人体解剖及动物生理学实验报告
实验名称蟾蜍骨骼肌生理
姓名
学号
系别
组别
同组姓名
实验室温度
实验日期2015年5月7日
一、实验题目
蟾蜍骨骼肌生理
A蟾蜍腓肠肌刺激强度与骨骼肌收缩反应的关系
B蟾蜍骨骼肌单个肌肉收缩分析（潜伏期、收缩期和舒张期的确定）
C蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌收缩的关系
二、实验目的
确定蟾蜍骨骼肌收缩的
（1）阈水平和最大收缩以及刺激强度与肌肉收缩之间的关系曲线
（2）收缩的三个时期：潜伏期、缩短期、舒张期
（3）刺激频度与肌肉收缩的关系
三、实验方法
1、蟾蜍坐骨神经-骨骼肌标本的制作及电路连接
1)双毁髓处死蟾蜍后，剥去皮肤，暴露腰骶丛神经，游离大腿肌肉之间的做个神
经及小腿的腓肠肌，注意不要将胫神经与腓神经分离。神经端结扎后，剪去无
关分支后游离至膝关节处；肌肉端结扎在肌腱上，将腓神经也一起结扎，结扎
线留长。保留膝关节，剪去腿骨，将标本离体。注意保持神经肌肉湿润。
2)用大头钉将标本的膝关节固定于标本盒R2和R3两记录电极之间的石蜡凹槽内，
保证神经、肌肉与电极充分接触。神经中枢端接触刺激电极S1和S2，肌肉接
触记录电极R3和R4，之间接触接地电极。
3)肌肉的结扎线从标本盒中穿出，连接张力换能器。注意连线尽量短，以减小阻
力。在实验过程中，注意标本的休息：将神经搭在肌肉上，用浸湿了任氏液的
棉花覆盖神经肌肉，保持湿润。但标本盒内避免有过多的液体，防止短路。
4)换能器插头接RM6240通道1。刺激输出线两夹子分别连接标本盒的刺激电极
S1和S2，插头接刺激输出插口。如果需要记录肌肉的动作电位，则在肌肉所
搭置的记录电极上连接输入导线，注意接地，插头接通道2。
2、蟾蜍骨骼肌生理各项数据测定
A蟾蜍腓肠肌刺激强度和骨骼肌收缩反应的关系
1)打开信号采集软件，从“实验”菜单中选取“刺激强度对骨骼肌收缩的影响”，出
现软件自动设置界面，各项参数已设置好，但需要将“采集频率”修改成“20kHz”，扫描速度仍然是“1.0s/div”。界面的采集通道默认为RM6240B面板上的通道1.刺激模式自动设置为强度递增刺激，起始强度为0.02V（可根据标本特性灵活选择）2)检查装置连接正确后，点击“开始记录”，屏幕下出现扫描线，软件处于记录状态。
（主义不要点击“开始示波”，在示波状态下，文件不能保存。）扫描线如偏离零点较远，需要调零：将换能器与标本盒的棉线放松，旋转换能器的调零钮，使基线恢复零点。
3)将换能器连接的棉线拉直，如果基线偏移零位（肌肉被牵拉的程度会影响基线位置），
不必去管（不必重新调零，测量时，将偏移量减去即可）。点击“开始刺激”，刺激器按一定时间间隔自动输出单个刺激方波，后一次比前一次强度递增。将“刺激标注”激活，显示出每次发放的刺激的强度。屏幕上应出现一系列由刺激触发的肌肉收缩曲线，同时可以观察到标本盒中肌肉的收缩。注意文件的保存（不要移动标本盒与换能器的位置，即肌肉被牵拉的程度保持固定。此要求也适用于ⅡB和ⅡC。）
4)当收缩幅度不再变化时，停止刺激，停止记录。
5)应用测量工具，确定收缩的阈水平和最大收缩。并确定最大收缩所对应的最小刺激
强度（即最适刺激强度）。记录下收缩幅度，刺激和放大器的参数设置。（注意在测量时。需将波形适当展开，确保测量数据更准确。）
6)绘制刺激强度与肌肉收缩幅度之间的关系曲线。
B单个肌肉收缩分析（确定潜伏期、缩短期、舒张期）
1)将ⅡA实验得到的最大刺激强度对应的收缩曲线展开，应用测量工具确定收缩的三
个时期：潜伏期、缩短期、舒张期。
2)至少测量三次。计算几次重复测量得到的三个时期的平均值和标准差。
C蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌收缩的关系
1)打开信号采集软件，关闭通道3和4，保留通道1和2，分别对应肌肉收缩信号和
肌肉动作电位信号。示波状态下修改参数设置：采集频率20kHz；通道1：通道模式为张力，扫描速度400ms/div，灵敏度7.5g（可根据收缩幅度合理选择），放大器时间常数设为直流，滤波频率100Hz；通道2：通道模式为生物电，扫描速度
400ms/div ，灵活度2mv ，放大器时间常数0.001s ，滤波频率1kHz 。刺激模式为串单单刺激，波宽1ms ，延时20ms ，选择一定的刺激脉冲个数（10-60个，避免让肌肉受到过多刺激）和刺激强度（阈上刺激强度即可，不必达到最大刺激强度，避免收缩幅度过大，超出换能器量程）。 2) 点击“开始记录”，软件进入记录状态。
3) 记录过程中逐渐提高刺激频率，在一定的刺激频率下，点击“开始刺激”，刺激器
按此频率连续发放设定的刺激脉冲个数，肌肉出现相应的收缩。
4) 观察肌肉收缩的总和现象，确定肌肉收缩的最小融合频率，观察肌肉动作电位与收
缩的关系。
5) 观察不同频率引起肌肉收缩的幅度变化。
四、实验结果
A 蟾蜍腓肠肌刺激强度和骨骼肌收缩反应的关系
图1. 蟾蜍腓肠肌刺激强度和骨骼肌收缩反应的关系图
表1 蟾蜍腓肠肌刺激强度与骨骼肌收缩强度的关系表
刺激强度（V ）
收缩强度（g ）
刺激强度（V ）
收缩强度（g ）
0.18 0.19 0.00 1.49
0.24 0.25
6.96
7.35 0.20 3.31 0.26 7.45 0.21 4.79 0.27 7.59 0.22 6.07 0.28 7.69 0.23
7.46
0.29
7.51
根据上表可绘制下图，曲线图能更加直观的显示蟾蜍骨骼肌收缩强度随对腓肠肌刺激强度增加的变化趋势。
图2.蟾蜍腓肠肌刺激强度与骨骼肌收缩强度的曲线图
结果分析：
由上述图表可以看出，刚开始以较低强度刺激时，骨骼肌并没有收缩，直到达到阈刺激强度时（阈刺激强度在0.18-0.19V之间），骨骼肌开始收缩；随着刺激强度的增大，骨骼肌收缩强度逐渐增大；刺激强度约为0.23V时，骨骼肌收缩强度达到最大值，最大值在7.5g左右；在这之后，随着刺激强度的增大，骨骼肌收缩强度不再明显增加，而是在最大收缩强度附近波动。
产生此现象的原因分析：
由于一块肌肉由许许多多肌纤维组成，骨骼肌的收缩受运动神经元的支配。单个运动神经元可支配多根肌纤维，一个运动神经元与它所支配的肌纤维组成一个运动单位。而不同的运动单位兴奋阈值不同。低于阈刺激的刺激强度，神经纤维不发生兴奋，其所支配的肌细胞也不发生反应；当刺激电压达到阈强度时，神经干中阈值最低的神经开始兴奋，其所支配的运动单位也兴奋并发生收缩。刺激强度逐渐增大，神经干中兴奋的神经纤维增加，收缩的运动单位也增加，于是骨骼肌收缩张力增加。当刺激电压达到最大刺激强度后，所有的神经纤维都兴奋，其所支配的所有的运动单位也收缩，所有刺激强度再增大。骨骼肌收缩力也不再增加。
B蟾蜍骨骼肌单个肌肉收缩分析（潜伏期、收缩期和舒张期的确定）
图3 单个肌肉收缩分析图（潜伏期、收缩期和舒张期的确定）
从上图可看出，当肌肉受到一个单刺激时，产生一次收缩，称为单收缩。从刺激开始到收缩开始这一段无明显外部表现的时间，称为潜伏期。自肌肉开始收缩至收缩达到高峰，是长度缩短或张力增高的时间，称为缩短期。自收缩高峰开始，曲线较缓慢地下降至基线，为长度或张力恢复过程的时间，称为舒张期。
