当前位置:文档之家› 钙离子荧光说明书

钙离子荧光说明书

钙离子荧光说明书

使用说明:

1.取适量Fluo-4 AM母液,用PBS稀释至0.5-5μM的工作液。

注:工作液须即用即配,请勿反复冻融。

2.对于待检测的培养细胞,去除培养液,用PBS或HBSS洗三遍。

注:因为培养液中的血清含有酯酶会导致Fluo-4 AM分解为Fluo-4,而酚红会导致荧光背景增强。

3.加入Fluo-4 AM工作液,溶液量以能充分覆盖细胞为准。

4.20℃-37℃孵育10-60分钟进行荧光探针装载。

注:如果是首次实验不能确定孵育温度和时间,建议先尝试37℃孵育30分钟,观察荧光效果。如果细胞死亡较多,则适当缩短时间或降低温度;如果荧光强度太弱,则适当延长时间。

5.随后用PBS或HBSS洗涤3次,洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-4 AM在细胞内完全转变成Fluo-4。

6.如有需要,可以使用适当药物来刺激细胞。

7.用激光共聚焦显微镜、荧光酶标仪、荧光分光光度计或流式细胞仪等荧光检测仪器检测Fluo-4的荧光,以确定细胞内钙离子浓度的变化。

印刷荧光油墨使用注意事项

印刷过程中如果想为胶印活件增加特殊效果,可以在四色印刷过程中使用荧光油墨,这样一来,印刷出的图像就能散发出熠熠的光辉。荧光能让图像跳跃起来,在胶印过程中,可以通过多种方法来使用荧光油墨。举例来说,如果能在普通的品红油墨里增加25%到50%的粉红色荧光油墨,那么一个粉红色气球的形象就会变得更加突出了。由于荧光油墨的颜色相对较浅,所以它能使图像变得更加轻盈,而颜色较重的品红油墨则可以用来保持图像的深度、细节和反差。要想更好地控制和影响印刷机,可以把粉色油墨作为第五色添加到这个粉红色气球的印刷过程中。这能有选择性地把荧光油墨印在特定的区域,从而保证其他色彩的真实性,例如手持气球的人手的颜色。对于需要重点强调的实地色块,可以印刷两遍荧光油墨。经济效益和多种用途由于非涂布纸很容易吸收大量的油墨,所以印刷页面上的颜色很容易失去活力。但是荧光油墨就能在被大量吸入纸张的前提下保持较高的亮度,因为它们能将更多的光线反射到眼中。它们也可以用在印刷过程的末端,以弥补没有在非涂布纸上印刷好的图像细节。举例来说,如果一幅图像以黄色和品红为主,那么就可以用荧光油墨来替代印刷原色,从而提高图像的亮度。上海印刷 荧光油墨的使用并不是一门精密科学,也不是每一家印刷厂都拥有同样的工艺、选项、设备和供应商。只要能够得到合理地使用,荧光油墨就能成为一种赚钱的工具,并对印刷效果产生重大影响。 印刷荧光油墨使用注意事项 含有大面积实地色块的明亮图像最适合使用荧光油墨。如果在含有很多阴影的暗调图像中使用这种油墨,也许就会损失掉一部分质感和反差。荧光油墨的价格大约比普通油墨贵20%左右。但是油墨在一个印刷活件的总成本中所占的比例是非常小的。黄色和品红色荧光油墨的冲击力最强,蓝色油墨的效果最弱。一定要小心选择荧光油墨的涂布方式。水性涂布比上光涂布更容易使荧光油墨褪色。但是无论选择哪种方式,涂料都会对荧光油墨的效果产生影响。不能用荧光油墨准确地检验图像。所以一定要在印刷机上检验图像,因为荧光油墨很有可能在印刷过程中出现轻微的色偏。由于这些油墨相对较浅,所以印刷厂往往会加大对印刷机的供墨量,以便印刷出更明亮的色彩。这些“变幻无常“的颜料最适合印刷短期使用的具有较强冲击力的促销材料,因为它们很容易褪色。虽然荧光油墨非常明亮,但也不必放弃阴影。荧光油墨之所以看起来比较明亮,是因为它们使用了大比例的光谱色,其中就包括UV 光。它们把UV光的波长转换到可见光里,从而将更多的色彩反射到眼睛里。荧光油墨是由荧光染料和树脂制成的。荧光染料能使油墨变得明亮起来,但如果不在溶液中添加树脂,它们就不能发出荧光。

荧光油墨

荧光防伪油墨 防伪技术是—门交叉边缘学科,涉及光学、化学、物理学、电磁学、计算机技术、光谱技术、印刷技术、包装技术等诸多领域。油墨防伪技术是目前医药包装行业应用得比较广泛的一种防伪技术。该种防伪技术主要是利用在普通油墨连接料中加入特别物质,经过非凡工艺加工而成为特殊印刷油墨的技术。这类防伪技术的特点是:实施简朴、成本低、隐蔽性好、色彩鲜艳、检验方便。目前防伪油墨主要有紫外激发荧光防伪油墨、磁性防伪油墨、热敏变色防伪油墨、日光激发变色防伪油墨、光学可变防伪油墨、压敏防伪油墨、红外防伪油墨、防涂改防伪油墨、防伪印油等。 油墨印刷防伪是医药包装防伪技术中的一个重要部分。实验表明,加入荧光颜料的荧光防伪油墨耐水、耐酸、耐醇性能良好,目前大量使用在医药包装中,特殊是泡罩包装中。在其它药品包装中如药品软包装和药品标签中也常被使用。可以说,荧光防伪油墨是目前医药包装油墨防伪里面应用最多的—种防伪油墨。 荧光油墨是由在油墨中加入相应的可见荧光化合物而制成的。其防伪特征是:印刷品在可见光和紫外线作用下,可发出闪闪荧光。不同的配方可以得到不同的荧光油墨。如在油墨中加入紫外线激发的可见荧光化合物(如三苯乙烯衍生物、二苯乙烯衍生物、四苯乙烯衍生物等)得到紫外荧光油墨,在紫外线的照射下可发出红、黄、绿、蓝等可见光。在油墨中加入具有红外线激发的可见荧光化合物可得到红外荧光油墨,在红外灯照射下可发出绿色的可见光。 荧光油墨有隐形和有形之分 (1)隐形荧光油墨防伪:所用材料为隐形荧光油墨,印刷工艺简单。该油墨印刷出隐形图案或文字,在紫外光照射下,呈现出清楚光亮的荧光图案。色彩鲜艳。该防伪检测方便,只要有一紫外光源或验钞机即可。 由于隐形荧光油墨是隐形即无色,在印刷时肉眼看不见也即无任何机器识别的跟踪标记。所以套印起来难度较大,但该种防伪隐蔽性较好,防伪力度更强,日前海内大多数医药包装都采用该种隐形荧光油墨。 (2)有形荧光油墨防伪:所用材料为有形荧光油墨,印刷工艺简单,套准精确,印刷效果同普通油墨印刷效果一样,但在紫外光照射下,印刷品呈现出异常的亮光,此时,可区别于普通油墨。 荧光油墨种类的使用对于包装防伪效果的好坏来说相当重要,假如选择不正确或者不佳的话,可能导致防伪效果不明显或者根本起不到任何防伪要求,例如根据色光的显色理论以及光吸收原理来说,中长波长的颜色光吸收短波长。因此,在选择荧光防伪油墨时一定要慎重。一般印刷体系中有产生其补色光的油墨存在或者有比所选荧光油墨显色光波长长的油墨存在时,该种荧光油墨最好不要使用或使用后达不到一定的防伪效果。因此在医药包装行业采用荧光防伪油墨的生产过程中,针对印刷体系中多种不同的印刷底涂材料荧光油墨的选取显得尤其重要。 此外荧光油墨的使用对于印刷工艺要求也比较严格,由于其油墨体系的特殊性,一般在使用过程中我们要注重考虑下面的一些影响因素: (1)由于药品包装印刷工艺中一般常用的都是凹版印刷,所以在凹版印刷中对于溶剂的选择非常重要。溶剂是凹印油墨的重要组分,具有溶解性和挥发性,其挥发速度是决定挥发型油墨干燥速度及印刷质量的重要因素。 溶剂挥发速度慢,对于印刷图像的再现性比较好,但如果挥发速度过慢,在印刷品上未能彻底挥发,则荧光墨层容易发生粘连,造成防伪图像模糊不清,版面起脏,影响防伪效果及

