1.1972年，美国Berg和Jackso等人将猿猴病毒SV40基因组DNA，λ噬菌体基因以及大肠杆菌半乳糖操纵子在体外重组获得成功。
1973年，美国斯坦福大学的Cohen和Boyer等人在体外构建出含有四环素和链霉素，两个抗性基因的重组质粒分子，将之导入大肠杆菌后，该重组质粒得以稳定复制，并赋予受体细胞相应的抗生素抗性，由此宣告了基因工程的成立。
2.基因工程的三大要素：供体、受体、载体。
3.基因工程操作的基本步骤：
（1）切：从供体细胞中分离出基因组DNA，用限制性核酸内切酶分别将外源DNA（包括外源基因或目的基因）和载体分子切开。
（2）接：用DNA连接酶将含有外源基因的DNA片段接到载体分子上，构成DNA重组分子。
（3）转：借助于细胞转化手段将DNA重组分子导入受体细胞
（4）增：短时间培养转化细胞，以扩增DNA重组分子或使其整合到受体细胞的基因组中
（5）检：筛选和鉴定经转化处理的细胞，获得外源基因高效稳定表达的基因工程菌或细胞
4.基因工程的主体战略思想是外源基因的稳定高效表达
5.绝大多数分子克隆实验所使用的载体是DNA双键分子，其功能是：
（1）为外源基因提供进入受体细胞的转移能力
（2）为外源基因提供在受体细胞中的复制能力或整合能力
（3）为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力
6.野生型质粒具有下列基本特征：自助复制性，可扩增性，可转移性，不相容性
7.人工构建的载体质粒根据其功能和用途可分为下列几类：
（1）克隆质粒：用于克隆和扩增外源基因
（2）测序质粒：高拷贝复制，并含有多酶切口的接头片段，便于各种DNA片段的克隆与扩增
（3）整合质粒：含有整合酶编码基因以及整合特异性的位点序列，克隆在这种质粒上的外源基因进入受体细胞后，能准确地重组整合在受体染色体DNA的特定位点上
（4）穿梭质粒：能在两种不同种属的受体细胞中复制及检测
（5）探针质粒：用来筛选克隆基因的表达调控元件
（6）表达质粒：使得克隆在合适位点上的任何外源基因均能在受体细胞中高效表达
8.野生型质粒改造的指导思想是：
（1）删除不必要的DNA区域
（2）灭活某些质粒的编码基因，同时灭活那些对质粒复制产生负调控效应的基因，以提高质粒的拷贝数
（3）加入易于识别的选择标记基因，便于检测含有重组质粒的受体细胞（4）在选择性标记基因内引入具有多种限制性内切酶识别及切割位点的DNA 序列，同时删除重复的酶切位点
（5）根据外源基因克隆的不同要求，分别加装特殊的基因表达调控元件或用于表达产物亲和层析分离的标签编码序列
9.λ噬菌体是大肠杆菌的温和型噬菌体，由外壳蛋白与一个48.5kb长的双链线状DNA分子组成。λ-DNA的包装上限为50.9kb。
10.λ-DNA载体由于包装的限制，其外源DNA片段装载量最多只有23kb左右。
11.hsdR编码限制性核酸内切酶，它能识别DNA分子上的特定位点并将双链DNA切断；hsdM的编码产物是DNA甲基化酶，催化DNA分子特定位点上的碱基甲基化反应；而hsdS表达产物的功能则是协助上述两种酶识别特殊的作用位点。
12.多数Ⅱ类酶的识别序列为4、5或6个碱基对，而且具有180°旋转对称的回文结构。
13.绝大多数的Ⅱ类酶均在其识别位点内切割DNA，切割位点可发生在识别序列的任何两个碱基之间，一部分酶识别相同的序列，但切点不同，这些酶称为同位酶，其中识别位点与切割位点均相同的不同来源的酶称为同裂酶，有些酶识别位点不同，但切出的DNA片段具有相同的末端序列，这些酶称为同尾酶。
14.大肠杆菌的DNA连接酶在催化连接反应时，需要烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）作为辅助因子，NAD＋与酶形成酶-AMP复合物，同时释放出烟酰胺单核苷酸（NMN）。
15.T4噬菌体的DNA连接酶以ATP作为辅助因子。
16.T4-DNA连接酶由T4噬菌体编码，T4-DNA连接酶与大肠杆菌连接酶相比具有更广泛的底物适应性
17.Klenow酶实际上是大肠杆菌DNA聚合酶ⅠC端的大片段，首先由Klenow 通过枯草杆菌蛋白酶切点特异性降解的方法从DNA聚合酶Ⅰ中制备
18.S1核酸酶常用来切平突出的单链末端（单链的RNA、发夹结构中的环状部分）以及制作S1图谱。
19.碱性磷酸单酯酶来源于大肠杆菌和牛小肠
20.可将所有的Ⅱ类限制性核酸内切酶分为三大组，即低盐组（0~50mmol/LNaCl）、中盐组（50~100mmol/LNaCl）、高盐组（100~150mmol/LNaCl）
21.第Ⅱ类限制性核酸内切酶虽然具有特异性的识别位点及切割位点，但当酶解条件发生变化时，酶切反应的专一性可能会降低，导致同种酶识别多种序列，这种现象称为限制性核酸内切酶的星号活性。（条件变化可能是低盐、高PH（＞8）、甘油大量存在）
22.大多数限制性核酸内切酶可简单地在68℃保温10min灭活
23.T4-DNA连接酶催化的连接反应的缓冲系统组成为：50~100mmol/LTris-HCl（PH7.5），10mmol/LMgCl2，5mmol/LDTT以及≤1mmol/L的ATP。通常1国标单位（U）的T4-DNA连接酶定义为，在最佳缓冲系统及15℃、1h之内，完全连接1μgλ-DNA的HindⅢ片段所需的酶量24.大多数限制性核酸内切酶产生的黏性末端的Tm值在15℃以下，连接反应温度与时间常采用下列几种组合：15℃-2h，12℃-8h,7℃过夜。
25.重组率是指在连接反应结束后，含有外源DNA片段的重组分子数与所投入的载体分子数之比
26.提高重组率可采用以下方法：（P39）
（1）提高外源DNA片段与载体DNA的分子数之比
（2）在连接反应前，先用碱性磷酸单酯酶处理载体DNA，去除其5′端的磷酸基团
（3）在连接反应前，用TdT酶在载体分子的3′羟基末端聚合一段同种碱基的寡聚核苷酸
27.不同黏性末端的连接有四种类型：
（1）待连接的两种DNA分子都具有5′黏性末端
（2）待连接的两种DNA分子都具有3′黏性末端，Klenow酶对这种结构没有活性
（3）一种DNA分子具有3′端黏性末端，另一种DNA携带5′黏性末端（4）两种DNA分子均含有不同的两个黏性末端。通常用Klenow酶补平一种DNA分子的5′黏性末端，再用T4-DNA聚合酶切平3′黏性末端的另一端28.细菌转化的全过程包括五个步骤：1、感受态的形成2、转化因子的结合3、转化因子的吸收4、整合复合物前体的形成5、转化因子单链DNA的整合29.受体细胞的选择,通过诱变手段对野生型细菌进行遗传性状改造，使之具备下列条件：（1）限制性缺陷型（2）重组缺陷型（3）转化亲和型（4）遗传互补型（5）感染寄生缺陷型
