1 引言 (1)
2 材料与方法 (2)
2.1 实验材料 (2)
2.2 实验方法 (2)
2.2.1 海蓬子总RNA的提取 (2)
2.2.2 反转录合成海蓬子cDNA第一链 (3)
2.2.3 目的基因cmo的核心片段扩增 (4)
2.2.4切胶回收目的基因cmo (5)
2.2.5 PCR产物回收纯化后与pMD19-T vector的连接 (6)
2.2.6 C a Cl2法制备大肠杆菌感受态细胞 (7)
2.2.7菌落PCR鉴定 (7)
2.2.8海蓬子cmo基因的测序 (8)
2.2.9 RACE cDNA文库的构建 (8)
1 引言 (1)
2 材料与方法 (2)
2.1 实验材料 (2)
2.2 实验方法 (2)
2.2.1 海蓬子总RNA的提取 (2)
2.2.2 反转录合成海蓬子cDNA第一链 (3)
2.2.3 目的基因cmo的核心片段扩增 (4)
2.2.4切胶回收目的基因cmo (5)
2.2.5 PCR产物回收纯化后与pMD19-T vector的连接 (6)
2.2.6 C a Cl2法制备大肠杆菌感受态细胞 (7)
2.2.7菌落PCR鉴定 (7)
2.2.8海蓬子cmo基因的测序 (8)
2.2.9 RACE cDNA文库的构建 (8)
2.2.10 RACE法扩增cmo基因的3’末端序列 (9)
2014届宁波大学本科毕业论文——海蓬子胆碱单加氧酶（CMO）基因的克隆及生物信息学分析
2.2.11 RACE法扩增cmo基因的5’末端序列 (10)
2.2.12海蓬子cmo基因全长cDNA的获得 (10)
2.2.13海蓬子cmo基因的生物信息学分析 (10)
2.3结果和分析 (10)
2. 3.1海蓬子cmo基因核心片段克隆 (10)
2.3.2海蓬子cmo基因3’-RACE结果和5’-RACE结果 (12)
2.3.3.海蓬子cmo基因全长序列的获得 (13)
3 海蓬子cmo基因的生物信息学分析 (15)
3.1 海蓬子CMO蛋白同源性分析 (15)
3.2 海蓬子CMO蛋白系统进化树的建立 (18)
3.3 海蓬子CMO蛋白一级结构分析 (19)
3.4 海蓬子CMO蛋白二级结构分析 (19)
3.5 海蓬子CMO蛋白三级结构分析 (20)
4.结论 (21)
致谢 ........................................................................................................................................ 错误！未定义书签。参考文献 .. (22)
海蓬子胆碱单加氧酶（CMO）基因的克隆及生物信息学分析
摘要：甜菜碱是最好的渗透保护剂，在植物抗盐、耐旱方面有重大意义。甜菜碱由胆碱经两步氧化反应合成，其中由胆碱
单加氧酶(CMO) 催化第一步氧化反应。本研究采用RACE（Rapid Amplification of cDNA Ends, RACE）技术克隆得到海蓬
子cmo基因的全长cDNA序列，结果表明，海蓬子cmo基因的cDNA全长序列为1858 bp，开放阅读框ORF为1406 bp，5’非编码区为630 bp，3’非编码区为977 bp。编码一个由418个氨基酸组成的分子量大小为69264，等电点pI为5.88的蛋白质。二级结构分析结果表明，海蓬子CMO蛋白主要形成4种二级结构形式，分别是α-螺旋、无规则
卷曲、β-折叠和β-转角。蛋白质同源性比对结果表明，海蓬子CMO与辽宁碱蓬CMO的同源性最高，为86%；其次
是碱蓬、菠菜、麦冬、榆钱草的相似性依次为86%、82%、82%、80%。系统进化树分析表明，海蓬子cmo基因
与碱蓬、梭梭、白梭梭、麦冬、滨藜等亲缘关系最近。生物信息学分析表明，海蓬子胆碱单氧化酶的氨基酸序列具有较高
的同源性，均含有转运肽区、2Fe-S中心区和非血红素Fe离子结合区。CTHRASILACGSGKKSCFVCPYHGWV区域为Rieske
型[Fe-S]簇结构域，FCDNYVDSSYHVPY区域为非血红素Fe离子结合区，AASATTMLLKYP区域为转肽区。海蓬子CMO
蛋白的氨基酸序列与其他植物胆碱单加氧酶氨基酸序列中的Rieske型铁硫簇结合区和非血红素Fe离子结合区有高度保守性。关键词：海蓬子；胆碱单加氧酶基因（cmo）；基因克隆；生物信息学分析
Cloning and Bioinformatic Analysis of choline monooxygenase （CMO）
gene from Salicornia europaea
Wang Yuanyang, Biotechnology, 123050023, Gong Yifu
Abstract: Betaine is one of the best protective agent, has great significance in plant resistance to salt and drought tolerant,Betaine is synthesized by a two-step oxidation of choline, CMO is the first step in catalytic oxidation reaction catalyzed by the enzyme choline monooxygenase.The full-length cDNAs of the Salicornia europaea alpha inhibitor of cholinemonooxygenase （cmo）was obtained using RACE（Rapid Amplification of cDNA Ends）. The full-length cDNA of PaIκBα is1858bp containing a 5’untra nslated region (UTR) of 153 bp, 3’untranslated region (UTR) of 483 bp and open reading frame (ORF) of 1406 bp, encoding a polypeptide of 418 amino acids with an estimated molecular mass of 69.264KD and an estimated isoelectric point of 5.88.Protein secondary structure analysis indicates that the salicornia CMO mainly form four secondary structure form, Respectively alpha helix, extended
strand, random coil, beta turn. The deduced amimo acids sequence of cholinemonooxygenase （cmo）shared 86% homology with Suaeda Liaotungensis, and shared 86%, 82%, 82%, 80% homology with Suaeda Liaotungensis, Spinacia Oleracea, Ophiopogon Japonicas, Atriplex Prostrata respectively. Phylogenetic analysis revealed that the cmo of Salicornia europaea and Suaeda Liaotungensis, Haloxylon Ammodendron, Haloxylon Persicum, Ophiopogon Japonicus, Atriplex Hortensis were in the same phylogenetic. Bioinformatics Phylogenetic analysis showed the amino acid sequence of a single Salicornia choline oxidase with high homology. Containing transit peptide, Rieske type Fe-S cluster motif and non-heme Fe binding motif. The region of CTHRASILACGSGKKSCFVCPYHGWV is Rieske type Fe-S cluster motif. The region of FCDNYVDSSYHVPY is non-heme Fe binding motif. The region of AASA TTMLLKYP is transit peptide. Amino acid sequence of Salicornia europaea are highly conserved with other plant choline monooxygenase amino acid sequence Rieske-type iron-sulfur cluster-binding domain and the non-heme Fe binding motif.
