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RNA疗法:超越RNA干扰和翻译寡糖核酸

RNA疗法:超越RNA干扰和翻译寡糖核酸
RNA疗法:超越RNA干扰和翻译寡糖核酸

RNA疗法:超越RNA干扰和翻译寡糖核酸

摘要:在这里,我们讨论三个以RNA为基础的治疗技术,利用各种寡糖核苷酸在一个特定序列下结合RNA进行碱基配对的效果和行动的不同机制。RNA干扰与反义寡糖核苷酸下调基因表达,诱导依赖酶有针对性地退化RNA的表达,空间阻塞的寡核苷酸阻止细胞器访问mRNA前体和其没有讲解的RNA。通过这一机制,空间阻塞的寡核苷酸可以重新定向剪切,修复有缺陷的RNA,还原蛋白质的合成或下调基因的表达。此外,它们还可以进行广泛的化学修改,用以获取更多类似药物的性质。阻塞的RNA 寡核苷酸还有恢复基因功能的能力,使它们能最好地与遗传疾病的治疗配合。并从临床治疗杜氏肌营养不良症试验取得积极成果,这项技术已经接近实现并有良好临床应用前景。

大多数目前市场上销售的药物是小分子,如酶和受体靶蛋白,它们代表总蛋白的相当小的子集。相比之下,寡核苷酸大分子这一目标前体mRNA表达之前,被翻译成蛋白质的遗传信息。由于基因编码所有细胞的蛋白质,寡核苷酸定位基因可能被证明是有效的。目标是针对不属于现有药物可治疗的疾病。例如,遗传性疾病- 杜氏肌营养不良症(DMD)和脊髓性肌萎缩症(SMA)的(下面讨论)等疾病。这项技术包括以下三种方法,利用核苷酸:RNA 干扰(RNAi),反义寡核苷酸和空间位阻,阻断寡核苷酸。这三种方式涉及的互补结合,通过基本的RNA的寡核苷酸配对,因此所有三种方法本质上都是通过反义机制运作。然而,它们在其下游行动和产生功能性结果的机制却大不相同。

RNA干扰反义寡核苷酸在这里我们就只是简单地讨论,因为它们现在已经应用十分广泛。它们调节基因表达的诱导酶降解目标mRNA并去除致病基因产物,如癌基因或促炎性细胞因子。而作为细胞酶就需要认识到这些反义化合物,它们只能在有限的程度进行化学修改,所以这限制了我们加强他们药理性质的能力。反义化合物,通过阻断访问细胞器的RNA去调节RNA的功能,所以不会导致靶RNA的降解,这也是是本研究的主要焦点。这一行动的不同模式导致了一定的结果,例如修理有缺陷的RNA或一种新蛋白,而使用RNA干扰或反义寡核苷酸就不可能实现。此外,因为非阻塞RNA寡核苷酸的活动不需要利用细胞酶,并且它们可以应用更广泛的化学修饰来改善它们类似药物的性质。

细胞少量摄入RNA干扰,反义寡核苷酸和空间阻断核苷酸是其作为疗法使用的一个主要障碍。这也是抗病毒药物fomivirsen3是目前唯一被批准的反义药物(虽然药物2004年由于药品市场减少被中断)的主要原因。在本次研究中强调化学的最新进展即运用这三种技术的不同特征,改善反义寡核苷酸在细胞内传递。核酸适配体,这是比寡核苷酸结构更加复杂以RNA为基础的药物,并能直接与蛋白质相互作用,而不是与互补的RNA作用,但在本文中不作涉及。

降解靶mRNA的寡核苷酸

RNA干扰首次证实是其在秀丽线虫外源性的传递,双链RNA(dsRNA)通过诱导同源mRNA 的降解有效地抑制一个基因(编码肌丝蛋白质)的表达。介导基因沉默的机制涉及双链RNA 降解成小分子干扰核糖核酸(siRNAs)—21-22个核苷酸长度并与多蛋白RNA诱导的沉默复合体(RISC)交互的双链RNA片段。在RISC中,小分子干扰核糖核酸得到释放,正义链被丢弃,并且反义或导链结合到mRNA。当其目标是完全互补的siRNA,内切酶Argonaute 蛋白2 - RISC的一个组成部分,能从mRNA反义链5'端切割10和11个核苷酸下游。

尽管RNA干扰最初无法在哺乳动物细胞中被检测到。但在后来的研究表明,这些细胞中

缺乏能力把双链RNA切割为siRNA。当合成的siRNA被摄入到体外培养的人体细胞,其可以进入RISC并降解目标mRNA。这一发现导致siRNA的相关研究迅速增加。在2002年,也就是siRNA发现一整年后,siRNA的期刊查询最终被234次引用; 在2002-2010年期间它更是被33009次引用,其中7241次是从2010年起的。值得注意的是,活体实验第一个成功的早在2003年就开展了:在暴发性肝炎得小鼠模型中用裸siRNA抑制FAS的mRNA 表达。在RNAi研究数量增加也是公司创办的结果,如Alnylam制药及siRNA治疗作为一种很有前途的治疗平台专注于发展siRNA的结果。

寡核苷酸诱导基因表达下调的机制:

①小分子干扰核糖核酸(siRNA):合成的双链siRNA与RNA干扰通路组成部分,Dicer 酶,Argonaute蛋白2(AGO2)以及其他蛋白质络合,形成RNA诱导的沉默复合体(RISC)。RISC通过解开siRNA的导链结合目标mRNA,使得AGO2降解RNA。RISC结合的siRNA也可以结合非预期的不匹配mRNA,导致显着的脱靶效应(见正文)。

②反义gapmer寡核苷酸:其通常都有一个有侧翼的硫代骨干,侧翼通常是被2'-O-甲氧基乙基(2'-MOE)或2'-O-甲基(2'-OME)残留物(图中以红色突出显示)修饰的。侧翼的修饰增加了反义寡核苷酸(ASO)降解的阻力,增强与目标mRNA的结合。侧翼是否修改在gapmer-mRNA中由降解双螺旋mRNA的核糖核酸酶H(RNase H)的有无来进行确认。

③抑制翻译的寡核苷酸(TSOs):phosphorodiamidate吗琳低聚物(PMOS)和其衍生物,以及2'-MOE或2'-OME残基完全取代的寡核苷酸都不能检测出RISC或RNase H,因此也就不会导致RNA的降解。然而,它们通过核糖体与mRNA的空间位阻以及抑制蛋白质的翻译导致了基因表达的下调。

④外部引导序列(EGSs)和RNase P.:一种肽类结合的PMO(PPMO)设计用于目标细菌mRNA杂交形成茎环结构等,并由此产生双螺旋的tRNA类似物。在细菌中,一个经加工的tRNA核酶—核糖核酸酶P 可以识别这种结构并酶切mRNA。

寡核苷酸化学:

所有寡核苷酸都是带负电荷的:硫代(PS)的骨干以及2'-O - 甲氧基乙基(2'-MOE)和2'-O-甲基(2'-OME)取代基可以提高抗降解的能力并促进蛋白结合靶RNA。锁核酸(LNA)的修改显着提高寡核苷酸与目标mRNA的结合(见顶部面板)。在phosphorodiamidate吗啉低聚物(PMOS)中,核糖核酸(RNA)或脱氧核糖核酸(DNA)被吗啉环替代,硫代磷酸以及磷酸双酯键(RNA)的群体被带电phosphorodiamidate群体替代,产生了一种十分耐降解的中性化合物(见底部面板)。在带正电的PMOs中的带正电的哌嗪残基(PMOplus)以及在结合肽的PMOs(PPMOs)中带正电的富含精氨酸的多肽,能够显着提高细胞内摄取低聚物。

