实验常用试剂、缓冲液的配制方法
1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl
（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L
□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl
7.4 约70mL
7.6 约60mL
8.0 约42mL
4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl
（pH8.8）□配制量1L
□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）□配制量1L
□配置方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL
500 mM EDTA（pH8.0）20mL
2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠
（pH5.2）□配制量100mL
□配置方法1. 称取40.8gNaOAc?3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
4. 高温高压灭菌后，室温保存。
5、PBS Buffer□组份浓度137 mM NaCl，2.7mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4
□配制量1L
□配置方法1. 称量下列试剂，置于1L烧杯中。
NaCl 8 g
KCl 0.2g
Na2HPO4 1.42 g
KH2PO4 0.27g
2. 向烧杯中加入约800 mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加HCl将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1L。
4. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
6、10 M醋酸铵□组份浓度10 M醋酸铵
□配制量100mL
□配置方法1. 称量77.1g醋酸铵置于100～200 mL烧杯中，加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。
2.加去离子水将溶液定容至100mL。
3.使用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.密封瓶口于室温保存。
注意：醋酸铵受热易分解，所以不能高温高压灭菌。
7、Tris- HCl平衡苯酚□配置方法
1. 使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此，苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要，我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。
2. 操作注意：苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。
3. 苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上，苯酚平衡操作方法如下：
①液化苯酚应贮存于-20℃，此时的苯酚呈现结晶状态。从
冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。
②加入羟基喹啉（8-Quinolinol）至终浓度0.1％。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色。有助于方便识别有机相。
③加入等体积的1M Tris-HCl（pH8.0），使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。
④重复操作步骤③。
⑤加入等体积的0.1M Tris-HCl（pH8.0），使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。
⑥重复操作步骤⑤，稍微残留部分上层水相。
⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。
⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。
8、苯酚/氯仿/异戊醇□配置方法
1. 说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯/酚/氯仿/异戊醇（25：24：1）。氯仿可使蛋白（25 ：24 ：1）质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。
2. 配置方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇（24：1）均匀混合后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。
9、10％（W/V）SDS□组份浓度10％（W/V）SDS
□配制量100mL
□配置方法1.称量10g高纯度的SDS置于100～200mL烧杯中，加入约80mL的去离子水，68℃加热溶解。
2. 滴加数滴浓盐酸调节pH值至7.2。
3. 将溶液定容至100mL后，室温保存。
10、2 N NaOH□组份浓度2N NaOH
□配制量100mL
□配置方法
1.量取80mL去离子水置于100～200mL塑料烧杯中（NaOH 溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂）。
2. 称取8g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌。
3. 待NaOH完全溶解后，用去离子水将溶液体积定容至100mL。
4. 将溶液转移至塑料容器中后，室温保存。
11、2.5 N HCl□组份浓度2.5 N HCl
□配制量100mL
□配置方法1. 在78.4mL的去离子水中加入21.6mL的浓盐酸（11.6N），均匀混合。
2. 室温保存。
12、5 M NaCl □组份浓度5 M NaCl
□配制量1L
□配置方法1. 称取292.2g NaCl置于1L烧杯中，加入约800mL 的去离子水后搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至1L后，适量分成小份。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
13、20％（W/V）Glucose □组份浓度20％（W/V）Glucose
□配制量100mL
□配置方法1. 称取20g Glucose置于100～200mL烧杯中，加入约80mL的去离子水后，搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100mL。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
14、Solution I □组份浓度25 mM Tris-HCl（pH8.0），10mM EDTA，50mM Glucose
（质粒提取用）□配制量1L
□配置方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1M Tris-HCl（pH8.0）25mL
0.5 M EDTA（pH8.0） 20mL
20％Glucose（1.11M） 45mL
dH2O 910mL
2. 高温高压灭菌后，4℃保存。
3. 使用前每50 mL的Soliution I中加入2mL的RNase A（20mg/mL）。
15、Solution II□组份浓度250mM NaOH，1％（W/V）SDS （质粒提取用）□配制量500mL
□配置方法1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。
10％SDS 50mL
2N NaOH 50mL
2. 加灭菌水定容至500mL，充分混匀。
3. 室温保存。此溶液保存时间最好不要超过一个月。
注意：SDS易产生气泡，不要剧烈搅拌。
16、Solution III□组份浓度3M KOAc，5M CH3COOH
（质粒提取用）□配制量500mL
□配置方法1. 量取下列溶液置于500mL烧杯中。
KOAc 147g
CH3COOH 57.5mL
2. 加入300mL去离子水后搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容至500mL。
4. 高温高压灭菌后，4℃保存。
17、0.5M EDTA□组份浓度0.5 M EDTA
(pH8.0) □配制量1L
□配置方法1. 称取186.1g Na2EDTA?2H2O，置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌。
3. 用NaOH调节pH值值8.0（约20g NaOH）。
注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。
4. 加去离子水将溶液定容至1L。
5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。
6. 室温保存。
18、1 M DTT□组份浓度1 M DTT
□配制量20mL
□配置方法1. 称取3.09g DTT，加入到50mL塑料离心管内。
2. 加20mL的0.01 M 的NaOAc（pH5.2），溶解后使用0.22μm滤器过滤除菌。
3. 适量分成小份后，-20℃保存。
19、10mM ATP□组份浓度10mM ATP
□配制量20mL
□配置方法1. 称取121mg Na2ATP?3H2O，加入到50mL塑料离心管内。
2. 加20mL的25mM Tris-HCl（pH8.0），搅拌溶解。
3. 适量分成小份，-20℃保存。
分子生物学实验常用培养基的配制方法
1、Ampicillin□组份浓度100mg/ml Ampicillin
（100mg/ml）□配制量50mL
□配置方法1. 称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。
2. 加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3. 用0.22μm滤膜过滤除菌。
4. 小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
2、IPTG □组份浓度24mg/mL IPTG
（24mg/mL）□配制量50mL
配置方法1. 称量1.2g IPTG置于50mL离心管中。
2. 加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3. 用0.22μm滤膜过滤除菌。
4. 小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
3、X- Gal□组份浓度20mg/mL X- Gal
（20mg/mL）□配制量50mL
□配置方法1. 称取1g X-Gal置于50mL离心管中。
2. 加入40mL DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解后，定容至50mL。
3. 小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
4、LB培养基□组份浓度1％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，1％（W/V）NaCl
□配制量1L
□配置方法1. 称量下列试剂，置于1L烧杯中
Tryptone 10g
Yeast Extract 5g
NaCl 10g
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.0。
4. 高温高压灭菌后，4℃保存。
5、LB/Amp培养基□组份浓度 1％（W/V） Tryptone
0.5％（W/V）Yeast Extract
1％（W/V）NaCl
0.1mg/mL Ampicillin
□配制量1L
□配置方法1. 称量下列试剂，置于1L烧杯中
Tryptone 10g
Yeast Extract 5g
NaCl 10g
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.0。
4. 加去离子水将培养基定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，冷却至室温。
6. 加入1mL Ampicillin（100mg/mL）后均匀混合。
7. 4℃保存。
6、TB培养基□组份浓度 1.2％（W/V）Tryptone
2.4％（W/V）Yeast Extract
