《基础生物化学》试题A
考试时间：2006年1月
闭卷：（√）适用专业：2004级全校各专业等
姓名：学号：专业年级：本试题共五道大题，共4页，满分100分。考试时间120分钟。
注意：1.答题前，请将姓名、学号和专业等准确、清楚地填入答题纸。涂改及模糊不清者，答题纸作废。
2.所有答案请写在答题纸上。
3.试卷若有雷同以零分计。
一、判断题（正确的画“√”，错的画“×”，填入答题框。每题1分，共20分）
1、DNA是遗传物质，而RNA则不是。
2、天然氨基酸都有一个不对称α-碳原子。
3、蛋白质降解的泛肽途径是一个耗能的过程，而蛋白酶对蛋白质的水解不需要ATP。
4、酶的最适温度是酶的一个特征性常数。
5、糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转。
6、哺乳动物无氧下不能存活，因为葡萄糖酵解不能合成A TP。
7、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。
8、变性后的蛋白质其分子量也发生改变。
9、tRNA的二级结构是倒L型。
10、端粒酶是一种反转录酶。
11、原核细胞新生肽链N端第一个残基为fMet，真核细胞新生肽链N端为Met。
12、DNA复制与转录的共同点在于都是以双链DNA为模板，以半保留方式进行，最后形成链状产物。
13、米氏常数（Km）是与反应系统的酶浓度无关的一个常数。
14、对于任一DNA分子来说，分子中的G和C的含量愈高，其熔点（Tm）值愈大。
15、DNA损伤重组修复可将损伤部位彻底修复。
16、蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中将向阴极移动。
17、酮体是在肝内合成，肝外利用。
18、镰刀型红细胞贫血病是一种先天性遗传病，其病因是由于血红蛋白的代谢发生障碍。
19、基因表达的最终产物都是蛋白质。
20、脂肪酸的从头合成需要NADPH+H+作为还原反应的供氢体。
二、单项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共25分）
1、生物素是（）的辅酶。
A、丙酮酸脱氢酶
B、丙酮酸激酶
C、丙酮酸脱羧酶
D、丙酮酸羧化酶
2、参与转录的酶是（）。
A、依赖DNA的RNA聚合酶
B、依赖DNA的DNA聚合酶
C、依赖RNA的DNA聚合酶
D、依赖RNA的RNA聚合酶
3、米氏常数Km是一个可以用来度量（）。
A、酶和底物亲和力大小的常数
B、酶促反应速度大小的常数
C、酶被底物饱和程度的常数
D、酶的稳定性的常数
4、某双链DNA纯样品含15%的A，该样品中G的含量为（）。
A、35%
B、15%
C、30%
D、20%
5、具有生物催化剂特征的核酶（ribozyme）其化学本质是（）。
A、蛋白质
B、RNA
C、DNA
D、酶
6、下列与能量代谢有关的途径不在线粒体内进行的是（）。
A、三羧酸循环
B、氧化磷酸化
C、脂肪酸β氧化
D、糖酵解作用
7、大肠杆菌有三种DNA聚合酶，其中主要参予DNA损伤修复的是（）。
A、DNA聚合酶Ⅰ
B、DNA聚合酶Ⅱ
C、DNA聚合酶Ⅲ
D、都不可以
8、分离鉴定氨基酸的纸层析是（）。
A、离子交换层析
B、亲和层析
C、分配层析
D、薄层层析
9、糖酵解中，下列（）催化的反应不是限速反应。
A、丙酮酸激酶
B、磷酸果糖激酶
C、己糖激酶
D、磷酸丙糖异构酶
10、DNA复制需要：(1)DNA聚合酶Ⅲ；(2)解链蛋白；(3)DNA聚合酶Ⅰ；(4)DNA指导的RNA 聚合酶；(5)DNA连接酶参加。其作用的顺序是（）。
A、(4)(3)(1)(2)(5)
B、(2)(4)(1)(3)(5)
C、(2)(3)(4)(1)(5)
D、(4)(2)(1)(3)(5)
11、脂肪酸分解产生的乙酰CoA的去路是（）。
A、合成脂肪酸
B、氧化供能
C、合成胆固醇
D、以上都是
12、天然蛋白质中不存在的氨基酸是（）。
A、半胱氧酸
B、瓜氨酸
C、甲硫氨酸
D、丝氨酸
13、下面关于tRNA的分子结构特征的描述中正确的是（）。
A、有反密码环和3’端有CCA序列
B、有密码环
C、有反密码环和5’端有CCA序列
D、5’端有CCA序列
14、酶具有高效催化能力的原因是（）。
A、酶能催化热力学上不能进行的反应
B、改变反应的平衡常数
C、降低反应的活化能
D、酶能提高反应物分子的活化能
15、破坏蛋白质α螺旋结构的氨基酸残基之一是（）。
A、亮氨酸
B、甘氨酸
C、脯氨酸
D、谷氨酸
16、蛋白质生物合成的方向是（）。
A、从C端到N端
B、从N端到C端
C、定点双向进行
D、不一定
17、茚三酮与脯氨酸反应时，在滤纸层析谱上呈现（）色斑点。
A、蓝紫
B、红
C、黄
D、绿
18、一种tRNA Arg,其反密码子为GCU，在核糖体上，它可以与mRNA配对的密码子是（）。
A、UGA
B、CGA
C、AGU
D、AGI
19、维系DNA双螺旋稳定的最主要的力是（）。
A、氢键
B、离子键
C、碱基堆积力
D、范德华力
20、以NADP+作为氢受体形成NADPH＋H＋的代谢途径是（）。
A、糖酵解
B、三羧酸循环
C、磷酸戊糖途径
D、糖原异生
21、某一种蛋白质在pH5.0时，向阴极移动，则其等电点是（）。
A、>5.0
B、＝5.0
C、<5.0
D、不确定
22、酶的竞争性抑制剂对酶促反应的影响是（）。
A、Vmax不变，Km增大
B、Vmax不变，Km减小
C、Vmax增大，Km不变
D、Vmax减小，Km不变
23、绝大多数真核生物mRNA5’端有（）。
A、帽子结构
B、poly A
C、起始密码子
D、终止密码子
24、氰化物中毒是由于抑制了（）细胞色素。
A、Cytc
B、Cytb
C、Cytc1
D、Cytaa
3
25、生物体内大多数氨基酸脱去氨基生成α-酮酸是通过（）作用完成的。
A、氧化脱氨基
B、还原脱氨基
C、联合脱氨基
D、转氨基
三、多项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共5分）
1、下列关于蛋白质中L-氨基酸之间形成的肽键的叙述，（）是正确的。
A、具有部分双键的性质
B、比通常的C-N单键短
C、通常有一个反式构型
D、不能自由旋转
2、下列关于蛋白质结构的叙述，（）是正确的。
A、二硫键对稳定蛋白质的构象起重要作用
B、当蛋白质放入水中时，带电荷的氨基酸侧链趋向于排列在分子的外面
C、蛋白质的一级结构决定高级结构
D、氨基酸的疏水侧链很少埋在蛋白质分子的内部
3、下列（）说法是错误的。
A、当动物体内动用脂肪过多过快时，可能由于酮体的大量生成，引起碱中毒。
B、当动物体内缺乏某种维生素时，可引起代谢过程发生障碍。
C、当动物饲料中短缺任何一种氨基酸时，均可引起蛋白质合成困难。
D、某些叶酸类似物因可竞争性地与二氢叶酸还原酶结合，常被用作抗菌和抗肿瘤药物。
4、生物DNA损伤的修复方式有（）。
A、光裂合酶修复
B、切除修复
C、重组修复
D、人工修复
5、关于共价修饰调节酶，下列（）说法是正确。
A、这类酶一般存在活性和无活性两种形式，
B、酶的这两种形式通过酶促的共价修饰相互转变
C、伴有级联放大作用
D、酶蛋白磷酸化活性增大，去磷酸化则失活
四、名词解释（每题4分，共20分）。
DNA半保留复制同工酶酶的活性中心呼吸链糖异生作用
五、问答题（4选3，每题10分，共30分）
1、写出天冬氨酸在体内彻底氧化成CO
2和H
2
0的反应历程，注明其中催化脱氢反应的酶及
其辅助因子，并计算1mol天冬氨酸彻底氧化分解所净生成的ATP的摩尔数。
2、DNA双螺旋结构有些什么基本特点？这些特点能解释哪些最重要的生命现象？
3、试述mRNA、tRNA和rRNA在蛋白质合成中的作用。
《基础生物化学》A参考答案及评分标准
考试时间：2006年1月
一、判断题（正确的画“√”，错的画“×”，填入答题框。每题1分，共20分）
二、单项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共25分）
三、多项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共5分）
四、名词解释（每题4分，共20分）。
DNA半保留复制：DNA在复制时，两条链解开分别作为模板，在DNA聚合酶的催化下按碱基互补的原则合成两条与模板链互补的新链，以组成新的DNA分子（２分）。这样新形成的两个DNA分子与亲代DNA分子的碱基顺序完全一样。由于子代DNA分子中一条链来自亲代，另一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制（２分）。
同工酶来源不同种属或同一种属，甚至同一个体的不同组织或同一组织、同一细胞中分离出具有不同分子形式（2分）但却催化相同反应的酶（２分），称之为同工酶。
酶的活性中心：酶分子中直接与底物结合，并和酶催化作用直接有关的区域叫酶的活性中心或活性部位（２分）。酶的活性中心有两个功能部位：第一个是结合部位，由一些参与底物结合的有一定特性的基团组成；第二个是催化部位，由一些参与催化反应的基团组成，底物的键在此处被打断或形成新的键，从而发生一定的化学变化（２分）。
呼吸链：线粒体基质是呼吸底物氧化的场所，底物在这里氧化所产生的NADH和FADH2将质子和电子转移到内膜的载体上，经过一系列氢载体和电子载体的传递，最后传递给O2生成H2O（3分）。这种由载体组成的电子传递系统称电子传递链，因为其功能和呼吸作用直接相关，亦称为呼吸链（1分）。
糖异生作用：非糖物质转化成糖代谢的中间产物后（1分），在相应的酶催化下,绕过糖酵解途径的三个不可逆反应（2分）,利用糖酵解途径其它酶生成葡萄糖的途径称为糖异生（1分）。
五、问答题（4选3，每题10分，共30分）
1、写出天冬氨酸在体内彻底氧化成CO2和H20的反应历程，注明其中催化脱氢反应的酶及其辅助因子，并计算1mol天冬氨酸彻底氧化分解所净生成的ATP的摩尔数。
答案要点：天冬氨酸在体内彻底氧化成CO
2和H
2
0的反应历程。（3分）脱氢反应的酶：
