当前位置:文档之家› 酵母展示系统 Fc诱导展示实验步骤

酵母展示系统 Fc诱导展示实验步骤

酵母展示系统 Fc诱导展示实验步骤
酵母展示系统 Fc诱导展示实验步骤

诱导培养基配制Selective scFv (or Fab or ligand) Induction Media

1x (SG-CAA)成分:

5 g/L casamino acids (-ade, -ura, -trp) (BD Bacto #223050)

1 g/L galactose

1 g/L raffinose(棉子糖是自然界中最知名的一种三糖,由半乳糖、果糖和葡萄糖结合而成)0.05 g/L glucose

7g/L YNB Yeast Nitrogen Base with ammonium sulfate w/out amino acids (BD Difco 233520)

2.7 g/L Na2HPO4

3.7 g/L NaH2PO4

配制方法:

10X 10%半乳糖

称取100g溶于1000ml水中

②推荐过滤除菌高压灭菌

10X 10%棉子糖

①称取100g溶于1000ml水中

②推荐过滤,高压灭菌即可

20%葡萄糖

①称取200g溶于1000ml水中

②推荐过滤除菌,根据经验,高压灭菌即可

10X 10%半乳糖

10X YNB

①称取70g溶于1000ml水中

过滤除菌

1X SG – CAA

①称取 5 g 酪蛋白水解物

2.7 g Na2HPO4(6.8g Na2HPQ4.12H2O)

3.7g NaH2PO4(

4.8. NaH2PO4.2H2O)

②加入500ml水中,定容至700ml高压灭菌

③加入10X 10%半乳糖100ml、10X 10%棉子糖100ml 、20%葡萄糖2.5ml、

10X YNB100ml混匀

4度保存。有效期为1-2个月

抗体诱导展示实验步骤:

对照设置:

pYD说明书参考对照设置:

可选对照:EBY100/pYD-Fv 不诱导(阴性对照)

步骤:

1.挑单克隆至10ml SD-CAA(葡萄糖生长培养基)中,250rpm,30℃,摇过夜。

2.第二天测菌液浓度,OD600应在2-5之间。

如果小于2,继续培养至OD600=2-5,或直接进行步骤3

如果大于5,进行步骤3

注:通常OD600<2,展示抗体的细胞数将减少,OD600<5,诱导展示抗体的时间将延长

3. 3000-5000 x g 室温离心5-10min。

4.用SG-CAA(半乳糖诱导培养基)重悬至OD600=1,以保证细胞继续处于对数生长期,例:如果OD600=2,则重悬在20 SG-CAA培养基中。

5.立刻取出2OD600的细胞,作为诱导起始点样本(0h).例:OD600=1,应取

4ml。

6.250rpm,20℃,诱导培养。通常20℃会有更多的细胞展示抗体。

7.每隔12h取一次样,直到第48h(ie:0h,12h,24h,36h,48h)以确定最佳诱导时间。(取出的细胞4度保存,不要冻存细胞)

表达检测

1.各个时间点收集的细胞3000-5000 x g ,4℃离心5-10min。

2.用1XPBS重悬,再离心

3.收集细胞,用250ul 1XPBS,1 mg/ml BSA,and 1ug antibody重悬混匀

4.冰上放置30min,期间混匀几次

5.3000-5000 x g ,4℃离心5-10min

6.1XPBS洗一次

7.用1X PBS, 1 mg/ml BSA, and 1ug anti-mouse IgG重悬混匀

8.检测

PLC控制系统实验指导书(三菱)(精)

电气与可编程控制器实验指导书 实验课是整个教学过程的—个重要环节.实验是培养学生独立工作能力,使用所学理解决实际问题、巩固基本理论并获得实践技能的重要手段。 一 LC控制系统实验的目的和任务实验目的 1.进行实验基本技能的训练。 2.巩固、加深并扩大所学的基本理论知识,培养解决实际问题的能。 3.培养实事求是、严肃认真,细致踏实的科学作风和良好的实验习惯。为将来从事生产和科学实验打下必要的基础。 4.直观察常用电器的结构。了解其规格和用途,学会正确选择电器的方法。 5.掌握继电器、接触器控制线路的基本环节。 6.初步掌握可编程序控制器的使用方法及程序编制与调试方法。 应以严肃认真的精神,实事求是的态度。踏实细致的作风对待实验课,并在实验课中注意培养自己的独立工作能力和创新精神 二实验方法 做一个实验大致可分为三个阶段,即实验前的准备;进行实验;实验后的数据处理、分及写出实验报告。 1.实验前的准备 实验前应认真阅读实验指导书。明确实验目的、要求、内容、步骤,并复习有关理论知识,在实验前要能记住有关线路和实验步骤。 进入实验室后,不要急于联接线路,应先检查实验所用的电器、仪表、设备是否良好,了解各种电器的结构、工作原理、型号规格,熟悉仪器设备的技术性能和使用

方法,并合理选用仪表及其量程。发现实验设备有故障时,应立即请指导教师检查处理,以保证实验顺利进行。 2. 联接实验电路 接线前合理安排电器、仪表的位置,通常以便于操作和观测读数为原则。各电器相互间距离应适当,以联线整齐美观并便于检查为准。主令控制电器应安装在便于操作的位置。联接导线的截面积应按回路电流大小合理选用,其长度要适当。每个联接点联接线不得多余两根。电器接点上垫片为“瓦片式”时,联接导线只需要去掉绝缘层,导体部分直接插入即可,当垫片为圆形时,导体部分需要顺时针方向打圆圈,然后将螺钉拧紧,下允许有松脱或接触不良的情况,以免通电后产生火花或断路现象。联接导线裸露部分不宜过长。以免相邻两相间造成短路,产生不必要的故障。 联接电路完成后,应全面检查,认为无误后,请指导老师检查后,方可通电实验。 在接线中,要掌握一般的控制规律,例如先串联后并联;先主电路后控制电路;先控制接点,后保护接点,最后接控制线圈等。 3.观察与记录 观察实验中各种现象或记录实验数据是整个实验过程中最主要的步骤,必须认真对待。 进行特性实验时,应注意仪表极性及量程。检测数据时,在特性曲线弯曲部分应多选几个点,而在线性部分时则可少取几个点。 进行控制电路实验时。应有目的地操作主令电器,观察电器的动作情况。进一理解电路工作原理。若出现不正常现象时,应立即断开电源,检查分析,排除故障后继续实验。 注意:运用万用表检查线路故障时,一般在断电情况下,采用电阻档检测故障点;在通电情况下,检测故障点时,应用电压档测量(注意电压性质和量程;此外,还要注意

