禽流感检测方法研究进展 郑胜男本硕21 摘要:禽流感是一种可以感染多种禽类和人的烈性传染病,其病毒亚型众多,宿主范围广，容易发生变异和重组，由于各亚型之间无交叉反应性,使得禽流感病毒的检测工作较为困难。目前，该病毒的检测方法主要有病毒分离鉴定、血清学方法和分子生物学方法，同时,人们也正致力于用一些新兴检测方法来检测禽流感病毒。现就禽流感病毒的检测方法做一综述。关键词:禽流感病毒;检测方法;AIV；血清;诊断；分子生物； 禽流感是由正黏病毒科、A型流感病毒属中的不同亚型引起的禽类的一种急性高度接触性传染病。目前已知禽流感病毒的血凝素包括16种亚型，[1]神经氨酸酶包括9种亚型。其中H5和H7亚型常为高致病性的禽流感病毒。 1.病原学检测方法 1 .1病毒分离与鉴定 病毒的分离鉴定是禽流感的经典诊断方法，最常用的为细胞接种和鸡胚接种法，以细胞发生病变，鸡胚死亡或培养物尿囊液具有凝集红细胞特性作为判定依据作初步鉴定，也可用针对NP的单抗,用免疫荧光染色作病毒的初步鉴定。[2]确诊还需其它辅助检测手段。其检测结果准确可靠，灵敏，极少量病毒也可检出。但其操作程序繁
杂，费用高，实验室要求高，耗时费力，周期长，检测时间需1～3 周，大面积应用推广受到较大限制。 1 .2电镜检测技术 用电镜技术或免疫电镜技术诊断禽流感病毒，可以在电子显微镜下清楚观察到粒子形态，确定病毒的有无。[3]、[4]电镜技术快速、准确，但检验结果与样品制备技术、取病材料的部位和时间有关，且本方法不能用于亚型及致病性的测定。 2.免疫学检测 2 .1血凝(HA )和血凝抑制(HI)试验 HA 和HI 简单、快速、特异性好，但是操作繁琐费时，不能用已知HA亚型的抗血清检出禽流感新的HA亚型。HI试验是WHO进行全球流感监测所采用的普及方法。[5]一般先将可疑病料接种适龄鸡胚或细胞进行病毒分离，然后用HA试验检测出培养物是否具血凝素活性，再用已知阳性血清进行HI试验来验证。[6] 2 .2琼脂扩散试验(AGP) AGP试验是用来检测A型流感病毒群特异性血清抗体，适用于鉴定所有A型流感病毒。AGP试验操作简单，既可以定性又可以定量。但敏感性差，易有有假阳性。现已在AIV快速定型双扩散法[7]基础上建立了AGP诊断试剂盒。AGP试验可以用敏感性、准确性良好的尿素- 聚丙烯酰胺凝胶电泳法作为补充或辅助诊断手段。 [8] 2 . 3乳胶凝集试验(LAT)
禽流感病毒的传播途径 至今由禽鸟传人的禽流感有三种：甲型H5N1、甲型H7N7及甲型H9N2。禽流感主要通过横向传播，即通过易感禽类与感染禽类的直接接触或与病毒污染物的间接接触而传播，如被污染的饮水、飞沫、饲料及其他被污染的蛋筐、蛋盘、运输工具等。被病毒污染的羽毛和粪便是重要的传染物，因为病毒含量高而且存活时间长，应特别注意。该病能否垂直传播，目前尚无足够的证据，但从自然感染禽流感病毒的鸡蛋蛋黄、蛋清及蛋壳中均能分离到病毒，所以感染鸡群的蛋不能用作孵化，不经消毒处理的不能运至非疫区。人感染禽流感的主要传播 主要经呼吸道传播，通过密切接触感染的禽类及其分泌物、排泄物，受病毒污染的水等，以及直接接触病毒毒株被感染。在感染水禽的粪便中含有高浓度的病毒，并通过污染的水源泉由粪便-口途径传播流感病毒。目前还没有发现人感染的隐性带毒者，尚无人与人之间传播的确切证据。 人类对禽流感的研究和防治工作已有100多年的历史。目前研究结果表明，禽流感病毒中缺乏人流感病毒的基因片段，除非禽流感病毒与人流感病毒发生基因重组，否则它很难侵犯人类，导致人与人间传播。人禽流感的发生，目前只可能是因接触的病禽而感染。人感染病毒的几率很小。
一般认为任何年龄均具有易感性，但12岁以下儿童发病率较高，病情较重。与不明原因病死家禽或感染、疑似感染禽流感家禽密切接触人员为高危人群。 单纯型流感 仅有上呼吸道卡他性炎症变化，黏膜可见充血、水肿及淋巴细胞浸润。纤维上皮细胞变性、坏死、脱落。 肺炎型流感 肺脏是暗红样水肿。气管、支气管内有血性分泌物、黏膜充血，其纤毛上皮细胞坏死脱落，黏膜下层灶性出血、水肿和白细胞浸润，肺泡中有纤维蛋白渗出液，含中性粒细胞及淋巴细胞。肺中叶肺泡有出血，肺泡内可有透明膜，肺组织易分离出流感病毒。 严重并发症型流感 主要病理改变为肺实变。由于肺间质水肿、间质负压减小，增加小气道陷闭倾向，导致肺不张；肺泡膜表面活性物质减少，肺泡亦陷隐闭；加之肺充血，使肺容量减小和肺顺应性下降，导致急性呼吸急迫综合征等严重并发症。
《人感染H7N9禽流感诊疗方案（2017版）》等6种重点知识考试参考答案 1.患者体温基本正常、临床症状好转时，病原学检测间隔（c ），连续两次阴性，可根据相应规定解除隔离措施。 A.1-2 天 B.3-4天 C.2-4天 D.4-5天 2.以下关于人感染H7N9禽流感的实验室检查正确的是：d A.血生化中有肌酸激酶升高 B.对患者呼吸道标本采用PCR检测到H7N9禽流感病毒核酸 C.从患者呼吸道标本中检测出H7N9禽流感病毒 D.以上均对 3.重症病例病毒核酸阳性可持续（A ）周以上 A.3 B.6 C.9 D.12 4.下列哪项不是寨卡的临床特征D A.发热 B.皮疹 C.关节痛 D.角膜炎 5.人感染H7N9禽流感易发展为重症的危险因素不包括（A ） A.年龄≥45岁 B.合并严重基础病或特殊临床情况 C.发病后持续高热（T≥39度） D.淋巴细胞计数持续降低 6.以下不属于人感染H7N9禽流感重症病例次要标准的是（D ） A.呼吸频率≥30次/分 B.氧合指数≥250mmHg C.多肺叶浸润 D.血尿素氮≥7.14mmol/L 7.以下不能对寨卡病毒灭活的是（ C） A.70%乙醇 B.1%次氯酸钠 C.红外线照射 D.过氧乙酸 8.以下关于埃博拉出血热错误的是（C ） A.病毒分离应采集发病一周内患者血清标本，用Vero细胞进行病毒分离
