岛津LC-20AT常见故障及维护
2013年07月10日发布
一、泵不送液：
1、泵头中有气泡。解决方法：将流动相用超声波清洗器进行脱气；
打开排液阀，按PURGE功能键排除气泡；打开排液阀，用注射器
从泵的排液管中抽液排除气泡。
2、单向阀堵塞，污染，磨损造成单向阀工作不正常。解决方法：
LC-20AT是双泵头串联泵，在主泵头和辅泵头的下端分别装有入
口单向阀，当送液泵出现压力波动超过0.3MP或者送液压力达不
到正常压力值时，排除气泡干扰的因素后，初步判断单向阀被污
染导致上述现象发生，可用下面两种方法清洗。第一种方法是在
线清洗：打开仪器电源，确认键盘在开启状态，拆下泵的出口管，
连接阻尼管，阻尼管的出口直接接入废液瓶，将流动相换成异丙
醇，打开排液阀，按PURGE键更换流动相，等待其运行结束后关
闭排液阀，按FUNC键将流速设为1mL/min，按PUMP键送液清洗，
需要清洗一个小时以上。第二种方法是超声波清洗，操作如下：
拧松并取下单向阀的管路用扳手分别松开两个泵头的入口单向
阀，用手取下单向阀,用镊子将单向阀放入装有异丙醇的烧杯中，
用超声波清洗15分钟，清洗完毕后将单向阀用镊子取出，装到泵
头上，用扳手拧紧，将单向阀连接管路装好并拧紧，重新送液测
试，如果压力正常则清洗完毕，如果故障依然存在，可能需要更
换单向阀。
3、吸滤头堵塞。解决方法：吸滤头清洗或者更换。吸滤头是用于清
除流动相中机械杂质的过滤器，在长期使用后，由于流动相中机
械杂质的累积会导致吸滤头堵塞，堵塞后在送液时吸滤头不断有
气泡出现进入送液管，清洗时将吸滤头从送液管中拔出，用镊子
放入装有异丙醇的烧杯中，超声波清洗15分钟，清洗完毕后将吸
滤头用镊子取出，用滤纸擦干后插入送液管，放入装有流动相的
瓶中，送液测试，确认吸滤头没有气泡产生，否则应更换新的吸
滤头。
二、泵压力偏高：按照以下顺序依次判断、处理。
1、泵的管路过滤器堵塞。断开泵的出口管路，以1mL/min送液压力
高于0.3MP，说明管路过滤器堵塞。管路过滤器位于泵的出口处，
用于清除由泵输送的流动相试剂中的机械杂质或柱塞密封垫磨损
的碎屑。长期使用或使用含机械杂质较多的流动相时容易引起堵
塞，此时需要清洗或更换过滤器上的过滤片，操作如下：拧松并
取下过滤器连接管路，拧松并取下管路过滤器，用镊子将管路过
滤器放入装有异丙醇的烧杯中，用超声波清洗15分钟，清洗完毕
后用镊子取出过滤器，用手将过滤器拧入连接口，用手拧紧，用
扳手拧紧60°～90°即可，打开泵电源开关，用纯水做流动相，
以1mL/min送液，如压力值超过0.3MP，应更换新的管路过滤片。
用镊子将过滤器前端的过滤片取下，把新的过滤片用纯水或异丙
醇浸湿，放在过滤器座上，用手将过滤器拧入连接口，用手拧紧
并用扳手拧紧60°～90°即可，连接上泵出口管路，更换完毕。
2、预混合室过滤片堵塞。断开混合室出口管路，以1mL/min送液压
力高于1MP，说明预混合室过滤片堵塞。当混合室压力过高时，
可能是由于混合室的过滤片污染所造成，解决方法操作如下：用
扳手拧开预混合室的管路，用扳手取下预混合室，取出过滤片，
取下的过滤片放在装有5﹪稀硝酸溶液的烧杯中，用超声波清洗
15分钟，再用纯水清洗5分钟，将清洗后的滤片安装到预混合室
中，拧紧预混合室，装好连接管路，清洗完毕。如果管路压力依
然偏高需要更换过滤片。
3、进样器堵塞。断开进样器出口，以1mL/min送液压力高于1MP，
说明进样器流路堵塞，建议使用清洗液洗进样器流路。
4、色谱柱堵塞或污染。断开色谱柱出口，送液压力仍高，说明色谱
柱堵塞或污染，建议按色谱柱使用说明书清洗或者更换色谱柱。
5、检测池堵塞。断开检测池出口，送液压力仍高，说明检测池堵塞。
SPD-20A紫外检测器和SPD-M20A二极管阵列检测器的清洗：打开
并取下检测器前面板，拧下检测器出口和入口管路接头，断开连
接，再拧松两个连接头的固定螺丝，拔掉检测池加热线，拧松检
测池固定螺丝，取下检测池，将适配器连接到检测池的入口并拧
紧螺丝，用注射器吸取50mL异丙醇缓缓地把溶剂推入检测池中，
清洗完毕后拆下适配器，观察检测池中是否留有异物，如果清洗
不彻底，应分解清洗检测池，用螺丝刀拧下检测池一侧的透镜固
定螺丝，用镊子取下透镜和垫片，注意镊子不要划伤透镜表面，
用螺丝刀拧下检测池另一侧的透镜固定螺丝，用镊子取下透镜和
垫片，将透镜放入装有异丙醇的烧杯中，用超声波清洗10分钟，
同时观察检测池内是否还有异物，如有异物，先将保温罩拆下，
将检测池朝下放入装有异丙醇的100毫升烧杯中，注意液面刚好
没过检测池孔即可，不益使用过大烧杯，以致溶剂接触到加热线，
用超声波清洗10分钟，清洗完毕后，取出检测池和透镜放在滤纸
上，将池体表面的液体擦干，装回保温罩，将新的垫片装入检测
池左侧池孔中，再将凸透镜放在垫片上面，注意垫片和透镜应放
在检测池的凹槽中，透镜的凸面应朝上，拧上透镜固定螺丝，将
新的垫片放入检测池右侧池孔中，将平面透镜放在垫片上面，拧
上透镜固定螺丝，螺丝的紧固程度应该以检测池不漏液为准，过
紧可能会损坏透镜，将检测池装到检测器上，检测池上的箭头方
向应朝上，拧紧固定螺丝，将连接头固定在检测器上，插入检测
池加热线，分别连接好检测池的入口和出口连接管路，装上前面
板，检测池清洗完毕。
三、泵压不稳：
1、泵头中有气泡。解决方法：将流动相用超声波清洗器进行脱气；
打开排液阀，按PURGE功能键排除气泡；打开排液阀，用注射器
从泵的排液管中抽液排除气泡。
2、单向阀堵塞，污染，磨损造成单向阀工作不正常。清洗单向阀或
者更换。参见在线清洗或超声波清洗单向阀操作步骤。
3、吸滤头堵塞。超声波清洗吸滤头或更换。参见超声波清洗吸滤头
操作步骤。
4、柱塞密封垫漏液。检查泵头是否漏液，如果漏液需更换柱塞密封
垫。操作如下：柱塞密封垫磨损时密封性减弱，就会发生漏液，
密封垫漏液会产生以下现象：泵头后面的清洗管路有流动相流出，
如果连接泵头自动清洗装置时，装清洗液的瓶内清洗液会增加，
此时需要更换新的柱塞密封垫。下面以更换左泵头密封垫为例，
打开仪器电源，确认键盘在开启状态，重复按FUNC键到屏幕显示
CONTROL，按ENTER键进入P-SET，输入数字“1”，按ENTER键
确认，泵运行指示灯亮，等待指示灯熄灭，此时柱塞回到初始位
置，用扳手拧松并取下左泵头上的连接管路，用手拧下泵头下的
进液管接头，然后用内六角扳手交替拧松并取下两个泵头固定螺
栓，将泵头平行取出，平放在桌面上，将密封垫装卸工具有突起
的一端插入柱塞密封垫中，拉出密封垫，注意密封垫的下面还有
一个小垫片，取出柱塞密封垫时应避免小垫片掉出，此时检查泵
头内部，如有异物可用超声波将其清洗干净。新的密封垫先用异
丙醇或乙醇浸泡5分钟，再将新密封垫套入装卸工具平直的一端，
插入泵头并顶紧，将密封垫装卸工具从密封垫中拉出，再将泵头
边上的凹槽与泵头座上的销钉对齐，将泵头安装到泵头固定座上，
使销钉滑入槽中，将两个内六角螺栓放入泵头的螺栓孔中，先用
手拧紧，再用内六角扳手将螺栓交替均匀的拧紧，将泵头上下的
管路装好并拧紧，然后将左泵头的送液量清零。操作如下：按“CE”
键直到屏幕回到初始画面，重复按“VP”键直到屏幕显示
MAINTENANCE，重复按FUNC键直到屏幕显示“L SEAL DELIVERED”
输入数字“0”，按ENTER键确认，将左泵头的送液量记录归零。
注意右泵头密封垫送液量清零选择“R SEAL DELIVERED”按同
