H7N9禽流感防控工作方案 姓名：XXX 部门：XXX 日期：XXX
H7N9禽流感防控工作方案 为进一步做好我县H7N9禽流感防控工作，防止人感染H7N9禽流感等疫情在我县传播和扩散，根据国家、省、市、县统一部署，结合我委实际情况和工作职责，特制定本工作方案。 一、指导思想 按照“加强领导、密切配合、依靠科学、依法防治、群防群控、果断处置”的原则，采取严格控制传染源，切断传染途径、保护易感动物的综合防治措施，防止疫情发生。 二、防控任务 按照县政府办《关于做好当前H7N9禽流感防控工作的紧急通知》（岳政办〔20**〕6号）要求，各畜牧兽医站在当地乡镇政府统一领导下，尽职尽责完成各项防控任务。 1、高致病性禽流感免疫。各地要针对本地补栏家禽、免疫抗体水平不达标及去年秋防不足的薄弱环节，做好高致病性禽流感的强制免疫工作，尤其要做好种禽、规模养禽户的程序化免疫接种工作。对水禽饲养量大、林下土鸡规模养殖户、养禽密集区域，要科学启动高致病性禽流感的春季强免工作。 2、H7N9禽流感监测。针对当前的形势开展一次全面的疫情普查，尤其是规模养殖场、活禽交易市场，从外地调入商品家禽及产品较多的地方。根据市防指要求，全县采取10个规模养禽场，一个活禽交易市场，每场采集30份血清样品于2月13日送市畜牧兽医局检测，发现阳性病例，按照《动物H7N9禽流感应急处置指南》处理。 3、家禽防疫重点场所消毒。对家禽养殖、屠宰及活禽交易等重点 第 2 页共 5 页
场所全面实施消毒灭源工作。 4、动物检疫监管。要进一步加强家禽的产地、运输、屠宰检疫工作，禽类及禽产品凭检疫合格证运输、上市销售。对检疫监管过程发现的病死畜禽要严格无害化处理，做到“四不一处理”，不留隐患。 5、H7N9禽流感防控宣传。H7N9禽流感可防可控，要加强禽流感防控知识宣传普及，引导社会公众理性消费禽类产品，坚持正确舆论导向，防止恐慌，指导兽医、养殖从业人员等密切接触者规范操作，做好高危人群防护工作，普及科学防控H7N9禽流感知识。 6、应急值守。各地要做好突发疫情的各项应急准备工作，实行24小时专人值班和领导带班制度，严格履行责任制。县畜牧兽医局要加强动物用疫苗、消毒药、防护服等动物疫病防控物资贮备。一旦发生疫情，能快速反应、及时应对，果断处置。实行零报告、日报告制度，各乡镇每日14：30前上报，县农委值班电话，联系人：。 三、保障措施 1、成立组织、加强领导 县农委成立H7N9禽流感防控领导小组。 2、开展工作督查，确保取得实效 县农委成立8个督查组，委班子成员带队，到各地开展工作督查禽流感免疫，监测排查，消毒灭源，检疫监督，无害化处理，应急值守，信息报送等工作是否落到实处，确保H7N9禽流感防控工作取得实效。 3、强化应急物资贮备 根据防控工作需要，及时调购疫苗、消毒药品，防护用品等防控物资，确保防控工作顺利开展。 4、明确工作纪律 第 3 页共 5 页
全国流感监测工作方案 篇一：全国流感监测方案 全国流感监测方案 （试行） 一、背景 流感是第一个实行全球监测的呼吸道传染病。由于其传播速度极快，病毒极易发生变异，故每年流感都会发生不同规模的流行。上一世纪以来已先后发生四次全球流感大流行，仅1918年“西班牙”流感的大流行就导致至少XX万人死亡，超过第一次世界大战的死亡人数。流感流行带来了巨大的疾病负担，造成了较严重的社会影响。据XX年世界卫生组织公布的数据，估计全球每年流感病例达6亿—12亿。我国是流感的多发地，每年流感发病数估计可达上千万人。1957年、1968年和1977年三次大流行毒株均首发于我国。1997年在中国香港特别行政区人群中发现禽流感H5N1感染病例。1988年以来，WHO每年公布的流感疫苗病毒株约一半来自中国。中国已成为世界流感监测的前哨。 流感是我国重点防治的传染病之一，1957年成立了国家流感中心（NIC），开始在全国范围内开展流感监测和防治指导工作。近年来分别与美国疾病预防与控制中心（CDC）及日本国立感染症研究所（NIID）在流感监测工作方面进行合作交流，从XX年起我国与世界卫生组织进行合作，在23个
省份建立了监测网络，开展流感监测工作，使部分省、市疾病预防控制机构具备了流感监测的技术能力和专业队伍，并取得了一定的成绩。根据XX年世界卫生组织提出的“流感预防与控制的全球议程”的要求，以及我国疾病控制工作的需要，完善和加强我国流感监测网络已成为一项非常必要和迫切的任务。为加强全国流感防治工作的统一部署，指导各地开展流感监测工作，特制定本监测方案。 二、目标 建立一个规范、灵敏、高效的覆盖全国的流感监测网络，及时掌握我国流感疫情动态，发现流感流行株、新毒株或变异毒株，做出预警预测，采取有效措施，预防流感大流行，减少超额死亡率，为我国流感防治工作的科学决策提供参考依据，并为全球流感疫苗的推荐和生产做出贡献。 三、监测网络 （一）原有已开展流感监测的23个监测省份在省会城市增加2-4所监测医院，并增选2-3个重点城市的各2所医院监测点，以形成本地区的流感监测网络。 （二）其余8个省、自治区、直辖市（山西、江西、海南、重庆、西藏、陕西、青海、宁夏），首先在省会城市选择2所监测医院开展流感监测工作，有条件的地区，也可适当增加监测点和监测城市。 （三）监测点的选择：
