微生物检验技术 B卷参考答案及评分标准
动植物检疫专业2009级 2011-2012 学年第一学期
一、填空题(共20分，每空1分)。
1. 分离纯化与接种技术微生物计数法
2. 红无
3. 大肠菌群致病菌
4. 三氯化铁绿色
5. 铜绿假单胞菌大肠埃希菌
6. 靛基质尿素酶
7. 链激酶血凝块溶解
8．血液、血清、腹水乙型（β -）溶血链球菌
9. 副溶血弧菌绿
10. 卵黄琼脂平板S.S琼脂平板
二、判断题（共 10 分，每小题 1 分,用“√”表示对，“×”表示错)。
1.√
2. ×
3. √
4. √
5. ×
6. ×
7. √
8. √
9. ×10. √
三、名词解释题（共20分，每小题2分)。
1、兰氏分群：兰氏（Lancefield)用温热的稀盐酸浸出C抗原，与特异性血清作沉淀反应，将链球菌分为20个血清群（A-V，缺I和J）。
2、暴烈发酵：产气荚膜梭菌牛乳培养基培养时能分解乳糖产酸，使酪蛋白凝固，同时生成大量气体，将凝固的酪蛋白冲成海棉状碎块。管内气体常将覆盖在液体上的凡士林层向上推挤，这种现象称为“暴烈发酵”。
3、增菌培养基：能够给微生物提供较适当的生长环境从而使微生物大量繁殖的培养基。
4、粪大肠菌群：系一群需氧及兼性厌氧，在44.5℃培养24h内能发酵乳糖产酸产气和分解色氨酸产生靛基质的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
5、肠杆菌科细菌；是一大群生物学性状近似的革兰氏阴性杆菌。多数是肠道的正常菌群，少数为病原菌。肠杆菌科细菌种类繁多，如埃希菌属、沙门菌属、克雷伯菌属、变形杆菌属等。
6、类酵母型菌落：外观似酵母菌落，但可见伸入培养基中的假菌丝，它是由伸长的芽生孢子形成，如白色念珠菌。（由于部分单细胞真菌出芽繁殖后，芽管延长不与母细胞脱离，而形成假菌丝，此假菌丝伸入培养基，形成表面似酵母型菌落、培养基内有假菌丝的类酵母型菌落。）
7、cytopathic effect（CPE）：是指细胞病变效应，病毒在细胞内增殖的结果，常常导致细胞损伤，甚至将其杀死，因而在低倍显微镜下可以看到不同现象，常见的为细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落等。
8、病毒滴度：样本中病毒的浓度，通过用系列稀释的病毒接种细胞培养、鸡胚或实验动物,检测病毒增殖的情况而确定。可用PFU／mL表示。
9、血凝试验：许多动物病毒,如正黏病毒科、副黏病毒科、腺病毒科的成员,能够凝集某些动物(如鸡、小鼠、豚鼠、人)的红细胞。这些病毒含有可与红细胞结合的蛋白质,引起红细胞凝集。利用这种特性,可做血凝试验来检测这些病毒的存在。
10、中和试验: 是病毒在活体内或细胞培养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验。
四、简答题(共30分，每小题5分)。
1、简述真菌毒素的产生条件及检验方法。
参考答案：
真菌毒素的产生条件：①首先取决于菌株，其次依赖于外界环境，如基质、温度和湿度。②基质对霉菌的生长和产毒有一定的影响。一般而言，真菌产毒菌株主要在食物、粮食、饲草等植物上生长产毒，在乳、蛋等动物源基质上产毒能力较低。③霉菌的生长繁殖与温度有密切关系，大多数最适温度为25~30℃，低于l0℃或高于40℃生长减弱，产毒素能力也会受到影响。④基质的水分、空气的湿度与真菌的生长繁殖和产毒素能力密切相关，基质含水量在17%~18%时为真菌产毒素的最适条件。(3分)
检测真菌毒素有许多方法：如检测黄曲霉毒素有生物学方法和ELISA法等。生物学方法主要用于检测真菌毒素的毒性，如用鸡胚、小白鼠做毒性试验，观察动物中毒死亡或出现肿瘤。ELISA法操作简便，并具有安全快速高效、费用低，适用于大批量标本的筛选。(2分)
2、简述食品微生物检验的一般流程。
参考答案：
（1）样品的采集与送检(1分)
采集的样品必须具有代表性和均匀性，能全面反映被检样品的卫生状况。需要填写采
样单。
样品的送检要求：要快速运送：不要超过3小时；易变质的样品要冷藏，若路途遥远，无需冷冻样品可保持在1~5℃低温下运送；需保持冷冻状态的样品，可保存在泡沫塑料隔热箱，维持0℃；送检过程，要注意防污染、防散漏、防变质；要填写送检申请单，以供检验人员参考。
（2）检验前的准备(1分)
①准备好所需的各种仪器。
②按技术要求将各种玻璃仪器进行清洗、烘干、包扎、灭菌，冷却后送无菌室备用。
③准备好所用的各种试剂，制备好普通营养琼脂或其他选择性培养基。
④做好无菌室或超净工作台的灭菌工作，提前1h灭菌30~60min.
⑤工作衣、鞋、帽、等灭菌后备用。
⑥工作人员进入无菌室后，实验没有完成之前不得随便出入无菌室。
（3）样品的预处理(1分)
不同样品要采用不同的处理方法，均需要在无菌条件下进行操作。
（4）常规微生物(1分)
测定细菌的菌落总数和大肠菌群数。
（5）致病微生物的检测(1分)
致病菌既能够引起人们发病的细菌。对不同的食品和不同的场合，应该选择一定的参考菌群进行检验。
（6）提交检验结果的报告
3、细胞培养有哪些类型和方法，并比较它们的优缺点？
参考答案：
(1) 原代细胞培养(1分)
动物组织经胰蛋白酶消化，使细胞分散而得，单个细胞，再生长于培养器皿中。各种组织都能制备，最常用者为肾和睾丸等，胚胎和幼畜的细胞较易生长。
优点：病毒对天然宿主的细胞最易感；适宜于病毒的分离。
缺点是有时携带潜伏病毒。
(2) 二倍体细胞株培养(2分)
原代细胞长成单层后用胰蛋白酶或EDTA钠将细胞从玻面消化下来，使细胞分散成单个细胞。然后加入新营养液，再分装于玻瓶中长成单层。如此可以连续传代，细胞的染色体数与原组织中一样，仍为二倍体，因此称为二倍体细胞。
优点：细胞碎片较少，潜伏病毒容易发现，对病毒的易感性与原代细胞差别不大。二倍体细胞可以大量培养，将多余细胞在液氮罐中贮存，随时取用，甚为方便。
(3) 传代细胞系培养(2分)
与上述两类细胞不同，这类细胞可在体外无限制分裂下去，有些从肿瘤组织而来，有些从细胞株转化而来。它们的染色体数目常不正常，称为异倍体。
优点：容易培养，生长迅速，传代方便，随时可以获得。
缺点：对病毒分离不够敏感，也不能用此直接制备疫苗，因为接种到动物体内有引起肿瘤的潜在危险。在实验室传代日久,有的可能污染。
4、简述病毒感染单位的测定方法。
参考答案：
常用于病毒感染单位测定的技术有空斑试验、终点稀释法、荧光-斑点试验、转化试验等,最常用的是前两种。（1分）
空斑试验是一种检查和准确测定病毒滴度的方法。将稀释的病毒悬液加入单层细胞培养瓶中。病毒吸附后，再覆盖一层融化的半固体营养琼脂，使病毒在单层细胞培养中有限扩散。结果是每一个有感染性的病毒在单层细胞中可产生一个局限性的感染灶。用活性染料(如中性红) 染色，则活细胞着色，受病毒感染而破坏的细胞不着色，形成肉眼可见的空斑(plaque)。每个蚀斑是由一个感染性病毒颗粒形成的，称作空斑形成单位(plaque forming unit, PFU)。根据样本的稀释度和空斑数,计算每毫升空斑形成单位(PFU),即可确定病毒的滴度。病毒悬液中的感染性病毒量的滴度可用PFU／ml表示。（2分）
终点稀释法用于测定几乎所有种类的病毒滴度,包括某些不能形成空斑的病毒,并可用以确定病毒对动物的毒力或毒价。将病毒做系列稀释,选择4~6个稀释度,接种一定数量的细胞、鸡胚或动物,每个稀释度做3~6个重复。使用细胞培养,可通过CPE来判定组织培养半数感染量(TCID50)。在鸡胚或动物,是以死亡或发病来测定。以感染发病作为指标时,可计箅半数感染量(ID50);以体温反应作为指标时,可计箅半数反应量(RD50) 。用鸡胚测定时,可计算鸡胚半数致死量(ELD50)或鸡胚半数感染量(EID50) （2分）
