分子生物学笔记完全版
第一章基因的结构
第一节基因和基因组
一、基因(gene)
是合成一种功能蛋白或RNA 分子所必须的全部DNA 序列．
一个典型的真核基因包括
①编码序列—外显子(exon)
②插入外显子之间的非编码序列—内合子(intron)
③5'-端和3'-端非翻译区(UTR)
④调控序列(可位于上述三种序列中)
绝大多数真核基因是断裂基因(split-gene)，外显子不连续。
二、基因组(genome)
一特定生物体的整套(单倍体)遗传物质的总和，
基因组的大小用全部DNA 的碱基对总数表示。
人基因组3X1 09(30 亿bp)，共编码约10 万个基因。
每种真核生物的单倍体基因组中的全部DNA 量称为 C 值，与进化的复杂性并不一致(C-value
Paradox)。
人类基因组计划（human genome project, HGP）
基因组学（genomics）,结构基因组学（structural genomics）和功能基因组学（functional genomics）。
蛋白质组（proteome）和蛋白质组学（proteomics）
第二节真核生物基因组
一、真核生物基因组的特点：，
①真核基因组DNA 在细胞核内处于以核小体为基本单位的染色体结构中．
②真核基因组中，编码序列只占整个基因组的很小部分(2—3％)，
二、真核基因组中DNA 序列的分类•
(一)高度重复序列(重复次数>lO5)
卫星DNA(Satellite DNA)
(二)中度重复序列
1．中度重复序列的特点
①重复单位序列相似，但不完全一样，
②散在分布于基因组中．
③序列的长度和拷贝数非常不均一，
④中度重复序列一般具有种属特异性，可作为DNA 标记．
⑤中度重复序列可能是转座元件(返座子)，
2．中度重复序列的分类
①长散在重复序列(long interspersed repeated segments．) LINES
②短散在重复序列(Short interspersed repeated segments) SINES
SINES：长度<500bp，拷贝数>105．如人Alu 序列
LINEs：长度>1000bp(可达7Kb),拷贝数104-105，如人LINEl
(三)单拷贝序列(Unique Sequence)
包括大多数编码蛋白质的结构基因和基因间间隔序列，
三、基因家族(gene family)
一组功能相似且核苷酸序列具有同源性的基因．可能由某一共同
祖先基因(ancestral gene)经重复(duplication)和突变产生。
基因家族的特点：
①基因家族的成员可以串联排列在一起，形成基因簇(gene cluster)或串联重复基因(tandemly repeated
genes)，如rRNA、tRNA 和组蛋白的基因；
②有些基因家族的成员也可位于不同的染色体上，如珠蛋白基因；
③有些成员不产生有功能的基因产物，这种基因称为假基因(Pseudogene)．
Ψa1 表示与a1 相似的假基因．
假基因分类。加工过的假基因(processed pseudogene)。
典型的基因家族
1．tRNA 基因
单倍体人基因组中1300 个tRNA 基因，tRNA 基因簇．
2．rRNA 基因
>l00copy．rRNA 基因簇(重复单元28S、18S、5.8s-rRNA)
3．组蛋白基因
30-40copy．定位：7q32-q36
组蛋白基因簇(重复单位：H1，H2A，H2B，H3、H4)
特点：无intron，Poly(A)- RNA．
4．珠蛋白基因
α类：16p13，基因簇(24Kb)：5?—δ—Ψδ—Ψα1—α2—α1—3?
β类：11p15，基因簇(60Kb)：5?—δ—Gr—Ar—Ψβ—δ—β—3?
四、超基因家族(Supergene family ，Superfamily)
由基因家族和单基因组成的大基因家族，结构上有程度不等的同源性，但功能不同．
五、人类基因组中的重复序列标记
1、A1u 序列
单倍体人基因组50 万-100 万拷贝，平均每隔3-6Kb 就有一个Alu 序列，
人A1u 序列长300bp：
2X130bp 重复序列；
+31bp 间隔序列(中间)；
两侧7-21bp 正向重复(direct repeats)，返座子?
Alu 序列广泛散布于人基因组，约90%巳克隆的人基因合有Alu 序列
Alu 序列标志。
2、可变数串联重复• ，•
Variable number tamdem repeat，VNTR．
又称小卫星DNA(minisatellite DNA)
由短重复单位(6-40bp)串联重复(6-100 次以上)而成，多位于基因的非编码区，广泛分布。VNTR 多态性—分子标记—DNA 指纹图（fingerprint）.
小卫星DNA 突变与肿瘤，H-Ras。
3、短串联重复（short tandem repeat,STR）
又称微卫星DNA（microstallite DNA）
2-6 个核苷酸组成的重复单位串联重复(10-60 次),两侧为特异的单拷贝序列，人基因组中每l0kb
DNA 序列至少一个STR 序列。
{CA)n，50，000-100，000 拷贝．
新一代遗传标记，人类基因组研究，肿瘤，遗传病．
第三节线粒体基因组
人线粒体基因组的特点：
1、人线粒体基因组为16，569bp 的双链闭环分子，一条链为重链(H 链)，一条链为轻链(L 链)，两条链均有编码功能，每个mtDNA 分于编码13 种蛋白质和24 种结构RNA(22rRNA，2tRNA)．
2、线粒体DNA 为母系遗传．
3、结构基因不含内含子，部分区域有基因重叠，因此病理性mtDNA 突变更易发生．
4、mtDNA 突变频率更高．
5、线粒体DNA 突变的表型表达与核DNA 不同。
第四节细菌和病毒基因组
一、细菌基因组的特点。
1．功能相关的几个结构基因往往串联在—起，受它们上游的共同调控区控制，形成操纵子结构，
2．结构基因中没有内含子，也无重叠现象。
3．细菌DNA 大部分为编码序列。
二、病毒基因组的特点
1．每种病毒只有一种核酸，或者DNA，或者RNA；
2．病毒核酸大小差别很大，3X103 一3X106bp；
3．除逆病毒外，所有病毒基因都是单拷贝的。
4．大部份病毒核酸是由一条双链或单链分子(RNA 或DNA)，仅少数RNA 病毒由几个核酸片段组成．
5．真核病毒基因有内含子，而噬菌体（感染细菌的病毒）基因中无内含子．
6．有重叠基因．
第五节染色质和染色体
细胞分裂间期—染色质(chromatin)
分裂期—染色体(chromosome)
一、染色质的基本单位—核小体
(一)核小体(nucleosome)结构
DNA 绕在组蛋白八聚体(H2A、H2B、H3、H4 各一对)核心外1.8 周(146bp),形成核小体核心
颗粒。
两个核小体核心颗粒之间有Linker DNA(0-80bp)，
核小体核心颗粒+Linker=核小体(长180-210bp)
核小体DNA Ladder．
(二)组蛋白(histone)：一类小的带有丰富正电荷<富含Lys，Arg)的核蛋白，与DNA 有高亲和
力．
组蛋白分类：
1．核小体核心组蛋白，H2A，H2B，H3，H4。分子量较小(102-135aa)
作用：盘绕DNA 形成核小体。
2．H1 组蛋白：较大(220aa)，作用：与Linker DNA 结合后利于核小体稳定和更高级结构的
形成•
。
二、染色质的高级结构
1、30nm 染色质纤丝，
2、袢环结构(looped domain) 。
3、细胞分裂期染色体
分裂期染色体=一对姐妹染色单体（Chromatid)
有丝分裂中期46 条染色体按大小和形状排列的的光学显微镜图像称为人的染色体核型(Karyotype)
三、染色体的结构要素。
(一)．着丝粒（centromere)：细胞分裂时染色体与仿锤丝相连结的部位，为染色体的正常分离所必需。
(二)．端粒(telomere)：真核生物线状染色体分子末端的DNA 区域
端粒DNA 的特点：
1、由富含G 的简单串联重复序列组成(长达数kb)．
人的端粒DNA 重复序列：TTAGGC。
2、端粒的末端都有一条12-16 碱基的单链3?端突出。
端粒的作用：防止DNA 末端降解，保证染色体的稳定性和功能
第二章DNA 的复制、修复和重组
第一节DNA 的复制(DNA Replication)
一、DNA 复制的基本特性
1. 半保留性(Semi-Conservative)
Meselson-Stahl 实验
2. 双向复制(一般)
复制起始点(origin)+两侧复制叉=复制单位(复制子, Replicon)
3.半不连续性(Semi-discontinuous)
前导链(leading strand)-连续合成
随从链(Lagging Strand)-不连续,由岗崎片段(okazaki fragment)连接而成.
二、DNA 复制必需的成份(真核生物)
1.染色体DNA 复制必需三种核苷酸序列①复制起点②着丝粒③端粒.
2．RNA 引物(RNA Primer)
一般8-14nt.带游离3'-OH 形成磷酸二酯键.
④DNA 解链酶(DNA Helicase),打开DNA 双链.
⑤增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen.PCNA)
辅助催化前导链合成.
⑥端粒酶(Telomerase)
末端复制问题。
端粒酶负责染色体末端(端粒)复制,是由RNA 和蛋白质组成的核糖核蛋白.其中的RNA 成分是端粒复制的模板.(因此端粒是逆转录酶)
作用:维持端粒长度.
端粒酶活性可用基于PCR 的“TRAP”（Telomerase repeat amplification
protocol）法测定（Kim,N et al.,science,266,2011-2014(1994)
端粒与细胞寿命。
端粒、端粒酶与肿瘤的关系：绝大多数恶性肿瘤具有端粒酶活性但端粒缩短，但也有约5%
的肿瘤无端粒酶活性且端粒较长。
端粒酶作为新的肿瘤标志和肿瘤治疗靶点.
第二节DNA 修复（DNA repair）
DNA 修复是维持基因组完整性的重要机制，在保护基因组避免发生可能导致肿瘤或遗传疾病的突变中起关键的作用。
引起DNA 损伤的因素：
1、细胞内源性损伤因素：
DNA 复制错误；自发损伤包括碱基互变异构、碱基脱氨（C→U、A→I）和碱基丢失等；氧
化代谢副产物如活性氧物质（Reactive
oxygen species，ROS）的攻击等。
2、环境中的损伤因素：
辐射（含紫外线、X 射线）产生胸腺嘧啶二聚体；化学致癌物（氧化脱氨，烷化剂或代谢活
化物如苯并芘、黄曲霉素等产生碱基加合物）
一、碱基切除修复(Base excision repair、BER)
该途径中最关键的是必须通过一种糖苷酶(glycosylase)先除去变异碱基(如被氧化、烷基化或脱氨的碱基)，该糖苷酶催化连接损伤碱基与脱氧核糖之间的糖苷键水解，释放游离碱基并在DNA 中产生一个去碱基位点，然后由去嘌呤／去嘧啶(AP)核酸内切酶、DNA 聚合酶和DNA 连接酶等利用相对的一条正常链为模板进行修补合成。
BER 途径中的重要糖苷酶：
(1)尿嘧啶DNA 糖苷酶(UDG)，从DNA 中除去尿嘧啶碱基；
(2)3—甲基腺嘌吟(3MeA)DNA 糖苷酶，可修复烷化剂产生的损伤；
(3)负责修复DNA 氧化损伤的糖苷酶（如Fpg／MutM DNA 糖苷酶）
BER 是修复内源性DNA 损伤(自发水解、烷基化和活性氧攻击)的主要途径，因此对于降低自发突变的频率、防止肿瘤发生有重要作用。
二、核苷酸切除修复(Nucleotide excision repair，NER)
首先由多聚体复合物识别损伤，再在损伤的两侧进行切除。随着DNA 链被解开，包含损伤的单链片段释放出来，留下的缺口由DNA 聚合酶填补，DNA 连接酶封闭。该途径包括20 种以上蛋白，可以修复紫外辐射诱导的环丁烷嘧啶二聚体(CPD)和(6—4)光产物((6—4)PPs)，以及一些化学物质产生的大加合物。
人的NER 系统有关基因及其蛋白质产物功能。
NER 系统缺陷与着色性干皮病（Xeroderm pigmentosum,XP）
NER 可再分为二条子途径：
(1)全基因组修复(Global Genomic
repair，GGR)途径：修复整个基因组内的损伤，其效率取决于损伤的化学特性、损伤部位的DNA 序列和染色质结构。
(2)转录藕联修复(Trancsription—coupled
repair，TCR，)：特异地修复基因组中具有转录活性(即表达)的基因的被转录DNA 链上的损
伤，该途径的
特点是依赖RNA 聚合酶II 催化的转录，其中的一些蛋白是普通转录因子TFIIH 的亚基。
三、错配修复(Mismatch repair)
负责修复DNA 复制过程中由于错误掺入而产生的错配。
STR 序列复制-模板链的滑动产生小的环状突出(loop)-
重复序列扩张（expansion）或丢失：微卫星不稳定性（microsatellite instability）
E
coli 中的MMR 途径需要mutS,mutH,mutL 和uvrD 基因产物和特异性核酸外切酶、DNA 聚合酶和DNA 连接酶等。在酵母和人类已鉴定了mutS,mutH 的多种同源物。遗传性非息肉性
结肠癌（HNPCC）基因缺陷。
微卫性不稳定与肿瘤。新的肿瘤基因诊断标志。
四、重组修复(Recomhinant repair)
修复DNA 的两条链均受损伤的部位的双链断裂或链间交连。
Further readings:
1 Wood RD，DNA repair in eukaryotes，Ann Rev
Biochem，1996，65：135—167
2 Krokan HE,et a1., DNA glycosylase in the base excision
repair of DNA．Biochem J，1997，325：1—16
3 Vrieling H，et a1., Transcription coupled repair and its impact
on mutagenesis，Mutation Res，1998，400：135—142
第三节重组(recombination)
重组的本质是基因的重排或交换.即2 个DNA 分子间或一个DNA 分子的不同部位间,通过断
裂和重接,交换DNA 片段从而改变基因的组合和序列.
