第一章蛋白质化学
一、填空题
1.蛋白质的基本组成单位是氨基酸，基本单位之间依靠肽键进行连接成为链状。
2.组成蛋白质的碱性氨基酸有赖氨酸、精氨酸和组氨酸，酸性氨基酸主要有谷氨酸
和天门冬氨酸。
3.在蛋白质氨基酸中，脯氨酸为一种α-亚氨基酸，除甘氨酸其余氨基酸均为L-型氨基酸。
4.在蛋白质氨基酸中有紫外光吸收的氨基酸是苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸，紫外分光法定量测定蛋白质含量的基础。
5.在酶的活性中心经常出现的氨基酸有谷AA、丝AA、组AA 和半胱氨酸等。
6.在蛋白质氨基酸中半胱氨酸是含硫的极性氨基酸，另一中含硫非极性R-基团氨基酸是蛋AA ，也称为甲硫AA。
7.氨基酸在等电点（pI）时主要以兼性离子形式存在，在pH > pI时氨基酸带负电荷，主要以阴离子形式存在，在电场中向正极移动。
8.除脯氨酸外，大部分氨基酸与茚三酮反应产生蓝紫色物质，而前者产生黄色物质。
9.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱来滴定NH3+放出的H+
10.寡肽通常是指由2个到10个氨基酸残基组成的小分子肽。
15.测定蛋白质多肽链N端氨基酸的方法有、、等，测定C-末端氨基酸的方法有、。
16.用化学法拆开蛋白分子中二硫键的方法有还原法和氧化法，常用的化学试剂分别有巯基乙醇和过甲酸。
17.在蛋白质一级结构测定中常用化学法将肽链断开，如用溴化氰可以在蛋氨酸位点把肽链断开。
18.构象与构型是两个不同的概念，构型的改变往往要涉及共价键的改变，而构象的变化主要是由于单键的转动引起原子或基团在空间的不同排列。
19.组成肽键的6个原子位于同一个平面，主要由于肽键不能自由旋转所造成，该平面称为肽平面。
20.蛋白质的二级结构主要有α螺旋、β折叠、β回折和无规则卷曲等几种形式。
21.α-螺旋是链内形成氢键，其方向与螺旋的长轴平行，而β折叠是链间形成氢键，氢键方向与肽链的长轴近于垂直。
22.α-螺旋是第一个氨基酸C=O与其后第4个氨基酸的N-H之间形成氢键，每圈螺旋包含3.6 个氨基酸残基，高度为0.54nm ，每个氨基酸残基沿轴上升0.15nm并沿轴旋转100度。
23.维持蛋白质高级构象的主要化学键有氢键、离子键、范德华力和疏水作用等，其中维持蛋白质三级结构最重要作用力是疏水相互作用。
25.蛋白质超二级结构的类型主要有αα、βαβ、βββ等。
27.当溶液中盐离子强度低时，可增加蛋白质溶解度，这种现象称为盐溶，当溶液中盐离子强度高时，可使蛋白质沉淀析出，此现象称盐析。
29.在正常生理条件（pH 7左右），蛋白质中赖和精氨基酸的侧链几乎完全带正电荷，但组氨基酸的侧链仅部分带正电荷。
30.蛋白质分子中肽键是一个氨基酸的羧基基与后一氨基酸的氨基缩合失去一分子水形成。
31.球蛋白分子内部是一个疏水环境，而分布在分子表面的极性基团与水分子形成水化膜，由于相同电荷互相排斥，因此蛋白质分子在溶液中是稳定的，不会发生沉淀，如果破坏了上述稳定因素，蛋白质分子会发生沉淀。
32. 蛋白质二级结构中的α-螺旋几乎都是右手螺旋，而β-折叠有平行和反平行两种类型。
33.蛋白质分子的二级结构和三级结构之间还经常存在两种结构组合体称为超二级结构和结构域，它们可以充当蛋白质三级结构的组合配件。
.蛋白质的营养主要由必需氨基酸决定，人体必需氨基酸主要有thr 、val 、leu 、trp \ ile 、met 、lys 和phe 等八种，而对儿童组AA也是一种必需氨基酸，因此又称为半必需氨基酸。