表2蟾蜍骨骼肌单收缩潜伏期、缩短期及舒张期数据测量表
刺激强度（V）潜伏期（ms）缩短期（ms）舒张期（ms）
1 0.27 7 57 235
2 0.28 8 64 250
3 0.29 10 63 247
Mean 0.28 8.33 61.33 244
SD 0.01 1.53 3.79 7.94
由上表可得到蟾蜍骨骼肌单收缩潜伏期、缩短期及舒张期的数据，且每组数据间方差较小，由此可证明实验误差较小，得到的数据也较为准确。
潜伏期收缩期舒张期
C蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌收缩的关系
图4蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌收缩的关系图（当前波间隔为500ms）上图（图4）显示的为几个分离的单收缩，实验显示，直到波间隔降低到200ms，蟾蜍的骨骼肌均为分离的单收缩。
图5蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌收缩的关系图（当前波间隔为50ms）
图6蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌收缩的关系图（当前波间隔为25ms）
以上两图（图5、图6）显示的为几个收缩反应的重叠，即发生收缩总和。实验显示，波间隔在150ms—25ms，骨骼肌均发生不完全强直收缩现象。
图7蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌收缩的关系图（当前波间隔为20ms）
上图（图7）显示的为肌肉发生强直收缩的现象，可得到一条光滑的曲线。实验显示，当波间隔降低到20ms，蟾蜍的骨骼肌会发生强直收缩现象。
表3 蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌最大收缩幅度数据记录表
实验次数波间隔（ms）刺激频度（Hz）最大收缩幅度（g）现象
1 500 2.00 2.50 单收缩
2 300 3.3
3 2.90 单收缩
3 200 5.00 4.06 单收缩
4 150 6.67 17.70 不完全强直收缩
5 50 20.0 28.33 不完全强直收缩
6 25 40.0 27.14 不完全强直收缩
7 20 50.0 29.20 完全强直收缩
实验结果分析：
上述图为不同刺激频率下肌肉收缩的曲线，通过测量可以发现在一定范围内，最大
收缩幅度随波间隔的减小而增加，即最大收缩幅度随刺激频率的增加而增加。但当波间隔减小到一定值（50ms），即刺激频率增大到一定值（20Hz）后，骨骼肌最大收缩幅度
便不再增强，而是在最大值上下波动。
若给肌肉不同的有效地频率刺激，实验也可以分别观察到单收缩（2—5Hz）、收缩总和/不完全强直收缩（6.7—40Hz）和强直收缩现象（50Hz）。如果后一次刺激落在前一
收缩的舒张期，肌肉出现不完全强直收缩；继续增大频率，后一刺激落在前一收缩的收缩期，出现完全强直收缩。
由上述图像也可看出，肌肉动作电位的发生要先于肌肉的收缩。这是因为神经的兴
奋支配着肌肉的收缩，但二者并不是完全同步的，从神经兴奋到肌肉的收缩需要一系列的生理生化反应及信息的传递，而这一系列生理过程需要耗费一定的时间。所以神经动作电位的发生要先于肌肉的收缩。
刺激频率低时，肌肉发生一连串互不相连的单收缩，这是因为每个新刺激到来时，前一次刺激引起的单收缩已经结束。于是，每个刺激都引起一次独立的收缩。发生不完全强直收缩时，每次新的收缩都发生在前次收缩的舒张期中，肌肉则在自身尚处于一定程度的缩短或张力存在的情况下进行新的收缩，即发生了收缩总和。当刺激频率增大到一定的较高程度时，出现完全强直收缩，这是因为连续刺激时，后来的每个刺激都可能总是落在前一次收缩的收缩期结束之前，各次收缩的张力或长度变化发生融合而叠加起来。
五、分析与讨论
1、刺激强度与收缩幅度的关系是怎样的？为什么？
（1）刺激强度到达阈刺激时腓肠肌开始收缩，在最大刺激前收缩幅度随刺激强度增
大而增大，到达最大刺激强度后，再增大刺激强度，收缩强度也不会再增大，而是在最大值附近波动。
（2）由于一块肌肉由许许多多肌纤维组成，骨骼肌的收缩受运动神经元的支配。单个运动神经元可支配多根肌纤维，一个运动神经元与它所支配的肌纤维组成一个运动单位。而不同的运动单位兴奋阈值不同。低于阈刺激的刺激强度，神经纤维不发生兴奋，其所支配的肌细胞也不发生反应；当刺激电压达到阈强度时，神经干中阈值最低的神经开始兴奋，其所支配的运动单位也兴奋并发生收缩。刺激强度逐渐增大，神经干中兴奋的神
经纤维增加，收缩的运动单位也增加，于是骨骼肌收缩张力增加。当刺激电压达到最大刺激强度后，所有的神经纤维都兴奋，其所支配的所有的运动单位也收缩，所有刺激强度再增大。骨骼肌收缩力也不再增加。
2、什么是潜伏期？你认为本实验所测的潜伏期内发生了怎样的生理过程？
（1）从刺激开始到到肌肉机械收缩之前这一段无明显外部表现的时间，称为潜伏期。（2）潜伏期内发生了很多生理过程，包括刺激产生的动作电位以局部电流的在神经纤维上传导；兴奋在神经-肌肉接头处传导；动作电位在骨骼肌细胞上的传导；骨骼肌细胞的兴奋-收缩耦联等过程。其与舒张期显著相关,机械收缩之前肌纤维的生物化学活动对肌肉的舒张机制有调制作用。
3、肌肉的收缩期和舒张期分别发生了怎样的生理过程？肌肉的收缩和舒张是否都需要
能量？
（1）动作发生开始到收缩幅度最大点是收缩期，之后到恢复常态是舒张期。收缩期和舒张期主要过程：骨骼肌细胞的兴奋-收缩耦联。横桥周期中骨骼肌的粗细肌丝相对滑行，使张力增大或减小。
（2）肌肉的收缩和舒张都需要能量。
4、刺激频率和肌肉动作电位及收缩的关系分别是怎样的？
（1）刺激频率和肌肉动作电位：肌肉动作电位不会随着刺激频率的增大而发生叠加，刺激频率只会改变肌肉动作电位的峰值及时程。
（2）刺激频率和肌肉收缩：当刺激频率较小时，肌肉表现为连串的单收缩；增大刺激频率，使刺激的间隔大于一次肌肉收缩的持续时间兵小于一次肌肉收缩舒张的持续时间时，动作电位发生部分叠加，肌肉则呈现锯齿状的收缩波形，产生不完全强直收缩；继续增大刺激频率，使刺激的间隔小于一次肌肉收缩的时间时，动作电位叠加程度增大，在每次收缩后不能舒张而是继续受到下一个刺激继续收缩，肌肉产生完全强直收缩。
5、动作电位会发生叠加么？为什么？
（1）肌肉动作电位不会随着刺激频率的增大而发生叠加。
（2）因为动作电位具有“全或无”的特点，只要刺激达到动作电位阈值，就会产生动作电位，且由于不应期的存在动作电位不会发生叠加，只能单独存在。
6、骨骼肌为什么可发生强直收缩？强直收缩在幅度上与单收缩有何差别？有何生理
意义？
（1）骨骼肌发生强直收缩的原因：连续刺激时，后来的每个刺激都可能总是落在前一次收缩的收缩期结束之前，各次收缩的张力或长度变化发生融合而叠加起来就会产生完全强直收缩。
（2）完全强直收缩是在上一次收缩的基础上收缩，因此比单收缩效率高，幅度也明显要比单收缩幅度大。
