HPLC―MSMS法测定鸭肉中氯霉素类药物残留[HJ1.3mm] 收稿日期：2015-11-16 基金项目：江苏省泰州市社会发展项目（编号：TS032）。 通信作者：蒋春茂，博士，教授，主要从事新兽药研究。E-mail：cmj109@126。 动物源食品（肉、蛋、奶、水产及其制品）的安全是全世界关注的焦点，其中兽药残留问题是影响动物源食品安全的重要因素之一[1]。氯霉素类药物属于广谱抗生素，对革兰氏阴性及阳性细菌均有抑制作用，主要包括氯霉素（chloramphenicol，CAP）、甲砜霉素（thiamphenicol，TAP）、氟苯尼考（florfenicol，FF）等。氯霉素可抑制人类骨髓的造血功能，引起再生障碍性贫血，在美国、欧盟及我国均被禁用于食品动物，同时规定了禽肉中甲砜霉素、氟苯尼考的最高残留限量分别为50、100 ng/g。目前，氯霉素类药物残留的检测方法主要有微生物法[2]、酶联免疫法[3]、共振生物传感器法[4]、气相色谱法[5]、液相色谱法[6]、超高效液相色谱法[7]、气相色谱-质谱法[8]、液相色谱-质谱法[9]、超高效液相色谱-串联质谱法[10-12]等。 目前，动物性食品中氯霉素类及其代谢物的残留检测前处理方法较为传统，药物与杂质间分离度差，且?驮拥那按?理程序影响了样品回收率。如何简化前处理方法是目前该类药物检测中亟待解决的关键问题。仅采用HPLC技术或GC技术已无法满足多残留检测的要求，且其在鸭肉残留检测方法中的应用尚未见国内外报道。鉴于此，本研究拟将快速溶剂萃取（ASE）
技术应用于样品前处理，采用HPLC-MS/MS法建立快速、简易、高灵敏、高通量的禽肉中氯霉素类及其代谢物的多残留快速检测技术，为兽药残留监控体系的建立和完善提供先进的技术资料，对于我国动物性食品出口贸易更好地与国际接轨、保障人类健康具有重要意义。 1材料与方法 1.1药物与试剂 氯霉素对照品购自中国食品药品检定研究所，批号为130555-201203。甲砜霉素对照品购自中国兽医药品监察所，批号为k0240706。氟苯尼考对照品购自中国兽医药品[JP2]监察所，批号为k0301305。7-羟基双香豆素标准品购自Sigma-Aldrich公司，批号为STBD2336V。氯霉素原料药购自郑州津北化工有限公司。甲砜霉素粉（5%）、氟苯尼考粉（10%）均购自江苏中牧倍康药业有限公司。乙腈为色谱纯，购自Fisher scientific公司。二甲基亚砜（DMSO）为色谱纯，购自国药集团化学试剂有限公司。乙酸为色谱纯，购自Sigma-Aldrich公司。 1.2仪器与设备 API4000 Q-trap型三重四级杆/离子阱质谱仪，包含电喷雾电离源（ESI 源）（美国应用生物系统公司）；1200系列高效液相色谱系统（美国安捷伦科技有限公司）；CTC PAL型自动进样器（CTC Analytics，AG，瑞士）；FA25型高速匀浆机（Fluko公司）。 1.3试验动物及处理 雏鸭购自江苏省海安县某孵化场，选择无抗饲料饲养至30日龄。将鸭分为2组，其中一组给以氯霉素原料药、甲砜霉素粉、氟苯尼考粉，均
5 MM_FS_CNJ_01出口肉 肉制品 氯霉素 残留量 气相色谱法 外标法定量 MM_FS_CNJ_0110 出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法 1. 适用范围 本方法适用于出口猪肉中氯霉素残留量的检验。 2. 原理概要 用乙酸乙酯提取试样中的氯霉素， 然后将乙酸乙酯蒸发至干， 用正已烷净化， 氯霉素经硅烷化衍生后， 溶解于正已烷中， 用带电子俘获检测器的气相色谱仪进 行测定，外标法定量。 3. 主要试剂和仪器 . 主要试剂 乙酸乙酯：重蒸馏； 甲醇：重蒸馏； 正已烷：重蒸馏； 丙酮：重蒸馏； 硅烷化试剂：3mL 六甲基二硅烷（HMDS 片1mL 三甲基氯硅烷（TMS ）+ 9mL 比啶; 氯化钠水溶液： 1mol/L ； 氯霉素标准品：含量》% 氯霉素标准溶液：准确称取适量的氯霉素标准品，用丙酮配成mL 的贮备液, 根据需要稀释成适当浓度的标准工作液。 . 仪器 气相色谱仪：配有电子俘获检测器 （ECD ）； 快速混匀器； 离心机： 3000r/min ； 多功能微量化学样品处理仪或其他相当的仪器； 具塞离心管： 5mL ； 离心管： 15mL ； 尖嘴吸管； 微量可调移液管：50卩L 、200卩L 、1000卩L ; 微量注射器：10卩L 。 4. 试样的抽取与制备 . 检验批 以不超过 2500 件商品为一检验批。 同一检验批的商品应具有相同特征， 如： 包装、标记、产地、规格和等级等。 . 抽样数量 最低抽样数，件 26? 100 101 ? 250 251?500 501?1000 1001?2500 批量，件 1?25 10 15 17 20
.抽样方法 按规定的抽样件数，随机抽取，逐件开启。从每件内取一袋作为原始样品，其总量不少于2kg，放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室。 如每件中无小包装或有小包装但每袋重量超过2kg者，则可用锋利刀（用酒精灭菌后）在抽出的包件中，每件割取不少于100g,混合后置于清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的重量不少于2kg。加封后，标明标记，及时送交实验室。 .试样的制备 从原始样品中分取出约1kg，充分绞碎混匀，装入清洁的容器内，作为试样，加圭寸并标明标记。 .试样保存 将试样于—18C以下冷冻保存。 注：在抽样和制样过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 5. 过程简述 .