一、名词解释
1、广义分子生物学：在分子水平上研究生命本质的科学，其研究对象是生物大分子的结构和功能。2
2、狭义分子生物学：即核酸（基因）的分子生物学，研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程，以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能
3、基因：遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA 等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA 序列(对以RNA 作为遗传信息载体的RNA 病毒而言则是RNA 序列)。
4、基因：基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。
5、功能基因组学：是依附于对DNA 序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。
6、蛋白质组学：是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。
7、生物信息学：对DNA 和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输
8、蛋白质组：指的是由一个基因组表达的全部蛋白质
9、功能蛋白质组学：是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。
10、单细胞蛋白：也叫微生物蛋白，它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而，单细胞蛋白不是一种纯蛋白质，而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。
11、基因组：指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。
12、C 值：指生物单倍体基因组的全部DNA 的含量，单位以pg 或Mb 表示。
13、C 值矛盾：C 值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。
14、重叠基因：共有同一段DNA 序列的两个或多个基因。
15、基因重叠：同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。
16、单拷贝序列：单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次，因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息，编码各种不同功能的蛋白质。
17、低度重复序列：低度重复序列是指在基因组中含有2～10 个拷贝的序列
18、中度重复序列：中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万（<105）次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序，但慢于高度重复顺序。
19、高度重复序列：基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA 序列。这些重复序列的长度为6~200 碱基对。
20、基因家族：真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因，可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。
21、基因簇：基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体的特殊区域。
22、超基因家族：由基因家族和单基因组成的大基因家族，各成员序列同源性低，但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。
23、假基因：一种类似于基因序列，其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。
24、复制：是指以原来DNA（母链）为模板合成新DNA（子链）的过程。或生物体以DNA/RNA 为模板合成DNA/RNA 的过程。
25、半保留复制：DNA 复制过程中，新合成的子代DNA 分子中，一条链是新合成的，另
外一条链来自亲代，这种复制方式称为半保留复制。
26、复制子：基因组上能够独立进行复制的单位，包括复制起点和复制终点。所有的原核
生物的染色体、噬菌体仅有一个复制子；真核生物的染色体有多个复制子
27、复制起始点：DNA 分子上起始复制并控制复制起始频率的特定位置
28、复制终点：终止复制的位点。
29、复制叉：又称生长点，复制开始时，起始点处的DNA 双螺旋要解链，松开的两股链
和未松开的双螺旋形状象一把叉子，称为复制叉，是复制有关的酶和蛋白质组装成新的复合
物和新链合成的部位。
30、引物：是人工合成的与模板DNA 互补的寡核苷酸序列
31、简并引物：是指代表编码单个氨基酸所有不同碱基可能性的不同序列的混合物。
32、相向复制：从两个起点开始两条链的复制，形成两个复制叉，各以一条链为模板单一方
向复制出一条新链。
33、单向复制：复制从一个起始点开始，只有一个复制叉，以同一方向生长出两条链。
34、双向复制：从一个起始点开始，沿着两个相反的方向形成两个复制叉，一方向移动，两
条DNA 链都被作为模板，各生长出两条新链，形成一个复制泡，用电子显微镜可以观察到
复制泡的存在。这是原核生物和真核生物DNA 复制最主要的形式
35、D 环复制：又称取代环复制，是线粒体DNA 的复制形式。复制中呈字母D 形状而得名。
36、DNA 的半不连续复制:DNA 在复制过程中，一条链合成是连续的，而另一条链合成是
不连续的，这样的复制过程称为半不连续合成。
37、冈崎片段：DNA 复制时，以5’→3’方向的母链作为模板，子链沿5’→3’最初合成
长短不一、不连续核苷酸小片段，最后连接成为完整子链，这些小片段称之为岗崎片段。38、前导链：以3’→5’方向DNA 链为模板链，子代DNA 以5’→3’方向连续合成，称
为前导链。
39、后随链：以5’→3’方向DNA 链为模板链，子代DNA 以5’→3’方向不连续合成，
形成许多不连续的冈崎片段，最后连接成一条完整的DNA 链，称为后随链，又称后滞链。40、引物酶：又称引发酶，合成起始引物，引物长度为10-60 个核苷酸，E.coli 中是DnaG
蛋白。
41、RNA 聚合酶：以一条DNA 链或RNA 链为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA 的酶。
促进DnaA 活性，促进复制起始。
42、端粒：真核生物线性染色体DNA 的两端是一种特殊结构称为端粒功能：稳定染色体
末端结构，防止染色体末端融合、重组、降解；补偿5’末端在切除RNA 引物后留下的空
缺
43、DNA 的损伤：生物体生命过程中DNA 双螺旋结构发生的任何改变都称之为DNA 损伤。
44、DNA 修复：是细胞对DNA 受损伤后的一种反应。主要包括：直接修复、切除修复、
错配修复、重组修复、易错修复和SOS 应急反应
45、光修复：光裂合酶能特异地和嘧啶二聚体结合，在可见光下催化光化合反应，使环丁烷环
回复到两个独立的嘧啶，这一过程叫光复活作用。
46、应急反应（SOS 反应）：许多能造成DNA 损伤或抑制DNA 复制的过程能引起一系列
复杂的诱导效应，这种效应称为应急反应（SOS 反应）
47、同义突变：指突变改变了密码子的组成，但由于密码子的简并性没有改变所编码的氨基酸
序列的突变
48、错义突变：指基因突变改变了所编码氨基酸的序列，不同程度地影响蛋白质和酶的活性。
49、无义突变：指基因改变使代表某种氨基酸的密码子变为终止密码子，导致肽链合成过早
终止。
50、致死突变: 有些错义突变和无义突变严重影响到蛋白质活性甚至完全无活性, 从而影响
了表现型。
51、渗漏突变: 有些错义的产物仍然有部分活性,使表现型介于完全的突变型和野生型之间的中间类型。
52、中性突变: 有些错义突变不影响或基本上不影响蛋白质活性,不表现出明显的性状变化。
53、电泳:带电颗粒在电场的作用下，向着与其电性相反的电极移动，称为电泳。
54、迁移率:是指带电颗粒在单位电场下泳动的速度。影响迁移率的内在因素：（1）样品所带静电荷的多少（2）样品颗粒大小（3）样品分子空间构象影响迁移率的外界因素：电场强度、电泳缓冲液的离子强度、电泳缓冲液的pH 值、支持物及其浓度的影响、插入染料的影响、温度的影响、电渗
55、DNA 重组：又称遗传重组，指DNA 分子内或分子间发生遗传信息的重新组合，重组产物叫重组DNA
56、同源重组:又称一般性重组，指发生在两条同源DNA 分子之间，通过配对、链断裂和再
连接，而产生片段交换过程。重组产物称为重组体
57、Holliday 中间体:同源重组中，两条同源的DNA 分子经过配对、断裂和再连接，形成的
连接分子，称为Holliday 中间体
58、Chi 位点：它是刺激重组的位点。这一位点是由8 个碱基组成的非对称序列
59、特异位点重组:指发生在一个特定的短DNA 序列内，由特异的酶和辅助因子识别和作用的重组。
60、单链同化：单链DNA 与同源双链DNA 分子发生链的交换，从而使重组过程中DNA 配对、Holliday 中间体的形成、分支移动等步骤得以实现的过程。
61、转座子：基因组上中可以移动的DNA 片段。转座子由基因组的一个位置转移到另一个位置的过程叫转座
62、反转座子：又称反转录转座子或反转录子，是一类在转座过程中需要以RNA 为中间体，
经过反转录过程再分散到基因组中的转座子。生物学意义：对基因表达的影响；反转座子介导基因的重排；反转座子在进化中的作用
63、转录：生物体以DNA 为模板合成RNA 的过程。
64、反转录：生物体以RNA 为模板合成DNA 的过程。
65、剪接：真核生物RNA 前体去除内含子，连接外显子的过程。
66、剪接体：在mRNA 前体内含子的剪接过程中，由多个核内小分子核糖核酸（snRNA）和蛋白质组装形成催化剪接反应的复合体。