一.同源重组(Homologous recombination)
指DNA 同源序列间的重组,常发生于两个较长的同源DNA 片段或同源染色体之间。
可通过同源重组将外源基因定位整合到细胞基因组中.
二.转座(transposition)
可移动的DNA 元件(mobile DNA elements)
-转座元件(Transposable element).它是指那些可在DNA 分子内
或DNA 分子间转移的DNA 片段.
转座元件的转移过程-转座
转座的特点:
1.转座后原来位置的转座元件序列仍然保留,但同时又把新合成的DNA 复本插入到另
外一个位点.
2.转座过程需要转座酶(transposase).它催化断裂和重接两步连续的过程(需要M2+)
3.转座元件插入位置的两茶有3-12bp 的正向重复序列(靶序列),它是由于转座酶错位切割DNA 造成的.这种短正向重复序列是存在转座元件的特征.
转座元件的分类
①转座子(transposon):通过DNA 复制而转移的转座元件.
②逆转座子(retroposon)或返座子,通过RNA 阶段实现转移的转座元件(DNA→ RNA→DNA→
插入新位点)
逆转座子例:Alu.LINE1.逆假基因(retro-pseudogene)
转座的遗传效应-导致基因重排、插入、缺失。
第三章基因表达的调控
基因表达：DNA→mRNA→蛋白质的遗传信息传递过程
基因表达的调控
第一节基因的活化
基因的“开关”-染色质的活化
一、活性染色质的结构
间期核染色质：
异染色质(heterochromatin)，高度压缩(不转录)；
常染色质(euchromatin)，较为松散，
常染色质中约10%为活性染色质(更开放疏松)。
活性染色质→←非活性染色质
二、活性染色质的结构特点
(一)DNaseI 敏感性
转录活性(或有潜在转录活性)的染色质对DNase I 更敏感．
DNase I 超敏感位点(DNase I HyperSensitive Sites，DHSS)
(二)组蛋白H3 的CyS110 上巯基暴露，
三、活性染色质结构的形成
（一)、核小体位相(Phased positioning)
1．核小体的旋转定位(rotational positioning)
指核小体核心与DNA 双螺旋在空间结构中的相互关系，主要包括DNA 双螺旋的大沟是面向还是背向核心结构．…
2．核小体的平移定位(translational positioning)
指核小体与特定DNA 序列的结合位置和方式，特别是转录活性相关的DNA 调控元件（启动子、增强子等）序列与核小体的相互位置关系。
(二)、组蛋白修饰
1．H1 组蛋白磷酸化
促进染色体包装，影响转录活性，
2．核心组蛋白修饰
乙酰化：常发生在组蛋白的Lys，
一般活性染色质是高度乙酰化的。
（三)HMG 蛋白结合
HMG（high mobility group)蛋白—高迁移率蛋白, 如HMG14/HMG17.
与核小体核心颗粒结合，有利转录。
四、DNA 甲基化与基因表达．
(一)、真核生物基因组DNA 的甲基化(Methylation)
哺乳动物基因组中5%的C 为甲基化(m C)，mC 主要存在于CpG 二核苷酸中．
CpG 二核苷酸序列常成簇聚集并零散地分布于人基因组中，形成CpG 岛(CpG islands)．人基因组中约每10Kb 就有一个CpG 岛．
CpG 岛常与基因相连(可作为寻找基因的标记)。
(二)DNA 甲基化的转录抑制作用。
基因表达与甲基化呈负相关
基因甲基化状态：
1、高度甲基化：基因为持续失活(如女性的一条X 染色体；
2、诱导去甲基化：如组织或发育阶段特异性表达基因；
3、持续低水平甲基化：具有转录活性(如持家基因)。
持家基因(housekeeping gene)：
是指对所有类型组织细胞在任何时候都需要其表达的基因，通常都是维持细胞基本生存所必须的基因，其表达常保持在固定的水平。又称为组成性基因(Constitutive
gene)。
（三）甲基化与基因组印迹
基因组印迹(genomic imprinting)：指基因表达活性只局限于来自双亲之一的基因版本。
被印迹(imprinted)的基因．
基因组印迹的机制--DNA 高度甲基化
基因组印记与肿瘤．
第二节转录水平的调控
转录水平的调控是基因表达调控中最重要的环节。
一、真核基因转录基本条件：
特异性基因转录的基本条件包括：
①启动子(特别是核心启动子)
②转录模板(转录起始点（+1）---终止点)
③RNA PolⅡ
④普通转录因子(GTFs)
(一)启动子(promoter)
与基因转录启动有关的一组DNA 序列，一般位于RNA
poII 转录起始点上游100-200bp 以内，其功能是决定转录的起始点和调控转录频率．
启动子区域包括核心启动子和启动子上游近侧序列：
1、核心启动子(core promoter)
是决定转录起始位置的关键序列，也是普通转录因子TFⅡD 的结合位点，
①TA TA 盒(TATA box) 位于转录起始点上游-25～-30bp．
②起始子(initiator，Inr) Inr 是与转录起始位点重叠的短的较保守序列．
注：①不是所有基因都含有TATA 盒或Inr 序列．有的只有其中之一，有的两者都无．
②这些核心启动子的序列和它们之间的间隔多变
2、上游启动子元件(Upstream Promoter element，UPE)
位于较上游(-30 一-110bp)，能较强影响转录起始的频率，如CAAT 盒和GC 盒．其中GC 盒是转录因子SPl 的结合位点。
(二)RNA 聚合酶Ⅱ
负责真核生物蛋白编码基因的转录(产物mRNA)，有7-10 个亚基，最大亚基的羧基末端结构域(CTD)具有7 个氨基酸(Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser
-Pro-Set)的重复序列，其中有多个磷酸化位点．CTD 磷酸化对调控基因转录有重要作用．(三)基础转录因子(basal transcription factor)
真核基因转录除RNA 聚合酶外还需要许多蛋白因子—转录因子参加，其中一些转录因子是
RNA 聚合酶Ⅱ转录起始必需的，并且可以维持基础水平的转录，因此称为基础转录因子或普通转录因子(general
transcription factor)
1．RNA 聚合酶II 的普通转录因子(TF II)
包括TFIID,TFⅡB,TFIIF，TFIIE，TFIIH，TFIIA 等．
TFIID 是由TATA 盒结合蛋白(TATA binding protein，TBP)和8 种TBP 协同因子(TBP associated factor，TAF)组成的复合物，TFIID 可识别和结合核心启动子(TA TA 盒和Inr)；TFⅡB 的C 端与TFIID 和DNA 的复合物结合，N-端与TFⅡF 协同作用募集RNA 聚合酶
II，
再加上TFIIE,TFIIH 形成完整的转录复合物．
TFIIH 有蛋白激酶活性，可使RNA Pol 最大亚基CTD 磷酸化，使转录起始过渡到转录延伸．
TFIIA 有助于TFIID 与TATA 盒核心启动子结合．
2、TAF 的作用
TFIID 中包括至少8 种TBP 协同因子,分子量为30—250kD,分别命名为TAFⅡ-30～250．TAFⅡ150 识别起始子(1nr)序列．
TAF 是基因转录调控的辅助因子，它的作用是通过与多种转录调控因子（激活物或阻遏物）的转录调控结构域结合，而介导转录激活或抑制。
二、基因转录的顺式调控元件
顺式调控元件(cis-regulating
element)是指对基因表达有调控活性的DNA 序列，其活性只影响与其自身同处于一个DNA 分子上的基因．
顺式调控元件中的短核心序列：共有序列或一致序列（consensus sequence)。
(一)启动子(promoter)
(二)增强子(enhancer)
能显著提高基因转录效率的一类顺式调控元件（其核心序列常为8-12bp)．
增强子的作用特点：
1．能(通过启动子)提高同一条链上的靶基因转录速率；
2．增强子对同源基因或异源基因同样有效；
3．增强子的位置可在基因5?-上游、基因内或3?下游序列中；
4．自身没有5?-或3?-方向性；
5．增强子可远离转录起始点(最多30Kb)；
6．增强子一般具有组织或细胞特异性．
(三)负调控元件—沉寂子
负调控元件是能抑制基因表达的序列．如沉寂子(silencer)
(四)其它顺式调控元件
1．应答元件(responsive elements)
真核细胞中对某些特定的环境作出应答的基因，常具有相同的顺式元件—应答元件．
应答元件能被在一些特定情况下表达的调控因子识别(又称为可诱导的顺式调控元件／反式作用因子)。
2．转座元件对基因表达的调控，。
三、基因转录的反式作用因子
转录水平的调控主要是通过与多种DNA 元件结合的蛋白因子来实现．
反式作用因子(trans-acting factor)是通过识别和结合顺式调控元件的核心序列而调控靶基因转录效率的一组蛋白质．
反式作用因子对基因表达的调控可正(激话)可负(阻遏)．
(一)反式作用因子的结构：
结构域(domain)是指蛋白质中可以具有独立的超二级结构的部分。通常由一个基因外显子编码，并可具有特定的功能。在较大的蛋白质中，
多个结构域间可通过较短的多肽柔性区互相联接．
基序(motif)：一般指构成任何一种特征序列的基本结构．作为结构域中的亚单元，其功能是体现结构域的多种生物学作用．
1．反式作用因子的DNA 结合结构域(DNA binding domain)中的几种常见基序：
①螺旋/转角/螺旋（Helix-turn-helix,HTH）基序
两段螺旋被一短的转角结构分开，其中一段螺旋为DNA 识别螺旋．
同源异形结构域(Homeodomain，由同源异形盒编码)中含有HTH 基序。具有Homeodomain 的转录调控蛋白在胚胎发育和正常细胞分化的基因表达调节中有重要作用。
②锌指(Zinc finger)基序
由肽链的保守序列中的一对组氨酸加一对半胱氨酸(His2／Cys2)或 2 对半胱氨酸(cys2／cys2)
与一个锌离子形成配位键，这些氨基酸对之间的多肤链成环状突出并折迭成指形结构，多个指结构常串联重复。
锌指族转录因子以二聚体形式同DNA 上的顺式调控元件结合。
含锌指基序的转录因子：与GC 盒结合的SPl、类固醇激素受体家族，抑癌蛋白WT1 等。
③亮氨酸拉链(Leucine-Zipper)基序
由一段每隔6 个a a
就有一个Leu 的伸展肽链组成，这些周期性出现的Leu 都位于α—螺旋的同—侧面，因此两条均含Leu 拉链基序的蛋白质通过亮氨酸侧链的相互作用形成二聚体。
具有亮氨酸拉链基序的转录因子：原癌基因C-Jun/C-fos(APl 家族)
④螺旋-环-螺旋(Helix-loop-Helix，HLHt)基序．
由2 个α螺旋间隔一个非螺旋的环(loop)组成．
如原癌基因产物C-myc 及其结合蛋白Max．
含HLH 和Leu-拉链基序的转录因子的相似性：
①均至少含有一个α螺旋，其中都有一侧亲水面和一侧疏水面，因此这两种基序又称为两亲α—螺旋基序．
②两类转录因子均依靠α螺旋氨基端附近的碱性区（带正电荷aa 区）与DNA 结合，因此又分别称为bzip 和bHLH
（b=basic，碱性)
③两类转录因子活性都依赖于二聚体化
2、反式激活结构域(Transactivation domain) …
是反式作用因子的转录调控结构域，一般由DNA 结合结构域外的30-100 个aa 组成．