提取与净化 称取均匀试样（精确至于15mL离心管中，加入2mL乙酸乙酯，在混匀器中快速混匀1min,离心3min,用尖嘴吸管将乙酸乙酯提取液转入另一具塞离心管中，再用2mL 乙酸乙酯提取一次残渣。合并乙酸乙酯提取液，于多功能微量化学样品处理仪（60 C ）或其他相当的仪器上通氮气吹干。加入200卩L甲醇溶解残渣，再加入 2mL1mol/LNaCI水溶液和1mL正已烷，快速混匀1min，离心3min，弃去正已烷层。再用2X 1mL正已烷洗涤，弃去正已烷。加入2mL乙酸乙酯，混匀1min, 离心3min。吸取乙酸乙酯溶液于5mL具塞离心管中，在多功能微量化学样品处理仪上（60 °C ）或其他相当的仪器通氮气吹干。 .硅烷化 向盛有残余物的具塞离心管中，力卩200卩L硅烷化试剂，混匀30s，于60C 反应15mi n,用氮气吹干，加正已烷，供气相色谱分析。取氯霉素标准工作液于5mL具塞离心管中，于60C通氮气吹干，按上述步骤硅烷化后，作为标准溶液，供气相色谱测定。.测定色谱条件 色谱柱：农残U #柱，25n X （内径）; 进样口温度：280C； 柱温：240C； 检测器温度：300 C； 氮气：纯度》% 载气流量15mL/min,尾吹气30mL/min。 色谱测定 根据样液中氯霉素含量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中硅烷化氯霉素响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定，在上述色谱条件下，硅烷化氯霉素保留时间约为。 .空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。 6. 结果计算 用色谱数据处理机或按下列公式计算试样中氯霉素残留量： X= h? c ? V h s ? m 式中：X ----- 试样中硅烷化氯霉素含量，mg/kg ；
氯霉素软膏的主要功效 氯霉素软膏是属于外用药膏的，主要就是涂抹到人们的皮肤上面，这样的话就可以起到一个抗炎杀菌的作用，对于由于细菌，或者是真菌等原因所导致的一些疾病就是有很大的治疗目的，可以在短时间内就控制住自己的病情发展，而且副作用也是很低的，基本上不会给自己的身体内部造成非常大的影响，所以说可以长期的涂抹使用的。 本品为氯霉素类抗生素。在体外具广谱抗微生物作用，包括需氧革兰阴性菌及革兰阳性菌、厌氧菌、立克次体属、螺旋体和衣原体属。对下列细菌具杀菌作用：流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和脑膜炎奈瑟菌。对以下细菌仅具抑菌作用：金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、草绿色链球菌、B组溶血性链球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、副伤寒沙门菌、志贺菌属、脆弱拟杆菌等厌氧菌。下列细菌通常对氯霉素耐药：铜绿假单胞菌、不动杆菌属、肠杆菌属、粘质沙雷菌、吲哚阳性变形杆菌属、甲氧西林耐药葡萄球菌和肠球菌属。
本品属抑菌剂。氯霉素为脂溶性，通过弥散进入细菌细胞内，并可逆性地结合在细菌核糖体的50S亚基上，使肽链增长受阻(可能由于抑制了转肽酶的作用)，因此抑制肽链的形成，从而阻止蛋白质的合成。 氯霉素曾广泛用于治疗各种敏感菌感染，后因对造血系统有严重不良反应，故对其临床应用现已做出严格控制。可用于有特效作用的伤寒、副伤寒和立克次体病等及敏感菌所致的严重感染。氯霉素在脑脊液中浓度较高，也常用于治疗其他药物疗效较差的脑膜炎患者。必要时可用静脉滴注给药。由于氯霉素可引起严重的毒副作用，故临床仅用于敏感伤寒菌株引起的伤寒感染、流感杆菌感染、重症脆弱拟杆菌感染、脑脓肿、肺炎链球菌或脑膜炎球菌性脑膜炎同时对青霉素过敏的患者。应用时疗程避免过长，既往有药物引起血液学异常病史的病人应禁用。
第四十三章四环素类及氯霉素类抗生素 [内容提示及教材重点] 一、四环素与土霉素 抗菌作用：广谱，对革兰阳性的肺炎球菌、溶血性链球菌、草绿色链球菌及部分葡萄球菌、破伤风杆菌和炭疽杆菌等有效；对革兰阴性细菌的脑膜炎球菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、流感杆菌、巴氏杆菌属、布氏杆菌等及某些厌氧菌（如拟杆菌、梭形杆菌）都有效。此外，对肺炎支原体、立克次体、螺旋体、放线菌也有抑制作用，还能间接抑制阿米巴原虫，对绿脓杆菌、病毒与真菌无效。 抗菌机制：与细菌核蛋白体30S亚基在A位特异性结合，阻止aa-tRNA的联结，阻止肽链延伸和细菌蛋白质合成，还可引起细胞膜通透性改变，使胞内的核苷酸和其他重要成分外漏，从而抑制DNA复制。 临床应用：对立克次体感染和斑疹伤寒、恙虫病以及支原体引起的肺炎有良效，为首选。对革兰阳性菌和阴性菌感染，百日咳、痢疾、肺炎杆菌所致的尿道、呼吸道与胆道感染，可用新四环素作次选药。 不良反应：1.胃肠道反应2.二重感染3.对骨、牙生长的影响4. 长期大量口服或静脉给予可造成严重肝脏损害，也能加剧原有的肾功能不全，影响氨基酸代谢而增加氮质血症5.引起药热和皮疹等过敏反应。 二、氯霉素 抗菌作用：对革兰阳性、阴性细菌均有抑制作用，且对后者的作用较强，对伤寒杆菌、流感杆菌、副流感杆菌和百日咳杆菌的作用比其他抗生素强，对立克次体感染如斑疹伤寒也有效，但对革兰阳性球菌的作用不及青霉素和四环素。 作用机制：与核蛋白体50S亚基结合，抑制肽酰基转移酶，从而抑制蛋白质合成。 临床应用：曾广泛用于治疗各种敏感菌感染，后因对造血系统有严重不良反应，故对其临床应用现已做出严格控制。可用于有特效作用的伤寒、副伤寒和立克次体病等及敏感菌所致的严重感染，在脑脊液中浓度较高，也常用于治疗其他药物疗效较差的脑膜炎患者。 不良反应：抑制骨髓造血机能：一可逆的各类血细胞减少，其中粒细胞首先下降，这一反应与剂量和疗程有关；二不可逆的再生障碍性贫血，少见，但死亡率高。此反应属于变态反应与剂量疗程无直接关系。也可产生胃肠道反应和二重感染。此外，少数患者可出现皮疹及血管神经性水肿等过敏反应，但都比较轻微。新生儿与早产儿剂量过大可发生循环衰竭（灰婴综合征），这是由于他们的肝发育不全，排泄能力差，使氯霉素的代谢、解毒过程受限制，导致药物在体内蓄积。 [作业测试题]