（3）生理意义：强直收缩比单收缩效率高，幅度也明显要比单收缩幅度大。故强直收缩能产生比单收缩更大的力量，单收缩时一部分能量消耗在反复克服肌肉结缔组织和肌肉中其它成分的长度变化上，而在强直收缩时，则不需要消耗这些能量，节省下的能量能更多地用于肌肉做功。骨骼肌会发生强直收缩，使效率高，张力大。而心肌的不应期长，不会发生强直收缩。这适应于心肌和骨骼肌的功能。
7、分析实验中出现和应该注意的问题。
（1）分离神经和肌肉时应该小心不要破坏神经和肌肉。
（2）分离后的神经和肌肉要随时保持湿润，尽量不要用手指和镊子去触碰，肌肉如果太干燥，又在强烈电刺激下，很可能痉挛，这样不仅损伤了神经和肌肉，也导致实验很难进行下去。
（3）实验过程中要经常用任氏液湿润棉球覆盖在标本上，每次刺激后应使肌肉休息一段时间。
（4）在测量骨骼肌单收缩时，刺激频率不要太高，以免肌肉疲劳。
（5）神经要伸直放置，另外，牵连在肌肉上的线一定要绷直，不然会影响实验结果。（6）在移动标本时，不要用力拉扯神经端，应该拉扯肌肉端。防止避免过度牵拉神经使其断裂。
六、参考文献
生理学实验（第三版），解井田赵静，高等教育出版社，2009
人体及动物生理学（第三版）王玢左明雪，高等教育出版社，2009
人体解剖学及动物生理学实验讲义，生理学实验教学团队，2015年3月
《植物生理学实验》课程大纲 一、课程概述 课程名称（中文）：植物生理学实验 （英文）：Plant Physiology Experiments 课程编号：18241054 课程学分：0.8 课程总学时：24 课程性质：专业基础课 前修课程：植物学、生物化学、植物生理学 二、课程内容简介 植物生理学是农林院校各相关专业的重要学科基础课，是学习相关后续课程的必要前提，也是进行农业科学研究和指导农业生产的重要手段和依据。本实验课程紧密结合理论课学习内容，加深学生对理论知识的理解。掌握植物生理学的实验技术、基本原理以及研究过程对了解植物生理学的基本理论是非常重要的。本大纲体现了植物生理学最实用的技术方法。实验内容上和农业生产实践相结合，加强学生服务三农的能力。实验手段和方法上，注重传统、经典技术理论与现代新兴技术的结合，提高学生对新技术、新知识的理解和应用能力。 三、实验目标与要求 植物生理学实验的基本目标旨在培养各专业、各层次学生有关植物生理学方面的基本研究方法和技能，包括基本操作技能的训练、独立工作能力的培养、实事求是的科学工作态度和严谨的工作作风的建立。开设植物生理学实验课程，不仅可以使学生加深对植物生理学基本原理、基础知识的理解，而且对培养学生分析问题、解决问题的能力和严谨的科学态度以及提高科研能力等都具有十分重要的作用。 要求学生实验前必须预习实验指导和有关理论，明确实验目的、原理、预期结果，操作关键步骤及注意事项；实验时要严肃认真专心操作，注意观察实验过程中出现的现象和结果；及时将实验结果如实记录下来；实验结束后，根据实验结果进行科学分析，完成实验报告。 四、学时分配 植物生理学实验课学时分配 实验项目名称学时实验类别备注 植物组织水势的测定3学时验证性 叶绿体色素的提取及定量测定3学时验证性 植物的溶液培养及缺素症状观察3学时验证性 植物呼吸强度的测定3学时设计性 红外CO2分析仪法测定植物呼吸速率3学时设计性选修 植物生长物质生理效应的测定3学时验证性 植物种子生活力的快速测定3学时验证性
生理学实验报告 实验题目： 蛙的体循环血压、心肌收缩和心电图（ECG）的同步记录与分析 课程名称：生理学实验 专业：10级生物技术及应用（基地班） 教室：A414 学生姓名：徐棒夏凡女 学号：10350083 10350081 指导老师：龙天澄张碧鱼陈笑霞 日期：2012年5月15日 一．实验目的 1.学习并掌握蛙的体循环血压、心肌收缩和心电图（ECG）的同步记录 2.记录和分析植物神经系统和重要神经递质对血压、心电（心肌的电生理特性）和心搏（心肌的收缩特性）的影响。 二．动物与器械 青蛙；蛙心插管、常用手术器械、计算机采集系统、蛙心夹、YP100压力换能器、三通管、注射器、保护电极、露丝电极、一维位移微调器、固定针、蜡盘、培养皿、污物缸、棉线、纱布、滴管、小烧杯；任氏液、石蜡油、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液、肝素溶液；
三．实验原理 神经与体液因素对心血管功能的调节可通过心肌收缩力、心电图和血压的变化反映出来。尤其是血压的指标直接反映了心输出量和外周阻力的变化，可以较好的评价整体的心血管功能。 本实验用青蛙主动脉插管法，直接测量血压，并同步记录心搏和心电图。记录和分析植物神经系统和重要神经递质对血压、心电（心肌的电生理特性）和心搏（心肌的收缩特性）的影响。 四．实验步骤 1. 分离迷走交感混合神经干 按常规方法用探针刺毁蟾蜍的脑和脊髓，将动物背位放在蛙板上。把左侧下颌角与前肢间的皮肤纵向剪开，用镊子紧贴下颌角分离皮下组织。找到体轴走向的提肩胛肌，小心地将提肩胛肌横向剪断，即可见到其下方的血管神经束（皮动脉，颈静脉和迷走-交感混合干）。在迷走—交感混合干下方穿一线，用玻璃分针分离开神经，用湿生理棉球暂将神经覆盖，以避免神经干燥。 2. 暴露心脏 在胸骨柄后方的皮肤上先剪开一小的切口，再自切口处向左右两侧锁骨外侧方向剪开皮肤，切口成V形，把切开的皮肤掀向头端。在胸骨柄后方的腹肌上也剪一小切口，沿身体正中方向剪开剑突和胸骨（剪子尖向上翘以免损伤血管和心脏），剪断左右乌喙骨和锁骨及提臂肌，使胸部创口也呈V形。可见到心包和心脏。用眼科剪剪开心包膜，在心脏舒张时夹上蛙心夹。蛙心夹拴线的另一端与张力换能器相连（换能器的输出端与生理信号采集处理系统的一个输入通道相连）。 3. 主动脉插管 YP100压力换能器的直端和侧端管上加装三通管。从侧管注入液体石蜡，将系统内气泡赶净。用装有50%柠檬酸钠溶液（肝素-任氏液）的注射器连接于侧端管上，直端管上连接心脏插管。 用线结扎动脉的远心端，在左主动脉分叉处穿线备用。用手术剪在结扎处与穿线处剪一V形口，将插管经V形口插入动脉圆锥适当深度。穿线结扎并固定于插管上。
一、蟾蜍坐骨神经干动作电位引导及传导速度测定 实验目的：加强理解兴奋传导的概念，掌握测定神经干动作电位传导速度的方法。熟悉仪器设备的操作。 实验原理：通过测出示波器上动作电位传导的距离和传导所需的时间，计算传导速度。 1.潜伏期法：测量第一个通道动作电位潜伏期的时间t，输入刺激电极到第一个引导 电极间的距离s，v=s/t。 2.潜峰法：测量两个通道的动作电位波峰间的时间差和两对引导电极间的距离，v= (s2-s1)/(t2-t1)。 实验步骤：1.制备坐骨神经-腓神经标本，放入神经屏蔽盒。 2.连接仪器，引导动作电位波形。 3.剪裁编辑图形，计算传导速度。 实验结果：1.图形 2.计算 S=10mm, t=0.33ms, v=10mm/0.33ms=33m/s 分析讨论： 1. 当刺激端和记录端离得较远时，引导的复合动作电位波形会发生什么改变，为什么？ 2.用什么方法可使复合动作电位传导速度的测量更准确？ 实验结论：神经干动作电位的传导速度为33m/s.