荧光标记技术在蛋白质定位及功能研究中的应用

荧光标记技术在蛋白质定位及功能研究中的应用 Feb 20, 2010No Comments 随着分子生物学、有机化学以及材料科学等学科的进展,最近我们又获得了好几种新型的荧光蛋白标签,这些标签可以用于细胞生物学成像研究。本文将对荧光标志物在蛋白质研究中的优势及劣势进行一番详细的介绍,文章中将重点介绍如何使用荧光标志物研究活体细胞(而不是固定细胞)中的靶蛋白。使用该方法可以对靶蛋白的表达情况、细胞中的定位情况、活性状态等指标进行研究,还将介绍将荧光显微镜与电子显微镜技术相结合的可行性问题。小分子荧光标志物染料、纳米晶体材料,即所谓的“量子点(quantum dots)”材料、自发荧光蛋白、小分子蛋白质标签等等这些材料都可以作为荧光标志物,而且将这几种材料“混合”起来是一种非常有前途的荧光标志物研究新思路。 我们使用荧光技术来研究细胞生物学已经好多年了,而且在从微小的分子层面到完整的有机体层面等各个层面都可以使用荧光技术进行研究。最开始使用的方法是将小分子有机染料与各种抗体相连接,来研究各种目的蛋白。不过这种使用抗体的方法如果需要对细胞内的蛋白质进行研究时,还需要对细胞进行固定和透化操作。因此后来又发展出可以直接在活体细胞内标记某种细胞器、核酸分子或某些离子的荧光标志物。在最近这10年里,荧光蛋白的出现使得进行非侵入性的活体细胞成像成为了可能。使用这种荧光蛋白标志物,我们可以研究目的基因的表达情况,蛋白质运输情况以及各种细胞内动态的生物化学信号通路。使用经过遗传修饰的小分子有机荧光标志物构建的混合系统,我们还可以对蛋白质的寿命进行研究,如果再结合电镜技术和快速光淬灭技术(rapid photoinactivation)还可以对蛋白质的定位情况进行研究。与此同时,半导体纳米晶体材料技术也得到了高度的发展,现在,这种新型的材料在亮度和光稳定性方面都要比传统的荧光标志物好得多,只不过现在这种材料的靶向性还不是很好。本文中我们将对目前荧光标志物及其相关技术的发展进行介绍,同时还将介绍荧光标志物在蛋白质表达、蛋白质活性以及蛋白质功能研究工作中的作用进行介绍。 ?0?2 荧光标志物 小分子有机染料 小分子有机染料是指分子量小于1KD的小分子物质,这种小分子有机染料可以通过与生物大分子共价连接的方式对其进行标记,我们现在对这种染料的最佳检测波长范围、亮度,即吸光系数、光稳定性和自我淬灭特性都有了比较详尽的了解。利用荧光染料的分子策略包括扩展共轭双键、额外添加环状结构增强其刚性、用氟或磺酸盐这类吸电子性的或带电荷的物质进行修饰等。现在市面上已经有数百种这类荧光染料的商业化产品可供选择,而且还在不断增加之中。不过由于这类染料对蛋白质缺乏特异性,因此多与抗体联用(图1A~C)。?0?2 荧光蛋白 第一批用于细胞生物学的荧光蛋白包括藻胆蛋白(phycobiliproteins)和从蓝藻