30.细菌受体细胞的转化方法分述如下：（1）Ca2+诱导转化（2）PEG介导的细菌原生质体转化（3）电穿孔驱动的完整细胞转化（4）接合转化（5）λ噬菌体的转染
31.转化率是转化（包括感染）效率的评估指标，通常有两种形式表征转化率。一是在待转DNA分子数大于受体细胞数的条件下，转化细胞与细胞总数之比。转化率的另一种表示形式是在受体细胞数相对于待转化DNA分子数大大过量时，每微克DNA转化所产生的克隆数
32.转化率的影响因素：（1）载体DNA及重组DNA方面：不同载体DNA转化同一受体细胞，其转化率明显不同。载体分子的空间构想对转化率也有明显的影响，超螺旋结构的载体质粒具有较高的转化率；对于以质粒为载体的重组分子而
言相对分子质量大的转化率低（2）受体细胞方面：受体细胞除了具备限制性重组缺陷性状外，还应与所转化的载体DNA性质相匹配（3）转化操作方面：受体细胞的预处理或感受态细胞的制备对转化率影响最大
33.基于载体遗传标记的筛选与鉴定：（1）抗药性筛选法（2）营养缺陷型筛选法（3）显色模型筛选法（4）噬菌斑筛选法
34.转化子的选择主要是利用抗药性标记或营养缺陷性标记，PUC18/19和PSPORT1这两种质粒除了Lacz′外都含有Ap′选择标记基因。
35.基于克隆片段序列的筛选与鉴定：（1）PCR鉴定法（2）菌落原位杂交法（3）限制性酶切图谱法（4）亚克隆法（5）DNA序列测定法
36.菌落原位杂交法（又称探针原位杂交法）能从成千上万个转化子中迅速检测出期望重组子
37.最佳探针长度范围为100~1000kb，另外探针内部不能含有大面积的互补序列，否则会直接影响探针与DNA靶序列的杂交
38.探针标记有下列几种方法：（1）5′端标记法（2）反转录标记法（3）缺刻前移标记（4）ABC标记法
39.DNA的脱氧末端终止测序法的本质是在DNA聚合过程中通过酶促反应的特异性终止进行测序，反应的终止依赖于特殊的反应物2′，3′-双脱氧核苷三磷酸（ddNTP），它们与DNA聚合反应所需的底物2′-脱氧核苷三磷酸（dNTP）结构相同，唯独在其3′位是氢原子而非羟基。末端终止测序法的操作关键是ddNTP 与dNTP投料比例，两者较为理想的分子比在1:3~1:4之间
40.基于外源基因表达产物的筛选与鉴定：（1）蛋白质生物功能检测法（2）放射免疫原位检测法（3）蛋白凝胶电泳检测法
41.目的基因克隆的四大战略：（1）鸟枪法P75（2）cDNA法P79（3）PCR扩增法（4）化学合成法
42.标准鸟枪法操作程序如下：（1）目的基因组DNA片段的制备：①机械切割
②限制性内切酶部分酶解③特定限制性内切酶全酶解（2）外源DNA片段全克隆（3）期望重组子的筛选（4）目的基因的定位
43.常规的期望重组子筛选法均可用与cDNA重组克隆的筛选，其中较为理想的首推探针原位杂交法
44.报告基因：是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是说，是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因，如氯霉素乙酰基转移酶（CAT）等
45.含有启动子活性的DNA片段的分离大体上有下列三种方法：（1）鸟枪法克隆（2）酶保护法分离（3）滤膜结合法分离
46.应用最广泛的大肠杆菌天然启动子有四种，即P lac、P trp、P L、P recA基因
47.利用可控性的启动子调整外源基因的表达时序，即通过启动子活性的定时诱导，将外源基因的转录启动限制在受体细胞生长循环的某一特定阶段，是克服上述困难的有效方法
48.导致异源重组蛋白在大肠杆菌细胞中不稳定性的主要原因是：（1）大肠杆菌缺乏针对异源重组蛋白的折叠复性和翻译后加工系统（2）大肠杆菌不具备真核生物细胞完善的亚细胞结构以及众多的稳定因子（3）高效表达的异源重组蛋白在大肠杆菌细胞中形成高浓度微环境，致使蛋白分子间的相互作用增强
49.在某些生长条件下，大肠杆菌能积累某种特殊的生物分子，它们致密的集聚在细胞内，或被膜包裹或形成无膜裸露结构，这种结构称为包含体
50.高效表达重组异源蛋白的大肠杆菌所形成的包含体大部分存在于细胞质中，
它们基本上由蛋白质组成，其中大部分（占50%以上）是外源基因的表达产物，具有正确的氨基酸序列，但空间构象往往是错误的，因而没有生物活性。以包含体的形成表达重组异源蛋白，其显著的优点是简化了外源基因表达产物在大肠杆菌细胞内的分离纯化程序
51.包含体的形成机制（1）折叠状态的蛋白质集聚作用（2）非折叠状态的蛋白质集聚作用（3）蛋白质折叠中间体的集聚作用
52.包含体的分离主要包括菌体破碎、离心收集、清洗三大操作步骤
53.构建融合蛋白表达质粒必须遵循三个原则：（1）受体细菌结构基因应能高效表达，且其表达产物可以通过亲和层析进行特异性简单纯化（2）外源基因插在受体菌结构基因的下游区域，并未融合蛋白提供终止密码子（3）当两个蛋白编码序列融合在一起时，外源基因的表达取决于其正确的翻译阅读框架
54.融合蛋白的位点专一性断裂方法有两种：化学断裂法和蛋白酶酶促裂解法。用于蛋白质位点专一性化学断裂的最佳试剂为溴化氰（CNBr），它与多肽链中的甲硫氨酸侧链进行硫醚基反应，生成溴化亚氨内酯，后者不稳定。用蛋白酶裂解酶融合蛋白的前提条件是外源蛋白分子内部不能含有精氨酸，谷氨酸和赖氨酸。
55.为了克服这些仅识别并作用于单一氨基酸的蛋白酶所带来的应用局限性，可在受体菌蛋白编码序列与不含起始密码子的外源基因之间加装一段编码Ile-Glu-Gly-Arg寡肽序列的人工街头片段
56.寡居型异源蛋白的表达（1）多表达盒型重组（2）多顺反子型重组（3）多编码序列型重组
57.理想的变形剂应具备如下性质：（1）变性溶解速度快（2）对包含体中残留细
胞碎片的分离没有干扰（3）无温度依赖性（4）对蛋白酶具有抑制作用（5）对蛋白质中的氨基酸侧链基团无化学反应活性
58.二硫键的形成有两种机制：（1）化学氧化法（2）二硫键交换法
59.SSC显性突变基本上与基因的启动子和分泌信号功能无关，而SSC1和SSC2的隐性突变则具有一定程度的累加性
60.与原核细菌相比，酿酒酵母作为外源基因表达受体菌的一个突出优点是具有完整高效的异源蛋白修饰系统，尤其是糖基化系统。目前已从野生型的酿酒酵母中分离出许多类型的糖基化途径突变株，在这些突变株中，具有重要实用价值的是mnng,och1,och2,alg1和alg2。
61.几乎所有的酿酒酵母菌株中都存在一个6318bp的野生型ZU双链环状质粒。ZU质粒上共有4个基因:FLP,REP1，REP2，D,还含有3个顺式作用元件：ARS,REP3，FRT.
