关于微生物的一些基本知识
1、微生物的分类
1.1 从微生物形态与结构
真核细胞型微生物细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体；胞质内有完整的细胞器（如内质网、核糖体及线粒体等）。真菌属于此类型微生物。
原核细胞型微生物细胞核分化程度低，仅有原始核质，没有核膜与核仁；细胞器不很完善。这类微生物种类众多，有细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体和放线菌。
非细胞型微生物没有典型的细胞结构，亦无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长繁殖。病毒属于此类型微生物。
1.2 从对氧的需求
好氧微生物：亦称需氧菌、需氧微生物。在有氧环境中生长繁殖，氧化有机物或无机物的产能代谢过程，以分子氧为最终电子受体，进行有氧呼吸。
厌氧微生物：厌氧性细菌anaerobic bacteria 指在无氧条件下生活的细菌。为好氧性细菌的对应词。其中，在氧存在下不能生长的细菌，特称为专性厌氧菌，如梭菌、甲烷菌、硫酸盐还原菌以及大部分光合细菌。
兼性厌氧细菌：无论有氧状态还是无氧状态都能生长发育的细菌。
1.3 微生物获得碳源与能量的方式
根据微生物对碳源和能源的需求不同，可将微生物分为下列四个营养类型：
(1) 光能自养型微生物：以CO2作为惟一或主要碳源，以无机物（如硫化氢、硫代硫酸钠等无机硫化物）作为供氢体，还原CO2合成细胞物质，并利用光能进行生长。它们都含有叶绿素等光合色素，因此能将光能转化为化学能。藻类、蓝细菌和某些光合细菌（红硫细菌、绿硫细菌）都属于光能自养微生物。
(2)化能自养型微生物：以CO2或碳酸盐作为惟一或主要碳源，以氢气、硫化氢、二价铁离子或亚硝酸盐等有机物作为电子供体，还原CO2或碳酸盐合成细胞物质，并利用无机物氧化所产生的化学能作为能源。这类微生物包括氢细菌、硫细菌、铁细菌和硝化细菌等。
(3)光能异养型微生物：不能以CO2作为惟一或主要碳源，需要以有机物作为供氢体，具有光合色素，以光作为能源。在生长时，光能异养型微生物常需要外源的生长因子。红螺菌属、红假单胞菌属和红螺微菌属的一些细菌就属于光能异养型微生物。
(4)化能异养型微生物：以有机化合物作为碳源，并利用有机物质氧化产生的化学能作为能源，对于这类微生物而言，有机物既是碳源又是能源。
2、微生物的繁殖
2.1 微生物的繁殖周期
微生物的繁殖分为四个周期：延迟期、对数期、稳定期和衰亡期。
延迟期：指微生物生长刚开始的一段时间，这段时期微生物的生长较为缓慢，是微生物培养条件的生理适应期。
对数期：在微生物培养了一定数量后，微生物的数量会大量增长，因为此时的培养皿中营养物质充足，微生物的增殖以对数的方式增加，此期间，培养皿中的微生物个数以恒定的几何级数大量增加。
稳定期：是在对数期之后，由于微生物在对数期大量消耗营养物质，从而使培养皿中的营养物质不足以支持微生物继续大量繁殖，而此时在培养皿中的微生物数保持较稳定的个数，新生和死亡几乎持平。
衰亡期：微生物数量开始下降，原因是此时培养皿中的营养物质已经不足以维持其中的微生物的继续生存，微生物由于营养物质的减少和自身副产物的增加而不断消亡。
微生物生长曲线
2.2 微生物的营养物质
水分1）细胞的重要组成成分；（2）生理生化反应的容积；（3）营养物质与矿物质在细胞内外交换的媒介；（4）控制微生物细胞内温度的变化。
碳源：细胞组成部分。
氮源：细胞组成部分。
矿物质。根据生物需要量的大小矿物质元素分为大量袁术与微量元素：（1）大量元素有：P、S、K、Mg、Ca、Na等；（2）微量元素有Cu、Zn、Mn、Mo、Co等。
生长因子。是某些微生物不能从普通的碳源与氮源物质合成，而需要另外加入才能满足机体生长需要的有机物质。包括维生素、氨基酸、嘌呤或嘧啶碱基。
2.3影响微生物生长的因素
影响微生物生长的主要因素有营养物质、水的活性、温度、pH和氧等。
2.3.1．营养物质
营养物质不足导致微生物生长所需要的能量、碳、氮源、元机盐等成分不足。
2.3.2．温度
根据微生物生长的最适温度不同，可以将微生物分为嗜冷、兼性嗜冷、嗜温、嗜热和超嗜热等五种不同的类型。它们都有各自的最低、最适和最高生长温度范围。
微生物类型生长温度／℃
最低最适最高
嗜冷微生物0以下15 20
兼性嗜冷微生物0 20-30 3；
嗜温微生物15—20 20-45 45以上
嗜热微生物45 55-65 80
超嗜热或嗜高温微生物65 80-90 100以上
温度对微生物生长的影响具体表现在：①影响酶活性，每种酶都有最适的酶促反应温度，温度变化影响酶促反应速率，最终影响细胞物质合成；②影响细胞质膜的流动性，温度高流动性大，有利于物质的运输，温度低流动性降低，不利于物质运输，因此温度变化影响营养物质的吸收与代谢产物的分泌；③影响物质的溶解度，物质只有溶于水才能被机体吸收或分泌，除气体物质以外，温度上升物质的溶解度增加，温度降低物质的溶解度降低，最终影响微生物的生长。
2.3.3．pH
微生物生长过程中机体内发生的绝大多数的反应是酶促反应，而酶促反应都有一个最适pH范围，在此范围内只要条件适合，酶促反应速率最高，微生物生长速率最大，因此微生物生长也有一个最适生长的pH范围。此外微生物生长还有一个最低与最高的pH范围，低于或高出这个范围，微生物的生长就被抑制，微生物不同生长的最适、最低与最高的pH
微生物最低PH 最适PH 最高PH
细菌3-5 6.5-7.5 8-10
酵母菌2-3 4.5-5.5 7-8
霉菌1-3 4.5-5.5 7-8 pH通过影响细胞质膜的透性、膜结构的稳定性和物质的溶解性或电离性来影响营养物
微生物基础知识试题 部门：____________ 姓名：______________ 成绩：____________ 一、填空题（每空2分，共40分） 1、微生物的形体极度小，必须借助于_____________或______________放大数， 百倍、千倍至数万倍，常用______________、______________作为测量单位。 2、微生物分布广泛，存在于_________、_______、_________、______________ 、______________之表以及______________。 3、原核细胞生物由_____________构成，真核细胞生物多数由_____________组成。 4、利用某种微生物制成_____________或____________为人类预疾病。 5、活性粒子是夹带有大量_____________的粒子，非活性粒子是单纯的_____________粒 子。水是制药企业的____________或____________，由于水的污染，将直接导入污染源。 6、热力灭菌利用高温杀微生物可分为__________________、________________。 二、多项选择题（共15分） 1、来苏（甲酚皂）2%的水溶液用于（）消毒。 A．皮肤B、设备C、容器D、空气 2、常用的消毒剂75%的乙醇用于（）消毒。 A．皮肤工具B、设备C、容器D、空气 3、消毒剂用于表面活性剂0.1-0.2%的新洁尔灭液，用于（）消毒。 A．皮肤B、工具C、地漏D、容器 4、37-40%的甲醛液8-9ml/m3( )消毒。 A．皮肤B、工具C、地漏D、室内 5、常用的灭菌器主要有（） A．高压蒸汽灭菌器B、烘箱C、紫外线灯
