子宫内膜异位症论文：CD4+CD25+调节性T细胞及转录因子Foxp3在子宫内膜异位症中的表达
【中文摘要】通过对CD4+CD25+Treg及转录因子Foxp3在子宫内膜异位症中(简称内异症)表达的研究,探讨免疫调节在子宫内膜异位症发病机制中的作用。方法：以临床诊断及术后病理证实为子宫内膜异位症(卵巢巧克力囊肿)的囊壁30例作为内异症的异位内膜组；在上述病例中行子宫切除的术后切取子宫内膜,未行子宫切除的则通过诊刮,共获得在位子宫内膜30例作为内异症的在位内膜组；取同期单纯因子宫肌瘤而行子宫切除的子宫内膜30例作为对照组。应用免疫组织化学方法检测CD4+CD25+Treg及转录因子Foxp3在子宫内膜异位症在位内膜和异位内膜中的表达。结果：1、阳性CD4+CD25+Treg表达分布于子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞的细胞膜和细胞浆。a、CD4+CD25+Treg在正常子宫内膜中较少表达,几乎不表达。b、
CD4T+CD25+Treg在内异症在位内膜和异位内膜的表达显著增加,明显高于正常子宫内膜,差异有统计学意义(P0.05)。2、阳性转录因子Foxp3表达分布于子宫内膜间质细胞和腺上皮细胞的细胞核。a、转录因子Foxp3在正常子宫内膜中几乎不表达。b、转录因子Foxp3在内异症在位内膜和异位内膜表达增加,显著高于正常子宫内膜,差异有统计学意义(P0.05)。3、内异症在位内膜和异位内膜CD4+CD25+Treg 和转录因子Foxp3的表达呈正相关性。结论：l、阳性CD4+CD25+Treg 和阳性转录因子Foxp3在内异症在位内膜和异位内膜中的表达均显
著增加,提示免疫调节机制在内异症的发生中可能起到重要作用。2、内异症在位内膜和异位内膜中CD4+CD25+Treg和转录因子Foxp3的表达呈正相关性,提示转录因子Foxp3可能启动调节性T细胞的免疫抑制功能,使盆腔内免疫环境呈免疫耐受状态,为内异症的发生提供必
要条件。
【英文摘要】:Through explore the expression of CD4+ CD25+ regulatory T cells and transcription factor Foxp3 in endometriosis to discusse the role of immune regulation in the pathogenesis of endometriosis.Methods:By clinical diagnosis and postoperative pathology for endometriosis (ovarian chocolate cyst) bursa wall 30 cases as the ectopic endometrium group; In the above case hysterectomy postoperative cut take endometrial along with partial muscularis,not hysterectomy postoperative cut through curettage, we obtained 30 cases of as the eutopic endometrium group; Take same pure of 30 uterine myoma muck seen endometrial as control group. Applicated the immunohistochemistry detection CD4+CD25+ regulatory T cells and transcription factors Foxp3 in endometriosis patients ectopic and eutopic and the normal control group.Results:1、Positive CD4+CD25+ regulatory T cells expression and distribution in endometrial glandular epithelial cells and stromal cells of the cell membrane and cytoplasm.a、CD4+CD25+
regulatory T cells less expression almost no expression in non-endometriosis normal endometrium, b、CD4+CD25+ regulatory T cells in endometriosis eutopic and ectopic endometrium was significantly increased, significantly higher than that of normal endometrium in endometriosis, the difference was statistically significant (P 0.05).2、The expression and distribution of transcription factor Foxp3 in endometrial stromal cells and glandular epithelial cell nuclei. a、Transcription factor Foxp3 in the non-normal endometrium of endometriosis is almost not expression. b、Endometriosis eutopic and ectopic endometrium transcription factor Foxp3 expression was significantly higher than that of normal endometrium in endometriosis, the difference was statistically significant (P 0.05).3、The expression of CD4+CD25+ regulatory T cells and transcription factor Foxp3 positive correlation in endometriosis eutopic and ectopic endometrium. Conclusion:1、The expression of CD4+CD25+ regulatory T cells and transcription factor Foxp3 were significantly increased in endometriosis eutopic and ectopic endometrium suggesed that immune suppressive mechanisms in the occurrence of endometriosis may play an important role.2、The expression of CD4+CD25+ regulatory T cells and transcription factor Foxp3
were positive correlation in endometriosis eutopic and ectopic endometrium suggested that transcription factor Foxp3 may initiate immune suppression of regulatory T cells and the pelvic environment to the of immune tolerance state and provide the necessary conditions of endometriosis.