0.4％（V/V） Glycerol
17mM KH2PO4
72mM K2HPO4
□配制量1L
□配置方法1. 配制磷酸盐缓冲液（0.17M KH2PO4，0.72M
K2HPO4）100mL。
2.称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 12g
Yeast Extract 24g
Glycerol 4mL
3. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
4. 加去离子水将培养基定容至1L后，高温高压灭菌。
5. 待溶液冷却至60℃以下时，加入100mL的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
6. 4℃保存。
7、TB/Apm培养基□组份浓度1.2％（W/V） Tryptone
2.4％（W/V）Yeast Extract
0.4％（V/V） Glycerol
17mM KH2PO4
72mM K2HPO4
0.1mg/mL Ampicillin
□配制量1L
□配置方法
1. 配制磷酸盐缓冲液（0.17M KH2PO4，0.72M K2HPO4）100mL。溶解
2.31g KH2PO4和2.54g K2HPO4于90mL的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至100mL，高温高压灭菌。
2. 称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 12g
Yeast Extract 24g
Glycerol 4mL
3. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
4. 加去离子水将培养基定容至1L后，高温高压灭菌。
5. 待溶液冷却至60℃以下时，加入100mL的上述灭菌磷酸盐缓冲液和1mL Ampicillin（100mg/mL）。
6. 均匀混合后4℃保存。
8、SOB培养基□组份浓度2％（W/V）Tryptone
0.5％（W/V） Yeast Extract
0.05％（W /V）NaCl
2.5mM KCl
10mM MgCl2
□配制量1L
□配置方法
1. 配制250mM KCl溶液。在90mL的去离子水中溶解1.86g KCl 后，定容至100mL。
2. 配制2M MgCl2溶液。在90mL的去离子水中溶解19g MgCl2后，定容至100mL，高温高压灭菌。
3. 称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 20g
Yeast Extract 5g
NaCl 0.5g
4. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
5 量取10mL 250 mM KCl溶液，加入到烧杯中。
6. 滴加5N NaOH溶液（约0.2mL），调节pH值至
7.0。
7. 加入去离子水将培养基定容至1L。
8. 高温高压灭菌后，4℃保存。
9. 使用前加入5mL灭菌的2M MgCl2溶液。
9、SOC培养基□组份浓度 2％（W/V） Tryptone
0.5％（W/V） Yeast Extract
0.05％（W /V） NaCl
2.5mM KCl
10mM MgCl2
20mM 葡萄糖
□配制量100mL
□配置方法
1. 配制1M葡萄糖溶液。将18g葡萄糖溶于90mL去离子水中，充分溶解后定容至100mL，用0.22μm滤膜过滤除菌。
2. 向100mL SOB培养基中加入除菌的1M葡萄糖溶液2mL，均匀混合。
3. 4℃保存。
10、2×YT培养基□组份浓度1.6％（W/V）Tryptone，1％（W/V）Yeast Extract，0.5％（W/V）NaCl
□配制量1L
□配置方法1.称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 16g
Yeast Extract 10g
NaCl 5g
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加1N KOH，调节pH值至7.0。
4. .加水离子水将培养基定容至1L。
5. 高温高压后，4℃保存。
11、Φb×broth培养基□组份浓度2％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，0.5％（W/V）MgSO4?7H2O
□配制量1L
□配置方法1.称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 20g
Yeast Extract 5g
MgSO4?7H2O 5g
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加1N KOH，调节pH值至7.5。
4. .加水离子水将培养基定容至1L。
5. 高温高压后，4℃保存。
12、NZCYM培养基□组份浓度0.5％（W/V）Yeast Extract
0.1％（W/V） Casamino Acid
1％（W /V）NZ胺
0.5％（W /V）NaCl
0.2％（W /V）MgSO4?7H2O
□配制量1L
□配置方法1.称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Yeast Extract 5g
Casamino Acid 1g
NZ胺10g
NaCl 5g
MgSO4?7H2O 2g
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加5N NaOH溶液（约0.2mL），调节pH值至7.0。
4. .加水离子水将培养基定容至1L。
5. 高温高压后，4℃保存。
13、NZYM培养基□组份浓度0.5％（W/V）Yeast Extract
1％（W /V）NZ胺
0.5％（W /V） NaCl
0.2％（W /V）MgSO4?7H2O □配置方法NZYM培养基除不含Casamino Acid（酪蛋白氨基酸）外，其他成份与NZCYM培养基相同。
14、NZM培养基□组份浓度1％（W /V） NZ胺
0.5％（W /V） NaCl
0.2％（W /V）MgSO4?7H2O □配置方法NZM培养基除不含Yeast Extract（酵母提取物）外，其他成份与NZYM培养基相同。
15、一般固体培养基的□配置方法1. 按照液体培养基配方准备好液体培养基，在高温高压灭菌前，加入下列试剂中的一种。
配制 Agar（琼脂：铺制平板用） 15g/L
Agar（琼脂：配制顶层琼脂用） 7g/L
Agarose（琼脂糖：铺制平板用） 15 g/L
Agarose（琼脂糖：配制顶层琼脂用）7g/L
2. 高温高压灭菌后，带上手套取出培养基，摇动容器使琼脂或琼脂糖充分混匀（此时培养基温度很高，小心烫伤）。
3. 待培养基冷却至50～60℃时，加入热不稳定物质（如抗生素），摇动容器充分混匀。
4. .铺制平板（30～35mL培养基/90mm培养皿）。
16、LB/Amp/X-Gal/IPTG□组份浓度 1％（W
/V）Tryptone
平板培养基 0.5％（W/V）Yeast Extract
1％（W/V）NaCl
0.1mg/mL Ampicillin
0.5％（W /V） IPTG
0.04mg/mL X-Gal
1.5％（W /V） Agar
□配制量1L
□配置方法1. 称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 10g
Yeast Extract 5g
NaCl 10g
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加5N NaOH溶液（约0.2mL），调节pH值至7.0。
4. 加水离子水将培养基定容至1L后，加入15gAgar。
5. 高温高压灭菌后，冷却至60℃左右。
6. 加入1mL Ampicillin（100mg/mL）、1mL IPTG
（24mg/mL）、2mL X-Gal（20mg/mL）后均匀混合。
7. 铺制平板（30～35mL培养基/90mm培养基）。
8. 4℃保存平板。
17、TB/Amp/X-Gal/IPTG□组份浓度
1.2％（W /V） Tryptone
平板培养基 2.4％（W/V）Yeast Extract
0.4％（W/V）Glycerol
17mM KH2PO4
72mM K2HPO4
0.1mg/mL Ampicillin
0.024mg/mL IPTG
0.04mg/mL X-Gal
1.5％（W /V） Agar
□配制量1L
□配置方法1.配制磷酸盐缓冲液（0.17M KH2PO4，0.72M
K2HPO4）100mL。
2. 称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tryptone 12g
Yeast Extract 24g
Glycerol 4mL
3. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
4. 加水离子水将培养基定容至1L后，加入15gAgar。
5. 高温高压灭菌后，冷却至60℃左右。
6. 加入100mL的上述灭菌磷酸盐缓冲液、1mL Ampicillin（100mg/mL）、1mL IPTG（24mg/mL）、2mL X-Gal （20mg/mL）后均匀混合。
7. 铺制平板（30～35mL培养基/90mm培养基）。
8. 4℃保存平板。
生物化学实验常用试剂的配制方法
1、0.5mol/L氢氧化钠溶液□组份浓度0.5mol/L
□配制量2L
□配置方法1.准确称取氢氧化钠40g。
2.用去离子水溶解并稀释至2L。
2、0.5mol/L盐酸溶液□组份浓度0.5mol/L
□配制量2L
□配置方法1.准确量取盐酸83.4mL。
2.用去离子水稀释至2L。
4、0.2％葡萄糖标准溶液□组份浓度0.2％
□配制量1L
□配置方法1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中，在70℃干燥2小时。
2.干燥器中冷却至室温，重复干燥，冷却至恒重。
3.准确称取葡萄糖2.000g。
4.用去离子水溶解并定容至1L
5.于4℃保存。
5、250μg/mL牛血清□组份浓度250μg/mL
白蛋白标准液□配制量2L
□配置方法1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。
2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。
3.4℃保存。
6、Folin试剂甲
□配置方法1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中，
加入50g无水碳酸钠，溶解，待用。
2.称取0.5g酒石酸钾钠，溶于80mL去离子水中，
加入0.25g硫酸铜?5水，溶解。
3.将1：2：去离子水按20：4：1的比例混合即可。
4. 4℃保存，可用一周。
7、Folin试剂乙
□配置方法
1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g，
钼酸钠?2水6.2526g，去离子水175mL，85％磷酸12.5mL，
浓盐酸25mL，充分混合。
2.回流10小时，再加硫酸锂37.5g，去离子水12.5mL及数滴溴。
3.然后开口沸腾15min，以驱除过量的溴，冷却后定容到250mL。
4.于棕色瓶中保存，可使用多年
注意：上述制备地Folin试剂乙地贮备液浓度一般在2mol/L左右，几种操作方案都是把Folin试剂乙稀释至1mol/L的浓度作为应用液，我们这时是把贮备液于使用前稀释18 倍，使之浓度为0.1mol/L 略高。这种稀释18倍后的Folin 试剂乙就是上文称之为的“应用液”。Folin试剂乙贮备液浓度的标定，一般是以酚酞为指示剂。用Folin试剂乙去滴定1mol/L左右的标准氢氧化钠溶液，当溶液颜色由红变为紫灰，再突然变成墨绿即为终点，如果用氢氧化钠去滴定Folin试剂乙，终点不太好掌握，溶液地颜色是由浅黄变为浅绿，再变为灰紫色为终点。
8、DNS试剂
□配置方法1.取3，5-二硝基水杨酸10g,加入2mol/L氢氧化钠溶液200mL。（3，5-二硝基水杨酸试剂）
2.将3，5-二硝基水杨酸溶解，然后加入酒石酸钾钠300g。
3. 待其完全溶解，用去离子水稀释至2000mL，棕色瓶保存。
9、5％蔗糖溶液□组份浓度5％
□配制量1L
□配置方法称取蔗糖50g，用去离子水溶解定容至1L。10、0.1mol/L蔗糖溶液□组份浓度0.1mol/L
□配制量1L
□配置方法称取蔗糖34.230g，用去离子水溶解并定容至1L。
11、20％乙酸溶液□组份浓度20％
□配制量1.2L
□配置方法量取冰乙酸300mL，用去离子水稀释至1200mL。
12、30％（W/V）Acrylamide
□组份浓度30％（W/V）Acrylamide 0.05％
□配制量1L
□配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中
