V ARGA IV AN等人的发明是关于从发酵液中回收多粘菌素B以及提纯该物质的方法和目的。上述本发明利用多粘菌素B的回收发酵液得到的，其特点是，从发酵液中获得的滤液，其pH值和颜色是经过聚苯乙烯型非离子型合成吸附剂净化和调整后，其比表面积为500~1000m2/g和厚度为3~30nm。同时多粘菌素B从有机溶剂的水溶液吸附剂中洗脱。多粘菌素B在洗脱液pH值调到碱性后逐渐凝固，接着多粘菌素B在无机酸作用下项多粘菌素B 盐溶液转化，从而干燥得到晶体物质。
KWANG YOUN等人的发明是关于一种改进MCCDA培养基组合物来生产高浓度的多粘菌素B以及其制备方法
V ARGA IV AN等人的发明是关于工业生产菌株多粘芽孢杆菌在28℃，压力40~70kPa，曝气量0.4~1vvm，最小溶解氧浓度为60%，pH和葡萄糖和铵离子最佳浓度的条件下生长，多粘菌素B的产量由1.8g/L上升到2.8g/L。该专利在欧洲专利局、韩国、世界知识产权组织均获得专利
PARK SEUNG HW AN等人的发明，目的是多粘菌素B或E是从芽孢杆菌菌株分离的生物合成酶，是提供开发抗生素衍生物的一类物质。构成方式是多粘菌素E生物合成的酶包含具有4个氨基酸序列的多肽小单元PmxA，具有5个氨基酸序列的多肽小单元PmxB，和具有6个氨基酸序列的多肽小单元PmxE。一个表达载体包含一个核苷酸编码的多粘菌素E生物合成酶。转化宿主细胞的表达载体是通过拒染性转导制备的。多粘菌素E是通过在营养培养基中培养转化制备宿主细胞。
SKRJABIN KONSTANTIN等人的发明公开了一种分离多粘菌素B的方法，这是由多粘芽孢杆菌形成的细菌孢子产生的。一个天然的解决方就是从培养液中分离生物质后利用大孔强酸性阳离子交换纯化后得到。多粘菌素B洗脱后，被转移和存放到硫酸盐溶液中得到硫酸多粘菌素B溶液。最后通过磺酸阳离子交换剂洗脱出来并干燥。使用的大孔强碱性阳离子交换剂和磺酸阳离子交换剂分别是Dowex-MSC-1和 KU-2-20.EFFECT。该方法提纯获得的多粘菌素B，符合国际质量要求，同时可以提高抗生素产量，简化生产工艺。
【申请号】 CN201110385129.5 【申请日】 2011-11-25
【公开号】 CN103130875A 【公开日】 2013-06-05
【申请人】上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院【地址】 200040 上海市静安区北京西路1320号【发明人】张元钦;那可;赵文杰;赵波;程晴华
【专利代理机构】上海智信专利代理有限公司 31002 【代理人】朱水平;沈利
【国省代码】 31
【摘要】
本发明公开了一种从多粘菌素B发酵液中提取多粘菌素B的方法,包括以下步骤：a.将多粘菌素B的发酵液经固液分离,取滤液；b.滤液用极性有机溶剂萃取,萃取液在pH1.0～2.0用水反萃；c.将步骤b所得的反萃液中加入反萃液体积3～8％(w/v)的无机盐,并调整至pH?9.0～10.0,从而析出沉淀,即为多粘菌素B。优选的还包括d：将多粘菌素B和硫酸反应成盐,然后溶析,即得多粘菌素B硫酸盐。通过本发明制备的多粘菌素B或其硫酸盐的收率和纯度都较高,产品纯度为85％以上,效价为8100IU/g以上,收率为60％以上。本发明工艺方法操作简便、耗时短、对设备要求低、有机溶剂可回收利用,可用于大规模的工业化生产。
【主权项】
一种从多粘菌素B的发酵液中提取多粘菌素B的方法,包括以下步骤：a.将多粘菌素B的发酵液固液分离,取滤液；b.将步骤a所得的滤液用极性有机溶剂萃取,萃取液在pH1.0～2.0用水反萃；和c.将步骤b所得的反萃液中加入反萃液体积3～8％(w/v)的无机盐,并调整至pH?9.0～10.0,从而析出沉淀,即为多粘菌素B。
【页数】 9
【主分类号】 C07K7/62
【专利分类号】 C07K7/62;C07K1/36;C07K1/30;A61K38/12;A61P31/04
【申请号】 CN201310506594.9 【申请日】 2013-10-24 【公开号】 CN103540633A 【公开日】 2014-01-29
【申请人】河北圣雪大成制药有限责任公司【地址】 051430 河北省石家庄市栾城县圣雪路50号
【发明人】郭耀光;郑万静;闫彩洁
【专利代理机构】石家庄汇科专利商标事务所 13115 【代理人】刘闻铎【国省代码】 13