5、简述溶血试验的原理，写出其试验方法、溶血类型及现象。
参考答案：
1、原理（2分）
某些细菌在代谢过程中能产生溶血素，可使人或动物的红细胞发生溶解，不同的细菌有不同的溶血反应，借此可鉴别细菌。
2、试验方法（2分）
（1）平板法
将培养物接种于血平板培养基上，36±1 ℃培养24～48h，观察结果。
溶血试验的溶血类型及现象
α（甲型）溶血: 菌落周围出现较窄的半透明的草绿色溶血环。
β（乙型）溶血: 菌落周围出现较宽的透明溶血环。
γ（-丙型）溶血: 菌落周围无溶血环。
（2）试管法
将待检菌培养液与等量的2%羊血球混合，在36±1 ℃培养16～18h，观察结果。如溶血，培养液可出现透明状。
3、结果观察与记录（1分）
有溶血现象，为阳性，记+；无溶血现象，为阴性，记-
6、金黄色葡萄球菌有哪些培养特性和生化特性？
参考答案：
（1）普通培养基上生长良好，在麦康凯琼脂平板不生长。（1分）
（2）血平板上生长更佳，致病菌株β溶血。（1分）
（3）产生金黄色色素。（1分）
（4）高度耐盐：可在10~15%NaCl肉汤中生长。（1分）
（5）分解葡、乳、麦、蔗糖，产酸不产气，触酶阳性，致病菌株能分解甘露醇。（1分）
五、问答题(共20分，每小题10分)。
1、详细叙述TSI（Triple Sugar Iron）试验的方法、原理和现象，并分析大肠杆菌、沙门
氏菌、志贺氏菌在TSI琼脂培养基上应该产生何种现象？
参考答案：
1、三糖铁（TSI）试验原理（2分）
三糖铁（TSI）琼脂培养基含有乳糖、葡萄糖、蔗糖为可发酵糖类，其产酸时通过酚红指示剂测出，酸性呈黄色，碱性呈红色；硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢，与硫酸亚铁中的铁盐生成黑色硫化铁。
2、三糖铁试验的现象（2分）
如果细菌可利用乳糖和蔗糖发酵产酸或产酸产气，培养基全部变黄；如果只可以利用
葡萄糖，葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄，但因量少，生成的少量酸，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物，故使斜面最后为红色，底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，仍保持黄色；如果细菌又能分解含硫化合物，产生硫化氢，培养基底部变黑。
3、试验方法（2分）
称取本品 64.5g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,加热煮沸 1分钟,分装于 16mm× 150mm 试管,121℃高压灭菌 15 分钟制成斜面长 4-5cm,底部长2-3cm。以接种针挑取待试菌可疑菌落或纯培养物，穿刺接种并涂布于斜面，置36±1℃培养18~24h，观察结果。
4、志贺氏菌都能分解葡萄糖，产酸不产气，大多不发酵乳糖，不产生H2S，培养基斜面为红色，下部为黄色。大肠杆菌，能分解葡萄糖产酸产气，大多数能分解乳糖，不产生H2S，培养基全部变黄，底部被抬高。沙门氏菌，能分解葡萄糖，不发酵乳糖，大多数产生H2S，多数产气，培养基底部变黑。
（4分）
2、描述新生隐球菌的微生物学特性，检验过程采用哪些方法？
参考答案：
微生物学特性：在组织中呈圆形或卵圆形，直径一般在4～6μm，外周有宽厚荚膜，荚膜较菌大1～3倍，折光性强，一般染色法不易着色而难以发现而得名。常采用墨汁负染色法，在黑色景下可镜检到透亮菌体和宽厚荚膜。（3分）
检验方法：
(1) 标本直接镜检（1分）
用病人脑脊液作墨汁负染色检查是诊断隐球菌脑膜炎最简便、快速方法。
常规细胞染色可发现隐球菌，但易误诊和漏诊。如用PAS染色后新生隐球菌呈红色。
(2) 抗原检测（1分）
用乳胶凝集试验、ELISA、和单克隆抗体法等免疫学方法检测隐球菌荚膜多糖特异性抗原，已成为临床上的常规诊断方法。
(3) 核酸检测（1分）
可用痰液、支气管吸出物等标本核酸检测方法有DNA探针法、PCR探针法等，用于检测的探针、引物主要选自保守区的重复序列。可检出新生隐球菌，并可区别类型，是新生变种还是格特变种。非致病性隐球菌不被检出。
(4) 分离培养（1分）
将标本接种在沙氏培养基上，病原性隐球菌在25℃和37℃生长，而非病原性隐球菌在
37℃时不生长。培养2—5d后观察菌落形态特点，并取菌落作印度墨汁负染色镜检。
(５) 鉴定（3分）
1）酚氧化酶试验：接种L-多巴枸橼酸铁和咖啡酸培养基中，经2～5d培养，呈棕黑色菌落。
2）脲酶试验：能产生脲酶分解尿素琼脂培养基中的尿素形成NH4+和CO2，使pH升高，培养基可由黄色变粉红色，而白假丝酵母菌为阴性。
3）糖同化及发酵试验：能同化葡萄糖、半乳糖、蔗糖和肌醇，但不能发酵多糖类，不能同化硝酸盐。非致病性隐球菌不能同化肌醇。
3、如何进行病毒的鉴定，详述病毒鉴定的步骤与方法。
参考答案：
1、初步鉴定（4分）
(1)根据临床表现、流行病学特征与标本来源，初步判定属于哪一类病毒。
(2)根据生物学特性：①细胞病变效应；②血吸附和血凝作用；③干扰现象；
(3)病毒的理化特性测定：①代谢抑制法鉴定病毒核酸类型;②脂溶性试验;③耐酸性
试验;
包括病毒核酸型鉴定、耐酸性试验、脂溶剂敏感性试验、耐热性试验、胰蛋白酶敏感试验等。通常以细胞或鸡胚培养为观察体系,应设立已知病毒为对照。
鉴定病毒核酸型：①代谢抑制法，添加氟脱氧尿核苷(FUDR)或类似物于病毒培养物中,病毒复制被抑制者,即为DNA病毒,否则为RNA病毒,也可用DNA酶或RNA酶分别作用,以判定核酸的性质。绿豆芽酶可降解单股核酸,用它可进一步鉴定核酸是单股或双股。②可直接用纯化的病毒核酸通过电镜观察,对其进行鉴定。但技术要求较高。③近年来,PCR核酸测序技术的应用使得病毒核酸型鉴定的可行性大为增加。
2、接种动物的观察：根据动物的感染范围,可初步推断属于何种病毒。接种动物的观
察是非常重要的,通过观察试验动物的反应有时也可初步鉴定何种病毒。每天都需要观察,有时1d需要观察数次。（2分）
3、最终鉴定：病毒的最终鉴定需要免疫学方法、电子显微镜与免疫电子显微镜技术等
特异性方法加以鉴定。（4分）
(1)病毒的血清学鉴定：血清中和试验、血清抑制试验、免疫荧光试验；
病毒分离后,可用已知的抗病毒血清或单克隆抗体,对分离毒株进行血清学鉴定,
以确定病毒的种类、血清型及其亚型。常用的血清学试验有血清中和试验、血
清抑制试验等。此外,可采用一些血清学技术如免疫沉淀技术和免疫转印技术分
析病毒的结构蛋白成分。
(2)病毒的分子生物学鉴定：分子生物学技术已广泛应用于病毒的鉴定；包括病毒
基因的PCR扩增及其序列分析,核酸杂交技术,病毒全基因组序列测定分析等,从而可获得分离毒株的基因组信息,依据基因组序列绘制遗传进化树分析比较分离毒株的遗传变异情况,确定分离毒株的基因类型。
《微生物检验技术》期末考试试题(A 卷) 一、名词解释(每小题3分，共15分) 1、菌落 2、正常菌群 3、消毒 4、噬菌体 5、最小抑菌浓度（MIC ） 二、填空题（每空1分，共25分） 1．细菌的特殊结构 有 、 、 、 。 2.细菌生长繁殖的条件是 、 、 和气体。 3．病原菌的致病作用与 、 及 有密切关系。 4.诊断血清是用 免疫家兔等动物后取其 而制成的。一般置于 保存，使用时应避免 ， 降低效价。