Acrylamide 290g
BIS 10g
2.向烧杯中加入约600mL的去离子水，充分搅拌溶解
3.加入去离子水将溶液定容至1L，用0.45μm滤膜滤去杂质。
4.于棕色瓶中4℃保存。
注意：丙稀铣胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无
毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。
13、40％（W/V）Acrylamide
□组份浓度40％（W/V）Acrylamide 0.05％
□配制量1L
□配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中
Acrylamide 380g
BIS 20g
2.向烧杯中加入约600mL的去离子水，充分搅拌溶解
3.加入去离子水将溶液定容至1L，用0.45μm滤膜滤去杂质。
4.于棕色瓶中4℃保存。
注意：丙稀铣胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。
14、10％（W/V）过硫酸铵
□组份浓度10％（W/V）过硫酸铵
□配制量10mL
□配置方法1.称取1g过硫酸铵。
2.加入10mL的去离子水后搅拌溶解。
3.贮存于4℃。
注意：10％过硫酸胺溶液在4℃保存时间可使用2周左右，超过期限会失去催化作用。
15、考马斯亮蓝R-250染色液
□组份浓度0.1％（W/V）考马斯亮蓝R-250，25%（V/V）异丙醇，
10％（V/V）冰醋酸
□配制量 1L
□配置方法1.称取1g考马斯亮蓝R-250,置于1L烧杯中。
2.量取250mL的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解。
3.加入100mL的冰乙醋酸，均匀搅拌。
4.加入650mL的去离子水，均匀搅拌。
5.用滤纸出去颗粒物质后，室温保存。
16、考马斯亮蓝染色脱色液
□组份浓度10％（V/V）醋酸，5％（V/V）乙醇
□配制量1L
□配置方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
醋酸100mL
乙醇50mL dH2O 850mL
2.充分混合后使用。
17、凝胶固定液
□组份浓度50％（V/V）甲醇，10％（V/V）醋酸
(SDS-PAGE银氨染色用) □配制量100L
□配置方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
甲醇500mL
醋酸100mL
dH2O 400mL
2.均匀混合后室温保存。
18、凝胶处理液
□组份浓度50％（V/V）甲醇，10％（V/V）戊二醛
(SDS-PAGE银氨染色用) □配制量1L
□配置方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
甲醇50mL
戊二醛10mL
dH2O 40mL
2. 均匀混合后室温保存。
19、凝胶染色液
□组份浓度0.4％（W/V）硝酸银，1％（V/V）浓氨水，(SDS-PAGE银氨染色用) 0.04％（W/V）氢氧化钠
□配制量100L
□配置方法1.量取下列试剂，加入100～200mL试剂瓶中。
20％硝酸银2mL
浓氨水1mL
4％氢氧化钠1mL
dH2O 96mL
2.均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液
会呈现混浊状，此时应补加浓氨水，直至透明。
3.本染色液应现用现配，不宜保存。
20、显影液
□组份浓度0.005％（V/V）柠檬酸，0.02％（V/V）甲醛
(SDS-PAGE银氨染色用) □配制量1L
□配置方法1.称取下列试剂，置于1L试剂瓶中。
柠檬酸50mg
甲醛0.2mL
2.加入1L去离子水后，摇动混合后溶解。
3.室温保存。
21、45％乙醇溶液□组份浓度45％
□配制量1L
□配置方法量取无水乙醇450mL，加入去离子水550mL，混匀。
22、5％的十二烷基硫酸钠溶液□组份浓度5％
（W/V）□配制量0.1L
配置方法:称取5.0g十二烷基硫酸钠,溶于100mL4％的乙醇溶液中。
23、三氯甲烷-异戊醇混合试剂
配置方法取500mL三氯甲烷试剂，加入21mL异戊醇试剂，混匀。
24、1.6％乙醛溶液□组份浓度1.6％
□配制量0.1L
□配置方法取47％乙醛3.4mL，用去离子水定容至100mL。25、二苯胺试剂
□配置方法1.称取二苯胺试剂0.8g，溶解于180mL冰乙酸中，
2.再加入8mL高氯酸混匀。
3. 临用前加入0.8mL 1.6％乙醛溶液。
注意：配制完成后试剂应为无色。
26、15％三氯乙酸溶液□组份浓度15％
□配制量2L
□配置方法称取三氯乙酸300g，用去离子水溶解定容至2000mL。
27、1％谷氨酸溶液□组份浓度1％
□配制量 0.5L
□配置方法1.称取5g谷氨酸，先用适量得用去离子水溶解。
2. 再用氢氧化钾溶液中和至中性。
3. 最后用去离子水定容至0.5L。
28、1％丙酮酸溶液□组份浓度1％
□配制量0.5L
□配置方法1.称取5g丙氨酸，先用适量得用去离子水溶解。
2. 再用氢氧化钾溶液中和至中性。
3. 最后用去离子水定容至0.5L。
29、0.1％的碳酸氢钾溶液□组份浓度0.1％
□配制量0.5L
□配置方法称取碳酸氢钾0.5g，用去离子水溶解定容至0.5L。
30、0.05％的碘乙酸溶液□组份浓度0.05％
□配制量0.25L
□配置方法称取0.125g碘乙酸，用去离子水溶解定容至0.25L。
31、Locke氏溶液□配制量2L
配置方法称取18g氯化钠,0.84g氯化钾, 48g氯化钙,0.3g碳酸氢钠，2g葡萄糖，用去离子水溶解定容至2000mL。32、0.2mol/L的丁酸溶液□组份浓度0.2mol/L
□配制量1L
□配置方法1.量取18mL正丁酸试剂。
2.用1mol/L的氢氧化钠中和。
3.再用去离子水定容至1L。
33、0.1mol/L的硫代硫酸钠溶液□组份浓度0.1mol/L
□配制量10L
□配置方法称248.17g硫代硫酸钠，用去离子水溶解并定至10L。
34、0.1mol/L的碘溶液□组份浓度0.1mol/L
□配制量1L
□配置方法1.称取碘12.7g和碘化钾25g。
2.用去离子水溶解并定容至1L。
3.用0.1mol/L的硫代硫酸钠标定。
35、10％氢氧化钠溶液□组份浓度10％
□配制量2L
□配置方法称取200g氢氧化钠，用去离子水溶解并定容至2L。
36、10％盐酸溶液□组份浓度10％
□配制量0.2L
□配置方法量取浓盐酸49.3mL，用去离子水定至0.2mL。37、0.1％标准丙氨酸溶液□组份浓度0.1％
□配制量0.5L
□配置方法称取丙氨酸0.5g，用去离子水溶解并定容至0.5mL。
38、0.1％标准谷氨酸溶液□组份浓度0.1％
□配制量0.5L
□配置方法称取谷氨酸0.5g，用去离子水溶解并定容至500mL。
39、0.1％水合茚三酮乙醇溶液□组份浓度0.1％
□配制量 1L
□配置方法称取1g水合茚三酮试剂，溶于1000mL无水乙醇中。
40、酚溶液
□配置方法在大烧杯中加入80mL去离子水，再加入300g 苯酚，在水浴中加热搅拌、混合至苯酚完全溶解。将该溶液倒入盛有200mL去离子水的1000mL分液漏斗内，轻轻振荡混合，使其成为乳状液。静止7～10小时，乳状液变成两层透明溶液，下层为被水饱和的酚溶液，放出下层，贮存于棕色瓶中备用。
41、0.5％淀粉溶液□组份浓度0.5％
□配制量 0.1L
□配置方法称取淀粉0.5g，用去离子水溶解定容至0.1L。42、对羟基联苯试剂
配置方法称取对羟基联苯1.5g，溶于100mL0.5％氢氧化钠溶液中，配制成1.5％的溶液。若对羟基联苯颜色较深，应用丙酮
或无水乙醇重结晶，放置时间较长后，会出项针状结晶，
应摇匀后使用。
生物化学实验常用缓冲液的配制方法
1、0.2 mol/L 磷酸缓冲液□组份浓度0.2mol/L
（pH 6.0）□配制量1L
□配置方法1. 称取磷酸氢二钠?12水8.82 g。
2. 称取磷酸二氢钠?2水27.34g。
3. 用去离子水溶解并定容至1L。室温保存。
注意：此为母液，使用时稀释40倍使用。
2、洗脱液□组份浓度0.15mol/L
（含0.15mol/L氯□配制量10L
化钠的0.005mol/L□配置方法1.称取氯化钠87.66g。
pH 6.0的磷酸缓冲液） 2. 用0.2mol/L pH6.0的
磷酸缓冲液250mL溶解。
3. 用去离子水稀释至10 L。室温保存。
3、0.3mol/L磷酸缓冲液□组份浓度0.3mol/L
（pH7.8）□配制量0.5L
□配置方法1.准确称取磷酸氢二钠?12水49.150g。
2.磷酸二氢钠?2水2.000g。
3. 用去离子水溶解并定容至0.5L。室温保存。
注意：此为母液，使用时稀释10倍使用。
4、0.2mol/L乙酸缓冲液□组份浓度0.2mol/L
（pH4.6）□配制量 2L
□配置方法1.准确称取乙酸钠?3水54.44g。
2. 加入23mL冰乙酸，溶解。
3. 用去离子水溶解并定容至2L。4℃保存。
5、0.2mol/L磷酸-柠檬酸□组份浓度0.2mol/L
缓冲液□配制量各1L
（pH 2.6、4.6、6.6）
□配置方法 1. 母液A（0.2mol/L的Na2HPO4溶液）：称取
Na2HPO4?12水143.256g，用去离子水定容至2L。
2. 母液B（0.1mol/L的柠檬酸溶液）：称取柠檬酸?1水42.028g 用去离子水溶解定容至2L。
3. pH2.6、
4.6、6.6的三种缓冲液如下表配制：
pH值A（mL）B（mL）
2.6 109.0 891.0
4.6 467.5 532.5
6.6 72
7.5 272.5
4. 按上表混匀后，4℃保存。
6、20×SSC 缓冲液□配制量 1L
（pH7.0）□配置方法1.准确称取175.2g氯化钠。
2.准确称取88.2g柠檬酸钠?2水。
3.溶解于800mL去离子水中。
4.加入数滴10mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.0。
5.加去离子水定容至1L。
注意：按实验需要可分装后高压灭菌。
10×SSC、5×SSC、1×SSC可由20×SSC做相应稀释得到。
7、0.15mol/L氯化钠-□组份浓度0.15mol/L
乙二胺四乙酸二钠□配制量1L
缓冲液□配置方法 1.准确称取氯化钠8.77g。
（pH8.0） 2. 称取乙二胺四乙酸二钠37.2g。
3. 溶于800mL去离子水中。
4.用固体的氢氧化钠调pH值为8.0。
5.加去离子水定容至1L。
8、1/15mol/L的磷酸盐□组份浓度0.15mol/L
缓冲液□配制量1L
（pH7.6）
□配置方法
1.溶液甲（1/15mol/L的KH2PO4溶液）：称取KH2PO4 9.078g，用去离子水溶解定容至1L。
2. 溶液乙(1/15mol/L的Na2HPO4溶液):称取Na2HPO4? 2水11.876g （或磷酸氢二钠?12水2
3.894g）用去离子水溶解定容至1L。
3.pH7.6磷酸盐缓冲液：将①和②按1.4：8.6比例混合即可。
9、5×Tris-GlycineBuffer□组份浓度0.125M Tris，1.25M Glycine，0.5％（w/v）SDS
（SDS-PAGE电泳缓冲液）□配制量 1L
□配置方法1.称取下列试剂，置于1L烧杯中。
Tris 15.1g
Glycine 94g
SDS 5.0g
2.加入约800mL的去离子水，搅拌溶解。
3.加去离子水将溶液定容至1L后，室温保存。
10、5×SDS-PAGE□组份浓度250mM Tris-HCl（pH6.8）
Loading Buffer 10％（W/V）SDS 0.5％（W/V）BPB
50％（V/V）甘油
5％（W/V）β-巯基乙醇
□配制量5mL
□配置方法1.量取下列试剂，置于10mL塑料离心管中。
1M Tris-HCl 1.25mL
SDS 0.5g
BPB 25mg
甘油2.5mL
2.加入去离子水溶解后定容至5mL。
3.小份（500μl/份）分装后，于室温保存。
4.使用前将25μl的2-ME加到每小份中。
5.加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右
生物化学实验常用柱料数据及性质
1、DEAE阴离子交换纤维素
（1）纤维素的处理
取纤维素干品用蒸馏水浸泡，充分溶涨并搅拌均匀，过夜。次日再搅匀，静止30min留下沉集部分（重复3次），
用真空泵抽干。然后用适量的0.5mol/L的氢氧化钠溶液浸
泡30min，抽干，蒸馏水洗至中性；再用适量的0.5mol/L
的盐酸溶液浸泡30min，抽干，蒸馏水洗至中性；重复用
0.5mol/L的氢氧化钠溶液浸泡30min，抽干，蒸馏水洗至
中性。最后用0.005mol/L pH6.0的磷酸缓冲液浸泡待用。
（2）纤维素的重生
回收的纤维素先用0.5mol/L氯化钠-0.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡，再按上述（1）操作处理，即可再次投入使用。
（3）纤维素的保存
回收后，用0.5mol/L氢氧化钠溶液浸泡30min后，蒸馏水洗至中性，抽干，于鼓风干燥箱中60℃烘干后，保存。
2、SephadexG型葡聚糖凝胶