样方法可更换右泵头密封垫。
四、基线漂移：
1、色谱柱污染。用洗脱力强的溶剂长时间清洗色谱柱或更换色谱柱。
2、管路污染。用清洗液清洗流路或更换被污染的部件。
3、流动相污染或纯度不够。流动相重新配置，净化处理或更换纯度
高的流动相。
4、检测池污染。清洗检测池，参见检测池清洗操作步骤。
5、环境温度变化大。
6、泵压力不稳。参见泵压不稳故障诊断。
五、基线噪音大：
1、检测池有气泡。参见检测池清洗操作步骤。
2、流动相纯度不够，或流动相在使用波长下吸收大。更换纯度高的
流动相或更换流动相种类。
3、检测池能量低。更换光源或光路部件。
4、仪器接地不良。重新连接地线，确定接地。
六、峰面积重现性差：
1、手动进样器污染。手动进样阀的清洗：峰面积重现性差或出杂峰时，
有可能进样阀受到污染，在日常清洗不能解决问题时，需分解进样
阀进行清洗，如果出现漏夜现象，通常需要更换进样阀转子密封垫。
首先用附带扳手拧下进样阀2号口和3号口连接管，再拧下5号口和6号口废液管，用附带内六角扳手拧松手柄的两个固定螺丝，取下进样阀，用附带的内六角扳手交替拧松进样阀后盖的三个固定螺丝，取下固定螺丝，取下进样阀后盖，取出转子密封垫和定子，放入烧杯中，分别用水和异丙醇超声清洗10分钟，清洗完毕后将定子和转子密封垫取出，放到干净的滤纸上，查看转子密封垫的表面是否有划痕，如有划痕需更换，将转子密封垫晾干后，装入进样阀，注意安装的正反面，导针孔要对应好，将定子装入后盖中，再将后盖装到进样阀上，注意定位销要对准，将三个固定螺丝放到进样阀后盖螺孔中，用扳手交替并均匀拧紧，将进样阀装回拧紧固定螺丝，将5号口和6号口废液管连接好，将2号口和3号口连接管恢复，装上进样阀手柄，拧紧固定螺丝，进样阀清洗完毕。
2、手动进样器的进样口漏液。更换转子密封垫。
3、自动进样器清洗液流路有气泡。选择合适的清洗液并脱气，使用
PURGE功能冲洗进样阀，排除气泡。
4、自动进样器进样口漏液。在流路中进样口发生漏液时，通常是进样
口密封垫损坏造成，这时需要更换进样口密封垫。操作如下：打开电源开关，仪器开始自检结束后，确认键盘在开启状态，重复按FUNC 键，直到屏幕显示CONTROL,按ENTER键进入，重复按FUNC键，直到屏幕显示ZHOME，按ENTER键执行，这时进样针提起并移到ZHOME 位置，关闭仪器电源，打开进样器门，取出样品架，拧下挡板螺丝，取出挡板，用手拧松进样口密封垫并取下，将新的进样口密封垫插入高压阀中并用手拧紧即可，安装挡板，拧上固定螺丝，放回样品架，并关紧进样器门，打开仪器电源，仪器开始自检，自检结束后，确认键盘在开启状态，按VP键直到屏幕显示MAINTENANCE，按FUNC 键直到屏幕显示NDL SEAL USED，输入“0”，按ENTER键确认，将密封垫的使用计数归零，按“CE”键两次回到初始画面，进样口密封垫更换完毕。进样口位置校正：进样针在进样口的位置发生偏移时，可能造成进样口漏液或损坏进样口密封垫，这时需要调整进样针位置，操作如下：打开仪器电源，仪器开始自检，自检结束后，确认键盘在开启状态，重复按VP键直到屏幕显示CALIBRATION，按FUNC键，输入密码，初始密码是五个零，按ENTER键进入，重复按FUNC键，直到屏幕显示ADJUST INJ PORT，按ENTER键进入，打开自动进样器门拆下挡板，按ENTER键开始调整进样器位置，依次用键盘上的上下箭头调整针的上下位置，依次用左右箭头调整针的左右位置，用FUNC和BACK键调整针的前后位置，直到进样器的针尖调整到密封垫的水平面并在密封垫的孔的中间，按ENTER键仪器自动测试调整后的位置，安装挡板，关上进样器门，输入数值“1”
保存调整好的位置，输入数值“1”按ENTER键磨合进样口密封垫，进样口位置调整完毕，按CE键两次，回到初始画面，将仪器恢复。
5、自动进样器流路污染。使用清洗液清洗进样器管路。
6、色谱柱污染或劣化。用洗脱力强的溶剂长时间清洗色谱柱或更换色
谱柱。
七、保留时间重现性差：
1、泵压力不稳。参见泵的故障诊断。
2、环境温度变化大。
3、色谱柱未充分平衡好。充分平衡色谱柱。
4、梯度洗脱时流动相混合比例异常。确认各流路的流速是否正确。
八、峰形异常：
1、色谱柱污染或劣化。用洗脱力强的溶剂长时间清洗色谱柱或更换色谱柱
2、流路污染。使用清洗液清洗流路
3、流路死体积大。检查管路连接处，正确连接管路，消除死体积
九、常见错误信息：
1、泵的常见错误信息
⑴ ERROR P-MAX
泵压超过设定的最大压力值，检查流路是否有堵塞现象或更改最大压力值
⑵ ERROR P-MIN
泵压低于设定的最小压力值，检查流路是否有漏液现象或更改最小压力值
⑶ OPEN DRAIN VALVE
PURGE时请打开排液阀旋钮
⑷ ERROR LEAK
漏液报警，检查泵是否存在漏液现象。
2、自动进样器的常见错误信息
⑴ NO VIAL DETECTED
自动进样器未检测到样品瓶，确认样品瓶是否放入
⑵ ERR LEAK DETECT
漏液报警，检查自动进样器是否存在漏液现象
⑶ DOOR IS OPEN
自动进样器门没有关好，进样时请关好自动进样器的门
3、紫外检测器的常见错误信息
⑴ ERR OVEN CURRENT
灯电流过载，建议更换氘灯
⑵ ERR D2 LAMP
氘灯错误，建议更换氘灯
⑶ CHECK NO GOOD
波长自检未通过，清洗检测池，排出气泡，重新进行波长校准
⑷ ERR LEAK DETECT
漏液报警，检查紫外检测器是否存在漏液现象
4、示差检测器的常见错误信息
⑴“ALARM” DISPLAY
总能量值偏低，清洗检测器的样品池和参比池或更换钨灯
⑵ ERROR LEAK
漏液报警，检查示差检测器是否存在漏液现象
5、荧光检测器的常见错误信息
⑴ ERR OVER HEAT
过热报警，疏通检测器散热口，降低环境温度
6、柱温箱的常见错误信息
⑴ ERR LEAK DETECT
漏液报警，检查柱温箱是否存在漏液现象
⑵ WARNING：LOW SET TEMP
温度设定过低，请重新设置温度
十、使用缓冲溶液时的清洗：
如果使用缓冲溶液作为流动相，它蒸发时可能会在流路中生成结晶。柱
塞和柱塞密封圈上的结晶可能会损坏柱塞或密封圈并缩短它们的使用寿
命，所以，如果使用缓冲溶液，很重要的一点是经常使用蒸馏水清洗密
封圈内表面和柱塞表面，以保护它们并延长其使用寿命。手动清洗的周
期一般为：对于磷酸缓冲溶液（低浓度）一天几次。对于硼酸缓冲溶液
（低浓度）一天数次。在使用缓冲溶液操作后不再继续使用仪器，请务
必使用蒸馏水或去离子水替换流路中的缓冲溶液，以防止缓冲溶液结晶
沉积。
十一、色谱柱的日常保养：
1、购买新柱后一定要仔细阅读说明书，确认柱的使用条件以及清洗再
生步骤，按照说明书条件测试色谱柱柱效，记录使用压力
2、定期检测柱压和柱效
3、不同流动相之间转换时应注意溶剂的互溶性
4、确认样品不会在流动相中析出或带有固体不溶物，请使用0.45μm
或0.22μm的一次性滤膜过滤样品，或者进行前处理
5、为了延长色谱柱使用寿命，请使用保护住
6、定期用合适的溶剂清洗或再生色谱柱
7、长期不用时，清洗干净后，使用柱子说明书中指明的溶剂保存，柱
子要从仪器上卸下并用堵头密封后保存
8、定期用合适的流动相清洗保存的柱子，避免干涸
十二、紫外灯的保养：
1、氘灯保证寿命为2000小时
2、保证仪器的使用环境