氯霉素 生科院制药081 李志200811806128 氯霉素（INN）在1949年发现具有抑菌抗菌作用。它被认为是一个典型的广谱抗生素，因为它是既便宜又容易制造，经常被发现在第三世界作为首选药物使用。 氯霉素，也称为Chlornitromycin，是有效对抗多种革兰氏阳性和革兰氏阴性菌，包括 很多厌氧生物的抗生素。由于耐抗性和安全问题，它已不再是一个在发达国家中任何感染的第一线药物，虽然它有时被用于眼部感染的外用。尽管如此，推进新的药物和细菌耐药性提高的全球性问题，已导致其使用的兴趣降低。在低收入国家，氯霉素仍然广泛使用，因为它是价格低廉和容易获得。 与氯霉素相关治疗最严重的不良影响是骨髓毒性，其可能出现两种截然不同的形式：骨髓抑制，这是药物直接毒性作用，通常是可逆的。再生障碍性贫血，这是特质（罕见，不可预知的，与剂量无关），一般是致命的。 因为它通过抑制细菌蛋白质的合成功能，氯霉素有一个非常广泛的应用：对革兰氏阳性菌（包括大多数的MRSA菌株），革兰氏阴性菌和厌氧菌，但不对绿脓杆菌，衣原体，或肠杆菌属作用。它有一些对鼻疽的活动，但不再被经常用来治疗这个有机体（已取代头孢他啶，美罗培南）引起的感染。在西方，氯霉素主要限于局部用途，因为对再生障碍性贫血的风险的担忧。 治疗用途 最初的迹象是氯霉素治疗伤寒，但现在几乎是普遍的多重耐药伤寒杆菌的存在意味着它很少用于此适应症当生物体被称为是敏感的除外。氯霉素可作为二线剂在治疗耐四环素霍乱。由于其出色的血脑屏障渗透（远远优于头孢菌素），氯霉素仍然为金黄色葡萄球菌脑脓肿的首选治疗。它在治疗脑脓肿也是有用的，不知道是否混合有机体或致病微生物。氯霉素是有效的对三个主要细菌性脑膜炎：脑膜炎奈瑟菌，肺炎链球菌和流感嗜血杆菌。在西方，氯霉素仍然是严重的青霉素或头孢菌素过敏和GPS患者治疗脑膜炎的首选药物，在他们国家一般进行静脉注射氯霉素。在低收入国家，世卫组织建议，油性氯霉素可用于第一线治疗脑膜炎。 在以往经验看氯霉素用于儿童发烧时的鉴别诊断包括两个脑膜炎奈瑟菌败血症以及洛基山斑疹热和点状皮疹，已在美国使用氯霉素，等候诊断的调查结果。 氯霉素也是对肠球菌，从而导致其用于治疗耐万古霉素肠球菌认为有效。 虽然未公布，氯霉素也被广泛应用到青蛙，以防止真菌感染。最近的研究表明氯霉素最近被发现用于两栖动物的壶菌病的救生治疗。壶菌病是一种真菌病三分之一失去了生命自1980年以来的120蛙物种灭绝的罪魁祸首。 不良影响 1.再生障碍性贫血 最严重的副作用是氯霉素治疗出现罕见的再生障碍性贫血，通常是致命的。在治疗过程中，没有办法预测谁可能会或可能不会得到这种副作用。这种副作用的效果，通常会出现数
MM_FS_CNJ_0110出口肉肉制品氯霉素残留量气相色谱法外标法定量 MM_FS_CNJ_0110 出口肉及肉制品中氯霉素残留量检验方法 1.适用范围 本方法适用于出口猪肉中氯霉素残留量的检验。 2.原理概要 用乙酸乙酯提取试样中的氯霉素，然后将乙酸乙酯蒸发至干，用正已烷净化，氯霉素经硅烷化衍生后，溶解于正已烷中，用带电子俘获检测器的气相色谱仪进行测定，外标法定量。 3.主要试剂和仪器 3.1.主要试剂 乙酸乙酯：重蒸馏； 甲醇：重蒸馏； 正已烷：重蒸馏； 丙酮：重蒸馏； 硅烷化试剂：3mL六甲基二硅烷(HMDS)＋1mL三甲基氯硅烷(TMS)＋9mL吡啶； 氯化钠水溶液：1mol/L； 氯霉素标准品：含量≥99.5%； 氯霉素标准溶液：准确称取适量的氯霉素标准品，用丙酮配成0.10mg/mL 的贮备液，根据需要稀释成适当浓度的标准工作液。 3.2.仪器 气相色谱仪：配有电子俘获检测器(ECD)； 快速混匀器； 离心机：3000r/min； 多功能微量化学样品处理仪或其他相当的仪器； 具塞离心管：5mL； 离心管：15mL； 尖嘴吸管； 微量可调移液管：50μL、200μL、1000μL； 微量注射器：10μL。 4.试样的抽取与制备 4.1.检验批 以不超过2500件商品为一检验批。 同一检验批的商品应具有相同特征，如：包装、标记、产地、规格和等级等。 4.2.抽样数量 批量，件最低抽样数，件 1～25 1 26～100 5 101～250 10 251～500 15 501～1000 17 1001～2500 20
4.3.抽样方法 按规定的抽样件数，随机抽取，逐件开启。从每件内取一袋作为原始样品，其总量不少于2kg，放入清洁容器内，加封后，标明标记，及时送交实验室。 如每件中无小包装或有小包装但每袋重量超过2kg者，则可用锋利刀(用酒精灭菌后)在抽出的包件中，每件割取不少于100g，混合后置于清洁容器内，作为混合原始样。混合原始样的重量不少于2kg。加封后，标明标记，及时送交实验室。 4.4.试样的制备 从原始样品中分取出约1kg，充分绞碎混匀，装入清洁的容器内，作为试样，加封并标明标记。 4.5.试样保存 将试样于－18℃以下冷冻保存。 注：在抽样和制样过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。 5.过程简述 5.1.提取与净化 称取2.00g均匀试样(精确至0.01g)于15mL离心管中，加入2mL乙酸乙酯，在混匀器中快速混匀1min，离心3min，用尖嘴吸管将乙酸乙酯提取液转入另一具塞离心管中，再用2mL乙酸乙酯提取一次残渣。