37.单体与亚基的根本区别在于有无生物活性，亚基是具有三级结构的蛋白质分子独立结构单位，但不是独立的功能单位，亚基之间主要通过次级键相互作用形成具有四级结构的蛋白质分子。
39.Anfinsen以RNase为材料进行的变性-复性实验得出的结论是一级结构决定高级结构。
41.蛋白质的最低自由能构象常常通过半胱氨酸残基的侧链间形成共价键而得到稳定，蛋白质非极性侧链间的疏水作用可导致蛋白质分子自由能降低。
42.分离蛋白质混合物的各种方法主要依据蛋白质在溶液中的下列特性，如分子大小、电荷、溶解性、吸附性质等。
43.利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使蛋白质和其它物质分开的方法叫透析。
44.在分离纯化蛋白质过程中，常用的沉淀蛋白质的方法有中性盐、有机溶剂和酸沉淀等。
45.蛋白质分子平均含氮量为16%，测定出蛋白质中的氮含量可以定量测定蛋白质，这种定量蛋白质的方法成为凯氏定氮法法。
二、名词解释
1.蛋白质系数
2.别构效应
3.构象与构型
4.结构域
5.必需氨基酸
6.蛋白质等电点
8.蛋白质变性作用9.蛋白质的复性
12.简单蛋白与结合蛋白13.蛋白质四级结构14.蛋白质的三级结构15.超二级结构
17.完全蛋白 18.氨基酸的等电点 19.肽与肽键
20.蛋白质一级结构21.蛋白质二级结构 22.蛋白质的沉淀作用 23.蛋白质盐析与盐溶
三、选择题
1.下列哪种试剂可以拆开蛋白质分子中的二硫键（）
（1）DNFB （2）溴化氰（3）β-巯基乙醇（4）异丙醇
2.下列关于凝胶过滤的叙述哪一项是正确的（）
（1）凝胶过滤时分子量小的先流出（2）凝胶过滤不能用于蛋白质与小分子的分离
（3）凝胶过滤不能用于蛋白质分子量测定（4）凝胶过滤可用于蛋白质分子量测定
3.下列检测蛋白质的方法，哪种与肽键性质有关（）
（1）紫外吸收法（2）双缩脲法（3）福林-酚试剂法（4）茚三酮法
4.使蛋白质在280nm具有最大光吸收的结构成分是下列的哪一种？
A色氨酸的吲哚环B酪氨酸的酚环 C 苯丙氨酸的苯环 D 半胱氨酸的硫原子E肽键
5．下面几种氨基酸中除哪一种外，其溶液均能引起偏振光旋转？
A丙氨酸B甘氨酸C亮氨酸D丝氨酸E缬氨酸
6．离子化侧链的pK值最接近生理pH的是下列哪一种氨基酸？
A半胱氨酸B谷氨酸C谷氨酰胺D组氨酸E赖氨酸
8．在生理pH下，下列哪一种是带正电荷的氨基酸？
A半胱氨酸B谷氨酸C赖氨酸D色氨酸E缬氨酸
11．下列哪一种氨基酸是哺乳动物非必需氨基酸？
A苯丙氨酸B赖氨酸C酪氨酸D亮氨酸E甲硫氨酸
13.下列哪一种氨基酸是蛋白质中未曾发现的含硫氨基酸？
A高半胱氨酸B半胱氨酸C甲硫氨酸D胱氨酸E苏氨酸
14．除哪一种外，下列有关α-螺旋的叙述都是正确的？
A靠分子内的氢键来稳定B靠减少不利的R-基团相互作用来稳定C靠相互间的疏水作用来稳定D它是在一些蛋白质内发现的一种二级结构类型E脯氨酰和甘氨酰残基具有破坏α-螺旋结构的作用
16．下面关于蛋白质中L-氨基酸之间肽键的叙述哪些是正确的？
1）肽键具有部分双键的性质2）肽键比正常的碳-碳单键短3）肽键对与其有关的两个氨基酸的α-碳原子来说具有反式构型。4）肽键可以完全自由地旋转
（A）1，2，3 （B）1，2，4 （C）2，3，4 （D）1，2，3，4
17．下面有关蛋白质结构的叙述哪些是正确的？
1）．链间二硫键对于预测蛋白质分子的构象也许是不必要的
2）．带电荷的氨基酸侧链倾向于分子的外部以便与溶剂接触
3）．蛋白质的一级结构在决定高级结构的因素中是相当重要的
