醛酮類化合物检测方法─高效能液相层析法
中华民国89年8月29日（89）环署检字第48966号公告
自中华民国89年11月29日起实施
NIEA R502.10C
中华民国91年3月5日环署检字第0910014627号公告修正为NIEA R502.11C
一、方法概要
本方法用以检测非气体基质中具游離醛酮基(free carbonyl) 化合物。固态样品萃取液
或水样经过濾后，在40 ℃下与2,4-二硝基苯胼
(2,4-dinitrophenylhydrazine, DNPH) 反应，
生成相对应之DNPH 衍生物，经C18 管柱萃取或二氯甲烷液相－液相萃取及浓缩后，取
适当体积注入高效液相层析仪(HPLC) 。使用逆相层析管柱及梯度冲提分離出各种醛類与
酮類之DNPH 衍生物，用紫外光侦测器在360 nm 之波长测其吸收强度，进行目标待测物
的确认与定量。
二、适用范围
（一）本方法适用于水样、土壤、废弃物、及毒性化学物质样品检测。各目标待测物列出
如下：
（二）方法侦测极限列在表一及表二。视样品基质干扰情形及步骤中所使用的样品体积，
各样品的方法侦测极限，可能与表中所列之值不同。
三、干扰
（一）方法的干扰可能源自于溶剂、试剂、玻璃器皿和样品处理用设备的污染，导致随机
干扰，或使层析图谱的基线升高，因此必须使用相同的检测条件设定，依七、（四）节步骤执行实验室内试剂及器皿之方法空白检测，以确定无干扰物存在。
待测物CAS No.a
甲醛(Formaldehyde) 50-00-0
乙醛(Acetaldehyde) 75-07-0
丙醛(Propanal, Propionaldehyde) 123-38-6
巴豆醛(Crotonaldehyde) 123-73-9
丁醛(Butanal, Butyraldehyde) 123-72-8
环己酮(Cyclohexanone) 108-94-1
戊醛(Pentanal, Valeraldehyde) 110-62-3
己醛(Hexanal, Hexaldehyde) 66-25-1
庚醛(Heptanal) 111-71-7
辛醛(Octanal) 124-13-0
壬醛(Nonanal) 124-19-6
癸醛(Decanal) 112-31-2
注：a 化学文摘社登记号码。
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https://www.doczj.com/doc/744274517.html,.tw/niea/REFUSE/R50211C.htm 2008/10/6 1.玻璃器皿必须绝对洁净，使用后必须立即以最后所使用的溶剂冲洗，接着用清
洁剂和热水清洗，再用自來水和不含有机物的试剂水清洗，清洗完成后，晾干
并干燥之，使用前再于130 ℃烘箱中烘2-3 小时。乙腈的冲洗步骤可以烘箱烘
烤步骤取代，不可用甲醇或丙酮清洗玻璃器皿，因这些溶剂会与DNPH 反应而
生成干扰物。于干燥并冷却后，玻璃器皿应保存于一洁净区域，避免灰尘堆积
或其它污染物的污染。
2.使用高纯度试剂和溶剂可减少干扰，并可使用全玻璃蒸馏系统蒸馏纯化溶剂。
3.当执行硅胶管处理步骤时，必须戴聚乙烯(PE) 材质的手套，以避免可能的污
染。
（二）由于环境中自然存在甲醛，故常发生DNPH 试剂被甲醛污染，所使用的DNPH试剂
必须以HPLC 级的乙腈进行多次再结晶纯化步骤，再结晶纯化步骤系于40 - 60 ℃慢
慢将溶剂蒸发以得到最多的结晶，纯化后的DNPH 结晶保存于HPLC 级的乙腈中。
于执行样品检测前应先执行DNPH 中所含醛酮類化合物不纯物的检测，不纯物的量
应小于25 mg/L。參見附錄之DNPH 再结晶步骤。
（三）基质干扰可能來自于与样品共同被萃取出來的污染物，基质干扰情形可分成样品來
源和基质本身。若一系列样品都有干扰问题，则应更换移动相或进行必要的清洗步
骤。
（四）若样品中含有乙醇则于进行衍生步骤时，会产生乙醛，此背景问题，将无法检测浓
度低于0.5 ppm ( 500 ppb ) 的乙醛。
四、设备
（一）高效液相层析仪(组装式)
1.泵系统：可梯度冲提，固定流量控制可达1.5 mL/min.。
2.高压注射阀，附20 μL样品回路。
3.管柱：250 mm ×
4.6 mm 内径，5 - μm 粒径之C18 填充剂(Zorbax）或同级品。
4.吸光侦测器：360 nm。
5.与侦测器聯通的记錄器：最好用數据处理系统以量测尖峰面积及滞留时间。
6.氦气：供移动相溶剂除气。
7.移动相盛装容器和抽气过濾装置：供盛装和过濾HPLC 移动相之用，过濾装置
必须全为玻璃和铁氟龍材质，并使用0.22 μm 聚酯濾膜。
8.样品注射针：将样品注入HPLC 样品回路中，至少需承装样品回路体积之四倍
的容量。
（二）衍生反应设备
1.反应瓶：250 mL 平底长颈圆烧瓶。
2.分液漏斗：250 mL 附铁氟龍栓塞。
3.K-D装置：參見「分液漏斗液相－液相萃取法（NIEA R106.00C）」或其它萃取
方法系列的适当方法。(若其它浓缩装置经实验室验证，具同等功能者亦可使用)。
4.沸石：以二氯甲烷溶剂萃取洁净处理过，约为10 / 40 mesh (碳化硅或同级品)。
5.pH计：能量测精确至0.01 单位。
6.玻璃纤维濾纸：孔径1.2 μm (Fisher G4 级或同级品)。
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7.固相吸附管：内部充填2 g C18 (Baker 或同级品)。
8.真空固相萃取装置：能同时萃取12 个样品(Supelco 或同级品)。
9.样品容器：容量为60 mL (Supelco 或同级品)。
10.微量吸管：能精确转置0.10 mL 的溶液。
11.水浴槽：加热用，附同心圆盖，可控制温度(精确至± 2 ℃ )，需在抽气柜中操
作。
12.样品震荡器：回转震荡式及附温度控制烘箱(精确至± 2 ℃ ) (Lab-Line Orbit
Environ-Shaker Model 3527 或同级品)。
13.注射针：5 mL、500 μL、100 μL，(附旋转密合接头或同级品)。
14.针筒过濾片：0.45 μm 濾片匣，(Gelman Acrodisc 4438 或同级品)。（三）量瓶：5 mL 、10 mL 及250 mL 或500 mL。
（四）样品瓶：10 或25 mL 玻璃瓶，附铁氟龍内衬螺旋盖或加压密合盖。（五）天平：分析天平，精确至0.0001 g。
（六）玻璃漏斗。
（七）聚乙烯(PE) 手套：用來处理硅胶吸附管。
（八）固体样品萃取设备
1.旋转装置：此装置必须能以每分钟30 ±2 次之频率旋转萃取容器。
2.萃取容器：500 mL 含铁氟龍垫片旋转式盖或压合式盖。
3.过濾器附玻璃纤维濾纸。
五、试剂
（一）所有检测所需的无机试药皆需使用试药级。若需使用其它等级试药，则在使用前必
须确认该试药的纯度足够高，使检测结果的准确度不致降低。
（二）不含有机物的试剂水：所使用的试剂水中干扰物的浓度，应小于目标待测物方法侦
测极限值。
（三）甲醛溶液：浓度为37.6 % (w/w)，将甲醛溶于不含有机物的试剂水中。依下述步骤执
行甲醛储备溶液的正确浓度确认。
（四）醛類和酮類标准品：分析级，用來制备除甲醛外之其它目标待测物的DNPH 衍生标
准品，參見目标待测物表。市售已衍生化标准品亦可使用（參照「水中甲醛、乙醛
和丙醛检测方法－液相层析仪/紫外光侦测器法」NIEA W782.50B 五（六）、节）。
（五）使用之试剂
1.二氯甲烷，CH2Cl2：HPLC 级或同级品。
2.乙腈，CH3CN：HPLC 级或同级品。
3.氢氧化钠，NaOH：1.0 N 和5 N。
4.氯化钠饱和溶液，NaCl：于不含有机物的试剂水中加入过量的试药级的氯化钠
5.亚硫酸钠溶液，Na2SO3：0.1 M。
6.硫酸钠，Na2SO4：粒狀，无水。
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7.柠檬酸，C8H8 O7：1.0 M溶液。
8.柠檬酸钠，C6H5 Na3O7 2 H2O：1.0 M 含二个结晶水的三钠盐。
9.冰醋酸，CH3 CO2H。
10.醋酸钠，CH3 CO2Na。
11.盐酸，HCl：0.1 N。
12.柠檬酸盐缓冲液，1 M，pH = 3：将80 mL 之1 M 柠檬酸溶液加入于20 mL 之 1
M 柠檬酸钠溶液中，混合均匀，视需要使用NaOH 或HCl 调整pH 值。
13.醋酸盐缓冲液，5 M，pH = 5（分析甲醛时使用）：将40 mL 之5 M 醋酸溶液加
