临床生物化学检验复习指导
第一章绪论
第一节重点解析
临床生物化学检验是一门由分析化学、生物化学、电子计算机技术和临床医学等学科相互渗透结合逐渐形成的理论与实践性较强的边缘学科。是高等医学检验专业的一门主干学科。
一、临床生物化学检验的性质与任务
临床生物化学检验既是一门研究人体健康和疾病时生理生化过程的医学基础理论学科，又是一门应用各种技术和方法分析机体健康和疾病时体液或组织样品中各种化学成分的医学应用技术学科，它在医学理论和医学实践中均具有相当重要的地位。
它的作用主要有两方面，一方面阐明有关疾病的生物化学基础和疾病发生发展过程中的生物化学变化；在阐明疾病生化诊断的原理方面，偏重于论述疾病的生化机制，故又称为临床生物化学。另一方面开发应用临床生化检验的方法和技术，对检验结果的数据及其临床价值作出评价，用以帮助疾病的诊断以及采取适宜的治疗，偏重于临床生化实验室的应用，国内称为临床生化检验学。
它的主要任务是研究人体器官、组织、体液的化学组成和进行着的生化过程，以及疾病、药物对这些过程的影响，为疾病诊断、病情监测、药物疗效、预后判断和疾病预防等各个方面提供信息和理论依据。
二、临床生物化学检验的研究进展
近20年来，在疾病临床生物化学方面的研究进展主要表现在缺血性冠状动脉疾病、肝胆系统疾病、肾脏疾患、呼吸系统疾病、脂代谢疾病、神经与精神疾病、糖尿病及内分泌疾病以及骨代谢标志物、电解质与酸碱平衡、治疗药物监测、自由基与NO测定等方面。临床生化检验方法学的进展，主要表现在生化分离与分析技术、生化自动化分析与酶法分析、临床生化诊断试剂盒、方法学的高新技术含量、全面质量管理、分子生物学技术等方面。
三、临床生物化学检验与临床医学的关系
运用现代科学技术的原理和方法，探讨疾病的发生发展规律，并应用于临床诊断和疾病防治，是临床医学和检验医学的共同要求和迫切愿望。
1．与探讨疾病发生机制的关系临床生物化学检验从分子水平研究人体内在疾病状态下的生化变化和代谢异常，有助于从本质上阐明疾病的发病机制,研究阐明了健康和疾病的某些特征，同时，健康和疾病的多样性的研究又开拓了临床生化及检验学研究的新领域。反过来，人类对健康和疾病的认识又将从孤立地研究生化过程变化的方式改变为全面系统地研究细胞内复杂的网络式生化变化的模式，这对临床生物化学检验的研究来说是一种突破性进展。2．与临床疾病诊断和治疗的关系目前，临床开展的生化检验项目已达300余种，而且，许多检验项目已进入分子水平，对临床疾病诊断和治疗的价值越来越高，主要表现为：①疾病诊断和早期诊断；②判断疾病的严重程度和预后。③治疗效果监测。④治疗药物检测。⑤探讨疾病的机理。
随着临床生化检验技术的发展，用于诊断疾病、判断病情、疗效观察等生化项目和先进方法不断涌现，使得临床生物化学检验的领域更加多姿多彩。
第二节习题练习
一、A型题
【A1型题】
1. 目前，我国大医院多已开展了新的缺血性冠状动脉疾病诊断组合是
A. 肌红蛋白、肌钙蛋白T或I、CK-MB质量
B.LDH和AST及CK
B. LDH-1和AST及CK-MB
D.LDH-1和AST及CK-MB及其亚型
E. LDH-1和CK及CK-MB
2. 在肝炎辅助诊断中应用最广泛的酶是
A. AST
B. ALT
C.ALP
D.GGT
E.CHE
3.在胆红素临床研究中还观察到
A. 胆红素在急性肝炎和严重肝病时都升高
B.胆红素在急性肝炎和严重肝病时都降低
C.胆红素在急性肝炎恢复期升高，严重肝病时降低
D.胆红素在急性肝炎恢复期降低，严重肝病时升高
E.胆红素在急性肝炎恢复期和严重肝病时都升高
4.在原发性肝癌诊断标志物研究方面肝纤维化的指标已进入临床试验的是
A. AFP及其异质体
B.异常凝血酶原
C.GGT同工酶
D.丙酮酸激酶同工酶、岩藻糖苷酶（AFU）
E.Ⅲ型胶原与Ⅱ型胶原
5. 对肾小球损伤标志物的研究已推广应用的是
A. 肌酐，尿酶
B. 尿素氮及低分子量蛋白
C.尿酶及尿微量蛋白
D.尿微量蛋白、转铁蛋白
E.尿酶及低分子量蛋白
6. 我国研究的TC测定参考方法具有独创性，它是
A. 酶法
B. 免疫测定
C. HPLC法
D. 电泳法
E.ALBK法
【A2型题】
7. 不再是呼吸系统疾病重要监测指标是
A. 血浆HCO-3
B. pH、PCO2、PO2
C. 血清抗胰蛋白酶
D. IgG、IgM
E.IgA、IgE
8.下列标志物不可以提供骨吸收和骨形成的动态变化指数是
A. 骨碱性磷酸酶
B.I型前胶原C端肽和I型胶原交联N端肽
C.尿胶原砒啶交联
D.脱氧砒啶交联
E.钙、磷、镁及甲状旁腺激素
二、B型题
【B1型题】
（9~13共用备选答案）
A. 糖基化血红蛋白和糖化血清蛋白
B.β-羟基丁酸、乙酰乙酸
C.血糖、胰岛素及C肽
D.胰岛素细胞抗体、谷氨酸脱MM酶抗体和评估胰岛素抵抗
E.乳酸
9.糖尿病诊断
10. 糖尿病酮症的监测
11. 糖尿病并发症
12. 糖尿病分型诊断
13. 糖尿病的治疗检测
【B2型题】
（14~19共用备选答案）
A. 光谱技术
B.HPLC技术