B.发病前21天内，在没有恰当个人防护的情况下，接触过埃博拉患者的血液、体液、分泌物、排泄物或尸体等符合其流行病学史 C.疑似病例应及时采集标本，并送至所在医院检验科进行病原学检测 D.尚无特异性治疗措施，主要是对症和支持治疗 9.埃博拉出血热患者诊疗过程中，医务人员应当戴（D ） A.一次性口罩 B.纱布口罩 C.特效抗病毒口罩 D.医用防护口罩 10.埃博拉病毒60℃灭活病毒需要（D ） A.5分钟 B.15分钟 C.30分钟 D.1小时 11.医疗机构应当重视并落实消毒、隔离和防护工作，为医务人员提供充足的防护用品，确保诊疗区域的工作环境达到（D ）的需求 A.消灭一切可能性传染源 B.切断传播途径 C.保护医务人员安全救治患者 D.切断传播途径、保护医务人员安全救治患者 12.根据WHO通报的MERS疫情，结合文献报道，对（A ）进行修订。 A.《中东呼吸综合征医院感染预防与控制技术指南（2014版）》 B.《医疗机构消毒技术规范》 C.《医院隔离技术规范》 D.《医院空气净化管理规范》 13.人感染H7N9禽流感患者在使用抗病毒药物之前应：A A.留取呼吸道标本 B.做药物过敏实验 C.查验血型 D.量体温 14.截至2016年1月，至少在非洲、亚洲、美洲的45个国家有（A ）传播的证据 A.寨卡病毒 B.鼠疫 C.霍乱 D.疟疾 15.人感染H7N9禽流感的主要临床表现为（A ） A.肺炎 B.腹泻 C.出血 D.呕吐
也谈新城疫和禽流感的区别 一、病原不同，在此不必赘说。 二、症状： 1、禽流感（AI）肿头肿眼，新城疫（ID）无； 2、AI脚鳞有出血，ID无； 3、AI排粪黄白色、黄绿色，ID绿色、恶臭； 4、AI呼吸有呼噜声音突出，ID有被噎的咯咯声。 三、病变： 1、AI肿头部及颈部皮下有胶冻样渗出，ID无； 2、AI整个气管弥漫性出血，粘液多，ID仅喉头出血现象多； 3、AI胸腺出血严重，ID出血较轻； 4、ID嗉囊炎症较重、有粘液，AI较少； 5、AI肝脏表面有出血斑或点，ID一般无； 6、AI心脏冠状脂肪出血点发生较多，ID较少； 7、AI肾脏肿大有出血，ID无； 8、AI胃表面脂肪有出血点，ID一般无；AI腺胃基部及乳头间出血多，ID则腺胃乳头出血多； 9、AI胰腺出血有坏死，ID无； 10、AI小肠弥漫性出血多，一般小肠无淋巴滤泡出血，而ID则小肠淋巴滤泡肿大出血多，有较大的出血点或斑，肠管有粗细不一变化，切开粗部肠管有黄色胶冻样分泌液； 11、AI法氏囊肿大有出血，ID无； 12、AI胸腹部皮下及腿肌有出血斑或点，腿根部及腹部脂肪有出血点，ID无； 13、AI肺脏有淤血水肿，ID一般无。 四、流行病学： AI发病较快，温和型恢复后短时间内可复发，ID恢复后可产生较长时间的免疫力；AI 可引起鸭鹅发病，ID不能。 在这一系列的区别中，禽流感最有与新城疫鉴别诊断意义的是：AI肿头肿眼、腿鳞片出血、胰腺出血坏死、肾肿、法氏囊肿大出血、内脏出血变化严重 2.临诊症状 鸡群吃料后第2天就出现异常，但养殖户没有注意。第3天鸡群出现明显症状和死亡。鸡群精神沉郁，食欲减少或废绝，羽毛粗乱，鸡冠、喙、爪及面部发绀，不爱走动，喜扎堆。呼吸加快，严重的可见张口呼吸，流涎，消瘦，大部分鸡粪便正常，少数鸡有白色软便或黄绿色稀便，死前有抽搐表现等。严重的则突然发病，倒地侧卧，全身抽搐、两腿伸直或扑打几下翅膀后迅速死亡。体况良好、采食量高的鸡死亡和发病相对比较严重。 3.病理变化 濒死的鸡剖检，可见到肝脏略肿大，色淡黄，质脆，脾脏无肿大、有少量出血点。死亡
文献综述 禽流感病毒致病机制的研究进展 摘要：禽流感对畜禽养殖业造成巨大经济损失，并对人类健康造成威胁，已成为各国公共卫生关注的人畜共患病。本文从禽流感病毒（Avian Influenza Virus.AIV）的分子学特性，跨越种属的传播机制以及各基因组份与致病性的作用等方面进行简述。 关键词：禽流感病毒；传播机制；致病机制 １前言 禽流感（Avian Influenza.AI）是由正粘病毒科A型流感病毒（Avian Influenza Virus. AIV）引起的禽类急性传染病，被世界动物卫生组织和我国《家畜家禽防疫条例》列为A类烈性传染病。禽流感病毒根据其核蛋白（NP）和基质蛋白（M1）抗原性及其基因特性的不同可划分为A、B、C型。其中A型流感病毒感染范围最广、危害最大，常以流行性的形式出现，并能引起世界性人流感的大流行。A型流感病毒也可以从各种动物体中分离到，例如人、猪、马、海洋哺乳动物、猫、狗和鸟类等[1]。根据对鸡致病性的不同，AIV可以分为高致病性禽流感（Highly Pathogenic Avian Influenza.HPAI）和低致病性禽流感（Low Pathogenic Avian Influenza.LPAI）。