肾病患者尿中只有微量白蛋白，因此这一检查又被称为“尿微量白蛋白检查”。1型糖尿病患者在起病1～5年后就要进行尿微量白蛋白的筛查；2型糖尿病患者在确诊糖尿病后，需要马上进行这项筛查，结果正常者仍然需要每年检查。“尿微量白蛋白”这一检查，留取尿液有四种方式！①取任意时刻的尿液，测定尿白蛋白浓度、尿白蛋白/肌酐；②留取24小时尿液，测定尿白蛋白总量；③留取一段时间尿
如何正确认识蛋白尿 Document number：NOCG-YUNOO-BUYTT-UU986-1986UT
对尿蛋白的认识 尿蛋白是尿液中的正常成分，正常人每天尿中排出的蛋白质一般为40-80毫克/天，上限为150毫克/天，在常规检测中显示的是阴性，在正常含量范围内的尿中的蛋白质即为尿蛋白。当尿中蛋白增加，尿常规检查可以测出即为蛋白尿。蛋白尿是肾脏病的常见表现，全身性疾病亦可出现蛋白尿。 病因 可以导致蛋白尿的原因很多，它们包括：功能性蛋白尿、体位性蛋白尿或病理性蛋白尿。常见有：剧烈运动后，发热的极期，进食高蛋白饮食；胡桃夹现象；各种肾脏病和肾血管病等。 临床表现 不同病因引起的腰疼临床表现也不相同，例如： 1.功能性蛋白尿 功能性蛋白尿是一种轻度（24小时尿蛋白定量一般不超过～1克）、暂时性蛋白尿，原因去除后蛋白尿迅速消失。常发生于青壮年，可见于精神紧张、严重受寒或受热、长途行军、强体力劳动、充血性心衰、进食高蛋白饮食后。 2.体位性蛋白尿 清晨尿液无尿蛋白，起床活动后逐渐出现蛋白尿，长时间站立、行走或加强脊柱前凸姿势时，尿蛋白含量增多，平卧休息1小时后尿蛋白含量减少或消失，多发生于瘦长体型的青年或成人。反复体位性蛋白尿，需注意除外肾病，如胡桃夹现象（又叫左肾静脉压迫综合征，是因主动脉和肠系膜上动脉挤压左肾静脉所致）。 3.病理性蛋白尿 蛋白尿持续存在，尿中蛋白含量较多，尿常规检查常合并有血尿、白细胞尿和管型尿。并可伴有其他肾脏病表现，如高血压、水肿等。病理性蛋白尿主要见于各种肾小球、肾小管间质疾病、遗传性肾病、肾血管疾病和其他肾脏病。常见的如： （1）原发性肾小球疾病①肾炎可为隐匿性、急性、急进性或慢性。常合并血尿、高血压和水肿等。②肾病综合征24小时尿蛋白定量大于或等于克，同时伴有血白蛋白减少，水肿、高血脂。③肾功能不全分为急性和慢性肾功能不全。蛋白尿为肾脏损害的表现。 （2）继发性肾小球疾病①狼疮性肾炎是系统性红斑狼疮累及肾脏的表现。育龄期女性多见。依据肾脏受累严重程度的不同，尿蛋白量可以表现为少量至大量。②紫癜性肾炎是过敏性紫癜肾脏受累的表现。主要表现为血尿、蛋白尿，儿童多见，成年人亦可发生。蛋白尿多数发生在紫癜出现后2～4周。③糖尿病肾病是糖尿病常见的并发症，早期肾脏受累，但是尿常规检查尿蛋白可为阴性，后逐渐出现微量白蛋白尿，再发展至大量蛋白尿，乃至终末期肾病，即肾功能衰竭需要透析等治疗。④痛风性肾病尿检异常出现较晚且轻微，仅见轻度蛋白尿及少量红细胞。晚期可进展至慢性肾衰竭。⑤高血压肾病原发性高血压病发生5～10年后常出现肾脏等损害。良性高血压导致的蛋白尿一般为轻至中度的尿蛋白（24小时尿蛋白定量一般不超过～2克），很少出现大量蛋白尿。有些合并镜下血尿，常有高血压左心室肥厚、脑动脉和视网膜动脉硬化等表现。另外一种恶性高血压导致的蛋白尿常为突发性，24小时尿蛋白定量可由少至大量，多数伴有血尿和白细胞尿，肾功能多急剧恶化。 （3）肾小管间质疾病如肾盂肾炎、间质性肾炎等，尿蛋白多为+至++，24小时尿蛋白定量多＜2克。 （4）遗传性肾病如Alport综合征、Fabry病、薄基膜肾病、先天性肾病综合征等，由于基因异常，导致肾脏结构缺陷，导致不同程度的蛋白尿。
尿微量白蛋白MALB检测 1检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2 实验原理 将未稀释的样品加入含有抗人血清白蛋白特异性抗体的缓冲液变浊溶液吸光度值（340nm）与尿液样品中白蛋白浓度成正相关。 3 标本： 3.1 病人准备：留取24h尿液标本（加苯防腐）混匀后记录尿液总量取少量尿液离心；清晨中段尿。 3.2 类型：尿液 3.3 标本存放尿液的稳定性：20～25℃保存可稳定1天，2～8℃保存至少可稳定2天； -20℃保存可稳定6个。 3.4 标本运输常温条件下运输。 3.5 标本拒收标准细菌污染的标本。 4 实验材料