67、模板链：“－链”、“反义链”，指用于转录的DNA 单链，是合成RNA 的模板
68、编码链：“＋链”、“有义链”、“非模板链”，指模板链的对应DNA 链，碱基序列与mRNA
一致（DNA：T，RNA：U）
69、编码序列：编码序列从AUG 开始以三核苷酸单位阅读直到出现终止密码UGA ，UAA 或UAG 之一。
70、RNA 编辑：是指转录后的RNA 在编码区发生碱基的插入、丢失或替换等现象。编辑的生物学意义：(1)改变和补充遗传信息；(2)增加基因产物的多样性，是基因调控的一种方式，有利于进化；(3)可能与学习和记忆有关
71、反式作用因子：通过扩散到与其编码基因不在同一个DNA 分子上的靶位置，识别、结合而调节基因表达的分子。如转录因子、RNA 聚合酶
72、顺式作用元件：通常只在原位影响与其处于同一个DNA 分子上的、物理上紧密相连、被表达的基因序列。通常不编码蛋白，多位于基因旁侧或内含子中。如启动子、终止子、增强子、操纵基因、MAR
73、启动子：位于转录起始点附近，且为转录起始所必需，可被RNA 聚合酶特异性识别、结合，并起始转录的一段保守DNA 序列，其本身不被转录。
74、-10 序列（Pribnow 框）：几乎所有原核基因的启动子中，在转录起始位点上游-10bp 位点区域都有一个典型的6bp 区域，共有序列为TATAAT（T80A95T45A60A50T96）序列，称为-10 序列或Pribnow 框。
75、- 35 序列（Sextama 框）：转录起始位点上游约－35bp 处有一段6bp 区域，共同序列为TTGACA（T82T84G78A65C54A45），称为-35 序列（Sextama 框）
76、操纵子：是原核生物在分子水平上基因表达调控的单位，由调节基因、启动子、操纵基因和结构基因等序列组成。
77、增强子：指能使基因转录频率明显增加的DNA 远端调控序列
78、强终止子：无需其他蛋白质因子的帮助，而是依靠转录产物形成特殊的二级结构就可以终止转录，这种终止子被称为内部终止子。
79、弱终止子：需要在一种蛋白质因子ρ的帮助才能终止，所以又称为ρ依赖性终止子。
80、结构基因：编码参与细胞结构或代谢活动的结构蛋白、酶的基因。
81、操纵基因：指操纵子中常与启动子相邻或重叠的序列，被有活性调节蛋白结合后，影响启动子启动下游结构基因转录，是一类顺式作用元件。
82、调节基因：编码控制其它基因表达的蛋白质或RNA 的基因。
83、调节蛋白：是调节基因产物，有活性调节蛋白可与操作基因结合，控制下游结构基因转录。
84、效应物：调节蛋白需要有一个小分子物质结合并改变其活性，共同调节结构基因转录，这个小分子物质称为效应物(effector)
85、CAP：（降解物活化蛋白）或CRP（环腺苷酸受体蛋白）是分子量为22.5kd 的二聚体
86、顺反子：遗传学将编码一个蛋白质或多肽的遗传单位称为顺反子(cistron)。
87、多顺反子：原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位，转录生成的mRNA 可编码几种功能相关的蛋白质，为多顺反子(polycistron) 。
88、单顺反子：真核mRNA 只编码一种蛋白质，为单顺反子(single cistron) 。
89、遗传密码: DNA（或mRNA）中的核苷酸序列与蛋白质中氨基酸序列之间的对应关系称为遗传密码。特点：连续性、简并性、通用性、变异性、方向性、变偶性
90、密码子：mRNA 上每3 个相邻的核苷酸编码蛋白质多肽链中的一个氨基酸，这三个核苷酸就称为一个密码子或三联体密码。
91、同义密码子：同一种氨基酸具有两个或更多密码子的现象称为密码子的简并性。对应于同一种氨基酸的不同密码子称为同义密码子。
92、开放阅读框架：从mRNA 5 端起始密码子AUG 到3 端终止密码子之间的核苷酸序列，按照三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。
93、RNA 的再编码：mRNA 以不同的方式翻译，改变原来编码信息，称为RNA 的再编码
94、氨基酸的活化：是指氨基酸与tRNA 相连，形成氨酰-tRNA 的过程。氨基酸的活化在细胞质中进行。反应由氨酰-tRNA 合成酶（又称氨基酸活化酶）催化。意义：（1）使氨基酸本身被活化，利于下一步形成肽键反应。（2）tRNA 可携带氨基酸到mRNA 的指定部位，使氨基酸进入到肽链合适的位置
95、安慰诱导物：又称义务诱导物：能高效诱导酶的合成，但不是酶作用底物，与酶底物结构类似的分子
96、应急反应：当细菌能源十分缺乏时，几乎所有的生化反应都停止，为生存，细菌体内可立即产生一种应急应答反应，关闭许多基因表达。
97、反式作用因子：通过扩散到与其编码基因不在同一个DNA 分子上的靶位置，识别、结
合而调节基因表达的分子。如转录因子、RNA 聚合酶
98、顺式作用元件：通常只在原位影响与其处于同一个DNA 分子上的、物理上紧密相连、
被表达的基因序列。通常不编码蛋白，多位于基因旁侧或内含子中。如启动子、终止子、增强子、操纵基因、MAR
99、转录后的加工：是指将各种前体RNA 分子加工成成熟RNA 的过程。
100、信号序列：所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号，主要为N 末端特异氨基酸序列，可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位，这一序列称为信号序列。
101、分子伴侣：分子伴侣是细胞一类保守蛋白质，可识别肽链的非天然构象，促进各功能
域和整体蛋白质的正确折叠。
102、应急反应(strigent response)：当细菌能源十分缺乏时，几乎所有的生化反应都停止，为
生存，细菌体内可立即产生一种应急应答反应，关闭许多基因表达。
103、管家基因：在生物体几乎所有的细胞中始终表达的基因，表达产物大致以恒定水平始
终存在于细胞内，是维持细胞最低限度功能所不可缺少的基因，是细胞生存所必须的。这
类基因的表达称为组成型表达
104、奢侈基因：只在特定的细胞类型或细胞生长发育特定时间表达的基因。这类基因的表
达称为可调节表达
105、核基质结合区：30nm 染色质纤维以特定的DNA 序列结合在核基质上，这些特定DNA 序列称为MAR，它使纤维状的染色质DNA 形成数以万计的环状结构域。
106、绝缘子：是一类特殊的顺式作用元件，阻止激活或阻遏作用在染色质上的传递，使染
色质活性限定于结构域内
107、座位控制区(LCR)：是一种远距离顺式元件，为相连接的基因提供了一个可以活化的
染色体环境，可能是DNaseI 的超敏感位点和许多转录因子结合位点，可促进基因转录108、CpG 岛：真核生物基因组中，常见富含的CpG 的区域，称为CpG 岛，常位于转录调控区
及其附近，其甲基化程度直接影响转录活性。
109、DNA 甲基化：真核生物DNA 双螺旋中，胞嘧啶核苷的嘧啶环5 位甲基化，并与其上
的鸟嘌呤形成mCpG，是DNA 甲基化的唯一形式
110、高速泳动蛋白（HMG）：活性染色质中含有两种高度丰富的小分子非组蛋白，这些蛋
白具有异常高的电荷，在凝胶电泳中移动快，所以称为高速泳动蛋白（HMG）
111、小卫星DNA 序列：又称可变数目串联重复，重复单位6-40bp，每个拷贝长度0.1-20Kb （6-100 次），分为位于邻近染色体端粒的区域（端粒家族），以及分散在基因组的多个位置
上（高变家族），一般没有转录活性。
112、增强子：指能使基因转录频率明显增加的DNA 远端调控序列。
二、填空题
1、原核生物复制方式：θ 型复制、滚环复制、D 环复制
2、真核生物复制方式：多起点双向复制
3、真核生物基因组组分包括：核内染色体DNA、核外细胞器DNA（线粒体DNA、叶绿体DNA）、质粒
4、真核生物DNA 序列类型：单拷贝序列、低度重复序列、中度重复序列、高度重复序
5、PCR 体系：引物、DNA 聚合酶模板dNTP Mg 2+浓度
6、反式作用因子结构包括：DNA 结合结构域、转录激活结构域、二聚体结构域，其中，DNA 结
构域包括：螺旋-转角-螺旋（HTH）结构基序、锌指（ZF）结构基序、螺旋-突环-螺旋（HLH）
结构基序、亮氨酸拉链（LZ）结构基序
7、DNA 的提取的一般步骤
1、准备生物材料
2、裂解细胞
3、去除杂质
4、沉淀DNA
5、检测
6、保存
三、简答论述题
1、增强子为什么具有远距离作用呢？
答：成环模型：认为增强子通过一些蛋白质因子的介导可与远距离的启动子结合，使DNA 形成了一个环，从而促使远距离的启动子的转录。成环模型也符合染色体的侧环模型和核基质的调控理论，也就是说DNA 的特殊序列可以和核基质结合形成侧环，在某些细胞中有些基因通过环的形成让增强子区和启动子区相互靠近，使这些基因能得以表达。看来环的形成主要是两种因素：①某些蛋白质因子的介导；② 和核基质特异的结合
2、病毒基因组的结构特点
答：a 与细菌相比，病毒基因组很小，大小相差较大。
b 病毒基因组由DNA 组成，也可以由RNA 组成，每种病毒颗粒中只含有一种核酸，
核酸结构可以是单链或双链、环状或线状。
c 有重叠基因。
d 大部分是用来编码蛋白质的，基因间的间隔序列较短。
e 功能上相关的基因集中成簇，在基因组的特定的部位,形成一个功能单位或转录单
元，转录产物为多顺反子，之后经过简单加工。
f 噬菌体的基因是连续的；而真核细胞病毒的基因是不连续的，具有内含子。
3、细菌染色体基因组结构的一般特点
答：☆细菌的染色体基因组通常仅由一条环状双链DNA 分子组成，染色体相对
聚
集在一起，形成一个较为致密的区域，称为类核。
☆ 只有一个复制起点，数个相关的结构基因串联在一起，受同一调控区调节，合成多顺反子mRNA。
☆ 具有操纵子结构。
☆ 编码蛋白质的基因都是单拷贝，但rRNA 基因是多拷贝。
☆ 和病毒的基因组相似，非编码的DNA 部份所占比例比真核细胞基因组少得多。
☆ 基因组DNA 中具有多种调控区如复制起始区、复制终止区、转录启动区和终止区等，还有重复序列，比病毒基因组复杂。
☆ 具可移动的DNA 序列
4、真核生物基因组的特点
答：☆真核生物的基因组比较庞大，具有多个复制起始点。
☆一个基因组包括多条线状染色体，每条染色体DNA 上有多个复制起始点。
☆ 真核生物的基因组DNA 与蛋白质结合形成染色质的复杂高级结构，储存于细胞核内。