高致病性AIV由于其传染性极强，可引起家禽全身性感染，造成多个组织器官严重病理损伤，致死率达100%，其感染禽类达88种，主要是鸡、鸭、鹅，除此之外，还可感染猪、猫、狗、老虎等哺乳动物和人类，是一种人畜共患病，对各国的公共卫生构成严重的危害[2]。近年来不断增加的H5N1亚型禽流感病毒（AIV）直接感染人、致人死亡的事件不断增加。本文对禽流感病毒致病机制的研究进展综述如下，以期提高人们对公共卫生学意义上禽流感防控紧迫性的认识。 ２AIV生物学特征 流感病毒属正黏病毒科，是一种呈球形或杆状、有包膜的单股负链RNA病毒，其基因组分为8个节段，编码血凝素（hemagglutinin, HA)），神经酰胺酶（neuraminidase, NA），基质蛋白（matrix protein,M）M1和离子通道M2，非结构（nonstructrual,NS）蛋白NS1和NS2，核蛋白（nucleo protein,NP）以及三个聚合酶PB1、PB2（polymerase basic1, 2）和PA（polymerase acidic）以及新发现的与有道细胞凋亡有关的PB1-F2蛋白[3]等10种蛋白。根据核蛋白和基质蛋白的抗原性不同，流感病毒被分为甲型、乙型和丙型，AIV 属于甲型流感病毒。甲型和乙型流感病毒的主要抗原表位位于跨膜糖蛋白HA和NA，根据这些糖蛋白抗原性的差异，甲型流感病毒可分为16个H亚型（H1- H16）和9个N
魏官庄小学 如何预防H7N9禽流感病毒知识讲座禽流感病毒普遍对热敏感，对低温抵抗力较强，65℃加热30分钟或煮沸(100℃)2分钟以上可灭活。病毒在较低温度粪便中可存活1周，在4℃水中可存活1个月，对酸性环境有一定抵抗力，在pH4.0的条件下也具有一定的存活能力。在有甘油存在的情况下可保持活力1年以上。 一、流行病学 (一)传染源。目前尚不明确，根据以往经验及本次病例流行病学调查，推测可能为携带H7N9禽流感病毒的禽类及其分泌物或排泄物。 (二)传播途径。经呼吸道传播，也可通过密切接触感染的禽类分泌物或排泄物等被感染，直接接触病毒也可被感染。现尚无人与人之间传播的确切证据。 (三)易感人群。目前尚无确切证据显示人类对H7N9禽流感病毒易感。现有确诊病例均为成人。 (四)高危人群。现阶段主要是从事禽类养殖、销售、宰杀、加工业者，以及在发病前1周内接触过禽类者。 二、临床表现 根据流感的潜伏期及现有H7N9禽流感病毒感染病例的调查结果，潜伏期一般为7天以内。 三、H7N9的症状和预防
1. 病情表现为典型的病毒性肺炎，起病急，病程早期有高热(38度以上可给予物理降温，如冰敷，乙醇擦浴，降温毯等。儿童禁用水杨酸类解热镇痛药)，咳嗽等呼吸道感染症状。起病5-7天出现呼吸困难。 2. 对鸡肉等彻底煮熟，不要吃半生不熟鸡蛋。 3.尽量不接触活禽鸟和猪等。 4. 病毒在100℃中一分钟可被消灭。 5. 加强身体锻炼，增强自身的身体的免疫力 6. 要勤开窗，不要因为害怕pm2.5而把窗户紧闭，导致空气不流通。 7. 避免去人多的地方，现在病毒虽还没有变异到人传人，但年老体弱和幼儿抵抗力差，还是要注意的好。 8. 在家的时候，采用熏醋的方法在家庭中用于预防不耐酸的流感病毒、副流感病毒、呼吸道病毒等所引起的感冒有一定效果。 9. 春夏转换季节，一定要注意保暖，千万不要觉得，天气变暖了，就可以少穿衣服，不要着凉了。 10. 早睡早起，生活要规律，不要再暴饮暴食，多吃蔬果，不抽烟，少喝酒，养成一个好的生活习惯。
临床如何鉴别新城疫与禽流感的差别 高致病性禽流感与新城疫同属禽类烈性传染病，都具有传播快、发病急、死亡率高的特征，在国家动物防疫法上同被列为一类动物疫病。在当前各地围追堵截禽流感的重大战役中，我们在临床诊断时要特别注意禽流感与新城疫的鉴别，不要被两者相似症状所迷惑；又因为目前对这两种病采取的控制扑杀的规定不一样，所以一旦造成误诊误判，后果将不堪想象。 高致病性禽流感与新城疫同属禽类烈性传染病，都具有传播快、发病急、死亡率高的特征，在国家动物防疫法上同被列为一类动物疫病。在当前各地围追堵截禽流感的重大战役中，我们在临床诊断时要特别注意禽流感与新城疫的鉴别，不要被两者相似症状所迷惑；又因为目前对这两种病采取的控制扑杀的规定不一样，所以一且造成误诊误判，后果将不堪想象，因此必须具备鉴别新城疫排除禽流感的能力。两者在临床上可通过如下几个方面进行鉴别诊断。 从流行病学调查上去鉴别 1、高致病性禽流感发病急、病程短、死亡快，临床上最为多见的是多呈短期内大批死亡，有的死前甚至不表现临床症状。 目前高致死性（最急性）的新城疫已不多见，而急性、亚急性的新城疫，多呈渐进死亡，且死亡率远比高致病性禽流感低得多，（目前一般在出现死亡的
最初5天内不超过20%）病程也拖的较长，大群鸡病程多在4～5天以上。 2、高致病性禽流感流行的疫点及疫点附近，不仅鸡发病，其他家禽（如鸭、鹅）也会发病，而新城疫一般只引起鸡发病。 3、必须调查鸡场主（或农户）其鸡群免疫接种情况，期间新城疫疫苗、法氏囊病疫苗及禽流感疫苗是否按程序接种，在此之前鸡群是否患过其它疫病。如果前不久曾患过法氏囊病，则鸡群很可能因其免疫机能遭到破坏而影响新城疫苗的免疫效果，法氏囊病继发或并发新城疫在临床上是十分常见的。 4、现场查看鸡舍的通风情况，兽医人员只要走进鸡舍即能感觉到舍内氨气的程度（冬春季节鸡舍光顾了保温而忽视了通风），又能亲眼看到鸡群的精神状态和发病状况。因为舍内空气过于混浊极易引发呼吸道病，而患呼吸道病（如慢呼、传支或传染性气囊炎等）的鸡群也是很容易并发新城疫的。 从临床症状上进行鉴别 大多数临床兽医对于禽流感病鸡的临床症状上是认识不多的，尤其是高致病性禽流感往往看不到明显的临床症状，鸡群就发生大批死亡，但有经验的临床兽医对新城疫的临床症状应该体会较深的。应从如下几方面去观察分析： 1、高致病性禽流感病鸡的典型症状是鸡冠、肉垂发紫、肿胀，肿头肿脸和腿鳞出血，而新城病鸡则很少肿头肿脸和腿鳞出血。 2、新城疫病鸡常离群呆立、闭目缩颈、呈瞌睡状，常发出呼噜声和甩头症状力图把口腔中的分泌物甩掉；将病鸡倒提会有酸水或粘液从口鼻流出来，同时在鸡群中必定有一部分鸡出现拉绿色稀粪的现象。而禽流感病鸡除了精神萎