1 目的：为了规范LC-20AD高效液相色谱仪的使用，确保测量结果的准确性，特制定此规程。 2 范围：本规程适用于LC-20AD高效液相色谱仪的使用。 3 责任者：化验员 4 程序： 4.1 准备 4.1.1 准备所需的流动相，用合适的0.22μm滤膜过滤，超声脱气20min。 4.1.2 根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）。 4.1.3 配置标准溶液和样品，用合适的0.22μm滤膜过滤。 4.2 开机 4.2.1 接通电源，打开计算机。 4.2.2 按一次电源按键就是打开“ON”（再按一次即为关闭“OFF”）, 待泵和检测器自检结束，如果没有错误，屏幕显示正确，即进入初始屏幕：在显示初始屏幕的状态下，不能仅按数字键来设定检测波长，按CE键，确认已进入初始屏幕，按一下func键，屏幕显示“LAMBDA 1”（设定检测波长），波长参数输入区闪烁，提示操作者输入波长值：输入所需波长，再按Enter键，设定即告完成。 4.3 排空操作 4.3.1 将排液阀旋钮逆时针旋转180°，打开排液阀。检查吸滤头至入口单向阀流动相管路无气泡，再按Purge键进行排空。检查吸滤头至入口单向阀流动相管路无气泡即再按Purge 键停止排空此时检查压力显示是否为“0”，若不为“0”，执行以下零压力调整操作：在停泵状态下，按func键多次，直至进入ZERO ADJ项，按Enter键完成初始压力调零，最后顺时针旋紧排空阀。 4.4最大和最小保护压力设定： 4.4.1最大压力限制是流路中的压力所不能超过的值，最大保护压力设置的目的就是保护色谱柱和其他流路部件。如果压力超过限定值，送液就将自动停止，发出报警声并显示出错信息。在初始屏幕上按func两次，光标会在MAX字段后闪烁，提示输入新值，然后按Enter键，屏幕上出现新值。 4.4.2 最小压力限制是防止以下情况发生的压力下降：
起草人：日期：审核人：日期： 批准人：日期：生效日期：生效人： 颁发部门：质量部拷贝号： 分发部门： QA、QC 岛津LC-15高效液相色谱仪确认方案 目录 1. 概述................................................................错误！未定义书签。 2. 验证目的............................................................错误！未定义书签。 3. 验证范围............................................................错误！未定义书签。 4. 验证小组成员及职责..................................................错误！未定义书签。 5. 验证方案培训........................................................错误！未定义书签。 6. 验证进度计划........................................................错误！未定义书签。 7. 验证方案的执行......................................................错误！未定义书签。 7.1 确认数据的记录与审核 (3) 7.2 文件要求 (3) 8. 验证的内容..........................................................错误！未定义书签。 8.1 安装确认..........................................................错误！未定义书签。 8.2 运行确认..........................................................错误！未定义书签。 9. 变更与偏差..........................................................错误！未定义书签。 10.验证的评定和结论 (9) 10.1验证结果的审批 (9) 10.2验证的评定结论 (9) 11.附件 (9)
1.目的 依据厂家指导说明书及仪器资料建立仪器操作规程，详细规定了岛津液相色谱仪的使用方法，以及仪器设备的维护、保养和卫生清洁，确保仪器不受损坏，检测稳定性好，正常运行。 2.适用范围 本规程适用于岛津液相色谱仪的操作、维护、保养和卫生清洁。 3.职责 由质检部检测人员负责。 4.相应记录表格 《仪器使用清洁记录》《仪器维护保养记录》 5. 仪器：岛津液相色谱仪（岛津SPD-10A） 6. 用途：检测物质组分及含量检测 7.环境要求 7..1 稳定无震动的安放位置。 7.2 避免阳光直射，强烈的温度变化，电磁干扰。 8.系统组成： 本系统由输送系统（高压输液泵）、手动进样器、紫外检测器、色谱工作站/电脑等组成。 9.程序 9.1 准备流动相
9.1.1流动相配置：按产品需要配置 9.1.2 抽滤 将抽滤瓶连接好并放上滤膜，将娃哈哈水倒入最上层开口瓶中，启动泵的按钮即开始抽滤，抽滤一半时将电源关掉（防止抽滤时间过长将滤膜抽破，以免达不到过滤的效果），让水慢慢流入接收瓶内。抽滤两遍，用蓝盖瓶装好，即过滤完，加入少许乙腈（占总体积10%）即可。磷酸盐缓冲液同以上方法抽滤即可。新倒出来的乙腈与甲醇不用过滤，按需要量直接倒入蓝盖瓶内即可。若乙腈或甲醇是头一天剩下的第二天再用时需过滤，方法同上。（水相与磷酸盐缓冲溶液时用0.22UM的水系滤膜（蓝色盒装），抽滤有机相时用0.22UM的有机滤膜（红色盒装））抽滤流动相的多少根据当天的检测量来定。 9.1.3 超声 将已抽滤好的流动相（水相，磷酸盐缓冲液，乙腈，甲醇）置超声波清洗仪上超声20分钟，超声完后，将流动相至仪器顶端的流动相盒内，换下头一天的流动相，A管路放在水相瓶子内，B管路放在乙腈瓶子内，准备开机。 9.2.开机 液相色谱仪由四个模块组成（即柱温箱、检测器、单元泵），分别按启每个模块电源使之在开机状态，打开电脑，使色谱仪与电脑连接。在电脑桌面双击2000工作站图标，此时打开一个工作界面，点击文件下的调用已设定好方法，即打开在线工作界面。 9.3排气 把管路中空气排尽的操作，一般在开关机及更换流动相时使用。操作为：打开放气阀，流速设置为5ML/MIN，点击泵启动，排气2-3MIN后，关闭排气阀门，设置好检测参数，大约运行30分钟后基线稳定方可进样。 9.4进样 仪器稳定后先进对照品，待对照品数据稳定后进样品。先在工作界面输入该样品名称及保存路径，再拿微量进样器吸取样品清洗微量进样器2-3次，再吸取
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪 的图文操作手册 一、岛津LC-20AT型高效液相色谱仪： 岛津LC-20AT型高效液相色谱仪 二、功能和用途： 1、功能：本仪器采用高压梯度通过高压输液泵分别独立精确控制流量、调整 溶剂浓度比例，实现高效率、高精度混合；即配备了可提供全波长三维信息的二极管阵列检测器，全新的光路设计与有效的梯形狭缝池设计保证了高分辨率和高灵敏度；也配备了灵敏度更高、选择性更好的荧光检测器； 还配备了具有高灵敏度、检测范围更广的蒸发光检测器。 2、用途：本仪器可以高效地分离分析高沸点、热不稳定的有机及生化试样； 二极管阵列检测器对大部分有机化合物有响应；荧光检测器可以检测产生荧光的物质，对如多环芳烃、维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应；蒸发光散射检测器对碳氢化合物、表面活性剂、聚合物、脂肪酸和氨基酸、油和挥发性低于流动相的任何样品、不含发色团的化合物有响应。