4.1 试剂：上海倍特生物科技有限公司Malb试剂盒 4.1.1 试剂组成 R1:TRIS /HCL缓冲液：20 mmol/l，pH 7.4；氯化钠：150 mmol/L；聚乙二醇6% R2:抗人白蛋白TRIS /HCL缓冲液：20 mmol/l，pH 7.4氯化钠：150 mmol/l 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8°C下保存期限：见试剂标签上的有效期。机上稳定期：90天。 4.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。 4.2 校准品：使用试剂盒里校准品自动分析仪进行校准。 5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪 6 操作步骤
6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。 6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。 6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。 6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。 7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。 8 计算方法 以MALB校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mg/L报告。
蛋白尿的鉴别诊断 *导读：剧烈运动出现微量蛋白尿发热出现蛋白尿心力衰竭肾淤血引起蛋白尿药物中毒引起蛋白尿因有明确的病史和相应的体格检查一般诊断不困难…… (一)急性肾小球肾炎 链球菌感染后通过免疫复合物引起急性肾小球肾炎潜伏期1~2周平均10 d发病上呼吸道感染后潜伏期6~12d皮肤感染后潜伏期14~24d,也急性感染症状减轻或消失后出现水肿高血压血尿蛋白尿和管型尿24h尿蛋白定量 l~3 g血总补体和补体C3降低肾影像学检查肾脏增大水肿从眼睑开始以后从颜面部发展至全身病程短绝大多数可痊愈(90%左右)区别于慢性肾小球肾炎 (二)慢性肾小球肾炎 临床分普通型高血压型肾病型慢性肾炎急性发作型其临床表现与急性肾炎相似不同点是链球菌感染后潜伏期短一般一周之内最短5 d水肿从下肢开始从下向上蔓延病程长易复发晚期常常有肾功能损害以高血压型出现最早眼底检查动脉变细反光增强眼底出血渗出等与急性肾炎眼底小动脉痉挛不同影像学检查肾脏缩小 (三)肾盂肾炎 是感染疾患全身感染中毒症状腰痛膀腕刺激症状实验室检查为脓尿菌尿是其特点24h尿蛋白定量一般在1g之内很少超过2g一
般无水肿血压不高只有慢性肾孟肾炎晚期肾功能损害时才表现水肿高血压 (四)系统性红斑狼疮 属于自身免疫性疾病脱发面部蝶形红斑口腔溃疡游走性关节炎光过敏雷诺现象多脏器损害尤以心J肾产经系统最多见其中肾受损占第一位其蛋白尿一般较多部分患者以肾病综合征形式出现实验室检查：自身抗体阳性总补体和补体C3降低约l/3案例血中可找到狼疮细胞皮肤活检真皮变性萎缩 (五)多发性骨髓瘤 老年男性好发贫血重且与肾脏受损不相称病情进展快易损害肾功能骨质破坏骨骼疼痛病理性骨折肝脾肿大骨髓检查大量骨髓瘤细胞存在可确诊其尿蛋白是溢出性蛋白尿本一周氏尿蛋白阳性 (六)其他 剧烈运动出现微量蛋白尿发热出现蛋白尿心力衰竭肾淤血引起蛋白尿药物中毒引起蛋白尿因有明确的病史和相应的体格检查一般诊断不困难
医疗器械产品技术要求编号： 尿微量白蛋白（mALB）测定试剂盒（化学发光-免疫分析法） 2性能指标 2.1试剂盒 2.1.1外观和性状 （1）试剂盒各个组分应齐全、完整、液体无渗漏。 （2）中文包装标签应清晰，准确、牢固。 （3）试剂R1 为澄清透明液体，无沉淀、颗粒或絮状物。 （4）试剂R2 为略带乳白色均一性液体，无明显沉淀、颗粒或絮状物。 （5）试剂R3 为澄清透明液体，无沉淀、颗粒或絮状物。 2.1.2装量 液体装量应不少于标示值。 2.1.3准确度 相对偏差应不超过±10 .0%。 2.1.4空白限 应不大于 2.0mg/L。 2.1.5线性 （a）在 4.0mg/L～200.0mg/L 范围内，其相关系数r 应不小于0.9900。 （b）[4.0，20.0] mg/L 范围内，线性绝对偏差应不超过±2.0 mg/L；在（20.0，200.0] mg/L 范围内，线性相对偏差应不超过±10 %。 2.1.6批内精密度 批内变异系数（CV）应≤10.0%。
2.1.7批间精密度 批间变异系数（CV）应≤10.0%。 2.2校准品 2.2.1外观和性状 澄清透明液体，不得有沉淀、颗粒或絮状物。