62.除了酿酒酵母外，其他几种酵母细胞内也含有野生型的相似质粒，如克鲁维酵母属中的PKD1质粒等。
63.乳酸克鲁维酵母细胞内含有两种不同的线状双链质粒PGKL1(8.9kb)和PGKL2（13.4kb）
64.酵母自助复制型载体质粒的构建主要包括引入复制子结构，选择标记基因，克隆位点三部分DNA序列
65.端粒区域的DNA为TEL序列
66.利用酵母的端粒TEL，CEN,ARS等DNA元件构建人工酵母染色体，可以克隆扩大片段的外源DNA，这是YAC载体构建的基本思路。YAC载体的装载是可高达800kb，因而非常适用于构建人的基因组文库
67.酵母的常规转化方法：（1）原生质球转化法（2）碱金属离子法（3）电穿孔转化法
68.用于酵母转化子筛选的标记基因主要有营养缺陷互补基因和显性基因两大类。显性标记基因的编码产物主要是干扰酵母受体细胞正常生长的毒性物质的抗性蛋白。
69.外源基因在酵母中表达的限制性因素：（1）稳定态mRNA的翻译活性（2）稳定态mRNA的半衰期长度（3）酵母tRNA与外源基因密码子的不匹配性（4）稳定态mBNA的浓度
70.生长迅速，AOX1基因的强启动子及其表达的可诱导性是巴斯德毕赤酵母作为外源基因表达受体的三大优势
71.除了信号肽序列及其构象特征外，受体细胞内信号肽剪切酶系的表达水平对异源蛋白的高效分泌也有很大影响。酿酒酵母中能用于促进异源蛋白高效分泌的信号肽序列并不多，它们只要来源于由MFα1基因编码的多肽性激素α因子，蔗糖酶（SOC2），可阻遏型酸性磷酸酯酶（PH05），杀手毒素因子（K1L）等，其中MFα1的信号肽序列最为常用。MFα1信号肽的氨基酸序列为Met-Arg-(LeuP)n-(X)-Ala-Leu-Gly
72.所谓的转基因通常是指在DNA操作过程中整合到动植物受体细胞染色体上的外源基因，含有转基因并为其遗传修饰了的动植物发育个体则称为转基因生物制品（GMO或TO）
73.动物转基因的表达特性：（1）转基因的时空特异性表达（2）转基因的可控性表达（3）转基因的共抑制效应
74.转基因导入动物体内的方法：（1）动物细胞物理转化法：①磷酸钙共沉淀法
②电击法③脂质体包埋法④DNA显微注射法（2）动物病毒转染法：①腺病毒②猴肿瘤病毒③牛痘病毒④反转录病毒（3）工程胚胎干细胞法，细胞能在培养基中体外增值，当把它们重新输回胚胎胚泡后，仍保留着分化成其他细胞（包括生殖细胞）的能力，这些细胞称为多效性胚胎干细胞（ES细胞）（4）体细胞转基因克隆法
75.动物细胞高效率表达异源蛋白的基本原理：（1）基因扩增（2）在表达载体上安装病毒或细胞来源的强启动子及有效的翻译起始信号
76.基因治疗的基本内容：基因诊断，基因分离，载体构建，基因转移
77.特异性抑制癌基因的表达方法：（1）反义RNA法（2）核酶法
78.野生型Ti质粒大小为200~800kb，其中与植物感染和致癌有关的T-DNA 区和vir区分别为12~24kb和35kb。T-DNA上含有3套基因tms,tmr,tmt,分别编码合成植物生长素，分裂素，生物碱和酶系。
79.首先构建含T-DNA区的根瘤农杆菌-大肠杆菌穿梭质粒，将外源基因，NPT Ⅱ基因和多克隆位点取代T-DNA上的tms,tmr和tmt基本组。
80.高等植物体内的聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶而使细胞壁破损，因而减少该酶的表达可有效防止蔬菜和水果的过早腐烂。
基因工程期末试题复习要点整理 基因工程是70年代出现的一门科学，是生物学最具生命力和最引人注目的前沿科学之一，是现代生物技术的代表，是生命科学类专业中的一门重要的专业课。本课程主要介绍基因工程概述、重组DNA基本技术及原理、基因克隆、基因的分离及鉴定、基因工程的表达系统、基因工程的应用等。通过本课程的学习，使学生掌握基因工程技术的基本原理和了解该技术在动物、植物和微生物等方面的应用，为今后从事生物学教学、生物技术研究和产品开发，或进一步的研究生学习科研打下坚实的理论及专业基础。扬州大学试题纸 一、名词解释：共10题，每题2分，共20分。 1. 基因: 是DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列，是遗传物质的最小功能单位。 2. 定位克隆: 获取基因在染色体上的位置信息，然后采用各种方法对该基因进行定位和克隆 3. 融合基因: 是指应用DNA体外重组技术构建的一类具有来自两个或两个以上的不同基因核苷酸序列的新型基因。 4. 转化子: 导入外源DNA后获得了新遗传标志的细菌细胞或其他受体细胞，又称重组体。 5. 人工接头：是人工合成的具有一个或数个特定限制性内切酶识别和切割序列的双股平端DNA短序列。 6. RT-PCR: 是指以mRNA在反转录酶作用下合成cDNA第一链为模板进行的PCR。 7. ORF : 起始于AUG、止于UAA、UGA、UAG的连续的密码子区域，是潜在的编码区。 8. MCS: 指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制核酸内切酶的酶切位点的DNA片段。 9. gene targeting : 基因工程中利用活细胞染色体DNA可与外源DNA的同源性DNA序列发生重组的性质，来进行定点修饰改造染色体上某一目的基因的技术 10. 5’RACE: 是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术，是以mRNA为模板反转录成cDNA第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点到5’端之间未知序列的方法。 四、简答题：共4题，共20分。 1．简述获得目的基因常用的几种方法。（5分）
贵州城市职业学院2014—2015学年度第二学期 本大题得（） 分 一、单选题（每题2分，共20分） 1. 1765年英国人（A ）发明了蒸汽机。 A.瓦特 B. 福特 C ?卡尔?本茨 D.古诺 2. 属于中国汽车自主品牌的是：（A ） A.红旗 B. 福特C .大众D. 起亚 3. 采用人字齿轮形状作为公司标志的汽车公司是：（C ） A.法国标致 B. 德国大众 C .法国雪铁龙 D.韩国现代 4. 第一家采用流水线生产方式的汽车企业是（B ）。 A.奔驰 B. 福特 C .法拉利 D.丰田 5. 活塞位于（A ）内 A.气缸 B. 曲轴箱 C .空气滤清器 D.飞轮 6. VIN 车辆识别代码共有（B ）位 A. 15 B. 17 C . 20 D. 25 7. 柴油机是由（B ）发明的 A.奥托 B. 狄塞尔 C .雷诺尔 D. 古诺 8. “多功能汽车”的英文简写是（B ） A. SUV B. MPV C . 4WD D. RV 9. 斯巴鲁SUBAR 的含义是（A ） A.昂星宿 B. 龙卷风 C .流星 D.银河系 10. 东风汽车标记是一对（B ） A.树叶 B. 飞燕 C .鱼鳍 D.羽毛 : 号位座 :名姓 :号学 :级班 ? ? 业专《汽车文化》期末考试（A ） 试卷命题人：王丰 任课老师：王丰
本大题得（）分 二、填空题（每空1分，共30分） 1.汽车史上的四次大变革是：第一次流水线生产方式_______ 、第二次汽车产品多样 性 _____ 、第三次精益的生产方式、第四次汽车工业走向世界。 2.至1966年，我国汽车工业已形成第一汽车制造厂、南京汽车制造厂、上海汽车制造厂、济南汽车制造厂、北京汽车制造厂五个汽车生产基地，基本填补了汽车类型的空白。 3.汽车的主要性能指标有动力性、燃油经济性、制动性、操纵稳定性、行驶平顺性、 排放污染物和噪声。 4.汽车主要是由发动机、底盘、车身、电气设备四大部件组成。 5.四冲程汽油机的一个工作循环包括四个行程，进气、压缩、做功、排气。 6.按传动介质分，汽车传动系的形式有机械传动、液力传动、液压传动、电传动。 7.两位德国人卡尔?本茨、戈特利布?戴姆勒被誉为现代汽车之父。 8.确定汽车外形有三个因素，包括机械工程学、人机工程学、空气动力学。 本大题得（）分 三、判断题（只判断正误）（每题1分，共10分） 1.在我国，拖拉机和摩托车属于汽车的范畴。（x ） 2.按我国规定，中型客车的车长划分为 3.5米v L V 7米。（x ） 3.美国福特汽车公司生产出T型车，又在世界上首推流水线装配汽车的方式。（V ） 4.发动机由曲轴连杆机构、配气机构、燃料供给系、传动系、润滑系、冷却系、和起动系组 成。（x ） 5.宝马的英文缩写是BMU （X ）