C.半自动、全自动电泳技术
D.生化自动化分析
E.代谢物酶法测定
F.离子选择电极
G.干化学分析
H.生物芯片技术、
I.生物传感技术
14.在微量代谢物、药物检测方面
15.特别被急诊室广泛采用是
16.适合临床分离蛋白质、同工酶的是
17.适合临床大规模常规检测的是
18.温和、快速、无污染的检测方法是
19.将其高科技、复杂的实验构思全部完成在生产阶段
三、C型题
（20~23共用备选答案）
A. 酶试剂法测定
B. 离子选择电极法测定
C. 两者均可应用
D.两者均不可应用
20. 血清钠、钾测定
21. 血清氯、钙测定
22. 血清总蛋白、清蛋白测定
23. 血清ALT、AST测定
四、X型题
24.临床生物化学检验是
A. 理论与实践性较强的一门边缘学科
B.研究人体生理的基础学科
C.研究人体健康和疾病时生理生化过程的一门医学基础理论学科
D.分析机体健康时体液或组织样品中各种化学成分的一门医学技术学科
E.分析疾病时体液或组织样品中各种化学成分的一门医学技术学科
25.临床生物化学的主要作用是
A. 阐明有关疾病的生物化学基础
B.阐明疾病发生发展过程中的生物化学变化
C.阐明疾病生化诊断的原理
D.论述疾病的生化机制
E.促进临床医学的发展
26.临床生化检验学的主要作用是
A. 开发应用临床生化检验的方法和技术
B.对检验结果的数据及其临床价值作出评价
C.用以帮助疾病的诊断以及采取适宜的治疗
D.偏重于临床生化实验室的应用
E.促进临床生物化学诊断试剂的发展
27.临床生物化学检验对临床疾病诊断和治疗的价值主要表现为
A. 疾病诊断和早期诊断
B.判断疾病的严重程度和预后
C.治疗药物和治疗效果监测
D. 探讨疾病的机理
E. E.促进新药品的开发应用
28.近10年来用分子生物学技术对神经系统疾病的研究，并取得进展的有
A. 如苯丙酮尿症、舞蹈病、老年性痴呆
B.线粒体肌病和脑肌病
C.遗传性共济失调、神经肌肉疾病
D.神经纤维瘤、癫痫
E.X连锁智力低下及肝窦状核变性
第三节参考答案
一、A型题
【A1型题】
1.A
2.B
3.C
4.E
5.D
6.C
【A2型题】
7.A 8.E
二、B型题
【B1型题】
9.C 10.B 11.E 12.D 13.A
【B2型题】
14.B 15.G 16.C 17.D 18.E 19.H
三、C型题
20.C 21.C 22.D 23.A
四、X型题
24.ACDE 25.ABCDE 26.ABCDE 27.ABCD 28.ABCDE
第二章临床生物化学实验技术
第一节重点解析
一、光谱检验技术
利用各种化学物质都具有发射、吸收或散射光谱谱系的特征，以此来确定物质性质、结构或含量。在临床生物化学检验中，光谱分析是一类十分重要的技术，应用极为广泛。它既可以研究物质的结构分析，也可以对特定物质进行定性或定量的分析根据物质对光谱响应特征的不同，可把光谱检验技术分为发射光谱分析技术、吸收光谱分析技术和散射光谱分析技术三大类。
可见-紫外光分光光度法利用朗伯－比尔定律作为化学反应定量的基础，应重点掌握该定律的应用、使用条件和各个变量间的关系，从而根据已有的结果计算需要的变量。
吸光系数是表示物质特性的常数，是物质鉴定的基础，根据物质的吸光系数可以进行定量测定，但应注意其使用的条件。在化学反应中尽量选择吸光系数大的物质，可以提高测定的灵敏度。
在分光光度法的建立中，应掌握波长的选择、双波长测定的原理和抗干扰的原理。在可能的情况下应选择灵敏度高、选择性好的显色剂，同时需要应用适当的校准方式和计算方程式。
在定量分析中，大量使用分光光度计。该类仪器属于比较精密的分析计器，使用要求比较严格。其中单色光的纯度和波长的准确性直接影响到测定结果的准确性和精密度。在使用前和使用过程中应进行光源的检查和波长的校正。
原子吸收分光光度法是基于光源辐射出具有待测元素特征谱线的光，通过原子化器，被其中待测元素的基态原子所吸收，根据吸收而导致辐射特征谱线光被减弱的程度来测定待测元素的含量。与其它分析方法比较，它具有灵敏、准确、分析速度快、干扰少、无需化学反应和测量元素含量范围较广等优点。由于其检测灵敏度较高，操作环节比较多，而且每种元素需要一种的光源灯，因此在临床实验室一般较少应用于常规分析。
荧光分析法是利用某些物质吸收了一定波长的光能后，分子从基态跃迁到激发态，此类电子经与同类分子或它种分子相互碰撞，消耗相当，而下降至第一电子激发态的最低振动能阶。最低能阶下降到基态，同时发射出比原来所吸收的频率较低，波长较长的光能，称为荧光。利用元素的原子所发射的共振荧光波长的差异，可确定元素的种类或物质分子中某种结构，从荧光的强弱可以测定物质的含量。荧光分析定量是基于荧光物质的稀溶液，在一定的温度下，当激发光的波长、强度、荧光测定波长以及液层厚度一定时，所测得的荧光强度F与该溶液中荧光物质的浓度C成正比，F=kC。采用标准曲线法或直接比较法，对荧光物质进行定量。荧光分析法灵敏度高，可以进行微量分析和定量测定较微量的物质。但该方法影响因素较多，因此，在进行荧光分析时应严格控制各种条件才能获得灵敏、准确的分析结果。
