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人参_香树素合成酶同源模建及高通量虚拟筛选抑制剂的研究_詹冬玲

人参_香树素合成酶同源模建及高通量虚拟筛选抑制剂的研究_詹冬玲
人参_香树素合成酶同源模建及高通量虚拟筛选抑制剂的研究_詹冬玲

2012年第70卷

化 学 学 报

V ol. 70, 2012 第3期, 217~222

ACTA CHIMICA SINICA

No. 3, 217~222

* E-mail: liujs1007@https://www.doczj.com/doc/ae6830669.html,

Received August 31, 2011; revised November 10, 2011; accepted November 23, 2011.

Project supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 31070638), Natural Science Foundation of Jilin province (Nos. 20101552, 201015109) and Doctoral Fund of Ministry of Education (No. 20090061120101).

·研究论文·

人参β-香树素合成酶同源模建及高通量虚拟筛选抑制剂的研究

詹冬玲a 王 嵩*,b 韩葳葳c 刘景圣*,a

(a 吉林农业大学食品科学与工程学院 长春 130118)

(b 吉林大学理论化学研究所理论化学计算国家重点实验室 长春 130061)

(c 吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室 长春130023)

摘要 人参β-香树素合成酶(β-AS)能催化氧鲨烯环化生成齐墩果烷型皂苷, 从而减少植物固醇的生成量, 有助于获得高效的人参皂苷. 因β-AS 的三维结构是未知的, 我们以氧鲨烯环化酶为模板, 对β-AS 进行三维结构搭建. 以抑制剂10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene 为先导化合物, 通过AutoDockvina 进行分子对接, 选取结合能量最低的新化合物进行研究. 研究结果表明: 新抑制剂8442257比先导化合物10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene 的抑制效果更好. Leu287与新抑制剂结合时能量最低, 是重要的残基位点; Ser413和Trp613通过氢键与新抑制剂结合, 在抑制过程中起重要作用. 我们的研究结果为人参β-香树素合成酶抑制剂的研究提供一个有利的依据. 关键词 同源模建; β-香树素合成酶; 虚拟筛选; 分子对接

Study of Homology Modeling and High-throughout Screening of

a New Inhibitor of Panax β-AS

Zhan, Dongling a Wang, Song *,b Han, Weiwei c Liu, Jingsheng *,a

(a College of Food Science and Engineering , Jilin Agricultural University , Changchun 130118)

(b State Key Laboratory of Theoretical and Computational Chemistry , Institute of Theoretical Chemistry , Jilin University ,

Changchun 130061)

(c

Key Laboratory for Molecular Enzymology and Engineering of Ministry of Education , Jilin University , Changchun 130023)

Abstract β-Amyrin synthase from P ginseng (β-AS) catalyzes the biosynthesis of the cyclization of oxi-dosqualene into Oleanane-type saponins, thereby reducing the amount of steroid formation. However, the 3D structure of β-AS has not been firmly established. To finding the novel inhibitors, a 3D structure model of β-AS protein was constructed based on the structure of the template human oxidosqualene cyclase. After virtual screening technique of β-AS, a novel natural compound (8442257) has been found with the lowest affinity energy. Then we identify that Leu287 is the most important anchoring residues for binding with 8442257 because it has strong vdW interaction with inhibitor. Ser413 and Trp613 are important residues because they make hydrogen bonds with inhibitor. Our results may be helpful for further experimental in-vestigations.

Keywords homology modeling; β-amyrin synthase; virtual screening; molecular docking

人参皂苷(Ginsenoside)是五加科(Araliaceae)植物人参(Panaxginseng )和西洋参(Panaxquinquefolium )的主要

活性成分, 具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤作用[1,2], 已成为医药、食品、轻工等行业的重要原料. 人参皂苷属于三

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萜类物质, 与植物甾醇共享前期代谢途径: 通过2,3-氧化角鲨烯环化步骤进入三萜代谢分支途径, 在三萜碳环骨架复杂修饰的基础上形成人参皂苷. 在人参体内2,3-氧化角鲨烯流向3条代谢途径, 一条是合成固醇类物质, 另外两条是合成皂苷类物质(达玛烷型皂苷和齐墩果烷型皂苷), 而环阿乔醇合成酶(CS), 达玛烯二醇合成酶(DS)和β-香树素合成酶(β-AS)分别控制2,3-氧化角鲨烯流向达玛烷型皂苷和齐墩果烷型皂苷合成途径[3,4]. 从以上的分析可知, 人参皂苷和固醇来源于同一前体, 而β-AS又是固醇合成的关键酶, 因此通过抑制β-AS酶的活性可以抑制人参固醇合成, 从而可使更多的前体流向皂苷的合成途径, 进而提高皂苷的生物合成水平. 目前人参β-AS 的基因已被克隆(GeneBank: AB009029)[4]. 但是其三级结构仍然没有被解析.

近年来发展的计算机辅助药物设计方法[5,6]与传统的抑制剂筛选相比具有投入少、周期短、操作简单等优点. 本文通过同源模建的方法构建β-香树素合成酶的三维结构, 以抑制剂10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqua-lene为先导化学物, 在数据库中筛选出一种新的性能良好的抑制剂.

1 理论方法

1.1 同源模建

SWISS-MODEL[7,8](同源模建法)是一项预测蛋白质三级结构的服务, 它利用同源建模的方法实现对一段未知序列三级结构的预测. 一般由如下四步完成: (1)从待测蛋白质序列出发, 搜索蛋白质结构数据库, 选定其中一个作为待测蛋白质序列的模板; (2)待测蛋白质序列与选定的模板进行再次比对, 插入各种可能的空位使两者的保守位置尽量对齐; (3)模建: 调整待测蛋白序列中主链各个原子的位置, 产生与模板相同或相似的空间结构; (4)利用能量最小化原理, 使待测蛋白质侧链基团处于能量最小的位置.

1.2 分子动力学模拟

在初始的三维结构基础上, 利用GROMACS4.5.3程序对其进行了分子动力学6 ns (MD)模拟, 在模拟过程中使用了周期性边界条件和amber力场, 并用PME (particle meshewald)计算体系的静电相互作用. 考虑到溶剂化效应, 初始结构外加入了0.8 nm的TIP3P水分子层, 并置于周期性盒子当中. 用Na+平衡蛋白质中的负电荷. 能量最小化后, 在最初的0.05 ns的MD模拟中将温度从0 K提升到298 K, 采用Langevin温度平衡方法, 然后进行6 ns MD模拟使体系达到平衡, 选取平均构象做为下一步研究体系. 1.3 分子对接

以10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene为先导化合物在ZINC数据库中(http://zinc. docking. org/-index.shtml)搜索小分子配体衍生物, 然后用Autodockvina软件对这些化合物进行虚拟筛选. Auto-dockvina[9]的精度、速度以及使用的便利性要优于AutoDock 4.0[9,10]. 用AutoDockvina进行对接, 最后得到能量打分最低的小分子, 我们选取能量最低的化合物(zinc_8442249), 用Gaussian 03的PM3方法将结构进行优化[11,12]. Affinity[13]是商业半柔性的分子对接程序, 在对接过程中, 底物与设定酶的部分残基可以移动, 酶的其他部分则固定不动. 在蒙特卡罗构象搜寻的步骤中, 将默认的100步最小化提高到1000步, 每个搜寻到的构象会在298 K的恒温条件下做1000 ps的分子动力学模拟后再进行能量最小化. 在最终得到的10个最优构象中, 选取能量最低的构象作为进一步研究的对象. Ludi 是一种的全新蛋白配体设计工具, 已广泛地被生化公司和科研机构使用, 其特点是以蛋白质三维结构为基础, 通过化合物片段自动生长的方法产生候选的配体先导化合物. Ludi打分可以评估受体和配体的结合强弱[14].