英语期末考试----12月26日 （一）题型： 1.听力(10个短对话&2个短篇文章--10个问题) 2.阅读（3篇，其中一篇从第二册快速阅读的1--5单元中出） 3.单词（3，4，6单元A课文课后练习中vocabulary&word-building） 4.完型 5.翻译（3，4，6单元A课文课后练习中汉译英部分；以及3，4，6A课文中一段的段落进行英译汉） （二）单词&短语 1. I firmly believe that this agreement will be for our mutual benefit. 我坚决相信这份协议有利于我们的共同利益。 1.People have bought these houses under the illusion that their value would just keep on rise. 人们买房子是基于它们会增值这种幻象。 2.The project has been canceled by the local government for lack of public resources. 由于缺乏公共资源，当地政府取消了这个项目。 3.The clerk must have overlooked your name, because he said you were not here. 书记员一定是漏掉了你的名字，因为他说你不在这。 4.The speaker said something about the actors and then proceeded to talk
about the film. 发言人说了一些演员的事情，然后继续介绍电影。 5.Differences of opinion are often the most difficult problem to resolve. 如何处理各种不同的意见是最难解决的问题。 6.When he looked for a job, John strongly felt that there was a widespread prejudice against men over forty. 在找工作的过程中，约翰强烈的感觉到针对年过四十的男性的那种歧视。 7.Children should be encouraged to reach a compromise between what they want and what others want. 应该鼓励孩子们在他们自己和他人的所想所愿中找到折中点。 8.The discovery seems to confirm that people lived here over 100 years ago. 这个发现印证了此处一百多年前有人居住。 9.The book was first published in 1994 and was subsequently translated into fifteen languages. 这本书首次出版于1994年，而后被译成15种语言。 10.Mind your own business. My affairs have nothing to do with you. 管好你自己吧。我的事与你无关。 11.Having worked in the company for two years, Mr. Smith is now taking care for marketing and public relations. 在公司工作两年后，史密斯先生如今负责市场营销和公共关系。
基因工程 一名词解释 DNA，1、限制与修饰系统：限制酶的生物学功能一般被认为是用来保护宿主细胞不受外源DNA的感染，可讲解外 来 从而阻止其复制和整合到细胞中。一般来说，与限制酶相伴而生的修饰酶是甲基转移酶，或者说是甲基化酶，能保护 自身的 DNA不被讲解。限制酶和甲基转移酶组成限制与修饰系统。 2、各种限制与修饰系统的比较 Ⅱ型Ⅰ型Ⅲ型 识别位点4~6bp，大多为回文序列二分非对称5~7bp 非对称 切割位点在识别位点中或靠近识别位点无特异性，至少在识别位点外100bp 识别位点下游 24~26bp 简答 1. 何谓 Star activity？简述Star activity的影响因素及克服方法？ 答：在极端非标准条件下，限制酶能切割与识别序列相似的序列，这个改变的特征称为星星活性。 pH 引起星星活性的的因素：①高甘油浓度（>5%）；②酶过量（ >100U/μl ）；③低离子强度（ <25mmol/L）；④高(> ；⑤有机溶剂如DMSO （二甲基亚砜）、乙醇、乙二醇、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺等；⑥用其它二价阳离子 星星活性的抑制措施：①减少酶的用量，避免过量酶切，减少甘油浓度；②保证反应体系中无有机溶剂或乙醇；③提高离子强度到100 ～ 150mM（在不抑制酶活性的前提下）；④降低反应pH至；⑤使用Mg2+作为二价阳离子。 2. 试回答影响限制性内切核酸酶切割效率的因素？（影响酶活性的因素？） 答：外因：反应条件、底物纯度（是否有杂质、是否有盐离子和苯酚的污染）、何时加酶、操作是否恰当，反应体系的选择、反应时间的长短 内因：星星活性、底物甲基化、底物的构象 3、 DNA末端长度对酶切割的影响 答：限制酶切割 DNA 时，对识别序列两端的非识别序列有长度要求，也就是说在识别序列两端必须要有一定数量的 核苷酸，否则限制酶将难以发挥切割活性。在设计PCR引物时，如果要在末端引入一个酶切位点，为保证能够顺利切 割扩增的 PCR产物，应在设计的引物末端加上能够满足要求的碱基数目。一般需加 3 ～4 个碱基对。 4、何为载体？一个理想的载体应具备那些特点？ 答：将外源 DNA 或目的基因携带入宿主细胞的工具称为载体。载体应具备：①在宿主细胞内必须能够自主复制（具 备复制原点）；②必须具备合适的酶切位点，供外源DNA 片段插入，同时不影响其复制；③有一定的选择标记，用于 筛选；④其它：有一定的拷贝数，便于制备。 5 抗性基因（ Resistant gene）是目前使用的最广泛的选择标记，常用的抗生素抗性有哪几种？并举两例说明其原理？ 答：氨苄青霉素抗性基因（ ampr）、四环素抗性基因（tetr ）、氯霉素抗性基因（ Cmr）、卡那霉素和新霉素抗性基因（ kanr , neor ）以及琥珀突变抑制基因supF 。 ⑴青霉素抑制细胞壁肽聚糖的合成，与有关的酶结合，抑制转肽反应并抑制其活性。氨苄青霉素抗性Ampr 编码一个酶，可分泌进入细胞的周质区，并催化β - 内酰胺环水解，从而解除氨苄青霉素的毒性。 ⑵四环素与核糖体 30S 亚基的一种蛋白质结合，从而抑制核糖体的转位。 Tetr 编码一个由 399 个氨基酸组成的膜 结合蛋白，可阻止四环素进入细胞。 6. 何为α - 互补？如何利用α - 互补来筛选插入了外源DNA 的重组质粒？ 答：α - 互补指 lacZ 基因上缺失近操纵基因区段的突变体与带有完整的近操纵基因区段的β - 半乳糖苷酶阴性的突变体之间实现互补。α - 互补是基于在两个不同的缺陷β－半乳糖苷酶之间可实现功能互补而建立的。实现α- 互补主要有两部分组成：LacZ △ M15 ，放在 F 质粒或染色体上，随宿主传代；LacZ' ，放在载体上，作为筛选标记，当在 LacZ' 中插入一个片断后，将不可避免地导致产生无α- 互补能力的β－半乳糖苷酶片断。在诱导物IPTG 和底物 X-gal （同时可作为生色剂）的作用下，含重组质粒的菌落不能产生有活性的β－半乳糖苷酶，不能分解 X-gal ，呈现白色，而含非重组质粒的菌落则呈现兰色。以此达到筛选的目的。 7、试简述λ噬菌体的裂解生长状态Lytic growth 和溶原状态 Lysogenic state 两种循环的分化及其调节过程？ 答：裂解生长状态是λ噬菌体在宿主中大量复制并组装成子代λ噬菌体颗粒，导致宿主细胞裂 解。溶原状态为λ噬菌体基因组 DNA 通过位点专一性重组整合到宿主染色体DNA 中随宿主的繁殖传到子代细胞。调节过程：由感染复数