【关键词】子宫内膜异位症 CD4+CD25+ Treg 转录因子Foxp3 免疫调节
【英文关键词】endometriosis CD4+CD25+ regulatory T cell transcription factor Foxp3 immune regulation
【目录】CD4~+CD25~+调节性T细胞及转录因子Foxp3在子宫内膜异位症中的表达摘要3-4ABSTRACT4-5第1章
前言9-12第2章材料与方法12-17 2.1 研究对象及
分组12 2.1.1 内异症患者异位内膜组12 2.1.2 内异
症患者在位内膜组12 2.1.3 对照组12 2.1.4 排除标
准12 2.2 主要仪器与实验试剂12-13 2.3 实验方法
13-16 2.3.1 标本的收集13-14 2.3.2 玻片的准备
14 2.3.3 HE染色(见附图1、2、3、4)14 2.3.4 筛选标本14 2.3.5 免疫组织化学染色14-15 2.3.6 免疫组化结果判定15-16 2.4 统计学处理16-17第3章结果17-22 3.1 CD4~+CD25~+Treg在组织中的表达情况
17-18 3.2 转录因子Foxp3在组织中的表达情况
18-19 3.3 CD4~+CD25~+Treg和转录因子Foxp3的相关性
19-22第4章讨论22-29 4.1 子宫内膜异位症发病机制22-24 4.1.1 种植学说22 4.1.2 体腔上皮化生学说(coelomic metaplasia theory)和诱导学说22-23 4.1.3 淋巴-血行转移学说23 4.1.4 “在为内膜决定论”学说
23 4.1.5 免疫学说23-24 4.2 调节性T细胞与免疫调节24-26 4.2.1 CD4~+CD25~+Treg的分化发育及功能特征
24-25 4.2.2 Treg细胞免疫调节作用机制25-26 4.2.3 CD4~+CD25~+Treg在子宫内膜异位症中的表达26 4.3 转录因子Foxp326-27 4.3.1 转录因子Foxp3的特点和免疫调节
26-27 4.3.2 转录因子Foxp3在子宫内膜异位症中的表达
27 4.4 CD4~+CD25~+Treg和转录因子Foxp3的相关性
27-28 4.5 不足之处28-29第5章结论29-30
第6章展望30-31致谢31-32参考文献32-35
附图35-38攻读学位期间的研究成果38-39综述
39-45参考文献43-45
基因组学与应用生物学，2009年，第28卷，第4期，第803－808页Genomics and Applied Biology,2009,Vol.28,No.4,803－808 专题介绍Review WRKY 转录因子表达谱的研究进展 张颖蒋卫杰* 凌键 余宏军 王明 中国农科院蔬菜花卉研究所,北京,100081*通讯作者,jiangwj@https://www.doczj.com/doc/bb4400093.html, 摘 要环境胁迫对植物的生长发育造成重大影响，因此，提高植物的抗逆性是农业面临的重要问题。自然 界中存在多种抗逆基因，如抗盐基因、 抗旱基因、抗寒基因等。利用植物基因工程和分子生物学技术提高植物对逆境的适应性及其抗逆分子机制的研究已成为当今热点。WRKY 转录因子是一类参与多种胁迫反应的诱导型转录因子，本文综述了WRKY 转录因子家族的结构特点、WRKY 转录因子在非生物胁迫(高温、低温、 干旱、盐)、外源物质(激素及O 3)处理及生物胁迫下的表达模式。各种胁迫下的表达谱均呈现不同特点，这些差异表达可能与它们所行使的不同生物学功能有关。 关键词 WRKY 转录因子,表达谱,非生物胁迫,RT-PCR Advance on Expression Profile of Transcription Factor WRKY Zhang Ying Jiang Weijie * Ling Jian Yu Hongjun Wang Ming Institue of Vegetable and Flower,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing,100081*Corresponding author,jiangwj@https://www.doczj.com/doc/bb4400093.html, DOI:10.3969/gab.028.000803 Abstract Environmental stress has an adverse effect on the growth of plants and the productivity of crops,so it is very important for agriculture to improve plant resistance to stress.Expression of a variety of genes is induced by these stresses in various plants,such as salt-resistant,drought-resistant,chilling-resistant genes and so on.It has become a hotspot to enhance plant adaptability to stress and study its molecular mechanism by plant genetic engi-neering and molecular biological technology.WRKY transcription factor is an inducible transcription factor which is involved in a variety of stress responses.In this paper,the structural characteristics of WRKY transcription factor family,and the expression profile of WRKY transcription factors in abiotic stresses (heat,cold,drought and salt),in exogenous substances (hormones and O 3)and in biotic stresses are reviewed.The expression profile in different stressshowed different characteristics,which may be related to the different biological functions of WRKY tran-scription factors. Keywords WRKY transcription factor,Expression profile,Abiotic stress,RT-PCR https://www.doczj.com/doc/bb4400093.html,/doi/10.3969/gab.028.000803 基金项目：本研究由国家973计划项目(2009CB119001)资助 植物对胁迫的响应是一种积极主动的应激过程。植物接受胁迫信号后，通过一系列的信号传递途径，最终诱导相关基因的表达。转录因子在基因表达的调控过程中起着重要作用，它们与靶基因上游的各种特定DNA 元件结合，激活或抑制靶基因的转录活性，以调控其时空特异性表达。WRKY 类转录因子是一类研究较多的转录因子，它广泛的参与生物、非生物胁迫应答反应、信号分子传递、植物衰老和器官 发育等一系列生理活动(刘戈宇等,2006)。WRKY 转 录因子最早是在甜薯中发现(Ishiguro and Nakamura,1994)，随后在多种植物中陆续发现了大量的WRKY 转录因子。WRKY 基因家族通常具有一个或者两个WRKY 域，WRKY 域能特异的与靶基因启动子区的W-box 结合，从而调控靶基因的表达(Rushton et al.,1995)。近年来，基于传统的分子生物学方法研究WRKY 基因功能的基础上，利用各种物种基因组数