寡核苷酸诱导的调控基因表达的机制:

①外显子跳跃剪接转换的的寡核苷酸(SSOs):一种化学修饰,阻塞的RNA寡核苷酸定位到在mRNA前体中的剪接位点以及内部外显子剪接的增强剂(ESE),防止外显子上的剪接体的正确组装以及重定向到另一个通路的剪接,并诱导目标外显子的跳跃。这种交替剪接的的mRNA可能会编码具有良好的性能新型蛋白质,且在杜氏肌营养不良症的情况下若外显子跳跃恢复读码框则其可恢复翻译。另外,它可能会改变剪接变异体的替代平衡。而且这些

降解目标mRNA的成果是不能依靠反义寡核苷酸以及小分子干扰RNA来实现的。

②外显子由SSOs保留:一些外显子与mRNA之间剪接不佳是因为它们含有外显子剪接消音器(ESS)元素。SSO旨在阻断ESS与该元素在剪接中的角色之间的干扰,及促进外显子的包容性,在遗传疾病脊髓性肌萎缩的情况下已经被证明。

③正确的剪接的恢复和通过SSOs进行的RNA维修:一个内含子突变可能会创建和/或激活异常剪接位点,从而导致内含子片段被纳入到剪接的mRNA里,在本质上是创建了一个伪外显子并干扰了读码框的翻译。定位异常剪接元素的SSO还原了正确的拼接并允许功能齐全蛋白质的正确翻译。

④三重重复序列上剪接因子的位移:一个在营养不良性肌强直症蛋白激酶(DMPK)mRNA 前体中扩展的三重重复序列(CUGCUGCUG)吸引因为类似盲肌的蛋白质(MBNLs)而被知道的剪接因素,从核质外滴定它们。因此,体内代谢和其他几个mRNA前体并没有被正确加工,从而避免一些蛋白质的翻译以及神经肌肉障碍的强直性肌营养不良症的成因。一种改进的空间阻塞寡核苷酸取代了MBNL,允许其参加适当的mRNA拼接及恢复受影响肌肉的功能。

前景

仅有的两个被批准的核酸类药物已经达到了市场和局部体内注射的要求。这两个药物一个是反义寡核苷酸fomivirsen,一个是RNA 适配体pegaptanib(Macugen药物;辉瑞/ Eyetech 制药)第二个药物在这里并没有讨论。因为这些大极性分子没有遵循利平斯基的规则:经验

规则指出,除等特点,有效的药物总是有分子量低于500达,在极性和非极性溶剂可溶性相当,所以它被认为基于寡核苷酸药物对系统无法生效。虽然寡核苷酸显然不符合这些标准,基于本文上述的一些观点在我们看来这一领域已经处在成功边缘。在现在增强细胞吸收寡核苷酸的新型化学物质尤其被看好。同样,以RNA为基础的疗法潜力很大,迄今已经对影响现有药物无法治疗的疾病有一定的作用。所以这些化合物当然值得我们努力去从中得到有效的药物。

有一个与单克隆抗体的比较很有启发性。这类不遵循利平斯基的规则的寡核苷酸现在全球市场已经超过40亿元,并被用来治疗严重慢性疾病,如癌症,多发性硬化症和类风湿关节炎。特异性识别抗原的单克隆抗体最早产生于1975(注释94),1986年FDA批准了一个单一的单克隆抗体然后在此大约10年后其大量流入了市场。我们相信,寡核苷酸和RNA为基础的疗法很有潜力并能短时间内获得很大的进展。

DNA复制 转录与翻译重要知识汇总

DNA复制、转录与翻译重要知识汇总 ? 今天给同学们汇总的知识是有关生物遗传学中的难点,DNA的复制转录以及翻译,对这部分知识不明白记不住的同学们一定要自己把表里面的内容写一遍,加深记忆哦~ DNA分子的复制、转录、翻译

三者之间的关系 1.过程不同 (1)复制的过程:DNA解旋,以两条链为模板,按碱基互补配对原则,合成两条子链,子链与对应母链螺旋化。(马上点标题下“高中生物”关注可获得更多知识干货,每天更新哟!) (2)转录的过程:DNA解旋,以其一条链为模板,按碱基互补配对原则,形成mRNA单链,进入细胞质与核糖体结合。

(3)翻译的过程:以mRNA为模板,合成有一定氨基酸序列的蛋白质。 2.特点不同 (1)对细胞结构的生物而言,DNA复制发生于细胞分裂过程中,是边解旋边复制,半保留复制。 (2)转录和翻译则发生于细胞分裂、分化等过程。转录是边解旋边转录,DNA双链全保留。转录是以DNA的一条链为模板合成RNA的过程,并不是一个DNA分子通过转录可生成一个RNA分子,实际上,转录是以基因的一条链为模板合成RNA的过程。一个DNA分子上有许多基因,能控制多种蛋白质的合成,所以一个DNA 分子通过转录可以合成多个RNA分子。 (3)一个mRNA分子上可相继结合多个核糖体,同时合成多条相同的肽链,顺次合成多肽链。从核糖体上脱离下来的只是多肽链,多肽链还要在相应的细胞器(内质网、高尔基体)内加工,最后才形成具有一定空间结构的有活性的蛋白质。 3.三者之间的关联要素 (1)DNA中含有T而无U,而RNA中含有U而无T,因此可通过放射性同位素标记T或U,研究DNA复制或转录过程。 (2)复制和转录发生在DNA存在的部位,如细胞核、叶绿体、线粒体、拟核、质粒等部位。同学们比较容易忽视在线粒体和叶绿体中也有少量的DNA存在。这些DNA分子上的基因可以控制部分蛋白质的合成,因此线粒体和叶绿体中也存在转录和翻译所需的酶、核糖体等条件,也会发生转录和翻译过程。 (3)转录出的RNA有3类,mRNA、tRNA和rRNA都是以DNA为模板通过转录合成的。但携带遗传信息的只有mRNA。 (4) DNA复制和转录都需要解旋酶,解旋酶的作用不是解开DNA分子的双链螺旋状态使之成为双链线性状态,而是断裂DNA分子中碱基对之间的氢键,使DNA双链解开成单链,以便作为模板进行复制或转录。 知识点汇总: 1、DNA的结构特点:由两条脱氧核苷酸链按方式盘旋而成的规则的结构。 由和连接,形成 两条链上的碱基通过键形成,即A—T (氢键有个),G—C (氢键有个)。 2、DNA复制 时期:。

磁珠法分离纯化DNA原理及其步骤

磁珠法分离纯化DNA原理及其步骤 日期:2012-05-22 来源:互联网 标签:核酸纯化核酸分离磁珠法纯化DNA 摘要: 磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸,从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了磁珠法纯化DNA原理、核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤。 欢度大力神杯之夏,参与BRAND竞猜活动,获赠BRAND产品! GeneCopoeia:qPCR mix免费试用体验活动开始! 磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸,从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。本文主要概述了磁珠法纯化DNA原理、核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤。 磁珠法纯化DNA原理 磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠,这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团,能同核酸发生吸附反应。硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料,来吸附核酸,其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。离心磁珠是指磁珠微珠表面包裹了一层可发生离心交换的材料(如DEAE,COOH)等,从而达到吸附核酸目的。不同性质的磁珠微珠所对应的纯化原理是不一致。使用磁珠法来纯化核酸的最大优点就是自动化。磁珠在磁场条件下可以发生聚集或分散,从而可彻底摆脱离心等所需的手工操作流程。Omega拥有全面的磁珠法核酸分离试剂盒,基于这种技术的试剂盒,名称前都有’Mag-Bind’。 核酸分离与纯化的原则 核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。核酸的分离主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开。在分离核酸时应遵循以下原则:保证核酸分子一级结构的完整性:排除其他分子污染。 核酸分离与纯化的步骤 大多数核酸分离与纯化的方法一般都包括了细胞裂解、酶处理、核酸与其他生物大分子物质分离、核酸纯化等几个主要步骤。每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现。 1. 细胞裂解:核酸必须从细胞或其他生物物质中释放出来。细胞裂解可通过机械作用、化学作用、酶作用等方法实现。 (1) 机械作用:包括低渗裂解、超声裂解、微波裂解、冻融裂解和颗粒破碎等物理裂解方法。这些方法用机械力使细胞破碎,但机械力也可引起核酸链的断裂,因而不适用于高分子量长链核酸的分离。有报道超声裂解法提取的核酸片段长度从< 500bp ~> 20kb 之间,而颗粒匀浆法提取的核酸一般< 10kb。