过程控制系统实验报告材料(最新版)

实验一、单容水箱特性的测试 一、实验目的 1. 掌握单容水箱的阶跃响应的测试方法,并记录相应液位的响应曲线。 2. 根据实验得到的液位阶跃响应曲线,用相关的方法确定被测对象的特征参数T和传递函数。 二、实验设备 1. THJ-2型高级过程控制系统实验装置 2. 计算机及相关软件 3. 万用电表一只 三、实验原理 图2-1单容水箱特性测试结构图由图2-1可知,对象的被控制量为水箱的液位H,控制量(输入量)是流入水箱中的流量Q1,手动阀V1和V2的开度都为定值,Q2为水箱中流出的流量。根据物料平衡关系,在平衡状态时 Q1-Q2=0 (1)

动态时,则有 Q1-Q2=dv/dt (2) 式中 V 为水箱的贮水容积,dV/dt为水贮存量的变化率,它与 H 的关系为 dV=Adh ,即dV/dt=Adh/dt (3) A 为水箱的底面积。把式(3)代入式(2)得 Q1-Q2=Adh/dt (4) 基于Q2=h/RS,RS为阀V2的液阻,则上式可改写为 Q1-h/RS=Adh/dt 即 ARsdh/dt+h=KQ1 或写作 H(s)K/Q1(s)=K/(TS+1) (5) 式中T=ARs,它与水箱的底积A和V2的Rs有关:K=Rs。 式(5)就是单容水箱的传递函数。 对上式取拉氏反变换得 (6) 当t—>∞时,h(∞)=KR0 ,因而有K=h(∞)/R0=输出稳态值/阶跃输入当 t=T 时,则有 h(T)=KR0(1-e-1)=0.632KR0=0.632h(∞)

式(6)表示一阶惯性环节的响应曲线是一单调上升的指数函数,如图 2-2 所示。当由实验求得图2-2所示的阶跃响应曲线后,该曲线上升到稳态值的63%所对应的时间,就是水箱的时间常数T。该时间常数 T也可以通过坐标原点对响应曲线作切线,切线与稳态值交点所对应的时间就是时间常数T,由响应曲线求得K和T后,就能求得单容水箱的传递函数。如果对象的阶跃响应曲线为图2-3,则在此曲线的拐点D处作一切线,它与时间轴交于B点,与响应稳态值的渐近线交于A点。图中OB即为对象的滞后时间τ,BC为对象的时间常数T,所得 的传递函数为: 四、实验内容与步骤 1.按图2-1接好实验线路,并把阀V1和V2开至某一开度,且使V1的开度大于V2的开度。 2.接通总电源和相关的仪表电源,并启动磁力驱动泵。

酵母表面展示IGRP206-214-H-2Kd单链三聚体及对NOD鼠CD8+T细胞的活化作用

酵母表面展示IGRP206-214-H-2K d单链三聚体 及对NOD鼠CD8+T细胞的活化作用 徐娅雯 李凯 王宇航 马旻轩 伏娇 潘兴元 钱莉 龚卫娟 季明春 (扬州大学医学院病原生物学和免疫学教研室,江苏扬州,225001) 摘要:目的:为阐明胰岛细胞特异性葡萄糖-6-磷酸催化亚基相关蛋白(IGRP)导致TID发病的机理,研究酵母表面展示IGRP206-214-H-2K d单链三聚体对NOD小鼠CD8+T细胞的影响。方法:在本室已有真核表达型IGRP206-214-H-2K d单链三聚体的基础上,构建IGRP206-214-H-2K d单链三聚体的真核酵母表达载体,筛选高表达IGRP206-214-H-2K d单链三聚体的酵母菌,进而研究酵母表面展示IGRP206--H-2K d单链三聚体对NOD小鼠CD8+T细胞的影响。结果:转染IGRP206-214-214 H-2K d单链三聚体的真核表达载体的酵母菌,在含2%D-半乳糖的酵母培养基中,20°C诱导18h,有77.1%的酵母能稳定表达IGRP206-214-H-2K d单链三聚体蛋白。体外试验证明表达IGRP206-214-H-2K d单链三聚体的酵母菌能激活NOD鼠脾脏CD8+T细胞。结论:本研究为进一步纯化真核表达IGRP206-214-H-2K d单链三聚体蛋白以及研究其在T1D发病过程中的分子机理提供了研究基础。 关键词:I型糖尿病;H-2K d;酵母展示;CD8 + T 细胞 中图分类号:R 392.2 文献标志码:A 文章编号: Displaying of IGRP206-214-H-2K d SCT on yeast surface and activation of CD8+T cells of NOD mice Xu Yawen, Li Kai, Wang Yuhang, Ma Minxuan, Fu Jiao, Pan Xingyuan, Qian Li, Gong Weijuan, Ji Mingchun Department of Pathogeniology & Immunology,School of Medicine,Yangzhou University,Yangzhou 225001,China Abstract: Objective: To study TID pathogenesis caused by islet-specific glucose-6-phosphatase catalytic subunit related protein (IGRP). Methods: On the basis of the eukaryotic expression of IGRP206-214-H-2K d-SCT we have had, we constructed a yeast expression system for IGRP206-214-H-2K d-SCT displayed on the yeast cell surface, screen the yeast with high expression of IGRP206-214-H-2K d-SCT, and then to study the effect of yeast surface display IGRP206-214-H-2K d-SCT on CD8+T cells of NOD mice. Results: After screened inducing expression condition, 77.1% of yeast cells are expressed IGRP206-214-H-2K d protein under condition of 2% of D-galactose and 18h of induced period at 20 °C. Then, we proved that yeast expressed specific proteins could activate spleen CD8+T cells of NOD mouse in vitro. Conclusion:Our results provide base research for extracting IGRP206-214-H-2K d protein and study molecular mechanism of T1D pathogenesis induced by IGRP206-214. [KEY WORDS]Type 1 diabetes mellitus;H-2K d;Yeast expression system;CD8 + T cells

