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实验一 固定化酵母酒精发酵

实验一 固定化酵母酒精发酵
实验一 固定化酵母酒精发酵

实验一固定化酵母酒精发酵

一、实验目的

掌握淀粉质原料的双酶法糖化工艺。

掌握制备固定化细胞中最基本、最常用的方法。

掌握固定化酵母酒精发酵工艺。

掌握酒精的提取及测定方法。

二、实验原理

(一)淀粉质原料的双酶法糖化

酶解法是指利用淀粉酶将淀粉水解为葡萄糖的过程。酶解法制葡萄糖可分为两步:第1步是利用a—淀粉酶将淀粉液化为糊精及低聚糖,使淀粉的可溶性增加,这个过程称为液化;第2步是利用糖化酶将糊精或低聚糖进一步水解,转变为葡萄糖的过程,在生产上称为糖化。淀粉的液化和糖化都是在酶的作用下进行的,故也称为双酶水解法。

淀粉质原料双酶法糖化是一新型生产工艺,免去了原料的高温蒸煮,即可节省蒸煮用汽,又可省去冷却用水、电,同时由于酶作用的专一性强,淀粉的水解副反应少,因而水解糖液纯度高,淀粉的转化率(出糖率)高,提高了原料出酒率。

(二)微生物细胞的固定化

固定化酶和固定微生物细胞的原理是将酶或微生物细胞利用物理的或化学的方法,使酶或细胞与固体的水不溶性支持物(或称载体)相结合,使其既不溶于水,又能保持酶和微生物的活性。它在固相状态作用于底物,具有离子交换树脂那样的特点,有一定的机械强度,可用搅拌或装柱形式与底物溶液接触。由于酶和微生物细胞被固定在载体上,使得它们在反应结束后,

可反复使用,也可贮存较长时间使酶和微生物活性不变。

一般胞内酶、提纯酶在固定化中或固定化后常不稳定,而固定化微生物不仅可避免复杂的酶提取和纯化过程,同时解决了酶的不稳定性问题。细胞固定化后,酶活较高,操作稳定性较好,可在多步酶促反应中应用并便于连续化、自动化操作。若代谢底物及产物均为低分子物质时使用固定化微生物细胞效果更佳。

微生物细胞固定化常用载体有:1、多糖类(纤维素、琼脂、葡聚糖凝胶、藻酸钙、K一角叉胶、DEAE-纤维素等);2、蛋白质(骨胶原、明胶等);

3、无机载体(氧化铝、活性炭、陶瓷、磁铁、二氧化硅、高岭土、磷酸钙凝胶等);

4、合成载体(聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、酚醛树脂等)。选择载体原则以价廉、无毒、强度高为好。微生物细胞固定化常用的方法有三大类:1.吸附法

吸附法是将细胞直接吸附于惰性载体上,分物理吸附法与离子结合法。(1)物理吸附法是利用硅藻土、多孔砖、木屑等作为载体,将微生物细胞吸附住。(2)离子结合法是利用微生物细胞表面的静电荷在适当条件下可以和离子交换树脂进行离子结合和吸附制成固定化细胞。吸附法优点是:操作简便、载体可再生;缺点是:细胞与载体的结合力弱、pH、离子强度等外界条件的变化都可以造成细胞的解吸而从载体上脱落。

2.包埋法

是将微生物细胞均匀地包埋在水不溶性载体的紧密结构中,细胞不至漏出而废物和产物可以进入和渗出。细胞和载体不起任何结合反应.细胞处于最佳生理状态。因此,酶的稳定性高,活力持久,所以目前对于微生物细胞的固定化大多采用包埋法。本次实验作为重点训练。

3.共价交联法

是利用双功能或多功能交联剂,使载体和酶或微生物细胞相互交联起

来,成为固定化酶或固定化细胞。常用的最有效的交联剂是戊二醛。这是一种双功能的交联剂,在它的分子中,一个功能团与载体交联,另一个功能团与酶或细胞交联。此法最为突出的优点是:固定化酶或细胞稳定性好,共价交联剂和载体都很丰富。

然而到目前为止,尚无一种可用于所有种类的微生物细胞固定化的通用方法,因此,对某一待定的微生物细胞来说。必须选择其合适的固定化方法和条件。

三、实验材料

1、菌种:酿酒酵母。

2、培养基

(1)种子培养基YEPD

酵母膏 10g 葡萄糖 20g

蛋白胨 20g 自来水 1000ml

pH 5.5

分装100ml培养基于300ml锥形瓶中,经0.1MPa灭菌20min。

(2)酒精发酵培养基

使用玉米淀粉水解液培养基。

将酶解法制备的玉米淀粉水解液在每个500ml锥形瓶中分装300ml,0.1MPa灭菌20min备用。

3、主要药品

玉米粉、耐高温a-淀粉酶、糖化酶、硫酸、pH试纸、海藻酸钠、葡萄糖、蛋白胨、酵母膏、生理盐水、CaCl

等。

2

4、器皿及仪器

恒温水浴锅、培养箱、粉碎机、电炉、高压灭菌锅、显微镜、糖度计、

量筒、纱布、500ml三角瓶、100ml烧杯、500ml烧杯、1000ml烧杯、培养皿、无菌10ml注射器外套及5#静脉针头、移液管、玻璃棒、冷凝管等。

四、实验步骤

(一)玉米淀粉水解液的制备

玉米粉250g,加水1000ml搅拌均匀,加耐高温a—淀粉酶100u/g玉米粉,加热至85~90℃,液化45min左右,间歇取水解液进行碘反应实验,若无蓝红色产生,仍然是碘和醪的原色时,则表示淀粉已完全水解为糊精等小分子产物。液化反应一般以碘反应颜色正好消失时为终点。然后冷却至60℃,用硫酸调pH在4.0~4.5,加糖化酶300u/g玉米粉,保温糖化30min,不断搅拌。糖化结束,用2层纱布滤去残渣后用糖度计测滤液的糖度,调糖度15°Bx左右,调pH4.7,将玉米淀粉水解液分装入500ml三角瓶,0.1MPa 灭菌20min备用。

1、酵母种子液的制备

挑取新鲜斜面菌种几环,接入装有100mlYEPD培养基的锥形瓶中,30℃振荡培养,培养30h。

2、海藻酸钠凝胶固定化酵母细胞的制备

海藻酸钠凝胶是从海藻中提取获得的藻酸盐,为D—甘露糖醛酸和古洛糖醛酸的线性共聚物,多价阳离子如Ca2+、Al3+可诱导凝胶形成。将微生物细胞与海藻酸钠溶液混匀后,通过注射器针头或相似的滴注器将上述混合液