荧光油墨印刷工艺技术及其应用

中国包装报/2011年/6月/27日/第003版 技术 荧光油墨印刷工艺技术及其应用 星星 随着社会的发展,荧光油墨得到了越来越广泛的应用。特别是票据、证券、刮刮卡、商标、书刊封面和烟酒等包装产品的印刷工艺,采用防伪荧光油墨进行印刷,既可提高印刷工艺水平,又可达到一定的防伪效果。所以,正确认识和了解荧光油墨的特性,掌握好荧光油墨的正确应用方法,不仅可有效防止印刷故障的出现,提高印刷生产效率,而且还可以较好地提高产品的印刷质量,满足客户对防伪产品的印刷质量要求。 荧光油墨的特性和用途 所谓荧光油墨,就是用含有荧光颜料制成的油墨。用荧光油墨印刷的版面,具有将紫外线短波转换为较长的可见光,进而反射出迷人色彩的特性,因此,具有一定的防伪效果。荧光油墨中的着色剂,即颜料或染料与普通着色剂不同,它不仅能反射可见光,而且还能吸收短波部分,如紫、蓝和绿光光线,并且反射为可见的荧光,使所着色物质经日光或紫外线激发后显出荧光。所以,其着色的物质能产生非常悦目的具有荧光效果的色彩。而着色剂能否产生好的荧光效果,主要取决于它的分子结构中某些原子团的存在状态。夜光型荧光油墨印刷后,用紫外线照射印品图文时,会变成长波段的可见光反射出来,因而在暗处也可呈现鲜艳夺目的色彩效果,这是其原料锌、镉和锶等硫化物作用的结果,也是夜光型荧光油墨的基本特性。无色荧光油墨可与同类的4色油墨调制配其他有色荧光油墨,但是,其发光颜色和亮度将因加入油墨的颜色与分量不同而有所差异,若调配不当还容易影响油墨性能。由于红、黄油墨的透射光波长与紫外荧光线的波长差距较大,因此所产生的荧光色明显,而绿色荧光油墨在浅底色或白底色上印刷时,只有墨层达到一定的厚度后,才能获得较理想的荧光效果。基于荧光油墨在彩色印刷品中应用效果较好,所以,它广泛应用于证券、邮票、商标、标签、刮卡、发票、航标和其他包装装潢印刷品,应用前景极其广阔。 荧光油墨的类型和品种 荧光油墨按印刷工艺类型可分为:有丝印荧光油墨、凹印荧光油墨、胶印荧光油墨、凸印荧光油墨和柔印荧光油墨。按油墨性能分,荧光油墨是用于一般产品的印刷,而荧光防伪油墨专门用于特殊产品的防伪印刷。使用时,要根据印刷工艺的特点设计,选择相应的荧光油墨,才能确保印刷工艺效果不受影响。荧光油墨又分为隐形防伪油墨和有形防伪油墨。用隐形荧光防伪油墨印刷出的图文,正对着印品看几乎看不到印刷色彩,而当斜着观察印刷版面,也只能看到淡淡的、有微量光泽感的印迹,这种荧光油墨常常用于印刷刮刮卡、书刊封面和发票等产品。当采用紫外光照射印刷图文时,就会清楚看到光亮清晰、色彩鲜艳的荧光图文。由于隐形荧光油墨是透明无色的,在印刷时用肉眼难以清楚观察,这给装版校版造成一定的难度。根据以往凸印工艺实践经验,装隐形荧光油墨的印刷版面时,最好先不要马上进行洗车换色,而应在装版校版完成之后,再进行洗车换色,这样有利于提高装版校版的效率。而采用有形荧光油墨进行印刷,工艺相对比较简便,装版校版和印刷过程的墨色控制比较直观明了,所以,版面套准容易,印刷过程的墨色也容易保持均匀。 选择合适的荧光油墨印刷不同的产品,对于产品的防伪效果有着至关紧要的作用。若选择油墨品种不合适的原料,容易造成印刷防伪效果不好,甚至起不到防伪的效果。比如在金黄色的底色上叠印无色荧光蓝油墨,由于荧光蓝油墨在紫外光的照射下可呈现蓝色光,再与底色金黄色光进行混合,由于黄色光和蓝色光互为补色,呈现出来的是白色光。这是光谱中中长波的金黄色光

夜光油墨说明

夜光油墨 夜光油墨是采用长余辉稀土发光材料,通过高科技手段制成的。在白天吸收太阳光10-30min,便自动持续发光10h以上,所以到深更半夜仍旧发光,特别是当车行驰在黑暗中夜光油墨,发光格外明亮、醒目,它形同霓虹灯广告,霓虹灯需要电源才能发光,而夜光油墨无须用电,节省能源,无限循环使用,也可称为太阳能“霓虹灯”广告。 夜光油墨原材料: 夜光油墨用于印刷:为了减少夜光粉在涂料中沉淀的问题,您可以高速搅拌,并添加防沉剂,使用前需搅拌均匀,可用稀释剂来调整黏度,不可使用重金属化合物做添加剂。印刷背景使用白色或反光色系为主,可提高所印图案的亮度与发光时间。涂料与油墨涂层厚度最好大于100目,如可达到130目~150目,其效果最佳,(用80目丝网印,两遍 蓄光型自发光油墨,可持续发光12小时以上,其吸光-蓄光-发光过程无限循环,永久使用。(夜光粉可作为一种添加剂,均匀分布在各种透明介质中,如涂料,油墨,塑料,印花浆,陶瓷,玻璃,化纤等,用夜光粉制成的各种发光制品)。颜色品种有:黄绿色(油墨)、天蓝色(粉)、蓝绿色(粉)。可以用于:铭牌、军事设施、消防应急系统、交通标志、工艺品、装饰品、玩具等的印刷其印刷方式有:丝印/UV丝印/喷涂印刷时要注意事项: 1、夜光油墨只能印在白色底材上,如在其他颜料底材上印刷,须在底材上加印白色; 2、1D型黄绿夜光粉粒径为200目(约25-35微米),颗粒较粗,亮度最好,一般印在透明材料反面,用80目网版印刷; 3、2D黄绿夜光粉粒径为250目(约10-20微米),印正面较大的文字(如门牌等)或反面,用100目网版印刷; 4、5P夜光粉粒径为600目(约5-8微米),颗粒较细,亮度略差,一般印正面,建议用120目网版印刷。 可添加的助剂: 1、丝印:718快干、719中干、783慢干、800特慢干等; 2、丝印ABS不烧底溶剂:815快干、816中干、818慢干溶剂; 3、UV丝印:908UV丝印稀释剂

紫外荧光胶印油墨

泉州市千变新材料有限公司紫外荧光油墨系列Quanzhou City, change new material Co Ltd ultraviolet fluorescent powder series 紫外荧光油墨(ultra-violet fluorescent Ink)是由在油墨中加入相应的可见荧光化合物而制成的。其防伪特征是:印刷品在普通光线下看不见,在紫外线下,可发出闪闪荧光。紫外荧光油墨有隐形和有形之分。应用紫外光(200—400nm )照射激发而发出可见光(400—800nm)的特种油墨,称为紫外荧光油墨。根据激发波长不同分为短波和长波。激发波长为254nm的称为短波紫外荧光油墨,激发波长为365nm的称为长波紫外荧光油墨,按颜色的变化又分为无色、有色、变色三种,无色可显示红、黄、绿、蓝等颜色;有色可使原有颜色发亮;变色可使一种颜色变成另一种颜色 1、隐形紫外荧光油墨:所用材料为隐形材料,印刷工艺简单。该油墨印刷出隐形图案或文字,在紫外光照射下。呈现出清晰光亮的荧光图案。色彩鲜艳。该防伪检测方便,只要有一紫外光源或验钞机即可。由于隐形荧光油墨是隐形即无色,在印刷时肉眼看不见也即无任何机器识别的跟踪标记。所以套印起来难度较人,但该种防伪隐蔽性较好,防伪力度更强,目前国内大多数医药包装都采用该种隐形荧光油墨。应用范围 货币,票据,证卡,烟、酒、药品、化妆品的标签、包装、说明书等具有较高防伪要求的印刷品。 3印刷方式