自动控制原理实验指导

实验四 控制系统的稳定性判据 一、实验目的 熟练掌握系统的稳定性的判断方法。 二、基础知识及MATLAB 函数 用MATLAB 求系统的瞬态响应时,将传递函数的分子、分母多项式的系数分别以s 的降幂排列写为两个数组num 、den 。由于控制系统分子的阶次m 一般小于其分母的阶次n ,所以num 中的数组元素与分子多项式系数之间自右向左逐次对齐,不足部分用零补齐,缺项系数也用零补上。 1.直接求根判稳roots() 控制系统稳定的充要条件是其特征方程的根均具有负实部。因此,为了判别系统的稳定性,就要求出系统特征方程的根,并检验它们是否都具有负实部。MATLAB 中对多项式求根的函数为roots()函数。 若求以下多项式的根24503510234++++s s s s ,则所用的MATLAB 指令为: >> roots([1,10,35,50,24]) ans = -4.0000 -3.0000 -2.0000 -1.0000 特征方程的根都具有负实部,因而系统为稳定的。 2.劳斯稳定判据routh () 劳斯判据的调用格式为:[r, info]=routh(den) 该函数的功能是构造系统的劳斯表。其中,den 为系统的分母多项式系数向量,r 为返回的routh 表矩阵,info 为返回的routh 表的附加信息。 以上述多项式为例,由routh 判据判定系统的稳定性。 den=[1,10,35,50,24]; [r,info]=routh(den) r= 1 35 24 10 50 0 30 24 0 4 2 0 0

24 0 0 info= [ ] 由系统返回的routh 表可以看出,其第一列没有符号的变化,系统是稳定的。 注意:routh ()不是MATLAB 中自带的功能函数,须加载routh.m 文件(自编)才能运行。 三、实验内容 1.系统的特征方程式为010532234=++++s s s s ,试用两种判稳方式判别该系统的稳定性。 2.单位负反馈系统的开环模型为 ) 256)(4)(2()(2++++= s s s s K s G 试用劳斯稳定判据判断系统的稳定性,并求出使得闭环系统稳定的K 值范围。 四、实验报告 1.根据内容要求,写出调试好的MATLAB 语言程序,及对应的MATLAB 运算结果。 2.总结判断闭环系统稳定的方法,说明增益K 对系统稳定性的影响。 五、预习要求 1. 结合实验内容,提前编制相应的程序。 2.熟悉闭环系统稳定的充要条件及学过的稳定判据。 附件:routh.m function [routh_list,conclusion] = Routh(chara_equ) % ======================================================= % 自编劳斯判据求解系统稳定性函数 % 输入: % chara_equ = 特征方程向量 % 输出: % routh_list = 劳斯表 % conclusion = 给出系统是否稳定或存在多少个不稳定的根的结论

过程控制实验报告

过程控制实验 实验报告 班级:自动化1202 姓名:杨益伟 学号:120900321 2015年10月 信息科学与技术学院 实验一过程控制系统建模 作业题目一: 常见得工业过程动态特性得类型有哪几种?通常得模型都有哪些?在Simulink中建立相应模型,并求单位阶跃响应曲线、 答:常见得工业过程动态特性得类型有:无自平衡能力得单容对象特性、有自平衡能力得单容对象特性、有相互影响得多容对象得动态特性、无相互影响得多容对象得动态特性等。通常得模型有一阶惯性模型,二阶模型等、 单容过程模型 1、无自衡单容过程得阶跃响应实例 已知两个无自衡单容过程得模型分别为与,试在Simulink中建立模型,并求单位阶跃响应曲线。 Simulink中建立模型如图所示: 得到得单位阶跃响应曲线如图所示:

2、自衡单容过程得阶跃响应实例 已知两个自衡单容过程得模型分别为与,试在Simulink中建立模型,并求单位阶跃响应曲线。 Simulink中建立模型如图所示: 得到得单位阶跃响应曲线如图所示:

多容过程模型 3、有相互影响得多容过程得阶跃响应实例 已知有相互影响得多容过程得模型为,当参数, 时,试在Simulink中建立模型,并求单位阶跃响应曲线在Simulink中建立模型如图所示:得到得单位阶跃响应曲线如图所示:

4、无相互影响得多容过程得阶跃响应实例 已知两个无相互影响得多容过程得模型为(多容有自衡能力得对象)与(多容无自衡能力得对象),试在Simulink中建立模型,并求单位阶跃响应曲线。 在Simulink中建立模型如图所示: 得到得单位阶跃响应曲线如图所示:

实验室信息管理系统(LIMS)

1.实验室信息管理系统(LIMS)主要功能 1)样品的管理(Sample Management) 是指样品进入实验室到分配检测项目直至完成并认可检测结果出具证书的过程。样品被登录到LIMS 后,系统将严格按照预先定义好的有关规范对其实行管理。样品登录后,系统将自动分配一个按照一定规则命名的sample ID作为该样品在实验室中唯一的标识,并打印出条码。所有与样品有关的信息在样品登录时都将被记录下来,如送样单位付款单位接收报告单位的信息、需要出报告的日期、检测的项目及要求、样品的状态及描述、接收样品的日期部门及人员等。样品登陆后,根据检测项目的不同会自动给相关的技术小组下达工作任务,即自动分配样品。检测结果可以从仪器直接传输或者人工键盘输入,并且会有三级审核认可的过程,只有通过认可的结果才可以进行发布和产生分析证书。 2) 质量控制的管理(Quality Control Management) LIMS 应该提供相关的功能模块为实验室建立一套完善的质量管理体系,对影响实验室质量的诸要素进行有效的管理和控制,并严格规范实验室的标准操作流程(SOP)。为了保证分析数据的准确性、分析结果的可靠性和监测测试仪器的稳定性,过程质量控制中的数据进行统计分析。并通过对质控样品的数据分析,自动评价实验室总体或者个体的质量状况。通过对一定时间内样品关键质量数据的分析,预测其质量的趋势。 3) 仪器集成(Instrument Interface) 将测试仪器跟LIMS 集成,实现从测试仪器到LIMS 的自动数据传输代替测试和质量控制结果的键盘输入,从而大大提高工作的效率和减少错误率,缩短样品在实验室中的生命周期。 4)统计报表。 提供报表软件,生成准确反应实验室需求的报表,包括统计、计算等。通过开放式数据库连接,同时保持数据的一致性和安全性。 5) 厂家的管理。 包括厂家基本信息、厂家意见反馈、厂家送样历史记录、厂家样品监测信息、厂家与实验室业务往来统计、费用统计和厂家信誉额度等信息。