二、电化学分析技术
电化学传感器在临床生化分析的应用中占据着主导的地位。其原理是将电极浸入待测溶液中组成原电池，其中一支电极的电极电位与待测离子的活度有关，其关系服从Nernst 方程，此电极称为指示电极；另一支电极是电位已知并且恒定的所谓参比电极,目前最常用的参考电极有甘汞电极和银-氯化银电极。
离子选择电极法根据标本情况又可分为直接法和间接法。直接法是用离子选择电极直接测定生物体液中的被测物质；间接法则是将标本进行预稀释，然后再进行测定，使得标本的使用量更少。间接法由于将标本进行了预稀释，可以控制其离子强度，也就是控制其活度系数，但间接法由于标本被稀释，测定结果比直接法低。
ISE具选择性好、灵敏度高，、线性范围宽、溶血、脂血及黄疸不影响测定，对有色、浑浊溶液都可进行分析、设备简单，分析速度快，易于自动化，标本用量少等优点，在临床上应用广泛。
三、电泳技术
电泳技术应用广泛，在生物化学实验技术中占有重要地位，主要用于蛋白质、核酸等的分离、鉴定和定量。目前已经发展到自动化的电泳系统，整个电泳过程包括点样、电泳、脱色、扫描定量都实现了自动化操作。同时用半干胶技术取代液体缓冲液，使得电泳操作更规范简便，电泳结果重现性更好。
应掌握电泳的原理、影响因素、各种电泳的特点和使用范围。
四、常用免疫分析技术
随着单克隆抗体的开发和使用、各种标记技术的发展使得免疫学进入了一个新的时期。由于免疫分析技术具有特异性好、快速、灵敏度高等，使得荧光分析法其应用范围十分广泛，在临床生物化学中可以对内分泌激素、蛋白质、多肽、核酸、神经递质、受体、肿瘤标志物、血药浓度等血清微量物质进行定量测定。
免疫比浊分析分为散射免疫比浊分析和透射免疫比浊分析，应掌握它们的原理、适用条件、影响因素和临床应用。
酶免疫分析是将酶催化的放大作用与抗原、抗体的免疫反应相结合的一种标记免疫分析技术。与放射免疫分析相比其最大优势在于避免了放射性核素对人体的损害、核素标记的抗原或抗体批间差异大，酶标记物具有明显较长的有效期和不需特殊设备等。近年来在EIA中又引进了放大系统，派生出荧光酶免疫分析、增强化学发光酶免疫分析等，使检测的灵敏度大大提高，应用范围不断扩大。应掌握均相EIA和非均相EIA的原理，各种方法的优缺点和应注意的问题。
化学发光免疫分析近十年来得到了很大发展，与微粒子发光免疫分析生物发光免疫分析、增强化学发光分析和电化学发光等以其灵敏度高、检测速度快、操作简便、所用试剂对人体无危害的优点，成为非放射性免疫分析技术中最具有发展前途的方法之一。主要掌握它们的原理和在临床中的应用。
时间分辨荧光免疫分析以镧系元素为标记物，是一种全新的非放射性标记免疫技术和超灵敏度的检测技术。其主要特点是以稀土元素铕（Eu3+）标记抗原或抗体为示踪剂。利用增强液的荧光放大作用和时间分辨荧光测量法排除样品或试剂中非特异性荧光物质的干扰，最大限度地提高了荧光信号测量的特异性和检测方法的灵敏度、操作方法简便、标记物制备容易、稳定性好、不污染环境和易于自动化等优点。
五、其他检验技术
离心机是利用物质的高速旋转时产生强大的离心力，使置于该旋转体中的悬浮颗粒发生沉降或漂浮，从而使某些颗粒达到浓缩或与其他颗粒分离的目的。离心机的种类繁多，用途各异。在使用中应掌握离心力的换算，沉降系数的意义和表示方法，离心机使用中应注意的问题。
高效液相层析法是用特制微粒（<10um）充填的层析柱作为固定相，通过高压使液体流动相快速通过层析柱而达到快速有效分离液相中各种物质的层析技术。它具有分离效果好、分析速度快，检测灵敏度高等特点。在医药卫生和生物化学中得到广泛的应用，蛋白质、糖类、核酸、氨基酸、生物碱、类固醇和类脂等大分子以及高分子聚合物度能用HPLC测定。
放射免疫分析是利用了现代放射性测量技术的高度敏感性和精确性，灵敏度高，是一种超微量的分析技术。同时，由于其分析原理是基于抗原与抗体间高度专一性的结合反应，因而它具有很高的特异性，能从组分十分复杂的样品中准确地测出某一特定组分的含量而不受其它组分的干扰。其分析原理是：用放射性核素标记配体或结合剂，在配体与结合剂之间竞争性或非竞争性的可逆性结合反应，形成配体－结合剂复合物，其反应遵循质量作用定律。放射免疫分析根据结合反应原理及方法学设计原理的不同有许多类型。主要用于激素、微量蛋白等的定量测定，在临床中应用较广。
生物传感器是指固定化的生物体内成分(酶、抗原、抗体、激素等)或生物体本身（细胞、细胞器、组织等）为敏感元件组成的传感器。生物传感器这种新的检测手段与传统的生
物化学相比具有以下的主要特点为①生物传感器是用选择性好的生物体材料作为敏感材料，因此一般不需要进行样品的前处理，一般也不需另加其他试剂，使用简便、快速、准确；；
②由于它的体积小，可以实现连续在位检测，联机操作；③响应快，样品用量少，且由于敏感材料是固定化的，可以反复多次使用；④传感器连同测定仪器的成本远低于大型的分析仪，便于推广普及。