鸟病常用药物

鸟病常用药物 土霉素 抗菌谱广,对霍乱、沙门氏菌、大肠杆菌、衣原体等均有疗效。此药毒 性低,安全性好,是观赏笼鸟常用的药物。饲喂治疗是应以0.1克/1 0克。 四环素 抗菌作用与土霉素相似,但对一般细菌的作用稍强于土霉素,特别是对大 肠杆菌和变形杆菌效果更好。 复方新诺明 对付葡萄球菌、大肠杆菌和多杀性巴氏杆菌作用较强。疗效较好。用法用量: 0.01%-0.02%混饲,连用2-7天。 痢特灵 对沙门氏菌、球虫病、大肠杆菌性肠炎有较好疗效,应用较普遍。用法 用量:0.02%-0.04%混饲或0.01%-0.02%混饮,连用3-5天。 制霉菌素 对各种真菌都有抑杀作用,长用于治疗曲霉素菌病、白色念珠菌病和冠

藓等真菌病。口服不容易吸收,多用于体表皮肤或黏膜的真菌性感染。 丙硫苯咪唑 本品是一种广谱、高效、低毒的驱虫剂,安全范围大,对多种成虫、绦虫、吸虫有效果。用法用量: 15-25 毫克 / 千克体重,口服。 \   马拉硫磷 本品的毒性低,对于各种螨类、蜱、虱等体外寄生虫都有良好的杀灭作 用。用法用量: 1.25%喷雾,或用爽身粉配成4% 的浓度撒粉。   除虫菊 本品的毒性低,安全可靠、无残毒,但是作用的时间短,经常用于消灭鸟类的体外寄生虫。用法用量:用 2%-3% 的溶液喷洒。 石腊油 这是滴注肛门或泄殖腔作润滑剂作用的,以治疗便秘或者是难产(蛋阻 留)。

甲醛 就是俗称的 “福尔马林”,杀菌力强,是鸟笼和笼舍的消毒剂,一般配成5%-10%的溶液,可以用作表面消毒,也可以与等量高锰酸钾混合,发烟熏蒸房舍。   鱼肝油 含有维生素 A 、D ,治疗缺乏维生素 A 、D 引起的各种疾病,同时也可以预防软骨病,提高鸟儿的繁殖率。而且没有副作用。 ________________________ _____________ 鸟常用药品的配备 饲养玩赏鸟,应配备一些常用药品,以便日后鸟儿 受伤能及时给于治疗。 酒精:常用70 % 的酒精作消毒用,如创伤消毒。 碘酒:对局部创伤有消毒作用,药效时间长。对蚊子叮咬引起的皮肤红肿发炎有疗效。

常用药品功能主治

常用药品功能主治(配伍禁忌表) 1、注射用辅酶A:用于白细胞减少症、原发性血小板减少性紫癜及功能性低热的辅助治疗。 2、氯丙嗪:用于精神分裂症、躁狂症或其他精神病性障碍。及各种原因所致的呕吐或顽固性呃逆。 3、异丙嗪(又叫非那根):①用于治疗皮肤黏膜的过敏②晕动病③麻醉和术后的辅助治疗④防治放射病性或药源性恶心、呕吐。 4、盐酸奈福泮(又叫悦止):术后止痛、癌症痛、急性外伤痛。局部麻醉、针麻等麻醉辅助用药。 5、三磷酸胞苷二钠:用于颅脑外伤后综合症及其遗症的辅助治疗。 6、盐酸川芎嗪:用于闭塞性脑血管疾病,如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞等。 7、氢溴酸高乌甲素:用于中度以上疼痛。 8、盐酸甲氧氯普胺(又叫胃复安):镇吐药 9、尼可刹米(又叫可拉明):用于中枢性呼吸抑制及各种原因引起的呼吸抑制。 10、利巴韦林(又叫病毒唑):抗病毒药。 11、地西泮(安定):①可用于抗癫痫和抗惊厥②静注

可用于全麻的诱导和麻醉前给药。 12、重酒石酸间羟胺注射液:①防治椎管内阻滞麻醉时发生的急性低血压②用于出血、药物过敏、手术并发症及脑外伤或脑肿瘤合并休克而发生的低血压③心源性休克或败血症所致的低血压 13、盐酸肾上腺素注射液(又叫付肾):主要适用于因支气管痉挛所致严重呼吸困难,可迅速缓解药物等引起的过敏性休克,亦可用于延长浸润麻醉用药的作用时间。 14、苯巴比妥钠注射液(又叫鲁米那):治疗癫痫,也用于其他疾病引起的惊厥及麻醉前给药。 15、黄体酮注射液:用于月经失调,如闭经和功能性子宫出血、黄体功能不足、先兆流产和习惯性流产、经前期紧张综合症的治疗。 16、盐酸苯海拉明:用于急性重症过敏反应、手术后药物引起的恶心呕吐、牙科局麻、其他过敏反应病不宜口服用药者。 17、异烟肼注射液:与其他结核药联合用于各种类型结核病及非结核分支杆菌病的治疗。 18、硫酸阿托品注射液:①各种内脏绞痛②全身麻醉前给药、严重盗汗和流涎症③迷走神经过度兴奋所致的缓慢性心失常④抗休克⑤解救有机磷酸酯类中毒。