L-谷氨酸脱氢酶（NAD+），丙酮酸脱氢酶系（CoA，TPP，硫辛酸，FAD，Mg2+），异柠檬酸脱氢酶（NAD+，Mg2+），a-酮戊二酸脱氢酶系（CoA，TPP，硫辛酸，NAD+，Mg2+），琥珀酸脱氢酶（FAD，Fe3+），苹果酸脱氢酶（NAD+）。（3分）共消耗1ATP，生成2ATP、5NADH和1FADH，则净生成：-1+2+3×5+2×1＝18ATP（2分）
2.DNA双螺旋结构有什么基本特点？这些特点能解释哪些最重要的生命现象？
答案要点：a. 两条反向平行的多聚核苷酸链沿一个假设的中心轴右旋相互盘绕而形成，螺旋表面有一条大沟和一条小沟。（2分）b. 磷酸和脱氧核糖单位作为不变的骨架组成位于外侧，作为可变成分的碱基位于内侧，链间碱基按A-T配对，之间形成2个氢键，G-C配对，之间形成3个氢键（碱基配对原则，Chargaff定律）。（2分）c. 螺旋直径2nm，相邻碱基平面垂直距离0.34nm,螺旋结构每隔10个碱基对重复一次，间隔为3.4nm。（2分）该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征，最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA复制、转录和反转录的分子基础，亦是遗传信息传递和表达的分子基础。该模型的提出是本世纪生命科学的重大突破之一，它奠定了生物化学和分子生物学乃至整个生命科学飞速发展的基石。（2分）
3.试述mRNA、tRNA和rRNA在蛋白质合成中的作用。
答案要点：a.mRNA是遗传信息的传递者，是蛋白质生物合成过程中直接指令氨基酸掺入的模板。（3分）b.tRNA在蛋白质合成中不但为每个三联体密码子译成氨基酸提供接合体，还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供运送载体。(4分)c. rRNA与蛋白质结合组成的核糖体是蛋白质生物合成的场所（3分）
《基础生物化学》试题A
考试时间：2006年11月
闭卷：（√）适用专业：2005级全校各专业
姓名：学号：专业年级：本试题共五道大题，共4页，满分100分。考试时间120分钟。
注意：1.答题前，请将姓名、学号和专业等准确、清楚地填入答题纸。涂改及模糊不清者，答题纸作废。
2.所有答案请写在答题纸上。
3.试卷若有雷同以零分计。
一、判断题（正确的画“√”，错的画“×”，填入答题框。每题1分，共20分）
1.所有的蛋白质都具有一、二、三、四级结构。
2.如果DNA一条链的碱基顺序是5’-CTGGAC-3’，则互补链的碱基序列为5’
-GACCTG-3’。
3.脱氧核苷酸的合成与核苷酸的合成相似，都可以从头合成。
4.酶的最适温度是酶的一个特征性常数。
5.镰刀型红细胞贫血病是一种先天性遗传病，其病因是由于血红蛋白的代谢发生障碍。
6.在哺乳动物体内，氨的主要去路是在肾脏合成尿素并随尿排出体外。
7.逆转录酶是一种多功能酶，但它在催化DNA合成时，不需要引物。
8.杂交双链是指DNA双链分开后两股单链的重新结合。
9.限制性内切酶可识别并切割DNA或RNA的特异序列位点，产生粘性末端或平齐末端。
10、端粒酶是一种反转录酶，对维持真核生物染色体DNA的长度具有重要作用。
11、原核细胞新生肽链N端第一个残基为Met，真核细胞新生肽链N端为fMet。
12、构型的改变必须有旧的共价健的破坏和新的共价键的形成，而构象的改变则不发生此变化。
13、RNA聚合酶缺乏核酸外切酶活性，不具备校对功能，因此RNA转录的保真度比DNA复制要低得多。
14、高浓度中性盐可使蛋白质发生变性，并形成不溶性复合物从溶液中沉淀出来。
15、原核生物核糖体大亚基中的16S rRNA有部分序列与其mRNA的SD序列互补。
16、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中，浓缩效应是由于浓缩胶凝胶浓度大引起的一种效应。
17、许多氨基酸的都可作为一碳基团的供体，而一碳基团转移酶的辅酶是FH4。
18、在转录中，双股DNA中作为模板的那条链，称有意义链或正（＋）链。
19、能荷水平之所以影响一些代谢反应，仅仅因为ATP是一些酶的产物或底物。
20、脂肪酸的从头合成需要NADPH+H+作为还原反应的供氢体。
二、单项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共25分）
1、生物素是（）的辅酶。
A、丙酮酸脱氢酶系
B、丙酮酸激酶
C、丙酮酸脱羧酶
D、丙酮酸羧化酶
2、蛋白质生物合成的方向是（）。
A、从C端到N端
B、从N端到C端
C、从5’端到3’端
D、从3’端到5’端
3、某酶今有4种底物(S)，其Km值如下，该酶的最适底物为（）。
A、S1：Km＝5×10-5M
B、S2：Km＝1×10-5M
C、S3：Km＝10×10-5M
D、S4：Km＝0.1×10-5M
4、某双链DNA纯样品含15%的A，该样品中G的含量为（）。
A、35%
B、15%
C、30%
D、20%
5、具有生物催化剂特征的核酶（ribozyme）其化学本质是（）。
A、蛋白质
B、RNA
C、DNA
D、酶
6、下列与能量代谢有关的途径不在线粒体内进行的是（）。
A、三羧酸循环
B、氧化磷酸化
C、脂肪酸β氧化
D、糖酵解作用
7、酶反应速度对底物浓度作图，当底物浓度达一定程度时，得到的是零级反应，对此最恰当的解释是( ) 。
A、形变底物与酶产生不可逆结合
B、酶与未形变底物形成复合物
C、酶的活性部位为底物所饱和
D、过多底物不利于催化反应
8、2，4-二硝基苯酚可抑制细胞的功能，可能是破坏（）作用引起的。
A、NADH电子传递链
B、FADH2电子传递链
C、胞外NADH的穿梭
D、氧化磷酸化
9、糖酵解中，下列（）催化的反应不是限速反应。
A、丙酮酸激酶
B、磷酸果糖激酶
C、己糖激酶
D、磷酸丙糖异构酶
10、DNA复制需要：(1)DNA聚合酶Ⅲ；(2)解链蛋白；(3)DNA聚合酶Ⅰ；(4)DNA指导的RNA 聚合酶；(5)DNA连接酶参加。其作用的顺序是（）。
A、(4)(3)(1)(2)(5)
B、(2)(4)(1)(3)(5)
C、(2)(3)(4)(1)(5)
D、(4)(2)(1)(3)(5)
11、在TCA循环中，下列（）发生了底物水平磷酸化。
A、柠檬酸→α－酮戊二酸
B、α－酮戊二酸→琥珀酸
C、琥珀酸→延胡索酸
D、延胡索酸→苹果酸
12、天然蛋白质中含有的20种氨基酸的结构，通常（）。
A、全部是L－型
B、全部是D型
C、部分是L－型，部分是D－型
D、除甘氨酸外都是L－型
13、某一种蛋白质在pH5.0时，向阴极移动，则其等电点是（）。
A、>5.0
B、＝5.0
C、<5.0
D、不确定
14、只要出现（），蛋白质的α螺旋结构就中断。
A、亮氨酸
B、甘氨酸
C、脯氨酸
D、谷氨酸
15、蛋白质变性常伴变化，有下列（）现象描述错误。
A、丧失生物活性
B、溶解度降低
C、光学性质发生变化
D、对蛋白酶的降解更加不敏感
16、关于共价修饰调节酶，下列（）说法是错误的。
A、这类酶一般存在活性和无活性两种形式，
B、酶的这两种形式通过酶促的共价修饰相互转变
C、伴有级联放大作用
D、酶蛋白磷酸化活性增大，去磷酸化则失活
17、纸层析之所以能分离鉴定丙氨酸和谷氨酸，是因为二者（）的不同。
A、分子量
B、极性
C、对滤纸吸附力
D、对滤纸亲和性
18、在脂肪酸的合成中，每次碳链的延长都需要（）直接参加。
A、乙酰CoA
B、草酰乙酸
C、丙二酸单酰CoA
D、甲硫氨酸
19、维系DNA双螺旋稳定的最主要的力是（）。
A、氢键
B、离子键
C、碱基堆积力
D、范德华力
20、不属于生物DNA损伤暗修复的方式是（）。
A、光裂合酶修复
B、切除修复
C、重组修复
D、差错倾向修复
21、下面关于tRNA的分子结构特征的描述中正确的是（）。
A、有反密码环和3’端有CCA序列
B、有密码环
C、有反密码环和5’端有CCA序列
D、二级结构呈倒L结构
22、酶的竞争性抑制剂对酶促反应的影响是（）。
A、Vmax不变，Km增大
B、Vmax不变，Km减小
C、Vmax增大，Km不变
D、Vmax减小，Km不变
23、绝大多数真核生物mRNA5’端有（）。
A、帽子结构
B、poly A
C、起始密码子
D、终止密码子
24、氰化物中毒是由于抑制了细胞色素（）。
A、Cytc
B、Cytb
C、Cytc
1D、Cytaa
3
25、生物体内大多数氨基酸脱去氨基生成α-酮酸是通过（）作用完成的。
A、氧化脱氨基
B、还原脱氨基
C、联合脱氨基
D、转氨基
三、多项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共5分）
1、保证DNA复制过程忠实性的因素主要有（）。
A、DNA聚合酶的高度专一性
B、DNA聚合酶的校对功能
C、复制起始RNA引物的合成与切除
D、DNA连接酶连接切口
2、下列（）等在生化反应中，可以作为脂酰基的载体。
A、CoA
B、CoQ
C、ATP
D、ACP
3、下列关于蛋白质结构的叙述，（）是正确的。
A、二硫键对稳定蛋白质的构象起重要作用
B、当蛋白质放入水中时，带电荷的氨基酸侧链趋向于排列在分子的外面
C、蛋白质的一级结构决定高级结构
D、氨基酸的疏水侧链很少埋在蛋白质分子的内部
4、ATP在新陈代谢中具有的作用，（）是正确的。
A、ATP是细胞内的“能量通货”
B、ATP是细胞内磷酸基团转移的中间载体
C、ATP参与单糖基的活化
D、ATP是细胞的“第二信使”
5、下列（）说法是错误的。
A、当动物体内动用脂肪过多过快时，可能由于酮体的大量生成，引起碱中毒。
B、当动物体内缺乏某种维生素时，可引起代谢过程发生障碍。
C、当动物饲料中短缺任何一种氨基酸时，均可引起蛋白质合成困难。
D、某些叶酸类似物因竞争性地与二氢叶酸还原酶结合，常被用作抗菌和抗肿瘤药物。
四、名词解释（每题4分，共20分）。
氧化磷酸化同工酶酶的活性中心遗传密码 DNA半保留复制
五、问答题（1、2和3题必做，4和5任选1题，共30分）
1、请列举细胞内乙酰CoA的代谢去向。（5分）
2、酿酒业是我国传统轻工业的重要产业之一，其生化机制是在酿酒酵母等微生物的作用下从葡萄糖代谢为乙醇的过程。请写出在细胞内葡萄糖转化为乙醇的代谢途径，并注明其中催化脱氢反应和发生底物水平磷酸化反应的酶及其辅助因子。（10分）