Key Words:Salicornia europaea; choline monooxygenase; clone; Bioinformatic Analysis
1 引言
我国现人均占有耕地及淡水资源均低于世界平均水平，被列为严重缺水的国家。在耕地萎缩、淡水污染、海水入侵等问题日益严重的今天，开发利用我国广大盐碱地与滩涂这一宝贵的后备国土资源，发展海水灌溉农业已成当务之急。
甜菜碱是一类季铵化合物，随后发现在高等植物的28个科中都有甜菜碱的分布[1]，是高等植物中重要的代谢积累产物。甜菜碱合成酶基因是重要的抗逆基因之一[2]，在干旱、盐碱的逆境下，可以维持细胞的正常膨压。特别是藜科和禾本科植物，在受水/盐胁迫时，积累大量的甜菜碱[3]，甜菜碱的含量直接影响植物的耐盐性。甜菜碱合成的第一个步骤是通过铁氧还蛋白依赖性胆碱催化单加氧酶（CMO），催化转化胆碱到甜菜碱醛。海蓬子CMO是胆碱合成甜菜碱的第一个相关酶，等电点为5.1[4]。1989年，Brouquisse 等从菠菜(S. oleracea)叶绿体中测得此酶[5]；随后，Barnet等部分纯化了此酶[6]；1995年，Burnet等真正得从菠菜叶片中纯化了CMO。CMO的分子量是98KD，是同型的二聚体或三聚体。1997年Rathinasabapathi 等对同型亚基的研究[7]，说明了CMO是单基因编码。同一年，Rathinasabapathi采用了RT-PCR法分离出来了编码CMO的完整1622bp的cDNA全长从菠菜叶片中，在ploy(A)序列前58bp处有一个推定的聚腺苷酸化的信号序列(AAATAAT)。该信号肽的组成和大小是一个典型的叶绿体基质靶向的信号肽，利用光合作用产生的铁氧还蛋白作为电子受体[8]。
许多研究表明cmo基因可以提高植物的耐盐性，2002年，李秋莉等[9]将辽宁碱篷的CMO基因转化到烟草中，转基因植株甜菜碱含量有所提高，耐盐性达1.5%。郭龙彪[10]将AhCMO转化到水稻中，获得了耐盐、抗除草剂的植株，不仅为水稻耐盐耐寒提供了新种质，而且具有直接应用价值。沈国义等[11]人将菠菜中的cmo转入烟草中，转基因烟草能在1.17%NaCl盐浓度中生长，而没有cmo基因的烟草则不能生长。1998年，Nuceio ML等[12]将菠菜cmo基因转化到烟草中，得到的转基因植株的CMO酶的活性只有菠菜体内活性的3％，有效的提高了烟草的耐盐性。张守攻等[13]人将小叶杨胆碱单加氧酶(cmo)基因成功的克隆并转化到杂种落叶松，大大的增加了其抗旱性。田间跃胜等[14]人将枸杞中的cmo基因克隆到拟南芥植株中，增强了其耐盐性。将山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因经农杆菌介层转入草莓[15]、小麦[16]等植物，均能使转基因植物的抗盐、耐旱能力得到不同程度的提高。
海蓬子耐盐度高，可用海水直接灌溉，其抗盐能力超过海水盐度的20%～40%，耐盐极限达到NaCl 浓度的千分之五。cmo基因目前已从菠菜、水稻等植物中克隆了[17-18]，但海蓬子中cmo基因克隆还未见报
道。因此，本试验以海蓬子为研究材料，采用RACE技术从海蓬子中克隆cmo基因的cDNA全长序列，并进行了生物信息学分析，进而为阐明海蓬子耐盐分子机理及创造耐盐新种质奠定基础。
2 材料与方法
2.1 实验材料
采用北美海蓬子（来源于江苏盐城绿苑海蓬子开发有限公司），大肠杆菌DH-5α（E.coli DH-5α），pMD-19T，含有氨苄青霉素。
r-Taq酶等相关PCR扩增试剂和DH5α感受态细胞，DNA Marker，RNAiso Plus，PrimeScript?RT Master Mix，PrimerScript? One Step RT-PCR Kit等试剂盒由大连宝生物（TAKARA）公司购买，SMART TM RACE 试剂盒于美国Clontech公司购买；引物委托上海生工生物工程股份有限公司合成；各种抗生素均自上海奥宇生物科技有限公司购买；EZ-10 Spin Column DNA 胶回收试剂盒、UNIQ-10柱式质粒小量抽提试剂盒、其他化学试剂来自上海生工生物工程股份有限公司。
LB培养基配方：蛋白胨10 g，酵母粉5 g，NaCl 10 g，H2O 800 Ml，pH值调到7.2，加入H2O到1000 mL高压灭菌。固体LB中加入15 g琼脂粉，高压灭菌。盐生杜氏藻DNA提取试剂：Tris-HCl（pH 8.0）10 mM，EDTA（pH 8.0）100 mM，SDS：0.5%（w/v）
2.2 实验方法
2.2.1 海蓬子总RNA的提取
(1) 取新鲜海蓬子放入泥巴下培养，长出苗，挑取干净叶片，快速放入液氮研磨至粉末状，然后转入1.5 mL心管内，加入65℃预热的0.75mL取液，涡旋振荡混匀后65℃温浴20 min。
（2）将含有匀浆样品的TRIZOL在室温下孵育20min，使得TRIZOL试剂液充分充分裂解匀浆组织。
（3）加入200 μl氯仿试剂，盖紧EP管管盖，在振荡漩涡仪上充分振荡30s，混匀，冰上孵育20min后低温高速离心（4 ℃，12,000×g，15 min）。
（4）将离心后的上层澄清液小心吸出，转移到新的EP管，加入等体积的冰浴异丙醇，轻微
颠倒振荡混匀。
（5）将混合均匀的样品在-20 ℃冰箱孵育20 min以上，4 ℃，12,000×g离心10 min，可观察到RNA以片状沉淀附着于EP管底。
（6）倒掉上清液，保留RNA沉淀在管底，加入1 ml冰浴的75%的RNA专用乙醇，上下颠倒EP管，洗涤RNA沉淀。在漩涡震荡仪上轻微振荡样品，使得沉淀悬浮在乙醇中。于低温高速离心机中，4 ℃，12,000×g 离心5 min，倒掉上清液。用同样的方法再次清洗沉淀，离心。
（7）倒掉上清液，将EP管倒置在干净的纸巾上，静置5 min，适当晾干沉淀。
（8）用50 μL DEPC水溶解RNA，再加入0.5 μL RNA酶抑制剂。
琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量，以100 V的电压电泳，紫外检测能看到较分明的三条带，则RNA完整性良好，取2μL RNA样品加到2000μL RNAase-free 水中，用紫外分光光度计测定OD260值，以此计算RNA的浓度。
测定RNA的OD值，将提取好的RNA保存于-80 ℃冰箱。
2.2.2 反转录合成海蓬子cDNA第一链
将海蓬子RNA模版、Primer和AMV Reverse Transcriptase等按照试剂盒说明书混合均匀，进行香鱼cDNA第一链的合成。反应的步骤是：首先在室温下静置10 min，42 ℃反转录1 h，而后在冰上静置冷却2 min，置于-20 ℃冰箱保存备用。
反转录反应体系如下：
海蓬子RNA模版 1 μL
5×Reverse Transcriptase Buffer 4 μL
dNTPs 2 μL
Oligo(dT) Primer 0.5 μL
RNase Inhibitor 1 μL
AMV Reverse Transcriptase(5 U/μL) 0.5 μL
DEPC H2O 11 μL
Total 20 μL
2.2.3 目的基因cmo的核心片段扩增
根据NCBI数据库中其他物种的cmo基因序列的保守区域序列设计一对兼并引物。引物序列为：F: TGCCCTTACCA TGGA TGGGT
R: GTTGTCATCCAAGGGCCA TACC
RT-PCR反应体系如下：
PCR反应程序为：
94°C 预变性3min
94°C 30S
56°C 40s 34cycles
72°C 1 min
72°C 10 min
16°C hold
1%的琼脂糖凝胶电泳检测将以上所得的PCR产物，确定目的条带的大致位置。
2.2.4切胶回收目的基因cmo
（1）取eppendorf管，称重量并记录，将包含目的条带的琼脂糖块用小刀切下，放入1.5mL 的eppendorf管中，再次称重，得到琼脂糖质量（注意切胶时在保证含有目的条带的前提下尽可能切下较小的胶块）；
（2）按照每100mg琼脂糖胶块加入200 μL Diffusion buffer 溶液的比例，在eppendorf管中加入Diffusion buffer 溶液，振荡混匀。如果琼脂糖质量小于100 mg，用双蒸水补充至100 mg；
（3）将eppendorf管放置于55°C水浴锅，水浴10 min，每隔2 min颠倒混匀一次；
（4）10000 rpm 离心10 min，将上清液移至另一个干净的1.5 mL的eppendorf管中；
（5）按照每100 uL上清液的体积加入500 ul的Binding buffer IV和300 uL 100% 异丙醇的比例，在eppendorf管中加入Binding buffer IV和异丙醇，充分混合，55°C温育1 min；
（6）将溶化后的琼脂糖液转移入UNIQ-10吸附柱，静置2 min ，10000 rpm离心30 sec，倒掉收集管中的液体，再将吸附柱放回到同一收集管中；
（7）在吸附柱中加入500μLWash Solution液，静置1 min后，12000rpm离心30 sec，倒掉收集管中的液体；
（8）将吸附柱放入同一收集管中，重复步骤8，12000 rpm离心1 min，彻底去除Wash Solution；
（9）将UNIQ-10吸附柱放入一干净的eppendorf管中，在吸附膜中央的上空垂直滴加入30 μLElution Buffer(可预先60℃温育5min)，55°C水浴1 min后，12000 rpm离心1 min；
（10）用1%琼脂糖凝胶电泳检测回收的片段，将回收的DNA于-20°C保存；
2.2.5 PCR产物回收纯化后与pMD19-T vector的连接
PCR产物回收纯化后与pMD19-T的反应体系，如下：
Solution I 4.5μL
pMD 19-T 0.5μL
回收DNA 5μL
总体积10uL
将以上反应液混合好后置于4°C环境下进行过夜连接。
2.2.6 C a Cl2法制备大肠杆菌感受态细胞
(1)将E.coli DH5α接种到LB固体培养基上，置于37℃恒温箱中过夜培养12-16个小时。从平板上挑取活化后的E.coli DH5α单菌落，接种到5mL的LB液体培养基中，37℃摇床振荡过夜培养大约12h至对数生长期，移液器吸取1mL培养物接种到100mL的LB液体培养基中，37℃摇床振荡培养2-3小时至OD600=0.5左右；
(2)将LB培养液分装到50mL离心管中，于冰上静置10min;
(3)4℃下5000 rpm离心5 min，收集菌体;
(4)去上清，吸干管底残留的LB培养基，加入10mL预冷的0.1mol/L CaCl2溶液，用移液枪轻轻吹打重悬浮细胞，冰上静置15分钟，4℃，4000rpm，离心10min；
(5)重复步骤4；
(6)4℃下4000 rpm离心10 min，彻底去上清，用200 Μl CaCl2（0.1 M，预冷）重悬菌体，用移液枪轻轻混匀;
(7)置于冰浴2-7 h可用于转化。
2.2.7菌落PCR鉴定
PCR扩增过夜培养长出来的单菌落，进行电泳检测，筛选出阳性克隆。
PCR扩增反应体系如下：
PCR反应程序为：
95°C 3 min
94°C 1 min
55°C 1 min 34 cycles
72°C 90 sec
72°C 10min
2.2.8海蓬子cmo基因的测序
实验中的测序工作委托上海生物工程有限公司（中国）完成。
2.2.9 RACE cDNA文库的构建
选取海蓬子的RNA用于构建海蓬子RACE cDNA文库，该文库按照SMART TM RACE cDNA Amplification Kit (Clontech, USA)的说明书程序进行操作。将构建好的海蓬子3′-readyRACE cDNA 文库和5′-ready RACE cDNA 文库分别分成小份放到eppendorf管中，保存于-20 °C冰箱，以用于后续的试验。