《解谜禽流感》初中说明文阅读题及答案 《解谜禽流感》初中说明文阅读题及答案 《解谜禽流感》初中说明文阅读题及答案 ①2016年在墨西哥暴发的H7N3型禽流感，是北美有记载以来在禽类中暴发的最大疫情，共有2000万只鸟禽被扑杀。此次暴发还导致两人感染，但他们并未发生发热和肺部症状，仅出现了结膜炎症。 ②自2002年起，科学家陆续发现人感染H7型禽流感病毒的病例。在过去10年里，人感染H7型禽流感病毒共有100多例确诊或疑似感染病例。感染人数最多的一次发生在荷兰，共有80多人感染H7N7型禽流感病毒，1人死亡，同时还导致3000多万只鸟禽死亡。 ③禽流感病毒究竟是什么？ ④禽流感病毒属正粘病毒科甲型流感病毒属。禽甲型流感病毒颗粒呈多形性，其中球形直径80～120nm，有囊膜。基因组为分节段单股负链RNA。依据其外膜血凝素和神经氨酸酶蛋白抗原性不同，目前可分为16个H亚型和9个N亚型。禽甲型流感病毒除感染禽外，还可感染人、猪、马、水貂和海洋哺乳动物。可感染人的禽流感病毒亚型为H5N1、H9N2、H7N7、H7N2、H7N3，此次人感染的禽流感病毒是H7N9。该病毒为新型重配病毒，其内部基因来自于H9N2禽流感病毒。 ⑤禽流感主要是指禽中流行的由流感病毒引起的感染性疾病。禽流感病毒可分为高致病性禽流感病毒、低致病性禽流感病毒和无致病性禽流感病毒。高致病性禽流感病毒目前只发现H5和H7两种亚型。由于种属屏障，禽流感病毒只在偶然的情况可以感染人，既往确认感染人的禽流感病毒有H5N1、H9N2、H7N2、H7N3、H7N7、H5N2、H10N7，症状表现各不相同，可以表现为呼吸道症状、结膜炎、甚至死亡。人感染高致病性H5N1禽流感病毒后常表现为高热等呼吸道症状，往往很快发展成肺炎，甚至急性呼吸窘迫综合症和全身器官衰竭，甚至死亡。 ⑥H7N9是禽流感的一种亚型。流感病毒颗粒外膜由两型表面糖蛋白覆盖，一型为血细胞凝集素（即H），一型为神经氨酸酶（即N），H 又分15个亚型，N分9个亚型。所有人类的流感病毒都可以引起禽类流感，但不是所有的禽流感病毒都可以引起人类流感，禽流感病毒中，H5、H7、H9可以传染给人，其中H5为高致病性。依据流感病毒
第16卷第4期黑龙江八一农垦大学学报16（4）：65～70 文章编号：1002-2090(2004)04-0065-06 禽流感的研究进展 李冬野，余丽芸 （黑龙江八一农垦大学， 大庆 163319） 摘 要：禽流感是由A型流感病毒引起的禽类（家禽和野禽）的一种急性传染病，给全世界造成巨大的经济损失，同时对人类的公共卫生也造成了相当大的危害。本文综述了禽流感在病原、致病机理、临床症状、诊断以及防治方面的研究进展情况。 关键词：禽流感；研究进展 中图分类号：S855.3 文献标识码：A Minireview of Avian Influenza Research LI Dong-ye，YU Li-yun Abstract：Avian influenza caused by type A influenza virus is an acute highly contagious disease of birds (poultry and wildfowl). This disease leads to important economic losses worldwide, at the same time it does a great harm to the public health. The subject of this review included brief characterizations of the pathogeny，pathogenesis, lesions, diagnose and prevention and control. Key words：avian influenza；minireview 0 前言 禽流行性感冒(Avian influenza，AI) 简称禽流感，又名真鸡瘟（Fowl plague）、真性鸡瘟、鸡疫、欧洲鸡瘟等，是由A型流感病毒（Avian Influenza Virus，AIV）引起的从呼吸系统病变到全身败血症的一种高度接触性、急性传染病。鸡、火鸡、鸭等家禽及野鸟均可感染。亚洲、美洲、欧洲的许多国家和地区都曾发生过此病，给养禽业造成了巨大的损失。同时，其对人类的公共卫生也造成了相当大的危害。禽流感病毒是人流感病毒株形成的最庞大基因库，禽流感可直接感染人，陆续有人感染禽流感病毒死亡的病例报道。高致病性禽流感(Highly Pathogenic Avian Influenza，HPAI) 已被国际兽医局动物流行病组织(OIE) 列为甲类传染病， 并被列入国际生物武器公约动物传染病名单，1992年2月禽流感被我国农业部《家禽家畜防疫条例》列为甲类监测传染病[1]。 