第一模块微生物学基础知识 第一章微生物概述 一. 什么是微生物 微生物是一类肉眼不能直接看见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能观察到的微小生物的总称。 微生物具有形体微小、结构简单；繁殖迅速、容易变异；种类繁多、分布广泛等特点。 二. 微生物的分类： 根据微生物有无细胞基本结构、分化程度、化学组成等特点，可分为三大类。1. 非细胞型微生物无细胞结构，无产生能量的酶系统，由单一核酸（DNA/RNA）和蛋白质衣壳组成，必须在活细胞内增殖。病毒属于此类微生物。 2. 原核细胞型微生物细胞核分化程度低，只有DNA盘绕而成的拟核，无核仁和核膜。这类微生物包括细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌。 3. 真核细胞型微生物细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体，能进行有丝分裂。如真菌、藻类等。 三. 微生物的作用及危害 1. 微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。 2. 微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 从药品生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。
第二章微生物的类群和形态结构 一. 细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。 1. 细菌的形态与结构 观察细菌最常用的仪器是光学显微镜，其大小可以用测微尺在显微镜下测量，一般以微米为单位。细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺形菌三类。 （1）球菌多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排列方式，分为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。 （2）杆菌形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球杆菌等。 （3）螺形菌菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆菌。 细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结构。 2. 细菌的繁殖 二分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。在分裂前先延长菌体，染色体复制为二，然后垂直于长轴分裂，细胞赤道附近的细胞质膜凹陷生长，直至形成横隔膜，同时形成横隔壁，这样便产生两个子细胞。 细菌生长速度很快，一般约20min分裂一次。若按此速度计算，细菌群体将庞大到难以想象的程度。但事实上由于细菌繁殖中营养物质的逐渐消耗，有害代谢产物的逐渐积累，细菌不可能始终保持高速度的无限繁殖。经过一段时间后，细菌繁殖速度逐渐减慢，死亡菌数增多，活菌增长率随之下降并趋于停滞。 3. 细菌的菌落 单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。细菌菌落常表现为湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致等。 二. 真菌
病原微生物学知识点 重点整理
精品资料 病原生物与免疫学记忆知识点 1.免疫的现代概念。P4 答：生物在生存、发展过程中所形成的识别“自我”与“非己”，以及通过排斥“非己”而保护“自我”维护自身生理平衡与稳定的现象。 2.固有免疫与适应性免疫的特点。 答：（1）固有免疫：非特异性，可遗传性，效应恒定性。 （2）适应性免疫：特异性（针对性），习得性，效应递增性。 3.免疫系统的功能。P5 答：（1）积极意义：免疫防御，免疫自稳，免疫监视。 （2）消极意义：免疫损伤：超敏反应，自身免疫病。 4.人体中枢免疫器官的类型及作用。P6 答：（1）骨髓：①产生所有血细胞； ②淋巴细胞产生发育的器官：B细胞分化、发育的最主要场所； （2）胸腺：T细胞分化、发育、成熟的场所。 5.人体外周免疫器官的类型。P7 答：淋巴结，脾脏，黏膜相关淋巴组织。 6.抗原的定义及双重属性。P12 答：指能与T、B细胞受体结合，启动免疫应答，并能与相应的免疫应答产物产生特异性结合的物质。 双重属性：（1）免疫原性：指抗原能够刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞的能力。 （2）免疫反应性：指抗原与其所诱导的抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合的能力。7.半抗原的概念。P12 答：仅具有免疫反应性的物质。 8.表位的概念。P13 答：决定抗原特异性的结构基础或化学集团称为表位，又称抗原决定簇。 9.影响免疫原性的主要因素。P14 答：（1）抗原的结构与生物学特性：“异物”性，分子量，复杂性，易接近性，可提呈性。（2）免疫系统的识别能力。 （3）抗原与免疫系统的接触方式。 10.T细胞依赖性抗原和T细胞非依赖性抗原的概念。P15、16 答：（1）T细胞依赖性抗原：指需在APC及Th细胞参与下才能激活B细胞产生抗体的抗原。（2）T细胞非依赖性抗原：指刺激B细胞产生抗体时不需要Th细胞辅助的抗原。
微生物学实验复习 3、培养基得配置原则： (1)目得要明确(根据微生物得种类、培养目得等)，如培养基可由简单得无机物组成，生产用培养基内可加入化学成 分不明确得天然物质，而分类、鉴定用培养基内必须加入已知化学成分得物质。 (2)营养要协调：注意各种营养物质得浓度与比例。 (3)pH要适宜：各种微生物适宜生长得pH范围不同，如细菌、放线菌与真菌得最适pH分别 为：6、5～7、5、7、5～8、5与5、0～6、0。
5、细菌培养基得配制过程？ 答：配制培养液→调节PH →分装→包扎→灭菌→搁置斜面（搁置斜面得长度不超过试管总长得1/2） 【问题与探究】 （1）培养基灭菌后，为什么需要冷却到50 ℃左右时，才能用来搁置斜面或倒平板？您用什么办法来估计培养基得温度？ 【提示】 琼脂得凝固点为40 ℃，温度太高易使培养皿破裂，低于40 ℃，培养基已凝固，倒不出，所以培养基灭菌后，需冷却到50 ℃左右时才能用来倒平板，可以用手触摸盛有培养基得试管，感觉试管得温度下降到刚刚不烫手时就可以进行倒平板了。 （2）为什么需要使试管口通过火焰？ 【提示】 通过灼烧灭菌，防止试管口得微生物污染培养基。 （3）为了能彻底灭菌，在操作过程中应注意哪些事项？ 【提示】 使用高压蒸汽灭菌锅时，加压之前一定要把原先得空气排尽，注意恒温灭菌，同时要注意高压蒸汽灭菌锅得压力(100 kPa)、温度(121 ℃)与灭菌时间(20 min)。 6、无菌操作与接种技术 (1)接种 概念：在_无 菌 条件下将微生物接入 培养基____得操作过程。 工具：玻璃刮铲、接种针与接种环。 方法：穿刺接种、斜面划线接种与平板划线接种、涂抹平板等。 （2）无菌操作 ——微生物接种技术得关键 ①培养微生物用得试管、培养皿与微生物培养基等，在接种之前都需要 灭菌_。 ②通常接种操作要在____酒精灯火焰__得附近进行。 【想一想】 在微生物得培养过程中为什么要进行无菌操作？