实时荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光基团，利用荧光信号来实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板浓度进行定量分析。 其特点有： (1)用产生荧光信号的指示剂显示扩增产物的量，进行实时动态连续的荧光监测，避免终点定量的不准确性，并且消除了标本和产物的污染，且无复杂的产物后续处理过程。 (2)荧光信号通过荧光染料嵌入双链DNA，或荧光探针特异结合木得检测物等方法获得，打打提高了检测的灵敏度、特异性和精确性。Real-time O-PCR可以应用于mRNA表达的研究、DNA拷贝数的检测、单核苷酸多态性的测定、细胞因子的表达分析、肿瘤耐药基因表达的研究以及病毒感染的定量监测。 实时荧光定量PCR技术的基本原理 在PCR反应体系中加入荧光染料或荧光基团，这些荧光物质有其特定的波长。仪器可以自动检出，利用荧光信号积累，实时监测整个PCR进程，在PCR 循环中，测量的信号将作为荧光阈值的坐标。并且引入一个——Ct值（Threshold cycle）概念，Ct值是指产生可被检测到得荧光信号所需的最小循环数，是在PCR 循环过程中荧光信号由本底开始进入指数增长阶段的拐点所对应的循环次数。 荧光阈值相当于基线荧光信号的平均信号标准偏差的10倍。一般认为在荧光阈值以上所测出的荧光信号是一个可信的信号，可以用于定义一个样本的Ct值。通常用不同浓度的标准样品的Ct值来产生标准曲线，然后计算相对方程式。 方程式的斜度可以用来检查PCR的效率，所有标准曲线的线性回归分析需要存在一个高相关系数（R2＞0.99），这样才能认为实验的过程和数据是可信的，使用这个方程式计算出未知样本的初始模板量。实时荧光定量PCR仪都有软件，可以从标准曲线中自动地计算出未知样本的初始模板量。 实时荧光定量PCR技术的应用 1. 基因工程研究领域 ①基因表达研究：对β地中海贫血症患者β与γ珠蛋白mRNA水平进行检测，其结果特异性强、定量准确，为了解β地中海贫血的分子病理机制及其临床诊断提供了可靠的检测数据。 ②转基因研究：利用两种发光探针及适当的循环阈值，扩增一个转移后的基因和一个对照基因，以分析转基因老鼠接合性。该方法为45个转基因动物的同型结合及异质结合提供了明确的鉴定结果。通过实时定量PCR检测，同型结合的异质接合动物交配后其子代中转基因的传递情况符合孟德尔遗传规律。这项技术在转基因动物繁育及基因剂量功能效应实验中将有很大的用途。
全国流感监测方案 （试行） 一、背景 流感是第一个实行全球监测的呼吸道传染病。由于其传播速度极快，病毒极易发生变异，故每年流感都会发生不同规模的流行。上一世纪以来已先后发生四次全球流感大流行，仅1918年“西班牙”流感的大流行就导致至少2000万人死亡，超过第一次世界大战的死亡人数。流感流行带来了巨大的疾病负担，造成了较严重的社会影响。据2002年世界卫生组织公布的数据，估计全球每年流感病例达6亿—12亿。 我国是流感的多发地，每年流感发病数估计可达上千万人。1957年、1968年和1977年三次大流行毒株均首发于我国。1997年在中国香港特别行政区人群中发现禽流感H5N1感染病例。1988年以来，WHO每年公布的流感疫苗病毒株约一半来自中国。中国已成为世界流感监测的前哨。 流感是我国重点防治的传染病之一，1957年成立了国家流感中心（NIC），开始在全国范围内开展流感监测和防治指导工作。近年来分别与美国疾病预防与控制中心（CDC）及日本国立感染症研究所（NIID）在流感监测工作方面进行合作交流，从2000年起我国与世界卫生组织进行合作，在23个省份建立了监测网络，开展流感监测工作，使部分省、市疾病预防控制机构具备了流感监测的技术能力和专业队伍，并取得了一定的成绩。根据2002年世界卫生组织提出的“流感预防与控制的全球议程”的要求，以及我国疾病控制工作的需要，完善和加强我国流感监测网络已成为一项非常必要和迫切的任务。为加强全国流感防治工作的统一部署，指导各地开展流感监测工作，特制定本监测方案。 二、目标 建立一个规范、灵敏、高效的覆盖全国的流感监测网络，及时掌握我国流感疫情动态，发现流感流行株、新毒株或变异毒株，做出预警预测，采取有效措施，预防流感大流行，减少超额死亡率，为我国流感防治工作的科学决策提供参考依据，并为全球流感疫苗的推荐和生产做出贡献。
疾控中心h7n9禽流感防控方案 近期，安吉县出现一例人感染H7N9禽流感确诊病例，为进一步加强人感染H7N9禽流感防控和医疗救治工作，现将有关要求通知如下: 一、加强组织领导，做好应对准备 各医疗卫生单位要高度重视人感染H7N9禽流感防控工作，进一步提高对疫情防控工作重要性的认识，防止出现麻痹和懈怠思想。要切实加强组织领导，明确各科室及人员工作职责，落实防控措施。加强应急值班，做好人员、技术和物资等各项准备工作，确保一旦发现疫情能及时、有效、规范地开展应急处置。要组织对所有医务人员的业务知识培训，重点学习《人感染H7N9禽流感诊疗方案(版)》、《关于印发《人感染H7N9禽流感医疗救治专家共识》的通知》(卫办医政函[2013]340号)、个人防护及院感等知识要点。 二、加强预检分诊，规范发热门诊 各医疗单位要严格按有关要求开展预检分诊，提高预检分诊的敏感性。
设置发热门诊的医疗单位必须严格执行预检分诊和院内转诊制度，发热门诊必须规范、正常运转。要加强发热门诊管理，注重流行病学史询问，规范不明原因肺炎病例的诊断与报告。 三、加强疫情监测，提高发现能力 各医疗卫生单位要认真开展流感样病例监测和不明原因肺炎病例监测工作。按照《全国不明原因肺炎病例监测、排查和管理方案》要求，病例定义为: 1、发热(腋下体温≥38℃); 2、具有肺炎的影像学特征; 3、发病早期白细胞总数降低或正常，或淋巴细胞分类计数减少; 4、经规范抗菌药物治疗3-5天(参照中华医学会呼吸病学分会颁布的“社区获得性肺炎诊断和治疗指南”)，病情无明显改善