二、兴奋性不应期的测定 实验目的：了解测定不应期的方法和原理，并加深对兴奋性在兴奋过程中的变化过程的理解。 实验原理：神经纤维受到适宜刺激后，产生兴奋，即动作电位。一次兴奋产生后，必须经绝对不应期、相对不应期、超常期等变化后，兴奋性才能恢复。本实验通过生物电放大器引导并记录神经干复合动作电位，验证和测量动作电位的不应期。先给一个条件刺激，再用另一个检验刺激在兴奋的不同时期给予刺激，检查兴奋未阈值及所引起动作电位的幅度。 实验步骤： 1．制备坐骨神经-腓神经标本，并浸在任氏液中约5分钟，待其兴奋性稳定后实验。 2.连接仪器，设置实验参数，观察并测量神经干的不应期。 实验结果：（见图） 分析讨论： 1.为什么要先引导神经纤维的单向复合动作电位，然后再测量其兴奋性的不应期？ 2.神经干不应期与单根神经纤维的不应期有何不同？ 实验结论：兴奋性的不应期包括绝对不应期、相对不应期、超常期、低常期。
生 理 实 验 设 计 实验课题:筒箭毒对神经—肌肉接头处得兴奋传递得影响 实验成员:星期五下午第四实验室第二组 筒箭毒对神经—肌肉接头处兴奋传递得影响 实验假设 筒箭毒能与乙酰胆碱竞争神经肌接头处得ｎm受体,使肌肉松弛。 实验原理与目得 神经肌肉接头处得兴奋传递过程有三个重要得环节: 一就是钙离子促进神经轴突中得囊泡膜与接头前膜发生融合而破裂; 二就是囊泡中得乙酰胆碱释放到神经肌肉接头间隙; 三就是乙酰胆碱与接头后膜上得受体结合,引发终板电位。 乙酰胆碱(Aｃetylｃholine,ACh)就是一种重要得神经递质,就是连接每个运动神经元与骨骼肌之间得信使。如果AＣh得传递受阻,肌肉就不能收缩。箭毒就是美印第安人在猎箭头部涂抹得一种毒药,它能够占用并阻塞ACh 受体得位置,能竞争性阻断AＣh得去极化作用致使神经递质不能影响肌肉、能与ＡCh 竞争神经肌接头处得nm胆碱能受体,但不激动受体,因而使骨骼肌松弛、抗胆碱酯酶药可拮抗其肌肉松弛作用,新斯得明就是胆碱酯酶抑制剂,可通过抑制胆碱酯酶增减乙酰胆碱在肌接头间隙得浓度。故筒箭毒过量可用适量新斯得明解救。筒箭毒与乙酰胆碱竞争性结合乙酰胆碱受体,注射新斯得明后使突触间隙内得乙酰胆碱浓度升高
而使竞争性增强,故乙酰胆碱与受体接触增多,从而使肌无力症状减弱。 本实验得目得就是探索筒箭毒对神经-－肌接头处兴奋传递得影响极其相关机制;观察筒箭 毒得肌松作用,分析其作用点;了解新斯得明对抗筒箭毒得作用。 实验对象 大白鼠,体重2５0g以上 实验器材与药品 Powerlaｂ一套(主机,刺激器,张力换能器),手术器械一套,小动物人工呼吸机,气管插管,棉线,大头针,铁架台,注射器0.０0１g％筒箭毒碱,０。005g％新斯得明,２5％乌拉坦,１。5％普鲁卡因,生理盐水 实验方法 1、大鼠称重,麻醉;25%乌拉坦腹腔注射０。５mｌ／100g麻醉。然后仰卧固定于鼠手术床上,分离气管及颈外静脉,分别插入气管插管与静脉插管,准备好人工呼吸机。数分钟后翻正反射消失,即可进行实验; 2、分离坐骨神经;在髋关节后,坐骨结节内凹陷处切开皮肤,钝性分离肌肉,暴露一段坐骨神经,用浸有1、5%普鲁卡因得棉线围绕坐骨神经打一个结,在坐骨神经干上做传导阻滞麻醉,排除下行干扰; 3、分离腓神经;在外侧剪开皮肤,钝性分离肌肉组织,分离腓神经,神经穿线备用; 4、分离胫前肌;将大鼠两前肢固定在手术台(仰卧),从后置踝关节正前方向剪开小腿皮肤,剪断踝关节前部韧带,分离胫前肌肌腱,沿胫骨分离胫前肌(注意不要损伤血管),在踝部得胫前肌肌腱处扎线,与结扎线远端切断肌腱; 5、安装并设定powｅrlab记录肌张力得cｈarｔ设定文件;调定刺肉毒碱对神经肌肉接头处处兴奋传递得影响 6、连接仪器;手术操作完成后,将胫前肌与pｏwerlab得张力换能器向连接,腓神经处安放刺激电极。最适负荷设定为１０ｇ左右。稳定一段时间后,于给药前记录一段正常得肌肉收缩曲线; 7. 缓慢静脉注射0。001%筒箭毒碱0.1ml／10０g,从仪器上观察肌肉收缩曲线得变化情况; 8。待肌肉收缩曲线再次稳定或完全消失后,停止刺激,同时缓慢静脉注射0。005%新斯得明0、１5mｌ／1０0g,观察肌肉收缩曲线得变化情况、 预期结果 注射筒箭毒后肌肉收缩曲线幅度变小甚至消失,即肌肉处于肌无力状态,注射新斯得明后肌肉收缩曲线又基本恢复正常,即肌肉恢复正常收缩状态; 结果分析 从神经传来得兴奋,通过神经－肌肉接头传递给肌纤维膜,就是以化学递质乙酰胆碱为中介进行得,其全过程可分为:(1)接头前过程、(2)神经递质在间隙得扩散。(3)接头后过程、 如果就是筒箭毒作用于突触前膜,即不能释放乙酰胆碱,那么无论就是否有新斯得明,后膜中均无乙酰胆碱,所以在注射新斯得明后仍然就是肌无力状态,即不会出现预期结果; 如果就是筒箭毒作用于突触间隙,即与突触前膜释放得乙酰胆碱结合,抑制其发挥作用,那么无论就是否有新斯得明,后膜中均无可发挥肉毒碱对神经肌肉接头处处兴奋传递得影响作用得乙酰胆碱,所以在注射新斯得明后仍然就是肌无力状态,即不会出现预期结果; 而如果就是筒箭毒作用于突触后膜,即与乙酰胆碱竞争性结合乙酰胆碱受体,注射新斯得明后使突触间隙内得乙酰胆碱浓度升高而使其竞争性增强,使乙酰胆碱与受体接触增多,从而使肌无力症状减弱,使肌肉收缩曲线幅度增强,即会出现预期结果; 综上所述,假设成立。 注意事项
生理学实验报告 一、实验题目： 1．实验员：马冰（0941054） 2．时间：2011年10月10日 3．组号：第二组 4．班级：09生科 二、实验目的 1．熟悉并掌握生物信号采集处理系统 2．掌握蛙类坐骨神经腓肠肌标本和坐骨神经干标本的制备技术 3．观察不同刺激强度、刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响 4．观察电刺激对神经兴奋性、兴奋传导的影响 5．熟悉阈强度、最适刺激强度及单收缩、完全强直收缩之间的关系 三、实验原理 兴奋性：可兴奋组织对外界刺激发生反应的能力（或细胞受刺激时产生动作电位的能力）。 兴奋：也就是动作电位，指可兴奋细胞受阈刺激或阈上刺激时，细胞在静息电位的基础上发生一次迅速的、短暂的并可扩布的电位变化。 阈强度：在刺激持续时间和刺激强度-时间变化率固定时，引起可兴奋细胞产生动作电位的最小刺激强度，也叫阈值或阈刺激。 阈刺激或阈上刺激产生动作电位，其特点：①“全或无”现象；②进行长距离无衰减传递（神经纤维、骨骼肌细胞等）。 阈下刺激引起局部电兴奋，其特点：①幅度在阈下刺激的范围内，随刺激强度的增大而升高；②在细胞膜上可进行电紧张性扩布，即衰减性传播；③可以相互融合（时间总和、空间总和）。 最适刺激强度：引起肌肉产生最大收缩时的最小刺激强度。 单收缩：肌肉受到一次短促的刺激时，会产生一次机械性收缩和舒张的过程。 兴奋性作为三大基本生命现象（新陈代谢、兴奋性、生殖）具有重要的生理意义。那么，什么叫兴奋性呢？它是指可兴奋组织对外界刺激发生反应的能力。所有可兴奋组织产生兴奋
（也就是动作电位）都必须有一个条件：刺激。 刺激包括三方面的内容：刺激强度、刺激时间、刺激强度-时间变化率。其中，刺激强度就是电刺激的脉冲电压，刺激时间就是某个单刺激所持续的时间。 刺激强度对骨骼肌收缩形式的影响（固定刺激的时间和刺激强度-时间变化率）：单根神经纤维或肌纤维对刺激的反应是“全或无”式的。但在神经纤维肌肉标本中，则表现为当刺激强度很小时（阈下刺激），不能引起神经纤维动作电位的产生和肌肉的收缩；当刺激强度在一定范围内变动时，肌肉收缩的幅度与之成正比。因为坐骨神经干中含有数千万条粗细不等的神经纤维，其兴奋性各不相同。弱刺激只能使其中少量兴奋性高的神经纤维先兴奋，并引起它所支配的少量肌纤维收缩。随着刺激强度逐渐增大，发生兴奋的神经纤维数目逐渐增多，其所引起收缩的肌纤维数目亦增多，结果肌肉收缩幅度随刺激强度的增加而增强。当刺激达到某一强度时，神经干中全部神经纤维兴奋，它们所支配的全部肌纤维也都发生兴奋和收缩，从而引起肌肉的最大收缩。此后，若再增加刺激强度，肌肉收缩幅度将不再增加。我们把引起肌肉产生最大收缩时的最小刺激强度叫最适刺激强度。 刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响（把刺激强度固定在最适刺激强度，把单刺激改为连续单刺激）：刺激频率就是单位时间内连续刺激的次数。随着刺激频率的增高，肌肉的反应依次表现为单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩： ⑴如果刺激频率很小时，每相邻两个刺激的间隔时间很大，当其大于肌肉收缩的收缩期和舒张期之和时，肌肉表现为一个个的单收缩。单收缩包括收缩期及舒张期。前者占时较后者为短。 ⑵当逐渐增加刺激频率，使新的刺激引起的肌肉收缩落在前一个刺激引起肌肉收缩的舒张期，这样，肌肉在连续未完全舒张的基础上就开始新的收缩，形成锯齿样的不完全强直收缩张力曲线。 ⑶当刺激频率继续增大时，新的刺激引起肌肉收缩落在前一次刺激引起肌肉收缩的收缩期，这样，肌肉在连续收缩不全的基础上出现新的收缩，形成一个类似方波的完全强直收缩张力曲线。 四、实验方法和步骤 （见生理学实验指导P36，P40，P44） 五、实验对象 蟾蜍
