细胞因子常识
重组细胞因子概述
一、细胞因子的概念
细胞因子(cytokine)是由机体多种细胞分泌的小分子蛋白质，通过结合细胞表面的相应受体发挥以调节免疫应答为主的生物学作用。细胞因子具有非常广泛的生物学活性，包括促进靶细胞的增殖和分化，增强抗感染和细胞杀伤效应，促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达，促进炎症过程，影响细胞代谢等。
二、细胞因子的特征
1、低分子量；一般为＜60kD的多肽或糖蛋白。多以单体形式存在，少数为二聚体，三聚体。
2、天然细胞因子由抗原、丝裂原或其他刺激物活化的细胞所分泌，通过旁分泌(paracrine)、自分泌(autocrine)或内分泌(endocrine)方式在局部发挥短暂作用。
3、一种细胞因子可由多种细胞产生，同一种细胞可产生多种细胞因子。
4、需通过与靶细胞表面相应受体结合后发挥其生物学效应。
5、具有高效性、多效性、叠性、拮抗性、协同性和网络性。
三、细胞因子的分类
1、白细胞介素(interleukin，IL-s)
最初是指由白细胞产生又在白细胞间发挥作用的细胞因子。
2、干扰素（interferon,IFN)
最早发现的细胞因子，有干扰病毒感染和复制的能力。分α、β和g三种类型。
3、肿瘤坏死因子超家族(tumor necrosis factor，TNF) 1975年发现的一种能使肿瘤发生出血坏死的物质。
4、集落刺激因子(colony-stimulating factor，CSF)
指能够刺激多能造血干细胞和不同造血祖细胞增殖分化，在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。包括G-CSF（粒细胞）、M-CSF（巨噬细胞）、GM-CSF（粒细胞、巨噬细胞）、Multi-CSF（多重）（IL-3）、红细胞生成素(EPO)、干细胞生长因子(SCF)、血小板生成素(TPO)等。
5、趋化因子(chemokine)
主要功能是招募血液中的单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等进入特定的淋巴器官和
组织以及感染发生的部位。根据趋化因子近N端半胱氨酸(Cys)的位置、排列方式和数量，可分为CC、CXC、C、CX3C四个亚家族。
6生长因子(growth factor，GF)
生长因子(GF)是具有刺激细胞生长作用的细胞因子。
六、生物学活性质控
不同的细胞因子用不同的方法进行相应的体外（in vitro）或体内（in vivo）活性
检测。
重组细胞因子活性通常会以ED50（半数有效浓度）或units（活性单位）来标识。因
此1mg细胞因子中所含的活性单位（units）可以理解为将1mg/ml细胞因子原液稀释成
ED50的稀释倍数注：ED50 (半数有效浓度): 可诱导50%最大反应的细胞因子浓度 1)
ED50=1.0ng/ml, 则1.0 ng/ml相当于1 unit; 2) 1mg PDGF-BB中含有多少个units呢? Units=1mg/1.0 ng/ml=106
3)若测定的ED50为0.5ng/ml对应比活性为： 1mg/0.5ng/mg=2X106
七、纯度测定
纯度：由以下方法测定纯度大于95.0% （a）高效液相色谱（SEC-HPLC）；（b）还
原和非还原银染SDS-PAGE。
SDS能断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结构强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂
变性凝胶电泳：
蛋白质在一定浓度的含有强还原剂的SDS溶液中，与SDS分子按比例结合，形成带负
电荷的SDS-蛋白质复合物，这种复合物由于结合大量的SDS，使蛋白质丧失了原有的电荷
状态形成仅保持原有分子大小为特征的负离子团块，从而降低或消除了各种蛋白质分子之
间天然的电荷差异，由于SDS与蛋白质的结合是按重量成比例的，因此在进行电泳时，蛋
白质分子的迁移速度取决于分子大小。非变性凝胶电泳：
非变性凝胶里面没加变性剂。非变性胶跑出来的蛋白能保持其活性一般用做功能试验，如EMSA。由于没有变性剂的原因非变性胶电泳时除了与蛋白分子量有关也会受都电荷的影响，因此对蛋白等电点的确定和缓冲液的酸碱性有注意，有时需要倒转电泳时的正负极。
从跑的胶来看，变性胶会比较好看，带比较窄，非变性胶跑出来则比较粗糙。
1. 凝胶的配置中非变性凝胶不能加入SDS，而变性凝胶的有SDS。
2. 电泳载样缓冲
液中非变性凝胶的不仅没有SDS，也没有巯基乙醇。
3. 在非变性凝胶中蛋白质的分离取决于它所带的电荷以及分子大小，不像SDS-PAGE
电泳中蛋白质分离只与其分子量有关。
4. 非变性凝胶电泳中，酸性蛋白和碱性蛋白的分离是完全不同的，不像SDS-PAGE中
所有蛋白都朝正极泳动。非变性凝胶电泳中碱性蛋白通常是在微酸性环境下进行，蛋白带
正电荷，需要将阴极和阳极倒置才可以电泳。
5. 因为是非变性凝胶电泳，所有的电泳时候电流不能太大，以免电泳时产生的热量
太多导致蛋白变性，而且步骤都要在0-4度的条件下进行，这样才可以保持蛋白质的活性，也可以降低蛋白质的水解作用。这点跟变性电泳也不一样。
八、分子量还原SDS-PAGE测定
本法测得的分子量，除单链蛋白质外，均不是天然蛋白质的完整分子量，而是组成这
些蛋白质的亚基或肽链的分子量。本法对一些电荷异常，或构象异常，或带有大辅基的蛋
白质不适用，如组蛋白F1和某些糖蛋白等。对一些结构蛋白如胶原蛋白等也不适用。
准确度比较：点喷雾质谱法>还原的SDS-PAGE>非还原的SDS-PAGE>HPLC
此法测得的表观分子量由于翻译后修饰（磷酸化，糖基化），剪切，异构等原因，会
比预期的分子量偏大。如：p53蛋白，其表观分子量是53kDa（这也是该蛋白名字的由来），但是根据氨基酸序列计算得到的分子量却是43kDa。
九、N末端氨基酸序列分析
重组蛋白经N末端氨基酸序列分析；必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱（MS）检
测其真实性。
十、内毒素对活性的影响
内毒素（Endotoxin），是革兰氏阴性菌细胞壁的产物。当细菌死亡自溶或粘附在其
它细胞时，表现毒性，内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂A成分。
