分子生物学2014年复习题
第二章题目
一、单选题(17小题,共18分)
1．A2．A3．C4．D5．A6．B7．A8．A9．C10．C11．B12．Ｄ13．C14．B16．A17．A
1．对Ds元件描述错误的是()。
A．是自主转座元件B．是染色体断裂的位点C．与Ac元件相似D．内部有缺失2．对非复制转座描述错误的是()。
A要求有解离酶B．移动元件到一个新的位点，在原位点上不留元件C．要求有转座酶D．涉及保守的复制，在这个过程中转座子序列不发生改变
3．细菌的错配修复机制可以识别复制时新旧DNA链之间错误配对的碱基，这是因为()。
A．新DNA链含有错误的碱基B．旧DNA链更倾向于含有错误碱基C．旧DNA链在特殊位点含有甲基化基团D．新DNA链在特殊位点含有甲基化基团
4．下面叙述哪些是正确的?()
A．C值与生物体的形态复杂性呈正相关B．C值与生物体的形态复杂性呈负相关C．每个门的最大C 值与生物体形态复杂性是大致相关的D．每个门的最小C值与生物体形态复杂性是大致相关的
5．DNA在10m纤丝中压缩多少倍?()。
A．6倍B．10倍C．40倍D．240倍
6．下列有关TATA盒(Hognessbox)的叙述,哪个是正确的:（）
A.它位于第一个结构基因处
B.它和RNA聚合酶结合
C.它编码阻遏蛋白
D.它和反密码子结合
7．理论上自发突变是随机发生的，并均匀分布于基因组中。然而，精细分析表明，DNA中的某些位点较其他位点更易发生突变。这些“热点”突变是由于()。
A．存在可被进一步修饰(如脱氨基)的已修饰碱基(如甲基化)，导致碱基转换并通过复制产生突变B．DNA 的空间结构选择性地使部分DNA暴露在诱变因子的作用下C．被修饰(如甲基化)碱基的存在，易于发生错配复制并因此产生突变 D.DNA中富含A—T区域的存在，使得自发解链及错配碱基的掺入
8．一个复制子是()。
A．任何自发复制的DNA序列(它与复制起点相连) B．复制的DNA片段和在此过程中所需的酶和蛋白质C．任何给定的复制机制的产物(如单环) D．复制起点和复制叉之间的DNA片段
9．最常见的DNA修饰是甲基化，在原核细胞中，下列叙述错误的是：
A．鉴别需修复的损伤DNA。B．区别复制后的核酸链和允许／不允许继续复制。C．鉴别在重组中插入到基因组中的甲基化的外源DNA。D．保护自身DNA免受内切核酸酶作用，而不保护外源DNA。10．原核生物中，后随链的引物是被（）清除的。
A.3′至5′外切核酸酶
B.DNA连接酶
C.DNA聚合酶I
D.DNA聚合酶Ⅲ
11．.真核复制子有下列哪些特征？
A．由于存在终止序列，所以比原核复制子要短的多。B．由于基因组较大，所以比原核复制子要长的多。C．常是双向复制，且能融合。D．全部立即激活，确保S期中整条染色体被复制
12．分子生物学检测证实：DNA序列可在()之间转移。
A．线粒体DNA与核DNA B．叶绿体DNA与线粒体DNA C．不同的叶绿体分子D．以上都对13．通过突变分析最终将“基因”确定为遗传单位后，就必须从分子水平评价基因的功能。这一问题的成功解决是由于发现了()。
A．显性等位基因上的突变使其表型类似隐性基因B．突变基因不能编码产生存在于野生型个体中的蛋白质C．突变基因的蛋白质产物与野生型基因的产物有差别D．营养缺陷型细菌只有经过致突变剂处理后才能在基本培养基上生长
14．以下哪一个在260nm波长下具有最大的单位质量吸收：（）
A.双链DNA
B.单核苷酸
C.RNA
D.蛋白质
16．Copia元件()。
A．两侧为定向重复B．串联排列C．在果蝇基因组中约有20000个拷贝D．不被转录
17．下列关于滚环复制描述错误的是()。
A．是细菌DNA的主要复制方式B．可以使复制子大量扩增C．是噬菌体DNA在细菌中最通常的一种复制方式D．复制子中编码切口蛋白的基因的表达是自动调节的
单选题1．A 2．C3．D4．D5．D6．D8．B9．D
1．RNA聚合酶Ⅱ的C端结构域(CTD)的磷酸化与()无关。
A．TFIID中特异TAF蛋白的存在B．TFIIH的激酶活性D．从起始聚合酶到延伸聚合酶的转换E．起始因子TFIIA、TFIIB及TFIID的释放
2．下面哪一项是对三元转录复合物的正确描述?()
A．ζ因子、核心酶和双链DNA在启动子形成的复合物B．全酶、TFI和解链DNA双链形成的复合物C．全酶、模板DNA和新生RNA形成的复合物D．三个全酶在转录起始位点(tsp)形成的复合物
3．起始细菌基因转录的DNA结合蛋白称为：
A．操纵子B．启动子C．阻遏物D．ζ因子
4．发生于转录以及RNA剪接之后的核苷酸序列的改变，称为()。
A．RNA修饰B．翻译后修饰C．甲基化D．RNA编辑
5．转酯反应()。
A．不需要ATP B．拆开一个化学键后又形成另一个化学键C．涉及对糖磷骨架OH基团的亲核攻击D．以上都正确
6．DNA依赖的RNA聚合酶的通读可以靠()。
A．ρ因子蛋白与核心酶的结合B．抗终止蛋白与一个内在的P因子终止位点结合，因而封闭了终止信号C．NusA蛋白与核心酶的结合D．抗终止蛋白以它的作用位点与核心酶结合，因而改变其构象，使终止信号不能被核心酶识别
8．下列有关TATA盒(Hognessbox)的叙述,哪个是正确的:
A.它位于第一个结构基因处
B.它和RNA聚合酶结合
C.它编码阻遏蛋白
D.它和反密码子结合
9．转酯反应：
A．不需要ATP。B．断开一个键，同时形成一个新键。C．涉及OH基团对糖一磷酸主链的亲核攻击。D．所有上述都正确。
1．A2．B3．A 4D5．A6．B7．B8．B9．A10．B11． 12．B13．B14．B15．A16．C17．A
18．A19．A20．D21．A
1．反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性(摇摆性)?( )
A．第一个B．第二个C．第三个D．第一个与第二个
2．氨酰tRNA分子同核糖体结合不需要下列哪些蛋白质因子参与?( )
A．EF-Tu B．EF-Ts C．eIF-2 D．EF-1
3．反密码子中的哪个碱基在密码子阅读中摆动？
A第一个B第二个C第一个和第二个D第二个和第三个
4．氨酰tRNA促进多少个核糖核苷酸三联体的翻译? A.1 B.3 C.20 D.61
5．下列叙述不正确的是( )。
A．共有20个不同的密码子代表遗传密码B．色氨酸和甲硫氨酸都只有一个密码子C．密码子的第三位具有可变性D．不同的密码子可能编码同一个氨基酸
6．真核起始因子eIF-3的作用是( )。
A．帮助形成亚基起始复合物(elF-3、GTP、Met-tRNA、40S) B．帮助亚基起始复合物(三元复合物、40S)与mRNA5’端的结合C．若与40S亚基结合，防止40S与60S亚基的结合D．与mRNA5’端帽子结构相结合以解开二级结构
7．术语“转录三元复合物”描述如下：
A．ζ因子、核心酶和启动子处的双链DNA序列。B．全酶复合物、模板DNA和新生的RNA。C．全酶复合物、TFI和解链双螺旋DNA。D．转录起始位点(tsp)处的三种全酶的复合物。
8．tRNA分子上结合氨基酸的序列是
A．CAA-3′B．CCA-3′C．AAC-3′D．ACA-3′E．AAC-3′
9．以下哪些不是遗传密码的特征?( )
A．密码子与氨基酸的数量相同B．密码子几乎在任一物种中都通用C．一些氨基酸由多个密码子编码D．密码子是简并的
10．氨酰-tRNA的功能决定于：
A.氨基酸
B. 反密码子
C.氨基酸与反密码子之间的距离
D.氨酰-tRNA合成酶活性
11．12．与mRNA的GCU密码子对应的tRNA的反密码子是：（）A.CGA B.IGC C.CIG D.CGI
13．氨酰tRNA的作用由( )决定。
A．其氨基酸B．其反密码子C．其固定的碱基区D．氨酰tRNA合成酶的活性
14．GAUC四个碱基中，在密码子的第三位上缺乏特异性的是( )。A．G B．A C．U D．C 15．下列哪些是起始反应的产物? A．ATP+Pi B．GTP+Pi C．起始因子D．多肽
16．3．下列关于遗传密码的叙述，错误的是
A．碱基缺失、插入可致框移突变B．AUG是起始密码
C．UUU是终止密码D．一个氨基酸可有多达6个密码子
17．下列关于原核生物转录的叙述中不正确的是( )。
A．IF-2与含GDP的复合物中的起始tRNA结合B．核糖体的小亚基能直接同mRNA作用C．细菌所有蛋白质的第一个氨基酸是修饰过的甲硫氨酸D．多肽链的第一个肽键的合成不需要EF-G
18．蛋白质生物合成中的终止密码不包括( )。A UAC B UAA C UAG D UGA
19．关于tRNA中的内含子的叙述，错误的是：
A．通过两步转酯反应从tRNA中移去。B．有一段与反密码子互补的序列。C．形成一种同样的二级结构。D．被蛋白质酶(内切核酸酶和连接酶)移去。
20．多数氨基酸都有两个以上密码子，下列哪组氨基酸只有一个密码子？（）
A.苏氨酸、甘氨酸
B.脯氨酸、精氨酸
C.丝氨酸、亮氨酸
D.色氨酸、甲硫氨酸
21．以下哪项不属于翻译后修饰的机制?( )A．甲基化B．遍在蛋白化C．磷酸化D．去磷酸化
1．A2．B3．B4．A
1．早期在肺炎球菌中进行的转化实验表明
A．细胞的遗传特性通过于不同特性细菌的DNA接触后会发生永久性的变化。B．细菌的非遗传特性通过于特性不同的细菌的DNA接触后会发生永久性的变化。C．所有遗传物质必须都含有DNA. D．细菌中的所有遗传物质必然携带在DNA分子上。
2．多克隆位点：（）
A.含有许多拷贝的克隆化基因
B.使得对克隆所用的限制酶的选择具有灵活性
C.使得对克隆所用的生物种类的选择具有灵活性。
D.含有许多拷贝的同一种限制酶切位点
3．有两种不同的方法可对核酸测序：化学测序法(Maxam—Gilbert)和酶测序(Sanger)法。Sanger测序法的原理和优点是：
A．碱基和特定染料的不同的作用。B．合成的引物的延伸和DNA修复合成的可靠终止。C．末端标记DNA与限制位点的相互关系。D．同时对DNA双螺旋的两条链的测序能力。
4．哪一类型的突变最不可逆?()
A．缺失B．转换C．颠换D．插入
1．A2．B3．B4．D5．C6．B7．C8．D9．B10．C11．B12．B13．A14．C15．D16．D
17．B18．D19．C