入于60 mL 之 5 M 醋酸钠溶液中，混合均匀，视需要使用NaOH 或HCl 调整
pH 值。
14.2,4-二硝基苯胼，[2,4-(O2N)2C6H3]NHNH2 (DNPH)，70 % (w/w) 于不含有机物的
试剂水中：将428.7 mg 之70 % (w/w) DNPH 溶液溶于100 mL 乙腈中，即制备
成浓度为 3.00 mg/mL 之溶液。
15.萃取液：将64.3 mL 之1.0 N NaOH 和5.7 mL 之冰醋酸加入于900 mL 不含有机
物的试剂水中，再以不含有机物的试剂水稀释至 1 L，pH 应为 4.93 ±
（六）储备标准溶液
1.甲醛储备标准溶液，约1000 mg/L：取适当量之甲醛确认标准品，或甲醛标准溶
液(约265 μL )于不含有机物的试剂水中稀释。若无法取得甲醛确认标准品，或
甲醛确认标准品的质量无法确定时，需依下述步骤执行进行溶液的标定。
甲醛储备溶液标定：取25 mL 之0.1 M Na2SO3 溶液置于烧杯中并记錄pH
值，加入25.0 mL 之甲醛储备溶液，记錄pH值，以0.1 N HCl 滴定此混合溶液，
使pH 回復至原pH 值。依下式计算甲醛的浓度：
式中：
N HCl =所使用HCl 溶液之当量浓度，[毫当量(meq)/mL] (1 mmole HCl = 1
meq HCl)
mL HCl =标定所使用之HCl 溶液体积
30.03 =甲醛之分子量，mg/mmole
2.醛類及酮類储备标准溶液：取适当量之标准品加入于90 mL 之乙腈中，稀释至
100 mL，浓度即为1000 mg/L。
（七）标准品储存：所有标准溶液需储存于附铁氟龍内衬螺旋盖的玻璃瓶中，应尽量充
满，使瓶端空间尽量小，于 4 ℃暗处保存，标准品可稳定保存6周。应经常检查储
备标准溶液是否有裂解或蒸发现象，尤其是制备校正标准品前应作检查。（八）校正标准品
取储备标准溶液，于不含有机物的试剂水中，配制至少五种不同浓度之包含每
一目标待测物的校正标准溶液，每一目标待测物的低浓度，应恰好或稍高于表一或
表二中所列之方法侦测极限，其它校正标准溶液的浓度，则可配合预期之真实样品
的浓度范围作适当的调整。
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https://www.doczj.com/doc/744274517.html,.tw/niea/REFUSE/R50211C.htm 2008/10/6 六、采样与保存
（一）參見「事业废弃物采样方法NIEA R118.00B」有关有机待测物相关之采样与保存规
范。
（二）采样后之样品需于 4 ℃以下冷藏，但毒性化学物质不在此限。水溶液样品必须采样
后三天内进行衍生反应及萃取步骤。固体萃取液样品应尽早检测。所有衍生反应后
的样品萃取液应于制备后三天内完成检测。
七、步骤
（一）样品萃取处理
1.含固体及水溶液兩相样品萃取法
若样品中包含固体，及水溶液样品中所含固体物大于百分之一，则应将水
相与固相分離，依六、（二）节步骤分别保存，供日后检测之用。若有需要，应将废弃物中固体颗粒磨碎减小颗粒之体积，以相当于20 倍固体样品重的溶剂
进行萃取。萃取完成后，萃取液需以孔径为0.6 至0.8 μm 之玻璃纤维濾纸过
濾。
(1)若样品水相与萃取液互溶(混合后未显示多层相)，则样品中的水相直接加入
于萃取液中，一并进行分析；若样品水相与萃取液不互溶，将水相与萃取
液分别分析，检测结果为按体积比例计算之平均浓度。
(2)若只检测甲醛，则水样及/或固体样品萃取液需调整pH 至5.0，以避免甲醛
干扰物的形成。
2.固体样品萃取法
(1)所有固体样品应充分搅拌使呈均匀狀，将树枝、树葉及石块等異质物丢弃不用。若样品潮湿，则需取具有代表性的样品，进行样品干重测定。固体
样品粒子若固体每克之表面积大于或等于 3.1 cm2 或最窄处小于 1 cm，即
可通过9.5 mm 之标准筛网，则不需减小颗粒尺寸，否则应先压碎、切割或
磨细，使能通过9.5 mm之标准筛网。压碎、切割或磨细的方法不可产生热，且样品应避免曝露于空气，最好先将样品及工具冷却至 4 ℃再用。
①样品干重测定：在某些狀况，样品测试结果需以干重为计算依据，若需
此种數据，则于秤取样品进行检测的同时，另外秤一份样品作为干重测
定之用。需注意干燥烘箱应放置在抽气柜内或附排气装置，高度污染的
有害废弃物样品的干燥步骤可能导致严重的实验室污染。
②秤取样品作萃取之用后，立即秤取 5 至10 g 样品于已在天平上归零之坩埚内，于105 ℃烘箱内隔夜干燥，测定其干重百分比，于干燥瓶内
冷却后，秤重：
(2)秤量25 g 固体样品于一附铁氟龍内衬密封螺旋盖或加压密封盖的500 mL 样
品瓶中，加入500 mL 萃取液(參見五、（五）15. 节)，以30 rpm 转速旋转
18 小时，进行固体样品萃取，再将萃取液用玻璃纤维濾纸过濾后，密封于样品瓶内于 4 ℃储存。每mL 萃取液相当于0.050 g 固体样品。较小的样品
量可使用较小体积的萃取液，一般依固体重：萃取液体积= 1 ：20 的比例
调整。
3.毒性化学物质样品萃取法
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https://www.doczj.com/doc/744274517.html,.tw/niea/REFUSE/R50211C.htm 2008/10/6 配合毒性化学物质管制项目包括甲醛、乙醛、丁醛及巴豆醛，取适量样
品，依据其为固相或液相參照七（一）、1. 或 2. 节步骤执行萃取。
4.水溶液样品直接进行下述步骤。
（二）净化和分離
1.对基质单纯的样品不一定需执行样品净化步骤。本净化步骤适用于各种样品基
质型式，若因样品基质特殊而需使用特殊的净化步骤，检测人员必须确定流洗
程序，并进行甲醛添加样品测定，其添加回收率应大于85%，若样品呈泡沫狀乳
液时之回收率会较低。
2.若样品不是澄清液或不知样品基质的复杂性，则需将样品于2500 rpm 離心10 分
钟，倒出上清液，以玻璃纤维濾纸过濾收集于密封的容器中。
（三）衍生反应
1.水样：先预估水样的取用量，使目标待测物的预估浓度能落在校正浓度范围内
(一般为100 mL )，将适当量的样品置入反应瓶中(參見四、（二）节)。2.固体样品：一般约需1 至10 mL 萃取液(參見七、(一)节)，若是较特殊的样品，
则取用量需由预备试验的结果决定之。若所使用的样品或萃取液体积小于100
mL，则应使用不含有机物的试剂水将总液体之体积调整为100 mL，稀释前应记
錄样品的原始体积。
3.目标待测物的衍生反应和萃取，可依下述
4. 或
5. 节步骤执行。
4.液相-固相衍生反应和萃取步骤
(1)于除检测甲醛外之目标待测物样品中，加入4 mL 柠檬酸盐缓冲液，并以6
M 盐酸或6 M 氢氧化钠调整pH 至3.0 ± 0.1，再加入6 mL 之DNPH 试剂，
密封此样品容器，放入以预先加热至40 ℃之回转振荡器(參見四、（二）12. 节)中一小时。调整振荡器旋钮，使反应容器内之液体和缓回转摇晃。
(2)若只检测甲醛，则加入4 mL 醋酸盐缓冲液，并以6 M 盐酸或6 M 氢氧化
钠调整pH 至 5.0 ± 0.1，再加入 6 mL 之DNPH 试剂，密封此样品容器，放
入以预先加热至40 ℃之回转振荡器(參見四、（二）12. 节)中一小时。调整振荡器旋钮，使反应容器内之液体和缓回转摇晃。
(3)组装連接至水压吸气器或真空泵上的固相萃取装置，将内部已填装2 g 吸
附剂之吸附管接到真空歧管上，于每一吸附管各以10 mL 之稀释柠檬酸盐缓冲液( 10 mL 之 1 M 柠檬酸盐缓冲液溶于250 mL 不含有机物之试剂水中)
流洗，进行吸附管调整。
(4)于一小时反应时间到达后，立即将样品反应容器自振荡器上取出，并加入10 mL 饱和NaCl 溶液。
(5)将反应溶液全量转置入吸附管，不能漏失，并以真空系统进行抽气，使溶液以3-5 mL/min 流量通过吸附管，当所有液体皆通过吸附管后，再持续抽
气约1 分钟。
(6)以9 mL 乙腈加入吸附管系列进行流洗步骤，并直接收集于10 mL 量瓶中，
以乙腈稀释至标线，混合均匀后，转置入样品中并密封保存之，以备检
测。（因本步骤使用过量的DNPH，于完成流洗步骤后，吸附管的颜色仍是黄色，并不表示待测物的衍生物有残留在管柱中）。
5.液相-液相衍生反应和萃取步骤
(1)于除甲醛外之目标待测物样品中，加入4 mL 柠檬酸盐缓冲液，并以6 M 盐