5．K—B法中抑菌圈直径的大小与药物的最低抑菌浓度呈关系，即抑菌圈愈大，MIC值、细菌对药物的敏感程度。 6．、和可作为甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌的鉴别试验。 7．淋病奈瑟菌主要以方式传播，引起。 8.细菌对待测药物的敏感程度可分为、、 三级。 三、选择题(每小题1.5分，共30分)： 1、属于非细胞型微生物的是（） A、真菌 B、细菌 C、放线菌 D、病毒 E、螺旋体 2、革兰染色所用染液的顺序是（） A、稀释复红—碘液—95％乙醇—结晶紫 B、稀释复红—95％乙醇—碘液—结晶紫 C、结晶紫—碘液—95％乙醇—稀释复红 D、结晶紫—95％乙醇—碘液—稀释复红 E、稀释复红—结晶紫—碘液—95％乙醇 3、靛基质试验又称（） A、甲基红试验 B、尿素分解试验 C、硫化氢生成试验 D、吲哚试验 E、糖发酵试验 4、对人体无害的细菌代谢物是（）
A、热原质 B维生素 C、外毒素 D、内毒素 E、侵袭性酶 5、正常人体不存在细菌的部位是（） A、体表 B、口腔 C、大肠 D、尿道口 E、血液 6、实验室对接种针（环）、试管口的灭菌方法是（） A干烤法 B、流通蒸汽法 C、烧灼 D、焚烧 E、煮沸法 7、卡介苗是由何种变异而产生的（） A、形态变异 B、结构变异 C、毒力变异 D、耐药变异 E、酶活性变异 8、病原菌侵入血流并在其中大量繁殖，产生毒性代谢产物，引起严 重的全身症状，称为（） A、毒血症 B、菌血症 C、败血症 D、脓毒血症 E、 病毒血症 9、哪种动物不是微生物学检验中常用的实验动物（） A、小白鼠 B、豚鼠 C、裸鼠 D、家兔 E、马 10、下列哪项不是金黄色葡萄球菌的特点（） A、凝固酶试验阳性 B、产生溶血素 C、分解 甘露醇 D、产生耐热核酸酶 E、胆汁溶菌试验阳性 11、在普通琼脂平板上生长的化脓性细菌是（） A、金黄色葡萄球菌 B、乙型链球菌 C、肺炎
一、选择题(A型): !、下列细菌中哪一种细菌在血平板上一般不出现溶血环? A、金黄色葡萄球菌 B、表皮葡萄球菌 C、甲型链球菌 D、肺炎双球菌 2、进行玻片法血浆凝固酶试验不需要下列哪种材料? A、免血浆 B、生理盐水 C、2%红细胞悬液 D、待检细菌 3、UMI系统不包括下列哪一项试验? A、尿素酶 B、甲基红 C、靛基质 D、动力 4、麦康凯培养基和克氏双糖铁共有的成分是: A、葡萄糖 B、酚红 C、中性红 D、乳糖 5、对浓汁标本进行细菌学鉴定,下列哪一项试验一般不包括在内? A、涂片染色镜检 B、血平板分离培养 C、血浆凝固酶试验 D、抗"O"试验 6、乙链在血清肉汤中的生长情况是： A、完全沉淀生长 B、均匀混浊生长 C、部分沉淀生长 D、形成菌膜 7、甲基红试验和VP试验阳性表明被检菌具有以下哪一特性： A、分解乳糖产酸产气 B、分解葡萄糖生成丙酮酸 C、生成甲醇、甲醛 D、以上全部 8、下列哪一项不符合霍乱弧菌的特点 A、有动力 B、抵抗力较强 C、耐碱不耐酸 D、在自然界广泛存在，人是唯一易感者 9、对于一个脓汁标本，首先应进行的检验步骤是： A、涂片镜检 B、接种血平板 C、含硫氨基酸 D、苯丙氨酸 10、抗"O"试验管法中，溶血素应预先用还原剂处理，原因是： A、还原被氧化的S溶血素，恢复溶血能力 B、溶血素O对热不敏感 C、溶血素S对氧敏感 D、以上全错 11、观察乙型溶血性链球菌典型形态，选择哪一种培养基可得理想结果： A、普通琼脂平板 B、普通肉汤 C、血琼脂平板 D、血清肉汤 12、对脑膜炎奈瑟氏菌的标本采送，哪一种是错误的？ A、低温 B、保温 C、防干燥 D、快速 13、区别志贺氏菌和沙门氏菌可采用下列哪种试验？ A、氧化酶试验 B、乳糖发酵试验 C、葡萄糖发酵 D、动力试验 14、下列哪一项可用于区别肺炎双球菌和甲型链球菌？ A、胆汁溶菌试验和甘露醇发酵试验 B、溶血试验和胆汁溶菌试验 C、菊糖发酵试验和胆汁溶菌试验 D、溶血试验和菊糖发酵试验
微生物检验技术基础知识模拟题12 一、最佳选择题 1. SS琼脂培养基属于 A.厌氧培养基 B.营养培养基 C.鉴别培养基 D.选择培养基 E.特殊培养基 答案：D SS琼脂含有抑制剂胆盐、煌绿、硫代硫酸钠，对大肠埃希菌有较强的抑制作用，而对肠道致病菌则无明显抑制作用，是沙门菌属及志贺菌属的强选择培养基。 2. 从脑脊液中分离培养，能在血平板上生长的细菌最可能是 A.脑膜炎奈瑟菌 B.军团菌 C.变形杆菌 D.伤寒沙门菌 E.金黄色葡萄球菌 答案：A 脑膜炎奈瑟菌为流行性脑脊髓膜炎(流脑)的病原菌，引起化脓性脑脊髓膜炎，可从脑脊液中分离培养，而且培养条件要求较高，普通培养基上不生长，在含有血清或血液的培养基上方能生长。 3. 病毒长期保存最好的方法是 A.-20℃冰箱 B.-80℃冰箱 C.-70℃冰箱
答案：D 冷冻干燥法是保存病毒最好的方法，用此方法病毒可长期保存。 4. 痰标本涂片抗酸染色，如镜检找到抗酸杆菌，报告时符号“++”代表 A.多数视野能发现1～9个以上的抗酸杆菌 B.多数视野发现10个或10个以上的抗酸杆菌 C.全片发现1～2个抗酸杆菌 D.全片发现1～9个抗酸杆菌 E.全片未发现抗酸杆菌 答案：A 痰标本检查结核分枝杆菌，行涂片与抗酸染色，如镜检时多数视野能发现1～9个以上的抗酸杆菌，可报告“++”。 5. SPA是指 A.肺炎克雷伯杆菌A蛋白 B.金黄色葡萄球菌A蛋白 C.链球菌A蛋白 D.表皮葡萄球菌A蛋白 E.大肠埃希菌A蛋白 答案：B SPA是金黄色葡萄球菌细胞壁成分中的A蛋白，能与人及多种哺乳动物血清中的IgG类抗体的Fc段非特异结合，常用作协同凝集试验。 6. 结核分枝杆菌在液体培养基中培养时出现的现象是 A.混浊生长 B.沉淀生长
微生物室上岗人员操作技术基础测试卷A(化妆品） 说明：1.本试卷命题范围为化妆品微生物检测标准汇编·操作规程及相关专业基础知识 2.本测试为闭卷考试，满分为120分，时间为120分钟 3.本测试在人员入职后进行，以检验人员对工作的掌握程度。 姓名：测试时间：年月日 阅卷：成绩： 一、填空题（44*1） 1. 化妆品微生物检验项目包括：、、 、、。 液体供检样品前处理时，水溶性样品用溶解，油溶性样品用溶解。 4.在测定霉菌和酵母菌时，虎红培养基中含有，以抑制其他细菌的生长。 5. 化妆品粪大肠菌群检测时，报告被检样品中检出粪大肠菌群应符合的条件：、、 、。 6.金黄色葡萄球菌革兰氏染色镜检结果为：革兰氏，排列成 状，芽孢，荚膜，致病性葡萄球菌。 7.在电压220V时，普通30W直管型紫外线灯，在室温为20~25℃的使用情况下，紫外线辐射强度（垂直1m处）应≥ 8.卵磷脂吐温80培养基灭菌条件为℃高压灭菌分钟. 9.金黄色葡萄球菌在 Baird-Parker 平板上, 菌落直径为 ,颜色呈 ,边缘为色 ,周围为一带 ,在其外层有一 .圈。一般认为阳性的金黄色葡萄球菌菌株有致病力. 10.检测粪大肠菌群时，所用的双料乳糖胆盐培养基中，溴甲酚紫的作用是 培养基原理是：蛋白胨提供源和源；糖是大肠菌群可发酵的糖类；磷酸氢二钾是；琼脂是培养基凝固剂； 伊红和美蓝是剂和剂，可抑制革兰氏阳性菌，在酸性条件下产生沉淀，形成色菌落或具黑色中心的外围的菌落。 12.高压灭菌锅必须每个月进行一次灭菌效果评价，用菌进行评价检验，而平时也要用进行检测。 13. 10-1 和10-2两个稀释度每ml的菌落数分别是260,28，则菌落总数报告值为