常见的反式激活域有以下几种：
①酸性α谨螺旋结构域(acidic a-Helix domain)如Jun；
②富含谷氨酰胺结构域(glutamine—rich domain)如SPl．
⑧富含脯氨酸的结构域(proline-rich domain)。
(二)反式作用因子家族
同一类序列特异性转录因子一般由基因家族编码，它们的蛋白结构同源，并结合特异的顺式调控元件，这些蛋白组成一个反式作用因子家族。
1．POU 家族
这一家族中都有一个独特的DNA 结合结构域-POIJ 结构域．
POU 结构域包括：
N 端POU 特异结构域(POUs)+C 端POU 同源异形结构域(POUH）．
POU 结构域是Pit1，octl／oct2 和unc86 等反式作用因子共有的保守区，因此这类蛋白统称
为POU 结构域蛋白。
2、类固醇激素受体家族
包括：糖皮质激素受体(GR），性激素受体(ER／AR)，甲状素激素受体(TR)，维甲酸受体(RAR)，VitD3 受体(VD3R)．
这些受体位于胞质或核内，通过激活基因转录起作用．这些受体的DNA 结合结构域都含有2 个Cys2／Cys2 型锌指基序，(分别由2 个外显子编码)，可识别DNA 上的激素应答元件(HRE：Hormone
responsive elements)
3、NF-κB 家族
包括RelA(P65)，P60，RelB，C-Rel，P50 五种．主要是P50／RelA 异二聚体．
胞质中P50／RelA•Iκ B抑制蛋白(失活状态)→释放Iκ B而被激活→易位至核内→
激活转录。
第三节转录后加工
在细胞核内对基因产物(mRNA 前体)进行各种修饰、剪接和编辑，使编码蛋白质的外显子部分连接成为一个连续的开放读框(open
reading frame，ORF)的过程称为转录后加工．
一、mRNA 前体加工的分子机制-
核内mRNA 前体—异质性核RNA(heterogeneous nuclear RNA，hnRNA)，
hnRNA 与蛋白质结合形成核异质性核糖核蛋白(hnRNP), mRNA 前体的加工在hnRNP 上进行．
(一)5?-端加帽(capping)
—mRNA 前体的5?-端加甲基化鸟苷(m7pppN)
5?端m7G 帽子结构的作用：
1．使mRNA 更稳定
2．增加蛋白质合成的效率
3．帽子结构对mRNA 前体的剪接是必需的
（二)3?-端接多聚腺苷(poly(A))
—在mRNA 前体3?端接上一个约200—250 个腺嘌呤核苷酸(A)的尾巴。
poly(A)尾巴的作用：
1．有利于mRNA 通过核孔；
2．参与稳定mRNA；
3．增强翻译效率。
（三)mRNA 前体的剪接
剪接(sp!icing)—剪除内含子，并将外显子连接
1．真核内含子的序列特征：
真核内含子总是由Gu 开始，以AG 结束，
内含子的5?-端剪接点(供位)和3?-端剪接点(受位)，以及内含子中的一个内部序列分支点（branchsite)是mRNA 前体正确剪接所必需的。
2．mRNA 前体的剪接机制
-剪接过程由二步连续的转酯反应组成．该过程中产生一个套索状中间体（lariat intermediate)，结果使2 个原先被分隔的外显子连接。
3．剪接体(spliceosome)
细胞核内的小分子RNA(一般≤300 碱基)—SnRNA（small nuclear RNA)，包括U1—U6 等。snRNA 与特异的蛋白质形成复合物-SnRNP．mRNA 前体与snRNP 形成的复合物—剪接体．mRNA 前体的剪接通过剪接体进行。
U2，U6，U4／U6 SnRNP 等是活性剪接体的主要成份．
(四)RNA 编辑(RNA editing)
是一种与mRNA 剪接不同的加工方式，指mRNA 在转录后因插入、缺失或核苷酸的替换，改变了DNA 模板来源的遗传信息，从而翻译出氨基酸序列不同的多种蛋白质，
RNA 编辑的例子：apo—B 的编辑：C→U 替换。
二、内含子的选择性剪接
选择性剪接(alternative
splicing)：在mRNA 前体的剪接过程中，参加剪接的外显子可以不按其线性次序剪接，内含
子也可以不被切除而保留，即一个外显子或内含子是否出现在成熟mRNA 中是可以选择的，这种剪接方式称为选择性剪接。此外，不同的启动子或不同的poly(A)加尾位点的选择，也可看作选择性剪接．
选择性剪接的主要方式。
由来自一个基因的mRNA 前体因选择性剪接而产生多种mRNA，并翻译出的不同蛋白质，称为同源异构体(isoform)．
>5%的人基因可在不同的组织或生理状态下，通过选择性剪接产生不同的蛋白质异构体，这是造成真接生物高度异质性的基础。
第四节翻译水平调控
一、翻译起始因子(IF)的调节：可逆磷酸化的作用．
1．eIF-4F 的磷酸化激活蛋白质的合成．
2．eIF-2 的磷酸化引起翻译起始受阻，降低蛋白质的生物合成水平
二、mRNA 结构与翻译控制，
（一)5?-UTR 结构
1、mRNA5?端m7G 帽有增强翻译水平的作用．
2、“上游AUG 密码子”(位于起始AUG 上游的其他AUG 密码子)的存在往往抑制下游开放读框的翻译效率．
3、起始AUG 旁侧序列对翻译效率的影响．Kozak 序列：GCCAUGG
(二)3?-UTR 结构
1．poly(A)尾增加翻译效率
2．富含UA 序列抑制翻译。
三、mRNA 稳定性与翻译控制
mRNA 稳定性主要取决于3?—UTR 结构
1．poly(A)尾增加mRNA 稳定性，
2．3?-UTR 中UA 序列导致mRNA 不稳定．
四、翻译后修饰
1、氨基酸侧链的共价修饰：乙酰化、磷酸化、糖基化（N-、O-）；
2、蛋白质前体的切割和成熟。Proprotein→protein.例：胰岛素的成熟。
五、蛋白质的分泌和胞内定位
信号肽：作为蛋白质定位信号的短肽序列，指导蛋白质运输到正确位置，定位结束后通常被特异的信号肽酶切除。
常见几种信号肽的特点：
1 内质网和细胞分泌信号：N-端约20 个左右氨基酸，疏水。
2 线粒体定位信号：N-端，一面为正电残基另一面为疏水残基的两亲α螺旋。
3 核定位信号：内部，常为碱性氨基酸加脯氨酸链两部分构成。
如SV40 T 抗原：pro-lys-lys-lys-Arg-lys(127-132)
第四章原癌基因与抑癌基因
第一节概述
病毒致癌作用，病毒癌基因Viral oncogene，V-onc).。
细咆癌基因(cellular oncogene ，c-onc)或原癌基因(protoncogene)
—正常细胞中与v-onc 同源的基因，
抑癌基因(tumor suppressor gene)：是指由于其存在和表达而抑制细胞癌变的基因。
原癌基因与抑癌基因生物学性质差异：
1．功能：抑癌基因在细胞生长中起负调节作用，抑制增殖、促进分化成熟与衰老，或引导多余细胞进入程序性细胞死亡(PCD)，原癌基因的作用则相反．
2．遗传方式：原癌基因是显性的，激活后即参与促进细胞增殖和癌变过程，而抑癌基因为隐性，只有发生纯合失活时才失去抑癌功能．
3．突变的细胞类型：抑癌基因突变不仅可发生在体细胞中，也可发生在生殖系(germ
1ine)细胞中，并通过其遗传突变，而原癌基因只在体细胞中产生突变。
第二节原癌基因
原癌基因是细胞的正常基因，其表达产物对细胞的生理功能极其重要，只有当原癌基因发生结构改变或过度表达时，才有可能导致细胞癌变。
一、原癌基因表达的特点：
l、正常细胞中原癌基因的表达水平一般较低，而且是受生长调节的，其表达主要有三个特点：①具有分化阶段特异性；②细胞类型特异性；
③细胞周期特异性。
2、肿瘤细胞中原癌基因的表达有2 个比较普遍和突出的特点：
①一些原癌基因具有高水平的表达成过度表达•
②原癌基因的表达程度和次序发生紊乱，不再具有细胞周期特异性。
3、细胞分化与原癌基因表达．
在分化过程中，与分化有关的原癌基因表达增加，而与细胞增殖有关的原癌基因表达受抑制。二，原癌基因的结构改变与其表达激活
(一)点突变
C--ras：12、13、61 位密码子点突变，存在于多种肿瘤．
C-ras 编码蛋白(21kD,P21)：RAS，是一种GTP 结合蛋白，具GTP 酶活性，是重要的信号转
导分子．
(二)染色体易位
染色体易位(translocation)：是染色体的一部分因断裂脱离，并与其它染色体联结的重排过程。因染色体易位造成的原癌基因激活：
1、因易位使原癌基因与另一基因形成融合基因，产生一个具有致癌活性的融合蛋白，
如t(9：22)使c-abl 与bcr 融合，产生一个致癌的P210 蛋白
2、因易位面使原癌基因表达失控，如t(8：14)易位使c-myc 表达失控．
(三)基因扩增
基因扩增(gene amplification)即基因拷贝数增加．
如HL-60 和其它白血病细胞，C-myc 扩增8-22 倍．其它：c-erb B，c-net．
(四)LTR 插入
LTR 是逆转录病毒基因组两端的长末端重复(long terminal repeat)，其中含有强启动子序列。
三、原癌基因产物的功能
大多数原癌基因编码的蛋白质都是复杂的细胞信号转导网络中的成份，在信号转导途径中有
着重要的作用．
原癌基因产物可作为：
1、生长因子，如sis(PDGF-β)，fgf 家族(int-2，csf-1 等)
2、生长因子受体(质膜)：具酪氨酸蛋白激酶活性，如neu，ht，met，erbB，trk，fms，ros-1 等。
3、非受体酪氨酸蛋白激酶(质膜／胞质)
如src 家族：src，syn，fyn，abl，lck，ros，yes，fes，ret 等．
4、丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶(胞质)：如raf，raf-1，mos，pim-1，
5、G 蛋白(质膜内侧)，具GTP 结合作用和GTP 酶活性，如ras 家族中的H-ras，K-ras，N-ras，
以及mel 和ral 等．
，
6．核内DNA 结合蛋白(转录因子)
如myc 家族，fos 家族，Jun 家族，ets 家族，rel，erb A(类固醇激素受体)
第三节抑癌基因
一、抑癌基因失活与杂合性丢失
抑癌基因为隐性癌基因，只有发生纯合失活时才对肿瘤形成起作用，通常的表现为抑癌基因的一个等位基因丢失，面另一个存留的等位基因发生突变(点突变、微缺失，重排等)，等位基因丢失常伴有抑癌基因相邻区域的杂合性丢失(Loss
of heterozygosity，LOH)，
LOS 指肿瘤中特定染色体上某种DNA 多态性标志(如RFLP，VNTR、STR 或SSCP 等)的等
位基因片段在同一患者中由正常组织基因组中的两种变为一种，即等位基因型由杂合子变为纯合子。
LOH 是肿瘤细胞中部分染色体区域缺失的表现。
二、抑癌基因产物的功能
抑癌基因p53
人P53 基因定位：17P13，11 个外显子编码393 个氨基酸。
p53 基因突变：存在于一半以上的人肿瘤中，多为点突变，主要发生于外显子5-8,如肝癌中的249 号密码子第3 碱基G→T
,与黄曲霉素B1 有关。
P53 蛋白结构和功能：
P53 蛋白为核内转录因子，包括①核心区的DNA 结合域；②N 端转录激活域；③C 端介导寡聚体化的结构域。
1、P53 的中央域识别和结合一个10bp 的启动子序列，可激活转录（通过N-端的反式激活
域）。P53 突变大多发生于中央DNA 结合域。
2、P53 也可结合DNA 损伤时产生的单链区域。
3、P53 是四聚体，寡聚化需要C-端域
4、P53 激活cki p21, 后者抑制细胞周期于G1 期.