1、适合任何印刷方式:胶印、UV胶印、凸印、UV柔版、丝印、UV丝印、水性丝印、移印、凹印、喷涂、 2、丝印可做纸张、塑胶、尼龙、ABS、PET、PP、金属、玻璃,水性、UV等油墨,丝印建议用200-300目网版。 1、使用时请用新墨辊与新印版,或者将旧的墨辊与印版彻底清洗干净,(胶印墨辊可用还原剂清洗),特别是印刷无色荧光油墨时,极微量的有色油墨有可能使无色荧光油墨带色,影响隐形效果。 2、本油墨印在不同的材料效果略有不同: A、无荧光纸:纸张略黄,在荧光灯下不显色,造纸过程中不加任何增白的化学物品,属于环保纸。欧洲、美国及我国的人民币、发票、国家机构颁发的证书都使用这种纸。 B、不含增白化学物品的塑料材料, 如卡片、包装袋。 C、普通的有荧光纸,外观洁白。这种纸在造纸过程中为了增白效果在纸浆中加入某种化学物品,在长波紫外荧光灯下显示蓝色。印刷后荧光效果不是很理想,现亚洲地区普遍使用这种纸张。为了使荧光效果更好:a. 采用高浓度的荧光油墨印刷;b. 可以在纸张表面先印一层无色荧光黑油墨。两种同时采用效果更好。 D、在表面涂有某种化学物品的纸张,这种化学物品有可能跟荧光油墨发生化学反应,导致荧光效果慢慢消失。如:热敏纸、化学变化纸。 E、双波段油墨要印在无荧光的纸或塑料上,印在带有荧光的材料上无双波段荧光效果。

荧光油墨印刷技巧

荧光油墨印刷技巧 当黑暗的环境下,荧光油墨会发光。产生这种效果的关键在于这种油墨中包含有特种彩色颜料,它能吸收紫外波段的能量,并将这些能量转换成较长的可见颜色的波长。印刷品的表面能发射出强烈的比较饱和的颜色,从而吸引人的注意力。荧光油墨的组成颗粒通常比其它的油基或橡胶基的油墨颗粒更加柔软。但这并不影响它的性能,因为它们在滚筒与滚筒、印版到橡皮布、橡皮布到承印物的转移过程中,具有独特的转移方式。 技巧:荧光油墨最适合使用金属印版。选纸时最好不用有淡色或彩色的纸张,因为带颜色的纸张会减少,甚至会使油墨的明度降到最小。偏白或偏亮的纸会加强荧光效果。具有较高亮度和较好的油墨吸收性的非涂布纸使用荧光油墨比较理想。涂布的白纸也能有较漂亮的效果。然而,由于用涂布纸进行印刷时只能使用较少的墨量,要得到最佳印刷效果则有必要进行两次印刷。不透明墨 几乎所有的印刷厂都会遇到在黑色或带颜色的物体表面进行印刷的情况。对于这些类型的承印物,需要一种不透明油墨来有效地遮盖住承印物本身带有的颜色。这样就可以避免油墨的色彩与基体颜色的混合,生成一种不期望的颜色。

通常在一块暗色的承印物上精确地复制一种明亮的颜色是不可能的。但只是在一块色泽较暗的承印物上简单的加上50%的不透明白色,就会收到某些非常意想布道的效果。建议大家:如果使用多于50%的不透明的白色,则后印上去的彩色会看去“偏淡”;如果少于50%的不透明的白色,则颜色会有些透明的感觉。 技巧:当使用定制的颜色或混合颜色时,配方中往往需要透明的白色而不是不透明的白色,这样可以使颜色强度的损失达到最小。在大多数情况并不需要用透明白墨替代所有的不透明白墨。

荧光技术

https://www.doczj.com/doc/406716680.html,/?p=21977 首页专题译述会议展览技术方法教学视频热点话题生命百态研究前沿科研综述电子杂志RSS 订阅当前位置: 生命奥秘> 技术方法> 文章正文荧光标记技术在蛋白质定位及功能研究中的应用 cyq 发表于2010-02-20 14:48 | 来源:| 阅读 随着分子生物学、有机化学以及材料科学等学科的进展,最近我们又获得了好几种新型的荧光蛋白标签,这些标签可以用于细胞生物学成像研究。本文将对荧光标志物在蛋白质研究中的优势及劣势进行一番详细的介绍,文章中将重点介绍如何使用荧光标志物研究活体细胞(而不是固定细胞)中的靶蛋白。使用该方法可以对靶蛋白的表达情况、细胞中的定位情况、活性状态等指标进行研究,还将介绍将荧光显微镜与电子显微镜技术相结合的可行性问题。小分子荧光标志物染料、纳米晶体材料,即所谓的“量子点(quantum dots)”材料、自发荧光蛋白、小分子蛋白质标签等等这些材料都可以作为荧光标志物,而且将这几种材料“混合”起来是一种非常有前途的荧光标志物研究新思路。 我们使用荧光技术来研究细胞生物学已经好多年了,而且在从微小的分子层面到完整的有机体层面等各个层面都可以使用荧光技术进行研究。最开始使用的方法是将小分子有机染料与各种抗体相连接,来研究各种目的蛋白。不过这种使用抗体的方法如果需要对细胞内的蛋白质进行研究时,还需要对细胞进行固定和透化操作。因此后来又发展出可以直接在活体细胞内标记某种细胞器、核酸分子或某些离子的荧光标志物。在最近这10年里,荧光蛋白的出现使得进行非侵入性的活体细胞成像成为了可能。使用这种荧光蛋白标志物,我们可以研究目的基因的表达情况,蛋白质运输情况以及各种细胞内动态的生物化学信号通路。使用经过遗传修饰的小分子有机荧光标志物构建的混合系统,我们还可以对蛋白质的寿命进行研究,如果再结合电镜技术和快速光淬灭技术(rapid photoinactivation)还可以对蛋白质的定位情况进行研究。与此同时,半导体纳米晶体材料技术也得到了高度的发展,现在,这种新型的材料在亮度和光稳定性方面都要比传统的荧光标志物好得多,只不过现在这种材料的靶向性还不是很好。本文中我们将对目前荧光标志物及其相关技术的发展进行介绍,同时还将介绍荧光标志物在蛋白质表达、蛋白质活性以及蛋白质功能研究工作中的作用进行介绍。 荧光标志物 小分子有机染料 小分子有机染料是指分子量小于1KD的小分子物质,这种小分子有机染料可以通过与生物大分子共价连接的方式对其进行标记,我们现在对这种染料的最佳检测波长范围、亮度,即吸光系数、光稳定性和自我淬灭特性都有了比较详尽的了解。利用荧光染料的分子策略包括扩展共轭双键、额外添加环状结构增强其刚性、用氟或磺酸盐这类吸电子性的或带电荷的物质进行修饰等。现在市面上已经有数百种这类荧光染料的商业化产品可供选择,而且还在不