微生物实验室要求 微生物检验实验室操作技术要求 第一节实验室管理制度 一、实验室管理制度 1 ．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理，使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。 2 ．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验 室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。 3 ．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、 检修 , 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。 4 ．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告； 药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出，应严格执行《菌种保管制度》。 5 ．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开 实验室前认真检查水、电、暖气、门窗，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。 6 ．科、室负责人督促本制度严格执行，根据情况给于奖惩，出现问题立即报告， 造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。 二、仪器配备、管理使用制度 1 ．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位 pH 计、高速离心机。 2 ．实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经 计量部门检定合格方能使用。 3 ．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，经科室负责人同意填报修理申请、送仪器维修部门。
临床微生物学检验技术试题及答案 A1题型 1. 机体抵抗病原微生物的屏障结构包括 A、皮肤与粘膜 B、血脑屏障 C、胎盘屏障 D、免疫系统 E、A、B和C 答案E 2. 有关内毒素的描述哪项是错误的 A、均由革兰氏阴性菌产生 B、其化学成分为脂多糖 C、160℃，2~4小时才被破坏 D、毒害效应具有组织器官选择性 E、毒性作用较弱 答案D 3. 下列描述哪项是错误的 A、病原菌致病力的强弱度称为毒力 B、毒力主要由侵袭力和毒素所决定 C、破伤风毒素属于内毒素 D、侵袭力是指病原菌突破宿主机体的防御功能，并能在体内定居、繁殖和扩散的能力 E、以上均不是 答案C 4. 下列哪种成分不属于外毒素 A、脂多糖 B、痉挛毒素 C、肉毒毒素 D、表皮剥脱毒素 E、霍乱肠毒素
答案A 5. 下列哪种成分不属于外毒素 A、金黄色葡萄球菌肠毒素 B、产毒性大肠杆菌肠毒素 C、白喉毒素 D、表皮剥脱毒素 E、类脂A 答案E 6. 内毒素的毒性作用包括 A、发热反应 B、白细胞反应 C、内毒素血症与内毒素休克 D、以上都是 E、A和C 答案D 7. 慢性志贺菌感染的病程一般在（）以上 A、两周 B、一个月 C、两个月 D、六周 E、七周 答案C 8. 志贺菌随饮食进入体内，导致人体发病，其潜伏期一般为 A、一天之内 B、1-3天 C、5-7天 D、7-8天 E、8天以后 答案B 9. 下列关于结核分支杆菌描述正确的是
A、类脂质为胞壁中含量最多的成分 B、产生外毒素 C、产生内毒素 D、耐药性低 E、一般采用革兰氏染色 答案A 10. 我国的卫生标准中，每升饮用水中不得超过（）个大肠杆菌 A、1 B、3 C、5 D、7 E、8 答案B 11. 大肠杆菌指数测定时，37℃培养24小时，能发酵乳糖（）为阳性 A、产酸 B、产酸产气 C、产酸不产气 D、产气不产酸 E、以上都不产生 答案B 12. 下列何种细菌为革兰氏阴性菌 A、脑膜炎奈瑟菌 B、结核分支杆菌 C、铜绿假单细胞 D、枯草芽孢杆菌 E、白喉棒状杆菌 答案C 13. 下列何种细菌为革兰氏阳性杆菌 A、大肠杆菌 B、铜绿假单细胞
农产品质量检测专业及绿色食品生产与经营专业2015级《食品微生物检测技术》课程期末考试卷 （A卷） 一、名词解释（总分10分，每题2分） 1．菌落 2．菌落总数 3．培养基 4．乳酸菌 5．大肠菌群 二、填空题（总分20分，每空1分） 1．与食品工业密切相关的乳酸菌主要为乳杆菌属、双歧杆菌属和链球菌属中的等。采用法，检测酸奶中的各种乳酸菌可以获得满意结果。 2．我国卫生部颁布的食品微生物指标主要有、和三项。 3．在菌体形态观察中，需进行制片后才能进行显微镜下观察，观察细菌时采用的制片方法是，观察真菌采取的制片方法是。 4．微生物生长需要的营养要素有、、、、生长因子和能源。 5．根据细菌的生长曲线，可将细菌的生长分为、、、 四个时期，作为研究材料应取的细菌最合适。 6．一般培养基的制备主要程序可分为：称量、、调节pH、过滤、、加塞包扎、 和无菌检查等步骤。 7．无菌室的熏蒸消毒，主要采用熏蒸消毒法，测定无菌室无菌程度一般采用法。 三、单项选择题（总分20分，每题1分，将答案写在下面） 1——5：6——10： 11——15：16——20： 1.紫外线的杀菌机理可能是（） A.紫外线的高热作用 B.紫外线的辐射作用 C.紫外线凝固细菌蛋白质 D.紫外线干扰细菌DNA复制与转录
2.革兰氏染色的关键操作步骤是（） A.结晶紫染色 B.碘液固定 C.酒精脱色 D.复染 3.热力灭菌法分干热和湿热灭菌两类，并在同一温度下湿热灭菌效力较干热要强这是因为（） A.可迅速提高温度 B.湿热有一定潜热、穿透力大，促进菌体蛋白凝固 C.迅速破坏细菌的酶系统 D.促进糖类分解 4.关于金黄色葡萄球菌的描述不正确的是（）。 A.球状菌 B.G+ C.在血平板上形成的菌落为黑色D能产生凝固酶 5.GB/T4789.2-2010菌落总数检验方法是（）。 A.平板涂抹法 B.显微镜检查法 C.平板菌落计数法 D.菌落计数器法 6.检测金黄色葡萄球菌所用的增菌液是（） A.7.5%氯化钠肉汤 B.普通肉汤 C.蛋白胨水 D.TTB 7.在测定菌落总数时，首先将食品样品作成（）倍递增稀释液。 A.1：5 B.1：10 C.1：15 D.1：20 8.奶粉检验取样前，操作人员应（） A.用95％的酒精棉球擦手 B.用75％的酒精棉球擦手和容器口周圈 C.用65％的酒精棉球擦容器口周围 D.用酒精灯烤容器口周围 9.某微生物在有氧和无氧时均可以生长并可以利用氧，它属于（）。 A.微好氧菌 B.好氧菌 C.厌氧菌 D.兼性厌氧菌 10.一般培养基高压蒸汽灭菌的条件是：（） A.121℃/15-30min B.115℃/15-30min C.130℃/15-30min D.65℃/15-30min 11.采用湿热高压蒸汽灭菌，（）是影响灭菌质量的关键。
食品微生物检验技术复 习题 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