5、p53 激活与负责辐身损伤的修复蛋白GADD45，维持基因组稳定性。
6、P53 诱导凋亡的机制尚不清楚。
7、正常情况下p53 以低水平存在，半衰期短。DNA 损伤稳定P53 并增加其转录活性
8、Mdm2 使p53 不稳定，易被降解，并能直接抑制其反式激活活性（Mdm2 是癌基因)
第五章信号转导
细胞外信号通过与细胞表面的受体相互作用转变为胞内信号并在细胞内传递的过程称为信号转导(signal transduction)
跨膜信号转导过程包括：
1，胞外信号被质膜上的特异性受体蛋白识别，受体被活化；
2，通过胞内信号转导物(蛋白激酶，第二信使等) 的相互作用传递信号；
3，信号导致效应物蛋白的活化，引发细胞应答（如激活核内转录因子，调节基因表达）。第一节胞内信使
细胞内信使(intracellular messenger)是具有信息传递作用的一些小分子，也称为第二信使(second
messengers)。
一、cAMP{环磷酸腺苷) ，
生成：腺苷酸环化酶催化A TP 生成cAMP;
代谢：cAMP 磷酸二酯酶水解cAMP 产生5?-AMP
功能：，
①激活蛋白激酶A
②抑制蛋白磷酸酯酶
二、cGMP(环磷酸鸟苷)
生成酶：鸟苷酸环化酶
代谢酶：cGMP 磷酸二酯酶
功能：①激活蛋白激酶G ②调控细胞膜离子通道
三、三磷酸肌醇（inositol triphosphate,IP3）和甘油二酯（diacyglycerol, DAG）
G-蛋白偶联受体激活磷脂酶Cβ生成IP3 及DAG
功能：
1、IP3：开放胞内钙库，激活Ca2+途径．
2、DAD：在Ca2+和磷脂酰丝氨酸存在下，激活蛋白激酶C，
四、钙离子
细胞内钙离子主要贮存于胞内钙库(如肌细胞的肌浆网，SR)和线粒体中。
细胞质膜两铡[Ca2+]跨膜梯度：细胞外液>>胞浆
胞浆内[Ca2+]的调节一通过(质膜和钙库膜上的)钙离子通道(进入)和钙泵(出)，
钙通道开放的条件：
①质膜或钙库膜去极化(可兴奋细胞)；
成②IP3 介导钙库膜上钙通道开放(任何细胞)．
钙泵激活．线粒体钙泵的作用．
Ca2+功能：与钙调蛋白(calmodulin, CaM)结合形成Ca2+•CaM 复合物：
①激活腺苷酸环化酶和磷酸二酯酶，②激活Ca2+•CaM 依赖蛋白激酶
钙通道阻断剂及其临床应用。
五、一氧化氮(NO)
NO 合成酶催化L-精氨酸生成NO 和胍氨酸
NO 合成酶(NOS)分类：①神经元型(nNOS)．
②内皮细胞型(ecNOS)
③诱导型（iNOS)
功能：激活乌苷酸环化酶，刺激cGMP 合成。
NO 的生理病理作用
第二节蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶
蛋白激酶(Protein
kinase，PK)催化蛋白质的含羟基氨基酸(丝／苏和酪)的侧链羟基形成磷酸酯（A TP 的γ磷酸基转移至氧）．
蛋白质磷酸酯酶(Protein phosphatase，PPase)催化磷酸蛋白的磷酸酯键水解而去磷酸化。
细胞内任何一种蛋白质的磷酸化状态是由蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶的两种相反酶活性之间的平衡决定的。
蛋白质可逆磷酸化的调节在信号转导过程中有重要作用，是细胞生命活动的调控中心。一、信号转导过程中的蛋白激酶
{一)丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶(Ser／Thr PK)
是一大类特异地催化蛋白质的丝氨酸和苏氨酸残基磷酸化的激酶家族，参与多种信号转导过程。
1、蛋白激酶A（PKA)
-cAMP 依赖性蛋白激酶.
PKA 由两个催化亚基C 和两个调节亚基R 所构成
PKA 参与cAMP 介导的转录水平调控。
PKA 的其它(下游)底物：①多种代谢相关酶②核内组蛋白和非组蛋白③膜蛋白等。
2、蛋白激酶C(PKC)
-Ca2+激活的／磷脂依赖性蛋白激酶．
调节：可被Ca2+，DAG 和磷脂酰丝氨酸激活．TPA(佛波酯)也可激活．
PKC 分子由N-端的调节区和C—端催化区（亲水的蛋白激酶结构域）所组成。
PKC 有多种亚型(>12 种)．
PKC 可激活：
①受体，如EGFR，胰岛素受体，细胞因子受体等。
②细胞骨架蛋白如Map，Tau．
②膜蛋白，如Na+-H+交换蛋白，Ca2+-ATP 酶等．
④核蛋白／转录因子，起始因子等，
⑤信号转导物如鸟苷酸环化酶，Raf-1 等．
3、Ca2+•钙调蛋白依赖性蛋白激酶(Cam-PK)
Cam-PKII 是一种多功能的蛋白激酶．
4。cGMP 依赖的蛋白激酶(PKG)
功能：调节胞内钙离子．
5，DNA 依赖的蛋白激酶(DNA-PK)
调节：结合游离DNA 片段后被激活，
底物：核内DNA 结合蛋白和转录因子，如SPl，Fos／Jun，Myc 和P53，
作用：①参与DNA 修复和重组,
②通过激活TF 调节基因表达;
③参与细胞周期的关卡机制(Checkpoint).
6．丝裂原激活的蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase，MAPK)
调节：MAPK 激酶-MAPKK（MEK）。
下游底物：核内转录因子如Myc，Jun，Ets 及其它胞内蛋白．
(二)酪氨酸蛋白激酶（Tyrosine protein kinase，TPK)
—特异地催化蛋白质的酪氨酸残基磷酸化，
蛋白质酪氨酸磷酸化在细胞生长，分化和转化的调节中起重要作用。
1、经典的src 激酶家族
原癌基因c-src 蛋白产物Src 是一种酪氨酸蛋白激酶，它有三个基本结构域：从C-端至N-- 端依次为SH1、SH2，SH3(SH=src
homolog)。
SHl 结构域：具酪氨酸激酶活性，
SH2 结构域：能识别并结合含磷酸化酪氨酸的短序列，
SH 结构域：通过脯氨酸和疏水性氨基酸残基与靶蛋白结合，
Src 家族：包括原癌基因src，yes，lyn，fyn，lck，blk，fgr，bcd 和yrk 编码蛋白，它们都有TPK 活性．共同参与细胞转化的信号转导过程．
SH2 结构域在信号转导途径中的重要作用：由于含SH2 结构域的信号转导分子可以识别和结合其他含磷酸化酪氨酸的蛋白，因此，通过蛋白质的酪氨酸磷酸化／去磷酸化调节可以决定信号转导分子的结合与解离，从而导致信号的开启或关闭。
2、JAK 嫩酶家族
JAK(Janus kinase)激酶家族包括Jakl，Jak2，Jak3，Tyk2 等，
Jak 激酶具有一个TPK 结构域和一个激酶样结构域，它们与Src 的TPk 激酶结构域具有同源
性，但JaK 激酶没有SH2，SH3 结构域；
Jak 激酶主要参与细胞因子的信号转导．
二、蛋白磷酸酯酶对磷酸化的调节
(一)、丝氨酸／苏氨酸蛋白磷酸酯酶
这类酶选择性地作用于含磷酸丝氨酸或磷酸苏氨酸残基的肽链，使之脱去磷酸基团并改变生物活性．
主要成员：PPl，PP2A，PP2B，PP2C，等．
PP2A，催化亚基及其功能．
(二)酪氨酸蛋白磷酸酯酶(PTPase)
蛋白质酪氨酸磷酸酯酶催化磷酸化酪氨酸残基的去磷酸化反应，与相应的酪氨酸蛋白激酶共同调节蛋白质的磷酸化水平，
PTPase 家族可分为2 类：
1、胞质型(非受体型)：小的可溶性蛋白，只有一个催化结构域，
特点是合有SH2 domain，如PTPlC，，PTPlB 等．，
2．受体型(PTPR)，是大的跨膜蛋白，特点是有2 个串联的胞浆催化结构域，如白细胞共同抗原CD45，
PTPlC(存在于造血细胞)：N 端2 个串联重复的SH2 结构域{识别Tyr•P，并指导蛋白
与蛋白结合)，C 端为磷酸酯酶催化结构域。
Jak 可作为PTP1C 底物．
PTPase 基因可能是肿瘤抑制基因．
第三节细胞膜受体介导的信号转导
一、受体的分类
质膜受体和胞内受体（胞浆或核受体，如类固醇激素受体）
膜受体的分类：
（一）G 蛋白耦联受体家族
又称为七次胯膜受体家族，特点是具有七段跨膜的α螺旋结构，本身无酶活性，胞浆侧肽链上有磷酸化位点，受体功能受磷酸化调节。成员；肾上腺素受体、多巴受体、视紫红蛋白等。
（二）酪氨酸激酶受体家族
受体本身胞浆侧有蛋白酪氨酸激酶活性，并且胞浆侧肽链上有自身磷酸化位点，配基结合后受体形成二聚体，二聚体中每个亚基可以磷酸化对应的另一亚基，从而启动信号转导。
这类受体主要包括多数生长因子受体(如IGF，EGF，PDGF，NGF，SCF，HGF 等生长因子的受体)，除胰岛素受体外，这类受体均由一条肽链组成．
(三)细胞因子受体家族
这类受体本身无TPK 活性，但其胞浆侧近膜部分有非受体酪氨酸蛋白激酶的结合位点，在配基与受体结合后，受体发生二聚化或寡聚化，并激活Jak 族蛋白酪氨酸激酶．
此类受体包括细胞因子受体以及生长激素、促乳素等受体．
细胞因子(cytokine)：是淋巴细胞和造血细胞产生的一大类对细胞生长和分化有调节作用的蛋白因子。包括干扰素(IFN)、白细胞介素(IL)、白血病抑制因子（LIF）、抑癌素M 等
(但IL-8R 为G 蛋白藕联受体)
(四)离子通道受体
与配基结合后构成离子通道，主要存在于神经突触，如乙酰胆碱(ACH)，5-HT 受体等。
二、G 蛋白介导的信号转导。
G 蛋白藕联受体的信号转导途径由三部分组成：
①细胞膜受体；②G 蛋白③效应物(effector)，其中G 蛋白将受体与效应物藕联．
G-蛋白(G-protein)是一种鸟苷酸结合蛋白，是由α、β和γ三个亚基组成的异三聚体，
多，β和γ亚基总是紧密结合在一起作为一个功能单位Gβγ
Gα亚基可分为Gs,Go,Gi,Gq 等，其活性可被霍乱毒素（CT）或百日咳毒素（PT）修饰。G-蛋白介导的信号转导的机制：G-蛋白循环。
G-pr 的效应物：离子通道、腺苷酸环化酶、磷脂酶C、磷脂酶A2 等
三、RAS-MAPK 信号转导途径
1、途径中的信号分子
Ras：具鸟苷酸结合活性的一种胞浆蛋白（与G-蛋白不同)
Ras 活性与其结合的鸟苷酸有关。
鸟苷酸交换因子（SOS）
Ras•GDP Ras•GTP
(失活) GTP 酶激活蛋白（GAP）（激活）
接头蛋白：生长因子受体结合蛋白Grb2，通过其SH2 结构域与Tyr 被磷酸化的受体结合，同时通过其SH3 域与具有pro 富集区的SOS 结合，并通过SOS 活化Ras 蛋白．
2、Ras-MAPK 途径：
生长因子→生长因子受体(具酪氨酸激酶活性)→含有SH2结构域的接头蛋白(如Grb2)→鸟苷酸交换因子SOS→Ras-GTP→Rafl→MAPKK（MEK）→MAPK→转录因子→调节基因表达。3．Ras-MAPK 途径的调节
①Ras-MAPK 途径中信号转导分子的突变(如Ras)和表达量的改变．
②其他信号转导途径的影响
cAMP-PKA：抑制Raf-1；PKC：活化Raf~l，
四、Jak-stat 途径：
STA T：信号转导物与转录激活剂（signal transducer and activators of
transcription）
至少6 种，分子量84-113KD，含一个SH2 结构域(羧端)，一个SH3 样结构域，并合有DNA
结合域，Stat 的激活依赖通过磷酸化形成二聚体．
Jak-Stat 途径：
细胞因子→ 受体( 二聚体化) → Jak → Stat → Stat 二聚体( 活化) → 易位至核，影响转
录．•
第六章细胞周期及其调节
细胞增殖(cell proliferation)与细胞生长分裂周期．
第一节细胞周期
一、细胞周期(cell cycle)：指亲代细胞分裂结束到子代细胞分裂结束所经历的过程，这个过程所需的时间称为细胞周期时间。
细胞周期由G1、S、G2 和M 期组成(G1、S 和G2 期又合称为分裂间期)。
G1(Gap1)期：DNA 合成前期(复制前期)，从上次有丝分裂完成到DNA 复制之前的阶段; S 期：DNA 复制期;
G2 期：合成后期，从DNA 复制完成至有丝分裂开始;
M 期：有丝分裂(Mitosis)期，包括核分裂和胞质分裂．
M 期结束后形成两个新的子细胞。
注：①不同细胞的细胞周期时间不同，一般S+G2+M 期较恒定，而G1 期变化较大，因而它
决定了细胞周期时间的长短；
②G1 期细胞有三种可能的趋向：1)进入S 期(即进入细胞周期)．2)处于静止期即Co 期(在一
定条件下可重新进入增殖周期)，3)分化、衰老、凋亡。
二、细胞周期中各时相的主要生化事件
细胞周期中每期都有其特殊功能，其中S 期的DNA 复制和M 期细胞核的有丝分裂是细胞周期中2 个最关键的过程：
1、G1 期：为DNA 复制作准备，G1 早期合成各种RNA、结构蛋白和酶等，细胞通过一个
限制点(restriction
point，R 点)后在G1 后期合成DNA 复制有关的蛋白和酶。
在开始合成DNA 之前有一个关卡(checkpoint)，检查染色体DNA 是否有损伤，如有则先要进行修复。
2、S 期：DNA(包栝端粒)的复制及组蛋白合成、核小体装配．S 期后每一染色体复制成2 个染色单体•
S→G2 期关卡：检查DNA 复制是否完成
3、G2 期：为有丝分裂作准备．有RNA 和非组蛋白合成。
4、M 期：染色体浓缩一仿锤体形成→染色体分离并移向细胞两端→染色体解聚，形成两个新核→胞质分裂。
第二节周期素依赖性蛋白激晦与细胞周期调节
周期素依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinases，CDKs)
通过使特异底物磷酸化调节细胞周期进行，其活性依赖与周期素(cyclin)结合形成复合物。
一、周期素-周期素依赖性蛋白激酶
周期素家族和周期素依赖蛋白激酶(CDK)家族．
细胞周期的不同时相表达不同cyc-CDK，这些cyc-CDK 复合物在各不同的细胞周期过渡点起作用．
1、G1 期cyc-CDK
G1 期表达的周期素为周期素C、D（D1、D2、D3)和E。
D 族周期素主要与CDK4(以及CDK2、CDK5、CDK6)结合成活性的蛋白激酶复合物，对细胞通过R 点(G0→G1 过渡有重要作用。
E 族周期素与CDK2 形成复合物。
cycE-CDK2 复合物调控G1→S 过渡。
2、S 期和M 朔cyc-CDKs
cycA-CDK2：驱动细胞通过S 期．
cycB-cdc2：驱动G2→M 期过渡(cdc2 或p34cdc2 即CDKl)．
二、周期素依赖性蛋白激酶抑制物
(cyclin-dependent kinase inhibitor，CKIs)
CKls 通过与CDKs 结合而抑制激酶活性，在细胞周期中起负调控作用．
CKIs 一般按其分子量命名．：
CKls 的分类：
1、Kip／Cip 家族：包括三种结构相关蛋白P21、P27、P57、特点是能结合并抑制大多数cyc-CDK 复合物；
P21(其它名称W AFI／CIPl 等)：可被P53 诱导转录，P21 抑制cycDl-CDK4 和cycE-CDK2，参与(由于DNA 损伤诱导的)P53 介导的细胞周期停止。
P27 参与血清去除、接触抑制和TGF-β等导致的细胞周期停止。
2、INK4 蛋白家族，包括四种相关蛋P16、P15、P18、P19．
特点：INK4 是cycD-CDK4 和cycD-CDK6 的专一性抑制剂，并与CDK 单体结合。
P15 可能参与TGF-β诱导的细胞周期停止于G1 期，?