生物传感器根据利用的生物物质的不同可分为两类。一类是利用酶、细胞内小器官、细胞、组织等具有辅酶特性物质的生物催化传感器。酶传感器、微生物传感器和组织传感器属于此类；另一类是利用抗体、结合蛋白质、激素受体、DNA、RNA等具有亲和性物质的传感器。免疫传感器、受体传感器、DNA传感器属于这类。
生物芯片是指采用光导原位合成或微量点样等方法，将大量生物大分子比如核酸片段、多肽分子甚至组织切片、细胞等等生物样品有序地固化于支持物（如玻片、硅片、聚丙烯酰胺凝胶、尼龙膜等载体）的表面，组成密集二维分子排列，然后与已标记的待测生物样品中靶分子杂交，通过特定的仪器对杂交信号的强度进行快速、并行、高效地检测分析，从而判断样品中靶分子的数量、种类等信息。根据芯片上的固定的探针不同，生物芯片包括基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片，另外根据原理还有元件型微阵列芯片、通道型微阵列芯片、生物传感芯片等新型生物芯片。如果芯片上固定的是肽或蛋白，则称为肽芯片或蛋白芯片；如果芯片上固定的分子是寡核苷酸探针或DNA，就是DNA芯片。
生物芯片技术应用于疾病的诊断、新药开发、基因测序、基因表达分析、寻找新基因、突变和多态性研究等诸多方面。生物芯片技术虽然还处在初期发展阶段，它的飞速发展正在逐步改变着人们对生物体的认识，随着这一技术的深入发展，它将对临床疾病诊断、疾病发生机理的认识和新药开发都将是一个重要的研究手段。但仍然存在着许多难以解决的问题，例如技术成本昂贵、复杂、检测灵敏度较低，重复性差、分析泛围较狭窄等问题。这些问题主要表现在样品的制备、探针合成与固定、分子的标记、数据的读取与分析等几个方面。
第二节习题练习
一、A型题
【A1型题】
1. 可见－紫外分光光度法的理论基础为
A. 朗伯-比尔定律
B．Nernst方程式
C．Rayleigh方程式
D．Heidelberger曲线
E．以上均不是
2．分光光度法中A代表
A. 透光率
B．散射光强度
C．吸光度
D．物质的浓度
E．以上均不是
3．测定微量元素含量常用
A. 可见－紫外分光光度法
B．原子吸收分光光度法
C．荧光分析法
D．电化学分析法
E．电泳技术
4．关于原子吸收分光光度法的叙述正确的为
A. 干扰少
B．应用范围广，一种光源可检测多种元素
C．为了改善检出限，尽可能使用宽的狭缝
D．仪器通电后可立即检测
E．以上均正确
5．荧光分析的灵敏度通常可达
A. 10－6g/l
B．10－10g/l
C．10－16g/l
D．10－13g/l
E．10－4g/l
6．荧光分析中温度升高可引起
A. Rayleigh散射
B．Mie散射
C．自熄灭现象
D．温度效应
E．荧光强度增大
7．目前分辨率最高的电泳支持体为
A. 琼脂糖凝胶
B．醋酸纤维素薄膜
C．淀粉胶
D．聚丙烯酰胺凝胶
E．以上均不正确
8．自动化特种蛋白分析仪多采用
A. 散射比浊分析技术
B．透射比浊分析技术
C．荧光分析技术
D．电化学分析技术
E．酶免疫分析 9．ELISA又称
A. 均相EIA
B．化学发光免疫分析
C．荧光分析法
D．时间分辨荧光免疫分析
E．非均相EIA
10．目前最好的血药浓度检测方法为
A. 时间分辨荧光免疫分析
B．高效液相层析法
C．酶免疫分析法
D．生物传感技术
E．免疫比浊分析
【A2型题】
11.关于吸光系数的叙述错误的为
A．吸光系数指吸光物质在单位浓度及单位厚度时的吸光度B．在给定条件下，吸光系数是表示物质特性的常数
C．在吸光度与浓度（或厚度）之间的直线关系中，吸光系数可代表检测的灵敏度D．摩尔吸光系数是物质的浓度为1mol/l，厚度为1cm时的吸光系数
E．以上物质浓度指样品中被测物，而非显色液中被测物浓度。
12.下列说法错误的为
A．紫外光的波长范围为200－400nm
B．双波长法只能消除干扰组分的干扰
C．双波长法中欲测组分在两波长处的吸光度相差愈大，灵敏度愈高
D．吸光峰对应的波长称为最大吸收波长
E．双波长法中干扰组分在两波长处的吸光度最好相等
13.在原子吸收分光光度法中，为提高灵敏度下列做法错误的为
A．选择最灵敏的吸收线
B．使用较宽的狭缝
C．采用较小的电流
D．采用最佳的火焰类型及状态
E．调整光源
14.关于荧光分析错误的为
A．可对物质进行定量分析
B．可确定物质分子中某种结构
C. 属于发射光谱分析法
D．不能定性
E．溶剂可影响荧光分析
15.有关电解质分析仪的叙述错误的为
A．为了延长仪器的寿命，不用时应关闭仪器
B．应保持电极很好的水化，增加电极的稳定性
C．仪器启动后，清洗管路，进行两点校准
D．每天测定后对电极进行必要的保养
E．电极膜上附着的蛋白质应去除
16.关于毛细管电泳叙述错误的为
A．粒子运动受电场和电渗流的影响
B．正离子向负极移动
C. 负离子也可向负极移动
D．电渗作用可通过中性物质的速度测定
E．使用高压电场带来的产热难以克服 17.下列说法错误的为
A．聚丙烯酰胺凝胶分辨率高
B．等电聚焦电泳用两性电解质作为介质中的缓冲成分
C. 聚丙烯酰胺凝胶不具有分子筛的功能