构建cDNA文库的操作步骤如下：
(1)在200μL 的eppendorf管中分别加入下列反应物质：
3’-RACE-Ready cDNA 5’-RACE-Ready cDNA
1-3 μLRNA 1-3 μLRNA
1 μL3’-CDS primen A 1 μL5’-CDS primen A
1 μLSMART II A oligo
(2) 在eppendorf管加入ddH2O，调整每管的终体积为5 μL；
(3) 微离心反应液使其混合均匀；
(4) 70°C 水浴锅中温育2 min；
(5) 置于冰上静置2 min；
(6)离心机中微离心数秒；
(7)在200μL eppendorf管中分别加入下列物质：2 μL5×First-Strand Buffer，1 μL dNTP Mix (10 mM)，1 μLDTT，1 μLM-MLV反转录酶；
(8)轻微震荡使加入的反应物混合均匀；
(9)微离心数秒使反应混合液聚集于管底；
(10)在42°C 水浴锅中温育90min；
(11)在反应管中加入100 μL Tricine-EDTA Buffer，稀释第一链反应产物
(12)放置于–20°C冰箱中贮存，备用。
2.2.10 RACE法扩增cmo基因的3’末端序列
根据已获得的cmo基因的核心片段序列，在此序列基础上设计两个基因特异引物，分别为cmo3-1(ATGGATGGGTGTTTGGCTTAG)和cmo3-2(TGGAACTGAGTGGCTTGGTAG)，以构建好的3′-ready RACE cDNA 文库为模板，cmo3-1和Advantage 2 PCR Kit 中提供的引物UPM (Universal Primer A Mix：5'-CTAATACGACTCACTATAGGGCAAGCAGTGGTACAACGCAGA G-3' and 5'-AAGCAGTGGTATCAACGCAGAGT-3') 进行第一轮PCR，随后使用cmo3-2和试剂盒中提供的引物NUP (Nested Universal Primer A：5'-AAGCAGTGGTATCAACGCAGAGT-3')进行第二轮PCR，按照3’RACE 试剂盒Advantage 2 PCR Kit (Clontech, USA))说明书扩增cmo的cDNA 3’末端序列。第一轮PCR的程序是25个循环(变性94 ℃20 sec →退火68 ℃30 sec→延伸72 ℃ 1 min)，第二轮PCR的程序是32个循环(变性94 ℃20 sec →退火56 ℃30 sec→延伸72 ℃ 1 min)。
PCR产物经回收纯化后克隆至pMD19-T vector (TaKaRa，大连，中国) ，转化至大肠杆菌DH5α
感受态细胞，经PCR菌液鉴定阳性菌落送到上海生工生物工程公司进行测序。
2.2.11 RACE法扩增cmo基因的5’末端序列
根据已获得的cmo基因的核心片段序列，在此序列基础上设计两个基因特异引物，分别为cmo5-1(CATAGTATTTGTGGGCATAAGGAAAC)和cmo5-2 （GCATCAGTTGTTTGGGTGGCTT）。以构建好的5′-ready RACE cDNA 文库为模板，按照5’RACE 试剂盒(Invitrogen)的说明书扩增PaIκBα的cDNA 5’末端序列。PaIκBα5-1和Advantage 2 PCR试剂盒中提供的引物UPM 进行第一轮PCR扩增反应，随后使用cmo5-2和试剂盒中提供的引物NUP (Nested Universal Primer)进行第二轮PCR扩增反应。第一轮PCR扩增的程序有25个循环(94 ℃20 sec → 68 ℃30 sec→72 ℃1 min)，第二轮PCR扩增的程序有32个循环(94 ℃20 sec → 56 ℃30 sec→72 ℃ 1 min)。将第二轮获得的PCR产物切胶回收，连接到pMD19-T vector上，转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞，经PCR菌液鉴定后，对阳性菌落进行测序。
2.2.12海蓬子cmo基因全长cDNA的获得
使用vector suite NTI软件中的assemble程序对cmo基因核心序列、3′ RACE和5′ RACE的测序结果进行拼接之后，获得海蓬子cmo基因cDNA全长序列。
2.2.13海蓬子cmo基因的生物信息学分析
本文中均使用Vector NTI Suite 7.0软件和BLAST工具（https://www.doczj.com/doc/aa3760455.html,）进行序列分析，在NCBI网站的ORF Finder上完成ORF的查找和核苷酸的翻译，使用https://www.doczj.com/doc/aa3760455.html, 网站提供的相关生物信息学分析软件和WLViewLite 40软件进行蛋白质基本性质的分析以及蛋白质三维模型的同源建模。使用ClustalX软件对序列进行多重比对后，使用MEGA4软件中的邻位相连法（Neighbor-Joining）完成系统发生树的构建。
2.3结果和分析
2. 3.1海蓬子cmo基因核心片段克隆
图2.1海蓬子cmo 基因保守区域RT-PCR 电泳图
L1：DL2000 marker （从上到下的条带依次为：2000bp 、1000bp 、750bp 、500bp 、250bp 和100bp ）；
L2：海蓬子cmo 基因保守区域RT-PCR 结果（箭头所示）
Fig.2.1 RT-PCR electrophoresis of cmo of Salicornia europaeal Lane 1: DL2000 marker(2000bp, 1000bp, 750bp, 500bp, 250bp and 100bp from the top down) Lane 2: RT-PCR electrophoresis of
cmo of Salicornia europaeal regions (indicated in arrow)
通过RT-PCR 的方法，以 F(TGCCCTTACCATGGATGGGT)和R(GTTGTCATCCAAGGGCCATACC)为引物，从海蓬子中扩增出cmo 基因的一段序列(图2.1)，将扩增片段的阳性菌落送到上海生工生物工程公司，进行测序，片段大小为500bp 。测序结果登录NCBI 网站（https://www.doczj.com/doc/aa3760455.html, ），将海蓬子cmo 基因与其他物种的cmo 基因进行核苷酸序列比对（Nucleotide BLAST ），BLAST 软件分析结果表明，cmo 与碱蓬（Suaeda Liaotungensis ）、辽宁碱蓬（Suaeda Liaotungensis ）、菠菜（Spinacia Oleracea ）、麦冬（Ophiopogon Japonicas ）、榆钱草（Atriplex Prostrata ）的相似性依次为86%、86%、82%、82%、80%（表2.1）。这表明实验获得的cmo 基因正是海蓬子cmo 基因，cmo 基因在不同生物之间序列非常保守。根据所得序列设计cmo 基因的5’RACE 和3’RACE 的特异性引物。
表2.1 cmo 核心片段与其他物种cmo 序列同源性比较
Tab.2.1 The homologous comparison of cmo protein between S.europaeaL and other species
登录号
物种
相似性
GenBank accession number species similarity
U85780.1 菠菜(Spinacia Oleracea) 82%
AF354442.1 辽宁碱蓬(Suaeda Liaotungensis)86%
DQ645889.1 麦冬(Ophiopogon Japonicas) 82%
AY082068.1 榆钱草(Atriplex Prostrata)80%
AF354442.1 碱蓬(Suaeda Liaotungensis)85%
2.3.2海蓬子cmo基因3’-RACE结果和5’-RACE结果
3'-RACE和5'-RACE分别得到大小分别为950bp和600bp左右的产物（图2.2），将扩增片段的阳性菌液送到上海生工生物工程公司，进行测序，测序结果显示两个片段分别为977bp的3’末端和630 bp的5’末端。
4
5 6
1 2
3
图2.2 海蓬子cmo基因3’和5’-RACE结果电泳图
L1/L4：DL2000 marker (从上到下条带大小依次为：2000bp、1000bp、750bp、500bp、250bp和100bp)；L2/L3：分别是3’-RACE 第一轮和第二轮产物（箭头所示）；L5/L6：分别是5’-RACE第一轮和第二轮产物（箭头所示）。
Fig.2.2 Electrophresis results of choline monooxygenase from Salicornia europaea3’和5’-RACE
L1/L4: DL2000 marker(2000bp, 1000bp, 750bp, 500bp, 250bp and 100bp from the top down) L2/L3:First and second rounds of the 3’-RACE product respectively (indicated in arrow) L5/L6: First and second rounds of the 5’-RACE product respectively (indicated in arrow)
2.3.3.海蓬子cmo基因全长序列的获得
使用Vector NTI Suite 7.0软件对PaIκBα基因核心序列、3’末端和5’末端进行拼接，得到推测的长度为1845bp，3’非编码区(untranslated region, UTR ) 包括24个poly(A)在内的长度为632bp，开放阅读框(open reading frame, ORF)为1406 bp，编码含有418个氨基酸残基的蛋白，5’UTR为763 bp（图2.3）。
1 GGCACATACTCAAACAATACTAAGGAAGGCTCATTATAAATACTGAAAAAACAATCAATT
61 AAAGGAGTTATTAAATTAAACTCATAATAATAACAATAATCATCTAAAAAAAACTTTGTT
121 TGATTTTTTATTTTTTTTTCAATTATTTTAAGATGGCAGCAGCCGCAAGTGCTACAACAA
1 M A A A A S A T T M
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图2.3 cmo序列全长及其推导的氨基酸序列
起始密码子用粗体显示；*代表终止密码子；底下加单线部分显示保守的Rieske型[Fe-S]簇结构域；底下加双线部分显示：非血红素Fe离子结合区；底下加箭头的表示转肽区。
Fig.2.3 Nucleotide sequence and predicted amino acid sequence of the cmo
The initiating start codon was marked bold. The asterisk (*) indicated the stop codon. The conserved Rieske-type iron-sulfur cluster-binding regions are showed with the single line; The double-underlines show the non-heme Fe binding motif;The transit peptide showd with arrow point.