或呈进行性加重。 医疗单位发现不明原因肺炎病例第一时间向县卫计局和县疾控中心报告，并组织力量开展病例调查和处置。县疾控中心做好病例调查、标本的采集与检测，加强疫情的预测预警。 四、做好救治准备，严控院内感染 各医疗单位要高度重视呼吸道发热疾病诊治，严格按照《人感染H7N9禽流感诊疗方案(版)》中“有疫情地区人感染H7N9禽流感早检早治流程图”(见附件1)要求，切实提高医护人员警惕性，做到“早发现、早报告、早诊断、早治疗”，减少危重病人的发生。在流行季节，凡临床症状及实验室检查或辅助检查符合流感样病毒感染表现的，应迅速给予抗病毒治疗，防止误诊误治，努力减少重症发生率。 确定安吉县第二人民医院为人禽流感疑似病例救治定点医院，定点医院要做好专业医疗力量、器械和药物的准备;要严格执行各项消毒隔离和院内感染控制制度，做好医护人员防护，加强管理，严防院内交叉感染的发生。 进一步调整完善“县级人感染H7N9禽流感医疗救治”领导小
动物H7N9禽流感防控工作实施方案 为切实做好我市动物H7N9禽流感防控工作，保障人民群众身体健康，维护社会正常秩序，根据省防重办《关于进一步加强H7N9禽流感防控工作的紧急通知》和全省H7N9禽流感疫情防控会议精神，结合我市实际，特制定本实施方案。 一、总体要求 坚持把人民群众身体健康和生命安全放在首位，遵循“依法、科学、规范、统一”的原则，按照“有力、有序、有效、有度”和“早发现、早报告、早处置、早诊断、早扑灭”的防控方针，落实属地管理职责，强化禽流感免疫工作，加强疫情排查监测，加强检疫监管，加强巡查督查，加强应急值守，强化早期预警，加强部门信息互通和协调联动，有效防控动物H7N9禽流感。 二、工作要求 严格落实动物防控监管措施，在以下四个环节上做好防控工作。 1、养殖环节。规模养殖场（户）完善动物防疫条件，建立健全防疫制度、规范免疫档案，按照上级规定程序落实禽流感强制综合防控措施，要求对所有存笼家禽必须100%接种禽流感疫苗，同时对所有养禽场所进行消毒、排查工作，发现疑似病例，及时报告，并采样送检，对病死禽一律进行火烧深埋无害化处理。家禽出笼上市，按规定向当地检疫部门报检，取得检疫合格证明后方可进入市场。按照属地管理原则，落实乡镇每日监管巡查制度、畜牧水产局监督检查制度，
通过巡查监督检查，及时解决存在的问题和弥补薄弱环节，保证养殖环节动物防控工作真正落到实处。 2、交易环节。以市、乡各大交易市场为对象，严把家禽准入关，未经检疫不得进入市场。各地要明确专人佩戴袖章进行动物防检排查工作，重点加强对贩运户的监管检查，严禁未经产地检疫的家禽外地禽类进入我市市场交易。 3、屠宰环节。严禁定点屠宰场购买未经检疫的禽类。凡进入定点屠宰环节的禽类，必须取得动物检疫部门的产地检疫合格证。动物检疫部门必须派专人驻场进行检疫，并完善产品进出档案资料。在禽类宰前宰后检疫检验中，发现有疑似禽流感症状的，要及时进行采样送上级部门检测，同时必须采取坚决措施进行处理，停止加工出售，封存所有产品。 4、冷藏环节。加强对全市冷库的监管，了解其产品的来源及产地检疫情况，严防借机从外地购买禽类及其产品进行宰杀、冷藏；组织专业人员对冷库中存储的禽类产品进行抽样送检。检测结果未出之前，所有产品不得上市销售；经检测为阳性的产品，必须全部进行无害化处理，并依法追究相关人员的责任。 三、具体措施 1、加强领导。市防重办负责对动物H7N9禽流感防控的调度、协调和指导工作。各乡镇（街道）及有关部门要高度重视，认真落实国家和省、x禽流感防控要求，制定完善相关的预案和工作方案，明确责任分工，狠抓工作落实，全力以赴做好疫病防控工作。各乡镇（街
最新H7N9禽流感防控方案 最新H7N9禽流感防控方案 为做到早发现、早报告、早诊断、早隔离、早治疗人感染H7N9禽流感病例，控制疫情的传播、蔓延，保障人民群众身体健康和生命安全，特制定本方案。 一、目的 (一)早期发现人感染H7N9禽流感病例。 (二)规范病例发现、报告、流行病学调查、实验室检测、密切接触者管理等疫情处置工作。 (三)指导各地开展人感染H7N9禽流感疫情防控工作。 二、适用范围 此方案适用于现阶段人感染H7N9禽流感病例的防控。 目前对该疾病的感染来源、感染发病的危险因素、传播途径、潜伏期、传染期、临床特点以及该病毒人际传播能力尚不清楚。本方案将根据对该疾病科学认识的深入和疫情形势变化适时更新。 三、病例的发现、报告 (一)病例定义。 1、监测病例。同时具备以下4项条件的病例: (1)发热(腋下体温≥38℃); (2)具有肺炎的影像学特征; (3)发病早期白细胞总数降低或正常,或淋巴细胞分类计数减少;