3、试述mRNA、tRNA和rRNA在蛋白质合成中的作用。（10分）
4、为什么说三羧酸循环是糖、脂、蛋白质三大物质代谢的共同通路？哪些化合物可以被认为是联系糖、脂、蛋白质和核酸代谢的重要环节？为什么？（10分）
《基础生物化学》A参考答案及评分标准
考试时间：2006年11月
一、判断题（正确的画“√”，错的画“×”，填入答题框。每题1分，共20分）
二、单项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共25分）
三、多项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共5分）
四、名词解释（每题4分，共20分）。
氧化磷酸化：代谢物在生物氧化过程中释放出的自由能用于合成ATP（即ADP+Pi→ATP）（２分）,这种氧化放能和ATP生成（磷酸化）相偶联的过程（２分）称氧化磷酸化。
同工酶来源不同种属或同一种属，甚至同一个体的不同组织或同一组织、同一细胞中分离出具有不同分子形式（2分）但却催化相同反应的酶（２分），称之为同工酶。
酶的活性中心：酶分子中直接与底物结合，并和酶催化作用直接有关的区域叫酶的活性中心或活性部位（２分）。酶的活性中心有两个功能部位：第一个是结合部位，由一些参与底物结合的有一定特性的基团组成；第二个是催化部位，由一些参与催化反应的基团组成，底物的键在此处被打断或形成新的键，从而发生一定的化学变化（２分）。
遗传密码：DNA（或mRNA）中的核苷酸序列与蛋白质中氨基酸序列之间的对应关系称为遗传密码（3分）。答有密码子的（1分）。
DNA半保留复制：DNA在复制时，两条链解开分别作为模板，在DNA聚合酶的催化下按碱基互补的原则合成两条与模板链互补的新链，以组成新的DNA分子（2分）。这样新形成的两个DNA分子与亲代DNA分子的碱基顺序完全一样。由于子代DNA分子中一条链来自亲代，另一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制（2分）。
五、问答题（4选3，每题10分，共30分）
1、请列举细胞内乙酰CoA的代谢去向。（5分）
答案要点：三羧酸循环；乙醛酸循环；从头合成脂肪酸；酮体代谢；合成胆固醇等。（各1分）
2、酿酒业是我国传统轻工业的重要产业之一，其生化机制是在酿酒酵母等微生物的作用下从葡萄糖代谢为乙醇的过程。请写出在细胞内葡萄糖转化为乙醇的代谢途径，并注明其中催化脱氢反应和发生底物水平磷酸化反应的酶及其辅助因子。
答案要点：从葡萄糖代谢为乙醇的反应历程。（6分）
脱氢反应的酶：3-磷酸甘油醛脱氢酶（NAD＋），醇脱氢酶（NADH+H+）（2分）底物水平磷酸化反应的酶：磷酸甘油酸激酶，丙酮酸激酶（Mg2+或K+）（2分）
3.试述mRNA、tRNA和rRNA在蛋白质合成中的作用。
答案要点：①mR NA是遗传信息的传递者，是蛋白质生物合成过程中直接指令氨基酸掺入的模板。（3分）②.tRNA在蛋白质合成中不但为每个三联体密码子译成氨基酸提供接合体，还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供运送载体。(4分)③. rRNA 与蛋白质结合组成的核糖体是蛋白质生物合成的场所（3分）。
4、为什么说三羧酸循环是糖、脂、蛋白质三大物质代谢的共同通路？哪些化合物可以被认为是联系糖、脂、蛋白质和核酸代谢的重要环节？为什么？
答案要点：①三羧酸循环是糖、脂、蛋白质三大物质代谢的共同氧化分解途径（2分）；三羧酸循环为糖、脂、蛋白质三大物质合成代谢提供原料（1分），要举例（2分）。②列举出糖、脂、蛋白质、核酸代谢相互转化的一些化合物（3分），糖、脂、蛋白质、核酸代谢相互转化相互转化途径（2分）。
《基础生物化学》试题A
考试时间：2007年1月
闭卷：（√）适用专业：2005级医工、草学、动检等
姓名：学号：专业年级：本试题共五道大题，共4页，满分100分。考试时间120分钟。
注意：1.答题前，请将姓名、学号和专业等准确、清楚地填入答题纸。涂改及模糊不清者，答题纸作废。
2.所有答案请写在答题纸上。
3.试卷若有雷同以零分计。
一、判断题（正确的画“√”，错的画“×”，填入答题框。每题1分，共20分）
1.DNA是遗传物质，而RNA则不是。
2.天然氨基酸都有一个不对称α-碳原子。
3.蛋白质降解的泛肽途径是一个耗能的过程，而蛋白酶对蛋白质的水解不需要ATP。
4.酶的最适温度是酶的一个特征性常数。
5.糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转。
6.哺乳动物无氧下不能存活，因为葡萄糖酵解不能合成A TP。
7.DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。
8.变性后的蛋白质其分子量也发生改变。
9.tRNA的二级结构是倒L型。
10、端粒酶是一种反转录酶。
11、原核细胞新生肽链N端第一个残基为fMet，真核细胞新生肽链N端为Met。
12、DNA复制与转录的共同点在于都是以双链DNA为模板，以半保留方式进行，最后形成链状产物。
13、米氏常数（Km）是与反应系统的酶浓度无关的一个常数。
14、对于任一DNA分子来说，分子中的G和C的含量愈高，其熔点（Tm）值愈大。
15、DNA损伤重组修复可将损伤部位彻底修复。
16、蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中将向阴极移动。
17、酮体是在肝内合成，肝外利用。
18、镰刀型红细胞贫血病是一种先天性遗传病，其病因是由于血红蛋白的代谢发生障碍。
19、基因表达的最终产物都是蛋白质。
20、脂肪酸的从头合成需要NADPH+H+作为还原反应的供氢体。
二、单项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共25分）
1、生物素是（）的辅酶。
A、丙酮酸脱氢酶
B、丙酮酸激酶
C、丙酮酸脱羧酶
D、丙酮酸羧化酶
2、参与转录的酶是（）。
A、依赖DNA的RNA聚合酶
B、依赖DNA的DNA聚合酶
C、依赖RNA的DNA聚合酶
D、依赖RNA的RNA聚合酶
3、米氏常数Km是一个可以用来度量（）。
A、酶和底物亲和力大小的常数
B、酶促反应速度大小的常数
C、酶被底物饱和程度的常数
D、酶的稳定性的常数
4、某双链DNA纯样品含15%的A，该样品中G的含量为（）。
A、35%
B、15%
C、30%
D、20%
5、具有生物催化剂特征的核酶（ribozyme）其化学本质是（）。
A、蛋白质
B、RNA
C、DNA
D、酶
6、下列与能量代谢有关的途径不在线粒体内进行的是（）。
A、三羧酸循环
B、氧化磷酸化
C、脂肪酸β氧化
D、糖酵解作用
7、大肠杆菌有三种DNA聚合酶，其中主要参予DNA损伤修复的是（）。
A、DNA聚合酶Ⅰ
B、DNA聚合酶Ⅱ
C、DNA聚合酶Ⅲ
D、都不可以
8、分离鉴定氨基酸的纸层析是（）。
A、离子交换层析
B、亲和层析
C、分配层析
D、薄层层析
9、糖酵解中，下列（）催化的反应不是限速反应。
A、丙酮酸激酶
B、磷酸果糖激酶
C、己糖激酶
D、磷酸丙糖异构酶
10、DNA复制需要：(1)DNA聚合酶Ⅲ；(2)解链蛋白；(3)DNA聚合酶Ⅰ；(4)DNA指导的RNA 聚合酶；(5)DNA连接酶参加。其作用的顺序是（）。
A、(4)(3)(1)(2)(5)
B、(2)(4)(1)(3)(5)
C、(2)(3)(4)(1)(5)
D、(4)(2)(1)(3)(5)
11、脂肪酸分解产生的乙酰CoA的去路是（）。
A、合成脂肪酸
B、氧化供能
C、合成胆固醇
D、以上都是
12、天然蛋白质中不存在的氨基酸是（）。
A、半胱氧酸
B、瓜氨酸
C、甲硫氨酸
D、丝氨酸
13、下面关于tRNA的分子结构特征的描述中正确的是（）。
A、有反密码环和3’端有CCA序列
B、有密码环
C、有反密码环和5’端有CCA序列
D、5’端有CCA序列
14、酶具有高效催化能力的原因是（）。
A、酶能催化热力学上不能进行的反应
B、改变反应的平衡常数
C、降低反应的活化能
D、酶能提高反应物分子的活化能
15、破坏蛋白质α螺旋结构的氨基酸残基之一是（）。
A、亮氨酸
B、甘氨酸
C、脯氨酸
D、谷氨酸
16、蛋白质生物合成的方向是（）。
A、从C端到N端
B、从N端到C端
C、定点双向进行
D、不一定
17、茚三酮与脯氨酸反应时，在滤纸层析谱上呈现（）色斑点。
A、蓝紫
B、红
C、黄
D、绿
18、一种tRNA Arg,其反密码子为GCU，在核糖体上，它可以与mRNA配对的密码子是（）。
A、UGA
B、CGA
C、AGU
D、AGI
19、维系DNA双螺旋稳定的最主要的力是（）。
A、氢键
B、离子键
C、碱基堆积力
D、范德华力
20、以NADP+作为氢受体形成NADPH＋H＋的代谢途径是（）。
A、糖酵解
B、三羧酸循环
C、磷酸戊糖途径
D、糖原异生
21、某一种蛋白质在pH5.0时，向阴极移动，则其等电点是（）。
A、>5.0
B、＝5.0
C、<5.0
D、不确定
22、酶的竞争性抑制剂对酶促反应的影响是（）。
A、Vmax不变，Km增大
B、Vmax不变，Km减小
C、Vmax增大，Km不变
D、Vmax减小，Km不变
23、绝大多数真核生物mRNA5’端有（）。
A、帽子结构
B、poly A
C、起始密码子
D、终止密码子
24、氰化物中毒是由于抑制了（）细胞色素。
A、Cytc
B、Cytb
C、Cytc1
D、Cytaa
3
25、生物体内大多数氨基酸脱去氨基生成α-酮酸是通过（）作用完成的。
A、氧化脱氨基
B、还原脱氨基
C、联合脱氨基
D、转氨基
三、多项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共5分）
1、保证DNA复制过程忠实性的因素主要有（）。
A、DNA聚合酶的高度专一性
B、DNA聚合酶的校对功能
C、复制起始RNA引物的合成与切除
D、DNA连接酶连接切口
2、下列（）等在生化反应中，可以作为脂酰基的载体。
A、CoA
B、CoQ
C、ATP
D、ACP
3、下列关于蛋白质结构的叙述，（）是正确的。
A、二硫键对稳定蛋白质的构象起重要作用