常用药品功能 中 大

常用药品功能中大 1、注射用辅酶A:用于白细胞减少症、原发性血小板减少性紫癜及功能性低热的辅助治疗。 2、氯丙嗪:用于精神分裂症、躁狂症或其他精神病性障碍。及各种原因所致的呕吐或顽固性呃逆。 3、异丙嗪(又叫非那根):①用于治疗皮肤黏膜的过敏②晕动病③麻醉和术后的辅助治疗 ④防治放射病性或药源性恶心、呕吐。 4、盐酸奈福泮(又叫悦止):术后止痛、癌症痛、急性外伤痛。局部麻醉、针麻等麻醉辅助用药。 5、三磷酸胞苷二钠:用于颅脑外伤后综合症及其遗症的辅助治疗。 6、盐酸川芎嗪:用于闭塞性脑血管疾病,如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞等。 7、氢溴酸高乌甲素:用于中度以上疼痛。 8、盐酸甲氧氯普胺(又叫胃复安):镇吐药 9、尼可刹米(又叫可拉明):用于中枢性呼吸抑制及各种原因引起的呼吸抑制。 10、利巴韦林(又叫病毒唑):抗病毒药。 11、地西泮(安定):①可用于抗癫痫和抗惊厥②静注可用于全麻的诱导和麻醉前给药。 12、重酒石酸间羟胺注射液:①防治椎管内阻滞麻醉时发生的急性低血压②用于出血、药物过敏、手术并发症及脑外伤或脑肿瘤合并休克而发生的低血压③心源性休克或败血症所致的低血压 13、盐酸肾上腺素注射液(又叫付肾):主要适用于因支气管痉挛所致严重呼吸困难,可迅速缓解药物等引起的过敏性休克,亦可用于延长浸润麻醉用药的作用时间。 14、苯巴比妥钠注射液(又叫鲁米那):治疗癫痫,也用于其他疾病引起的惊厥及麻醉前给药。 15、黄体酮注射液:用于月经失调,如闭经和功能性子宫出血、黄体功能不足、先兆流产和习惯性流产、经前期紧张综合症的治疗。 16、盐酸苯海拉明:用于急性重症过敏反应、手术后药物引起的恶心呕吐、牙科局麻、其他过敏反应病不宜口服用药者。 17、异烟肼注射液:与其他结核药联合用于各种类型结核病及非结核分支杆菌病的治疗。 18、硫酸阿托品注射液:①各种内脏绞痛②全身麻醉前给药、严重盗汗和流涎症③迷走神经过度兴奋所致的缓慢性心失常④抗休克⑤解救有机磷酸酯类中毒。 19、复方樟柳碱注射液:用于缺血性视神经、视网膜、脉络膜病变。 20、注射用盐酸赖氨酸:治疗颅脑外伤、慢性脑组织缺血、缺氧性疾病的脑保护剂。 21、注射用单硝酸异山梨酯:治疗心绞痛,与洋地黄或利尿剂合用治疗慢性心力衰竭。 22、碳酸氢钠注射液:①治疗代谢性酸中毒②碱化尿液③作为制酸药,治疗胃酸过多引起的症状④静脉滴注对某些药物中毒有非特异性的治疗作用,如巴比妥类、水杨酸类药物及甲醇等中毒。 23、硫酸镁注射液:可作为抗惊厥药。常用于妊娠高血压,治疗先兆子痫和子痫,也用于治疗早产。口服具有导泻作用。 24、维生素C注射液:①治疗坏血病②慢性铁中毒③特发性高铁血红蛋白症的治疗。 25、胞磷胆碱氯化钠(又叫胞二磷):辅酶。用于急性颅脑外伤和脑手术后意识障碍。 26、过氧化氢溶液:消毒防腐药。

磁珠法基因组DNA 提取试剂盒 (细胞)

磁珠法基因组DNA 提取试剂盒(细胞) 样本前处理:细胞用PBS洗两次后,6000rpm/min 离心3min,弃上清,加入500ul Buffer CGP重悬沉淀,12000rpm/min离心1min,弃上清,取沉淀备用。2.裂解结合:在细胞沉淀中,加入500μLBuffer CGL,室温放置5-10min,再加入500μl异丙醇和30ul磁珠悬浮液(MB) (使用前充分重悬),颠倒混匀,室温放置5min(期间不时颠倒混匀);将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。3.漂洗:(1)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer CGW 0,涡旋振荡5s,重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体,重复该步骤1次。 (2)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer CGW I,涡旋振荡5s,重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。重复该步骤一次,待磁珠完全吸附后吸弃液体(液体一定要弃尽,不然残留会影响下游实验),晾干2min。 实验准备 56°C加热源磁珠用前一定要充分混匀;使用前需在Buffer CGW I中加入相应体积的无水乙醇。 4.洗脱:将离心管从磁力架上取下加入50-100μl Buffer EB ,涡旋振荡结合移液器吹打,充分吹散磁珠(一定要完全吹散磁珠,若未充分重悬会影响DNA 得率),56°C 放置5min(每隔2min振荡混匀重悬磁珠),置于磁力架上,将上清DNA转移至一新的离心管中,放入-20 °C保存备用,保质期为2 年。 纯度效果评价通过测定洗脱液中DNA的A260来确定RNA产量,通常情况下A260值在0.1~1.0之间数据比较可信。如果不在此范围内,请稀释或浓

常用药名及作用

所有注射针剂名称(学名)及用途 1、注射用辅酶A:用于白细胞减少症、原发性血小板减少性紫癜及功能性低热的辅助治疗。 2、氯丙嗪:用于精神分裂症、躁狂症或其他精神病性障碍。及各种原因所致的呕吐或顽固性呃逆。 3、异丙嗪(又叫非那根):①用于治疗皮肤黏膜的过敏②晕动病③麻醉和术后的辅助治疗 ④防治放射病性或药源性恶心、呕吐。 4、盐酸奈福泮(又叫悦止):术后止痛、癌症痛、急性外伤痛。局部麻醉、针麻等麻醉辅助用药。 5、三磷酸胞苷二钠:用于颅脑外伤后综合症及其遗症的辅助治疗。 6、盐酸川芎嗪:用于闭塞性脑血管疾病,如脑供血不足、脑血栓形成、脑栓塞等。 7、氢溴酸高乌甲素:用于中度以上疼痛。 8、盐酸甲氧氯普胺(又叫胃复安):镇吐药 9、尼可刹米(又叫可拉明):用于中枢性呼吸抑制及各种原因引起的呼吸抑制。 10、利巴韦林(又叫病毒唑):抗病毒药。 11、地西泮(安定):①可用于抗癫痫和抗惊厥②静注可用于全麻的诱导和麻醉前给药。 12、重酒石酸间羟胺注射液:①防治椎管内阻滞麻醉时发生的急性低血压②用于出血、药物过敏、手术并发症及脑外伤或脑肿瘤合并休克而发生的低血压③心源性休克或败血症所致的低血压 13、盐酸肾上腺素注射液(又叫付肾):主要适用于因支气管痉挛所致严重呼吸困难,可迅速缓解药物等引起的过敏性休克,亦可用于延长浸润麻醉用药的作用时间。 14、苯巴比妥钠注射液(又叫鲁米那):治疗癫痫,也用于其他疾病引起的惊厥及麻醉前给药。 15、黄体酮注射液:用于月经失调,如闭经和功能性子宫出血、黄体功能不足、先兆流产和习惯性流产、经前期紧张综合症的治疗。 16、盐酸苯海拉明:用于急性重症过敏反应、手术后药物引起的恶心呕吐、牙科局麻、其他过敏反应病不宜口服用药者。 17、异烟肼注射液:与其他结核药联合用于各种类型结核病及非结核分支杆菌病的治疗。 18、硫酸阿托品注射液:①各种内脏绞痛②全身麻醉前给药、严重盗汗和流涎症③迷走神经过度兴奋所致的缓慢性心失常④抗休克⑤解救有机磷酸酯类中毒。 19、复方樟柳碱注射液:用于缺血性视神经、视网膜、脉络膜病变。 20、注射用盐酸赖氨酸:治疗颅脑外伤、慢性脑组织缺血、缺氧性疾病的脑保护剂。 21、注射用单硝酸异山梨酯:治疗心绞痛,与洋地黄或利尿剂合用治疗慢性心力衰竭。 22、碳酸氢钠注射液:①治疗代谢性酸中毒②碱化尿液③作为制酸药,治疗胃酸过多引起的症状④静脉滴注对某些药物中毒有非特异性的治疗作用,如巴比妥类、水杨酸类药物及甲醇等中毒。 23、硫酸镁注射液:可作为抗惊厥药。常用于妊娠高血压,治疗先兆子痫和子痫,也用于治疗早产。口服具有导泻作用。 24、维生素C注射液:①治疗坏血病②慢性铁中毒③特发性高铁血红蛋白症的治疗。 25、胞磷胆碱氯化钠(又叫胞二磷):辅酶。用于急性颅脑外伤和脑手术后意识障碍。