2 结果与讨论

2.1 同源模建

将β-AS蛋白序列提交到Swiss-model自动比较蛋白模建服务器上, 通过程序自动选择了同样在甾族化合物骨架形成中起重要作用的人氧化鲨烯环化酶的晶体结构1W6J为模板[15], 序列相似性为41%, 直接生成了β-AS的初始三维结构, 整个体系包含753个残基. 2.2 动力学模拟

在6 ns的MD模拟过程中RMSD随时间变化曲线如图1所示, 由图1可见, β-AS体系的RMSD在2 ns之后趋于不变(0.35), 体系已经稳定. 最终得到的β-AS的三维结构见图2. 图2为β-AS的表面静电势, 中间凹槽部分就是抑制剂结合的部位.

QMEAN Z-scores[16]表示蛋白稳定性的预测. 经过分子动力学模拟之后, 该结构Z-scores值为-6.16, 说明β-AS结构稳定.

图3显示的Profiles-3D的分值. 经过分子动力学优化后, 各残基的兼容性均有所提高. 而对于最终的β-AS 结构, 其所有残基的得分均大于0, 说明所有的残基都处于合理的位置. 通过VADAR 对优化的结构的二面角进行评估. 由图4中可见, 752个残基的二面角所决定的构象大部分都落在合理的区域内(红色和黄色区域).

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图1 6 ns 均方根偏差

Figure 1

RMSD from 6 ns MD simulation

图2 β-AS 的三级结构

Figure 2 Final structure of β

-AS

图3 β-AS 的Profiles-3D 打分 Figure 3 Profiles-3D score of β-AS

估, 由表1可见, 预测的结果和已知实验的结果都比较吻合. 经过两种不同的评估方法验证, 说明β-AS 的结构是可靠的.

表1 β-AS 的 VADAR 统计 Table 1 VADAR STATS of β-AS

Statistic Observed Expected

Helix 353 (46%) Sheet 48 (6%) Coil 351 (46%) Turn

132 (17%)

Mean hbond distance 2.3 sd =0.4 2.2 sd =0.4

Mean hbond energy -1.8 sd =1.1 -2.0 sd =0.8 res with hbonds 525 (69%)

564 (75%)

Mean Helix Phi

-62.2 sd =12.8 -65.3 sd =11.9 Mean Helix Psi

-41.9 sd =19.1 -39.4 sd =25.5

2.3 抑制剂结合位点的预测

10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene 是与底物2,3-oxidosqualene 竞争型的抑制剂, 因此抑制剂的结合位点是底物的结合位点. 在甾醇生物合成中的关键酶(包括β-AS)的氨基酸序列中存在极度保守的部分(例如Tyr259), 但目前没有其他信息提供活性口袋所处的位置以及组成. 通过CASTP 模块搜寻活性口袋, 搜寻到一处包含有Trp259的位点如图5所示, 结合文献[15], 残基数为Asn122, Pro125, Phe128, Cys260, Tyr261, Arg263, Ala256, Lys257, Met258, Trp259, Cys260, Tyr261, Arg263, Ile369, Cys371, Gln412, Ser413, Phe414, Gln415, Ser416, Trp419, Phe461, Lys462, Tyr465, Arg466, His467, Ile468, Phe475, Ser476, His470, Trp472,

Gln473, Val474, Ser475, Gln476, Cys477, Ser524, Leu525, Ala534, Trp535, Glu536, Pro537, Ala545, Asp546, Ile547, Val548, Glu549, His550, Glu551, Tyr552, Val553, Glu554, Cys555, Thr594, Gln595, Met596, Tyr610, Asn612, Trp613, Tyr619, Cys665, Arg668, Val728, Phe729, Met730, Lys731, Leu735和Tyr737, 可以确定为活性部位. 2.4 高通量虚拟筛选

β-AS 具有高度特异性, 而抑制剂10-aza-10,11- dihydro-2,3-oxidosqualene 是与底物2,3- oxidosqualene 结构相似, 属于竞争型的抑制剂. 图6(A)为抑制剂10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene 的二维结构.

以10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene 作为先导化合物通过建立的筛选策略进行筛选, 从ZINC 数据库的1300多万小分子中筛选出来的120个小分子中, 使用AutoDockvina 将120个小分子分别与β-AS 进行分子对接. 选择能量最低的小分子(化合物8442257, 见图6(B)做进一步的深入研究. 图6(C)为8442257和酶的对接图,

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图4 β-AS 的拉式图

Figure 4 Ramachandran plot of β

-AS

图5 (A) β-AS 的活性口袋大小和(B) β-AS 的活性口袋残基

Figure 5 (A) Pocket size of β-AS and (B) pocket residue of β-AS

由图6(C)可见, 可以将8442257和10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene 放在活性位点中. 用Gaussian03 AM1方法对其优化结构, 然后用Affinity 软件对接. 表2中显示的这两种抑制剂与酶的相互作用能. 8442257与酶的相互作用能(-75.69 kJ/mol)比10-aza- 10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene 与酶的相互作用能

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图6 (A)抑制剂10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene 的结构; (B) 8442257的3D 结构; (C) 8442257和β-AS 的分子对接图; (D) 8442257和活性位点残基Ser413和Trp613的氢键示意图

Figure 6 (A) Structure of inhibitor 10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene; (B) the 3D structure of 8442257; (C) molecular docking of enzyme and 8442257, (D) hydrogen bond between 8442257 and some residues of active site of β-AS

表2 β-AS 和抑制剂的总的相互作用能、范德华静电作用以及Ludi 打分

Table 2 Total energy E total , van-der-Waal energy E vdw and electrostatic E ele between inhibitors and β-AS Ludi score

Ligand

E vdw /(kJ?mol -1)

E ele /(kJ?mol -1)

E total /(kJ?mol -1)

Ludi score 8442257

-73.10 -2.59 -75.69 802 10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene

-64.60

-0.40

-64.26

621

(-64.26 kJ/mol)低, 说明前者与酶形成的复合物稳定, 而且不容易脱去, 能够更好地抢占底物的空间, 抑制化学反应的发生. Ludi 的得分(8442257: 802, 10-aza-10,11- dihydro-2,3-oxidosqualene: 703)也说明8442257是比10-aza-10,11-dihydro-2,3-oxidosqualene 好的抑制剂. 8442257与β-AS 酶活性口袋中的部分残基共形成2个氢键, 从而提高了抑制剂的稳定性. 8442257与Ser413的羧基部分形成1个氢键, Trp613与8442257形成了1个氢键, 所以Ser413和Trp613在抑制剂8442257的识别起到极为重要的作用. 因此它们在β-AS 中起到稳定抑制剂的作用.