名词解释 样品（sample）是指从某一总体中抽出的一部分。 食品采样（sampling）是指从较大批量食品中抽取能较好地代表其总体样品的方法。 接种：将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。 菌落总数：指一定数量或面积的食品样品，在一定条件下进行细菌培养，使每一个活菌只能形成一个肉眼可见的菌落，然后进行菌落计数所得的菌落数量。 V-P试验：某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。 生理生化试验：微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一。 硫化氢（H2S）试验：有些细菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物，而产生硫化氢气体，硫化氢遇铅盐或低铁盐可生成黑色沉淀物。 增殖培养基: 在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。 外源性污染：食品在生产加工、运输、贮藏、销售食品过程中不遵守操作规程或不按卫生要求使食品发生污染称为外源性污染，也称为第二次污染． 环状沉淀反应：是一种定性试验方法，可用已知抗体检测未知抗原。将已知抗体注入特制小试管中，然后沿管壁徐徐加入等量抗原，如抗原与抗体对应，则在两液界面出现白色的沉淀圆环。 微生物性食物中毒：食用被微生物或微生物毒素污染的食品而引起的中毒称为微生物性食物中毒。 无菌接种操作：培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具在无菌条件下接种含菌材料于培养基上，这过程叫做无菌接种操作。 菌落：指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的细菌集合而成。 细菌总数：指一定数量或面积的食品样品．经过适当的处理后，在显微镜下对细菌进行直接计数。其中包括各种活菌数和尚未消失的死菌数。 大肠菌群：系指一群在37度能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽胞杆菌。 淀粉水解试验：某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。 糖酵解试验：不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。甲基红（Methyl Red）试验：肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至以下，使甲基红指示剂变红。 靛基质（Imdole）试验：某些细菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯醛结合，形成玫瑰吲哚，为红色化合物。尿素酶（Urease）试验：有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。氧化酶（Oxidase）试验：氧化酶亦即细胞色素氧化酶，为细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶，氧化酶先使细胞色素C氧化，然后此氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。硫化氢-靛基质-动力（SIM）琼脂试验：试验方法：以接种针挑取菌落或纯养物穿刺接种约1/2深度，置36±1℃培养18~24h，观察结果。培养物呈现黑色为硫化氢阳性，混浊或沿穿刺线向外生长为有动力，然后加Kovacs氏试剂数滴于培养表面，静置10min，若试剂呈红色为靛基质阳性。培养基未接种的下部，可作为对照。选择培养基:在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基，称之为选择培养基。鉴别培养基: 在培养基中加入某种试剂或化学药品，使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别，因而有助开快速鉴别某种微生物。这样的培养基称之为鉴别培养基。 无菌技术:指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。 粪大肠菌群：系一群需氧及兼性厌氧，在℃培养24h内能发酵乳糖产酸产气和分解色氨酸产生靛基质的革兰氏阴性无芽胞杆菌。玻片凝集法：是一种常规的定性试验方法。原理是用已知抗体来检测未知抗原。常用于鉴定菌种、血型。试管凝集法：是一种定量试验方法。多用已知抗原来检测血清中有无相应抗体及其含量。常用于协助诊断某些传染病及进行流行病学调查。 沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体结合，在有适量电解质存在下，经过一定时间，形成肉眼可见的沉淀物，称为沉淀反应（Precipitation）。絮状沉淀反应：将已知抗原与抗体在试管（如凹玻片）内混匀，如抗原抗体对应，而又二者比例适当时，会出现肉眼可见的絮状沉淀，此为阳性反应。琼脂扩散试验：利用可溶性抗原抗体在半固体琼脂内扩散，若抗原抗体对应，且二者比例合适，在其扩散的某一部分就会出现白色的沉淀线。每对抗原抗体可形成一条沉淀线。有几对抗原抗体，就可分别形成几条沉淀线。大肠菌群MPN：大肠菌群MPN是采用一定的方法，应用统计学的原理所测定和计算出的一种最近似数值。 大肠菌群值：大肠菌群值是指在食品中检出一个大肠菌群细菌时所需要的最少样品量。内源性污染：凡由动物体在生活过程中，由于本身带染的微生物而造成食品的污染者，称为内源性污染，也称第一次污染．食品腐败变质：是指食品受到各种内外因素的影响，造成其原有化学性质或物理性质发生变化，降低或失去其营养价值和商品价值的过程．
《微生物检验技术》课程标准 课程代码： 建议课时数：150 适用专业：医学检验技术 一、课程的性质 《微生物检验技术》课程作为校企合作、工学结合的一门课程，在医学检验课程体系中占有重要地位，是医学检验专业的一门重要的专业核心课程，同时也是国家医学检验职业资格考试的五大内容之一。《微生物检验技术》课程是医学检验的重要部分，培养学生掌握常规微生物检验技术的基本知识和基本技能，使他们具有微生物检验技术的实际操作能力，为后续课程和岗位职业能力打下良好的基础。 1．课程设置的依据 打破以知识传授为主要特征的传统学科课程模式，转变为以任务引领型课程为主体的课程模式，让学生通过完成医学临床标本微生物学检测等相关知识结构，并发展职业能力。本课程是以微生物检验顺序为线索进行设计的。以工作任务为中心整合理论与实践，实现理论与实践的一体化。教学过程中，通过院校合作，校内实训基地建设等多种途径，采取临床医院与学校教学交替等形式，充分开发学习资源，给学生提供丰富的实践机会。教学效果评价采取过程评价与结果评价相结合的方式，通过理论与实践相结合，重点评价学生的职业能力。 2．课程内容确定的依据 课程内容的确定紧紧围绕工作任务完成的需要来进行，同时又充分考虑了职业教育对理论知识学习的需要，并融合了获取相关职业资格证书对知识、技能和态度的要求。 主要依据：①以微生物检验技术的工作过程为主线安排教学内容，体现真实微生物检验的工作流程，注重教学内容衔接性。②以微生物检验技术典型的工作任务为载体设计教学内容。引入临床案例，内容来源于真实的工作项目，引入微生物检验操作规范、技术标准和职业资格标准。体现知识学习的应用性，能力培养的递进性和素质培养的职业性。③课程内容可适当拓展，删减一些已经过时的陈旧的知识内容，将微量化、快速化检测技术及半自动化、自动化仪器使用和新技术纳入《微生物检验技术》课程内容中。注重学生可持续发展能力的培养，为学生的终身学习着想。突出课程教学的先进性和实用性。④以职业素养、职业道德、职业能力培养为目标设计考核评价体系，融入医院、企业文化、提倡职业精神。 3．课时安排说明 本课程安排在第二学年第3、4学期，建议学时数为150学时，理论教学68学时，实践教学82学时。