B、当蛋白质放入水中时，带电荷的氨基酸侧链趋向于排列在分子的外面
C、蛋白质的一级结构决定高级结构
D、氨基酸的疏水侧链很少埋在蛋白质分子的内部
4、ATP在新陈代谢中具有的作用，（）是正确的。
A、ATP是细胞内的“能量通货”
B、ATP是细胞内磷酸基团转移的中间载体
C、ATP参与单糖基的活化
D、ATP是细胞的“第二信使”
5、下列（）说法是错误的。
A、当动物体内动用脂肪过多过快时，可能由于酮体的大量生成，引起碱中毒。
B、当动物体内缺乏某种维生素时，可引起代谢过程发生障碍。
C、当动物饲料中短缺任何一种氨基酸时，均可引起蛋白质合成困难。
D、某些叶酸类似物因竞争性地与二氢叶酸还原酶结合，常被用作抗菌和抗肿瘤药物。
四、名词解释（每题4分，共20分）。
蛋白质的变性作用酶的活性中心呼吸链糖异生作用β－氧化
五、问答题（1、2和3题必做，4和5任选1题，共30分）
1、试述遗传中心法则的主要内容。（5分）
2、乙酰CoA可进入哪些代谢途径？请列出。（5分）
3、写出天冬氨酸在体内彻底氧化成CO
2和H
2
0的反应历程，注明其中催化脱氢反应的酶及
其辅助因子，并计算1mol天冬氨酸彻底氧化分解所净生成的ATP的摩尔数。（10分）4、试述mRNA、tRNA和rRNA在蛋白质合成中的作用。
《基础生物化学》A参考答案及评分标准
考试时间：2007年1月
一、判断题（正确的画“√”，错的画“×”，填入答题框。每题1分，共20分）
二、单项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共25分）
三、多项选择题（请将正确答案填在答题框内。每题1分，共5分）
四、名词解释（每题4分，共20分）。
DNA半保留复制：DNA在复制时，两条链解开分别作为模板，在DNA聚合酶的催化下按碱基互补的原则合成两条与模板链互补的新链，以组成新的DNA分子（２分）。这样新形成的两个DNA分子与亲代DNA分子的碱基顺序完全一样。由于子代DNA分子中一条链来自亲代，另一条链是新合成的，这种复制方式称为半保留复制（２分）。
同工酶来源不同种属或同一种属，甚至同一个体的不同组织或同一组织、同一细胞中分离出具有不同分子形式（2分）但却催化相同反应的酶（２分），称之为同工酶。
酶的活性中心：酶分子中直接与底物结合，并和酶催化作用直接有关的区域叫酶的活性中心或活性部位（２分）。酶的活性中心有两个功能部位：第一个是结合部位，由一些参与底物结合的有一定特性的基团组成；第二个是催化部位，由一些参与催化反应的基团组成，底物的键在此处被打断或形成新的键，从而发生一定的化学变化（２分）。
呼吸链：线粒体基质是呼吸底物氧化的场所，底物在这里氧化所产生的NADH和FADH2将质子和电子转移到内膜的载体上，经过一系列氢载体和电子载体的传递，最后传递给O2生成H2O（3分）。这种由载体组成的电子传递系统称电子传递链，因为其功能和呼吸作用直接相关，亦称为呼吸链（1分）。
糖异生作用：非糖物质转化成糖代谢的中间产物后（1分），在相应的酶催化下,绕过糖酵解途径的三个不可逆反应（2分）,利用糖酵解途径其它酶生成葡萄糖的途径称为糖异生（1分）。
五、问答题（4选3，每题10分，共30分）
1.写出天冬氨酸在体内彻底氧化成CO
2和H
2
0的反应历程，注明其中催化脱氢反应的酶及
其辅助因子，并计算1mol天冬氨酸彻底氧化分解所净生成的ATP的摩尔数。
答案要点：天冬氨酸在体内彻底氧化成CO
2和H
2
0的反应历程。（3分）脱氢反应的酶：
L-谷氨酸脱氢酶（NAD+），丙酮酸脱氢酶系（CoA，TPP，硫辛酸，FAD，Mg2+），异柠檬酸脱氢酶（NAD+，Mg2+），a-酮戊二酸脱氢酶系（CoA，TPP，硫辛酸，NAD+，Mg2+），琥珀酸脱氢酶（FAD，Fe3+），苹果酸脱氢酶（NAD+）。（3分）共消耗1ATP，生成2ATP、5NADH和1FADH，则净生成：-1+2+3×5+2×1＝18ATP（2分）
2.DNA双螺旋结构有什么基本特点？这些特点能解释哪些最重要的生命现象？
答案要点：a. 两条反向平行的多聚核苷酸链沿一个假设的中心轴右旋相互盘绕而形成，螺旋表面有一条大沟和一条小沟。（2分）b. 磷酸和脱氧核糖单位作为不变的骨架组成位于外侧，作为可变成分的碱基位于内侧，链间碱基按A-T配对，之间形成2个氢键，G-C配对，之间形成3个氢键（碱基配对原则，Chargaff定律）。（2分）c. 螺旋直径2nm，相邻碱基平面垂直距离0.34nm,螺旋结构每隔10个碱基对重复一次，间隔为3.4nm。（2分）该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征，最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA复制、转录和反转录的分子基础，亦是遗传信息传递和表达的分子基础。该模型的提出是本世纪生命科学的重大突破之一，它奠定了生物化学和分子生物学乃至整个生命科学飞速发展的基石。（2分）
3.试述mRNA、tRNA和rRNA在蛋白质合成中的作用。
答案要点：a.mRNA是遗传信息的传递者，是蛋白质生物合成过程中直接指令氨基酸掺入的模板。（3分）b.tRNA在蛋白质合成中不但为每个三联体密码子译成氨基酸提供接合体，还为准确无误地将所需氨基酸运送到核糖体上提供运送载体。(4分)c. rRNA与蛋白质结合组成的核糖体是蛋白质生物合成的场所（3分）
【实验操作考核要点】 一、目的要求 1．掌握组织样品的制备方法，了解其注意事项。 2．了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项，掌握其操作方法。 3．正确操作使用刻度吸管和可调微量移液器。 4．熟练运用溶液混匀的各种方法（视具体情况，采用合适的混匀方法）。 5．正确掌握溶液转移的操作。 6．正确操作使用分光光度计。 二、操作考核内容 按百分制计。 1．吸量管操作（20分）； 2．可调式微量移液器操作（20分）； 3．溶液混匀操作（视具体情况，采用合适的混匀方法）（15分）； 4．溶液转移操作（10分）； 5．分光光度计比色操作（25分）。 6．整体表现（10分）。 三、操作考核标准 （一）吸量管操作（20分，每项操作5分） 1．执管 要求右手拿吸量管，左手拿橡皮球，只能用食指而不能用拇指按压吸量管上口来调节吸取液量的刻度；吸液、排液整个操作过程吸量管应始终保持垂直。 2．坐姿 要求腰、背保持竖直，看刻度时眼睛保持平视。 3．吸取溶液 吸量管插入液面深度约0.5cm，不能一插到底，也不能插入过浅而吸进空气致使溶液进入橡皮球内；调控吸量管吸取液量的刻度时，吸量管尖应离开液面靠在容器内壁上。 4．排出液体
吸量管尖应靠上受纳容器内壁，让管内溶液自然流出。不能用橡皮球吹压，而且在流净后吸量管尖停靠受纳容器内壁至少3秒。 （二）可调式微量移液器操作（20分，每项操作5分） 1．设定容量值 转动加样器的调节旋钮，反时针方向转动旋钮，可提高设定取液量。顺时针方向转动旋钮，可降低设定取液量。在调整设定移液量的旋钮时，不要用力过猛，并应注意使取液器显示的数值不超过其可调范围。 2．吸液 （1）选择合适的吸头安放在取液套筒上，稍加扭转压紧吸嘴使之与套筒之间无空气间隙； （2）把按钮压至第一停点，垂直握持加样器,使吸头浸入液面下2~3毫米处,然后缓慢平稳地松开按钮，吸入液体，等一秒钟，然后将吸头提离液面，贴壁停留2-3秒，使管尖外侧的液滴滑落。 3．放液 （1）将吸头口贴到容器内壁底部并保持100°~40°倾斜； （2）平稳地把按钮压到第一停点，等一秒钟后再把按钮压到第二停点以排出剩余液体； （3）压住按钮，同时提起加样器，使吸头贴容器壁擦过，再松开按钮。按吸头弹射器除去吸头。 4．压放按钮时保持平稳；加样器不得倒转；吸头中有液体时不可将加样器平放。取液器吸嘴为一次性使用。实验完毕，将取液器读数调至最大量程值，竖立放于支架上。 （三）溶液的混匀（操作流程中下划实线的三处，每项操作5分，共15分）1．肝糖原的提取与鉴定操作中，肝匀浆上清液中加5ml 95%乙醇后的混匀最好用倾倒混匀，也可用滴管或吸量管吸、吹混匀，或用玻璃棒搅拌混匀。 2．肝糖原定量测定中，肝组织消化液沸水浴后全部转入100 ml容量瓶，加水至刻线后的混匀应采用倒转混匀。 3．肝糖原定量测定中，加蒽酮溶液后的混匀，可将试管倾斜约45o再作旋转混匀。因蒽酮溶液（浓硫酸配制）比重大于样品水溶液很多，一加入便沉于管
第五章脂类代谢 【测试题】 一、名词解释 1.脂肪动员 2.脂酸的β-氧化 3.酮体 4.必需脂肪酸 5.血脂 6.血浆脂蛋白 7.高脂蛋白血症 8.载脂蛋白 受体代谢途径 10.酰基载体蛋白（ACP） 11.脂肪肝 12.脂解激素 13.抗脂解激素 14.磷脂 15.基本脂 16.可变脂 17.脂蛋白脂肪酶 18.卵磷脂胆固醇脂酰转移酶（LCAT） 19.丙酮酸柠檬酸循环 20.胆汁酸 二、填空题 21.血脂的运输形式是，电泳法可将其为、、、四种。 22.空腹血浆中含量最多的脂蛋白是，其主要作用是。 23.合成胆固醇的原料是，递氢体是，限速酶是，胆固醇在体内可转化为、、。 24.乙酰CoA的去路有、、、。 25.脂肪动员的限速酶是。此酶受多种激素控制，促进脂肪动员的激素称，抑制脂肪动员的激素称。 26.脂肪酰CoA的β-氧化经过、、和四个连续反应步骤，每次β-氧化生成一分子和比原来少两个碳原子的脂酰CoA，脱下的氢由和携带，进入呼吸链被氧化生成水。 27.酮体包括、、。酮体主要在以为原料合成，并在被氧化利用。 28.肝脏不能利用酮体，是因为缺乏和酶。 29.脂肪酸合成的主要原料是，递氢体是，它们都主要来源于。 30.脂肪酸合成酶系主要存在于，内的乙酰CoA需经循环转运至而用 于合成脂肪酸。 31.脂肪酸合成的限速酶是，其辅助因子是。 32.在磷脂合成过程中，胆碱可由食物提供，亦可由及在体内合成，胆碱及乙醇胺由活化的及提供。 33.脂蛋白CM 、VLDL、 LDL和HDL的主要功能分别是、，和。 34.载脂蛋白的主要功能是、、。 35.人体含量最多的鞘磷脂是，由、及所构成。