《微生物学》复习题 一、名词解释 1.微生物 一类个体微小，结构简单，必须借助显微镜才能看见，单细胞，简单多细胞，甚至无细胞结构的低等微生物通称 2.病原微生物 指可以侵入人体，引起感染甚至传染病的微生物，或称病原体。 3. 性菌毛 又称性毛，性丝，是一种长在细菌体表的纤细，中空，长直的蛋白质类附属物，比菌毛长，且每一个细胞仅一至少数几根。 4.菌落 是由单个细菌细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。 5.质粒 凡游离于原核生物核基因组以外，具有独立复制能力的小型共价闭合环状的dDNA分子6、荚膜 某些细菌表面的特殊结构，是位于细胞壁表面的一层松散的粘液物质。 7.芽孢 某些细菌在其生长发育后期，一定条件下，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形，厚壁，含水量极低，抗逆性极强的休眠构造。 8.菌毛 又称纤毛，伞毛，线毛或须毛，是一种长在细菌体表的纤细，中空，短直且数量较多的蛋白质类附属物。 9.细菌生长曲线 定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的试验曲线。 10.酵母菌 一般泛指能发酵糖类的各种单细胞真菌的通俗名称。 11.病毒 是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非单细胞生物”，其本质是一类含DNA或RNA的特殊遗传因子。 12、培养基 是指由人工配置的，含有六大营养要素，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。
13. 消毒 采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动植物有害的病原菌，而对被消毒对象基本无害的措施。 14. 灭菌 采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。 15. 无菌操作 用于防止微生物进入人体或其他无菌范围的操作技术。 16. 自发突变 是指物体在无人干预下自然发生的低频率突变。 17. 诱变 即诱发突变，是指通过人为的方法，利用物理，化学或生物因素显著提高基因自发突变频率的手段。 18.变异 指生物体在某种外因或内因的作用下引起的遗传物质结构或数量的改变，亦遗传型的改变。 19.营养缺陷型 指微生物等不能在无机盐类和碳源组成的基本培养基中增殖，必须补充一种或一种以上的营养物质才能生长。 20. 抗体 是高等动物体在抗原物质的刺激下，由浆细胞产生的一类能与相应抗原在体内发生特异结合的免疫球蛋白。 21. 传染 又称感染或侵染，指外源或内源性病原体在突破其宿主的三道防线（机械屏障，非特异性免疫和特异性免疫）后，在宿主的特定部位定居，生长，繁殖，产生特殊酶和毒素，进而引起一系列病理，生理性反应的过程。 22. 人畜共患病 即人和脊椎动物由同一种病原体引起的，在流行病学上密切相关的一类传染病。 23. 毒力 又称致病力，表示病原体致病能力的强弱。 24. 抗原 是一类能诱导机体发生免疫应答并能与相应抗体或T淋巴细胞受体发生特异性反应的大分子物质。 25.细胞因子 曾称淋巴因子，是一类存在于人和高等动物体中的，由白细胞和其他细胞合成的异源性
微生物基础知识考试试题 部门姓名得分 一、填空题(共30分,每空1分) 1、药品污染的主要途径、、、、。 2、引起药品腐败的微生物有、、、等。 3、常用的灭菌法有、、、 、。 4、细菌的形态有、、。 5、常用的消毒剂有、、、、等。 6、细菌生长最适宜的温度为;霉菌、酵母菌最适宜生长温度就是℃;大肠杆菌最适宜生长温度为℃。 7、形体最微小,结构最简单的微生物就是。 8、干热灭菌常用 2小时。 9、用乙醇进行消毒时,最佳浓度就是。 10、细菌细胞由、、、核质组成。 二、判断(共20分,每题2分) 1、微生物数量多、分布广,但繁殖不快,适应性不强。 ( ) 2、被微生物污染的药品可能会使其失去有效性。 ( ) 3、无菌操作的目的就是保证所生产药品不被环境中的微生物污染。 ( ) 4、热致死点越高,说明微生物对温度的抗性越强。 ( ) 5、食品中添加抑菌剂,可以杀灭含有的全部微生物。 ( ) 6、病毒形体微小,必须用普通光学显微镜才能观察形态。 ( ) 7、消毒剂品种应定期更换,防止产生耐药菌株。 ( )
8、高压蒸汽灭菌可以最为有效地除去物品内外的微生物、 ( ) 9、霉菌不属于单细胞微生物。 ( ) 三、名词解释(共30分,每题10分) 1、微生物: 3、消毒: 四、简答题(共20分) 1、微生物按结构划分的种类及微生物特点。(10分) 2、紫外线辐射与60Co灭菌的特点。(10分) 一、填空题(共30分,每空1分) 1、药品污染的主要途径空气、原辅料、水、设备与建筑、人员。 2、引起药品腐败的微生物有细菌、真菌、病毒、细菌内毒素及热原等。 3、常用的灭菌法有干热灭菌法、湿热灭菌法、气体灭菌法、滤过灭菌法、辐射灭菌法。 4、细菌的形态有球菌、杆菌、螺旋菌。 5、常用的消毒剂有乙醇、甲醛、苯扎溴铵、过氧乙酸、碘酒等。 6、细菌生长最适宜的温度为;霉菌、酵母菌最适宜生长温度就是25～28℃; 大肠杆菌最适宜生长温度为36±1 ℃。 7、形体最微小,结构最简单的微生物就是病毒。 8、干热灭菌常用160℃-170℃2小时。 9、用乙醇进行消毒时,最佳浓度就是70%-75％。 10、细菌细胞由细胞壁、细胞膜、细胞质、核质组成。 二、判断(共20分,每题2分) 1、微生物数量多、分布广,但繁殖不快,适应性不强。(×) 2、被微生物污染的药品可能会使其失去有效性。(√) 3、无菌操作的目的就是保证所生产药品不被环境中的微生物污染。(√) 4、热致死点越高,说明微生物对温度的抗性越强。(√) 5、食品中添加抑菌剂,可以杀灭含有的全部微生物。(×) 6、病毒形体微小,必须用普通光学显微镜才能观察形态。(×) 7、消毒剂品种应定期更换,防止产生耐药菌株。(√) 8、高压蒸汽灭菌可以最为有效地除去物品内外的微生物、(√) 9、霉菌不属于单细胞微生物。(√) 三、名词解释(共30分,每题10分) 1、微生物:一般地说就是指一群形态上、结构上都很简单的生物体。它们就是一群在光学显微镜或电子显微镜下放大几百倍,几千倍甚至几万倍才能瞧到的微小生物,因为人类肉眼无法觉察或辨清,故称之微生物。 2、灭菌:用物理方法或化学药品杀灭物体上所有的微生物,包括致病菌与非致病菌,繁殖体与芽孢。 3、消毒:消毒就是指杀灭病原微生物的繁殖体,但杀不死芽孢等全部微生物。 四、简答题(共20分) 1、微生物按结构划分的种类及微生物特点。(10分)