三、细胞周期调节因子与肿瘤
1、cyclin 和CDKs 可能为原癌基因，其突变或过度表达可导致细胞转化。
2、CKI 可能是广谱的肿瘤抑制基因，其失活导致CDK 活性失调。
p16(MTSl)在肿瘤中突变特点及其作用。
第三节细胞周期的其它调节机制
生长因子、生长抑制因子、原癌基因(如，myc)和抑癌基因产物、蛋白质可逆磷酸化、蛋白水解等对细胞周期也有重要调节作用。
一、pRB ，•
抑癌蛋白，分子量106KD，其活性与磷峻化状态有关：
G0 及G1 早期：pRB 非磷酸化，与转录因子E2F-1 结合(抑制转录)
GF 等→cycD-CDK4 及cycE-CDK2 激活→pRb 磷酸化(失活)→释放E2F→DNA 合成基因表
达。
二、p53
抑癌蛋白(转录因子)，
在细胞周期中的作用：参与细胞周期关卡-DNA 损伤检查的关键蛋白(通过诱导P21 转录使细胞周期停止于G1 期)。
三、细胞因子对细胞周期的作用．
1．生长因子在细胞通郧点中的作用
GF→GFR→Ras-MAPK→fos/jun 等基因表达→cycD-CDK4 等表达→pRB 磷酸化→E2F 释放
→进入细胞增殖周期。
2、生长抑制因子与细胞周期停止
2015届本科毕业生免试攻读硕士学位研究生名单公示 根据《关于做好2015届本科毕业生的推荐免试攻读研究生工作的通知》（药大教函〔2014〕11号）和《中国药科大学推荐优秀应届本科毕业生免试攻读硕士学位研究生工作管理办法（试行）》（药大教〔2006〕135号）的文件精神，经有关院系按程序组织推荐、考核，推荐以下384名同学（名单见附件）获得中国药科大学免试攻读研究生的资格。 公示期：9月19日—9月22日。如有异议，请于9月22日17：00前将意见反馈至教务处。电话：86185207，联系人：彭老师，电子邮件：pjy @https://www.doczj.com/doc/532904743.html,。 中国药科大学教务处 2014年9月19日
附件： 院部系：药学院共 154 人 专业姓名专业姓名专业姓名药学（药学方向）刘熠药物制剂阮思达药学（药理方向）丁杨 药学（药学方向）李江硕药物制剂杜适药学（药理方向）官丽欢 药学（药学方向）赵沁媛药物制剂包圆圆药学（药理方向）李雪萍 药学（药学方向）何子豪药物制剂朱勇药学（药理方向）夏念 药学（药学方向）王欢药物制剂杨二爽药学（药理方向）朱良 药学（药学方向）潘微彤药物制剂耿天娇药学（药理方向）廖红卫 药学（药学方向）许丹丹药物制剂张翠婷药学（药理方向）李成园 药学（药学方向）顾慧琳药物制剂武佳玉药学（药理方向）向鹏君 药学（药学方向）叶思药物制剂袁盛霄药学(基础药学理科基地) 任欲然 药学（药学方向）孙丽涵药物制剂葛英药学(基础药学理科基地) 陈宇 药学（药学方向）赵丹丹药物制剂金雨婷药学(基础药学理科基地) 徐珩 药学（药学方向）姜蕊琪药物制剂冯敏药学(基础药学理科基地) 王遣 药学（药学方向）彭伟青临床药学杨霞药学(基础药学理科基地) 苏媛 药学（药学方向）吴珊湖临床药学陈湉傲药学(基础药学理科基地) 于瑶 药学（药学方向）张燚临床药学高菲菲药学(基础药学理科基地) 费禹翔 药学（药学方向）徐炯临床药学潘奕彤药学(基础药学理科基地) 戴爽 药学（药学方向）李天琪临床药学赵奕药学(基础药学理科基地) 陆冰榴 药学（药学方向）苏月临床药学任光辉药学(基础药学理科基地) 谷世寅 药学（药学方向）刘琳琳临床药学尹航药学(基础药学理科基地) 马晓菲 药学（药学方向）席佳越药物分析陆炜药学(基础药学理科基地) 吴荣洁 药学（药学方向）张束炜药物分析唐崇壮药学(基础药学理科基地) 周启蒙 药学（药学方向）赖嘉卓药物分析王赟药学(基础药学理科基地) 朱秋文 药学（药学方向）席颖药物分析薛亚茹药学(基础药学理科基地) 伍悦 药学（药学方向）黄昊哲药物分析李薇药学(基础药学理科基地) 徐畅 药学（药学方向）张倩倩药物分析乔洲药学(基础药学理科基地) 冯臻 药学（药学方向）闵红萍药物分析张倩颖药学(基础药学理科基地) 戴量 药学（药学方向）※朱书雷药物分析江咪药学(基础药学理科基地) 吴崇富 药学（药学方向）※余静药物分析高长醒药学(基础药学理科基地) 席婉琳 药物制剂梁海莎药物分析王璐药学(基础药学理科基地) 元子青云药物制剂郭李盈药物分析刘天娇药学(基础药学理科基地) 栾佳琪 药物制剂边琼药物分析王琦药学(基础药学理科基地) 周淑喜 药物制剂潘楚玥药物分析李少元药学(基础药学理科基地) 严勇 药物制剂陈柯戎药物分析秦智莹药学(基础药学理科基地) 陶怡 药物制剂韩悦药物分析郑梅药学(基础药学理科基地) 马宇 药物制剂周安维药物分析王瑞药学(基础药学理科基地) 薛夏琳 药物制剂何昀药物分析陈梦药学(基础药学理科基地) 林娜 药物制剂陈丹丹药物化学陈德恒药学(基础药学理科基地) 周先豪 药物制剂杨芸药物化学黎漓药学(基础药学理科基地) 周洁 药物制剂赵美慧药物化学朱婕药学(基础药学理科基地) 田春莉
中国药科大学药物分析期末试卷（B卷） 2016～2017学年第一学期 专业药学专业药物分析方向班级学号姓名 核分人： 一、选择题（共15分） (最佳选择题) 每题的备选答案中只有一个最佳答案(每题1分) 1. 中国药典主要内容包括：( ) A 正文、含量测定、索引 B 凡例、制剂、原料 C 鉴别、检查、含量测定 D 前言、正文、附录 E 凡例、正文、附录 2. 日本药局方与USP的正文内容均不包括( ) A.作用与用途 B.性状 C.含量规定 D.贮藏 E.鉴别 3. 按药典规定, 精密标定的滴定液(如氢氧化钠及其浓度)正确表示为( ) A.氢氧化钠滴定液(0.1520M) B.氢氧化钠滴定液 (0.1524mol/L) C 氢氧化钠滴定液(0.1520M/L) D. 0.1520M氢氧化钠滴定液 E. 0.1520mol/L盐酸滴定液 4、药物中氯化物杂质检查的一般意义在于它( ) A. 是有疗效的物质 B. 是对药物疗效有不利影响的物质 C.是对人体健康有害的物质 D. 是影响药物稳定性的物质 E.可以考核生产工艺和企业管理是否正常
5. Ag-DDC 法是用来检查 ( ) A. 氯化物 B. 硫酸盐 C. 硫化物 D. 砷盐 E. 重金属 6. 采用碘量法测定碘苯酯含量时，所用的方法为 ( ) A. 直接回流后测定法 B. 碱性还原后测定法 C. 干法破坏后测定法. D. 氧瓶燃烧后测定法 E. 双氧水氧化后测定法 7. 四环素类药物在碱性溶液中，C 环打开，生成 ( ) A. 异四环素 B. 差向四环素 C. 脱水四环素 D. 差向脱水四环素 E. 配位化合物 8. 甾体激素类药物鉴别的专属方法为 ( ) A. UV B. GC C. IR D. 异烟肼法 E. 与浓硫酸反应 9. 药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是 ( ) A ．维生素A B ．维生素B 1 C ．维生素C D ．维生素D 10. 中国药典2000年版测定维生素E 含量的内标物为 ( ) A.正二十八烷 B.正三十烷 C.正三十二烷 D.正三十烷 E.十六酸十六醇酯 11. 加入氨制硝酸银后能产生银镜反应的药物是 ( ) A.地西泮 B.阿司匹林 C.异烟肼 D.苯佐卡因 E.苯巴比妥 12. 坂口(Sakaguchi)反应可用于鉴别的药物为 ( ) A. 雌激素 B. 链霉素 C. 维生素B 1 D. 皮质激素 E. 维生素C 13. 维生素A 采用紫外分光光度法测定含量，计算公式中换算因子为 ( ) A ．效价(IU/g) B ．效价(g/IU) C ．(g/IU)1% cm 1效价E D ．1% cm 1(IU/g)E 效价 E ．(IU/g)1% cm 1效价E
中国药科大学药物分析期末试卷（A卷） 2007-2008学年第一学期 专业药学专业药物分析方向班级学号姓名 人： 得分评卷人一、填空题（每空0.5分，共15分） 1、非盐酸盐药物在生产过程中也可能引入的氯离子，氯离子对人体_______，但它能反映药物的_______及生产过程_______，因此氯化物常作为_______杂质检查。药物中的微量氯化物检查的条件是在______比色管中，在_________条件下与__________反应，生成氯化银胶体微粒而显白色浑浊，与一定量的_____________溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较，判定供试品中氯化物是否符合________规定。比较时，比色管同置______背景上，从比色管__________观察，比较，即得。氯化物浓度以50ml中含_________μg的Cl-为宜，此范围内氯化物所显浑浊度明显，便于比较。供试品溶液如不澄清，应________；如带颜色，可采用____________解决。 2、药品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应检测要求。建立药品质量标准时分析方法需经验证。验证内容有：_________、__________、__________、__________、_________、 _________、_________、_________。HPLC法进行药物分析测定时系统适用性试验的目的是________________；系统适用性试验的常见内容有：_________、__________、___________、___________。 3、砷盐的检查时，有机结合的砷通常须经 ______________________处理：取规定量的供试品与_________或氢氧化钙、硝酸镁共热转化为_________后，依法检查。操作中应注意炽灼温度不宜超过700℃。
第一大题：命名题 第二章 1 CH 3CH(C 2H 5)CH(CH 3)CH 2CH 32 (CH 3)2CHCH 2CH(CH 3)2 3 CH 3CH 2CHCH(CH 3)2 CH(CH 3)2 4 CH 3CH 2CH 2CHCH 2CH 2CHCH 3 5 (C 2H 5)4C 6 CH 3CH 2CH 2CHCHCH 2CH 2CH 2CH 3 CH(CH 3)2 CH 2CH 2CH 2CH 2CH 3 7 CH 3 CH 3CH 2CCH 3 CH 3 8 9 10 Cl 第三章 1 C C (CH 3)2CH CH 3CH 2 H 2CH 2CH 32 C C H C H 3CH 3 CH 2Cl 3 C C CH 3CH 2 H H CH 2CH 2CH 3 4 (CH 3)3CCH CH 2 第四章
1 CH CH 2Br H C 2H 5 2 H Cl C 2H 5 CH 3H CH 2Cl 3 CH 3 Cl H Br C 2H 5 H 4 CH 3 H H H Cl Br Br C 2H 5 1 CH 3CHCHCH 2CH 2CH 3 Br CH 2Cl 2 CH 2CH 2CHCHCHBr 2Br CH 3 CH 3 3 (CH 3)2CHCCH(CH 3)2 CH 3 Cl 4 CH 3 Cl Cl Cl CH 3H 5 Br H 3 6 CH 3 H H Cl Br CH 2CH 2CH 3' 第五章