酸或6 M 氢氧化钠调整pH 至 3.0 ± 0.1，再加入 6 mL 之DNPH 试剂，密封
此样品容器，放入已预先加热至40 ℃之回转振荡器中一小时。调整振荡器旋钮，使反应容器内之液体和缓回转摇晃。
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https://www.doczj.com/doc/744274517.html,.tw/niea/REFUSE/R50211C.htm 2008/10/6 (2)若只检测甲醛，则加入4 mL 醋酸盐缓冲液，并以6 M 盐酸或6 M 氢氧化
钠调整pH 至 5.0 ± 0.1，再加入 6 mL 之DNPH 试剂，密封此样品容器，放
入已预先加热至40 ℃之回转振荡器中一小时。调整振荡器旋钮，使反应容器内之液体和缓回转摇晃。
(3)于250 mL 分液漏斗中，每次以20 mL 二氯甲烷进行样品溶液萃取，連续执
行三次。若于萃取过程中形成泡沫狀乳液情况，则于2000 rpm 離心机離心
10 分钟，将二层液分離，将泡沫乳液移除，再进行下列萃取步骤。将所有二氯甲烷萃取液一同倒入125 mL 内含5.0 g 无水硫酸钠之三角锥瓶中，旋
转摇晃内容物进行溶液去除水份之干燥程序。
(4)将10 mL浓缩管装在500 mL蒸发瓶上，组装K-D浓缩装置，參見分液漏斗液
相－液相萃取法（NIEA R106.00C）方法之四、设备。将萃取液小心倒入蒸发瓶中，需注意不要将硫酸钠固体倒入，以30 mL 二氯甲烷清洗三角锥瓶，并将此洗液一同倒入蒸发瓶中，不能有任何样品漏失。
(5)依分液漏斗液相－液相萃取法之K-D 浓缩步骤，进行萃取液浓缩，使最终
体积为5 mL，于进行检测前，将溶剂置换成乙腈。
（四）建议之层析检测条件
1.验证适用于水样，土壤或废弃物样品。
管柱：C-18， 4.6 mm × 250 mm 内径，5 μm 粒径
移动相梯度：70 / 30 乙腈/水(v/v)，维持20 分钟由70 / 30 乙腈/水改成100 % 乙
腈，于15 分钟内完成100 % 乙腈，维持15 分钟
流率：1.2 mL/分
侦测器：紫外光，360 nm
样品注射体积：20 μL
2.依下述步骤进行移动相的过濾，并去除其中溶解之气体：
(1)于抽气过濾装置中，将每一种溶剂(水和乙腈)，以0.22 μm 之聚酯薄膜濾纸
进行过濾。
(2)于已过濾之溶剂中，通入流量为100 mL/min 氦气10 至15 分钟进行除气；
或将已过濾之溶剂置于三角锥瓶中，瓶口盖上表玻璃，加热至60 ℃，持续5 至10 分钟，进行除气。于侦测器之后应連接一固定背压控制阀(350 kPa)
或0.25 mm 内径，15 - 30 cm 长之铁氟龍管，以避免移动相发生漏气现象。
(3)将各移动相装入固定使用的容器中，依七、（四）1.节所列的分析条件，设
定溶剂梯度更改的程序，将系统之高压泵于起始溶剂混合比例( 70 % / 30 % 之乙腈/水)以 1.2 mL/min 流速，运转20 至30 分钟，打开侦测器，将侦测结
果列印在记錄器的记錄纸上或類似的输出讯号记錄器上，以建立一稳定的
基线。
（五）校正
1.建立液相层析操作条件，使进行液相-固相衍生反应和萃取所得之各待测物滞留
时间与表一中所列之值相近；或进行液相-液相衍生反应和萃取所得之各待测物
滞留时间与表二中所列之值相近。各待测物滞留时间窗口的测定，參見「层析
检测方法总则」NIEA M102.01C 之七、（五）节。建议之层析分析条件列于本
方法七、（四）、1.节中。
2.依与样品制备相同之步骤，执行校正标准溶液之衍生反应及萃取步骤(參見本方
法七、（三）4. 或 5. 节)。如使用已衍生化标准品则依照「水中甲醛、乙醛和丙
醛检测方法－液相层析仪/紫外光侦测器法」五（六）、及七（一）、节标准溶
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https://www.doczj.com/doc/744274517.html,.tw/niea/REFUSE/R50211C.htm 2008/10/6 液及检量线制备规定执行。
3.执行溶剂空白检测以确保系统洁净无污染。（检测前，必需将样品及标准品先
回温至室温）。
4.依本方法七、（四）节所建议之层析分析条件进行经样品前处理之校正标准品
之检测，并将尖峰面积与校正标准溶液之浓度(单位为μg/L )制表。
5.将尖峰面积与对应之注入仪器中之校正标准溶液之浓度制表，以计算各待测物
于每一浓度之校正因子(參見八、(一)节计算公式)，校正标准品之平均校正因子
的百分相对标准偏差(%RSD) 应20 %，否则，即应进行系统检查。若经进行系
统检查后，校正标准品查核仍无法符合规范需求，系统即应进行重新校正。若
经重新校正后仍无法符合规范需求，即应重新制备校正标准品。
6.每日于进行样品检测前及检测后，必须以一个或數个校正标准品，进行校正曲
线的确认，确认所得之校正因子必须落在最初建立之校正因子的± 15 % 之内，
否则，即应进行系统检查。若经进行系统检查后，校正标准品查核仍无法符合
规范需求，系统即应进行重新校正。
7.每检测10 个样品或每批少于10 个样品时，必须进行一个校正标准品检测，以
确认DNPH 衍生物校正因子仍然落在最初校正因子的± 15 % 之内。（六）样品检测
1.以高效能液相层析仪依本方法七、（四）节之条件进行样品检测，表一及表二
所列之滞留时间和方法侦测极限，即是依七、（四）节之条件针对待测物检测
而得。
2.若尖峰面积超出校正曲线之线性范围，则应注入较小体积的样品量；或者，以
乙腈稀释此处理完成的样品溶液，再重新检测。
3.于目标待测物皆冲提出來，依八、（二）节中公式计算样品中待测物的浓度，
或是使用检测方法中适当的计算步骤。
4.若因明显的干扰因素而妨碍尖峰面积的计算，则需进行样品的再净化步骤。
八、结果处理
（一）校正因子、平均校正因子、标准偏差、和百分相对标准偏差计算：
式中：
= 由五个不同校正浓度所得之平均校正因子
CFi
= 每一校正标准品之校正因子i (i=1-5)
RSD= 校正因子之相对标准偏差
n= 校正标准品數
醛酮類化合物检测方法─高效能液相层析法(NIEA R502.11C) 第8 页，共20 页
https://www.doczj.com/doc/744274517.html,.tw/niea/REFUSE/R50211C.htm 2008/10/6 （二）依下式计算液体样品之浓度
式中：
= 待测物之平均校正因子
Vs= 样品之mL 數(无单位)
（三）依下式计算固体样品之浓度
式中：
= 待测物之平均校正因子
Vex= 样品萃取液之mL 數(无单位)
九、质量管理
（一）參考有机物萃取及样品制备法中的质量管理步骤，及「层析检测方法总则」方法中
的质量管理规范。实验室应建立质量保证计划书，并据以执行，并应将所有數据及
记錄建檔保存。
（二）依「层析检测方法总则」方法中，七、步骤进行必要的质量管理程序，以执行
HPLC 操作系统查核，如滞留时间窗口、校正确认、样品的层析检测等的查核。
（三）起始绩效查核：每一实验室应针对样品制备及后续配合的检测方法，于洁净的基质
中进行目标待测物的检测，所得數据准确度和精密度必须符合实验室的品保规范。
若执行新进人员训練时或仪器功能改变时，必须持续执行绩效查核。參見「层析检
测方法总则」之九、节中的相关规定。
（四）样品制备及检测之质量管理：实验室必须针对样品基质影响，建立方法绩效检查(精
密度、准确度和侦测极限)之书面资料档，对每十个或每一批次检测样品，至少需包
含方法空白、基质添加、重复样品、实验室品管样品等质量管理样品检测數据资
料。
1.样品基质影响之绩效检查的书面资料档，应包含至少一个基质添加和一对未添
加的重复样品；或者，一对基质添加/基质添加之重复样品的检测。需依据批次
样品基质的基本背景资料，才能决定该制备及检测重复样品或基质添加/基质添
加重复样品。若预期样品中含有目标待测物，则实验室必须执行一个基质添加
和一对未添加的重复样品检测；若预期样品中不含目标待测物，则实验室必须
执行一对基质添加/基质添加之重复样品检测。
2.每十个或每一批次样品检测时，必须伴同实验室质量管理样品之检测，此质量
管制样品之基质，必须为与真实样品基质類似之洁净(管制)基质，取用于检测之
体积或重量与真实样品相同。于实验室质量管理样品中添加与基质添加样品