内毒素与细胞膜上的受体结合引起免疫反应，对细胞有较强的毒性作用。我们的产品
均采用多种方法有效去除内毒素,使用鲎试剂（Limulus Amebocyte,LAL）测定含量小于
0.1ng/ug (1 EU/ug)。
十一、贮存及复溶
产品均为无菌冻干粉剂，调整PH和盐浓度经0.2um过滤后分装冻干。
请使用手动化霜冰箱，由于每次冻融都会造成蛋白的部分变性，所以要适量分装尽量
避免反复冻融。干粉状态在室温下存放3周，不影响活性；放于-18℃以下，可稳定保存
至少一年。
复溶时依据说明书，大多数溶解在灭菌超纯水（18MΩ.cm）中，浓度不低于
100μg/ml，以待进一步稀释至工作浓度。蛋白质在高浓度下稳定，所以有些加入载体蛋白，但是可能会对实验造成影响。我们的产品均不含carrier protein或其他添加物（如BSA、HAS、蔗糖等），而是以低盐的形式做冻干处理，微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层。所以使用前先离心20-30s，使附于管盖或管壁的蛋白集于管底，有些产品复溶需要加入醋酸，因为含PBS的冻干粉中性时容易吸附管壁，加入酸溶于液体中，表面活性剂也防止吸附。
复溶后的细胞因子，4℃可稳定储存 2周；长期保存请分装后存放于-20℃以下，可稳定保存至少三个月。最好在-80℃保存。分装时浓度要>100ng/ul，体积要>20ul。
十二、重组细胞因子的交叉活性
大多数人类细胞因子对小鼠细胞都有活性。
许多小鼠细胞因子对人类细胞也有活力表现，但是比相应人类细胞因子活力低。
一些人类的细胞因子如IL-7在小鼠细胞中表现出比小鼠细胞因子更高的比活力。
干扰素、GM-CSF、IL-3 和IL-4 有物种特异性，对于非人类细胞几乎没有活性。
成纤维细胞生长因子和神经营养因子是高度保守的，在其它的动物细胞中也能表现很好的活性。
十三、细胞因子的应用
免疫学实验细胞培养实验细胞治疗细胞调亡的研究
干细胞培养与扩增分化（ips）细胞因子的功能性分析体外生化分析
作为抗原，应用于生产高质量抗体抗体分析中作为阳性对照
ELISA和其他分析方法中作为标准品使用
蛋白-蛋白相互作用
捋捋让人迷惑的细胞因子 细胞因子是一类调节蛋白或者糖蛋白，他们的分类现在还不是完全清楚。他们通过结合细胞表面的特定受体，激发细胞内信号通路起作用。 白细胞组成了免疫和炎症系统，大多数细胞因子作用于白细胞或者由白细胞表达，他们在免疫和炎症反应中起到重要的调节作用。实际上，一些免疫抑制和抗炎作用的药物就是通过调节这些细胞因子的表达起作用的。 细胞因子由特定的细胞表达并分泌到胞外，结合细胞表面的细胞因子受体后激活细胞内信号 传导通路 细胞因子分类 细胞因子最早在20世纪70年代中期被提出，它当时被认为是一种多肽因子，可以调控细胞分化和免疫系统。干扰素（IFNs）和白介素（ILs）是主要的多肽家族，在当时细胞因子主要指这两类家族。 起初细胞因子的分类主要是根据分泌该因子的细胞类型或者细胞因子初次被发现时的生物活性。然而这些分类方法现在看来都不够准确，无法满足后期的分类需求。最近，根据细胞
因子一级，二级和三级结构的分析，可以将大多数的细胞因子分为6大家族。因此，根据分类方式的不同，某些细胞因子会有多个名称。 表1：细胞因子根据结构分类结果 细胞因子家族成员 ‘β-Trefoil’ cytokines Fibroblast growth factors Interleukin-1 Chemokines Interleukin-8 Macrophage inflammatory proteins ‘Cysteine knot’ cytokines Nerve growth factor Transforming growth factors Platelet-derived growth factor EGF family Epidermal growth factor Transforming growth factor-αHaematopoietins Interleukins 2–7, -9, -13 Granulocyte colony stimulating factor Granulocyte-macrophage colony stimulating factor Leukaemia inhibitory factor Erythropoietin Ciliaryneurotrophic factor TNF family Tumour necrosis factor-α and –β
细胞因子风暴研究进展 细胞因子风暴（英语：Cytokine storm）又称高细胞介质症（Hypercytokinemia），一种不适当的免疫反应，因为细胞因子与免疫细胞间的正回馈循环而产生。这也被认为是1918年流感大流行、2003年SARS事件、2009年H1N1流感大流行，以及H5N1高致病性禽流感中病毒致死的原因不过美国疾病控制与预防中心认为这一症状与H1N1之间的没有充分的证据可以展示其关联性。 症状为高烧、红肿、肿胀、极度疲倦与恶心。在某些情况下可能致命。治疗：当免疫系统对抗病原体时，细胞素会引导免疫细胞前往受感染处。同时，细胞素也会激活这些免疫细胞，被激活的免疫细胞则会产生更多的细胞素。通常来说，人体会检查并控制这个反馈循环。但是在有些情况下，情况会失控，导致一个地方聚集了太多被激活的免疫细胞。目前为止，还没有完全了解这一现象的具体成因，但是有推测认为可能是由于免疫系统对新的、高致病的病原体产生的过激反应。 细胞因子风暴有可能会对身体组织和器官产生严重的损伤，比如当其发生于肺部，过多的免疫细胞和组织液可能会在肺部积聚，阻塞空气进出，并导致死亡。 细胞因子风暴与各种感染性和非感染性疾病有关，甚至是治疗性干预尝试的不幸后果。已有研究证明其在移植物抗宿主病、多发性硬化症、胰腺炎或多器官功能障碍综合征中出现。随着研究的深入，对细胞因子风暴的细胞定位和分子机制有所了解，并有助于病毒性症状尤其是流行性感冒的治疗。 细胞因子是由细胞分泌出来用于细胞间信号传导和通信的多种小蛋白质，具有自分泌、旁分泌和/或内分泌活性，并且通过结合受体引发多种免疫应答。细胞因子的主要功能有控制细胞增殖和分化、血管发生、免疫、炎症反应的调节（表1）。 表一：与细胞因子风暴相关的因子主要类型及功能 类型功能 干扰素调节先天免疫，活化抗病毒性质，抗增殖作用。 白介素白细胞增殖和分化， 趋化因子控制趋向性，募集白细胞，很多是促炎因子 集落刺激因子刺激造血祖细胞增殖和分化 肿瘤坏死因子促炎，激活细胞毒素T细胞 干扰素（IFNs）是一种细胞因子家族，其在病毒和其他微生物病原体的先天免疫中起核