滴入CaCl

溶液中,Ca2+从外部扩散进入海藻酸钠与细胞混合液珠内,使藻2

酸钠转变为水不溶的藻酸钙凝胶,由此将微生物细胞包埋在其中。在此法的

使用中,应尽量避免培养基中含有钙螯合剂(如磷酸根),因为它可导致钙

的溶解和释放,并由此引起凝胶的破坏。

称取0.8g海藻酸钠于100ml烧杯中,加去离子水少许,调成糊状,再加

入其余的水(总量为20ml)。火上加温至熔化,0.1MPa灭菌20min,冷却至

45℃左右,加入4ml酵母培养液,混合均匀,倒入一个无菌的小塑料瓶中或

注射器外套并与5#静脉针头相连,通过1.5~2.0mm的小孔,以恒定的速度

滴到100ml无菌烧杯中,杯中预先盛有50ml含10%葡萄糖的已灭菌的10%

(胶诱导剂)溶液,使形成凝胶珠。浸泡30min后,将凝胶珠转入无菌CaCl

2

烧杯中,用无菌去离子水洗涤三次,然后接种入300ml酒精发酵培养基中,

置25℃下发酵7天,测定酒精含量。另外,再取10ml未经固定化的酵母种

子液投入到装有300ml酒精发酵培养基中作为对照,同样条件下发酵7天后

测酒精含量。

(三)酒精发酵液的蒸馏及酒精度的测定

取100ml发酵液,倒入500ml圆底烧瓶中,加100ml蒸馏水蒸馏,当开

始流出液体时,用100ml量筒接收馏出液100ml,并用酒精比重计测量其酒

精度。

剩余的发酵液全部倒出后弃去,将固定化细胞用无菌去离子水洗3次,

加入发酵培养基继续培养,可反复使用数十次。

五、实验报告内容

1、记录双酶法糖化工艺步骤。

2、记录用海藻酸钠凝胶包埋酵母细胞的过程。

3、比较实验中固定化与游离的酵母细胞产酒精量有何差别?

六、思考题

1、淀粉质原料双酶法糖化工艺的应用在发酵工业上有何意义?

2、微生物细胞固定化在发酵工业上有何意义?

酵母菌酒精发酵实验报告

实验方案 酵母菌酒精发酵的条件研究 学院(部):生物与化学工程学院 专业:生物工程 学生姓名:鑫 学号:11018150 班级:生物工程二班 指导教师:肖

一、实验目的 1、学会实验的设计和操作过程 2、找到酵母菌发酵时的最优条件 二、培养基和实验方法及材料的确定 1、玉米粉的糖化方法 玉米粉的糖化采用双酶法,其工艺流程如下 玉米粉→加水→液化→糖化→发酵→蒸馏→成品酒精 试验中,发酵培养按照三角瓶100ml培养。本次工做20组是要,共需发酵液20*100=2000ml。培养液按照100g玉米粉、300ml水。所以共需玉米粉700g。 液化:取100g玉米粉,加入300mL的水,液化温度为90℃,pH值为5.5,液化时间为3.5h,液化酶的添加量为0.035g/100 g玉米粉 糖化:糖化时的工艺条件为:糖化温度为58℃,pH值为4.5,糖化时间为3.5h,糖化酶的添加量为0.3g/100g玉米粉。 2、活化培养基 本实验在进行实验时采用察氏(czapck)培养基的配制,配方如下表一: 表一 3、扩大培养基 扩大培养仍然用察氏(czapck)培养基,由于要用液体的,所 以将其中的琼脂配料去掉。 4、发酵培养基

糖化液稀释至l0%浓度,添加辅料(硫酸铵0.4%),pH5.5 灭菌 三、培养基的制备及酵母的活化 1、准备酵母母菌一支常温下存放一天,增加菌种的活力。在母菌存放期间制作各时期培养基 2、准备固体培养基(察氏培养基)50ml,做成8支试管斜面,扩大培养基800ml(做扩大培养时使用)。做成8个三角瓶,每瓶200ml。120℃灭菌30min。 3、发酵液的制备 (1)玉米粉的筛选 实验前准备粉碎后的玉米粉700g。 (2)玉米粉的液化 按照100g玉米粉、300ml水的配比对玉米粉进行液化,液化方案上文已经交代。在1000ml烧杯里,或者500ml烧杯分两次,水浴液化。 器材:烧杯500ml两个,玻璃棒一个,水浴锅一个,糖化酶0.225g 步骤:1、将糖化酶,玉米粉,水按照比例配置好在烧杯里。2、将配好的玉米液放于水浴锅中90℃液化3.5h。边液化边搅拌。 (3)玉米粉的糖化 将液化后的玉米液中按照0.3g/100ml加入液化液中。再在水浴锅中,58℃糖化3.5h。 (4)过滤 糖化后的糖化液有可能有没有彻底液化的玉米颗粒,会造成浑浊,这时需要对糖化液进行过滤操作。 操作步骤: 最后与以上培养基一起进行灭菌处理。灭菌时,清洗16支移液管,与培养基一起灭菌。 (5)活化步骤 器材:酒精灯,接种针,母菌,斜面培养基,消毒酒精。 步骤:1、将器材放于实验台上。对双手合桌面进行灭菌。对接种针进行灼烧灭菌。2、在酒精灯旁按照无菌操作步骤在酒精灯火焰旁取

工业酒精的制备实验报告

工业酒精的制备 实验报告 学院:生物与化学工程学院班级:化工141 姓名: 学号: 实验日期:2017年6月20日

一、实验目的 1.熟悉精馏塔的结构和精馏流程,掌握精馏塔操作方法; 2.了解板式塔的结构,观察塔板上汽-液接触状况; 3.掌握精馏过程的基本操作及调节方法; 4.掌握测定塔顶、塔釜溶液浓度的实验方法; 5.掌握精馏塔全塔效率的测定方法; 6.掌握求取理论板数的方法。 二、应用背景 乙醇( C2H5OH ),俗名酒精,是基本的工业原料之一,与酸碱并重,它作为再生能源尤为受人们的重视。乙醇有相当广泛的用途,除用作燃料、制造饮料和香精外,也是一种重要的有机化工原料,如用乙醇制造乙酸、乙醚等;乙醇又是一种有机溶剂,用于溶解树脂,制造涂料。 乙醇精馏是生产乙醇中极为关键的环节,是重要的化工单元。其工艺路线是否合理、技术装备性能之优劣、生产管理者及操作技术素质之高低,均影响乙醇的产量及品质。工业上用发酵法和乙烯水化法生产乙醇,但不管用何种方法生产乙醇,精馏都是其必不可少的单元操作。 三、合成方法 酒精的工业生产方法可分为发酵法和化学合成法两大类; (1)发酵法是利用淀粉质原料或糖质原料,在微生物的作用下生成酒精,根据原料的不同,又可分为: A.淀粉质原料发酵生产酒精这是我国当前生产酒精的主要方法,它是利用薯类、谷物及野生植物等含淀粉的原料,在微生物的作用下将淀粉水解为葡萄糖,再进一步发酵生成酒精。整个生产过程包括原料蒸煮、糖化剂制备、糖化、酒母制备、发酵及蒸馏等工序。 B.糖蜜原料发酵生产酒精直接利用糖蜜中的糖分,经过稀释并添加部分营养盐,借酒母的作用发酵生成酒精。 C.亚硫酸盐纸浆废液发酵生产酒精造纸原料经亚硫酸盐液蒸煮后,废液中含有六碳糖,这部分糖在酵母作用下可以发酵生成酒精,主要是工业酒精。 (2)化学合成法生产酒精是利用炼焦炭、裂解石油的废气为原料,经化学合成反应而制成酒精。生产方法又可分为间接水合法和直接水合法两种,目前工业上普遍采用后者。 A.间接水合法又称硫酸水合法,它的生产过程是将乙烯与硫酸经加成作用生成硫酸氢乙脂,再进行水解,生成乙醇和硫酸。此法的缺点是对设备腐蚀严