3 海蓬子cmo基因的生物信息学分析
3.1 海蓬子CMO蛋白同源性分析
利用vector NT I Suite 7.0对海蓬子CMO和其他7种植物的CMO蛋白进行多序列比对，结果显示不同植物的CMO氨基酸序列具有较高的同源性（图3.1）。不同植物CMO基因编码区编码的氨基酸序列中都含有系列保守域，分别分为转运肽区、2Fe-2S中心与非血红素Fe离子结合区。如CMO的N-末端含有有关该酶蛋白定位于叶绿体的转运肽（比如框1滨藜CMO的4-15位氨基酸残基），能够引导肽链进入叶绿体，推测其合成产物甜菜碱醛可能位于叶绿体基质，这也与甘氨酸甜菜碱的生物合成路径基本
吻合[20]。转运肽的下游是疏水性氨基酸残基群（比如框1滨藜CMO的20-40位氨基酸残基），其功能可能与CMO的亚细胞定位有关。在大多数植物CMO氨基酸序列的中段，有一个由22-24个氨基酸残基（CXHX15-17CXXH）组成的2Fe-2S中心（比如框2中梭梭CMO的133-158位氨基酸残基），其中，C残基负责与S原子结合，参与酶促反应过程中电子的传递。2Fe-2S中心的下游是非血红素Fe离子结合区（G/DX3-4DX3HX4-5H；比如框2中白梭梭CMO的187到200位氨基酸）该区域负责与铁氧还原蛋白结合，同样起到传递电子的作用[20]。
1 1
3
1
良好的开头是成功的一半。如果能写好引言部分，作者对于审稿人来说就有置信度（credibility）和好的第一印象；而如果引言部分没有写好，整篇文章都会被拖累。 写引言部分的核心目的和基本功能（底线）是向读者和审稿人说清楚“我为什么要做这个研究”，能够自圆其说。而为了达到这个目的，有一个“基本公式”： 首先说这个课题引起广泛兴趣，有重要的理论和应用价值； 其次说谁谁谁做了什么，他们发现了什么，但是什么什么还不清楚，效果还不理想。 再次说有鉴于存在的问题，我们在本文中用了什么方法做了什么，得到什么结果。 老练的作者写引言部分都是按照这个思路去写的，用三、四段话就能把引言部分给构建好，每一段话功能突出、点到为止。相反，不老练的作者写引言部分显得没有章法，沿着“意识流”，想到什么地方说到什么地方，每一段话没有功能也没有结构。为什么有的文章眉毛胡子一把抓？为什么有的文章读也读不懂？是因为根本就没有按照“公式”去写！ 也许有的人会说我误导研究生，但是事实上这种对科研写作有益的“八股文”被写进正宗教科书呢！2008年牛津大学出版社出版了一本Write Like a Chemist，里面说到表演喜剧、电视里面做卖车的广告，都是有一定套路的，不按照套路出牌就吸引不了观众，就没有人来看戏、买车。同理，书中介绍了写引言部分的“公式”： 1. Introduce the Research Area 1.1. Identify the research area 1.2. Establish the importance of the research area 1.3. Provide essential background information about the research area 2. Identify a Gap (or Gaps) 3. Fill the Gap 3.1. Introduce the current work 3.2. Preview key findings of the current work (optional) The first move, with three submoves, has the broad purpose of describing the general resarch area. Submove 1.1 identifies the research topic, and submove 1.2 stresses its importance. Together, these two submoves are frequently accomplished in the first few sentences of the paper. Note that only the general topic is mentioned at this point, not the specific work
环境监测（Environmental Monitoring） 教材：奚旦立等著《环境监测》，高等教育出版社 黄秀莲等编《环境监测与分析》，高等教育出版社。 学时安排：讲课54学时；实验48学时。 引言 随着经济的发展，生产力和科学技术水平的提高，人们改造自然的能力在逐渐增强，同时也意味着人们对自然的破坏能力也极大地增加了。从而出现了一系列的环境问题： 1.臭氧空洞问题 当人们向大气中排放的氟氯烃的等一系列人工合成的化学物质的量超过了大气的自净能力时，大气上空氯代烃等物质的增加，同臭氧发生化学反应，消除了臭氧，使大气层上方臭氧层的臭氧浓度降低，臭氧层变薄或出现了空洞，导致太阳辐射中的紫外线被吸收的量大大减少，到达地面的紫外线强度增加，结果会引起人类皮肤癌的发病率上升，也会引起农作物的减产或对生态环境造成一定的不良影响等。 2.大气污染问题 随着工业废气和汽车废气排放量的增加目前我国大多数城市面临空气污染问题。 3.环境污染事故 由于油轮、化学药品运输轮船的海难事故，大量的原油、或有毒化学药品被排放到大海，引起海洋生物和海水养殖生物的大量死亡。 4.赤潮 目前在我国海洋赤潮和淡水湖库水花的出现越来越频繁，这主要是因为工业和生活污水中营养盐向自然水体的过量排放导致水体富营养化所致。 综上所述：目前环境问题已经成为当前人类所面临的严重的问题之一。世界各国都在积极进行环境污染物的防治工作，进行有效的环境管理。要做到这一点，人们首先要了解目前我们所处的环境的质量状况。 如：环境中目前有那些污染物？它们的含量或强度是多少？对人类和生态环境有没有毒害作用？这些污染物的来源是那里？怎样控制这些污染源对污染物的排放？等等。 要解决这些问题首先要进行环境分析或环境监测。 环境监测起源于环境分析 环境分析是环境分析化学的简称，其主要任务是用化学分析方法和仪器分析方法对自然的水体、空气、土壤、生物等环境要素中的化学污染物作定性检测（detection）和定量测定（determination）。 环境分析是环境化学的一个分支，环境化学中的很多研究性专题（如酸雨、大气光化学烟雾等）都需要环境分析技术提供准确的分析数据。成为人们鉴别环境是否污染，并判断污染程度的一个重要手段。 但是随着社会的发展，人类面临的环境污染问题日益复杂，对环境分析提出了更高的要求。 其一是：污染物除了化学因子之外还有各种物理参数（如：噪声、震动、电磁波、
第三章天气预报发展历程 北京大学钱维宏 引言 天气预报作为一种信息与人们的生产和生活息息相关。天气预报,从定性描述到逐步定量预测, 经历了几千年的发展历史。发展的过程也是对自然认识得到提升和预测方法不断完善与建立的过程。第三章从天气预报要回答的基本问题出发，依次综述了古代天气预报、早期天气预报、近代天气预报和现代天气预报的发展历程，最后提出了未来天气预报中思路更新和方法改进的可能。 3.1 天气预报 天气预报要回答两个基本的问题，即什么是天气和天气要预报什么？什么是天气，事关天气的定义。天气要预报什么，事关天气预报的内容。 3.1.1 天气的定义 天气是多气象要素（温度、气压、湿度、风等）随时间的连续变化及其产生的各种现象（如云、雨雪、雷暴、雾霾、沙尘暴等）。对这些气象要素的变化和出现的现象，人们都是可以感知的，如人们可以感知气温有24小时的日变化（午后热，清晨凉）和不同日之间的变化（寒潮降温和高温热浪）。天气和气象要素变化是与中尺度—天气尺度（200～2000km）系统的生消和移动相联系的。因此，天气系统的移动速度和生命期决定了局地天气变化的时间尺度，或天气过程。图1是气旋天气系统的移动与消亡（锢囚）过程[1]，云雨区和冷暖风向变化是随天气系统的移动而变化的。