1．下列情况不属于基因表达阶段特异性的是，一个基因在
(A) 分化的骨骼肌细胞表达，在未分化的心肌细胞不表达
(B) 胚胎发育过程不表达，出生后表达
(C) 胚胎发育过程表达，在出生后不表达
(D) 分化的骨骼肌细胞表达，在未分化的骨骼肌细胞不表达
2．Lac阻遏蛋白结合乳糖操纵子（元）的
(A) CAP结合位点(B) O序列(C) P序列(D) I基因
3．为什么葡萄糖可参与乳糖操纵子的代谢阻抑?()
A．与乳糖操纵子的调控毫无关联B．乳糖分解生成葡萄糖，因此葡萄糖的存在可成为细胞内具有正常乳糖水平的信号C．因为葡萄糖也是β‐半乳糖苷酶的底物D．葡萄糖的存在增加了细胞内乳糖阻抑物的含量
4．Lac阻遏蛋白由
(A) Z基因编码(B) Y基因编码(C) A基因编码(D) I基因编码
5．正转录调控系统中，调节基因的产物被称为：（）
A. 阻遏蛋白
B. 诱导因子
C. 激活蛋白
D. 增强子
6．一个操纵子（元）通常含有
(A) 数个启动序列和一个编码基因(B) 一个启动序列和数个编码基因
(C) 一个启动序列和一个编码基因(D) 两个启动序列和数个编码基因
7．在大肠杆菌的热激反应中，某些蛋白质表达的开启和关闭的机制是()。
A．温度升高使特定阻抑蛋白失活B．编码热敏感蛋白的基因的启动子区域在较高温度下发生变性C．在高温时合成新的ζ因子，调节热激基因的表达D．高温时，已存在的聚合酶ζ因子与启动子的结合能力增强
8．乳糖、阿拉伯糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是
A 与启动子结合
B 与操纵基因结合
C 与RNA聚合酶结合影响其活性
D 与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNA
9．DNA损伤修复的SOS系统
A 是一种保真性很高的复制过程
B LexA蛋白是一系列操纵子的阻遏物
C RecA蛋白是一系列操纵子的阻遏物
D 它只能修复嘧啶二聚体
10．cAMP与CAP结合、CAP介导正性调节发生在
(A) 葡萄糖及cAMP浓度极高时(B) 没有葡萄糖及cAMP较低时
(C) 没有葡萄糖及cAMP较高时(D) 有葡萄糖及cAMP较低时
11．在基因型为(I+ p+ o c Z- Y- A+/I+ p+ o +Z - Y+A -)的菌株中，β‐半乳糖苷透性酶的表达形式
应为()。
A．组成型B．诱导型C．缺陷型D．致死型
12．控制基因产物数量的最关键的步骤是()。
A．mRNA向细胞质的转运B．转录的起始C．可变剪接D．翻译的调控
13．4．选出下列所有正确的叙述。()
A．人体内所有的细胞具有相同的一套基因B．人体内所有的细胞表达相同的一套基因C．外显子以不同顺序存在于基因组和cDNA中D．人体内所有的细胞以相同的方式剪接每个基因的mRNA 14．()是通常与其调控的基因具有一段距离的DNA顺式作用元件。
A．启动子B．终止子C．增强子D．调节子
15．选择行拼接能引发某些转录，这些转录差别在于：
A. mRNA的5`非翻译区
B. mRNA的编码区
C. mRNA3`非翻译区
D.以上各项都是
16．锌指蛋白质________结合锌。
A 共价的
B 在DNA存在时C在α-螺旋区 D 通过在保守的Cys和His残基之间的协同作用17．由于高度浓缩而造成转录沉默的DNA区的C碱基通常发生()修饰。
A．超氧化B．甲基化C．去磷酸化D．磷酸化
18．可变剪接能增加转录产物，这些转录产物间的区别在于()。
A．mRNA的5'非转录区B．mRNA的编码区C．mRNA的3'非转录区D．ABC全是
19．非洲爪蟾体细胞中rDNA拷贝数约有500个，而在卵母细胞中的拷贝数约增加了倍，可以用来转录合成卵裂所需要的ribosome。
A.1000
B.2000
C.4000
D.400
二、名词解释(1小题,共2分)
1．超螺旋
1．超螺旋:如果固定DNA分子的两端，或者本身是共价闭合环状DNA或与蛋白质结合的DNA分子，DNA 分子两条链不能自由转动，额外的张力不能释放，DNA分子就会发生扭曲，用以抵消张力。这种扭曲称为超螺旋，是双螺旋的螺旋。
1．SD序列
1．SD序列：转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译，需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌16SrRNA末端富含嘧啶的序列互补，是核糖体的识别位点。
2．EF-Tu
2．EF-Tu:原核生物蛋白质合成的延长因子之一，EF-Tu首先与GTP结合，然后再与氨基酰tRNA结合成三元复合物，这样的三元复合物才能进入A位。此时GTP水解成GDP，EF-Tu和GDP与结合在A位上的氨基酰tRNA分离。
三、判断题(13小题,共14分)
1．错2．错3．对4．错5．错6．对7．错8．错9．错10．对11．对12．对13．对
1．拓扑异构酶I和II可以使DNA产生正向超螺旋。
2．在高盐和低温条件下由DNA单链杂交形成的双螺旋表现出几乎完全的互补性，这一过程可看作是一个复性(退火)反应。
3．单个核苷酸通过磷酸二酯键连接到DNA骨架上。
4．复制叉上的单链结合蛋白通过覆盖碱基使DNA的两条单链分开，这样就避免了碱基配对。
5．DNA分子整体都具有强的电负性，因此没有极性。
6．DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。
7．DNA双螺旋的B型代表了DNA的一般结构，z型DNA到目前为止仅在低等真核细胞中被鉴定。8．只要子链和亲本链中的一条或两条被甲基化，大肠杆菌中的错配校正系统就可以把它们区别开来，但如果两条链都没有甲基化则不行。
9．转座酶可以识别整合区周围足够多的序列，这样，转座子不整合到基因的中间，因为破坏基因对细胞是致死的。
10．TnA转座子家族通常含有三个基因：转座酶，解离酶，氨苄青霉素抗性基因。
11．Cot1/2与基因组的大小有关
12．若一个二倍体酵母细胞中发生了一个错义突变，而这一突变将另外一个不同的氨基酸引入了一个分解代谢酶的催化位点，从而使得这种酶可以利用别的底物。这就是所谓的功能获得性突变。
13．拓扑异构酶Ⅰ之所以不需要A TP来断裂和重接DNA链，是因为磷酸二酯键的能量被暂时储存在酶活性位点的磷酸酪氨酸连接处。
1．对2．对3．对4．错5．错6．错7．对
1．在色氨酸浓度的控制下，核糖体停泊在Trp引导区一串色氨酸密码子上，但并不与之脱离
2．在非诱导的情况下，每个细胞大约有4分子的β‐半乳糖苷酶
3．CAP和CRP蛋白是相同的
4．每个转录因子结合位点被单个转录因子识别。
5．核不均一RNA是mRNA和rRNA的前体而不是tRNA的前体。
6．所有高等真核生物的启动子中都有TATA框结构。
7．大多数持家基因编码低丰度的mRNA。
判断题1．对 2．错3．对4．错5．对6．错7．错
1．候选三磷酸核苷通过对生长中RNA链的α磷酸的亲和攻击加到链上。
2．在转录终止子柄部的A-T碱基对可以增强结构的稳定性
3．如果剪接发生在一个内含子的GU序列与相邻内含子的AG序列间，会使位于两个内含子之间的外显子缺失。
4．RNA编辑在锥虫的线粒体中经常出现，主要包括多聚C残基的添加和缺失。
5．细菌细胞用一种RNA聚合酶转录所有的RNA，而真核细胞则有三种不同的RNA聚合酶。
6．RNA编辑是在转录之前或转录之后发生的改变mRNA序列组成的一系列不同寻常的反应过程。
7．I型剪接分两步进行。首先，一个外源腺苷残基的3’—OH攻击内含子第一个核苷酸的5’端。1．对2．对3．对4．错5．错6．错7．对8．错9．错10．对
11．错，蛋白质合成消耗的总能量比转录多，因为每个mRNA分子可以产生成百上千个蛋白质分子。1．核糖体小亚基最基本的功能是连接mRNA与tRNA，大亚基则催化肽键的形成。
2．模板和反义DNA链可以被描述为：模板链可被RNA聚合酶阅读而合成互补的核酸——mRNA，这是核糖体蛋白质合成中的有义链。
3．无义密码子同等于终止密码子。
4．真核生物和原核生物的转录和翻译都是耦联的
5．RNaseP是在tRNA加工过程中起作用的酶，含有蛋白质和RNA两种成分，无论在体内和体外，起作用时都需要RNA和蛋白质的存在。
6．摇摆碱基位于密码子的第三位和反密码子的第一位。
7．在肽链延伸的过程中，加入下一个氨基酸比加入氨酰tRNA更能激活每个氨酰tRNA间的连接。8．因为AUG是蛋白质合成的起始密码子，所以甲硫氨酸只存在于蛋白质的N端。
9．延伸因子eEF-1α帮助氨酰tRNA进入A位点依赖于ATP内一个高能键的断裂。
10．三种类型的RNA相互作用以起始和维持蛋白质的合成。
11．蛋白质合成时，每加入一个氨基酸要水解4个高能磷酸键(4个／密码子)，所消耗的总能量比起DNA 转录(每加入一个核苷酸用两个高能磷酸键，6个／密码子)要少。
四、填空题(14小题,共32分)
1．变性2．磷酸二酯键3．先导链，后随链4．RNA引物，DNA引发酶5．拓扑异构酶Ⅱ，解旋酶，聚合酶Ⅲ6．480圈 1.632 7．RecA蛋白，交叉链互换，Holliday连接
8．θ复制滚环复制正超螺旋负超螺旋9．高度重复序列，中度重复序列，单拷贝序列。
10．基因突变，位点专一的11．0.64 12．DNA修复核酸酶，DNA聚合酶，DNA连接酶
13．核苷酸切除修复，SOS反应14．δε3’→5’
1．双链DNA放入蒸馏水中会发生。
2．一个核苷酸的5’-磷酸和相邻核苷酸的3’-羟基连接形成键
3．在DNA复制过程中，连续合成的子链称为＿＿＿＿＿，另一条非连续合成的子链称为＿＿＿＿＿。4．DNA后随链合成的起始要一段短的，它是由以核糖核苷酸为底物合成的。
5．DNA复制时需要解开DNA的双螺旋结构，参与该过程的酶有与；原核生物有三种DNA 聚合酶，其中的核苷聚合活性最强。
6．假设一个不含双螺旋的DNA分子有4800个碱基对。一共存在圈螺旋；如果该分子以线性、双链的形式存在，它的长度是μm
7．大肠杆菌的染色体配对需要________，它与单链DNA结合并使同源双链DNA与之配对。一般性重组的主要中间体是__________,也用它的发现者名字命名为______.
