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微生物复习资料

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绪论

一、填空题

1 世界上第一个看见并描述微生物的人是荷兰商人列文虎克,他的最大贡献是利用自制的单式显微镜发现了微世界。

2 微生物学发展的奠基者是法国的巴斯德,而被称为细菌学奠基者是德国的科赫。

3 微生物的五大共性指:体积小面积大、吸收快转化多、生长旺繁殖快、适应强易变异、分布广种类多,其中最主要的共性应是:体积小面积大。(课文中给出的特点是1、大多数微生物肉眼难以直接观察2、微生物通常以独立的增值单位存在3、微生物结构简单4、微生物生长快速5、微生物几乎无所不在6、微生物的研究使用相同的方法)因为有一个巨大的营养物质吸收面,代谢废的排泄和环境信息的交换面,并由此产生其他4个共性。

4 微生物包括:无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒;具原核细胞结构的真细菌、古生菌、具真核细胞结构的真菌,单细胞藻类、原生动物等。

二、选择题

1、微生物是一些个体微小,构造简单的低等生物的总称,它们的大小一般小于( C )。

A、1cm

B、1mm

C、0.1mm

D、1μm

2、当今,一种新的瘟疫正在全球蔓延,它是由病毒引起的(C )。

A、鼠疫

B、天花

C、艾滋病

D、霍乱

3、人类已消灭的第一个传染病是(C )。

A、麻疹

B、脊髓灰质炎

C、天花

D、水痘

三、判断题

1.微生物所包括的都是一些小型、简单的单细胞生物(×)

2.17世纪后期,微生物学先驱者列文虎克用自制的只有一块小透镜的单式显微镜最先观察到了细菌(√)

3.巴斯德是细菌学的奠基人(×)

4.巴斯德曾用著名的曲颈瓶试验推翻了当时流行的生命起源于生命的胚种学即生源论。(√)

第一章原核生物的相态、构造和功能

1.细菌的基本形态有(球状)、(杆状)和(螺旋状)。

2.根据分裂方式及排列情况,球菌分(单球菌)、(双球菌)、(四联球菌)、(八叠球菌)、链球菌)和(葡萄球菌)等。

3.螺旋状的细菌有三类不同形态,若螺旋不满一周者称(弧菌),小而坚硬,螺旋数在2-6环间者,称(螺菌),而螺旋数多,体长而柔软者,则称(螺旋体)。

4.细菌的一般构造有(细胞壁)、细胞膜、细胞质和(核区)等,特殊构造有(鞭毛)、菌毛、(性菌毛)和(糖被)等。

5.革兰氏阳性细菌的细胞壁成分为(肽聚糖)和(磷壁酸),革兰氏阴性细菌细胞壁分为内外两层,内层成分是(肽聚糖),外层称外膜,化学成分为(脂多糖)、(磷脂)若干(外膜蛋白)。

6.在革兰氏阳性细胞细胞壁的肽聚糖成分中,肽包括(肽桥)和(肽尾)两种,聚糖则包括(N—乙酰葡糖胺)和(N—乙酰胞壁酸)两种糖。

7.G+细菌细胞壁特有的成分是(磷壁酸),G-细胞的则是(外膜)。

8.G-细菌的鞭毛是(基体),以及(钩形鞘),(鞭毛丝)3部分构成。

9.细菌的鞭毛具有(运动)功能,菌毛具有(附着于物体表面)功能,性菌毛具有(传递遗传物质)功能。

10.脂多糖由(类脂A)、 (核心多糖)和(O—特异侧链)三部分组成。

11.人为去尽细胞壁的细菌称为(原生质体) ,未除尽壁的细菌常称为(球状体) ,在实验室中发生自发缺壁突变的细菌被称为(L型细菌) ,而自然界中存在的稳定型无壁原核微生物则是(支原体) 。

12.能与非豆科植物根部进行共生固氮的放线菌是(弗兰克氏菌属) 。

13.细菌最常见的繁殖方式是裂殖,包括(二分裂) 、 (三分裂)和(复分裂)三种形式,少数细菌还能进行(芽殖) 。14.放线菌是一类呈菌丝生长和以孢子繁殖的原核生物,其菌丝(基内菌丝) 、 (气生菌丝)和(孢子丝)三种类型。

15.蓝细菌细胞有多种特化形式以执行不同的生理功能,如执行固氮功能的(异形胞) ;如执行抵御不良环境功能的(静息孢子) ;执行繁殖功能的(链丝段)和内孢子等。

16.支原体是一类(无细胞壁) 、介于(独立生活)和细胞内寄生生活之间的最小型原核生物,其中有一类专门感染植物的支原体,称为(类支原体或植原体) 。

17.立克次氏体是一类专性(寄生)于真核细胞内G-的原核生物。

18.具有感染力的衣原体细胞称(原体) ,而无感染力的细胞则称(始体) 。

选择题

1、在下列微生物中,细胞壁不含肽聚糖的是(C)。

A、真细菌

B、放线菌

C、古生菌

D、蓝细菌

2、在自然界存在的各种形态的原核生物中,最多见的形态是(B)。

A、球状

B、杆状

C、螺旋状

D、分支丝状

3、在G+细菌细胞壁中缺乏的化学成分是(D)。

A、肽聚糖

B、磷壁酸

C、类脂质

D、蛋白质

4、在G-细菌细胞壁中缺乏的化学成分是(B)。

A、肽聚糖

B、磷壁酸

C、类脂质

D、蛋白质

5、用溶菌酶水解G-细菌的细胞壁通常可获得一种称为(D)的缺壁细胞。

A、支原体

B、L型细菌

C、原生质体

D、球状体

6、G-细菌的LPS是内毒素的物质基础,其毒性位于(A)上。

A、类脂A

B、核心多糖

C、特异侧链

D、脂蛋白

7、除支原体外,能形成“油煎蛋”状菌落的细菌还有(C)。

A、原生质外

B、球状体

C、L细菌

D、衣原体

8、异染粒在细菌中的生理功能是(D)。

A、碳源贮藏物

B、氨源贮藏物

C、能源贮藏物

D、磷元素贮藏物

9、细菌芽孢的抗逆性是多方面的,但是突出的是(A)。

A、抗热

B、抗干旱

C、抗化学药品

D、抗辐射

10、棕色固氮菌等固氮菌在不良的环境条件下,会浓缩成一个圆形的称为孢囊的休眠体,它的主要功能是(D)。

A 抗热

B 抗化学药物

C 抗辐射

D 抗干旱

11、在某些蓝细菌中,会分化出一种能固氮的特殊细胞,称作(D)。

A、静息孢子

B、链丝段

C、内孢子

D、异形胞

12、以下四类微生物中,有一类可形成微小的、特征明显的“油煎蛋状”的菌落种类,它是(A)

A、支原体

B、立克次氏体

C、衣原体

D、螺旋体

13、肽聚糖种类的多样性主要反映在(A)结构的多样性上。

A、肽桥

B、黏肽

C、双糖单位

D、四肽尾

14、磷壁酸是(D)细菌细胞壁上的主要成分。

A、分杆杆菌

B、古生菌

C、G—

D、G+

15、在G—细菌肽聚糖的四肽尾上,有一个与G+细菌不同的称作(C)的氨基酸。(m-DAP)

A、赖氨酸

B、苏氨酸

C、二氨基庚二酸

D、丝氨酸

16、苏玉金芽孢杆菌主要产生4种杀虫毒素,其中的件孢晶体属于(D)。

A、α毒素

B、β毒素

C、毒素

D、δ毒素

17、固氮菌所特有的休眠体构造称(A)。

A、孢囊

B、外生孢子

C、黏液孢子

D、芽孢

名词解释:

1.横割分裂:

2.磷壁酸:是结合在G+细菌细胞壁上的一种酸性多糖,主要成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸。

3.脂多糖(LPS):是位于G—细菌细胞壁所特有的结构,它位于壁的最外层,化学成分为脂多糖、磷脂和若干外膜蛋白。

4.荚膜:

5.L型细菌:指那些实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺损菌株。(自发缺壁突变)

6.原生质体:指在人为条件下,用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后,所得到的仅有一层细胞膜包裹的圆球状渗透敏感细胞

7.聚β—羟丁酸(PHB):是一种存在于许多细菌细胞质内属于类脂性质的碳源类贮藏物,不溶于水,而溶于氯仿,可用尼罗蓝或苏丹黑染色,具有贮藏能量、碳源和降低细胞内渗透压等作用。

8.异染粒:是无机偏磷酸的聚合物,分子呈线状,具有贮藏磷元素和能量以及降低细胞渗透压等作用。

9.孢囊:是棕色固氮菌等一些固氮菌在外界缺乏营养的条件下,由整个营养细胞外壁加厚、细胞失水而形成的一种抗干旱但不抗热的圆形休眠体。

10.糖被:包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质。

11.菌落:是在固体培养基上(内)以母细胞为中心的一堆肉眼可见的,有一定形态、构造等特征的子细胞集团。

12.芽孢:某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量低、抗逆性强的休眠构造。

13.伴胞晶体:少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体,成为伴胞晶体。

14.H抗原:

15.基内菌丝:当放线菌的孢子落在固体基质并发芽后,就不断伸长、分枝并以放射状向基质表面和内层扩展,形成大量色浅、较细的具有吸收营养和排泄代谢废物功能的基内菌丝。

16.气生菌丝:在基内菌丝上不断向空间方向分化出颜色较深、直径较粗的分枝菌丝,这就是气生菌丝。

17.始体:原体经空气传播,一旦遇合适的新宿主,就可通过吞噬作用进入细胞,在其生长中转化成无感染力的细胞,称为始体。

18.异形胞:是存在于丝状生长种类中的形大、壁厚、专司固氮功能的细胞,数目少而不定,位于细胞链的中间或末端。

19.静息孢子:是一种长在细胞链中间或末端的形大、壁厚、色深的休眠细胞,富含贮藏物,能抵御干旱等不良环境。

20.原体:具有感染力的细胞。

简答题:

1、从结构和成分两方面比较G+细菌G-细菌细胞壁的异同?