1 C CH 2CH 2CH 2OH 2 CH 2CHCHCHCH 3 CH 2CH 2CH 3 OH 3 H H OH CH 2CH 3 4 CH 3 OH OH H H CH 2CH 3]5 OCH 2CH CH 2 CH 3 CH 3 6 OH CH 3 CH 3 OH H 5C 2 7 CH 3CH CHCHCHCH 2CH 3 2OH Cl CH 3CH 3 8 CH 2CH 2CHCH 2CH 3OH CH 2OH 1 Cl CH 3CH 3 2 H 3C H 33 CH 3 CH 3 4CH 3 第六章
糖的化学 一、填空题 1．糖类是具有__多羰基醛或多羟基酮___结构的一大类化合物。根据其分子大小可分为____单糖___、_寡糖_____和_多糖____三大类。 2．判断一个糖的D—型和L—型是以__离羰基最远的一个不对称___碳原子上羟基的位置作依据。 3．糖类物质的主要生物学作用为__主要能源物质___、__结构功能___、_多方面的生物活性和功能____。4．糖苷是指糖的___半缩醛或半缩酮羟基__和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛(或缩酮)等形式的化合物。5．蔗糖是由一分子__葡萄糖___和一分子_果糖____组成，它们之间通过_α，β-1，2_糖苷键相连。 6．麦芽糖是由两分子_葡萄糖____组成，它们之间通过__ a-1，4___糖苷键相连。 7．乳糖是由一分子___葡萄糖__和一分子_半乳糖____组成，它们之间通过___β—1，4_糖苷键相连。 8．糖原和支链淀粉结构上很相似，都由许多___葡萄糖__组成，它们之间通过_α—1，4和α—1，6____ _二种糖苷键相连。二者在结构上的主要差别在于糖原分子比支链淀粉___分支多__、链短_____和_结构更紧密____。 9．纤维素是由___葡萄糖__组成，它们之间通过β—1，4糖苷键相连。 12．人血液中含量最丰富的糖是___葡萄糖糖原__，肝脏中含量最丰富的糖是__肝糖原___，肌肉中含量最丰富的糖是__肌糖原___。 13．糖胺聚糖是一类含_糖醛酸____和__氨基已糖及其衍生物___的杂多糖，其代表性化合物有_透明质酸__、_肝素_和_硫酸软骨素等。----粘多糖 14．肽聚糖的基本结构是以_ N—乙酰—D—葡糖胺____与_ N—乙酰胞壁酸____组成的多糖链为骨干，并与＿__四__肽连接而成的杂多糖。 15．常用定量测定还原糖的试剂为_菲林____试剂和__班乃德___试剂。 16．蛋白聚糖是由__蛋白质___和_糖胺聚糖____共价结合形成的复合物。 19．脂多糖一般由_外层低聚糖链____、_核心多糖____和__脂质___三部分组成。 20．糖肽的主要连接键有__O-糖苷键___和_N-糖苷键 21．直链淀粉遇碘呈__蓝___色，支链淀粉遇碘呈_紫红____色，糖原遇碘呈_红____色。 二、是非题 1．D-葡萄糖的对映体为L-葡萄糖，前者存在于自然界。 2．人体不仅能利用D-葡萄糖而且不能利用L-葡萄糖。 3．同一种单糖的。α型和β型是异头体(anomer)，它们仅仅是异头碳原子上的构型不同 4．糖的变旋现象比旋光度改变 6．由于酮类无还原性，所以酮糖亦无还原性。 7．果糖是左旋的，因此它属于L－构型。 8，D-葡萄糖，D-甘露糖和D-果糖生成同一种糖脎。--差向异构 9．葡萄糖分子中有醛基，它和一般的醛类一样，能和希夫(Schiff)试剂反应。成半缩醛 10．糖原、淀粉和纤维素分子中都有一个还原端，所以它们都有还原性。分子太大不显还原性，多糖都是非还原性糖 11．糖链的合成无模板，糖基的顺序由基因编码的转移酶决定。 12．从热力学上讲，葡萄糖的椅式构象比船式构象更稳定。 13．肽聚糖分子中不仅有L-型氨基酸，而且还有D-型氨基酸。 14．一切有旋光性的糖都有变旋现象。有α和β异构体的糖才有变旋现象 15．醛式葡萄糖变成环状后无还原性。半缩醛羟基，仍有还原性 16．多糖是相对分子质量不均一的生物高分子。 17．α淀粉酶和β淀粉酶的区别在于α淀粉酶水解α－1，4糖苷键，β—淀粉酶从链的非还原端开始，每次从淀粉分子上水解下两个葡萄糖基，产物为极限糊精和麦芽糖。
《药物色谱分析》复习重点 第三章 气相色谱法 1. 了解气相色谱法的特点及分类； 2. 气相色谱的固定液 （1）对固定液的要求 （2）样品组分与固定液之间的分子作用力的种类 （3）固定液的极性与分离特性评价，主要掌握Rohrschneider 常数，了解McReynolds 常数 （4）固定液的分类，掌握几种常见固定液如聚二甲基硅氧烷类、聚苯基甲基硅氧烷类、氰烷基聚硅氧烷类和聚乙二醇的特点及使用分析对象。 （5）气相色谱中如何选择固定液 3、气-液色谱柱气相色谱法 （1）气-液色谱柱气相色谱法中对担体的要求； （2）使用前担体的表面处理的原因及方法，其中担体表面处理时釉化的目的是什么？ （3）填充柱的老化的目的、方法及注意事项 4.气-固色谱与气-液色谱的特点比较 5. 毛毛细细管管柱柱气气相相色色谱谱法法 （1）毛细管柱的柱管使用聚酰亚胺涂层的原因及作用 （2）交联毛细管柱的特点及常用交联方法，毛细管气相色谱柱交联引发剂主要有哪些？
（3）毛细管柱进样方式，掌握分流及吹尾气目的。 （4）分流比及测定方法；线性分流与非线性分流及影响样品失真的因素。 （5）分流进样法的优缺点。 第四章气相色谱检测器 气相色谱检测器的种类及其原理、性能特点（主要FID、 ECD、NPD） 第五章气相色谱相关技术 1.程序升温色谱法 （1）特点 （2）主要方式及适用对象 2.顶空气相色谱法 （1）特点、分类 （2）静态顶空分析的原理及影响静态顶空气相色谱分析的因素 （3）动态顶空分析的原理及动态顶空法操作条件选择 第六章GC在药物分析中的应用 1. 如何判断待测物是否可以直接进行GC分析 2. 哪些化合物经过衍生化后可以进行GC分析
选择题Ⅰ： 1. 下面四个同分异构体中哪一种沸点最高? (A) 己烷 (B) 2-甲基戊烷 (C) 2,3-二甲基丁烷 (D) 2,2-二甲基丁烷 2. 下列环烷烃中加氢开环最容易的是: (A) 环丙烷 (B) 环丁烷 (C) 环戊烷 (D) 环己烷 3. 光照下,烷烃卤代反应的机理是通过哪一种中间体进行的? (A) 碳正离子 (B) 自由基 (C) 碳正离子 (D) 协同反应,无中间体 4. 1-甲基-4-异丙基环己烷有几种异构体? (A) 2种 (B) 3种 (C) 4种 (D) 5种 5. 在下列哪种条件下能发生甲烷氯化反应? (A) 甲烷与氯气在室温下混合 (B) 先将氯气用光照射再迅速与甲烷混合 (C) 甲烷用光照射,在黑暗中与氯气混合 (D) 甲烷与氯气均在黑暗中混合 6. 下列一对化合物是什么异构体? (A) 非对映体 (B) 构型异构体 (C) 对映体 (D) 构造异构体 7. 与 相互关系是: (A) 对映体 (B) 非对映体 (C) 构型异构体 (D) 构造异构体 8. 下列化合物中哪些可能有顺反异构体? (A) CHCl =CHCl (B) CH 2=CCl 2 (C) 1-戊烯 (D) 2-甲基-2-丁烯 9．构造式为CH 3CHClCH =CHCH 3 的立体异构体数目是: (A) 2种 (B) 4种 (C) 3种 (D) 1种 10．下列化合物中哪些可能有E ,Z 异构体? (A) 2-甲基-2-丁烯 (B) 2,3-二甲基-2-丁烯 (C) 2-甲基-1-丁烯 (D) 2-戊烯 11．实验室中常用Br 2的CCl 4溶液鉴定烯键,其反应历程是: (A) 亲电加成反应 (B) 自由基加成 (C) 协同反应 (D) 亲电取代反应 12．(CH 3)2C =CH 2: (A) (CH 3)2CHCH 2Cl (B) (CH 3)2CClCH 3 (C) CH 3CH 2CH 2CH 2Cl (D) CH 3CHClCH 2CH 3 13． CF 3CH =CH 2: (A) CF 3CHClCH 3 (B) CF 3CH 2CH 2Cl (C) CF 3CHClCH 3 与 CF 3CH 2CH 2Cl 相差不多 (D) 不能反应 14．CH 3CH =CH 2 + Cl 2 + H 2: (A) CH 3CHClCH 2Cl + CH 3CHClCH 2OH (B) CH 3CHOHCH 2Cl + CH 3CHClCH 2Cl (C) CH 3CHClCH 3 + CH 3CHClCH 2OH (D) CH 3CHClCH 2Cl 15．某烯烃经臭氧化和还原水解后只得 CH 3COCH 3,该烯烃为: (A) (CH 3)2C =CHCH 3 (B) CH 3CH =CH 2 (C) (CH 3)2C =C(CH 3)2 (D) (CH 3)2C =CH 2 16．CH 3CH =CHCH 2CH =CHCF 3 + Br 2 (1 mol) 主要产物为: (A) CH 3CHBrCHBrCH 2CH =CHCF 3 (B) CH 3CH =CHCH 2CHBrCHBrCF 3 (C) CH 3CHBrCH =CHCH 2CHBrCF 3 (D) CH 3CHBrCH =CHCHBrCH 2CF 3 17．异戊二烯经臭氧化,在锌存在下水解,可得到哪一种产物? (A) HCHO + OHCCH 2CHO (B) HCHO + HOOCCH 2COOH (C) HCHO + CH 3COCHO (D) CH 3COCHO + CO 2 + H 2O 18．下列化合物中哪一个能与顺丁烯二酸酐反应,生成固体产物? (A) 萘 (B) CH 3CH 2CH =CH 2 (C) (D) 对二甲苯 19．二氯丙烷可能的异构体数目有多少? (A) 2 (B) 4 (C) 6 (D) 5 H CH 3CH 3 H H CH 3CH 3CH 3CH 3H CH H CH 3
选择题出题点： 20种氨基酸各自的特点和碱基 蛋白质，核酸变性的特点 测定蛋白质含量与分子量的方法原理 各类连接键，结构稳定的键 二级结构特点 PI的计算，氨基酸解离分析 分析方法原理：凝胶层析，电泳，离子交换等 单抗，多糖，疾病原因 酶活力，比活力，Km，(非)竞争性抑制动力学效应 代谢：限速酶，场所，转运，重要联系点代谢物 抑制剂，呼吸链，限速酶 过程：EMP,TCA,尿素循环，β氧化 血浆脂蛋白种类作用 名词解释 蛋白质等电点蛋白质变性核酸的增/减色效应 Tm α螺旋β折叠DNA双螺旋结 构tRNA的三叶草结构碱基互补原则 蛋白质的结构域蛋白质的超二级结构米氏常数米氏方程变构酶变构效酶活 力固定化酶同工酶酶的活性中心 必需基团酶的竞争性抑制生物氧化呼吸链氧化磷酸化底物水平磷酸化粘多 糖TCA循环乳酸循环糖异生作用 酮体必需脂肪酸必需氨基酸β氧化尿素循环转氨基作用联合脱氨基作用一碳单位半保留复制遗传中心法则 遗传密码冈崎片断转录逆转录基因表达核蛋白体循环抗代谢物基因工程药物生物技术药物生物药物 单克隆抗体基因文库cDNA文库核酸的杂交分子病基因敲除DNA芯片核酸复性蛋白质印迹亲和层析 离子交换层析凝胶过滤 问答（有些和名解重复） 蛋白质的二级结构 DNA的双螺旋结构 固定化酶的概念制备方法及优点 β氧化与脂肪酸合成的比较 乙酰CoA的来源去路及在细胞内的定位 青霉素的抗菌机制 磺胺药与抗菌增效剂的抗菌机制 现代生物技术的定义主要内容及在新药研究开发中的应用 哪些生化研究成果应用于新药设计研究 酶催化高效率的因素及基本原理 糖在体内主要代谢途径及生理意义 糖酵解与糖异生的比较 酮体的生成利用及意义 尿素循环过程，特点及意义 大肠杆菌DNA复制过程 RNA转录过程 重组DNA技术概念过程及应用