中国农业大学研究生入学考试复习资料 《生物化学》重点大题 1．简述Chargaff 定律的主要内容。 答案：(1）不同物种生物的DNA 碱基组成不同，而同一生物不同组织、器官的DNA 碱基组成相同。(2）在一个生物个体中，DNA 的碱基组成并不随年龄、营养状况和环境变化而改变。 (3）几乎所有生物的DNA 中，嘌呤碱基的总分子数等于嘧啶碱基的总分子数，腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T) 的分子数量相等，鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的分子数量相等，即A＋G=T＋C。这些重要的结论统称 为Chargaff 定律或碱基当量定律。 2．简述DNA 右手双螺旋结构模型的主要内容。 答案：DNA 右手双螺旋结构模型的主要特点如下： (1）DNA 双螺旋由两条反向平行的多核苷酸链构成，一条链的走向为5′→3′，另一条链的走向为3′→5′;两条链绕同一中心轴一圈一圈上升，呈右手双螺旋。 (2）由脱氧核糖和磷酸构成的骨架位于螺旋外侧，而碱基位于螺旋内侧。 (3）两条链间A 与T 或C 与G 配对形成碱基对平面，碱基对平面与螺旋的虚拟中心轴垂直。 (4）双螺旋每旋转一圈上升的垂直高度为3.4nm(即34?），需要10 个碱基对，螺旋直径是2.0nm。(5）双螺旋表面有两条深浅不同的凹沟，分别称为大沟和小沟。 3．简述DNA 的三级结构。 答案：在原核生物中，共价闭合的环状双螺旋DNA 分子，可再次旋转形成超螺旋，而且天然DNA 中多为负超螺旋。真核生物线粒体、叶绿体DNA 也是环形分子，能形成超螺旋结构。真核细胞核内染色体是DNA 高级结构的主要表现形式，由组蛋白H2A、H2B、H3、H4 各两分子形成组蛋白八聚体，DNA 双螺旋缠绕其上构成核小体，核小体再经多步旋转折叠形成棒状染色体，存在于细胞核中。 4．简述tRNA 的二级结构与功能的关系。 答案：已知的tRNA 都呈现三叶草形的二级结构，基本特征如下：(1）氨基酸臂，由7bp 组成，3′末端有-CCA-OH 结构，与氨基酸在此缩合成氨基酰-tRNA，起到转运氨基酸的作用;(2）二氢尿嘧啶环(DHU、I 环或D 环），由8～12 个核苷酸组成，以含有5，6-二氢尿嘧啶为特征;(3）反密码环，其环中部的三个碱基可与mRNA 的三联体密码子互补配对，在蛋白质合成过程中可把正确的氨基酸引入合成位点;(4)额外环，也叫可变环，通常由3～21 个核苷酸组成;(5)TψC 环，由7 个核苷酸组成环，和tRNA 与核糖体的结合有关。 5．简述真核生物mRNA 3′端polyA 尾巴的作用。 答案：真核生物mRNA 的3′端有一段多聚腺苷酸(即polyA)尾巴，长约20～300 个腺苷酸。该尾巴与mRNA 由细胞核向细胞质的移动有关，也与mRNA 的半衰期有关;研究发现，polyA 的长短与mRNA 寿命呈正相关，刚合成的mRNA 寿命较长，“老”的mRNA 寿命较短。 6．简述分子杂交的概念及应用。 答案：把不同来源的DNA(RNA）链放在同一溶液中进行热变性处理，退火时，它们之间某些序列互补的区域可以通过氢键重新形成局部的DNA-DNA 或DNA-RNA 双链，这一过程称为分子杂交，生成的双链称杂合双链。DNA 与DNA 的杂交叫做Southern 杂交，DNA 与RNA 杂交叫做Northern 杂交。 核酸杂交已被广泛应用于遗传病的产前诊断、致癌病原体的检测、癌基因的检测和诊断、亲子鉴定和动
一、名词解释 二、选择题（每题1分，共20分） 1、蛋白质多肽链形成α-螺旋时，主要靠哪种次级键维持（） A：疏水键；B：肽键： C：氢键；D：二硫键。 2、在蛋白质三级结构中基团分布为（）。A：疏水基团趋于外部，亲水基团趋于内部；B：疏水基团趋于内部，亲水基团趋于外部；C：疏水基团与亲水基团随机分布； D：疏水基团与亲水基团相间分布。 3、双链DNA的Tm较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致（） A：A+G；B：C+T： C：A+T；D：G+C。 4、DNA复性的重要标志是（）。 A：溶解度降低； B：溶液粘度降低； C：紫外吸收增大； D：紫外吸收降低。 5、酶加快反应速度的原因是（）。 A：升高反应活化能； B：降低反应活化能； C：降低反应物的能量水平； D：升高反应物的能量水平。 6、非竟争性抑制剂对酶促反应动力学的影响是（）。 A：Km增大，Vm变小； B：Km减小，Vm变小； C：Km不变，Vm变小； D：Km与Vm无变化。 7、电子经FADH2呼吸链交给氧生成水时释放的能量，偶联产生的ATP数为（） A：1；B：2；C：3；D：4。8、不属于呼吸链组分的是（） A：Cytb；B：CoQ；C：Cytaa3；D：CO2。 9、催化直链淀粉转化为支链淀粉的是（）A：R酶；B：D酶； C：Q酶；D：α—1，6糖苷酶 10、三羧酸循环过程叙述不正确的是（）。A：循环一周可产生3个NADH、1个FADH2、1个GTP； B：可使乙酰CoA彻底氧化； C：有两步底物水平磷酸化； D：有4—6碳的羧酸。 11、生物体内脂肪酸氧化的主要途径是（）。A：α—氧化；B：β—氧化； C：ω—氧化；D：过氧化。12、脂肪酸从头合成途径不具有的特点是（）A：利用乙酰CoA作为活化底物； B：生成16碳脂肪酸； C：需要脂肪酸合成本科系催化； D：在细胞质中进行。 13、转氨酶的辅酶是（） A：FAD；B：NADP+； C：NAD+；D：磷酸吡哆醛。 14、氨基酸分解的主要途径是（）。 A：氧化脱氨基作用；B：裂解作用； C：脱氨基作用；D：水解作用。 15、合成嘌呤环的氨基酸是（）。 A：甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酸； B：甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺； C：甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺； D：蛋氨酸、天冬酰胺、谷氨酸。 16、植物体的嘌呤降解物是以（）形式输送到细嫩组织的。 A：尿酸；B：尿囊酸； C：乙醛酸；D：尿素。 17、DNA复制方式为（）。 A：全保留复制； B：半保留复制； C：混合型复制； D：随机复制。 18、DNA复制时不需要下列那种酶（）。 A：DNA聚合酶； B：引物酶； C：DNA连接酶； D：RNA聚合酶。 19、细胞内编码20种氨基酸密码子总数为（）A：16；B：64；C：20；D：61。20、mRNA在蛋白质合成重要性在于携带有（）A：遗传密码； B：氨基酸； C：识别密码子的结构； D：各种蛋白质因子的结合部位。 三、填空题（每空1分，共20分）。 1、蛋白质在等电点时，溶解度最（），导电性最（）。 2、米氏常数值大时，酶与底物的（）小；酶作用于不同底物，其米氏常数（），其中米氏常数值最小的称为（）。 3、生物氧化是（）在细胞中（），同时产生（）的过程。 4、麦芽糖是（）水解的中间产物。它是
大学生生物化学实验技能大赛初赛试题及答案 一、选择题 1、下列实验仪器中，常用来取用块状固体药品的仪器是（）。 A. 药匙 B. 试管夹 C. 镊子 D. 坩埚钳 2、托盘天平调零后，在左盘衬纸上置氧化铜粉末，右盘衬纸上置1个5g砝码，游码标尺示数如下，此时天平平衡。则被称量的氧化铜质量为（）。 A. 8.3 g B. 7.7 g C. 3.3 g D. 2.7 g 3、用减量法从称量瓶中准确称取0.4000 g分析纯的NaOH固体，溶解后稀释到100.0 mL，所得NaOH溶液的浓度为（）。 A. 小于0.1000 mol/L B. 等于0.1000 mol/L C. 大于0.1000 mol/L D. 三种情况都有可能 4、已知邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）的摩尔质量为204.2 g/mol，用作为基准物质标定0.1 mol/L NaOH溶液时，如果要消耗NaOH溶液为25 mL左右，每份应称取邻苯二甲酸氢钾（）g左右。 A. 0.1 B. 0.2 C. 0.25 D. 0.5 5、NaHCO3纯度的技术指标为≥99.0%，下列测定结果哪个不符合标准要求？（）。 A. 99.05% B. 99.01% C. 98.94% D. 98.95% 6、精密称取马来酸氯苯那敏对照品12 mg，应选取（）的天平。 A. 千分之一 B. 万分之一 C. 十万分之一 D. 百万分之一 7、实验室标定KMnO4溶液，常用的基准物质是（）。 A. Na2CO3 B. Na2S2O3 C. Na2C2O4 D. K2Cr2O7 8、标定氢氧化钠常用的基准物质是（）。 A. EDTA B. K2Cr2O7 C. 草酸 D. 邻苯二甲酸氢钾 9、下列物质可以作为基准物质的是（）。 A. KMnO4 B. Na2B4O7·7H2O C. NaOH D. Na2S2O3 10、下列物质中，可以用直接法配制标准溶液的是（）。 A. 固体NaOH B. 浓HCl C. 固体K2Cr2O7 D. 固体Na2S2O3
生物化学试题及答案（6） 默认分类2010-05-15 20:53:28 阅读1965 评论1 字号：大中小 生物化学试题及答案（6） 医学试题精选2010-01-01 21:46:04 阅读1957 评论0 字号：大中小 第六章生物氧化 【测试题】 一、名词解释 1.生物氧化 2.呼吸链 3.氧化磷酸化 4. P/O比值 5.解偶联剂 6.高能化合物 7.细胞色素 8.混合功能氧化酶 二、填空题 9．琥珀酸呼吸链的组成成分有____、____、____、____、____。 10．在NADH 氧化呼吸链中，氧化磷酸化偶联部位分别是____、____、____，此三处释放的能量均超过____KJ。 11．胞液中的NADH+H+通过____和____两种穿梭机制进入线粒体，并可进入____氧化呼吸链或____氧化呼 吸链，可分别产生____分子ATP或____分子ATP。 12．ATP生成的主要方式有____和____。 13．体内可消除过氧化氢的酶有____、____和____。 14．胞液中α-磷酸甘油脱氢酶的辅酶是____，线粒体中α-磷酸甘油脱氢酶的辅基是____。 15．铁硫簇主要有____和____两种组成形式，通过其中的铁原子与铁硫蛋白中的____相连接。 16．呼吸链中未参与形成复合体的两种游离成分是____和____。 17．FMN或FAD作为递氢体，其发挥功能的结构是____。 18．参与呼吸链构成的细胞色素有____、____、____、____、____、____。 19．呼吸链中含有铜原子的细胞色素是____。 20．构成呼吸链的四种复合体中，具有质子泵作用的是____、____、____。 21．ATP合酶由____和____两部分组成，具有质子通道功能的是____，____具有催化生成ATP 的作用。 22．呼吸链抑制剂中，____、____、____可与复合体Ⅰ结合，____、____可抑制复合体Ⅲ，可抑制细胞色 素c氧化酶的物质有____、____、____。 23．因辅基不同，存在于胞液中SOD为____，存在于线粒体中的 SOD为____，两者均可消除体内产生的 ____。 24．微粒体中的氧化酶类主要有____和____。 三、选择题