D．琼脂糖凝胶的最适浓度为0．5－1．0％
E．醋酸纤维素薄膜不吸附染料
18．关于免疫比浊分析下列叙述错误的为
A．散射比浊法中散射光强度与复合物的含量成正比
B．加入的抗原或抗体应过量才能维持复合物的相对不溶解性
C．透射比浊法中测得的光通量与复合物的量成正比
D．颗粒的大小和形状影响比浊结果
E．散射比浊法是免疫比浊分析中最常用的一种方法
19．下列不属于生物传感器的为
A． Na+电极
B．酶电极
C．组织电极
D．微生物电极
E．免疫电极
20．关于离心技术下列说法错误的为
A．离心技术主要用于浓缩或分离物质
B．8000rpm以下称低速离心机
C．分析型离心机有光学系统而制备型离心机无D．使用离心机最重要的是平衡
E．沉降系数是颗粒在单位离心力下的沉降速度
【A3型题】
〔题21－23共用题干〕
分光光度法属于精密仪器，使用前要进行检查校正21．关于光源的说法正确的为
A. 不需要检查光源
B．波长选在580nm进行检查
C．检查时应缩小狭缝
D．换新灯泡时不需重新调整
E．以上均不正确
22．若光源正常，则可见到
A. 白色光斑
B．光斑明暗不均
C．光斑边缘模糊
D．明亮均匀光斑
E．蓝色光斑
23．关于波长的说法正确的为
A．可用镨钕玻璃校正
B．温度对波长的精度无影响
C．标准重鉻酸钾溶液不能用来校正波长
D．波长精度在±6~±7nm可不调整
E．不能通过光源检查来筛选波长
二、B型题
【B1型题】
〔题24－28共用题干〕
A. 原子吸收分光光度法
B．散射比浊法
C．荧光分析法
D．电化学分析技术
E．电泳技术
指出检测下列物质常用的技术
24.锌的检测
25.DNA的检测
26.蛋白质的分离与鉴定
27.血清钠的检测
28.微量蛋白的检测
【B2型题】
〔题29－34共用题干〕
A. 丽春红S
B．考马斯亮蓝R250
C．溴化乙啶
D．伊红
E．结晶紫
F．SDS
G．过硫酸胺
H．四甲基乙二胺
I.冰醋酸－乙醇
J．甲叉双丙稀酰胺
29.制备聚丙烯酰胺凝胶的催化剂
30.制备聚丙烯酰胺凝胶的加速剂
31.醋酸纤维素薄膜常用的染料
32.核酸电泳常用的染料
33．蛋白质电泳中为消除或减少电荷对蛋白质移动的影响常加入
三、C型题
〔题34－38共用题干〕
A．直接参与发光反应的标志物
B．以催化反应或能量传递参与发光的酶标志物
C 两者均是
D．两者均不是
34．辣根过氧化物酶
35.三联吡啶钌标志物
36.吖啶酯Ⅰ
37．碱性磷酸酶
38．稀土元素铕
(题39－43共用题干)
A．激发光
B．发射光
C．两者均有
D两者均无
下列生化检验技术在检测过程中有哪些光参与
39.荧光分析法
40.化学发光免疫分析
41.紫外－可见分光光度法
42.酶免疫法
43.时间分辨荧光免疫分析
四、K型题
44．分光光度法中如何消除或减少干扰
⑴用双波长法
⑵用掩蔽剂
⑶采用联立方程式
⑷用显色剂
45．影响荧光分析的因素有
⑴温度
⑵溶剂
⑶溶液的PH值
⑷浓度
46．ISE法的核心为
⑴电极电位与待测离子的活度的关系服从Nernst方程式
⑵溶液的PH值要适当
⑶要保持标准液与标本之间具有相同的离子强度
⑷敏感膜对被测离子选择性响应
47．荧光分析定量的基础为
⑴荧光物质为稀溶液
⑵激发光强度与荧光物质浓度成正比
⑶在一定条件下，荧光强度与荧光物质的浓度成正比
⑷根据发出荧光的波长定量
48．免疫比浊分析是
⑴测定方法遵循比尔定律
⑵应按照雷莱方程式
⑶利用散射光强度或对入射光减弱的原理进行定量分析
⑷能直接用比尔定律测定
五、X型题
49．分光光度法中常用双波长法消除干扰，下列叙述正确的为A．干扰组分在两波长处的吸光度最好相同
B．欲测组分在两波长处的吸光系数有显著区别
C．干扰组分在两波长处的吸光度有显著区别
D．欲测组分在两波长处的吸光系数相同
50．下列叙述正确的为
A．荧光分析的灵敏度大于分光光度法
B．物质浓度愈高，荧光强度愈强
C．发射光波长小于激发其发出荧光的激发光波长
D．利用元素的原子所发射的共振荧光的差异可确定元素的种类
51．ISE的特点
A. 选择性好
B．灵敏度高
C. 线形范围宽
D．溶血不影响测定
52．离子选择性电极法的影响因素有
A．离子强度
B．溶液的PH值
C．温度
D．干扰离子
53．影响颗粒电泳迁移率的因素有
A．带净电荷的数量
C．电场强度
D．电渗
54．测定葡萄糖可应用
A．电化学分析技术
B．生物传感技术
C．荧光分析法
D．以上均正确
55．分光光度法中定量分析常用的方法有
A．标准曲线法
B．直接比较法
C．标准加入法
D．外标法
56．HPLC经常采用的检测器是
A．紫外或紫外－可见分光检测器
B．荧光检测器
C. 示差检测器
D电化学检测器
57．离心技术中影响颗粒沉降速度的因素有
A．介质的粘滞度
B．颗粒直径
C．离心加速度
D．颗粒偏离球形的程度
58．时间分辨荧光免疫分析采用的标记物为
A．放射性物质
B．稀土元素
C．酶
D．地高辛
第三节参考答案
一、A型题
【A1型题】
1.A
2.C
3.B
4.A
5.D
6.C