图1 气旋天气系统的移动与消亡（锢囚）过程。上图为地面图，阴影部分为云雨区，箭头为地面风向，红色箭头为暖风，蓝色为冷风，实线为等压线，带三角和半圆的线分别为冷暖锋。下图为沿A-B的垂直剖面。 天气的一些要素，特别是气温、降水、能见度和风，在量值变率上不超过一定的限度，对人们的生产和生活不构成威胁，这样的天气属于正常的范围，即正常的天气。它们的变化量值超过了一定的限度（阈值）会给人们的生产和生活造成危害，对应的异常天气称为极端天气。不同的极端天气事件要比较它们的持续时间、强度差异和影响的区域范围。持续时间越长、影响范围越大，和越强的极端天气事件形成的危害会越大。3.1.2 天气预报的内容 天气预报的内容基本上就是以上的那些气象要素。有这样的一条天气预报：今天上午有雾，下午多云转阴，夜里阴有中到大雨，明天雨止转多云，偏南风2~3级，夜里转西北风4~5级，今天最高温度25度，明晨最低温度12度，后天晴到少云。这是一条3天的天气预报。第1天的天气现象内容最丰富，按时间顺序从雾（能见度）到多云、阴天和降水。第2天的内容只是雨止转多云。第3天的内容更简单，晴到少云。像这样1~3天的逐日天气预报称为短期天气预报。第1天“上午有雾，下午多云转阴”，这种未来几个小时的预报称为短时天气预报。 这样的一条天气预报中，天气现象、风和气温随时间的变化是遵循确定的变化顺序的，反映的是一个天气尺度气旋系统经过当地的移动过程。在地面气旋的暖湿空气区中(图1中红箭头风的区域)，出现了偏南风暖平流下的雾。日近正午，太阳辐射增强，雾消，气温升高。下午气旋冷锋来临，云量增多。夜间，冷锋过境形成较大的降水，风向也随之转变为西北，风力增大。后半夜，冷空气下来后，风吹云散，地面长波辐射增加，第2天早晨气温较低，白天为多云天气。到了第3天，气旋系统远去，当地受高压系统控制，天气晴好（晴到少云）。当地从受气旋影响出现降水，到转受高压系统影响天气晴好，是为一个天气过程。下一个天气过程是否重复这一个天气过程，就看未来新的气旋和高压系统的强度和移动速度了，一般不会完全重复。天气预报员的任务就是在预报天气系统生消和移动的基础上，推断出各地可能出现的各种天气现象。如推断未来第4天后至第9天，当地是否再次受到1次或者2次类似的天气过程影响。因此，未来4~9天的逐日天气预报称为中期天气预报。近年来，人们还想知道10天后的逐日天气预报，
论文第一部分一般称为“引言（Introduction)”，不能叫“前言”，“前言”是用在书里的。有些学生给这部分标题写得五花八门，比如“课题背景”、“问题的提出”，都是不规范的。写论文，标题都是简略的，虽然八股，但格式创新没有必要，创新还是要在内容上。 首先可以写课题的背景、理论意义、应用前景，但不宜过多，有一小段就可以了。 重点部分是对前人工作的介绍和评述，也就是对这一课题前人已经做了哪些重要的创新工作，是一个简略的研究史，比如何时由何人发起，国内外哪些学者分别作了哪些创新贡献。要对每一作者每一篇参考文献的科学或技术贡献进行评述和肯定。这里说主要的贡献，是指一些重要的学者也许发了很多文章、专利，但其主要贡献应该有几篇代表性的文献，而不是所有文献。有些学者论文不多，是否引用主要看其文献的创新性，如果没有创新性，就不必引用。如果创新明显，即使一篇文章也应该引用。在所有的参考文献中，应该突出近年来的文献，尤其近三年的参考文献，最好占一多半。如果一个课题近几年文献很少，可能是这个课题研究必要性不大，同行没兴趣，也有可能太难了，没有进展，或者你不掌握全面的文献。 在以上评述中，重点是向读者介绍前人或他人的学术或技术创新贡献，由此明确了哪些工作解决了，哪些工作还没解决，最后一段就是介绍本文工作的主要目的、主要内容和方法。也同时使人明确了本文工作的必要性、创新性。 这部分也是学生容易犯学术错误的部分。有些人写引言时，喜欢对别人的工作过进行不合理的否定，专讲人家的工作不足，这是不合适的，因为你的工作是基于别人的工作基础之上，别人的工作有不足是正常，否则你就没必要做这个工作了。还有人喜欢将别人的语言、段落、图表进行原封不动的引用，这是不合适的。阅读别人的文献，应该注意记下别人的工作要点，对他人工作进行总结、归纳、整理，形成自己的观点，用自己的语言重新表述。简单引用往往会形成抄袭或不正确引用的问题。 有些人写引言时，只写了某些工作发展多快、应用多么广泛、有什么问题，一句话内引用了多篇文献，这一般是不提倡的，因为读者根本弄不清楚其中每篇文章都写了什么，每个作者都有什么创新或贡献。另外，参考文献一定是作者读过的，不可以引用文献中的参考文献，因为你并不清楚那篇文献是怎样写的，别人错了你也就错了。 引言的长短也是要合适的，对于6000字以上常见的学术论文，引言在一页多一点是合适的，再多一般没有必要。如果是短文(letter，4页以内的)，引言就要相应缩短，但一般也要半页到一页。 总之，引言部分是很重要的，写不好会直接影响文章的录用。写好了，表明作者科研素质成熟，对同行工作了解全面，也使读者明确你的工作创新性，更容易理解论文内容。尤其国际期刊论文，审稿时如发现引言写的不合适，或被认为作者不了解国际情况，或作者科研素质太差，要你学会写引言后再投稿。
浅谈现代天气预报的主要方法 摘要：随着科技的发展，天气预测的技术也得到了快速的发展，尤其是基于现代通信设施与数学理论的方法使得预报的准确程度大为提高。故文章对现代天气预报的主要方法进行了介绍，并对各种方法的优缺点进行了详细的分析。 关键词： 1、引言 自从1951年英国首次运用天气图制作天气预报以来，至今只有130多年的历史。由于近代大型计算机的出现，计算技术的提高，以及气象学理论的进步，天气预报方法已获得很大发展。除了天气图预报方法日趋充实完善外，又开展了数值天气预报、数理统计预报、气象预专家系统、临近预报和单站预报等方法。综合运用这些方法，是现代气象部门预测天气最基本最有效的方法与手段。 2、天气图预报方法 2.1 预报指标法 在长期的预报实践中发现，引起某地天气变化，常常和其前期天气形势、天气过程以及某些气象要素的物理量值有关，这些物理量值的大小和出现时间就成为某地出现某些天气的“指标”。由于某种天气现象的发生往往是由多种物理因素作用的结果，因而可以将这些物理因素归纳在一起组成综合性的预报指标，即“形势加指标”的预报方法，这样往往可以提高预报正确率。但是无论怎样，仍然不能客观、定量对天气作出准确预报。 2.2 相似形势法 一般而言，不同时间的天气图上，其天气形势和天气过程是没有完全相同的。但在大量的历史天气图中，总可以归纳出若干具有代表性的天气形势和天气过程。在预报天气时，如果当时的天气形势和过程与某一模式的前期情况相似，我们就可以参考该模式的后期形势进行预报。这种方法在60年代曾广泛推广使用，其缺点和预报指标法一样，对天气预报不客观、不定量。实际预报中不同的预报员会有不同的看法，预报效果也不够理想。 2.3 落区预报法 在制作天气预报时，把表示某一天气现象发生时的各种特征量(线)，描绘在
教案
讲稿 第一章引言 [新课导入]： 导入方式：通过复习计算机语言基础知识，导入vb语言的功能及学习方法 导入目的：增强学生的学习积极性 导入时长：大约5分钟 [新课讲授]： 重点： 1）了解程序与程序设计语言 2）了解VB的集成开发环境 3）掌握简单应用程序的建立过程 难点：1）简单应用程序的建立过程 2）窗体简单应用程序的建立过程 方法：运用多媒体辅助教学，采用案例教学和任务驱动等教学法 1.1程序与程序设计语言 计算机程序设计语言,通常简称为编程语言,是一组用来定义计算机程序的语法规则。 计算机的工作原理——“存储程序”（存储程序和程序控制） 程序设计语言大致有三类：机器语言，汇编语言，高级语言 1. 机器语言 2. 汇编语言 3. 高级语言 1.2 Visual Basic 简介 Visual Basic是从BASIC语言发展而来的，是开发Windows环境下图形用户界面软件的可视化工具。Visual意指“可视的”，在Visual Basic中引入了面向对象的概念，把各种图形用户界面元素抽象为不同的控件，如各种各
样的按钮、文本框和图片框等。 1.3 Visual Basic的集成开发环境 VB的集成开发环境除了Microsoft应用软件常规的标题栏、菜单栏、工具栏外，还包括VB的几个独立的窗口，如图1-2所示。VB应用程序的开发过程几乎都可以在集成环境中完成。 图1-1 VB应用程序集成开发环境 1.4 建立简单的应用程序 VB可视化编程不需要编写大量的代码去描述界面元素的外观和位置，而是采用面向对象、事件驱动的方法。VB的对象已被抽象为窗体和控件，因而大大简化了程序设计。用VB开发应用程序，一般包括3个主要步骤：建立用户界面、设置窗体和控件的属性、编写代码。 （1）建立用户界面。用户界面由窗体和控件组成，所有控件都放在窗体上，程序中的所有信息都要通过窗体显示出来，它是应用程序的最终用户界面。在应用程序中要用到哪些控件，就在窗体上建立相应的控件。