第六章脂类代谢 一、知识要点 （一）脂肪的生物功能： 脂类是指一类在化学组成和结构上有很大差异,但都有一个共同特性,即不溶于水而易溶于乙醚、氯仿等非极性溶剂中的物质。通常脂类可按不同组成分为五类，即单纯脂、复合脂、萜类和类固醇及其衍生物、衍生脂类及结合脂类。 脂类物质具有重要的生物功能。脂肪是生物体的能量提供者。 脂肪也是组成生物体的重要成分，如磷脂是构成生物膜的重要组分，油脂是机体代谢所需燃料的贮存和运输形式。脂类物质也可为动物机体提供溶解于其中的必需脂肪酸和脂溶性维生素。某些萜类及类固醇类物质如维生素A、D、E、K、胆酸及固醇类激素具有营养、代谢及调节功能。有机体表面的脂类物质有防止机械损伤与防止热量散发等保护作用。脂类作为细胞的表面物质，与细胞识别，种特异性和组织免疫等有密切关系。 （二）脂肪的降解 在脂肪酶的作用下，脂肪水解成甘油和脂肪酸。甘油经磷酸化和脱氢反应，转变成磷酸二羟丙酮，纳入糖代谢途径。脂肪酸与ATP和CoA在脂酰CoA合成酶的作用下，生成脂酰CoA。脂酰CoA在线粒体内膜上肉毒碱：脂酰CoA转移酶系统的帮助下进入线粒体衬质，经β-氧化降解成乙酰CoA，在进入三羧酸循环彻底氧化。β-氧化过程包括脱氢、水合、再脱氢和硫解四个步骤，每次β-氧化循环生成FADH2、NADH、乙酰CoA和比原先少两个碳原子的脂酰CoA。此外，某些组织细胞中还存在α-氧化生成α羟脂肪酸或CO2和少一个碳原子的脂肪酸；经ω-氧化生成相应的二羧酸。 萌发的油料种子和某些微生物拥有乙醛酸循环途径。可利用脂肪酸β-氧化生成的乙酰CoA 合成苹果酸，为糖异生和其它生物合成提供碳源。乙醛酸循环的两个关键酶是异柠檬酸裂解酶和苹果酸合成酶前者催化异柠檬酸裂解成琥珀酸和乙醛酸，后者催化乙醛酸与乙酰CoA生成苹果酸。 （三）脂肪的生物合成 脂肪的生物合成包括三个方面：饱和脂肪酸的从头合成，脂肪酸碳链的延长和不饱和脂肪酸的生成。脂肪酸从头合成的场所是细胞液，需要CO2和柠檬酸的参与，C2供体是糖代谢产生的乙酰CoA。反应有二个酶系参与，分别是乙酰CoA羧化酶系和脂肪酸合成酶系。首先，乙酰CoA在乙酰CoA羧化酶催化下生成，然后在脂肪酸合成酶系的催化下，以ACP作酰基载体，乙酰CoA为C2受体，丙二酸单酰CoA为C2供体，经过缩合、还原、脱水、再还原几个反应步骤，先生成含4个碳原子的丁酰ACP，每次延伸循环消耗一分子丙二酸单酰CoA、两分子NADPH，直至生成软脂酰ACP。产物再活化成软脂酰CoA，参与脂肪合成或在微粒体系统或线粒体系统延长成C18、C20和少量碳链更长的脂肪酸。在真核细胞内，饱和脂肪酸在O2的参与和专一的去饱和酶系统催化下，进一步生成各种不饱和脂肪酸。高等动物不能合成亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸，必须依赖食物供给。 3-磷酸甘油与两分子脂酰CoA在磷酸甘油转酰酶作用下生成磷脂酸，在经磷酸酶催化变成二酰甘油，最后经二酰甘油转酰酶催化生成脂肪。 （四）磷脂的生成 磷脂酸是最简单的磷脂，也是其他甘油磷脂的前体。磷脂酸与CTP反应生成CDP-二酰甘油，在分别与肌醇、丝氨酸、磷酸甘油反应，生成相应的磷脂。磷脂酸水解成二酰甘油，再与CDP-胆碱或CDP-乙醇胺反应，分别生成磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺。 二、习题
《生化分离》考试复习题库 一、选择题 1.下列不是超临界萃取工艺的方法是（）。 A 等温法 B 等压法 C 吸附法 D 交换法 2.影响絮凝效果的因素有很多，但不包括（）。 A 絮凝剂的浓度 B 溶液pH值 C 溶液含氧量 D 搅拌速度和时间 3.葡聚糖凝胶色谱属于排阻色谱，在化合物分离中，先被洗脱下来的为（）。 A 杂质 B 小分子化合物 C 大分子化合物 D 两者同时下来 4.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（）。 A 增大 B 减小 C 先增大，后减小
D 先减小，后增大 5.下列不能提高发酵液过滤效率的措施是（）。 A 增大滤过面积 B 降低料液温度 C 加压或减压 D 加入助滤剂 6.下列方法中，哪项不属于改善发酵液过滤特性的方法 A 调节等电点 B 降低温度 C 添加表面活性物质 D 添加助滤剂 7.助滤剂应具有以下性质（） A 颗粒均匀、柔软、可压缩 B 颗粒均匀、坚硬、不可压缩 C 粒度分布广、坚硬、不可压缩 D 颗粒均匀、可压缩、易变形 8.在发酵液中除去杂蛋白质的方法，不包括（） A 沉淀法 B 变性法 C 吸附法 D 萃取法 9.下列关于速率区带离心法说法不正确的是（）
A 样品可被分离成一系列的样品组分区带 B 离心前需于离心管内先装入正密度梯度介质 C 离心时间越长越好 D 一般应用在物质大小相异而密度相同的情况 10.助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒，它能使滤饼疏松，滤速增大。以下不属于助滤剂的是（） A 氯化钙 B 纤维素 C 炭粒 D 硅藻土 11.细胞破碎的方法可分为机械法和非机械法两大类，下列不属于机械法的是（） A 加入金属螯合剂 B 高压匀浆法 C 超声破碎法 D 珠磨法 12.萃取操作是利用原料液中各组分（）的差异实现分离的操作。 A 溶剂中的溶解度 B 沸点 C 挥发度 D 密度 13.两相溶剂萃取法的原理为：
生物化学实验技能大赛活动方案 一、活动目的 通过举办生物化学实验技能大赛，使广大学生树立崇尚科学，勇于创新，开拓进取，敢于实践的精神风貌，增强专业素养。在深化教育改革，推进素质教育的要求下，不断提高学生实验设计及实验操作的能力，从而提高广大学生学习《生物化学》这门课程的兴趣，推动生物化学实践教学的改革；增加同学们的合作交流，促进相互间的学习与沟通，拓展知识的应用范围，培养创新意识及团队精神，提高综合实验设计、分析和生物化学实验操作技能，提高大学生动手能力和实践技能，促进我校良好学风的建设，营造浓厚的学习、学术氛围，特此举行此次生物化学实验技能大赛。矚慫润厲钐瘗睞枥庑赖賃軔。 二、组织机构 主办单位：韶关学院教务处 承办单位：英东生命科学学院团委 三、参赛对象 韶关学院全日制在校学生均可参加，自行组队(可跨专业)，团队人数1至4人。 四、比赛流程： 1.初赛 各参赛队伍需上交报名表（附件1）并按照作品格式要求（附件2）独立完成实验设计，于2016年11月9日-11月20日将实验设计和报名表（放在同一文件夹压缩打包命名为：学院+实验课题+队长姓名+队长短号）发送至邮箱（）参加初赛，纸质版需上交到英东楼B309生科院辅导员办公室处。评委老师对实验设计进行评定后，筛选出约20支参赛队伍进入复赛。 2.复赛 2016年11月26日09:00—17:00为预实验阶段，实验室开放，各参赛队伍可在当天熟悉比赛场地或对所需材料、仪器、试剂等作实验前的预处理。 2016年11月27日09:00—17:00为正式复赛阶段，进入实验室按照实验设计进行操作，并当场完成实验报告，复赛分数根据实验过程及实验报告进行评定。 复赛评选出8支队伍进入决赛，决赛名单当场公布。 复赛地点：英东实验室 决赛 2016年12月3日19:00—22:30为决赛阶段，进行实验报告答辩，决赛分为四个环节：报告陈述、现场答辩、观众提问、专家点评。获奖的实验报告将在英东大厅展示15天。 决赛地点：图书馆学术报告厅 五、参赛要求 1.作品内容 （1）物质提取类 如从柑橘皮中提取果胶；从果蔬中提取类胡萝卜素；从芦荟中提取碳水化合物；从鸡蛋清中提取某蛋白；从三七中提取三七皂等。 （2）物质检验类 如检验市面上某几种品牌牛奶是否掺假；检验市面上某几种食品是否含有防腐剂；检验某品牌的食用植物油是否含胆固醇等。 （3）物质含量测定类 如洗衣粉磷含量分析；测定某品牌奶粉的蛋白质含量是否达标；比较几种饲料中某物质的含量等。
生物化学试题及答案 维生素 一、名词解释 1、维生素 二、填空题 1、维生素的重要性在于它可作为酶的组成成分，参与体内代谢过程。 2、维生素按溶解性可分为和。 3、水溶性维生素主要包括和VC。 4、脂脂性维生素包括为、、和。 三、简答题 1、简述B族维生素与辅助因子的关系。 【参考答案】 一、名词解释 1、维生素：维持生物正常生命过程所必需，但机体不能合成，或合成量很少，必须食物供给一类小分子 有机物。 二、填空题 1、辅因子； 2、水溶性维生素、脂性维生素； 3、B族维生素； 4、VA、VD、VE、VK； 三、简答题 1、
生物氧化 一、名词解释 1.生物氧化 2.呼吸链 3.氧化磷酸化 4. P/O比值 二、填空题 1．生物氧化是____ 在细胞中____，同时产生____ 的过程。 3．高能磷酸化合物通常是指水解时____的化合物，其中重要的是____，被称为能量代谢的____。 4．真核细胞生物氧化的主要场所是____ ，呼吸链和氧化磷酸化偶联因子都定位于____。 5．以NADH为辅酶的脱氢酶类主要是参与____ 作用，即参与从____到____的电子传递作用；以NADPH 为辅酶的脱氢酶类主要是将分解代谢中间产物上的____转移到____反应中需电子的中间物上。 6．由NADH→O2的电子传递中，释放的能量足以偶联ATP合成的3个部位是____、____ 和____ 。 9．琥珀酸呼吸链的组成成分有____、____、____、____、____。