8．由一个亲代环状DNA分子产生两个子代环的复制模式是，由一个亲代环产生带有线性分支环的复制模式是。在一个环中，生长叉的复制移动会产生超螺旋，DNA促旋酶会产生超螺旋。9．根据DNA复性动力学研究，DNA序列可以分成：，，。
10．偶然情况下，在同一基因两个稍微不同拷贝(等位基因)间发生重组的过程中，一个等位基因经过________过程会被另一等位基因代替。通过______基因重组，游动DNA序列和一些病毒可进入或离开一条目的染色体。
11．32μg／ml浓度的DNA溶液的A260值是_____________
12．DNA修复包括三个步骤：_____对DNA链上不正常碱基的识别与切除，________对已切除区域的重新合成，_____对剩下切口的修补。
13．___________途径可以切去任何造成DNA双螺旋大片段改变的DNA损伤；大肠杆菌中，任何由于DNA 损伤造成的DNA复制障碍都会诱导____________的信号，即允许跨过障碍进行复制，给细胞一个生存的机会。
14．只有真核DNA聚合酶_________和_____显示________外切核酸酶活性。
1．帽子结构，多腺苷化尾，poly(A)聚合酶，内含子，剪接，外显子
2．一，rRNA，mRNA，tRNA，5SrRNA 3．磷酸二酯，多聚体，内含子，外显子，自动催化
4．上游，下游，环，浓度 5．琼脂糖凝胶电泳，电子显微镜，沉降速度
6．真核生物中的5SrRNA，原核生物中的mRNA ;反义RNA
7．识别结合-35区；ρ因子 8．B 9．增加mRNA稳定性，翻译水平上的调控
1．真核生物的mRNA加工过程中，5'端加上，在3’端加上，后者由催化。如果被转录基因是不连续的，那么一定要被切除，并通过过程将连接在一起。
2．原核生物只有＿＿＿＿种RNA聚合酶而真核生物有三种，每一种都有其特定的功能。聚合酶Ⅰ合成＿＿＿＿，聚合酶Ⅱ合成＿＿＿＿，聚合酶Ⅲ合成＿＿＿＿和＿＿＿＿。
3．RNA是由核糖核苷酸通过＿＿＿＿键连接而成的一种＿＿＿＿。在四膜虫中前体tRNA的＿＿＿＿切除和＿＿＿＿的拼接是通过＿＿＿＿机制。
4．一些基因具有称为增强子的附加元件，它们位于启动子的＿＿＿＿或＿＿＿＿，甚至可以位于相反的方向上。它们在相关DNA形成大＿＿＿＿时与基本启动子相互作用。它们惟一的作用是增加启动子处转录因子的＿＿＿＿
5．测定分子量<5×106U的DNA分子量时用_____________方法。测定分子量等于5×106U的DNA分子量时用____________。测定分子量>100×106U的DNA分子量用_____________.
6．写出两种合成后不被切割或拼接的RNA：和；与mRNA分子互补的一段单链核苷酸叫作序列。
7．原核生物体RNA的合成由RNA聚合酶全酶完成，ζ负责___________；原核中RNA合成的终止有时必须_______________参加。
8．ζ因子专一性表现在()。
A．ζ因子修饰酶(SME)催化ζ因子变构，使其成为可识别应激启动子的ζ因子B．不同基因编码识别不同启动子的ζ因子C．不同细菌产生可以互换的ζ因子D．ζ因子参与起始依靠特定的核心酶
9．真核mRNA的3`端的polyA的重要功能是______________和______________
1．核糖体，肽酰tRNA结合区，氨酰tRNA结合区2．核糖体RNA
3．分子内切割，化学修饰4．同义错义5．32
1．包括两个tRNA分子的结合位点： ,即P位点，紧密结合与多肽链延伸尾端连接的tRNA分子；即A位点，结合带有一个氨基酸的tRNA分子。
2．在活细胞中，最稳定的RNA类型是。
3．真核生物rRNA加工主要是两个内容：______________和__________________。
4．如果碱基的改变产生一个并不改变氨基酸残基编码的密码子，并且不会造成什么影响，这就是____突变。如果改变了氨基酸残基的密码，这就是____突变。
5．假定摆动假说是正确的，那么最少需要＿＿＿＿种tRNA来翻译61种氨基酸密码子。
1．总RNA分离的方法很多，常采用的是异硫氰酸胍和b-巯基乙醇这两种RNase抑制剂来抑制RNase的活性
1．代谢物2．甲基化，CpG，C 3．Inr，TA TA，－10，TFIID 4．接合型
5．结构域，结合，激活6．tRNA,snRNA _rRNA（5S）
1．在乳糖存在的情况下，葡萄糖依然能够抑制乳糖操纵子的机制称为＿＿＿＿＿。
2．基因表达还受到DNA＿＿＿＿修饰的影响。＿＿＿＿双联体的＿＿＿＿残基通常被甲基化。
3．RNA聚合酶Ⅱ的启动子也包含若干序列元件，只是它们比聚合酶Ⅰ和聚合酶Ⅲ的启动子更加复杂多样。首先，在转录起始位点附近发现一个松散保守的＿＿＿＿序列。很多聚合酶Ⅱ的启动子在起始位点上游约25个核苷酸处具有一个＿＿＿＿框。除了位置不同外，它与原核生物的＿＿＿＿元件很相似。它是第一个识别聚合酶Ⅱ的因子＿＿＿＿的结合位点。
4．酵母细胞通过DNA重排改变____________。
5．转录因子通常具有两个独立的：一个转录DNA，一个转录
6．真核生物RNA聚合酶III负责转录
五、简答题(8小题,共30分)
1．请描述C值矛盾，并举一个例子说明。
1．对高等真核生物而言，生物体基因组的大小与其复杂性并没有直接的联系。亲缘关系相近的生物体的DNA含量可能相差很大。例如，一些两栖类动物比其他的两栖类动物的DNA含量多100倍，但它们的进化地位并不因此而更高。
2．RecA蛋白是怎样调节SOS反应的?
2．RecA蛋白识别损伤DNA，引发LexA蛋白的自身催化切割。LexA蛋白的失活，可以除去那些含有编码修复与防御蛋白质基因(如recA、uvrAB和umuC)的操纵子上的阻抑蛋白。由于lexA的表达是自我调节的，所以SOS反应会在产生必须修复功能的同时，也会产生中止反应的产物，使反应恢复正常状态。产生这些产物的操纵子也受LexA蛋白的阻抑。
3．哪些条件可促使DNA复性(退火)?
3．降低温度、pH和增加盐浓度可以促进DNA复性(退火)。
5．大肠杆菌染色体的分子质量大约是2．5X10^9Da，核苷酸的平均分子质量是330Da，两个邻近核苷酸对之间的距离是0.34nm，双螺旋每一转的高度(即螺距)是3．4nm，请问：
(1)该分子有多长?
(2)该DNA有多少转?