摘要模板：红字标注为文章各部分内容的连接词。 近年来，管理舞弊现象无论在规模上还是在复杂程度上都是越发猖獗了，管理舞弊已成为危害世界经济发展的公害,严厉打击和治理管理舞弊行为已刻不容缓。（这句话交待了写作的背景）文章将管理舞弊及其审计作为研究的重点，以管理舞弊的特点为切入点，分别对管理舞弊的动因、行为、手段及危害进行了分析，阐明了治理管理舞弊的迫切性和必要性。其次分析了面对管理舞弊注册会计师应承担的审计责任，即作为提供审计服务的注册会计师，有必要揭露管理舞弊，承担相应的审计责任。最后，针对当前注册会计师舞弊审计面临的困境，提出防范管理舞弊和提升审计质量的策略，以达到文章研究的目的。 引言部分（论文的开头部分）的模板 近年来，国内外证券市场发生一系列的重大管理舞弊案引起了各国政府部门和社会公众的极度震惊和强烈不满，管理层舞弊是对社会危害最大、最难防范的舞弊行为（研究问题的现状）。管理层舞弊的发生不仅严重损害资本市场的健康发展,使广大投资者蒙受了巨额经济损失,而且使审计质量遭到空前质疑，严重降低了注册会计师的公信力（研究问题现状导致的后果或产生的影响）。目前，针对管理层舞弊的审计,我国现阶段普遍采用现代风险导向审计模式，但该模式由于不适合我国的基本国情，在我国的应用中出现各种“水土不服”的症状，逐渐 变成该模式的缺陷，严重制约了其在舞弊审计中优势的发挥（针 目前采取的解决办法并指出解决办法的不足之处）。（这部分清晰地交待了写作的背景）因此，加强研究管理舞弊的特点、常用手段以及现行审计模式的缺陷，以重新构建一种适合我国国情并能有效发现管理舞弊的审计模式就具有非常重要的理论价值与现实意义。（一句话引入正文） 结语段模板： 综上所述，治理系统基础审计作为社会审计适应我国现实环境变化的执业模式，既体现了我国新审计准则的基本思想，又能更好的与我国国情相吻合。（对你构建的新体系或者你的新主张进行概括性地评价）因此，这种模式可克服现代风险导向审计的各种缺陷，是一种在更加审慎与宽广的审计理念指导下的创新审计执业模式，若能在舞弊审计中充分运用，必能帮助注册会计师更有效地发现管理舞弊，以遏制管理舞弊的发生。（形成结论） 另一篇论文的摘要、引言与结语段，请注意这三个部分的关系。
本科学术论文引言部分写法 引言是论文的开场白，目的是向读者说明本研究的来龙去脉，吸引读者对本篇论文产 生兴趣，对正文起到提纲掣领和引导阅读兴趣的作用。这是小篇为大家整理的，仅供参考! 引言前言、导言、绪言、序言是正文的引子，相当于演说中的开场白。国内刊物引言 部分不需另立标题。引言应当对正文起到提纲挈领和引导阅读兴趣的作用。 在写引言之前首先应明确几个基本问题：你想通过本文说明什么问题?它是否值得说明?本文将在什么杂志发表或本文的读者是什么人?在写引言乃至整篇论文时都应注意这 几个问题。引言在内容上应包括：为什么要进行这项研究?立题的理论或实践依据是什 么 ?拟创新点何在?理论与或实践意义是什么?告诉读者你为什么要进行这项研究是引言的主要内容和目的，这其中也包括说明这项研究的理论和或实践意义。 语句要简洁、开门见山，如“重型继发性脑室出血临床表现严重，预后差，病死率 高。本文着重探讨用双侧侧脑室穿剌交替引流尿激酶溶解血凝块冲洗结合腰穿脑脊液置 换的方法治疗重型继发性脑室出血”。有时我们研究的项目是别人从未开展过的，这时 创新性是显而易见的，如“左旋咪唑所至脑病患者的临床与CT表现国内陆续有报道,但 未见磁共振成像的研究”。大部分情况下，我们所研究的项目是前人 开展过的，这时说明你的研究与别人的研究的本质区别和创新点是至关重要的，如“已有数项研究探讨了阿斯匹林在缺血性脑卒中的应用，但这些研究均是小规模、非双 盲对照的。本研究则采用双盲对照的方法，样本大、观察时间长”。在引言中对与本文 相关的研究作一简要的回顾是十分必要的。在研究开始以前就应该对与本研究相关的内 容作一系统的回顾，在引言中可以将回顾的结果作简要的概括。 引言的写作在包括上述内容的同时要注意以下事项：①内容切忌空泛，篇幅不宜过长。回顾历史择其要点,背景动态只要概括几句即可,引用参考文献不宜过多。根据以往 的经验，一篇3000～5000字的论文引言字数在150～250字较为恰当。②不必强调过去 的工作成就。回顾作者以往的工作只是为了交待此次写作的基础和动机，而不是写总结。评价论文的价值要恰如其分，实事求是，慎用“首创”、“首次 发现”、“达到国际一流水平”、“填补了国内空白”等提法。因为首创必须有确 切的资料。对此，可以用相对较委婉的说法表达，如“就所查文献，未见报道”等。③ 不要重复教科书或众所周知的内容。如在讨论维生素D是否能预防骨质疏松的文章中， 没有必要再说明什么是维生素D，什么是骨质疏松。④引言只起引导作用，可以说明研究的设计，但不要涉及本研究的数据、结果和结论，少与提要和正文 重复。结果是通过实验或临床观察所得，而结论是在结果的基础上逻辑推理提升的 见解。在引言中即对结论加以肯定或否定是不合逻辑的。⑤引言一般不另列序号及标题。 摘要应用针刀医学对颈椎病引发的高血压及并发症眩晕、耳鸣、难听、阵发性晕厥、关顶沉重、视物模糊理论，施以朱汉章针刀闭合性手术疗法、手法整复、配合药物：复方 丹参、红花、三磷腺苷、康定可通病变部位注射治疗效果的临床观察。全部患者轻体症、
2019年第3 期 天气预报业务的现状与发展 程文博1张保龙2刘冰玉3隋沆锐4 1、内蒙古自治区乌拉特后旗气象局 2、内蒙古自治区巴彦淖尔市气象局 3、河北省秦皇岛市气象局 4、内蒙古自治区呼伦贝尔市气象局 1引言 我国已经明确提出要实现现代气象 预报业务的创新，并最终实现智能化、精准化和规范化；构建完善的气象预报业务平台；构建综合性比较强的人才队伍；完善管理、技术以及业务体系，确保我国能够建立起气象预报业务的新局面。 2天气预报业务的现状分析2.1未深入基层，管理体系比较片面改革开放以来，在创新型经济建设的推动下，我国开始不断地健全和创新相关的工作机制。为了提升气象部门的工作效率，制定了一系列的改革制度，但是因为各种因素的限制，未能深入基层，所以政策就很难涉及具体的问题，天气预报工作无法满足现代化社会发展的需要。 2.2未形成健全的人才培养制度气象部门在招聘员工之后，未组织后期培训，随着社会的飞速发展，知识内容在不断丰富，作为气象部门工作人员，原本的知识储备是远远不够的，只有不断学习，才能更好地胜任自己的本职工作。对在职工作人员，需要建立起惩处机制，由于预报人员的工资待遇比较低，如果不采取有效的措施，他们的工作积极性会受到影响，并最终影响工作效率。 针对新入职的员工，没有考核机制，也没有对新进员工的技能进行过考核评价，很多进到气象部门的工作人员能力不足，对后期工作造成了极为不利的影响。 2.3未严格按照上级要求开展工作上级会统一制定工作计划，安排工作内容，但是下级却没有将其落实，也没有联系当地的实际情况加以调整，仍然沿用传统的工作模式响应上级的号召，造成了预报工作没能满足时代发展的需求。 2.4工作人员本身存在的问题分析一方面，气象局对天气预报专业的体系了解不完善，所以进入气象部门的工作 人员虽然有着丰富的理论知识，但实践经验有所欠缺，他们的实践能力以及理论知识的综合能力较差，还不能了解和掌握天气影响系统的物理结构等，造成了天气预报平台预报分析的准确性得不到保障；另一方面，气象工作人员的工资待遇等透明化，也没有奖励，所以很大一部分工作人员安于现状，对工作缺乏热情，大多敷衍了事，工作效率大打折扣。 3有效提升天气预报业务质量的途 径 3.1优化资源配置 政府需要加强和基层之间的联系，优化资源配置，不断完善天气预报的管理系统，确保不同省份、不同地区的资源实现 共享，保证预报工作的准确性。要深入到基层，密切关系，不断创新，建立起健全完善的天气预报管理制度。 作为教育部门，在人员培养的过程中，需要对教学内容和教学计划进行调整，提升技能实践培训在教学过程中的比值，要积极的引导专业人员不断地深入学习，更好地满足时代发展的需求。 3.2建立人才培养机制 要通过人力资源管理外包的方式对工作人员进行考核，尤其是业务人员的知识能力要进一步提升，构建完善的人才队伍。气象局要借助这种途径打造一支优秀的人才队伍，一些烦琐的人事工作可以直接打包给人力资源公司，这样人事管理工作就会大大简化，人事能力的考核、绩效等部分，外包部门都能有详细的结果分析。外包企业主要对这些琐事负责，尤其是对新进员工、中期的培训等都会严格把关，气象部门的人员素质就会明显提升，气象部门的工作内容也会简化，就可以把更多的精力投入气象预测过程中，气象预测结果的准确性得到根本保障。 3.3建立完善的软件系统平台 只有建立健全完善的软件系统平台，预报结果的准确性才能得到提升。 尤其是要完善短时和临近天气的预报业务，加强天气气候模式预报业务系统的分辨率，打 造智能化创新型的业务平台。 之前的分散化的系统模式得以重新整合，形成适应发 展需要的新型信息预报系统，提升预报工作的指导效果。 3.4提高工作人员的热情 作为气象部门的工作人员，要积极响应气象局的各类，全身心地投入到工作中，提升工作能力，提高工作素养。既然选择了这份工作，就要饱含热忱，以积极的心态应对工作中的种种。要有良好的职业素养和责任心，对待预报工作中的各种问题，不能逃避，要积极应对，要竭尽全力，做好自己的本职工作。 此外，要不断学习，丰富自己的知识储备，只有这样才不会被社会淘汰，要密切和同行之间的交流，互相补缺补差，提高工作效率，以便更好地开展天气预报工作。 4结束语 综上所述，为了能够全方位提升天气预报的效率，需要相关部门密切联系，根据当地的实际情况，采取一系列的改革措施，提高工作人员的主动性和积极性，确保天气预报工作能够顺利开展，保证预报工作能够满足社会发展的需要，更好地为人们的工作和生活服务，带来更多的收益。 参考文献： [1]伍荣生,谈哲敏,王元.我国业务天气预报发展的若干问题思考[J].气象科学,2007(01):112~118. [2]端义宏,金荣花.我国现代天气业务现状及发展趋势[J].气象科技进展,2012,2 (05):6~11. HEBEINONGJI 河北 农 机 普法·交流 83