过程控制系统实验指导书解析

过程控制系统实验指导书 王永昌 西安交通大学自动化系 2015.3

实验一先进智能仪表控制实验 一、实验目的 1.学习YS—170、YS—1700等仪表的使用; 2.掌握控制系统中PID参数的整定方法; 3.熟悉Smith补偿算法。 二、实验内容 1.熟悉YS-1700单回路调节器与编程器的操作方法与步骤,用图形编程器编写简单的PID仿真程序; 2.重点进行Smith补偿器法改善大滞后对象的控制仿真实验; 3.设置SV与仿真参数,对PID参数进行整定,观察仿真结果,记录数据。 4.了解单回路控制,串级控制及顺序控制的概念,组成方式。 三、实验原理 1、YS—1700介绍 YS1700 产于日本横河公司,是一款用于过程控制的指示调节器,除了具有YS170一样的功能外,还带有可编程运算功能和2回路控制模式,可用于构建小规模的控制系统。其外形图如下: YS1700 是一款带有模拟和顺序逻辑运算的智能调节器,可以使用简单的语言对过程控制进行编程(当然,也可不使用编程模式)。高清晰的LCD提供了4种模拟类型操作面板和方便的双回路显示,简单地按前面板键就可进行操作。能在一个屏幕上对串级或两个独立的回路进行操作。标准配置I/O状态显示、预置PID控制、趋势、MV后备手动输出等功能,并且可选择是否通信及直接接收热偶、热阻等现场信号。对YS1700编程可直接在PC机上完成。

SLPC内的控制模块有三种功能结构,可用来组成不同类型的控制回路:(1)基本控制模块BSC,内含1个调节单元CNT1,相当于模拟仪表中的l台PID调节器,可用来组成各种单回路调节系统。 (2)串级控制模块CSC,内含2个互相串联的调节单元CNTl、CNT2,可组成串级调节系统。 (3)选择控制模块SSC,内含2个并联的调节单元CNTl、CNT2和1个单刀三掷切换开关CNT3,可组成选择控制系统。 当YS1700处于不同类型的控制模式时,其内部模块连接关系可以表示如下:(1)、单回路控制模式

杭电《过程控制系统》实验报告

实验时间:5月25号 序号: 杭州电子科技大学 自动化学院实验报告 课程名称:自动化仪表与过程控制 实验名称:一阶单容上水箱对象特性测试实验 实验名称:上水箱液位PID整定实验 实验名称:上水箱下水箱液位串级控制实验 指导教师:尚群立 学生姓名:俞超栋 学生学号:09061821

实验一、一阶单容上水箱对象特性测试实验一.实验目的 (1)熟悉单容水箱的数学模型及其阶跃响应曲线。 (2)根据由实际测得的单容水箱液位的阶跃响应曲线,用相关的方法分别确定它们的参数。二.实验设备 AE2000型过程控制实验装置,PC机,DCS控制系统与监控软件。 三、系统结构框图 单容水箱如图1-1所示: Q2 图1-1、单容水箱系统结构图 四、实验原理 阶跃响应测试法是系统在开环运行条件下,待系统稳定后,通过调节器或其他操作器,手动改变对象的输入信号(阶跃信号),同时记录对象的输出数据或阶跃响应曲线。然后根据已给定对象模型的结构形式,对实验数据进行处理,确定模型中各参数。 图解法是确定模型参数的一种实用方法。不同的模型结构,有不同的图解方法。单容水箱对象模型用一阶加时滞环节来近似描述时,常可用两点法直接求取对象参数。 如图1-1所示,设水箱的进水量为Q1,出水量为Q2,水箱的液面高度为h,出水阀

h1( t ) h1(∞ ) 0.63h1(∞) 0 T V 2固定于某一开度值。根据物料动态平衡的关系,求得: 在零初始条件下,对上式求拉氏变换,得: 式中,T 为水箱的时间常数(注意:阀V 2的开度大小会影响到水箱的时间常数),T=R 2*C ,K=R 2为单容对象的放大倍数,R 1、R 2分别为V 1、V 2阀的液阻,C 为水箱的容量系数。令输入流量Q 1 的阶跃变化量为R 0,其拉氏变换式为Q 1(S )=R O /S ,R O 为常量,则输出液位高度的拉氏变换式为: 当t=T 时,则有: h(T)=KR 0(1-e -1)=0.632KR 0=0.632h(∞) 即 h(t)=KR 0(1-e -t/T ) 当t —>∞时,h (∞)=KR 0,因而有 K=h (∞)/R0=输出稳态值/阶跃输入 式(1-2)表示一阶惯性环节的响应曲线是一单调上升的指数函数,如图1-2所示。当由实验求得图1-2所示的 阶跃响应曲线后,该曲线上升到稳态值的63%所对应时间,就是水箱的时间常数T ,该时间常数T 也可以通过坐标原点对响应曲线 图 1-2、 阶跃响应曲线