5．(1)l碱基=330Da，1碱基对=660Da
碱基对数=2．5X109／660=3．8X106=3800kb每个碱基对相距0．34nm，这样染色体DNA分子的长度=3．8X106X0．34nm=1．3X106nm=1．3mm
(2)该DNA双螺旋中的转数=3．8X106X0．34／3．4=3．8X105。
6．一个基因组有两个序列。一个是A，另一个是B,各有2000bp长，其中一个是由400bp的序列重复5次而成，另一个则由50bp的序列重复40次而成，问：
(1)这个基因组的大小怎样?
(2)这个基因组的复杂性如何?
6．基因组的大小是指在基因组中DNA的总量、复杂性是指基因组中所有单一序列的总长度。(1)4000bp。
(2)450bp。
1．哪些转录因子含有TBP?为什么它们被称为定位因子?请用一个模型解释为什么所有三种RNA聚合酶都能与TBP发生作用?
2．概括说明ζ因子对启动子调节的辅助功能。
2．ζ因子(除了RpoN)有识别启动子序列的结构域。作为游离的蛋白质，ζ因子并不具备与DNA结合的构象。当ζ因子与核心酶结合后构象发生改变，其N端游离出与DNA结合的结构域。ζ因子的这一调节方式是为了防止游离的ζ因子与启动子区结合，而阻碍了依赖于全酶的转录启动。另外，这样也可防止形成全酶的ζ因子的浓度被稀释，因为每一个细胞中，大约每3个核心酶对应于一个ζ因子。
3．比较真核生物与原核生物转录起始的第一步有什么不同。
3．细菌中，DNA指导的RNA聚合酶核心酶由四个亚基组成(两个α亚基，一个β亚基，一个β’亚基)。核心酶与ζ亚基结合产生全酶。核心酶可以催化NTP的聚合，但只有全酶能够引发转录的开始。主要的步骤是：具有特异识别能力的ζ亚基识别转录起始点上游的启动子特异同源序列，这样可以使全酶与启动子序列结合力增加，形成封闭的二元复合物。关键的作用是RNA聚合酶与DNA的相互作用。真核生物中，当含TBP的转录因子与DNA相互作用时，其他因子也结合上来，形成起始复合体，这一复合体再与RNA 聚合酶结合，因此主要是RNA聚合酶与蛋白质之间的作用。
4．列举4种天然存在的具有催化活性的RNA。
4．I组内含子、II组内含子、RNaseP、锤头型核酶。
1．为什么mRNA的翻译起始密码子的上游必须含有不被翻译的核糖核苷酸?
1．原核与真核细胞的mRNA必须在翻译起始密码子上游有一段不被翻译的核糖核苷酸上游区(前导序列)，一则可以为核糖体结合提供位点，二则保持结合的稳定性。
2．简述真核与原核细胞中翻译起始的主要区别。
2．原核细胞与真核细胞翻译起始的主要区别是来自mRNA的本质差异以及小亚基与mRNA起始密码子上游区结合的能力。原核细胞mRNA较不稳定，而且是多顺反子，在IF-3介导下，通过16SrRNA的3’端在核糖体结合位点与小亚基直接结合后，原核细胞翻译起始复合物(1F-3、30S、mRNA、IF-2、GTP、fMet-tRNA)就装配起来了。而在真核细胞中，需要几种起始因子(eIF-4、4A、4B)帮助mRNA启动，起始复合物(SIC、40S亚基、elF-2、GTP、Met、tRNA)才能结合(在elF-4和elF-3因子的促使下)到mRNA帽子上。一旦结合，SIC开始向mRNA下游区搜索，直至找到第一个AUG密码子。
3．有一个被认为是mRNA的核苷酸序列，长300bp，你怎样才能：(1)证明此RNA是mRNA而不是tRNA 或rRNA。(2)确定它是真核还是原核mRNA。
3．根据序列组成进行判断：(1)此序列太长不可能是tRNA。如果它是rRNA，应该含有许多特殊元件，如假尿嘧啶和5—甲基胞嘧啶；同时应具有可以形成发夹环的反向重复序列。如果是mRNA则应有AUG起始密码子、一段相应的氨基酸密码子和一个相应的终止密码子构成的可读框。(2)所有的真核生物mRNA在5，端都含有一个7—甲基鸟苷，而且大多数还在3’端有一个长的poly(A)尾巴。这些都是原核生物mRNA 所不具有的，但是原核生物mRNA靠近5，端有一个核糖体结合序列(SD序列)。
4．氨酰tRNA合成酶的功能是什么?
4．两个类型的10种氨酰tRNA合成酶各自对应一种功能性氨酰tRNA。通过两步反应，特定的氨基酸先通过磷酸化与氨酰AMP结合，然后与相关的tRNA结合(磷酸二酯键的断裂)，这一反应的精确性是mRNA遵循遗传密码进行翻译的基础。
5-6章习题题目部分
1．一份蛋白质的混合物要在3种丙烯酰胺凝胶中电泳，每种凝胶都有一种不同的pH值，每种凝胶中都能看到5个条带。①能否得出混合物中只有5种蛋白质的结论？试解释。②如果是一个线性DNA片段的混合物的电泳，可否得出相同的结论？
3．在基因操作实践中有哪些检测核酸和蛋白质相对分子质量的方法？
4．色谱法常被用来从其他RNA分子中分离真核mRNA，分离柱的惰性介质上连接着寡-dT。请问这种分离方法的原理是什么？
1．不能，因为形状不同会影响移动性——即两种分子量和形状都不同的蛋白质分子，在电泳中可能具有相同的移动性。
可以，所有线性DNA片段都具有相同的基本形状和相同的电荷聚集率。因此，如果所有条带的强度看起来相同，那么可以得出存在5种不同的DNA片段的结论。
4．真核mRNA分子含有一个末端的poly(A)，poly(A)能够在复性调节下，与柱子里的dT形成氢键。因此，mRNA将留在柱子里，其它类型的RNA将通过柱子。最后，通过加热便能非常容易地将mRNA从柱子上洗脱下来。
7-8章题目部分，
2．论述真核生物基因表达的多级调控系统。
1．蜜二糖是lac操纵子的弱诱导物，它通常在自己的透性酶作用下进入细胞。但如果细胞在42℃下生长，透性酶失去活性，则蜜二糖只有在lacY透性酶存在的情况下才能进入细胞。这样，42℃下lacYˉ和lacPˉ的突变株不能在以蜜二糖为惟一碳源的培养基上生长。如何通过这种特性分离lac操纵子的组成型突变? 1．42℃时，一个lac+诱导型菌株不能生长在含蜜二糖的培养基上。因为乳糖透性酶不能被诱导产生(细胞内既没有乳糖，也没有蜜二糖)。任何组成型的lacOc和lacⅠˉ突变都能生长，原因是乳糖操纵子是永久性表达的，所以，蜜二糖就能够被乳糖透性酶运入细胞内。
2．根据基因家族内各成员同源性的程度，基因家族应分为哪几类？
2．基因家族是指核苷酸序列或编码产物具有一定程度同源性的一组基因.
(1)核酸序列相同, 在真核生物基因组中，有些基因的拷贝数不只一个，可以有几个、几十个或上百个，这些基因被称为单纯多基因家族（各基因的核苷酸序列相同）如rRNA,tRNA家族和组蛋白基因家族。(2分) (2)家族中各基因核苷酸序列高度同源,如人类生长激素基因家族。(3)家族中各基因编码的产物蛋白质有同源功能区（但基因的核苷酸序列相似性可能很低）如src癌基因家族。(2分)
(4)家族各基因编码的蛋白质中具有小段保守基序，如DEAD box基因家族。(5)基因超家族是指一组由多基因家族及单基因家族组成的更大的基因家族。(2分)
（注意：有些答案不完整或者不准确，请注意及时修改补充）
1、请列举3项实验证据来说明为什么染色质中DNA与蛋白质分子是相互作用的。
1、Tm值高；DNA酶消化慢；DNA聚合酶和RNA聚合酶催化复制和转录活性低于自由DNA。
2、简述组蛋白都是有那些类型的修饰，其功能分别是什么？
2、组蛋白的修饰作用包括甲基化、乙酰化、泛素化等，降低了组蛋白所带正电荷，直接或间接影响基因的转录活性，组蛋白甲基化可发生在组蛋白的赖氨酸和精氨酸残基上，与基因激活和基因沉默相关。
组蛋白乙酰化主要发生在核心组蛋白上，组蛋白乙酰化呈多样性，核小体上有多个位点可提供乙酰化，乙酰化/去乙酰化修饰影响染色质结构和基因活化，高乙酰化水平会使转录活化，低乙酰化则抑制转录。
磷酸化？组蛋白泛素化修饰位点为高度保守的赖氨酸残基，但与经典蛋白质泛素化不同，不会导致蛋白质的降解，但能够招募核小体到染色体，参与X染色体的失活，影响组蛋白的甲基化和基因转录。（p27）3、DNA复制时为什么前导链是连续复制，而后随链是以不连续的方式复制？并请以大肠杆菌为例简述后随链复制的各个步骤。
3、复制叉，引发酶，冈崎片段，然后以与复制叉移动相反的方向按照5ˊ→3ˊ方向合成一系列的冈崎片段，引物去除，连接酶连接。以大肠杆菌为例见p51。
4、真核生物DNA的复制在哪些水平上受调控？
4、（1）细胞生活周期水平调控：也称限制点调控，即决定细胞停留在G1期还是进入S期。
（2）染色体水平调控：决定不同染色体或同一染色体不同部位的房子字按一定顺序在S期起始复制。（3）复制子水平调控：决定复制的起始与否。这种调控从单细胞上午到高等生物是高度保守的。
5、什么是转座子？可分为哪些种类？
5、转座子是存在于染色体DNA上可自主复制和位移基本单位。种类有：
（1）插入序列（IS）是最简单的转座子，不含任何宿主基因、是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。末端具有反向重复序列。
（2）复合型转座子是一类带有某些抗药性基因的转座子，其两翼往往是两个相同或高度同源的IS 序列。
（3）除以上两种外，还存在一些没有IS的、体积庞大的转座子------TnA家族。其带有三个基因，其中一个编码β-内酰胺酶，另外两个则是转座作用所必需的。（P-63）
6、什么是SNP? SNP作为第三代遗传标记的优点是什么？
6、SNP即单核苷酸多态性。主要指在基因水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。优点见P-66.