（1）凝胶的特性要点
葡聚糖G后面的数字代表不同的交联度，数值越大交联度越小，吸水量越大。其数值大致为吸水量X的10倍。Sephadex对
碱和弱酸稳定（在0.1mol/L盐酸中可以浸泡1～2小时）。
在中性时可以高压灭菌。不同型号中又有颗粒粗细之分。
颗粒粗的分离效果差，流速快。颗粒越细分离效果越好，
但流速也越慢。交联葡聚糖工作时的pH稳定在2～11的范
围内。葡聚糖G型凝胶分离的分子量分级范围为700～8×
105。SephadexG 型葡聚糖凝胶的数据见下表
。
*本表数值取自Pharmacia Biotech Biodirectory 1996。 **为2.6×30cm 层析柱在25℃用蒸馏水测定之值。 D ＝Darcy ’s law (2)凝胶的溶胀*
G 系交联葡聚糖凝胶亲水性强，只能在水中溶胀（仅有少量的有机溶剂也可以使之溶胀），有机溶剂或含有有机溶剂较多的水溶液会改变其孔隙，使之收缩失去或降低凝胶的分离能力。在水中溶胀时如在室温则需要较长时间，才能达到充分溶胀的程度，但可煮沸到100℃，以缩短其溶胀时间。见下表 Sephadex G 型葡聚糖凝胶溶胀所需时间
*溶胀时要将凝胶浸泡在过量的水或缓冲液中。在整个溶胀过程中应避免剧烈地搅拌，尤其不能使用电磁搅拌，以免破坏了它的颗粒结构，以及产生许多碎末而影响洗脱时的流速。
（3）凝胶的回收与保存
凝胶的再生最好不要在柱上进行（有些凝胶可以在
位清洗），可将凝胶在0.5mol/L 氯化钠及0.5mol/L 氢氧化钠的混合溶液中浸泡；一般约需30分钟以上。然后用蒸馏水洗至中性，最后用缓冲液平衡即可恢复使用。
经常使用的凝胶，一般加入一些抗菌剂放在普通冰箱中，即可保存较长的时间。如确切在相当长的时间里不准备使用时，则以保存干凝胶为好。处理时可先用较浓的氯化钠浸泡（如0.5mol/L ）,在用0.5mol/L 的氢氧化钠处理并用蒸馏水洗至中性，然后用递增百分比浓度的乙醇分多次作脱水处理。一般可从30％的乙醇开始；每次均应让凝胶在乙醇中多浸泡一些时间。在无水乙醇处理后，最后再用乙醚处理一次以加速乙醇的挥发。处理后的凝胶宜在80℃以下的温度烘干。在进行凝胶的回收时，如在每一步操作时，均使用布氏漏斗抽滤可大大地加快整个回收过程。 【注意】
a ．凝胶在氢氧化钠溶液中浸泡的时间不要太长。
b ．不要图快过早地使用百分浓度太大地乙醇，以免凝胶颗粒收缩太快，破坏了它地结构，因而影响了它地分离能力。
c ．在乙醚未充分挥发完以前，切不可将含有多量乙醚地凝胶放入烘箱，以免发生危险。
d ．溶胀了地凝胶不可放入低温冰箱中冻结，以免其球形结构被破坏。
微生物学实验常用培养基的配制 1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）
牛肉膏 3g 蛋白胨 5g 氯化钠 10g 琼脂 15~20g pH 7.0~7.2
水
1000mL
121℃灭菌20min 。
2、高氏（Gause ）1号培养基（培养放线菌用） 可溶性淀粉 20g 硝酸钾 1g 氯化钠 0.5g 磷酸氢二钾 0.5g 硫酸镁 0.5g
硫酸亚铁
0.01g
琼脂20g
水1000mL
pH 7.2～7.4
配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。121℃灭菌20min。
3、查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）
硝酸钠2g
磷酸氢二钾1g
氯化钾0.5g
硫酸镁0.5g
硫酸亚铁0.01g
蔗糖30g
琼脂15~20g
水1000mL
pH 自然
121℃灭菌20min。
4、马丁氏（Martin）琼脂培养基（分离真菌用）
葡萄糖10g
蛋白胨5g
磷酸二氢钾1g
七水合硫酸镁0.5g
1/3000孟加拉红（rose
bengal，玫瑰红水溶液）
100mL
琼脂15—20g
pH 自然
蒸馏水800mL
112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL，使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基（简称PDA）（培养真菌用）
马铃薯200g
蔗糖（或葡萄糖）20g
琼脂15—20g
pH 自然
培养基的配制：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加糖及琼脂，熔化后补足水至1000mL。121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基
培养基的配制：
(1)、取大麦或小麦若干，用水洗净，浸水6—12小时，至15℃阴暗处发芽，上面盖纱布一块，每日早、中、晚淋水一次，麦根伸长至麦粒的两倍时，即停止发芽，摊开晒干或烘干，贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎，一份麦芽加四份水，在65℃水浴中糖化3—4小时，糖化程度可用碘滴定之。加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤，滤液如混浊不清，可用鸡蛋白澄清，方法是将一个鸡蛋白加水约20mL，调匀至生泡沫时为止，然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。 (4)、将滤液稀释到5—6波美度，pH约6.4，加入2%琼脂即成。121℃灭菌30min。
7、无氮培养基（自生固氮菌、钾细菌）
甘露醇（或葡萄糖）10g
磷酸二氢钾0.2g
七水合硫酸镁0.2g
氯化钠0.2g
二水合硫酸钙0.2g
碳酸钙5g
蒸馏水1000mL
pH 7.0—7.2
113℃灭菌30min。
8、半固体肉膏蛋白胨培养基
肉膏蛋白胨液体培养基100mL
琼脂0.35—0.4g
pH 7.6
121℃灭菌20min。
9、合成培养基
偏磷酸铵1g
氯化钾0.2g
七水合硫酸镁0.2g
豆芽汁10mL
琼脂20g
蒸馏水1000mL
pH 7.0
加12 mL0.04%的溴钾酚紫（pH5.2—6.8，颜色由黄变紫，作指示剂）。121℃灭菌20min。
10、豆芽汁蔗糖（或葡萄糖）培养基
黄豆芽100g
蔗糖（或葡萄糖）50g
水1000mL
pH 自然
培养基的配制：称新鲜豆芽100g，放入烧杯中，加入水1000mL，煮沸约30min，用纱布过滤。用水补足原量，再加入蔗糖（或葡萄糖）50g，煮沸熔化。121℃灭菌20min 。
11、油脂培养基
蛋白胨10g
牛肉膏5g
氯化钠5g
香油或花生油10g
1.6%中性红水溶液1mL
琼脂15—20g
蒸馏水1000mL
pH 7.2
121℃灭菌20min
注：(1)、不能使用变质油。
(2)、油和琼脂及水先加热。
(3)、调好pH值后，再加入中性红。
(4)、分装时，需不断搅拌，使油均匀分布于培养基中。12、淀粉培养基
蛋白胨10g
牛肉膏5g
氯化钠5g
可溶性淀粉2g
蒸馏水1000mL
琼脂15—20g
121℃灭菌20min
13、明胶培养基
牛肉膏蛋白胨液100mL
明胶12—18g
pH 7.6
在水浴锅中将上述成分溶化，不断搅拌。溶化后调pH7.2—7.4。
121℃灭菌30min。
14、蛋白胨水培养基
蛋白胨10g
氯化钠5g
蒸馏水1000mL
pH 7.6
121℃灭菌20min。
15、糖发酵培养基
蛋白胨水培养基1000mL
1.6%溴钾酚紫乙醇溶液1—2mL
pH 7.6
另配制20%糖溶液（葡萄糖、乳糖、蔗糖等）各10mL。
培养基的配制：
(1)、将上述含指示剂的蛋白胨水培养基（pH7.6）分装于试管中，在每管内放一倒置的小玻璃管（Durham tube），使之充满培养液。
(2)、将已分装好的蛋白胨水和20%的各种糖溶液分别灭菌，蛋白胨水121℃灭菌20min；糖溶液112℃灭菌30min。
(3)、灭菌后，每管以无菌操作分别加入20%无菌糖溶液0.5 mL （按每10mL培养基中加入20%的糖液0.5mL，则成1%的浓度）。配制用的试管必须洗干净，避免结果混乱。
16、葡萄糖蛋白胨水培养基
蛋白胨5g
葡糖糖5g
磷酸氢二钾2g
蒸馏水1000mL
将上述各成分溶于1000mL水中，调pH7.0—7.2，过滤。分装试管，每管10mL，112℃灭菌30min。
17、麦氏（Meclary）琼脂（酵母菌）
葡萄糖1g
氯化钾 1.8g
酵母浸膏 2.5g
醋酸钠8.2g
琼脂15—20g
蒸馏水1000mL
113℃灭菌20min。
18、柠檬酸盐培养基
磷酸二氢铵1g
磷酸氢二钾1g
氯化钠5g
硫酸镁0.2g
柠檬酸钠2g
琼脂15—20g
蒸馏水1000 mL
1%溴麝香草酚蓝乙醇液10 mL
培养基的配制：将上述各成分加热溶解后，调pH6.8，然后加入指示剂，摇匀，用脱脂棉过滤。制成后为黄绿色，分装试管，121℃灭菌20min后制成斜面，注意配制时控制好pH，不要过碱，以黄绿色为准。
19、醋酸铅培养基
pH7.4的牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL
硫代硫酸钠0.25g
10%醋酸铅水溶液 1 mL
培养基的配制：将牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL加热溶解，待冷却至60℃时加入硫代硫酸钠0.25g，调至pH7.2，分装于三角瓶中，115℃灭菌15min。取出后待冷却至55—60℃，加入10%醋酸铅水溶液（无菌的）1mL，混匀后倒入灭菌试管或平板中。
20、血琼脂培养基
pH7.6的牛肉膏蛋白胨琼脂100 mL
脱纤维羊血（或兔血）10 mL
培养基的配制：将牛肉膏蛋白胨琼脂加热熔化，待冷却至50℃时，加入无菌脱纤维羊血（或兔血）摇匀后倒平板或制成斜面。37℃过夜检查无菌生长即可使用。
21、玉米粉蔗糖培养基
玉米粉60g
磷酸二氢钾3g
维生素B1100mg
蔗糖10g
七水合硫酸镁 1.5g
水1000 mL
121℃灭菌30min，维生素B1单独灭菌15min后另加。
22、酵母膏麦芽汁琼脂
麦芽粉3g
酵母浸膏0.1g
水1000 mL
121℃灭菌30min。
24、棉籽壳培养基培养基的配制：棉籽壳50%，石灰粉1%，过磷酸钙1%，水65%—70%，按比例称好料，充分搅拌均匀后装瓶，较薄地平摊盘上。
25、复红亚硫酸钠培养基（远藤氏培养基）
蛋白胨10g
乳糖10g
磷酸氢二钾 3.5g
琼脂20—30g
蒸馏水1000 mL
5%碱性复红乙醇溶液20 mL
培养基的配制：先将琼脂加入900 mL蒸馏水中，加热溶解，再加入磷酸氢二钾及蛋白胨，使溶解，补足蒸馏水至1000 mL，调pH至7.2—7.4。加入乳糖，混匀溶解后，115℃灭菌20min。称取亚硫酸钠置一无菌空试管中，加入无菌水少许使溶解，再在水浴中煮沸10min后。立刻滴加于20 mL 5%碱性复红乙醇溶液中，直至深红色褪成淡粉红色为止。将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中，充分混匀，倒平板，放冰箱中备用，贮存时间不宜超过2周。
26、伊红美蓝培养基（EMB培养基）
蛋白胨水培养基100 mL
20%乳糖溶液 2 mL
2%伊红水溶液 2 mL
0.5%美蓝水溶液 1 mL
培养基的配制：将已灭菌的蛋白胨水培养基（pH7.6）加热熔化，冷却至60℃左右时，再把已灭菌的乳糖溶液，伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。摇匀后，立即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度，115℃灭菌20min。
27、乳糖蛋白胨培养液（“水的细菌学检查”用）
蛋白胨10g
牛肉膏3g
乳糖5g
氯化钠5g
1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1 mL
蒸馏水1000 mL
培养基的配制：将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于1000 mL蒸馏水中，调pH至7.2—7.4。加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1 mL，充分混匀，分装于有小倒管的试管中。115℃灭菌20min。
28、石蕊牛奶培养基
牛奶粉100g
石蕊0.075g
水1000 mL
pH 6.8
121℃灭菌15min。
29、LB（Luria-Bertani）培养基
蛋白胨10g
酵母膏5g
氯化钠10g
蒸馏水1000 mL
pH 7.0
121℃灭菌20min。
30、基本培养基
磷酸氢二钾10.5g
磷酸二氢钾 4.5
硫酸铵1g
二水合柠檬酸钠0.5g
蒸馏水1000 mL
121℃灭菌20min。
需要时灭菌后加入：
糖（20%）10 mL
维生素B1（硫胺素）（1%）0.5 mL
七水合硫酸镁（20%） 1 mL
链霉素（50mg/ mL）4 mL，终浓度200μg/ mL
氨基酸（10mg/ mL）4 mL，终浓度40μg/ mL
pH 自然（—7.0）
31、庖肉培养基
培养基的配制：
(1)、取已去肌膜、脂肪之牛肉500g，切成小方块，置1000 mL 蒸馏水中，以弱火煮1小时，用纱布过滤，挤干肉汁，将肉汁保留备用。将肉渣用绞肉机绞碎，或用刀切成细粒。