第七章细胞因子 学时：3 目的要求： 1.掌握：细胞因子的概念、细胞因子的共同特性，掌握几种主要的细胞因子（IL－2、IL－12、IFN、TNF、CSF、EPO）的分泌细胞和生物学活性。 2.熟悉：其它细胞因子的分泌细胞和生物学活性。 3.了解：细胞因子受体家族及信号转导机制，了解细胞因子在临床上的应用。 教学内容： 1.细胞因子的概念和共同特性。 2.细胞因子的种类和功能：IL－（IL－1、IL－2……IL－18）、IFN、TNF、CSF、趋化因子生长因子等。 3.细胞因子与疾病的发生，细胞因子与疾病的诊断及治疗。 [本章主要内容] 一、细胞因子概述 （一）细胞因子的概念 细胞因子（cytokine，CK）:是由细胞 （免疫细胞、非免疫细胞）合成、分泌的能调节多种细胞生理功能的低分子量蛋白质的统称。 （二）细胞因子的共同特性 1．绝大多数细胞因子均为分子量为6～60KD的多肽或糖蛋白。其结构有：单体，包括多数细胞因子；二聚体，包括IL-5、IL-10、IL-12、M-CSF、TGF-β及PDGF等；三聚体，如TNF。 2．具有高效能作用。10-12mol/L就有明显的生物学作用。细胞表面可表达高亲和性的受体，10～10，000个/细胞。 3．分泌为短时自限性。无前体状态的储存，细胞受刺激活化后合成、分泌，刺激停止后合成停止。 4．可通过自分泌、旁分泌及内分泌方式发挥作用。多数细胞因子以自分泌（autocrine）或旁分泌（paracrine）起作用；少数细胞因子（IL-1、IL-6、TNF-α等）还可通过内分泌（endocrine）方式起作用。 细胞因子产生的多源性及多向性：（1）一种细胞可分泌多种细胞因子；（2）几种不同类型的细胞可产生一种或多种相同的细胞因子。 6．发挥作用为非特异性、多效性及重叠性。多效性是指一种细胞因子作用于多种靶细胞，产生不同的生物学效应。重叠性是指不同细胞因子作用于同一靶细胞，产生相同或相似的生物学效应。 7．作用具有双重性。介导生理作用，参与正常免疫应答，清除异物；介导病理作用，参与炎症反应、自身免疫病及肿瘤的发生、发展等。 8．细胞因子的网络效应。即不同细胞因子间具有协同作用和拮抗作用。细胞因子的合成分泌相互调节，受体表达相互调控，共同组成了细胞因子网络。 9．细胞因子与激素、神经肽和神经递质共同组成细胞间信号分子系统。 二、细胞因子的种类与功能 根据功能可将细胞因子大致分为六大类：白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、趋化因子和生长因子。 白细胞介素（interleukins，ILs） ILs是能够介导白细胞之间和其他细胞之间相互作用的细胞因子。已报告有20余种。
细胞因子风暴研究进展 细胞因子风暴(英语:Cytokine storm)又称高细胞介质症(Hypercytokinemia),一种不 适当的免疫反应,因为细胞因子与免疫细胞间的正回馈循环而产生。这也被认为就是1918年流感大流行、2003年SARS事件、2009年H1N1流感大流行,以及H5N1高致病性禽流感中 病毒致死的原因不过美国疾病控制与预防中心认为这一症状与H1N1之间的没有充分的证据 可以展示其关联性。 症状为高烧、红肿、肿胀、极度疲倦与恶心。在某些情况下可能致命。治疗:当免疫系统对抗病原体时,细胞素会引导免疫细胞前往受感染处。同时,细胞素也会激活这些免疫细胞,被激活的免疫细胞则会产生更多的细胞素。通常来说,人体会检查并控制这个反馈循环。但 就是在有些情况下,情况会失控,导致一个地方聚集了太多被激活的免疫细胞。目前为止,还没有完全了解这一现象的具体成因,但就是有推测认为可能就是由于免疫系统对新的、高致 病的病原体产生的过激反应。 细胞因子风暴有可能会对身体组织与器官产生严重的损伤,比如当其发生于肺部,过多的免疫细胞与组织液可能会在肺部积聚,阻塞空气进出,并导致死亡。 细胞因子风暴与各种感染性与非感染性疾病有关,甚至就是治疗性干预尝试的不幸后 果。已有研究证明其在移植物抗宿主病、多发性硬化症、胰腺炎或多器官功能障碍综合征中 出现。随着研究的深入,对细胞因子风暴的细胞定位与分子机制有所了解,并有助于病毒性症 状尤其就是流行性感冒的治疗。 细胞因子就是由细胞分泌出来用于细胞间信号传导与通信的多种小蛋白质,具有自分泌、旁分泌与/或内分泌活性,并且通过结合受体引发多种免疫应答。细胞因子的主要功能有 控制细胞增殖与分化、血管发生、免疫、炎症反应的调节(表1)。 表一:与细胞因子风暴相关的因子主要类型及功能 类型功能 干扰素调节先天免疫,活化抗病毒性质,抗增殖作用。 白介素白细胞增殖与分化, 趋化因子控制趋向性,募集白细胞,很多就是促炎因子 集落刺激因子刺激造血祖细胞增殖与分化 肿瘤坏死因子促炎,激活细胞毒素T细胞 干扰素(IFNs)就是一种细胞因子家族,其在病毒与其她微生物病原体的先天免疫中起核
1.PAMP/DAMP 在介导细胞自噬、炎症和佐剂研发中的作用？ 1.病原微生物表面存在一些人体宿主所没有的，但可为许多相关微生物所共享，结构恒定且进化保守的分子结构，称为病原体相关分子模式（pathogen-associated molecular patterns, PAMP）,固有免疫识别的PAMP，往往是病原体赖以生存，因而变化较少的主要部分，如病毒的双链RNA和细菌的脂多糖，对此，病原体很难产生突变而逃脱固有免疫的作用。 PAMP主要包括两类： ①以糖类和脂类为主的细菌胞壁成分。如脂多糖、肽聚糖、脂磷壁酸、甘露糖、类脂、脂阿拉伯甘露聚糖、脂蛋白和鞭毛素等。其中最为常见且具有代表性的是：革兰阴性菌产生的脂多糖(1iposachride，LPS)；革兰阳性菌产生的肽聚糖(proteoglycan)；分枝杆菌产生的糖脂(glicolipid)和酵母菌产生的甘露糖。 ②病毒产物及细菌胞核成分，如非甲基化寡核苷酸CpGDNA、单链RNA、双链RNA。需要指出的是，上述PAMP可以表达在病原体表面或游离于免疫细胞之外，也可以出现在免疫细胞的胞质溶胶，以及溶胶中各种携带病原体的胞内区室(intracellularcompartment)，如内体和吞噬溶酶体。 