第三、四章作业
10.什么是上升突变？什么下降下降突变？
上升突变：增加Pribnow区共同序列的同一性，转录水平会上升。例如在乳糖操纵子的启动子中，将其Pribnow区从TATGTT变成TATA TT，就会提高启动子的效率，提高乳糖操纵子基因的转录水平。
下降突变：如果Pribnow区从TATAA T变成AATAA T就会大大降低其结构基因的转录水平。在原核生物中，-35区与-10区之间的距离大约是16到19bp，小于15bp或大于20bp都会降低启动子的活性，即造成下降突变。
12.真核与原核生物基因转录有哪些差异？（课本P93）
15.简述Ⅰ、Ⅱ类内含子的剪接特点。
答：Ⅰ类内含子的剪接主要是转酯反应，即剪接反应实际上是发生了两次磷酸二脂键的转移。I类内含子的切除体系中，在第一个转酯反应由一个游离的鸟苷或者鸟苷酸介导，鸟苷或鸟苷酸的3’—OH作为亲核基团攻击内含子5’端的磷酸二脂键，从上游切开RNA链。在第二个转酯反应中，上游外显子的自由3’—OH作为亲核基团攻击内含子3’位核苷酸上的磷酸二脂键，使内含子被完全切开，上下游两个外显子通过新的磷酸二脂键相连。Ⅱ类内含子主要存在于真核生物的线粒体和叶绿体rRNA基因中，在Ⅱ类内含子切除体系中，转酯反应无需游离鸟苷或鸟苷酸，而是由内含子本身的靠近3’端的腺苷酸2’—OH作为亲核基团攻击内含子5’端的磷酸二脂键，从上游切开RNA链后形成套索结构。再由上游外显子的自由3’—OH作为亲核基团攻击内含子3’位核苷酸上的磷酸二脂键，使得内含子被完全切开，上下游两个内含子通过新的磷酸二脂键相连。
16.什么是套索状结构？哪些类型RNA的剪接中会形成该结构？
1）在RNA剪接过程中，内含子分支位点的保守腺苷酸的2，OH攻击5，剪接位点保守鸟苷酸的磷酸基团，使内含子5，端与外显子3’端之间的磷酸二酯键断开，故形状像套索。
2)pre-mRNA与Ⅱ类自剪接内含子形成套索状结构。
第四章
5．简述摆动学说。
摆动学说认为，在密码子与反密码子的配对中，前两对严格遵守碱基配对原则，第三对碱基有一定的自由度，可以“摆动”，因而使某些tRNA可以识别1个以上的密码子。反密码子的第一位碱基为A或C时
，只识别一种密码子，为G或U时，可识别两种，为I时可识别三种密码子。
12.哪些种类抗生素只能特异性地作用于原核生物核糖体？哪些只作用于真核生物核糖体？哪些既能抑制原核生物核糖体，也能抑制真核生物核糖体？
氯霉素四环素红霉素青霉素卡那霉素只能特异性地作用于原核生物核糖体
白喉毒素放线菌酮只作用于真核生物核糖体
潮霉素嘌呤霉素链霉素蓖麻毒素既能抑制原核生物核糖体，也能抑制真核生物核糖体
16.蛋白质有哪些翻译后的加工修饰？其作用机制和生物学功能是什么？（课本P144-146）
1）N端fMet或Met的切除N端的甲酰基被脱甲酰化酶水解得到有功能的蛋白因子
2）二硫键的形成通过两个半胱氨酸的氧化作用生成稳定蛋白质天然构象
3)特定安氨基酸的修饰
1.磷酸化由多种蛋白激酶催化
2.糖基化大多数由内质网中的糖基化霉催化
3.甲基化由N-甲基转移酶催化
4乙酰化由N-乙酰转移酶催化
4)切除新生肽链中的非功能片段合成特定功能的具有活性的蛋白质分子。
生物学功能：蛋白质经过以上各种加工修饰才能变成有活性的蛋白质在生命活动过程中执行其功能。
第五、六章作业
简述PCR扩增的原理和步骤。
答：PCR is to amplify DNA segment whose base sequence located it’s two ends have been deaved
（1）变性：denaturation
（2）退火：annealing
（3）合成：extension
2、荧光染料SYBR Green I和TaqMan荧光探针的主要不同点。
答：TaqMen 探针的两端有一个荧光基因和淬灭基因，由于距离太近，荧光信号被淬灭基因吸收，发生荧光猝灭，检测不到荧光，当PCR反应开始时，随着双链DNA变性产生单链DNA，TaqMan探针结合到与之配对的靶DNA序列上，并被具有外切酶活性的TaqDNA聚合酶逐个切除而降解，从而解除荧光淬灭的束缚，荧光基因发出荧光，反映DNA量。
在基因操作实践中有哪些检测核算和蛋白质相对相对分子质量的方法？
答：（1）凝胶电泳技术
（2）双向电泳技术
（3）质谱分析技术
基因敲除技术：
答：PACE技术、应用cDNA差示分析法克隆技术、Gateway大规模克隆技术、基因的图位克隆法、热不对称交错多聚酶链式反应克隆T-DNA插入位点侧翼序列
已知一个cDNA 3’端的部分序列，请设计实验流程得到该基因的全长cDNA。
答：（1）在3’端加上Poly C,并扩增
（2）用接头物adapter dG扩增5’端
（3）拼接序列
（4）设计引物扩增全长
第六章
RNAi的原理和前景
答：利用双链小RNA降解细胞中同源mRNA从而阻断靶基因的表达。
前景：基因功能分析、研究信号转导、药物研发、细胞周期调控等。
DNA与蛋白质相互作用的研究方法：
答：酵母单杂交系统、凝胶滞缓实验、DNAsel足迹实验
蛋白质与蛋白质的相互作用的研究方法：
答：酵母双杂交系统、等离子表面共振技术、免疫共沉淀技术、GST和GAD融合蛋白沉降技术、荧光共振能量转移法、噬菌体展示技术
基因敲除的手段：
答：构建重组基因载体法、T-DNA插入失活技术、RNA干涉技术
第七、八章作业题
第七章
代谢物对基因表达调控的两种方式
原核生物基因表达调控分为正转录调控和负转录调控。
产物为激活蛋白为正转录调控，诱导物使激活蛋白处于活性为正控诱导，诱导物使激活蛋白处于非活性为正控阻遏。
产物为阻遏蛋白为负转录调控；阻遏蛋白不与诱导物结合为负控诱导，遏蛋白与诱导物结合为负控阻遏。乳糖操纵子调控模型
1.Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码
2.这个mRNA分子的启动子紧接着O区，而位于I与O之间的启动子区（P），不能单独起动合成β-半乳糖苷酶和透过酶的生理过程。
3.操纵基因是DNA上的一小段序列（仅为26bp），是阻遏物的结合位点。
4.当阻遏物与操纵基因结合时，lac mRNA的转录起始受到抑制。
5.诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与操纵基因结合，从而激发lac mRNA的合成。色氨酸调控子的阻遏系统和弱化机制
阻遏：当培养基中色氨酸含量较高时，辅阻遏物与色氨酸结合，可阻遏trp操纵子的转录；当培养基色氨酸含量不足时，辅阻遏物不结合色氨酸，不能阻遏trp操纵子的转录。
弱化：当培养基色氨酸含量很低时，载有色氨酸的tRNA-Trp也少，这时的前导区结构形成2-3配对，不形成3-4配对的发夹结构，转录进行。当培养基色氨酸含量很高时，载有色氨酸的tRNA-Trp也多，这时的前导区结构形成3-4配对的发夹结构，转录终止。
反义RNA的调控机理
大量反义RNA,与bfr的mRNA配对，阻止细菌铁蛋白基因的翻译。
第八章
DNA甲基化对基因表达的调控机制。
当组蛋白H1与含CCGG序列的甲基化或非甲基化DNA分别形成复合体时，DNA的构型存在着很大的差别，甲基化达到一定程度时会发生从常规的B-DNA向Z-DNA的过渡。由于Z-DNA结构收缩，螺旋加深，使许多蛋白质因子赖以结合的元件缩入大沟而不利于基因转录的起始。DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与DNA的相互作用，抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。直接和间接，X染色体失活。
简述真核生物转录元件组成及分类。
启动子、增强子、终止子
启动子：（1）核心启动子：转录起始位点及上游的TATA区。（2）上游启动子元件，-70位的CAA Tbox，和GCbox。
增强子：在5′端转录起始点上游约100个核苷酸以远的位置，有些顺序可以起到增强转录活性的作用，它能使转录活性增强上百倍，因此被称为增强子。增强子通常有组织特异性，这是因为不同细胞核有不同的特异因子与增强子结合
终止子：AATAAA顺序和它下游的反向重复顺序合称为终止子，是转录终止的信号。
简述反式作用因子的结构特点及其对基因表达的调控。
TF：一，DNA结合域:1.螺旋-转折-螺旋结构。同源域蛋白通过第三个螺旋与双链DNA的大沟结合，N端的延伸部分于DNA小沟结合，提高稳定性。2.锌指结构，两个锌原子将两个α螺旋装配成类似HTH结构，再以同源或异源二聚体的方式将两个α螺旋结合在相邻的两个大沟中。3.碱性亮氨酸拉链，同一个或不同多肽链的两个α-螺旋的疏水面相互作用形成一个圈对圈的二聚体结构与DNA结合。4.碱性-螺旋-环-螺旋，转录激活域，酸性激活域，谷氨酰胺富含域，脯氨酸富含域。
蛋白质-蛋白质结合域，二聚化结构域
举例说明蛋白质磷酸化如何影响基因表达。
磷酸化与去磷酸化的重要性。
受cAMP水平调控的A激酶。
调节亚基（PKA）与CAMP结合，引起构象改变，释放催化亚基。
C激酶与PIP2，IP3，DAG
DAG提高了C激酶对于钙离子的亲和力，使PKC能被钙离子所活化。
CaM及MAP激酶
C激酶激活丝氨酸/苏氨酸的级联磷酸化反应
蛋白质磷酸化与细胞分裂调控
十一章
STS路标：序列标签位点
鸟枪法：1.用机械方法打断DNA，建立插入片段约2kb的高度随机基因组文库。高效、大规模的两末端测序。
用有关软件对测序克隆片段进行序列集合。
用适当方法填补缺口。
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。 10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10区的TATA、-35区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源DNA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛选重组细菌。称之为蓝-白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。18．Klenow酶：DNA聚合酶I大片段，只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（IF-2）和（IF-3）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（ S2）开始，无G时转录从（ S1）开
分子生物学复习题(有详细答案)
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绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了“脱氧核糖核苷酸的结构”的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分
现代分子生物学试题 邯郸学院12生技 Chapter 3 生物信息的传递——从DNA到RNA 一、名词解释： 1、Transcription 2、Coding strand (Sense strand) 3、Intron 4、RNA editing 5、Messenger RNA (mRNA) 二、判断正误： 1、基因表达包括转录和翻译两个阶段 2、mRNA是以有义链为模板进行转录的 3、转录起始就是RNA链上第一个核苷酸键的产生 4、σ因子的作用是负责模板链的选择和转录的起始 5、聚合酶可以横跨40个碱基对，所以解旋的DNA区域也是40个碱基对 6、流产式起始是合成并释放2~9个核苷酸的短RNA转录物 7、启动子是有义链上结构基因5’端上游区的DNA序列 8、大肠杆菌基因中存在-10bp处的TTCACA区 9、-35区是指5’到3’方向-35区最后一个碱基离+1碱基为35个bp 10、真核基因几乎都是单顺反子 三、单选： 1、_______号帽子存在于所有帽子结构中 A、0号 B、1号 C、2号 D、以上全不是 2、在对启动子识别中起关键作用的是_______ A、α亚基 B、β亚基 C、σ因子 D、β’亚基 3、RNA聚合酶中提供催化部位的是_______ A、α+α B、α+β C、α+β’ D、β+β’ 4、_______是细胞内更新率极高不稳定的RNA A、mRNA B、rRNA C、tRNA D、snRNA 5、mRNA由细胞核进入细胞质所必需的形式是_______ A、5’端帽子 B、多聚腺苷酸尾 C、ρ因子 D、以上都不是 6、真核生物RNA聚合酶II所形成的转录起始复合物不包括_______ A、TBP B、TFIIA C、TFIIC D、TFIID 7、真核生物转录的所在空间是_______ A、细胞质 B、细胞核 C、核孔 D、线粒体 8、ρ因子本质上是一种_______ A、核苷酸 B、蛋白质 C、多糖类 D、碱基