(2)、将保留的肉汁加蒸馏水，使总体积为2000 mL，加入蛋白胨20g，葡萄糖2g，氯化钠5g，及绞碎的肉渣，置烧瓶摇匀，加热使蛋白胨溶化。
(3)、取上层溶液测量pH，并调整其达到8.0，在烧瓶壁上用记号笔标示瓶内液体高度，121℃灭菌15min后补足蒸发的水分，重新调整pH值8.0，再煮沸10—20min，补足水量后调整pH7.4。
(4)、将烧瓶内容物摇匀，将溶液和肉渣分装于试管中，肉渣约占培养基的1/4左右。经121℃灭菌15min后备用，如当日不用，应以无菌操作加入已灭菌的石蜡凡士林，以隔绝氧气。
32、乳糖牛肉膏蛋白胨培养基
乳糖5g
牛肉膏5g
酵母膏5g
蛋白胨10g
葡萄糖10g
氯化钠5g
琼脂粉15g
pH 6.8
水1000mL
33、马铃薯牛乳培养基
培养基的配制：200g马铃薯（去皮）煮出汁，脱脂鲜乳100mL，酵母膏5g，琼脂粉15g，加水1000mLpH7.0。制平板培养基时，牛乳与其他成分分开灭菌，倒平板前再混合。
34、尿素琼脂培养基
尿素20g
琼脂15g
氯化钠5g
磷酸二氢钾2g
蛋白胨1g
酚红0.012g
蒸馏水1000mL
pH 6.8±0.2
培养基的配制：在蒸馏水或去离子水100mL中，加入上述所有成分（除琼脂外）。混合均匀。过滤灭菌。将琼脂加入900mL蒸馏水或去离子水中，加热煮沸腾。在15磅121℃灭菌15min。冷却至50℃，加入灭菌好的基本培养基，混匀后，分装于灭菌的试管中，放在倾斜位置上使其凝固。
微生物学实验常用试剂的配制
1、3%酸性乙醇溶液
浓盐酸 3mL
95％乙醇97mL
2、中性红指示剂
中性红0.04g
95％乙醇28mL
蒸馏水72mL
中性pH6.8～8颜色由红变黄，常用浓度为0.04％。
3、淀粉水解试验用碘液（卢戈氏碘液）
碘片1g
碘化钾2g
蒸馏水300mL
先将碘化钾溶解在少量水中，再将碘片溶解在碘化钾溶液中，待碘全溶后，加足水分即可。
4、溴甲酚紫指示剂
溴甲酚紫0.04g
0.01mol/LNaOH 7.4g
蒸馏水 92.6mL
溴甲酚紫pH5.2～5.6，颜色由黄变紫，常用浓度为0.04％。
5、溴麝香草酚蓝指示剂
溴麝香草酚蓝0.04g
0.01mol/LNaOH 6.4mL
蒸馏水 93.6mL
溴麝香草酚蓝pH6.0～7.6，颜色由黄变蓝，常用浓度为0.04％。
6、甲基红试剂
甲基红（Methyl red）0.04g
95％乙醇 60mL
蒸馏水40mL
先将甲基红溶于95％乙醇中，然后加入蒸馏水即可。
7、V﹒P﹒Y试剂
(1)．5％α－萘酚无水乙醇溶液
α－萘酚 5g
无水乙醇100mL
(2)．40％KOH溶液
KOH 40g用蒸馏水定容至100mL即可。
8、吲哚试剂
对二甲基氨基苯甲醛 2g
95％乙醇 190mL
浓盐酸 40mL
玻璃仪器的洗涤及各种洗涤液的配制
实验中所使用的玻璃器皿清洁与否直接影响实验结果。由于器皿的不清洁或被污染，往往造成较大的实验误差，甚至会出现相反的实验结果。因此，玻璃器皿的洗涤清洁工作是非常重要的。
玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将锥形瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中，用毛刷刷洗，然后用自来水及蒸溜水冲洗。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡，再用自来不及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干备用。
1. 初用玻璃器皿的清洗
新购买的玻璃器皿表面常附着有游离的碱性物质，先用肥皂水（或去污粉）洗刷，再用自来水洗净，然后浸泡在1%~2%盐酸溶液中过夜（不少于4h），再用自来水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2~3次，在100~130℃烘箱内烘干备用。
2. 使用过的玻璃器皿的清洗
（1）一般玻璃器皿
如试管、烧杯、锥形瓶等（包括量筒）。先用自来水洗刷至无污物，再选用大小合适的毛刷蘸取去污粉（掺入肥皂粉）刷洗或浸入肥皂水内。将器皿内外，特别是内壁，细心刷洗，用自来水冲洗干净后再用蒸馏水洗2~3次，热的肥皂水去污能力更强，可有效地洗去器皿上的油污。洗衣粉与去污粉较难冲洗干净而常在器壁上附有一层微小粒子，故要用水多次甚至10次以上充分冲洗，或可用稀盐酸摇洗一次，再用水冲洗。烘干或倒置在清洁处备用。凡洗净的玻璃器皿，不应在器壁上带有水珠，否则表示尚未洗干净，应再按上述方法重新洗涤。若发现内壁有难以去掉的污迹，应分别使用下述的各种洗涤剂予以清除，再重新冲洗。用过的载玻片与盖玻片如滴有香柏油，要先用皱纹纸擦去或浸在二甲苯内摇晃几次，使油垢溶解。再在肥皂水中煮5~10min，用软布或脱脂棉擦拭，立即用自来水冲洗，然后在稀洗涤液中浸泡0.5~2h,自来水冲去洗涤液,最后用蒸馏水换洗数次,待干后,浸于95%乙醇中保存备用.使用
时在火焰上烧去乙醇。用此法洗涤和保存的载玻片和盖玻片清洁透亮，没有水珠。检查过活菌的载玻片或盖玻片应先在2%新洁尔灭溶液中浸泡24h，然后上述方法洗涤方法洗涤与保存。玻璃器皿经洗涤后，若内壁的水均匀分布成一薄层，表示油垢完全洗净，若挂有水珠，则还需要用洗涤液浸泡数小时，然后用自来水充分冲洗，最后用蒸馏水洗2~3次后备用。
（2）量器
如吸量管、滴定管、量瓶等。使用后应立即浸泡于凉水中，勿使物质干涸。工作完毕后用流水冲洗，以除去附着的试剂、蛋白质等物质，晾干后浸泡在铬酸洗液中4~6h（或过夜），再用自来水充分冲洗，最后用蒸馏水冲洗2~4次，风干备用。
（3）其他
具有传染性样品的容器（如分子克隆、病毒玷污过的容器）常规先进行高压灭菌或其他形势的消毒，再进行清洗。盛过各种毒品（特别是剧毒药品和放射性核素物质的容器）必须经过专门处理，确知没有残余毒物存在时方可进行清洗。否则使用一次性容器。装有固体培养基的器皿应先将其刮去，然后洗涤。带菌的器皿在洗涤前先浸在2%煤酸皂溶液（来苏水）或0.25%新洁尔灭消毒液内24h 或煮沸0.5h,再用上述方法洗涤。
3. 洗涤液的种类和配制方法
（1）铬酸洗液
（重铬酸钾一硫酸洗液，简称洗液或清洁液）广泛用于玻璃器皿的洗涤，常用的配制方法有4种
①取100mL工业浓硫酸置于烧杯内，小心加热，然后慢慢地加入重铬酸钾粉末，边加边搅拌，待全部溶解后冷却，贮于带玻璃塞的细口瓶内。
②称取5g重铬酸钾粉末置于250mL烧杯中，加水5mL，尽量使其溶解。慢慢加入100mL浓硫酸，边加边搅拌，冷却后贮存备用。
③称取80g重铬酸钾，溶于1000mL自来水中，慢慢加入工业浓硫酸1000mL，边加边搅拌。
④称取200g重铬酸钾，溶于500mL自来水中，慢慢加入工业浓硫酸500mL，边加边搅拌。
（2）浓盐酸（工业用）
可洗去水垢或某些无机盐沉淀。
（3）5%草酸溶液
可洗去高锰酸钾的痕迹。
（4）5%~10%磷酸三钠（Na3PO4·12H2O）溶液
可洗涤油污物。
（5）30%硝酸溶液
洗涤CO2测定仪器及微量滴管。
（6）5%~10%乙二铵四乙酸二钠（EDTA）溶液
加热煮沸可洗去玻璃器皿内壁的白色沉淀物。
（7）尿素洗涤液
为蛋白质的良好溶剂，适用于洗涤盛蛋白质制剂及血样的容器。
（8）酒精与浓硝酸混合液
最适合于洗净滴定管，在滴定管中加入3mL酒精，然后沿管壁慢慢加入4mL浓硝酸（相对密度1.4），盖住滴定管管口。利用所产生的氧化氮洗净滴定管。
（9）有机溶液
如丙酮、乙醇、乙醚等可用于洗脱油脂、脂溶性染料等污痕。二甲苯可洗去油漆污垢。
（10）氢氧化钾-乙醇溶液和含有高锰酸钾的氢氧化钠溶液
它是两种强碱性的洗涤液，对玻璃器皿的侵蚀性很强，清除容器内壁污垢，洗涤时间不宜过长。使用时应小心谨慎。
上述洗涤液可多次使用，但使用前必须将待洗涤的玻璃器皿先用水冲洗多次，除去肥皂液、去污粉或各种废液。若仪器上有凡士林或羊毛脂时，应先用软纸擦去，然后再用乙醇或乙醚擦净。否则会使洗涤液迅速失效。例如肥皂水、有机溶剂（乙醇、甲醛等）及少量油污物均会使重铬酸钾-硫酸液变绿，降低洗涤能力。
4. 细胞培养级玻璃器皿的洗涤处理
（1）按上述方法对玻璃器皿进行初洗，晾干。
（2）将玻璃器皿浸泡入洗液中，24~48h。注意玻璃器皿内应全部充满洗液，操作时小心勿将洗液不溅到衣服及身体各部。
（3）取出，沥去多余的洗液。
（4）自来水充分冲洗。 （5）排列6桶水，前3桶为去离子水，后3桶为去离子双蒸水。
（6）将玻璃器皿依次过6桶水，玻璃器皿在每桶中过6~8次。 （7）倒置，60℃烘干。
（8）用硫酸纸包扎，160℃干烤3h。
实验室常用试剂、缓冲液的配制 1 MTris-HCI(pH7.4,7.6,8.0) 组份浓度1 MTris-HCI 配制量1 L 配制方法1.称量121.1 gTris置于1 L烧杯中。 2. 加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 4. 将溶液定容至1 L。 5. 咼温咼压火菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1 C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 1.5 MTris-HCl(pH8.8) 组份浓度1.5 MTris-HCl 配制量1 L 配制方法1.称量181.7 gTris置于1 L烧杯中。 2. 加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。 4. 将溶液定容至1 L。 5. 高温高压火菌后，室温保存。 注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化 差异很大，温 度每升高1 C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 10 X TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0) 组份浓度100 mMTris-HCl,10 mMEDTA 配制量1 L 配制方法1.量取下列溶液，置于 1 L烧杯中。 2. 向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合 3. 将溶液定容至1 L后，高温高压火菌。 4. 室温保存。 3 M醋酸钠(pH5.2) 组份浓度配制量配制方法PBSBuffer 组份浓度137 mMNaCl,2.73 M琴磁柚 IQO ml 1. N.1OAC - 3H.OH于100-200 m：疑杯中.加人對40讪的去两子水披扌半渚孵 2、加入冰酯敌讷帑pH值至4 3加去离子庆粕増液證容至20ml. mMKCl,10 mMNa2HPO4,2 mMKH2PO4 配制量1 L 配制方法1.称量下列试剂，置于 1 L烧杯中。 2. 向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
53种常见缓冲液配制方法 乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)取5 mol/L醋酸溶液15.0 ml，加乙醇60 ml和水20 ml，用10 mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000 ml，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)取三羟甲基氨基甲烷12.14 g，加水800 ml，搅拌溶解，并稀释至1000 ml，用6 mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)取氯化钙0.294 g，加0.2 mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40 ml使溶解，用1 mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100 ml，即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)取三羟甲基氨基甲烷6.06 g，加盐酸赖氨酸3.65 g、氯化钠5.8 g、乙二胺四醋酸二钠0.37 g，再加水溶解使成1000 ml，调节pH值至9.0，即得。 乌洛托品缓冲液取乌洛托品75 g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2 ml，再用水稀释至250 ml，即得。 巴比妥缓冲液(pH7.4)取巴比妥钠4.42 g，加水使溶解并稀释至400 ml，用2 mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。 巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥5.52 g与巴比妥钠30.9 g，加水使溶解成2000 ml，即得。 巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)取巴比妥钠5.05 g，加氯化钠3.7 g及水适量使溶解，另取明胶0.5 g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2 mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.8，再用水稀释至500 ml，即得。 甲酸钠缓冲液(pH3.3)取2 mol/L甲酸溶液25 ml，加酚酞指示液1滴，用2 mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2 mol/L甲酸溶液75 ml，用水稀释至200 ml，调节pH值至3.25～3.30，即得。 邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)取邻苯二甲酸氢钾10 g，加水900 ml，搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6，加水稀释至1000 ml，混匀，即得。 枸橼酸盐缓冲液取枸橼酸4.2 g，加1 mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40 ml使溶解，再用20％乙醇稀释至100 ml，即得。 枸橼酸盐缓冲液(pH6.2)取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2，即得。