2、革兰氏染色分为哪几个步骤及其机制?

3、什么是芽孢?试述芽孢研究意义及抗逆性机制。

4、四种缺壁细菌的形成原因,制备方法、程度等方面的比较,并举出实例?

5、放线菌是革兰氏阳性细菌还是阴性细菌?它的主要繁殖方式是什么?一般分布在哪?

6、简述蓝细菌细胞的几种特化形式?异形胞静息孢子链丝段内孢子

7、支原体、衣原体和立克次氏体的主要特征比较?

第二章真和微生物的形态、构造和功能

一、填空题

填空题

1.真核生物包括的主要类群有(原生动物)、单细胞藻类和(真菌)。

2.真菌细胞壁合成以多糖为主,它有两种形式:一是微纤维形式,成分包括(纤维素)和(几丁质)等,另一是无定形基质形式,成分包括(甘露聚糖)和(葡聚糖)等。

3.真核微生物执行运动功能的细胞器主要是“(9+2)”型鞭毛,它由(鞭杆)、(基体)和(过渡区)三部分组成。

4.酵母菌一般具有以下五个特点:(个体一般以单细胞状态存在)、(多数营出芽繁殖)、(能发酵糖类)、(细胞壁常含甘露聚糖)和(常生活在含糖较高、酸度较大的水生环境中)。

5.酿酒酵母的细胞壁呈三明治状、外层为(甘露聚糖)、内层为(葡聚糖)、中间层为(蛋白质);细胞壁

经(蜗牛消化酶)水解后可制成酵母原生质体。

6.酵母菌的繁殖方式多样,包括无性为(芽殖)、(裂殖)、(产无性孢子)和有性的(产子囊孢子)等。

7.酵母菌的无性孢子有(节孢子)、(掷孢子)和(厚垣孢子)等数种。

8.霉菌的营养菌丝可分化出多种执行不同生理功能的细胞形式,如(假根)、(匍匐菌丝)、(吸器)、(附着胞)和(附着枝)、(菌核)、(菌索)、(菌环)等。

9.霉菌所具有的结构复杂,产无性孢子的子实体有(分生孢子器)、(分生孢子座)和(分生孢子盘)三种类型。

二、选择题

1、在酵母菌细胞壁的4种成分中,赋予其机械强度的主要成分是(C)。

A、几丁质

B、蛋白质

C、葡聚糖

D、甘露聚糖

2、高等陆生真菌细胞壁的主要成分以(D)为主。

A、纤维素

B、葡聚糖

C、甘露聚糖

D、几丁质

3、在“9+2”型鞭毛微管二联体的A亚纤维上,会伸出内外2条动力蛋白臂,其性质是(A)。

A、ATP酶

B、微管

C、肌动蛋白丝

D、中间丝

4、“9+2”型鞭毛的基体,其横切面在电子显微镜下呈(D)。

A、“9+2”型

B、“9+1”型

C、“9+3”型

D、“9+0”型

5、在真菌菌丝尖端的细胞中,细胞核常(C)。

A、有2个

B、有1个

C、找不到

D、有多个

6、存在于真核微生物细胞中溶酶体内的水解酶,其作用的最适PH一般都在(D)左右。

A、PH8

B、PH7

C、PH6

D、PH5

7、只存在于厌氧性原生动物和真菌鞭毛基体附近的一种细胞器是(D)。

A、液泡

B、膜边体

C、几丁质酶

D、氢化酶体

8、单细胞蛋白(SCP)主要是指用(D)细胞制成的微生物蛋白质。

A、藻类

B、蓝细菌

C、霉菌

D、酵母菌

9、2um质粒仅存在于少数酵母菌如(C)。

A、各种酵母菌

B、假丝酵母

C、酿酒酵母

D、曲霉菌

10、制备酵母菌的原生质体可用(D)处理。

A、溶菌酶

B、纤维素酶

C、几丁质酶

D、蜗牛消化酶

11、酵母菌细胞的直径约比细菌的直径大(C)。

A、2倍

B、5倍

C、10倍

D、100倍

12、真酵母进行有性生殖时产生(C)。

A、掷孢子

B、接合孢子

C、子囊孢子

D、芽孢子

13、大多数蕈菌属于(D)。

A、接合菌类

B、藻状菌类

C、子囊菌类

D、担子菌类

14、蕈菌菌丝中双核细胞的大量繁殖须借助(B)。

A、减数分裂

B、锁状联合

C、准性生殖

D、有丝分裂

一、名词解释:

1、菌丝:霉菌营养体的单位。

2、菌丝体:由许多菌丝相互交织而成的一个菌丝集团。

3、菌丝球:真菌在液体培养基中进行通气搅拌或振荡培养时,往往会产生菌丝球的特殊构造,有利于氧的传递、营养物和代谢废物的输送。

4、真酵母:具有有性生殖的酵母菌称为“真酵母”。

5、假酵母:只进行无性繁殖的酵母菌称为“假酵母”。

6、芽痕:成熟后,芽细胞和母细胞分离在母细胞上留下一个芽痕。

7、蒂痕:在芽细胞上留下一个生痕或称蒂痕。

8、真菌丝:如果细胞相连,且其间的横隔面积与细胞直径一致,则这种竹节状的细胞串就称为真菌丝。

9、假菌丝:如果长大的子细胞与母细胞不立即分离,其间仅以狭小的面积相连,这种藕节状的细胞串称为假菌丝。

10、膜边体:又称须边体或质膜外泡,为许多真菌所特有,是一种位于菌丝细胞四周的质膜与细胞壁间、由单层膜包裹的细胞器。

11、几丁质酶体:又称壳体,是一种活跃于各种真菌菌丝体顶端细胞中的微小泡囊,内含几丁质体,其功能是把其中含有的酶源源不断的运送到菌丝尖端细胞壁表面,使该处不断合成几丁质微纤维,从而保证菌丝不断向前延伸。

12、氢化酶体:

13、子实体:

14、子囊果:

二、简答题:

1、酵母菌的菌落特征。

2、霉菌的菌落特征。

3、霉菌的菌丝体有哪些特化形式,各有什么功能?菌环菌网附枝附着枝吸器菌核附着胞子座

4、为什么说蕈菌也是真核微生物?

5、什么叫锁状连合,试图示锁状连合的过程。

6、试阐明酿酒酵母的生活史及其特点?

7、比较细菌,放线菌、酵母菌和霉菌细胞成分的异同,并讨论它们的原生质体制备方法。

第三章病毒和亚病毒

一、填空题

1.病毒可分(真病毒)与(亚病毒)两大类。从组成的化学本质来划分,真病毒至少含有(核酸)和(蛋白质)两种成分;亚病毒中的类病毒只含(具有独立侵染性的RNA组分),拟病毒只含(不具独立侵染性的RNA或DNA 组分),而朊病毒只含(单一蛋白质组分)。

2.单个病毒粒子称为(病毒粒),它由核心和(衣壳)构成,有些较复杂病毒还有一层(包膜),其上长有(刺突)等附属物。

3.不同病毒在不同的宿主细胞上可形成不同特征的聚集体,如在动物细胞内的(包涵体),细菌菌苔上的(噬菌斑),植物叶片上的(枯斑),昆虫细胞内的(多角体),以及动物单层细胞上的(空斑)。

4.病毒的对称体制有:(螺旋)对称、(二十面体)对称和(复合)对称。

5.一般地说,动物病毒的核酸类型以(线状的dsDNA)和(ssRNA)为主,植物病毒以(ssRNA)为主,噬菌体以(线状的dsDNA)为主,而真菌病毒则都是(dsRNA)。

6.温和噬菌体有三种存在方式,即(游离态)、(整合态)和(营养态)

7.昆虫病毒主要有三类,即(核型多角体病毒),(质型多角体病毒)和(颗粒体病毒)。

8.病毒对于一般抗生素(不敏感),对干扰素(敏感)。

二、选择题

1、现发现一种只含不具侵染性RNA成分的分子病原体,它属于( C )。

A、病毒

B、类病毒

C、拟病毒

D、肮病毒

2、至今对人类健康威胁最大的传染病病原体是(A )。

A、病毒

B、细菌

C、真菌

D、原生动物

3、真菌、细菌、病毒三者直径的大致比例是( D )。

A、10:5:1

B、10:6:4

C、100:50:2

D、100:10:1

4、动物病毒在其宿主的单层细胞培养物上所形成的聚集体称( C )。

A、包涵体

B、噬菌斑

C、空斑

D、枯斑

5、在噬菌体一步生长曲线中,若人为地用氯仿等破坏宿主细胞,发现培养液呈现侵染性,此期称(C )。

A、潜伏期

B、隐晦期

C、胞内累积期

D、裂解期

6、我国用于防治棉铃虫的病毒杀虫剂是一种(A )制剂。

A、核型多角体病毒

B、质型多角体病毒

C、颗粒体病毒

D、骨状病毒粒子

7、马铃薯纺锤形块茎病的病原体是(B )。

A、病毒

B、类病毒

C、拟病毒

D、朊病毒

三、名词解释:

1、包膜:有些较复杂的病毒,其核衣壳外还被一层含有蛋白质或糖蛋白的类脂双层膜覆盖着,这层膜称为包膜。

2、裂解量:平均每一宿主细胞裂解后产生的子代噬菌体数称做裂解量。

3、自外裂解:指大量噬菌体吸附在同一宿主细胞表面并释放众多的溶菌酶,最终因外在的原因而导致细胞裂解。

4、溶源性:温和噬菌体侵入相应宿主细胞后,由于前者的基因组整合到后者的基因上,并随后者的复制而进行同步复制,因此,这种温和噬菌体的侵入并不引起宿主细胞裂解,此即称溶源性或溶源现象。

5、溶源菌:凡能引起溶源性的噬菌体即称温和噬菌体,而其宿主就称溶源菌。

6、病毒:是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非细胞生物”,其本质是一种只含DNA或RNA 的遗传因子,他们能以感染态和非感染态两种状态存在。

7、亚病毒:凡在核酸和蛋白质两种成分中,只含其中之一的分子病原体,就称亚病毒。包括类病毒和拟病毒和朊病毒。

8、烈性噬菌体:凡在短时间内能连续完成吸附,侵入,增殖,成熟,裂解五个阶段而实现其繁殖的噬菌体,就称为烈性噬菌体。

9、温和噬菌体:进入菌体后并不进行增殖或引起溶菌的噬菌体就称为温和噬菌体。

10、噬菌斑形成单位数(效价):表示每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数,又称感染中心数。1.从元素水平上看,微生物营养最需要的是碳氢氧氮磷硫六种元素。

2.微生物六类营养要素是碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐、水。

3.若以所需碳源对微生物进行分类,则能利用有机碳源者称异样微生物,而利用无机碳源者则称自养微生物。4.狭义的生长因子一般仅指维生素。

5.按微生物所需的能源,氢供体和碳源来划分,它们的营养类型有光能无机营养型、光能有机营养型、化能无机营养型和化能有机营养型。

6.光能无机营养型微生物的能源:光、氢供体,无机物,基本碳源是:CO2,代表性微生物是:蓝细菌和藻类等。7.微生物实验室中配制固体培养基时,最常用的凝固剂为琼脂和凝胶。

8.光能有机营养型微生物的能源是光、氢供体有机物,基本碳源是 CO2 和简单有机物,这类微生物的代表如红螺菌科的细菌等。

9.化能无机营养型微生物的能源是无机物,氢供体无机物,基本碳源是 CO2 ,这类微生物的代表如硝化细菌等。

10.化能有机营养型微生物的能能源是有机物,氢供体是有机物,基本碳源是有机物。

11.营养物质通过渗透方式进入微生物细胞膜的方式有单纯扩散、促进扩散、主动运送、基团移位等四种。12.不能在人工培养基上生长的微生物称为难养菌。

13.选用或设计培养基的四个原则是目的明确、营养协调、理化适宜、经济节约。

14.高氏1号培养基常用于培养放线菌(链霉菌);马铃薯葡萄糖培养基常用于培养真菌;牛肉膏蛋白胨琼脂培养基常用于培养细菌。

15.从功能上来分,EMB培养基属于鉴别性培养基,它所含的两种染料分别是伊红和美蓝,其碳源为蛋白胨、乳糖、蔗糖,在EMB平板上,大肠杆菌产生在透射光下呈蓝色的菌落,在反射光下呈绿色金属闪光的菌落。

19.按物理状态划分,培养基可分为液体培养基、固体培养基和半固体培养基。

16.通常细菌最适pH的范围为 6.5—7.5 ,酵母菌的最适pH范围为 4.5—5.5 ,霉菌的最适pH范围是 4.5—5.5 。

土壤微生物生物量的测定方法

土壤微生物生物量的测定方法1土壤微生物碳的测定方法(熏蒸提取----仪器分析法) 基本原理 新鲜土样经氯仿熏蒸后(24h),土壤微生物死亡细胞发生裂解,释放出微生 物生物量碳,用一定体积的LK 2SO 4 溶液提取土壤,借用有机碳自动分析仪测定微 生物生物量碳含量。根据熏蒸土壤与未熏蒸土壤测定有机碳的差值及转换系数(K EC),从而计算土壤微生物生物量碳。 实验仪器 自动总有机碳(TOC)分析仪(Shimadzu Model TOC—500,JANPAN)、真空干燥器、烧杯、三角瓶、聚乙烯熟料管、离心管、滤纸、漏斗等。 实验试剂 1)无乙醇氯仿(CHCL 3 ); 2)L硫酸钾溶液:称取87g K 2SO 4 溶于1L蒸馏水中 3)工作曲线的配制:用L硫酸钾溶液配制10ugC/L、30ugC/L、50ugC/L、 70ugC/L、100ugC/L系列标准碳溶液。(其实一般情况下, 仪器会自带的标曲,一般不用自己做的) 操作步骤 土壤的前处理(过筛和水分调节略) 熏蒸 称取新鲜(相当于干土,这个可以根据自己土样的情况而定)3份分别放入25ml小烧杯中。将烧杯放入真空干燥器中,并放置盛有无乙醇氯仿(约2/3)的15ml烧杯2或3只,烧杯内放入少量防暴沸玻璃珠,同时放入一盛有NaOH溶液的小烧杯,以吸收熏蒸过程中释放出来的CO 2 ,干燥器底部加入少量水以保持容器湿度。盖上真空干燥器盖子,用真空泵抽真空,使氯仿沸腾5分钟。关闭真空干燥器阀门,于25℃黑暗条件下培养24小时。 抽真空处理 熏蒸结束后,打开真空干燥器阀门(应听到空气进入的声音,否则熏蒸不完

全,重做),取出盛有氯仿(可重复利用)和稀NaOH溶液的小烧杯,清洁干燥器,反复抽真空(5或6次,每次3min,每次抽真空后最好完全打开干燥器盖子),直到土壤无氯仿味道为止。同时,另称等量的3份土壤,置于另一干燥器中为不熏蒸对照处理。(注意:熏蒸后不可久放,应该快速浸提)※ 浸提过滤 从干燥器中取出熏蒸和未熏蒸土样,将土样完全转移到80ml聚乙烯离心管中,加入40ml L硫酸钾溶液(土水比为1:4,考虑到土样的原因,此部分熏蒸和不熏蒸土均为4g,即,4g土:16ml的硫酸钾溶液,当然这个加入量要根据TOC仪器的进入量决定)300r/min振荡30min,用中速定量滤纸过滤。同时作3个无土壤基质空白。土壤提取液最好立即分析,或—20℃冷冻保存(但使用前需解冻摇匀)(注意这部分很重要,有研究结果表明:提取液如果不立即分析,请保存在—20℃,否则将影响浸提液的效果,其次,过滤时不要用普通的定性或定量滤纸,以免长久杂质会堵塞仪器的管路,建议使用那种一次性塑料注射器,配一个的滤头,一个才1元)。 TOC仪器测定 吸取上述土壤提取液10ul(这个要根据仪器自己的性能决定,但是一般情况下,在测定土壤滤液时候,要对其进行稀释,如果不稀释,一方面超过原来仪器的标曲,另一方面可能堵塞仪器。)注入自动总有机碳(TOC)分析仪上,测定提取液有机碳含量。由于总有机碳分析仪型号较多,不同的型号则操作程序存在较大差异,这里以本实验室使用的有机碳分析仪(Shimadzu Model TOC---500,JAPAN)为例。 计算 SMBC=(E C CHCL3—E C CK)*TOC仪器的稀释倍数*原来的水土比/ 2 土壤微生物生物量氮(茚三酮比色法) 土壤微生物生物氮一般占土壤全氮的2%—7%,是土壤中有机—无机态氮转化的一个重要环节,关于土壤微生物氮的测定常见的熏蒸浸提法有两种,一是全氮测定法,另一个是茚三酮比色法,如下 基本原理(茚三酮比色法)