微生物的实验室培养(5年15考) (2013新课标全国Ⅱ卷、四川理综、江苏卷，北京卷、浙江、山东，天津) 一、培养基 1概念：按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质 2．营养构成? ?? ? ? 1一般都含有水、、无机盐、碳源、氮源 2还需满足不同微生物对pH 、特殊营养物质以及O 2的要求 3．培养基的种类及用途 划分 标准 培养基 的种类 特点 用途 物理性质 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体培养基 加凝固剂，如琼脂 观察微生物的运动、鉴定 固体培养基 微生物的分离与鉴定、活菌计数、 菌种保藏 化学成分 天然培养基 成分不明确的天然物质 工业生产 合成培养基 培养基成分明确 分类、鉴定 用途 选择培养基 培养基中加入某种化学物 质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生 物的生长 培养、分离出特定微生物(如在培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素；在培养金黄色葡萄球菌时，可在培养基中加入高浓度的食 盐等) 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在 培养基中加入某种指示剂 或化学药品 鉴别不同种类的微生物，如可用伊红—美蓝培养基检测饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈 深紫色，并带有金属光泽) ①自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。②含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源，也能作为能源物质，提供能量，如NH 3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。 二、无菌技术 1．消毒???? ? 特点：使用较为温和的物理或化学方法仅杀死 物体表面或内部的部分微生物不包括芽孢和孢子 常用方法：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法
微生物基础知识 1、微生物概述 （1）定义：生物界中存在的一群形体微小的生物。它的大小通常以微米来表示。 （2）范围：细菌、霉菌、酵母菌、放线菌、支原体、病毒等。（3）特点： ①形体微小、结构简单、生长繁殖快、对物质有强烈的转化作用； ②种类繁多； ③易引起变异； ④数量大、分布广、环境适应性强； （4）与人类的生活密切相关。 2、微生物的分类 微生物可分为八大类： 真菌：蘑菇、霉菌、酵母菌、念珠菌 细菌：肺炎球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌 放线菌： 支原体：肺炎支原体 衣原体：沙眼 立克次体：斑疹伤寒 螺旋体：梅毒 病毒：甲、乙肝病毒，麻疹病毒，狂犬病毒，流感病毒。
（1）按其结构、化学组成可分为： ①原核类：仅有原始核质，无核仁和核膜，细胞器很不完善。如细菌、放线菌、支原体、立克次氏体； ②真核类：细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，细胞器完整。如真菌（酵母菌和霉菌），原生动物，藻类： ③非细胞类：体积微小，能通过除尘过滤器。如病毒和朊病毒。（2）按其致病性可分为： ①病原性微生物：有致病性； ②非病原性微生物：无致病性； 3、微生物的五大共性 （1）体积小，面积大 （2）吸收多，转化快 （3）生长旺，繁殖快 （4）适应强，易变异 （5）分布广，种类多 4、影响微生物生长的因素 （1）温度：在各种影响微生物生长繁殖的因素中，温度起着最重要的作用，每种微生物都一个最适宜的生长温度，在这种温度下，增代时间最短。一般来讲，高温能杀死微生物，低温可抑制微生物生长；（2）PH值：酸碱环境对微生物的影响；
（3）氧气：真空环境可抑制需氧菌的生长； （4）光线； （5）盐类； （6）水分活性。 5、常见污染药物制剂的微生物 （1）葡萄球菌：可引起局部感染 （2）大肠杆菌：胆道和尿道感染 （3）绿脓杆菌：化脓性感染、中耳炎、肺炎 （4）枯草杆菌：结膜炎 （5）酵母菌：使糖分解，药液产生有机酸 （6）霉菌：是制剂霉坏，酸败变质 6、洁净车间内微生物在哪里？ （1）空气 （2）水 （3）人员 （4）器具 灰尘-----“微生物的飞行器” 微生物不是凭空存在的，99%的微生物都附在颗粒上。控制空气中的微粒数，就是控制了微生物数量。 灰尘、微粒具有沉降和粘附的趋势，所以同一区域内，地面是微
专题2 微生物的培养与应用 课题2.1 微生物的实验室培养 一、【课题目标】 （一）知识与技能 了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术（二）过程与方法 分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象 （三）情感、态度与价值观 形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神 二、【课题重点】 无菌技术的操作 三、【课题难点】 无菌技术的操作 四、【教学方法】 启发式教学 五、【教学工具】 多媒体课件 六、【教学过程】 （一）引入新课 在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。 （二）进行新课 1．基础知识 1．1 培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。 〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂。 【补充】培养基的类型及其应用：
1．2 培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。 〖思考2〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？ C、H、O、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97％以上。 【补充】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。 氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。 1．3 培养基除满足微生物生长的 pH 、特殊营养物质和氧气等要求。 【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。 〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖、维生素和有机氮等营养物质。 〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加维生素，培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸性，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。 活动2：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题： 1．4 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。 1．5 无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。 1．6 比较消毒和灭菌（填表） 1．7 消毒方法： （1）日常生活经常用到的是煮沸消毒法； （2）对一些不耐高温的液体，则使用巴氏消毒法（作简要介绍）； （3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果，然后使用紫外线进行物理消毒。 （4）实验操作者的双手使用酒精进行消毒； （5）饮水水源用氯气进行消毒。 1．8灭菌方法： （1）接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法； （2）玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；