捋捋让人迷惑的细胞因子 细胞因子是一类调节蛋白或者糖蛋白，他们的分类现在还不是完全清楚。他们通过结合细胞表面的特定受体，激发细胞内信号通路起作用。 白细胞组成了免疫和炎症系统，大多数细胞因子作用于白细胞或者由白细胞表达，他们在免疫和炎症反应中起到重要的调节作用。实际上，一些免疫抑制和抗炎作用的药物就是通过调节这些细胞因子的表达起作用的。 细胞因子由特定的细胞表达并分泌到胞外，结合细胞表面的细胞因子受体后激活细胞内信号 传导通路 细胞因子分类 细胞因子最早在20世纪70年代中期被提出，它当时被认为是一种多肽因子，可以调控细胞分化和免疫系统。干扰素（IFNs）和白介素（ILs）是主要的多肽家族，在当时细胞因子主要指这两类家族。 起初细胞因子的分类主要是根据分泌该因子的细胞类型或者细胞因子初次被发现时的生物活性。然而这些分类方法现在看来都不够准确，无法满足后期的分类需求。最近，根据细胞
因子一级，二级和三级结构的分析，可以将大多数的细胞因子分为6大家族。因此，根据分类方式的不同，某些细胞因子会有多个名称。 表1：细胞因子根据结构分类结果 细胞因子家族成员 ‘β-Trefoil’ cytokines Fibroblast growth factors Interleukin-1 Chemokines Interleukin-8 Macrophage inflammatory proteins ‘Cysteine knot’ cytokines Nerve growth factor Transforming growth factors Platelet-derived growth factor EGF family Epidermal growth factor Transforming growth factor-αHaematopoietins Interleukins 2–7, -9, -13 Granulocyte colony stimulating factor Granulocyte-macrophage colony stimulating factor Leukaemia inhibitory factor Erythropoietin Ciliaryneurotrophic factor TNF family Tumour necrosis factor-α and –β
免疫学知识点梳理 第一章绪论 1. 免疫的概念 2.固有免疫和适应性免疫的特点比较。 3.免疫的三大功能防御、自稳、监视，相应的病理反应为超敏及免疫缺陷、自身 免疫病、恶性肿瘤。 4.免疫系统的组成 5.简述中枢免疫器官和外周免疫器官的组成 6.淋巴细胞再循环的意义。 7.主要的免疫细胞及免疫分子有哪些。 8.克隆选择学说 第二章抗原 1. 抗原的定义 2.完全抗原与半抗原的定义及特点 3.抗原表位的分类（线性表位-T细胞和构象表位-B细胞）、抗原结合价 4.共同抗原与交叉反应，交叉抗原的生物学意义。 5.决定抗原免疫原性的因素。（理化因素、宿主因素、免疫途径及方法） 6.抗原的种类： 1）抗体产生是否对T细胞依赖：TD抗原、TI抗原 2）抗原与机体的亲缘关系：异嗜性抗原、异种抗原、同种异型抗原、自身抗原3）抗原提呈细胞内抗原的来源：内源性抗原、外源性抗原 7.非特异性免疫刺激剂：免疫佐剂、超抗原、丝裂原第三章抗体 1.抗体和免疫球蛋白的定义。 2.抗体的基本结构： 重链（H链）和轻链（L链）； 可变区（V区）：超变区（CD1-3）和骨架区（FR1-4） 恒定区（C区）：C H1-4；C L 铰链区：CH1与CH2之间。 结构域和功能区：VH和VL抗原结合位点；CH1和CL为Ig同种异型遗传标志所
在；CH2和CH3为补体C1q结合位点；CH3和CH4能与多种细胞表面的Fc 受体结合，产生免疫效应。 3.免疫球蛋白的水解片段： 木瓜蛋白酶水解片段：2个Fab（抗原结合片段）， 1个Fc （可结晶片段） 胃蛋白酶水解片段：1个Fab'段，多个pFc段 4.抗体的类型：根据重链C区氨基酸组成的差别分为，IgG、IgA、IgM、IgD、Ig巳 型：根据轻链C区氨基酸组成的差别分为，入和K 5.抗体三类不同的抗原决定基： 同种型：同一种属所有个体Ig分子共有的抗原特异性标志。同种异型：同一种属不同个体间Ig 分子具有的不同抗原特异性标志。存在于Ig C区和V区。 独特型：同一个针对不同抗原所产生的Ig分子V区所特有的抗原表位。存在于Ig重链和轻链的V区。 6.抗体的主要功能 V区特异性识别、结合抗原； C区，与具有Fc受体的细胞结合；激活补体，发挥溶解细胞的活性； 介导免疫细胞活性（ADCC调理作用、超敏反应、激活巨噬细胞和肥大细胞）；7.五类免疫球蛋白的特性与功能IgG：唯一能通过胎盘的抗体。 血清含量最高，占总量的75-80%，半衰期长，能通过经典途径激活补体；主要的抗感染抗体，参与II、III 型超敏反应。 IgM: 五聚体，分子量最大，其激活补体、结合抗原、免疫调理作用比IgG 强，占血清免疫球蛋白总量的5-10%。 IgM 的特点：个体发育中最早产生的抗体；是抗原刺激后出现最早的抗体；是BCR的主要成分；参与II、III型超敏反应。 IgA：分血清型和分泌型两种。是外分泌液中的主要抗体。
免疫超级无敌复习 名词解释 1.Adjuant佐剂* 预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答能力或改变免疫应答类型的非特异性免疫增强性物质。 2.Autoimmunity自身免疫 是机体免疫系统对自身细胞或自身成分所发生的免疫应答，产生自身抗体和/或自身反应性T细胞的正常生理现象，存在于所有的个体 3.MALT 粘膜相关淋巴组织* 指呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道粘膜固有层和上皮细胞下散在的无被膜淋巴组织，以及某些带有生发中心的器官化的淋巴组织 4.mAb单克隆抗体 由K?hler和Milstein建立的杂交瘤技术制备单克隆抗体，使经过筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌抗单一抗原表位的特异性抗体。 5.pAb多克隆抗体 天然抗原分子中常含有多种不同抗原特异性的抗原表位，以该抗原物质刺激机体免疫系统，体内多个B细胞克隆被激活，产生的抗体中实际上含有针对多种不同抗原表位的免疫球蛋白。 6.MHC主要组织相容性复合体 指存在同一染色体上编码主要组织相容性抗原的基因群，具有控制免疫应答和同种移植排斥反应等复杂功能。 7.SAg超抗原 某些抗原性物质，其抗原作用不受MHC限制，无抗原特异性，只要极低浓度，即可激活多克隆淋巴细胞（2-20%），产生强烈的免疫应答。 8.SLE 系统性红斑性狼疮 是典型的全身性自身免疫性疾病，患者的皮肤、肾和脑等均可发生病变，多发生在20 - 30岁女性9.TSA 肿瘤特异性抗原 是指肿瘤细胞特有的或存在于某些肿瘤细胞而不存在于正常细胞的新抗原 10.TAA 肿瘤相关抗原 是指肿瘤细胞和正常细胞组织均可表达的抗原，只是其含量在细胞癌变时明显增高 11.Clonal anergy克隆无能 T，B细胞缺乏第二活化信号，不能有效活化也不能对相应的特异性抗原或MHC/抗原肽复合物产生正免疫应答。 12.ELISA 酶联免疫吸附实验 是酶免疫测定技术中应用最广的技术，其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固体载体表面，使抗原抗体反应在固相表面进行，通过洗涤将固相上的抗原抗体复合物与液相中的游离或分开13.HLA 人类白细胞抗原 人的MHC称为HLA，其主要中能是以其产物提呈抗原肽进而激活T淋巴细胞。因此，MHC在启动适应性免疫应答中起重要作用 14.Cytokine细胞因子* 由免疫原、丝裂原或其他因子刺激细胞所产生的低分子量可溶性蛋白质、微生物信息分子，具有调节固有免疫和适应性免疫应答，促进造血，以及刺激细胞活化、增殖和分化等功能