三、操作步骤： 1、色谱柱的安装 本仪器配备了SPD-M20A二极管阵列检测器、RF-10AXL荧光检测器和Varian380-LC蒸发光散射检测器。样品分析前首先要确定用什么检测器，然后把色谱柱连接到所需的检测器上。 2、开机 a、首先打开UPS，然后依次打开DGU-20A3真空脱气机、LC-20AT溶液 传输单元（泵）、CBM-20A系统控制器、所选用的检测器、自动进样器 SIL-20A，CTO-20A柱温箱电源打开。（HPLC组件的电源开关大都在仪 器的右下角） b、将两个泵上部中间的黑色旋钮逆时针旋转90~180度，按purge键进行自 动脱气，一般设置为3分钟；然后按自动进样器软键盘的purge键，对 自动进样器上的样品进行脱气，一般为25分钟。 c、双击Lc solution图标。输入用户名Admin，点击OK。单击系统配置的 图标，出现系统配置的对话框。单击自动配置，仪器自动将能找到的仪 器配置，也可以用图示中的蓝色和红色箭头分别添加和去掉配置的仪 器。需要注意的是，仪器优先选择自动进样器，如果需要手动进样，需
云南品斛堂生物科技有限公司 文件名称岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、 维修、保养操作规程 页码1/4 文件类别工作标准颁发部门质量部文件编号SOP-03-015-00 制定审核批准 制定日期年月日审核日期年月日批准日期年月日分发部门质量部、生产部实施日期年月日文件状态修订口新订口原因：执行2010年版药品生产质量管理规范 1目的：建立岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养操作规程，确保仪器的正确操作。 2范围：本规程适用于岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养。 3责任：化验室负责人，化验员。 4内容： 4.1概述 本系统由四元低压梯度系统输送泵、自动进样器、UV检测器、柱温箱、LabSolutions色谱数据工作站和电脑等组成。 4.2原理 储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱固定相内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。 4.3技术参数 流量设定范围0.0001～10 mL/min 流速精度±1% 或±2μL/min 最大操作压力44MPa 进样数216个样品 外形尺寸mm 410×500×605mm 波长重现性±0.1nm 温控精度±0.1℃波长范围190～700nm 噪声±2.5×10-6AU 漂移100×10-6AU/h 4.4设备安装位置
设备名称放置房间 LC-2030型高效液相色谱仪精密仪器室 4.5操作方法 4.5.1准备 4.5.1.1准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20～30min。 4.5.1.2根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）。 4.5.1.3配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。 4.5.1.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 4.5.2开机 接通电源，依次开启高效液相色谱仪开关，电脑主机、显示器，待高效液相色谱仪自检结束后，打开色谱工作站。 4.5.3等度洗脱 4.5.3.1排气 打开Purge，点击程序中的“自动排气”，系统自动进行排气，若使用多通道，根据实际需要选择通道进行排气；如果不出液，用针头接上“p”的管路，进行抽气，至到有液体从“Purge”这个管路排出。 4.5.3.2参数设定 4.5.3.2.1波长设定：在[数据采集]窗口的[时间程序视图]中[检测器A]，选择波长(1)输入所需波长。 4.5.3.2.2流速设定：在[数据采集]窗口的[时间程序视图]中[泵]，选择泵总流量，输入所需流速。 4.5.3.2.3流动相比例设定：在[数据采集]窗口的[时间程序]中[泵]，选择所用泵，输入泵项下所需的浓度比例。 4.5.3.3设置好后，点击“下载”系统自动按照设置好的方法，进行走基线。
岛津高效液相色谱仪LC-20A操作规程 一、目的：为了安全、规、正确使用岛津LC-20A型高效液相色谱仪，特制订本操作规程。 二、围：仅适用于岛津LC-20A型高效液相色谱仪。 三、环境要求：温度4 ～35℃，相对湿度为40～80% ，最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。 四、L C-20A高效液相色谱仪工作原理： 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相),由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱流出, 通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到工作软件,数据以图谱形式表现出来。 4.1高效液相色谱仪外观图： 图1：高效液相色谱仪外观图 开机顺序：A泵→B泵→柱温箱→自动进样器→检测器→系统控制器后→电脑显示器→主机（注：仪器各单元的开关均在左下角） 4.2高效液相色谱仪的基本流路：
五、样品准备： 5.1开机之前，准备好所用的流动相和样品，检查储液器的吸滤头是否在液面以下。流动相和样品必须通过0.45um过滤器过滤。 5.2 流动相：必须使用HPLC级或相当于该级别的流动相，并通过0.45um过滤器过滤。过滤后的流动相必须经过充分脱气，以除去其中溶解的气体O2等，如不脱气易产生气泡、基线噪声增加、灵敏度下降，甚至无法分析。 5.3 查看仪器使用记录，了解仪器当前状况。 图2：真空过滤器图3：超声波清洗器 5.4 样品前处理：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理。 图4 样品前处理 六、操作规流程： 工作软件操作流程概述：
15-岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养操作规程