合并乙酸乙酯提取液，于多功能微量化学样品处理仪(60℃)或其他相当的仪器上通氮气吹干。加入200μL甲醇溶解残渣，再加入2mL1mol/LNaCl水溶液和1mL正已烷，快速混匀1min，离心3min，弃去正已烷层。再用2×1mL正已烷洗涤，弃去正已烷。加入2mL乙酸乙酯，混匀1min，离心3min。吸取乙酸乙酯溶液于5mL具塞离心管中，在多功能微量化学样品处理仪上(60℃)或其他相当的仪器通氮气吹干。 5.2.硅烷化 向盛有残余物(5.1)的具塞离心管中，加200μL硅烷化试剂，混匀30s，于60℃反应15min，用氮气吹干，加1.00mL正已烷，供气相色谱分析。取1.00mL 氯霉素标准工作液于5mL具塞离心管中，于60℃通氮气吹干，按上述步骤硅烷化后，作为标准溶液，供气相色谱测定。 5.3.测定 5.3.1.色谱条件 色谱柱：农残Ⅱ#柱，25m×0.53mm(内径)； 进样口温度：280℃； 柱温：240℃； 检测器温度：300℃； 氮气：纯度≥99.99%，载气流量15mL/min，尾吹气30mL/min。 5.3.2.色谱测定 根据样液中氯霉素含量情况，选定峰高相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中硅烷化氯霉素响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定，在上述色谱条件下，硅烷化氯霉素保留时间约为8.7min。 5.4.空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。 6.结果计算 用色谱数据处理机或按下列公式计算试样中氯霉素残留量：
1 绪论 1.1 引言 随着社会经济的快速发展和人民生活水平的提高，动物源性食品在人们生活中所占比例越来越大，部分不法养殖户为追求经济效益最大化，不同程度的在饲料中添喂人用抗生素，使畜禽肉品中抗生素残留严重，成为的食品安全的重要问题之一。各国政府严格限制食品中各种有害成分，特别是抗生素、农药残留等。 食品安全检测是保障食品安全的基础，是监督管理的重要手段。为了有效地保障食品安全，就必须对食品安全中的各类样品进行准确地分析测定。目前食品安全检验部门通常采用气相色谱、液相色谱等分析仪器。然而使用这些仪器进行分析测定前，必须把样品制成溶液。 由于食品样品具有被测物浓度低、组分复杂、干扰物质多、易受环境影响而变化等特点，因此要获得数据准确、重现性好的分析结果，样品预处理是重要环节。样品预处理已成为分析化学领域中一个重要的分支，传统的样品预处理方法有液-液萃取、索氏提取、层析、蒸馏、吸附、离心、过滤等几十种。这些方法一般要使用大量的有机溶剂，而且处理时间长、操作步骤复杂，容易导致样品损失和玷污，产生较大误差。因此，迫切需要探索高准确度、快速、简单、不使用或少使用有机溶剂的样品预处理方法，发展较快的有固相萃取、固相微萃取等。 固相萃取技术以其高效性、高选择性、高自动化程度以及低耗性等特点被广泛地应用在生物医学、食品分析、环境分析等领域[1]，其关键是优良的固相萃取材料的制备。因此制备选择性高的固相萃取材料已为研究的热点。 1.2 氯霉素样品预处理及检测方法 1.2.1 氯霉素类抗生素来源及危害 我国是一个养殖大国，近年来养殖业飞速发展。由于集约化的高密度养殖、珍贵品种引进、使用催生长激素、环境污染等因素导致了养殖环境的恶化和畜禽疾病增加，又由于畜禽疾病防治体系的不健全和欠缺用药指导和规范管理，在养
水产品中氯霉素的残留量的检测：气相色谱法 氯霉素属广谱抑菌抗生素，是治疗伤寒，副伤寒的首选药，治疗厌氧菌感染的特效药物之一，其次用于敏感微生物所致的各种感染性疾病的治疗。氯霉素曾广泛用于治疗各种敏感菌感染，后因对造血系统有严重不良反应，故对其临床应用现已做出严格控制。因其抗菌效果好、成本低，上世纪八、九十年代长期应用于水产养殖业。尽管农业部出台公告禁止使用，但仍有一些不法的水产品养殖户，特别是散户依然在偷偷使用。 水产养殖户会在饲料、养殖（包括环境、器械等的消毒）、加工、保鲜、包装和运输等生产环节使用氯霉素，用于延长水产品的寿命、方便运输。我国在养殖过程中滥用抗生素已经成为一个严重的水产品安全问题，而且由于氯霉素在水产品中的残留超标，我国水产品出口已经受到严重冲击，并且开始波及到其他动物制品的出口。现在我国政府也明文禁止在渔牧养殖中使用含有氯霉素的兽药和渔药，并加强
了对食物性产品中氯霉素的监督力度。仅凭肉眼无法分辨水产品是否含有氯霉素，只有经过专业部门才能检测出来。 仪器准备 GC5890N气相色谱仪（南京科捷分析仪器有限公司）全兼容Agilent 6890N气相色谱仪，可直接接驳Agilent 6890N检测器及相关检测器控制板，可连接安捷伦色谱工作站和自动进样器，仪器技术指标、性能、检测器灵敏度可与Agilent 6890N相媲美。独特的进样口设计解决进样歧视，双柱补偿功能不仅能解决升温带来的程序漂移，可以得到更低的最小检测限；可选填充柱、毛细管分流/不分流（具有隔膜清扫功能）两种进样系统。适用于食品卫生、医疗器械、电子高纯气体行业、精细化工、石油开采及炼制、石油化工、环境监测、生物工程以及职卫检测、质量监督检验所等分析检测机构。 检测过程 样品处理： 提取准确称取5.00g样品，置于50mL玻璃离心管中，加入乙酸乙酯20mL，均质机均质1min，分散均匀，4000r/min离心3min，将乙酸乙酯层转移到100mL细口鸡心瓶中。再向离心管中加乙酸乙酯10mL，均质1min，4000r/min离心3min，合并乙酸乙酯提取液于原鸡心瓶中，于40℃水浴中旋转蒸发至干。 脱脂净化向鸡心瓶中加1mL盐酸溶液（0.01moL/L），漩涡混合溶解残留物，再加入2mL正己烷，漩涡混合1min，充分混匀提取脂肪，转移到5mL离心管中，4000r/min离心2min，弃去正己烷层，再