微生物学基础知识 第一章微生物概述 一. 什么是微生物 微生物是一类肉眼不能直接看见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能观察到的微小生物的总称。 微生物具有形体微小、结构简单；繁殖迅速、容易变异；种类繁多、分布广泛等特点。 二. 微生物的分类： 根据微生物有无细胞基本结构、分化程度、化学组成等特点，可分为三大类。 1. 非细胞型微生物无细胞结构，无产生能量的酶系统，由单一核酸（DNA/RNA）和蛋白质衣壳组成，必须在活细胞内增殖。病毒属于此类微生物。 2. 原核细胞型微生物细胞核分化程度低，只有DNA盘绕而成的拟核，无核仁和核膜。这类微生物包括细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌。 3. 真核细胞型微生物细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体，能进行有丝分裂。如真菌、藻类等。 三. 微生物的作用及危害 1. 微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。 2. 微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 从药品生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。 第二章微生物的类群和形态结构 一. 细菌 细菌是一类细胞细而短、结构简单、细胞壁坚韧，以二分裂方式无性繁殖的原核微生物，分布广泛。 1. 细菌的形态与结构 观察细菌最常用的仪器是光学显微镜，其大小可以用测微尺在显微镜下测量，一般以微米为单位。细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺形菌三类。 （1）球菌多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排列方式，分为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。
微生物的实验室培养基础梳理 一、微生物的营养 1．碳源 2．氮源 【注意】 ①对许多微生物来说，既可利用无机含氮化合物作为氮源，也可利用有机含氮化合物作为氮源。 ②固氮微生物可以利用氮气作为氮源。 ③铵盐、硝酸盐等既可作为微生物最常用的氮源，也可作为某些化能自养微生物的能源物质。 ④自养微生物与异养微生物类型的划分主要是依靠能否以CO2作为生长的主要或唯一的碳源，而不是由氮源决定。 3．水 水是微生物生命活动必需的一种重要物质。 4．无机盐 无机盐对微生物的生理功能有：构成微生物细胞的组成成分；作为酶的组成成分，也是某些酶的激活剂；调节和维持微生物细胞的渗透压和pH；某些无机盐具有特殊功能，如化能自养细菌的能源物质NH4+等。 5．生长因子 6．其他条件 培养微生物时还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 二、培养基 1．培养基的概念 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供适合其生长繁殖的营养基质。 2．配制原则 目的要明确；营养要协调；pH要适宜；要经济节约。 3．培养基的类型 （1）按物理性质分：
（2）按化学性质分： （3）按功能分： ①全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染 外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染。 ②培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。可以用手触摸盛有培养 基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板。操 作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基。 ③平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒 置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 ④在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生 物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。 三、无菌技术 1．无菌技术的主要内容 ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒； ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行； ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 2．实验室常用的消毒方法 煮沸消毒；化学药物消毒；紫外线消毒。 3．实验室常用的灭菌方法 ①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精 灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或 瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；
微生物检验技术基础知识-4-2 (总分：39.50，做题时间：90分钟) 一、单项选择题(总题数：23，分数：23.00) 1.不属于细菌合成代谢产物的是 ?A．热原质 ?B．维生素 ?C．抗生素 ?D．甲酸 ?E．细菌素 （分数：1.00） A. B. C. D. √ E. 解析：细菌利用分解代谢中的产物和能量不断合成菌体自身成分，同时还合成一些在医学上具有重要意义的代谢产物，包括热原质、毒素与侵袭性酶、色素、抗生素、细菌素和维生素。 2.O139群霍乱弧菌的暴发最早出现于 ?A．北非 ?B．南非 ?C．北美洲 ?D．南亚 ?E．亚洲西部 （分数：1.00） A. B. C. D. √ E. 解析：1992年10月印度和孟加拉国等南亚国家又发现了一个新的霍乱弧菌血清群(即O139群)。 3.兔肠段结扎试验检测LT，阳性结果判断标准为每立方厘米肠段的液体量大于 ?A．1ml ?B．1.5ml ?C．2ml ?D．2.5ml
?E．5ml （分数：1.00） A. √ B. C. D. E. 解析：LT是不耐热肠毒素，可用兔肠段结扎试验检测，可使兔毛细血管通透性增加，肠液分泌大量增加，试验每立方厘米肠段的液体量＞1ml为阳性。 4.从脑脊液中分离培养，能在血平板上生长的细菌最可能是 ?A．脑膜炎奈瑟菌 ?B．军团菌 ?C．变形杆菌 ?D．伤寒沙门菌 ?E．金黄色葡萄球菌 （分数：1.00） A. √ B. C. D. E. 解析：脑膜炎奈瑟菌为流行性脑脊髓膜炎(流脑)的病原菌，引起化脓性脑脊髓膜炎，可从脑脊液中分离培养，而且培养条件要求较高，普通培养基上不生长，在含有血清或血液的培养基上方能生长。 5.我国研制的流行性出血热细胞培养灭活疫苗有 ?A．6种 ?B．3种 ?C．5种 ?D．2种 ?E．1种 （分数：1.00） A. B. √ C. D. E.