微生物检验试题 1.下列对微生物概念表述正确的是 A.仅存在于人体 B.结构复杂，形体微小 C.可用肉眼进行观察 D.原虫不属于微生物 E.卡氏肺孢子虫属于微生物 2.下列不属于原核细胞型微生物的是 A.大肠埃希菌B新型隐球菌 C肺炎衣原体D厌氧性放线菌 E解脲脲原体 3.属于非细胞型微生物的是 A.朊粒 B.细菌 C.真菌 D.衣原体 E.支原体 4.医院感染是指 A.患者在住院前三天发生的感染 B.患者在住院前一天发生的感染 C.患者在住院期间发生的感染 D.患者出院后一天发生的感染 E.患者在住院后三天发生的感染 5.下列对临床微生物检验的工作原则表述错误的是 A.确保临床标本可靠 B.微生物学定性分析 C.全面了解机体病原微生物 D.快速准确提供信息 E.加强与临床联系 6.革兰阳性细菌细胞壁具有很强抗原性的成分是 A.外膜 B.肽聚糖 C.磷壁酸 D.聚糖骨架 E.五肽交联桥 7.下列菌有细胞壁外膜层的是 A.粪肠球菌 B.溶血葡萄球菌 C.新型隐球菌 D.产酸克雷伯菌 E.克柔假丝酵母菌 8.具有脱硫氢基作用的细菌是 A.金黄色葡萄球菌 B.肺炎链球菌 C.脑膜炎奈瑟菌
D.奇异变形杆菌 E.流感嗜血杆菌 9.能使菌体蛋白变性或沉淀的消毒剂是 A.高锰酸钾 B.过氧乙酸 C.过氧化氢 D.低浓度苯酚 E.高浓度苯酚 10.监测高压灭菌器灭菌效果应选用 A.嗜热脂肪芽胞杆菌ATCC7953 B.金黄色葡萄球菌A TCC25923 C.大肠埃希菌ATCC25922 D.枯草芽胞杆菌黑色变种ATCC9372 E.铜绿假单胞菌ATCC27853 11.不属于口腔中常见正常菌群的是 A.卡他布兰汉菌 B.大肠埃希菌 C.甲型和丙型链球菌 D.表皮葡萄球菌 E.白假丝酵母菌 12.淘米水样粪便、有腥臭味，符合的疾病是 A.细菌性痢疾 B.重症霍乱 C.病毒性腹泻 D.阿米巴痢疾 E.肠伤寒 13.鉴定致病性金黄色葡萄球菌最常用的试验是 A.耐热DNA酶试验 B.血浆凝固酶试验 C.甘露醇分解试验 D.KIA E.MIU 14.抗酸染色检查的是 A.大叶性肺炎 B.细菌性脑膜炎 C.细菌血流感染 D.结核病、麻风 E.淋病 15.具有嗜冷性的菌为 A.奇异变形杆菌 B.产酸克雷伯菌 C.小肠结肠炎耶尔森菌 D.黏质沙雷菌 E.摩氏摩根菌
微生物检验技术课程综合化改革探讨 摘要：文章从培养实用型检验专业人才出发，分析三年制高职医学检验技术专业的课程设置和教学现状，从理论和实验两方面采取一系列措施进行教学改革，强调微生物检验技术课程综合化改革的必要性并对改革路径进行探讨。 关键词：微生物检验技术；教学现状；教学改革 微生物检验技术是医学检验技术专业学生必修的专业课程，也是一门应用性、实践性极强的学科。医学检验技术教学团队作为省高校教学团队，积极提高该课程的教学质量，立足课程基本要求，大胆改革，使学生具备扎实的理论知识和实践技能，能够直接上岗，增强就业竞争力。 1课程设置和教学现状分析 按照高职医学检验课程改革方案，医学检验技术专业五门专业课在第三学期”并行”开设，导致学生学习任务过重，课程内容之间也难以衔接，教学效果欠佳；理论课教学内容偏多，教与学的难度加大，而实验课仍然是传统的教学模式，即教师示范，然后学生模仿，且主要以验证性实验为主，难以发挥学生的主观能动性，导致学生对实验课也只是疲于应付，不利于学生创新能力的培养。 2理论教学改革
2.1优化教学内容《微生物检验技术》这本教材综合了微生物学、免疫学和流行病学等学科的内容，主要是研究感染性疾病的诊断方法，为临床医生合理用药提供依据。因此，这门课程的教学质量直接影响学生在临床工作中的工作能力[1]。为此，我们对教学内容进行了改革，将教学内容分为三大块：第一大块，首先介绍微生物的基本概念、在微生物检验过程中会使用到的一些基本技术和检验方法，使学生对微生物的相关理论知识有个大致的了解，为学生后续学习奠定基础；第二大块，主要介绍临床上常见的病原微生物的生物学特性、微生物学检验方法及临床意义，并将第一块中讲到的检验技术和检验方法运用到病原微生物的检验中来，让学生对整个学习内容有个纵向的了解；第三大块，模拟临床工作实际，介绍各种临床标本的微生物学检验，使学生学会收集标本和处理标本，并能够对检验结果进行分析，从而提高学生分析问题和解决问题的能力。与此同时，根据临床微生物的发展，对教学内容及时调整，微生物检验涉及到的微生物有三大类八大种，而对于三年制高职医学检验技术专业学生来说，如果每一种都精讲，势必造成学时严重不足，而且没有针对性，重难点不突出，学生学习起来很费力，这时教师可根据临床开展需要，对于临床分离率比较高的微生物，例如，化脓性球菌、肠杆菌科细菌、非发酵菌科细菌、流感病毒、乙型肝炎病毒、SARS 病毒等内容，要精讲；而
临床微生物学检验技术试题及答案A1题型 1、人类ABO血型抗原包括 A、A抗原 B、B抗原 C、O抗原 D、AB抗原 E、A抗原和B抗原 答案：E 2、ABO血型物质在人体中可引起哪几种Ab产生 A、抗B抗体 B、抗AB抗体 C、抗A抗体 D、抗O抗体 E、抗A和抗B抗体 答案：E 3、免疫耐受就是 A、非特异性无反应性 B、特异性无反应性 C、机体无反应性 D、免疫抑制性 E、对任何抗原都不反应 答案：B 4、迟发型皮肤过敏反应与下列哪种物质有关 A、IgE B、IgA C、活化B细胞 D、活化T细胞 E、活化NK细胞
答案：D 5、佐剂作用是 A、将Ag送入机体各部位 B、将Ag固定在局部 C、增强Ag免疫原性 D、赋予Ag免疫原性 E、增强机体对Ag的免疫应答 答案：E 6、下列哪种物质既有非特异性免疫也参与特异性免疫反应 A、IgG B、干扰素 C、IgA D、前列腺素 E、补体 答案：E 7、TDH 细胞是 A、产生Ab细胞 B、天然杀伤细胞 C、细胞毒细胞 D、迟发变态反应T细胞 E、依Ab杀伤T细胞 答案：D 8、关于霍乱弧菌是否侵入上皮细胞，下列说法正确的是 A、不侵入 B、侵入 C、在特定条件下侵入 D、具有侵袭基因的霍乱弧菌侵入 E、侵入后局限于上皮细胞内 答案：A 9、葡萄球菌能产生多种溶血素，其中最主要的是
A、α、β溶血素 B、α、γ溶血素 C、β、γ溶血素 D、δ、ε溶血素 E、α、γ溶血素 答案：A 10、与其他肺部感染病原菌相比较，铜绿假单胞菌的毒力特点是 A、产生外毒素 B、具有内毒素 C、产生溶血素 D、产生绿脓素 E、具有菌毛 答案：D 11、有荚膜的流感嗜血杆菌含有荚膜多糖抗原称作： A、V抗原 B、M抗原 C、A抗原 D、X抗原 E、S抗原 答案：B 12、下列关于铜绿假单胞菌叙述中，正确的是 A、革兰氏阳性球菌 B、革兰氏阳性杆菌 C、无芽孢 D、具有荚膜 E、无鞭毛 答案：C 13、下列何种微生物具有荚膜结构 A、军团菌 B、支原体