分子间的非键相互作用对于确定抑制剂与酶之间的相对位置以及关键残基非常重要, 由于β-AS 的活性口袋较大, 涉及氨基酸残基非常多, 与8442257活性位

点残基之间的总相互作用能小于-1 kJ/mol 的残基及其相互作用能列在表3中. 由表3可见, 除上述提及的2个与β-AS 形成氢键的残基相互作用能特别是静电相互作用较大外, Leu287, Pro194, Leu285, Gln288, Glu291, Arg206, Glu290, Tyr292, Ile188, Met185, Cys202也和抑制剂有较大的范德华相互作用. 尤其是Leu287和抑制剂的相互作用较大(E vdW =-9.81 kJ/mol, E ele =-1.16 kJ/mol, E total =-10.97 kJ/mol).

综上所述, 从氢键和相互作用能两个方面来看, Leu287, Pro194, Leu285, Trp613, Gln288, Ser413, Tyr184, Glu291, Arg206, Glu290, Tyr292, Ile188, Met185, Cys202 这14个氨基酸残基在β-AS 中, 对抑制剂8442257都具有重要的作用. 我们的研究为设计β-AS 酶专有的抑制剂提供可靠的理论线索.

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表3抑制剂8442257和活性位点残基的相互作用能和范德华静电作用

Table 3 Total energy E total, van-der-Waal energy E vdw and electrostatic E ele between 8442257 and individual residues of β-AS Residue E vdw/(kJ?mol-1) E ele/(kJ?mol-1) E total/(kJ?mol-1)

Leu287 -9.81 -1.16 -10.97

Pro194 -5.88 -0.43 -6.31

Leu285 -6.06 0.08 -7.39

Trp613 0.10 -5.69 -5.59

Gln288 -5.45 -0.07 -5.52

Ser413 -0.09 -5.28 -5.37

Tyr184 -5.09 0.14 -4.94

Glu291 -4.19 -0.12 -4.51

Arg206 -3.17 0.31 -2.86

Glu290 -3.67 -0.01 -3.68

Tyr292 -2.11 -0.23 -3.34

Ile188 -2.33 0.55 -1.78

Met185 -1.47 -0.00 -1.47

Cys202 -0.72 -0.28 -1.00

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(A1108313 Qin, X.)

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人参怎么吃效果最好 人参怎么吃效果最好?人参的吃法有很多种,如煎汤、炖服。那么人参怎么吃最好?人参历来都是非常畅销的保健产品,人参有非常强的医疗保健功效,因此得到了众多消费者的青睐。但是有些人并不了解人参的科学服用方法,因此没有收到理想的效果。下面我们就人参的服用方法具体的介绍一下。 现代科学研究发现,人参含有多种人参皂甙、洋参多糖及少量挥发油、维生素及微量元素等成分。具有抗疲劳、抗缺氧、增强机体抗病能力及促进蛋白质合成等作用。还有提高红细胞内超氧化物歧化酶活性,具有养胃生津、抗衰老、延年益寿的功效。它药性和缓,性寒凉,和人参的温热峻补不同,四季皆宜,尤适于夏天服用。它广泛用于非处方药、健康食品及化妆品等方面。 人参两种最简单的食用方法: 方法一:用开水泡服。 先将参片用凉水稍稍冲洗后,放入杯中,再用沸水冲泡后服用,也可以用锅先把水煮开,再将参片放入清煮片刻即可,一般冲泡几道水后,味道变淡了,最后将参片咬碎后服用。 方法二:竹丝鸡炖人参片。 家庭服用人参可采用以下几种方法: 1 .作汤法。将原皮西洋参切成薄片,做菜汤时每次放入5克共煮。菜汤、药同食,每日1次。 2 .煮粥法。取大米50克,淘洗后加水煮粥,粥开后加入西洋参细粉5克,直至粥成,宜每日早餐服用。 3 .泡酒法。取西洋参30克置于净器中,用米酒500克浸泡,密封7 日后取用。 4. 含化法。将无皮西洋参放在饭锅内蒸一下,使其软化,然后用刀将参切成薄片,放在玻璃瓶内,一次口含一片,每天用量2-4克,早饭前,晚饭后含于口中,细细咀嚼。 5. 冲粉法。将西洋参研成细粉状,每次5克,用纱布或滤纸包好,置杯中,冲入沸水,加盖后约5分钟即可饮用,可重复冲服几次至无味止。 6. 炖服法。将原皮西洋参切片,每天2-5克放入瓷碗内,加适量水浸泡3-5小时。密封碗口,再置锅内隔水蒸炖20-30分钟,早饭前半小时服用。