7.D
8.A
9.E 10.B
【A2型题】
11.E 12.B 13.B 14.D 15.A 16.E 17.C 18.C 19.A 20.B 【A3型题】
21.B 22.D 23.A
二、B型题
【B1型题】
24.A 25.C 26.E 27.D 28.B
【B2型题】
29.G 30.H 31.A 32.C 33.F
34.B 35.D 36.A 37.B 38.D
39.C 40.B 41.A 42.D 43.C
四、K型题
44.E 45.E 46.D 47.B 48.A
五、X型题
49.AB 50.AD 51.ABCD 52.ABCD 53.ABD
54.AB 55.AB 56.ABCD 57.ABCD 58.B
第三章临床酶学检验技术略
第四章临床生化检验全面质量控制
第一节重点解析
临床生化检验全面质量控制（TQC）是利用现代科学管理的方法和技术检测分析过程中的误差，控制与分析有关的各个环节，确保实验结果的准确可靠。也称为实验室质量保证。
一、全面质量控制的内容
全面质量控制的内容主要包括标本分析前、分析中和分析后的三个质控。
分析前质量保证的内容主要为：① 人员的素质和稳定性；② 实验室的设置和工作环境；③ 实验仪器的质量保证；④ 检测方法的选择和评价；⑤ 试剂盒的选择与评价；⑥ 病人准备；
⑦ 标本的采集、处理和储存；⑧实验室用水等。
分析中质量控制的内容主要包括：① 标本的正确处理和应用；②项目操作规程的建立；③室内质控和结果分析；④登记和填发报告等。
分析后质量评估的内容主要有：① 运送实验报告；② 室内质控的数据管理；③ 参加室间评质；④ 病人投诉调查；⑤临床信息反馈等。
二、标本采集与处理
1．血标本采集前应注意的事项标本采集前影响血液成分变化的因素主要有生理、饮食、药物和采血时间等。采血时间宜在早晨空腹6～12小时后进行，这样血浆组成物质的浓度相对比较稳定，其分析的结果才具有代表性。
2．血标本采集时应注意的事项应尽量避免溶血。防止溶血的办法有：①抽血器和容器必须干燥洁净，因为红细胞遇水即会溶血，应尽量使用一次性抽血器；②不用或短时间使用止血带，忌长时间压迫血管；③抽血后取下针头再将血液沿容器壁徐徐注入容器内，切勿用力过猛；④若需血浆可用抗凝管作容器，应轻轻倒转容器与抗凝剂混匀，切勿用力振摇。
3．血标本采集后应注意的事项采血后应尽快分离血清（浆），一般不应超过2小时，并及时测定，必要时可置冰箱保存。
三、分析仪器的质量保证
（一）分析仪器的性能检查
1．波长校正在更换光源灯、重新安装、搬运或检修后，以及仪器工作不正常时，都要进行波长校正。就是正常工作的仪器，每隔一个月也要检查一次，这样才能保证读数与通过样品的波长符合，保证仪器的最大灵敏度。
2．线性检查包括仪器线性及测定方法线性两个方面的检查。线性误差表现为溶液的浓度与吸光度不成线性关系，出现正偏离或负偏离的现象。这种偏离，一是溶液本身不符合比耳定律，这种现象叫做化学偏离；二是仪器本身各种因素的影响，使吸光度测定值与浓度之间不成线性关系，这种现象叫做仪器偏离。仪器偏离的因素很多，如杂光、有限宽带、检测器噪声、环境条件的变化、波长的变动、比色杯的误差、辐射光的非平行性、检测器本身的非线性等。
3．杂光（杂散光）检查在吸光度测定中，凡检测器感受到的不需要的辐射都称为杂光，杂光对吸光度测定法的准确性有严重的影响，杂光的来源有：①室内光线过强而漏入仪器，仪器暗室盖不严；②仪器本身的原因，如单色器的设计、光源的光谱分布、光学原件的老化程度、波带宽度、以及仪器内部的反射及散射等；③样品本身的原因，如样品有无荧光、样品的散射能力强弱等。杂光检测方法：①紫外光区用12g/L的氯化钾溶液，在220nm处测其透光度，即为杂光量；②可见光区插入谱钕滤光片，在585nm处测定，其测定值即为杂光水平。小于1%T为合格。
4．稳定性检查当电源电压在220-230V范围内变化时，仪器读数漂移不应超过透光度标尺上限值的±1.5%。在电源电压不变的条件下，在3分钟内其读数漂移不应超过标尺上限值的±0.5%。
５．重复性检查在波长、工作状态、电源电压、比色杯等合格的前提下，可进行重复性检查。用重铬酸钾溶液（30、60、90、190mg铬/L）在波长440nm，将各浓度管连续测3～5次，各浓度管中最大差值误差小于1%T为合格。
6．灵敏度检查将重铬酸钾液配制成30和32.5mg铬/L及120和122.5mg铬/L的4种应用液（浓度差两组各为2.5mg铬/L）。波长440nm，以水校零点，将上述应用液连续测3次吸光度，2.5mg铬/L浓度差的吸光度值差不小于0.01。
（二）分析仪器日常工作状态监测
1．监测方法在可见光区范围内，常用硫酸镍水溶液。该液在440nm～700nm之间有吸收峰，峰值在510nm。检查时，在400、460、510、550及570nm处测定硫酸镍溶液的透光度值，记录并保存。待一定时间后用该溶液再检测。比较前后两次的数据，即可知仪器的工作状态。每天监测均应任选一法校正波长。一般应每月监测一次。当400nm及700nm处杂光增强时，可能的原因包括：①激发光源陈旧，变黑或表层模糊不清。透镜有灰尘。③色散元件失效等。如510nm处透光度减弱，可能原因为光源灯丝故障，比色池出光缝失灵或光栅损坏。