紫外无色荧光油墨使用说明

紫外无色荧光油墨使用说明 广州名博防伪技术有限公司对紫外无色荧光油墨使用方法作出如下介绍: 在波长200-400nm 紫外光照射下,能发出可见光。按激发光源波长的不同,分为短波(254nm)、长波(365nm)和双波段紫外荧光油墨。 颜色品种:颜色变化有:无色-有色,有色-原有颜色发亮,有色-另一种颜色。长波:无-黄、橙、红、黄绿、翠绿、草绿、深绿、翠蓝、品蓝、黑、白; 红-橙、红-红、绿-草绿、蓝-草绿、橙-红、黄-红、黑-红、绿-红、 蓝-红、橙-橙、蓝-绿、黄-黄、蓝-蓝、绿-黄绿; 短波:无-黄、橙、红、绿; 双波:长波红-短波绿;长波蓝-短波红、短波黄、短波橙、短波绿;

长波草绿-短波黄、短波橙、短波红。 适用范围:货币,票据,证卡,烟、酒、药品、化妆品的标签、包装、说明书等具有较高防伪要求的印刷品。 注意事项: 1、适合任何印刷方式:胶印、UV胶印、凸印、UV柔版、丝印、UV丝印、水性丝印、移印、凹印、喷涂、印章墨水; 2、丝印可做纸张、塑胶、尼龙、ABS、PET、PP、金属、玻璃,水性、UV等油墨,丝印建议用300-350目网版。 1、适合任何印刷方式:胶印、UV胶印、凸印、UV柔版、丝印、UV丝印、水性丝印、移印、凹印、喷涂、印章墨水; 2、丝印可做纸张、塑胶、尼龙、ABS、PET、PP、金属、玻璃,水性、UV等油墨,丝印建议用300-350目网版。 1、使用时请用新墨辊与新印版,或者将旧的墨辊与印版彻底清洗干净,(胶印墨辊可用还原剂清洗),特别是印刷无色荧光油墨时,极微量的有色油墨有可能使无色荧光油墨带色,影响隐形效果。 2、本油墨印在不同的材料效果略有不同: A、无荧光纸:纸张略黄,在荧光灯下不显色,造纸过程中不加任何增白的化学物品,属于环保纸。欧洲、美国及我国的人民币、发票、国家机构颁发的证书都使用这种纸。★★★★ B、不含增白化学物品的塑料材料, 如卡片、包装袋。★★★ C、普通的有荧光纸,外观洁白。这种纸在造纸过程中为了增白效果在纸浆中加入某种化学物品,在长波紫外荧光灯下显示蓝色。印刷后荧光效果不是很理想,现亚洲地区普遍使用这种纸张。为了使荧光效果更好:a. 采用高浓度的荧光油墨印刷;b. 可以在纸张表面先印一层无色荧光黑油墨。两种同时采用效果更好。★★ D、在表面涂有某种化学物品的纸张,这种化学物品有可能跟荧光油墨发生化学反应,导致荧光效果慢慢消失。如:热敏纸、化学变化纸。★ E、双波段油墨要印在无荧光的纸或塑料上,印在带有荧光的材料上无双波段荧光效果。 F、无色荧光黑要印在带荧光的材料上才能看到荧光黑效果。 3、无色荧光油墨并非绝对无色或绝对没有印迹。在洁白的纸张上,即使印上完全无色透明的光油,也会由于纸和光油的折射及反射系数不同,产生视觉差异。为了达到更好的隐形效果,印刷时注意以下几点: A、印在毛糙、吸水性好、颜色偏黄纸张上; B、印在线条文字等旁边; C、在印刷品表面上光油或复膜; D、丝印调稀一点,胶印印薄一点。 4、A型为高浓度型,隐形效果好、发光亮度高、耐候性好、耐磨性好,可保持10年不褪色( 胶印A型为大豆油全环保油墨,48小时不结皮); B型各种性能比A型略差一点,可保持7-8年不褪色(胶印B型24小时不结皮)。可添加助剂: 1、胶印、凸印(一般不须添加):BO-965胶印调墨油(调整粘度), BO-964白燥油(里干),BO-963红燥油(表干);1、胶印、凸印(一般不须添加):BO-965胶印调墨油(调整粘度), BO-964白燥油(里干),BO-963红燥油(表干); 2、UV胶印:907UV调墨油

【CN110066546A】一种荧光油墨及其制备方法和应用【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910318266.3 (22)申请日 2019.04.19 (71)申请人 陕西科技大学 地址 710021 陕西省西安市未央区大学园1 号 (72)发明人 郭凌华 龙浩 姜慧娥 杨凌霄  耿博 霍娜 尚磊  (74)专利代理机构 西安通大专利代理有限责任 公司 61200 代理人 徐文权 (51)Int.Cl. C09D 11/50(2014.01) C09D 11/102(2014.01) C09D 11/03(2014.01) (54)发明名称 一种荧光油墨及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种荧光油墨,以质量分数 计,包括以下组分:稀土配合物3~5份,尼龙透明 浆95~100份,分散剂0.5~7份,稀土配合物为铕 的配合物或/和铽的配合物。本发明将尼龙透明 浆与稀土配合物混合,加入分散剂,再通过填料 的调节让油墨达到丝网油墨要求的流动性和粘 度,得到所需荧光油墨。本发明的荧光油墨具有 成本低、稳定性高及再现性强等特点,制备工艺 简单, 可以广泛应用于防伪领域。权利要求书1页 说明书5页 附图5页CN 110066546 A 2019.07.30 C N 110066546 A