生命科学系本科2010-2011学年第1学期试题分子生物学（A）答案及评分标准 一、选择题，选择一个最佳答案（每小题1分，共15分） 1、1953年Watson和Crick提出（A ） A、多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B、DNA的复制是半保留的，常常形成亲本——子代双螺旋杂合链 C、三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D、遗传物质通常是DNA而非RNA 2、基因组是（D ） A、一个生物体内所有基因的分子总量 B、一个二倍体细胞中的染色体数 C、遗传单位 D、生物体的一个特定细胞内所有基因的分子总量 3、下面关于DNA复制的说法正确的是（D ） A、按全保留机制进行 B、按3＇→5＇方向进行 C、需要4种NTP加入 D、需要DNA聚合酶的作用 4、当过量的RNA与限量的DNA杂交时（A ） A、所有的DNA均杂交 B、所有的RNA均杂交 C、50%的DNA杂交 D、50%的RNA杂交 5、以下有关大肠杆菌转录的叙述，哪一个是正确的？（B ） A、-35区和-10区序列间的间隔序列是保守的 B、-35区和-10区序列距离对转录效率非常重要 C、转录起始位点后的序列对于转录效率不重要 D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游10bp处 6、真核生物mRNA转录后加工不包括（A ） A、加CCA—OH B、5＇端“帽子”结构 C、3＇端poly（A）尾巴 D、内含子的剪接 7、翻译后的加工过程不包括（C ） A、N端fMet或Met的切除 B、二硫键的形成 C、3＇末端加poly（A）尾 D、特定氨基酸的修饰
8、有关肽链合成的终止，错误的是（C ） A、释放因子RF具有GTP酶活性 B、真核细胞中只有一个终止因子 C、只要有RF因子存在，蛋白质的合成就会自动终止 D、细菌细胞内存在3种不同的终止因子：RF1、RF2、RF3 9、酵母双杂交体系被用来研究（C ） A、哺乳动物功能基因的表型分析 B、酵母细胞的功能基因 C、蛋白质的相互作用 D、基因的表达调控 10、用于分子生物学和基因工程研究的载体必须具备两个条件（B ） A、含有复制原点，抗性选择基因 B、含有复制原点，合适的酶切位点 C、抗性基因，合适的酶切位点 11、原核生物基因表达调控的意义是（D ） A、调节生长与分化 B、调节发育与分化 C、调节生长、发育与分化 D、调节代谢，适应环境 E、维持细胞特性和调节生长 12、乳糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是（E ） A、与DNA结合影响模板活性 B、与启动子结合 C、与操纵基因结合 D、与RNA聚合酶结合影响其活性 E、与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNA 13、Lac阻遏蛋白由（D ）编码 A、Z基因 B、Y基因 C、A基因 D、I基因 14、紫外线照射引起DNA损伤时，细菌DNA修复酶基因表达反应性增强，这种现象称为（A ） A、诱导 B、阻遏 C、正反馈 D、负反馈 15、ppGpp在何种情况下被合成？（A ） A、细菌缺乏氮源时 B、细菌缺乏碳源时 C、细菌在环境温度太高时 D、细菌在环境温度太低时 E、细菌在环境中氨基酸含量过高时
一、名词解释 1、广义分子生物学：在分子水平上研究生命本质的科学，其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学：即核酸（基因）的分子生物学，研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程，以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能 3、基因：遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因：基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学：是依附于对DNA序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学：是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学：对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组：指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学：是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白：也叫微生物蛋白，它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而，单细胞蛋白不是一种纯蛋白质，而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组：指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值：指生物单倍体基因组的全部DNA的含量，单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾：C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因：共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠：同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。 16、单拷贝序列：单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次，因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息，编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列：低度重复序列是指在基因组中含有2～10个拷贝的序列 18、中度重复序列：中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万（<105）次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序，但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列：基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。 20、基因家族：真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因，可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 21、基因簇：基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体的特殊区域。 22、超基因家族：由基因家族和单基因组成的大基因家族，各成员序列同源性低，但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 23、假基因：一种类似于基因序列，其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。 24、复制：是指以原来DNA（母链）为模板合成新DNA（子链）的过程。或生物体以DNA/RNA
现代分子生物学复习题
现代分子生物学 一.填空题 1.DNA的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染 小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′ 东隅已逝 2 桑榆非晚！
末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一 种经济的方法、可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc 构型、 L构型。在电泳中最前面的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、 CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转 录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA 显微注射法、胚胎干细胞法。 14.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、 TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、B、E 。 其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有32.8%的T,则A为_32.8%_,G 为_17.2%_和C为_17.2%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 17.DNA合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA 东隅已逝 3 桑榆非晚！
1、分子生物学的定义。 从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控。 2、简述分子生物学的主要研究内容。 a.DNA重组技术（基因工程） （1）可被用于大量生产某些在正常细胞代谢中产量很低的多肽 ; （2）可用于定向改造某些生物的基因组结构 ; （3）可被用来进行基础研究 b.基因的表达调控 在个体生长发育过程中生物遗传信息的表达按一定时序发生变化（时序调节），并随着内外环境的变化而不断加以修正（环境调控）。 c.生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） 一个生物大分子，无论是核酸、蛋白质或多糖，在发挥生物学功能时，必须具备两个前提： (1)拥有特定的空间结构（三维结构）； (2)发挥生物学功能的过程中必定存在着结构和构象的变化。 结构分子生物学就是研究生物大分子特定的空间结构及结构的运动变化与其生物学功能关系的科学。它包括3个主要研究方向： (1) 结构的测定 (2) 结构运动变化规律的探索 (3) 结构与功能相互关系 d.基因组、功能基因组与生物信息学研究 3、谈谈你对分子生物学未来发展的看法？ (1)分子生物学的发展揭示了生命本质的高度有序性和一致性，是人类认识论上的重大飞跃。生命活动的一致性，决定了二十一世纪的生物学将是真正的系统生物学，是生物学范围内所有学科在分子水平上的统一。 (2)分子生物学是目前自然学科中进展最迅速、最具活力和生气的领域，也是新世纪的带头学科。
(3)分子生物学是由生物化学、生物物理学、遗传学、微生物学、细胞学、以及信息科学等多学科相互渗透、综合融会而产生并发展起来的，同时也推动这些学科的发展。 (4)分子生物学涉及认识生命的本质，它也就自然广泛的渗透到医学、药学各学科领域中，成为现代医药学重要的基础。 1、DNA双螺旋模型是哪年、由谁提出的?简述其基本内容。 DNA双螺旋模型在1953年由Watson和Crick提出的。 基本内容： (1) 两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕，两条链均为右手双螺旋。 (2) 嘌呤与嘧啶碱位于双螺旋的内侧，3′,5′- 磷酸与核糖在外侧，彼此通过磷酸二酯键相连接，形成DNA分子的骨架。 (3) 双螺旋的平均直径为2nm,两个相邻碱基对之间相距的高度即碱基堆积距离 为0.34nm,两个核苷酸之间的夹角为36。。 (4) 两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相连系而结合在一起，A与T相配对形成两个氢键，G与C相配对形成3个氢键。 (5) 碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制，但根据碱基互补配对原则，当一条多核苷酸的序列被确定后，即可决定另一条互补链的序列。