地基基础工程质量检测的项目、方法和数量 基础类型：预制桩 1 检测项目：桩身质量 检测方法：低应变法或高应变法 检测数量： 抽检数量不少于总桩数的20%，且每个柱下承台不得少于1根。桩身完整性检测宜采用两种或多种合适的检测方法进行。 2 检测项目：承载力 检测方法：静载试验或高应变法 检测数量： 1、有下列情况之一的应当采用静载荷试验： （1）地基设计等级为甲级； （2）地质条件复杂、桩施工质量可靠性低； （3）属于本地区采用的新桩型或新工艺； （4）挤土群桩施工产生挤土效应；抽检数量不少于单位工程桩总数的1%，且不少于3根；当单位工程桩总数在50根以内时，不少于2根。 2、除1所列情形之外，当采用高应变法抽检时，抽检数量不低于8%且不少于10根。 基础类型：小直径混凝土灌注桩 1
检测方法：低应变法或高应变法 检测数量： 对于地基基础设计等级为甲级或地质条件复杂、成桩质量可靠性较低的灌注桩，抽检数量不少于桩总数的30%，且不得少于20根； 其它桩基工程，抽检桩数不少于总桩数的20%，且不得少于10根。 除上述规定外，每个柱下承台还不得少于1根。 桩身完整性检测宜采用两种或多种合适的检测方法进行 2 检测项目：承载力 检测方法：静载试验或高应变法 检测数量： 1、有下列情况之一的应当采用静载荷试验： （1）地基设计等级为甲级； （2）地质条件复杂、桩施工质量可靠性低； （3）属于本地区采用的新桩型或新工艺； （4）挤土群桩施工产生挤土效应；抽检数量不少于单位工程桩总数的1%，且不少于3根；当单位工程桩总数在50根以内时，不少于2根。 2、除1所列情形之外，当采用高应变法抽检时，抽检数量不少于单位工程桩总数的5%且不少于5根。 基础类型：大直径(桩径≥800mm)混凝土灌注桩 1
丙二醛含量测定
实验六、植物组织丙二醛含量测定 植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。 丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。 [原理] 植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应，反应产物为粉红色的3，5，5一三甲基恶唑2，4一二酮(Trimet—nine)。该物质在539nm波长下有吸收峰。由
于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应，并在该波长处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539nm与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。 [材料、仪器、药品] 1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照。 2．仪器：(1) 分光光度计；(2) 离心机；（3）水浴锅：(4) 天平；(5) 研钵；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度离心管；(9) 刻度试管(10ml)；(10) 镊子；(11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。 3．药品： (1) 0.05mol/L pH7.8磷酸钠缓冲液； (2) 石英砂； (3) 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸，先用少量蒸馏水溶解，然后定容到100ml； (4) 0.5％硫代巴比妥酸溶液：称取0.5g硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即为0.5％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。 [方法] 1．丙二醛的提取：取0.5g样品，加入2ml预冷的0.05mol/L pH7.8的磷酸缓冲液，加入少量石英砂，在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5ml刻度离心试管，将研钵用缓冲液洗净，清洗也移
植物组织或器官中丙二醛含量的测定 一、实验目的 二、实验原理： 三、实验仪器：紫外可见分光光度计离心机 四、实验步骤： ●1 MDA的提取称2g叶片，加入10％三氯乙酸(TCA)2ml及少量石英砂，研磨；进一步加入8mlTCA充分研磨，接着把匀浆液以4000r／min离心10min，其上清液即为MDA提取液。 ●2 MDA显色反应及测定取2ml MDA提取液（对照组取2ml 蒸馏水），在加2ml 0.6％TBA混匀，在试管上加棉塞，置沸水中加热15min，迅速拿出水浴锅冷却，以4000r／min离心15min ，于波长532nm和450nm下测定OD值。 五、结果计算 ●以测得的OD532减去OD600的非特异吸收值，分别计算衰老和对照组的值。 MDA浓度(μmol/L)=6.45OD532-0.56OD450 D450、D532分别代表450nm、532nm波长下的光密度值。 六、注意事项： ●0.1-0.5％的三氯乙酸对MDA—TBA反应较合适，若高于此浓度，其反应液的非专一性吸收偏高； ●MDA-TBA显色反应的加热时间，最好控制沸水浴10-15min之间。时间太短或太长均会引起532nm下的光吸收值下降； ●如待测液浑浊，可适当增加离心力及时间。 ●低浓度的铁离子能增强MDA与TBA的显色反应，当植物组织中铁离子浓度过低时应补充Fe3+（最终浓度为0.5 nmol·L-1） ●可溶性糖与TBA显色反应的产物在532 nm也有吸收（最大吸收在450 nm），当植物处于干旱、高温、低温等逆境时可溶性糖含量会增高，必要时要排除可溶性糖的干扰。 丙二醛(MDA)含量的测定 ①测定步骤 称取剪碎的试材1g，加入2ml10%三氯乙酸(TCA)和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA进一步研磨，匀浆在4000r/min离心10分钟，上清液为样品提取液。吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的吸光度。 ②计算(3-6)式中：C—MDA的浓度；A450，A532 和A600—分别代表450、532和600nm 波长下的吸光度值。 丙二醛(MDA)含量的测定 丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。 关键词：丙二醛含量测定氧化作用MDA膜脂过氧化硫代巴比妥酸TBATBA显色反应 植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛(MDA)是膜脂过氧化的最终分解产物，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。MDA从膜上产生的位置释放出后，可以与蛋白质、核酸反应，从而丧失功能，还可使纤维素分子间的桥键松驰，或抑制蛋白质的合成。因此，MDA的积累可能对膜和细胞造成一定的伤害。 [原理]丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁
地基基础检测试卷A卷
t 2L t L t 3L 成都交大工程项目管理有限公司检测一所 地基基础检测内部培训考核试卷(A) （满分100分，闭卷考试，时间90分钟） 姓 名 ： 分数： 选择题（每题1分，共100题） 1、变形模量是在现场进行的载荷试验在（ ）条件下求得的。 a 、无侧限 b 、有侧限 c 、半侧限 d 、无要求 2、低应变设备检定试验的检定时间一般为（ ）。 a 、3个月 b 、1年 c 、2年 d 、3年 3、低应变试验中，对于灌注桩和预制桩，激振点一般选在桩头的（ ）部位。 a 、1/4桩径处 b 、3/4桩径处 c 、桩心位置 d 、距桩边10cm 处 4、桩身混凝土纵波波速C 的公式为（ ）。 a 、C ＝2L/T b 、C ＝ c 、C ＝ d 、C ＝ 5、一块试样，在天然状态下的体积为210cm 3，重量为350g ，烘干后的重量为310g ，设土粒比重Gs 为2.67.(选做2道小题) （1）该试样的密度ρ＝（ ）。 a 、1.67 b 、1.48 c 、1.90 d 、1.76 （2）含水率ω为（ ）。