酵母 发酵实验

实验一、二甜酒酿的制作品尝 1.实验目的 (1)通过甜酒酿的制作了解酿酒的基本原理 (2)掌握甜酒酿的制作技术。 2.实验原理 以糯米(或大米)经甜酒药发酵制成的甜酒酿,是我国的传统发酵食品。我国酿酒工业中的小曲酒和黄酒生产中的淋饭酒在某种程度上就是由甜酒酿发展而来的。 甜酒酿是将糯米经过蒸煮糊化,利用酒药中的根霉和米曲霉等微生物将原料中糊化后的淀粉糖化,将蛋白质水解成氨基酸,然后酒药中的酵母菌利用糖化产物生长繁殖,并通过酵解途径将糖转化成酒精,从而赋予甜酒酿特有的香气、风味和丰富的营养。随着发酵时间延长,甜酒酿中的糖分逐渐转化成酒精,因而糖度下降.酒度提高,故适时结束发酵是保持甜酒酿口味的关键。 3.实验材料 3.1 材料糯米、酒药。 3.2器具及其他用品手提高压灭菌锅、滤布、塑料盒、不锈钢锅。 4.实验流程 酒药 洗米蒸饭淋水降温落缸搭窝发酵甜酒酿5.实验步骤 5.1 洗米蒸饭将糯米淘洗干净,用水浸泡过夜,捞起放于置有滤布的蒸屉上,于锅内蒸熟(约15-20min),使饭“熟而不糊”。 5.2 淋水降温用清洁冷水淋洗蒸熟的糯米饭,使其降温至35℃左右,同时使饭粒松散。 5.3 落缸搭窝将酒药均匀拌入饭内,并在洗干净的塑料盒内洒少许酒药,然后将饭松散放入塑料盒内,搭成凹形圆窝,面上洒少许酒药粉。盖上塑料盒盖。 5.4保温发酵于30℃进行发酵,待发酵2 d后,当窝内甜液达饭堆2/3高度时,进行搅拌,再发酵1 d左右即可。 6.实验结果 (1)发酵期间每天观察、记录发酵现象。 (2)对产品进行感官评定,写出品尝体会。 7.思考题 (1)制作甜酒酿的关键操作是什么? (2)发酵期间为什么要进行搅拌?

酵母菌分类

酵母菌分類 根據荷蘭Lodder & Kreger-van Rij 所著“The Yeasts, A Taxonomy Study” 分類主要依據是 1. 形態 2. 對硝酸鹽或碳源的利用 3. 對糖的發酵性 形態與大小:因酵母種類不同而不同,同一種也會因培養條件或發育時期不同而有異,一般直徑約在5 μm,顯微鏡40X及100X接物鏡下皆可觀察到。 cerevisiae型:球形與卵形(如啤酒酵母Saccharomyces cereviisiae) ellipsoideus型:橢圓形(如葡萄酒酵母Saccharomyces ellipsoideus) pastorianus型:香腸形 apiculatus型:檸檬形 trigonopsis型:三角形 增殖法:主要為營養增殖(即出芽生殖(budding)),偶而發生有性生殖時則行子囊胞子來增殖。 母細胞(mother cell):原來的細胞 子細胞daughter cell):增殖後的細胞 多極出芽(multilateral budding):同一個細胞上數個地方可以出芽者 兩極出芽(bipolar budding):只有細胞兩端才會出芽者(如Kloeckera spp.) 偽菌絲(pseudomycelium):出芽後的細胞一直連成很長,呈菌絲狀者(如Candida spp.) 真菌絲(true mycelium):有些酵母會形成如同黴菌具有隔膜(septum)的真菌絲(如Endomycopsis spp., Trichosporum spp.) 分裂酵母(fission yeast):非出芽,而是在細胞中央形成隔膜再分裂成兩個細胞者(如Schizosaccharomyces spp.)

(完整版)馒头发酵方法与过程实验报告

馒头发酵方法与过程实验报告 馒头的发酵方法很多,有老面发酵法、酒曲发酵法、化学膨松剂发酵法、酵母发酵法等等。实验证明无论从食品营养的角度,还是从操作的角度,酵母发面都有很强的优势。用酵母发面不仅适合家庭和工业化生产线,也适合小型作坊式馒头房,特别是对于要求不增加成本的用户也是非常合适的。酵母发酵是馒头生产中最关键的环节,它对于馒头质量的好坏有着直接的关系。 一.常见的酵母发酵工艺 酵母的发酵原理是利用面粉中的糖份与其他营养物质,在适宜的生长条件下繁殖产生大量的二氧化碳气体,使面团膨胀成海绵状结构。 在酵母馒头的生产中,常见的发酵工艺简单的归纳起来主要有以下两种: 1.一次发酵法 原辅料: 和面、压面、成型、发酵、汽蒸 (1)操作方法: 和面: 将所有的原辅料一次加入和成面团,干酵母用量0.3%,鲜酵母用量为1%左右,加水量38-40%,和好的面团温度一般应控制在28℃。 成型: 馒头成型由馒头成型机来完成,家庭制作由手工完成,根据需要制成各种形状和大小的馒头坯。 发酵: 在温度30-32℃,湿度为75-80%的条件下让面团发酵35分钟。没有恒温恒湿条件的,也可以采取其它相应的保温措施。 蒸煮: 面团发酵完成以后,沸水上笼蒸20分钟。 (2)发酵特点: 用一次发酵法生产馒头,具有工艺线路短,生产周期短,生产效率高劳动强度低等许多优点,并且生产出来的馒头有很好的咀嚼感。因此该方法被许多馒头厂家广泛使用。 2.二次发酵法 部分原辅料:第一次和面、第一次发酵、第二次和面 压面、成型、第二次发酵、汽蒸 (1)操作方法: 第一次和面取30%左右的面粉加入所需的干酵母(添加量以第一次所加面粉量的0.16%计)再加上50%左右的水(加水量以第一次所加面粉量计),和成面团。 第一次发酵和好的面团在温度26-28℃,湿度70-80%的条件或温暖的自然条件下发酵8-12小时。发酵时间也可以根据自己生产的实际情况通过调整酵母的用量、两次和面时面粉的配比以及发酵温度、湿度来灵活调节。

酒精发酵实验(修改后)

实验五酒精发酵系列实验 5.1 酒精酵母的培养 一、实验目的 1.了解酒精发酵的主要类型及其控制条件。 2.熟悉酒母的培养方法。 3.掌握酒精发酵的操作方法。 二、实验原理 在厌氧条件下,己糖分解为乙醇并放出二氧化碳的作用,称为酒精发酵作用。酒精发酵的类型有三种:1、通过EMP途径的酵母菌酒精发酵;2、通过HMP途径的细菌酒精发酵(即异型乳酸发酵);3、通过ED途径的细菌酒精发酵。在工业酒精和各种酒类的生产中,酒精发酵作用主要是由酵母菌完成的,因此酵母菌的酒精发酵作用是它们的工艺基础。 酵母菌通过EMP途径分解己糖生成丙酮酸,在厌氧条件和微酸性条件下,丙酮酸继续分解为乙醇。但是如果在碱性条件或培养基中加有亚硫酸盐时,产物就主要是甘油,这也就是工业上的甘油发酵。因此,如果酵母菌要进行酒精发酵,就必须控制发酵液在微酸性条件。 三、实验器材 酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌种,培养基、蒸馏水、无菌水、铝锅、电炉、三角瓶、牛皮纸、棉绳、水浴锅、振荡器。 四、方法步骤 4.1 酒母的制备 4.1.1 培养基配方 红糖100g,硫酸铵2.0g,磷酸二氢钾1.0g,自来水1000ml,pH自然。配好后的发酵培养基分装入205ml三角瓶中,每瓶100ml,湿热灭菌20min。 4.1.2 酒母扩大培养 根据上诉配方配制培养基,按下述步骤,灭菌、接种、培养。 4.1.2.1 酒母扩大培养 4.1.3成熟酒母质量指标 要求细胞形态整齐、健壮、没有杂菌。酵母的细胞数为1亿/ml左右,出芽率在15~30%,酵母死亡率≤1%。 五、实验报告 记录实验结果。 六、思考题 1.如何培养酒母?酒母培养要点是什么?