中国药科大学药物化学考研药物化学药物化学 精编 Document number：WTT-LKK-GBB-08921-EIGG-22986
中国药科大学2006年药物化学期末试卷 一、名词解释（每小题4分，共12分） 1.抗高血压药 2.抗代谢抗肿瘤药 3.四环素类抗生素 二、填空题(每空1分，共16分) 1.卡托普利的结构式为_____化学名是_____其主要用途为 __________。 2.镇静催眠药按化学结构的不同,可分为_____类_____类和 其他类型。 3.对乙酰氨基酚的结构式是_____。 4.吗啡分子结构中因具有_____及_____,因而显酸碱两性。 5.盐酸麻黄碱的主要用途是_____。 6.顺铂临床用于__________。 7.环磷酰胺临床使用的剂型为_____。 8.林可霉素的主要用途是__________。 的结构式为_____。 10.孕甾烷的基本结构式是_____。 11.对氨基水杨酸钠临床用途是_____。 12.克霉唑的临床用途为_____。
三、单项选择题(在每小题的五个备选答案中，选出一个正 确答案，并将正确答案的序号填在题干的括号内。每小题2分，共36分) 1.可与吡啶-硫酸铜试液作用显绿色的药物是( )。 A.苯巴比妥 B.苯妥英钠 C.硫喷妥钠 D.氯丙嗪 E.安定 2.下列药物中哪一个具有吩噻嗪环结构( ) A.氨甲丙二酯 B.舒宁 C.苯巴比妥 D.氯丙嗪 E.安定 3.苯巴比妥的化学名是( )。 乙基-6-苯基-2，4，6-嘧啶三酮 氯-5-甲基-1-甲酰胺 乙基-5-苯基-2，4，6-（1H，3H，5H）嘧啶三酮 氯-5-甲基-1-哌嗪乙醇 ，5-二苯基-2，4-咪唑烷二酮钠盐 4.在阿司匹林合成中产生的可引起过敏反应的副产物是 ( )。 A.乙酰水杨酸酐 B.吲哚 C.苯酚 D.水杨酸苯酯
中国药科大学研究生入学考试药物分析复试题汇总 A.10年药分复试 共十道大题，考3h 1.为什么要进行砷盐检查？砷盐检查方法有哪些及装置 2.复方。。包括丹参、冰片、三七，及各自特征成分及如何进行质量控制？含量测定 3.光谱题：苯佐卡因，画出氢谱和碳谱 二维谱中HMBC、HMQC 、NOESY、ROESY 名词解释 4.色谱分析，确定所用色谱分析方法（多为书中例题)，考过 二甲双胍、硝酸异山梨酯、好像还有个多糖 5.质谱离子化方法有哪些，各自特点，有哪些质谱仪（）如离子肼 6.好像还有个关于青霉素杂质的检查 实验与专外 1.配流动相 2.画下FID检测器及气化室 3.阿司匹林分析挑错，水解后剩余滴定法。 4.英文翻译（）基本都为药物分析方向期末考试所用专外书上内容 B.08年药分复试 一、单选 二、多选 三、问答题 1.盐酸伪麻黄碱的质量控制项目应有哪些，各自目的，并各自简述一种合适的控制方法及简要步骤、 2.抗生素类药物的分类，其含量测定方法与化学分析方法有何区别 3.按色谱条件选对应物质 条件一：ODS柱...，流动相：庚烷磺酸钠的磷酸缓溶液：水（）2:98） 条件二：ODS柱....，流动相：甲醇：水：冰醋酸，254nm; 条件三：ODS柱....，流动相：乙腈：水 （72:28）; 条件四：ODS柱....，流动相：甲醇：水（20:80）； 物质：柴胡皂苷，二氟尼柳，醋酸甲地孕酮，CH3N(CH3)2RCOO 4.(1)盐酸普萘洛尔含量测定方法？方程式？滴定度
（2）用ODS柱时拖尾的原因？解决方法？ （3）盐酸普萘洛尔，...普萘洛尔,.......普萘洛尔出峰顺序。 5.尼可刹米 （1） （2）IR峰归属，振动形式，3032cm 1,2975,1685,1589,1570,1465,1210,1120,711(3)NMR峰归属 偶合裂分原因，图中化学位移：9.0；7.0；3.0；1.0；0； （4）C13谱：10个峰，a j,J=0 指出对应C，及原因 （5）质谱：m/z 178;177;163;150;28;51;78;106（基峰），裂解方程式 6.什么是GC衍生化？特点（目的）？写出三种衍生化方程式 7.系统适应性试验包括？各自标准。计算公式 8.（1）上海华联制药厂 （2）欣弗 （3）梅花K （4）齐二药 以上各自事件的药物？原因，谈谈对药物质量控制的具体措施。 C.07年药物分析复试题 一、选择题（20'） 二、克伦特罗相关问题（60’） 三、克伦特罗的作用（0结构式已给出） 请推测克伦特罗的紫外吸收的特征峰位？ 请画出克伦特罗的大概的H NMR和C NMR 请推测克伦特罗的红外光谱的主要峰归属 请推测克伦特罗的主要质谱裂解方式 三、其他（70） 制剂分析的检查项目 多种药物色谱条件的选择？包括柠檬烯、龙脑、依那普利、VE以及二甲双胍。只需写出是采用GC还是LC，以及检测方式。为什么 色谱适应性考察项目有哪些 还不全，就记得这么多了10年药分复试 共十道大题，考3h 1.为什么要进行砷盐检查？砷盐检查方法有哪些及装置 2.复方。。包括丹参、冰片、三七，及各自特征成分及如何进行质量控制？含量测定 3.光谱题：苯佐卡因，画出氢谱和碳谱 二维谱中HMBC、HMQC
第一章测试 1 【单选题】(10分) 现在的有机化合物指的是含（）的化合物，大部分还含有氢和其它一些常见元素。 A. O B. N C. C D. S 2 【单选题】(10分) 以下哪条是常见有机化合物的特性： A. 熔点高 B. 极性大 C. 水溶性好 D. 反应速度慢
3 【单选题】(10分) 以下哪个分子中存在非极性共价键： A. N2 B. H2O C. NH4+ D. NaCl 4 【单选题】(10分) 下列哪个分子是非极性分子： A. 氯仿 B. 四氯化碳 C. 水 D. 氨
5 【单选题】(10分) 决定一类化合物典型性质的原子团被称为： A. 取代基 B. 定位基 C. 官能团 D. 配基 6 【单选题】(10分) 碳原子基态电子排布为： A. 1s42s12p1 B. 1s22s22p2 C. 1s22s02p4 D.
1s22s42p0 7 【单选题】(10分) 烷烃中，碳原子采取的杂化形态是： A. sp B. 不杂化 C. sp2 D. sp3 8 【单选题】(10分) 有机化合物中，碳原子一般为： A. 二价 B. 不定 C. 三价
D. 四价 9 【单选题】(10分) 烷烃分子中，各共价键之间的夹角一般最接近于: A. 180° B. 109.5° C. 90° D. 120° 10 【判断题】(10分) 共价键的键长越长，键能越高，键越牢固。 A. 错 B. 对
第二章测试1 【单选题】(10分) A. 碳架异构 B. 官能团异构 C. 位置异构 D. 互变异构 2 【单选题】(10分) A. 2,4,4-三甲基己烷
一、选择题（单项选择题） 1．下列哪一个化合物的名称与所给出的维生素名称不符? ( ) A．α－生育酚一维生素E B．硫胺素一维生素B， C．抗坏血酸一维生素C D．氰钴胺素一维生素B12 E．吡哆醛一维生素B2 2．下列哪一个辅酶不是来自维生素 ( ) A．CoQ B．FAD C．NAD＋ D.pLp E．Tpp 3．分子中具有醌式结构的是 ( ) A．维生素A B．维生素B1 C．维生素C D．维生素E E．维生素K 4．具有抗氧化作用的脂溶性维生素是 ( ) A．维生素C B．维生素E C．维生素A D．维生素B1 E．维生素D 5．下列维生素中含有噻唑环的是 ( ) 丸维生素E2 B．维生素B1 C．维生素PP D．叶酸 E．维生素B7 6．成人及儿童因缺乏哪种维生素而导致干眼病? ( ) A．维生素]35 B．叶酸 C．维生素A D.维生素B3 E．维生素B6 7．下列哪种维生素可转化为甲基和甲酰基载体的辅酶? ( ) A. 硫胺素 B．叶酸 C.维生素A D．泛酸 E．核黄素 8．下列关于维生素C结构和性质的叙述，哪一项是错误的? ( ) A. 维生素C是含六个碳原子骨架的化合物 B．维生素C具有酸性是因为一COOH释放质子 C．还原型维生素C为烯醇式，而氧化型维生素C为酮式 D．还原型维生素C的元素组成为C：H：O=6：8：6 E．维生素C是一种内酯化合物 9．下列哪一种维生素或辅酶不含环状结构 ( ) A.烟酸 B．四氢叶酸 C．维生素D3 D．泛酸 E．生物素 10．下列哪一种辅酶能与焦磷酸硫胺素一起在丙酮酸转变为乙酰辅酶A的过程中起重要作用 ( ) A．维生素B3 B‘硫辛酸 C．维生素A D．维生素C E．NADP 11．泛酸是CoA的组成成分，后者在糖、脂和蛋白质代谢中起 ( ) A．脱羧作用 B．酰基转移作用 C.脱氢作用 D．还原作用 E．氧化作用12．下列哪个不是丙酮酸脱氢酶系的辅助因子? ( ) A．pLp B．Tpp C．硫辛酸 D．FAD E．CoA 13．下列哪一个反应需要生物素 ( ) A．羟化作用 B．羧化作用 C．脱羧作用 D．脱水作用 E．脱氨基作用 14．转氨酶的辅酶是下列化合物中的哪一个? ( ) A. 尼克酸 B．泛酸 C．硫胺素 D．磷酸吡哆醛 E．核黄素 15．下列哪一种化合物由谷氨酸、对氨基苯甲酸和蝶呤啶组成 ( ) A. 维生素B12 B．氰钴胺素 C．叶酸 D．生物素 E．CoA 16．除CoA可以作为酰基载体之外，下列哪种物质也可以传递乙酰基 ( ) A. 生物素 B．叶酸 C. Tpp D．硫辛酸 E．维生素B12 17．来自于食物的抗生物素蛋白不影响哪一种酶的催化反应? ( ) A．琥珀酸脱氢酶 B．丙酰辅酶A羧化酶