Th1/Th2细胞基础知识 1)Th1/Th2 分类： 早在1986年，Mosmann等应用Th细胞克隆培养技术和细胞因子产生的不同，已发现小鼠CD4阳性细胞群是一个不均一的亚群，可分为Th1和Th2两个功能不同的独立亚群(见表1)。后来在人类的CD4阳性细胞群中也发现了Th1，Th2两等， ?个功能细胞亚群(见表2)。T h1细胞主要分泌IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-β/ 介导与细胞毒和局部炎症有关的免疫应答，参与细胞免疫及迟发型超敏性炎症的形成，故亦称为炎症性T细胞，可被视为相当于TDT H细胞。Th1细胞在抗胞内病原体(病毒、细菌及寄生虫等)感染中发挥重要作用。在胞内细菌感染时，Th1细胞优先发育并引发吞噬细胞介导的宿主防御应答。Th1细胞持续性强应答，可能与器官特异性自身免疫病、接触性皮炎、不明原因的慢性炎症性疾病、迟发型超敏反应等有关。Th2细胞：Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10,其主要功能为刺激B 细胞增殖并产生抗体，与体液免疫相关。在T/B细胞比例较低时，Th1细胞也可能辅助B 细胞产生抗体(IgM、IgG2a和IgA类)。在对蠕虫感染和环境变应原的应答中，主要是Th2细胞参与，以介导体液免疫应答为主。过度的Th2细胞应答可能在遗传易感的过敏性特应症中起重要作用。 两类CD4+Th细胞对细胞因子的反应性各异：IFN-γ可诱导Th1细胞分化，但抑制Th2细胞增殖；IL-4诱导Th2细胞分化，但可与IL-13等一起抑制Th1细胞功能；IL-2则可同时引起Th1和Th2细胞增殖。 ，可下调APC和Th1细胞活性，在诱导免疫耐受中起重要作用。?除上述的Th1和Th2 细胞外，还有一类产生Th1和Th2样混合性细胞因子的Th0细胞。Th0亚群可能是从Th 前体向Th1或Th2细胞分化过程中的一个中间阶段。此外，期有人报道还存在CD4+Th3细胞，其主要分泌TGF-
细胞内细胞因子的检测 细胞因子是可溶性蛋白，在淋巴细胞应答中有重要的免疫调节作用。研究显示，细胞因子可以具有多重功能，作用于多个细胞亚群并可在不同亚群细胞表达。早期细胞因子表达与T细胞功能相关性研究是基于特定克隆细胞的激活。尽管研究应用T淋巴细胞克隆证明了不同细胞因子的合成，如Th1(IL-2，IFN-γ)与Th2(IL-4，IL-5，IL-10)，但这些研究很难推广，因为T细胞克隆与体内T细胞功能相关性还不清楚。 活化的T细胞可分泌多种细胞因子至细胞外，而流式细胞仪仅能检测细胞内的抗原，所以应阻断细胞因子分泌至细胞外，方法为破坏高尔基体，因细胞因子（即各种蛋白）在合成后需经高尔基体的加工和转运，才能到达细胞膜，然后通过高尔基体膜与细胞膜的融合作用将细胞因子分泌至细胞外。因此破坏高尔基体即可切断细胞因子的转运途径，干扰其分泌。近来，Jung与Picker采用了Brefeldin(BFA)与monensin等药物预孵检测胞内细胞因子的表达的方法。这一方法阻断了胞内高尔基体介导的转运使得细胞因子聚集，蓄积，增强细胞因子信号可被流式细胞仪检测。 胞内细胞因子染色与传统的检测可溶性蛋白的方法如ELISA相比，具有显著优越性。该法从单个细胞水平检测内多个细胞因子的同时，还可标记各种细胞表面分化抗原以及活化分子、趋化因子受体和黏附分子等，从而区分表达特定细胞因子的细胞亚群及其表型特征。使用特定刺激剂研究细胞因子应答是细胞因子研究中的重大进展。早在1986年，Mosmann等应用Th细胞克隆技术和细胞因子产生的不同，发现小鼠CD4细胞是一个不均一的亚群，可分为Th1和Th2两个功能不同的独立亚群。后来在人类的CD4细胞群中也发现了Th1和Th2细胞亚群。Th1细胞主要分泌IL-2、IFN-γ和TNF-α等，介导与细胞毒和局部炎症有关的免疫应答，参与细胞免疫及迟发型超敏反应，在抗胞内病原菌感染中发挥重要作用；Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10，其主要功能是刺激B细胞增殖并产生抗体，与体液免疫有关。应用该方法，在细胞水平该方法证明了人与鼠的淋巴细胞都存在1型与2型分化，且这些分化在特定细胞因子增强时可被
TF-coEx：一种基于基因共表达网络的转录因子功能预测新方法 TF-coEx： Transcription Factor Function Prediction based on Gene Co-e xpression Network收藏本页导出题录 分享 作者：陈靖祺[1] 柳靓婧[1,2] 田卫东[1] CHEN Jing-qi,LIU Jing-jing,TIAN Wei-dong （1.Institute of Biostatistics,Fudan University,Shanghai 200433,China ; 2.Institute of Plant Biology,Fudan University,Shanghai 200433,China）机构地区：[1]复旦大学生物统计研究所,上海200433 [2]复旦大学植物科学研究所,上海200433 出处：《复旦学报：自然科学版》 SCI CAS CSCD 2012年第51卷第6期 803-812页,共10页《Journal of Fudan University （Natural Science）》 摘要：转录因子在细胞内的各种生物通路中起着重要的调控作用．在人基因组中有1000多个注释为DNA结合蛋白的编码基因，其中部分基因已被证明为转录因子，对它们调控的生物通路也相对比较清楚．其余的大多数DNA结合蛋白可能是潜在的转录因子，但它们的功能并不明确．鉴于转录因子与其所调控的靶基因在基因表达水平上密切关联，本文从基因共表达网络出发建立了]。个预测转录因子功能的新方法——co-expression-based transcription factor function prediction（TF-coEx）．首先，利用大规模高通量表达芯片数据建立了不同条件下人全基因组的基因共表达网络，并通过网络划分获得包含转录因子的一系列基因共表达模块．之后，通过对模块内基因的功能富集分析，并整合不同网络的模块功能富集结果，对所有潜在的转录因子编码基因进行了功能预测．通过与已知功能的对比，我们证明TF-coEx的预测效果显著好于随机．此外，对预测分值最大的50个结果的文献验证显示，54％的预测有实验证据支持．方法的预测结果为进一步设计具体的实验来验证潜在转录因子的功能提供了方向．
脂肪细胞的基础知识 脂肪细胞的生长全过程及其形态变化脂肪母细胞，是指能向脂肪细胞分化的ADSCs在激素、生物活性因子、寒冷等因素刺激下均能逐渐分化成为单能干细胞。它可保持着干细胞增殖活跃的特性，脂肪母细胞再进一步分化为前脂肪细胞，即通常人们所说的脂肪细胞前体。前脂肪细胞再经历细胞融合、接触抑制和克隆扩增等步骤启动向成熟脂肪细胞分化，并在胰岛素、地塞米松等诱导剂作用下完成向成熟脂肪细胞的分化。全过程可以表示为：多能干细胞——脂肪母细胞——前脂肪细胞——不成熟脂肪细胞——成熟脂肪细胞。生长期前脂肪细胞的形态与成纤维细胞相似，经诱导分化，其细胞骨架和细胞外基质发生变化，开始进入不成熟细胞向成熟细胞转变。细胞形态由成纤维细胞样逐渐趋于类圆或圆形，胞体逐渐增大，胞质中开始出现小脂滴，脂质开始累积，以后小脂滴增多并融合为较大的脂滴，可经油红“O”染色等方法于显微镜下显色，从而获得成熟脂肪细胞的形态特征。此时的细胞无分裂增殖能力，为脂肪细胞分化的终末阶段。 张高娜,梁正翠.动物脂肪细胞的研究进展[J].饲料工业,2009,30(2):42-44. 脂肪细胞由起源于中胚层的间充质干细胞逐步分化形成,按间充质干细胞→脂肪母细胞→前脂肪细胞→不成熟脂肪细胞→成熟脂肪细胞的过程发展。前脂肪细胞在多种转录因子调控下,激活脂肪组织相关基因,并在这些基因的顺序性调控下,经一系列复杂的步骤分化为成熟脂肪细胞。 张艳.脂肪细胞分化过程中的分子事件[J].儿科药学杂志,2008,14(1):56-57.