初级中学八年级生物《酵母菌发酵》教案

山东省肥城市湖屯镇初级中学八年级生物 《酵母菌发酵》教案 一、教学目标: 知识目标:1、通过观察酵母菌发酵现象,掌握其发酵原理。 2、通过探究“影响酵母菌发酵的因素一温度”实验,巩固探究实验的过程。能力目标:通过探究活动,提髙实验设计及动手能力,培养分析问题及解决问题的能力。情感态度及价值观目标:1、体验知识和技术在生活和生产中的应用价值。 2、体验小组合作学习与交流的乐趣。 二、教学重点:1、生物发酵现象及原理。 2、巩固探究实验的过程。 三、教学过程: (一)情境导入: 师:同.学们,你们有谁蒸过馒头吗?(没有) 那你们见过家长蒸过馒头吗?(有的见过) 有谁知道蒸馒头时需要加入一种什么物质吗?(酵母菌) 师:很好,请大家观察桌子上的两个馒头,看有什么不同? (提示:可以用手捏一捏或掰开看一看) 生:一个松软多孔、一个硬而无孔。 师:同学们观察得很仔细,请猜测一下哪一个馒头在制作过程中加入了酵母菌? 生:松软多孔的。 师”:对,为什么加入了酵母菌馒头会变得松软多孔?酵母菌有什么作用呢?请大家欣赏一段视频后来回答。 播放视频:酵母菌发酵 (二)(学习任务一)酵母菌发酵现象 生:加入了酵母菌馒头内会产生一种气体 师:很好,这位学生看得很认真。 (讲述)酵母菌是一种真菌,适于在温暖且富含糖分的环境中生存,它能把糖分分解产生气体等物质,这个过程就是我们常「说的发酵,蒸馒头就是利用了酵母菌发酵的这一原理。 (展示)课前做的发酵装置。 (强调:为了保持酵母菌的生长,把装垃放在约30度温水中水浴保持恒温) 请大家仔细观察现象? 生:液体中有气泡岀现,气球胀大。 师:气球内的气体是什么? 生:猜测(二氧化碳) 师:如何证明? 生:通入澄淸的石灰水。 师:好,我们验证一下。 (取两只试管,各倒入少许澄淸的石灰水,导气管的一端通入其中一只试管) 引导学生思考:另一试管有必要吗?起什么作用?(强调对照) 生:石灰水变浑浊,证明产生了二氧化碳。

糖发酵实验报告

糖发酵试验 一、目的 1.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。 2.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 二、原理 多糖?单糖?丙酮酸?酸性产物(或产酸产气)?ph下降?指示剂呈酸性变色(若产气者有气泡出现)。 不同的细菌可根据分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。是否产酸,可在糖发酵培养基中加入指示剂(通常为溴甲酚紫,即b.c.p,其ph在5.2以下呈黄色,ph在6.8以上呈紫色),经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。是否产气可在发酵培养基中放入倒置小倒管观察。 不同的微生物具有发酵不同糖(醇)的酶类,所以发酵途径及发酵产物各不相同。例如:大肠杆菌能使乳糖发酵,产酸产气,而伤寒杆菌则不能;大肠杆菌能使葡萄糖发酵,产酸产气,而伤寒杆菌则只产酸、不产气。 糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢气、甲烷、二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气;伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气,不能分解乳糖;普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气,不能分解乳糖。发酵培养基含有蛋白胨,指示剂(溴甲酚紫),倒置的德汉氏小管和不同的糖类。当发酵产酸时,溴甲酚紫指示剂可由紫色(ph6.8)变为黄色(ph5.2)。气体的产生可由倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。 三、器材 1.菌种大肠杆菌,普通变形杆菌斜面各一支。 2培养基葡萄糖发酵培养基试管和乳糖发酵培养基试管各3支(内装有倒置的德汉氏小管)。 3仪器或其他用具试管架,接种环等。 四、操作步骤 1.用记号笔在各试管外壁上分别标明发酵培养基名称和所接种的细菌菌名。 2取葡萄糖发酵培养基试管3支,分别接入大肠杆菌,普通变形杆菌,第三支不接种,作为对照。另取乳糖发酵培养基试管3支,同样分别接人大肠杆菌,普通变形杆菌,第三支不接种,作为对照。 在接种后,轻缓摇动试管,使其均匀,防止倒置的小管进入气泡。 3将接种过和作为对照的6支试管均置37℃培养24~48h。 4.观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡。篇二:发酵实习实验报告第一部分、实验部分 实验一、酸乳的制作 一、实验目的 1、掌握酸乳的制作方法、基本原理; 2、了解发酵剂制备过程中的操作要点; 3、对最终产品进行感官评定及理化检测,并进行品质比较。 二、基本原理 酸乳也成为酸牛奶,是人们喜欢的饮用发酵乳。所谓发酵乳、鲜乳或乳制品等主要原料添加乳酸菌,发酵以后形成的具有特殊风味的乳制品。乳经过发酵制成发酵乳以后营养价值提高,发酵乳中的蛋白质、钙盐容易消化吸收,具有消化、抑制肠道内异常的发酵和杀死肠

发酵实验报告结果

(一)实验结果 1.详细描述枯草芽孢杆菌固态培养物(外观、气味、培养物状态等) 答:枯草芽孢杆菌淡黄色,中间色深,表面较平整,无光泽,边缘不整齐,形成的菌落为圆形。培养基中的枯草芽孢杆菌有腥臭味,长势良好,观察培养基,无明显染菌现象。 2.记录个人活菌测定中各平行数据,计算最终平均值。 答:平行试验中,其他几个由于菌落连成一片,无法计数。只有如图一个平板中大约有100 个透明圈,因为是稀释了5亿倍,所以600亿\克。 (二)思考题: 在枯草芽孢杆菌固态培养过程中,为了防止霉菌与酵母的污染,可采用什么方法? 答:可以加入抗真菌制剂。 (三)注意事项 1. 实验所用稻壳应尽量剪碎,使固体发酵培养基混合均匀 2. 无菌水高压灭菌时,应向三角瓶中加入玻璃珠防止暴沸。 3. 使用涂布器时,注意使用用酒精灯灭菌,待涂布器冷却后再进行涂布,以免杀死菌体。

(一)实验结果 1、详细记录实验过程中各参数及数据。 结果记录如表: 糖化后,加入可乐瓶中的上清:400ml, 活化的酵母种液:10ml ,置于28℃的培养箱中静置培养36h左右。 2、对实验结果的判断与分析。 实验结果检验:○1二氧化碳生成的检验培养约48h后,观察瓶中混合液,淀粉大部分沉降在瓶底,上清浓度较稀,靠瓶壁边缘有一连串微小气泡 ○2酒精生成的检验打开瓶塞,闻到有浓重酒精气味。取发酵液5ml, 加10%硫酸2ml,加1%K2Cr2O7溶液10-20滴,颜色由黄色变为黄绿色,稍加热后现象产生更快,更明显。 图示:酒精生成的检验结果左侧:蒸馏水5ml,颜色偏黄,透明度高右侧:发酵液5ml,黄绿色,与对照管有明显差异 1、思考题:现有3株不同来源的酒精酵母,请设计实验判断哪株酵母发酵酒精能力最强?