(4)不能从临床或实验室角度诊断为常见病原所致肺炎。 2、人感染H7N9禽流感疑似病例与确诊病例定义参照《人感染H7N9禽流感诊疗方案(20xx年第1版)》(卫发明电〔20xx〕5号)。 (二)发现与报告。 各级各类医疗机构发现符合监测定义的病例后，须于24小时内进行网络直报。报告疾病类别选择“其他传染病”，并在备注栏中注明“人感染H7N9禽流感监测病例”。尚不具备网络直报条件的医疗机构，应当于24小时内以最快的通讯方式(电话、传真等)向当地县级疾病预防控制机构报告，并寄出传染病报告卡，县级疾病预防控制机构在接到报告后立即进行网络直报。 各级各类医疗机构发现人感染H7N9禽流感疑似病例、确诊病例后，应当于2小时内进行网络直报。报告疾病类别选择“其他传染病”，并在备注栏中注明“人感染H7N9禽流感疑似病例或者确诊病例”。尚不具备网络直报条件的医疗机构，应当于2小时内以最快的通讯方式(电话、传真等)向当地县级疾病预防控制机构报告，并寄出传染病报告卡，县级疾病预防控制机构在接到报告后立即进行网络直报。 四、病例的流行病学调查、采样与检测 (一)流行病学调查。各县(市、区)疾病预防控制机构接到辖区内医疗机构或医务人员报告人感染H7N9禽流感疑似病例或确诊病例后，应当按照《人感染H7N9禽流感流行病学调查方案》(附件1)进行调查，重点了解病例的基本情况、临床表现、发病前7天内可疑动物(如
H7N9禽流感防控工作方案 禽流感，全名鸟禽类流行性感冒，是由病毒引起的动物传染病，通常只感染鸟类，少见情况会感染猪。以下是我为您带来的H7N9禽流感防控工作方案，欢迎阅读！ H7N9禽流感防控工作方案【一】 为进一步做好我县H7N9禽流感防控工作，防止人感染H7N9禽流感等疫情在我县传播和扩散，根据国家、省、市、县统一部署，结合我委实际情况和工作职责，特制定本工作方案。 一、指导思想 按照〃加强领导、密切配合、依靠科学、依法防治、群防群控、果断处置〃的原则，采取严格控制传染源，切断传染途径、保护易感动物的综合防治措施，防止疫情发生。 二、防控任务 按照县政府办《关于做好当前H7N9禽流感防控工作的紧急通知》(岳 政办(20xx) 6号)要求，各畜牧兽医站在当地乡镇政府统一领导下，尽职尽责完成各项防控任务。 1、高致病性禽流感免疫。各地要针对本地补栏家禽、免疫抗体水平不达标及去年秋防不足的薄弱环节，做好高致病性禽流感的强制免疫工作，尤其要做好种禽、规模养禽户的程序化免疫接种工作。对水禽饲养量大、林下土鸡规模养殖户、养禽密集区域，要科学启动高致病性禽流感的春季强免工作。 2、H7N9禽流感监测。针对当前的形势开展一次全面的疫情普查，尤其
是规模养殖场、活禽交易市场，从外地调入商品家禽及产品较多的地方。根据市防指要求，全县采取10个规模养禽场，一个活禽交易市场，每场采集30份血清样品于2月13 口送市畜牧兽医局检测，发现阳性病例, 按照《动物H7N9禽流感应急处置指南》处理。 3、家禽防疫重点场所消毒。对家禽养殖、屠宰及活禽交易等重点场所全面实施消毒灭源工作。 4、动物检疫监管。要进一步加强家禽的产地、运输、屠宰检疫工作，禽类及禽产品凭检疫合格证运输、上市销售。对检疫监管过程发现的病死畜禽要严格无害化处理，做到〃四不一处理〃，不留隐患。 5、H7N9禽流感防控宣传。H7N9禽流感可防可控，要加强禽流感防控知识宣传普及，引导社会公众理性消费禽类产品，坚持正确舆论导向，防止恐慌，指导兽医、养殖从业人员等密切接触者规范操作，做好高危人群防护工作，普及科学防控H7N9禽流感知识。 6、应急值守。各地要做好突发疫情的各项应急准备工作，实行24 小时专人值班和领导带班制度，严格履行责任制。县畜牧兽医局要加强动物用疫苗、消毒药、防护服等动物疫病防控物资贮备。一旦发生疫情，能快速反应、及时应对，果断处置。实行零报告、日报告制度，各乡镇每口14:30前上报，县农委值班电话，联系人：。 三、保障措施 1、成立组织、加强领导 县农委成立H7N9禽流感防控领导小组。 2、开展工作督查，确保取得实效
《食品安全学》综述 PCR快速检测技术综述 1．前言 聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍，是肉眼能直接观察和判断；可从一根头发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几个星期才能做到的事情，用PCR几个小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。 该酶促反应最基本的3个环节是：[1]模板DNA的变性，即在94℃下模板双链DNA变为单链DNA；[2]引物与模板链的特异性复性；[3]引物链的延伸。 2.研究的目的与意义 聚合酶链反应（PCR）技术建立以来，定性技术不断改进和完善，可以达到检测单个靶序列的水平、但实际工作中常需要定量检测标本中核酸，而不是某一特定序列存在与否，借助PCR对基因快速、敏感、特异而准确定量成为目前分子生物学技术研究的热点之一。定量PCR旨在评估样品中靶分子数，此测定可以是绝对的，如每微克样本中靶DNA的分子数；也可以是相对定
量，即与设定的内参照或外参照比较而言。鉴于PCR方法主要有5个，即对PCR产物的直接定量、极限稀释法、靶基因与参照基因的同步扩增、竞争性PCR和荧光定量PCR[1]。这几种放啊各有利弊，对其选择取决于靶基因的特性、对PCR产量的期望值、对准确度的要求、需要相对还是绝对定量。 人类对于核酸的研究已经有100多年的历史。20世纪60年代末70年代初，人们致力于研究基因的体外分离技术。但是，由于核酸的含量较少，一定程度上限制了DNA的体外操作。Khorana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想。但是，当时的基因序列分析方法尚未成熟，对热具有较强稳定性的DNA聚合酶还未发现，寡核苷酸引物的合成仍处在手工、半自动合成阶段，这种想法似乎没有任何实际意义。 