人参属药用植物组织和细胞培养的研究进展

CR3、TL R2、TL R4、D ectin21、甘露糖受体,但是由于多糖结构的多样性和复杂性,可以想象,多糖受体也是多样的,今后还会有更多的多糖受体被揭示。 多糖作用的信号转导机制也是今后研究的重要课题,其研究策略将是以作用的受体为信号传入的起始点,以某种细胞效应(如吞噬、趋化、合成或分泌细胞因子)为终点观测指标,确定其中的信号转导通路。通过研究有望发现新的药物作用靶点,为建立新的药物筛选模型提供信息。References: [1] Yan J,V etvicka V,X ia Y,et a l1Beta2glucan,a“specific” bi o logic response modifier that uses antibodies to target tumo rs fo r cyto toxic recogniti on by leukocyte comp lem ent recep to r type3(CD11b CD18)[J]1J Imm unol,1999,163 (6):3045230521 [2] Cheung N K,M odak S1O ral(1→3),(1→4)2beta2D2glucan synergizes w ith antigangli o side GD2monoclonal antibody3F8 in the therapy of neuroblastom a[J]1Ch in Cancer R es,2002, 8(5):1217212231 [3] Cheung N K,M odak S,V ickers A,et a l1O rally adm inis2 tered beta2glucans enhance anti2tumo r effects of monoclonal antibodies[J]1Cancer Imm unol Imm unother,2002,51(10): 55725641 [4] Hong F,H ansen R D,Yan J,et a l1Beta2glucan functi ons as an adjuvant fo r monoclonal antibody i m m uno therapy by recruiting tumo ricidal granulocytes as k iller cells[J]1Cancer R es,2003,63(24):9023290311 [5] Yoon Y D,H an S B,Kang J S,et a l1To ll2like recep to r42 dependent activti on of m acrophages by po lysaccaride iso lated from the radix of P la ty cod on g rand if lorum[J]1In t Imm unop ha r m acol,2003,3(13214):1873218821 [6] H an S B,Yoon Y D,A hn H J,et a l1To ll2like recep to r2m e2 diated activati on of B cells and m acrophages by po lysaccha2 ride iso lated from cell culture of A can thop anax sen ticosus[J]1 In t Imm unop ha r m acol,2003,3(9):1301213121 [7] A ndo I,T sukumo Y,W akabayash i T,et a l1Safflow er po lysaccharides activate the transcri p ti on facto r N F2kappa B via To ll2like recep to r4and induce cytok ine p roducti on by m acrophages[J]1In t Imm unop ha r m acol,2002,2(8):11552 11621 [8] A derem A,U levitch R J1To ll2like recep to rs in the inducti on of the innate i m m une response[J]1N a tu re,2000,406 (6797):78227871 [9] L ien E,M eans T K,H eine H,et a l1To ll2like recep to r4 i m parts ligand2specific recogniti on of bacterial li popo lysac2 charide[J]1J C lin Invest,2000,105(4):49725041 [10] Zhang D M,M ao B L1R ecent advances on researches of To ll2like recep to rs[J]1L if e S ci R es(生命科学研究),2002, 6(1):362391 [11] B row n G D,T aylo r P R,R eid D M,et a l1D ectin21is a m aj o r beta2glucan recep to r on m acrophages[J]1J E xp M ed, 2002,196(3):40724121 [12] B row n G D,H erre J,W illiam s D L,et a l1D ectin21m ediates the bi o logical effects of beta2glucans[J]1J E xp M ed,2003, 197(9):1119211241 [13] A riizum i K,Shen G L,Sh ikano S,et a l1Identificati on of a novel,dendritic cell2associated mo lecule,dectin21,by sub2 tractive c DNA cloning[J]1J B iol Che m,2000,275(26): 201572201671 [14] Grunebach F,W eck M M,R eichert J,et a l1M o lecular and funti onal characterizati on of hum an dectin21[J]1E xp H e m a2 to,2002,30(11):1309213151 [15] Yoko ta K,T akash i m a A,Bergstresser P R,et a l1Identifica2 ti on of a hum an homo logue of the dendritic cell2associated C2type lectin21,dectin21[J]1Gene,2001,272(122):512601 [16] H er m anz2FR alcon P,A rce I,Roda2N avarro P,et a l1C lon2 ing of hum an D ECT I N21,a novel C2type lectin2like recep to r gene exp ressed on dendritic cells[J]1Imm unog enetics,2001, 53(4):28822951 [17] Chen H L,L i D F,Chang B Y,et a l1Effects of lentinan on bro iler sp lenocyte p ro liferati on,interleuk in22p roducti on, and signal transducti on[J]1P ou lt S ci,2003,82(5):7602 7661 [18] L i M C,L iang D S,Xu Z M,et a l1Effects of Ganod er m a (Ganod er m a lucid um)po lysaccharide on PKA activity of m urine peritoneal m acrophages[J]1Ch in T rad it H erb D rug s (中草药),2000,31(5):35323551 [19] H su M J,L ee S S,L ee S T,et a l1Signaling m echanis m s of enhanced neutroph il phagocyto sis and chemo taxis by the po lysaccharide purified from Ganod er m a lucid um[J]1B r J P ha r m acol,2003,139(2):28922981 [20] L i Y W,M a L1TL R42M D2Signaling pathw ay induced by endo toxin[J]1Ch in P ha r m acol B u ll(中国药理学通报), 2002,18(2):12121251 人参属药用植物组织和细胞培养的研究进展 陈 巍1,高文远13,贾 伟2,段宏泉1,肖培根3Ξ (11天津大学药物科学与技术学院,天津 300072;21上海交通大学药学院,上海 200030; 31中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京 100094) 摘 要:从愈伤组织的诱导及培养、试管苗再生、悬浮培养、反应器培养及转基因器官培养等5个方面介绍了人参属药用植物组织与细胞培养的研究进展。日本和韩国已经分别实现了人参悬浮细胞和不定根培养的工业化;我国尽管已经开发了人参愈伤组织的一些产品,但在人参属药用植物组织和细胞培养的工业化方面还有一段路要走。 关键词:人参属;组织培养;细胞培养;生物反应器 中图分类号:R282121 文献标识码:A 文章编号:02532670(2005)04061605 Advances i n stud ies on tissue and cell culture i n m ed ic i na l plan ts of P anax L1 CH EN W ei1,GAO W en2yuan1,J I A W ei2,DUAN Hong2quan1,X I AO Pei2gen3 (11Co llege of Phar m aceutical Science and T echno logy,T ianjin U niversity,T ianjin300072,Ch ina;21Schoo l of Phar m acy, Ξ收稿日期:2004206211 :(022)87401895:@..

抗菌药物合理应用管理制度及奖惩办法

抗菌药物合理应用管理制度及奖惩办法 1 建立健全医院合理应用抗菌药物管理组织和制度 成立医院合理应用抗菌药物管理小组或相应管理组织,由主管业务院长任小组组长,成员包括各临床科室主任、感染控制护士、药学及微生物学专业人员等。制定符合本医院、本科室的抗菌药物合理使用管理制度;协调、监控医院抗菌药物的购进及使用;负责抗菌药物应用的指导、咨询工作;定期审查、总结抗菌药物使用情况,发现问题及时采取有效的整改措施;根据临床用药情况,组织经常性、各层面人员的药理知识培训,提高医务人员合理用药的综合素质。 2 加强对医务人员合理应用抗菌药物及相关药理知识的培训 当今,随着医学科学的迅速发展,新型抗菌药物的品种日新月异,细菌的耐药谱也不停地发生变迁,过去经验型的治疗将随着循证医学的深入被淘汰。只有抓好医务人员的合理用药观念。通过岗前培训、举办讲座、办学习班、新药介绍等形式,对各级医护人员进行合理应用抗菌药物的教育和培训,普及合理用药观念,不断更新相关知识,提高医院抗菌药物治疗水平。各级医师应根据药代动力学、药效学和药物经济学,以及细菌培养和药敏试验结果,严格掌握适应症,合理选用药物;护士应了解各种抗菌药物的配制要求,准确执行医嘱,仔细观察病人用药后的反应,积极主动配合医师做好各种细菌培养标本的留取和送检工作;强调医护人员的协作精神,强调药物使用中的合

理配伍,强化根据药敏试验用药的观念。 3 加强对患者及其家属进行合理使用抗菌药物的宣传教育 通过向患者发放健康教育杂志,设立本院健康教育橱窗、病床边等多种方式进行宣教,特别是门诊医生要做好耐心的解释工作,使其清楚根据个体用药的重要性,让患者积极主动配合医生的治疗,达到合理用药的日的。 4 制定合理应用抗菌药物的规定 要求医生严格掌握使用抗菌药物的适应症、禁忌症及联合使用抗菌药物的指征;抗菌药物给药方案的制定和调整原则:根据患者生理、病理特点及抗菌药物的临床药理特点,综合考虑感染部位、细菌耐药情况、不良反应及价格等因素,制定个体化给药方案:严格控制抗菌药物的预防性使用;严格掌握局部应用抗菌药物的适应症,确保抗菌药物治疗能获得最佳疗效和最小的不良反应。 5 严把进药关,建立完善的合理用药网络 根据检验科提供的细菌耐药情况,医院药事管理委员会和抗菌药物管理小组要及时调整本院的抗菌药物用药目录,医院采用招标购药,保证进药质量;选择疗效可靠、不良反应小、相对价廉的药物作为常规品种,暂停或淘汰临床应用无效或已产生严重耐药性的药物。引入药物经济学概念,通过鉴别、测量和对比不同的治疗方案,优化治疗成本与效果结构,使药物达到最好效应,避免只强调用药安全有效性,而忽视支付药物费用的情况,使临床用药更趋于治疗有效、费用合理。医院可通过自己的局域网、电话、窗口其他途径,就医院所