从宿主细胞释放的内源性危险信号是杜撰的东西作为损伤相关分子模式（D-AMPS）Endogenous danger signals are things coined as damage associated molecular patterns (DAMPs) released from host cells 组织损伤释放的内源性配体，即DAMP 组织细胞起始破坏及炎症信号途径激活,可能与局部缺血组织或细胞间基质损伤所释放(内源性)损伤/危险相关分子模式信号(damage/danger associated molecular pattern,DAMP)有关。天然免疫细胞表面Toll样受体(T oll like receptor, TLR)是脊柱动物识别病原体感染最原始的一种方式,其通过识别、结合特异性分子模式而启动胞内信号转导途径,进而激活核转录因子NF-κB,诱导炎性细胞因子表达和多种生物学效应。TLR在天然免疫和适应性免疫应答间发挥重要的桥梁作用。现已发现,TLR识别的分子模式不仅包括病原微生物(及其产物)所共有的某些非特异性、高度保守的病原相关分子模式(Pathogen associated molecular pattern,PAMP),如脂多糖(LPS)、磷壁酸(LTA)、肽聚糖、细菌DNA、双链RNA等,还包括组织细胞损伤破坏时所释放的一系列内源性“危险信号”,如热休克蛋白(HSP)、氧自由基、核甘酸、神经介质、白介素等。 TLR1，TLR2，TLR4，TLR5，TLR6与位于细胞表面。TLR2形成与TLR1或TLR6形
细胞因子风暴研究进展标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]
细胞因子风暴研究进展 细胞因子风暴（英语：Cytokine storm）又称高细胞介质症（Hypercytokinemia），一种不适当的免疫反应，因为细胞因子与免疫细胞间的正回馈循环而产生。这也被认为是1918年流感大流行、2003年SARS事件、2009年H1N1流感大流行，以及H5N1高致病性禽流感中病毒致死的原因不过美国疾病控制与预防中心认为这一症状与H1N1之间的没有充分的证据可以展示其关联性。 症状为高烧、红肿、肿胀、极度疲倦与恶心。在某些情况下可能致命。治疗：当免疫系统对抗病原体时，细胞素会引导免疫细胞前往受感染处。同时，细胞素也会激活这些免疫细胞，被激活的免疫细胞则会产生更多的细胞素。通常来说，人体会检查并控制这个反馈循环。但是在有些情况下，情况会失控，导致一个地方聚集了太多被激活的免疫细胞。目前为止，还没有完全了解这一现象的具体成因，但是有推测认为可能是由于免疫系统对新的、高致病的病原体产生的过激反应。 细胞因子风暴有可能会对身体组织和器官产生严重的损伤，比如当其发生于肺部，过多的免疫细胞和组织液可能会在肺部积聚，阻塞空气进出，并导致死亡。 细胞因子风暴与各种感染性和非感染性疾病有关，甚至是治疗性干预尝试的不幸后果。已有研究证明其在移植物抗宿主病、多发性硬化症、胰腺炎或多器官功能障碍综合征中出现。随着研究的深入，对细胞因子风暴的细胞定位和分子机制有所了解，并有助于病毒性症状尤其是流行性感冒的治疗。 细胞因子是由细胞分泌出来用于细胞间信号传导和通信的多种小蛋白质，具有自分泌、旁分泌和/或内分泌活性，并且通过结合受体引发多种免疫应答。细胞因子的主要功能有控制细胞增殖和分化、血管发生、免疫、炎症反应的调节（表1）。 表一：与细胞因子风暴相关的因子主要类型及功能
不同麻醉方式对细胞因子IL 【关键词】麻醉；IL ［摘要］目的：评价不同麻醉方法对IL1β和IL6的影响。方法：比较硬膜外麻醉下与全麻下患者IL1β和IL6的变化。结果：硬膜外组与全麻组术中IL6均明显升高，持续至术后第1日晨。硬膜外组患者IL6水平在术中及术后各时点均较全麻组高，但组间比较差异无显著性。两组患者IL1β围术期各时间点均未检测到。结论：手术创伤可引起外周血炎性细胞因子IL6的表达增强，不同麻醉方法对其影响较小。 ［关键词］麻醉；IL1β；IL6 1 材料与方法 1．1 受试对象及分组20例ASAIII级择期行人工股骨头置换术患者，男性12例，女性8例，年龄49岁～66岁，体重53 kg～86 kg。术前均无内分泌及恶性疾病，也未接受过免疫抑制治疗。随机分为硬膜外阻滞组和全麻组，每组10例。患者入室后均开放静脉，术中监测心率、血压、心电图和血氧饱和度，两组患者术中均未输血。 1．2 标本采集并检测方法分别于麻醉诱导前10 min(T1)，切皮后30 min(T2)，切皮后1 h(T3)，术毕(T4)，术后第1日晨(T5)及术后第3日晨(T6)于非输液侧肘静脉穿刺抽取外周血2 ml(EDTA抗凝)。经2 000 rpm离心10 min后取上清液，置-20 ℃冰箱冷冻备检，采用ELISA法检测患者血浆IL1β及IL6水平。使用上海森雄科技公司提供的进口分装试剂盒，严格按说明书进行操作。
1.3 检测步骤建立标准曲线：设标准孔8孔，每孔加入样品稀释液100 μl，第一孔加标准品100 μl，移至第二孔，如此反复对倍稀释至第七孔，最后第七孔吸出100 μl弃去，使体积均为100 μl，第八孔为空白对照。将所采集血浆各100 μl加入待测品孔，待反应板充分混匀后置37 ℃ 120 min，用洗涤液将反应板充分洗涤4次～6次，印干后每孔加第一抗体工作液50 μl，充分混匀后置37 ℃60min。再次洗板4次～6次，印干后每孔加酶标抗体工作液100 μl，充分混匀后置37 ℃ 60 min。洗板同前，每孔加入底物工作液100 μl，置37 ℃暗处反应8 min后每孔加入1滴终止液混匀。在492 nm 处测吸光(OD)值，以所测得OD值在标准曲线上求IL1β、IL6的浓度。 1.4 统计学处理各组数据以均数±标准差( ±s)表示，组间比较采用t检验，组内比较采用单因素方差分析和q检验，P＜0.05为差异有统计学意义。 2 结果 两组患者性别、年龄、体重、术中入量、失血量、手术时间等无明显差异,麻醉手术期间两组患者各时间点血压、心率等血液动力学指标差异无显著性。围术期细胞因子IL1β和IL6的变化：两组患者IL6在手术开始后均有升高，硬膜外组患者IL6在手术切皮后1 h 即明显升高(P＜0.05)，至术毕达到高峰(P＜0.01)，一直持续至术后的第1日晨(P＜0.05)，第3日晨恢复至术前水平。全麻组则在术毕时达到与术前比差异有显著意义(P＜0.01), 持续至术后第1日晨(P＜0.05)，第3日晨恢复至术前水平。硬膜外组患者IL6水平在术中及术