10．在NADH 氧化呼吸链中，氧化磷酸化偶联部位分别是____、____、____，此三处释放的能量均超过____KJ。 12．ATP生成的主要方式有____和____。 14．胞液中α-磷酸甘油脱氢酶的辅酶是____，线粒体中α-磷酸甘油脱氢酶的辅基是____。 16．呼吸链中未参与形成复合体的两种游离成分是____和____。 26．NADH经电子传递和氧化磷酸化可产生____个ATP，琥珀酸可产生____个ATP。 三、问答题 1．试比较生物氧化与体外物质氧化的异同。 2．描述NADH氧化呼吸链和琥珀酸氧化呼吸链的组成、排列顺序及氧化磷酸化的偶联部位。 7．简述化学渗透学说。 【参考答案】 一、名词解释 1．物质在生物体内进行的氧化反应称生物氧化。 2．代谢物脱下的氢通过多种酶与辅酶所催化的连锁反应逐步传递，最终与氧结合为水，此过程与细胞呼吸有关故称呼吸链。 3．代谢物脱下的氢经呼吸链传递给氧生成水，同时伴有ADP磷酸化为ATP，此过程称氧化磷酸化。 4．物质氧化时每消耗1摩尔氧原子所消耗的无机磷的摩尔数，即生成ATP的摩尔数，此称P/O比值。 二、填空题 1.有机分子氧化分解可利用的能量 3.释放的自由能大于20.92kJ/mol ATP 通货 4.线粒体线粒体内膜 5.生物氧化底物氧H+＋e- 生物合成 6.NADH-CoQ Cytb-Cytc Cyta-a3-O2 9．复合体Ⅱ泛醌复合体Ⅲ细胞色素c 复合体Ⅳ 10．NADH→泛醌泛醌→细胞色素c 细胞色素aa3→O2 30.5 12．氧化磷酸化底物水平磷酸化 14．NAD+ FAD
第一章蛋白质的结构与功能 1.20种基本氨基酸中,除甘氨酸外,其余都是L-α-氨基酸. 2.支链氨基酸(人体不能合成:从食物中摄取):缬氨酸亮氨酸异亮氨酸 3.两个特殊的氨基酸：脯氨酸：唯一一个亚氨基酸甘氨酸：分子量最小，α-C原子不是手性C原子，无旋光性. 4.色氨酸：分子量最大 5.酸性氨基酸：天冬氨酸和谷氨酸碱性氨基酸：赖氨酸、精氨酸和组氨酸 6.侧链基团含有苯环：苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸 7.含有—OH的氨基酸：丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸 8.含有—S的氨基酸：蛋氨酸和半胱氨酸 9.在近紫外区（220—300mm）有吸收光能力的氨基酸：酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸 10.肽键是由一个氨基酸的α—羧基与另一个氨基酸的α—氨基脱水缩合形成的酰胺键 11.肽键平面：肽键的特点是N原子上的孤对电子与碳基具有明显的共轭作用。使肽键中的C-N键具有部分双键性质，不能自由旋转，因此。将C、H、O、N原子与两个相邻的α-C 原子固定在同一平面上，这一平面称为肽键平面 12.合成蛋白质的20种氨基酸的结构上的共同特点：氨基都接在与羧基相邻的α—原子上 13.是天然氨基酸组成的是：羟脯氨酸、羟赖氨酸，但两者都不是编码氨基酸 14.蛋白质二级结构的主要形式：①α—螺旋②β—折叠片层③β—转角④无规卷曲。α—螺旋特点：以肽键平面为单位，α—C为转轴，形成右手螺旋，每3.6个氨基酸残基螺旋上升一圈，螺径为0.54nm，维持α-螺旋的主要作用力是氢键 15.举例说明蛋白质结构与功能的关系 ①蛋白质的一级结构决定它的高级结构 ②以血红蛋白为例说明蛋白质结构与功能的关系：镰状红细胞性贫血患者血红蛋白中有一个氨基酸残基发生了改变。可见一个氨基酸的变异（一级结构的改变），能引起空间结构改变，进而影响血红蛋白的正常功能。但一级结构的改变并不一定引起功能的改变。 ③以蛋白质的别构效应和变性作用为例说明蛋白质结构与功能的关系：a.别构效应，某物质与蛋白质结合，引起蛋白质构象改变，导致功能改变。协同作用，一个亚基的别构效应导致另一个亚基的别构效应。氧分子与Hb一个亚基结合后引起亚基构象变化的现象即为Hb的别构（变构）效应。蛋白质空间结构改变随其功能的变化，构象决定功能。b.变性作
核酸化学及研究方法 一、名词解释 1.正向遗传学：通过研究突变表型确定突变基因的经典遗传学方法。 2.核小体组蛋白修饰：组成核小体组蛋白，其多肽链的N末端游离于核小体之外，常被化学基团修饰，修饰类型包括：乙酰化、甲基化、磷酸化和泛素化，修饰之后会改变染色质的结构和活性。 3.位点特异性重组：位点特异性重组是遗传重组的一类。这类重组依赖于小范围同源序列的联会，重组只发生在同源短序列的范围之内，需要位点特异性的蛋白质分子参与催化。 4.转座机制：转座酶上两个不同亚基结合在转座子的特定序列上，两个亚基靠在一起形成有活性的二聚体，切下转座子，转座酶-转座子复合物结合到靶DNA上，通过转座酶的催化将转座子整合到新位点上。 5.基因敲除：利用DNA同源重组原理，用设计的外源同源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的靶基因发生重组，从而将外源DNA整合到受体细胞的基因组中，产生精确的基因突变，完成基因敲除。 6.Sanger双脱氧终止法：核酸模板在核酸聚合酶、引物、四种单脱氧碱基存在的条件下复制或转录时，如果在四管反应系统中分别按比例引入四种双脱氧碱基，若双脱氧碱基掺入链端，该链便停止延长，若单脱氧碱基掺入链端，该链便可继续延伸。如此每管反应体系中便合成了以共同引物为5’端，以双脱氧碱基为3’端的一系列长度不等的核酸片段。反应终止后，分四个泳道进行电泳，以分离长短不一的核酸片段（长度相邻者仅差一个碱基），根据片段3’的双脱氧碱基，便可依次阅读合成片段的碱基排列顺序。 7.荧光实时PCR技术原理 探针法：TaqMan探针是一小段可以与靶DNA序列中间部位结合的单链DNA，它的5’和3’端分别带有一个荧光基团，这两个荧光基团由于距离过近，相互发生淬灭，不产生绿色荧光。PCR反应开始后，靶DNA变性，产生单链DNA，TaqMan探针结合到与之配对的靶DNA序列上，之后被Taq DNA聚合酶切除降解，从而解除荧光淬灭，荧光基团在激发光下发出荧光，最后可根据荧光强度计算靶DNA的数量。染料法：荧光染料（如SYBR GreenⅠ）能与双链DNA发生非序列特异性结合，并激发出绿色荧光。PCR反应开始后，随着DNA的不断延伸，结合到DNA上的荧光染料也相应增加，被激发产生的荧光也相应增加，可根据荧光强度计算初始模板的数量。 8.双分子荧光互补(BiFC)技术原理 将荧光蛋白在某些特定的位点切开，形成不发荧光的N片段和C片段。这2个片段在细胞内共表达或体外混合时，不能自发地组装成完整的荧光蛋白，不能产生荧光。但是，当这2个荧光蛋白的片段分别连接到一组有相互作用的目标蛋白上，在细胞内共表达或体外混合这两个目标蛋白时，由于目标蛋白质的相互作用，荧光蛋白的2个片段在空间上互相靠近互补，重新构建成完整的具有活性的荧光蛋白分子，并在该荧光蛋白的激发光激发下，发射荧光。 简言之，如果目标蛋白质之间有相互作用，则在激发光的激发下，产生该荧光蛋白的荧光。反之，若目标蛋白质之间没有相互作用，则不能被激发产生荧光。 二.问答题： 1.怎样将一个基因克隆到pET32a载体上；原核表达后，怎样纯化该蛋白？ 2.通过哪几种方法可以获得cDNA的全长？简述其原理。 （一）已知序列信息 1.同源序列法：根据基因家族各成员间保守氨基酸序列设计简并引物，利用简并引物进行RT-PCR扩增，得到该基因的部分cDNA序列，然后再利用RACE（cDNA末端快速扩增技术）获得cDNA全长。 2.功能克隆法：cDNA文库；基因组文库 （二）未知序列信息： 1.基于基因组DNA的克隆：是在鉴定已知基因的功能后，进而分离目标基因的一种方法。
邻二氮菲法测定蔬菜中铁的含量 摘要 用邻二氮菲分光光度法直接测定蔬菜中的铁含量，方法简便、快速、准确，为指导人们合理食用蔬菜进行补铁及进一步开发蔬菜产品提供了可靠的理论依据[1 2]。 关键词蔬菜铁含量邻二氮菲 1.前言 铁作为必需的微量金属元素，对于人体的健康十分重要。铁是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其它酶系统的主要组分，可协助氧的运输，还能促进脂肪的氧化。蔬菜是人们摄取微量铁的主要途径之一，缺铁可造成贫血并容易疲劳，而过多则会导致急性中毒。所以，蔬菜中铁含量的测定具有重要的营养学意义，可为指导人们合理食用蔬菜进行补铁以防治缺铁性贫血，提供可靠的理论依据。 2.实验目的 综合运用所学知识，用仪器分析法测定金属元素含量；练习灵活运用各种基本操作和查阅资料的能力。 3.实验原理 蔬菜中金属元素常与有机物结合成难溶或难于解离的物质，常采用有机物破坏法是被测的金属元素以氧化物或无机盐的形式残留下来，以便测定。本实验采用有机物破坏法（干法），即在高温下加入氧化剂，使有机物质分解。根据不同浓度的物质具有不同的吸光度，采用分光光度法来测定蔬菜中的铁含量。在pH值4～6的条件下，以盐酸羟胺将三价铁还原为二价铁，二价铁再与邻二氮菲（phen）生成桔红色络合物［3］，用分光光度计在510nm测定蔬菜中铁的含量。 盐酸羟胺还原三价铁的反应如下： 2 Fe3++2NH2OH·HCl→2 Fe2++N2+2H2O+4H++2Cl- 邻二氮菲与二价铁的反应式如下： Fe2+ + 3(phen) =Fe(phen)3 4.实验器材 722型分光光度计（1台），电子天平（1台）蒸发皿（4个），100mL容量瓶(4个)，
生物化学考试试卷及答 案 Company number：【WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998】