药品名称

【药品名称】牛黄上清胶囊【汉语拼音】Niuhuang Shangqing Jiaonang 【药物组成】牛黄、薄荷、菊花、荆芥穗、白芷、川芎、栀子、黄连、黄柏、黄芩、大黄、连翘、赤芍、当归、地黄、桔梗、甘草、石膏、冰片。辅料为【性状】本品为色的胶囊剂,内容物为棕黄色至深棕色粉末;气芳香,味苦。【作用类别】本品为头痛类非处方药药品。【功能与主治】清热泻火,散风止痛。用于头痛眩晕,目赤耳鸣,咽喉肿痛,口舌生疮,牙龈肿痛,大便燥结。【药理作用】经动物试验表明本品具有镇痛、轻泻、抗炎作用。另外还有一定的解热效应。【用法用量】口服,一次3粒,一日2次。【贮藏条件】密封防潮。【规格】每粒装0.3克 品名:心可舒胶囊汉语拼音:Xinkeshu Jiaonang 【剂型】胶囊剂【成分】丹参、葛根、三七、木香、山楂。【性状】药品为胶囊剂,内容物为棕色的粉末;气微,味酸、涩。【药理毒理】药理作用:主要有耐缺氧,防止血栓形成,保护心肌缺血,降压扩张血管,降低胆固醇等作用。【功能主治】活血化瘀,行气止痛。用于气滞血瘀型冠心病引起的胸闷、心绞痛、头晕、头痛、颈项疼痛及心律失常、高血脂等症。【用法用量】口服,一次数4粒,一日3次,或遵医嘱。【注意事项】心阳虚患者不宜用。【规格】每粒装0.3克 【名称】血栓通注射液【别名】田七人参注射液 ,血栓通注射液【性状】本品为淡黄色至黄色的澄明液体。【功用】可扩张血管,改善血液循环。用于各种血管性和出血性疾病、脑血管病及其后遗症、视网膜中央静脉与动脉阻塞、视网膜血管炎、糖尿病视网膜病变、老年性黄斑变性,眼内出血及其他眼底病。【规格】针剂:150mg。【不良反应】偶有过敏反应,如皮疹等。用法用量静脉滴注:一次150-300mg,用10%葡萄糖注射液250~500ml稀释后使用,一日1~2次。 复方氨酚烷胺片 适应症适用于缓解普通感冒及流行性感冒引起的发热、头痛、四肢酸痛、打喷嚏、流鼻涕、鼻塞、咽痛等症状。 用法用量口服。成人,一次1片,一日2次。百科名片复方氨酚烷胺片(Compound Paracetamol and Amantadine Hydrochloride Tablets)商品名感康,是西药化学药品,副作用小,用于治疗流行感冒。 【药品名称】香连胶囊【药物组成】黄连(吴茱萸制)、木香。辅料为【性状】本品为色胶囊剂,内容物为黄色至棕色粉末;气焦香,味苦。【功能与主治】清热燥湿,行气止痛。用于泄泻腹痛,便黄而粘。【用法用量】口服,一次2-3粒,一日2次。【注意事项】1.孕妇慎用。2.忌食辛辣,油腻食物。3.按照用法用量服用,小儿及年老体虚者应在医师指导下服用。4.服药三天后症状未改善,应去医院就诊。

【CN109609346A】一种基于磁珠法核酸提取的方法及设备【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910114530.1 (22)申请日 2019.02.14 (71)申请人 盈开生物科技(上海)有限公司 地址 201100 上海市闵行区莘福路388号1 幢237室 (72)发明人 谢仁祥 吴应光  (74)专利代理机构 北京盛凡智荣知识产权代理 有限公司 11616 代理人 高志军 (51)Int.Cl. C12M 1/00(2006.01) C12N 15/10(2006.01) (54)发明名称一种基于磁珠法核酸提取的方法及设备(57)摘要本发明公开一种基于磁珠法核酸提取的方法及设备,所述核酸提取的方法包括以下几个步骤:(1)将提取模块上端接一个快换头,再将套管接在提取模块下端,将提取模块的无线充电模块停放在无线充电处充电备用;(2)使用机械臂去取提取模块;(3)将套管伸入样本中,打开提取模块的振动电机,将样本与磁珠混匀,一段时间后使核酸与磁珠尽可能吸附后关闭,然后打开电磁铁,将带有核酸的磁珠吸附在套管表面;(4)将提取模块伸入目标管内,关闭电磁铁,磁珠脱落,再打开振动电机,将磁珠与洗涤液混匀,最后洗脱完成整个核算的提取过程。省去了额外的机械夹爪等设备,小巧轻便,节省了核酸提取的时间,效 率大大提高。权利要求书1页 说明书2页 附图1页CN 109609346 A 2019.04.12 C N 109609346 A

权 利 要 求 书1/1页CN 109609346 A 1.一种基于磁珠法核酸提取的方法及设备,其特征在于,所述核酸提取的设备包括:快换头(1),所述快换头(1)连接机械臂和提取模块(8),所述提取模块(8)包括:上端的无线充电模块(4),所述无线充电模块(4)下方连接电路板(2),所述该电路板(2)下方连接振动电机(5),所述振动电机(5)下方连接电磁铁(3),所述电磁铁(3)外侧套设套管(6); 所述核酸提取的方法包括以下几个步骤: (1)将提取模块(8)上端接一个快换头(1),再将套管(6)接在提取模块(8)下端,将提取模块(8)的无线充电模块(4)停放在无线充电处充电备用; (2)使用机械臂去取提取模块(8); (3)将套管(6)伸入样本中,打开提取模块(8)的振动电机(5),将样本与磁珠混匀,一段时间后使核酸与磁珠尽可能吸附后关闭,然后打开电磁铁(3),将带有核酸的磁珠吸附在套管(6)表面; (4)将提取模块(8)伸入目标管内,关闭电磁铁(3),磁珠脱落,再打开振动电机(5),将磁珠与洗涤液混匀,最后洗脱完成整个核算的提取过程。 2

常用西药治疗功效简介 大全

中药大全是由中药学专家、中国老教授协会医药专业委员会理事、北京老医药卫生工作者协会药学委员会理事崔树德主编的中药学专著。中药分为很多种,有补气的、补血的等等。中药品种多了,自然个各种药的作用也都不一样了 哪些药物不能用药水送服柠檬小城给生活加点 酸

南岸区书记被调查 iPhone成富人泄欲工 具影响容貌的6个瑕疵 《中药大全》是由中药学专家、中国老教授协会医药专业委员会理事、北京老医药卫生工作者协会药学委员会理事崔树德主编的中药学专著,由黑龙江科学技术出版社出版,已向全国发行,各地新华书店有售。因其内容丰富,既有传统医药学术实践经验;又有现代科学技术实验。论述精炼、丰富详实。主要内容有:中医药发展简史;中医药基本理论;中药的科属、产地、采集、命名、真伪优劣鉴别;炮制加工、功能主治;临床应用、配伍、剂量、中药饮片调剂、煎药规程;中药化学成分、药理实验;中药剂型、中成药配制、辨证论治合理应用;毒剧中药品种和管理法规;中药材、中成药库存保管养护;中药药性歌括、药斗排列等……收载中药千余种;中成药500余种;常用中药方剂千首。是现今书市上内容最为丰富、最为实用的大型工具书之一。可作为中药厂、中药店、医疗单位中药房、医药院校以及中医工作者学习必备参考书;并可作为图书馆、医药资料中心藏书之一以及广大医药爱好者的学习资料;广大患者可用此书对症查询有关药物的适应症、治疗、保健、用法、用量等有关知识。 中药分为很多种,有补气的、补血的等等。中药品种多了,自然个各种药的作用也都不一样了。下面小编为大家介绍一部分中药的的作用。详细可以参考《中药大全》。 1、补气药