第五章细胞因子 主要内容 （一）细胞因子的概念与种类 1．细胞因子（CK）机体多种细胞分泌的小分子蛋白质或多肽，通过与细胞表面相应受体结合发挥抗感染、抗肿瘤、免疫调节、参与炎症反应、促进细胞生长和组织修复等多种生物学作用。 2．细胞因子的分类按来源分为两类：淋巴因子（LK）和单核因子（MK）；按结构和功能可分为以下六类： （1）白细胞介素（IL）：是一组能介导白细胞和其他细胞间相互作用的细胞因子。主要作用是调节细胞生长，参与免疫应答和介导炎症反应。 （2）干扰素（IFN）：因其能干扰病毒感染和复制而命名。IFN有α、β和γ三种类型。IFN-α和IFN-β合称为Ⅰ型干扰素，主要由被病毒感染的细胞、单核-巨噬细胞、成纤维细胞产生，其作用以抗病毒、抗肿瘤为主，也有一定的免疫调节作用。IFN-γ又称Ⅱ型干扰素，由活化的T细胞和NK细胞产生，其作用以免疫调节为主，抗病毒、抗肿瘤作用不及Ⅰ型干扰素。 （3）肿瘤坏死因子（TNF）：因最初发现其能引起肿瘤组织出血坏死而得名。主要的有TNF-α、TNF-β。TNF-α由单核-吞噬细胞产生，大剂量可引起恶液质。TNF-β由活化的T细胞产生又称淋巴毒素。TNF能发挥抗肿瘤、抗病毒、免疫调节作用，也能引起发热反应、炎症反应和恶液质。 （4）集落刺激因子（CSF）：能够刺激造血干细胞和不同发育分化阶段的造血祖细胞增殖分化的一组细胞因子。 （5）趋化性细胞因子：是一类促进炎症的细胞因子，其主要作用是招募血液中的单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等进入感染发生的部位。 （6）生长因子（TGF）：具有刺激细胞生长作用的细胞因子。有些生长因子也可抑制免疫应答，如转化生成因子-β（TGF-β）可抑制多种免疫细胞的增殖、分化及免疫效应。 （二）细胞因子的共同特性 1．理化特点和分泌特点 （1）理化特点：多数是小分子糖蛋白。多以单体形式存在（如IL-1、IL-2），少数以二聚体（如IL-10、IL-12）、多聚体形式存在（TNF为三聚体）。
细胞因子的免疫应用及研究进展 摘要：细胞因子( cytokine) 是一类由各种免疫细胞和非免疫细胞产生的具有生物活性的多肽或糖蛋白。通常所说的细胞因子包括淋巴细胞因子、单核细胞因子及其他细胞产生的细胞因子。细胞因子具有强大的免疫调节和免疫激活作用,有关细胞因子方面的研究已成为当今基础免疫学和临床免疫学研究中十分活跃的领域,并取得了令人瞩目的成绩,特别是近年来由于分子生物学技术的发展,使得细胞因子的研究和应用进入了一个全新的阶段。本文主要对其应用做一个综述。 关键词：细胞因子、免疫、应用 1.细胞因子的特性 尽管细胞因子种类繁多,功能复杂广泛,但其也有一些共同的特点,主要表现为: ①多为糖蛋白,分子质量一般为10～25ku,有的为8～10ku。②通过与受体的特异性结合而发挥其相应的生物学效应。这类结合的细胞因子亲和力较高,在极低浓度下亦显示出生物学活性。③一般在局部发挥效应,这种效应既可针对产生该细胞因子并且具有受体的细胞———即自分泌(autocrine)作用,也可针对邻近的细胞———即旁分泌(paracrine)作用。④分泌期短,一般仅为数天,且其半衰期也很短。⑤一种细胞因子可作用于多种靶细胞,并显示出多种生物学功能,即具有多效性;同时多种细胞因子也可作用于同一种细胞发挥相似的生物学作用。⑥细胞因子之间通过合成分泌的相互调节、受体表达的相互调控、生物学效应的相互影响而组成一个相互协同又相互制约的复杂的免疫反应协调网络,共同维持机体免疫系统的平衡。⑦细胞因子具有强大的免疫调节作用,是机体发挥免疫功能不可缺少的成分。 2.细胞因子的应用 大多数细胞因子是机体免疫应答的产物,对机体免疫系统具有强大的调节作用,是机体发挥免疫功能,清除病原体不可缺少的成分,与疾病的发生、发展有着密切的关系;另一方面,体内分泌的细胞因子过多,亦可引起病理性反应。因此,细胞因子在疾病的诊断、治疗和预防等方面有着极为广阔的应用前景。进入20世纪80年代以来,细胞因子的临床应用已成为医学研究和产品开发的重要领域,进入临床应用的细胞因子逐年增多,它们在人类和动物疾病的诊断、治疗和预防等方面发挥着越来越重要的作用。 2.1在诊断和治疗方面的应用 细胞因子一方面可以治疗某些疾病,如免疫缺陷性疾病、病毒性疾病、细菌性疾病及肿瘤等,另一方面可以导致和/ 或促进某些疾病的发生和发展,如自身免疫性疾病、移植排斥反应等。因此,细胞因子在疾病的诊断和治疗方面发挥着独特作用并取得了较为明显的效果。支气管哮喘患者体内的IL24、IL25、IL210及IL213等Th2型细胞因子浓度显著升高,在其作用下IgE合成增多,IgE与嗜碱性粒细胞和肥大细胞上的高亲和力受体结合,从而引起本病的发生。应用IFN2γ和抗IL24抗体或IL24R可减少Th2型细胞因子产生,从而抑制过敏反应,达到治疗的目的。在多发性硬化症患者的病灶中IL22和IFN2γ产生明显增加,而在恢复
第六章细胞因子 一．选择题 【A 型题】 1．关于细胞因子的共性，下列哪项是错误的？ A. 无MHC 限制性 B. 特异性 C. 高效性 D. 网络性 E. 作用多向性 2．细胞因子不包括： A. 淋巴毒素 B. 过敏毒素 C. IL-2 D. 集落刺激因子 E. 干扰素 3．关于IL-2 的生物学作用，下列哪项是错误的？ A. 以自分泌和旁分泌发挥作用 B. 能促进T、B 淋巴细胞增殖与分化 C. 能增强NK 细胞活性 D. 抑制Th1 细胞的分化 E. 能增强巨噬细胞的吞噬杀伤功能 4．主要由单核/ 巨噬细胞产生的细胞因子是： A. TNF-α B. IFN-γ C. IL-2 D. IL-3 E. IL-4 5．直接能杀伤靶细胞的细胞因子有： A. IL-1 B. IL-2 C. IL-4 D. IFN-γ E. TNF-α 6．IFN-γ主要由下列那种细胞产生？ A. 活化的T 细胞 B. 巨噬细胞 C. 树突状细胞 D. 成纤维细胞 E. B 淋巴细胞 7．能增强MHC-I/II 类分子表达、促进APC 提呈抗原作用的细胞因子是： A. IFN-γ B. TGF C. CSF D. IL-1 E. IL-2 8．促进Th0 细胞分化成Th1 细胞的主要细胞因子是： A. IL-1，IL-8 B. IL-3，GM-SCF C. IL-4，IL-5 D. IL-5，IL-6 E. IL-12，IFN-γ9．促进Th0 细胞分化成Th2 细胞的主要细胞因子是： A. IL-3 B. IL-5 C. IL-2 D. IL-4 E. IL-12 10．对淋巴细胞和巨噬细胞具有抑制作用的细胞因子是： A. IL-1 B. IL-2 C. IL-12 D. TGF-β E. GM-CSF 11．