土壤微生物量碳测定方法

土壤微生物量碳测定方法及应用 土壤微生物量碳(Soil microbial biomass)不仅对土壤有机质和养分的循环起着主要作用,同时是一个重要活性养分库,直接调控着土壤养分(如氮、磷和硫等)的保持和释放及其植物有效性。近40年来,土壤微生物生物量的研究已成为土壤学研究热点之一。由于土壤微生物的碳含量通常是恒定的,因此采用土壤微生物碳(Microbial biomass carbon, Bc)来表示土壤微生物生物量的大小。测定土壤微生物碳的主要方法为熏蒸培养法(Fumigation-incubation, FI)和熏蒸提取法(Fumigation-extraction, FE)。 熏蒸提取法(FE法) 由于熏蒸培养法测定土壤微生物量碳不仅需要较长的时间而且不适合于强酸性土壤、加 入新鲜有机底物的土壤以及水田土壤。Voroney (1983)发现熏蒸土壤用·L-1K 2SO 4 提取液提取 的碳量与生物微生物量有很好的相关性。Vance等(1987)建立了熏蒸提取法测定土壤微生物 碳的基本方法:该方法用·L-1K 2SO 4 提取剂(水土比1:4)直接提取熏蒸和不熏蒸土壤,提取 液中有机碳含量用重铬酸钾氧化法测定;以熏蒸与不熏蒸土壤提取的有机碳增加量除以转换 系数K EC (取值来计算土壤微生物碳。 Wu等(1990)通过采用熏蒸培养法和熏蒸提取法比较研究,建立了熏蒸提取——碳自动一起法测定土壤微生物碳。该方法大幅度提高提取液中有机碳的测定速度和测定结果的准确度。 林启美等(1999)对熏蒸提取-重铬酸钾氧化法中提取液的水土比以及氧化剂进行了改进,以提高该方法的测定结果的重复性和准确性。 对于熏蒸提取法测定土壤微生物生物碳的转换系数K EC 的取值,有很多研究进行了大量的 研究。测定K EC 值的实验方法有:直接法(加入培养微生物、用14C底物标记土壤微生物)和间接法(与熏蒸培养法、显微镜观测法、ATP法及底物诱导呼吸法比较)。提取液中有机碳的 测定方法不同(如氧化法和仪器法),那么转换系数K EC 取值也不同,如采用氧化法和一起法 K EC 值分别为(Vance等,1987)和(Wu等,1990)。不同类型土壤(表层)的K EC 值有较大不 同,其值变化为(Sparling等,1988,1990;Bremer等,1990)。Dictor等(1998)研究表 明同一土壤剖面中不同浓度土层土壤的转换系数K EC 有较大的差异,从表层0-20cm土壤的K EC 为,逐步降低到180-220cm土壤的K EC 为。 一、基本原理 熏蒸提取法测定微生物碳的基本原理是:氯仿熏蒸土壤时由于微生物的细胞膜被氯仿破 坏而杀死,微生物中部分组分成分特别是细胞质在酶的作用下自溶和转化为K 2SO 4 溶液可提取 成分(Joergensen,1996)。采用重铬酸钾氧化法或碳-自动分析仪器法测定提取液中的碳含量,以熏蒸与不熏蒸土壤中提取碳增量除以转换系数K EC 来估计土壤微生物碳。 二、试剂配制 (1)硫酸钾提取剂(·L-1):取分析纯硫酸钾溶解于蒸馏水中,定溶至10L。由于硫酸钾较难溶解,配制时可用20L塑料桶密闭后置于苗床上(60-100rev·min-1)12小时即可完全溶解。 (2) mol·L-1(1/6K 2Cr 2 O 7 )标准溶液:称取130℃烘2-3小时的K 2 Cr 2 O 7 (分析纯)9.806g 于1L大烧杯中,加去离子水使其溶解,定溶至1L。K 2Cr 2 O 7 较难溶解,可加热加快其溶 解。 (3) mol·L-1(1/6K 2Cr 2 O 7 )标准溶液:取经130℃烘2-3小时的分析纯重铬酸钾4.903g, 用蒸馏水溶解并定溶至1L。