人员卫生和微生物 基础知识培训 一、第二十九条 ?所有人员都应当接受卫生要求的培训，企业应当建立人员卫生操作规程，最大限度地降低人员对医疗器械生产造成污染的风险。 一、第二十条 ?凡在洁净区工作的人员（包括清洁工和设备维修工）应当定期培训，使无菌医疗器械的操作符合要求。培训的内容应当包括卫生和微生物方面的基础知识。未受培训的外部人员（如外部施工人员或维修人员）在生产期间需进入洁净区时，应当对他们进行特别详细的指导和监督 法规要求 ?第三十条人员卫生操作规程应当包括与健康、卫生习惯及人员着装相关的内容。生产区和质量控制区的人员应当正确理解相关的人员卫生操作规程。企业应当采取措施确保人员卫生操作规程的执行。 法规要求 ?第三十一条企业应当对人员健康进行管理，并建立健康档案。直接接触医疗器械的生产人员上岗前应当接受健康检查，以后每年至少进行一次健康检查 法规要求 ?第三十二条企业应当采取适当措施，避免体表有伤口、患有传染病或其他可能污染医疗器械疾病的人员从事直接接触医疗器械的生产。 法规要求 ?体表伤口 ?患有传染病： 呼吸道传染病：流行性感冒，肺结核，腮腺炎，麻疹，百日咳等（空气传播） 体表传染病：血吸虫病，沙眼，狂犬病，破伤风，淋病等（接触传播） 法规要求 ?其他可能污染医疗器械疾病： 皮癣、真菌感染的皮肤病等 法规要求 ?第三十三条参观人员和未经培训的人员不得进入—— 生产区和质量控制区， 特殊情况确需进入的，应当事先对个人卫生、更衣等事项进行指导。 法规要求 ?第三十五条进入洁净生产区的人员不得化妆和佩带饰物。 一、人员卫生 ?人体是一个永不休止的污染媒介。 ?人是药厂中最不清洁的成份，是最大的污染源。?人类是第一的(主要)污染源。 ?人们每24小时就会脱落皮肤表面上最外层的皮细胞。这等于每天高达109（1000，000，000）=10亿个细胞的数量。 人带来的污染来源 ?人的头发和皮肤 ?液滴 ?衣着 ?化妆品和珠宝手饰 ?人的操作 （生产过程中人员不当的操作所引起的混杂和误差） 人是最大的污染源 人体内外表面 广泛存在微生物 未洗的手清水漂洗的手 洗净的手洗净的手 (用皂液) (用消毒剂) ?工作服及其质量应当与生产操作的要求及操作区的洁净度级别相适应，其式样和穿着方式应当能够满足------ ?保护产品和人员的要求。 解决方法 ?人的头发和皮肤 清洗、包裹 法规要求：附录第二十四条 ?正确穿戴洁净服，必须包盖全部头发、胡须及脚部，并能阻留人体脱落物；口罩要罩住口鼻；洁净鞋应能遮盖住全脚。并定期按规定清洗。离开洁净室，必须脱掉洁净服装。 更衣 头发应完全包在帽子内 填写批记录后，手套应消毒 微生物的概念 ?是所有形体微小，单细胞或个体结构较为简单的多细胞，甚至没有细胞结构的低等生物的通称。 微生物五大共性 ?体积小，面积大； ?吸收多，转化快； ?生长旺，繁殖快； ?适应强，易变异； ?分布广，种类多； 微生物的分类 *微生物类群十分庞杂，主要包括细菌、放线菌、真菌（霉
食品微生物学检验GB 4789 系列知识点汇总 GB 4789.1-2016 食品卫生学检验总则 一、2016版总则变更内容 1.删除了标准中的英文名称、起草单位变更为中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局。 2.删除了规范性引用文件。 3.修改了实验室基本要求： 微生物专业教育或培训经历（如生物学、植 物学、医学、食品科学与工程、食品质量与安全等与微 生物有关的相关专业），具备相应的资质（应有岗位上岗 证、生物安全上岗证和压力容器上岗证），能够理解并正 确实施检验。 ①人员修改为检验人员实验室生物安全操作和消毒知识（相关标准及培训， 如GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求、消毒技术 规范（2002））。 品。 确保自身安全。
有颜色视觉障碍的人员不能从事涉及辨色的实验（即无颜 色视觉障碍）。 ②环境与设施--突出温度、湿度和洁净度。 生物危害程度应与实验室生物防护水平相适应: 灭的微生物，如天花病毒。 间传播如霍乱弧菌。 病原微生物分类 沙门氏菌、单增李斯特氏菌。 第四类：通常不会引起人或动物疾病的微生物。 BSL-1）：操作第四类病原微生物（属于正压，适用 ） 实验室生物安全级别BSL-2）：操作第三类病原微生物（属于负压，适用 II级生物安全 ） BSL-3）：操作第二类病原微生物
四级（BSL-4）：操作第一类病原微生物 消毒：是杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其中的孢子。 灭菌：是杀死和去除所有微生物及其中孢子的过程。 蒸法消毒） 消毒剂表面消毒 微生物实验 高压灭菌 干热灭菌（180℃1h或170℃2h） 培养基和试剂灭菌 过滤除菌 紫外线消毒法：紫外灯管放射一定波长，破坏细菌或病毒的DNA和RNA，使他们丧失生存能力和繁殖能力，从而达到灭菌目的。紫外线的特点是对芽孢和营养细胞都能起作用，但细菌芽孢和霉菌芽孢对其抵抗力大，且紫外线穿透力极低，所以只能用于表面灭菌，对固体物质灭菌不彻底。
微生物学知识点 《微生物学》复习题 一、名词解释 1。微生物 一类个体微小,结构简单，必须借助显微镜才能看见，单细胞,简单多细胞，甚至无细胞结构的低等微生物通称 2。病原微生物 指可以侵入人体，引起感染甚至传染病的微生物,或称病原体。 3。性菌毛 又称性毛，性丝，是一种长在细菌体表的纤细，中空,长直的蛋白质类附属物，比菌毛长，且每一个细胞仅一至少数几根. ...文档交流仅供参考... 4。菌落 是由单个细菌细胞或一堆同种细胞在适宜固 体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落. ...文档交流仅供参考... ５.质粒 凡游离于原核生物核基因组以外,具有独立复制能力的小型共价闭合环状的dＤＮA分子 6、荚膜 某些细菌表面的特殊结构,是位于细胞壁表面的一层松散的粘液物质。 7.芽孢