刺激B 细胞产生IgG2a 的细胞因子是： A. TNF B. IL-4 C. IL-2 D. TGF-β E. IFN-γ 12．下列哪组细胞因子具有趋化作用？ A. IL-1，IL-8 B. IFN，MCP-1 C. IL-8，MCP-1 D. TNF，IL-4 E. IL-1，IL-6 13．Th1 细胞与Th2 细胞之间主要分别通过分泌什么细胞因子而相互抑制？ A. IFN-γ，IL-4 B. IL-4，IFN-γ C. TNF，IL-1 D. IL-4，IL-5 E. GM-SCF，TNF 14．刺激多种造血细胞分化成熟的细胞因子是： A. TNF B. SCF C. IL D. TGF E. IFN 15．可用于治疗白细胞减少症的细胞因子是： A. IL-2 B. IL-11 C. IFN-γ D. EPO E. M-CSF 16．可刺激NK 细胞、增强其杀伤活性的IL 是： A. IL-3，IL-5 B. IL-2，IFN-γ C. EPO，M-CSF D. IL-1，IL-4 E. IL-4，IL-7 17．在Ig 类别转换中，能促进IgM 转换为IgE 和IgG1 的细胞因子是： A. IL-1 B. IL-2 C. IL-4 D. IL-6 E. TNF 18．促进肝细胞产生急性期蛋白的细胞因子是： A. IL-2，IL-3 B. IL-1，IL-6 C. IL-4，IL-5 D. IL-7，IL-10 E. IL-8，IL-13 【X 型题】 1. 巨噬细胞的活化因子包括： A. IL-2 B. IFN-γ C. GM-SCF D. MCP E. IL-10 2. Th2 细胞主要通过分泌哪些细胞因子辅助B 细胞的体液免疫应答？ A. IL-4 B. IL-5 C. IL-6 D. IL-10 E. IL-13 3. Th1 细胞主要通过分泌哪些细胞因子介导细胞免疫应答？ A. IL-2 B. TNF C. IFN-γ D. IL-10 E. IL-13 4. 对NK 细胞的活化、分化具有正调节作用的CK 是：
II型细胞因子及其受体研究进展 目前已经发现的细胞因子有200多种，随着基因测序技术的快速发展，相信会有更多的因子被发现，并且随着细胞工程技术和蛋白重组技术的发展，一定会有更多的细胞因子重组蛋白被纯化制备。细胞因子功能多样，不同因子间可以相互作用，同一因子可以有不同的功能，因此，细胞因子构成了一个复杂的网络功能图。而细胞因子想要发挥作用，必须与相应的受体结合行。细胞因子与其受体结合后，会对细胞产生作用，可以刺激细胞生长增殖分化，调控机体免疫应答，为在细胞及分子水平研究某些自身免疫性疾病、肿瘤、免疫缺陷疾病的发病机理提供数据，为临床治疗和诊断提供指导依据。 细胞因子受体一般分成四个类型：Ⅰ型细胞因子受体（Type ⅠCytokine Receptor）、Ⅱ型细胞因子受体家族（Type ⅡCytokine Receptor）、TNF超家族受体以及趋化因子受体。在本文，将主要介绍Ⅱ型细胞因子及其受体的研究进展及其应用。 Ⅱ型细胞因子受体家族（Type ⅡCytokine Receptor ），也称干扰素受体家族（Interferon receptors family）。主要包含Ⅱ型白介素（IL-10，IL-19，IL-20，IL-22等）受体，Ⅰ型干扰素（IFNA，IFNB）受体和Ⅱ型干扰素（IFNG）受体。此类受体的结构特点治是在膜外区近氨基端含有四个保守半胱氨酸残基细无Trp-Ser-X-Trp-Ser序列，一般为具有高亲和力的异二聚体或多聚体。II型细胞因子受体的细胞外结构域由串联Ig样结构域组成，细胞内结构域通常与属于Janus激酶（JAK）家族的酪氨酸激酶相关。
Cytokines（细胞因子） Cytokines are proteins secreted by the cells of innate and adaptive immunity that mediat many of the functions of these cells. Cytokines are produced in response to microbes and other antigens. and different cytokines stimulate diverse responses of cells involved in imminity and inflammation. In the activation phase of adaptive immune responses, cytokines stimulate the growth and differentiation of lymphocytes, and in the effector phases of innate and adaptive immunity, they activate different effector cells to eliminate microbes and other antigens.Cytokincs also activate stimulate the development of hematopoictic cells. In clinical medicine cytokines are important as therapeutic agents and as targets for specific antagonists innumerous immune and inflammatory diseases, 细胞因子是由多种细胞产生的，具有调节先天免疫与适应性免疫细胞功能作用的多肽分子。细胞因子在有微生物和其他抗原作用细胞时产生，不同的细胞因子刺激反应细胞产生不同的反应，其中涉及免疫反应和炎症反应。免疫反应的反应阶段，细胞因子刺激淋巴细胞的增长与分化；效应阶段,它们激活不同的效应细胞消除细菌和其它抗原。细胞因子也刺激祖细胞的生长。在临床医学方面，细胞因子很重要,因为可以作为治疗因子和作为特定免疫和炎性疾病的靶制剂。 The nomenclature of cytokines is often based on their cellular sources. Cytokines that are produced by mononuclear phageocytes were called monokines,and those produced by lymphocytes were called lymphokines.。