【摘要】
一种发酵法生产多粘菌素B的方法,包括将多粘菌素B产生菌接种于培养基中进行培养的步骤,所述培养基中包括有机碳源,无机氮源,有机氮源,磷酸氢二钾以及硫酸铵,关键是：所述培养基使用的有机碳源的浓度控制在7%-11%。本发明的有益效果是,由于多粘菌素B发酵培养基中有机碳源淀粉替换为糊精,有利于菌体利用,使得多粘菌素B发酵单位大幅度提高。本发明方法发酵合成多粘菌素B的最高发酵单位可达到7000U/mL。
【主权项】
一种发酵法生产多粘菌素B的方法,包括将多粘菌素B产生菌接种于培养基中进行培养的步骤,所述培养基中包括有机碳源,无机氮源,有机氮源,磷酸氢二钾以及硫酸铵,其特征在于：所述培养基使用的有机碳源的浓度控制在7%?11%。
【页数】 5
【主分类号】 C12P21/04
【专利分类号】 C12P21/04;C12R1/01
【申请号】 CN201110390624.5 【申请日】 2011-11-30 【公开号】 CN103130876A 【公开日】 2013-06-05
【申请人】天津市海德安科医药科技发展有限公司【地址】 300457 天津市滨海新区开发区洞庭路220号天津市国际生物医药联合研究院综合楼C407
【发明人】李小兵;赵平
【专利代理机构】天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 【代理人】陆艺【国省代码】 12
【摘要】
本发明公开了一种高纯度多粘菌素B的制备方法,步骤为：(1)上柱液的准备；(2)上高效液相色谱制备柱,硫酸钠-磷酸缓冲液/有机溶剂作为流动相,收集目标组分,重点去除杂质B1-1和B3,HPLC测定收集液,目标成分B1或B2或B1和B2的混合物的色谱纯度在99.5％以上；(3)精制：将收集的目标组分真空浓缩去有机溶剂,余相进行纳滤脱盐浓缩,浓缩液,得到纯度在99.5％以上的多粘菌素B。本发明的方法提纯多粘菌素B具有纯度高、收率高、工艺简单、可连续进样等优点,产品质量远高于目前EP、USP规定的药用标准,设备一次性投资稍高,但运行成本不高,适合于工业化生产。
【主权项】
一种高纯度多粘菌素B的制备方法,其特征是包括如下步骤：(1)上柱液的准备：按1g∶20?100ml的比例将经发酵并经分离提取得到的原料硫酸多粘菌素B溶于水中,经微孔过滤除杂,得澄清溶液；(2)上柱分离：流动相为体积比为15?25∶85?75的有机溶剂和硫酸钠?磷酸缓冲液,所述硫酸钠?磷酸缓冲液为用磷酸调pH＝2.0?3.0的20?40mM的硫酸钠水溶液；将步骤(1)获得的澄清溶液进样上高效液相色谱制备柱,制备柱工作压力为3.0?10.0MPa,工作温度为15?35℃,检测波长为215nm,收集不同时段组分,所述目标组分为多粘菌素B1单体、多粘菌素B2单体,或多粘菌素B1和B2的混合物；(3)精制：将收集的目标组分真空蒸馏,去除有机溶剂,余相进行纳滤脱盐浓缩,浓缩液经喷干或冻干,得到色谱纯度在99.5％以上、单一杂质在0.1％以下的多粘菌素B1单体、多粘菌素B2单体,或多粘菌素B1和B2的混合物。
【页数】 10
【主分类号】 C07K7/62
【专利分类号】 C07K7/62;C07K1/16
【申请号】 WO2012KR00926 【申请日】 2012-02-08 【公开号】 WO2013105689 【公开日】 2013-07-18
【申请人】 UNIV KONKUK IND COOP CORPSEO KUN HOCHON JUNG WHANPARK JUN
HOLIM JIN HYEOKHYEON JI YEONKIM JONG HYUNSONG KWANG YOUN
【发明人】
SEO KUN HOCHON JUNG WHANPARK JUN
HOLIM JIN HYEOKHYEON JI YEONKIM
JONG HYUNSONG KWANG YOUN
【分类号】 C12N1/20
【优先权】 2012-01-10 KR 20120003136 【附加分类】
【摘要】
The present invention relates to an improved MCCDA culture medium composition comprising a high
concentration of polymyxin B, and to a method for producing same.