实验室常用溶液及试剂配制 一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1 表一普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂配制 表三混合酸碱指示剂配制 表四容量分析基准物质的干燥 表五缓冲溶液的配制 1、氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、氨水-氯化铵缓冲溶液 8、常用缓冲溶液的配制 二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4 1、硝酸银（C AgNO3=0.1mol/L）标准溶液的配制 2、碘（C I2=0.1mol/L）标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠（C Na2S2O3=0.1mol/L）标准溶液的配制 4、高氯酸（C HClO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 5、盐酸（C HCl=0.1mol/L）标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠（C EDTA =0.1mol/L）标准溶液的配制 7、高锰酸钾（C K2MnO4=0.1mol/L）标准溶液的配制 8、氢氧化钠（C NaOH=1mol/L）标准溶液的配制 三、常见物质的实验室试验方法 ----------------------------------------------------------6 1、柠檬酸（C6H8O7·H2O） 2、钙含量测定（磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca（H2PO4）2·H2O、钙粉等） 3、氟（Fˉ）含量的测定 4、磷（P）的测定 5、硫酸铜（CuSO4·5H2O） 6、硫酸锌（ZnSO4·H2O） 7、硫酸亚铁（FeSO4·H2O） 8、砷 9、硫酸镁（MgSO4） 四、维生素检测--------------------------------------------------------------------------------8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱
实验室试剂管理办法 1目的 1.1使操作员能够妥善保存化学药品、化学试剂，防止其变质、防止意外事故的发生。 1.2使操作员能够妥善处理废料，防止其污染环境、防止意外事故的发生。 2范围 2.1适用于化验室化验员日常药品的管理。 3职责 3.1化验室 4内容 4.1 化学药品、试剂的储存 4.1.1化学药品储存室应符合有关安全规定，有防雷、防火、防爆、调温等安全措施。室内应干燥、 通风良好、温度一般不超过３０℃。 4.1.2化学药品建立严格的帐目并记录于《化学试剂点检表》、《化学药品使用记录表》。 4.1.3室内备有消防器材。 4.1.4所有的化学试剂分类存放，无机试剂按酸、碱、盐、氧化物、单质等分类；盐类按阳离子分 类，钾盐、钠盐、铵盐、钙盐、镁盐等；有机试剂按官能团排列，烃、醇、酸、酯等；指示 剂按用途分类，酸碱指示剂、氧化还原指示剂、配位滴定的金属指示剂；专用有机指示剂按 测定对象分类。 4.1.5易燃易暴品应存放于阴凉偏低、不易碰撞的地方，有良好的通风效果，移动时轻拿轻放；配 备相应的灭火设备。 4.1.6低沸点、易挥发有机溶剂存放于阴凉、通风处，远离热源，不得有明火。并不要与固体试剂 同置一个柜中。 4.1.7见光易分解的应保存在棕色瓶中，或用黑色袋子裹严包装物，避光保存。 4.1.8 易燃易爆品、有毒害药品，应锁入药品柜内，防止人员带出制成自己或他人身体伤害和财 产损失，药品柜钥匙由部门主管保管一把，带班主管保管一把，其余钥匙全部交还公司，如要使用以上药品，需带班主管或部门主管批准后，由带班主管或代理人亲自开锁按其需要数量发料，并记录于<化学药品使用记录表》。易燃易爆品储存于①药品柜，有毒害药品储存于②药品柜。 4.2 化学试剂溶液的管理 4.2.1化学试剂溶液要装在细口瓶中，见光易分解的应装在棕色瓶中。所有化学试剂溶液在存放过 程中都应避免受热和强光照射。 4.2.2所有试剂、溶液的盛装容器上都必须贴上标签，标签书写工整、完整和清晰；试剂最好是原 标签，配制的溶液包装上的标签应写明名称、单位浓度、配制日期；长期使用的试剂、溶液上的标签，贴层透明胶保护，以防腐蚀、磨损。并填写《标液配制记录表》。 4.2.3影响试液质量的因素。试液的质量除主要受试剂质量的影响以外还会受其他多种因素的影 响。 4.2.3.1试液的稳定性。稳定性较好的试剂配制成溶液后，其稳定性可能变差。因而试液都应标 明配制日期，并根据需要定期检查记录于《实验室试剂点检表》，如发现试液变色、沉淀等变质迹象，即应弃去重配。不稳定试液应分多次少量配制，并分特别情况来采取特殊贮存方法，如避光等。 4.2.3.2试液的贮存期。一般浓溶液在贮存期内变化不大，而稀溶液则随贮存时间的延长，其浓 度多会发生变化。溶液的浓度愈低，有效使用期限愈短。化学试剂溶液只能在其有效期内使用，GB 601 规定一般滴定分析用标准溶液在常温下，使用期限不宜超过两个月。
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L） 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 24 Na2HPO4-2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 ② 687·H2 柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12 ，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。 7．磷酸盐缓冲液
2 4·2H 2Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。 Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。 24·2H 2KH 2PO 4分子量 = 136.09，1/15M 溶液为9.078克/升。 8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）
10．Tris –盐酸缓冲液（0.05M ，25℃） C HOCH2 NH2 分子量=121.14; 0. 1M 溶液为12.114克/升。Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 247·H 2硼酸H 2BO 3,分子量=61.84,0.2M 溶液为12.37克/升。 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
247·10H 2硼酸H 2BO 3，分子量=61.84, 0.2M 溶液为12.37克/升。 硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（ 0.05M ） 13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M 硼酸根） 2 47·10H 2 14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M ） 2+2+22·10H 2
1DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC 根据需要确定要配的体积，泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用，泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜，送至高压，然后配相关溶液。 20.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris 1000ml DEPC水 用HCL调ph至7.5，高压备用。 3 4%PFA的配制(ph 7.0)40g PFA 1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压) 将溶液持续加热至60℃左右，搅拌之至完全溶解，注意温度不要超过65℃，否则PFA降解失效。 30.2% 甘油/0.1M tris 20ml 甘油 980ml 0.1Mtris 4 20XSSC Nacl 175.3g （ph 7.0）柠檬酸钠88.2g DEPC水1000ml 分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用 5 HEPES 溶液HEPES 23.8g (ph6.8-8.0)DEPC H2O 100ml 6 50X Denhaldt′s 液 聚蔗糖（Ficoll 400）0.2g 聚乙烯吡咯烷酮(polyvinypyrrolidone) 0.2g 牛血清蛋白（BSA）0.2g DEPC 水20ml 7 预杂交buffer Deinoized formanmid 5ml 20X SSC 1.5ml 1M HEPES 0.5ml 50X Denhanldt′s液1ml 龟精DNA 0.6ml(4ug/ul) DEPC水 1.4ml 龟精DNA 要先95℃10-15min加热变性，随即冰浴。杂交buffer分装后-20℃保存。 8Washing buffer (ph7.5) maleic acid 5.8g NACL 4.4g Tween（吐温） 1.5ml 定容至500ml溶质浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 0.3% Tween 9Maleic acid buffer (ph7.5) Maleic acid 5.8g Nacl 4.4g 定容至500ml 溶质的浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 10Detection buffer
各种缓冲液的配制方法
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L） X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y 2.0 2.4 2.6 2.8 50 50 50 50 44.0 32.4 24.2 16.8 3.0 3.2 3.4 3.6 50 50 50 50 11.4 8.2 6.4 5.0 甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。 2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L） X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升 pH(20℃)X Y pH(20℃)X Y 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 5 5 5 5 5 4.070 3.960 3.295 2.642 2.022 3.2 3.4 3.6 3.8 5 5 5 5 1.470 0.990 0.597 0.263 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升）0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） pH 0.2mol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/L 柠檬酸 （毫升） 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 19.15 19.45 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55 Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。 Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