间充质干细胞 概念： 不同文献中，分别命名为抽脂处理细胞（processed lipoaspirate cells, PLA），脂肪基质微管碎片细胞（stromal vascularfraction cells, SVF），脂肪组织源基质细胞（adipose-tissue derived stromal cells, ATSCs），脂肪源中胚层干细胞（adipose-derived mesodermal stem cells, ADMSCs）等。这些不一致的名称均指从脂肪组织中分离的、可在体外大量扩增并具有多向分化潜能的细胞。 李惠侠,屈长青. 脂肪组织源性干细胞研究进展[J]. 生理科学进展,2007,38(2) 脂肪细胞是由起源于中胚层的间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)逐步分化、发育而来，MSC主要分布于脂肪组织和骨髓中。脂肪细胞不同发育阶段的两类细胞系为多能干细胞系和前体脂肪细胞系，前者为不定向的细胞系，能转变为稳定的脂肪细胞、肌细胞和软骨细胞，后者为定向的细胞系，是目前体外研究脂肪细胞分化应用最为广泛的细胞系。 庞卫军,李影. 脂肪细胞分化过程中的分子事件[J]. 细胞生物学杂志,2005,27: 497-500. 脂肪来源的间充质干细胞(adipose tissue derived mesenchymal stem cells, ADMSCs) 间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)具有自我更新及多向分化潜能,是一种 具有潜力的组织工程种子细胞。目前研究得比较多的是骨髓来源的MSCs,但骨髓中的间 充质干细胞数量很少(约占细胞总数的1/105),且存在取材困难等问题。MSCs广泛分布于 其他组织中,包括肌肉、血管、肝脏、胰腺和脂肪等。 ADMSCs表面有CD29、CD44、CD71、CD90、CD105/SH-2、SH-3、STRO-1等多 种抗原标志。 李冬艳,宇丽. 脂肪来源的间充质干细胞分离方法的改进[J]. 暨南大学学报(医学版),2007,28(6). 脂肪源性干细胞（adipose-derived stem cells，ADSCs） Zuk等从脂肪组织中分离出了一种成纤维细胞样细胞，它与骨髓间充质干细胞(MSCs)形态相似，称之为脂肪干细胞（ADSCs)，平均每300 ml脂肪组织可获得2×108～ 6×108个这样的细胞。ADSCs和MSCs具有相同的表现型，对CD29、CD44、CD71、 CD70、CD105/SH2和SH3为阳性反应，对CD31、CD34和CD45为阴性反应。此外， 它们还具有各自特征性的表达分化抗原：ADSCs具有特征性表达分化抗原CD49d，而MSCs具有特征性表达分化抗原CD106。 张高娜, 梁正翠. 动物脂肪细胞的研究进展[J]. 饲料工业,2009,30(2) 间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是一类具备干细胞特点的细胞系，具有自我更新能力、长期的活性和多系分化潜能。 脂肪来源的间充质干细胞（adipose tissue-derived mesenchymal stem cells，ADSCs），以其取材方便、来源丰富等多种优势逐渐取代骨髓间充质干细胞（bone marrow-derived mesenchymal stem cells，BMSCs）。 免疫表型：研究发现ADSCs主要表达CD13、CD44、CD73、CD90、CD105、CD106、CD166、CD29、CD49e和HLA-ABC，而不表达CD34、CD3、CD19、CD45、CD14、CD117、CD31、CD62L、CD95L和HLA-DR。这个结果和其他的MSCs几乎一致。但ADSCs与BMSCs也有差别：大部分BMSCs表达CD10，而表达CD10的ADSCs仅占5%～20%；几乎所有的ADSCs表达CD49f和CD54，而BMSCs极少表达。 周苏娜,张明鑫. 脂肪来源的间充质干细胞的生物学特征及临床应用[J]. 中国现代普通外科进展,2009,12(1). 不同细胞的表面标志是不同的，脂肪干细胞的表面标记为：CD9、CD10、CD13、CD29、CD10、CD44、CD49e、CD49d、CD54、CD55、CD59、CD90、CD105、CD107、CD146、
细胞内细胞因子的流式细胞仪检测 一、简介 随着研究的进展，仅仅对细胞进行定量和活性的检测已不能满足需要。在单细胞水平研究细胞因子的表达能力对研究细胞因子在疾病中的作用越来越显的重要无比。目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括：ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析（limiting dilution analysis，LDA）和单细胞PCR，应用原位杂交技术和免疫组化方法观察细胞因子蛋白表达及mRNA表达可以识别Th1和Th2细胞，此方法可获得较强的细胞内信号，但此方法工作量大、主观性强，难以进行大样本检测，且人肉眼识别能力有很大的局限性，而ELISPOT及单细胞PCR技术，技术性强、劳动强度大，难以进行广泛推广。随着多标记及胞内细胞因子标记流式细胞技术的出现，使对细胞内细胞因子的研究推向了一个新的阶段。下面主要对胞内细胞因子流式细胞技术作以介绍。 TH1与TH2(IL－4，IL－5，IL－10)，但这些研究很难外推，因为T细胞克隆与体内T细胞功能相关性还未被揭示。早期细胞因子表达与细胞功能相关性研究是基于特定克隆细胞的激活。尽管研究应用T淋巴细胞克隆证明了不同细胞因子的合成，如TH1(IL－2，IFN－ ) 近来，Jung与Picker采用了monensin、PMA等药物预孵，用Brefeldin(BFA)、Monensin阻断了胞内高尔基体介导的转运的方法使得细胞因子聚集，蓄积，增强细胞因子信号可被流式细胞仪检测。因为自然状态下，T淋巴细胞产生少量的细胞因子，通常要对T淋巴细胞体外活化进行研究。在体外刺激过程中，T淋巴细胞产生的细胞因子已释放出来，胞内细胞因子信号较弱，难以进行检测。