病原微生物复习100题教程文件

病原微生物复习100 题

精品资料 仅供学习与交流,如有侵权请联系网站删除 谢谢2 一、100多选题(选择最佳答案) 1.下述微生物除了哪种以外,均属于原核细胞型? A 病毒 B 放线菌 C 衣原体 D 细菌 E 支原体 2.真核细胞型微生物是: A 真菌 B 细菌 C 支原体 D 立克次体 E 衣原体 3.细菌大小的测量单位是: A 厘米 B 毫米 C 微米 D 毫微米 E 微微米 4. 病毒大小的测量单位是: A 厘米 B 毫米 C 微米 D 毫微米 E 微微米 5. 关于细菌革兰染色操作步骤,下列哪项是错误的? A 标本涂片固定 B 结晶紫初染 C 碘液媒染 D 盐酸酒精脱色 E 稀释复红复染 6.关于抗酸染色,下述哪项是错误的? A 石碳酸复红染色 B 盐酸酒精脱色 C 碱性美兰染色 D 结核杆菌染成红色 E 非抗酸杆菌染成红色 7.关于血清学诊断方法,下述哪项错误? A 伤寒—肥达反应 B 风湿病—抗“O”试验 C 斑疹伤寒—外斐氏反应 D 类风湿—冷凝集试验 E 梅毒—胶乳凝集试验 8. 关于细菌对氧的需要分类,下述哪项错误? A 兼性厌氧菌—大肠杆菌 B 专性厌氧菌—破伤风梭菌 C 专性厌氧菌—脆弱类杆菌 D 专性需氧菌—结核分枝杆菌 E 微需氧菌—霍乱弧菌 9.青霉素杀菌机理是: A 破坏细胞膜 B 破坏肽聚糖 C 抑制肽聚糖合成 D 抑制蛋白质的合成 E 抑制的DNA 合成 10.细菌中最耐热的结构是: A 芽胞 B 鞭毛 C 荚膜 D 核蛋白体 E 中介体 11.细菌的生长繁殖方式是: A 有丝分裂 B 二分裂 C 有性孢子生殖 D 无性孢子生殖 E 复制 12.在细菌生长中,生物学性状最典型的是: A 迟缓期 B 对数期 C 减数期 D 稳定期 E 衰退期 13.杀灭包括芽胞在内的微生物的方法称为: A 消毒 B 无菌 C 防腐 D 灭菌 E 杀菌 14.抗毒素血清等被细菌污染处理方法是: A 滤过除菌 B γ射线照射 C 低热灭菌 D 间歇灭菌 E 环氧乙烷 15.下列消毒灭菌法,哪种是错误的? A 金属器械一漂白粉 B 排泄物一漂白粉 C 饮水一氯气 D 含糖培养基一间歇灭菌 E 人和动物血清一滤过除菌 16.细菌以接合方式转移基因是通过: A 细胞壁接触 B 细胞膜融合 C 鞭毛 D 性菌毛 E 普通菌毛 17.下述哪项对外毒素的叙述是不正确的? A 蛋白质 B 细胞壁成分 C 不耐热 D 毒性强 E 受甲醛作用可失去毒性 18.细菌内毒素的主要成分为: A 肽聚糖 B 脂多糖 C 鞭毛蛋白 D 核蛋白 E 脂蛋白 19.下列细菌抗感染免疫,以细胞免疫为主是? A 链球菌 B 结核分枝杆菌 C 白喉杆菌 D 葡萄球菌 E 肺炎链球菌 20.霍乱弧菌的感染途径是: A 呼吸道感染 B 消化道感染 C 创伤感染 D 接触感染 E 多途径感染 21.结核杆菌感染途径是: A 呼吸道感染 B 消化道感染 C 创伤感染 D 接触感染 E 多途径感染 22.下述除哪项外,均为金黄色葡萄球菌的致病因素? A 溶血毒素 B 血浆凝固酶 C 肠毒素 D 菌毛 E 表皮剥脱毒素 23.下述除哪项外,均为致病性葡萄球菌最重要的鉴定 依据? A 金黄色色素 B 血平板上溶血 C 凝固酶阳性 D 耐热核酸酶 E 发酵菊糖 24.下述除哪项外,均为金黄色葡萄球菌引起的毒素性疾病? A 肉毒中毒 B 烫伤样皮肤综合症 C 假膜性肠炎 D 中毒性休克综合症 E 食物中毒 25.下列除哪项外,均与链球菌在组织内扩散有关? A 链激酶 B 血浆凝固酶 C 链球菌DNA 酶 D 链道酶 E 链球菌纤维蛋白溶酶 26.关于脑膜炎奈氏菌微生物学检查法,下列哪项是错误的? A 标本取材后应立即冷藏 B 瘀斑涂片镜检有诊断意义 C 分离培养用巧克力色培养基 D 初次培养需5~10%CO2 E 标本可采取瘀斑穿刺液 27.休克、败症死亡的患者,尸体解剖心血培养发现有革兰阳性矛头状双球菌生长,该菌可能是: A 溶血性链球菌 B 脑膜炎奈氏菌 C 痢疾杆菌 D 肺炎链球菌 E 金黄色葡萄球菌 28.疑似败血症患者血培养,在血平板培养基上长出带α溶血环的灰色小菌落,染色镜检为革兰阳性链球菌,该菌可能是: A 甲型溶血性链球菌 B 乙型溶血性链球菌 C 丙型链球菌 D 肺炎链球菌 E 肠球菌 29.单位发生以呕吐为主要症状的食物中毒。在餐具和厨房炊具中没培养出肠道致病菌,但在炊事人员的手上查出了化脓感染灶。请问致病菌可能是: A 产气荚膜梭菌 B 金黄色葡萄球菌 C 空肠弯曲菌 D 肠炎沙门菌 E 鼠伤寒沙门菌 30.26岁女性发热39℃,咳嗽铁锈色痰,X 光检查右肺上叶有大片阴影,胸腔有少量积液。临床诊断为大叶性肺炎,请问致病的微生物为何? A 嗜肺军团菌 B 肺炎球菌 C 肺炎杆菌 D 肺炎支原体 E 肺炎衣原体 31.某新生儿出生被确诊为细菌性脑膜炎,下述哪种为常见的致病菌? A 流感杆菌 B 肺炎球菌 C 脑膜炎球菌 D B 群链球菌 E 金黄色葡萄球菌 32.12岁男儿以发热为主诉来院,既往确诊为轻度心瓣膜病。一个月前拔牙,二周前开始发热,血培养确诊为感染性心内膜炎,请问常见的致病菌为何? A 甲型链球菌 B 乙型链球菌 C B 群链球菌 D D 群链球菌 E 变异链球菌 33.24岁妇女和她的丈夫在饭店吃饭5小时后,出现恶心、呕吐和腹泻症状,其中呕吐为甚。该症状可能和下列哪种细菌有关? A 产气荚膜杆菌 B 肉毒杆菌 C 肠产毒性大肠杆菌 D 伤寒沙门菌 E 金黄色葡萄球菌 34.20岁青年扁桃腺摘除后,发烧,体温 37.5~39C0间,分离培养有带溶血环的小菌落生成,诊断为甲型溶血性链球菌心内膜炎。该菌来自何处? A 皮肤 B 结肠 C 鼻咽腔 D 尿道 E 眼结膜 35. 引起猩红热为 A A 群溶血型链球菌 B B 群溶血型链球菌 C D 群溶血型链球菌 D 甲型溶血型链球菌 E 变异链球菌 36. 引起风湿热为 A A 群溶血型链球菌 B B 群溶血型链球菌 C D 群溶血型链球菌 D 甲型溶血型链球菌 E 变异链球菌 37.引起出血性结肠炎的肠出血性大肠杆菌的血清型是: A 0152 B O157 C O158 D O159 E O164 38.检查哪种细菌指数可判断水、食品是否被粪便污染? A 葡萄球菌 B 链球菌 C 志贺菌属 D 沙门菌属 E 大肠菌群 39.下述哪种疾病不做血培养? A 亚急性细菌性心内膜炎 B 钩端螺旋体病 C 副伤寒 D 细菌性痢疾 E 布氏菌病 40. 患者张某,发烧第五日,疑似伤寒病,为确诊应做下述哪项检查为宜? A 便培养 B 尿培养 C 胆汁培养 D 血培养 E 肥达反应 41. 张×,疑是注射过伤寒,甲型副伤寒疫苗,这次因发烧入院,两次取血做肥达氏反应,入院后第四天结果如下:TH 1:80 TO 1:80 TA 、TB 、TC 1:40, 入院后第十二天结果如下:TH 、TO 1:320 TA 、TB 、TC 1:40 ,应作何种诊断 ? A 患伤寒 B 患甲型副伤寒 C 患乙型副伤寒 D 沙门菌早期感染 E 回忆反应 42. 患者张某,发烧第15日,疑似伤寒病,为确诊应做下述哪项检查为宜? A 便培养 B 尿培养 C 胆汁培养 D 血培养 E 肥达反应 43.患者王某,发烧一周,做肥达反应,结果为T01:40、TH1:160、TA 、TB 、TC 均为1:40以下,十天后复查TO 、TH 、TA 、TB 、TC 均为1:40以下,请问下述哪项解释为宜? A 患伤寒病 B 患副伤寒甲 C 患副伤寒乙 D 沙门菌早期感染 E 非特异回忆反应 44.患者周某,发烧一周做肥达反应结果如下:TO1:80,TH 、TA 、TB 、TC 均为1:40,下述哪项解释为宜? A 患伤寒病 B 患副伤寒甲 C 患副伤寒 D 沙门菌早期感染 E 非特异回忆反应 45. 患者冯某,发烧一周,做肥达反应结果如下:TO1:80、TH1:80、TA1:80、TB1:40、TC1:40,十天后复查TO1:320,TH1:40,TA1:320,TB 、TC 均1:40以下,请问下述哪项解释为宜? A 患伤寒病 B 患副伤寒甲 C 患副伤寒乙 D 沙门菌早期感染 E 非特异回忆反应 46. 3岁男儿在幼儿园进食后,出现严重腹痛、血便和肾功衰竭。同时进食儿童也有数人出现相同的症状,诊断出血性结肠炎。下述哪项为常见的病原菌? A O 139霍乱弧菌 B O 157肠出血性大肠杆菌 C 肠致病性大肠杆菌 D 肠侵袭性大肠杆菌 E 肠产毒性大肠杆菌 47.腹泻患者便培养,可疑菌落镜检革兰阴性中等大杆菌,不分解乳糖分解葡萄糖只产酸,半固体培养基中不扩散生长,该菌可能是: A 大肠杆菌 B 痢疾杆菌 C 伤寒沙门菌 D 肠炎沙门菌 E 鼠伤寒沙门菌 48.霍乱弧菌的致病性,下述哪一项是错误的? A 致病因素有霍乱肠毒素 B 有菌毛使细菌吸附到小肠粘膜表面 C 细菌可侵入到细胞内繁殖 D 主要症状为腹泻 E 通过污染水源或食物经口摄入 49.1992年以后主要流行霍乱弧菌血清群是: A 古典生物型 B EL Tor 生物型 C O139 D 0138 E 02 50.下述除哪项外,均能产生肠毒素? A 肠产毒性大肠杆菌 B 霍乱弧菌 C 产气荚膜梭菌 D 金黄色葡萄球菌 E 痢疾志贺菌 51.某单位发生了症状以呕吐腹泻为水样便的食物中毒,防疫医生在调查后认定为“与吃新鲜小海米拌凉菜”有关,请问致病菌可能是: A 副溶血性弧菌 B 肠炎沙门氏菌 C 鼠伤寒杆菌 D 产气荚膜杆菌 E 空肠弯曲菌 52.关于产气荚膜梭菌毒素的作用,下述哪项是错的? A α毒素—卵磷脂酶 B μ毒素—透明质酸酶 C κ毒素—胶原蛋白酶 D γ毒素—皮肤坏死 E 肠毒素—腹泻 53.肠道正常菌群中属于无芽胞厌氧菌的是: A 大肠杆菌 B 破伤风梭菌 C 绿脓假单胞菌 D 金黄色葡萄球菌 E 脆弱类杆菌 54.下列哪种疾病不是由无芽胞厌氧菌引起的? A 烫伤样皮肤综合症 B 坏死性口腔炎 C 肺脓肿 D 子宫内膜炎 E 败血症 55. 女患者左下腹部有痉挛性疼痛,一周前曾做过经阴道的结扎手术,阴道后穹隆穿刺术得20ml 带血,恶臭的脓性液体。厌氧培养得革兰阴性杆菌。请问该菌是下述哪一项? A 大肠杆菌 B 肺炎克氏菌 C 变形杆菌 D 绿脓假单胞菌 E 脆弱类杆菌 56. 异染颗粒是哪种细菌染色特性? A 鼠疫杆菌 B 结核分枝杆菌 C 炭疽芽胞杆菌 D 麻疯分枝杆菌 E 白喉棒状杆菌 57.某校发生了症状以急性胃肠炎为主的食物中毒,防疫医生发现并确定是切猪肉时生熟不分,造成食物污染而发生的,并依据该致病菌在污染的食品、粪便中每克含有十万个以上菌,确定了诊断,请问致病菌可能是: A 副溶血性弧菌 B 沙门氏菌 C 空肠弯曲菌 D 产气荚膜杆菌 E 肉毒杆菌 58. 卡介苗是结核分枝杆菌的变异株,它的变异指的是: A 菌落变异 B 形态变异 C 结构变异 D 毒力变异 E 耐药性变异 59.下述哪种微生物感染是有菌免疫? A 白喉棒状杆菌 B 痢疾志贺菌 C 结核分枝杆菌 D 百日咳杆菌 E 伤寒沙门菌 60. 2月前感到疲劳,食欲减少,体重减轻,发烧咳嗽,喀痰带血丝。取标本涂片用齐-尼二氏染色法染色镜下见到染成红色细长弯曲有长枝的杆菌。该细菌是何种细菌? A 炭疽芽胞杆菌 B 肺炎克氏菌 C 结核分枝杆菌 D 流感嗜血杆菌 E 白喉棒状杆菌 61.成人临床怀疑患肺结核病,在下列处置中,除哪项外均是正确的? A 痰浓缩集菌涂片抗酸染色 B 做结核菌素试验 C 胸部X 光摄影 D 痰结核杆菌培养 E 接种豚鼠做动物试验 62.在放线菌感染的病灶组织及脓样物质中,肉眼可见的黄色小颗粒称: A 异染颗粒 B 质粒 C 硫磺样颗粒 D 包涵体 E Dane 颗粒 63. 布鲁氏菌病的临床热形特点是 A 波浪热 B 回归热 C 稽留热 D 弛张热 E 间日热 64.皮肤出现中央发黑呈痈样化脓灶,分泌物革兰染色镜检发现革兰阳性竹节状大杆菌,菌体中央带有芽胞,且有荚膜。该病原菌是: A 大肠杆菌 B 变形杆菌 C 布氏杆菌 D 炭疽芽胞杆菌 E 鼠疫杆菌 65. 幽门螺杆菌鉴定的主要依据是: A 过氧化氢酶 B 氧化酶