【申请号】 RU20110149592 【申请日】 2011-12-07 【公开号】 RU2492180 【公开日】 2013-09-10
【申请人】 UCHREZHDENIE ROSSIJSKOJ AKADEMII NAUK TS
BIOINZHENERIJA RA
【发明人】
SKRJABIN KONSTANTIN
GEORGIEVICHDZHAVAKHIJA VAKHTANG VITAL
EVICHGLAGOLEVA ELENA VIKTOROVNAPETUKHOV
DMITRIJ VLADIMIROVICHOVCHINNIKOV
ALEKSANDR IGOREVIC
【分类号】 C07K7/62
【优先权】 2011-12-07 RU 20110149592 【附加分类】
【摘要】 FIELD: chemistry.SUBSTANCE: invention relates to biochemistry. Disclosed is a method of separating polymyxin B, which is produced by spore-forming bacteria Bacillus polymyxa. A native solution obtained after separating biomass from culture fluid is purified using a macroporous strongly acidic cationite. Polymyxin B is eluted, a Polymyxin B base is deposited and transferred to polymyxin B sulphate solution. Final purification of the solution is carried out in a sulphonic acid cationite and then dried. The macroporous strongly basic cationite used is Dowex-MSC-1 and the sulphonic acid cationite is KU-2-20.EFFECT: method enables to obtain pharmaceutically pure substance polymyxin B, which meets international quality requirements, while increasing antibiotic output and simplifying the production process thereof.3 cl, 5 ex
【申请号】 US30432107A 【申请日】 2007-05-21 【公开号】 US8119371 【公开日】 2012-02-21
【申请人】 BIOTIKA AS 【发明人】 VARGA IVAN;VRUBLOVA KATARINA;KOVACOVA LUDMILA;KLUKOVA JANA
【分类号】 C12P21/04
【优先权】 2006-06-15 SK 902006;2007-05-21 SK
2007050011
【附加分类】
【欧洲主分类】 C12P21/02 【欧洲副分类】 C12P21/02
【摘要】The invention is related to the process of fermentation with production strain Bacillus polymyxa for industrial production of antibiotic polymyxin B with yield from 1.8 to 2.8 g/l of filtrate of fermentation broth at temperature 28 ℃. pressure 40~70 kPa, aeration from 0.4 to 1 vvm, concentration of dissolved oxygen minimal 60%, maintenance of pH and optimal concentration of glucose and ammonium ions.
【申请号】 KR20110147621A 【申请日】 2011-12-30 【公开号】 KR20120004958 【公开日】 2012-01-13
【申请人】 KOREA RES INST OF BIOSCIENCE 【发明人】 PARK SEUNG HWAN;CHOI SOO KEUN;PARK SOO YOUNG;KIM JI HYUN;RYU CHOONG MIN
【分类号】 C12N9/00
【优先权】 2011-12-30 KR 20110147621 【附加分类】
【摘要】 PURPOSE: A polymyxin B or E biosynthetic enzyme isolated from Paenibacillus sp. strain is provided to develop antibiotics containing derivatives. CONSTITUTION: A polymyxin E biosynthetic enzyme contains PmxA polypeptide small unit having an amino acid sequence of sequence number 4, PmxB polypeptide small unit having an amino acid of sequence number 5, and PmxE polypeptide small unit having an amino acid of sequence number 6. An expression vector contains a nucleotide encoding the polymyxin E biosynthetic enzyme. A transformed host cell is prepared by transducing the expression vector by achromatophilia. The polymyxin E is prepared by culturing the transformed host cell in a nutrient medium.
【申请号】 US20070303205 【申请日】 2007-05-11 【公开号】 US7951913 【公开日】 2011-05-31
【申请人】 BIOTIKA A 【发明人】 VARGA IVANBOBALOVA MARIAMICHALKOVA EVAJAKUBCOVA MARI
【分类号】 A61K38/00
【优先权】 2006-06-02 SK 20060000083;2007-05-11 WO 2007SK50009 【附加分类】
【欧洲主分类】 C07K7/62 【欧洲副分类】C07K7/62
【摘要】 The invention is related to the method of polymyxine B recovery from fermentation broth for the purpose of pure substance recovery. The invention mentioned above is obtained by using the method of polymyxine B recovery from fermentation broth according invention, which abstract is characterized by, that the filtrate is obtained from fermentation broth, its pH and color is adjusted and purified on non-ionogenic synthetic adsorbents of polystyrene type with specific surface 500 till 1000 m2·g?1 and fabric size 3 till 30 nm. The polymyxine B is eluated from adsorbent by aqueous solution of organic solvent. The polymyxine B base is coagulated from eluate after adjustment of pH to alcaline area. The polymyxine B base is converted by mineral acid to polymyxine B salt solution, from which is obtained crystal substance by drying.