这一方法可检测单个细胞内多个细胞因子，并可区分表达特定细胞因子的细胞亚群。在细胞水平该方法证明了人与鼠的淋巴细胞都存在1型与2型分化，且这些分化在特定细胞因子增强时可被逆转。且这些研究清楚地证明，只有激活的细胞亚群可以表达细胞因子，静止的正常淋巴细胞(T、B、NK)不能分泌细胞因子。 胞内流式分析法是用抗细胞因子抗体与细胞表面或胞内特定亚群标志组合，即可检测不同细胞亚群细胞因子的分泌，同时采用特殊的化学与抗体选择，确保静止与无细胞因子分泌细胞的最小荧光背景。具有其它方法难以比拟的优点： ?快速：流式定量检测细胞内细胞因子可在一天内完成，实验流程需6-8小时，实际操作时间为1-2小时，快速简便； ?简便：无需组织培养，可以全血分析，无需分离PBMCs； ?灵敏度高：高度灵敏的荧光标记与检测系统； ?高效：可以在同一个细胞内同时检测两种或更多种细胞因子，也可根据细胞免疫表型区分分泌细胞因子的细胞的亚型，进行多参数相关分析； ?安全：减少样本处理与生物源性污染
免疫学模拟题
《医学免疫学》模拟试题（一） 一、单选题（只许从每题备选答案种选择一个最佳答案。每题1分，共40分） 1、外周免疫器官不包括（） A、胸腺 B、淋巴结 C、脾 脏 D、粘膜相关淋巴组织 2、人B细胞分化成熟的部位是在（） A、胸腺 B、脾脏 C、骨 髓 D、法氏囊 3、木瓜蛋白酶水解IgG所获片段中，能与抗原特异结合的是 （） A、Fab段 B、Fc段 C、F（ab）2 段 D、pFc段 4、参与新生儿溶血症的Ig是（） A、IgG B、IgA C、 IgM D、IgD 5、能抵抗蛋白酶水解的Ig是（） A、IgG B、sIgA C、 IgM D、IgE 6、以下关于IgG 生物学特性的错误叙述是（） A、能通过胎 盘B、能激活补体 C、是参与I 型超敏反应的主要 Ig D、能发挥调理作用 7、参与旁路激活途径的补体成份是（） A、C1 B、C2 C、 C3 D、C4 8、补体经典激活途径中形成的C3转化酶是（） A、C4b2b B、C3bBb C、 C4b2b3b D、C3bnBb 9、下列补体裂解片段中具有调理作用的是（） A、C3a B、C3b C、 C5a D、C5b 10、同时参与经典、旁路及MBL三条激活途径的补体成分是（） A、C1 B、C2 C、 C3 D、C4 11、细胞因子（CK）的生物学作用特点不包括（） A、具有高效性 B、为特异性作用 C、多数在局部发挥作用 D、对细胞的作用不受MHC限制
12、能直接杀伤肿瘤细胞的细胞因子是（） A、TNF B、IFN C、IL- 1 D、IL-2 13、干扰素（IFN）不具有（） A、抗病毒作用 B、抗肿瘤作用 C、免疫调节作用 D、炎症介质作用 14、以下关于CD8分子的叙述，正确的是（） A、是辅助T细胞（Th）的膜分子 B、是细胞毒T细胞（Tc）的膜分子 C、是Th细胞识别抗原的辅助受体 D、是 HIV的受体 15、经典的HLA I类基因是（） A、HLA-DP B、HLA-DQ C、HLA- C D、HLA-DR 16、HLA复合体位于人的哪号染色体上（） A、1号染色体 B、2 号染色体 C、6号染色 体 D、17号染色体 17、HLAΠ类抗原主要分布于（） A、各种有核细胞，包括血小板和网织红细胞 B、各种白细胞和红细胞 C、淋巴细胞、粒细胞、红细胞及抗原提呈细胞（APC） D、B细胞、单核/巨噬细胞（Mφ）、树突状细胞（DC）及活化T细胞 18、T细胞的抗原识别受体是（） A、TCR B、CD3分子 C、补体受体 D、细胞因子受体 19、B胞胞不具有的表面标志是（） A、CD3分子 B、BCR C、Fc受体 D、补体受体（CR） 20、能特异杀伤靶细胞并有MHC限制性的是（） A、Mφ B、Tc 细胞 C、NK细 胞 D、B 细胞 21、专职性APC不包括（） A、DC B、Mφ C、B细 胞D、NK细胞 22、不同物种间共有的抗原称为（） A、TD抗原 B、TI抗原 C、异嗜性抗 原 D、异种抗原 23 、胸腺依赖性抗原(TD-Ag)是指( ) A、来源于胸腺的抗原 B、刺激B细胞产生抗体需T细胞辅助的抗原 C、在胸腺中加工处理的抗原 D、T细胞在胸腺内发育过程中获得的抗原
生理 绪论 正反馈调节的主要意义在于促进某一生理活动的正常进行。 1.排尿反射（属神经调节） 2.排卵前夕雌激素对LH的促分泌作用（属体液调节） 3.蛋白酶原的激活（属自身调节） 正反馈：血液凝固、排尿反射、排便反射、分娩过程、动作电位去极化过程中Na?内流、排卵前夕雌激素对LH 的促进作用、蛋白酶原的激活、兴奋的突触传播。 自身调节： 1.调节肾血流量的肌源性自身调节 2.管-球反馈 3.尿生成过程中的渗透性利尿和球-管平衡 4.局部组织的代谢性自身调节 5.脑血流量的肌源性自身调节 6.心肌骨骼肌的异长自身调节 7.内分泌系统存在的大量自身调节 目前为止只考过肾血流的肌源性自身调节（1992N65A，1999N1A）和脑血流的肌源性自身调节（2012N121B） 细胞的基本功能 单纯扩散： 1.O?、CO?、N?、NH?、类固醇激素。 2.乙醇、尿素、甘油（不带电荷极性共价键的小分子） Na?跨膜转运的方式： 1.易化扩散（经通道易化扩散，顺浓度梯度） 2.主动转运（消耗1个ATP可逆浓度差将3个Na?移出胞外，将2个K?移入胞内，逆浓度梯度） 经载体易化扩散：葡萄糖在一般细胞（除小肠黏膜上皮和肾近端小管上皮外）的跨膜转运。 继发性主动转运是利用原发性主动转运所形成的某些离子的浓度梯度，间接利用ATP能量的主动转运过程。 1.葡萄糖在小肠黏膜上皮的吸收和在近端小管上皮的重吸收 2.Na?-Ca2?交换 3.Na?-H?交换等 除进入肠黏膜上皮细胞和肾小管上皮细胞属于继发性主动转运外，葡萄糖进入其他细胞均属