微生物学实验报告

2012级制药专业 工业微生物学实验报告 姓名: 刘甜甜学号: 2012304090 班级: 制药12-2班指导老师:王健 日期:2014.6.11

一、实验目的 1、抑制或杀死微生物的一些物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的原理。 2、掌握物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的试验方法。 3、了解细菌的形态特征、染色特点。 4、了解细菌在普通培养基、选择培养基、血平板上的菌落特征。 5、掌握细菌分离划线培养的方法。 6、掌握细菌的初步生化反应。 7、掌握细菌密集划线法,掌握细菌K-B药敏纸片法。 二、实验内容 1 细菌Gram’s stain染色,镜检,观察记录细菌形态和特色特征 1.1 实验原理:染色原理:G+菌与Gˉ菌细胞壁不同,G+菌比Gˉ菌细胞内核糖核酸镁盐含量高,G+菌比Gˉ等电点低。 1.2 实验步骤: 1.2.1.制片:○1涂片:取半滴生理盐水置一洁净玻片上,以无菌操作技术自平板上去菌落少许,与生理盐水混匀,均匀涂布约1cm2大小,自然干燥; ②固定:取含菌膜的玻片与酒精灯火焰上来回三次,使菌膜牢固附于玻片表面; 1.2.2染色:①初染:取结晶紫一到两滴覆盖于菌膜表面,轻微摇动,维持30〃~40〃,细流水冲洗,切勿直接冲洗涂片区域; ②媒染:取卢氏碘液1~2滴覆盖菌膜表面,轻微摇动,维持30〃~40〃,用上法细流水冲洗; ③脱色:取95%酒精2~3滴于菌膜表面,轻微摇动,局部接近无色即可, 用上法细流水冲洗; ④复染:取1:10稀释石炭酸复红覆盖涂片区域,轻微摇动,用上法细流水冲洗; ⑤吸水纸初步吸干玻片水分,然后自然干燥; 1.2.3 镜检:于涂片区域加半滴香波油,油镜(100倍目镜)下。 图1:Gram’s stain(1000×)图2:染色试验 三、分离培养 1实验原理:四区划线法是把混杂着在一起的微生物或同一微生物群体的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞,经培养繁殖后生成个菌落。有时这些单菌落并非由单个细胞繁殖而来,故必须反复分离多次才能得到纯种。其原理是微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离的目的。

凯氏定氮法:土壤微生物量氮测定

土壤微生物量氮的测定方法 1.试剂配制: (1)混合催化剂:按照硫酸钾:五水硫酸铜:硒粉=100:10:1,称取硫酸钾100g、 五水硫酸铜10g、硒粉1g。均匀混合后研细,贮于瓶中。 (2)密度为1.84浓硫酸。 (3)40%氢氧化钠:称400g氢氧化钠于烧杯中,加蒸馏水600ml,搅拌使之全部溶 解定容至1L。 (4)2%硼酸溶液:称20g硼酸溶于1000ml水中,再加入20ml混合指示剂。(按体 积比100:2加入混合指示剂) (5)混合指示剂:称取溴甲酚绿0.5g和甲基红0.1克,溶解在100ml95%的乙醇中, 用稀氢氧化钠或盐酸调节使之呈淡紫色,此溶液pH应为4.5。 (6)0.01mol的盐酸标准溶液:取比重1.19的浓盐酸0.84ml,用蒸馏水稀释至 1000ml,用基准物质标定之。 (7)0.5M K2SO4溶液:称取K2SO4 87.165g溶解于蒸馏水中,搅拌溶解,(可加 热)定容至1L。 (8)去乙醇氯仿的配制:在通风柜中,量取100毫升氯仿至500毫升的分液漏斗 中,加入200毫升的蒸馏水,加塞,上下振荡10下,打开塞子放气,而后加塞再振荡10下,反复3次,将分液漏斗置于铁架台上,静止溶液分层,打开分液漏斗下端的阀,将下层溶液(氯仿)放入200毫升的烧杯中,将剩余的溶液倒入水槽,用自来水冲洗。再将烧杯中的氯仿倒入分液漏斗中,反复3次。将精制后的氯仿倒入棕色瓶中,加入无水分析纯的CaCl2 10g,置于暗处保存。 2.试验步骤:。 (1)制样:称取新鲜土壤(30.0g)于放置烧杯中,加约等于田间持水量60%水在25℃下培养7~15d。取15.0g土于烧杯,置于真空干燥器中,同时内放一装有用100ml精制氯仿的小烧杯,密封真空干燥器,密封好的真空干燥器连到真空泵上,抽真空至氯仿沸腾5分钟,静置5分钟,再抽滤5分钟,同样操作三次。干燥器放入25℃培养箱中24小时后,抽真空15-30分钟以除尽土壤吸附的氯仿。按照土:0.5M K2SO4=1:4(烘干土算,一般就是湿土:0.5M K2SO4=1:2),加入0.5M K2SO4溶液(空白直接称取15.0g土,加同样比例0.5M K2SO4溶液)震荡30分钟,过滤。 (2)测定:滤液要是不及时测定,需立即在-15℃以下保存,此滤液可用于微生物碳氮的测定。微生物碳测定只吸取2ml,采用重铬酸钾-硫酸亚铁滴定法测定。微生物氮吸取滤液10ml于消化管中,加入2g催化剂,在再加5ml浓硫酸,管口放一弯颈小漏斗,将消化管置于通风橱内远红外消煮炉的加热孔中。打开消煮炉上的所有加热开关进行消化,加热至微沸,关闭高档开关,继续加热。消煮至

最新工业微生物学实验考卷A0708答案

工业微生物学实验考卷A0708答案

一、填空题(共30分,其中8和11小题每空1分,其余每空0.5 分) 1. 显微镜物镜的放大倍数可由外形来辨别,镜头长度越短,口径越大,放大倍数越低。物镜的放大倍数都标在镜头上,常用的低倍镜为_ 10 ×、20×;高倍镜为 40 ×、45×;油镜为90×、 100 ×。若20×的目镜与45×的物镜配合使用,显微镜的总放大倍数为900倍,一般用 45×20 表示。 2. 新玻璃器皿含有游离碱,一般先将其浸于 2%盐酸溶液中浸泡数小时,然后用自来水清洗干净;用过的培养皿或试管若含有废弃 培养基或菌体,需先经高压蒸气灭菌或沸水煮沸后,倒掉污 物,方可清洗。 3. 微生物培养基的分类方法和种类很多,如按培养基中凝固剂含量的多少可分为固体、半固体和液体培养基;按照 培养基的原料来源可分为合成、半合成和天然 培养基,如PDA培养基根据其原料来源属于其中的半合成培养基。 仅供学习与交流,如有侵权请联系网站删除谢谢8

4. 固体培养基的配制过程可简单描述为:配料(称量)→溶解→校正pH→加凝固剂→融化→分装→加棉塞、包扎→灭菌→无菌检查,其中最后一步非常关键,可检测培养基的是否可用。 5.培养基的灭菌一般多采用高压蒸气灭菌,灭菌压力为0.1Mpa,即 121 ℃,时间20 min,若培养基中含糖成分的含量较高,一般多采用过滤除菌或减压灭菌,减压灭菌时温度为 115 ℃。 6.对不同的微生物进行斜面接种时,常根据需要采用不同的接种方法,如细菌和放线菌多采用密波状蜿蜒划线,酵母菌多采用中央划线法,用来观察菌种的形态和培养特征;霉菌多用点接法。 7.利用显微镜观察不同的微生物常采用不同的制片方法,如细菌需经过固定和染色后利用油镜(物镜)观察;酵母菌需制备水浸片,不需要染色,高倍镜下观察;霉菌制片时需要乳酸苯酚油作为一种介质,防止菌丝成团影响观察;另外,在观察假丝酵母和青霉菌时,需对菌体作小室培养以便观察到完整的菌体形态。 8.微生物学中可根据细菌的生理生化实验结果对未知菌进行鉴定,如利用MR实验和V-P实验可检测微生物利用葡萄糖产酸能力;明胶液化实验可检测细菌是否产蛋白酶;硝酸盐还原实验可检测细菌 仅供学习与交流,如有侵权请联系网站删除谢谢8