2013-2014年度第二学期基因工程期末考试 卷型：A 考试时间：90分钟满分：100分 一、名词解释（3×5） 限制性内切酶(或其它工具酶)：能在特异位点上催化双联DNA分子断裂，产生相应的限制性DNA片段 荧光定量PCR:所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法 （半定量PCR:是近年来常用的一种简捷、特异的定量RNA测定方法，通过mRNA反转录成cDNA，再进行PCR扩增，并测定PCR产物的数量，可以推测样品中特异mRNA的相对数量） 星活性：非标准条件下切割相似序列，产生非特异性片段 同裂酶（或同尾酶）：来源不同但具有相同识别序列，产生相同或不同末端 转基因技术（或转基因动植物等）：就是将人工分离和修饰过的基因导入到目的生物体的基因组中，从而达到改造生物的目的。 二、填空（1×15） 1.Cosmid 实际上是由cos 位点和质粒构成的杂合载体，也可以说是带有cos 序列的质粒。 2.超螺旋质粒DNA、开环质粒DNA、线状质粒DNA 在琼脂糖凝胶电泳的特点是：电泳的泳动速度由大到小分别是：超螺旋质粒>线状质粒>开环质粒。 3.质粒DNA的提取方法有碱裂解法、煮沸法、去污法。 4.基因工程中常用载体是质粒、噬菌体、动植物病毒。
5.设计引物是一般要求C+G的比例在40%-60%，长度在17-30bp 。 6.BAC载体与常规载体的区别在于复制单元的特殊性。 三、选择题（2×15，实卷应是1×35） 1.基因工程创始人（D） A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen 2.迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于（C） A. 既可以作用于双链DNA ，又可以作用于单链DNA B.只能作用于单链DNA C. 只能作用于双链DNA D.只能作用于RNA 3.氨苄青霉素的工作原理为（A ） A.可以抑制细胞壁肽聚糖的合成 B.可以抑制核糖体的转位 C.可以与核糖体50S 亚基结合并抑制蛋白质合成 D.可以与核糖体30S 亚基结合并抑制蛋白质合成 4.反转录酶是一种（C ） A. 依赖DNA的DNA聚合酶 B. 依赖DNA的RNA聚合酶 C. 依赖RNA的DNA聚合酶 D. 依赖RNA的RNA聚合酶 5.II 类限制性内切核酸酶( A ) A．仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供 B．限制性识别非甲基化的核苷酸序列 C．有外切核酸酶和甲基化酶活性
江西省井冈山经贸学校2014—2015第二学期 15汽修（3）班《汽车文化》期末考试题 注意事项： 1、考生应严格遵守考场规则，得到监考人员指令后方可答题。 2、考生拿到试卷后应首先填写密封线内各项内容（准考证号、姓名、学校），不得填出密封线外，同时把座位号填写在试卷右上角座位号栏内。 3、用蓝、黑色圆珠笔或钢笔把答案直接写在试卷上。 4、注意字迹清楚，保持卷面整洁。 5、考试结束将试卷放在桌上，不得带走。待监考人员收毕清点后，方可离场。 一、填空题 ：（每小题 1 分，共计 20 分） 1、 汽车诞生在 年。 2、 世界上第一条汽车流水装配线是在 国。 3、 被誉为赛车之父的是 。 4、 德国奥迪汽车公司原来是由 家公司合并而成。 5、 发明子午线轮胎的公司是 。 6、 中国唯一符合FIA 国际标准的F1赛道在 。 7、 世界上最著名的勒曼24小时汽车耐力赛举办地点是在 。 8、 世界上累计产量最高的汽车是 。 9、 SUV 是 汽车。 10、 现代汽车鼻祖是本茨及 。 11、 世界上最大的汽车城是美国的 。 12、 宝马的英文缩写名称是 。 13、 客车的车辆类别代号是 。 14、 我国汽车报废标准规定，家用轿车的使用年限为 年。 15、 VIN 车辆识别代码共有 位。 16、 汽油的辛烷值越高，其 越好。 17、 自动变速器上N 代表 。 18、 排气管“放炮”的主要原因有 。 19、 电控汽油机大多采用 点喷射。 20、 最新的汽车分类标准将汽车分成 商用车和 车两大类。 二、单选题 ：（每题 2 分，共计 60 分） 1的驱动形式是 。 A 、FR B 、FF C 、RR 2、 兰博基尼在创建初期生产什么 。 A 、飞机 B 、农用机械 C 、自行车 3、 最注重汽车安全性的汽车厂商是 汽车公司 。 A 、沃尔沃 B 、奔驰 C 、通用 4、 ABS 是 的缩写。 A 、 全球卫星定位系统 B 、电子防抱死制动系统 C 、汽车驱动防滑驱动系统 5、 GPS 是 A 的缩写。 A 、 全球卫星定位系统 B 、全球监测系统 C 、全球导航系统 6、 保时捷的创立者，甲壳虫的设计者是 。 A 、 菲迪南德.波尔舍 B 、菲迪南德.雷诺 C 、菲迪南德.费雷 7、 舒马赫夺得过 F1冠军 。 A 、 6 B 、5 C 、7 8、 转子发动机的发明人的国籍是 。 A 、日本 B 、德国 C 、 美国 9、 F1大奖赛全年共有 站。 A 、17 B 、16 C 、15 10、 ESP 是 的缩写。 A 、主动式车身悬挂系统 B 、电子动态稳定系统 C 、电子感应刹车控制系统 11、“MPV ”是 的英文缩写。 A 、高级房车 B 、运动型多用途车 C 、多用途厢式车 12、奥兹莫比尔是 汽车公司的品牌。 A 、克莱斯勒 B 、通用 C 、奥迪 13、Seat 品牌属于 国家。 A 、美国 B 、意大利 C 、西班牙 14、第一个ABS 系统的制造商是 。 A 、博世 B 、西门子 C 、德尔福 15、最早的电动汽车 。 A 、1847年，美国的法莫(M.Farmer)制造了第一辆无导轨蓄电池为动力的电动汽车 B 、1880年，法国的卡米?福尔最先制造出利用蓄电池作动力的、实用的电动汽车、 C 、 ，中国武汉理工大学研制的混合动力电动汽车 16、我国生产的第一辆汽车叫 。 A 、民生牌 B 、 民族牌 C 、民权牌 学校： 班级： 姓名： 学号： 身份证号： ……………………………装………………………订………………………线…………………………………
题型： 1.填空题5题 填空题 2.名词解释4题 3.问答题4题 4.计算作图题3题 5.综合计算题1题 备注1：没有整理第一章和第六章，老师说不考的 备注2：非线性判别函数相关概念P69 概率相关定义、性质、公式P83以后 最小错误率贝叶斯决策公式P85 最小风险贝叶斯P86 正态贝叶斯P90 综合计算有可能是第六次作业 一、填空题 物以类聚人以群分体现的是聚类分析的基本思想。 模式识别分类：1.从实现方法来分模式识别分为监督分类和非监督分类；2.从理论上来分，有统计模式识别，统计模式识别，模糊模式识别，神经网络模式识别法 聚类分析是按照不同对象之间的差异，根据距离函数的规律做模式分类的。 模式的特性：可观察性、可区分性、相似性 模式识别的任务：一是研究生物体（包括人）是如何感知对象的，二是如何用计算机实现模式识别的理论和方法。 计算机的发展方向：1.神经网络计算机－－模拟人的大脑思维；2.生物计算机－－运用生物工程技术、蛋白分子作芯片； 3.光计算机－－用光作为信息载体，通过对光的处理来完成对信息的处理。 训练学习方法：监督学习、无监督学习（无先验知识，甚至类别数也未知）。 统计模式识别有：1.聚类分析法（非监督）；2.判决函数法/几何分类法(监督)；3.基于统计决策的概率分类法 - 以模式集在特征空间中分布的类概率密度函数为基础，对总体特征进行研究，以取得分类的方法 数据的标准化目的：消除各个分量之间数值范围大小对算法的影响 模式识别系统的基本构成：书P7 聚类过程遵循的基本步骤：特征选择；近邻测度；聚类准则；聚类算法；结果验证；结果判定。 相似测度基础：以两矢量的方向是否相近作为考虑的基础,矢量长度并不重要。 确定聚类准则的两种方式：阈值准则，函数准则 基于距离阈值的聚类算法——分解聚类：近邻聚类法；最大最小距离聚类法 类间距离计算准则:1）最短距离法2）最长距离法3）中间距离法4）重心法5）类平均距离法6）离差平方和法P24 系统聚类法——合并的思想 用于随机模式分类识别的方法，通常称为贝叶斯判决。 BAYES 决策常用的准则：最小错误率；最小风险 错误率的计算或估计方法：①按理论公式计算；②计算错误率上界；③实验估计。