☆真核细胞被核膜分隔成细胞核和细胞质，在基因表达中，转录和翻译在时间和空间上被分隔，不偶联。
☆真核生物基因组存在着许多重复序列，重复序列单位长度不一，重复程度各异。
☆ 真核生物的蛋白质基因一般以少拷贝形式存在，转录产物为单顺反子。
☆ 存在着可移动的DNA 序列。
☆ 大多数真核生物基因含内含子，为断裂基因。
5、滚环复制特点:
（1）共价延伸；
（2）模板链和新合成的链分开;
（3）不需RNA 引物，在正链3‘－OH 上延
（4）只有一个复制叉;
（5）形成多联体;
6、D 环复制的特点：
D 环复制的特点是: 复制起始点不在双链DNA 同一位点，内、外环复制有时序差别。
7、DNA 聚合酶反应特点
☆ 以4 种dNTP 作为底物
☆ 反应需要接受模板指导
☆ 链延伸需要引物3’-羟基存在
☆ 新链延伸方向5’→ 3’
☆ 产物DNA 极性与模板相对
8、DNA 聚合酶I 的结构
DNA 聚合酶I 有5 个结合位点：
(1)模板结合位点
(2)引物结合位点
(3)底物dNTP 结合位点
(4)5‘→3’外切酶结合位点
(5) 3'→5'校正位点
9、DNA 聚合酶I 的主要活性和生理功能
5’ → 3’聚合活性：催化条件：4×dNTP、Mg2+、模板DNA（双链）、RNA 引物；可用与DNA 测序
3’ → 5’外切活性：无dNTP 是外切活性，有dNTP 时，校正作用
5’ → 3’外切活性
内切酶活性
生理功能：滞后链合成中除去RNA 引物并添补其留下的缺口；参与DNA 损伤修复10、DNA 聚合酶II 的主要活性
5’ → 3’聚合活性
3’ → 5’外切活性
生理功能：修复中起作用
11、DNA 聚合酶III 的主要活性
多亚基酶
5’ → 3’聚合活性
3’ → 5’外切活性
生理功能：是体内DNA 复制的主要承担者
12、DNA 的复制过程
1、复制的起始
①DNA 解旋、解链，形成复制叉：拓扑异构酶、解旋酶及单链DNA 结合蛋白
②RNA 引物合成：依赖于单链模版，由引物酶催化合成一小段RNA 引物
③特点：原核环形DNA 通常只有一个起点，双向复制；真核线性DNA 通常多个起始点，形成多个复制叉
2、复制的延长
①子链延长：引物合成后，由polII 催化，在引物3’-OH 末端逐一添加与模板链对应互补的脱氧核苷三磷酸
②半不连续合成：
A.领头链：键的延长方向与解链方向相同，为连续合成
B..随从链：键的延长方向与解链方向相反，为不连续合成，产生冈崎片段
3、复制的终止
①水解引物及填补空隙：冈崎片段合成后，由Pol I 水解去除RNA 引物，并填补留下的空隙
②连接酶连接冈崎片段形成完整双链DNA 分子：空隙填补后，DNA 片段与片段之间的一个缺口由DNA 连接酶催化连接，从而产生完整的双链DNA 分子
13、端粒酶的生物学意义
（1）细胞水平的老化，可能与端粒酶的活性下降有关。
（2）基因突变、肿瘤形成，端粒也可表现缺失，融合或序列缩短等现象。
（3）研究端粒的变化是目前肿瘤研究中的一个新领域。
14、DNA 重组的意义
1、迅速增加遗传群体的多样性
2、与DNA 修复有关
3、可调节某些基因的表达
15、转座子转座的特征
☆ 转座不依赖靶序列的同源性
☆ 转座后靶序列重复
☆ 转座子的插入具有专一性
☆转座具有排他性
☆转座具有极性效应
☆活化临近的沉默基因
☆区域性优化
16、转座子的应用
1、用于难以筛选的基因的转移
2、作为基因定位的标记
3、筛选插入突变
4、构建特殊菌株
5、克隆难以进行表型鉴定的基因
17、RNA 转录的一般特点
☆具有选择性，即只对基因组或DNA 分子中的编码区进行转录
☆开始于特定位点，并在特定的终点处终止
☆催化转录反应的是RNA 聚合酶
☆被转录的DNA 双链中只有其中一股模板链（反义链）作为RNA 合成的模板，进行“不对称”转录
☆ 启动子控制起始
☆ 底物为4 种5’-核糖核苷三磷酸
☆ 合成方向5′→3′
18、原核生物启动子的特征
结构典型：都含保守的识别序列（R)、结合序列（B)、起始位点（I）以及间隔长度;
直接和聚合酶相结合；
常和操纵子相邻；
常位于基因的上游；
19、真核RNA 聚合酶的一般特点
结构非常复杂
结构具有相似性
3 类RNA 聚合酶都有几种共同的亚基：根据其结构与功能，可以分为核心亚基、
共同亚基和非必须亚基。
20、原核生物和真核生物的rRNA 基因差异
原核生物无5.8S rRNA
5S rRNA 编码基因与其它rRNA 编码基因关系不同
重复次数不同
21、帽子结构的功能
（1）对翻译起识别作用------为核糖体识别RNA 提供信号，Cap0 的全部都是识别
的重要信号，Cap1,2 的甲基化能增进识别
（2）增加mRNA 的稳定性，使5’端免遭外切核酸酶的攻击
(3) 有助于mRNA 越过核膜，进入胞质
22、poly(A) 的功能
（1）可能与核质转运有关
（2）增强mRNA 稳定性
（3）增强可翻译能力
23、剪接机制——剪接体套索模型
●第一次转酯，内含子形成套索
●第二次转酯，外显子1、2 连接、套索状内含子释放
●拼接体解体与套索降解
24、翻译（蛋白质的生物合成）:
以氨基酸为原料
以mRNA 为模板
以tRNA 为运载工具
以核糖体为合成场所
起始、延长、终止各阶段蛋白因子参与
合成后加工成为有活性蛋白质
25、简并性的生物学意义？
可以降低由于遗传密码突变造成的灾难性后果。
可以使DNA 上的碱基组成有较大的变化余地，而仍然保持多肽上氨基酸序列不变。
26、tRNA 的结构与功能
1、tRNA 的一级结构特点
含10~20% 稀有碱基，如DHU
3′末端为—CCA-OH
5′末端大多数为G
具有TψC
2、tRNA 的二级结构——三叶草形
氨基酸臂
DHU 环
反密码环
额外环
TΨC 环
3、tRNA 的三级结构——倒L 型
27、肽链合成延长
包括以下三步：
进位：新氨酰tRNA 识别核糖体内的mRNA,进入A 位
转肽：P 位的氨基酸转到A 位新氨基酸末端，形成肽键
移位：核糖体向3’端移动1 个密码子长度
肽链延长是以上3 步在核糖体上连续性循环式进行，每次循环增加一个氨基酸，又称为核糖体循环(ribosomal cycle)。
28、原核生物基因表达调控的特点
主要是短期调节
主要是转录水平的调节
以操作子为单位，存在正、负调控，但以负调控为主，调节因子的活性主要受变构效应调节
还存在其它调控机制
29、Lac 操纵子调控机制总结
当低葡萄糖而高乳糖时，部分乳糖在β－半乳糖苷酶作用下转变为异乳糖，异乳糖可作为诱导物和有活性阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失活，不能结合O，RNA 聚合酶顺利结合启动子，起始转录利用乳糖的酶；同时，由于没有葡萄糖存在，胞内cAMP 浓度高，大量的cAMP－CAP 复合物结合在CAP 位点，极大的促进下游结构基因转录效率，β－半乳糖苷酶、通透酶和转乙酰酶的含量高，这时候，细菌就分解乳糖为葡萄糖和半乳糖，葡萄糖直接作为碳源，半乳糖利用gal 操纵子调控的酶转变为葡萄糖，由于阻遏物不断合成，当乳糖被消耗完毕后，有活性的阻遏蛋白可重新建立阻遏状态，酶合成被抑制，经过一段延迟期后，逐渐被稀释。
当高葡萄糖和高乳糖时，乳糖可作为诱导物和有活性阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白失活，不能结合O，RNA 聚合酶可顺利结合P 起始转录分解利用乳糖的酶；同时，但是由于葡萄糖存在，胞内cAMP 浓度极低，没有cAMP－CAP 结合在CAP 位点，转录虽然可以起始但还是效率极低，β－半乳糖苷酶、通透酶和转乙酰酶的含量非常少，这时候，细菌就利用葡萄糖作为碳源，而不利用乳糖。
30、色氨酸操纵子调节机制
当环境能提供足够浓度的色氨酸时，调节蛋白R 与辅阻遏物－色氨酸结合，构象变化而活化，就能够与操纵基因Otrp 特异性亲和结合，阻遏结构基因的转录起始。因此这是属于一种可阻遏的负调控操纵元，即操纵子通常是开放转录的，有效应物（色氨酸为辅阻遏物）作用时则阻遏关闭转录；同时，色氨酸浓度高，tRNAtrp-色氨酸浓度随之升高，核糖体沿mRNA 翻译移动的速度加快，占据1 和2 区域，1 和2、2 和3 配对的机会减少，3 和4 配对就形成具有终止结构C 茎环，RNA 聚合酶终止转录，于是即使已经开始的转录就减弱，这样，在有色氨酸存在时，大肠杆菌利用外界提供的色氨酸，而很快关闭其体内色氨酸合成途径，直接利用外界trp。
在色氨酸浓度未达到能起阻遏作用时，调节蛋白R 未与辅阻遏物－色氨酸结合，构象处于失活状态，不能与操纵基因Otrp 特异性亲和结合，结构基因的转录就可起始进行。同时，Ptrp 起始转录后，RNA 聚合酶沿DNA 转录合成mRNA，同时，核糖体就结合到新生成的mRNA 核糖体结合位点上，开始翻译。tRNAtrp-色氨酸量也少，使核糖体沿mRNA 翻译移动的速度慢，赶不上RNA 聚合酶沿DNA 移动转录的速度，这时核糖体占据前导序列1 区域，使不能生成发夹结构A ，于是2 和3 区域配对就形成发夹结构B ，阻止了C 生成终止信号的结构，RNA 聚合酶得以沿DNA 前进，继续去转录，编码合成色氨酸的酶。
31、基因工程的操作流程
1、分：分离目的基因
2、切：对目的基因和载体适当切割
3、接：目的基因与载体连接
4、转：重组DNA 转入受体细胞
5、筛：筛选出含有重组体的受体细胞
6、表：目的基因在受体细胞中表达，受体细胞成长为基因改造生物
32、PCR 技术的原理
聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）原理类似于DNA 的变性和复制过程，即在高温（93 ～95℃）下，待扩增的靶DNA 双链受热变性成为两条单链DNA 模板；而后在低温（37～65℃）情况下，两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA 模板结合，形成部分双链；在Taq 酶的最适温度（72℃）下，以引物3’端为合成的起点，以单核苷酸为原料，沿模板以5’→3’方向延伸，合成DNA 新链。这样，每一双链的DNA 模板，经过一次解链、退火、延伸三个步骤的热循环后就成了两条双链DNA 分子。如此反复进行，每一次循环所产生的DNA 均能成为下一次循环的模板，每一次循环都使两条人工合成的引物间的DNA 特异区拷贝数扩增一倍，PCR 产物得以2n 的批数形式迅速扩增，经过25～30 个循环后，理论上可使基因扩增109 倍以上，实际上一般可达106～107 倍。