作业指导书 O P E R A T I N G I N S T R U C T I O N S 动物源性食品中氯霉素类药物残留量测定 编号：XZJY084-00-2019 版本：第一版第0次修改 编制：审核：批准： 实施日期：2019.01.01
一、编制目的 为规范动物源性食品中氯霉素类药物残留量的检验方法，编制本指导书。 二、适用范围 本指导书适用于动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定。 三、编制依据 GB/T 22338-2008《动物源性食品中氯霉素类药物残留量测定》 四、实验原理 针对不同动物源性食品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素残留，分别采用乙腈、乙酸乙酯-乙醚或乙酸乙酯提取，提取液用固相萃取柱进行净化，液相色谱-质谱/质谱仪测定，氯霉素采用内标法定量，甲砜霉素和氟甲砜霉素采用外标法定量。 五、试剂和材料 除非另有说明,本分析中仅使用确认为分析纯的试剂和二次去离子水或相当纯度的水。 5.1 试剂 5.1.1 甲醇：液相色谱级。 5.1.2 乙腈：液相色谱级。 5.1.3 丙酮：液相色谱级。 5.1.4 正丙酮：液相色谱级。 5.1.5 正乙烷：液相色谱级。 5.1.6 乙酸乙酯：液相色谱纯。 5.1.7 乙醚。 5.1.8 乙酸钠。
5.1.9 乙酸铵。 5.1.10 β-葡萄糖醛酸苷酶：约40000活性单位。 5.1.11 氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素标准物质：纯度≥99.0％。 5.1.12 氯霉素氘代内标（氯霉素-D5）物质：纯度≥99.0％。 5.1.13 LC-Si固相萃取柱或相当者：200mg，3mL。 5.1.14 EN固相萃取柱或相当者：200mg，3mL。 5.1.15 一次性注射式滤器：配有0.45μm微孔滤膜。 5.2 试剂配制 5.2.1 乙腈饱和正乙烷：取200mL正乙烷于250mL分液漏斗中，加入少量乙腈，剧烈摇晃，静置分层后，弃去下层乙腈层即得。 5.2.2 丙酮-正乙烷（1+9）：丙酮、正乙烷按体积比1:9混匀。 5.2.3 丙酮-正己烷（6+4）：丙酮、正己烷按体积比6:4混匀 5.2.4 乙酸乙酯-乙醚（75+25）:75mL乙酸乙酯与25mL乙醚溶液混匀。5.2.5 乙酸钠缓冲液（0.1mol/L）；称取乙酸钠13.6g于1000mL容量瓶中，加入980mL水溶解并混匀，用乙酸调pH到5.0，定容至刻度混匀。 5.2.6 乙酸铵溶液（10mmol/L）：称取乙酸铵0.77g于1000mL容量瓶中，定容至刻度混匀。 5.3 标准品 氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素标准物质：纯度≥99.0％； 氯霉素氘代内标（氯霉素-D5）物质：纯度≥99.0％。 5.4 标准溶液配制 5.4.1 标准储备溶液:分别准确移取适量的氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素标准物质（精确到0.1mg），用乙腈配成500μg/mL的标准储备溶液（4℃避光保存可使用3个月）。
四环素类及氯霉素 考情分析 一、四环素类 天然： 四环素 土霉素（氧四环素） 金霉素（氯四环素） 地美环素（去甲金霉素） 半合成： 美他环素（甲烯土霉素） 多西环素（强力霉素） 米诺环素（二甲胺四环素） （一）四环素类的共同特点 【药动学特点】 1.口服部分吸收，影响因素多： ①如有Mg、Ca、Al、Fe等多价阳离子，能与四环素形成难溶性的络合物——使吸收减少。 ②饭后服药——血药浓度比空腹减少50%。 ③铁剂——使其吸收率下降40%～90%，故需同时服用两药时，应间隔3h。 ④碱性环境——影响吸收；而胃酸酸度高时——能促进吸收。 ⑤吸收量有限度——服药量超过0.5g以上，血药浓度不再随剂量增加而增高，多者随粪便排出。 2.组织分布广泛——骨、牙、肝中浓度高，存在肝肠循环； 3.肝脏代谢，肾脏排泄； 4.多西环素——吸收充分，不受胃内容物的影响，脑脊液中浓度高。 【抗菌机制】 1.30s亚基结合——抑制细菌蛋白质的合成。 2.还可抑制DNA的复制。 【抗菌作用】快速抑制细菌生长，高浓度杀菌。 广谱： 对G菌、G－菌； 立克次体、衣原体、支原体、螺旋体； 间接抑制阿米巴原虫（土霉素）。 －－四环素抗菌谱－－ 二菌四体一虫灵，基本无效伤绿结。 说明：二菌——指细菌和放线菌 四体——指立克次体、支原体、衣原体、螺旋体 一虫——指阿米巴原虫 【临床应用】
→立克次体感染 →衣原体感染 →支原体感染 →螺旋体感染 →细菌性感染 1.立克次体感染……包括斑疹伤寒和恙虫病等均可作为首选药物。 2.衣原体感染……四环素类治疗鹦鹉热衣原体引起的鹦鹉热，肺炎衣原体肺炎，沙眼衣原体引起的……等，口服或局部应用均有突出的疗效——多西环素为首选药物。 3.支原体感染……对肺炎支原体引起的非典型肺炎和溶脲脲原体引起的非特异性尿道炎具有良好的疗效。 4.螺旋体感染……回归热，多西环素为首选药物。 〖注意〗梅毒螺旋体首选——青霉素。 5.细菌性感染……疗效不如青霉素。 可作为治疗肉芽肿鞘杆菌引起的腹股沟肉芽肿、霍乱弧菌引起的霍乱、布鲁菌引起的布鲁菌病的首选药物。 【不良反应】——多而严重 1.胃肠道反应； 2.二重感染； 3.对牙齿和骨骼发育的影响； 4.肝肾损伤； 5.其他：光敏反应、前庭反应、假脑瘤。 【禁忌症】肾脏损伤病人，孕妇、哺乳期妇女及8岁以下儿童禁用。 ——二重感染—— 4原因：广谱抗生素长期应用 4后果：使人体内的正常菌群发生变化，敏感菌被抑制，耐药菌乘机繁殖，造成新的感染，又叫菌群交替症。 4多见于：年老、幼儿、体质衰弱、抵抗力低的患者。 合用肾上腺糖皮质激素、抗代谢药和抗肿瘤药时也可诱发。 4表现： ①真菌病：如白色念珠菌所致鹅口疮、肠炎； ②难辨梭菌引起的假膜性肠炎：可致死。 【例题】对四环素不敏感的病原体是 A.革兰阳性球菌 B.铜绿假单胞菌