习题七 一、填空 1．我国卫生部颁布的食品微生物指标有、和三项。 2．凡乳糖发酵管产气，革兰氏染色为阴性无芽胞杆菌，即报告为大肠杆菌性；凡乳糖发酵管不产气或革兰氏染色为阳性，则报告为大肠杆菌为性。 二、选择 1.乳糖初发酵试验通常在（）检测中用到。 A 乳酸菌 B. 酵母菌 C. 细菌总数 D. 大肠杆菌 2.大肠杆菌指数测定时，37℃培养24小时，能发酵乳糖（）为阳性 A产酸 B 产酸产气 C 产酸不产气D产气不产酸 E 以上都不产生 3.在饮用水中检出（），不能推定为粪便污染 A 埃希氏大肠杆菌 B 沙门氏菌C志贺菌D产气肠杆菌E弧菌属 4.在检验肠道细菌时应将培养物置（）培养。 A 28 ℃ B 25℃ C 36±1℃ D 45℃ 5.微生物的检验中，大肠菌群的测定单位用（）表示。 A g/ml (g) B g/100ml (g) C MPN/100ml (g) D cfu/ml (g) 6.大肠菌群的生物学特性是() A发酵乳糖、产酸、不产气 B不发酵乳糖、产酸、产气 C发酵乳糖、产酸、产气 D发酵乳糖、不产酸、不产气 7.大肠菌群的生物学特征是（） A革兰氏阳性、需氧和兼性厌氧 B革兰氏阴性、需氧和兼性厌氧 C革兰氏阳性、厌氧 D革兰氏阳性、需氧 8.大肠菌群在EMB平板上的菌落特征是（） A白色针尖状 B金黄色葡萄球菌 C黑色 D红色 9.MPN是指（） A 100g样品中大肠菌群确切数 B 1g样品中大肠菌群确切数 C 1g样品中大肠菌群近似数 D 100g样品中大肠菌群近似数 10.测定大肠菌群时，经EMB平板分离后要确定是否为大肠菌群，还要经过（） A 三糖铁试验 B V-P试验 C复发酵和革兰氏染色 D硫化氢试验 12.大肠菌群测定的一般步骤是（） A初发酵-分离-染色-复发酵 B初发酵-分离-复发酵-染色 C初发酵-复发酵-分离 D初发酵-复发酵 13.大肠菌群初发酵的培养条件是（） A 36℃，24h B 25℃，一周 C 36℃，48h D 36℃，4h 14.大肠菌群复发酵的培养条件是（） A 36℃，24h B 36℃，4h C 36℃，48h D 36℃，12h 15.下列有关大肠杆菌的描述中，错误的是( ) A革兰氏反应呈阴性 B菌体形态是短杆菌 C菌体排列为一个或二个 D会形成孢子 16.检测大肠菌群时，待检样品接种乳糖胆盐发酵管，经培养如不产气，则大肠菌群( )。A阳性 B阴性 C需进一步试验 D需接种伊红美兰平板 17.我国的卫生标准中，每升饮用水中不得超过（）个大肠杆菌 A1 B3 C5 D 7 E 8 18.大肠杆菌指数测定时，37℃培养24小时，能发酵乳糖（）为阳性 A产酸B产酸产气C产酸不产气D产气不产酸E以上都不产生
临床微生物学检验技术考试题库及答案 2、（正常菌群）条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。 3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒素） 4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（内毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋白） 5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥（G-菌无。是溶菌酶、青霉素作用部位） 6、细菌的主要遗传物质：核质（染色体）、质粒（存在于胞质，双链闭合环状DNA分子）、转位因子 7、细菌特殊结构：荚膜（保护，致病，抗原性，鉴别）、芽胞、鞭毛（运动器官）、菌毛（普通菌毛—粘附，致病性；性菌毛—接合方式转移遗传物质）*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标 8、L型（细胞壁缺陷）菌落：①“油煎蛋”（荷包蛋）样菌落（典型L型细菌）。②颗粒型菌落（简称G型菌落）③丝状菌落（简称F型菌落）。高渗环境生长。（环丙沙星） 9、自营菌：以无机物为原料；异营菌(腐生菌：以无生命的有机物质为营养物质；寄生菌：以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。 10、细菌营养物质：水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。 11、细菌个体的生长繁殖方式：无性二分裂，在对数期以几何级数增长 12、细菌分类（伯杰）等级依次为界、门、纲、目、科、属、种（最小分类单位）。 13、常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法； 14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%～ 10%CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24～48h生长良好。 15、血清学诊断时，一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2～3份检查，抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。 16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构；扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。
微生物检验技术专业知识模拟题20 以下每一道考题下面有A、B、C、D、E5个备选答案。请从中选择1个最佳答案。 1. Vero细胞是 A.人喉上皮癌细胞 B.人宫颈癌细胞 C.非洲绿猴肾细胞 D.人二倍体传代细胞 E.人胚肾细胞 答案：C 2. 主要在非洲大陆的人与猴中流行的感染后有出血症状的烈性病毒性传染病的病原是 A.汉坦病毒 B.克里米亚刚果热病毒 C.埃博拉病毒 D.登革病毒 E.黄热病病毒 答案：C [解答] 埃博拉病毒引起埃博拉出血热，主要在非洲流行，感染后病毒在体内大量增殖，袭击各个器官，使之发生变性、坏死，患者最后因广泛内出血、脑部受损等原因七窍流血而死。 3. 汉坦病毒的血凝素抗原所在位置是 A.核蛋白 B.聚合酶蛋白
C.G1糖蛋白 D.G2糖蛋白 E.G1和G2糖蛋白 答案：E [解答] 汉坦病毒由4种蛋白组成，即N、G1、G2和L。G1和G2均为糖蛋白，构成病毒包膜表面刺突，均具有中和抗原和血凝素抗原。 4. 革兰阳性菌细胞壁中特有的成分是 A.肽聚糖 B.磷壁酸 C.外膜 D.糖蛋白 E.多糖 答案：B [解答] 革兰染色法可将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌，肽聚糖为二者细胞共有成分。革兰阳性菌细胞壁由肽聚糖和磷壁酸组成，磷壁酸是其特有成分。 5. 为缺陷病毒，必需在其他肝炎病毒的辅助下才能复制的肝炎病毒是 A.甲型肝炎病毒 B.乙型肝炎病毒 C.丙型肝炎病毒 D.丁型肝炎病毒 E.戊型肝炎病毒 答案：D [解答] 缺陷病毒是指因病毒基因组不完整或者因基因某一点改变而不能进行正常增殖的病毒。丁型肝炎病毒是一种缺陷病毒，必须在乙型肝炎病毒辅助下才能
考试试题—微生物检验 考试日期：姓名：分数： 一、填空题 1、抽样量一般应为检验用量的 3 倍，抽样时如发现有异常或可疑的样品，应抽选有疑问的样品。 2、样品在检验前应保存在干燥处，并存放在有“待检验”标识的区域，待检样品严禁开启，以防样品检验前受到污染。 3、菌检室在检验前打开紫外灯消毒 30 分钟。 4、检验时，细菌使用营养琼脂培养基，酵母菌用 YPD琼脂培养基，霉菌用虎红琼脂培养基。 5、供试液分别稀释成 1：10，1：100，1：1000 等比例，用吸管吸取每一稀释级的供试液 1 ml，注入 2 个平皿中。 6、细菌培养是在 30-35 ℃下培养 48±2 小时。 7、菌检试验完成后，检验员应及时填写《菌检报告》，一式二份，送市场部一份，技术质管部一份。 8、霉菌、酵母菌培养是在 25-28 ℃下培养，药品培养 72±2 小时， 食品培养五天。 9、接到市场部的《菌检申请单》后，检验员按《菌检作业指南》进行 试验，并填写《菌检记录》。 10、消毒后，培养基须放在 45 ℃的水沐浴锅内恒温。 11、菌落计数，一般在平板背面用肉眼直接点数，必要时用放大镜，以防遗漏。 12、平板上有片状或斑样菌落蔓延生长以及平板受到污染时，该平板计数无 效。 13、同一稀释级的菌落数为2个平板的平均数，若2个平板菌落数相差在 1 倍以上时，该稀释级不宜采用。但2个平板菌落数均在 15 个以下时除外。 14、供试品一般按批号抽样，采用随机抽样方法抽样。 15、供试品制成供试液后，应在 1 小时内注皿操作完毕。 16、若只有一个稀释级的平均平板菌落数在计数范围内，将该稀释级的平均平板菌落数乘以稀释倍数，为报告菌数。