云南品斛堂生物科技有限公司 文件名称岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、 维修、保养操作规程 页码2/10 文件类别工作标准颁发部门质量部文件编号SOP-03-015-00 制定审核批准 制定日期年月日审核日期年月日批准日期年月日分发部门质量部、生产部实施日期年月日文件状态修订口新订口原因：执行2010年版药品生产质量管理规 范 1目的：建立岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养操作规程，确保仪器的正确操作。 2范围：本规程适用于岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养。 3责任：化验室负责人，化验员。 4内容： 4.1概述 本系统由四元低压梯度系统输送泵、自动进样器、UV检测器、柱温箱、LabSolutions色谱数据工作站和电脑等组成。 4.2原理 储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱固定相内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。 4.3技术参数 流量设定范围0.0001～10 mL/min 流速精度±1% 或±2μL/min 最大操作压力44MPa 进样数216个样品外形尺寸mm 410×500×605mm 波长重现性±0.1nm 温控精度±0.1℃波长范围190～700nm 噪声±2.5×10-6AU 漂移100×10-6AU/h 4.4设备安装位置
1.目的：建立岛津LC-20AT高效液相色谱仪维护操作规程，保证正确操作。 2.范围：适用于岛津LC-20AT高效液相色谱仪的维护操作。 3.责任：QC使用人员、维护人员。 4.内容： 4.1仪器组成： 脱气机：DGU-20A5R 四元低压泵：LC-20AT 自动进样器：SIL-20AC 柱温箱：CTO-20A 检测器A：SPD-20A 检测器B：RID-10A 4.2开机 4.2.1依次打开高效液相色谱仪“四元泵”、“进样器”、“柱温箱”“检测器（VWD/RID）” 电源，仪器开机自检。 4.2.2打开数据采集器（电脑），按“Ctrl”+“Alt”+“Delete”，输入用户名与密码 登录Windows系统 4.2.3双击击桌面上的图标，确认任务栏上SystemTray中的[LabSolutionsService] 图标显示绿色。 4.2.4在弹出的对话框中输入用户ID与密码，单击“确定”登入LabSolutions 4.2.5在“LabSolutions主项目”视窗里单击[选择项目]，选择实验项目，单击确定
4.2.6在[仪器]栏选择所要联机的仪器，双击打开，进入数据采集界面，仪器显示“脱机”、 “未就绪”或“就绪”状态 4.3数据采集 4.3.1点击数据采集界面菜单栏“”图标，点击“” 或“”打开或新建方法文件。若新建或修改方法，根据样品检验操作规程，对相应参数进行设置 4.3.1.1在[数据采集时间]项下设置“LC结束时间”并勾选所用的检测器，检测器A为 VWD检测器、检测器B为RID检测器；在[时间程序]项下设置控制参数，[泵]项下
设置“流速”、“流动相比例”、“压力下限”、“压力上限”；在[检测器A]项下设置“VWD波长”，在[检测器B]项下设置“池温度”、“极性”；在[柱温箱]项下设置“柱温箱温度”；在[自动进样器]项下设置“样品冷却器温度”；在[自动排气]项下设置“流动相排气通道与时间”。其余参数在该样品检验操作规程中除特有规定，不予修改调整，采用仪器默认参数。 4.3.1.2数据采集方法保存：采集方法建立或修改完成后，点击“”选择“另存为”， 输入文件名称与描述，完成采集方法编辑。 4.3.2调用已建立的采集方法，按照方法参数，跟换相应的流动相，点击
岛津高效液相色谱仪LC-20A 操作规程 一、 目的：为了安全、规范、正确使用岛津LC-20A 型高效液相色谱仪，特制订本操作规程。 二、 范围：仅适用于岛津LC-20A 型高效液相色谱仪。 三、 环境要求：温度4 ～35℃，相对湿度为40～80% ，最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。 四、 L C-20A 高效液相色谱仪工作原理： 高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到工作软件,数据以图谱形式表现出来。 开机顺序：A 泵→B 泵→柱温箱→自动进样器→检测器→系统控制器后→电脑显示器→主机（注：仪器各单元的开关均在左下角） 五、样品准备： 5.1开机之前，准备好所用的流动相和样品，检查储液器的吸滤头是否在液面以下。流动相和样品必须通过0.45um 过滤器过滤。 5.2 流动相：必须使用HPLC 级或相当于该级别的流动相，并通过0.45um 过滤器过滤。过滤后的流动相必须经过充分脱气，以除去其中溶解的气体O 2等，如不脱气易产生气泡、基线噪声增加、灵敏度下降，甚至无法分析。 5.3 查看仪器使用记录，了解仪器当前状况。 5.4 样品前处理：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE ）对样品进行预处理。 图4 样品前处理
1目的：建立岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养操作规程，确保仪器的正确操作。 2范围：本规程适用于岛津LC-2030高效液相色谱仪使用、维修、保养。 3责任：化验室负责人，化验员。 4内容： 4.1概述 本系统由四元低压梯度系统输送泵、自动进样器、UV检测器、柱温箱、LabSolutions色谱数据工作站和电脑等组成。 4.2原理 储液器中的被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱内,由于样品溶液中的各在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。 4.3技术参数 流量设定范围0.0001～10 mL/min 流速精度±1% 或±2μL/min 最大操作压力44MPa 进样数216个样品外形尺寸mm 410×500×605mm 波长重现性±0.1nm 温控精度±0.1℃波长范围190～700nm 噪声±2.5×10-6AU 漂移100×10-6AU/h 4.4设备安装位置 设备名称放置房间 LC-2030型高效液相色谱仪精密仪器室 4.5操作方法 4.5.1准备
4.5.1.1准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20～30min。 4.5.1.2根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）。 4.5.1.3配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。 4.5.1.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 4.5.2开机 接通电源，依次开启高效液相色谱仪开关，电脑主机、显示器，待高效液相色谱仪自检结束后，打开色谱工作站。 4.5.3等度洗脱 4.5.3.1排气 打开Purge，点击程序中的“自动排气”，系统自动进行排气，若使用多通道，根据实际需要选择通道进行排气；如果不出液，用针头接上“p”的管路，进行抽气，至到有液体从“Purge”这个管路排出。 4.5.3.2参数设定 4.5.3.2.1波长设定：在[数据采集]窗口的[时间程序视图]中[检测器A]，选择波长(1)输入所需波长。 4.5.3.2.2流速设定：在[数据采集]窗口的[时间程序视图]中[泵]，选择泵总流量，输入所需流速。 4.5.3.2.3流动相比例设定：在[数据采集]窗口的[时间程序]中[泵]，选择所用泵，输入泵项下所需的浓度比例。 4.5.3.3设置好后，点击“下载”系统自动按照设置好的方法，进行走基线。 4.5.3.4基线平稳后，方可进样。可以进行单次分析或批处理分析。 4.5.3.4.1单次分析:单击[数据采集]窗口助手栏上的“单次开始”图标；设置“样品名”“方法文件”“数据文件”“样品瓶”“样品架”“进样体积”等信息；点击确定，系统即自动进行单次分析。 4.5.3.4.2批处理分析:单击[数据采集]窗口助手栏上的“批处理”图标；从[文件]菜单中选择[新建批处理文件]；设置“样品名”“方法文件”“数据文件”“样品瓶”“样品架”“进样体积”等信息；点击保存，保存批处理文件；点击[批处理]助手栏中的“批处理开始”，系统即执行批处理程序。