酵母发酵酒精的研究进展

酵母发酵酒精的研究进展 (生命科学与技术学院微生物专业) 前言 人类利用酵母菌的历史已有几千年了。值得提出来的是,早在我国宋代的酿酒著作中,中国人已经明确记载了从发酵旺盛的酿酒缸内液体表面撇取酵母菌(当然不是纯粹的酵母菌)的方法,并把它们称为“酵”,风干以后制成的“干酵”可以长期保存。这种制造干酵母的原始方法说明,早在800年前,中国人已经意识到酒精发酵是由“酵”,即某种能生长的物质引起的。这种推断直到19世纪巴斯德才证明是酵母菌。明代末年出版的词书中记载有“以酒母起面曰发酵”,“发酵,浮起者是也”等解释。这说明至少在那时,一引起细心观察自然现象和注意比较的学者,已经认识到发面和酿酒有某种相同的因素在起作用。当时在欧洲虽然已经发现了酵母菌,但在200年后才知道酵母菌的作用。今天我们把这类微生物称酵母菌,正是以此为根据的。 酵母菌能够把糖变成酒精,是因为它的细胞里有催化剂,这些存在于生物细胞的催化剂在科学上叫做酶。虽然现在知道所有的生物都是靠酶催化的化学反应来生活的,但最早发现的酶,就是酵母菌的酶。酵母菌中最早发现的酶,是把糖变成酒精的一群酶,当时自然数酒化酶。由于这种酶的作用,使糖分解成酒精和二氧化碳,这就是利用酵母菌酿酒和发面包的原理。使面团产生许多空隙的就是二氧化碳。酵母细胞大小为2.5-10μm×4.5-21μm, 在加盖的玉米琼脂上不产生假菌丝或有不典型的假菌丝, 营养细胞可直接变为子囊, 每囊有1-4个圆形光面的子囊孢子, 在麦芽汁25℃培养3d, 细胞为圆形、卵形、椭圆形和香肠形。其菌落在麦芽汁琼脂上为乳白色, 有光泽, 平坦, 边缘整齐。菌体维生素、蛋白质含量高, 既可食用又可提取细胞色素C、核酸、麦角固醇、谷胱甘肽、凝血质、辅酶A、三磷酸腺苷等。该菌种能发酵葡萄糖、麦芽糖、半乳糖及蔗糖, 但不能发酵乳糖和蜜二糖, 不同化硝酸盐。 酵母菌的繁殖方式既可进行无性繁殖,如芽殖,又可进行有性生殖;酵母菌既可进行有氧呼吸,又可进行无氧呼吸,是一种兼性厌氧呼吸的真核微生物。单细胞真核生物酿酒酵母基因组为12,068kb,比单细胞的原核生物和古细菌大一个数量级。酿酒酵母基因组共有5887个ORF,这比原核生物和古细菌要多很多。酿酒酵母的基因密度为1个基因/2kb,密度小于原核生物流感嗜血杆菌和尿殖道支原体等。酿酒酵母是最小的真核基因组,裂殖酵母其次,其密度是1/2.3kb,简单多细胞生物线虫的基因密度为1/30kb。第二、酿酒酵母只有4%的编码基因有内含子,而裂殖酵母则有40%编码基因有内含子。 1、酵母的生长条件 1.1 无机盐

发酵大实验实验报告

2010级发酵大实验(1) 实验报告 任课老师: 姓名: 专业:生物技术 班级: 学号: 日期:2013年6月

实验报告 一、目的要求: 了解筛菌的基本操作,包括:培养基配制,灭菌,接种,涂板,摇菌,紫外分光光度计的使用等。 二、实验材料 1、菌种来源:英语公园葡萄树下土壤和生物学院院楼门口土样。 2、培养基: (1)淀粉液体培养基:可溶性淀粉1%、蛋白胨1% 、葡萄糖0. 5%、NaCl 0. 5%、牛肉膏0. 5% (2)淀粉固体培养基: 可溶性淀粉1%、蛋白胨1% 、葡萄糖0. 5%、NaCl 0. 5%、牛肉膏0. 5%、琼脂粉1.5% 。 3、器皿:试管,量筒,烧杯,移液管,培养皿,洗耳球,玻璃棒,酒精灯,接菌环,三角瓶,玻璃棒等。 4、仪器:高压蒸汽灭菌锅,水浴锅,恒温培养箱,摇床,天平、紫外可见分光光度计等。 5、试剂:1%碘液、1M NaOH、DNS、pH 5.6 0.05M 乙酸/乙酸钠缓冲液、1%淀粉溶液、1mg/mL的麦芽糖,结晶紫溶液。 6、其他:封口膜、纱布,棉花,试管架等。 三、实验步骤: 1、初筛: (1)配制培养基:按照上述培养基成分及数量称取各物质,放入三角瓶中,加水到100ml,包扎。和包扎好的试管、移液管、涂布器、培养皿等一起放入灭菌锅中121℃高压灭菌20min。然后干燥后使用。 (2)倒平板:把培养基置于无菌工作台上,待冷却到55℃左右后,倒入灭菌后的平板中,每个平板中约15-20ml,之后待冷却凝固。 (3)菌悬液制备:我们组分别从英语公园的葡萄树下和生物学院院楼门口采集土样,各称取10g,放入装有90mL无菌水的三角瓶中,震荡20min后静置5min。(4)浓度稀释:在无菌试验台上进行浓度梯度稀释,把土样摇匀,从中吸取1ml 置于事先灭好菌的试管中,再加入9 ml无菌水,再从该试管中吸取1ml土样置

酵母发酵力测定试验步骤

酵母发酵力的测定 一、目的 通过测定酵母发酵力,筛选发酵力强的酵母。 二、实验原理 酵母在微酸性糖液中起发酵作用,其中的糖逐渐减少,乙醇及CO 2 则依比例 而增大,CO 2 是气体,除溶解于醪中者外,都跑向外面,所以测定酵母的发酵力,或测糖液比重的减小,或测糖的减少,或乙醇的增加,或称培器为减轻量,以 CO 2的失去多少,或用NaOH等固定CO 2 然后称其量,或将培养器密闭,由其中压 力的增大,而定发酵的强弱等。本实验采用乙醇浓度增大、CO 2 含量、糖的减少、培养器的减轻四个方面测定其发酵力强弱。 三、实验材料 1.菌种:本公司实验室分离所得。 2.试剂:葡萄糖、果糖、蔗糖、硫酸镁、磷酸二氢钾、蛋白胨、酵母浸膏、菲林试剂、碳酸氢钠。 3.器具:大三角瓶、小三角瓶、胶塞、玻璃管、1ml移液管、10ml移液管、天平、酒精计、温度计、蒸馏器、培养箱。 4.培养基 四、方法步骤 1.从斜面菌种接种到小三角瓶(100ml培养基)28℃培养24h; 2.摇匀小三角瓶菌种,吸取10ml接种到大三角(1000ml),装好CO 2 收集装置,称重,记录其重量,置28℃培养,每天称重一次,直到重量减少量小于0.5g; 3.发酵结束后,通过测量排水量测定CO 2 含量; 4.取一定量的发酵醪液,测定其残糖量,以测定其发酵力; 5.取100ml发酵醪液,加100ml水蒸馏出100ml溶液,用酒精计测定其乙醇含量。 (注:如果用酒精计不能测出,则改用重铬酸比色法或气相色谱法)