人体解剖及动物生理学实验报告 实验名称蟾蜍骨骼肌生理 学号 系别 组别 同组 实验室温度 实验日期2015年5月7日
一、实验题目 蟾蜍骨骼肌生理 A蟾蜍腓肠肌刺激强度与骨骼肌收缩反应的关系 B蟾蜍骨骼肌单个肌肉收缩分析（潜伏期、收缩期和舒期的确定） C蟾蜍腓肠肌刺激频度与骨骼肌收缩的关系 二、实验目的 确定蟾蜍骨骼肌收缩的 （1）阈水平和最大收缩以及刺激强度与肌肉收缩之间的关系曲线 （2）收缩的三个时期：潜伏期、缩短期、舒期 （3）刺激频度与肌肉收缩的关系 三、实验方法 1、蟾蜍坐骨神经-骨骼肌标本的制作及电路连接 1)双毁髓处死蟾蜍后，剥去皮肤，暴露腰骶丛神经，游离大腿肌肉之间的做个神 经及小腿的腓肠肌，注意不要将胫神经与腓神经分离。神经端结扎后，剪去无 关分支后游离至膝关节处；肌肉端结扎在肌腱上，将腓神经也一起结扎，结扎 线留长。保留膝关节，剪去腿骨，将标本离体。注意保持神经肌肉湿润。 2)用大头钉将标本的膝关节固定于标本盒R2和R3两记录电极之间的石蜡凹槽， 保证神经、肌肉与电极充分接触。神经中枢端接触刺激电极S1和S2，肌肉接 触记录电极R3和R4，之间接触接地电极。 3)肌肉的结扎线从标本盒中穿出，连接力换能器。注意连线尽量短，以减小阻力。 在实验过程中，注意标本的休息：将神经搭在肌肉上，用浸湿了任氏液的棉花 覆盖神经肌肉，保持湿润。但标本盒避免有过多的液体，防止短路。 4)换能器插头接RM6240通道1。刺激输出线两夹子分别连接标本盒的刺激电极 S1和S2，插头接刺激输出插口。如果需要记录肌肉的动作电位，则在肌肉所 搭置的记录电极上连接输入导线，注意接地，插头接通道2。 2、蟾蜍骨骼肌生理各项数据测定 A蟾蜍腓肠肌刺激强度和骨骼肌收缩反应的关系
实用文档专业：应用心理学 ： 学号：日期：地点：汪加诚3110102422 2016.1024 医学楼 C512 实验报告 课程名称：实验名称： 神经生理学指导老师：成绩： 同组学生：神经干不应期的测定实验类型：模拟实验 一、实验目的 了解蛙类坐骨神经干产生动作电位后其兴奋性的规律性变化。学习绝对不应期和相对不 应期的测定方法。 二、实验原理 神经组织和其他可兴奋组织一样，在接受一次刺激产生兴奋以后，其兴奋性将会发生规 律性的变化，依次经过绝对不应期、相对不应期，超常期和低常期，然后再回到正常的兴奋 水平。 采用双脉冲刺激的方法。将两刺激脉冲间隔由最小逐渐增大时，开始只有第一个刺激脉 冲刺激产生动作电位(action potential, AP)，第二个刺激脉冲刺激不产生 AP，当两刺激脉 冲间隔达到一定值时，此时第二个刺激脉冲刚好能引起一极小的 AP，这时两刺激脉冲间隔即 为绝对不应期。继续增大刺激脉冲间隔，这时由第二个刺激脉冲刺激产生的 A P逐渐增大，当 两刺激间隔达到某一值时，此时由第二个刺激脉冲刺激产生的 AP，其振幅刚好和由第一个刺 激产生的 A P相同，这时两刺激脉冲间隔即为相对不应期。 三、材料和方法 【材料】：蟾蜍或蛙；标本屏蔽盒、任氏液、微机生物信号采集处理系统。 【实验方法】： 1．系统连接和仪器参数设置 （1）RM6240 系统：点击“实验”菜单，选择“肌肉神经”或“生理科学实验项目”菜 单中的“神经干兴奋不应期的测定”或“神经干兴奋不应期的自动测定”项目。系统进入该 实验信号记录状态。仪器参数：1通道时间常数 0.02s、滤波频率 1KHz、灵敏度 4mV，采样频率 80KHz，扫描速度 1ms/p。双刺激激模式，最大刺激强度，刺激波宽 0.1ms，起始波间隔 30 ms，延迟 2ms，同步触发。
蛙心起搏点观察实验报告 篇一：蛙心起搏点 蛙心起搏点 实验报告 20081217 01:15:25 阅读175 评论0 字号：大中小 【实验目的】 1 了解在体内观察器官生理特点的方法，并确定蛙心起搏点及传导途径 2 理解内环境稳态的重要性 【实验原理】 哺乳动物心脏的特殊传导系统具有自动节律性，但各部分的节律性高低不同。正常情况下，窦房结的自律性最高，它自动产生的兴奋向外扩布，依次激动心房肌、房室交界、房室束、心室内传导组织和心室肌，引起整个心脏兴奋和收缩。由于窦房结是主导整个心脏兴奋和跳动的正常部分，故称之为正常起搏点；其他部位自律组织受窦房结的“抢先占领或超速驱动压抑”控制，并不表现出它们自身的自动节律性，只是起着兴奋传导作用，故称之为潜在起搏点。一旦窦房结的兴奋不能下传时，则潜在起搏点可以自动发 生兴奋，是心房或心室依从节律性最高部位的兴奋节律而跳动。
两栖类动物心脏的正常起搏点是静脉窦，在正常情况下，其 心房和心室在静脉窦冲动作用下依序搏动，只有当正常起搏点的冲动受阻时，“超速压抑”解除，心脏的自律性次之的部位才可能显示其自律性。 本实验利用结扎阻断传导通路的方法来确定蛙心起搏点和传导途径。 【实验对象】蟾蜍或蛙 【实验器材和药物】蛙板、蛙类手术器械、刺蛙针；线、小烧杯、滴管、任氏液 【实验方法和步骤】 1 暴露心脏蟾蜍或蛙一只，用刺蛙针破坏脑和脊髓后，将其仰卧固定在蛙板上。用剪刀剪开胸骨表面皮肤并沿中线剪开胸骨，可见心脏包在心包中，仔细剪开心包，暴露出心脏，在窦房沟、房室沟处各预 置一段手术用的丝线 2 观察正常心跳频率 观察它们的跳动次序并计数它们在单位时间内的跳动次数 3 结扎窦房沟，并观察心跳的变化 找到静脉窦和心房交界的半月行白线（窦房沟）。然后将预先穿入的丝线沿着
不同pH值对牛蛙离体心脏收缩活动的影响 2008231144 赖泽红生科一班 摘要：本实验主要是采用斯氏蛙心插管法，在保持灌流液高度恒定的情况下，分别以不同pH值的溶液对牛蛙离体心脏进行灌流，经张力换能器、RM6240D型生物信号采集处理系统与处理系统记录心肌的活动过程，探讨不同pH对离体心脏活动的影响，以揭示酸碱度与心脏收缩活动的关系。 关键词：pH值；离体心脏；收缩活动 生理状态下，血液pH值保持在7.35—7.45，这是保证细胞惊醒正常代谢和机能活动的基本条件。在生命活动的过程中，体内不断生成酸性或碱性产物，机体通过多方面的调解活动，使血液pH值保持在正常范围内。然而，一旦机体酸碱调节失衡，会导致体内酸中毒或碱中毒，对机体造成影响。心脏直接与血液接触，心肌细胞的收缩活动容易受血液pH值的影响。本实验通过用不同PH值的灌流液灌流牛蛙离体心脏，观察其对心脏某些功能的影响，以揭示酸碱度与心脏收缩活动的关系，用离体牛蛙心脏，排除了在体时的神经体液干扰，故实验结果更为可靠。 一、实验材料： 1、实验仪器：RM6240D型生物信号采集处理系统、张力换能器、pH酸度计。 2、常用器械：蛙板或蜡盘，蛙心夹、蛙心套管，滴管，培养皿或小烧杯，玻璃板、容量瓶，移液管、量筒、污物缸，纱布，棉线，