酵母细胞

酵母细胞表面展示技术是一种真核蛋白表达系统。其基本原理是将外源靶蛋白基因与特定的载体基因序列融合后导入酵母细胞,融合蛋白诱导表达后,信号肽引导融合蛋白向细胞外分泌,外源蛋白的展示主要是借助于GPI锚的作用,GPI锚定蛋白的C端包含疏水多肽,当细胞蛋白被合成,前体蛋白通过羧基末端的疏水序列锚定在内质网膜上,其余蛋白则位于内质网腔中。在极短的时间内,疏水序列在转酰氨基酶的作用下ω位点裂开同时被GPI锚置换,并被运输到高尔基体再通过分泌途径分泌至细胞膜外。在蛋白水解酶作用下,分泌信号序列被切除,细胞蛋白被磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C从细胞膜上释放并以GPI锚定形式与葡聚糖共价相连被转运至细胞壁外。图1展示的是通过α-凝集素系统转运目的蛋白到细胞表面的分泌途径。酵母表面展示技术具有表达偏差小,展示的融合蛋白相对分子质量范围大,分子数量多,筛选、纯化、活性测定方便等优点。 目前,最常见的酵母表面展示系统包括:凝集素展示表达和絮凝素展示表达[5]。如图2所示,α-凝集素展示表达系统(图2A)是将外源基因与酵母编码α-凝集素C端编码序列连接后插入质粒载体的分泌信号肽(Secretion signal,SS)下游,融合蛋白诱导表达后,信号肽引导嵌合蛋白向细胞外分泌,由于融合蛋白C-末端存在含GPI锚定信号(GPIanchor attachment signal)的凝集素多肽序列,可将蛋白锚定在酵母细胞壁上,从而将蛋白分子展示表达在酵母细胞表面;a-凝集素展示系统(图2B)与α-凝集素展示系统不同的是其具有由二硫键连接的Aga1和Aga2两个亚基,目的蛋白通过与Aga2形成融合蛋白,再通过Aga1末端的GPI结构使目的蛋白表达于细胞表面;絮凝素展示表达系统利用絮凝素基因(flo1p)与外源基因融合,并将融合蛋白展示表达在细胞表面,此系统又包括两个子系统:GPI锚定

实验室信息管理系统,使用的有效性

实验室信息管理系统,使用的有效性 文章内容检索重点:试验室能力管理、神鹰LIMS、实验室管理系统、TDM实验室管理系统、数据采集、实验室信息管理系统。 实验室智能管理系统,是天健通泰科技在神鹰TDM多年成功经验的背景下,面向标准化实验室推出的又一个具有行业领先技术的实验室信息管理系统软件。具有独立自主知识产权,可以针对客户需求做出迅速调整的成熟软件系统。LIMS实验室智能管理系统满足ISO/IEC:17025体系的全部要求,对实验室的资源、样品、分析任务、实验结果、质量控制等进行合理有效的科学管理。LIMS管理系统可保证您实验室数据的完整性、合法性以及可追溯性;极大地减少了实验室管理的人工成本,使得错综复杂的流程管理能够有条不紊的进行。 神鹰实验室综合管理系统是基于用户的硬件平台,选择标准的微软系统平台,可在局域网内win 10/8/7/2000/XP等中文平台上稳定运行。利用先进的可视化开发工具,采用成熟与流行技术相结合的开发方式,完成具有良好用户界面,易学易用,维护方便,方式灵活的LIMS管理软件,快速准确地完成各类分析测试和数据的采集、加工和存贮,实现全实验室、全业务的计算机化管理、实现客户实验室检测数据处理系统的联网运行,帮助客户改变以前的运行和管理模式,实现检测业务流程和资源(包括检测数据、人员、仪器设备、标准物质、试剂材料、技术和质量文件、检测经费等)的计算机化管理,为实验室提供科学、规范、高效的管理方法。使客户实验室对社会开展的分析测试等服务的数据处理、数据管理规范化、科学化和现代化。

一、实验室信息管理的必要性 1、改进质量管理手段 1.1提高分析数据的综合利用率 1.2提高分析数据的时效性 1.3挖掘分析数据的潜在价值 2、规范实验室内部管理在实验室内部,根据实验室业务及质量管理流程,实现样品登记申请、样品登记、任务分配、分析数据的快速采集,审核、处理、统计、查询,直至报表自动生成,最后将有用的信息传递给桌面用户。将人员、仪器、试剂、方法、环境、文件等影响分析数据的质量要素有机结合起来,整体内部管理体系遵循ISO9000及实验室评审国际标准ISO/IEC 17025,全面提升实验室的分析水平和规范化管理。LIMS系统的建立也为企业实验室进行标准化认证创造条件。 3、实现质量数据大范围共享LIMS系统的主要管理对象是实验室,它既是实验室的信息集成,又支持企业其它管理系统对质量数据的快速访问. 只要有相应的访问权限,LIMS终端用户可以选择浏览数据。通过样品链,在同一个界面中完成对分析数据的浏览。

计算机过程控制系统(DCS)课程实验指导书(详)

计算机过程控制系统(DCS)课程实验指导书实验一、单容水箱液位PID整定实验 一、实验目的 1、通过实验熟悉单回路反馈控制系统的组成和工作原理。 2、分析分别用P、PI和PID调节时的过程图形曲线。 3、定性地研究P、PI和PID调节器的参数对系统性能的影响。 二、实验设备 AE2000A型过程控制实验装置、JX-300X DCS控制系统、万用表、上位机软件、计算机、RS232-485转换器1只、串口线1根、网线1根、24芯通讯电缆1根。 三、实验原理 图2-15为单回路水箱液位控制系统 单回路调节系统一般指在一个调节对象上用一个调节器来保持一个参数的恒定,而调节器只接受一个测量信号,其输出也只控制一个执行机构。本系统所要保持的参数是液位的给定高度,即控制的任务是控制水箱液位等于给定值所要求的高度。根据控制框图,这是一个闭环反馈单回路液位控制,采用SUPCON JX-300X DCS控制。当调节方案确定之后,接下来就是整定调节器的参数,一个单回路系统设计安装就绪之后,控制质量的好坏与控制器参数选择有着很大的关系。合适的控制参数,可以带来满意的控制效果。反之,控制器参数选择得不合适,则会使控制质量变坏,达不到预期效果。一个控制系统设计好以后,系统的投运和参数整定是十分重要的工作。 一般言之,用比例(P)调节器的系统是一个有差系统,比例度δ的大小不仅会影响到余差的大小,而且也与系统的动态性能密切相关。比例积分(PI)调节器,由于积分的作用,不仅能实现系统无余差,而且只要参数δ,Ti调节合理,也能使系统具有良好的动态性能。比例积分微分(PID)调节器是在PI调节器的基础上再引入微分D的作用,从而使系统既无余差存在,又能改善系统的动态性能(快速性、稳定性等)。但是,并不是所有单回路控制系统在加入微分作用后都能改善系统品质,对于容量滞后不大,微分作用的效果并不明显,而对噪声敏感的流量系统,加入微分作用后,反而使流量品质变坏。对于我们的实验系统,在单位阶跃作用下,P、PI、PID调节系统的阶跃响应分别如图2-16中的曲线①、②、③所示。 图2-16 P、PI和PID调节的阶跃响应曲线