1985年，美国科学家Kary Mullis在高速公路的启发下，经过两年的努力，发明了PCR技术，并在Science杂志上发表了关于PCR技术的第一篇学术论文。从此，PCR技术得到了生命科学界的普遍认同，Kary Mullis也因此而获得1993年的诺贝尔化学奖。 但是，最初的PCR技术相当不成熟，在当时是一种操作复杂、成本高昂、“中看不中用”的实验室技术。1988年初，Keohanog通过对所使用的酶的改进，提高了扩增的真实性。尔后，Saiki 等人又从生活在温泉中的水生嗜热杆菌内提取到一种耐热的DNA聚合酶，使得PCR技术的扩增效率大大提高。也正是由于此酶的发现使得PCR技术得到了广泛地应用，使该技术成为遗传与分子生物学分析的根本性基石。在以后的几十年里，PCR方法被不断改进：它从一种定性的分析方法发展到定量测定；从原先只能扩增几个kb的基因到目前已能扩增长达几十个kb的DNA片段。到目前为止，PCR技术已有十几种之多，例如，将PCR与反转录酶结合，成为反转录PCR，将PCR 与抗体等相结合就成为免疫PCR等。 3.国内外研究现状 3.1. 基础研究方面的应用 目前从事分子生物学的实验室和研究人员，几乎每天都在使用PCR，可以说几乎没有一个分子生物学家没有使用过PCR。因此，PCR与分子克隆一样是分子生物学实验室的常规方法，可用于达到以下目的： [1] 扩增目的基因和鉴定重组子； [2]克隆基因； [3]基因功能和表达调控的研究； [4]基因组测序； [5]制备单链模板； [6]致突变； 3.2. PCR在临床上的应用[2] [1]在遗传学上的应用：人类的遗传性疾病是因为某一碱基序列发生了突变，使之缺失或形成某一限制性内切酶的识别位点，通过PCR结合限制片段长度多态性分析（PCR-RFLP），就可以从基因的水平对遗传性疾病进行分析。例如，血友病甲是一种常见的遗传性出血性疾病，患者体内缺乏凝血因子FVIII这是由于基因第14个外显子的第336位氨基酸的编码基因发生了突变，产生了一个新的PstI酶切点，因此可以使用PCR-RFLP对血友病进行诊断。PCR还可以用来检测遗传性耳聋和Leber遗传性视神经病。 [2]在肿瘤研究中的应用：PCR已日益广泛应用于肿瘤的病因与发病机理研究以及肿瘤诊断与治疗的研究中。例如，差异显示PCR技术能针对不同肿瘤寻找其特异而敏感的标志物，并用于肿瘤早期诊断、判断预后及疗效评估。另一方面，在使用普通放疗、化疗的同时可结合定量PCR 技术检测微小残留病灶，以进一步改进治疗方案。此外，由于癌症的发生在一定意义上是单个细胞分子发生变化，因而可以使用单细胞PCR技术对癌症的发病机理进行研究。
人禽流感疫情监测实施方案 为及时发现人间可能感染的禽流感病例，及时采取有效的预防控制措施，制订此监测方案。此项监测工作只在有禽流感疫情发生的省份开展。 一、监测目的 1、早期发现可能的人禽流感病例，及时采取有效的公共卫生措施，预防可能出现的人禽流感疫情传播蔓延。 2、了解当地监测时间段内流感流行毒株的变化情况。 二、监测范围及时限 发生禽流感疫情的县（区），发现禽流感疫情后连续监测1个月。 三、监测病例定义 1、体温≥38℃，伴有咳嗽或咽痛，并且发病前1周内有禽类接触史的病例。 2、不明原因肺炎病例。 四、监测点设立 在疫情发生所在县选择县人民医院、县儿童医院（无儿童医院，可选择有儿科诊疗科室的其它综合医院）以及疫情涉及乡（镇）辖区内所有乡（镇）卫生院和村卫生室作为监测单位。 五、监测工作内容 发现和报告符合监测病例定义的病例，并对监测病例采样进行血清学和病原学检测。 1、参加监测科室 所有涉及监测病例诊疗的科室均要参加监测工作。 2、监测病例报告 监测点发现监测病例，做好相关登记（见附表1），并立即电话报告当地县级疾病预防控制中心，各医疗机构每周一上午10：00前将上周的监测病例汇总表上报县（区）疾病控制中心（见附表3）。 3、采样 （1）采样责任人：县级医疗机构医务人员承担本院监测病例的采样工作，县（区）疾病控制专业人员负责乡镇卫生院、村卫生室监测病例的采样。所有标本采集一式二份，并填写“人禽流感监测病例采样登记表”（见附表2）。 （2）样本运送的时间要求：县（市、区）疾病预防控制中心负责将样本运送到省级疾病预防控制中心实验室。运送的时间要求：有条件的地区，样本于采样后24小时内送到；无条件的地区，样本集中保存在县疾病控制中心的－20℃以下的冰箱里，于采样后48小时内送到。 （3）样本采集的种类、时间、运送、保存和检测，按照《人禽流感实验室检测技术方案》（附件7）操作。 各省级实验室禽流感病毒检测结果阳性，或发现无法鉴定的流感毒株，应立即将原始标本及分离物送国家流感中心进一步复核、确认。 4、疫情报告：一旦发现人禽流感疑似或确诊病例，按照《人禽流感疫情报告管理方案》进行疫情报告。 各地在完成监测工作后，要及时写出监测报告，对原始资料保存归档，省卫生行政部门要及时对监测工作开展评价工作。
H7N9禽流感防控知识宣传资料 一、什么是H7N9禽流感 禽流感是禽流行性感冒的简称，是由甲型流感病毒引起的禽类传染性疾病，容易在鸟类(尤其是鸡)之间引起流行，过去在民间称作鸡瘟。禽类感染后死亡率很高。 二、H7N9禽流感防治常识 对于如何预防H7N9禽流感，专家建议，勤洗手、室内勤通风换气、注意营养、保持良好体质有利于预防流感等呼吸道传染病。出现打喷嚏、咳嗽等呼吸道感染症状时，要用纸巾、手帕掩盖口鼻，预防感染他人。此外，还要特别注意尽量避免直接接触病死禽、畜。 三、日常生活中怎样预防人感染高致病性禽流感? 1、加强体育锻炼，注意补充营养，保证充足的睡眠和休息，以增强抵抗力。 2、尽可能减少与禽类不必要的接触，尤其是与病、死禽的接触。勤洗手，远离家禽的分泌物，接触过禽鸟或禽鸟粪便，要注意用消毒液和清水彻底清洁双手。