农田种植人参的技术

如何在农田种植人参_农田种植人参的技术 一般10月上旬—中旬作床,依地势顺坡打池,池长50米左右,池床规格:床宽120—150cm、床高30—40cm,作业道宽70cm。同 时在参地四周挖好排水沟。 不宜选择地:地下水位高、低洼易涝、旱垄道以及使用除草剂的大豆地,蔬菜、瓜果类地一般不宜选择。 土壤检测:在选定的地块采集土样,进行农残、重金属及养分、有机质、PH值检测,对农残、重金属超标的地块不宜选用。 调酸:根据土壤PH检测结果,施入适量的生石灰,然后用旋耕 机旋一遍。 种植养地作物:春天在调酸旋耕后的地块种植苏子。 深翻与旋耕:7月初待苏子开花前,进行横竖两次旋耕,间隔7—10天进行深翻,耕翻深度40cm左右,以后每隔10天翻耕一次。 增施有机肥:结合旋耕每亩施入腐熟的猪粪或羊粪等有机肥4— 5立方米。 灭菌杀虫:结合旋耕施入高效低残的杀菌剂、杀虫剂,旋耕两遍既可作床。 施底肥:作床时每亩施腐熟饼肥(拌DND菌种)、益生元重茬剂及适量的磷钾肥,旋耕两遍即可播种和移栽。 种子消毒:方法是100毫升适乐时兑水250—500毫升水拌25kg 种子,晾至不沾手时即可播种。 播种:播种分育苗和直播作货两种。育苗地播种一般采用 4×5cm扎眼点播或撒播,每帘用种子0.4—0.6kg,复土厚度3cm左右;直播作货:可采用6×18cm和5×20cm点播。

移栽:一年生立栽,株行距8×20cm复土厚度3—4cm. 消毒与覆盖:播种、移栽完的地块用恶霉灵(10g/帘)床面喷雾消毒,然后用碎玉米秸或稻草覆盖3—4cm。 除草:采用人工除草,原则是拔早、拔小、拔了。 水分:农田地一般的年份参床不缺水,如缺水,采取人工浇水。一次性浇透(重点是池床中间) 病害防治:主要搞好春季床面消毒,苗期主意预防立枯病、猝倒病,生长季节主防灰霉病、黑斑病、疫病。生产中要使用在人参上登记的农药。

东北人参的功效

东北人参的功效 东北人参的功效,我国最名贵的人参要属东北的野山参了。那么,东北人参的功效有哪些?据史书《神农本草经》记载,世界上应用人参最早的国家是中国。传说早在远古黄帝时期,有关人参的神奇功效就已为人所知,以此算来,人参的应用至少有4000多年的历史。而远在二千年前,我们的祖先就把人参用于临床了。关于人参的文字记载,最早见于春秋时期越国宰相范蠡所著的《范子计然》一书。书中有“人参出上党,状类人形者善”的描述,对人参的形状做了形象的描述。 东北人参,是一个标识。从北大荒到北大仓,东北在历史洪流中脱胎换骨,“东北三宝,人参、貂皮与鹿茸”也如歌一样被传唱,三宝中尤以人参为百姓家所津津乐道。人参的种类很多,而且很多药材虽不是人参,名字中却带有“参”字,它们的功效各异,在使用时一定要区分清楚。最名贵的人参要属东北的野山参了。顾名思义,野山参生长在荒山野岭上,“年龄”可达数十年乃至上百年,比较罕见。“这种人参可以大补元气,但价格极其昂贵,除非是体质极度虚弱的重病人,一般很少用到。 享有“百草之王、百药之首”的人参,关于它的美丽传说、奇特外形、神奇药效令世人称奇。我国东北人参最高参龄达150年以上,发现于长白山脉,出土净重为251克,芦长碗密,为2011年至今我国出土的最大一苗人参。由于其五形俱全,形态如龙,因此被称为“龙形参”。该参猛看时如神龙摆尾,气势昂然;细看则艼须如瀑布而下,清疏而长;体虽被主艼遮挡,但犹如宝藏龙体之下,可堪称大货中之上品。生于长白山脉之丛林深处,历经百年之孤寂与守候,得遇伯乐,终成传奇这是对“龙形参”最好的注释。 还有一种原产地在北美的人参,名为西洋参或花旗参。李时珍的《本草纲目》中记载,西洋参性偏寒,有益气生津的效果,适用于有虚火的人或容易上火者。”因此,夏天容易上火的人,选用西洋参泡茶为宜,阳虚、气虚体质的适合用人参泡茶。人参种类复杂,质量也有优劣,甚至还有假冒的,因此,选购时应加以鉴别。进口人参口感好、香气足、苦中带甘醇,功效也最好。市面上和药房销售的几块钱一克的人参大部分均为国产引种的,进口的人参仅有像福临门人参、同仁堂等少数大型品牌能够买到,价格在十几块到二十几块一克不等。其中以同仁堂最贵,包装也最为漂亮,适合用于送礼;福临门人参面向家用客户,价格较为实惠,适合居家自用。平时市民常说的人参,多指在园地中人工培育出来的园参。按照加工方法的不同,园参又可以分为生晒参、白参和红参等。其中,生晒参药性平和,以补气作用为主,尤适合于气阴不足者;白参的作用和生晒参一样,只是效果略差;红参则是药性偏温热,具有补气温阳的作用,适用于阳气虚弱者。

琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的研发进展_仇是胜

第14卷第1期现代农药V ol.14 No.1 专论与综述 琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂的研发进展(Ⅱ) 仇是胜1,柏亚罗2 (1. 江苏嘉隆化工有限公司,江苏徐州 221112;2. 江苏省农药研究所股份有限公司,南京 210024) 摘要:琥珀酸脱氢酶抑制剂类 (SDHI) 杀菌剂历经3代,有18个品种上市或即将上市。尤其是第3代8个吡唑酰胺类杀菌剂的问世,有力地带动了SDHI类杀菌剂市场的迅速发展。介绍了SDHI类杀菌剂的作用机理、构效关系和专利概况,逐个陈述了它们的应用与市场,总结了该类产品的抗性情况及产生机理,并展望了SDHI类杀菌剂的发展前景。 关键词:琥珀酸脱氢酶抑制剂;酰胺类杀菌剂;研究开发;应用;市场;抗性 中图分类号:TQ 455.4+9文献标识码:A doi:10.3969/j.issn.1671-5284.2015.01.001 Progress on Research and Development of Succinate Dehydrogenase Inhibitor Fungicides (Ⅱ) QIU Shi-sheng1, BAI Ya-luo2 (1. Jiangsu Jialong Chemical Industry Co., Ltd., Jiangsu Xuzhou 221112, China; 2. Jiangsu Pesticide Research Institute Co., Ltd., Nanjing 210024, China) Abstract: Eighteen fungicides of succinate dehydrogenase inhibitors (SDHI) have launched or will launch soon through three-generation-development. Especially, the sales of eight carboxamide fungicides in the 3rd generation, promoted significantly the market development of SDHIs. The paper introduced the mechanism of action, structure- activity relationships and patent profiles of SDHIs. The uses and markets of the all active ingredients were described, their resistance and resistant mechanisms were summaried, and the futures of SDHIs were also prospected. Key words: succinate dehydrogenase inhibitor (SDHI); carboxamide fungicide; R&D; use; market; resistance (续上期) 5.4 呋喃酰胺类 (furan-carboxamides,1个) 甲呋酰胺 (fenfuram) 是由壳牌公司发现、安万特(现拜耳作物科学) 公司开发[2]。 甲呋酰胺是替代汞制剂、具内吸性的拌种剂[9],可防治谷物上的腥黑穗病和黑粉病(Tilletia和Ustilago spp.)[2]。 甲呋酰胺的主要剂型有:DS和LS[2]。其开发代号为:WL 22361;主要商品名为:Pano-ram[2]。 截至2014年10月11日,甲呋酰胺尚未在欧盟、美国和中国登记[23-25]。 5.5 氧硫杂环己二烯酰胺类 (oxathiincar- boxamides,2个) 5.5.1 萎锈灵 (carboxin) 萎锈灵由美国有利来路(现科聚亚) 公司1966年报道,1969年引入市场[2]。 萎锈灵为内吸性杀菌剂,种子处理可用于大麦、小麦和燕麦等作物,防治黑粉病、腥黑粉病[特别是散黑穗病、黑穗病(Ustilago spp.)],用药量为每100 kg种子50~200 g;还用于大麦、小麦、燕麦、水稻、棉花、花生、大豆、油菜、蔬菜、玉米、高粱和其他作物上防治种子和幼苗上的病害,如黑穗病、腐烂病和疫病等,特别是丝核菌(Rhizoctonia spp.) 引起的病害。萎锈灵不能与强碱或强酸性农药混配[2]。 萎锈灵可采用闷种、拌种和浸种等方法施用,亦可叶面喷雾防治小麦、豆类、梨等的锈病。其对作物生长具有一定的刺激作用,能使小麦增产[9]。 萎锈灵的主要剂型有:FS、SC、WP和WS等[2]。 萎锈灵的开发代号为:D 735;其单剂产品的 收稿日期:2014–10–13;修回日期:2014–10–18 作者简介:仇是胜 (1967—),男,江苏省徐州市人,高级工程师,主要从事农药及有机合成工作。Tel:0516–85038670;E–mail:qiuss001@https://www.doczj.com/doc/ae6830669.html,

常见药用植物介绍

药用植物,是指医学上用于防病、治病的植物。其植株的全部或一部分供药用或作为制药工业的原料。广义而言,可包括用作营养剂、某些嗜好品、调味品、色素添加剂,及农药和兽医用药的植物资源。药用植物种类繁多,其药用部分各不相同,全部入药的,如:益母草、夏枯草等;部分入药的,如:人参、曼陀罗、射干、桔梗、满山红等;需提炼后入药的,如:金鸡纳霜等. 20世纪80 年代 ,我国曾经进行过全面系统的资源调查 , 发现我国的药用植物资源种类包括 383 科 ,2 309 属 ,11 146 种 ,其中藻、菌、地衣类低等植物有 459 种 ,苔藓、蕨类、种子植物类高等植物有 10 687 种。有些药用植物为我国所特有 ,如人参、杜仲、银杏等。 可泡花草茶喝(保健类药用植物) 马鞭草 被子植物门双子叶植物纲唇形目马鞭草科 多年生草本,高30~120厘米,茎四方形,上部方形,老后下部近圆形,棱和节上被短硬毛。单叶对生,卵形至长卵形,长2~8厘米,宽1.5~5厘米,3~5深裂,裂片不规则的羽状分裂或不分裂而具粗齿,两面被硬毛,下面脉上的毛尤密。花夏秋开放,蓝紫色,无柄,排成细长、顶生或腋生的穗状花序;花萼膜质,筒状,顶端5裂;花冠长约4 毫米,微呈二唇形,5裂;雄蕊4枚,着生于冠筒中部,花丝极短;子房无毛,花柱短,顶端浅2裂。果包藏于萼内,长约2毫米,成熟时裂开成4个小坚果喜肥,喜湿润,怕涝,不耐干旱,一般的土壤均可生长,但以土层深厚、肥沃的壤土及沙壤土长势健壮,低洼易涝地不宜种植。 性味归经:苦,凉。归肝、脾经 功能主治活血散瘀,截疟,解毒,利水消肿。用于症瘕积聚、经闭痛经、疟疾、喉痹、痈肿、水肿、热淋。 迷迭香 被子植物门双子叶植物纲唇形目唇形科 消除胃气胀、增强记忆力、提神醒脑、减轻头痛症状、对伤风、腹胀、肥胖等亦很有功效。有较强的收敛作用,调理油腻不洁的肌肤,促进血液循环,刺激毛发再生。改善脱发现象。

合理使用抗生素试题

抗菌药物合理使用测试题 一、选择题(每题2分,共60分) 1、抗菌药物治疗性应用的基本原则() A诊断为细菌性感染者,方有指征应用抗菌药物 B尽早查明感染病原,根据病原种类及药效结果选用抗菌药物 C按照药物的抗菌作用特点及体内过程特点选择用药 D抗菌药物治疗方案应综合患者病情,病原菌种类及抗菌药物特点制订 E以上都是 2、抗菌药物疗程,一般宜用至体温正常,症状消退后() A 24-48小时 B 48-72小时 C 72-96小时 D 5-7天 3、胆汁中药物浓度最高的头孢菌素类药物是:() A.头孢曲松 B.头孢氨苄 C.头孢哌酮 D.头孢呋辛 4、不宜常规预防性应用抗菌药物() A普通感冒B水痘C休克D昏迷E以上都是 5、患者服用()药期间大、小便、唾液、痰及泪液等可呈红色 A 去甲万古霉素 B 吡嗪酰胺(卫非特)C利福平D伊曲康唑 6、小儿应用抗菌药物,下列说法错误的是() A 氨基甙类抗生素小儿患者尽量避免使用 B 万古霉素和去甲万古霉素仅在有明确指征时方可使用 C 四环素类抗生素避免用于18岁以下未成年人 D 喹诺酮类抗菌药避免应用于18岁以下未成年人 7、妊娠期感染,避免使用的药物是() A 青霉素 B 头孢菌素 C 万古霉素 D 磷霉素 8、下列关于青霉素的描述,错误的是() A 全身大剂量使用可引起中枢神经系统反应 B 青霉素禁用于鞘内注射 C 青霉素钾盐不可快速静注 D 青霉素在酸性溶液中易失活 9、耐青霉素酶青霉素类抗生素,可用于下列哪种感染() A肺炎链球菌B溶血性链球菌C产青霉素酶的葡萄球菌 D甲氧西林耐药葡萄球菌 10、肠球菌感染首选用药() A 罗红霉素 B 环丙沙星 C 庆大霉素 D 呋喃唑酮 11、碳青霉烯类抗生素,下列说法错误的是() A本类药物适用于轻至重度感染,但不可作为预防用药 B对甲氧西林耐药葡萄球菌和嗜麦芽窄食单胞菌抗菌作用差 C亚胺培南/西司他丁不适于治疗中枢神经系统感染 D肾功能不全者应根据肾功能减退程度减量用药 12、阿莫西林/克拉维酸不适于治疗下列哪项感染()