2.2.2装量 液体装量应不小于标示值。 2.2.3校准品测量准确度（S0 除外） 用工作校准品校准测量系统后，以试剂盒配套的校准品作为样本进行检测，其测定结果与标示值的相对偏差应在±10.0%范围内。 2.2.4校准品均一性（S0 除外） 瓶内CV 应不大于10.0%； 瓶间CV 应不大于10.0%。 2.3质控品 2.3.1外观和性状 澄清透明液体，不得有沉淀、颗粒或絮状物。 2.3.2装量 液体装量应不小于标示值。 2.3.3质控品测定值 用试剂盒配套的校准品校准测量系统后，以试剂盒配套的质控品作为样本进行检测，其测定结果应在标示范围内。 2.3.4质控品均一性 瓶内CV 应不大于10.0%； 瓶间CV 应不大于10.0%。
第一部分尿微量白蛋白（U-Albumin）的临床意义 1982年Viberti等发现了糖尿病患者尿中总蛋白在正常范围，而尿白蛋白排泄增加的现象，首先提出了尿微量白蛋白的观点，并指出了这种蛋白的出现是肾病发生的早期预兆。 随着检测技术的进步，目前主要用于对糖尿病、高血压患者早期检测发现微量蛋白尿，以便及时采取保护肾功能的措施，如限制蛋白的摄入量、禁烟、及时控制血糖和血压。 因此及时检测尿微量白蛋白，对控制和防止早期肾病的发生极为重要。 1、微量白蛋白尿的基本概念 多种疾病可引起尿白蛋白排泄率持续增加，尿中用常规方法不能检测到，叫微量白蛋白。其含量在20－200mg/L，此时如能及时治疗，肾脏损害处在尚可逆转的时期，这种常并发于糖尿病，高血压病人中的尿蛋白，称微量白蛋白。 2、尿正常代谢及尿蛋白的形成 尿是在肾脏内形成的。体内血流经肾小球毛细管时，其中的细胞、大分子蛋白质和脂类等胶体被截留，其余成份则经半透膜滤过进入肾小球中此称为原尿。原尿通过肾小管时，绝大部分水分及电介质和葡萄糖等物质又被吸收回血，同时肾小管也分泌一些物质加入尿中，最后生成终尿。经输尿管、膀胱、尿道排出体外。 病理情况下，由于肾小球内压力增高滤过增加或是基底膜改变，导致高滤过率而出现蛋白尿。 3、微量白蛋白正常值： 健康成年人尿微量白蛋白参考区间 24h尿：＜30mg/L（24h最高量） (摘自卫生部医政司“全国临床检验操作规程”2006,第三版p356) 与定性法比较有下列优点： *敏感性高，可测出定性法阴性的标本 *精密度CV5－8％ *定量结果测定范围广5－200mg/L *标本量少，20ul尿液 *特异性强能抗尿中多种物质的干扰 *测量时间快，3分钟报告结果
尿微量白蛋白（MAU）测定试剂盒（胶体金免疫层析法） 适用范围：于体外定量测定人尿液中的尿微量白蛋白(MAU)含量。 1.1包装规格 20人份/盒 1.2 主要组成成分 本试剂盒由MAU检测卡、干燥剂和滴管组成。MAU检测卡由试纸条外壳与试纸条构成。试纸条由样品垫、胶体金垫（喷有由胶体金标记的MAU单克隆抗体）、层析膜（T线包被有MAU单克隆抗体，C线包被有羊抗鼠IgG抗体）、吸水纸、衬垫构成。检测卡为20人份/盒，干燥剂为1个/袋，滴管为20个/盒。 2.1 物理性状 2.1.1 外观 试剂盒各组分齐全、完整；包装袋应密封性好无破损；标签清晰；材料附着牢固，条宽应适应于卡壳且装配紧密。 2.1.2 膜条宽度 膜条宽度应不低于4.0mm。 2.1.3 液体移行速度 液体移行速度应不低于10mm/min。 2.2 空白检测限 应小于5.0mg/L。 2.3 重复性 用10mg/L尿微量白蛋白（MAU）参考品和100mg/L尿微量白蛋白（MAU）参考品各重复检测10次，其变异系数（CV）应不大于15%。 2.4 准确度 将200.0mg/L尿微量白蛋白(MAU)参考品加入到尿微量白蛋白（MAU）含量5.0mg/L 正常人尿液参考品中，按照体积比1:9混合，对混合后样本进行检测，回收率应在85%～115%范围内。 2.5 线性 线性范围为[5.0,200]mg/L，试剂盒的相关系数r应≥0.99。 2.6 批间差
用3个批号试剂盒分别对10.0mg/L尿微量白蛋白（MAU）参考品和100.0mg/L 尿微量白蛋白（MAU）参考品各重复检测10次，则3个批号试剂盒之间的批间相对偏差（R）应不大于15%。 2.7 稳定性 效期稳定性：2～30℃条件下放置有效期12个月后一个月内，检测物理性状、空白检测限、重复性、准确度、线性应符合2.1～2.6项的要求。