过程控制系统仿真实验指导

过程控制系统Matlab/Simulink 仿真实验 实验一 过程控制系统建模 ............................................................................................................. 1 实验二 PID 控制 ............................................................................................................................. 2 实验三 串级控制 ............................................................................................................................. 6 实验四 比值控制 ........................................................................................................................... 13 实验五 解耦控制系统 . (19) 实验一 过程控制系统建模 指导内容:(略) 作业题目一: 常见的工业过程动态特性的类型有哪几种?通常的模型都有哪些?在Simulink 中建立相应模型,并求单位阶跃响应曲线。 作业题目二: 某二阶系统的模型为2 () 22 2n G s s s n n ?ζ??= ++,二阶系统的性能主要取决于ζ,n ?两个参数。试利用Simulink 仿真两个参数的变化对二阶系统输出响应的影响,加深对二阶 系统的理解,分别进行下列仿真: (1)2n ?=不变时,ζ分别为0.1, 0.8, 1.0, 2.0时的单位阶跃响应曲线; (2)0.8ζ=不变时,n ?分别为2, 5, 8, 10时的单位阶跃响应曲线。

细菌表面展示技术讲稿(详细版)

细菌表面展示技术讲稿(详细 版) 标准化文件发布号:(9312-EUATWW-MWUB-WUNN-INNUL-DQQTY-

细菌表面展示(bacterial cell-surface display)技术 的发展及应用 各位同学大家好,今天我们为大家带来的是:细菌细胞表面展示技术,严谨的科学定义是:指通过重组 DNA 技术,将外源功能蛋白表达并定位于特定细菌细胞的表面,以达到一定的研究与应用目的是一项新的蛋白质应用技术。这句话该怎么理解:一般基因工程需要把蛋白提取出来,最好是菌体可以把蛋白分泌到菌体外,表面展示技术是把目的蛋白表达在细胞表面,外源蛋白的这种表面锚定有4个好处:1.可以使特定的反应在细胞表面直接发生而提高反应效率,2.能克服某些大分子底物不能穿越细胞膜而进入胞内,3客服某些反应产物在细胞内不能进行特定的构型折叠等弊端,4.使产物的提取纯化过程简化。 接下来,我组将从发展史,菌体构建,技术应用,未来展望4各方面为大家介绍。 1.发展史 大多数生物技术都是经历了噬菌体——细菌——真核(酵母菌)的三个发展应用阶段,表面展示技术也不例外。包括:1985年Smith等人创建噬菌体表面展示技术,次年, Freudl 报道细菌表面展示技术,以及近年来兴起的酵母菌表面展示技术与杆状病毒表面展示系统。 噬菌体表面展示技术:该展示系统是最早发展起来的,历经20多年发展,现在最常用的噬菌体表面展示系统主要有:丝状噬菌体、K噬菌体、T4噬菌体和T7噬菌体展示系统。噬菌体表面展示技术具有表面展示技术的基本优点,而且技术发展相对成熟,但由于载体自身的限制,使得该展示系统存在着很大缺点。比如,外源蛋白的插入可能影响噬菌体的装配,使其失去感染力;多肽或蛋白质与噬菌体外壳蛋白融合表达时存在不可预测的偏差性等。 酵母菌表面展示系统:酵母表面展示系统是近年发展起来的一种重要的真核蛋白表面展示系统。酿酒酵母是具有细胞壁的单细胞真核微生物,是目前常见的酵母表面展示系统载体蛋白来源。根据交配型的差异分为MATa和MATA两种单倍体,其细胞表面分别表达a或A凝集素,它们是酵母细胞壁上的两种甘露糖蛋白,可介导细胞间的性黏附使细胞融合。目的蛋白可分别与a或A凝集素融合,展示于酵母细胞表面。与细菌相比,酿酒酵母在表面展示技术上的应用具有许多优势:(1)具有公认的安全性;(2)其蛋白质折叠和分泌方式与哺乳动物相似,展示哺乳类蛋白优于细菌系统;(3)具有众所周知的发酵特性;(4)展示的蛋白质可通过糖基磷脂酰基醇(GPI)锚定或二硫键绑定在细胞壁上。因此,酵母表面展示系统是一种更为安全、高效的表面展示系统。但该系统也存在一些缺陷,例如酵母生长适温范围窄,主要的蛋白质后加工过程与哺乳动物细胞差异较大,重组酵母缺少选择标记等。2006年有人报道酵母的质量控制系统并不能区分表达完整折叠的蛋白和折叠结构缺陷型蛋白〔4〕,这也进一步表明了酵母表面展示系统在蛋白表达上还不完善,筛选出来的蛋白应用前可能还需要进一步分析研究。 杆状病毒表面展示系统:属于高等真核生物展示系统。该展示系统以杆状病毒为载体,外源基因插入病毒的衣壳蛋白基因或囊膜蛋白基因后经过加工处理,与衣壳蛋白或囊膜蛋白进行融合表达并在病毒粒子或感染细胞表面进行展示。作为一种真核生物展示系统,杆状病毒表面展示系统允许大片段外源基因的插入,能有效地在病毒粒子表面展示外源蛋白,而且可以对外源蛋白进行糖基化加工和折叠等翻译后修饰,尤其适合需进行特异的翻译后加工才能有效折叠和具有生物活性的高等真核生物细胞表面蛋白和分泌蛋白的展示。目前研究及应用最为广泛的杆状病毒表面展示系统是苜蓿尺蠖核型多角