人参人工种植技术人工种植人参有药效

人参人工种植技术人工种植人参有药效 现在主要是栽培的人参, 称为“园参”。主要产地是黑龙江、 吉林和辽宁省,而河北、山西省也有少量栽培,下面是精心为你的人参人工种植技术,一起来看看。 1、人参对生长环境条件的要求 人参是一种喜冷凉、湿润而耐荫的药用植物, 既怕积水, 又不 耐干旱, 忌强光直射, 对生长环境条件要求比较严格。 (1) 土壤:人参对土壤的要求是腐殖丰富、土层深厚、质地 疏松、渗水性强、排水良好的沙壤, 森林腐殖土最好, 中性或微酸性土壤较好, 但碱性土壤不宜种植。 (2) 水分:人参对水分要求比较严格, 既喜水又怕涝。水分过大, 当土壤湿度超过60%, 就会造成土壤中的空气不足, 使人参根系呼吸受到影响, 易染病害和烂根。水分过小, 当土壤湿度低于30%以下时, 会造成人参根系水分扩散, 使人参须根干枯, 导致产量下降。人参发育期要求土壤水分适宜, 春季出苗期土壤湿度保持在40%左右, 夏季生长期保持在45%—50%, 秋季保持在40%—50%为宜, 全年生长 发育期湿度范围以40%—50%为好。

(3) 光照:人参是喜阴植物, 喜散射弱光, 怕直射阳光。光照过强, 植物矮小, 叶片厚而色黄。光照过弱, 植株细高, 叶片薄而浓绿, 生长不正常。所以, 在人参栽培时, 应进行遮荫, 调节透光度, 避免强光直射, 利用散射光和折射光。 (4) 温度:人参怕高温, 耐严寒。在人参生长发育期间, 以平 均气温在15—20℃为宜, 温度高于30℃或低于是10℃时, 人参处于休眠状态。冬季在—40℃的严寒也可安全越冬。人参更新芽在春季地温于10℃以上即可萌芽生长, 但最怕早春的“缓阳冻”(即气温忽高忽低, 地表一冻一化现象) , 易引起冻害和根皮破坏(“破肚子”) 。播种后出苗期要求温度在10℃以上, 1—2年生的要求稳定在12℃以上, 生长期最适宜的温度20—25℃, 在36℃以上的烈日下, 叶子焦枯; 低于—6℃, 茎秆会失去生长机能。 (5) 肥料:人参喜肥, 又怕不腐熟肥。喜的是有机肥和无机肥, 怕的是施未腐熟的粪肥和施肥后土壤缺乏水分, 造成人参烧须烂根。 2、人参栽培品种 主要栽培品种有大马牙、二马牙、圆臂圆芦和线芦, 其特点是:大马牙主根粗短, 生长快, 抗病力强, 产量高。二马牙主根较细长, 产量比大马牙稍低。圆臂圆芦和线芦体形比较丰满美观。

(完整版)合理应用抗生素培训考试题库及答案

抗菌药物培训试题及答案 一、填空题: 1.抗菌药物是指具有___________活性,主要供全身应用(个别也可局部应用)的各种抗生素以及___________、磺胺类、硝基咪唑类、硝基呋喃类等化学合成药。抗菌药物用于细菌、衣原体、支原体、立克次体、__________等所致的感染性疾病,非上述感染原则上不用抗菌药物。 2.医师开具处方和药师调剂处方应当遵循、、、的原则。抗菌药物使用的合理性包括、、三个因素。 3.抗菌药物的预防性应用,包括______________应用抗菌药物和_______________预防用药。 4.不合理处方包括处方、用药处方及处方。 5.按照《卫生部抗菌药物临床应用指导原则》有关规定,接受清洁手术者(Ⅰ类切口),术前___ ___小时内,或麻醉开始时给药。如果手术时间超过____ __小时或失血量大于1500ml,术中可给予第二剂。总的预防用药时间不超过__ ___小时,个别情况可延长至48小时。 6.对不同级别医务人员经培训考核合格后,授予不同级别抗菌药物处方权:骨干级以上技术职务任职资格医师可使用;责任级以上技术职务任职资格的医师可使用。紧急情况下,医师可越级使用抗菌药物,处方量限于天。 7.手术进入呼吸、消化或泌尿生殖道但无明显污染,例如无感染且顺利完成的胆道、胃肠道、阴道、口咽部手术,该类手术切口属于__ 类切口。 8.《抗菌药物临床应用管理办法》规定,二级医院抗菌药物品种不得超过种,医疗机构住院患者抗菌药物使用率不得超过,门诊患者抗菌药物处方比例不得超过。。 二、单项选择题: 1、正确的抗菌治疗方案需考虑( ) A、患者感染病情 B、感染的病原菌种类 C、抗菌药作用特点 D、以上3项 2、胆汁中药物浓度最高的头孢菌素类药物是:( ) A.头孢曲松 B.头孢氨苄 C.头孢哌酮 D.头孢呋辛 3、下列情况有抗菌药联合用药指征( ) A、慢支急性发作 B、病原菌尚未查明的严重细菌感染 C、急性肾盂肾炎 D、急性细菌性肺炎 4、已经感染的病人使用抗菌药物针对感染进行治疗时,应该明确( ) A. 是否存在感染 B. 感染的部位及病原体 C. 病原体可能存在的耐药性 D. 以上都对 5、下列情况何种是预防用药的适应( ) A、昏迷 B、中毒 C、上呼吸道感染 D、人工关节移植手术