1.变性：在加热或碱性条件下可使DNA 双螺旋的氢键断裂，形成单链DNA，称之为变性。
2.退火：是模板与引物的复性。引物是与模板某区序列互补的一小段DNA 片段。
3.延伸：从结合在特定DNA 模板上的引物为出发点，将四种脱氧核苷酸以碱基配对形式按5’→3’的方向沿着模板顺序合成新的DNA 链。
35、
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At the end, Xiao Bian gives you a passage. Minand once said, "people who learn to learn are very happy people.". In every wonderful life, learning is an eternal theme. As a professional clerical and teaching position, I understand the importance of continuous learning, "life is diligent, nothing can be gained", only continuous learning can achieve better self. Only by constantly learning and mastering the latest relevant knowledge, can employees from all walks of life keep up with the pace of enterprise development and innovate to meet the needs of the market. This document is also edited by my studio professionals, there may be errors in the document, if there are errors, please correct, thank you!
分子生物学试题及答案 一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。 3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36 个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。 9．弱化子：在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。10．魔斑：当细菌生长过程中，遇到氨基酸全面缺乏时，细菌将会产生一个应急反应，停止全部基因的表达。产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸（ppGpp）和鸟苷五磷酸（pppGpp）。PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子，而是影响一大批，所以称他们是超级调控子或称为魔斑。 11．上游启动子元件：是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列，-10 区的TATA、-35 区的TGACA 及增强子，弱化子等。 12．DNA探针：是带有标记的一段已知序列DNA，用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。13．SD序列：是核糖体与mRNA结合序列，对翻译起到调控作用。 14．单克隆抗体：只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。 15．考斯质粒：是经过人工构建的一种外源D NA载体，保留噬菌体两端的COS区，与质粒连接构成。16．蓝-白斑筛选：含LacZ基因（编码β半乳糖苷酶）该酶能分解生色底物X-gal（5- 溴-4-氯-3- 吲哚-β-D- 半乳糖苷）产生蓝色，从而使菌株变蓝。当外源DNA插入后，LacZ 基因不能表达，菌株呈白色，以此来筛 选重组细菌。称之为蓝- 白斑筛选。 17．顺式作用元件：在DNA中一段特殊的碱基序列，对基因的表达起到调控作用的基因元件。 18．Klenow 酶：DNA聚合酶I 大片段，只是从DNA聚合酶I 全酶中去除了5' → 3'外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用 多聚dC 和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1．DNA 的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2．RNA 酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1 ）、（IF-2 ）和（IF-3 ）。 4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（DNA重组技术）三部分。7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（T2 噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接，）、 （mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子，在mRNA′3 末端多了一个多聚腺苷酸（polyA）尾巴）。9．蛋白质多亚基形式的优点是（亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法）、（可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响）、（活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭）。 10．蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11．半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP 的启动子S2 进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于
分子生物学试题（一） 一.填空题(,每题1分,共20分) 一.填空题(每题选一个最佳答案,每题1分,共20分) 1. DNA的物理图谱是DNA分子的（）片段的排列顺序。 2. 核酶按底物可划分为（）、（）两种类型。 3．原核生物中有三种起始因子分别是（）、（）和（）。 4．蛋白质的跨膜需要（）的引导，蛋白伴侣的作用是（）。5．真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：（）和（）。6．分子生物学的研究内容主要包含（）、（）、（）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（）、（）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（）、（）。 9．蛋白质多亚基形式的优点是（）、（）、（）。 10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括（成核）、（结构充实）、（最后重排）。 11.半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。所以需要一个不依赖于cAMP-CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于cAMP-CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从（S2 ）开始，无G时转录从（S1 ）开始。 12．DNA重组技术也称为（基因克隆）或（分子克隆）。最终目的是（把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体）。典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤： ①提取供体生物的目的基因（或称外源基因），酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形一个新的重组DNA分子。 ②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。 ③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 ④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。 13、质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为（严紧型质粒），不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为（松弛型质粒）。 14．PCR的反应体系要具有以下条件： a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的 DNA引物（约20个碱基左右）。 b、具有热稳定性的酶如：TagDNA聚合酶。 c、dNTP d、作为模板的目的DNA序列 15．PCR的基本反应过程包括：（变性）、（退火）、（延伸）三个阶段。 16、转基因动物的基本过程通常包括： ①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中； ②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫；