【黄芪】 补气升阳:用于脾肺气虚所致的倦怠乏力,气短多汗,便溏腹泻及中气下陷、脱肛等。 固气益表:用于虚汗证。 托毒生肌:用于气血不足,疮痈脓成不溃或溃不收口。 利水消肿:用于气虚脾弱,水肿,小便不利等。 【白术】 补脾益气:用于脾胃气虚,运化失常所致的纳少、气短、脘腹虚胀、倦怠便溏等。 燥湿利水:用于水肿和痰饮。 固表止汗:用于表虚自汗。 【山药】 补脾益胃:用于脾胃虚弱,食少倦怠,便溏久泻,小儿疳积及脾虚白带等。养肺固肾:用于肺虚喘咳、虚痨痰嗽等。 【甘草】 益气补中:用于心气虚,心悸怔忡,脉结代及脾胃气虚,倦怠乏力等。 清热解毒:用于痈组疮疡、咽喉肿痛等。 祛痰止咳:用于气喘咳嗽。 缓急止痛:用于胃痛、腹痛及腓肠肌挛急疼痛等。

临床药物治疗学复习提纲(免费)

人民卫生出版社《临床药物治疗学》考试复习提纲 总论部分 1. 药物:用于预防、治疗、诊断疾病,并规定有适应症或功能主治、用法用量的物质。 2. 药物治疗学:主要是研究药物预防、治疗疾病的理论和方法的一门科学。 3. 药物治疗的一般原则:药物治疗时,应遵循必要性、有效性、安全性、经济性、规范性的原则。 4. 药物治疗方案的制定原则:安全、有效、经济、方便。 5. (简答)如何理解药物治疗的必要性原则:①药物治疗是临床上最常用、最基本的治疗手段,往往具有其他治疗手段不可替代的作用。即使是以局部病变为特征的外科系统疾病,在手术治疗、放疗等非药物治疗的同时也往往需联合用药来提高疗程或防治并发症。②对于具体患者,需要权衡利弊,使患者接受药物治疗的预期获益大于药物可能对机体造成的伤害。 ③需确定适当的剂量、疗程与给药方案,才能是药物的作用发挥得当。 6. (简答)影响药物治疗有效性的因素:①药物方面因素:药物的生物学特性、药物的理化性质、剂型、剂量、给药途径、药物之间的相互作用。②机体方面因素:患者年龄、体重、性别、精神状态、病理状态、遗传特征、生物节律。③药物治疗的依从性。 7. 药物治疗的依从性:患者遵从医嘱或治疗建议的程度。 8. 处方:由取得了处方权的医师在治疗活动中为患者开具的、由药学专业技术人员审核、调配、核对,并作为发药凭证的医疗文书。 9. 药物治疗窗:产生最小治疗效应的血药浓度与出现机体能耐受的不良反应时的血药浓度之间的药物浓度范围。 10. 药物不良反应(ADR)合格药品在正常用法用量下出现的与用药目的无关的或意外的有害反应,排除用药过量、用药不当所致的药物反应。 11. A、B型不良反应比较: 类型 剂量相关性 发现时间 发生频率

妇科常用中成药

妇科常用中成药 龙血竭胶囊 血竭性平,味甘咸,无毒,入血分,归心、肝二经,有活血化瘀、祛腐生肌、养血生血、消肿定痛、止血敛疮等功效,被誉为“活血圣药”。 【成份】龙血竭。辅料为硬脂酸镁、白炭黑。 【作用类别】本品为骨伤科软组织扭挫伤类非处方药药品。 【功能主治】活血散瘀,定痛止血,敛疮生肌。用于跌打损伤,瘀血作痛。 【用法用量】口服,一次4~6粒,一日三次;外用,取内容物适量,敷患处或用酒调敷患处。 艾附暖宫丸 【成份】艾叶(炭),香附(醋制),吴茱萸(制),肉桂,当归,川芎,白芍(酒炒),地黄,黄芪(蜜炙),续断。 【性状】为深褐色至黑色的小蜜丸或大蜜丸;气微,味甘而后苦,辛。【功能主治】理气补血,暖宫调经。用于子宫虚寒,月经不调,经来腹痛,腰酸带下。 【适应症状】痛经。 【作用说明】主要有调节子宫平滑肌,抑菌等作用。 【用法用量】口服。蜜丸:一日1丸,一日2次。 【规格】大蜜丸每丸重9克。 八珍益母丸

【处方组成】益母草,党参,白术(炒),茯苓,甘草,当归,白芍(酒炒),川芎,熟地黄。 【性状】为棕黑色的水蜜丸,小蜜丸或大蜜丸;微有香气,味甜而微苦。 【功能主治】补气血,调月经。用于妇女气血两虚,体弱无力,月经不调。 【适应症状】月经不调。 【作用说明】主要有扩张血管,抑制血小板聚集,刺激网状内皮系统吞噬功能,兴奋子宫等作用。 【用法用量】口服。蜜丸:一次1丸,一日2次。 【规格】大蜜丸每丸重9克。 田七痛经胶囊 通则不痛寒则温调虚则补之 【性状】本品为胶囊剂,内容物为浅灰黄色的粉末;气微香,味微甘。【成份】三七、延胡索、小茴香、五灵脂、川芎、冰片、蒲黄、木香,辅料为二氧化硅。 【作用类别】本品为痛经类非处方药药品 【功能主治】通调气血,止痛调经。用于经期腹痛及因寒所致的月经失调。 【用法用量】口服,经期或经前5天一次3~5粒,一日2~3次。【规格】每粒装0.4克 大黄庶虫丸 Dahuang Zhechong Wan

磁珠法核酸分离技术概况

磁珠法核酸分离技术概况 传统的核酸分离技术包含沉淀,离心等过程,这些纯化方法的步骤繁杂、费时长、收率低,接触有毒试剂,很难实现自动化操作;而采用磁性微球做载体进行核酸分离技术就能很好地克服这些缺点,实现样品的快速、高效制备,是未来核酸纯化方法发展的一个重要方向。 一、磁珠法提取核酸简介 磁珠法提取核酸是通过细胞裂解液裂解细胞,从细胞中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,而蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。反应一定时间之后,再在磁场作用下,使磁性颗粒与液体分开,回收颗粒(即磁珠-DNA 混合物),再用洗脱液洗脱即可以得到纯净的DNA。 磁珠法不需要离心、不需要加入多种试剂,操作简单,符合核酸自动化提取要求,是未来核酸纯化方法发展的一个重要方向。 二、技术路线简易流程 样品裂解—磁珠与待分离DNA特异性结合—磁珠-DNA混合物的洗涤—磁珠与待分离DNA的洗脱分离(即结合-洗涤-洗脱三步)。 细胞裂解后,向裂解液中加入磁珠,当溶液的PH值小于6.5时,磁珠选择性的与优化的DNA结合,此时将吸附有DNA的磁珠置于磁场中,通过缓冲液去除没有被吸附的杂质(蛋白等),然后将磁珠置于PH值8.5的缓冲液中,纯化的DNA即可进入缓冲液中。 三、优点 配合微纳米磁珠核酸提纯试剂,优化样品回收和提纯效果,直接用于后续实验。 1、自动化操作保证了实验结果稳定,避免人工操作引起的差异及错误。 2、自动化操作系统,严格控制孔孔之间污染,避免操作人员的污染和被污染。 四、临床应用 乙肝、丙肝、艾滋病、流行性病毒、感染性疾病等。