1 禽流感病毒概述 1.1 分类 1.1.1 型的分类 禽流感是由正粘病毒科(Orthomyxoviridae) 流感病毒属的A型流感病毒所引起的。正粘病毒分两属，即A 型、B 型流感病毒属和C 型流感病毒属。型的分类可根据核蛋白（NP）和膜蛋白（MP）的不同来划分，也就是说NP和MP具有型特异性。AIV属A型流感病毒，在正粘病毒属中A型流感病毒是唯一感染禽类的病毒型[2]。 1.1.2 亚型的分类 禽流感病毒（AIV）可按病毒粒子表面的血凝素(hemagglutnin，HA )和神经氨酸酶(neuram inidase，NA )的糖蛋白进行分类[3]，前者对红细胞有凝集性，后者能将吸附在细胞表面的病毒子解脱下来，分为15个H亚型和9个N亚型。根据HA与NA的不同又可将禽流感分为很多亚型，因此可以组成 收稿日期：2004-08-22 作者简介：李冬野（1976-），女，研究实习员，黑龙江八一农垦大学毕业，现从事动物疾病的研究工作。
禽流感的介绍与防治 林泽宇201400111040化学 摘要：禽流感是禽流行性感冒的简称，这是一种由甲型流感病毒的一种亚型引起的传染性疾病综合征。按病原体的类型，禽流感可分为高致病性、低致病性和非致病性三大类。一般情况下，禽流感病毒并不容易使人类发病。 关键词：禽流感、传播途径、对人致病性 1.引言： 禽流感是禽流行性感冒的简称，这是一种由甲型流感病毒的一种亚型引起的传染性疾病综合征，被国际兽疫局定为Ａ类传染病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。不仅是鸡，其它一些家禽和野鸟都能感染禽流感。按病原体的类型，禽流感可分为高致病性、低致病性和非致病性三大类。一般情况下，禽流感病毒并不容易使人类发病。禽流感病毒属甲型流感病毒，甲型流感病毒根据其表面蛋白质的不同被分为Ｈ1到Ｈ15等15种亚型。世界各地的禽流感主要由高致病性的Ｈ5和Ｈ7两种亚型引起，而人对其中的Ｈ1和Ｈ3亚型易感。 2.研究历史： 连月来，以Ｈ５Ｎ１高致病性禽流感病毒为主要病原的禽流感疫情在亚洲多个国家先后暴发，其传播的范围和规模是空前的。尽管目前只在越南、泰国发现了人感染禽流感的病例，但这场成千上万只家禽病死或被宰杀的禽流感危机，无疑给人类健康带来巨大的威胁。 禽流感病毒攻击人类在历史上已非首次。有据可查的禽流感病毒直接传染人的首个病例为１９９６年的１例结膜炎患者，Ｂａｎｋｓ等对其病毒分离株（２６８／９６）进行了ＤＮＡ测序后发现，７个神经氨酸酶（ＮＡ）及内部基因与禽流感病毒高度同源，血凝素（ＨＡ）基因的全部核苷酸序列也与１９９５年从爱尔兰火鸡身上分离出的Ｈ７Ｎ７病毒株有９８．２％相同。 3.基本特征： 成分：甲型流感病毒呈多形性，其中球形直径80～120nm，有囊膜。基因组为分节段单股负链RNA。依据其外膜血凝素（H）/和神经氨酸酶（N）蛋白抗原
禽流感的研究进展 谭飞虎，刁小龙，朱玉娟，张尚弟，张连团，祁越，刘卫军，吴頔 甘肃农业大学生命科学技术学院，甘肃兰州（730070） E-mail：tanfeihu521@https://www.doczj.com/doc/4f14803449.html, 摘要：禽流感（Avian Influenza,AI），1878年首次发现与意大利，目前在美洲、非洲、亚洲、欧洲一些国家广泛发生。禽流感（AI）是由是由A型禽流感病毒(av ian in fluenza virus,AIV) 引起的禽类烈性传染病，主要在禽类中传播。AI不仅给世界养禽业造成了巨大的经济损失,而且对人类健康和生命安全构成了严重威胁。它可通过多种途径传播，且临床症状多样。本文主要从AIV的结构特征，致病机理，防治措施等方面论述了AIV 的研究进展 关键词：禽流感，结构特征，致病机理 引言 禽流感（Avian Influenza，AI）又名真性鸡瘟、欧洲鸡瘟，1878年首次发现于意大利。禽流感是由正粘病毒科甲型流感病毒属的A型流感病毒引起的禽类感染和疾病综合症。禽流感病毒（Avian Influenza Virus，AIV）亚型众多，变异频繁，根据病毒的血凝素（Hemagglutinin, HA）和神经氨酸酶（Neuraminidase，NA）的差异，将A型流感病毒分为不同的血清型，目前已发现16种HA亚型和9种NA亚型。其分子机制涉及点突变引起的抗原漂移（Antiyentil drife）和不同亚型毒株同源性产生新亚型所引起的抗原转变(Antiyentic shift)。该病在临床上所表现的症状变化从亚临床感染，重轻度的呼吸系统疾病，产蛋下降到严重的致死性疾病，其严重程度取于病毒的毒株以及被感染禽的种类，日龄和有无并发症等因素。禽流感病毒仅有H5和H7了两个血清型可引起高致病力禽流感（High Pathogentic Avian Influenza，HPAIV），以突然死亡和高死率为特征，在火鸡和鸡种引起的危害最为严重，常可导致感染鸡群的全军覆没，造成严重的经济损失，所以被国际兽医局列为A类烈性传染病。 1 流感病毒的分类 由于禽流感造成的损失巨大，引起国际社会的广泛关注，并对其分类进行了更为详尽的研究。