a、Ⅰ类桩 b、Ⅱ类桩 c、Ⅲ类桩 d、Ⅳ类桩 12、对于中密以上的碎石土，宜选用（）圆锥动力触探试验进行试验。 a、轻型 b、重型 c、中型 d、超重型 13、土的三相基本物理指标是（）。 a、孔隙比、含水量和饱和度 b、天然密度、含水量和相对密度 c、孔隙率、相对密度和密度 d、相对密度、饱和度和密度 14、与砂土的相对密实度无关的是（）。 a、含水量 b、孔隙比 c、最大孔隙比 d、最小孔隙比 15、地基常见破坏形式中不含下列选择中的（）。 a、整体剪切破坏 b、局部剪切破坏 c、拉裂破坏 d、冲剪破坏 16、地基整体剪切破坏过程中一般不经过下列（）阶段。 a、压密阶段 b、体积膨胀阶段 c、剪切阶段 d、破坏阶段 17、地基土达到整体剪切破坏时的最小压力称为（）。 a、极限荷载 b、塑性荷载 c、临塑荷载 d、临界荷载 18、平板载荷试验适用于（）。 a、浅层硬土 b、深层软土 c、浅层各类土 d、深层各类土 19、天然地基平板载荷试验圆形压板的面积一般采用（）。 a、0.1~0.2m2 b、0.25~0.5m2 c、0.5~1.0m2 d、1.0~2.0m2 20、平板载荷试验资料P~S曲线上有明显的直线段时，可以取（）作为承载
植物组织中丙二醛含量的测定 实验六逆境下植物细胞膜脂过氧化产物TBARS的提取与含量测定 活性氧(reactive oxygen species，ROS)是机体在生化反应中产生的性质活泼的具有极强的氧化功能、可以导致机体衰老的物质。 自由基的形成有生化、化学、物理等多方面的因素，但主要是来自机体内的生化反应，如各种酶的催化反应等都可以产生大量自由基。此外，一些化学物质空气污染、辐射、运动和心理压力等都会激发活性氧和自由基的产生。机体在氧的利用过程中，会因各种内因性和外因性因素而产生各种活性氧和自由基，这些自由基在维持机体正常代谢中起到积极的作用。 2-生物体内的自由基主要包括超氧阴离子)、羟自由基(O(?OH)、氢自由基(H?)、有机自 1由基(R?)、单线态氧(O)、过氧化氢(H0)、臭氧(O)及脂类过氧化自由基(LOO?)和脂 2223 类自由基(L?)等。 为维持机体的正常功能，抵御各种活性氧和自由基对器官和组织的伤害，体内有各种清 除活性氧和自由基的抗氧化物质，如抗氧化酶类、蛋白质类和抗氧化维生素等。抗氧化酶类 主要包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)、谷胱甘肽转移酶(GRT)等，这些酶是机体内部的第一道防线，但会随着年龄的增长而下降;蛋白质类包括铁传递蛋白、肝球蛋白、血红素结合蛋白等;抗氧化维生素有维生素C、尿酸、a-VE，α-胡萝卜素，β-胡萝卜素。
当活性氧和自由基浓度超过生理限度时，多余的自由基成为有害物质，攻击脂质、蛋白质、糖类和脱氧核糖核酸等大分子物质，发生各种氧化反应，引发各种 氧化损伤，进而导致细胞结构和功能的变化，使机体抵抗力下降，从而导致各种疾病发生，如人体癌症、动脉硬化、心脑血管疾病、肝肾损伤、糖尿病、缺血再灌流障碍等多种疾病。氧化是导致疾病的主要原因之一。如植物受到高温、水渍、低温等不良环境时，从形态上也表现出一系列症状，如萎嫣，叶片变黄，生物量变小等，以及保护酶活性下降等。为了了解生物体的健康状况，有必要对膜脂过氧化产物MDA进行测定。 一、实验目的 1.重点掌握MDA测定的原理和测定方法。 2.了解丙二醛( MDA )在生物体形成的因素。 3.进一步熟悉和掌握分光光度计和离心机的使用方法和注意事项。 二、原理 植物器官在衰老或逆境条件下，生物膜中的不饱和脂肪酸与自由基发生过氧化 反应，使膜中不饱和脂肪酸含量降低，导致膜的流动性下降，透性增大，使膜的正常功能遭到破坏。 ，MDA是膜脂过膜脂过氧化分解的终产物之一是丙二醛(malondialdehyde MDA ) 氧化作用的最终分解产物，其含量可以反映膜脂过氧化的程度，而且其在生物 体内积累还会对膜和细胞造成进一步的伤害，所以MDA的含量可以反映生物体衰老和遭受逆境伤害的程度。 测定原理:丙二醛在酸性和高温条件，可以与硫代巴比妥酸( TBA )反应生成红 棕色的三甲川( 3,5,5 —三甲基恶唑 2,4- 二酮)，在 532 nm 处有最大光吸收， 在 600 nm 处有最小光吸收，据此可测定MDA。可溶性糖干扰该反应，糖与TBA
建设工程质量检测人员（地基基础—低应变法、声波透射法） 现场操作技能考核实施细则 （2014年） 一、考核人员范围 参加2014年建筑工程质量检测人员，地基基础培训班学习并且理论考试合格人员。2012年以来，参加地基基础培训考试合格，已取得理论开始成绩合格证书，需要增加现场操作科目的人员。 二、考核目的 通过现场操作技能考核，对参考人员现场相关信息收集能力、仪器设备操作技能、分析处理结论的判断能力进行检验。 三、相关要求 1、参考人员带身份证及照片三张。 2、自备检测仪器设备。 ⑴低应变：检测仪主机、电源充电器、传感器、力锤、耦合剂、卫生纸、笔记本电脑、打印机、打印纸等。 ⑵声波透射：声波检测仪、换能器、三脚架、钢卷尺、声测管口拉线轮等。 3、所有检测数据的采集、数据分析及打印需参考人员独立完成。 四、流程：
（一）现场报到 1、应考人员到达长沙后，及时向考核组报告，以便确认其参考并安排考试。 2、考生持本人身份证进行身份信息审核后进入待考区，领取个人现场考核表并按要求在考核表上填写编号。 （二）现场采集数据（限时30分钟） 凭现场考核表、携带仪器设备，依次进入场地，老师和监考人员对仪器设备是否数据清零进行检查后，考生开始实操采集数据。 （三）进入室内数据分析、打印（限时15分钟） 独立完成分析、打印。 提交检测结果资料 1、提交实测曲线的分析。 2、结论及判据。 （四）现场基本技能提问（限时10分钟） （五）考试要求及纪律 1、考生通过身份核验进入待考区后，关闭通讯工具和移动网络工具，违者考试做零分处理。 2、考试从工作人员处领取考生编号，并按要求在考核表上填写编号，不得在考核表上填写与编号、考试内容无关的任何个人信息，如姓名、性别、单位、身份证号码等，违者考试做零分处理。
硫代巴比妥酸法（丙二醛含量测定） 一：原理 丙二醛(MDA)是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的三甲川(3，5，5—三甲基恶唑-2，4。二酮)，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，但532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值，所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为每克千重100—300ug·g-1，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3+的终浓度为0．5umol·L-1。 二：试剂 1：质量分数为10％三氯乙酸(TCA)； 2：质量分数0.6％硫代巴比妥酸：先加少量的氢氧化钠(1mol·L-1)溶解，再用10％的三氯乙酸定容； 三：方法 1：MDA的提取称取剪碎的试材1g，加入2mll0％TCA和少量石英砂，研磨至匀浆，再加8mlTCA研磨，匀浆在4000r·min-1离心10min，上清液为样品提取液。
2：显色反应和测定吸取离心的上清液2ml(对照加2ml蒸馏水)，加入2ml 0．6％TBA溶液，混匀物于沸水浴上反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液测定532、600和450nm波长下的消光度。 四：结果 C1＝11.71D450 C2＝{6.45(D532 - D600) - 0.56D450}NW-1 C1——可溶性糖的浓度(mmol·L-1) C2——MDA的浓度（·umol·L-1） D450、0532、D600分别代表450、532和600nm波长下的消光度值。 N:提取液总体积（ml） W:植物组织鲜重
地基基础检测内部培训考核试卷 （满分100分，闭卷考试，时间90分钟） 姓名：分数： 一、填空题（每题2分，共10题） 1、影响桩土荷载传递的因素有桩侧土和桩端土的性质，砼强度和长径比。 2、当采用低应变法或声波透射法检测桩身完整性时，受检桩的混凝土强度至少达到设计强度的70%且不少于15MPa。 3、建筑基桩检测技术规范中，对桩身完整性类别分为4 类，如桩身存在明显缺陷，对桩身结构承载力有影响的为Ⅲ类 4、用瞬态激振检验基桩桩身完整性通常使用力锤或力棒，根据所需要的带宽和能量要求，可选择不同轻型、重型的激振设备。 5、声波透射法中的声时值应由仪器测值t i扣除仪器系统延迟时间（即仪器零读数）t0及声波在水及两声测管中的传播时间t，。 6、声波透射法以超声波的声速值和波幅值为主，PSD值、主频值为辅来判断混凝土的质量。 7、基桩竖向静载荷试验时，应满足同一地质条件下不少于 3 根且不宜少于总桩数1%。当工程桩总数在50根以内时，不应少于 2 根。 8、单桩竖向抗压静载试验反力装置有（1）锚桩反力装置、（2）堆载反力装置、（3）堆锚结合反力装置。 9、当采用钻芯法检测桩身完整性时，当桩长为10－30m时，每孔截取3组芯样；当桩长小于10m时，可取2组，当桩长大于30m时，不少于4组。 10、对水泥土搅拌桩或旋喷桩复合地基，进行复合地基静载荷试验确定承载力时，可取s/b 或s/d等于0.006 所对应的压力（s为载荷试验承压板的沉降量；b和d分别为承压板宽度和直径，当其值大于2m时，按2m计算）。