4）．具有疏水侧链的氨基酸残基很少埋藏在分子内部，以便保护蛋白质免受水的作用。
（A）1，2，3 （B）2，3，4 （C）1，2，4 （D）1，2，3，4
18．下列几类氨基酸中哪一类只含非必需氨基酸？
A芳香族氨基酸B碱性氨基酸C支链氨基酸D含硫氨基酸E酸性氨基酸
9．已知天门冬氨酸的pKa1=2.09，pKa2=3.86，pKa3= 9.82，下列哪个pH代表天门冬氨酸的等电点（pI）？A2.09 B2.97 C3.86 D6.84 E9.82
20.在pH5的溶液中，精氨酸、赖氨酸和组氨酸的带电状态为：
A净带负电荷B既有正电荷，又有负电荷C不带任何电荷D只带负电荷E只带正电荷
22.含硫的必需氨基酸是
A.半胱氨酸
B.蛋氨酸
C.苏氨酸
D.亮氨酸
E.色氨酸
23.某蛋白质的等电点为7.5，在PH6.0的条件下进行电泳，它的泳动方向是：
（A）原点不动（B）向正极移动（C）向负极移动（D）向下移动（E）无法预测
24.典型的α-螺旋中每圈含氨基酸残基数为：
（A）4.6个（B）3.6个（C）2.6个（D）5.6个（E）10个
30.蛋白质变性时不应出现的变化是（）
A、蛋白质的溶解度降低
B、失去原有的生理功能
C、蛋白质的天然构象破坏
D、蛋白质分子中各种次级键被破坏
E、蛋白质分子中个别肽键被破坏
31.芳香族必需氨基酸包括（）
A、蛋氨酸
B、酪氨酸
C、亮氨酸
D、苯丙氨酸
E、脯氨酸
33.对于蛋白质的溶解度，下列叙述中哪一条是错误的？
A、可因加入中性盐而增高
B、在等电点时最大
C、可因加入中性盐而降低
D、可因向水溶液中加入酒精而降低
E、可因向水溶液中加入丙酮而降低
34.含四个氮原子的氨基酸是（）
A、赖氨酸
B、精氨酸
C、酪氨酸
D、色氨酸
E、组氨酸
35.为获得不变性的蛋白质，常用的方法有（）
A、用三氯醋酸沉淀
B、用苦味酸沉淀
C、用重金属盐沉淀
D、低温盐析
E、常温醇沉淀
37.有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的PI分别为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3电泳
时欲使其中4种泳向正极，缓冲液的pH应该是：
A 5.0
B 4.0
C 6.0
D 7.0
E 8.0
42.可用于测定多肽N端氨基酸的试剂是
A 丹磺酰氯
B β-巯基乙醇
C 溴化氰
D 羟胺
E 甲酸
43.侧链是环状结构的氨基酸是
A Lys B．Tyr C．Val D．I1e E. Asp
44.蛋白质变性是由于
A．蛋白质一级结构改变 B．蛋白质空间构象的改变 C．辅基的脱落D．蛋白质水解 E．以上都不是47.可用于蛋白质定量的测定方法有
A．双缩脲法 B．紫外吸收法 C．Folin—酚试剂法 D凯式定氮法 E．以上都可以
50.维系蛋白质一级结构的化学键是
A．氢键 B．肽键 C．盐键 D疏水键 E范德华力
51.α氨基酸共有的颜色反应是
A.双缩脲反应 B．茚三酮反应 C．坂口反应 D．米伦反应 E．Folin-酚试剂反应
53.蛋白质多肽方向性是
A 从3‘端到5’端
B 从5’端到3’端
C 从C端到N端
D 从N端到C端 E以上都不是
54.下列氨基酸不含极性侧链的是
A．丝氨酸 B．苏氨酸 C．亮氨酸 D．酪氨酸 E．半胱氨酸
55.赖氨酸的pK1为2.18，PK2为8.95，pK R为10.53,其pI是
A．9.74 B 8.35 C 6.34 D 5.54 E 5.27