根据国际病毒分类学（ICTV）第六次分类报告（1995年）规定，正粘病毒科分 3个病毒属：A，B型病毒属（Influenza Virus），A,B,C型流感病毒属（Influenza Virus C），类托高土病毒属（Thogotoline Virus），各属的代表中分别为A型流感病毒，C型流感病毒，托高土病毒，但是习惯上仍将A,B,C型流感病毒都归属亚流感病毒属的3个型[1]。这3个型的流感病毒没有共同的抗原，在内部核蛋白和基质蛋白的抗原性上有很大差异，在致病性和基因结构上也有所不同，其中的A型流感病毒感染的范围最大，危害最大，它可以感染人，猪，马，海洋哺乳动物，禽类等，是人和畜禽呼吸道疾病的重要病原。而B，C型流感病毒却只能感染人，所以禽流感可感染人类，引起以呼吸系统症状为主的急性传染病，部分患者可发展为全身多脏器功能衰竭而死亡。2005年1月新英格兰医学杂志上确认了第一例在人与人之间传播的禽流感病例，由于猪既有人类病毒的受体，又具有禽类病素的受体，所以猪可以同时感染两种病毒，并发生重配进而感染人类，这是禽流感病毒传染的最可能途径[ 2 ]。 -1-
新城疫与禽流感如何区分 概述：新城疫的简称为ND；禽流感的简称为AI，两种病毒病的区别可从流行病学、症状区分开来。 1、流行病学：AI发病较快，温和型恢复后短时间内可复发，ND恢复后可产生较长时间的免疫力；AI可引起鸭鹅发病，ND不能。在这一系列的区别中，禽流感最有与新城疫鉴别诊断意义的是：AI 肿头肿眼、冠髯出血有坏死、腿鳞片出血、胰腺出血坏死、肾肿、法氏囊肿大出血、内脏出血；而ND神经症状明显有扭颈转圈现象，12指肠和盲肠扁桃体有溃疡，坏死。二、症状： 1、禽流感（AI）肿头肿眼、肉垂和鸡冠出血坏死，新城疫（ND）无； 2、AI脚鳞有出血，ND无； 3、ND引起的神经症状比较突出有扭颈、转圈现象，AI较轻； 4、AI呼吸有呼噜声音突出，ND有被噎的咯咯声。 三、病变： 1、AI胸腺特别是下四对出血严重，ND出血较轻； 2、AI肝脏表面有出血斑或点，ND一般无； 3、AI肿头部及颈部皮下有胶冻样渗出，ND无； 4、AI胰腺出血有坏死，ND无； 5、AI整个气管弥漫性出血，粘液多，ND仅喉头出血现象多； 6、AI法氏囊肿大有出血，ND无； 7、AI肺脏有淤血水肿，ND一般无；8、AI肾脏肿大有出血，ND
无； 9、AI心脏冠状脂肪出血点发生较多，ND较少；胸腹部皮下及腿肌有出血斑或点，腿根部及腹部脂肪有出血点，ND一般无； 10、AI胃表面脂肪有出血点，ND一般无；AI腺胃基部及乳头间出血多，ND则腺胃乳头出血多； 11、AI小肠弥漫性出血多，ND则小肠淋巴滤泡肿大出血多，有较大的出血点或斑，12指肠和盲肠扁桃体出血、溃疡有坏死，肠管有粗细不一变化，切开粗部肠管有黄色胶冻样分泌液； 12、AI卵巢充血、出血严重、ND较轻，AI输卵管水肿、有白色分泌物，ND无； 14、ND嗉囊炎症较重、有粘液，AI较少。
禽流感研究进展 发表时间：2016-09-07T12:08:08.280Z 来源：《心理医生》2016年10期作者：刘元金1,2 付小敏2 赵晓会2 [导读] 与其他病毒性疾病类似，禽流感的防治尚无特别有效的方法，接种疫苗是预防禽流感发生与传播的最有效手段。 刘元金1,2 付小敏2 赵晓会2 (1华兰生物河南新乡 453000) (2新乡医学院三全学院河南新乡 453000) 【摘要】禽流感(Bird Flu或Avian Influenza) 具有高致病性和高致死率，它不仅给养殖业造成很大的危害，而且对人类的健康和生命安全也构成了威胁。因此，研究禽流感的特点及其防控技术势在必行。本文主要综述了禽流感概况、病原体结构特征、疫苗的研发及防控手段。 【关键词】禽流感；疫苗；研究进展 【中图分类号】R18 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）10-0002-02 Progress and achievements in the research on avian influenza Liu Yuanjin1; Fu Xiaomin2 Zhao Xiaohui2 1. HuaLan Bio-engineering, Henan Xinxiang 453000,China 2. Sanquan Medical College, Xinxiang Medical University, Henan Xinxiang 453000,China 【Abstract】Avian influenza virus can causes a very high level of morbidity and mortality. It is not only greatly harmful to culturist, but also underlying dangerous to human being. Therefore it should be stressed to establish its molecular character and prevent strategy. In this review, we foucus on the molecular character and prevent strategy of the Avian Inluenza. 【Key words】Avian influenza ; Vaccine; Research progress 1.