岛津DAD高效液相色谱操作规程 1、用途：进行样品纯度和杂质的分析，可以满足全波长采集数据并进行最佳 吸收波长的选择。 2、系统组成：本系统由2个LC-20A Tvp溶剂输送泵, 7725i手动进样阀， SPD-M20A紫外-可见检测器、岛津原装色谱数据工作站和电脑 等组成，柱温箱、不间断电源等辅助设备。 3、准备 3.1 准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤（水相用水膜，有机相用 有机膜），超声脱气20min。 3.2根据待检样品的需要更换合适的色谱柱（注意方向，顺序是从进样器流经 色谱柱进入检测器方向，色谱柱箭头方向为流速方向）。 3.3倒掉废液瓶中的废液。 3.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 4、操作规程 4.1启动仪器： 4.1.1首先打开柱温箱并设置柱温箱温度为40℃按柱温箱控制界面上的 ready键启动柱温箱。 4.1.2 依次开启电脑、按power键开启检测器和泵控开关。 4.1.3 将泵A、泵B吸滤器相应的放入到准备好的流动相中。 4.1.4 逆时针转动泵的排液阀180°，打开排液阀 4.1.5 按泵的[purge]键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗， 冲洗3-5分钟后，按[purge]键停止； 4.1.6将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀 4.1.7五分钟后打开电脑桌面上的LCsolution工作站，进行仪器与电脑的连 接。本机没有密码，可直接进入系统。 4.1.8进入主界面后点击通道1进行连接。 4.2参数设置： 4.2.1建立新的分析方法（详情见岛津原装色谱工作站操作规程）。若为已 有方法的分析项目，直接调用即可（详情见岛津原装色谱工作站操作 规程）。 本机所有操作均在工作站上进行，在操作界面上均为无效操作。工作站右上角工具栏上有一排图标，在上面控制泵开关和灯开关。 4.2.2点击工作站中的灯开关和泵开关进行仪器的稳定。 4.3仪器稳定的判断
岛津LC-20AT高效液相色谱操作步骤 1、流动相的处理 ◆共有5个流动相储液瓶。一般RP-HPLC中，A（无机相）、B（有机相）为 分析流动相；C（水）、D（甲醇）用于柱子后处理清洗；50%甲醇-水用于清洗自动进样针 ◆流动相体积V A、B=100+总流速×比例系数×分析时间（mL）；V c≥300mL； V D≈350mL；V50%甲醇≈300mL ◆所有流动相须用0.22um孔径滤膜过滤（根据有机相和无机相选用相应滤膜）， 清洗储液瓶，不能在清洗过程中留下污迹，并超声30min，超声完成后禁止剧烈摇晃 2、开机 ◆开启插座电源电脑开机 ◆打开仪器电源（LC—20AT最后打开，等待数秒后“control”指示灯亮） ◆打开软件（Labsolution 仪器LC—20A），若连接正常则软件 显示LC就绪 3、自动排气 ◆将各流动相过滤头缓慢放入流动相中 ◆在简单设置界面设置总流速为0.2mL/min；在自动排气界面设置自动排气参 数（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ各流动相≥5min，自动进样器≥25min），不勾选“排气结束后运行控制器” ◆“下载”“执行自动排气” ◆等待排气结束 4、样品处理 ◆稀释后的样品（浓度约1mg/mL，不宜过高）用注射器经0.22um过滤器注 入样品瓶 ◆样品应≥2/3样品瓶体积（1.5mL样品瓶） ◆按序号依次将样品瓶放入自动进样器的样品架上 ◆切记：将样品架推到底！ 5、系统平衡及设置分析条件 ◆自动排气完成后，设置柱温、检测波长等参数(建议柱温高于环境10℃)， 用梯度洗脱初始流动相平衡柱子（流动相比例与梯度洗脱初始比例一致） ◆“下载”“激活/取消激活仪器”，此时系统显示：等待柱温稳定 ◆缓慢增加总流速至样品分析所需流速，V max=1ml/min（每隔1分钟增大 0.2mL/min，注意每次增大都点击“下载”） ◆在时间程序界面设置梯度洗脱条件 ◆若要保存方法文件：文件方法文件另存 ◆等待基线平稳（留意泵压力是否稳定），待系统显示：LC就绪，右击，进行
岛津LC-2030型自动进样高效液相色谱仪使用、维护及保养标准操作规程 1
修订记载
目的：建立岛津LC-2030型自动进样高效液相色谱仪使用、维护及保养标准操作规程，供化验员标准操作。 范围：应用于岛津LC-2030型自动进样高效液相色谱仪。 职责：由质控实验室仪器负责人编写； 质控实验室经理、质量管理QA 审核；质量负责人批准； 质控实验室相关化验员执行。 内容： 1 编制依据：《岛津LC-2030型自动进样高效液相色谱仪使用说明书》、《药品生产质量管理规范》（ ）。 2 仪器组成：本仪器主要由溶剂瓶柜、自动进样器、紫外检测器、荧光检测器、柱温箱、脱气机组成。如图1所示： 图1 溶剂瓶自动进脱气 柱温箱 荧光检 紫外检
3 操作方法： 3.1 开机： 3.1.1 准备好流动相并安装好色谱柱：将配制好的流动相用孔径为0.45μm的滤膜过滤，超声脱气处理15分钟后方可使用；色谱柱按箭头指示方向连接到液相色谱仪上。 3.1.2 打开液相色谱仪电源，液相色谱仪仪器开始自检。 3.1.3 电脑开机进入WINDOWS桌面后，双击LC-2030色谱工作站图标，进入工作站登陆界面。如图2所示： 图2 3.1.4 单击【确定】进入主项目界面。如图3所示：
图3 3.1.5 单击【仪器】图标，双击，进入仪器操作界面在线系统， 出现在线控制主界面。如图4所示： 图4 3.1.6 打开排放阀（逆时针旋转﹤180°），单击【自动排气】，进入排气操作界面，根据需要选择流路及排气时间，完成设
置后单击【下载】。如图5所示： 图5 3.2 数据采集方法编辑： 3.2.1 常规参数设置： 3.2.1.1 单击[常规]，进入常规操作界面，运行时间、泵流速、检测器波长和柱温箱温度（5℃～85℃）等，完成设置后单击[下载]，将该方法下载至液相色谱仪。如图6所示： 图6 3.2.1.2 单击【时间程序】，进入该操作界面，若进行等度洗脱，则不需要修改。如图7所示： 图7 3.2.2 高级参数设置： 3.2.2.1 单击[高级]，进入该操作界面，设置相关检测参数，完成设置后单击【下载】，将该方法下载至液相色谱仪，如图8所示：