噬菌体展示技术操作步骤

筛选多肽 试剂及配制 (1)LB培养基: 胰蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 5g 溶于去离子水,至1L,高压灭菌,4℃保存。 (2)IPTG/Xgal: 称取1.25g IPTG,1.0g Xgal,溶于二甲基甲酰胺,至总体积25ml,-20℃避光保存。(3)LB/IPTG/Xgal平板: 1L LB培养基+15g琼脂粉,高压灭菌,冷却至70℃以下,加入1ml IPTG/Xgal,立即铺板,4℃避光保存。 (4)顶层琼脂糖凝胶: 胰蛋白胨10g 酵母提取物5g NaCl 5g MgCl2.6H2O 1g 琼脂糖7g 溶于适量去离子水中,至总体积为1L。高压灭菌,分装为50ml/份,室温保存,使用时于微波炉内融化。 (5)2×M9盐: Na2HPO412g KH2PO46g NaCl 1g NH4Cl 2g 溶于适量去离子水中,至终体积为1L。 (6)小型平板: 500ml 2×M9盐 500ml 3%琼脂粉 20ml 20%葡萄糖 2ml 1M MgSO4 0.1ml 1M CaCl2 1ml 硫胺素(10mg/ml) 在混合之前,将上述成分分别高压灭菌并冷却至70℃以下,葡萄糖和硫胺素采用过滤除菌。平板储存于4℃。 (7)封闭缓冲液: 0.1M NaHCO3(PH 8.6) 5mg/ml BSA 0.02% NaN3 过滤除菌,储存于4℃。 (8)TBS: 50mM Tris-HCl (PH 7.5) 150mM NaCl

高压灭菌,室温储存。 (9)PEG/NaCl: 20%(w/v)聚乙二醇-8000 2.5M NaCl 高压灭菌,室温储存。 (10)碘化物缓冲液: 10mM Tris-HCl (PH 8.0) 1mM EDTA 4M NaI 室温避光保存。 操作步骤: 1.第一天 (1)以0.1M NaHCO3(PH 8.6)制备 100μg/ml的靶分子溶液。如果需要稳定靶分子,可以用含有金属离子的相似离子强度缓冲液。 (2)在每孔内加入1.5ml 靶分子溶液,重复涡旋直至表面完全湿润(这一步要多注意,尽量避免溶液形成液珠)。 (3)在湿盒中,4℃温和振荡孵育过夜。4℃保存于湿盒中备用。 2.第二天 (4)将ER2537(滴度测定时用来铺板的细菌培养物)接种至10ml LB培养基中。如果是在同一天扩增洗脱的噬菌体,也可以将ER2537过夜培养物接种于含有20ml LB培养基的250ml锥形瓶中(比例为1:100)。37℃剧烈振摇。 (5)将平皿反扣在洁净的纸巾上,去除包被液,加满封闭液,4℃孵育至少1h。 (6)去除包被液。用TBST(TBS+0.1%Tween-20)快速洗涤6次。反复旋转确保孔底及孔侧面都被洗涤。按照步骤5的方法去除洗涤液(也可利用自动洗板机洗涤)。洗涤要迅速,避免平皿干燥。(注意每次更换纸巾,以避免交叉污染)。 (7)用1ml TBST稀释4×1010噬菌体(10μl原库),加至包被后的平皿内,室温下轻缓摇动10-60min。 (8)以步骤5的方法去除未结合的噬菌体。 (9)以步骤6的方法用TBST洗涤板子10次,每次换用洁净的纸巾,避免交叉污染。 (10)用1ml的洗脱缓冲液洗脱结合的噬菌体。洗脱液可以是含有配体(0.1-1mM)的TBS,或是含有靶蛋白(100μg/ml)的TBS以和固化在平皿上的靶蛋白竞争结合噬菌体。室温下轻缓摇动10-60min。将洗脱液转入微量离心管中。 (10a)或使用通用缓冲液,0.2M甘氨酸-盐酸(PH2.2),1mg/ml BSA。轻缓摇动不超过10min,将洗脱液转入微量离心管中,以150μl 1M Tris-HCl(PH 9.1)中和。 (11)取小量洗脱液(1μl)测定滴度,如果有必要,可将第一轮或第二轮测定滴度的噬斑进行测序(见后续操作)。(未用的洗脱物可4℃保存过夜,第二天进行扩增。在这种情况下,用LB过夜培养ER2537,第二天,用LB培养基以1:100将该培养物稀释至20ml,加入未扩增的洗脱液,在250ml的锥形瓶内,37℃剧烈振摇孵育4.5h,进入步骤13)。 (12)将剩余的洗脱物进行扩增:将洗脱物加入20ml ER2537培养物中(对数早期),37℃剧烈振摇孵育4.5h。 (13)将培养物转入微量离心管中,4℃,10000转离心10min,将上清转入新的离心管中,再次离心。 (14)将80%的上清转入新的离心管中,加入1/6体积的PEG/ NaCl。4℃沉淀噬菌体至

实验室信息管理系统(LIS)解决方案教学内容

康师傅检验信息管理系统 解决方案 2010-04-06 康师傅软件股份公司

一、 产品概述 康师傅检验信息管理系统是将实验室的分析仪通过计算机网络连接起来,采用科学的管理思想和先进的数据库技术,实现以实验室为核心的整体环境的全面管理,为临床提供全面的医学检验服务。它集样本管理、资源管理、流程管理、网络管理、数据管理(采集,传输,处理,输出,发布) 、报表管理等诸多模块为一体,组成一套完整的、符合实验室管理规范的综合管理和检测质量监控体系,既能满足实验室日常管理要求,又保证各种实验分析数据的严格管理和控制。 系统应支持条形码管理,具有医嘱和检验仪器双向自动传输功能。检验仪器应通过终端服务器的方式直接接入HIS 系统的主干网络。 二、 仪器连接 SYSMEX UF-100 SYSMEX UF-50 桂林优利特-300 桂林优利特-100 迪瑞H-300 罗氏MODULAR P+P 分析仪 电解质分析仪AVL-988-3 贝克曼LX-20 SYSTEM KX21 SYSMEX 9000/RAM-1 贝克曼库尔特 ACL-200 贝克曼库尔特 ACL-9000 SYSMEX 1800I 雷勃MK-3 罗氏E170 罗氏Light Cycle 中佳放免分析仪精子分析仪普利生NA6 细菌鉴定仪HX-21