实验室常用化学溶液试 剂药品有效期一览表 SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#
实验室常用化学药品、试剂，由于性质的不同，有效期也有所不同，比如我们常用的有缓冲液，有机试剂，标准溶液，流动相，标准品，配制溶液，留样等等，都有一定的有效期，如何正确把握使用期限？常用的标准溶液、缓冲液的有效期，你记住了吗本文列出了有效期一览表，供大家参考。 滴定用标准溶液的有效期为多长？其实跟贮存的条件有关，正常室温下贮存时间见下表。 表1.常见滴定用标准溶液的有效期 相比标准溶液的有效期，各种缓冲液、试液、指示液也有其有效期限制，多数实验室都是根据前辈的经验来规定期限，也有的实验室为了防止过期现象导致的样品分析结果误差的产生，尽量都是现配先用，或者最多使用一个月。对于某些较稳定的溶液来说，不必矫枉过正，一方面会造成浪费，一方面也增加了分析人员的工作量，那么，到底如何规定各种缓冲液、试液、指示液的使用期限呢，请参考下表！ 表2：各种缓冲液、试液、指示液使用期限表 表3.一般溶液有效期一览表 淀粉指示剂5g/L5天硝酸盐氮标准溶 液 / 1个月 淀粉指示剂10g/L5天硫酸锌535g/L1个月 盐酸氨水缓冲溶 液PH=9.6-9.7 7天 硫酸锰380g/L 1个月 乙醇溶液78%7天硫酸铜溶液20g/L1个月
乙醇溶液75%7天六水氯化铁0.25g/L1个月乙醇溶液72%7天碱性试剂/1个月乙醇溶液70%7天重铬酸锌12.285g/L1个月碘指示剂/7天重铬酸钾12.258g/l1个月氧化镁2%7天磺胺5g/L1个月间苯二酚盐酸溶 液/7天七水硫酸镁22.5g/L1个月氨水溶液1:47天三乙醇胺溶液1:31个月溴甲酚紫水溶液 1.60%7天韦氏液13g/L1个月酚酞指示剂5g/l7天硼酸溶液20g/L1个月酚酞指示剂10g/l7天喹钼柠铜溶液/1个月除蛋白试剂/7天柠檬酸溶液0.1moL/L1个月 饱和苦味酸溶液/7天氯化铵-EDTA溶 液/1个月 硝酸银溶液9.6g/L7天硫酸镉溶液/1个月 硝酸银溶液50g/L7天氢氧化铵-氢化 氨缓冲液/1个月 淀粉溶液1%7天碘贮备液/1个月玫红酸0.5g/L7天碘化钾溶液1moL/L1个月使用液（检测尿 素）/7天碘化钾溶液10%1个月碘-碘化钾/7天碘化钾溶液15%1个月 盐酸N-(1-萘 基）-乙烯二胺0.1%10天碘化钾溶液饱和 1个月 萘胺盐酸盐1g/L10天碘酸钾标准溶液10mmoL/L1个月亚甲基兰饱和溶 液/14天碘溶液0.005moL/L1个月显色剂（原料奶 掺假用）/15天氯化镁2%1个月 次甲基兰指示剂1g/L、10g/L 1个 月氯化钙27.5g/L1个月 甲基红指示剂0.1g/l、 2g/L 1个 月碱性酒石酸钾钠/1个月 甲基红指示剂1g/L 1个 月纳氏试剂/1个月 溴百里酚蓝指示 剂1%1个 月 费林试剂甲、乙 液 0.5g 1个月 溴甲酚绿指示剂1g/L 1个 月 三氯甲烷-冰乙 酸溶液 2：3 1个月 溴甲酚绿指示剂2g/L 1个 月 氯化钡溶液25g/L 1个月 铬酸钾指示剂50g/L1个乙醚-乙醇2：11个月
常见缓冲溶液配制方法 乙醇－醋酸铵缓冲液：取5mol/L醋酸溶液，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至，用水稀释至1000ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液：取氯化钙0.294g，加L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L 盐酸溶液调节pH值至，加水稀释至100ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液：取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至。 乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液，再用水稀释至250ml。 巴比妥缓冲液：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至，滤过。 巴比妥缓冲液：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。 巴比妥－氯化钠缓冲液：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用L盐酸溶液调节pH值至，再用水稀释至500ml。 甲酸钠缓冲液：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至～。 邻苯二甲酸盐缓冲液：取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至，加水稀释至1000ml，混匀。 枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。 枸橼酸盐缓冲液：取％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至。 枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液：甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液与乙液混合，摇匀。 氨－氯化铵缓冲液：取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至。 氨－氯化铵缓冲液：取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氯溶液35ml，再加水稀释至100ml。 硼砂－氯化钙缓冲液：取硼砂0.572g与氯化钙2.94g，加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约调节pH值至，加水稀释至1000ml。 硼砂－碳酸钠缓冲液～：取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml与硼砂溶液27ml，混匀。 硼酸－氯化钾缓冲液：取硼酸3.09g,加L氯化钾溶液500ml使溶解，再加L氢氧化钠溶液210ml。 醋酸盐缓冲液：取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至(电位法指示)，用水稀释至100ml，即得。 醋酸－锂盐缓冲液：取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH值至，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取醋酸钠5.1g，加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取无水醋酸钠20g，加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml，加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取醋酸钠18g，加冰醋酸，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取醋酸钠5.4g，加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至，再加水稀释至100ml。 醋酸－醋酸钠缓冲液：取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml。 醋酸－醋酸钾缓冲液：取醋酸钾14g，加冰醋酸，再加水稀释至1000ml。 醋酸－醋酸铵缓冲液：取醋酸铵7.7g，加水50ml溶解后，加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml。
化验室化学试剂管理规定
1.范围和目的 1.1本规程适用于品检科所有化学试剂以及配制试剂。 1.2制定本规程的目的是为了建立化验室化学试剂的购买、接受、储存、发放、使用、销毁使用管理规程，使化验员能正确地使用试剂，保证化验工作质量。 2.化学试剂的购买： 4.1.1由化验室技术员根据库存量及化学试剂检验需要量提出购买计划，经化验室负责人审核，公司厂长批准，交供应科采购员购买。 4.1.2供应科采购员到经公司审核批准的供应商或生产商处，依据采购计划要求的试剂品名、规格、等级、数量、生产商名称等，尤其是包装的完好性，标签是否为原厂粘贴牢固无破损，符合要求后进行采购。 3.化学试剂的入库 3.1购买后由采购员直接交给仓库管理员并办理入库手续。 3.2技术人员根据购买计划办理出库手续并通知化学试剂管理员到出库接受。 3.2化学试剂管理员先检查包装的完好性，封口是否严密, 试剂无泄漏，标签是否粘贴牢固无破损，内容清晰,贮存条件明确，瓶签已部分脱胶的，应及时用胶水粘贴。无标签的试剂不得入库。严格按采购计划单内容，逐一核对。 3.3化学试剂保管员必须每天检查一次温湿度表并记录。超出规定范围的应及时调整。 3.4 无标签的试剂应予销毁。 4.化学试剂的领用 4.1化验员根据检验需要量提出领用要求。 4.2化学试剂管理员根据化验员的要求发放化学试剂，并填写化学试剂领用记录。 5.化学试剂贮存 5.3.1原装化学试剂贮存环境 5.3.1.1化学试剂应单独贮藏于专用试剂库内，专人保管。该贮存室应阴凉、避光，防止由于阳光照射及室温偏高造成试剂变质、失效。 5.3.1.2化学试剂贮库在专用房间。室内严禁明火，消防灭火设施器材完备，以防一旦事故发生造成伤害和损失。 5.3.1.3盛放化学试剂的贮存柜需用防尘、耐腐蚀、避光的材料制成。 5.3.1.4危险品应贮藏于专用仓库保险柜内,保险柜钥匙由指定人员保管。 5.3.1.4化学试剂贮库室温应保持以5-30℃,相对湿度以45-75%为宜。 5.3.1.5化学试剂贮库应有良好的通风设备。 5.3.1.6化学性质或防护、灭火方法相互抵触的化学危险品，不得在同一柜或同一储存室内存放。 5.3.1.7化学试剂贮库存放的试剂数量要适量，不要过多。 5.3.2化验室内化学试剂的贮存 5.3.2.1化验室操作区内的橱柜中及操作台上，每个品种试剂只允许存放1-2瓶数量的化学
实验室常用生化试剂配方 1.常用抗生素配制以及使用说明（参考链霉菌室操作手册2019版） 抗生素 英文名称及缩写 抗性基因 贮藏液浓度(mg/ml) 100 25(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 35 25(0.15M NaOH配) 50(DMSO配) 50 50 MM 使用终浓度（μg/ml）链霉菌 2CM YEME 大肠杆菌 LA或LB 氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素紫霉素萘锭酮酸 TMP Ampicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprim cat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph －* 10 10 2 5 10 5 100 10 －－ 25 25 20 25 10 － 50 －－－－－－ 2.5 － 5 50-100 25 － 25 50 25 25 20 10-30