某些细菌在其生长发育后期，一定条件下，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形，厚壁，含水量极低，抗逆性极强的休眠构造。...文档交流仅供参考... 8。菌毛 又称纤毛，伞毛，线毛或须毛，是一种长在细菌体表的纤细,中空,短直且数量较多的蛋白质类附属物. 9。细菌生长曲线 定量描述液体培养基中微生物群体生长规律的试验曲线。 10．酵母菌 一般泛指能发酵糖类的各种单细胞真菌的通俗名称。 11。病毒 是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非单细胞生物”,其本质是一类含ＤNA 或RNＡ的特殊遗传因子。...文档交流仅供参考... 12、培养基 是指由人工配置的,含有六大营养要素,适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料.１3．消毒 采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动植物有害的病原菌,而对被消毒对象基本无害的措施。...文档交流仅供参考... １4。灭菌 采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施.
微生物实验室检验的基本知识 食品检验的基础知识 1、检验用水的要求 食品分析检验中绝大多数的分析是对水溶液的分析检测，因此水是最常用的溶剂。在实验室中离不开蒸馏水或特殊用途的纯水，在未特殊注明的情况下，无论配制试剂用水，还是分析检验操作过程中加入的水，均为纯度能满足分析要求的蒸馏水或去离子水。蒸馏水可用普通的生活用水经蒸馏汽化冷凝制成，也可以用阴阳离子交换处理的方法制得。特殊项目的检验分析对水的纯度有特殊要求时，一般在检验方法中注明水的纯度要求和提纯处理的方法。 为保证纯水的质量能符合分析工作的要求，对于所制备的每一批纯水，都必须进行质量检测。一般应达到以下标准： ①用电导仪测定的电导率小于或等于530μs/cm（25℃）。 ②酸度呈中性或弱酸性，PH＝5.0~7.5（25℃）.可用精密pH试纸、酸度计测定，也可用如下指示剂法测定：在10 ml水中加入2~3滴1g/L甲基红指示剂，摇匀呈黄色不带红
色，则说明水的酸度合格，呈中性；或在10 ml水中加入4~5滴1g/L溴百里酚蓝指示剂，摇匀不呈蓝色，则说明水的酸度合格，呈中性。 ③无有机物和微生物污染。检测方法为：在100 ml水中加入2滴0.1g/L高锰酸钾溶液煮沸后仍为粉红色。 ④钙、镁等金属离子含量合格。检测方法为：在10 ml 水样中加入2 ml氨-氯化铵缓冲溶液（PH＝10），2滴5g/L 铬黑T指示剂，摇匀。溶液呈蓝色表示水合格，如呈紫红色则表示水不合格。 ⑤氢离子含量合格。检测方法为：在10 ml水样中加入数滴硝酸，再加入4滴10g/L的AgNO3溶液，摇匀。溶液中无白色浑浊物表示水合格，如有白色浑浊物则表示水不合格。 2、检验用试剂的要求 化学试剂是符合一定质量要求标准的纯度较高的化学物质，它是分析工作的物质基础。试剂的纯度对分析检验很重要，它会影响到结果的准确性，试剂的纯度达不到分析检
微生物学基础知识试题(答案) 部门姓名成绩 一. 判断题（每题2分，共20分） 1. 常用于消毒的乙醇浓度为70%~75%。（√） 2. 酵母菌为多细胞真菌。（×） 3. 洁净室（区）的工作人员不能化妆，但可以戴戒指和项链。（×） 4. 消毒可以杀灭物体上的所有微生物，而灭菌只杀死物体上的病原微生物。（×） 5. 微生物数量多、分布广，但繁殖不快，适应性不强。（×） 6. 药品中存在微生物并不一定会引起药品变质。（×） 7. 洁净区中的所有操作均不应大幅度或快速动作。（√） 8. 一个不锈钢托盘擦拭得非常光亮，因此它不存在微生物污染。（×） 9.药品中添加抑菌剂，可以杀灭含有的全部微生物。（×） 10.多数细菌的最适培养温度时30~35℃. （√） 二. 填空题（每空2分，共40分） 1. 细菌按其形态不同，主要分为球菌、杆菌和螺旋菌三类，多以二分裂方式繁殖。 2. 洁净室（区）应定期消毒。使用的消毒剂不得对设备、物料和成品产生污染。 消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。 3. 细菌的生长曲线包括四个生长时期为延滞期、对数期、稳定期、衰亡期。 4. 形体最微小，结构最简单的微生物是病毒。 5. 微生物生长繁殖所需的营养物质主要有水、碳源、氮源、能源、无机盐和生长因子等。 6.酵母菌最最主要的繁殖方式是芽殖。 7. 大肠杆菌在合适的生长条件下， ~20 分钟便可繁殖一代 三、选择题（每题2分，共16分） 1 不属于细胞生物的微生物（ B ） A、细菌 B、病毒 C、真菌 D、放线菌 2 抗生素产生菌中，其主要产生菌是（ C ） A、真菌 B、酵母菌 C、放线菌 D、病毒
微生物培养与应用 微生物培养技术： 一、培养基：1、培养基按物理性质不同，可分为培养基和培养基；其中，用于菌种鉴定时生长菌落时，该用培养基。按功能可分为培养基和培养基；其中，筛选菌种时可用培养基，菌种鉴定时可用培养基。 2、培养基的化学成分一般都含有_______，_______，_____,_________四类营养成分；此外还需满足微生物生长对___ _，______和_______ 等要求 二、无菌技术： （1）消毒①特点：使用较为＿＿＿的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分＿＿＿＿（不包含芽孢和孢子） ②常用方法：煮沸消毒法，＿＿＿＿＿＿，化学试剂消毒 （2）灭菌 ①特点：指使用强烈的理化因素杀死物体内外＿＿＿＿＿＿，包括芽孢和孢子②常用方法：＿＿＿＿灭菌，＿＿＿＿灭菌，＿＿＿＿灭菌 （3）灭菌方法： ①接种环、接种针、试管口等使用___________法；对接种环灭菌时要用酒精灯火焰的_________层灼烧。 ②玻璃器皿、金属用具等使用________灭菌法，所用设备是； ③培养基、无菌水等使用___________灭菌法，所用设备是。检验培养基是否合格方法：可取随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，观察是否有菌落。三．