5 高二生物《基因工程和细胞工程》测试题姓名班级 （时间：90分钟分数：100分） 一．选择题（本大题包括25题，每题2分，共50分。每题只有一个选项符合题意。） 1．以下说法正确的是（） A.所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B．质粒是基因工程中惟一的运载体 C．运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接D．质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 2．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不．相符的是（） A．纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理——酶的专一性 B．植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C．植物体细胞杂交和动物细胞融合——生物膜的流动性 D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂 3．有关基因工程的叙述正确的是（） A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可作运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 4．能克服远缘杂交障碍培育农作物新品种的技术是（） A.基因工程 B.组织培养 C.诱变育种 D.杂交育种 5．下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A．培养人的效应T细胞能产生单克隆抗体 B．培养人的B细胞能够无限地增殖 C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞 6．PCR技术扩增DNA,需要的条件是( ) ①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体 A、①②③④ B、②③④⑤ C、①③④⑤ D、①②③⑥ 7．以下对DNA的描述，错误的是（） A.人的正常T淋巴细胞中含有人体全部遗传信息 B.同种生物个体间DNA完全相同 C.DNA的基本功能是遗传信息的复制与表达 D.一个DNA分子可以控制多个性状 8. 蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（） A.氨基酸结构 B.蛋白质空间结构 C.肽链结构 D.基因结构 9．细胞工程的发展所依赖的理论基础是（） A.DNA双螺旋结构模型的建立 B.遗传密码的确立及其通用性的发现 C.生物体细胞全能性的证明 D.遗传信息传递的“中心法则”的发现 10．下列不是基因工程中的目的基因的检测手段的是：（） A.分子杂交技术 B.抗原—抗体杂交 C.抗虫或抗病的接种 D.基因枪法 11．在以下4种细胞工程技术中，培育出的新个体中，体内遗传物质均来自一个亲本的是（） A.植物组织培养 B. 单克隆抗体 C. 植物体细胞杂交 D.细胞核移植 12．动物细胞融合与植物细胞融合相比特有的是（） A.基本原理相同 B.诱导融合的方法类 C.原生质体融合 D.可用灭活的病毒作诱导剂 13．下列哪一项属于克隆（） A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内 C．将鼠骨髓细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞
华东理工大学2004–2005学年第二学期 《基因工程》课程期末考试试卷B2005.6 开课学院：生物工程学院，考试形式：开卷，所需时间：120分钟 考生姓名：学号：专业：班级 一、问答题（共15分） 某表达质粒上含有一个能在大肠杆菌中可溶性表达的基因A，若将外源基因B插入到基因A的3' 末端，使之产生可溶性融合蛋白A-B，试设计合理的重组方案。（15分） ___ 起始密码子 A 基因全序列ATGATCGGGATTCGCTGGGATAAAGTGCACCTCAATATAGCACACGCTTGCAACGCAAAGAGC CCCGATTTCTGTAACCGCCAGCACAAAGATGCGGAACACCCAAAAGTGGCGGCAAACGCCTTC AACCGGATCCCGGGATATCAGCTGAGATCTGCTTTCTAG ___ 终止密码子 ___ 起始密码子 B 基因部分序列TCCCGGGATCCATGCTC.........................CGCTAAGAGGATCCTCCCGGGT ___ 终止密码子 BamHI：G\GATCC BglII：A\GATCT EcoRV：GAT\ATC EcoRI： G\AATTC SmaI：CCC\GGG PvuII：CAG\CTG 二、问答题（共15分） 简述基因洗牌术（DNA Shuffling）的工作原理及用途。 三、问答题（共10分） 为什么说多型汉逊酵母表达系统有可能比巴斯德毕赤酵母表达系统更优越？
四、问答题（共20分） 人促红细胞生长素（EPO）系一糖蛋白，其生物活性严格依赖于糖基侧链的序列和大小，临床上主要用于改善癌症患者由于放疗化疗所引起的红细胞降低症侯群。试设计一种高产人EPO的重组表达系统，内容包括： （1）选择合适的受体系统，并说明理由；（6分） （2）选择合适的载体系统，并说明理由；（6分） （3）确定合适的高效表达方案，并简述其机制。（8分） 五、问答题（共20分） 随着植物转基因技术的日趋成熟，世界范围内被批准上市的转基因农作物也不断涌现，然而人们对转基因产品的安全性仍有争论，至少他们要求对餐桌上的食物是否由转基因植物加工而成拥有知情权。为此，建立一种能区分转基因植物和天然植物的检测方法十分重要。目前，世界各国批准上市的转基因植物种类繁多，但绝大多数使用花椰菜花斑病毒（CaMV）的35S启动子。请设计一种能快速灵敏地检测转基因植物的实验程序，并简述其机制。 六、问答题（共20分） 下图是链霉菌的某段DNA序列，试分析其可能的开放阅读框（ORF），并写出： （1）N端10个氨基酸序列；（7分） （2）C端10个氨基酸序列；（7分） （3）潜在的SD序列。