中国药科大学药物化学试卷（B） 一、根据下列药物的结构，写出其药名及主要临床用途（20分）二、写出下列药物的化学结构及临床主要用途（20分，每题2分） 1、阿苯达唑 2、棒酸3、磺胺醋酰钠 4、甲氧苄啶5、诺氟沙星 6、炔诺酮 7、氟康唑 8、氯霉素9、氨苄青霉素 10、顺铂三、合成题（20分） 1、益康唑 2、己烯雌酚 3、氟尿嘧啶 4、环丙沙星 四、写出下列词头（尾）的药物作用靶位及主要临床用途（10分） 作用靶位主要临床用途（1） cef- ______________ ______________ （2） -conazole ______________ _______ ________ （3） -cillin _______________ _______________ （4） -oxacin _______________ _______________ （5）–vir _______________ ______________ 五、（10分） 1、写出下列药物不稳定性的分解产物 2、写出下列药物的代谢产物 六、简答题（20分） 1、试述磺胺类药物及其抗菌增效剂的作用机制。 2、试解释氨基糖甙类抗生素的耐药机制。 3、奥格门汀有哪两种药物组成？说明其合用理由。 4、为什么维生素C在生产贮存过程中易产生变色？ 2002—2003学年第二学期（2000级） 一、解释下列名词：（20分） 1、前药（Prodrug） 2、软药（Softdrug） 3、硬药（Harddrug） 4、生物电子等排（Bioisosterism） 二、巴比妥类药物5位取代基结构类型的不同对药物体内代谢和药物的作用产生较大影响，请解释之。并从药物设计的角度可得到什么启发？（10分） 三、药物的活性构象对药物的生物活性影响较大，以三环类抗精神病药物为例说明药物活性构象研究的基本原理（10分）。四、通过拟肾上腺素药物沙丁胺醇的发现，讨论该类药物设计的主要原理。（10分）。五、局部麻醉药利多卡因在临床应用时会产生中枢神经系统的副作用，解释其原因（10分）六、以镇痛药物和局部麻醉药物为例，总结由天然活性成分出发进行新药研究的基本原理和方法（15分） 七、手性药物的对映异构体之间活性的差异主要有那几种类型?根据已学的知识举例说明.（10分）。八、给出下列药物合理的合成路线（15分） 盐酸普鲁卡因枸橼酸芬太尼三唑仑 药物化学期末考试试卷理科基地班 一、试从“肾素－血管紧张素－醛固酮”系统的原理出发，简述作用于该系统抗高血压药物的结构类型，并举例说明。（20分）二、以合成抗菌药物喹诺酮药物的发现过程为例，认识定量构效关系（QSAR）在新药发现和研究中的作用(不需要写详细过程)。（20分）三、以H-2受体拮抗剂抗溃疡药物的研究为例，思考如何在新药研究中做到“me-too, me-better”（20分）四、什么是类型衍化方法?举例说明其在新药研究中的意义和作用?（10分）。五、简述核苷类抗病毒药物设计和研究的思路（10分）。六、给出下列药物合理的合成路线（20
中国药科大学 药物分析 期末试卷（A 卷） 学年第一学期 一、选择题（共50分） (一)A 型题(最佳选择题) 每题的备选答案中只有一个最佳答案(每题1分) 1．硫喷妥钠在吡啶溶液中可与铜盐反应，所呈的颜色为 ( ) A ．紫色 B ．红色 C ．绿色 D ．玫瑰红色 E ．紫堇色 2．雌激素的特有反应为 ( ) A ．麦芽酚反应 B ．硅钨酸反应 C ．硫色素反应 D ．Kober 反应 E ．坂口反应 3．四环素类药物中存在异四环素杂质是由于药物发生了 ( ) A ．差向异构化 B ．酸性降解 C ．碱性降解 D ．脱水反应 E ．光反应 4．维生素A 采用紫外分光光度法测定含量，计算公式中换算因子为 ( ) A ．效价(IU/g) B ．效价(g/IU) C ．(g/IU)1%cm 1效价E D ．1%cm 1(IU/g) E 效价 E ．(IU/g)1%cm 1效价E 5．薄层色谱法可用于检查药物中的杂质，如 ( ) A ．氯化物 B ．挥发性杂物 C ．有关物质 D ．硫化物 E ．硫酸盐 6．药物中砷盐检查采用古蔡氏法测定时，必须加入 ( ) A ．三氯化铁 B ．氯化亚汞 C ．氯化亚铁 D ．亚硝酸钠 E ．氯化亚锡 7．中国药典2000年版测定维生素E 含量采用GC 法，所用内标物质为 ( ) A ．正二十烷 B ．正二十二烷 C ．正三十烷 D ．正三十二烷 E ．正四十烷 8．酸性染料比色法中，水相的pH 值过小，则 ( )
A．能形成离子对B．有机溶剂提取能完全C．酸性染料以阴离子状态存在D．生物碱几乎全部以分子状态存在E．酸性染料以分子状态存在9．亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是( ) A．添加Br-B．生成NO＋Br-C．生成HBr D．生成Br2 E．抑制反应进行 10．头孢呋辛酯中应检查的杂质是( ) A．异烟肼B．甲醇C．丙酮D．异构体E．游离肼 11．中国药典（2000年版）采用双相滴定法测定苯甲酸钠的含量，其所用的溶剂体系为( ) A．水-乙醚B．水-冰醋酸C．水-氯仿D．水-乙醇E．水-丙酮12．药物纯度合格是指( ) A．含量符合药典的规定B．符合分析纯的规定C．绝对不存在杂质D．对病人无害E．不超过该药物杂质限量的规定 13．药物中氯化物杂质检查的一般意义在于( ) A．它是有疗效的物质B．它是对疗效有不利影响的物质 C．它是对人体健康有害的物质D．可以考核生产工艺中容易引入的物质E．检查方法比较方便 14．测定卤素原子与脂肪碳链相连的含卤素有机药物（如三氯叔丁醇）的含量时，通常选用的方法是( ) A．直接回流后测定法B．直接溶解后测定法C．碱性还原后测定法D．碱性氧化后测定法E．原子吸收分光光度法 15．各国药典对甾体激素类药物常用HPLC或GC法测定其含量， 主要原因是( ) A．它们没有特征紫外吸收，不能用紫外分光光度法 B．不能用滴定分析法进行测定 C．由于“其它甾体”的存在，色谱法可消除它们的干扰 D．色谱法比较简单，精密度好 E．色谱法准确度优于滴定分析法 16．下列药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是( ) A．维生素A B．维生素B1C．维生素C D．维生素D E．维生素E 17．两步滴定法测定阿司匹林的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.1/mol/L）相当
.中国药科大学2005年药物化学期末试卷 盐酸乙胺丁醇临床用于＿___＿＿_＿_＿_＿_。 5．烷化剂类抗肿瘤药分为氮芥类、＿__＿_＿_____＿_类、磺酸酯及卤代多元醇类、______＿______类。 6.头孢菌素与青霉素相比特点为________＿__＿_、＿_________＿_＿、_＿___＿_＿__＿__。 7.炔雌醇的结构是__＿___＿_____＿临床用于＿＿____＿_＿____。 ??? 3.对乙酰氨基酚的结构式是＿____。 ４.吗啡分子结构中因具有_＿___及＿___＿,因而显酸碱两性。 ６.顺铂临床用于__________。 7.环磷酰胺临床使用的剂型为____＿。 8.林可霉素的主要用途是_______＿_＿。 9.6－APＡ的结构式为____＿。 1０.孕甾烷的基本结构式是___＿＿。 １1.对氨基水杨酸钠临床用途是__＿＿_。 1２．克霉唑的临床用途为____＿。 2.炔诺酮的化学名为。 3.氟尿嘧啶为抗肿瘤药；卡莫司汀为抗肿瘤药。 4.半合成青霉素的主要中间体为,半合成头孢菌素的主要中间体 为。 5.磺胺类药物的必需结构为，且氨基与基必须成对位。 6.盐酸吗啡注射液放置能被空气氧化成毒性较大的 ,故应避光、密闭保存。1．心血管系统药物可分为(1)＿________＿(２）(3）__＿__＿____和抗心律失常药四大类。 2．甲丙氨酯又可称为____＿＿_＿＿_。 ３.盐酸哌替啶为_＿____＿_＿＿类镇痛药。 4.去甲肾上腺素属于__________类拟肾上腺素药，其主要用途是＿＿________。 5.6-APA的结构式为___＿＿_＿___。 ６.土霉素结构中含有____＿_＿___显弱酸性，还含有显碱性,故为两性化合物。7．甾类激素按化学结构可分为_____＿____,＿_______＿_和孕甾烷三类。 ８．5-氟尿嘧啶临床用于＿___＿___＿＿6-巯基嘌呤临床用于_＿_____＿_＿。 ２.扑热息痛药物中应检查( )杂质的含量。 Ａ.对乙酰氨基酚 B.对氨基酚Ｃ.水杨酸 Ｄ.对氨基苯甲酸 E.醋酸 ３.双氯芬酸钠属于哪类药物(） A．邻氨基苯甲酸类 B.吲哚乙酸类 C.芳基烷酸类 D.吡唑烷酮类 E.苯胺类 4．盐酸哌替啶的水溶液在pH值为()时最稳定，短时煮沸不致破坏。 Ａ.3 B.4 C.5 D.６ E.7 11.下列哪一药物属于抗菌增效剂(）
中国药科大学药物分析实验试卷（B卷） 2006～2007学年第一学期 一、选择题（共15分） 1.中国药典主要内容包括：() A 正文、含量测定、索引 B 凡例、制剂、原料 C 鉴别、检查、含量测定 D 前言、正文、附录 E 凡例、正文、附录 2.日本药局方与U S P的正文内容均不包括() A.作用与用途 B.性状 C.含量规定 D.贮藏 E.鉴别 3.按药典规定,精密标定的滴定液(如氢氧化钠及其浓度)正确表示为( ) A.氢氧化钠滴定液(0.1520M) B.氢氧化钠滴定液(0.1524mol/L) C 氢氧化钠滴定液(0.1520M/L) D. 0.1520M氢氧化钠滴定液 E. 0.1520mol/L盐酸滴定液 4、药物中氯化物杂质检查的一般意义在于它() A. 是有疗效的物质 B. 是对药物疗效有不利影响的物质 C.是对人体健康有害的物质 D. 是影响药物稳定性的物质 E.可以考核生产工艺和企业管理是否正常 5. Ag-DDC法是用来检查( ) A. 氯化物 B. 硫酸盐 C. 硫化物 D. 砷盐 E. 重金属 6.采用碘量法测定碘苯酯含量时，所用的方法为() A. 直接回流后测定法 B. 碱性还原后测定法 C. 干法破坏后测定法. D. 氧瓶燃烧后测定法 E. 双氧水氧化后测定法 7.四环素类药物在碱性溶液中，C环打开，生成() A. 异四环素 B. 差向四环素 C. 脱水四环素 D. 差向脱水四环素 E. 配位化合物 8.甾体激素类药物鉴别的专属方法为() A. UV B. GC C. IR D. 异烟肼法 E. 与浓硫酸反应 9.药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是( ) A．维生素A B．维生素B1C．维生素C D．维生素D 10.中国药典2000年版测定维生素E含量的内标物为() A.正二十八烷 B.正三十烷 C.正三十二烷 D.正三十烷 E.十六酸十六醇酯 11.加入氨制硝酸银后能产生银镜反应的药物是() A.地西泮 B.阿司匹林 C.异烟肼 D.苯佐卡因 E.苯巴比妥 12.坂口(S a ka g u c h i)反应可用于鉴别的药物为( ) A. 雌激素 B. 链霉素 C. 维生素B1 D. 皮质激素 E. 维生素C 13.维生素A采用紫外分光光度法测定含量，计算公式中换算因子为( ) A．效价(IU/g) B．效价(g/IU) C． (g/IU) 1% cm 1 效价 E D． 1% cm 1 (IU/g) E 效价 E． (IU/g) 1% cm 1 效价 E 14．雌激素的特有反应为( ) A．麦芽酚反应B．硅钨酸反应C．硫色素反应D．Kober反应E．坂口反应 15.苯甲酸钠的含量测定采用双相滴定法时所用溶剂体系为() A. 水-乙醇 B. 水-丙酮 C. 水-氯仿 D. 水-乙醚 E. 水-甲醇 二、匹配题（每小题5分，共15分） [1-5] A.吸附或分配性质的差异 B .杂质与一定试剂产生沉淀 C.杂质与一定试剂产生颜色反应 D.杂质与一定试剂反应产生气体 E.旋光性质的差异 1.药物中易碳化物的检查() 2.酸性条件下,用醋酸铅试纸检查药物中所含微量硫化物() 3.T L C法检查有关杂质() 4.硫酸阿托品中莨菪碱的检查() 1