分子生物学复习提纲 一．名词解释 （1）Ori ：原核生物基因质粒的复制起始位点，是四个高度保守的19bp组成的正向重复序列，只有ori能被宿主细胞复制蛋白质识别的质粒才能在该种细胞中复制。 ARS：自主复制序列，是真核生物DNA复制的起点，包括数个复制起始必须的保守区。不同的ARS序列的共同特征是一个被称为A区的11bp的保守序列。（2）Promoter：启动子，与基因表达启动有关的顺式作用元件，是结构基因的重要成分，它是位于转录起始位点5’端上游区大约100~200bp以内的具有独立功能的DNA序列，能活化RNA 聚合酶，使之与模板ＤＮＡ准确地相结合并具有转录起始的特异性。 （3）r-independent termination不依赖r因子的终止，指在不依赖r因子的终止反应中，没有任何其他因子的参与，核心酶也能在某些位点终止转录。（强终止子） （4）SD sequence：ＳＤ序列（核糖体小亚基识别位点），存在于原核生物起始密码ＡＵＧ上游７～１２个核苷酸处的一种４～７个核苷酸的保守片段，它与１６ＳｒＲＮＡ３’端反向互补，所以可以将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当位置以便起始翻译作用。 Kozak sequence：存在于真核生物mRNA的一段序列，核糖体能够识别mRNA 上的这段序列，并把它作为翻译起始位点。 （5）Operator：操纵基因，与一个或者一组结构基因相邻近，并且能够与一些特异的阻遏蛋白相互作用，从而控制邻近的结构基因表达的基因。 Operon：操纵子，是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控元件组成的基因表达单元。包括操纵基因、结构基因、启动基因。 （6）Enhancer：增强子，能强化转录起始的序列的为增强子或强化子Silencer：沉默子，可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件。与增强子作用相反。 （7）cis-acting element ：顺式作用元件，存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列，包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件，本身不编码任何蛋白质，仅仅提供一个作用位点，与反式作用因子相互作用参与基因表达调控。 trans-acting factor：反式作用因子，是指直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。具有三个功能结构域，即DNA结合域、转录结合域、结合其他结合蛋白的结构域。 （8）Open reading frame (ORF)：开放式阅读框架，是指一组连续的含有三联密码子的能够被翻译成为多肽链的DNA序列。它由起始密码子开始，到终止密码子结束。 （9）Gene：基因，产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。（能转录且具有生物学功能的DNA/RNA的序列。）
一、名词解释 1、广义分子生物学：在分子水平上研究生命本质的科学，其研究对象是生物大分子的结构和功能。2 2、狭义分子生物学：即核酸（基因）的分子生物学，研究基因的结构和功能、复制、转录、翻译、表达调控、重组、修复等过程，以及其中涉及到与过程相关的蛋白质和酶的结构与功能 3、基因：遗传信息的基本单位。编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的遗传信息的基本单位，是染色体或基因组的一段DNA序列(对以RNA作为遗传信息载体的RNA病毒而言则是RNA序列)。 4、基因：基因是含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，包含产生一条多肽链或功能RNA 所必需的全部核苷酸序列。 5、功能基因组学：是依附于对DNA序列的了解，应用基因组学的知识和工具去了解影响发育和整个生物体的特定序列表达谱。 6、蛋白质组学：是以蛋白质组为研究对象，研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。 7、生物信息学：对DNA和蛋白质序列资料中各种类型信息进行识别、存储、分析、模拟和转输 8、蛋白质组：指的是由一个基因组表达的全部蛋白质 9、功能蛋白质组学：是指研究在特定时间、特定环境和实验条件下细胞内表达的全部蛋白质。 10、单细胞蛋白：也叫微生物蛋白，它是用许多工农业废料及石油废料人工培养的微生物菌体。因而，单细胞蛋白不是一种纯蛋白质，而是由蛋白质、脂肪、碳水化合物、核酸及不是蛋白质的含氮化合物、维生素和无机化合物等混合物组成的细胞质团。 11、基因组：指生物体或细胞一套完整单倍体的遗传物质总和。 12、C值：指生物单倍体基因组的全部DNA的含量，单位以pg或Mb表示。 13、C值矛盾：C值和生物结构或组成的复杂性不一致的现象。 14、重叠基因：共有同一段DNA序列的两个或多个基因。 15、基因重叠：同一段核酸序列参与了不同基因编码的现象。 16、单拷贝序列：单拷贝顺序在单倍体基因组中只出现一次，因而复性速度很慢。单拷贝顺序中储存了巨大的遗传信息，编码各种不同功能的蛋白质。 17、低度重复序列：低度重复序列是指在基因组中含有2～10个拷贝的序列 18、中度重复序列：中度重复序列大致指在真核基因组中重复数十至数万（<105）次的重复顺序。其复性速度快于单拷贝顺序，但慢于高度重复顺序。 19、高度重复序列：基因组中有数千个到几百万个拷贝的DNA序列。这些重复序列的长度为6~200碱基对。 20、基因家族：真核生物基因组中来源相同、结构相似、功能相关的一组基因，可能由某一共同祖先基因经重复和突变产生。 21、基因簇：基因家族的各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体的特殊区域。 22、超基因家族：由基因家族和单基因组成的大基因家族，各成员序列同源性低，但编码的产物功能相似。如免疫球蛋白家族。 23、假基因：一种类似于基因序列，其核苷酸序列同其相应的正常功能基因基本相同、但却不能合成功能蛋白的失活基因。 24、复制：是指以原来DNA（母链）为模板合成新DNA（子链）的过程。或生物体以DNA/RNA
分子生物学期末试题 分子生物学期末考试试题 一、名词讲明 1、反式作用因子：能直截了当或间接地识别或结合各类顺式作用元件核心序列，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 2、基因家族： 3、C值矛盾：C值是指真核生物单倍体的DNA含量，一样的，真核生物的进化程度越高，C值越大，但在一些两栖类生物中，其C值却比哺乳动物大的现象。缘故是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能D NA所隔开。 4、核型：指一个物种所特有的染色体数目和每一条染色体所特有的形状特点。 5、RNA editing：转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。 二、判定： 1、真核生物所有的mRNA都有polyA结构。（X ） 组蛋白的mRNA没有 2、由于密码子存在摇摆性，使得一种tRNA分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的密码子。 （√） 3、大肠杆菌的连接酶以ATP作为能量来源。（X ）
以NAD作为能量来源 4、tRNA只在蛋白质合成中起作用。（X ） tRNA还有其它的生物学功能，如可作为逆转录酶的引物 5、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。（X ） RNA聚合酶的催化反应不需要引物 6、真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸（X ） 真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲硫氨酸 7、质粒不能在宿主细胞中独立自主地进行复制（X ） 质粒具有复制起始原点，能在宿主细胞中独立自主地进行复制 8、RNA因为不含有DNA基因组，因此按照分子遗传的中心法则，它必须先进行反转录，才能复制和增殖。（X ）不一定，有的RNA病毒可直截了当进行RNA复制和翻译 9、细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和ρ因子组成。（ X ） 细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和σ因子组成 10、核小体在复制时组蛋白八聚体以全保留的方式传递给子代。（√） 11、色氨酸操纵子中含有衰减子序列（√） 12、SOS框是所有din基因（SOS基因）的操纵子都含有的20bp的lexA结合位点。（√） 三、填空：
绪论 思考题：（P9） 1.从广义和狭义上写出分子生物学的定义？ 广义上讲的分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。 狭义的概念，即将分子生物学的范畴偏重于核酸（基因）的分子生物学，主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、表达和调节控制等过程。其中也涉及与这些过程相关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。 2、现代分子生物学研究的主要内容有哪几个方面？什么是反向生物学？什么是 后基因组时代？ 研究内容： DNA的复制、转录和翻译；基因表达调控的研究；DNA重组技术和结构分子生物学。 反向生物学：是指利用重组DNA技术和离体定向诱变的方法研究已知结构的基因相应的功能，在体外使基因突变，再导入体内，检测突变的遗传效应，即以表型来探索基因结构。 后基因组时代：研究细胞全部基因的表达图式和全部蛋白质图式，人类基因组研究由结构向功能转移。 3、写出三个分子生物写学展的主要大事件（年代、发明者、简要内容） 1953年Watson和Click发表了?脱氧核糖核苷酸的结构?的著名论文，提出了DNA的双螺旋结构模型。 1972~1973年，重组DNA时代的到来。H.Boyer和P.Berg等发展了重组DNA 技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创了基因工程新纪元。 1990~2003年美、日、英、法、俄、中六国完成人类基因组计划。解读人类遗传密码。 4、21世纪分子生物学的发展趋势是怎样的？ 随着基因组计划的完成，人类已经掌握了模式生物的所有遗传密码。又迎来了后基因组时代，人类基因组的研究重点由结构向功能转移。相关学说理论相应诞生，如功能基因组学、蛋白质组学和生物信息学。生命科学又进入了一个全新的时代。 第四章 思考题：（P130） 1、基因的概念如何？基因的研究分为几个发展阶段？ 概念：基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列，是遗传的基本单位和突变单位以及控制形状的功能单位。 发展阶段：○120世纪50年代以前，主要从细胞的染色体水平上进行研究，属于基因的染色体遗传学阶段。 ○220世纪50年代以后，主要从DNA大分子水平上进行研究，属于分