权 利 要 求 书1/1页CN 110066546 A 1.一种荧光油墨,其特征在于,以质量份数计,包括以下组分: 稀土配合物3~5份,尼龙透明浆95~100份,分散剂0.5~7份。 2.根据权利要求1所述的荧光油墨,其特征在于,荧光油墨的粘性为4~12Pa·s,流动度为30~50mm。 3.根据权利要求1所述的荧光油墨,其特征在于,稀土配合物为铕的配合物或/和铽的配合物。 4.根据权利要求3所述的荧光油墨,其特征在于,铕的配合物由铕盐与吡啶二甲酸制备而成,铕盐与吡啶二甲酸的摩尔比为1:(3~4); 铽的配合物由铽盐与吡啶二甲酸制备而成,铽盐与吡啶二甲酸的摩尔比为1:(3~4)。 5.根据权利要求1所述的荧光油墨,其特征在于,分散剂选用脂肪醇聚氧乙烯醚。 6.根据权利要求1所述的荧光油墨,其特征在于,还包括填料,填料采用无水乙醇或碳酸钙。 7.权利要求1~6任意一项所述荧光油墨的制备方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)按照质量份称取稀土配合物、尼龙透明浆和分散剂; (2)向尼龙透明浆中加入稀土配合物和分散剂,搅拌得到荧光油墨。 8.根据权利要求7所述的荧光油墨的制备方法,其特征在于,对稀土配合物进行预处理,具体为:将稀土配合物研磨成粉末状,粉末粒径为60~100nm。 9.根据权利要求7所述的荧光油墨的制备方法,其特征在于,稀土配合物为铕的稀土配合物或/和铽的稀土配合物,制备铕的稀土配合物具体为: 1.1 按照摩尔比为1:(3~4)称取铕盐和吡啶二甲酸,将铕盐与无水乙醇混合,得到铕盐溶液;将吡啶二甲酸与无水乙醇混合,调节pH值为6~7,得到吡啶二甲酸溶液; 1.2 将铕盐溶液和吡啶二甲酸溶液混合后,加热并搅拌,洗涤、过滤及干燥后得到铕的稀土配合物; 制备铽的稀土配合物具体为: 1.1 按照摩尔比为1:(3~4)称取铽盐和吡啶二甲酸,将铽盐与无水乙醇混合,得到铽盐溶液;将吡啶二甲酸与无水乙醇混合,调节pH值为6~7,得到吡啶二甲酸溶液; 1.2 将铽盐溶液和吡啶二甲酸溶液混合后,加热并搅拌,洗涤、过滤及干燥后得到铽的稀土配合物。 10.权利要求1~6任意一项所述荧光油墨作为防伪油墨在制备防伪印刷品中的应用,其特征在于,将所述荧光油墨打印在纸上,在紫外灯照射下,打印图案可见。 2

关于荧光油墨的综术

关于荧光油墨的综述 中山职业技术学院08精化班何权茂5105080114 关键字:油墨,荧光颜料,荧光油墨,印刷技巧 摘要 本综述结合多份文献概述了有关荧光油墨用途,发光理理,制备工艺,制备原料以及使用技巧。 概述 油墨是用于包装材料印刷的重要材料,它通过印刷将图案、文字表现在承印物上。油墨中包括主要成分和辅助成分,它们均匀地混合并经反复轧制而成一种粘性胶状流体。由颜料、连结料和助剂等组成。油墨种类繁多,荧光油墨则是其中一种。荧光油墨是票券印刷中应用比较多的油墨之一,其主要成分是荧光颜料。荧光颜料与高分子树脂连接料、溶剂和助剂配比,经研磨可制得荧光油墨。 现今社会印刷行业对荧光油墨的应用越来越多,用于制备荧光油墨的原料也不断地被发现,荧光油墨的种类,印刷技巧也应印刷要求的不同而不断被开发发现。不但由于荧光油墨的特殊性或使得荧光油墨的性能还不能充分满足到用户的需求。其非常特出的一点的就是绝大部分荧光油墨耐光性,耐热性较差。 进行荧光油墨综述,我们先了解荧光油墨产生荧光、蓄光的原理与荧光颜料的分类 荧光油墨之所以能够发光,主要是因为其主要成分是荧光颜料,

荧光颜料属功能性发光颜料,与一般颜料的区别在于当外来光(含紫外光)照射时,能吸收一定形态的能,而激发光子,以低可见光形式将吸收的能量释放出来,从而产生不同色相的荧光现象。不同色光结合形成异常鲜艳的色彩,当光停止照射后,发光现象即消失,因此称为荧光颜料。而人们把吸收不同颜色的光,然后散发出不同波长的光的现象称为荧光;把吸收光以后在黑暗环境中发光的现象称为磷光。二者的不同是磷光吸收自然光或人工光,在光移走之后的黑暗环境中发光;而荧光在吸收光之后必须在光存在的情况下才可以发光。荧光油墨在夜光或者紫光存在的情况下也可以发光,但是在黑暗无光的情况下不发光。荧光油墨不但能够表现出它本身的颜色,而且具有吸收光和改变光强度的能力,使得它表现出的颜色具有更强的光强度,但色相(或颜色)不变 荧光颜料根据分子结构通常可分为无机荧光颜料和有机荧光颜料 有机荧光颜料 有机荧光颜料又称目光型荧光颜料。这种荧光颜料是由荧光染料(荧光体)充分分散于无色透明不可溶的树脂中而制得,颜色由荧光染料分子决定。当日光照射时,发射一种除普通颜色以外的高亮度可见光,这是由于其反射光数量增加,吸收日光中肉眼不能看见的紫外光线,把紫外短波变成肉眼可见的长波。紫外光含量愈多,它放出的荧光愈强,并通过适当的配比或配以适量非荧光颜料,即可获得不同色调的荧光颜料。若无紫外光辐射,该颜料就为不呈荧光的普通色光

蛋白标记技术详解

蛋白标记技术详解 蛋白质标记的主要目的是监测生物过程、辅助检测(例如化合物的可靠定量、蛋白质修饰的特异性检测)或者纯化蛋白及其结合对象。蛋白质的标记能够提高检测灵敏度以及简化检测工作流程。 目前有多种蛋白质标记技术来帮助我们研究感兴趣的蛋白质的丰度、位置、相互作用、翻译后修饰、功能,乃至监测活细胞中的蛋白质运输等问题。目前有多种类型的标记物和标记方式可供选择,但是针对特定的应用应当选择适合的标记策略。 1.代谢标记策略 代谢标记策略是一种体内标记方法,在这种方法中,细胞被“喂养”了化学标记的营养物,然后这些标记物被掺入新合成的蛋白质、核酸或代谢物中。然后,我们可以收集细胞并分离这些分子以获得细胞生物过程的全局视图。 蛋白同位素标记 原理 蛋白同位素标记是一种经典的蛋白示踪和蛋白组学定量技术,用天然同位素(轻型)或稳定同位素(重型)标记的必需氨基酸取代细胞培养基中相应氨基酸,这样细胞新合成的蛋白质可以在细胞生长期间通过掺入含有不同同位素的氨基酸进行标记。 应用举例 蛋白质组学研究方向流行的代谢标记方法是SILAC(Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture),即细胞培养中氨基酸的稳定同位素标记。结合质谱技术,SILAC 通过使用重型氨基酸(例如,15N-或13C-赖氨酸)标记其中一组培养物或细胞系,而向另一组添加正常的轻型氨基酸,从而量化两种培养物或细胞系之间蛋白质丰度的差异。然后将在这两种条件下生长的细胞的裂解蛋白按细胞数或蛋白量等比例混合,经分离、纯化后进行质谱鉴定,根据一级质谱图中两个同位素型肽段的