常用手术器械。 3、药品：任氏液， HCL溶液，NaOH溶液。 4、实验动物：牛蛙2-4只（雌雄不限）。 二、实验步骤与方法 1、药品配制 （1）任氏液配制 母液及容量成分 NaCl、 KCl 、CaCl2 、NaH2PO4 、NaHCO3 、葡萄糖、蒸馏水，注: 表内各成分除葡萄糖以 g 为单位外，均以 ml 为单位. 任氏液的配制方法：一般先将各成分分别配制成一定浓度的母液，而后按所要的容量混合。需要注意的是：CaCl2 应在其他母液混合并加入蒸馏水后，再边搅拌边加入，以防钙盐生成。另外，葡萄糖应在用前临时加入，否则不宜久置。两栖类的为PH6.5-7.0 （2）不同PH浓度的任氏液配制。 不同PH值灌流液的配制。首先，校整酸度计。先将酸度计“PH-mv”开关拨到位置。打开电源开关，指示灯亮，预热30分钟。取下放蒸馏水的小烧杯，并用滤纸轻轻地吸去玻璃电极上多余水珠，在小烧杯内放入选择好的已知的PH值准确的缓冲溶液。将电极浸入。根据标准缓冲液的PH，将量程开关拧到 0～7 或 7～14 处。调节控温钮指示的温度与室温相同，调节零点，使指针在PH为7.0处。轻轻按下或稍许转动读数开关使开关卡住。调节定位旋钮，使指针恰好指在标准缓冲溶液的PH值处。放开读数开关，重复操作，直到数
一．实验目的练习双毁髓法，熟练掌握双毁髓技术。1.熟练使用手术器械。尤其是手术剪。2. 辨认和心脏相连的血管，并学会画和心脏相连的血管的图。 3.观察蟾蜍的心脏，学习双穿线手法使心脏游离，辨认与心脏相连的血管，心脏传导系、起搏点 4.，斯氏结扎-2。分析，了解并操作斯氏结扎-1 5.学会心脏搏跳的技术方法。 6.观察蟾蜍的心血管系统，了解两栖类心脏的构造、循环途径及其特点 二、实验原理心脏的特殊传导系统内含有自律细胞，因此具有自动节律性，但各部分的1.，自律性自律性高低不同。两栖类动物心搏起点是静脉窦（哺乳动物是窦房结）也以静脉窦（窦房结）为最高。正常的心脏搏动每次都由静脉窦（窦房结）发出冲动，沿心房传至房室结，再由房室结经房室束传至心室肌，引起心肌收缩。如给心搏起点一个刺激，则心跳频率发生变化；如阻断心搏冲动的正常传导，则出现不同的收缩障碍。原来由静脉窦传导的自律性收缩斯氏结扎是阻碍了心脏传导系，斯氏第一结扎以后，2.由于心房心室的自律性细胞一开始都是有静舒张被切断，致使心房成为其收缩舒张的开始。脉窦传导，所以刚开始结扎会有5~30min的停跳，之后自律性恢复，开始跳动。 A处为斯氏第一次结扎部位，B为斯氏第二次结扎部位 三、动物与器材 实验材料：蟾蜍一只 实验设备：手术器械：解剖盘、大头针、骨剪、直头解剖剪、眼科剪、镊子、眼科镊、动物探针，吸水纸 四．方法与步骤 1.双毁髓麻醉蟾蜍：左手食指与中指、无名指与小指分别夹着前肢、后肢，握住蛙体，拇指按住吻端使头部上下活动，两耳后腺间出现一道褶线，此线中点或用金属毁髓针沿头背中线向后移动触到一凹陷处，即枕骨大孔。拇指下压使头前俯与脊柱相连处凸起，同时将毁髓针由凹陷处垂直刺入1mm，再将针从枕骨大孔向前平行刺入颅腔并在颅腔内搅动，彻底捣毁脑组织使之成为“脊蛙”。 2.用镊子提起胸部中央的皮肤剪一小口，然后向左右两侧肩关节连接线处剪掉。用镊子捏起剑状软骨，在腹肌上剪一小口（注意不要伤及内脏器官），沿皮肤切开的位置剪下一块三角形肌肉，即可看到心包内跳动的心脏。小心用镊子夹起心包膜并剪开，暴露心脏。． 3.实验观察 （1）认识蟾蜍心各部分的构造和名称 自心脏腹面认识心室、心房、动脉圆锥（动脉球）和主动脉，然后用镊子把蟾蜍
实验设计影响骨骼肌收缩的因素 [实验原理] 蛙类的一些生理活动规律与温血动物相似，而维持其离体组织正常活动所需的理化条件较简单，易于建立和控制。坐骨神经和腓肠肌是可兴奋组织，将其置于人工配置的任氏液中，兴奋性在几小时内可保持不变。因此在实验中常用蛙类的坐骨神经-腓肠肌标本来观察和研究兴奋、兴奋性、刺激与肌肉收缩等基本的生理现象和过程。 神经受到一次阈刺激或阈上刺激，先产生一次动作电位，通过神经-肌肉接头处兴奋的传递，引起受支配的骨骼肌产生动作电位，然后通过兴奋-收缩耦联机制引起骨骼肌收缩。在一定范围内，随着刺激强度的增加，骨骼肌的收缩强度也随着增加。 整块骨骼肌或单个肌细胞受到一次短暂而有效的刺激时，可产生一次机械收缩，称为单收缩。若给肌肉相继两个有效刺激，且使两个刺激的间隔时间小于该肌肉单收缩的总时程。则引起肌肉的收缩可以总和起来，出现一连续的收缩，称为复合收缩。当骨骼肌受一串有效刺激时，若刺激频率较低，则肌肉的反应表现为一连串单收缩，若刺激频率逐渐增加，肌肉收缩反应可表现为不完全强直收缩和完全强直收缩 [实验对象] 蟾蜍或蛙。 [实验药品与器材] 青蛙或蟾蜍、常用手术器械（包括粗剪刀、手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、金属探针、玻璃分针）、固定针、锌铜弓、蜡盘、培养皿、污物缸、棉线、纱布、滴管、任氏液 RM6240计算机采集系统、JZ100型张力换能器(50 g)、支架、一维位移微调器、肌槽、双针型露丝电极 [实验方法与步骤] 1. 制备蛙的坐骨神经—腓肠肌标本 1) 毁脑和脊髓 取青蛙一只，用纱布包裹青蛙的四肢和躯干，露出头部。用左手握住青蛙，并用食指压其头部前端使其尽量前俯，拇指按压背部，使头部前俯；右手持金属探针由头前端沿中线向尾方划触，触及凹陷处即枕骨大孔处转向头方，向前探入颅腔内，然后向各个方向搅动探针，以捣毁脑组织。如探针确实在颅腔内，可感觉出针在四面皆壁的腔内。脑组织捣毁后，将探针退出，再由枕骨大孔刺入,并转向尾方,与脊髓平行刺入椎管,以确坏脊髓，要确定脑和脊髓是否完全破坏，可检查动物四肢肌肉的紧张性是否完全消失。 2) 剥制后肢标本 自青蛙的两侧腋部以下完全剥离皮肤（注意：可事先剪去尾椎末端及汇殖腔附近的皮肤，使剥离更容易）。而后倒提蛙腿，使其头部向下，用手术剪横向剪开腹部肌肉，看清脊神经后,用粗剪刀剪断脊柱(注意铁损伤坐骨神经)。把标本浸泡于盛有任氏液的培养皿中，将手及用过的剪刀、镊子等全部手术器械洗净，再继续下面的步骤。
生理学实验报告 坐骨神经-腓肠肌标本的制备 一、实验目的及要求 学习蛙类动物双毁髓的方法 掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的操作技术，为此后有关的神经肌肉实验打下基础。 二、实验原理 蛙或两栖类动物的一些基本生命活动及生理功能与温血动物近似，而且其离体组织需要的生活条件非常简单，易于控制和掌握。因
此在生理学实验中，坐骨神经-腓肠肌标本是研究神经肌肉生理最常用的对象，经常用来研究神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律、肌肉收缩的特点、兴奋性的周期性变化等。 三、实验对象 蟾蜍或蛙。 四、实验器材及药品 蛙类手术器械一套（金属探针1根，粗剪刀、眼科剪刀各1把，圆头镊子、眼科镊子各1把，玻璃分针2根），蛙板和玻璃板各1块，培养皿，滴管，废物缸、锌铜弓，丝线，棉花；任氏液。 五、实验方法及步骤 1、双毁髓：左手握蟾蜍，背部向上。用食指按压其头部前端，拇指压住躯干的背部，使头向前俯；右手持毁髓针，由两眼之间中线向后方划触，触及两耳后腺之间的凹陷处即是枕骨大孔的位置。将毁髓针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔，然后针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，以毁脑组织。再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。脊髓彻底捣毁时，可看到蟾蜍后肢突然蹬直，然后瘫软，此时的动物为双毁髓动物。 2、剥制后肢标本：左手持手术镊提起两前肢之间背部的皮肤，右手持手术剪横向剪断皮肤，然后往后肢方向撕剥皮肤。剪开腹壁肌肉，用手术镊提起内脏，翻向头部，在看清支配后肢的脊神经发出部位后，于其前方剪断脊柱。 3、分离两后肢：将去皮的后肢腹面向上置于解剖盘上，右手持