前言 禽流感是由A型流感病毒引起的禽类传染病，同时也是一种人畜共患病；被列为一类动物传染病。与其他病毒性疾病类似，禽流感的防治尚无特别有效的方法，接种疫苗是预防禽流感发生与传播的最有效手段。随着禽流感病毒多种亚型的发现以及生物技术的发展，目前已研发出了针对禽流感的多种疫苗。 2.禽流感概况 2.1 禽流感的发病历史 禽流感(Bird Flu或Avian Influenza)又称欧洲鸡瘟，被国际兽疫局定为甲类传染病。最早于1878年发生在意大利。到1955年，科学家证实其病原体为A型流感病毒；至到1981年被正式更名为禽流感。在被发现100多年来，人类并没有掌握有效的预防和治疗措施，仅能以消毒、隔离、宰杀禽畜的方式防止其蔓延。 2.2 禽流感的发病特点 禽流感常与传染性支气管炎、传染性气管炎、大肠杆菌病等混合感染；发病率和死亡率与自身毒株、鸡群性别、环境等有关。如禽流感病毒侵入黏膜，有利于大肠杆菌继发感染，进而增强禽流感病毒血凝作用，导致鸡群发病率和死亡率增高；禽流感病毒血清型多，各型间交叉保护弱，同一血清型不同毒株的毒力差异很大；禽流感病毒变易变异，极易发生致病性变异及抗原漂移和转变。 3.禽流感病原体 禽流感病毒(AIV)属正黏病毒科，流感病毒属。呈多形性，直径为80～120nm。其核酸由8段单股负链RNA组成，共编码8种结构蛋白和2种非结构蛋白。病毒包膜上有10～12nm的密集钉状物或纤突覆盖，分别是血凝素HA和神经氨酸酶NA。每个病毒颗粒大约由0.8%～1.1%的RNA，70%～75%的蛋白质，20%～24%的脂质和5%～8%的碳水化合物组成。 4.禽流感病毒的分类及致病性 4.1 禽流感病毒的分类 禽流感病毒（AIV）可按病毒粒子表面的HA和NA进行分类，共分为15个H亚型和9个N亚型。其中最受关注的是H5和H7，它们具有或转变为高致病性的潜力,致使最初的病毒若未受到控制而得以在鸡群中繁殖和传播。 4.2 禽流感的致病性 禽流感病毒可分为高致病性、低致病性和非致病性三大类。其中高致病性禽流感是由H5和H7亚毒株引起，其特点是潜伏期短，传播快，发病急，发病率和死亡率高，但传播范围往往局限。低致病性禽流感特点是潜伏期长，传播慢，病程长，发病率和死亡率低，一旦发病，如不采取积极措施，病毒很难在疫区根除，疫情会逐渐向周边地区扩散，而且病毒毒力还有可能变强。 5.禽流感疫苗的研制策略 5.1 全病毒灭活疫苗 禽流感灭活疫苗一般是用禽流感病毒鸡胚尿囊液经甲醛灭活而成。其工艺简单、免疫效果好、免疫持续时间长等优点，现已在规模化家禽养殖中使用，有效的避免了禽流感的暴发。但此类疫苗的副反应较多。 5.2 减毒活疫苗 减毒活疫苗是指将野毒株感染鸡胚，并在25～26℃下连续传代得到冷适应的减毒毒株，该病毒只能在25℃左右复制，不能在37℃下传代，使用该弱毒株接种使机体产生特异性免疫。多项人体和动物研究证实，该减毒株有很好的稳定性，对表面抗原发生转移的流行株病毒有一定的保护作用；但具有毒力恢复的风险。 5.3 基因工程亚单位疫苗 亚单位疫苗是指提取禽流感的有效成份并经进一步精制而成。这种疫苗的特点是安全性好，但成本相对高。随着基因工程技术的发展,外源表达的基因工程亚单位疫苗可大大降低成本。1994年Kodihalli等研制了火鸡H5N2病毒NP/HA和ISCOM的复合亚单位疫苗并用其免疫火鸡,21d后可产生较高的抗体滴度，对同源和异源(H6N1)亚型病毒的攻击产生保护作用。 5.4 基因重组活载体疫苗 利用遗传工程技术来分离血凝素基因（H5、H7、H9），并把它们插入载体病毒（如痘病毒），构建表达HA的重组病毒。此重组病毒
禽流感病毒中和实验及其他方法 （一）实验材料 1、中和反应实验材料 (1)病毒： ）的滴定。 一般为鸡胚尿囊病毒液，进行中和实验前，需要进行病毒滴度（TCID 50 (2)血清样品 包括待检血清和阳性以及阴性对照血清。人血清实验前需要56℃ 30分钟灭活，动物血清需RDE处理。－20℃储存，避免多次反复冻融。 (3)MDCK细胞和细胞培养试剂 1)MDCK细胞（狗肾上皮细胞） 2)MDCK细胞培养液：DMEM+5%牛血清+抗生素，过滤除菌 500毫升 DMEM（修饰的Eagles培养基） 5.5毫升 100×抗生素（100单位/毫升青霉素+100微克/毫升链霉素） 5.5毫升 100×L－Glutamine（2毫摩尔） 25.5毫升 56℃、30分钟加热灭活的牛血清 3)胰酶 / EDTA (4)其它
1)平底96孔微量培养板 2)病毒稀释液：DMEM+1%牛血清白蛋白+抗生素，即配即用。 429毫升 DMEM 66毫升 7.5%牛血清白蛋白（BSA） 5毫升 100×抗生素 3)TPCK－胰酶（使用浓度为2微克/毫升） 4)固定液：80%的丙酮，即配即用，4℃保存 400毫升丙酮 100毫升 PBS，PH 7.2 2、ELISA实验材料 (1)抗体1：鼠抗流感病毒甲型核蛋白克隆抗体 (2)抗体2：辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG (3)洗涤液：PBS+0.05%TWEEN－20 4升 PBS，PH 7.2 2毫升 TWEEN－20 (4)封闭液：PBS+1%牛血清白蛋白+0.05％TWEEN－20 867毫升PBS，PH 7.2 132毫升牛血清白蛋白 1毫升TWEEN－20