夜光粉用于印刷油墨的配制及使用方法

夜光粉用于印刷油墨的配制及使用方法 金点塑胶颜料有限公司—夜光印刷采用的油墨是内含夜光粉的蓄光油墨。蓄光油墨是由发光颜料、有机树脂、有机溶剂和助剂按一定比例,通过特殊加工工艺制成的。 蓄光颜料是一种长余辉发光夜光粉,简称长余辉夜光粉,又称自发光夜光粉、发光材料。这类夜光粉在合成过程中所形成晶体的晶格里产生结构缺陷和杂质缺陷才具有发光性能,由夜光粉晶格缺陷所引起的发光叫做自激发光,而由杂质缺陷引起的发光叫做激活发光,实际应用的各类发光夜光粉大多为后者。 夜光粉的发光是依据光致发光原理进行的,其激发光源一般是日光和人工光源,它吸收了激发光能并储存起来,光激发停止后,再把储存的能量以光的形式慢慢释放出来。吸收光→发光→储存→再发光,该过程可无限重复多次,和手机电池的充电→放电→再充电→再放电的反复使用过程是相似的。 这种自发光夜光粉在没有外界光源的黑暗环境中会发光,其发光时间被称为余辉时间。性能较好的长余辉夜光粉如发光颜色多样的硅酸盐体系长余辉夜光粉等,稀土激活的碱土铝酸盐的余辉特性最为优越,可实现20小时以上的余辉发光。 2.长余辉夜光粉的应用 长余辉夜光粉所涉及的应用领域相当广泛,其制品种类很多,将长余辉夜光粉制成发光涂料、发光油墨、发光塑料、发光纤维、发光纸、发光玻璃、发光陶瓷、发光大理石等,可应用于安全应急、交通运输、建筑装潢等。在现代印刷领域中,适用于公文、有价证券、证件和高级烟、酒、药品、化妆品等高档商品的包装印刷。 3.蓄光油墨的配制 配制蓄光油墨时应注意以下几点: (1)蓄光颜料的粒径 蓄光颜料的粒径应控制在45一65um,这样才能制出实用的蓄光油墨。 (2)树脂的选用 由于蓄光夜光粉为碱性物质,树脂的颜色对其发光亮度有影响,所以在选用树脂时应注意以下两点 。 ①应选用无色或浅色、透明度好的树脂、清漆。 ②应选用中性或弱酸性的树脂,清漆。

分析荧光油墨的发光原理(精)

分析荧光油墨的发光原理 荧光油墨是发光材料,是能够发射光的物质。该物质在阳光的照射下吸收太阳光辐射的能量储存起来,然后以热的形式表现出来,或者发生光化学反应,或者能量以可见光的形式散发出来。吸收的辐射能比散发的能量波长短。人们把吸收不同颜色的光,然后散发出来的现象称为荧光。把吸收光以后在黑暗环境中发光的现象称为磷光。二者的不同是磷光吸收自然光或人工光,在光移走之后的黑暗环境中发光,而荧光在吸收光之后必须在光存在下才可以发光。荧光油墨在“夜光”或者紫光存在的情况下也可以发光。但是在黑暗无光的情况下不发光。荧光油墨不但能够表现出它本身的颜色,而且具有吸收光和改变光强度的能力,使得它表现出的颜色具有更强的光强度,但色相(或颜色)不变。 普通油墨或染料通过反射光来显示颜色,而且每种油墨颜色的波长和输出能量也不同。例如红光反射红色,吸收其他颜色。而荧光红色不但具有部分反射的红色,而且把其他颜色(绿色、蓝色和紫色)转换成红色波长作为红色散发出来,因此该色好像是从物体内部辐射出来一样。正是这种发光的属性使该油墨被称为荧光油墨。印刷者使用荧光油墨进行印刷可以获得4倍于普通油墨的亮度和可见性。荧光油墨在昏暗的光线下,比如黄昏和黎明时分,显得非常明亮。

普通油墨颜色和荧光油墨颜色的反射特征是不同的,其测量单位是埃。荧光油墨把短波长光转换成长波长光而叠加产生荧光,通过转换和叠加,形成一种具有特殊的亮度和可见性的荧光颜色。 通常情况下,日光型荧光颜色标明直接在日光下寿命为30天。但现在该颜色在室内的寿命已经大大提高了。该色在室内可延长到无限期。它可用于表现鲜艳和跳跃的颜色。目前,荧光油墨具有底色精细、干燥快、和易用于较薄墨层等优点,在使用时要注意使用说明。 荧光油墨的颜料是以荧光颜料为基础,在实验控制下与塑料树酯进行精心的化学复合、搅拌和混合而成。日光型荧光颜色是染料悬浮于无色、透明、不可溶的树酯中所形成的颜色。树酯是以粉状物质为基础,加入到特定的连接料中精心混合和搅拌而成。如图23和24所示。与树酯相比,染料的量只占很小的比例。但是要获得最大的油墨亮度,在荧光颜色中加入一定量的染料或树酯是必须的。 荧光油墨的使用 荧光油墨一般有两种:油基型和快干型。该油墨使用工业上标准的丝网版进行印刷,但是该丝网版必须具有抗溶剂性。例如漆涂刀刻丝网版就不能用快干型荧光油墨。这一点在用户使用说明书上应当有明确的说明。市场上有多种不同颜色亮度的荧光油墨,在使用前必须