分子生物学备选考题 名词解释: 1.功能基因组学 2.分子生物学 3.epigenetics 4.C值矛盾 5.基因簇 6.间隔基因 7.基因芯片 8.基序（Motifs） 9.CpG岛 10.染色体重建 11.Telomerase 12.足迹分析实验 13.RNA editing 14.RNA干涉（RNA interference） 15.反义RNA 16.启动子（Promoter） 17.SD序列(SD sequence) 18.碳末端结构域（carboxyl terminal domain，CTD） 19.single nucleotide polymorphism，SNP 20.切口平移（Nick translation） 21.原位杂交 22.Expressing vector 23.Multiple cloning sites 24.同源重组 25.转座 26.密码的摆动性 27.热休克蛋白嵌套基因 28.基因家族增强子 29.终止子 30.前导肽RNAi 31.分子伴侣 32.魔斑核苷酸 33.同源域 34.引物酶 35.多顺反子mRNA 36.物理图谱、 37.载体（vector） 38.位点特异性重组 39.原癌基因（oncogene） 40.重叠基因、 41.母源影响基因、
42.抑癌基因（anti-oncogene）、 43.回文序列（palindrome sequence）、 44.熔解温度（melting temperature, Tm） 45.DNA的呼吸作用（DNA respiration） 46..增色效应（hyperchromicity）、 47.C0t曲线（C0t curve）、 48.DNA的C值（C value） 49.超螺旋(superhelix) 、 50.拓扑异构酶（topoisomerase）、 51.引发酶(primase) 、 52.引发体(primosome) 53.转录激活(transcriptional activation) 54.dna基因(dna gene)、 55.从头起始(de novo initiation) 、 56.端粒（telomere） 57.酵母人工染色体（yeast artificial chromosome, YAC）、 58.SSB蛋白（single strand binding protein）、 59.复制叉(replication fork)、 60.保留复制(semiconservative replication) 61.滚环式复制(rolling circle replication)、 62.复制原点(replication origin)、 63.切口(nick) 64.居民DNA (resident DNA) 65.有义链(sense strand) 66.反义链(antisense strand) 67.操纵子(operon) 、 68.操纵基因(operator) 69.内含子(内元intron) 70.外显子(外元exon) 、 71.突变子(muton) 、 72.密码子（codon）、、 73.同义密码（synonymous codons）、 74.GC盒(GC box) 75.增强子(enhancer) 76.沉默子(silencer) 77.终止子(terminator) 78.弱化子（衰减子）(attenuator) 79.同位酶(isoschizomers) 、 80.同尾酶(isocandamers) 81.阻抑蛋白（阻遏蛋白）(repressor) 82.诱导物（inducer）、 83.CTD尾（carboxyl-terminal domain ） 84.载体（vector）、 85.转化体(transformant)
现代分子生物学 复习提纲 第一章绪论 第一节分子生物学的基本含义及主要研究内容 1 分子生物学Molecular Biology的基本含义 ?广义的分子生物学：以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究 对象，从分子水平阐明生命现象和生物学规律。 ?狭义的分子生物学：偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调控 等过程，也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 1.1 分子生物学的三大原则 1) 构成生物大分子的单体是相同的 2) 生物遗传信息表达的中心法则相同 3) 生物大分子单体的排列（核苷酸、氨基酸）的不同 1.3 分子生物学的研究内容 ●DNA重组技术（基因工程） ●基因的表达调控 ●生物大分子的结构和功能研究(结构分子生物学） ●基因组、功能基因组与生物信息学研究 第二节分子生物学发展简史 1 准备和酝酿阶段 ?时间：19世纪后期到20世纪50年代初。 ?确定了生物遗传的物质基础是DNA。 DNA是遗传物质的证明实验一：肺炎双球菌转化实验 DNA是遗传物质的证明实验二：噬菌体感染大肠杆菌实验 RNA也是重要的遗传物质-----烟草花叶病毒的感染和繁殖过程 2 建立和发展阶段 ?1953年Watson和Crick的DNA双螺旋结构模型作为现代分子生物学诞生的里程碑。 ?主要进展包括： ?遗传信息传递中心法则的建立 3 发展阶段 ?基因工程技术作为新的里程碑，标志着人类深入认识生命本质并能动改造生命的新时期开始。 ? 第三节分子生物学与其他学科的关系 思考 ?证明DNA是遗传物质的实验有哪些？ ?分子生物学的主要研究内容。 ?列举5～10位获诺贝尔奖的科学家，简要说明其贡献。 第二章染色体与DNA
第2章染色体与DNA 名词解释 原癌基因：细胞内与细胞增殖相关的正常基因，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。 复制：以亲代DNA或RNA为模板，根据碱基配对的原则，在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 转座子 (transposon 或 transposable element)：位于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。包括插入序列和复合转座子。 半保留复制：以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA 中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制。 染色体：染色体是遗传信息的载体，由DNA、RNA和蛋白质构成，其形态和数目具有种系的特性。在细胞间期核中，以染色质形式存在。在细胞分裂时，染色质丝经过螺旋化、折叠、包装成为染色体，为显微镜下可见的具不同形状的小体。 核小体：是构成真核生物染色体的基本单位，是DNA和蛋白质构成的紧密结构形式，包括200bp左右的DNA和9个组蛋白分子构成的致密结构。 填空题 1.真核细胞核小体的组成是 DNA和蛋白 2.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片段发生连接，这是因为天然染色体末端存在端粒结构。 3.在聚合酶链反应中，除了需要模板DNA外，还需加入引物、DNA聚合酶、dNTP和镁离子。 4.引起DNA损伤的因素有自发因素、物理因素、化学因素。 5.DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链DNA结合蛋白。 6.参与DNA切除修复的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶、特异的核酸内切酶。 7.在真核生物中DNA复制的主要酶是DNA聚合酶δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。 8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。 9.DNA的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、DNA的直接修复。 选择题 1.真核生物复制起点的特征包括（B） A. 富含G-C区 B. 富含A-T区 C. Z-DNA D. 无明显特征 2.插入序列（IS）编码（A） A.转座酶 B.逆转录酶 C. DNA合成酶 D.核糖核酸酶 3.紫外线照射对DNA分子的损伤主要是(D) A.碱基替换 B.磷酸脂键断裂 C。碱基丢失 D.形成共价连接的嘧啶二聚体 4.自然界中以DNA为遗传物质的大多数生物DNA的复制方式（C） A.环式 B.D环式 C.半保留 D.全保留 5.原核生物基因组中没有（A） A.内含子 B.外显子 C.转录因子 D.插入序列 6.关于组蛋白下列说法正确的是(D)
现代分子生物学复习题 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
现代分子生物学 一.填空题 的物理图谱是DNA分子的限制性内切酶酶解片段的排列顺序。 2.核酶按底物可划分为自体催化、异体催化两种类型。 3.原核生物中有三种起始因子分别是IF-1、 IF-2 和IF-3 。 4.蛋白质的跨膜需要信号肽的引导，蛋白伴侣的作用是辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质。 5.真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：核心启动子元件和上游启动子元件。 6.分子生物学的研究内容主要包含结构分子生物学、基因表达与调控、DNA重组技术三部 分。 7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是肺炎球菌感染小鼠、T2噬菌体感染大肠杆菌这两 个实验中主要的论点证据是：生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能。 与mRNA之间的差别主要有两点： hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接、 mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴。 9.蛋白质多亚基形式的优点是亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法、可以减少蛋白质合成 过程中随机的错误对蛋白质活性的影响、活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭。 10.质粒DNA具有三种不同的构型分别是： SC构型、 oc构型、 L构型。在电泳中最前面 的是SC构型。 11.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别 是TFIID 、SP-1 和 CTF/NF1 。 12.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用，转录因子与DNA结合的功能域常见有以下 几种螺旋-转角-螺旋、锌指模体、碱性-亮氨酸拉链模体。 13.转基因动物常用的方法有：逆转录病毒感染法、DNA显微注射法、胚胎干细胞法。 聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是： D、A、 B、E 。其中TFII-D的功能是与TATA盒结合。 15.酵母DNA按摩尔计含有%的T,则A为%_,G为%_和C为%__。 16.操纵子包括_调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。 合成仪合成DNA片段时，用的原料是模板DNA‘TAQ 、引物、缓冲液、dNTP。 18.在琼脂糖电泳中，DNA会向正极移动。 19.染色体包括蛋白质、染色体两大部分。 20.环状DNA双链的复制主要可分为θ形、滚环形、D-环形三种类型。 21.转录的基本过程包括转录的起始、延伸、终止。 22.半乳糖对细菌有双重作用；一方面可以作为碳源供细胞生长；另一方面它又是细胞壁的成 分。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从 S2 开始，无G 时转录从 S1 开始。 重组技术也称为基因克隆或分子克隆。最终目的是把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤：