人感染高致病性禽流感 （一）单项选择题 1、人感染高致病性禽流感是我国《传染病防治法》规定管理的哪类传染病之一？发生流行时，应按照哪类传染病的预防控制措施要求严格管理：（B ） A、属于甲类，按甲类管理 B、属于乙类，按甲类管理 C、属于乙类，按乙类管理 D、属于丙类，按乙类管理 2、下列哪型禽流感病毒感染的临床表现较重：（A ） A、H5N1 B、H9N2 C、H7N7 D、H1N1 3、下列哪项是人类禽流感病最常见的并发症：（ A ） A、肺炎 B、急性呼吸窘迫综合征 C、肺出血 D、Reye综合征 4、流感病毒属正粘病毒科，分为几个型别：（C ） A、只有1型 B、分为甲、乙两型 C、分为甲、乙、丙三型 D、若干型 5、人感染高致病性禽流感血象淋巴细胞改变的特点是：（B ） A、淋巴细胞升高 B、淋巴细胞降低 C、淋巴细胞正常 D、异型淋巴细胞明显增多 6、与人流感病毒相比，下面哪项不是一禽流感病毒的特点：（D ） A、对环境抵抗力较强 B、在自然界抗原性较稳定 C、毒株呈多样性 D、变异速度快 7、下列哪种亚型的甲型流感病毒不是以往人间流行的流感病毒。（D ） A、H1N1 B、H2N2 C、H3N2
D、H5N 1 8、下列哪项不属于人感染高致病性禽流感的传播途径：（A ） A、经血液传播 B、直接密切接触传播 C、空气飞沫传播 D、粪一饮水一口传播 9、人感染高致病性禽流感的流行病学史中下列哪项最重要：（ B ） A、病前1周曾接触过禽类 B、病前1周曾有到过高致病性禽流感疫区的历史，有与禽类等动物的接触史 C、病前I周曾接触过感冒病人 D、病前1周曾吃过鸡 10、人感染高致病性禽流感的季节多为：（B ） A、四季散发，无季节性 B、四季散发，冬春季多见 C、四季散发，夏季多见 D、有严格的季节性，只见于冬春季 11、下列哪种药物属于口服的神经氨酸酶抑制剂类抗流感病毒药物：（ D ） A、金刚烷胺 B、金刚乙胺 C、利巴韦林 D、奥司他韦 12、对人感染高致病性禽流感的抗病毒治疗下列哪项说法是错误的：（D ） A、发病48小时内应用 B、抗病毒药可减轻病情 C、抗病毒药可缩短病程 D、对有合并症者疗效较好，尤其是全身性感染者 13、人感染高致病性禽流感的检疫期为：（A ） A、7天 B、14天 C、21天 D、28天 14、对人感染高致病性禽流感患者的密切接触者的处理为：（D ） A、严密隔离至21天 B、一般隔离至21天 C、注射疫苗 D、可服用抗病毒药物预防 15、一例来自越南禽流感疫区的患者出现发热、头痛等流感样症状，且患者呼吸道分泌物标本检测呈流感病毒核酸阳性，临床诊断应考虑为人感染高致病性禽流感的下列哪一类：（ B ）
禽流感研究进展及预防措施 禽流感是人、禽和其他哺乳动物共患的一种传染病，近年禽间疫情波及范围越来越大，禽流感疫情的发生，引起全球的高度关注。禽流感病毒有可能变异成一种既有高致病性又有人流感病毒高传播性特点的新型流感病毒，构成越来越严峻的大流行威胁。本文着重就流行病学和病原学的研究进展进行综述，为防控策略和措施的调整提供科学依据。 流感病毒是上呼吸道感染的主要病原，属于正粘病毒科，流感病毒属，既能引发禽类感染，又能感染人、猪、马等哺乳类动物[1]。禽流感是甲型流感病毒在禽类引发的传染病，既可以引起鸭、鸡、鹅和鸽子等家禽发病，又能够致天鹅、大雁等野生鸟类生病，而水禽是禽流感病毒最大的储存库。国际兽医局和中国农业部均将高致病性禽流感列为甲类传染病。人禽流感是人类感染H9N2、H5N1和H7亚型禽流感病毒中的某些毒株所引起的一种急性呼吸道传染病。我国已将人感染高致病性禽流感列为乙类法定传染病。近年来，不断发生人感染禽流感病毒事件，通过了解禽流感研究进展分析危害因素，对预防和控制禽流感具有重要的公共卫生意义。 1 流行概况 1.1 西班牙流感1918-1919年发生“西班牙流感”，大流行造成4千万人死亡，病毒基因序列分析显示内部基因片段来源于禽流感病毒[2-3]。 1.2 我国南部流感1957年2月起源于我国南部的流感，随后传播到美国、香港和新加坡等地。病原是人源和禽源流感病毒经过重组的H2N2亚型病毒，其中有5个基因来自当时人群中流行的H1N1亚型人流感病毒，而H2（HA）、N2（NA）、PBl 3个基因来源于禽流感病毒[4]。这次流感可能是在中间宿主猪的体内进行重配，再传播到人群当中。 1.3 香港流感1968年香港流感疫情，很快波及到世界各地。这次流感病毒由人/禽重组流感病毒替代H2N2亚型病毒，拥有禽源H3（HA）基因和PBl基因[5]。 1.4 墨西哥流感2009年2月，“墨西哥流感”即新甲型H1N1流感，该病毒成功适应于人类并导致疾病流行[6]。该病毒是人/猪/禽三种流感病毒的基因进行重配产生新型“甲型H1N1流感”病毒[7-9]，之后蔓延到全世界。世界上出现4次世界流感大流感，都与禽流感病毒有关。 1.5 人感染禽流感概况（1）20世纪50年代，发现H7N7亚型病毒能够直接感染人[10]；（2）1997年，中国香港特区发生18例H5N1患者，其中死亡6例[11]；（3）2003年，中国香港出现H5N1病例2例，其中死亡1例[12]；（4）2003年，荷兰出现H7N7感染85例，其中死亡1例[13]；（5）在2003-2012年，全球就有柬埔寨、老撾、缅甸、孟加拉国、巴基斯坦、土耳其、尼日利亚、埃及