硫酸镍溶液的制备：将硫酸镍溶于0.1%的硫酸中，用量的多少以在510nm处所测得的透光度达80%T为准（以0.1%硫酸校零点）,配好后密封备用。
2．监测的意义在400、700nm处的测定可以监测杂光，这些波长处的测定值升高说明杂光增加，其中任一值增加3%就需要进行检修。510nm处的测定值可以监测带宽，这个波长的测定值减小说明带度加大。光源强度减弱或波长不准可以产生这种结果，如降低2%T，对于带宽为20nm的仪器就需要修理了。460与550nm处的读数主要作为监测波长之用，称二次波长校正。这两个波长的读数相互关联，一个升高另一个就降低。如460nm的测定值（透光度）降低，而550nm的测定值升高，说明透过比色杯样品的波长小于波长度盘指示的波长。反之，如460nm的测定值升高，而550nm的测定值降低，说明透过比色杯样品的波长大于波长度盘指示的波长。
(三) 分析仪器的质量管理
分析仪器的质量管理包括①建立仪器的相关记录; ② 建立仪器的操作程序; ③ 建立仪器的检定与校准程序; ④ 仪器的比对确保结果的一致性。
四、临床生化实验室内质量控制
室内质控（IQC），旨在检测和控制常规工作的精密度和准确度，提高常规工作中天内和天间标本检测的一致性。能及时地、准确地报告检验结果。
（一）控制物
控制物又称质控品，质控品应具有的特征是：①人血清基质，分布均匀；②无传染性；③添加剂和调制物的数量少；④瓶间变异小，酶类项目一般瓶间CV%应小于2%，其它分析物CV%应小于1%；⑤冻干品其复溶后稳定，2-8℃时不少于24小时，-20℃时不少于20天；某些不稳定成分（如BIL，ALP等）在复溶后4小时的变异应小于2%；⑥在实验室的有效期应在一年以上；⑦合理的成本。
质控品的使用和保存应①严格按质控品说明书操作；②冻干质控品的复溶要确保所用溶剂的质量；③冻干质控品复溶时所加的量要准确，并尽量保持每次加入量的一致；④冻干质控品复溶时应轻轻摇匀，使内溶物完全溶解，切忌剧烈震摇；⑤质控品应严格按使用说明书规定的方法保存，不使用超过保质期的质控品；⑥质控品要在与患者标本同样测定条件下进行测定。
设定靶值分①暂定靶值的设定：根据20次或更多独立批次获得的至少20次质控测定的结果，计算出平均值，作为暂定靶值。②常用靶值的设立：以最初20个数据和三至五个月在控数据汇集的所有数据的累积平均数作为质控品有效期内的常用靶值，并以此作为以后室内质控图的平均数，对个别在有效期内浓度水平不断变化的项目，则须不断调整靶值。
控制限通常是以多个标准差表示，即以标准差的倍数表示。暂定标准差和常用标准差的设定方法同暂定靶值和常用靶值的设定。
（二）室内质控主要方法
1. 均数－标准差（ -S）质控图
方法是用单一浓度未定值血清，在天内、天间反复测定20次，计算均值（）、标准差（S）和变异系数（CV），绘制 -S质控图，得到均值线（）、警告线（±2S）和失控线（±3S）。与质控图制作相同批号的控制血清，每天随病人标本分析，结果点在图上，直线连接。
正常分布规律，① 95%数据落在±2S内；② 不能有连续5次结果在同一侧；③不能有5次结果渐升或渐降；④不能连续2个点落在±2S以外；⑤不应该有落在±3S以外的点。异常表现，① 漂移，提示存在系统误差；②趋势性变化，说明试剂或仪器的性能已发生变化；③ 精度变化，提示测定的偶然误差较大。
2.Westgard多规则质控法
方法要求在常规条件下，同时测定2份定值质控血清，并要求质控血清所含测定物浓度最好分别为医学决定水平的上限（高值）或下限（低值），或者是分析方法测定范围的上限和下限。将测定结果分别绘成2份不同浓度的－S质控图，当有一份质控血清测定值处于质控图上2S～3S界限内，发出"警报"信号时，即应采用其余各条规则对质控图进行全面检查，若符合其中一条，就应把该批分析测定的结果判为"失控"。
（三）失控后处理
操作者在测定质控时，如发现质控数据违背了质控规则，应填写失控报告单，对失控结果要进行回顾、检查、重复测定，或另取质控品分析，或检查仪器、试剂和操作等，以纠正失控。
五、室间质量评价和能力比对分析
室间质量评价（EQA）是通过实验室间的比对，观察各实验室结果的准确性、一致性，并采取一定措施，使各实验室结果渐趋一致。能力比对分析（PT）是室间质量评价技术方案之一，现已成为全球性室间质量保证系统的主要内容，以保护病人的利益和公众的福利。PT方案是通过实验室之间的比对判断实验室的检测能力的活动。
（一）室间质评应具备的条件
做好室间质评工作：① 要有一支素质较高的质控技术队伍；②参加室间质评的实
验室要有室内质控的基础；③要有良好质控血清作为调查样本；④调查样本的定值方法要可靠，应有参考实验室作后盾；⑤统一测定方法及校准品。
（二）室间质评的方法
组织若干实验室，共同在同一时间内测定同一批样品、收集测定结果，作统计分析并按规定评分。