名词解释： 1.基因(gene)：是一段携带功能产物（多肽，蛋白质，tRNA和rRNA和某些小分子RNA）信息的DNA片段，是控制某种性状的的遗传单位。 2.基因组(genome)：泛指一个有生命体、病毒或细胞器的全部遗传物质；在真核生物，基因组是指一套染色体（单倍体）DNA。 3、端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。 4、操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA为多顺反子。 5、顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。 6、反式作用因子:是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。在反式作用因子中，可直接或间接结合RNA聚合酶的，称为转录因子。 转录调节因子结构 DNA结合域 酸性活域 脯氨酸富含域 TF 转录激活域 谷氨酰胺富含域 蛋白质-蛋白质结合域 （二聚化结构域） 7、启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。 8、增强子:位于真核基因中远离转录起始点，能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游，也可相距靶基因较远。 9、基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质，进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 10、信息分子:调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子；而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。 11、受体:是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合，进而发生生物学效应的的特殊蛋白质。 12、分子克隆:在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组，将重组分子导入合适宿主，使其在宿主中扩增和 繁殖，以获得该DNA分子的大量拷贝。 13、蛋白激酶:是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。 14、蛋白磷酸酶:是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子，与蛋白激酶相对应存在，共同 构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关系统。 15、基因工程:有目的的通过分子克隆技术，人为的操作改造基因，改变生物遗传性状的系列过程。 16、载体:能在连接酶的作用下和外源DNA片段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA分子。 17、转化:指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。 18、感染:以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌 体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。 19、转导:指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。 20、转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。 21、DNA变性:在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之间的氢键断裂，而核酸分子中的所有共价键则不受影响。
《分子生物学》考试试题B 课程号：66000360 考试方式：闭卷 考试时间： 一、名词解释（共10题，每题2分，共20分） 1. SD 序列 2. 重叠基因 3．ρ因子 4．hnRNA 5. 冈崎片段、 6. 复制叉(replication fork) 7. 反密码子(anticodon)： 8. 同功tRNA 9. 模板链(template strand) 10. 抑癌基因 二、填空题（共20空，每空1分，共20分） 1.原核基因启动子上游有三个短的保守序列,它们分别为____和__区. 2.复合转座子有三个主要的结构域分别为______、______、________。 3.原核生物的核糖体由_____小亚基和_____大亚基组成，真核生物核糖糖体由_____小亚基和_______大亚基组成。 4.生物界共有___个密码子，其中__ 个为氨基酸编码，起始密码子为__ _______；终止密码子为_______、__________、____________。 5. DNA生物合成的方向是_______，冈奇片段合成方向是_______。 6.在细菌细胞中，独立于染色体之外的遗传因子叫_______。它是一
种_______状双链DNA，在基因工程中，它做为_______。 三．判断题（共5题，每题2分，共10分） 1.原核生物DNA的合成是单点起始，真核生物为多点起始。( ) 2.在DNA生物合成中，半保留复制与半不连续复制指相同概念。( ) 3.大肠杆菌核糖体大亚基必须在小亚基存在时才能与mRNA结合。( ) 4.密码子在mRNA上的阅读方向为5’→ 3’。( ) 5.DNA复制时，前导链的合成方向为5’→ 3’，后随链的合成方向也是5’→ 3’。（） 四、简答题（共6题，每题5分，共30分） 1.简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用。 2.蛋白质合成后的加工修饰有哪些内容? 3.简述人类基因组计划的主要任务。 4.简述现代分子生物学的四大研究热点。 5.何谓转座子?简述简单转座子发生转座作用的机理。 6.简述大肠杆菌乳糖操纵子与色氨酸操纵子在阻遏调控机制上有那些区别？ 四、问答题（共2题，共20分） 1.叙述蛋白质生物合成的主要过程。（10分） 2.请叙述真核基因的表达调控主要发生在那些环节？分别是怎样进行 的？（10分）
第2章染色体与DNA 名词解释 原癌基因：细胞内与细胞增殖相关的正常基因，是维持机体正常生命活动所必须的，在进化上高等保守。当原癌基因的结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤。 复制：以亲代DNA或RNA为模板，根据碱基配对的原则，在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 转座子 (transposon 或 transposable element)：位于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。包括插入序列和复合转座子。 半保留复制：以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA，这样新形成的子代DNA 中，一条链来自亲代DNA，而另一条链则是新合成的，这种复制方式叫半保留复制。 染色体：染色体是遗传信息的载体，由DNA、RNA和蛋白质构成，其形态和数目具有种系的特性。在细胞间期核中，以染色质形式存在。在细胞分裂时，染色质丝经过螺旋化、折叠、包装成为染色体，为显微镜下可见的具不同形状的小体。 核小体：是构成真核生物染色体的基本单位，是DNA和蛋白质构成的紧密结构形式，包括200bp左右的DNA和9个组蛋白分子构成的致密结构。 填空题 1.真核细胞核小体的组成是DNA和蛋白 2.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片段发生连接，这是因为天然染色体末端存在端粒结构。 3.在聚合酶链反应中，除了需要模板DNA外，还需加入引物、DNA聚合酶、dNTP和镁离子。 4.引起DNA损伤的因素有自发因素、物理因素、化学因素。 5.DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链DNA结合蛋白。 6.参与DNA切除修复的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶、特异的核酸内切酶。 7.在真核生物中DNA复制的主要酶是DNA聚合酶δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。 8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆转录酶。 9.DNA的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、DNA的直接修复。 选择题 1.真核生物复制起点的特征包括（B） A. 富含G-C区 B. 富含A-T区 C. Z-DNA D. 无明显特征 2.插入序列（IS）编码（A） A.转座酶 B.逆转录酶 C. DNA合成酶 D.核糖核酸酶 3.紫外线照射对DNA分子的损伤主要是(D) A.碱基替换 B.磷酸脂键断裂C。碱基丢失 D.形成共价连接的嘧啶二聚体 4.自然界中以DNA为遗传物质的大多数生物DNA的复制方式（C） A.环式 B.D环式 C.半保留 D.全保留 5.原核生物基因组中没有（A） A.内含子 B.外显子 C.转录因子 D.插入序列 6.关于组蛋白下列说法正确的是(D) A.为中性蛋白 B.为酸性蛋白 C.进化上不具保守性 D.染色体结合蛋白 7.DNA聚合酶Ⅰ（C） A.是复制酶，但不是修复酶 B.没有模板依赖性 C.有5′→3′外切酶活性 D. 5′→3′聚合酶活性极强