病原微生物考试复习资料

绪论 一.病原生物学的研究内容:研究病原生物的形态结构生命活动规律以及与机体和周围环境相互作用关系。 二.医学微生物学发展中的几个标志人物和事件: (一)显微镜的发明 荷兰吕文胡克于1676年发明了一架能放大200~300倍的显微镜。他用这种原始显微镜发现了许多肉眼看不见的微小生物,并正确地描述了微生物的形态,第一次为微生物的存在提供了证据医学教.育网搜集整理。 (二)传染因子的确立 1.19世纪60年代,法国科学家巴斯德(首次制成炭疽菌、狂犬病疫苗,微生物学和免疫学的奠基人)首先证明有机物的发酵与腐败是微生物作用的结果,并创立了用加温处理的巴斯德消毒法。 2.在巴斯德工作的启发下,英国外科医生李斯特用石炭酸喷洒手术室和煮沸手术器械,创建了无菌外科手术,成为微生物学应用于医学实践的一个巨大成就。 3.德国医生郭霍证明了微生物是传染病的致病因子,并创用固体培养基分离纯培养和细菌染色法等研究方法,使他同巴斯德一道成为实验微生物学的奠基人。郭霍提出了著名的四原则:①在同样特殊疾病中能发现同一种病原菌;②这种病原菌能在体外获得纯培养;③将纯培养接种至易感动物能引起相同的疾病;④能从感染动物体内重新分离出这种病原菌的纯培养医学教。 (三)病毒的发现 1892年俄国科学家伊凡诺夫斯基证明烟草花叶病病原体是一种光学显微镜看不见的,能通过细菌滤器的最小生物-病毒,标志着病毒病原研究的开始。 (四)抗生素的发现和应用 1929年Fleming发现青霉菌产生的青霉素能抑制葡萄球菌的生长。一直到1940年Florey 等将青霉素分离提纯后,才开始应用于临床医学教。 (五)免疫学的兴起与发展 18世纪英国医生创制了牛痘以预防天花,为科学地制备和应用疫苗开辟了途径。以后,巴斯德研制鸡霍乱、炭疽、狂犬等疫苗成功,从而为免疫学兴起奠定了基 第一篇微生物学基本原理 一、革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的差异 革兰氏阳性菌的细胞壁,是一层厚而致密的肽聚糖和磷壁酸组成。肽聚糖的肽链之间通过5个甘氨酸交联着。 革兰氏阴性菌的细胞壁则是多层结构,从内到外依次是:薄薄的肽聚糖层,脂蛋白层/周质层,磷脂层和脂多糖层。革兰氏阴性菌的肽聚糖结构也和革兰氏阳性菌的有所不同,肽链是直接交联在一起的。 二、细菌有哪及类特殊结构,各有什么主要功能 1、荚膜:某些细菌细胞壁外面覆盖着一层疏松透明粘性物质。厚度不同,名称不同。 功能:1)抵抗干燥;2)加强致病力,免受吞噬;3)堆积某些代谢废物;4)贮存物。 2、鞭毛和菌毛 鞭毛:某些细菌表面一种纤细呈波状的丝状物,是细菌运动器官。 鞭毛着生状态决定运动特点。

土壤微生物生物量碳及其影响因子研究进展(精)

土壤微生物生物量碳及其影响因子研究进展3 黄辉(1陈光水(1谢锦升(1黄朝法(2 (1.福建师范大学福州350007;2.福建省林业调查规划院福州350003 摘要:笔者较为全面地综述了国内外土壤微生物生物量碳的研究成果。笔者针对土壤微生物生物量碳主要受到碳氮限制、树种类型、土地利用方式、管理措施、土壤湿度和温度、土壤质地等因素的影响,提出了今后的研究应集中在以下几个方面:(1加强不同尺度土壤微生物生物量碳的影响因子及调控机理研究;(2进一步加强不同土壤类型下土壤微生物生物量碳动态及调控机理研究;(3对影响土壤微生物生物量碳高低不确定性的因子进行深入研究;(4加强其他因子对土壤微生物生物量碳影响的研究;(5探讨全球气候变化对土壤微生物生物量碳的影响。 关键词:微生物生物量碳;土壤;影响因子;全球变化 Adva nces on Soil Microbial Biomass Ca rbon a nd Its Effect Factor Huang Hui(1Che n Gua ngshui(1Xie J ingsheng(1Huang Chaof a(1 (1.Fujia n N or mal U niversity Fuzhou350007;2.Fujian Provincial Forest ry Survey a nd Planning Institute Fuzhou350003 Abstract:The aut hors review current knowledge of t he p roperty and deter mination of soil microbial biomass carbon a nd several f act ors cont rolling its dynamics bot h at home a nd abroad.By now,t here are several f ac2 t ors influe ncing soil microbial biomass carbon w hich include inhere nt p roperties of t he soil like texture,mois2 ture and temp erature a nd etc.Besides t hese,external f act ors(C a nd N limitation,sp ecies typ e,ma nageme nt measures and diff ere nces in la nd usealso cont rol on soil microbial biomass carbon.Despite intensive resear2 ches in recent years,t he uncertainties of soil microbial biomass still re main f or f urt her studies:(1St re ngt he2 ning eff ect f act ors of soil microbial biomass carbon a nd its cont rol mecha nism at diff erent scale;(2Paying

土壤微生物数量测定方法整理

土壤微生物的分离鉴定及数量测定 (一)培养基的制备 Ⅰ测定微生物总量培养基: 1. 细菌培养基(牛肉膏蛋白胨琼脂培养基) 牛肉膏Beefextract 5.0g 蛋白胨Peptone 10.0g NaCI 5.0g 蒸馏水H20 1000m1 琼脂15~20g PH 7.2~7.4 制备步骤: ⑴在100 mL小烧杯中称取牛肉膏5.0g,蛋白胨10.0g,加50 mL蒸馏水,置电炉搅拌加热至牛肉膏,蛋白胨完全溶解. ⑵向小铝锅中加入500 mL蒸馏水,将溶解的牛肉膏,蛋白胨倒入铝锅中并用自来水洗2~3次.加入 5.0gNaC1,在电炉上边加热边搅拌. ⑶加入洗净的琼脂条,继续搅拌,加热至琼脂完全熔化,补足水量至1000 mL. ⑷用NaOH或HC1调至pH7.0. 用酸度计或用玻棒沾少许液体用精密pH试纸测定其pH值,并用10%NaOH 调至所需pH值,必要时用滤纸或脱脂棉过滤。一般比要求的pH高出0.2,因为高压蒸汽灭菌后,pH常降低。 ⑸根据不同需要,可将配好的培养基分装入配有棉塞的试管或三角瓶内。注意分装时避免培养基挂在瓶口或管口上引起杂菌污染。如液体培养基,应装试管高度的1/4左右;固体培养基装试管高度的1/5左右;装入三角瓶的量以三角瓶容量的一半为限。,塞好棉塞,装入小铁丝筐,然后用旧报纸将棉塞部分包好. 标签表明培养基的名称、配制日期等。 ⑹高压蒸汽灭菌,用0.1Mpa(15lb/in2)121℃灭菌(15-20)30min. 2. 放线菌培养基(改良高氏1号琼脂培养基) 可溶性淀粉20g KNO3 1g K2HPO40.5g MgSO4? 7H2O 0.5g NaCl 0.5g原0.05g FeSO4? 7H2O 0.01g pH 7.2-7.4 制备步骤: (1)计算根据配方计算各种药品所需要的量,然后再分别称量。 (2)称量准确称量各种成分。 (3)溶化配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入少许沸水中,在火上加热,边搅拌边依次逐一溶化其他成分,溶化后,补足水分到1000ml,调PH(可不调)。 (4)分装、包扎、灭菌。

医学微生物学考试试卷(附答案)

医学微生物学考试试卷(A) (临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科) 班级学号姓名 注意事项: 1.在试卷上写上姓名、班级。在答题卡上填上学号,将相应的数字涂黑,并写上班级、姓名和试卷类型(A卷/B卷)。交卷时必须将答题卡与试卷一起上交,否则以零分计算! 2.本份试卷由基础知识题和病例分析题组成,共150个选择题,请按题目要求,在备选答案中选择一个最佳答案,并在答题卡上将相应的字母涂黑,做在试卷上无效。 3.考试时请严格遵守考场纪律,原则上不允许上厕所。 第一部分、A型选择题 (由一题干和5个备选答案组成,请选出一个最佳答案。共90个选择题) 1.哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物: A.疯牛病 B.梅毒 C.结核病 D.沙眼 E.体癣 2.细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是: A.单细胞 B.二分裂方式繁殖 C.对抗生素敏感 D.有由肽聚糖组成的细胞壁 E.仅有原始核结构,无核膜 3.革兰阳性菌细胞壁: A.肽聚糖含量少 B.缺乏五肽交联桥 C.对溶菌酶敏感 D.所含脂多糖与致病性有关 E.有蛋白糖脂外膜 4.青霉素杀菌机制是: A.干扰细胞壁的合成 B.与核糖体50S亚基结合,干扰蛋白质合成 C.影响核酸复制 D.与核糖体30S亚基结合,干扰蛋白质合成 E.损伤细胞膜 5.有关“细菌鞭毛”的叙述,哪一项是错误的: A.与细菌的运动能力有关 B.许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛 C.在普通光学显微镜下不能直接观察到 D.可用于细菌的鉴定 E.将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛(半固体) 6.有关“芽胞”的叙述,错误的是: A.革兰阳性菌和阴性菌均可产生(都是阳性) B.不直接引起疾病 C.对热有强大的抵抗力 D.代谢不活跃 E.通常在细菌处于不利环境下形成 7.用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时,总放大倍数为: A.10倍 B.100倍 C.400倍 D.900~1000倍 E.10000倍 8.脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌经结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色后,菌体分别呈: A.红色和紫色 B.紫色和紫色