3、应尽量在正规的销售禽流感疫情场所购买经过检疫的禽类产品。 4、养成良好的个人卫生习惯，加强室内空气流通，每天1～2次开窗换气半小时。吃禽肉要煮熟、煮透，食用预防措施鸡蛋时蛋壳应用流水清洗，应烹调加热充分，不吃生的或半生的鸡蛋。要有充足的睡眠和休息，均衡的饮食，注意多摄入一些富含维生素C等增强免疫力的食物。经常进行体育锻炼，以增加机体对病毒的抵抗能力。 5、不要喂饲野鸽或其他雀鸟，如接触禽鸟或禽鸟粪便后，要立刻彻底清洗双手。外出在旅途中，尽量避免接触禽鸟，例如不要前往观鸟园、农场、街市或到公园活动;不要喂饲白鸽或野鸟等。 6、不要轻视重感冒，禽流感的病症与其他流行性感冒病症相似，如发烧、头痛、咳嗽及喉咙痛等，在某些情况下，会引起并发症，导致患者死亡。因此，若出现发热、头痛、鼻塞、咳嗽、全身不适等呼吸道症状时，应戴上口罩，尽快到医院就诊，并务必告诉医生自己发病前是否到过禽流感疫区，是否与病禽类接触等情况，并在医生指导下治疗和用药。
农业部关于印发《动物H7N9禽流感紧急监测方案》和《动物H7N9禽流感应急处置指南（试 行）》的通知 农医发[2013]13号 各省、自治区、直辖市及计划单列市畜牧兽医（农牧、农业）厅（局、委、办），新疆生产建设兵团畜牧兽医局，部属有关事业单位： 为进一步加强动物H7N9禽流感防控工作，全面强化疫情排查和病毒监测，及时处置突发情况，我部组织制定了《动物H7N9禽流感紧急监测方案》和《动物H7N9禽流感应急处置指南（试行）》，现印发给你们，请遵照执行。 农业部 2013年4月7日 动物H7N9禽流感紧急监测方案 一、监测目的 掌握了解H7N9禽流感病毒在动物群体中的来源、宿主范围、传播途径和危害程度；为及时清除动物群体中的H7N9禽流感病原提供科学依据。 二、监测范围 （一）核心监测区 已发生人感染H7N9禽流感病例和经国家禽流感参考实验确诊有动物H7N9禽流感阳性的省份。 （二）重点监测区 与核心监测区相邻的省份。 （三）一般监测区 上述两类监测区以外的省份。 三、监测对象
鸡、水禽（鸭、鹅）和人工饲养的鸽子、鹌鹑等；野生禽类；生猪。 四、监测数量 （一）活禽交易市场 每个市场采集不少于30只家禽的对应血样、咽喉和泄殖腔拭子，尽可能覆盖多种家禽和多个摊位。 核心监测区每省采集所有活禽交易市场，重点监测区每个县（市、区）至少采集1个活禽交易市场，一般监测区每个地（市、州）至少采集1个活禽交易市场。 （二）家禽屠宰场 每个家禽屠宰场采集3个以上家禽群体，每个家禽群体采集30只家禽的对应血样、咽喉和泄殖腔拭子。 核心监测区每省采集所有家禽屠宰场，重点监测区每省至少采集10个家禽屠宰场，一般监测区每省至少采集5个家禽屠宰场。 （三）家禽养殖场（村） 每个家禽养殖场（村）采集不少于30只家禽的对应血样、咽喉和泄殖腔拭子，尽可能覆盖多个养禽舍（户）。 核心监测区每个县（市、区）至少采集30个家禽养殖场（村）；重点监测区每省至少采集20个家禽养殖场（村）；一般监测区每省至少采集10个家禽养殖场（村）。 一旦家禽养殖场（村）采集样品的病原学检测结果阳性的，对该场（村）所在县域的所有家禽养殖场（村）进行监测。 （四）野生禽类栖息地 收集野生禽类新鲜粪便。对能捕获到的野生禽类采集咽喉和泄殖腔拭子。 （五）生猪屠宰场 每个屠宰场采集生猪鼻腔拭子不少于30份。核心监测区每省至少采集20个屠宰场，重点监测区每省至少采集10个屠宰场，一般监测区每省至少采集5个屠宰场。 （六）其他 各省自行确定上述场点的环境样品采样数量。
人禽流感诊疗方案摘要 （2005版） 一、概述 人禽流行性感冒（以下称人禽流感）是由禽甲型流感病毒某些亚型中的一些毒株引起的急性呼吸道传染病。 禽流感病毒于1900年发现，至1955年被分离成功，并被确认为甲型流感病毒。 早在1981年，美国即有禽流感病毒H7N7感染人类引起结膜炎的报道。 1997年8月20日WHO公布，从1例3岁香港儿童体内首次分离到禽流感病毒A H5N1株。此次疫情共确诊18例，死亡6例。 最近禽流感疫情 2003年12月底至2005年10月，全球有118人感染禽流感，其中61人死亡。 世界卫生组织（WHO）公布的最新资料： 截至2005年10月20日，在越南共有91人感染禽流感，其中41人死亡，成为受害最大的国家。泰国有18人感染，13人死亡；柬埔寨有4人感染，4人死亡；印度尼西亚有5人感染，3人死亡。 个案被证实月份 越南泰国柬埔寨印尼 证实死亡证实死亡证实死亡证实死亡 第1波2004.01 7 6 3 3 0 0 0 0 2004.02 15 9 7 4 0 0 0 0 2004.03 1 1 2 1 0 0 0 0 第2波2004.08 3 3 0 0 0 0 0 0 2004.09 1 1 3 2 0 0 0 0 2004.10 0 0 2 2 0 0 0 0 第3波2004.12-2005.10 64 21 2 1 4 4 7 4 合计91 41 19 13 4 4 7 4 二、病原学 H5N1病毒结构图