1.哪些因素引起 DNA 的突变？简要叙述生物体存在的修复方式。 突变引起的物理因素：辐射、紫外线等，化学因素：聚乙二醇，致癌物质等，生物因素：仙台病毒等。修复方式：错配修复恢复错配 切除修复（碱基、核苷酸）切除突变的碱基和核苷酸片段 重组修复复制后的修复，重新启动停滞的复制叉 DNA 直接修复修复嘧啶二体或甲基化DNA SOS 系统DNA 的修复，导致变异 2.描述乳糖操纵子的调控机制。（看不懂题目，乱写的） 乳糖操纵子的调控属于可诱导调节。在以乳糖为碳源的培养基中，在单个透过酶分子的作用下，少量乳糖分子进入细胞，又在单个β-半乳糖苷酶分子作用下转变成异构乳糖。某个异构乳糖与结合在操纵区上的阻遏物结合后使后者失活离开操纵区，开始了lac mRNA的生物合成。Lac mRNA翻译后生成大量的透过酶和β-半乳糖苷酶，加速了乳糖分子的转变。当乳糖分子都被消耗完毕时，阻遏物仍在不断被合成，有活性的阻遏物浓度超过了异构乳糖浓度，使细胞重新建立起阻遏状态，导致lac mRNA合成被抑制。mRNA 半衰期短，不到一个世代生长期，mRNA 几乎从细胞消失，透过酶和β-半乳糖苷酶的合成也趋于停止。 3.简述 DNA 半保留复制的概念。 每个子代分子的一条链来自亲代 DNA ，另一条链则是新合成的，这种复制方式被称为 DNA 的半保留复制。 4.对生物体转录和复制的特征进行说明比较？（网上找的） DNA 复制和RNA 转录在原理上是基本一致的，体现在：①这两种合成的直接前体是核苷三磷酸，从它的一个焦磷酸键获得能量促使反应走向合成；②两种合成都需要RNA 聚合酶和四种核苷酸；③两种合成都是以DNA为模板；④合成前都必须将双链DNA解旋成单链；⑤合成的方向都是5'→ 3'。 DNA 复制和RNA 转录的不同点体现在：①复制和转录所用的酶是不同的，复制用的是DNA 聚合酶，而转录用的是RNA聚合酶；②所用前体核苷三磷酸种类不同，DNA复制用四种脱氧核糖核苷三磷酸，即dATP、dGTP、dCTP、dTTP，而RNA 转录用四种核糖核苷三磷酸，即ATP、GTP、CrP、UTP 做前体底物；③在DNA 复制时是A 与T配对，而RNA转录是A与U配对；④DNA复制时两条链均做模板，而RNA 转录时只以其中一条链为模板；⑤DNA 复制是半不连续的，可产生冈崎片段，而RNA 转录是连续的；⑥DNA复制时需RNA 做引物，而RNA 转录无需引物；⑦DNA复制时需连接酶的参与，而RNA 转录时不需要。 5.阐述蛋白质生物合成途径 氨基酸的活化→翻译的起始（核糖体结合 mRNA 且甲硫氨酰 -tRNA* 结合到核糖体）→肽链的延伸（后续AA-tRNA 与核糖体的结合，肽键生成，移位）→肽链终止→蛋白质前体加工→蛋白质的折叠 6.简要叙述真核生物 mRNA的转录后加工的方式，这些加工方式各有何意义 RNA 的编辑：某些RNA，特别是mRNA 前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA所编码的遗传信息的改变。因为经过编辑的mRNA 序列发生了不同于模板DNA的变化。生物学意义：校正作用有些基因突变在突变过程中丢失的遗传信息可能通过RNA 的编辑得以回复 调控翻译通过编辑可以构建或去除起始密码子和终止密码子，是基因表达调控的一种方式
1．SD序列：起始密码子AUG上游5-10个核苷酸处，有一段可与核糖体16S rRNA配对结合的、富含嘌呤的3-9个核苷酸的共同序列，一般为AGGA(也有说是AGGAGG)，此序列称 SD序列(Shine-Dalgarno sequence) 2．顺式作用元件：cis-acting element是指对基因表达有调控活性的DNA序列，其活性只影响与其自身同处于一个DNA 分子上的基因 3．核小体nucleosome构成真核染色质的一种重复珠状结构，是由大约200 bp的DNA区段和多个组蛋白组成的大分子复合体。其中大约146 bp的DNA区段与八聚体(H2A、H2B、H3和H4各两分子)的组蛋白组成核小体的核心颗粒，核心颗粒间通过一个组蛋白H1的连接区DNA彼此相连。 基因产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。 冈崎片段Okazaki fragment 在DNA不连续复制过程中，沿着后随链的模板链合成的新DNA片段， 模板链DNA双链中其序列与编码链或信使核糖核酸互补的那条链。在DNA复制或转录过程中，作为模板指导新核苷酸链合成的亲代核苷酸链。 基因家族真核生物的基因组中有很多来源相同、结构相似、功能相关的基因，将这些基因称为基因家族 蛋白质内含子其DNA序列与外显子一起转录和翻译，产生一条多肽链，然后从肽链中切除与内含子对应的aa序列，再把与外显子对应的氨基酸序列连接起来，成为有功能的蛋白质。 翻译内含子mRNA中存在与内含子对应的核苷酸序列，在翻译过程中这一序列被“跳跃”过去，因此产生的多肽链不含有内含子对应的氨基酸序列 Northern blot过电泳的方法将不同的RNA分子依据其分子量大小加以区分，然后通过与特定基因互补配对的探针杂交来检测目的片段 Sorthern blot 蛋白激酶C protein kinase丝氨酸/苏氨酸激酶的家族成员。在多种免疫受体介导的信号转导中可被二酰甘油和钙离子所激活。 原癌基因proto-oncogene调控细胞生长和增殖的正常细胞基因。突变后转化成为致癌的癌基因。 多顺反子mRNA两个以上相关基因串在一起转录所得到的信使核糖核酸(mRNA)。多顺反子mRNA一般可同步翻译产生功能相关的多个蛋白质或酶。 Alternative splicing在高等真核生物中，内含子通常是有序或组成型地从mRNA前体分子中被剪接，然而，在个体发育或细胞分化时，可以有选择地越过某些外显子或某个剪接点进行变位剪接，产生出组织或发育阶段特异性mRNA，成为内含子的可变剪接。 端粒酶端粒酶是一种含RNA链的逆转录酶，通过识别并结合于富含G的端粒末端，以所含的RNA为模板，逆转录合成端粒。 X染色体失活人和鼠的Xist（ Xi-specific transcript）基因只在失活的X染色体上表达，编码一功能性RNA分子，此分子能与Xic位点相互作用，引起后者构象变化，更容易与各种蛋白因子相结合，最终导致X染色体失活 锌指结构指的是在很多蛋白中存在的一类具有指状结构的结构域，这些具有锌指结构的蛋白大多都是与基因表达的调控有关的功能蛋白由一个含有大约30个氨基酸的环和一个与环上的4个Cys或2个Cys和2个His配位的Zn构成， 反式作用因子trans-acting factor是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 染色质chromatin chromosome 指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构, 是间期细胞遗传物质存在的形式。 所谓C值，通常是指一种生物单倍体基因组DNA的总量。 一般高等生物的C值均大于低等生物,但某些植物或两栖动物的C值比人高出几十倍,这种C值与进化复杂性不一致的现象称为C值反常现象或称为C值矛盾（C-value paradox） 断裂基因或不连续基因（interrupted/discontinuous genes） 所谓断裂基因就是基因的编码序列在DNA分子上是不连续的，为不编码的序列所隔开。编码的序列称为外显子（exon），不编码的序列称为内含子（intron）。 寡核苷酸（oligonucleotide）：一般是指二至十个核苷酸残基以磷酸二酯键连接而成的线性多核苷酸片段。 回文序列是指沿同一方向(如5’→3’)序列相同的结构，即碱基序列的反向重复(inverted repeats) 核酸的变性：是指核酸双螺旋区的氢键断裂，DNA分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象 变性的DNA在适当的条件下，两条彼此互补的DNA单链可以重新缔合形成双螺旋结构，这个过程称之为复性 DNA复制时每个子代DNA分子的一条链来自亲代DNA，另一条链是新合成的，这种复制方式称半保留复制