第一篇总论 人体寄生虫学（human parasitology）也称医学寄生虫学（medical parasitology），是一门研究与医学有关的寄生虫及其与宿主关系的科学。主要研究寄生虫的形态结构、生态规律，着重研究寄生虫与人体及外界因素的相互关系，并从病原学和病原种群动力学角度，揭示寄生虫病发病机制及流行规律，以达到控制、消灭与预防寄生虫病目的。作为病原生物学重要组成部分，人体寄生虫学是预防医学及临床医学的一门基础课程。 第一章引言 第一节寄生虫的危害性 一、寄生虫病对人类健康的影响 寄生虫对人类的危害包括作为病原引起疾病、作为媒介引起疾病传播以及对经济的损失。联合国开发计划署／世界银行／世界卫生组织联合倡议的热带病特别规划（UNDP/World Bank/WHO Special Programme for Research and Training in Tropical Diseases,TDR）要求防治的６类主要热带病中，除麻风病外，其余５类都是寄生虫病。它们是疟疾（malaria）、血吸虫病（schistosomiasis）、丝虫病（filariasis）、利什曼病（leishmaniasis）和锥虫病（trypanosomiasis）。根据WHO 1975-1995年估计，全世界现感染疟疾
人口为４亿至４.9亿，每年死亡人数为220至250万；血吸虫病流行于７６个国家，受感染者约1.5亿，其中埃及血吸虫（Schistosoma haematobium）感染者1亿，曼氏血吸虫（S. Mansoni）感染者6000万，日本血吸虫（S. Japonicum）感染者150万，每年死于血吸虫病者为50至100万；丝虫病流行于80多个国家，感染者约1.45亿，其中淋巴丝虫感染者为1.28亿；盘尾丝虫感染者1700万。利什曼病主要在热带、亚热带地区，呈世界性分布，现受感染者120万。锥虫病，其中非洲锥虫病，每年新增病例10万，每年死于该病人数为5千，美洲锥虫病（恰加斯病，Chagas’disease）患者为240万，每年死亡人数为6万；肠道寄生虫病也严重地影响人类健康，阿米巴（amebae）感染者约占世界人口1%，每年死亡人数为４万至11万；贾第鞭毛虫（Giardia lamblia）感染者2亿；钩虫（hookworm）感染者13亿；蛔虫（Ascaris lumbricoides）感染者13亿。每年死于蛔虫引起肠梗阻者1550人；鞭虫感染者9亿；绦虫病和猪囊虫病（cestodiasis and cysticercosis cellulosae）患者为6500万；粪类圆线虫病（stronglyoidiasis）患者为3500万；华支睾吸虫病及后睾吸虫病(clonorchiasis)患者为1350万；姜片虫病（fasciolopsiasis）患者为1000万；毛圆线虫病（trichostrongyliasis）患者为550万；并殖吸虫病（paragonimiasis）患者为210万。虽然寄生虫感染率或受感染人数可以表示人群中被寄生虫累及的数量，但这些表示法未能准确反映出与健康损害关系。近几年WHO发表的总结报告中已不再使用寄生虫感染率或受感染者数字，而使用“能力丧失调整生存年”（disability-adjusted life years,DALYs）来表示疾病负担（disease burden），目的在于能更准确反映寄生虫对健康损害程度，以利于采取有效措施减少疾病负担。DALYs越
最佳答案 引言一般和摘要差不多，但是重点在写作的意图和缘由，有引出正文的功效。结构一般如下： 1、写作的意图、缘由 2、论文大致研究内容 3、主要的方法、措施 4、简单的研究结论 假如引言在论文内部的话，可以只写意图和缘由，另外再写一下目前该研究领域现状，为何再次研究等等，一段文字就够了，主要就是引出下面的内容，有点像一本书的“序”。 引言的写法 引言的主要任务是向读者勾勒出全文的基本内容和轮廓。它可以包括以下五项内容中的全部或其中几项： 介绍某研究领域的背景、意义、发展状况、目前的水平等; 对相关领域的文献进行回顾和综述，包括前人的研究成果，已经解决的问题，并适当加以评价或比较； 指出前人尚未解决的问题，留下的技术空白，也可以提出新问题、解决这些新问题的新方法、新思路，从而引出自己研究课题的动机与意义； 说明自己研究课题的目的； 概括论文的主要内容，或勾勒其大体轮廓。 如何合理安排以上这些内容，将它们有条有理地给读者描绘清楚，并非容易之事。经验告诉我们，引言其实是全文最难写的—部分。这是因为作者对有关学科领域的熟悉程度，作者的知识是渊博、还是贫乏，研究的意义何在、价值如何等问题，都在引言的字里行间得以充分体现。 我们可以将引言的内容分为三到四个层次来安排。第一层由研究背景、意义、发展状况等内容组成，其中还包括某一研究领域的文献综述；第二层提出目前尚未解决的问题或急需解决的问题，从而引出自己的研究动机与意义；第三层说明自己研究的具体目的与内容；最后是引言的结尾，可以介绍一下论文的组成部分。 值得注意的是，引言中各个层次所占的篇幅可以有很大差别。这一点与摘要大不一样，摘要中的目的、方法、结果、结论四项内容各自所占的篇幅大体比例一样。而在引言中，第一个层次往往占去大部分篇幅。对研究背景和目前的研究状况进行较为详细的介绍。研究目的可能会比较简短。 引言与摘要还有一点不同的是，摘要中必须把主要研究结果列出，而在引言中(如果摘要与正文一同登出)结果则可以省略不写，这是因为正文中专门有一节写结果，不必在引言中重复。 比较简短的论文，引言也可以相对比较简短。为了缩短篇幅，可以用一两句话简单介绍一下某研究领域的重要性、意义或需要解决的问题等。接着对文献进行回顾。然后介绍自己的研究动机、目的和主要内容。至于研究方法、研究结果及论文的组成部分则可以完全省略， 可见，引言一般分为三到四个层次。每个层次都有各自的任务与目的。而在语言上也有各自的特点，掌握这些特点会使写作过程化难为易。下面将对引言各层次的写作特点和技巧分别加以介绍。 （1）如何写引言的开头 引言开头(即第一层)最主要目的是告诉读者论文所涉及的研究领域及其意义是什么，研究要解决什么问题，目前状况或水平如何。（2）如何写文献综述 文献综述是学术论文的重要组成部分，是作者对他人在某研究领域所做的工作和研究成果的总结与评述，包括他人有代表性的观点或理论、发明发现、解决问题的方法等。在援引他人的研究成果时，必须标注出处，即这一研究成果由何人在何时何地公开发表。 （3）如何写研究动机与目的 在介绍了他人在某领域的工作和成果之后，下一步便介绍作者自己的研究动机、目的与内容。介绍研究动机可以从两个角度人
第一章引言和综述 提到创新正在民主化，我的感觉是，产品和服务的用户，无论是公司还是个体顾客，都越来越善于为他们自己创新。以用户为中心的创新过程越来越有优势，现在已经超过了数百年来一直作为商业主流的，以制造商为中心的创新开发系统。创新的用户可以准确地开发自己所需要的事物，而不需要依赖制造商为他们做代理人（这样做通常非常不完美）。而且，个体用户并不需要开发所有他们所需要的每一件事物，他们可以利用其他创新者开发并愿意与无偿共享的创新。 这种创新民主化的趋势既适用于信息产品，如软件，也适合实物产品。就后者，我们看一个简单的例子——夏威夷一个非正式的用户群体开发的高难度风帆冲浪表演运动技术设备。高难度的风帆冲浪运动表演需要特技技术，如在空中跳跃、空翻和旋转。高难度风帆冲浪表演的先驱，拉里?斯坦利（Larry Stanley）曾经向索纳里?沙（Sonali Shah）描述风帆冲浪技术和设备中重大创新的开发过程： 1978年，乔根?汉斯切尔德（Jürgen Honscheid）从前联邦德国来参加第一届夏威夷世界杯赛，第一次看到风帆跳跃——虽然在1974、1975年迈克?霍根（Mike Horgan）和我都玩过，但这对乔根?汉斯切尔德而言还是新鲜事。我们热衷跳跃，所有人都试图跳得越来越高，超越他人。但问题是，由于没有办法把自己控制在冲浪板上，冲浪者会从半空中飞出去，脚、腿都会受伤，冲浪板也容易损坏。 后来我想起了那片冲浪板，那是我们制作的一个附有脚套的试验用的小冲浪板，在我们看来,“它太蠢笨了，根本无法用于跳跃”。但是，这是我首次用脚套进行跳跃，我发现飞行可以控制了。跳得如此之快，完全超乎我的预想，而且与海浪撞击时，就像摩托车手从斜坡直冲下来，腾空之时，人就在空中飞行。在转瞬之间，你不仅能够在空中飞行，而且还可以着陆；甚至还可以在空中改变方向！ 真正的高难度风帆冲浪运动表演，事实上就是从那时开始的，也就是从我完成了这一点之后。在我们这些始终在一起运动的大约10个人中，每一两天就会有带不同脚套的冲浪板出现。冲浪板的制作越来越精，让我们在浪尖上愈发自如地跳跃、旋转。创新产生的效果，就像滚雪球一样，不断增大。 到1998年，风帆冲浪运动有着数百万的爱好者，市场上销售的冲浪板，有许多整合了用户开发的用于高难度表演的创新。 从刚才的描述中我们可以看出，以用户为中心的创新过程与传统模式形成了