56.蛋白质分子中的α螺旋和β片层都属于
A一级结构 B二级结构 C．二级结构 D．域结构 E．四级结构
57.下列含有两个羧基的氨基酸是
A．缬氨酸 B．色氨酸 C赖氨酸 D．甘氨酸 E．谷氨酸
58.含有疏水侧链的氨基酸有
A．精酸、亮氨酸 B苯丙氨酸、异亮氨酸 C．色氨酸、精氨酸 D．天冬氨酸、谷氨酸 E蛋氨酸、组氨酸59.组成蛋白质的基本单位是：
A． L-α氨基酸 B. D-α氨基酸 C. L-β氨基酸 D. L，D-α氨基酸 E. D-β氨基酸
60.维持蛋白质二级结构的主要化学键是
A．疏水键 B．盐键 C．肽键 D．氢键 E．二硫键
62.关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是
A．具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 B．天然蛋白质分子均有这种结构
C．三级结构的稳定性主要由次级键维系 D．亲水基团多聚集在三级结构的表面
E．决定盘曲折叠的因素是氨基酸序列
63.关干蛋白质的四级结构正确的是
A一定有多个不同的亚基 B—定有多个相同的亚基 C一定有种类相同，而数目不同的亚基数
D．一定有种类不同，而数目相同的亚基 E．亚基的种类，数目都不定
64.蛋白质的一级结构及高级结构决定于
A.亚基
B.分子中盐键
C.氨基酸组成和顺序 D．分子内部疏水键 E分子中氢键
66.蛋白质的等电点是
A．蛋白质溶液的pH等于7时溶液的pH B．蛋白质溶液的pH等于7．4时溶液的PH
C．蛋白质分子呈负离子状态时溶液的PH D蛋白质分子呈正离子状态时溶液的PH
E．蛋白质的正电荷与负电荷相等时溶液的PH
67.蛋白质溶液的稳定因素是
A．蛋白质溶液的粘度大 B．蛋白质在溶液中有“布朗运动”C．蛋白质分子表面带有水化膜和同种电荷D．蛋白质在溶液中有分子扩散现象 E．蛋白质分子带有电荷
四、判断题
1.纸电泳分离氨基酸是基于它们的极性性质。（）
2.在正常生理条件下，蛋白质中精氨酸和赖氨酸残基侧链几乎完全带负电荷。（
3.半胱氨酸属于含硫的必需氨基酸。（）
4.赖氨酸是必需氨基酸，而粮食中含量甚少，因此，作为食物添加剂，赖氨酸吃得多好。（）
5.蛋白质分子的一级结构决定其高级结构，最早的实验证据是蛋白质的可逆变性（）。
6.符合米-曼氏方程式的酶促化学反应，其最大反应速度不受添加竟争性抑制剂的影响。（）
11.用硫酸盐析出来的蛋白质，经Sephadex G-25层析，由于硫酸先被洗脱下来，从而达于除盐的目的。
12.用重金属盐沉淀蛋白质时，溶液的PH值应稍大于蛋白质的等电点。（）
13.phe-leu-ala-val-phe-leu-lys是一个含有7个肽键的碱性七肽。（）
14.蛋白质分子中所有的氨基酸(除甘氨酸外)都是左旋的。（）
15.自然界的蛋白质和多肽类物质均由L-型氨基酸组成。（）
16.当溶液的pH大于某一可解离基团的pKa值时，该基团有一半以上被解离。（）
18.双缩脲反应是肽和蛋白质特有的反应，所以二肽也有双缩脲反应。（）
19.热力学上最稳定的蛋白质构象自由能最低。（）
20.可用8mol/L尿素拆开蛋白质分子中的二硫键。（）
21.蛋白质的氨基酸顺序(一级结构)在很大程度上决定它的构象(三维结构)。（）
22.变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和以及除去了蛋白质外面的水化层所引起的（×）
25.在水溶液中，蛋白质溶解度最小时的pH值通常就是它的等电点。（）