注意事项： (1) –表示无记录或不能使用，贮存液除特别说明外均用无菌水配制，配制过程请 确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装； （2）Km 和Am有交叉抗性，同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量，并 设置阴性对照； （3）Hyg、Vio易见光分解，配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。有些抗生素需要在低盐的环境（如DNA培养基）下筛选效率较高，如Hyg, Km, Vio （4）用无菌水配制的抗生素需在超净工作台内用0.22 μm一次性过滤器过滤除菌并 分装；氯霉素、TMP、硫链丝菌素可以在超净工作台外配制分装，无需过滤除菌，但需确 保配制贮存液所用溶剂（无水乙醇、DMSO）未遭受污染，建议配制氯霉素时使用新的无水 乙醇，不要使用抽提质粒或总DNA时用的无水乙醇，以防止污染；DMSO，即二甲亚砜，易 挥发，有剧毒； （5）长期不用的抗生素请置于-20℃保存，抗生素粉末按照使用说明一般置于4℃保存，经常使用时可以暂置于4℃保存； （6）抗生素的实际使用浓度请结合实验经验进行适当调整； (7)配制抗生素时应尽量一次性称取抗生素粉末，配制过程中建议穿工作服，戴一次 性橡胶手套及口罩，及时清理称量配制抗生素时使用的台面及器具，以避免抗生素及溶剂 对自身的损伤及对工作环境的污染。 注意事项： (1)表中所列酶均可以用无菌水配制，也可以用相应的缓冲液配制，缓冲液配制方法 参考《分子克隆实验指南（第3版）》： 蛋白酶 K缓冲液：50 mM Tris（pH 8.0），1.5 mM 乙酸钙； RNase A缓冲液：TE （pH 7.6）：10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA；溶菌酶缓冲液：10 mM Tris-HCl（pH 8.0）； (2) RNase A配制好后沸水浴处理5 min，取出贮存RNase A后首次使用时也需沸水 浴处理5 min后再使用； （3）制备原生质体时使用的溶菌酶配制时需过滤除菌，其他情况一般无需过滤除菌； （4）所有酶均应在-20℃保存，使用过程中避免反复冻融，配制过程中尽量避免外界 污染。 （1）IPTG用无菌水配制，0.22μm一次性滤膜过滤除菌，分装保存于-20℃；
化验室化学试剂分类清单
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化验室化学试剂分类清单 栏 号 1 ２ 3 4 5 ６7 8 序号 化学品危险性类别 危规号规格数量包装类别月使用量 储存地点 使用地点商品名化学名俗名类别 是否剧毒/易制毒 品／腐蚀品 1 盐酸HCI ８.1 腐蚀品８1013 5０0ｍ ｌ 16瓶Ⅰ 500００ml 化验室药 品储存室 储存,化 验室使用 2 硫酸Ｈ2SＯ4 8.1 腐蚀品８1007 5０0ml １2瓶Ⅰ6０0００ｍl 3 冰乙酸CH３COOＨ无水乙酸８.1 腐蚀品81６01 500ｍl 15瓶Ⅲ １0000ml 4 甲酸HCOOＨ蚁酸8.1 腐蚀品811０1 500ml 1瓶Ⅱ1000ml ５硝酸HＮO３硝镪水8．1 腐蚀品81０02 500mｌ５瓶Ⅰ１０００m ｌ 6 无水乙醇ＣH３ＣH2OH 无水酒精 3.1 易制爆32０61 ５00ml 4瓶Ⅲ１5００m ｌ 7 甲醇CH3ＯH 木精 6.1 可燃／有毒３20５ ５00ml 2瓶Ⅰ５００ml 8 氢氧化钠NaOH 烧碱8.2 腐蚀品9５0０ １ 500g 11瓶Ⅰ 80００g 9 氯化钠NａＣＬ食盐否ｎull 500ｇ2瓶Ⅲ５00g 1 ０ 四氯化碳腐蚀品500mｌ１瓶Ⅰ10０0ml 11 过氧化氢H2O２双氧水5．2 易制爆81０67 500mｌ5瓶Ⅱ５00ml 12 高锰酸钾KＭnO4 过锰酸钾 4.1 易制毒／易制爆51048 ５00g 1瓶Ⅱ50g １3 二水合氯化亚锡 SnＣｌ２·2H ２O 6．1 有毒/腐蚀品nuｌl 500g 1瓶Ⅰ停用 14 碘I2 8.３低毒/腐蚀品21０05 250g ３瓶Ⅱ750g
实验室试剂管理办法 1 目的 1.1 使操作员能够妥善保存化学药品、化学试剂，防止其变质、防止意外事故的发生。 1.2 使操作员能够妥善处理废料，防止其污染环境、防止意外事故的发生。 2 范围 2.1 适用于化验室化验员日常药品的管理。 3 职责 3.1 化验室 4 内容 4.1 化学药品、试剂的储存 4.1.1 化学药品储存室应符合有关安全规定，有防雷、防火、防爆、调温等安全措施。室内应干燥、通 风良好、温度一般不超过3 0C。 4.1.2 化学药品建立严格的帐目并记录于《化学试剂点检表》、《化学药品使用记录表》。 4.1.3 室内备有消防器材。 4.1.4 所有的化学试剂分类存放，无机试剂按酸、碱、盐、氧化物、单质等分类；盐类按阳离子分类，钾 盐、钠盐、铵盐、钙盐、镁盐等；有机试剂按官能团排列，烃、醇、酸、酯等；指示剂按用途分 类，酸碱指示剂、氧化还原指示剂、配位滴定的金属指示剂；专用有机指示剂按测定对象分类。 4.1.5 易燃易暴品应存放于阴凉偏低、不易碰撞的地方，有良好的通风效果，移动时轻拿轻放；配备相应 的灭火设备。 4.1.6 低沸点、易挥发有机溶剂存放于阴凉、通风处，远离热源，不得有明火。并不要与固体试剂同置一 个柜中。 4.1.7 见光易分解的应保存在棕色瓶中，或用黑色袋子裹严包装物，避光保存。 4.1.8 易燃易爆品、有毒害药品，应锁入药品柜内，防止人员带出制成自己或他人身体伤害和财产损 失，药品柜钥匙由部门主管保管一把，带班主管保管一把，其余钥匙全部交还公司，如要使用以上药品，需带班主管或部门主管批准后，由带班主管或代理人亲自开锁按其需要数量发料，并记录于< 化学药品使用记录表》。易燃易爆品储存于①药品柜，有毒害药品储存于②药品柜。 4.2 化学试剂溶液的管理 4.2.1 化学试剂溶液要装在细口瓶中，见光易分解的应装在棕色瓶中。所有化学试剂溶液在存放过程中 都应避免受热和强光照射。 4.2.2 所有试剂、溶液的盛装容器上都必须贴上标签，标签书写工整、完整和清晰；试剂最好是原标签， 配制的溶液包装上的标签应写明名称、单位浓度、配制日期；长期使用的试剂、溶液上的标签，贴层透明胶保护，以防腐蚀、磨损。并填写《标液配制记录表》。 4.2.3 影响试液质量的因素。试液的质量除主要受试剂质量的影响以外还会受其他多种因素的影响。 4.2.3.1 试液的稳定性。稳定性较好的试剂配制成溶液后，其稳定性可能变差。因而试液都应标明配 制日期，并根据需要定期检查记录于《实验室试剂点检表》，如发现试液变色、沉淀等变质迹 象，即应弃去重配。不稳定试液应分多次少量配制，并分特别情况来采取特殊贮存方法，如避光 等。 4.2.3.2 试液的贮存期。一般浓溶液在贮存期内变化不大，而稀溶液则随贮存时间的延长，其浓度多 会发生变化。溶液的浓度愈低，有效使用期限愈短。化学试剂溶液只能在其有效期内使用，GB 601 规定一般滴定分析用标准溶液在常温下，使用期限不宜超过两个月。 4.2.3.3 容器的耐蚀性。玻璃容器的耐碱性都较差，玻璃被腐蚀后可释放出某些杂质污染试液，所以，应采用聚乙烯瓶盛放碱性试液。软质玻璃的耐酸性和耐水性也较差，不应采用此种玻璃制成的容器长期贮存试液。
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性， 须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。 8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。 1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA?2H2O和20g的NaOH，
实验室常用化学药品、试剂，由于性质的不同，有效期也有所不同，比如我们常用的有缓冲液，有机试剂，标准溶液，流动相，标准品，配制溶液，留样等等，都有一定的有效期，如何正确把握使用期限常用的标准溶液、缓冲液的有效期，你记住了吗本文列出了有效期一览表，供大家参考。 滴定用标准溶液的有效期为多长其实跟贮存的条件有关，正常室温下贮存时间见下表。 表1.常见滴定用标准溶液的有效期 相比标准溶液的有效期，各种缓冲液、试液、指示液也有其有效期限制，多数实验室都是根据前辈的经验来规定期限，也有的实验室为了防止过期现象导致的样品分析结果误差的产生，尽量都是现配先用，或者最多使用一个月。对于某些较稳定的溶液来说，不必矫枉过正，一方面会造成浪费，一方面也增加了分析人员的工作量，那么，到底如何规定各种缓冲液、试液、指示液的使用期限呢，请参考下表！ 表2：各种缓冲液、试液、指示液使用期限表 表3.一般溶液有效期一览表 淀粉指示剂5g/L5天硝酸盐氮标准溶 液 / 1个月
淀粉指示剂10g/L5天硫酸锌535g/L1个月盐酸氨水缓冲溶 液PH= 天 硫酸锰380g/L 1个月 乙醇溶液78%7天硫酸铜溶液20g/L1个月乙醇溶液75%7天六水氯化铁L1个月乙醇溶液72%7天碱性试剂/1个月乙醇溶液70%7天重铬酸锌L1个月碘指示剂/7天重铬酸钾l1个月氧化镁2%7天磺胺5g/L1个月间苯二酚盐酸溶 液/7天七水硫酸镁L1个月氨水溶液1:47天三乙醇胺溶液1:31个月溴甲酚紫水溶液%7天韦氏液13g/L1个月酚酞指示剂5g/l7天硼酸溶液20g/L1个月酚酞指示剂10g/l7天喹钼柠铜溶液/1个月除蛋白试剂/7天柠檬酸溶液L1个月饱和苦味酸溶液/7天氯化铵-EDTA溶液/1个月硝酸银溶液L7天硫酸镉溶液/1个月 硝酸银溶液50g/L7天氢氧化铵-氢化氨 缓冲液/1个月 淀粉溶液1%7天碘贮备液/1个月
不同缓冲液的缓冲范围 pH缓冲液 六十一秒的常用缓冲溶液的配制&缓冲溶液原理（2007年6月16日更新）（一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 甘氨酸分子量＝75.07。 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。 （二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） 邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。 Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。
C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。 ①使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 ；0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。 （六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2 mol/L） NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。冰乙酸11.8 mL稀释至1 L（需标定）。 （七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L） X 毫升0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。
（八）磷酸盐缓冲液磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/L） Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。 NaH2PO4·H2O分子量＝138.01；0.2 mol/L溶液为27.6 g/L。 NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03；0.2 mol/L溶液为31.21 g/L。 （九）巴比妥纳-盐酸缓冲液 巴比妥钠分子量＝206.18；0.04 mol/L溶液为8.25 g/L。 （十）Tris-HCl缓冲液（0.05 mol/L） 50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100
化验室化学试剂管理规定 1.范围和目的 本规程适用于品检科所有化学试剂以及配制试剂。 制定本规程的目的是为了建立化验室化学试剂的购买、接受、储存、发放、使用、销毁使用管理规程，使化验员能正确地使用试剂，保证化验工作质量。 2.化学试剂的购买： 技术员根据库存量及化学试剂检验需要量提出购买计划，经化验室负责人审核，公司厂长批准，交供应科采购员购买。 3.化学试剂的入库 购买后由采购员直接交给仓库管理员并办理入库手续。 技术人员根据购买计划办理出库手续并通知化学试剂管理员到出库接受。 化学试剂管理员先检查包装的完好性，封口是否严密,试剂无泄漏，标签是否粘贴牢固无破损，内容清晰,贮存条件明确，瓶签已部分脱胶的，应及时用胶水粘贴。无标签的试剂不得入库。严格按采购计划单内容，逐一核对。 化学试剂保管员必须每天检查一次温湿度表并记录。超出规定范围的应及时调整。 无标签的试剂应予销毁。 4.化学试剂的领用 化验员根据检验需要量提出领用要求。 化学试剂管理员根据化验员的要求发放化学试剂，并填写化学试剂领用记录。 5.化学试剂贮存 原装化学试剂贮存环境 55 5 55℃,相对湿度以45-75%为宜。 5应有良好的通风设备。 化验室内化学试剂的贮存 5 配制好的化学试剂应存放于试剂架上。性质不稳定的配制试剂应根据不同的性质存放，如放在阴暗处、冰箱等地方。使用化学试剂的过程中应特别注意其外观的变化。 配制化学试剂一般贮存1~2个月为宜,过期不得使用,须重新配制。在使用过程中发现有沉淀的，亦不得使用。 55需要冷藏保存的化学试剂应放在冷藏箱内保存。 易潮解、易失水风化、易挥发易吸收、二氧化碳、易氧化、易吸水变质化学试剂，需密闭保存或蜡封保存,应存放试剂柜下部柜中,平时应关门上锁；。 易爆炸品、易燃品、腐蚀品应单独存放,平时应关门上锁,剧毒品用后归还专用库（柜）。某些高活性试剂应低温干燥贮放。 保持室内清洁,通风和温湿度应符合规定。 每日检查一次消防灭火器材的完好状况,保证随时可以使用。