1、禽流感病毒 属正粘病毒科甲型流感病毒属。 病毒颗粒一般为球形、有囊膜的RNA病毒。 两种不同形状的表面钉状物是血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）。 依据其外膜血凝素（H）和神经氨酸酶（N）蛋白抗原性的不同，目前可分为16个H亚型（H1～H16）和9个N亚型（N1～N9）。多数亚型属非致病性或低致病性，高致病性亚型主要是含H5和H7的毒株。 2、禽流感病毒活力影响因素 对热比较敏感，但对低温抵抗力较强，65℃加热30分钟或煮沸（100℃）2分钟以上可灭活。 裸露的病毒在直射阳光下40～48小时即可灭活，如果用紫外线直接照射，可迅速破坏其活性。 三、流行病学 1、传染源 主要为患禽流感或携带禽流感病毒的鸡、鸭、鹅等禽类，特别是鸡； 野禽在禽流感的自然传播中扮演了重要角色。 2、传播途径 经呼吸道传播； 密切接触感染的家禽分泌物和排泄物、受病毒污染的水； 直接接触病毒毒株也可被感染； 目前尚无人与人之间传播的确切证据。 3、易感人群 一般认为，人类对禽流感病毒并不易感。尽管任何年龄均可被感染，但在已发现的感染病例中，13岁以下儿童所占比例较高，病情较重。 4、高危人群 从事家禽养殖业者 在发病前1周内去过家禽饲养、销售及宰杀等场所者 接触禽流感病毒感染材料的实验室工作人员 四、临床特征 1、临床表现 潜伏期：一般为1～3天，通常在7天以内。 临床症状： （1）H9N2亚型：轻微上呼吸道感染症状，甚至没有任何症状。 （2）H7N7亚型：主要表现为结膜炎。
许昌学院食品与生物工程学院2015-2016学年第一学期《现代食品检测技术》课程论文 PCR技术在食品检测中的应用
PCR技术在食品检测中的应用 许昌学院食品与生物工程学院，河南许昌461000 传统检测食品中微生物的方法主要是分离和培养鉴别，该方法操作繁琐，有些微生物很难培养。尤其是针对检测食品中的弱势菌，使用传统的方法基本无法检测出来。聚合酶链式反应（PCR）是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，由于它可以将微量的DNA大幅增加的特点，所以能够比较准确地检测食品中微生物。本文主要介绍PCF技术的操作原理和目前运用到食品检测中的几种具体的PCR技术特点，包括：多重PCR技术、实时荧光定量PCF检测技术、免疫PCR检测技术。并且对PCR技术在食品检测方面予以展望，为解决食品安全问题和相关食品检测做出导向作用。 关键词：食品检测；微生物培养；聚合酶链式反应；食品安全问题
、、■ 刖言 食品⑴是指原料不经加工或经过加工或改变性状、具有一定营养价值、对人体无害、可供人类食用的物质。它不仅富含营养成分和水等物质更容易滋生微生物，而且它能最直接的与人体接触，进入人体的消化系统，所以食品安全问题[2-4] 不容轻视。现代食品行业，在生产、运输、销售过程中有很多有害的微生物，这将严重危害食品的品质和人们的健康，甚至会引起一些严重的疾病。现代食品检测技术⑸是对食品按其原定用途进行制作和食用时不会使消费者受到伤害的一种担保。为保证食品安全急需一些快速、敏感、特异的检测方法，以及时发现致病菌，控制污染及其可能对人体健康产生的危害。PCR检测技术具有敏感性、 特异性、简便、快速的优点，现已广泛应用于微生物检测，尤其对培养困难的细菌检测和抗原结构复杂的细菌鉴定方面，具有常规方法无法比拟的优越性。 随着分子微生物学和分子化学的飞速发展，对病原微生物的鉴定已不再局限于对它的外部形态结构及生理特性等一般检验上，而是从分子生物学水平上研究生物大分子，特别是核酸结构及其组成部分。在此基础上建立的众多检测技术中，尤其是聚合酶链反应（PCR）成为世人瞩目的生物技术革命的新产物，已逐步应用于食品的检测，具有广阔的发展前景。 1 PCR技术的原理 PCR是在体外人为控制的合适条件下，以单链DNA或RNA为模板，以1 对人工合成的寡核苷酸序列为引物，在耐热Tap DNA聚合酶作用下特异性扩增基因片段的技术。整个反应过程除了需要加入待扩增的DNA片段和两个决定特 异性的引物外，还需加入适量的缓冲液、四种脱氧核糖核苷酸溶液（dNTP）、Tap DNA聚合酶、Mg2+等。每个PCR循环包括模板DNA变性、模板DNA与引物的退火（复性）、引物的延伸3个基础步骤。反应时，首先将靶DNA双链加热变性为单链状态，然后降低溶液温度，加入2段人工合成的与靶DNA端邻序列互补的寡核苷酸片段作为引物，即左端引物和右端引物，使合成引物在低温下与其靶序列特异配对，形成部分双链。然后，在Tap DNA聚合酶和4种dNTP 底物存在的情况下，引物沿模板DNA链（靶DNA单链）按5 '末端向3 '末端方向延伸，自动合成新的DNA双链，新合成的DNA片段又可作为扩增的模板。如此重复改变温度，由高温变性、低温复性、和适温延伸组成一个周期，每个周
禽流感防控工作方案 篇一：H7N9禽流感防控工作实施方案 H7N9禽流感防控工作实施方案 由于目前H7N9高致病禽流感在多个省市爆发，且已造成相当高比例患者不治身亡，加上H7N9病毒的传播途径主要为流动性较大的飞禽，防控不确定性较大。 为认真做好我校传染病的防治工作，及时有效预防、控制高致病性禽流感疫情，协助卫生部门做好人际间禽流感防控工作，最大程度地减少疫情对公众健康和社会造成的危害，保障广大师生的身体健康，做到依法防控，科学应对；预防为主，协同应对，特制定本方案。 一、成立H7N9禽流感防控工作领导小组 领导小组成员 组长：吴永胜 副组长：王丽娟 成员：刘华、段云瑞、韩凯凯、郭艳芳、张国义 报告联络员：王丽娟