岛津LC-20A型液相色谱系统的日常使用和维护 配置 系统组成：本系统由DGU-20A3脱气机、2个LC-20A T溶剂输送泵分为A，B泵、SIL-20A 自动进样器（7725手动进样器）、C18填料色谱柱、CTO-20A柱温箱、SPD-20A紫外-可见检测器、CBM-20A系统控制器、LCSolution（V er.1.21）工作站等组成。 准备 使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜），超声脱气20min以上待用。 根据待检样品的需要选用合适的色谱柱（柱进出口方向应与流动相流向一致）和定量环。 配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm的样品过滤器过滤后待用。 检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 注意：真空抽滤装置和超声波装置为液相色谱实验室必须的辅助设备。 开机和平衡系统 接通电源，依次开启稳压电源、A泵、B泵、柱温箱、自动进样器、检测器、系统控制器，待泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。 先把吸滤头放入流动相瓶中，打开排液阀，按purge键排液2～3分钟，purge完毕后关闭排液阀启动泵送液（流速开始不宜太高应为正常分析流速的50％～80％），如有柱温条件可同时开启柱温箱，平衡系统30分钟左右，此时可以同时进行自动进样器的purge操作（时间为15～25分钟）自动进样器清洗液一般使用与流动相比例接近的不含缓冲盐的试剂也可以用甲醇：水＝70：30或甲醇：水＝1：1代替，观察检测器基线平稳后即可做样。 注意：1.如果使用前色谱柱中保存的流动相为纯甲醇或纯乙腈，而新流动相中含有缓冲盐时，应先用纯水冲洗色谱柱十分钟左右再使用流动相，以免盐析出损坏系统。 2.如系统为正相和反相交换使用，应先将所有管路用异丙醇清洗后再更换新流动相使用。 清洗系统和关机 数据采集完毕后，如使用的是手动进样器请参看下图清洗： 具体方法： 用注射器吸20ml超纯水后套上冲洗头，将清洗头轻轻顶在进样口上（不宜用力太大，否则容易损坏进样口），使进样阀保持在Inject位置，慢慢将水推入，水将通过注射针导入口、引导管、注射针导入管和注射针密封圈，由样品溢出管排出。 泵头手动清洗： 如系统中有泵头自动清洗装置，则无需手动清洗，否则需手动清洗尤其使用完缓冲盐流动相时，清洗时使用下面工具，先用注射器吸入20毫升蒸馏水，套上针头，插入泵头清洗管任意一端，推入蒸馏水，另一端流入废液杯，重复2～3次即可！ 色谱柱清洗： 继续以分析中使用流动相冲洗10分钟以上，待基线平稳后关闭检测器，冲洗色谱柱 如流动相不含缓冲盐，可以用甲醇：水＝70：30（或用纯甲醇）直接冲洗30分钟以上后把流速设为零，然后关闭所有仪器设备，顺序为：先退出工作站软件，再依次关闭系统控制器、检测器、自动进样器、柱温箱、泵；
岛津高效液相色谱LC-20AT操作流程 1.开机 依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器和控制台（最后打开控制台），再打开电脑，开启LCsolution 软件，点击“仪器1”按钮，出现设置界面。 2.装载方法文件 打开液相操作方法文件（如有更改，更改完后先保存），点击软件中“仪器开关”和“泵开关”按钮（若设置柱温，点击“柱温箱”的按钮）。开启仪器和电脑的连接；点击“下载”按钮，装载操作方法。 3.进样 将样品加入进样瓶中，放在样品架上，记下放置的位置编号。 3.1 单次进样 点击“单次运行”按钮，出现单次运行的对话框。核实方法文件的出处和名称，核实数据文件的出处和名称。输入样品瓶和进样体积。 （样品架输入“1”；如果是空针，样品瓶输入“-1”）。完成后，点击“确定”，开始检测。 3.2自动进样 点击“批处理”按钮，出现批处理表。依次输入“样品瓶” （样品瓶编号）、“样品架名称”（输入1）、方法文件、数据文件、进样体积。输完后，保存批处理文件，然后点击“批处理开始”按钮。 4.关机 点击“仪器开关”和“泵开关”按钮（包括柱温箱），将其从凹陷状态，变成凸出状态。关闭软件，关掉电脑。依次关掉控制台、检测器、柱温箱、自动进样器、泵。 5.脱气 5.1 泵的脱气 更换流动相，或者其他操作，只要吸滤头与空气接触，都需进行在线脱气。 将泵的脱气阀逆时针转动45~90度，点击仪器上“purge”按钮，进行脱气。脱气自动结束，再将脱气阀顺时针拧紧。
5.2 自动进样器的脱气 在方法文件中设置脱气的条件，装载方法文件后，点击“进样器脱气”按钮。 6.方法设置 打开软件后，在页面下方设置方法文件。一般需设置的条件有，洗脱“模式”（一般设置为低压梯度）、“泵A总流速”、“压力限制（泵A）” （最大值一般设为20.0MPa，最小设置为0.0MPa）、“L C时间程序”、 “采集时间”（开始和结束时间）、“通道波长”、“柱温箱温 度”、自动进样器和自动排气相关设置以及L C时间程序。 附：L C时间程序设置如下图：结束时，分别选择“Controller”和“Stop” 7.标准曲线制作 7.1 积分识别条件的设置 选取不同浓度标样中的某一数据文件，打开。点击“向导”按钮 。按照指示设置“半峰宽”、“斜率”、“最小锋面积”等积分条件，选择标准品对应的色谱峰、设置定量方法相关条件、目标峰识别相关条件，输入目标物的名称、按照级别输入标曲中相应的浓度。完成后，点击“完成”。点击，保存此积分识别条件，新建一个新文件名。 7.2 标曲批处理文件的设置 点击左边栏的“批处理”按钮，出现批处理界面。按浓度从小到大或从大到小，将标曲中的标样文件添加到批处理表中。点击“样品类型”中按钮，第一个浓度选择“标准”中的“初始化校准曲线”，其他浓度选择“标准”中的“添加校准级别”. “分析类型”选择“IT QT”；输入“方法文件”和“数据文件”名称；输入不同浓度对应的“级别”。完成后，保存批处理文件。点击“批处理开始”，制作标准曲线。点击标曲中最大或最小浓度的标样数据文件，查看标准曲线。 8.样品浓度计算
液相色谱-手动进样阀的使用及保养手动进样阀是高效液相色谱系统中比较理想的进样装置，它是由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。 岛津HPLC系统采用美国Rheodyne（罗丹尼）公司生产的六通阀进样器作为手动进样装置。 1、手柄位处于进样(Load)位置时，样品经微量进样针从进样孔注射进 定量环，定量环充满后，多余样品从放空孔排出。 2、手柄转动至进样(Inject)位置时，阀与液相流路接通，由泵输送的 流动相冲洗定量环，推动样品进入液相分析柱进行分析。
使用及保养事宜 1、手柄处于Load和Inject之间时，由于暂时堵住了流路，流路中压 力骤增。再转到进样位，过高的压力冲击在柱头上会造成损坏，所以应尽快转动阀，不能停留在中途。 2、注射器针头有别于气相色谱，是平头注射器。平针头的优点： A：针头外侧紧贴密封垫内侧，密封性能好，不漏液，不引入空气。 B：防止针头刺坏密封垫及划伤定子。 应该注意选择质量好的液相色谱专用注射器。 3、装液量有部分装液法和完全装液法两种。 A：部分装液法进样时，进样量最多为定量环体积的75％。 B：完全装液法进样时，进样量最少为定量环体积的3至5倍。这样才能完全置换定量环内残留的溶液。 4、可根据进样体积的需要选择定量环，一般不要求精确计算定量环 的体积。譬如，一根名义上10uL的定量环，实际是9uL还是11uL 并不重要，因为被测样品和校正样品的进样体积保持一致，在计算结果时误差都被抵消了。