下图是国外kingfisher磁珠法核酸提取技术原理图,供参考。

常用中成药说明书

安神补心片 [药品成分]:丹参、五味子(蒸)、石菖蒲、合欢皮、菟丝子、墨旱莲、女贞子(蒸)、首乌藤、地黄、珍珠母。 【性状】本品为薄膜衣片,除去包衣显示棕褐色;味涩、微酸。 【功能主治】养心安神。用于心血不足引起的心悸失眠,头晕耳鸣。 【用法用量】口服,一次5片,一日3次。 【禁忌】孕妇、哺乳期妇女禁用。 八珍颗粒 【规格】每袋装 (l)8g (2)3.5g(无糖型) 【贮藏】密封,防潮,避热。 党参 60g 白芍(炒) 60g 白术(炒) 60g 熟地黄 908 茯苓 60g 当归 90g 川芎 45g 甘草(炙) 30g 功能与主治补气益血。用于气血两亏,面色萎黄,食欲不振,四肢乏力,月经过多。 【用法与用量】开水冲服,一次1袋,一日2次 八正胶囊 【功效】八正胶囊;清热、利尿、通淋。用于湿热下注,小便短赤,淋沥涩痛,口燥咽干等症. 【主要成分】栀子、车前子(炒)、瞿麦、匾蓄、滑石、大黄、川木通、灯心草、甘草。 【性状】本品为胶囊剂,内容物为棕褐色粉末;气微,味苦。 【适应症】清热、利尿、通淋。用于湿热下注,小便短赤,淋沥涩痛,口燥咽干等症。 【用法用量】口服,一次4粒,一日3次。 【药理毒理】药理作用:抗炎试验显示,本品可一直二甲苯所致小鼠的耳肿胀;抑制小鼠毛细血管通透性的增加。利尿试验显示,本品可增加正常大鼠和家兔的

排尿量。 百乐眠胶囊 【成份】百合、刺五加(生)、首乌藤、合欢花、珍珠母、石膏、酸枣仁、茯苓、远志、玄参、地黄(生)、麦冬、五味子、灯心草、丹参、辅料为淀粉【作用类别】本品为内科不寐类非处方药药品。 【适应症】滋阴清热,养心安神。用于肝郁阴虚型失眠症,症见入睡困难、多梦易醒、醒后不眠、头晕乏力、烦躁易怒、心悸不安等。 【用法用量】口服,一次4粒,一日2次,14天为一疗程。 【注意事项】 1、哺乳期妇女慎用。 2、不宜与葱、姜、大蒜、辣椒、海腥发物及寒凉等刺激性食物同服。 柏子养心丸 【用法与用量】口服,水蜜丸一次6g,小蜜丸一次9g,大蜜丸一次1 丸,一日 2次。 【规格】大蜜丸每丸重9g 功能与主治补气,养血,安神。用于心气虚寒,心悸易惊,失眠多梦,健忘。药理作用,主要有镇静、催眠、抗惊厥等作用。 板蓝根颗粒 成份板蓝根。辅料为蔗糖、糊精。 功能主治清热解毒,凉血利咽。用于肺胃热盛所致的咽喉肿痛、口咽干燥;急性扁桃体炎、腮腺炎见上述证候者。 【用法用量】开水冲服。一次半袋~1袋(含蔗糖),一日3~4次。 【药物相互作用】如与其他药物同时使用可能会发生药物相互作用,详情请咨询医师或药师。

用磁珠法来提取核酸中使用的裂解液的作用原理分析

磁珠法核酸提取裂解液的作用原理 文章来源:洛阳吉恩特生物科技有限公司 磁珠法核酸提取是以纳米生物磁珠为载体的一种新型核酸提取技术,核酸分子可与磁珠表面的硅羟基发生特异性识别与结合,在外部磁场的作用下发生聚集或分散,彻底摆脱传统核酸提取过程中离心、抽取上清液等手工操作流程,从而实现核酸的自动化提取。广泛应用于临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等多种领域。 磁珠法核酸提取一般包括裂解、结合、洗涤、洗脱四个主要步骤,每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现,其中裂解环节是决定提取之质量的重中之重,经常也会有老师问到应该如何对裂解液进行优化。那么,我们就来分析一下配置裂解液经常用的试剂及其作用原理。 1、盐酸胍、尿素 盐酸胍在浓度为4-8mol时可断裂氢键,有两种可能机制:1、变性蛋白和盐酸胍、尿素优先结合,形成变性蛋白-变性剂复合物,当复合物被除去,引起N-D 反应平衡向右移动,随着变性剂浓度增加,天然状态的蛋白不断转变为复合物,最终导致蛋白质完全变性;2、盐酸胍、尿素对氨基酸具有增溶作用,能形成氢键,当浓度高时,能破坏水的氢键结构,成为非极性残基的较好溶剂,使蛋白质内部的疏水残基伸展和溶解性加强,盐酸胍、尿素引起的蛋白变性往往是不可逆的。 同时盐酸胍是一个核酸酶的强抑制剂,但并不是一种足够强的变性剂,可以允许完整的RNA从富含RNase的组织中提取出来。高浓度尿素同样可以使蛋白质变性并抑制Rnase活性。 2、异硫氰酸胍 蛋白质变性剂,能迅速溶解蛋白质,导致细胞结构破碎,核蛋白由于其二级结构的破坏消失而迅速与核酸分离。在通常使用的蛋白质变性剂中作用最强的是异硫氰酸胍,它们可以使多数蛋白质转换成一种随机的卷曲状态。含有强力的阴离子和阳离子基团,它们可以形成较强的氢键。在还原剂存在的情况下,异硫氰酸胍可以断裂氢键,而去垢剂,如SDS存在的情况下,可以破坏疏水作用。

临床常用药物大全

第一章.消化系统疾病常用药物 第一节抗酸药:是一类弱碱性物质,口服能中和胃酸 碳酸氢钠:0.5g/片 【适应病症】:治疗胃酸过多,代谢性酸中毒及高钾血症。 【用法】:餐前服用。 【注意事项】:静脉滴注时应防止渗漏,应注意给药速度,5%碳酸氢钠为高张性溶液,滴注过快会抑制心脏,使血压骤降,不利于心脏复苏;对血钾过低者不宜立即应用,忌与酸性药物配伍,除普鲁卡因胺外,不宜与其他常用的心肺复苏药物合用;口服易产生CO2,将要穿孔的溃疡患者忌用。 【不良反应】:引起继发性胃酸分泌过多。用量过大可致碱中毒。 铝碳酸镁(胃达喜):500mg/片 【适应病症】:治疗消化性溃疡,胃炎。 【用法】:每次1~2片,3 次/日,餐后1~2小时或睡前咀嚼服用。 【注意事项】:大剂量服用可能有胃肠道不适,如消化不良和软糊状便,肾功能不全者长期服用应定期监测血中的铝含量,可影响四环素、环丙沙星、氧氟沙星的吸收。 【不良反应】:本药不良反应少而轻微,仅少数患者有胃肠道不适、消化不良、呕吐、大便次数增多或糊状大便,个别有腹泻。 磷酸铝(洁维乐凝胶):20g/包 【适应病症】:治疗消化性溃疡,胃炎,食管炎,胃酸过多等 【用法】:用前先摇匀,挤出凝胶直接服用,也可就水服用,成人每天2次,每次1包【注意事项】:每袋磷酸铝凝胶含蔗糖2.7g,糖尿病患者使用本品时,不超过1袋。慢性肾功能衰竭患者禁用,高磷血症禁用。对卧床不起或老年患者,有时会有便秘现象,此时可采用灌肠法。 【不良反应】:可见恶心、呕吐、便秘、大剂量可致肠梗阻;长期服用可致骨软化、脑病、痴呆及小红细胞性贫血,本品可影响某些药物的吸收。 大黄苏打:0.3g/片 【适应病症】:有健胃、制酸作用,用于食欲不振、消化不良、胃酸过多。 【用法】:每次1~3片,3 次/日 【注意事项】:①不宜与胃蛋白酶合剂、维生素等酸性药物合用。②密闭阴暗贮藏,否则逐渐变质,一部分碳酸氢钠变为碳酸钠。 【不良反应】:口服后可能因产生大量二氧化碳而使胃扩张,并刺激溃疡。 第二节H2受体阻断剂:可拮抗组胺引起的胃酸分泌