四环素类及氯霉素类知识点归纳 考情分析 一、四环素类 天然：四环素 土霉素（氧四环素） 金霉素（氯四环素） 地美环素（去甲金霉素） 半合成：美他环素（甲烯土霉素） 多西环素（强力霉素） 米诺环素（二甲胺四环素） （一）四环素类的共同特点 【药动学特点】 1.口服部分吸收，影响因素多： ①如有Mg2+、Ca2+、Al3+、Fe2+等多价阳离子，能与四环素形成难溶性的络合物，使吸收减少。 ②饭后服药，血药浓度比空腹减少50%。 ③铁剂使其吸收率下降40%～90%，故需同时服用两药时，应间隔3h。 ④碱性环境影响吸收，而胃酸酸度高时能促进吸收 ⑤吸收量有限度。服药量超过0.5g以上，血药浓度不再随剂量增加而增高，多者随粪便排出。 2.组织分布广泛——骨、牙、肝中浓度高，存在肝肠循环； 3.肝脏代谢，肾脏排泄； 4.多西环素吸收充分，不受胃内容物的影响，脑脊液中浓度高。 【抗菌机制】 1.与30s亚基结合，抑制细菌蛋白质的合成 2.还可抑制DNA的复制。 【抗菌作用】快速抑制细菌生长，高浓度杀菌 广谱：对G+菌、G-菌； 放线菌（厌氧菌） 立克次体、衣原体、支原体、螺旋体； 间接抑制阿米巴原虫（土霉素）。 --四环素抗菌谱-- 二菌四体一虫灵，基本无效伤绿结。 说明：二菌指细菌和放线菌， 四体指立克次体、支原体、衣原体、螺旋体 一虫指阿米巴原虫。 【临床应用】 →立克次体感染 →衣原体感染
→支原体感染 →螺旋体感染 →细菌性感染 1.立克次体感染……包括斑疹伤寒和恙虫病等均可作为首选药物。 2.衣原体感染……四环素类治疗鹦鹉热衣原体引起的鹦鹉热，肺炎衣原体肺炎，沙眼衣原体引起的……等，口服或局部应用均有突出的疗效 ——多西环素为首选药物。 3.支原体感染……对肺炎支原体引起的非典型肺炎和溶脲脲原体引起的非特异性尿道炎具有良好的疗效。 4.螺旋体感染……回归热，多西环素为首选药物。 〖注意〗梅毒螺旋体首选——青霉素。 5.细菌性感染……疗效不如青霉素。 可作为治疗肉芽肿鞘杆菌引起的腹股沟肉芽肿、霍乱弧菌引起的霍乱、布鲁菌引起的布鲁菌病的首选药物。 【不良反应】——多而严重 1.胃肠道反应； 2.二重感染； 3.对牙齿和骨骼发育的影响； 4.肝肾损伤； 5.其他：光敏反应、前庭反应、假脑瘤。 【禁忌症】肾脏损伤病人, 孕妇、哺乳期妇女 及8岁以下儿童禁用。 ——二重感染—— 原因：抗生素长期应用 后果：使人体内的正常菌群发生变化，敏感菌被抑制，耐药菌乘机繁殖，造成新的感染，又叫菌群交替症。 多见于：年老、幼儿、体质衰弱、抵抗力低的患者。 合用肾上腺糖皮质激素、抗代谢药和抗肿瘤药时也可诱发。 表现： ①真菌病：如白色念珠菌所致鹅口疮、肠炎； ②难辨梭菌引起的假膜性肠炎：可致死。 【例题】对四环素不敏感的病原体是 A.革兰阳性球菌
一、名词解释： 1. 抗生素 2. 赫氏反应 3. 二重感染 二、填空题 1．β-内酰胺类抗生素是指化学结构含 _________ 的一大类抗生素，包括 _________、_________和_________ 类抗生素。 2. 临床上常用的半合成大环内酯类抗生素有_______________、 _________________、_________________等。 3. 氨基糖苷类抗生素的共同不良反应有_____________、____________、 __________、____________。 4. 氯霉素的不良反应主要有 ___ 、 ___ 、 __ 、__________________等。 5. 头孢菌素类抗生素具有____________、____________、____________、 ____________等优点。 6. 耐青霉素G的金葡菌感染可选用______________、_______________、 ___________等半合成青霉素。 7. 下列不良反应常由哪种抗生素所致：过敏性休克___________；牙齿黄染 __________；耳毒性___________。 8. β内酰胺酶抑制剂有____________、____________和____________，与多种β-内酰胺类抗生素合用的目的是_____________。 9. 万古霉素仅对__________菌有强大杀菌作用，抗菌机制是__________，细菌对本品一般不易产生__________，且与其他抗生素无__________。 三、是非题
四环素类和氯霉素类 1.四环素片 【适应症】 1．本品作为首选或选用药物应用于下列疾病：(1)立克次体病，包括流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、洛矶山热、恙虫病和Q热。(2)支原体属感染。(3)衣原体属感染，包括鹦鹉热、性病、淋巴肉牙肿、非特异性尿道炎、输卵管炎、宫颈炎及沙眼。(4)回归热。(5)布鲁菌病。(6)霍乱。(7)兔热病。(8)鼠疫。(9)软下疳。治疗布鲁菌病和鼠疫时需与氨基糖苷类联合应用。 2．由于目前常见致病菌对四环素类耐药现象严重，仅在病原菌对本品呈现敏感时，方有指征选用该类药物。由于溶血性链球菌多对本品呈现耐药，不宜选用于该类菌所致感染的治疗。本品亦不宜用于治疗溶血性链球菌感染和任何类型的葡萄球菌感染。 3.本品可用于对青霉素类过敏的破伤风、气性坏疽、雅司、梅毒、淋病和钩端螺旋体病以及放线菌属、单核细胞增多性李斯特菌感染的患者。 【用法用量】口服，成人常用量：一次0.25～0.5g，每6小时1次。8岁以上小儿常用量：每次25～50mg/kg,每6小时1次。疗程一般为7～14日，支原体肺炎、布鲁菌病需3周左右。