浙江大学工业微生物学2000真题

浙江大学2000年工业微生物考研试题 一、是非题(共16分。只需注明 “ 对 ” 或 “ 错 ” ) ? 遗传型相同的个体在不同环境条件下会有不同的表现型。 EMP 和 HMP 代谢途径往往同时存在于同一种微生物的糖代谢中。 如果碱基的置换,并不引起其编码的肽链结构的改变,那么,这种突变现象称为沉默突变。 低剂量照射紫外线,对微生物几乎没有影响,但以超过某一阈值剂量的紫外线照射,则会导致微生物的基因突变。 在宿主细胞内, DNA 病毒转录生成 mRNA ,然后以 mRNA 为模板翻译外壳蛋白、被膜蛋白及溶菌酶。 总状毛霉和米根霉同属藻状菌纲。 大多数微生物可以合成自身所需的生长因子,不必从外界摄取。 产子囊孢子的细胞一定是双倍体,而出芽生殖的细胞可以是双倍体,也可以是单倍体。 E.coli K12( l ) 表示一株带有 l 前噬菌体( Prophage) 的大肠杆菌 K12 溶源菌株。 因为不具吸收营养的功能,所以,将根霉的根称为“假根”。 因为细菌是低等原核生物,所以,它没有有性繁殖,只具无性繁殖形式。 与单独处理相比,诱变剂的复合处理虽然不能使微生物的总突变率增大,但能使正突变率大大提高。 微生物系统分类单元从高到低依次为界、门、纲、科、目、属、种。 在自然条件下,某些病毒DNA 侵染宿主细胞后,产生病毒后代的现象称为转染(transfect) 。 一个操纵子中的结构基因通过转录、转译控制蛋白质的合成,而操纵基因和启动基因通过转录、转译控制结构基因的表达。 蓝细菌是一类含有叶绿素 a 、具有放氧性光合作用的原核生物。 二填充题(共 30分): 实验室常见的干热灭菌手段有 a 和 b 等。 实验室常用的有机氮源有 a 和 b 等,无机氮源有 c 和 d 等。为节约成本,工厂中常用e 等作为有机氮源。 细菌的个体形态主要有 a 、 b 和 c 等。 细菌肽聚糖由 a 和 b 交替交联形成基本骨架,再由 c 交差相连,构成网状结构。 a 是芽孢所特有的化学物质。一般它随着芽孢的形成而形成,随芽孢的萌发而消失。 微生物系统命名采用 a 法,即 b 加 c 。 中体 (mesosome) 是 a 内陷而成的层状、管状或囊状结构。它主要功能 b 。 鞭毛主要化学成分为 a ,鞭毛主要功能为 b 。 荚膜的主要化学成分有 a 和 b 等,常采用 c 方法进行荚膜染色。 霉菌细胞壁化学组成是 a 等;酵母菌细胞壁化学组成是 b 和 c 等。 培养基按其制成后的物理状态可分为 a 、 b 和 c 。 枝原体突出的形态特征是 a ,所以,它对青霉素不敏感。 碳源对微生物的主要作用 a 。 Actinomycetes 是一类介于 a 和 b 之间,又更接近于 a 的原核微生物。它的菌丝因其形态和功能不同可分为 c 、 d 和 e 。 霉菌的有性繁殖是通过形成 a 、 b 和 c 三类孢子而进行的。其过程都经历 d 、 e 、 f 三阶段。大多数霉菌是 g 倍体。

工业微生物学实验试卷A0809答案

2008-2009学年第 一学期本科试卷 课程名称:工业微生物学实验(A) 答案 第 1 页 (共 8 页) 学 院: 专 业: 学号: 姓名: ―――――――――――――装――――――――――――订――――――――――――线―――――――――――――― 题号 一 二 三 四 五 六 七 八 总成绩 得分 得分 一、名词解释(共20分,每小题4分) 1. 无菌操作:培养基经灭菌后,用经过灭菌的接种工具在无菌条件下接种含菌材料于培养基上,这一操作称为无菌操作。 2. 培养基:是人工配制的能满足微生物生长繁殖和积累代谢产物的营养基质。 3. 假菌丝: 酵母生长旺盛时,出芽形成的芽细胞尚未脱离母细胞又长出了新芽,容易形成成串的细胞。如果各细胞之间连接处面积小于细胞直径,形成的这种藕节状的细胞串称为假菌丝。 4. 大肠菌群: 大肠菌群系指一群在37℃、24h 能发酵乳糖,产酸、产气,需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。 5. 细菌菌落总数: 指被检样品通过一定的处理方法,培养一段时间后,每毫升或每毫克样品中所含细菌的菌落数。由于经过适当稀释的样品中每个细胞可形成一个单菌落,所以菌落数即是细菌活菌总数。 得分 二、判断题(共10分,每题1分) 1.无菌吸管上端塞入棉花的主要目的是为了防止菌液吸入口中( A )。 A.错 B.对

年级:06级专业:生物工程(本科)课程号:S040101046 2.稀释平板计数时,细菌,放线菌,真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在30-300个的稀释度进行计数( A )。 A.错 B.对 3.为了满足微生物对微量元素的需要,配制培养基所用的水最好使用自来水( B)。 A.错 B.对 4.实验室通常使用血球计数板测酵母菌的总菌数或霉菌的孢子数( B )。 A.错 B.对 5.浸油的油镜镜头可用软的卫生纸擦净( A )。 A.错 B.对 6.稀释平板计数通常采用的是二倍稀释法( A )。 A.错 B.对 7.使用手提灭菌锅灭菌后,为了尽快排除锅内蒸汽,可直接打开排气阀排气( A )。 A.错 B.对 8.镜台测微尺每小格的实际长度是10微米( B )。 A.错 B.对 9.用血球计数板计数时,任数5个大方格(80个小格)的菌数即可( A )。 A.错 B.对 10.测微生物的细胞大小时,需要校正的是镜台测微尺每格的实际长度( A )。 A.错 B.对 15分,每空0.5分) 1. 检查乳品和饮料是否含有大肠杆菌(E.coli)等肠道细菌,可采用___伊红美兰 ____培养基,在这种培养基平板上___能分解乳糖产酸的菌_(大肠菌群)_____会形成具有___金属_______光泽的紫黑色小菌落。 第 2 页(共8 页)

土壤微生物计数法

土壤微生物计数法 土壤是最复杂、最丰富的微生物基因库,所含微生物不仅数量巨大,而且各类繁多,主要包括细菌、真菌和放线菌三大类,是土壤最活跃的成分。土壤微生物数量测定方法可分为三大类:一类是根据在培养基上生长的菌落数来计算土壤微生物的数量,统称为培养计数法,主要有稀释平板法和最大或然计数法;二类是将土壤微生物染色后,在显微镜下观察计数,称为直接镜检法,包括涂片法、琼脂薄片法和膜过滤法等;三类是直接将微生物从土壤中分离和提取出来后再进行测定,主要有离心分离法。 1.1培养计数法 1.1.1概要 在自然条件下,土壤中的大多数微生物处于休眠状态,一旦供给可利用的碳源(如培养基),一些微生物将快速生长繁殖。因此,根据在培养基上所生长的微生物数量,可以估算土壤中微生物的数量。这种土壤微生物数量测定方法称为培养计数法,主要包括稀释平板计数法(简称稀释平板法)和最大或然计数法。 稀释平板计数法的基本原理:土壤微生物经分散处理成为单个细胞后,在特殊的培养基上生长并形成一个菌落,根据形成的菌落数来计算微生物的数量。 最大或然计数法的基本原理:假设被测定的微生物在稀释液中均匀分布,并在试管或平板上全部存活,随着稀释倍数的加大,稀释液中微生物的数量将越来越少,直到将某一稀释度的土壤稀释液接种到培养基上培养后,没有或很少出现微生物菌落。根据没有出现菌落的最低稀释度和出现菌落的最高稀释度,再用最大或然计数法计算出样品中微生物的数量。 1.1.2稀释平板法 一、试剂配制

常用的培养基各类很多(见附录一),可根据需要测定的微生物种类选择培养基。按配方配制培养基后,先在121℃下灭菌15min,冷却至45~50℃使用。凝固后的培养基可加热溶解后使用。 二、仪器设备 广口瓶或三角瓶及配套的橡皮塞,移液管(1ml、10ml,吸口用棉花塞住后用牛皮纸包好灭菌)培养皿(9㎝,用牛皮纸包好后灭菌)和显微镜等。 三、操作步骤 (1)土壤系列稀释液制备 取新鲜土壤(<2㎜)10.00g,放入经灭菌的装有70ml水的广口瓶中,塞上经灭菌的橡皮塞,在振荡机上振荡10min,此为10-1土壤稀释液。迅速用灭菌的移液管吸取10-1土壤稀释液10ml,放入灭菌的装有90ml水的广口瓶中,塞上橡皮塞,混合均匀,此为10-2土壤稀释液。再如此依次配制10-3、10-4、10-5和10-6系列土壤稀释液。上述操作均在无菌条件下进行,以避免污染。 (2)平板制备和培养 从两个稀释倍数的土壤稀释液中(细菌和放线菌通常用10-5和10-6土壤稀释液,真菌用10-2和10-3稀释液)吸取1.00ml(吸前摇匀),分别放入五套培养皿中(注意每变换一次浓度,须更换一支移液管);再向培养皿内注入45~50℃的培养基10ml,立即混合均匀,静置凝固后,倒置放于培养箱中培养。细菌和放线菌在28℃下培养7~10d,真菌在25℃下培养3~5d。 (3)镜检计数

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