With the development of anticytokine antibodies and molecular probes, it became clear that the same protein may be synthesized by lymphocytes,，monocytes,and a variety of tissue cells,,including endothelial cells and some epithelial cells. Therefore, the generic term cytokines is the preferred name for this class of mediators 细胞因子是根据其来源细胞而命名的。由单核细胞产生的细胞因子称为单核因子；由淋巴细胞产生的因子称为淋巴因子。随着抗细胞因子抗体和分子探针的发展,显然,同种蛋白质可能是由淋巴细胞、单核细胞以及各种组织细胞,包括内皮细胞和某些上皮细胞合成。因此,通用术语细胞因子是这类介质的首选名字。General properties of cytokines（细胞因子的一般特性） Cytokincs are polypcpeptides produced in response to microbes and other antigens that mediate and regulate immune and inflammatory reactions. Although cytokinesarc structurally diverse. they share several properties. 细胞因子是微生物和其他抗原的刺激诱导细胞产生和调节免疫和炎症反应的可溶性蛋白。虽然细胞因子的结构不同。但是他们具有某些共性。 Cytokine secretion is a brief, self-limited event. Cytokines arc not usually stored as preformed molecules. and their synthesis is initiated by new gene transcription as a result of cellular activation. Such transcriptional activation is transient, and the messenger RNA encoding most cytokincs are unstable, so cytokine synthesis is also transient. The production of some cytokincs may additionally be controlled by RNA processing and by post transcriptional mechanisms, such as protcolytic release of an active product from an inactive precursor. Once synthesized, cytokines arc rapidly secreted, resulting in a burst of release as needed
细胞因子常识 重组细胞因子概述 一、细胞因子的概念 细胞因子(cytokine)是由机体多种细胞分泌的小分子蛋白质，通过结合细胞表面的相应受体发挥以调节免疫应答为主的生物学作用。细胞因子具有非常广泛的生物学活性，包括促进靶细胞的增殖和分化，增强抗感染和细胞杀伤效应，促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达，促进炎症过程，影响细胞代谢等。 二、细胞因子的特征 1、低分子量；一般为＜60kD的多肽或糖蛋白。多以单体形式存在，少数为二聚体，三聚体。 2、天然细胞因子由抗原、丝裂原或其他刺激物活化的细胞所分泌，通过旁分泌(paracrine)、自分泌(autocrine)或内分泌(endocrine)方式在局部发挥短暂作用。 3、一种细胞因子可由多种细胞产生，同一种细胞可产生多种细胞因子。 4、需通过与靶细胞表面相应受体结合后发挥其生物学效应。 5、具有高效性、多效性、叠性、拮抗性、协同性和网络性。 三、细胞因子的分类 1、白细胞介素(interleukin，IL-s) 最初是指由白细胞产生又在白细胞间发挥作用的细胞因子。 2、干扰素（interferon,IFN) 最早发现的细胞因子，有干扰病毒感染和复制的能力。分α、β和g三种类型。 3、肿瘤坏死因子超家族(tumor necrosis factor，TNF) 1975年发现的一种能使肿瘤发生出血坏死的物质。 4、集落刺激因子(colony-stimulating factor，CSF) 指能够刺激多能造血干细胞和不同造血祖细胞增殖分化，在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。包括G-CSF（粒细胞）、M-CSF（巨噬细胞）、GM-CSF（粒细胞、巨噬细胞）、Multi-CSF（多重）（IL-3）、红细胞生成素(EPO)、干细胞生长因子(SCF)、血小板生成素(TPO)等。 5、趋化因子(chemokine)
五年制本科班《医学免疫学》期末复习思考题 第一章免疫学概论 第二章免疫器官和组织 1. 名词解释： 免疫（immunity）；固有免疫（innate immunity）或先天性免疫或非特异性免疫（non-specific immunity）；适应性免疫（adaptive immunity）或获得性免疫（acquired immunity）或特异性免疫（specific immunity）；初始淋巴细胞（naive lymphocyte）；免疫细胞（immune cells or immunocytes）；淋巴细胞再循环（lymphocyte recirculation）；淋巴细胞归巢（lymphocyte homing）。 2. 简述免疫系统的组成、基本功能以及免疫功能失调时的异常表现。 3. 简述免疫应答的类型（固有性免疫应答与适应性免疫应答）与主要特点。 4. 简述淋巴细胞再循环有何生物学意义？ 5. 简述中枢免疫器官和外周免疫器官的组成和功能。 第三章抗原 1. 