实验操作 1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 （1）方法步骤：_______，_______，_____ ,_________，_______ 。（按顺序写）倒平板时，使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是防止：。平板冷凝后，将平板倒置的原因是：。 2、（1）微生物接种的方法最常用的是_______________ 和___________ 整个操作过程都要在＿＿＿＿旁完成 ①平板划线法是通过_______在_______________表面连续划线的操作。将聚集的菌种_______ 分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是_______。菌落的特征包括形状、大小、隆起程度、颜色等方面 ②稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的_______ ，然后将不同稀释度的菌液分别_______到培养基的表面，进行培养。分为_______________ 和_______两步。 ③用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成个细胞，从而能在培养基表面形成，以便于纯化菌种。 在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 培养：接种后的培养皿放入内培养 3、菌种保藏（1）临时保藏 ①操作：采用＿＿＿＿培养基，＿＿＿＿长成后，放入＿＿＿冰箱中保藏，以后3~6个月，转移一次新的培养基 ②缺点：保存时间＿＿＿，菌种易被＿＿＿或产生变异（2）长期保存法：＿＿＿＿法，放在＿＿＿下保存。
【微生物学检验】知识点整理（第一部分）简述致病菌引起全身感染后，常见的几种类型？ 答：①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症 试述构成细菌侵袭力的物质基础。 答：①荚膜②黏附素③侵袭性物质 简述病原菌感染机体后，机体如何发挥抗菌免疫功能？ 答：首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障结构，血脑屏障，胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。7-10天后，机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌 简述细菌耐药性产生的主要机制。 答：①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力，在这种压力的作用下，原来只占很少比例的耐药菌株被保留下来，并不断扩大。 举例说明细菌命名的原则。 答：细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。一个细菌种的学名由两个拉丁字组成，属名在前，用名词，首字母大写；种名在后，用形容词，首字母小写；两者均用斜体字。中文译名种名在前，属名在后。如Mycobateriumtuberculosis（结核分枝杆菌）。属名亦可不将全文写出，只用第一个大写字母代表，如 如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌？并确定其有无致病性。 答：①直接镜检，经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌，可初步报告疑为葡萄球菌，需进一步分离培养鉴定。②分离培养：血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定，若无细菌生长，需连续观察7天，并以血平板确定有无细菌的生长。脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板，37℃过夜，可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。金葡菌菌落周围有透明溶血环。③试验鉴定：血浆凝固酶试验，甘露醇发酵试验，耐热核酸酶试验，肠毒素测定，SPA检测。致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环，血浆凝固酶试验阳性，甘露醇发酵试验阳性，耐热核酸酶试验阳性，SPA检测有A 蛋白的存在。 什么是不耐热肠毒素（LT）？它的物理性质、基本结构、致病机理及与霍乱毒素（CT）的关系如何。答：LT是肠产毒型大肠杆菌产生的致病物质，因对热不稳定，故称为不耐热肠毒素。其65℃30min可被破坏。LT分为LT-Ⅰ和LT-Ⅱ，LT-Ⅱ与人类疾病无关，LT-Ⅰ是引起人来胃肠炎的致病物质。其结构包括1个A亚单位和5个B亚单位，其中A亚单位是毒素的活性部分。B亚单位与肠粘膜上皮细胞表面的GM1神经节苷脂结合后，使A亚单位穿越细胞膜与腺苷环化酶作用，令胞内ATP转变为cAMP。胞质内cAMP水平增高后，导致肠粘膜细胞内的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔，同时钠的吸收减少，导致可持续几天的腹泻。LT-Ⅰ与霍乱肠毒素两者间的氨基酸的同源性达75%，他们的抗原高度交叉。 什么是O157：H7大肠杆菌？其致病物质和所致疾病是什么？ 答：O157：H7为肠出血性大肠杆菌的一个血清型，为出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原体。其致病物质是其表达的志贺毒素。 如何根据O抗体和H抗体的变化特点判断肥达试验的结果？ 答：若O、H凝集效价均超过正常值，则肠热症的可能性大，若两者均低，肠热症的可能性小，若O不高H高，可能预防接种或非特异性回忆反应，若O高H不高，则可能感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。 对肠热症患者进行微生物学检查时标本采集应注意什么？