5、样品溶液均要用滤膜过滤。防止微粒阻塞进样阀和减少对进样阀 的磨损。 6、每天使用后应冲洗进样器，通常用适当的有机溶剂、水或不含盐 的流动相冲洗，在进样阀的Load和Inject位置反复冲洗。 7、注意擦拭注射器针头的外侧。防止交叉污染。
岛津液相色谱仪使用注意事项 1.流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他 物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。 2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。 3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。 4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时， 然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。 5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存 柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。 6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。 7.C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。 8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。清洗方法；①以异丙醇作溶剂冲洗：②放在异丙醇中间用超声波清洗； ⑧用10％稀硝酸清洗。 9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。 10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动 相的清洗。 11.要注意柱子的pH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。 12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗，然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。 液相色谱柱使用经验谈 色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条 件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件 进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样品的前处理： a、最好使用流动相溶解样品。 b、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。 流动相的配制 液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点： a、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。 b、流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。 c、流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的
文件名称高效液相色谱仪标准操作规程文件编号 编制人审核人批准人 编制日期审核日期批准日期 颁发部门质量部生效日期 发送部门质量部 1.目的 建立岛津LC-20AT高效液相色谱仪的使用，维护操作规程，保证实验人员正确操作。2.范围 适用于岛津LC-20AT高效液相色谱仪的操作。 3.职责 QC使用人员对本标准的实施负责，QC主任对本标准的实施监督。 4.程序 4.1仪器组成及电源： 4.1.1仪器组成：本仪器由1台LC-20AT泵、SPD-20A紫外检测器、DGU-20A脱 气机和CTO-10AS VP柱温箱组成。 4.1.2电源：各部件均为220伏稳压电源。 4.2操作： 4.2.1依次打开泵、检测器、柱温箱电源开关。双击桌面上快捷图标， 点击【Operation】单击键，出现登录窗口，单击确认，进入工作画面， 此时可听到“滴”的2声，表明系统与工作站已经连接。 4.2.2打开“文件”项下“新建方法文件”，然后从仪器参数试图中设置指定的参数，设 定完成后，从“文件”项下选择“另存方法文件为”保存在指定的文件夹内，单击 “下载”。参数设置完成后点击键，输入文件编号、文件名称、方法名称 点击确认进入准备进样状态。 4.2.3进样阀手柄在“INJECT”位置时插入注射器，然后将进样阀手柄置“LOAD” 位置，推入供试品，再将进样阀手柄转到“INJECT”位置，分析的同时工作 站自动采集数据。 4.2.4待分析结束后点击键停止采集。 4.2.5当退出操作系统时，会出现“滴”的一声，证明以退出联机系统。
4.3图谱处理：按4.2.1操作，到单击键，进入图谱处理，打开文件，单击，单 击“文件”→“打开报告格式文件”，选择所需要的报告模板，按键，打印图谱。 4.4关机操作： 4.3.1全部分析完毕后，先关检测器开关，然后关泵、柱温箱开关，再用适宜的溶 剂清洗色谱系统。 4.3.2依次关闭泵和电脑的电源，拔下各插头，作好使用登记。 4.5清洁保养 4.4.1实验所用的流动相应经过μm的膜过滤，以降低色谱柱受污染的程度，延长使 用寿命。 4.4.2根据需要设定参数。由于每根色谱柱性能，填料各不相同，要依据其特性设 定最高保护压力，防止压力过大导致柱内填料空间发生变化，影响分离效果。 ?以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱一般最高工作压力不能超过20MPa。 ?以凝胶为填料的色谱柱一般最高工作压力不能超过。 4.4.3检测器的氘灯一般使用时间为2000小时，所以每次在进样品前半小时左右打 开，实验结束后，应先关闭检测器电源。 4.4.4最后一次进样完成后，应用流动相冲洗5-10分钟，以保证洗脱完全，然后先 用甲醇溶液（甲醇：水=15：85）冲洗至少30min，再用纯甲醇冲洗色谱柱至 少30min，流速为1ml/min。 4.4.5操作者应细心，了解仪器各部件性能。 4.4.6每次操作完毕后，应及时清理所用物品，倒掉废瓶中的废液，用柔软的抹布 擦拭仪器表面，保持仪器的清洁。 4.4.7若仪器长时间不用，可定期加电，使仪器预热一段时间，以免仪器内部件受 潮。 4.4.8为保证检验数据的可靠，每年应由计量部门负责校验一次。 5.术语: 无 6.相关文件和记录 6.1依据《岛津LC-20AT高效液相色谱仪使用说明书》 6.2记录