人参种植合同

林下参种植合作协议书 甲方: 住所: 身份证号码: 乙方: 住址: 身份证号码: 鉴于: 1、乙方为甲方种植林下参,乙方拥有经政府有关部门依法审批的参地证号为 号《林权证》或《农村土地承包经营权证》项下人参种植地亩,参地使用期限自年月日起至年月日止。 2、甲方为委托乙方种植、管护林下参的债权人。 3、合同中所称林下参定义:即林下人工播种山参式种子。自然生长10~20年以上,也称为籽海山参,年限越长,其价值也随之猛涨。其特点是芦长体灵,皮老纹深,须长而清疏;须上有珍珠疙瘩,形体特征可与野山参相媲美,以下简称林下参。 甲、乙方双方根据《中华人民共和国合同法》等法律、法规和规章的相关规定,本着互惠互利、诚实信用原则,经过充分协商,就人参种植合作项目达成协议,作为共同信守准则。 第一条合作项目 1、甲、乙双方确认,甲、乙双方将按照约定对甲方拥有的位于的参地,共计亩,按本协议约定进行林下参种植与管护的合作。 2、乙方承诺每亩林地种植参籽公斤,2010年11月已为甲方种植亩林下参,使用参籽公斤,甲方已于2010年11月份一次性支付乙方采购、种植及管护林下参各项费用合计人民币元。乙方保证林下参成活情况为每亩不低于肆仟棵。 3、乙方承诺每亩林地种植参籽公斤,2011年11月已为甲方种植亩林下参,使用参籽公斤,甲方已于2011年11月份一次性支付乙方采购、种植及管护林下参各项费用合计人民币元。乙方保证林下参成活情况为每亩不低于肆仟棵。 4、林地及林下参的出售及转让,必须在甲、乙双方达成一致后,以书面形式签订销售、转让协议后,方可进行出售及转让。 第二条权利及义务 (一)甲方权利及义务 1、甲方负责按双发约定,向乙方支付种植、管护林下参及所发生的参籽采购、种植费用。 2、甲方拥有所种林下参的全部所有权。 (二)乙方权利及义务 1、乙方与甲方合作种植人参所提供的参地应为经过政府有关部门合法审批并取得《农村土地承包经营权证》或《林权证》的土地、林地,且参地拥有的使用权、经营权年限足以保证双方合作种植人参的生长周期需要,保证不会因为参地权属和年限问题影响甲方的人参种植和收购。乙方应在本协议签署时向甲方提供参地使用权的相关证件复印件。 2、乙方须按协议要求,为甲方进行精心种植、管护林下参,保证林下参的成活情况为每亩不低于肆仟棵。

15生物化学实验琥珀酸脱氢酶的作用及丙二酸的抑制作用

琥珀酸脱氢酶的作用及丙二酸的抑制作用 【目的】 1 .掌握琥珀酸脱氢酶作用及丙二酸抑制作用的实验技术与原理。 2 .深化理解酶的竞争性抑制作用的特点。 【原理】 肌肉组织含有的琥珀酸脱氢酶是一种结合蛋白酶,以 FAD 为辅基。它能催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸, FAD 接受氢生成FAD·2H 。体外实验以美蓝 ( 甲烯蓝 ) 为受氢体,使美蓝还原生成美白 ( 甲烯白 ) 。其反应如下: 琥珀酸脱氢酶活性越高,美蓝脱色所需的时间越短,由于美白易被空气中的氧氧化成美蓝。故实验需在无氧条件下进行,可加一层液体石蜡以隔绝空气。 丙二酸与琥珀酸的化学结构很相似,能和琥珀酸竞争与琥珀酸脱氢酶结合,从而抑制琥珀酸的脱氢作用。其抑制程度与抑制剂和底物二者的浓度有关。本实验通过不同浓度的琥珀酸和丙二酸来观察丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制作用。 【器材】 1 .研钵与剪刀 2 .漏斗 3 .纱布 4 .恒温水浴 【试剂】 1 . 0.2mol/L 琥珀酸溶液 2 . 0.02mol/L 琥珀酸溶液 3 . 0.2mol/L 丙二酸溶液

4 . 0.02mol/L 丙二酸溶液 以上四种溶液均先用 5mol/L NaOH 溶液调至 pH7.0 ,再用 0.01mol/L NaOH 溶液调至 pH7.4 。直接用琥珀酸钠或丙二酸钠配制亦可。 5 . 1/15mol/L 磷酸盐缓冲液( pH7.4 ) 1/15mol/L Na 2 HPO 4 80.8ml 与 1/15mol/L KH 2 PO 4 19.2ml 混匀即可。 6 . 0.02% 美蓝溶液 7 .液体石蜡 【操作】 1 .肌肉提取液的制备 取用蒸馏水清洗过的新鲜动物肌肉组织约 10g ,置于研钵(或匀浆器)中,研磨成糜状,然后每克肌肉组织加 4 倍体积的冰冷的 pH7.4 1/15mol/L 磷酸盐缓冲液,混匀,用双层纱布过滤,取滤液备用。 2 .酶促反应 取试管 5 支,编号,按下表操作。 将上述各试管液混匀后,沿各管壁加入液体石蜡 5 ~ 10 滴,使其在液面形成一薄层以隔绝空气。置于37 ℃ 水浴中保温,记录各管保温开始时间及美蓝开始脱色的时间。 3 .计算并解释各管美蓝颜色变化原因。

合理使用抗生素的基本原则

合理使用抗生素的基本原则抗生素是治疗感染性疾病的主要药物,在临床医疗工作中占有重要地位。由于抗生素种类较多,临床应用也极为广泛,其使用的合理性与患者的康复及医院的医疗质量密切相关。但近年来由于应用不合理或滥用抗生素现象日见突出,几乎成为全球问题,我国有关专家多次呼呈,合理应用抗生素已成为当务之急。为了不断总结临床应用抗生素用药中一些基本规律,使抗生素的使用达到科学合理,确保用药的安全性和有效性,更好地发挥抗生素在救死扶伤的重要作用,本文就临床上合理应用抗生素必须掌握的几个基本原则,与医药同行进行商讨。 1正确选择原则 选择抗生素治疗的前提是必须明确病因诊断,目前用药偏滥、针对性差,主要是病因诊断做得不够造成的。正确估计致病菌,熟悉原发病的临床特点是合理应用抗生素的基础。对一些严重感染的患者,应尽一切努力寻找病原菌,在细菌培养及药敏结果未获得前,可根据病史和体格检查、病情变化和感染来源作出临床诊断,并根据临床经验选用抗生素。致病菌确定后,应根据药敏试验,及时调整抗生素。在选择抗生素时,应了解该药的抗菌作用、药代谢动力学及副作用,结合患者的具体情况选用,有条件

的医院,在治疗过程中,可测定血药杀菌浓度及进行血药浓度监测,以指导临床合理应用抗生素。总之,只有全面了解和分析机体的各种状态,从中找出抗生素应用中的一些基本规律,才能做到正确选药、合理应用、安全有效的原则。 2严格掌握适应证原则 抗生素的应用必须根据临床诊断,严格掌握适应证的原则,凡属可用可不用的尽量不用,切忌轻率和盲目地应用。对发热病人不能见热即用抗生素,应区别病因,是病毒性感染还是细菌性感染。对已确诊为病毒感染者,除重症乙型脑炎、重症肝炎、流行性出血热、麻疹等与预防继发感染而适当用抗生素外,其他病毒感染一般不必用抗生素。 3熟悉与恰当原则 熟悉药理学及体内药物代谢动力学过程,是合理用药的基础,同时要熟悉原发病的临床特点,注意个体差异及遗传特征差异选择用药。所谓恰当是指选择适当的剂量与给药方法。用药剂量正确与否关系甚大,用量恰当能治病,用量过小达不到治疗目的,过大则会危害人体健康。因此,在临床使用抗生素时,应尽早使用,剂量要恰当,避免长期使用。特别是在肝、肾功能减退的情况下,用药要更加慎重。给药途径的不同,不仅影响药物的剂量和

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