【不良反应】 1.胃肠道症状如恶心、呕吐、上腹不适、腹胀、腹泻等，偶可引起胰腺炎、食管炎和食管溃疡的报道，多发生于服药后立即卧床的患者。 2.本品可致肝毒性，通常为脂肪肝变性，妊娠期妇女、原有肾功能损害的患者易发生肝毒性，但肝毒性亦可发生于并无上述情况的患者。四环素所致胰腺炎也可与肝毒性同时发生，患者并不伴有原发肝病。 3.变态反应：多为斑丘疹和红斑，少数患者可出现荨麻疹、血管神经性水肿、过敏性紫癜、心包炎以及系统性红斑狼疮皮疹加重，表皮剥脱性皮炎并不常见。偶有过敏性休克和哮喘发生。某些用四环素的患者日晒时会有光敏现象。所以，应建议患者服用本品期间不要直接暴露于阳光或紫外线下，一旦皮肤有红斑应立即停药。 4.血液系统：偶可引起溶血性贫血、血小板减少、中性粒细胞减少和嗜酸粒细胞减少。 5.中枢神经系统：偶可致良性颅内压增高，可表现为头痛、呕吐、视神经乳头水肿等。 6.肾毒性：原有显著肾功能损害的患者可能发生氮质血症加重、高磷酸血症和酸中毒。 7.二重感染：长期应用本品可发生耐药金黄色葡萄球菌、革兰阴性杆菌和真菌等引起的消化道、呼吸道和尿路感染，严
四环素类与氯霉素 一、A1 1、易引起二重感染的药物是 A、四环素 B、红霉素 C、青霉素 D、SMZ E、TMP 2、不属于氯霉素的不良反应的是 A、缺铁性贫血 B、灰婴综合征 C、再生障碍性贫血 D、恶心呕吐 E、过敏反应 3、饭后服或与多价阳离子同服可明显减少其吸收的药物是 A、磺胺嘧啶 B、多西环素 C、红霉素 D、四环素 E、依诺沙星 4、因患伤寒选用氯霉素治疗，应注意定期检查 A、肝功能 B、肾功能 C、尿常规 D、血常规 E、肺功能 5、对革兰阴性杆菌治疗最好且最易透过血脑屏障的药物是 A、氯霉素 B、青霉素 C、四环素 D、红霉素 E、克林霉素 6、关于多西环素的叙述错误的是 A、是半合成的长效四环素类抗生素 B、与四环素的抗菌谱相似 C、可用于前列腺炎的治疗 D、抗菌活性比四环素强 E、口服吸收量少且不规则 7、关于四环素的不良反应，叙述错误的是 A、空腹口服引起胃肠道反应
B、不引起过敏反应 C、可导致婴幼儿牙釉齿发育不全，牙齿发黄 D、可引起二重感染 E、长期大量口服或静脉给予大剂量，可造成严重肝脏损害 8、氯霉素的抗菌作用机制是 A、抑制二氢叶酸合成酶，影响叶酸的合成 B、改变细菌胞浆膜通透性，使重要的营养物质外流 C、与细菌核糖体50S亚基结合，抑制肽酰基转移酶的活性，从而阻止肽链延伸，使蛋白质合成受阻 D、阻止氨基酰-tRNA与细菌核糖体30S亚基结合，影响蛋白质的合成 E、阻止细菌细胞壁黏肽的合成 9、对四环素体内过程描述不正确的是 A、在酸性环境下溶解度高，抗菌作用强 B、空腹服用吸收好 C、饭后服用可促进药物吸收 D、可进入胎儿血液循环 E、铁剂抑制四环素吸收 10、对于多西环素描述不正确的是 A、药物活性低于四环素 B、是四环素类药物的首选药 C、具有强效、长效、速效等特点 D、可用于肾脏疾病 E、常见不良反应为胃肠道刺激 11、可产生灰婴综合征的抗菌药物为 A、氯霉素 B、青霉素 C、四环素 D、庆大霉素 E、卡那霉素 12、孕妇与8岁以下的儿童应严禁使用 A、四环素 B、链霉素 C、青霉素 D、红霉素 E、庆大霉素 13、对四环素不敏感的病原体是 A、铜绿假单胞菌 B、肺炎杆菌 C、脑膜炎奈瑟菌 D、肺炎支原体 E、立克次体
第四十二章四环素类及氯霉素 一、选择题 A型题 1、可用于治疗阿米巴痢疾的抗生素是： A.青霉素 B.链霉素 C.头孢氨苄 D.土霉素 E.大观霉素 2、长效与高效的四环素类药物是： A.四环素 B.土霉素 C.多西环素 D.去甲金霉素 E.米诺环素 3、四环素不宜与抗酸药合用是因为： A.抗酸药破坏四环素，降低抗酸药的疗效 B.与抗酸药的金属离子络合，降低抗酸药的疗效 C.与抗酸药的金属离子络合，减少四环素的吸收 D.增加消化道反应 E.促进四环素的排泄 4、斑疹伤寒首选： A.链霉素 B.四环素 C.磺胺嘧啶 D.多粘菌素 E.阿齐霉素 5、伤寒或副伤寒的首选药： A.四环素 B.多西环素 C.氯霉素 D.氨苄西林 E.麦迪霉素 6、氯霉素在临床应用受限的主要原因是： A.抗菌活性弱 B.血药浓度低 C.细菌易耐药 D.易致过敏反应
E.严重损害造血系统 7、氯霉素的不良反应中，哪种属变态反应与剂量疗程无直接关系： A.胃肠道反应 B.灰婴综合征 C.二重感染 D.不可逆的再生障碍性贫血 E.可逆性粒细胞减少 缩短？ 8、同服苯巴比妥、苯妥英钠能使下列哪种药物血浓度降低，t 1/2 A.土霉素 B.四环素 C.米诺环素 D.氯霉素 E.多西环素 9、早产儿、新生儿应避免使用： A.红霉素 B.氯霉素 C.青霉素 D.吉他霉素 E.多西环素 10、对青霉素过敏的细菌性脑膜炎病人，可选用： A.氯霉素 B.卡那霉素 C.头孢氨苄 D.大观霉素 E.多粘菌素 11、关于米诺环素的叙述，下列哪项是错误的？ A.为长效、高效的四环素 B.抗菌谱与四环素相近 C.属天然四环素类 D.抗菌作用为四环素类中最强者 E.对四环素耐药的金葡菌、链球菌仍敏感 12、不宜用于绿脓杆菌感染的药物是： A.米诺环素 B.羧苄西林 C.阿米卡星 D.庆大霉素 E.多粘菌素 13、氯霉素抑制蛋白质合成的机制是： A.抑制70S初始复合物形成 B.与30S亚基结合,使mRNA密码错译