重铬酸比色法所需试剂如下: (1)0.1%(v/v)标准乙醇溶液;(2)2%重铬酸钾溶液;(3)浓硫酸;铬酸比色法 酒精糟中微量乙醇的测定 酒精糟中乙醇的含量是蒸馏时的一个重要指标。但酒精糟中乙醇含量甚微,不宜采用酒精计测量,需用比色法测定,比色法测定乙醇其浓度下限可达 0.02%。 1、原理 酒精糟中残余乙醇的测定采用蒸馏法,蒸出的乙醇用重铬酸钾氧化为乙酸,而六价铬被还原为三价铬,以比色法测定。 3CH 3CH 2 OH+2K 2 CrO 7 +8H 2 SO 4 =3CH 3 COOH+2Cr 2 (SO 4 ) 3 +2K 2 SO 4 +11H 2 O 2、试剂 (1)0.1%(v/v)标准乙醇溶液 (2)2%重铬酸钾溶液 (3)浓硫酸 3、测定步骤 (1)标准系列管的制备 在10毫升比色管中,按下列加入各溶液 各管中加1毫升重铬酸钾溶液,5毫升浓硫酸,摇匀。于沸水浴中加热10分钟,取出冷却。 (2)试样管的制备 称取100克酒精,放入500毫升圆底烧瓶中,加200毫升水,蒸馏,用100毫升容量瓶正确接收馏出液100毫升,摇匀。 取5毫升馏出液,放入10毫升比色管中,加1毫升2%重铬酸钾溶液,5毫升浓硫酸,摇匀,与标准系列管一起于沸水浴中加热10分钟,取出冷却。

细菌培养实验报告(新)

篇一:培养基的制备与灭菌实验报告 陕西师范大学远程教育学院 生物学实验报告 报告题目培养基的制备与灭菌 姓名刘伟 学号 专业生物科学 批次/层次 指导教师 学习中心培养基的制备与灭菌 一、目的要求 1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。 2. 掌握培养基的配置原则和方法。 3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。 二、基本原理 牛肉膏蛋白胨培养基: 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供细菌生长繁殖之用。 高压蒸汽灭菌: 主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽,关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出,压力增大,沸点升高,获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性,而达到灭菌的目的。 三、实验材料 1. 药品:牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂、1mol/l的naoh和hcl溶液。 2. 仪器及玻璃器皿:天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三 角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。 3. 其他物品:药匙、称量纸、ph试纸、记号笔、棉花等。 四、操作步骤 (一)玻璃器皿的洗涤和包装 1.玻璃器皿的洗涤 玻璃器皿在使用前必须洗刷干净。将三角瓶、试管、培养皿、量筒等浸入含有洗涤剂的水中.用毛刷刷洗,然后用自来水及蒸馏水冲净。移液管先用含有洗涤剂的水浸泡,再用自来水及蒸馏水冲洗。洗刷干净的玻璃器皿置于烘箱中烘干后备用。 2.灭菌前玻璃器皿的包装 (1)培养皿的包扎:培养皿由一盖一底组成一套,可用报纸将几套培养皿包 成一包,或者将几套培养皿直接置于特制的铁皮圆筒内,加盖灭菌。包装后的培养皿须经灭菌之后才能使用。 (2)移液管的包扎:在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脱脂棉),它的作 用是避免外界及口中杂菌进入管内,并防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花应距管口约0.5cm 左右,棉花自身长度约1~1.5cm。塞棉花时.可用一外围拉直的曲别针、将少许棉花塞入管口内。棉花要塞得松紧适宜,吹时以能通气而又不使棉花滑下为准。 先将报纸裁成宽约5cm左右的长纸条,然后将已塞好棉花的移液管尖端放在长条报纸的一端,约成45℃角,折叠纸条包住尖端,用左手握住移液管身,有手将移液管压紧.在桌面上向前搓转,以螺旋式包扎起来。上端剩余纸条,折叠打结,准备灭菌。 (二)液体及固体培养基的配制过程 1.液体培养基配制

干红葡萄酒酿造实验报告

开放性实验报告干红葡萄酒的酿造 专业: 班级: 学号: 姓名: 2016年 11 月 12 日

学习葡萄酒的酿造原理,掌握干红葡萄酒的酿制工艺 二实验原理 葡萄酒+果糖→酒精+CO2(条件:人工酵母或天然酵母)(酒精发酵) 高级醇+脂肪酸+挥发酸+酯类(陈酿) 色素+单宁+有机酸+果香物质+无机盐(葡萄酒原料) 三实验材料和仪器设备 (1)材料:新鲜葡萄、活性酵母、果胶酶、偏重亚硫酸钾、白砂糖、纱布、明胶; (2)仪器设备:分柄天平、烧杯、量筒、玻璃棒、称量纸、水浴锅、温度计、比重计、3L发酵瓶、纱布袋、漏斗、干净瓶子。 四实验操作步骤 (1)清洗容器或仪器,冷开水清洗。 (2)分选和清洗葡萄:剔除生的,有破损的,发霉的果实。清洗过后的葡萄自然晾干(为节约时间也可以用吹风机冷风吹干) (3)手工去梗,将葡萄的蒂部微微捏破,直接放入发酵瓶中。 (4)装瓶:装量不超过容量的75%,同时加入0.15克的偏重亚硫酸钾搅匀,并加入0.05克果胶酶,搅匀。 (5)酵母复水活化:称取7克冰糖溶解于少量冷开水定容100ml,加入2克酵母,混匀,放置于水浴锅30℃静置3小时活化,每10分钟搅拌一次,活化结束后直接加入葡萄醪中发酵。 (6)酒精发酵:酵母菌活化结束后取15ml加入发酵罐搅匀,当有酒帽形式时,加入25克白砂糖,每天测量一次比重、温度,并定期挥帽。 (7)当比重降至0.993—0.996时,酒精发酵结束。使用纱布袋与漏斗过滤皮渣,酒液用干净的瓶子装瓶,满瓶。 (8)陈酿:在装入干净的瓶子的同时加入0.054克偏重亚硫酸钾摇匀,在适宜的温度下放置。

1 整理干红葡萄酒发酵实验过程中,每天测量发酵温度和比重的结果,作出发酵 第二天葡萄酒温度较高,可能是受室温影响,总的来看,发酵较为正常。 2整理葡萄酒酿造过程中的相片,从气泡产生的多少、葡萄皮的浮沉、葡萄汁和葡萄籽的位置等参数的变化进行描述。 气泡由一开始的无气泡,到后来发酵搅拌时产生气泡。 葡萄皮由一开始挤入时的分布不均,到最后的悬浮在上层。 葡萄汁由一开始的堆积在下层,到最后的中层,位于沉淀之上。