1、一根桩径为φ377mm长为18m的沉管桩，低应变动测在时域曲线中反映的桩底反射为12ms，其桩身混凝土平均波速值为。 （A）3200m/s （B）3000m/s （B）1500m/s 2、当采用频域分析时，若信号中的最高频率分量为1000Hz，则采样频率至少应设置为___ ___。 （A）1000Hz （B）1500Hz （C）2000Hz 3、一根Φ为377mm长18m的沉管桩，（同上2题工地桩）对实测曲线分析发现有二处等距同相反射，进行频率分析后发现幅频曲线谐振峰间频差为250Hz，其缺陷部位在。（A）4m （B）6m （C）8m 4、应力波在桩身中的传播速度取决于。 （A）桩长（B）锤击能量（C）桩身材质 5、低应变检测中一般采用速度传感器和加速传感器，加速度传感器的频响特性优于速度传感器，其频响范围一般为。 （A）0-1 kHz （B）0-2kHz （C）0-5kHz 6、浙江省《建筑地基基础设计规范（DB33-10016-2003）》规定：“加载反力系统一般采用支座桩或支墩横梁反力架装置，该装置能提供的反力应不小于预估最大试验荷载的倍。”（A）1.2 （B）1.5 （C）2.0 7、浙江省《建筑地基基础设计规范（DB33-10016-2003）》规定，单桩竖向抗拔静载荷试验中，当试桩累计上拔量超过后，可终止加载。” （A）50mm （B）80mm （C）100mm 8、单桩水平静载试验规定，试桩至支座桩最小中心距为D，D为桩的最大边长（或直径）。 （A）2 （B）3 （C）4 9、声波透射法中测得的桩身混凝土声速是声波在无限大固体介质中传播的声速。对同一根混凝土桩，声波透射法测出的声速应低应变法测量出的声速。 （A）大于（B）小于（C）等于 10、当钻芯孔为一个时，宜在距桩中心的位置开孔。 （A）0～5cm （B）5～10cm （C）10～15cm
植物组织中丙二醛含量测定 方法一： 一、目的 通过实验，掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法。 二、原理 丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5－三甲基恶唑2、4－二酮），三甲川最大的吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值，所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100－300μg·g－1Dw，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3＋的终浓度为0.5nmol· L－1。在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值，即可计算出丙二醛含量。 三、材料、仪器设备及试剂 1. 材料：植物叶片。 2. 仪器设备：离心机，分光光度计；电子分析天平；恒温水浴；研钵；试管；移液管（1ml、5ml）、试管架；移液管架；洗耳球；剪刀。 3. 试剂：10％三氯乙酸；0.6％硫代巴比妥酸（TBA）溶液：石英砂。 四、实验步骤 1. 丙二醛的提取 称取受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片1g，加入少量石英砂和10％三氯乙酸2ml，研磨至匀浆，再加8ml10％三氯乙酸进一步研磨，匀浆以4000r/min离心10min，其上清液为丙二醛提取液。 2. 显色反应及测定 取4支干净试管，编号，3支为样品管（三个重复），各加入提取液2ml，对照管加蒸馏水2ml，然后各管再加入2ml 0.6％硫代巴比妥酸溶液。摇匀，混合液在沸水浴中反应15 min，迅速冷却后再离心。取上清液分别在532、600和450nm波长下测定吸光度（A）值。
植物组织MDA 含量测定 一、目的要求 1．掌握植物组织MDA 含量测定的原理及具体测量步骤； 2．深化理解MDA 与逆境和衰老的关系，理解植物组织MDA 含量测定的意义； 3．了解膜脂过氧化、氧自由基和MDA 形成的关系； 4．能够根据待测材料的具体情况设计实验步骤测定MDA 含量； 5．学习分光光度计，低温离心机等仪器的使用方法。 二、实验原理 植物遭受逆境胁迫或衰老时，体内会发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低，活性氧平衡失调及内源激素平衡失调等。活性氧代谢失调直接导致植物体内活性氧的大量积累，从而引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。 膜脂过氧化的产物有二烯轭合物、脂类过氧化物、丙二醛、乙烷等。其中丙二醛（Malondialdehyde ，MDA ）是膜脂过氧化最重要的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此在植物衰老生理和抗性生理研究中，MDA 含量是一个常用指标，可通过测定MDA 了解膜脂过氧化的程度，以间接测定膜系统受损程度以及植物的抗逆性。 MDA 在高温及酸性环境下可与2-硫代巴比妥酸（TBA ）反应，产生红棕色的产物3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮（Trimet —nine ），又名三甲川，该物质在532nm 处有最大光吸收，在600nm 处有最小光吸收。由于TBA 也可与其它物质反应，并在532nm 处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反应的影响，同时测定600nm 下的吸光度，利用532nm 与600nm 下的吸光度的差值计算MDA 的浓度。 即：A 532－A 600＝ε·C ·L 式中，A 532和A 600分别表示532nm 和600nm 处的吸光度值，C 是MDA 浓度，L 为比色杯厚度，ε=155L·mmol -1·cm -1。 + 100 C O H N S N H O O O H H H N H S N H O O H O OH N N H S 2O TB A MDA 3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮 需要指出的是，植物组织中糖类物质可能对MDA-TBA 反应有干扰作用。可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。
实验六、植物组织丙二醛含量测定 植物叶片在衰老过程中发生一系列生理生化变化，如核酸和蛋白质含量下降、叶绿素降解、光合作用降低及内源激素平衡失调等。这些指标在一定程度上反映衰老过程的变化。近来大量研究表明，植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内活性氧代谢的平衡被破坏而有利于活性氧的积累。活性氧积累的危害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。活性氧包括含氧自由基。自由基是具有未配对价电子的原子或原子团。生物体内产生的活性氧主要有超氧自由基(O-2)、羟自由基(OH·)、过氧自由基(ROO·)、烷氧自由基(RO·)、过氧化氢（H2O2）、单线态氧（O21）等。植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶POD和抗坏血酸过氧化物酶(ASA—POD)等是酶促防御系统的重要保护酶，抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)等是非酶促防御系统中的重要抗氧化剂。 丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。 [原理] 植物组织中的丙二醛(MDA) 在酸性条件下加热可与硫代巴比妥酸(TBA) 产生显色反应，反应产物为粉红色的3，5，5一三甲基恶唑2，4一二酮(Trimet—nine)。该物质在539nm波长下有吸收峰。由于硫代巴比妥酸也可与其它物质反应，并在该波长处有吸收，为消除硫代巴比妥酸与其它物质反