金冠剪纵向剪开脊柱，再剪开耻骨联合，使两后肢完全分离。 4、分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱端腹面向上，用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经，股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的裂缝，找出坐骨神经，剪断盖在上方的梨状肌，完全暴露坐骨神经，剪去支配腓肠肌之外的分支，再剪去脊柱及肌肉，只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。 5、分离股骨头：沿膝关节剪去股骨周围的肌肉，保留股骨的后2/3，剪断股骨。 6、游离腓肠肌：在腓肠肌跟腱下穿线并结扎，提起结扎线，剪断肌腱与胫腓骨的联系，游离腓肠肌，剪去膝关节下部的后肢，保留腓肠肌与股骨的联系，制备出完整的坐骨神经-腓肠肌标本。标本应包括：坐骨神经、腓肠肌、股骨头和一段脊柱骨四部分。 7、检验标本：用任氏液沾湿的锌铜弓的两极接触神经，如腓肠肌发生收缩，则标本机能正常，把标本固定在肌槽上。 8、连接好装置，调节适宜的灵敏度及刺激强度，开动记录仪，走纸速度为10mm/s,用手控触发开关，以单脉冲刺激神经，记录肌肉的单收缩曲线。 9、分别用1 Hz、2 Hz、3 Hz、4 Hz、6 Hz、12 Hz、24 Hz、30Hz 等频率去刺激坐骨神经，记录肌肉的收缩曲线。 六、分析及讨论 七、思考题 ?1．剥去皮肤的后肢，能用自来水冲洗吗？为什么？
蟾蜍的消化系统生物技术实验报告 蟾蜍的消化系统生物技术实验报告1，观察蟾蜍肠系膜毛细血管 2，观察蟾蜍的消化系统 1，蟾蜍的正确握拿方法，动物探针的正确使用 2，蟾蜍的“双毁髓”手术技术 3，两栖类动物的解剖技术及手术剪的使用 实验动物：雄性蟾蜍一只 实验器械：显微镜，手术剪，骨剪，镊子，吸水纸，大头针，解剖针，解剖盘，有孔的蜡板。 1，左手食指与中指、无名指与小指分别夹着前肢、后肢，握住蟾蜍，拇指按住吻端使头部上下活动，两耳后腺间出现一道褶线，此线中点或用金属毁髓针沿头背中线向后移动触到一凹陷处，即枕骨大孔。拇指下压使头前俯与脊柱相连处凸起，同时将毁髓针由凹陷处垂直刺入~1mm，再将针从枕骨大孔向前平行刺入颅腔并在颅腔内搅动捣毁脑，然后再将毁髓针撤回至枕骨大孔，反向插入脊椎管破坏脊髓，检查蟾蜍四肢肌肉完全松驰后处死成功 2，将蟾蜍置于有孔的蛙板上，腹部朝上，四肢伸展后用大头针固定。左手用镊子提起腹部皮肤，用手术剪前端1/3处剪开一小口，并从小口处向前将腹部皮肤剪开至下颚前端。向后剪至两后肢基部之间，泄殖孔稍前方再将皮肤向两
侧拉开。 3，用镊子提起腹部肌肉，用剪刀沿腹部中线剪开腹壁，拉出一段小肠，用大头针将肠系膜展开并固定在有孔的蜡板上。将肠系膜置于显微镜下观察，找到毛细血管，观察血液的流动并拍摄照片。 4，向两侧拉开蟾蜍的腹部肌肉找到蟾蜍的消化系统，小心地用剪刀和手术剪将其分离，置于解剖盘上并拍摄图片。 5，处理掉蟾蜍，洗净解剖盘和实验器械，将显微镜收好放入柜中。 1， 2， 1，毛细血管是体内分布最广、管壁最薄、口径最小的血管，仅能容纳1个红细胞通过。其管壁主要由一层内皮细胞构成，在内皮外面有一薄层结缔组织。毛细血管血流很慢，通透性大。这些特点有利于血液与组织之间充分进行物质交换。 2，蟾蜍的肝脏在体腔的前部，呈红棕色，不完全地环绕着心包，一般蛙类至少有中，右，左三叶。在中叶的腹面靠近右叶的一边有一颗黄绿色或墨绿色椭圆形的胆囊，具有导管引入胆总管而与小肠相通。 3，消化道的各个部分，在外形和构造上，都有很多变
植物生理学实验指导 主编张立军 参编（按姓氏汉语拚音） 樊金娟郝建军 刘延吉阮燕晔 朱延姝
沈阳农业大学植物生理学教研室 2004年1 月 序 实验课是提高学生动手能力，提高分析问题和解决问题能力的重要途径。植物生理学教研室的全体教师和实验技术人员经过多年的教改探索，认为实验课教学要注意基本实验技能的训练、要有助于提高学生的动手能力，有助于使学生熟悉实验工作；实验内容要有挑战性，能够吸引学生的兴趣。为此，我们在借鉴国外高校和国内其他高校的先进教学经验的基础上，提出了一系列提高实验课教学质量的改革措施，这些措施涉及到实验内容的设置、实验的设计、实验报告的写作，以及实验指导书的编写等多个方面。本学期的实验教学是我们实验教学改革探索的一部分。所有的实验都设计成研究型的，有适当的处理，并尽可能的设置重复。同学们能够通过实验解释一个理论或实际问题。在本次编写的实验指导中我们给出了大量的思考题，有的涉及实验中应注意的问题，有的涉及实验技术的应用，有的涉及实验方法的应用扩展；此外，我们还要求实验报告的形式类似于正式发表的科研报告，并附有写作说明，这有利于培养学生写作科研论文的能力。为了培养良好的科研习惯，对每个实验还都给出相应的记录方式。 本学期是我们教研室首次按这项教学改革研究成果组织教学，希望广大同学配合，也希望相关专业老师、相关部门的领导及广大同学提出宝贵意见、以便使植物生理学实验教学改革更加完善。 张立军 2004 年1月30日 2014年12月29日 1
附：参加教学改革人员： 刘延吉郝建军樊金娟朱延姝阮燕晔康宗利付淑杰于洋 目录 Section 1（1h） 植物生理学实验课简介 1．教学目的 2．教学要求和考核 3．实验内容介绍 4．实验室安全要求 Section 2（6h） 一、植物的光合速率测定-----改良半叶法 二、植物叶绿素素含量测定----丙酮提取法 Section 3（6h） 三、植物组织水势测定----小液流法 四、植物根系活力测定----甲烯蓝法 Section 4（6h） 五、植物抗逆性鉴定----电导率仪法 六、植物组织丙二醛含量测定 Section 5（4h） 七、植物组织硝态氮含量的测定 Section 6（4h） 八、植物呼吸酶活性测定 2
实验三：影响神经冲动传导的因素观察 实验目的： 1．继续学习蟾蜍坐骨神经-腓神经标本制备方法，掌握坐骨神经标本的制备方法。 2．引导蟾蜍坐骨神经动作电位，并观察其基本波形（包括双相和单相动作电位）。 3．学习和掌握神经干动作电位传导速度测定的原理和方法。 4．设计改变细胞外液的某些因素会对动作电位在神经干上传导的速度产生何种影响？ 实验原理： 蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，若将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，其兴奋性在几个小时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激，可在神经和肌肉上产生一个动作电位，肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次，表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在生理学实验中常利用 如果将两个引导电极置于正常完整的神经干表面，当神经干的一端兴奋之后，兴奋波会先后通过两个引导电极(r1r1’,图5坐骨神经干包括多种类型的神经纤维成分，因此记录到的动作电位是它们电位变化的总和，因此神经干动作电位是一种复合动作电位。由于各类神经纤维的兴奋阈值各不相同，所以记录到的动作电位幅值在一定范围内可随刺激强度的变化而改变，这一点不同于单根神经纤维的动作电位。
动作电位在神经纤维上的传导有一定的速度。不同类型的神经纤维动作电位传导速度各不相同。蛙类坐骨神经干中以Aα类纤维为主，传导速度(V)大约为35～40 m/s。测-腓肠肌标本的制备，但无需保留股骨和腓肠肌。坐骨神经干要求尽可能长些。在脊椎附近将神经主干结扎，剪断。提起线头剪去神经干的所有分支和结缔组织，到达腘窝后，可继续分离出腓神经或胫神经，在靠近趾部剪断神经。将制备好的神经标本浸泡在任氏液中数分钟，待其兴奋性稳定后开始实验。 3．仪器及标本的连结 （1）用浸有任氏液的棉球擦拭神经标本屏蔽盒上的电极，标本盒内放置一块湿润的滤纸片，以防标本干燥。用滤纸片吸去标本上过多的任氏液，将其平搭在屏蔽盒的刺激电极、接地电极和引导电极上，并且使其近中端置于刺激电极上，远中，频率8～16 Hz，波宽0.1～0.2 ms，强度根据标本兴奋性而定，由小增大(一般可选2V)。示波器灵敏度0.1～0.5 V/cm，扫描速度1～2 ms/cm。外触发输入接刺激器的触发输出端。触发选择置于外触发同步。开启电子刺激器时，调节触发电平旋钮，使示波器扫描与刺激输出同步。将扫描线调至荧光屏中间。 （3）若使用计算机生物信号采集处理系统进行实验则参照图5.5-2连接仪器。两对记录电极分别连接到CH1、CH2通道，刺激电极连接到刺激输出。打开计算机，启动生物信号采集处理系统，进入“神经干动作电位”模拟实验菜单。 4．观测和测定双相值时的阈刺激。 （2）增大刺激强度的过程中，伪迹和动作电位均随之加大，但当强度加大到某一程度后(此刺激强度称为最大刺激)，动作电位就不再增大，而伪迹仍随之加大。这是区别刺激伪迹与动作电位的可靠方法之一。