药理学—四环素类及氯霉素 考情分析 一、四环素类 天然： 四环素 土霉素（氧四环素） 金霉素（氯四环素） 地美环素（去甲金霉素） 半合成： 美他环素（甲烯土霉素） 多西环素（强力霉素） 米诺环素（二甲胺四环素） （一）四环素类的共同特点 【药动学特点】 1.口服部分吸收，影响因素多： ①如有Mg2＋、Ca2＋、Al3＋、Fe2＋等多价阳离子，能与四环素形成难溶性的络合物——使吸收减少。 ②饭后服药——血药浓度比空腹减少50%。 ③铁剂——使其吸收率下降40%～90%，故需同时服用两药时，应间隔3h。 ④碱性环境——影响吸收；而胃酸酸度高时——能促进吸收。 ⑤吸收量有限度——服药量超过0.5g以上，血药浓度不再随剂量增加而增高，多者随粪便排出。 2.组织分布广泛——骨、牙、肝中浓度高，存在肝肠循环； 3.肝脏代谢，肾脏排泄； 4.多西环素——吸收充分，不受胃内容物的影响，脑脊液中浓度高。 【抗菌机制】 1.30s亚基结合——抑制细菌蛋白质的合成。 2.还可抑制DNA的复制。 【抗菌作用】快速抑制细菌生长，高浓度杀菌。 广谱： 对G＋菌、G－菌； 立克次体、衣原体、支原体、螺旋体； 间接抑制阿米巴原虫（土霉素）。 －－四环素抗菌谱－－ 二菌四体一虫灵，基本无效伤绿结。 说明：二菌——指细菌和放线菌 四体——指立克次体、支原体、衣原体、螺旋体 一虫——指阿米巴原虫
【临床应用】 →立克次体感染 →衣原体感染 →支原体感染 →螺旋体感染 →细菌性感染 1.立克次体感染……包括斑疹伤寒和恙虫病等均可作为首选药物。 2.衣原体感染……四环素类治疗鹦鹉热衣原体引起的鹦鹉热，肺炎衣原体肺炎，沙眼衣原体引起的……等，口服或局部应用均有突出的疗效——多西环素为首选药物。 3.支原体感染……对肺炎支原体引起的非典型肺炎和溶脲脲原体引起的非特异性尿道炎具有良好的疗效。 4.螺旋体感染……回归热，多西环素为首选药物。 〖注意〗梅毒螺旋体首选——青霉素。 5.细菌性感染……疗效不如青霉素。 可作为治疗肉芽肿鞘杆菌引起的腹股沟肉芽肿、霍乱弧菌引起的霍乱、布鲁菌引起的布鲁菌病的首选药物。 【不良反应】——多而严重 1.胃肠道反应； 2.二重感染； 3.对牙齿和骨骼发育的影响； 4.肝肾损伤； 5.其他：光敏反应、前庭反应、假脑瘤。 【禁忌症】肾脏损伤病人，孕妇、哺乳期妇女及8岁以下儿童禁用。 ——二重感染—— 4原因：广谱抗生素长期应用 4后果：使人体内的正常菌群发生变化，敏感菌被抑制，耐药菌乘机繁殖，造成新的感染，又叫菌群交替症。 4多见于：年老、幼儿、体质衰弱、抵抗力低的患者。 合用肾上腺糖皮质激素、抗代谢药和抗肿瘤药时也可诱发。 4表现： ①真菌病：如白色念珠菌所致鹅口疮、肠炎； ②难辨梭菌引起的假膜性肠炎：可致死。 【例题】对四环素不敏感的病原体是
正确的抗感染思路5 第八节四环素类 天然四环素类包括金霉素、土霉素、四环素和去甲金霉素。半合成四环素包括多西环素（强力霉素）、米诺环素（二甲胺四环素）、甲烯土霉素等。半合成四环素因抗菌作用较强、耐药菌株较少、口服吸收较好、半减期长、用药次数少、不良反应轻，有取代天然四环素的趋势。 一．药理特点 1．为快速抑菌剂，抗菌谱广。不仅对大多数革兰阳性菌、阴性菌具一定抗菌作用，而且对厌氧菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、某些原虫也有良好作用。对革兰阳性菌的抗菌作用优于阴性菌。 2．抗菌作用以米诺环素为最强，多西环素其次，四环素、土霉素最差。 3．细菌耐药性明显，各品种呈不完全交叉耐药。 4．半合成四环素口服吸收好，受进食影响小。 5．能广泛分布于各组织与体液中，并储存在肝、脾、骨、牙齿中。在胆汁、前列腺中浓度较高，能透过胎盘，可透入脑脊液。 6．主要经肾脏排泄，清除半减期较长。肾功能不全者易在体内积聚，但多西环素仍可安全应用。 7．不良反应较多，除胃肠道反应、二重感染和过敏反应外，尚可引起肝损害、牙齿黄染，影响儿童骨骼生长。孕妇与8岁以下儿童不宜选用。 二．主要品种特点与比较 天然四环素类中临床上以四环素较为常用，可口服，也可静脉给药。金霉素目前只作外用。四环素抗菌谱广，但耐药现象严重，且各品种间交叉耐药。半合成四环素耐药菌株较天然四环素少，抗菌作用较后者强，其中，米诺环素最强，多西环素次之。米诺环素对葡萄球菌的抗菌作用也较强，为该类药物中最强者。半合成四环素口服吸收更好，在组织中的浓度也较高，其半减期长，用药次数少，不良反应也较轻。米诺环素可引起眩晕、耳鸣、共济失调等前庭功能紊乱，司机、高空作业者慎用。 表2－11－1 几种四环素类药物的比较 四环素多西环素米诺环素口服吸收率（％）60～80 93 100 消除半衰期（h）6～10 14～22 11～33 组织分布+ +++ +++ 抗菌作用++ ++～+++ +++ 不良反应多见相对较少相对较少 二．临床适应证 主要用于布鲁菌病、霍乱、回归热、兔热病、衣原体感染和立克次体病等特殊感染，且为这些感染的首选药。其次用于支原体肺炎、痤疮、酒糟鼻、兔热病、鼠咬热，或与其他药物联合用于炭疽、鼠疫。目前临床上也作为选用药用于性传播性疾病（非淋菌性尿道炎、梅毒、性病性淋巴肉芽肿等）和敏感菌所致的呼吸道、胆道、尿路感染及金葡菌所致的皮肤软组织感染、前列腺炎、产肠毒素大肠杆菌肠炎等。 三．注意事项 不良反应较多。①胃肠道反应，严重者可引起伪膜性肠炎。②肝毒性，大剂量给药、孕妇或伴肾功能不全者更易发生。③肾毒性，肾功能不全者应用天然四环素可加重氮质血症及尿毒症。④学龄前儿童用药可致牙齿黄染，孕妇用药可使胎儿牙齿黄染。⑤抑制胎儿与幼儿的骨骼生长。⑥过敏性皮炎、光敏性皮炎，且呈交叉过敏。⑦耐药菌或与真菌的二重感染。⑧血栓性静脉炎（静滴）、粒细胞减少、婴幼儿颅内压增高、维生素缺乏、中毒性精神病、赫氏样反应等。⑨对动物有致畸作用。