酵母菌发酵实验

酵母菌发酵实验 一、实验在教材中所处的地位与作用 本实验位于生物学八年级上册第五单元第五章第二节人类对细菌和真菌的利用。酵母菌在日常生活中很常用,可以用来发包子、馒头和酿酒,很具有代表性。该实验属演示实验,可直观地向学生展示酵母菌发酵现象,在实验过程中观察到液体中冒气泡,同时气球胀大,说明酵母菌发酵过程中产生了气体,与生活联系紧密,还可鼓励学生自己动手实践。 二、实验原型及不足之处 实验原型:生物学八年级上册教材P71 演示实验发酵现象在一杯温开水中加入一大勺糖和一小包酵母,进行搅拌。将这个杯子中的液体倒入透明的矿泉水瓶或玻璃瓶内,再往瓶内加一些温开水。将一个小气球挤瘪套在瓶口。将瓶子放在教室内的窗台上,每天观察瓶中的情况,看看瓶中的液体会不会冒出气泡,气球会不会胀大。 不足之处:该实验观察到液体中冒气泡,同时气球胀大,说明酵母菌发酵并产生了气体,但无法测知发酵过程中产生的是何种气体,也无法深入理解酵母菌在日常生活中的应用。 三、实验创新与改进之处 1、改用一个带橡胶塞的锥形瓶。 2、瓶口插一根“Y”形玻璃导管,排气端分别连挤瘪的小气球和橡胶管,橡胶管再连一根直的玻璃导管,橡胶管用夹子夹住。(见后图)

3、另用一个玻璃杯盛半杯澄清的石灰水,用来检测气体。 4、经过改进之后,就可以检测发酵过程中产生的是何种气体了。 四、实验器材 1、锥形瓶一个,“Y”形玻璃导管一根,直玻璃管一根,橡胶管一根,夹子一个,小气球一个,捆扎带一根,玻璃杯两个。 2、一杯温开水,一大勺糖,一小包酵母,半杯澄清的石灰水。 五、实验原理及装置说明 1、实验原理:酵母菌是兼性厌氧型真菌,喜欢含糖的环境,有氧时将葡萄糖分解成 co和水,无氧时将葡萄糖分解成酒精和二氧 2 化碳,同时都释放出能量。 2、装置如下图: 六、实验过程 1、在一杯温开水中加入一大勺的糖和一小包酵母,进行搅拌。将混合液倒入锥形瓶时,再将瓶内加一些温开水。

酵母菌酒精发酵实验报告

酵母菌酒精发酵实验报告 实验方案 酵母菌酒精发酵地条件研究 学院(部):生物与化学工程学院 专业:生物工程 学生姓名:鑫 学 班 指导 1 2 g玉米粉 糖化:糖化时地工艺条件为:糖化温度为58℃,pH值为4.5,糖化时间为3.5h,糖化酶地添加量为0.3g/100g玉米粉. 活化培养基 本实验在进行实验时采用察氏(czapck)培养基地配制,配方如下表一:

表一 扩大培养基 扩大培养仍然用察氏(czapck)培养基,由于要用液体地,所以将其中地琼脂配料去掉. 1 2 3 (1 (2 按照 中90℃液化3.5h.边液化边搅拌. (3)玉米粉地糖化 将液化后地玉米液中按照0.3g/100ml加入液化液中.再在水浴锅中,58℃糖化3.5h. (4)过滤 糖化后地糖化液有可能有没有彻底液化地玉米颗粒,会造成浑浊,这时需要对糖化液进行过 滤操作.

操作步骤: 最后与以上培养基一起进行灭菌处理.灭菌时,清洗16支移液管,与培养基一起灭菌. (5)活化步骤 器材:酒精灯,接种针,母菌,斜面培养基,消毒酒精. 步骤:1、将器材放于实验台上.对双手合桌面进行灭菌.对接种针进行灼烧灭菌.2、在酒精灯旁按照无菌操作步骤在酒精灯火焰旁取下试管棉塞.3、将灼烧后地接种针伸入母菌试管取粘 培养. , 不同菌量下地发酵 器材:扩大菌种,移液管四个,酒精灯,发酵液,洗耳球. 步骤:1、将实验器材放于实验台上.2、用移液管移取8%地扩大菌种到发酵液中.3、塞好棉塞,将发酵液存放于30℃条件下发酵2d.4、按照以上步骤,分别移取10%、12%、14%地扩大菌种到发酵液中,30℃培养2d,之后进行酒精检测. 不同醪液浓度下地发酵

酵母菌的分离鉴定、固定化及酒精发酵3(DOC)

酵母菌的分离鉴定、固定化及酒精发酵 吴英玲 10197020 10生物创新班 摘要:酵母菌喜欢酸性环境,可利用乳酸豆芽葡萄糖培养基富集培养酵母菌,然后在YPG培养基上用划线法分离纯化出酵母菌。将分离的酵母菌转接于YPG斜面培养基上培养,待长好后置于冰箱内 4 ℃下保存。用TTC显色剂及杜氏小管观察法筛选出发酵能力高的酵母菌。并通过菌落形态、细胞形态、生化分析及分子生物学手段进行微生物鉴定。采用PVA-海藻酸钠固定化技术固定酵母细胞进行酒精发酵。 关键词:酵母菌分离鉴定固定化酒精发酵 Abstract: Yeast like acid environment, the use of lactic acid glucose medium enrichment culture yeast, bean sprouts and purification by marking method on the YPG culture medium of yeast will transfer separation of the yeast in the YPG cant medium cultivation, staying long placed in the refrigerator after use the TTC chromogenic agent, save and duchenne tubular observation screen high fermentation ability by colony morphology of yeast cell morphological and biochemical analysis and molecular biology means to identify the microorganisms using PVA - sodium alginate immobilized technology fixed yeast cells for ethanol fermentation。 前言 酵母菌(yeast)是一类单细胞真菌。一般呈圆形、卵圆形、圆柱形,其菌落呈乳白色或红色,表面湿润、粘稠,易被挑起。酵母菌多数为腐生,专性或兼性好氧,广泛生长在偏酸性的潮湿的含糖环境中,例如水果、蔬菜、蜜饯的内部和表面以及在果园土壤中最为常见。酵母菌在有氧环境下将葡萄糖转化为水和二氧化碳,主要用于馒头、面包等食品发酵;在工业上,酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)将葡萄糖、果糖、甘露糖等单糖吸