常用药品的功能主治

盛年不重来,一日难再晨。及时宜自勉,岁月不待人。 常用药品基本知识 1、复方丹参滴丸180*27mg 天津天士力 功能主治:活血化瘀、理气止痛,用于气滞血瘀所致的胸痹,症见胸闷、心前区刺痛,冠心病心绞痛见上述症候者。 用法用量:口服或舌下含服,一次10粒,一日三次,或遵医嘱。 禁忌:孕妇慎用。 2、阿胶块250g 山东东阿 功能主治:补血滋阴,润燥,止血。用于血虚萎黄,眩晕心悸,心烦不眠,肺燥咳嗽。 用法用量:烊化兑服,3~9克,每天2次 3、山香圆片(山香) 0.5g*27p 青峰医药 功能主治:清热解毒,利咽消肿。用于肺胃热盛,咽炎,急性扁桃体炎,咽喉肿痛。 用法用量:口服,一次2~3片,一日3~4次,小儿酌减。 4、健胃消食片8s*4板江西江中制药 功能主治:健胃消食,用于脾胃虚热所致的食积、症见不思饮食,嗳腐酸臭,脘腹胀满,消化不良见上述症候者。 用法用量:口服,可以咀嚼。每次3片,每日3次。小儿酌减。 5、硫酸氢氯吡格雷片(波立维) 75mg*7 杭州赛诺菲安万特民生制药 功能主治:预防和治疗因血小板高聚集状态引起的心、脑及其它动脉的循环障碍疾病 用法用量:口服,可与食物同服也可单独服用。每日一次,每次二片。 6、硝苯地平缓释片Ⅰ(得高宁) 10mg*50 德州德药 功能主治:各种类型的高血压及心绞痛。 用法用量:口服:一次10~20mg,一日2次。极量,一次40mg,一日0.12g。 7、阿莫西林胶囊0.25g*24s 香港澳美 功能主治:用于敏感致病菌所致呼吸道感染、泌尿生殖系统感染、急性单纯性淋病伤寒、伤寒带菌者及钩端螺旋体病,亦可与克拉霉素兰索拉唑三联用药根除胃十二指肠幽门螺杆菌,降低消化道溃疡发率

新组:DNA的复制、转录、翻译

DNA的分子结构 1、DNA的组成元素: 2、DNA的基本单位:(种) 3、DNA的结构:①由两条、反向平行的脱氧核苷酸链盘旋成双螺旋结构。: ②外侧:脱氧核糖和磷酸交替连接构成基本骨架。侧:由氢键相连的碱基对组成。 ③碱基配对有一定规律:A =T;G ≡C。(碱基互补配对原则) 4、DNA的特性: ) ①多样性:碱基对的排列顺序是千变万化的。(排列种数:4n(n为碱基对对数 .. ②特异性:每个特定DNA分子的碱基排列顺序是特定的。 5、DNA的功能:携带遗传信息(DNA分子中碱基对的排列顺序代表遗传信息)。 6、与DNA有关的计算: (1) 双链DNA中A=T、G=C。A+G=T+C(嘌呤总数等于嘧啶总数)。但在单链中不一定是A=T,G=C。 (2)在双链DNA分子中,(A+G)=(A+C)=(T+G)=(T+C)=1/2全部碱基,即DNA分子中,任意两个不能配对的碱基和相等,各占整个DNA碱基总数的一半。 (3)设双链DNA两条链分别是α链和β链,则有以下等式关系: ①若α链中(A+G)/(T+C)=a,则β链中(A+G)/(T+C)=1/a。整个DNA分子中(A+G)/(T+C)=1 。(不互补碱基和的比,在两单链上互为倒数) ②若α链中(A+T)/(G+C)=b,β链中(A+T)/(G+C)=b,整个DNA分子中(A+T)/(G+C)=b。 (互补碱基和的比,在两单链中,及整个DNA中相等) 7.判断核酸种类(1)如有U无T,则此核酸为RNA;(2)如有T且A=T,C=G,则为双链DNA; (3)如有T且A≠T,C≠G,则为单链DNA ; 例1:由DNA分了蕴藏的信息所支配合成的RNA在完全水解后,得到的化学物质是() A.氨基酸、葡萄糖、碱基B.氨基酸、核昔酸、葡萄糖 C.核糖、碱基、磷酸D.脱氧核糖、碱基、磷酸 例2:噬菌体、蓝藻和酵母菌都具有的物质或结构是( ) A.细胞壁B.细胞膜C.线粒体D.核酸 15) 若DNA分子的一条链中(A+T)/(C+G)=a,则其互补链中该比值为( ) A.a B.1/a C.1 D.1-1/a 例3:分析一个DNA分子时,发现30%的脱氧核苷酸含有腺嘌呤,由此可知该分子中一条链上鸟嘌呤含量的最大值可占此链碱基总数的( ) A.20% B.30% C.40% D.70%

磁珠法拭子基因DNA提取试剂盒

磁珠法拭子基因组DNA提取试剂盒 MagBeads Swab DNA Extraction Kit 【目录号】SDE-5010、SDE-5030、SDE-5100 【运输条件】2~25 C; 【保存条件】磁珠悬浮液2~8 C;蛋白酶K -20 C;其它组分室温; 【试剂盒组成】 【注意事项】 1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,以免磁珠受到损害。使用前务必充分混匀; 2. 首次使用试剂盒,请按清洗液2标签提示加入无水乙醇,稀释备用; 3. 蛋白酶K请于-20 C长期保存,避免反复冻融;融化后4C保存,并尽快使用; 4. 为了达到最佳效果,建议使用新鲜拭子样本,或者4C存放少于3天的样本,样本反复 冻融将导致核酸得量严重降低; 5. 如需去除RNA请自备RNase A 溶液(100mg/mL,分散液:10mM Tris-HCl、1mM EDTA、pH 值8.0 ); 6. 请务必仔细阅读本试剂盒操作说明书,并严格按照操作步骤完成操作。

【产品简介】 本试剂盒适用于从口腔拭子、宫颈拭子等样本中提取基因组DNA或病毒DNA。试剂盒采用独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,磁珠表面修饰有特殊化学基团,在一定条件下对DNA具有极强的特异性亲和力,而当条件改变时,磁珠可逆的释放DNA,从而达到快速分离纯化DNA的目的,并可最大限度的去除蛋白质及其它杂质,从而保证提取DNA 的纯度。所得基因组DNA产物OD260/280比值在1.7~1.9之间,可直接用于酶切、PCR、荧光定量PCR、测序、文库构建等下游实验。本试剂盒可在EP管中进行手动操作,亦可配合核酸提取仪使用,实现高通量操作。 【试剂盒说明】 【自备仪器、耗材和试剂】 仪器自动版 英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、无水乙醇、异丙醇。 手动版 水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、真空干燥箱、无水乙醇、异丙醇、 2.0mL EP管、EP管配套用磁力架。 【仪器自动版操作步骤】 本操作以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例,同步可完成32个样本的提取。 1 . 96孔板上样准备 参照下表用量向96孔板各孔位中分别加入相应试剂: 2. 拭子样本裂解 1 )将拭子棉头或刮头剪下,转移至2.0mL EP管中,加入400卩拭子保存液、20丄蛋白 酶K和200此拭子缓冲液,使溶液完全浸润拭子,涡旋震荡。

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