荧光标记技术在蛋白质定位及功能研究中的应用

荧光标记技术在蛋白质定位及功能研究 中的应用 随着分子生物学、有机化学以及材料科学等学科的进展,最近我们又获得了好几种新型的荧光蛋白标签,这些标签可以用于细胞生物学成像研究。本文将对荧光标志物在蛋白质研究中的优势及劣势进行一番详细的介绍,文章中将重点介绍如何使用荧光标志物研究活体细胞(而不是固定细胞)中的靶蛋白。使用该方法可以对靶蛋白的表达情况、细胞中的定位情况、活性状态等指标进行研究,还将介绍将荧光显微镜与电子显微镜技术相结合的可行性问题。小分子荧光标志物染料、纳米晶体材料,即所谓的“量子点(quantum dots)”材料、自发荧光蛋白、小分子蛋白质标签等等这些材料都可以作为荧光标志物,而且将这几种材料“混合”起来是一种非常有前途的荧光标志物研究新思路。 我们使用荧光技术来研究细胞生物学已经好多年了,而且在从微小的分子层面到完整的有机体层面等各个层面都可以使用荧光技术进行研究。最开始使用的方法是将小分子有机染料与各种抗体相连接,来研究各种目的蛋白。不过这种使用抗体的方法如果需要对细胞内的蛋白质进行研究时,还需要对细胞进行固定和透化操作。因此后来又发展出可以直接在活体细胞内标记某种细胞器、核酸分子或某些离子的荧光标志物。在最近这10年里,荧光蛋白的出现使得进行非侵入性的活体细胞成像成为了可能。使用这种荧光蛋白标志物,我们可以研究目的基因的表达情况,蛋白质运输情况以及各种细胞内动态的生物化学信号通路。使用经过遗传修饰的小分子有机荧光标志物构建的混合系统,我们还可以对蛋白质的寿命进行研究,如果再结合电镜技术和快速光淬灭技术(rapid photoinactivation)还可以对蛋白质的定位情况进行研究。与此同时,半导体纳米晶体材料技术也得到了高度的发展,现在,这种新型的材料在亮度和光稳定性方面都要比传统的荧光标志物好得多,只不过现在这种材料的靶向性还不是很好。本文中我们将对目前荧光标志物及其相关技术的发展进行介绍,同时还将介绍荧光标志物在蛋白质表达、蛋白质活性以及蛋白质功能研究工作中的作用进行介绍。 荧光标志物 小分子有机染料 小分子有机染料是指分子量小于1KD的小分子物质,这种小分子有机染料可以通过与生物

荧光丝印油墨简介

荧光丝印油墨简介 荧光油墨是发光材料,是能够发射光的物质。该物质在阳光的照射下吸收太阳光辐射的能量储存起来,然后以热的形式表现出来,或者发生光化学反应,或者能量以可见光的形式散发出来。吸收的辐射能比散发的能量波长短。人们把吸收不同颜色的光,然后散发出来的现象称为荧光。把吸收光以后在黑暗环境中发光的现象称为磷光。二者的不同是磷光吸收自然光或人工光,在光移走之后的黑暗环境中发光,而荧光在吸收光之后必须在光存在下才可以发光。荧光油墨在“夜光”或者紫光存在的情况下也可以发光。但是在黑暗无光的情况下不发光。荧光油墨不但能够表现出它本身的颜色,而且具有吸收光和改变光强度的能力,使得它表现出的颜色具有更强的光强度,但色相(或颜色)不变。 普通油墨或染料通过反射光来显示颜色,而且每种油墨颜色的波长和输出能量也不同。例如红光反射红色,吸收其他颜色。而荧光红色不但具有部分反射的红色,而且把其他颜色(绿色、蓝色和紫色)转换成红色波长作为红色散发出来,因此该色好像是从物体内部辐射出来一样。正是这种发光的属性使该油墨被称为荧光油墨。印刷者使用荧光油墨进行印刷可以获得4倍于普通油墨的亮度和可见性。荧光油墨在昏暗的光线下,比如黄昏和黎明时分,显得非常明亮。

普通油墨颜色和荧光油墨颜色的反射特征是不同的,其测量单位是埃。荧光油墨把短波长光转换成长波长光而叠加产生荧光,通过转换和叠加,形成一种具有特殊的亮度和可见性的荧光颜色。 通常情况下,日光型荧光颜色标明直接在日光下寿命为30天。但现在该颜色在室内的寿命已经大大提高了。该色在室内可延长到无限期。它可用于表现鲜艳和跳跃的颜色。目前,荧光油墨具有底色精细、干燥快、和易用于较薄墨层等优点,在使用时要注意使用说明。 荧光油墨的颜料是以荧光颜料为基础,在实验控制下与塑料树酯进行精心的化学复合、搅拌和混合而成。日光型荧光颜色是染料悬浮于无色、透明、不可溶的树酯中所形成的颜色。树酯是以粉状物质为基础,加入到特定的连接料中精心混合和搅拌而成。如图23和24所示。与树酯相比,染料的量只占很小的比例。但是要获得最大的油墨亮度,在荧光颜色中加入一定量的染料或树酯是必须的。 荧光油墨的使用 荧光油墨一般有两种:油基型和快干型。该油墨使用工业上标准的丝网版进行印刷,但是该丝网版必须具有抗溶剂性。例如漆涂刀刻丝网版就不能用快干型荧光油墨。这一点在用户使用说明书上应当有明确的说明。市场上有多种不同颜色亮度的荧光油墨,在使用前必须

绿色荧光蛋白(GFP)标记亚细胞定位

绿色荧光蛋白(GFP)标记亚细胞定位 一、原理 利用绿色荧光蛋白(GFP)来示踪胞内蛋白的技术。利用GFP融合蛋白技术来进行活细胞定位研究是目前较为通行的一种方法,在光镜水平进行研究,不需要制样,没有非特异性标记的影响。并且GFP的分子量为27kD,经激光扫描共聚集显微镜激光照射后,可产生一种绿色荧光,从而对蛋白质进行精确定位。 激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope, LSCM, 以下简称共聚焦显微镜)因其独特的设计原理,有效地排除了非焦平面信息,提高了分辨率及对比度,使图像更为精确清晰,因此极其适于进行活细胞内蛋白质、核酸等定位及活体动态研究。二、主要步骤 1.真核表达载体的构建 ①引物设计 利用引物设计软件,根据pEGFP-N1的酶切位点设计目的基因引物: ②载体构建 将PCR产物酶切后插入pEGFP-N1,得到表达目的基因与EGFP融合蛋白质的真核表达载体。 2.转染真核细胞 当细胞生长到对数生长期时,接种到共聚焦显微镜专用的玻璃底培养皿(35mm petri di sh,10 mm Microwell)中,培养过夜。当细胞贴壁率达到30%~50%时,将表达载体质粒2ug和脂质体(Lipofectamine2000) 2ml分别溶于100 ml无抗生素、无血清的DM EM培养基中,充分混匀后,室温放置15 min,再将两种溶液充分混匀,室温放置30 m in。同时用无血清、无抗生素的DMEM洗涤待转染的培养细胞2~3次,向DNA-脂质体混合物中加入800 ml无抗生素、无血清的DMEM培养基,混合后加入到培养细胞中。培养

相关主题
文本预览
相关文档 最新文档