二、H7N9禽流感防控工作方案 （一）要充分认识做好禽流感疫情防控工作的重要性 、紧迫性和艰巨性，始终把广大师生的身体健康和生命安全放在第一位，切实加强领导，坚持依靠科学，依法防治，群防群控。要坚定信心，迎难而上，及时处理和解决防治工作中出现的问题，沉着应对，有力、有序、有效地做好禽流感疫情防控工作，坚决阻止疫情向人群传播和扩散，维护学校正常的教学和生活秩序。 （二）做好舆论宣传，加大健康教育工作的力度。增强广大师生 的防病意识和自我防护能力。学校将利用健康教育课、专题讲座、黑板报、广播、校园网络等多种形式开展预防禽流感的健康教育工作，引导师生员工养成良好的卫生习惯，加强户外锻炼，提高防疫意识和自身抵抗力，消除不必要的紧张和恐惧心理。 （三）落实禽流感防控制度。 1、坚持师生健康状况晨检报告制度。严格执行晨检制度，及时 全面掌握来校师生健康状况，一旦发现教职工、学生有发热、干咳、少痰、乏力、头痛、关节和肌肉酸痛、腹泻等症状与体征，要及时送到医院就诊并上报。 2、建立和完善工作机制，有效预防和控制疫情。学校一旦
人类群流感行的预防与隔离防护措施 一.禽流感与人类禽流感病基本知识 （一）禽流感 禽流感是由禽流感病毒引起的家禽和野禽的一种传染性疾病。禽流感病毒属于甲型流感病毒，通常只感染禽类动物，偶尔可感染猪或其他哺乳动物。所有禽类种群都对禽流感病毒具有易感性，家禽中出现禽流感后，很容易形成禽流感的爆发或流行。高致病性禽流感病毒株（例如此次导致亚洲禽流感爆发的H5N1亚型）引起的禽类动物中禽流感爆发，具有非常强的传染性和非常高的病死率，有时候其病死率会接近100%。 （二）人类禽流感病 尽管禽流感病毒通常具有种属特异性，但某些亚型（例如此次导致亚洲禽流感爆发的H5N1亚型）的禽流感病毒能够跨种属感染，在人类接触被其感染的病禽、病禽的排泄物或者被病禽排泄物所污染的土壤/尘土后，会导致人类的感染，从而引起人类禽流感病。人类禽流感病的早期临床表现与普通流感类似，但其病情较重，部分患者病情进展迅速，可很快出现多器官衰竭或者并发败血症休克，同时可引起噬血细胞综合征等多种并发征，病死率比较高。 二.人类禽流感病的预防策略 由于周边地区一些国家禽流感病正在流行且有蔓延趋势，我国部分省区也已发现禽流感。因此，高度警惕禽流感在国内大范围流行，尤其警惕禽流感侵袭人类，保护人民健康，维持经济稳定发展，作好预防和控制具有重要意义。可供采取的预防与控制措施有： 1. 加强检疫，预防疫情和传染源输入。开展对禽类的疫情监测，严格消毒隔离措施。尽量避免野禽和家禽的密切接触，防止野禽进入禽场、禽舍和饲料储存间，注意保持水源的清洁卫生，并给予适当的疫苗进行免疫接种。 2. 如怀疑有本病发生，应严格执行封闭隔离及消毒措施，并尽快作出确证诊断。一旦确定发生禽流感，必须立即采取封闭隔离、同群扑杀（疫点3公里内的同类家禽应全部杀灭，即焚烧病鸡和尸体；5公里内的家禽强制免疫）；对禽舍空气、环境、物品进行消毒等综合措施，有效控制局部暴发，防止疫情扩散。
2020年H7N9禽流感防控工作方案 为进一步做好我县H7N9禽流感防控工作，防止人感染H7N9禽流感等疫情在我县传播和扩散，根据国家、省、市、县统一部署，结合我委实际情况和工作职责，特制定本工作方案。 一、指导思想 按照加强领导、密切配合、依靠科学、依法防治、群防群控、果断处置的原则，采取严格控制传染源，切断传染途径、保护易感动物的综合防治措施，防止疫情发生。 二、防控任务 按照县政府办《关于做好当前H7N9禽流感防控工作的紧急通知》(岳政办〔20xx〕6号)要求，各畜牧兽医站在当地乡镇政府统一领导下，尽职尽责完成各项防控任务。 1、高致病性禽流感免疫。各地要针对本地补栏家禽、免疫抗体水平不达标及去年秋防不足的薄弱环节，做好高致病性禽流感的强制免疫工作，尤其要做好种禽、规模养禽户的程序化免疫接种工作。对水禽饲养量大、林下土鸡规模养殖户、养禽密集区域，要科学启动高致病性禽流感的春季强免工作。 2、H7N9禽流感监测。针对当前的形势开展一次全面的疫情普查，尤其是规模养殖场、活禽交易市场，从外地调入商品家禽及产品较多的地方。根据市防指要求，全县采取10个规模养禽场，一个活禽交易市场，每场采集30份血清样品于2月13日送市畜牧兽医局检测，发现阳性病例，按照
《动物H7N9禽流感应急处置指南》处理。 3、家禽防疫重点场所消毒。对家禽养殖、屠宰及活禽交易等重点场所全面实施消毒灭源工作。 4、动物检疫监管。要进一步加强家禽的产地、运输、屠宰检疫工作，禽类及禽产品凭检疫合格证运输、上市销售。对检疫监管过程发现的病死畜禽要严格无害化处理，做到四不一处理，不留隐患。 5、H7N9禽流感防控宣传。H7N9禽流感可防可控，要加强禽流感防控知识宣传普及，引导社会公众理性消费禽类产品，坚持正确舆论导向，防止恐慌，指导兽医、养殖从业人员等密切接触者规范操作，做好高危人群防护工作，普及科学防控H7N9禽流感知识。 6、应急值守。各地要做好突发疫情的各项应急准备工作，实行24小时专人值班和领导带班制度，严格履行责任制。县畜牧兽医局要加强动物用疫苗、消毒药、防护服等动物疫病防控物资贮备。一旦发生疫情，能快速反应、及时应对，果断处置。实行零报告、日报告制度，各乡镇每日14:30前上报，县农委值班电话，联系人:。 三、保障措施 1、成立组织、加强领导 县农委成立H7N9禽流感防控领导小组。 2、开展工作督查，确保取得实效 县农委成立8个督查组，委班子成员带队，到各地开展工作督查禽流感免疫，监测排查，消毒灭源，检疫监督，无