应的影响，在丙二醛含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用539nm 与600nm下的吸光度的差值计算丙二醛的含量。 [材料、仪器、药品] 1．材料：植物抗逆性鉴定实验中的四种菠菜样品，即绿色和黄色叶片的高温处理和室温对照。 2．仪器：(1) 分光光度计；(2) 离心机；（3）水浴锅：(4) 天平；(5) 研钵；(6) 剪刀；(7) 5ml刻度离心管；(9) 刻度试管(10ml)；(10) 镊子； (11) 移液管(5ml、2ml、1ml)；（12）冰箱。 3．药品： (1) L 磷酸钠缓冲液； (2) 石英砂； (3) 5％三氯乙酸溶液：称取5g三氯乙酸，先用少量蒸馏水溶解，然后定容到100ml； (4) ％硫代巴比妥酸溶液：称取硫代巴比妥酸，用5％三氯乙酸溶解，定容至100ml，即为％硫代巴比妥酸的5％三氯乙酸溶液。 [方法] 1．丙二醛的提取：取样品，加入2ml预冷的L 的磷酸缓冲液，加入少量石英砂，在经过冰浴的研钵内研磨成匀浆，转移到5ml刻度离心试管，将研钵用缓冲液洗净，清洗也移入离心管中，最后用缓冲液定容至5ml。在4500转/min离心10min。上清液即为丙二醛提取液。 2．丙二醛含量测定：吸取2 ml的提取液于刻度试管中，加入％硫代巴比妥酸的5%三氯乙酸溶液3ml，于沸水浴上加热10min，迅速冷却。于4500
****项目钻孔灌注桩基桩检测方案 编制： 审核： *********************** 二O一九年十月十四日
目录 1、工程概况 (2) 2、检测目的 (2) 3、检测依据及抽检原则 (2) 4、检测工作量 (3) 5、检测方法及原理 (4) 6、施工组织方案 (7) 7、委托方责任和义务 (7) 8、质量保证体系 (8) 9、文明施工及安全措施 (8) 10、工期安排 (9) 11、服务承诺 (9) 12、联系方式及其它说明 (9)
****项目钻孔灌注桩和浅层平板试验 检测方案 1、工程概况 拟建锦绣苑项目（建筑）位于****************，项目由*********有限责任公司开发建设，工程占地面积13334m2,建筑面积35308.3m2，由3栋主楼和1个地下室组成。主楼基础拟采用钻孔灌注桩基础，地下室基础拟采用天然基础。 本工程主楼拟采用的钻孔灌注桩桩径为800mm,有效桩长约37m，桩端持力层为第6层中风化灰岩，设计单桩承载力为5500kN；地下室拟采用天然基础，持力层为第4层粉质黏土层，承载力特征值为360kPa。 2、检测目的 1、单桩竖向抗压静载荷试验：采用单桩竖向抗压静载试验，确定单桩竖向抗压承载力特征值，为设计和工程验收提供依据。 2、单桩竖向抗拔静载试验：采用单桩竖向抗拔静载荷试验，确定单桩竖向抗拔承载力为设计和工程验收提供依据。 3、低应变反射波法：采用低应变反射波法测桩，确定混凝土桩的桩身完整性，判定桩身完整性类别与缺陷位置，为工程桩验收提供依据。 4、浅层平板载荷试验：采用浅层平板载荷试验，确定承压板下地基土应力主要影响范围内的承载力，为设计和工程验收提供依据。 3、检测依据及抽检原则 3.1、检测依据： （1）《建筑桩基技术规范》JGJ 94-2008 （2）《建筑地基基础设计规范》GB 50007-2011
附件 地基基础工程质量检测技术指引 为保证地基基础质量检测的规范性、准确性和公正性，根据国家、行业、省的相关技术规范、标准，结合我市实际制定本指引。 一、地基基础工程的检测项目、方法及数量 地基基础检测应符合地基基础工程质量检测的项目、方法和数量表（详见附表）以及下列规定： （一）地基基础工程质量检测抽检应按单位工程计算。 （二）同一单位工程采用不同地基基础类型时，应分别确定检测方法和抽检数量；同一单位工程中采用不同桩型或不同地基处理方法时，按相关规定分别确定检测方法和抽检数量。 （三）地基基础设计等级为丙级，且各单位工程的桩总数少于30根或复合地基处理面积小于300m2，可将地质条件相近，施工工艺相同的若干个单位工程合并起来，确定抽检数量，但应对每个单位工程进行承载力抽检。对每个单位工程的承载力抽检数量为：当采用静载试验时不得少于1根、当采用高应变法时不得少于2根、当采用平板载荷试验时不得少于2点。 （四）采用声波透射法、低应变法、高应变、钻芯法等对桩身质量进行检测，当检测结果不能对整桩桩身质量进行评定或难于判定其整桩的质量类别时，应采用钻芯法等适当的方法进行复检。 （五）桩身质量检测采用两种及以上方法的，抽测数量按实际检测的桩的数量计算，不得重复计算。 （六）工程桩的检测宜先进行桩身完整性检测，后进行承载力检测；当基础埋深较
大时，桩身完整性检测宜在基坑开挖至基底标高后进行。 二、验证检测 当对检测结果有异议时，应在原试验点附近重新选点进行试验或在原受检桩上进行验证检测，验证检测的抽检数量宜根据实际情况确定，可以采用以下方法：（一）可采用平板载荷试验，结合标准贯入试验、静力触探试验、圆锥动力触探试验、十字板剪切试验等方法，对地基基础承载力是否符合设计要求进行综合分析评价； （二）桩身浅部缺陷可采用开挖验证； （三）桩身存在缺陷的预制桩可采用高应变法进行验证，必要时还应进行水平荷载试验或竖向抗拔静载试验； （四）可根据实际情况采用静载法、钻芯法、高应变法、开挖等方法验证低应变法检测结果； （五）对于声波透射法检测结果有异议的，可重新用声波透射法检测，或在同一根桩用钻芯法检测； （六）可在同一根桩增加钻孔验证钻芯法检测结果； （七）可采用单桩竖向抗压静载试验验证高应变法所测单桩承载力检测结果。 三、扩大抽检 当检测结果不满足原设计要求时，应进行扩大抽检。扩大抽检应采用原来的检测方法或准确度更高的检测方法。当因未埋设声测管而不能采用声波透射法扩大抽检时，应采用钻芯法。扩大抽检的数量应符合下列规定： （一）当平板载荷试验、锚杆、单桩承载力检测或钻芯法检测结果不满足设计要求时，应按不满足设计要求的数量加倍扩大抽检。 （二）当采用低应变法抽检桩身质量所发现的Ⅲ、Ⅳ类桩之和大于抽检桩数的20%时，应按原抽检比例扩大抽检，当两次抽检的Ⅲ、Ⅳ类桩之和仍大于抽检桩数的20%时，
基桩质量检测工作实施细则 第一章总则 1.1 为确保基桩（地基和桩基）的工程质量、为设计和施工验收提供可靠依据，规范基桩质量检测工作十分重要。 1.2 基桩质量检测工作应符合安全适用、技术先进、操作规范、数据准确、评价正确的原则，满足《建筑地基基础施工质量验收规范》（GB50202-2002）的要求。依据《建筑地基基础设计规范》（GB50007-2002）、《建筑桩基技术规范》（JGJ94-94）、《建筑基桩检测技术规范》（JGJ106-2014）等现行技术标准，结合我省的实际情况，特制定规范基桩质量检测工作实施导则（以下简称《导则》）。 1.3 《导则》在湖南省行政区域内适用。凡在湖南省从事基桩质量检测工作都必须取得基桩质量检测机构资质证书，在资质证书规定的范围内开展工作。并取得计量认证合格证书。1.4 从事基桩质量检测工作的所有检测人员包括技术负责人必须经湖南省建设厅培训、考试合格后上岗。检测人员不得同时在两个及两个以上检测机构内兼职。 1.5 基桩质量检测使用的检测仪器、设备的性能指标和使用参数应符合《建筑基桩检测技术规范》（JGJ106-2014）的规定，所用计量器具应经检定合格在有效期内使用。 1.6 《导则》中的“基桩质量”是指《建筑地基基础施工质量验收规范》（GB50202-2002）中的主控项目“桩体质量（桩身完整性）”和承载力（地基承载力）”。 第二章基本规定