红河哈尼族彝族自治州红河县乐育乡中心小学校志乐育乡中心小学编 序 乐育乡中心完小校长、党支部书记杨志发 教育的发展是同人类社会的进步和发展相一致的。修志乃承前启后，继往开来，有利当今，惠及后人的一件大事。值此乐育中心小学百年华诞之际，乐育乡中心小学组织校志编写领导小组和写作班子，着手校志编篡工作，从史海中，一件一件地有序地整理出来，形成专著，这是对不同时期乐育乡小学教育发展高度的概括与总结，必将对乐育教育产生深远的意义。 乐育乡小学办学历史悠久，素来被誉为“重文之乡”。追溯乐育办学历程，据史料记载可追溯到清末由乐育村塾师高国英、张明彩等于家中开办的私塾。民国2年（1913年），代办土司李丁氏于乐育观音庙内（现校址）开办思陀乡立国民小学，民国32年（1943年）于阿布村（龙车）开办分校，次年于大新寨开办第二分校，乡内小学相继渐渐得到发展。 新中国建立后，乐育乡的教育事业得到了迅速发展，特别是在20世纪70年代贯彻多种形式办学期间，出现了村村办学的局面，全乡51个自然村除极个别村外几乎均设立了小学教学点。1998年，乐育乡普及了六年义务教育，2001年普及了实验教学，2012年，通过了两基复检评估验收。乐育乡的教育得到了翻天覆地的变化，现代砖混结构取代了庙宇、仓库和土木结构。校园文化建设、育人环境、办学设施日趋完善。 “以史为鉴，可以知兴废，以人为鉴，可以知得失”。百年来，中心学校的教师工作经历了许多历史性事件，在这些事件中面临过诸多困难，但“彩虹总在风雨后”，经过艰辛的探索于拼搏，教育终于走上了良性发展的轨道；一是关心支持教育已成为社会共识，兴教之风蔚然而起，初步形成了领导聚精会神抓教育，教职员工碑精竭力办教育，社会各界群策群力帮教育的全新格局；二是质量意识深入人心，素质教育和课程改革所需的教师队伍逐步得到加强，整体教育学质量得到极大提高，赢得社会的认同；三是“普六”、“普九”后教育设备基本
高温预报方法研究 1 影响温度变化的因素 本文主要从影响温度变化的因素入手来考虑高温的预报，从热力学第一定律 （1）式可以看到，温度的变化取决于温度平流、垂直运动、非绝热因子三项的 变化。 （1） 1．1 温度平流项 温度平流项是由于气温沿水平气流方向分布不均匀时，空气水平运动所引起 的局地气温变化，暖平流使气温上升，冷平流使气温下降。 （1）气温变化的程度取决于温度平流的强度，温度平流因子对高空和地面的气 温变化都有很大影响，特别是空中，由于辐射引起的温度变化比较小，而水汽凝 结只出现在有限地区，所以温度平流显得很重要。对于地面气温，它是一个决定 日平均气温的主要因子。 （2）温度平流对于气温日变化也有很大的影响，常常会掩盖气温的正常日变化。 （例：强冷空气入侵，局地气温明显下降，白天有可能出现最低温度,也会出现 一天中最高气温与最低气温相反的情形。） 1．2 垂直运动 垂直运动对气温变化的影响，主要与垂直运动的方向、强度以及大气稳定度 有关。 （1）当大气层结稳定（γd-γ）> 0时 上升运动（ω< 0）引起气温下降 下沉运动（ω> 0）引起气温升高 （2）当大气层结不稳定（γd-γ）< 0时 上升运动（ω< 0）引起气温上升 下沉运动（ω> 0）引起气温下降 （3）当大气层结是中性平衡状态时，垂直运动对气温的变化没有太大的作用。 对高空温度，垂直运动因子十分重要，其作用大小与温度平流相当。 对地面温度（考虑地形的影响），平原地区，垂直运动近于零，可以忽略此 因子，对山区来说，该因子很重要 ：譬如，北京西北方向的燕山山脉，高度约 ()dt dQ C T V t T p d 1+ --??-=??γγω
关于学位论文引言部分撰写的建议 前言也叫引言，是正文前面一段短文。前言是论文的开场白，目的是向读者说明本研究的来龙去脉，吸引读者对本篇论文产生兴趣，对正文起到提纲掣领和引导阅读兴趣的作用。在写前言之前首先应明确几个基本问题:你想通过本文说明什么问题?有哪些新的发现，是否有学术价值?一般读者读了前言以后，可清楚地知道作者为什么选择该题目进行研究。为此，在写前言以前，要尽可能多地了解相关的内容，收集前人和别人已有工作的主要资料，说明本研究设想的合理性。 1、引言应含概的内容 引言作为论文的开头，以简短的篇幅介绍论文的写作背景和目的，缘起和提出研究要求的现实情况,以及相关领域内前人所做的工作和研究的概况，说明本研究与前工作的关系，目前的研究热点、存在的问题及作者的工作意义，引出本文的主题给读者以引导。 引言也可点明本文的理论依据、实验基础和研究方法，简单阐述其研究内容；三言两语预示本研究的结果、意义和前景，但不必展开讨论。前言在内容上应包括:为什么要进行这项研究?立题的理论或实践依据是什么?拟创新点?理论与(或)实践意义是什么?首先要适当介绍历史背景和理论根据，前人或他人对本题的研究进展和取得的成果及在学术上是否存在不同的学术观点。明确地告诉读者你为什么要进行这项研究，语句要简洁、开门见山。如果研究的项目是别人从未开展过的，这时创新性是显而易见的，要说明研究的创新点。但大部分情况下，研究的项目是前人开展过的，这时一定要说明此研究与被研究的不同之处和本质上的区别，而不是单纯的重复前人的工作。 2、前言的写作方法 (1)、开门见山，不绕圈子。避免大篇幅地讲述历史渊源和立题研究过程。 (2)、言简意赅，突出重点。不应过多叙述同行熟知的及教科书中的常识性内容，确有必要提及他人的研究成果和基本原理时，只需以参考引文的形式标出即可。在引言中提示本文的工作和观点时，意思应明确，语言应简练。 (3)、回顾历史要有重点，内容要紧扣文章标题，围绕标题介绍背景，用几句话概括即可;在提示所用的方法时，不要求写出方法、结果，不要展开讨论;虽可适
数值天气预报 ——天气预报水平持续提高的最根本的科学途径 李泽椿陈德辉王建捷 1引言 数值预报以其能够反映大气物理规律的优势，已成为当今气象工作者进行天气分析和预报的基础。尤其是最近10多年来，气象科学以及地球科学的研究进展，高速度、高容量的巨型计算机及其网络系统的快速发展，有效地推动了数值预报的发展。在这一发展过程中，一方面，数值预报水平和可用性在大大提高，有参考意义的天气形势预报目前达到5—7.5天，我国全球预报模式的可用天数大约是6天，24—48小时预报的相关系数可达90％以上；另一方面，也使制作有意义的时间、空间上更精细的数值预报成为可能。然而，我们仍然要看到，观测误差、模式误差和大气系统的非线性特性，使得数值预报结果的不确定性和预报误差的存在是不可避免的。因此，如何应用数值预报产品，即能否科学、合理地从大量的数值预报结果中提取出有价值的信息，是在天气预报中能否真正以数值预报为基础和有效发挥预报员作用的关键问题，直接影响预报效果和精度。在回顾我国数值天气预报发展历程和展望未来的时候，我们更在思考数值预报应用问题，期望通过探讨适合我国预报业务特点和适应不断拓展的预报服务需求的科学预报途径，为我国数值预报的开发与业务应用向健康、协调方向发展和推进提供一些有益的思路。 5对我国数值预报开发与应用问题的若干看法 5.1数值预报应用中存在的问题 从80年代初期接收ECMWF数值形势预报产品开始、到90年代以后有了产品较为丰富的我国自己的全球和区域数值预报，数值预报产品的应用问题始终挑战着广大气象工作者、特别是在预报服务第一线的预报人员。我们可喜地看到，经过多年的不懈努力和实践，伴随着数值预报水平的提高，数值预报产品的应用也积累了不少经验并在各级台站的实际预报中取得了一定成效。但是也需认识到，当数值预报技术和业务深入发展的今天，面对新的和日益丰富的数值预报产品，数值预报的应用现状并不理想，存在的问题日见明显；在预报业务中，数值预报应用工作的进展缓慢和难以深入。这些问题解决不好不仅影响当前，而且影响长远，即可能造成提高预报准确率的后劲不足。 分析认为，当前数值预报应用中的问题主要表现在以下几个方面： （1）数值预报的使用方法陈旧、单一 虽然与80年代初期（当时仅能得到很少的数值预报产品，如500hPa高度、海平面气压）相比，目前国家级及省地气象台能得到的数值预报产品（如，从地面-10hPa各标准等压面的温度、高度、湿度、风，多种物理诊断量等）已是相当丰富，但是数值预报产品在预报流程中的使用方法与当初相比却没有太多改变，基本上还停留在把数值预报直接当作天气图来使用的阶段。诚然，天气图是制作天气预报最基本的图表，它包含了许多有用的实况信息、是天气学理论的直接表现，对天气预报的制作有着不可磨灭的历史作用和现实作用。但是，作为对3维大气的描述，天气图的方式有它的局限性：只给出了大气中几个代表层的情况和描述大气基本特征的要素，因而主要表达了大气的2维基本特征（即水平特征）。在目前的预报流程中，把数值预报直接当作天气图来使用还是相当普遍的，对物理诊断量的应用也比