问答题： 1 衰老与基因的结构与功能的变化有关，涉及到：（1）生长停滞；（2）端粒缩短现象；（3）DNA损伤的累积与修复能力减退；（4）基因调控能力减退。 2 超螺旋的生物学意义：（1）超螺旋的DNA比松驰型DNA更紧密，使DNA分子体积变得更小，对其在细胞的包装过程更为有利；（2）超螺旋能影响双螺旋的解链程序，因而影响DNA分子与其它分子（如酶、蛋白质）之间的相互作用。 3 原核与真核生物学mRNA的区别： 原核：（1）往往是多顺反子的，即每分子mRNA带有几种蛋白质的遗传信息（来自几个结构基因）。（2）5端无帽子结构，3端一般无多聚A尾巴。（3）一般没有修饰碱基，即这类mRNA分子链完全不被修饰。 真核：（1）5端有帽子结构（2）3端绝大多数均带有多聚腺苷酸尾巴，其长度为20-200个腺苷酸。（3）分子中可能有修饰碱基，主要有甲基化，（4）分子中有编码区与非编码区。 4 tRNA的共同特征： （！）单链小分子，含73-93个核苷酸。（2）含有很多稀有碱基或修饰碱基。（3）5端总是磷酸化，5末端核苷酸往往是pG。（4）3端是CPCPAOH序列。（5）分子中约半数的碱基通过链内碱基配对互相结合，开成双螺旋，从而构成其二级结构，开头类似三叶草。（6）三级结构是倒L型。 5 核酶分类：（1）异体催化的剪切型，如RNaseP；（2）自体催化的剪切型，如植物类病毒等；（3）内含子的自我剪接型，如四膜虫大核26SrRNA前体。 6 hnRNA变成有活性的成熟的mRNA的加工过程： （1）5端加帽；（2）3端加尾（3）内含子的切除和外显子的拼接；（4）分子内部的甲基化修饰作用，（5）核苷酸序列的编辑作用。 7 反义RNA及其功能： 碱基序列正好与有意义mRNA互补的RNA称为反意义或反义RNA，又称调节RNA，这类RNA是单链RNA，可与mRNA配对结合形成双链，最终抑制mRNA作为模板进行翻译。这是其主要调控功能，还可作为DNA复制的抑制因子，与引物RNA互补结合抑制DNA的复制，以及在转录水平上与mRNA5末端互补，阻止RNA合成转录。 8 病毒基因组分型：（1）双链DNA（2）单链正股DNA（3）双链RNA（4）单链负股RNA（5）单链正股RNA 9 病毒基因组结构与功能的特点： （1）不同病毒基因组大小相差较大；（2）不同病毒的基因组可以是不同结构的核酸。（3）病毒基因组有连续的也有不连续的；（4）病毒基因组的编码序列大于90%；（5）单倍体基因组，（6）基因有连续的和间断的，（7）相关基因丛集；（8）基因重叠（9）病毒基因组含有不规则结构基因，主要类型有：a几个结构基因的编码区无间隔；bmRNA没有5端的帽结构；c结构基因本身没有翻译起始序列。 10 原核生物基因组的结构的功能特点： （1）基因组通常仅由一条环状双链DNA分子组成。 （2）基因组中只有1个复制起点。 （3）具有操纵子结构。（4）编码顺序一般不会重叠。（5）基因是连续的，无内含子，因此转录后不需要剪切。（6）编码区在基因组中所占的比例（约占50%）远远大于真核基因组，但又远远小于病毒基因组。（7）基因组中重复序列很少（8）具有编码同工酶的基因。（9）细菌基因组中存在着可移动的DNA序列，包括插入序列和转座子。 （10）在DNA分子中具有多种功能的识别区域。 11??真核生物基因组结构与功能的特点：
一名词解释 1缺口（gap）：DNA分子中，一条链上失去一段单链，称为gap。 切口（nick）：DNA分子中，一条链上失去一个磷酸二酯键称为nick。 DNA hellicase (DNA解链酶)：也叫DNA解螺旋酶，其通过水解ATP获得能量来解开双链DNA，每解开一对碱基，需水解2分子A TP→ADP+Pi(磷酸盐) 拓扑异构酶：细胞内一类催化DNA拓扑异构体（topoisomerase）相互转化的酶，其为topoisomerase，其与DNA双条链形成共价结合的Pr-DNA中间体，在DNA 双链骨架的3’，5’-磷酸二酯键处造成暂时的切口，使DNA的多聚核苷酸 链得以穿越，通过改变DNA的连接数，而改变的分子拓扑结构。 3 无义突变(nonsense mutation)：DNA序列三联体密码子发生突变，导致AA密码子变为终 止密码子，称为无义突变，其导致翻译提前结束而常使产物失活 错义突变（missense mutation）：DNA序列三联体密码子发生突变导致pr中原来的AA被另一种AA取代。 4 转座子：是存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 DNA的转座：或称移位，是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 5转录单位：RNA链的转录起始于DNA模板的一个特定起点（启动子），并在一终点处（终止子）终止，此转录区域称为转录单位。一个转录单位可是一个基因，也可是多个基因。转录因子：RNA聚合酶起始转录需要的辅助因子称为转录因子。其作用或是认别DNA的顺式作用位点，或是识别其他因子，或是识别RNA聚合酶。 6 复制子：DNA的复制单位。 终止子（Terminator）：模板DNA上提供转录停止信号得DNA序列。 7. 单顺反子mRNA：编码1条多肽链的mRNA RNA编辑：是某些RNA，特别是mRNA的一种加工方式，其改变RNA的序列，而导致DNA所编辑的遗传信息改变。 8 起始tRNA：有一类能特异的识别MRNA摸板上起始密码子的tRNA 多顺反子mRNA：编码多条多肽链的mRNA。 9 RNA的再编码（RNA recoding）:mRNA在某些情况下不是以固定的方式被翻译，而可以 改变原来的编码信息，以不同的方式进行翻译，科学上把RNA编码和读码 方式的改变称为…… 同工tRNA：几种搬运相同AA的tRNA成为同工tRNA。 10通读（readthrough）：有些纵止子的作用被特异的因子所阻止，使酶得以越过终止子继续转录，这种现象称为通读 10 翻译跳跃(translation jumping)：翻译中读码框架发生位移，核糖体跳过一个碱基或一大段 mRNA（如50nt）后读继翻译。这一过程称tranlational jumping 1基因家族：真核生物基因中许多来源相同、结构相近、功能相关的基因按功能成套组合，这样的一组基因称为基因家族，其编码另一个蛋白质家族。 2拓扑异构酶：细胞内一类催化DNA拓扑异构体（topoisomerase）相互转化的酶，其为topoisomerase，其与DNA双条链形成共价结合的Pr-DNA中间体，在DNA双链 骨架的3’，5’-磷酸二酯键处造成暂时的切口，使DNA的多聚核苷酸链得以 穿越，通过改变DNA的连接数，而改变的分子拓扑结构。 3基因突变：指DNA的碱基顺序发生突然而永久性地变化，从而影响DNA的复制，并使DNA 的转录和翻译也跟着改变，因而表现出异常地遗传特征。 4 DNA的转座：或称移位，是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 5信号肽：在多肽链合成过程中，先合成的一段多肽序列，该序列引导后合成的多肽链进入
分子生物学试题 一、名词解释 1、基因：能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列，是决定遗传性状的功能单位。 2、基因组：细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。 3、端粒：以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。 4、操纵子：是指数个功能上相关的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA 为多顺反子。 5、顺式作用元件：是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 6、反式作用因子：是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。 7、启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。 8、增强子：位于真核基因中远离转录起始点，能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游，也可相距靶基因较远。 9、基因表达：是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质，进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 10、信息分子：调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子；而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。11、受体：是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合，进而发生生物学效应的的特殊蛋白质。 12、分子克隆：在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组，将重组分子导入合适宿主，使其在宿主中扩增和繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。 13、蛋白激酶：是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。 14、蛋白磷酸酶：是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子，与蛋白激酶相对应存在，共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。 15、基因工程：有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。 16、载体：能在连接酶的作用下和外源DNA片段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA 分子。 17、转化：指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。 18、感染：以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。 19、转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。 20、转染：指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。 21、 DNA变性：在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之间的氢键断裂，而核酸分子中的所有共价键则不受影响。 22、 DNA复性：当促使变性的因素解除后，两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA 双螺旋结构。 23、退火：指将温度降至引物的TM值左右或以下，引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交
核酸结构与功能 一、填空题 1．病毒ΦX174及M13的遗传物质都是单链DNA 。 2．AIDS病毒的遗传物质是单链RNA。 3．X射线分析证明一个完整的DNA螺旋延伸长度为 3.4nm 。 4．氢键负责维持A-T间（或G-C间）的亲和力 5．天然存在的DNA分子形式为右手B型螺旋。 二、选择题（单选或多选） 1．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2噬菌体感染大肠杆菌。 这两个实验中主要的论点证据是（C ）。 A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA作为疾病的致病剂 B．DNA突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子 E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代 2．1953年Watson和Crick提出（ A ）。 A．多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3．DNA双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA的解链温度的正确描述？（ CD ） A．哺乳动物DNA约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B．依赖于A-T含量，因为A-T含量越高则双链分开所需要的能量越少 C．是双链DNA中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D．可通过碱基在260nm的特征吸收峰的改变来确定 E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度 4．DNA的变性（ACE ）。A．包括双螺旋的解链 B．可以由低温产生C．是可逆的D．是磷酸二酯键的断裂E．包括氢键的断裂 5．在类似RNA这样的单链核酸所表现出的“二级结构”中，发夹结构的形成（AD ）。 A．基于各个片段间的互补，形成反向平行双螺旋 B．依赖于A-U含量，因为形成的氢键越少则发生碱基配对所需的能量也越少 C．仅仅当两配对区段中所有的碱基均互补时才会发生 D．同样包括有像G-U这样的不规则碱基配对 E．允许存在几个只有提供过量的自由能才能形成碱基对的碱基 6．DNA分子中的超螺旋（ACE ）。