三、检验流程 四、集团化医院网络布局 医院一医院二医院三需求说明: 1)医生根据登陆的医院科室申请检验医嘱 2)样本采样可以实行集中和分散两种方式

集中采样:系统中所有标本可以进行集中采样,然后根据执行科室进行标本分拣,将标本送到各自医院对应的检验科室 分散采样:用户根据登录医院查询对应医院的标本进行采样后,送到对应的检验科室 3)各检验科室收到标本后,进行标本接收上机 4)标本完成检验后,完成采集结果和报告审核,同时报告可以在各自医院的医生工作站进行浏览和打印 五、产品特点 ?使用高性能的数据库平台 ?使用专业的数据采集器(终端服务器)连接检验分析仪器 ?实现样本全程状态监控和周转时间(TAT)管理 ?使用条码管理,实现双向通讯和标本管理 ?符合临床实验室管理系统标准和管理规范 ?提供专业规范的检验报告和个性化报告定制服务 ?提供完善的质量控制体系 ?支持ASTM,HL7, SNOMED,NCCL等医疗行业相关标准 ?支持报告以Web,手机短信,电子邮件多种形式进行访问和发布 ?提供丰富的查询和统计功能 六、产品功能 1检验申请 1.1 医生或护士可在临床工作站录入检验医嘱形成检验申请单; 1.2 技师可在标本登记中录入检验申请单; 1.3 自动根据录入的医嘱取得标本类型,医嘱数量和容器类型; 1.4 可以接受来自外部系统的检验申请; 1.5 支持打印多种形式的检验申请单。

运动控制系统实验指导书分解

运动控制系统 实验指导书 赵黎明、王雁编 广东海洋大学信息学院自动化系

直流调速 实验一不可逆单闭环直流调速系统静特性的研究 一.实验目的 1.研究晶闸管直流电动机调速系统在反馈控制下的工作。 2.研究直流调速系统中速度调节器ASR的工作及其对系统静特性的影响。 3.学习反馈控制系统的调试技术。 二.预习要求 1.了解速度调节器在比例工作与比例—积分工作时的输入—输出特性。 2.弄清不可逆单闭环直流调速系统的工作原理。 三.实验线路及原理 见图6-7。 四.实验设备及仪表 1.MCL系列教学实验台主控制屏。 2.MCL—18组件(适合MCL—Ⅱ)或MCL—31组件(适合MCL—Ⅲ)。 3.MCL—33(A)组件或MCL—53组件。 4.MEL-11挂箱 5.MEL—03三相可调电阻(或自配滑线变阻器)。 6.电机导轨及测速发电机、直流发电机M01(或电机导轨及测功机、MEL—13组件)。 7.直流电动机M03。 8.双踪示波器。 五.注意事项 1.直流电动机工作前,必须先加上直流激磁。 2.接入ASR构成转速负反馈时,为了防止振荡,可预先把ASR的RP3电位器逆时针旋到底,使调节器放大倍数最小,同时,ASR的“5”、“6”端接入可调电容(预置7μF)。 3.测取静特性时,须注意主电路电流不许超过电机的额定值(1A)。 4.三相主电源连线时需注意,不可换错相序。 5.电源开关闭合时,过流保护发光二极管可能会亮,只需按下对应的复位开关SB1

即可正常工作。 6.系统开环连接时,不允许突加给定信号U g起动电机。 7.起动电机时,需把MEL-13的测功机加载旋钮逆时针旋到底,以免带负载起动。 8.改变接线时,必须先按下主控制屏总电源开关的“断开”红色按钮,同时使系统的给定为零。 9.双踪示波器的两个探头地线通过示波器外壳短接,故在使用时,必须使两探头的地线同电位(只用一根地线即可),以免造成短路事故。 六.实验内容 1.移相触发电路的调试(主电路未通电) (a)用示波器观察MCL—33(或MCL—53,以下同)的双脉冲观察孔,应有双脉冲,且间隔均匀,幅值相同;观察每个晶闸管的控制极、阴极电压波形,应有幅值为1V~2V 的双脉冲。 (b)触发电路输出脉冲应在30°~90°范围内可调。可通过对偏移电压调节单位器及ASR输出电压的调整实现。例如:使ASR输出为0V,调节偏移电压,实现α=90°;再保持偏移电压不变,调节ASR的限幅电位器RP1,使α=30°。 2.求取调速系统在无转速负反馈时的开环工作机械特性。 a.断开ASR的“3”至U ct的连接线,G(给定)直接加至U ct,且Ug调至零,直流电机励磁电源开关闭合。 b.合上主控制屏的绿色按钮开关,调节三相调压器的输出,使U uv、Uvw、Uwu=200V。 注:如您选购的产品为MCL—Ⅲ、Ⅴ,无三相调压器,直接合上主电源。以下均同。 c.调节给定电压U g,使直流电机空载转速n0=1500转/分,调节测功机加载旋钮(或直流发电机负载电阻),在空载至额定负载的范围内测取7~8点,读取整流装置输出电压U d 3.带转速负反馈有静差工作的系统静特性 a.断开G(给定)和U ct的连接线,ASR的输出接至U ct,把ASR的“5”、“6”点短接。 b.合上主控制屏的绿色按钮开关,调节U uv,U vw,U wu为200伏。 c.调节给定电压U g至2V,调整转速变换器RP电位器,使被测电动机空载转速n0=1500转/分,调节ASR的调节电容以及反馈电位器RP3,使电机稳定运行。 调节测功机加载旋钮(或直流发电机负载电阻),在空载至额定负载范围内测取7~8

相关主题
文本预览
相关文档 最新文档