于经载体介导的易化扩散，其中最典型的代表是红细胞和脑细胞。 没有饱和现象：在单纯扩散、离子经通道易化扩散以及水的渗透。（不需载体） 当钠泵受抑制，细胞内外K?浓度差减小，K?外流数量减少，静息电位的绝对值减小。 当钠泵受抑制，细胞内外Na?浓度差减小，Na?内流数量减少，动作电位的绝对值减小，即动作电位的幅度降低。 Na?-Ca2?交换属于继发性主动转运，其动力来自钠泵活动所建立的钠离子跨膜浓度梯度，故当钠泵活动受抑制时，Na?-Ca2?交换减弱。 钠泵受到抑制后，漏入细胞内Na?不能及时排出，胞质渗透压升高。 出胞：外分泌腺细胞排放酶原颗粒和黏液、内分泌腺细胞分泌激素以及神经纤维末梢释放神经递质等过程。 受体-G蛋白-AC途径：AC（腺苷酸环化酶)，其信号转导通路为：cAMP-PKA通路，代表激素：胰高血糖素、肾上腺素、促肾上腺皮质激素 受体-G蛋白-PLC途径：PLC(磷脂酶C)，其信号转导通路为：IP3-DAG-PKC通路，代表激素：去甲肾上腺素、抗利尿激素、促肾上腺皮质激素 离子通道受体途径：神经-肌接头的终板膜上，能与Ach结合的终板膜上的N?型乙酰胆碱受体阳离子通道 酪氨酸激酶受体途径：PTK(蛋白酪氨酸激酶)，其信号转导通路为：Ras/MAPK通路，代表激素：表皮生长因子 (AA-BB通路：AA为第二信使，BB为蛋白激酶) 乙酰胆碱及γ-氨基丁酸既可作用于G蛋白耦联受体，又可作用于通道型受体。 肾上腺素属于儿茶酚胺类递质，作用于G蛋白耦联受体 心房钠尿肽作用于鸟苷酸环化酶受体，鸟苷酸环化酶受体属于酶联型受体的一种。 腺苷酸环化酶（AC）可催化生成的第二信使为环磷酸腺苷（cAMP） 磷脂酶C（PLC）可催化生成的第二信使为三磷酸肌醇（IP?）和二酰甘油（DG） 促肾上腺皮质激素以cAMP作为第二信使。肾上腺素既可以cAMP作为第二信使（β肾 上腺素能受体、α?肾上腺素能受体） 也可以IP?和DG作为第二信使（α?肾上腺素能受体）。 醛固酮（类固醇激素）及甲状腺激素属于脂溶性配体，可直接进入细胞与胞质受体或核受体结合发挥作用，无需第二信使的参与。 配体： 1.离子通道型：乙酰胆碱、甘氨酸、γ-氨基丁酸等 2.G蛋白：儿茶酚胺、5-羟色胺、乙酰胆碱、氨基酸类递质以及几乎所有的多肽和蛋白质类
细胞内细胞因子染色 胞内细胞因子(INF-gamma)染色方法是在单细胞水平分析淋巴细胞的功能。通过结合表面染色和细胞内细胞因子染色，细胞内细胞因子（干扰素-γ）染色法是用来分析在单细胞水平淋巴细胞的功能。通过结合表面染色和细胞内细胞因子染色，此法可以获得在一定数量群体中，能够释放细胞因子细胞的百分比，而这些是无法用酶联免疫斑点法检测方法所获得的。 材料和试剂 I. 抗体 1. PE 鼠单抗IFN-γ (BD Bioscience 554412) 2. PE鼠IgG1 κ同型对照(BD Bioscience 554685) 注意: 以上抗体经作者验证可以被其他抗体代替 II. 其他材料： 1. BD Cytofix/Cytoperm TM Fixation/Permeabilization液体试剂盒，BD GolgiStop TM (BD Bioscience 554715) 2. 1X Phosphate Buffered Saline 磷酸缓冲液(PBS) 3. FACS staining Buffer: 1X PBS, 2% FBS. 4. Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) (Sigma 79346) 5. Ionomycin (Sigma I9657) 仪器 1. BECKMAN 离心机和转头(BECKMAN) 步骤 1. 刺激细胞： 1) 为刺激细胞使IFN-gamma从T细胞中释放，加入PMA (5ng/ml)和Ionomycin (500ng/ml)用37℃6h来培养和孵育细胞 2) 每6ml培养细胞加入4 μl BD GolgiStop TM，充分混匀。（推荐BD GolgiStop TM在细胞液中的时间不超过12h） 2. 收集细胞:
14．黏膜相关淋巴组织：主要指呼吸道、胃肠道及泌尿生殖道黏膜固有层和上皮细胞下散在的无被膜淋巴组织，以及某些带有生发中心的器官化的淋巴组织，如扁桃体、小肠的派氏集合淋巴结及阑尾等。15．淋巴细胞归巢：指成熟淋巴细胞经血液循环趋向性迁移并定居于外周免疫器官或组织的特定区域。其分子基础是淋巴细胞表面的归巢受体与内皮细胞表面相应黏附分子――血管地址素的相互作用。17抗原（antigen, Ag）是指能与T细胞、B淋巴细胞的TCR或BCR结合，促使其增殖、分化，产生抗体或致敏淋巴细胞，并与之结合，进而发挥免疫效应的物质。18．抗原表位(antigen epitope)或抗原决定基（antigeni c determinant）是指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。19．抗原分子中常带有多种抗原表位，不同抗原之间含有的相同或相似的抗原表位，称为共同抗原表位, 抗体或致敏淋巴细胞对具有相同和相似表位的不同抗原的反应，称为交叉反应（cross-reaction）。24．TCR、BCR或Ig的V区所具有的独特的氨基酸顺序和空间构型，可诱导自体产生相应的特异性抗体，这些独特的氨基酸序列所组成的抗原表位称为独特型抗原（idiotype, Id）。27抗体（antibody，Ab）是介导体液免疫的重要效应分子，是B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的糖蛋白，主要存在于血清等体液中，通过与相应抗原特异性地结合，发挥体液免疫功能。31．调理作用(opsonization) 指抗体如IgG（特别是IgG1和IgG3）的Fc段与中性粒细胞、巨噬细胞上的IgG Fc受体结合，从而增强吞噬细胞的吞噬作用。mediated-7．抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（antibody-dependent cell cytotoxicity，ADCC）指具有杀伤活性的细胞如NK细胞通过其表面表达的Fc受体（FcR）识别包被于靶抗原（如细菌或肿瘤细胞）上抗体的Fc段，直接杀伤靶细胞，NK细胞是介导ADCC的主要细胞。32．单克隆抗体（monoclonal antibody，mAb）：K?hler和Milstein将抗原特异性B细胞与恶性骨髓瘤细胞融合，形成杂交细胞系即杂交瘤(hybridoma)，既有骨髓瘤细胞大量扩增和永生的特性，又具有免疫B细胞合成和分泌特异性抗体的能力。