2.1 基桩质量的检测方法包括检测桩身完整性的低应变法、高应变法、钻芯法和声波透射法，检测承载力的静载试验、高应变法。静载试验又分为竖向抗压试验、水平试验和竖向抗拔试验。 2.2 基桩质量检测应严格执行《建筑基桩检测技术规范》（JGJ106-2014）中的各条强制性规定。 2.3 评价地（岩）基的质量应经过承载力检测，评价桩基的质量应经过桩身完整性检测和承载力检测。具体工程的检测内容及采用的检测方法应能满足《建筑地基础施工质量验收规范》（GB50202-2002）的要求。 2.4 桩身完整性检测的结果评价，应按照《建筑基桩检测技术规范》（JGJ106-2014） 3.5.1的原则，依据各种具体方法的实测数据和特征并参考勘察、设计和施工等资料综合分析。 2.5 承载力检测的结果评价，应符合设计所采用的规范要求。设计所采用的规范要求不明确时，应符合《建筑基桩检测技术规范》（JGJ106-2014）的要求。 2.6 检测工作程序应按《建筑基桩检测技术规范》（JGJ106-2014）图 3.2.1（检测程序框图）进行。 2.7 检测前的主要准备工作 2.7.1 调查、收集资料的内容有： 1．设计文件要求和委托方的检测目的； 2．工程名称、工程地点、建设、监理、勘察、设计、施工单位名称；3．工程地质勘察资料、基础设计图纸、基础施工记录等，及施工中出现的异常情况； 4．工程的场地环境条件。
实验7-2 丙二醛（MDA）含量测定 【实验目的】 1、掌握植物组织中丙二醛含量测定的原理和方法。 2、了解丙二醛含量测定的意义。 【实验原理】 植物器官在衰老或逆境胁迫时，会发生脂质过氧化作用，丙二醛（MDA）是其终产物之一，其含量可以反映脂类过氧化程度和植物遭受逆境伤害的程度。 在高温和酸性条件下，丙二醛与硫代巴比妥酸（TBA）反应，生成红棕色的3，5，5-三甲基恶唑-2，4-二酮（三甲川），在532nm处有最大吸收波长。植物在胁迫条件下可溶性糖增加，而糖与硫代巴比妥酸的反应产物在532nm也有吸收（最大吸收波长为450nm），因此测定植物组织中丙二醛含量时需排除可溶性糖的干扰。 采用双组分分光光度法可分别求出丙二醛和可溶性糖的含量。蔗糖与TBA反应产物在450 nm和532nm的摩尔吸收系数分别为85.40和7.40；丙二醛与TBA反应产物在450 nm和532nm的摩尔吸收系数分别为0和155000，根据Lambert-Beer定律，列出二元一次方程： A450=C1×85.4 A532- A600=C1×7.4+ C2×155000 解此方程得： C1（mmol/L）=11.71 A450 C2（μmol/L）=6.45（A532- A600）-0.56 A450 （1）其中：C1——可溶性糖的浓度 C2——丙二醛的浓度 A450、 A532、A600分别表示450、532和600nm波长下的吸光值。【实验器材与试剂】 1、实验材料受逆境胁迫的植物叶片或衰老的植物器官、正常植物叶片或器官 2、实验试剂 10%的三氯乙酸（TCA）（称取10克TCA蒸馏水稀释定容至100mL）、石英砂、0.6%的硫代巴比妥酸（称取0.6克硫代巴比妥酸先用少量1mol/L氢氧化钠溶解，再用10%三氯乙酸定容至100mL） 3、实验仪器分光光度计、离心机、研钵、电炉、试管、量筒、天
实验三丙二醛含量测定 一、实验目的： 熟悉测定丙二醛含量的常用方法。 二、实验原理 植物在盐胁迫下，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛是其产物之一，通常将其作为脂质过氧化指标，用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。丙二醛（MDA）是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸（TBA）反应生成红棕色的3,5,5-三甲基恶唑2,4-二酮（三胛川），其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。 三、仪器与试剂 分光光度计；离心机；电子天平；研钵两套；试管。 10%三氯乙酸（TCA）；0.6%硫代巴比妥酸；石英砂。 四、实验步骤 1.丙二醛提取 小麦叶片0.5g，加入10﹪三氯乙酸(TCA)5mL(分两次加)和少量石英砂充分研磨，匀浆液以5000r/min离心10min，上清液即为样品提取液。 2.反应体系 取2mL提取液，分别加入2mL 0.6﹪TBA液，混匀，在试管
上加盖塞，置于沸水浴中沸煮15min，迅速冷却，离心。取上清液测定532nm和450nm下的A值。以2mL水代替提取液调零。 3.MDA含量计算： 根据C＝6.45×A532－0.56×A450，计算出样品提取液中丙二醛的浓度C（μmol/L），然后再计算出每克样品中丙二醛的含量(μmol/gFW)。并对数据进行方差分析。
地基基础检测试题
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地基基础检测内部培训考核试卷 （满分1０0分，闭卷考试，时间９０分钟） 姓名：分数： 一、填空题(每题2分，共１0题） 1、影响桩土荷载传递的因素有桩侧土和桩端土的性质,砼强度和长径比。 ２、当采用低应变法或声波透射法检测桩身完整性时,受检桩的混凝土强度至少达到设计强度的70%且不少于15MPａ。 3、建筑基桩检测技术规范中,对桩身完整性类别分为４类,如桩身存在明显缺陷,对桩身结构承载力有影响的为Ⅲ类 4、用瞬态激振检验基桩桩身完整性通常使用力锤或力棒，根据所需要的带宽和能量要求，可选择不同轻型、重型的激振设备。 5、声波透射法中的声时值应由仪器测值ｔi扣除仪器系统延迟时间（即仪器零读数)t０及声波在水及两声测管中的传播时间ｔ，。 6、声波透射法以超声波的声速值和波幅值为主，PＳD值、主频值为辅来判断混凝土的质量。 7、基桩竖向静载荷试验时，应满足同一地质条件下不少于 3 根且不宜少于总桩数１％。当工程桩总数在５０根以内时，不应少于 2 根。 8、单桩竖向抗压静载试验反力装置有（１）锚桩反力装置、（2）堆载反力装置、(3）堆锚结合反力装置。 9、当采用钻芯法检测桩身完整性时，当桩长为１0－30ｍ时，每孔截取3组芯样;当桩长小于10m时,可取2组,当桩长大于３0ｍ时，不少于４组。 10、对水泥土搅拌桩或旋喷桩复合地基，进行复合地基静载荷试验确定承载力时,可取s／ｂ或s/d等于0.０0６所对应的压力(ｓ为载荷试验承压板的沉降量；ｂ和d分别为承压板宽度和直径,当其值大于2ｍ时,按2m计算)。
植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法) 简介： 动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物，一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列包括MDA在内的复杂化合物，此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA，例如thromboxane synthase也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。 植物丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法)(Plant MDA Assay Kit with TBA)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒，是采用一种基于MDA和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应，随后通过比色法用于对植物组织(根、茎、叶、种子等)MDA进行检测，是专门用于植物脂质氧化(lipid peroxidation)水平检测的试剂盒，不适用于动物组织、细胞、血液等。丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA发生反应，形成红色的MDA-TBA加合物，MDA-TBA加合物在有最大吸收，该复合物的吸光系数为155mmol/(L.cm)，并且在长处有最小吸收。植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰，我们总结出经验公式，以消除这一干扰。亦可以通过比标准品进行比较，进行含量检测。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、植物根茎、叶子等 2、剪刀 3、离心管、小试管或96孔板 4、分光光度计或酶标仪 5、水浴锅或恒温箱 6、离心机 操作步骤(仅供参考)：编号 名称TO1023 50T TO1023 100T Storage 试剂(A): 组织匀浆液250ml 500ml RT 避光试剂(A): TBA 0.35g 0.7g RT 避光试剂(C): 抗氧化剂0.5ml 1ml 4℃ 试剂(D): MDA标准品(1mmol/L) 0.5ml 1ml -20℃避光使用说明书