大鼠尿微量白蛋白（ALB)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，细胞上清及相关液体样本中尿微量白蛋白（ALB)的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠尿微量白蛋白（ALB)水平。用纯化的大鼠尿微量白蛋白（ALB)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入尿微量白蛋白（ALB)，再与HRP标记的尿微量白蛋白（ALB)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的尿微量白蛋白（ALB)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠尿微量白蛋白（ALB)浓度。 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备 用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上 进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤： 1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标 准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为180μg/ml，120μg/ml，60μg/ml，30μg/ml，15μg/ml）。 2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样 品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此 重复5次，拍干。 6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7.温育：操作同3。 8.洗涤：操作同5。 9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15分钟. 10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。 注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
尿微量白蛋白测定试剂盒（免疫比浊法） 适用范围：本产品适用于体外定量测定人尿液中白蛋白（mALB）的含量。 1.1 产品规格 1.2 主要组成成分 注：校准品具有批间、赋值特异性，具体值详见靶值单。 2.1外观 2.1.1试剂盒标签标识清晰，外包装完整无破损； 2.1.2试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物； 2.1.3试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物； 2.1.4校准品：无色或浅黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2净含量 净含量不低于标示值。 2.3空白吸光度 测定待检试剂在主波长340nm、副波长700nm、37℃条件下：A≤0.2。 2.4线性范围 (5，280)mg/L范围内，相关系数r≥0.990； (5,30]mg/L范围内，绝对偏差不超过±3mg/L； (30,280)mg/L范围内，相对偏差不超过±10.0%。 2.5分析灵敏度 在说明书规定参数设定条件下，测定浓度50mg/L的样本，△A≥0.05。 2.6 精密度 2.6.1批内重复性 CV≤10.0%。 2.6.2 批间差 相对极差R≤10.0%。 2.7 准确度 与已上市产品比对：(5，280)mg/L范围内，相关系数r≥0.990；(5,30]mg/L 范围内，绝对偏差不超过±3mg/L；(30,280)mg/L范围内，相对偏差不超过±10.0%。 2.8 校准品 2.8.1 均一性：CV≤5.0%； 2.8.2 开瓶稳定性：开瓶后3天，相对偏差不超过±10.0%。 2.9 稳定性 未开封试剂2℃～8℃储存,可稳定12个月。取到效期后2个月内产品进行检测, 检测结果应满足2.3、2.4、2.5、2.6.1和2.7的要求。 2.10溯源性 依据GB/T 21415—2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，校准品溯源至工作校准品，工作校准品经与Audit Diagnostics尿微量白蛋白测定试剂盒比对测量赋值。