（6分） 5’CGCTTGAATTCGTTCCATCTGGAGTCTGTACATGACCAGCCGATACGGCAGCCGGCAGGAACT CGGCCAGAAGTTCCTCGTCGACCCCGACATCATCAAGCTGATACGCCGAGCCGCCGAACGAACGG AAGGTCCCATCGTTGATCTGGGCGCCGGAGACGGCGCCCTGACGCTGCCCTTGAGTCGATTGGGC CGCCCTGTCACCGCGGTTGAGCTCGATCCCCGCCGGGTCAAACGGCTTTCGGCGCGTGCCCCGGA AAACGTCAAGGTCGTCGGCGAGGACATTCTGCGCTTTCGGCTTCCGACCGTTCCGCACACCGTCG TGGGGAACATCCCCTTCCATGTCACGACGGCCACGATGCGCCGGATCCTGGTGGCTCCCGCATGG GTGTCGGCCGTCCTCGTGGTGCAGTGGGAAGTGGCGCGCCGCCGGGCCGGCATCGGCGGCTGCTC GCTGGTCACGGCGGAGTCCTGGCCGTGGTTCGACTTCTCGGTGCTCAAGCGGGTGCCGAGGTTCG CCTTCCGGCCCGCGCCCTCCGTGGACGGCGGGATCCTCGTCATCGAGCGGCGGCCCGAGCCACTG GTGCGGGAGCGCAGGGAGTACCAGGACTTCGTCAGACAGGTCTTCACCGGGCGCGGTCACGGGCT GCGGGAGATCCTCCAACGCATCGGGCGGGTCCAGGACAGCGACCTGTCCGCGTGGTTCAGGGCAC ATGGAGTCTCGCCGCAGGCGCTGCCGAAGGACCTCACCGCCGAGCAGTGGGCGTCGCTCTGGGGC ATGGCGCGTGGCGGCCGGTCCGTGCCGCGGACGCGGATACTCCGGGACCTGCCGCACCGCACGTC CCTCGGGCCGCGGCGCAACAGCGGCTGACGCGGGCGGCAACCGGCGTGGCGGGCCGG 3’
2017—2018第一学期 17春汽修班《汽车文化》期末考试题 注意事项： 1、考生应严格遵守考场规则，得到监考人员指令后方可答题。 2、考生拿到试卷后应首先填写密封线内各项内容（准考证号、姓名、学校），不得填出密封线外，同时把座位号填写在试卷右上角座位号栏内。 3、用蓝、黑色圆珠笔或钢笔把答案直接写在表格里。 4、注意字迹清楚，保持卷面整洁。 5、考试结束将试卷放在桌上，不得带走。考试时间90分钟。 判断题： 选择题： 一、判断题 ：（每题 2 分，共计 40 分） 1、F1赛车发动机的冷却是靠水来冷却的。 （ ） 2、美国通用汽车公司创建于1908，创建人是威廉.C 杜兰特 （ ） 3、大众汽车公司主要有大众和奥迪两大品牌。 （ ） 4、本次和戴姆勒发明的汽车都采用柴油机 （ ） 5、1895年，法国的米其林兄弟制造出了用于汽车的充气轮胎 （ ） 6、美国第一大汽车公司是福特汽车公司 （ ） 7、福特汽车公司生产的T 型汽车是世界第一条流水线装配而成的汽车。 （ ） 8、爬坡试验包括最大爬坡度与爬长坡以及动力三项试验。 （ ） 9、德国工程师卡尔本次发明了在世界上第一辆摩托车。 （ ） 10、世界上第一辆吉普车是由美国班特姆公司制造。 （ ） 11、汽车是用内燃机作为动力，主要在公路上或马路上行驶的交通工具，通常有4个或4个以上的橡胶轮胎，用来运载人或货物。 （ ） 12、汽车电气设备由车身和发动机组成。 （ ） 13、1956年7月，国产第一辆“解放”牌4t 载货汽车在第一汽车制造厂诞生。“一汽”也因此被誉为中国汽车工业的摇篮。 （ ） 14、所有的宝马轿车都是后轮驱动。 （ ） 15、马自达以其辉煌的技术创新历史而自豪，尤其以转子发动机为代表。 （ ） 16、汽车噪音的主要来源有两个方面，一是发动机，另一个是喇叭。 （ ） 17、太阳能汽车使用太阳能电池把光能转化成电能储存在蓄电池中，用蓄电池来推动汽车。( ) 18、白色的汽车发生交通事故的几率远高于黑色汽车。 （ ） 19、未来小客车的造型必然是在鱼形车的基础上加以改进。 （ ） 20、方程式汽车赛项目只有F1。 （ ） 二、选择题 ：（每题2分，共计40 分） ( )。 A 、凯迪拉克 B 、地球 C 、水星 D 、 雪佛兰 2.( )成功地创造了一整套现代公司组织管理体系。 A 、 阿尔佛雷德 斯隆 B 、 丰田喜一郎 C 、 威廉 杜兰特 D 、威廉姆 迈巴赫 3.我国第一辆轿车是（ ）。 A 、红旗CA770高级轿车 B 、解放牌轿车 C 、SH760中级轿车 D 、东风牌轿车 年一级方程式汽车大赛中国大奖赛在（ ）赛道举行。 A 、北京 B 、上海 C 、广州 D 、大连 5.世界上最早组织汽车比赛的国家是（ ）。 A 、法国 B 、英国 C 、美国 D 、中国 年美国克莱斯勒的（ ）小客车，首次采用流线形车身。 A 、气流牌 B 、和风牌 C 、甲壳虫 D 、顺风牌 7.汽车排放造成的大气污染会破坏（ ），从而造成太阳辐射过强，也会导致出现高温天气。 A 、臭氧层 B 、对流层 C 、大气层 D 、电离层 8.氢气汽车指用（ ）的汽车 学校： 班级： 姓名： 学号： 身份证号： ……………………………装………………………订………………………线…………………………………
一、名词解释 1、分子生物学 2、基因工程 3、DNA的变性与复性 4、细胞学说 5、遗传密码的简并性 6、DNA半保留复制、半不连续复制 7、SD序列 8、开放阅读框（ORF） 9、多顺反子 10、蓝白斑筛选 11、中心法则 12、限制修饰系统 13、断裂基因 14、单链结合蛋白 15、核酶 16、密码子家族 17、TA克隆 18、PCR 19、SNP 20、操纵子学说 21、DNA重组技术 22、减色效应-增色效应 23、可变剪接 24、反转录 25、同尾酶 26、加帽反应 27、蓝白斑筛选 28、表观基因组学 29、DNA的溶解温度 30、DNA的大C值 31、重叠基因 32、引物酶 33、逆转录 34、限制性内切酶 35、载体的选择标记 36、DNA甲基化
37、端粒 38、端粒酶 39、前导链 40、启动子 41、反式作用因子 42、同义密码子 43、多克隆位点（MCS） 44、基因组计划 45、C值悖论 46、顺式作用元件 47、胸腺嘧啶二聚体 48、寄主的限制修饰现象 49、拓扑异构酶 50、DNA的溶解 51、拓扑异构体 52、间隔基因 53、假基因 54、同源异型蛋白 55、翻译 56、多重PCR 57、抗终止作用 58、SD序列 59、空载tRNA 60、cDNA RACE 61、分子杂交 62、cDNA文库 63、载体 64、RT-PCR 65、反义RNA 66、延伸tRNA 67、起始tRNA 68、探针 69、反式剪接 70、增强子 71、动物基因工程 72、基因组 73、限制性内切酶 74、单顺反子
75、密码子 76、转录 77、RNA干扰 78、中心法则 79、回环模型 80、TATA box 81、前导链 82、目的基因 83、RFLP 84、RACE 二、判断 1、大肠杆菌DNA生物合成中，DNA聚合酶I主要起聚合作用。( ) 2、DNA半保留复制时，后随链的总体延伸方向与先导链的延伸方向相反。( ) 3、原核生物DNA的合成是单点起始，真核生物为多点起始。（） 4、以一条亲代DNA(3’→ 5’)为模板时，子代链合成方向5’→ 3’，以另一条亲代DNA链 5’→ 3’为模板时，子代链合成方向3’→ 5’。（） 5、RNA的生物合成不需要引物。（） 6、大肠杆菌RNA聚合酶全酶由4个亚基（α2ββ’）组成。( ) 7、大肠杆菌在多种碳源同时存在的条件下，优先利用乳糖。 ( ) 8、在DNA生物合成中，半保留复制与半不连续复制指相同概念。（） 9、逆转录同转录类似，二者均不需要引物。（） 10、真核生物染色体核心组蛋白的乙酰化、组蛋白H1的磷酸化，都会使基因得以失活。（） 11、在原核细胞中，起始密码子AUG可以在mRNA上的任何位置，但一个mRNA上只有一个起 始位点。( ) 12、蛋白质生物合成过程中，tRNA在阅读密码时起重要作用，他们的反密码子用来识别mRNA上的密码子。( ) 13、表观遗传效应是不可遗传的。( ) 14、cAMP与CAP结合、CAP介导正性调节发生在有葡萄糖及cAMP较高时。( ) 15、DNA甲基化永久关闭了某些基因的活性，这些基因在去甲基化后，仍不能表达。 （） 16、RNA聚合酶催化的反应无需引物，也无校对功能。( ) 17、基因是存在于所有生命体中的最小遗传单位 18、人类基因组中大部分DNA不编码蛋白质 19、蛋白质生物合成过程中，tRNA在阅读密码时起重要作用，他们的反密码子用来识别 mRNA上的密码子。 ( )
基因工程期末考试重点知识整理