河南科技学院 2014-2015学年第二学期期终考试 生物化学试题（A ） 适用班级：园林131-134 注意事项：1.该考试为闭卷考试； 2.考试时间为考试周； 3.满分为100分，具体见评分标准。 ） 1、蛋白质的变性作用： 氨基酸的等点： 3、氧化磷酸化： 4、乙醛酸循环： 5、逆转录： 二、选择题（每题1分，共15分） 1、蛋白质多肽链形成α-螺旋时，主要靠哪种次级键维持（ ） A ：疏水键； B ：肽键： C ：氢键； D ：二硫键。 2、在蛋白质三级结构中基团分布为（ ）。 A ：疏水基团趋于外部，亲水基团趋于内部； B ：疏水基团趋于内部，亲水基团趋于外部； C ：疏水基团与亲水基团随机分布； D ：疏水基团与亲水基团相间分布。 3、双链DNA 的Tm 较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致（ ） A ：A+G ； B ：C+T ： C ：A+T ； D ：G+C 。 4、DNA 复性的重要标志是（ ）。 A ：溶解度降低； B ：溶液粘度降低； C ：紫外吸收增大； D ：紫外吸收降低。 5、酶加快反应速度的原因是（ ）。 A ：升高反应活化能； B ：降低反应活化能； C ：降低反应物的能量水平； D ：升高反应物的能量水平。 6、鉴别酪氨酸常用的反应为( )。 A 坂口反应 B 米伦氏反应 C 与甲醛的反应 D 双缩脲反应 7、所有α-氨基酸都有的显色反应是( )。 A 双缩脲反应 B 茚三酮反应 C 坂口反应 D 米伦氏反应 8、蛋白质变性是由于( )。 A 蛋白质一级结构的改变 B 蛋白质空间构象的破环 C 辅基脱落 D 蛋白质发 生水解 9、蛋白质分子中α-螺旋构象的特征之一是( )。
生物化学 一、名词解释 1.蛋白质变性与复性： 蛋白质分子在变性因素的作用下，高级构象发生变化，理化性质改变，失去生物活性的现象称为蛋白质的变性作用。 变性蛋白质在除去变性因素后，可缓慢地重新自发折叠成原来构象，并恢复原有的理化性质和生物活性，这种现象称为蛋白质的复性。 2.盐析与盐溶： 在蛋白质的水溶液中，加入大量高浓度的强电解质如硫酸铵、氯化钠、硝酸铵等，使蛋白质凝聚而从溶液中析出的现象叫盐析。 在蛋白质的水溶液中，加入低浓度的盐离子，会使蛋白质分子散开，溶解性增大的现象叫盐溶。 3.激素与受体： 激素是指机体内一部分细胞产生，通过扩散、体液运送至另一部分细胞，并起代谢调节控制作用的一类微量化学信息分子。 受体是指细胞中能识别特异配体（神经递质、激素、细胞因子）并与其结合，从而引起各种生物效应的分子，其化学本质为蛋白质。 4.增色效应与减色效应： 增色效应是指DNA变性后，溶液紫外吸收作用增强的效应。 减色效应是指DNA复性过程中，溶液紫外吸收作用减小的效应。 5.辅酶与辅基： 根据辅因子与酶蛋白结合的紧密程度分为辅酶和辅基， 与酶蛋白结合较松、用透析法可以除去的辅助因子称辅酶。 与酶蛋白结合较紧、用透析法不易除去的辅因子称辅基。 6.构型与构象： 构型是指一个分子由于其中各原子特有的固定空间排布，使该分子所具有的特定的立体化学形式。 构象是指分子中，不改变共价键结构，仅单键周围的原子旋转所产生的空间排布。即分子中原子的三维空间排列称为构象。 7.α-螺旋与β-折叠： α-螺旋是指多肽链的主链原子沿一中心轴盘绕，借助链内氢键维持的右手螺旋的稳定构象。
β-折叠是指两条或多条几乎完全伸展的多肽链(或同一肽链的不同肽段)侧向聚集在一起，相邻肽链主链上的NH和C=0之间形成氢链，这样的多肽构象即β-折叠。 8.超二级结构与结构域： 超二级结构是指蛋白质中相邻的二级结构单位(α-螺旋、β-折叠、β-转角及无规卷曲)组合在一起，形成有规则的在空间上能辩认的二级结构组合体。又称为花样或模体称为基元。 结构域是指多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的局部折叠区，它是相对独立的紧密球状实体。 9.酶原与酶原激活： 酶原是指某些活性酶的无活性前体蛋白。 酶原激活是指无活性的酶原形成活性酶的过程。 10.Tm值与Km值： 通常把增色效应达到一半时的温度或DNA双螺旋结构失去一半时的温度叫DNA的熔点或熔解温度，用Tm 表示。 Km是酶促反应动力学中间产物理论中的一个常数，Km值的物理意义在于它是当酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。 二、填空题 1、20世纪50年代，Chargaff等人发现各种生物体DNA碱基组成有种的特异性，而没有组织的特异性。 2、DNA变性后，紫外吸收能力增强，生物活性丧失。 3、构成核酸的单体单位称为核苷酸，构成蛋白质的单体单位氨基酸。 4、嘌呤核苷有顺式、反式两种可能，但天然核苷多为反式。 5、X射线衍射证明，核苷中碱基与糖环平面相互垂直。 6、双链DNA热变性后，或在pH2以下，或pH12以上时，其OD260增加，同样条件下，单链DNA的OD260不变。 7、DNA样品的均一性愈高，其熔解过程的温度范围愈窄。 8、DNA所处介质的离子强度越低，其熔解过程的温度范围越宽。熔解温度越低。 9、双链DNA螺距为3.4nm，每匝螺旋的碱基数为10，这是B型DNA的结构。 10、NAD+，FAD和CoA都是的腺苷酸（AMP）衍生物。 11、酶活力的调节包括酶量的调节和酶活性的调节。 12、T.R.Cech和S.Altman因各自发现了核酶而共同获得1989年的诺贝尔化学奖。 13、1986年，R.A.Lerner和P.G.Schultz等人发现了具有催化活性的抗体，称为抗体酶。 14、解释别构酶作用机理的假说有齐变模型和序变模型。 15、固定化酶的理化性质会发生改变，如Km增大，Vmax减小等。 16、脲酶只作用于尿素，而不作用于其他任何底物，因此它具有绝对专一性，甘油激酶可以催化甘油磷酸
生物化学复习 一、单选题： 1. 能出现在蛋白质分子中的下列氨基酸，哪一种没有遗传密码E.羟脯氢酸 2. 组成蛋白质的基本单位是A.L-α-氨基酸 3. 蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定C.溶液PH值等于PI 4. 下列关于对谷胱甘肽的叙述中，哪一个说法是错误的C.是一种酸性肽 5. 核酸对紫外线的吸收是由哪一结构所产生的C.嘌呤、嘧啶环上的共轭双键 6. 核酸分子中储存、传递遗传信息的关键部分是B.碱基序列 7. 镰刀型红细胞患者血红蛋白β-链第六位上B.缬氨酸取代谷氨酸 8. 酶加快化学反应速度的根本在于它E.能大大降低反应的活化能 9. 临床上常用辅助治疗婴儿惊厥和妊娠呕吐的维生素是C.维生素B6 10. 缺乏下列哪种维生素可造成神经组织中的丙酮酸和乳酸堆积D. 维生素B1 11. 关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 12.下列哪种因素不能使蛋白质变性E.盐析 13. 蛋白质与氨基酸都具有A A.两性 B.双缩脲胍 C.胶体性 D.沉淀作用 E.所列都具有 14. 天然蛋白质中不存在的氨基酸是C A.甲硫氨酸 B.胱氨酸 C.羟脯氨酸 D.同型半胱氨酸 E.精氨酸 15. 镰刀型红细胞患者血红蛋白β-链第六位上B A.赖氨酸取代谷氨酸 B.缬氨酸取代谷氨酸 C.丙氨酸取代谷氨酸 D.蛋氨酸取代谷氨酸 E.苯丙氨酸取代谷氨酸 16. 关于竞争性抑制剂作用的叙述错误的是D A.竞争性抑制剂与酶的结构相似 B.抑制作用的强弱取决与抑制剂浓度与底物浓度的相对比例 C.抑制作用能用增加底物的办法消除 D.在底物浓度不变情况下，抑制剂只有达到一定浓度才能起到抑制作用 E.能与底物竞争同一酶的活性中心 17. 下列关于酶的活性中心的叙述正确的是A A.所有的酶都有活性中心 B.所有酶的活性中心都含有辅酶 C.酶的必须基团都位于活性中心之内 D.所有抑制剂都作用于酶的活性中心 E.所有酶的活性中心都含有金属离子 18. 下列关于酶的变构调节，错误的是C A.受变构调节的酶称为变构酶 B.变构酶多是关键酶(如限速酶)，催化的反应常是不可逆反应 C.变构酶催化的反应，其反应动力学是符合米-曼氏方程的 D.变构调节是快速调节 E.变构调节不引起酶的构型变化
生命科学学院 关于举办首届大学生生物化学实验技能竞赛的通知 一、竞赛目的 激励大学生自主学习，培养大学生创新意识和团队精神，增强综合实验设计能力，提高生化实验操作技能，营造浓厚学术创新氛围，促进良好学风的建设，选拔优秀项目和选手参加山东省第五届生物化学实验技能大赛。 二、竞赛组委会 组长：王宝山、魏成武 成员：戴美学、杨桂文、谭效忠、苗明升、张鸿雁、杜希华、王珂、原永洁三、参赛对象 生命科学学院在校本科生，不限年级和专业。参赛队伍2-3人为一队，每队一名指导教师。每个参赛队限提交一份实验设计书，每个指导教师指导的项目数一般不超过6项。 四、参赛作品内容及要求 （一）作品内容 1、物质提取类 如从柑橘皮中提取果胶；从果蔬中提取类胡萝卜素；从芦荟中提取碳水化合物；从鸡蛋清中提取某蛋白；从三七中提取三七皂等。 2、物质检验类 如检验市面上某几种品牌牛奶是否掺假；检验市面上某几种食品是否含有防腐剂；检验某品牌的食用植物油是否含胆固醇等。 3、物质含量测定类
如洗衣粉磷含量的分析；测定某品牌奶粉的蛋白质含量是否达标；比较几种饲料中某物质的含量等。 4、探索物质在某一方面的应用类 如探索蛋白酶对草菇保鲜的影响机理；探索木瓜蛋白酶在食物色氨酸测定上的应用等。 5、比较不同品牌物质的营养价值 如对不同品牌螺旋藻片营养成分测定和营养价值的评价测定；对不同品牌饲料中营养价值比较等。 6、其他参赛者感兴趣的方面 （二）作品要求 1、作品要求在保证安全性的前提下，具有一定的科学性、实用性、创造性，具有较强的实际意义，以创新及紧密联系生产生活实际为佳，同时在实验室内的可操作性强。 2、每组参赛队严格按照实验设计书设计格式要求撰写实验设计书，并提交至大赛邮箱，一经提交不得修改，违者则取消决赛资格。 3、参赛作品原则上不能与山东省大学生生物化学实验技能大赛前四届作品相同（前几届作品请参考大赛相关网站：http://202.194.131.160/G2S/ Template/View.aspx?action=view&courseType=0&courseId=282），亦不可抄袭外省比赛作品，否则取消参赛资格。 4、实验设计书设计的项目最好进行过预实验（可利用寒假在指导教师指导下利用实验室条件进行预实验），并在“生科院首届大学生生物化学实验技能竞赛报名表”中如实注明是否做过预实验。 5、实验设计内容应能在8小时内完成，便于决赛时在限定的时间内进行实验操作。