生理学实验报告
实验一坐骨神经-腓肠肌标本制备 [1] 实验目的 1.学习机能学实验基本的组织分离技术； 2.学习和掌握制备蛙类坐骨神经-腓肠肌标本的方法； 3.了解刺激的种类。 [2] 实验原理 蛙类的一些基本生命活动和生理功能与恒温动物相似，若将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，其兴奋性在几个小时内可保持不变。若给神经或肌肉一次适宜刺激，可在神经和肌肉上产生一个动作电位，肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次，表明神经和肌肉产生了一次兴奋。在机能学实验中常利用蛙的坐骨神经-腓肠肌标本研究神经、肌肉的兴奋、兴奋性，刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征等，制备坐骨神经腓肠肌标本是机能学实验的一项基本操作技术。 [3] 实验对象 蛙 [4] 实验药品 任氏液 [5] 仪器与器械 普通剪刀、手术剪、眼科镊（或尖头无齿镊）、金属探针（解剖针）、玻璃分针、蛙板（或玻璃板）、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器。 [6] 实验方法与步骤 ①破坏脑、脊髓 取蛙一只，用自来水冲洗干净（勿用手搓）。左手握住蛙，使其背部向上，用大拇指或食指使头前俯(以头颅后缘稍稍拱起为宜)。右手持探针由头颅后缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管（图3-1-1）。然后将探针改向前刺入颅腔内，左右搅动探针2～3次，捣毁脑组织。如果探针在颅腔内，应有碰及颅底骨的感觉。 再将探针退回至枕骨大孔，使针尖转向尾端，捻动探针使其刺入椎管，捣毁脊髓。此时应注意将脊柱保持平直。针进入椎管的感觉是，进针时有一定的阻力，而且随着进针蛙出现下肢僵直或尿失禁现象。若脑和脊髓破坏完全，蛙下颌呼吸运动消失，四肢完全松软，失去一切反射活动。此时可将探针反向捻动，退出椎管。如蛙仍有反射活动，表示脑和脊髓破坏
研究不同因子对肠道平滑肌生 理特性的影响实验 一实验原理 取离体兔肠段置于台氏液中，用计算机采集 系统扫描其收缩曲线，假如滴加不同的因子，观 察他们对于离体肠段平滑肌收缩的影响。通过这 种观察，学习离体肠段平滑肌的实验方法，分析 酸和碱环境下以及不同中药试剂下消化管的收 缩作用。 二、试剂配制 1000ml 台氏液：NaCl 8.0g 、 KCl 0.2g 、 10% MgCl 2 0.1g NaH 2PO 2 0.05g 、NaHCO 3 1.0g 、 CaCL 2 0.2g 、葡萄 糖 1.0g 。蒸馏水加至1000ml 。 配制Ph 分别为6.0,7.0,8.0的试剂，以盐酸和氢氧化钠为原料。 并且分别准备好10ml 的王老吉，菊花茶，凉茶王，藿香正气水。 三、材料与器材 家兔两只 计算机BL-310生物机能系统、HU-I 型力换能器、麦氏浴皿、恒温水浴锅、温度计、手术器械、注射器、缝针、大小烧杯、滴管、丝线。 四、实验步骤 1．如右图装好实验装置，麦氏浴槽外的水浴温度为37℃，浴槽内调温至37±0.5℃.
2．制备离体兔肠段 兔耳缘静脉注射乌拉坦，致其昏迷后立即剖开腹腔，找到胃幽门与十二指肠交界处。在十二指肠起始端扎一线，剪取十二指肠、空肠，放入冷台氏液内。先用20m1注射器冲洗肠内容物，冲洗干净后剪成若干约1．5cm长的小肠段(每一实验小组一段)。在其两端结扎，一端做一短线环固定在通气的L管下方或浴皿内，另一端扎线与张力传感器相连。将肠段完全浸浴在调好温度的麦氏浴槽中，并调整好台氏液充气量(小气泡接连不断)。游离及取出肠段时，动作要快，取兔肠及兔肠穿线时，尽可能不用金属及手指触及。为保持离体肠段的活性，可先预冷充氧的营养液，游离肠段及穿线在预冷的营养液中进行。 3．开启计算机采集系统，接通与张力传感器相连的通道。固定L管并调节扎线与张力传感器，使肠段运动自如又能牵动传感器(注意：扎线不可贴壁或过紧过松)。实验项目-消化实验-肠道平滑肌生理特性的不同影响因素。调节增益与扫描速度，使肠段的运动曲线清晰地显示在显示器上并记录肠段活动曲线。
生理学实验报告-蛙心灌流
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蛙类离体心脏灌流 一、【目的要求】 1、学习离体蛙心灌流法。 2、观察Nａ＋,K+,Ｃa2+及肾上腺素(Adｒ),乙酰胆碱（ＡCｈ)，乳酸对离体心脏活动的影响。 二、【原理】 将离体蛙心（失去神经支配的蛙心）保持在适宜的环境中，在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响，可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性，都与钠、钾及钙等离子有关。外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。 三、【实验仪器】 青蛙、常用手术器械、蛙板（或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。套管夹、0．６5％ＮaＣl、２％ＣａＣl2、1%KCl、１：1０000肾上腺素、1：10000乙酰肌碱、3%乳酸。 四、【方法与步骤】 １、斯氏蛙心插管法 (１)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量(套管内2～3cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山开口处插入动脉圆锥(见右图)。当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内（于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。此时可见套管中血液冲人套管，并使液面随心脏搏动而亡下移动，表明操作成功(否则需退回并重新插入）。用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液。稳定住套管后，轻轻提起备用线，将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎紧(不得漏液）,再将结线固定在套管的小玻璃钩上，然后剪断结扎线上方的血管。轻轻提起套管和心脏,看清静脉窦的位置,于静脉窦下方剪断有牵连的组织，仅保留静脉窦与心脏的联系，使心脏离体(切勿损伤静脉窦)。用任氏液反复冲洗心室内余血,使套管内灌流液不再有残留血液。保持套管内液面高度一致（１．５~２ｃm）,即可进行实验。 (2）将插好离体心脏的套管固定在支架上,用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉(不可夹得过多，以免因夹破心室而漏液)。再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连(如右图）。注意:勿使灌流液滴到传感器上。调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中。 2、实验观察 (1）记录正常心搏曲线 (2）改用0．65%ＮaCＩ溶液灌流,并作好加药标记,观察心搏变化。待曲线氏插管装置出现明显变化时,立即吸去套管中的灌流液,同时做好冲洗标记，并用新鲜任氏液清洗2—3次,待心搏恢复正常。注意:换液时切勿碰套管，以免影响描记曲线的基线,同时保持灌流液面一致(以下同）。