酿酒实验报告

、目的 全校任选实验课《白酒和葡萄酒酿造与酒评》,是食品、生物工程类专业课。通过本课程的学习,使学生能运用基础课和专业基础课中学过的机械、化学和生物等学科的基础理论和专业知识,来认识与解决各类酿造过程中的具体生产技术问题,熟悉原料的特点和生产菌种的特性,选择合理的工艺流程和操作控制要点。通过本课程的学习,要求学生掌握米酒、黄酒、白酒、葡萄酒和白兰地的发酵工艺与新型白酒勾兑,以及培养学生通过用感官品评技术评价烈酒和葡萄酒酒质量,掌握品酒技能与评酒技术等。 本课程旨在培养学生能在酿酒行业、风味食品和调味品行业以及相关的食品发酵、 酶制剂行业从事技术、工艺和产品开发等研究工作。 本任选实验课专门提供学生酿制米酒、黄酒、小曲白酒、葡萄酒、白兰地酿造实验条件,以及提供白酒与葡萄酒品评实践条件,把酿造学的基本工艺与现代科学技术相结合,在弘扬祖国古代酒文化瑰宝的基础上,结合现代酿酒工艺及科学调酒勾兑方法,使学生能更深刻地体会到我国传统酿造工艺技术的博大精深,从而能利用所学知识不断提高我国酿造工艺技术水平的目的。 实验课共设7个实验项目和白酒香型分类实验,分别是:①米酒酿造②黄酒③小曲白酒酿造④葡萄酒酿造⑤白兰地酿造⑥新型白酒勾兑⑦烈酒和葡萄酒酒评与白酒香型分类。 二、原理与方案 1、米酒酿造原理 糯米(或者大米)含有丰富的淀粉,淀粉在根霉菌淀粉酶的作用下,先转化为麦芽糖,再转化为葡萄糖。受到酒曲里酒化酶的作用部分葡萄糖变为酒精。其味甘甜柔顺,所以称为甜酒。 2、小曲白酒酿造原理 用谷物、薯类或糖分等为原料,经糖化发酵、蒸馏、陈酿和勾兑制成的酒精浓度大于20%(V/V)的一种蒸馏酒。 小曲白酒的生产分为固态发酵法和半固态发酵法两种,半固态发酵法又分为先培菌糖化后发酵和边糖化边发酵两种典型的传统工艺。广东主要的方法是先培菌糖化后发酵工艺。此工艺特点是采用药小曲为糖化发酵剂,前期固态培菌糖化,后期半固态发酵,再经蒸馏、陈酿和勾兑而成。 3、葡萄酒酿造 葡萄酒是用新鲜的葡萄或葡萄汁经发酵酿成的酒精饮料。通常分红葡萄酒和白葡萄酒两种。前者以带皮的红葡萄为原料酿制而成;后者以不含色素的葡萄汁为原料酿制而成。 4、烈酒和葡萄酒酒评与白酒香型分类 4.1白酒品评 白酒是一种味觉品,它的色、香、味、格的形成不仅决定于各种理化成分的数量,还决定于各种成分之间的协调平衡、微量成分衬托等关系,而人们对白酒的感官检验,正是对白酒的色、香、味、格的综合性反映。这种反映是很复杂的,仅靠对理化成分的分析不可能全面地、准确地反映白酒的色、香、味、格的特点。因此,对白酒品质的鉴定,更多地是依靠感觉器官的尝评方法来弥补其不足。就现阶段的实际情况而言,任何精密仪器都代替不了人的味觉和嗅觉,用气相色谱仪分析白酒类微量香味成分对1/10万g含量的物质是可测定出来的,但超过这个极限则无法检测。而人的感官对1/100万g的含量的微量成分却能感觉出来,尤其有的感觉指标是不能用数据表示的。因此虽然现代的科学仪器能把白酒的微量成分分析出来,但是仍然不能准确地测定白酒内在质量,只能作为一种辅助

酵母菌酒精发酵实验方案

酵母菌酒精发酵实验方案 实验方案 酵母菌酒精发酵地条件研究 学院(部):生物与化学工程学院 专业:生物工程 学生姓名: 学 班 指导 1 2 g玉米粉 糖化:糖化时地工艺条件为:糖化温度为58℃,pH值为4.5,糖化时间为3.5h,糖化酶地添加量为0.3g/100g玉米粉. 活化培养基 本实验在进行实验时采用察氏(czapck)培养基地配制,配方如下表一:

表一 扩大培养基 扩大培养仍然用察氏(czapck)培养基,由于要用液体地,所以将其中地琼脂配料去掉. 1 2 3 (1 (2 按照 中90℃液化3.5h.边液化边搅拌. (3)玉米粉地糖化 将液化后地玉米液中按照0.3g/100ml加入液化液中.再在水浴锅中,58℃糖化3.5h. (4)过滤 糖化后地糖化液有可能有没有彻底液化地玉米颗粒,会造成浑浊,这时需要对糖化液进行过 滤操作.

操作步骤: 最后与以上培养基一起进行灭菌处理.灭菌时,清洗16支移液管,与培养基一起灭菌. (5)活化步骤 器材:酒精灯,接种针,母菌,斜面培养基,消毒酒精. 步骤:1、将器材放于实验台上.对双手合桌面进行灭菌.对接种针进行灼烧灭菌.2、在酒精灯旁按照无菌操作步骤在酒精灯火焰旁取下试管棉塞.3、将灼烧后地接种针伸入母菌试管取粘 培养. , 不同菌量下地发酵 器材:扩大菌种,移液管四个,酒精灯,发酵液,洗耳球. 步骤:1、将实验器材放于实验台上.2、用移液管移取8%地扩大菌种到发酵液中.3、塞好棉塞,将发酵液存放于30℃条件下发酵2d.4、按照以上步骤,分别移取10%、12%、14%地扩大菌种到发酵液中,30℃培养2d,之后进行酒精检测. 不同醪液浓度下地发酵

糯米甜酒发酵实验报告

发酵工艺实验—— 糯米甜酒发酵 xxxxxxxx xxx xxxxxxx 指导老师:xxx 一、实验目的 1、初步学会制作糯米甜酒。 2、学习糯米甜酒发酵的原理和方法。 3、学习糯米甜酒的鉴定、品评。 二、实验原理 糯米甜酒是我国传统的发酵食品,其产热量高,酒度低,风味独特,具有良好的营养价值。由于酵母不能直接利用淀粉,因此大多数的甜酒酿是将糯米或大米经过蒸煮糊化,利用酒药中的根霉和米曲霉等微生物将糊化后的淀粉糖化,将蛋白质水解成氨基酸,然后酒药中的酵母菌利用糖化产物进行生长和繁殖,并通过糖酵解途径将糖转化成酒精,经长时间酿制而成的产品。 三、实验材料 糯米1斤,酒曲酵母,蒸锅1个,多空蒸盘1个,托盘1个,纱布,筷子1双,试管1支,恒温箱,带盖玻璃瓶,pH试纸,酒精计,温度计等 四、实验方法与步骤 实验流程: 洗米,浸泡→蒸饭→摊冷→拌酒曲→落缸搭窝→培养成熟→检测 1、洗米,浸泡:称米、洗米至水清、泡米水高出水面10cm以上,浸泡12到16小时, 至可以用手碾碎即可,沥干水分。 2、蒸饭:在蒸锅里放上水,蒸屉上垫一层白布,烧水沸腾至有蒸汽。将沥干的糯米 放在布上蒸熟,中间掏窝方便蒸汽上行,约1小时。自己尝一下就知道了。没有这层布,糯米会将蒸屉的孔堵死,蒸不熟。尝一尝糯米的口感,如果饭粒偏硬,就洒些水拌一下再蒸一会。 3、摊冷:将蒸好的糯米端离蒸锅,倒在托盘中冷却至室温。间或用筷子翻翻以加快 冷却。在冷却好的糯米上洒少许水,将酒曲均匀的拌在糯米中,用手将糯米弄散摊匀,用水要尽量少。 4、落缸搭窝:转入容器,压实,中间扒一个小窝,然后密封。 5、培养成熟:置于30℃的恒温箱中培养,如果米饭变软,表示已糖化好;有水有酒 香味,表示已有酒精和乳酸,即可停止保温。扭松盖子放在约80℃热水中烫10min,杀死其中的微生物和酶,停止其活动。这样,甜酒酿就制作成功。 6、检测:测定酒精度,酸度,可溶性固形物含量,品评。 五、实验结果 (1)实测温度:21.0℃; (2)酒精度:10.0; (3)可溶性固形物含量:35.1; (4)pH:3.6; (5)品评结果: 有黄酒应有的香气,有醇香,但不浓郁(22分); 甜美尚爽口,酒味较淡薄(36分); 具有本类黄酒的风格,成分较为协调(12分); 品评总分:70分

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