临床微生物学检验 确保高压效果的可靠性。 【适用范围】 蒸气式高压锅。 【该SOP变动程序】 本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。 【操作方法】 1．将水加到高压锅内至其刻度线，将欲灭菌物品放入锅内，关闭锅门，拧紧螺丝并确认已经封闭。 2．打开排气阀。 3．打开蒸汽开关，向锅内输入蒸汽或接通电源，使产生蒸汽。 4．观察排气阀的排气情况，待排出的气体由冷气变为蒸汽，压力表达到0.05mPa 时，关闭排气阀。 5．观察压力表，当压力升至0.15mPa时，开始计时。 6．压力达0.15mPa后，可调节进气阀，减少进气量，维持压力并使其稳定在 0.15mPa。电加热时，可切断电源，维持压力持续15分钟，至多不超过30分 钟，否则营养物质破坏。 7．关闭进气阀门或切断电源，让锅内物品自然冷却，不可马上打开排气阀，以免发生意外。 8．待锅内压力降为零时，可打开锅盖，取出物品。 操作人员部门主管质量负责人姓名唐玉贞检验科检验科 日期 06年06月06日
确保培养箱温度恒定。 【适用范围】 各种类型隔水式、温度设定为27℃、35℃、42℃、56℃培养箱。 【该SOP变动程序】 本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。 【操作方法】 1．培养箱应放置于水平地面（或坚固的水平台），电源电压须匹配。 2．从注水口先将隔水箱内的水注满到浮标要求的位置。 3．将温度调节旋扭调至所需温度，然后将电源开关拨至“开”处。 4．每次使用时应在培养箱顶部插入标准温度计，监测实际温度。 5．培养箱工作温度波动范围应控制在±10C以内。 6．培养箱正面贴有温度记录表，记录每天上班和下班时温度，如温度超出正常范围，指示该温度的刻度应划上红圈，并把修正温度记录下来。 7．培养箱内外应保持清洁。 操作人员部门主管质量负责人 姓名唐玉贞检验科检验科 日期 06年06月06日
临床微生物学检验技术试题及答案 1.在对病人进行诊断时，常采用血清学方法，Ag-Ab反应有许多特点，但Ag-Ab反应主要特点是 A、分阶段性 B、可逆性 C、敏感性高 D、特异性 E、非特异性 答案：D 2.革兰氏染色是重要的细菌鉴别染色之一其媒染剂（卢戈氏碘液）所起的作用 A、增加摄取染料作用，不易脱色 B、固定初染细菌 C、对下一步脱色起促进作用 D、杀死细菌 E、破坏细菌细胞壁 答案：A 3.血清制品的保存常加一些防腐剂，防止杂菌生长，常用的是硫柳汞常用浓度为 A、0.001% B、0.01% C、0.1% D、1% E、10% 答案：B 4.能在SS琼脂上生长出的大肠埃希氏菌呈现______色 A、浅红 B、深红 C、微黄 D、无 E、深灰
答案：B 5.在用血清学方法诊断或进行流行病学调查时，常采用Ag与Ab反应，进行此反应必须有电解质参与，电解质量与反应有关，当电解质超出最佳浓度时 A、提高反应敏感性 B、降低敏感性 C、不反应 D、反应不变 E、提高特异性 答案：A 6. 肺炎链球菌在临床上主要引起下列何种疾病 A、脓胸 B、大叶性肺炎 C、肺纤维化 D、肺结节 E、支气管炎 答案：B 7. 颗粒型细菌抗原（死或活菌）在哪种反应中采用 A、沉淀反应 B、琼脂扩散 C、中和试验 D、凝集试验 E、对流电泳 答案：D 8.抗酸染色的结果判定 A、菌体着兰色为抗酸菌 B、菌体着红色为抗酸菌 C、菌体着绿色为抗酸菌 D、菌体着黄色为抗酸 E、菌体无色为抗酸菌 答案：B
9. 下列何种培养基适合军团菌培养 A、庆大霉素培养基 B、BCYE琼脂培养基 C、巧克力平板 D、PPLO培养基 E、Korthof培养基 答案：B 10. 冻干菌种待完全干燥后，需将安瓶中空气抽成真空，当用真空火花检测器检测时，火花是什么颜色证明为真空 A、红色 B、黄色 C、白色 D、紫色 E、兰绿色 答案：D 11.戊烷脒选择性培养基，胆汁湟绿培养基适用于什么细菌培养 A、霍乱弧菌 B、白喉杆菌 C、破伤风杆菌 D、布鲁氏菌 E、炭疽杆菌 答案：E 12.活性炭酵母琼脂培养基CYE是适用于培养什么细菌 A、分离鼠疫杆菌 B、布鲁氏菌培养 C、白喉杆菌培养 D、肠道细菌培养 E、军团菌的培养 答案：E 13.牛肉膏汤是常用的培养基，但它有一个特点是什么
《微生物检验技术》期末考试试题(A 卷 ) 得分阅卷教师 一、名词解释 ( 每小题 3 分，共 15 分) 1、菌落 2、正常菌群 3、消毒 4、噬菌体 5、最小抑菌浓度（ MIC） 二、填空题（每空 1 分，共 25 分）得分阅卷教师 1．细菌 有、、2. 细菌生长繁殖的条件是、3．病原菌的致病作用与、 4. 诊断血清是用 而制成的。一般置于 的特殊结构、。 、和气体。 及有密切关系。 免疫家兔等动物后取其 保存，使用时应避 免，降低效价。
5．K—B法中抑菌圈直径的大小与药物的最低抑菌浓度呈关系，即抑菌圈愈大，MIC 值、细菌对药物的敏感程 度。 6．、和可作为甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌的鉴别试验。 7．淋病奈瑟菌主要以方式传播，引起。 8. 细菌对待测药物的敏感程度可分为、、 三级。 得分阅卷教师 三、选择题 ( 每小题 1.5 分，共 30 分) ： 1、属于非细胞型微生物的是（） A、真菌 B 、细菌 C 、放线菌 D 、病毒 E 、螺旋体 2、革兰染色所用染液的顺序是（） A、稀释复红—碘液— 95％乙醇—结晶紫 B、稀释复红— 95％乙醇—碘液—结晶紫 C、结晶紫—碘液— 95％乙醇—稀释复红 D、结晶紫— 95％乙醇—碘液—稀释复红 E、稀释复红—结晶紫—碘液—95％乙醇 3、靛基质试验又称（） A、甲基红试验 B 、尿素分解试验 C 、硫化氢生成试验 D、吲哚试验 E、糖发酵试验 4、对人体无害的细菌代谢物是（）
A、热原质B维生素C、外毒素 D、内毒素 E、侵袭性酶 5、正常人体不存在细菌的部位是（） A、体表 B、口腔 C、大肠 D、尿道口 E、血液 6、实验室对接种针（环）、试管口的灭菌方法是（） A干烤法B、流通蒸汽法C、烧灼D、焚烧E、煮沸法 7、卡介苗是由何种变异而产生的（） A、形态变异 B、结构变异 C、毒力变异 D、耐药变异 E、酶活性变异 8、病原菌侵入血流并在其中大量繁殖，产生毒性代谢产物，引起严 重的全身症状，称为（） A、毒血症 B、菌血症 C、败血症 D、脓毒血症 E、 病毒血症 9、哪种动物不是微生物学检验中常用的实验动物（） A、小白鼠 B 、豚鼠C、裸鼠D、家兔E、马 10、下列哪项不是金黄色葡萄球菌的特点（） A、凝固酶试验阳性 B、产生溶血素 C、分解 甘露醇 D、产生耐热核酸酶 E、胆汁溶菌试验阳性 11、在普通琼脂平板上生长的化脓性细菌是（） A、金黄色葡萄球菌 B、乙型链球菌 C、肺炎