基因工程 第一章基因工程概述 1、基因工程的概念(基因工程基本技术路线PPT) 基因工程（Gene Engineering）,是指在基因水平上的遗传工程,它是用人为方法将大分子(DNA)提取出来,在离体条件下用适当的工具酶进行切割后,把它与作为载体的DNA分子连接起来,然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源遗传物质在其中“安家落户”,进行正常的复制和表达,从而获得新物种的一种崭新的育种技术. 2、基因工程的历史 基因工程准备阶段：1972，第一个重组DNA分子的构建，构建人：Paul Berg 及其同事PPT 基因工程诞生：1973，Cohen & Boyer首次完成重组质粒DNA对大肠杆菌的转化 基因工程发展阶段的几个重要事件： 一系列新的基因工程操作技术的出现； 各种表达克隆载体的成功构建； 一系列转基因菌株、转基因植物、转基因动物等的出现 3、基因工程的内容（P9） 4、基因克隆的通用策略（P12）(基因组文库(鸟枪法)+分子杂交筛选)
第二章分子克隆工具酶 5、限制性核酸内切酶的概念、特点、命名、分类(问答) 概念：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶，主要存在于细菌体内 特点（参加PPT） 命名：依次取宿主属名第一字母，种名头两个字母，菌株号，然后加上序号。如：从Haemophilus influenze Rd中提取到的第三种限制型核酸内切酶被命名为Hind Ⅲ，Hin指来源于流感嗜血杆菌，d表示来菌株Rd，Ⅲ表示序号。 分类：依据酶的亚单位组成、识别序列的种类以及是否需要辅助因子可分为：Ⅰ型酶、Ⅱ型（Ⅱs型）酶和Ⅲ型酶。 真核细胞中有4中DNA聚合酶：α，β，γ，线粒体DNA聚合酶 原核生物中3中DNA聚合酶：Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ
江西省井冈山经贸学校2015—2016第二学期 16春汽修一班《汽车文化》期末考试卷 注意事项： 1、考生应严格遵守考场规则，得到监考人员指令后方可答题。 2、考生拿到试卷后应首先填写密封线内各项内容（准考证号、姓名、学校），不得填出密封线外，同时把座位号填写在试卷右上角座位号栏内。 3、用蓝、黑色圆珠笔或钢笔把答案直接写在表格里。 4、注意字迹清楚，保持卷面整洁。 5、考试结束将试卷放在桌上，不得带走。考试时间90分钟。 判断题： 选择题： 一、判断题 ：（每题 2 分，共计 40 分） 1、目前我国汽车产量居全球第八位。（ ） 2、F1车赛的正式比赛是安排在星期六举行。（ ） 3、目前全球最大的汽车公司是德国大众汽车公司。（ ） 4、SUV 汽车的出现是汽车发展史上第六座里程碑。（ ） 5、甲壳虫汽车是德国大众汽车公司的费迪南德.波尔舍博士设计出来的。（ ） 6、日本最大的汽车公司是丰田汽车公司。（ ） 7、世界上第一台蒸汽机汽车是英国人瓦特发明的。（ ） 8、中高级轿车是目前世界上产量最大，保有量也最大的轿车。（ ） 9、英国劳斯莱斯汽车公司的车标是飞翔女神。（ ） 10、现代化交通运输包括铁路、公路、水路、航空、管道等五种运输方式。（ ） 11、全轮驱动的双轴汽车可用4*2来表示。（ ） 12、“红旗法规”是1865年法国制定的。（ ） 13、底特律是美国的汽车城。（ ） 14、我国从1998年7月1日起，全国所有汽车一律停止使用含铅汽油，改用无铅汽油。（ ） 15、与同等排量的汽油车相比，柴油轿车能够节油60%以上。（ ） 16、除了内燃机汽车，二十一世纪占据重要地位的汽车将是太阳能汽车。（ ） 17、世界方程式赛车最初级的形式是康巴斯赛车。（ ） 18、“GT ”赛是汽车耐久赛的简称。（ ） 学校： 班级： 姓名： 学号： 身份证号： ……………………………装………………………订………………………线…………………………………
大学语文》期末考试复习资 料 、单项选择题 1. 先秦时期最能代表儒家思想的语录体散文集是（ 2. 在《诗经》中，保存民歌最多的部分是（ 3. 下列作品中，通过标题点明主题思想的是（ 4. “既来之，则安之”这句古语出自（ 5. 《红楼梦》的体裁是（ 6. 《西厢记》是一部 7. 我国诗歌史上被称为”诗仙”的是（ 8. 在《史记》中，用来记叙帝王事迹的是（ 9. 《李将军列传》中，李广和李蔡的对比描写，主要是为了表现李广的（ 10. 在思想和艺术上都堪称中国古代长篇小说高峰的作品是（ 11. “红装素裹，分外妖娆”二句运用的修辞手法是 A. 象征 B. 比喻 C. 比拟 D. 用典 12. 李白《登金陵凤凰台》 ，在“凤凰台上凤凰游，凤去台空江自流”之后感叹人事变迁的 诗句是（ A. 旧时王谢堂前燕，飞入寻常百姓家 B. 南朝四百八十寺，多少楼台烟雨中 C. 吴宫花草埋幽径，晋代衣冠成古丘 A. 《庄子》 B. 《论 语》 C. 孟子》 D. 战国 策》 A. 风 B. 大雅 C. 颂 D. 小雅 A ．郭沫若的《炉中煤》 B ．高尔基的《鹰之歌》 C ．屠格涅夫的《门槛》 D ．契诃夫的《苦恼》 A. 《庄子》 B. 孟子》 C 《论语》 D. 史记》 A. 长篇章回白话小说 B. 长篇文言小说 C. 诗体韵文小说 D. 小说集 A. 元杂剧 B. 明杂剧 C. 说唱文学 D. 传奇 A. 屈原 B. 李白 C. 杜甫 D. 陶渊明 A. 列传 B. 世家 C. 表 D. 本纪 A. 骁勇善战 B. 爱护士卒 C. 负能使气 D. 不幸遭遇 A. 《三国演义》 B. 《红楼梦》 C. 《水浒传》 D. 儒林外史》
分子生物学与基因工程 绪论 1、分子生物学与基因工程的含义 从狭义上讲，分子生物学主要是研究生物体主要遗传物质-基因或DNA的结构及其复制、转录、表达和调节控制等过程的科学。 基因工程是一项将生物的某个基因通过载体运送到另一种生物的活体细胞中，并使之无性繁殖和行使正常功能，从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。 2、分子生物学与基因工程的发展简史，特别是里程碑事件，要求掌握其必要的理由 上个世纪50年代，Watson和Crick提出了的DNA双螺旋模型； 60年代，法国科学家Jacob和Monod提出了的乳糖操纵子模型； 70年代，Berg首先发现了DNA连接酶，并构建了世界上第一个重组DNA分子； 80年代，Mullis发明了聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR）技术； 90年代，开展了“人类基因组计划”和模式生物的基因组测序，分子生物学进入“基因组时代” 3、分子生物学与基因工程的专业地位与作用。 核酸概述 1、核酸的化学组成 2、核酸的种类与特点：DNA和RNA的区别 （1）DNA含的糖分子是脱氧核糖，RNA含的是核糖；
（2）DNA含有的碱基是腺嘌呤（A）、胞嘧啶（C）、鸟嘌呤（G）和胸腺嘧啶（T），RNA含有的碱基前3个与DNA完全相同，只有最后一个胸腺嘧啶被尿嘧啶（U）所代替； （3）DNA通常是双链，而RNA主要为单链； （4）DNA的分子链一般较长，而RNA分子链较短。 3、DNA作为遗传物质的直接和间接证据； 间接： （1）一种生物不同组织的细胞，不论年龄大小，功能如何，它的DNA含量是恒定的，而生殖细胞精子的DNA含量则刚好是体细胞的一半。多倍体生物细胞的DNA含量是按其染色体倍数性的增加而递增的，但细胞核里的蛋白质并没有相似的分布规律。 （2）DNA在代谢上较稳定。 （3）DNA是所有生物的染色体所共有的，而某些生物的染色体上则没有蛋白质。（4）DNA通常只存在于细胞核染色体上，但某些能自体复制的细胞器，如线粒体、叶绿体有其自己的DNA。 （5）在各类生物中能引起DNA结构改变的化学物质都可引起基因突变。 直接：肺炎链球菌试验、噬菌体侵染实验 4、DNA的变性与复性：两者的含义与特点及应用 变性：它是指当双螺旋DNA加热至生理温度以上（接近100oC）时，它就失去生理活性。这时DNA双股链间的氢键断裂，最后双股链完全分开并成为无规则线团的过程。简而言之，就是DNA从双链变成单链的过程。