1.哪些因素引起DNA的突变？简要叙述生物体存在的修复方式。 突变引起的物理因素：辐射、紫外线等，化学因素：聚乙二醇，致癌物质等，生物因素：仙台病毒等。 修复方式：错配修复恢复错配 切除修复（碱基、核苷酸）切除突变的碱基和核苷酸片段 重组修复复制后的修复，重新启动停滞的复制叉 DNA直接修复修复嘧啶二体或甲基化DNA SOS系统DNA的修复，导致变异 2.描述乳糖操纵子的调控机制。（看不懂题目，乱写的） 乳糖操纵子的调控属于可诱导调节。在以乳糖为碳源的培养基中，在单个透过酶分子的作用下，少量乳糖分子进入细胞，又在单个β-半乳糖苷酶分子作用下转变成异构乳糖。某个异构乳糖与结合在操纵区上的阻遏物结合后使后者失活离开操纵区，开始了lac mRNA的生物合成。Lac mRNA翻译后生成大量的透过酶和β-半乳糖苷酶，加速了乳糖分子的转变。当乳糖分子都被消耗完毕时，阻遏物仍在不断被合成，有活性的阻遏物浓度超过了异构乳糖浓度，使细胞重新建立起阻遏状态，导致lac mRNA合成被抑制。mRNA半衰期短，不到一个世代生长期，mRNA几乎从细胞消失，透过酶和β-半乳糖苷酶的合成也趋于停止。 3.简述DNA半保留复制的概念。 每个子代分子的一条链来自亲代DNA，另一条链则是新合成的，这种复制方式被称为DNA的半保留复制。 4.对生物体转录和复制的特征进行说明比较？（网上找的） DNA复制和RNA转录在原理上是基本一致的，体现在：①这两种合成的直接前体是核苷三磷酸，从它的一个焦磷酸键获得能量促使反应走向合成；②两种合成都需要RNA聚合酶和四种核苷酸；③两种合成都是以DNA为模板；④合成前都必须将双链DNA解旋成单链；⑤合成的方向都是5’→ 3’。 DNA复制和RNA转录的不同点体现在：①复制和转录所用的酶是不同的，复制用的是DNA聚合酶，而转录用的是RNA聚合酶；②所用前体核苷三磷酸种类不同，DNA复制用四种脱氧核糖核苷三磷酸，即dA TP、dGTP、dCTP、dTTP，而RNA转录用四种核糖核苷三磷酸，即A TP、GTP、CrP、UTP做前体底物；③在DNA复制时是A与T配对，而RNA转录是A与U配对；④DNA复制时两条链均做模板，而RNA转录时只以其中一条链为模板；⑤DNA复制是半不连续的，可产生冈崎片段，而RNA转录是连续的；⑥DNA复制时需RNA做引物，而RNA转录无需引物；⑦DNA复制时需连接酶的参与，而RNA 转录时不需要。 5.阐述蛋白质生物合成途径 氨基酸的活化→翻译的起始（核糖体结合mRNA且甲硫氨酰-tRNA*结合到核糖体）→肽链的延伸（后续AA-tRNA与核糖体的结合，肽键生成，移位）→肽链终止→蛋白质前体加工→蛋白质的折叠 6.简要叙述真核生物mRNA的转录后加工的方式，这些加工方式各有何意义 RNA的编辑：某些RNA，特别是mRNA前体的一种加工方式，如插入、删除或取代一些核苷酸残基，导致DNA所编码的遗传信息的改变。因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。 生物学意义：校正作用有些基因突变在突变过程中丢失的遗传信息可能通过RNA的编辑得以回复
"1:基因的三个基本属性是： A: 自我复制，转录，控制性状表达， B: 自我复制，翻译，控制性状表达， C: 自我复制，突变，控制性状表达， D: 自我复制，交换，控制性状表达，" "2:，分子生物学的三大支撑学科是： A: 遗传学，细胞学，进化论 B: 遗传学，细胞学，生物化学 C: 微生物学，遗传学，生物化学 D: 遗传学，生理学，生物化学" "3:分子生物学发展历程中的三大转变是： A: 研究对象的变换，研究内容的拓展，研究方法的改变 B: 研究对象的变换，研究难度的加深，研究策略的创新 C: 研究对象的变换，研究内容的拓展，研究策略的创新 D: 不同学科的渗透，研究内容的拓展，研究策略的创新" "4:对破译生物遗传密码作出重要贡献的是 A: 遗传学家 B: 生物化学家 C: 细胞学家 D: 生理学家" "5:“中心法则”指出了生物体的遗传信息流向是：从_经_到_. " "6:提出的双螺旋结构模型，并获得若贝尔奖的科学家是: A: J.Watson ，F. Crick 和Marshall Nirenberg B: J.Watson ，F. Crick 和Oswald Avery C: J.Watson ，F. Crick 和Maurice Wilkins D: J.Watson ，F. Crick 和Rosalind Franklin" "7:Oswald Avery对分子生物学发展的历史贡献是: "1:DNA的基本单元脱氧核苷酸是由（）组成的。 A: 一磷酸，核苷酸 B: 一磷酸，脱氧核糖，碱基 C: 三磷酸，脱氧核糖，碱基 D: 一磷酸，核甘" "2:分子中脱氧核苷酸的脱氧，是特指发生在（）的脱氧。 A: a，磷酸 B: b，核糖的C2位 C: c，核糖的C3位 D: d，碱基" "3:分布在同一区域中不同单链上的，两个不同的基因称为（）基因。A: 反向重复基因 B: 反向重叠基因 C: 反向倒位基因 D: 同向重叠基因"
第2章染色体与DNＡ 名词解释 原癌基因:细胞内与细胞增殖相关得正常基因，就是维持机体正常生命活动所必须得，在进化上高等保守。当原癌基因得结构或调控区发生变异，基因产物增多或活性增强时，使细胞过度增殖，从而形成肿瘤. 半保留复制:以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DＮA,这样新形成得子代DNA 中，一条链来自亲代DＮＡ,而另一条链则就是新合成得,这种复制方式叫半保留复制。 填空题 3、在聚合酶链反应中，除了需要模板DNA外，还需加入引物、DＮA聚合酶、dNTP与镁离子。 ４、引起ＤNA损伤得因素有自发因素、物理因素、化学因素。 5、ＤＮA复制时与ＤNA解链有关得酶与蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链ＤＮＡ结合蛋白。 6、参与DNＡ切除修复得酶有DNA聚合酶Ⅰ、DＮＡ连接酶、特异得核酸内切酶。 ７、在真核生物中DNA复制得主要酶就是ＤNA聚合酶δ.在原核生物中就是ＤNA聚合酶Ⅲ. 8、端粒酶就是端粒酶就是含一段RＮA得逆转录酶. 9、ＤNA得修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、ＤNＡ得直接修复。 简述ＤNＡ复制得过程 DNＡ得复制过程可被分为3个阶段，即复制得起始、延伸与终止.每个DNA复制得独立单元主要包括复制起始位点与终止位点. DＮA复制得起始包括预引发与引发两个阶段.在预引发阶段,DＮＡ解旋解链，形成复制叉,引发体组装;在引发阶段，在引发酶得催化下以DNA链为模板合成一段短得RNA引物。复制时DNA链得延伸由DＮＡ聚合酶催化,以亲代DＮA链为模板,引发体移动，从5′→3′方向聚合子代ＤNＡ链。当子链延伸到达终止位点就是，ＤＮＡ复制就终止了,切除RＮＡ引物，填补缺口，在DNA连接酶得催化下将相邻得冈崎片段连接起来形成完整得DＮA长链。 试述真原核生物得ＤNA复制得特点得不同之处 ①真核生物染色体有多个复制起点，多复制眼，呈双向复制，多复制子.原核生物得染色体只有一个复制起点，单复制子也呈双向复制。 ②真核生物冈崎片段长约2０0bp比原核生物略短.真核生物DNA复制速度比原核慢,速度为10０0～3000bp/mｉn(仅为原核生物得1／20～1/５0). ③真核生物复制得终止在端粒处，原核生物得复制叉相遇时即终止。 ④真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制；而在快速生长得原核生物染色体DNA复制中，起点可以连续发动复制。真核生物快速生长时,往往采用更多得复制起点。 ⑤真核生物有多种ＤNA聚合酶,ＤＮA聚合酶δ就是真正得复制酶，在PＣNA存在下有持续得合成能力。PＣNA称为增殖细胞核抗原，相当于大肠杆菌DＮＡ聚合酶Ⅲ得β-夹子，RFC蛋白相当于夹子装配器。 原核生物得DNA聚合酶有三种DＮA聚合酶ⅢDNA得真正复制酶：多亚基酶,含十种亚基，该酶ＤNA合成得持续能力强。 ⑥真核生物线性染色体两端有端粒结构，它就是由许多成串得重短复序列组成,端粒功能就是稳定染色体末段结构，防止染色体间得末端连接，并可补偿滞后链5'－末段在消除ＲＮA引物后造成得空缺,使染色体保持一定长度。端粒酶就是含一段RNA得逆转录酶。 ⑦ＲＰA：真核生物得单链结合蛋白；ＲNaseＨ1与MF－1切除ＲNA引物，DNA聚合酶ε填补缺口。
生命科学系本科2010-2011 学年第1 学期试题分子生物学（ A ）答案及评分标准 一、选择题，选择一个最佳答案（每小题 1 分，共15分） 1、1953 年Watson和Crick 提出（A ） A、多核苷酸DNA链通过氢键连接成一个双螺旋 B、D NA 的复制是半保留的，常常形成亲本——子代双螺旋杂合链 C、三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D、遗传物质通常是DNA而非RNA 2、基因组是（D ） A、一个生物体内所有基因的分子总量 B、一个二倍体细胞中的染色体数 C、遗传单位 D、生物体的一个特定细胞内所有基因的分子总量 3、下面关于DNA 复制的说法正确的是（D ） A、按全保留机制进行 B、按3Z V方向进行 C、需要4种NTP加入 D、需要DNA聚合酶的作用 4、当过量的RNA 与限量的DNA 杂交时（A ） A、所有的DNA均杂交 B、所有的RNA均杂交 C、50%的DNA 杂交 D、50%的RNA 杂交 5、以下有关大肠杆菌转录的叙述，哪一个是正确的？（ B ） A、-35 区和-10区序列间的间隔序列是保守的 B、-35 区和-10区序列距离对转录效率非常重要 C、转录起始位点后的序列对于转录效率不重要 D、-10区序列通常正好位于转录起始位点上游1Obp处 6、真核生物mRNA 转录后加工不包括（A ） A、加CCA—OH B、5,端帽子”结构 C、3,端poly （A）尾巴 D、内含子的剪接 7、翻译后的加工过程不包括（ C ） A、N端fMet或Met的切除 B、二硫键的形成 C、3,末端加poly （A ）尾 D、特定氨基酸的修饰
8、有关肽链合成的终止，错误的是（C ） A、释放因子RF具有GTP酶活性 B、真核细胞中只有一个终止因子 C、只要有RF因子存在，蛋白质的合成就会自动终止 D、细菌细胞内存在3种不同的终止因子：RF1、RF2、RF3 9、酵母双杂交体系被用来研究（C） A、哺乳动物功能基因的表型分析 B、酵母细胞的功能基因 C、蛋白质的相互作用 D、基因的表达调控 10、用于分子生物学和基因工程研究的载体必须具备两个条件（B） A、含有复制原点，抗性选择基因 B、含有复制原点，合适的酶切位点 C、抗性基因，合适的酶切位点 11、原核生物基因表达调控的意义是（D） A、调节生长与分化 B、调节发育与分化 C、调节生长、发育与分化 D、调节代谢，适应环境 E、维持细胞特性和调节生长 12、乳糖、色氨酸等小分子物质在基因表达调控中作用的共同特点是（E） A、与DNA结合影响模板活性 B、与启动子结合 C、与操纵基因结合 D、与RNA聚合酶结合影响其活性 E、与蛋白质结合影响该蛋白质结合DNA 13、Lac阻遏蛋白由（D ）编码 A、Z基因 B、Y基因 C、A基因 D、I基因 14、紫外线照射引起DNA损伤时，细菌DNA修复酶基因表达反应性增强，这种现象称为（A） A、诱导 B、阻遏 C、正反馈 D、负反馈 15、ppGpp在何种情况下被合成？（A） A、细菌缺乏氮源时 B、细菌缺乏碳源时 C、细菌在环境温度太高时 D、细菌在环境温度太低时 E、细菌在环境中氨基酸含量过高时 、填空题（每空1分，共10 分）