名词解释： 抗原（antigen，Ag）；免疫原性（immunogenicity）与抗原性(antigenicity)；完全抗原(complete antigen)与半抗原(hapten) 或不完全抗原(incomplete antigen) ；抗原决定族（antigenic determinant）或表位（epitope）；胸腺依赖性抗原（thymus dependent antigen，TD-Ag）； 胸腺非依赖性抗原（thymus independent antigen，TI-Ag）；异嗜性抗原（heterophilic antigen）；同种异型抗原（allogenic antigen）；自身抗原（autoantigen）；外源性抗原（exogenous antigen）；内源性抗原（endogenous antigen ）；超抗原（superantigen，SAg）； 佐剂（adjuvant）。 2. 简述抗原的基本特性。 3. 简述影响抗原免疫应答的主要因素（或：决定抗原免疫原性因素有哪些？）。怎样才能获 得高效价抗体？ 4. 简述医学上重要的抗原物质的种类有哪些？ 5. 简述TD-Ag和TI-Ag的主要区别。 6. SAg与常规Ag有何区别。简述超抗原的作用特点。 7. 能够活化T、B淋巴细胞的丝裂原分别有哪些？ 8. 请列表比较T细胞表位与B细胞表位的特性。请问T细胞表位与B细胞表位的主要区别 是什么？ 第四章抗体 1. 名词解释： 抗体（antibody，Ab）；免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）；互补决定区（complementarity determining region，CDR）；调理作用（opsonization）；调理素（opsonin）；抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity ，ADCC）；多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）；单克隆抗体（monoclonal antibody，mAb）。 2. 简述免疫球蛋白的基本结构和主要生物学功能。 3. 简述免疫球蛋白的各功能区的主要功能。
细胞因子风暴研究进展 Document serial number【KKGB-LBS98YT-BS8CB-BSUT-BST108】
细胞因子风暴研究进展 细胞因子风暴（英语：Cytokinestorm）又称高细胞介质症（Hypercytokinemia），一种不适当的免疫反应，因为细胞因子与免疫细胞间的正回馈循环而产生。这也被认为是1918年流感大流行、2003年SARS事件、2009年H1N1流感大流行，以及H5N1高致病性禽流感中病毒致死的原因不过美国疾病控制与预防中心认为这一症状与H1N1之间的没有充分的证据可以展示其关联性。 症状为高烧、红肿、肿胀、极度疲倦与恶心。在某些情况下可能致命。治疗：当免疫系统对抗病原体时，细胞素会引导免疫细胞前往受感染处。同时，细胞素也会激活这些免疫细胞，被激活的免疫细胞则会产生更多的细胞素。通常来说，人体会检查并控制这个反馈循环。但是在有些情况下，情况会失控，导致一个地方聚集了太多被激活的免疫细胞。目前为止，还没有完全了解这一现象的具体成因，但是有推测认为可能是由于免疫系统对新的、高致病的病原体产生的过激反应。 细胞因子风暴有可能会对身体组织和器官产生严重的损伤，比如当其发生于肺部，过多的免疫细胞和组织液可能会在肺部积聚，阻塞空气进出，并导致死亡。 细胞因子风暴与各种感染性和非感染性疾病有关，甚至是治疗性干预尝试的不幸后果。已有研究证明其在移植物抗宿主病、多发性硬化症、胰腺炎或多器官功能障碍综合征中出现。随着研究的深入，对细胞因子风暴的细胞定位和分子机制有所了解，并有助于病毒性症状尤其是流行性感冒的治疗。 细胞因子是由细胞分泌出来用于细胞间信号传导和通信的多种小蛋白质，具有自分泌、旁分泌和/或内分泌活性，并且通过结合受体引发多种免疫应答。细胞因子的主要功能有控制细胞增殖和分化、血管发生、免疫、炎症反应的调节（表1）。 表一：与细胞因子风暴相关的因子主要类型及功能 类型功能 干扰素调节先天免疫，活化抗病毒性质，抗增殖作用。
关于细胞因子，您应知道的那些事儿随着基因工程、蛋白质工程、细胞工程等生物高新技术的交叉应用，细胞因子的研究取得了突飞猛进的发展。到目前为止，细胞因子已发展成为一个涉及到多种学科、既具有深奥的理论探索意义（如细胞因子信号传导的分子机制），又具有极大的实际应用价值（如细胞因子免疫治疗和基因治疗）的热门研究领域。最近通过对我们公司17,000+细胞因子产品（涉及400+个分子的1000+重组蛋白）整理，更是认识到细胞因子在当前科学研究、疾病治疗和新药研发方面的重要性，因此对细胞因子基础知识的了解更是必不可少的。 1. 什么是细胞因子？ 细胞因子(Cytokine, CK)是细胞间相互作用的一种化学物质，由免疫细胞和非免疫细胞合成分泌的一类有多种生物活性的小分子多肽或糖蛋白。细胞因子最早是从淋巴细胞和单核细胞中发现的，因此曾被称为淋巴因子或单核因子，随后研究发现机体中的多种细胞都具有分泌这些蛋白的功能。细菌、病毒等微生物与物理或化学因素对机体的损伤都可以激发细胞因子的产生，而细胞因子又能杀灭细菌和抑制病毒，达到保护机体的目的。 2. 细胞因子有哪些特征呢？ （1）低分子量：绝大多数为6～60KD的多肽或糖蛋白。其结构有：单体，包括多数细胞因子；二聚体，包括IL-5、IL-10、IL-12、M-CSF、TGF-β及PDGF等；三聚体，如TNF。 （2）具有高效能作用。10-12mol/L就有明显的生物学作用。细胞表面可表达高亲和性的受体（10～10,000个/细胞）。 （3）天然细胞因子由抗原、丝裂原或其他刺激物活化的细胞所分泌，通过旁分泌(paracrine)、自分泌(autocrine)或内分泌(endocrine)方式在局部发挥短暂作用。 （3）分泌为短时自限性。无前体状态的储存，细胞受刺激活化后合成、分泌，刺激停止后合成停止。 （4）多源性或多向性，即一种细胞因子可由多种细胞产生，同一种细胞可产生多种细胞因子。 （5）需通过与靶细胞表面相应受体结合后发挥其生物学效应。 （6）具有非特异性、重叠性、拮抗性、协同性和网络性。 3. 细胞因子都有哪些基本的生物学活性呢？ 细胞因子通过结合细胞表面的相应受体发挥生物学作用。细胞因子具有非常广泛的生物学活性：