每个杂交瘤细胞由一个B 细胞融合而成，而每个B细胞克隆仅识别一种抗原表位，故经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌抗单一抗原表位的特异性抗体，是为单克隆抗体。其优点是结构均一、纯度高、特异性强、效价高、少或无血清交叉反应、制备成本低。44细胞因子（CK）：细胞因子是由免疫原、丝裂原或其他因子刺激细胞所产生的低分子量可溶性蛋白质，为生物信息分子，具有调节固有免疫和适应性免疫应答，促进造血，以及刺激细胞活化，增殖和分化功能。53白细胞分化抗原白细胞分化抗原：主要是指造血干细胞在分化成熟为不同谱系、各个谱系分化的不同阶段，以及成熟细胞活化的过程中，出现或消失的细胞表面分子。54．分化群（CD）：应用以单克隆抗体鉴定为主的方法，将来自不同实验室的单克隆抗体所识别的同一种分化抗原归位同一个分化群，简称CD（cluster of differentiation）。55．黏附分子（CAM）：是众多介导细胞间或细胞外基质间互相接触和结合分子的统称。黏附分子以受体－配体结合的形式发挥作用。59．主要组织相容性复合体：是存在于人和脊椎动物体内，编码主要组织相容性抗原的一组紧密连锁的基因群，其主要功能是以其产物提呈抗原肽进而激活T淋巴细胞，启动适应性免疫应答。64．MHC多态性：是一个群体概念，指一个基因座位上存在多个等位基因，即群体中不同个体在等位基因拥有状态上存在差别。HLA基因是迄今为止人体多态性最丰富的基因系统。65．连锁不平衡：指分属两个或两个以上基因座位的等位基因，同时出现在一条染色体上的几率高于随机出现的频率。66．HLA单体型：指染色体上MHC不同座位等位基因的特定组合。67．锚定残基：抗原肽往往带有两个或两个以上和HLA分子凹槽相结合的特定部位，称为锚定位，该位置的氨基酸残基称为锚定残基。73．等位基因排斥：是指B细胞中位于一对染色体上的轻链或重链基因，只有其中一条染色体上的基因能得到表达，先重排成功的基因抑制了同源染色体上另一等位基因的重排。链基因的表达。λ轻链基因的表达成功即抑制κ轻链基因之间的排斥，λ轻链和κ5．同种型排斥：种型排斥是指74．体细胞高频突变：B细胞受抗原刺激活化增殖过程中，每次细胞分裂，BCR可变区基因大约每1000bp就有一对发生突变，导致BCR的多样性及体液免疫应答中抗体的多样性。78阳性选择：在胸腺深皮质层，同胸腺上皮细胞表面的抗原肽-MHC分子复合物以适当亲和力发生结合的D P细胞可继续分化为单阳性细胞，而不能与抗原肽-MHC分子复合物发生有效结合或结合亲和力过高的DP细胞发生凋亡。此过程称为胸腺的阳性选择，T细胞获得了自身MHC限制性。79．阴性选择：SP细胞在皮髓质交界处及髓质区，与胸腺树突状细胞、巨噬细胞表面自身抗原肽-MHCⅠ类或Ⅱ类分子复合物相互识别，发生高亲和力结合者发生凋亡而被删除，以保证进入外周淋巴器官的T细胞不能针对自身抗原发生强的应答，此过程称为胸腺的阴性选择，T细胞获得自身免疫耐受。80．TCR复合物：由识别和结合抗原肽-MHC分子复合物的TCR和传递抗原刺激信号的CD3组成。87．抗原提呈细胞（APC）：指能够加工、处理抗原并将抗原信息提呈给T淋巴细胞的一类细胞，在机体的免疫识别、免疫应答与免疫调节中起重要作用。专职性APC包括DC、巨噬细胞和B细胞三种。90．抗原处理：APC将胞质内自身产生的内源性抗原或摄取入胞内的外源性抗原降解并加工处理成一定大小的多肽片段，使多肽适合与MHC 分子结合，然后以抗原肽-MHC复合物的形式表达于APC表面，此过程统称为抗原处理。91．抗原提呈：在APC与T细胞接触的过程中，表达于APC表面的抗原肽-MHC复合物被T细胞识别，将抗原信息提呈给T细胞，此过程统称为抗原提呈。104．细胞免疫应答：免疫细胞发挥清除和破坏抗原物质（如病毒感染的细胞、肿瘤细胞、移植细胞等）的效应。106．MHC限制性：免疫细胞之间相互作用不仅识别抗原肽，还要识别自身MH C分子，称为MHC限制性。例如，巨噬细胞与Th细胞之间受MHCⅡ类分子限制，靶细胞与Tc之间受MH CI类分子限制。107体液免疫：抗原诱导B淋巴细胞活化、增殖，最终分化为浆细胞，产生和分泌特异性抗体，存在于体液中，发挥重要的免疫效应，称为体液免疫。111 Ig基因的体细胞高频突变：生发中心母细胞的重链和轻链V区基因可发生高频率的点突变，在每次细胞分裂中，IgV区基因大约每1000 bp就有一对发生突变，而一般体细胞自发突变的频率是1/107～1/1010。此称为体细胞高频突变。体细胞高频突变与Ig基因重排导致的多样性，共同构成了BCR和抗体的多样性。109抗体亲和力成熟：随着免疫应答的进行，大量抗原被清除，或再次免疫应答仅有少量抗原时，只有表达高亲和力BCR的B细胞才能优先结合抗原，发生克隆扩增，产生高亲和力的抗体，此为抗体亲和力成熟。113同种型转换：B淋巴细胞完成IgV基因重排后的子代细胞，在抗原的诱导和Th细胞分泌的细胞因子调节下，其IgV基因表达不变，而C基因的表达从一种类型转变到另一种类型，进而导致Ig 类型的改变，称为Ig同种型转换，也叫做类别转换，如从IgM到IgG的转变。177固有免疫：亦称非特异性免疫，是生物体在长期种系发育和进化过程中逐渐形成的一系列防卫机制。非特异性免疫在个体出生时就具备，可对外来病原体迅速应答，产生非特异抗感染免疫作用，同时在特异性免疫应答过程中也起重要作用。178模式识别受体（PRR)：是指单核/巨噬细胞和树突状细胞等固有免疫细胞表面和胞内器室膜上能够识别病原体某些共有特定分子结构的受体。血液中还存在分泌型模式识别受体（sPRR），主要有甘露聚糖结合凝集素（MBL）、C反应蛋白等急性期蛋白。125免疫耐受(immunological tolerance):对抗原特异应答的T与B细胞，在抗原刺激下，不能被激活产生特异免疫效应细胞，从而不能执行正免疫应答效应的现象，称为免疫耐受。126中枢耐受:是指在胚胎期及出生后T与B细胞发育过程中，遇自身抗原所形成的耐受。127外周耐受:是指成熟的T及B细胞，遇内源性或外源性抗原，不产生正免疫应答。133免疫调节:是指机体在长期进化过程中发育完善形成的一系列反馈性上调和下调免疫系统功能，将免疫应答控