变异指数得分（VIS）计算公式为：
V = VI =
其中V为变异百分数，X为各室测定值，T为靶值， VI为变异指数，CCV为选定的变异系数。在计算时，VIS只计整数位，并不带正负符号。
WHO对发展中国家在国际质评中的标准为：VIS＜50为优秀；VIS＜100为良好；VIS ＜150为及格。我国的标准为：VIS＜80为优良；VIS＜150为及格。
（三）变异指数移动总均值
变异指数移动总均值（OMRVIS）是动态反映实验室工作质量的一个指标，表示实验室工作质量提高或下降的总趋势。
（四）研究不及格室间质评结果的程序
调查应包括：①书写误差的检查；②质控记录，校准状况及仪器功能检查的审核；
③当可能时，重新分析和计算。④评价该分析物实验室的历史性能。
不及格结果可分为如下几种类型：①书写误差；②方法学问题；③技术问题；④室间质评物问题；⑤结果评价的问题；⑥经调查后无法解释的问题等。
(五) 能力比对分析
方法是将未知标本分发给各实验室，并提供可靠的标准，对回报结果进行分析，判断实验室获得正确测定结果的能力。国际CLIA′88的PT方案规定，临床生物化学项目每年至少进行3次PT调查，每次调查至少包括5个不同的质控样本，TP在一年内，对于任一项至少可得15个测定结果。通过各实验室间持续的比较，作出结果判断。
国际CLIA′88技术细则规定，结果计算出的S1、S2均应大于80，否则判为不满意，且如果S1或S2连续两次或两次以上不满意，即为失败，对于某一个接受结果，不再进行优劣分级。
第二节习题练习
一、A型题
【A1型题】
1.CLIA'88的技术细则规定满意S1、S2均应大于
A 60
B 70
C 80
D 90
E 100
2.在室间质评中，一般认为VIS大于多少时表明测定结果超过允许误差
A 150
B 200
C 300
D 400
E 450
3.Westard多规则质控法选用的两份定值血清的浓度为
A .甲为医学决定水平的上限，乙正常
B.甲正常，乙为医学决定水平的下限
C.甲为医学决定水平的下限，乙正常
D.甲为医学决定水平的上限，乙医学决定水平的下限
E .甲、乙均正常
4.OCV与RCV的关系是
A .OCV=RCV
B .OCV>RCV
C .OCV D .OCV<1/2RCV E .两者无关系 5.在室内质控中， -S质控图发生漂移，提示存在 A 偶然误差 B随机误差 C 方法误差 D系统误差 E试剂误差 6.在进行分析仪器的线性检查时，常用的方法是在610nm处检测 A 伊文蓝 B重铬酸钾 C 硫酸镍 D碘化钠 E氯化钠 7.采血后应尽快分离血清（浆），一般不超过 A 1h B 2h C 6h D 12h E 24h 8.硫酸镍水溶液在440nm～700nm之间有吸收峰，峰值在 A.400 nm B.460 nm C.510 nm D.550 nm E.700nm 9.. 以硫酸镍水溶液监测仪器带宽，测定波长是 A.400 nm B.460 nm C.510 nm D.550 nm E.700nm 10.在均数－标准差（ -S）质控图中失控线是 A. B. -S C. ±2S D. ±2.5S E. ±3S 【A2型题】 11.分析前的质量保证不包括 A. 检测方法的选择和评价 B. 实验室用水 C. 质控标本的正确测定 D. 人员的素质和稳定性 E. 试剂盒的选择和评价 12.下列哪一种方法不可以防止血液标本的溶血 A 采血器盒容器必须干燥、洁净 B不用或短时间使用止血带 C采血后取下针头再将血液沿容器壁徐徐注入容器内 D 用抗凝管做容器时，应用力振荡，使血液与抗凝试剂充分混匀 E 尽量使用一次性采血器 13..分析中的质量控制不包括 A 实验仪器的质量保证 B室内质控和结果分析 C项目操作规程的建立 D质控标本的正确测定 E 登记和填发报告 14..分析后的质量评估不包括 A 室内质控和结果分析 B室内质控的数据处理 C病人投诉调查 D 运送实验报告 E 参加室间质评 15. 关于室间评价，下列说法错误的是 A 室间质量评价不能代替室内质控 B 参加室间质评的实验室不需以室内质控为基础 C 有良好的质控血清作为调查样本 D目的是通过实验室间的对比，并采取一定措施，使各实验室结果渐趋一致E 有一支素质较高的质控技术队伍 16.分析仪器的性能检查不包括 A 波长校正 B 线性检查 C 杂光检查 D稳定性检查 E 变异系数检查 17. 以下哪种血标本的成份变化不属于分析前 A葡萄糖转化为乳酸，使血糖浓度降低 B 血液中的CO2在空气中发生损失 C血浆中的无机磷减少 D酸性磷酸酶失活 E 有些物质可以通过红细胞膜而进入血浆 18. PT方案，下列哪种说法是错误的 A.是提高实验室检测准确性的重要举措 B.是室间质量评价技术方案之一 C.是地方性室间质量保证系统的主要内容 D.以保护病人的利益和公众的福利 E.是通过实验室之间的比对判断实验室的检测能力的活动 19.质控品在使用和保存中不当的是 A. 确保复溶溶剂的质量 B. 复溶溶剂加量要准确 C. 不使用超过保质期的质控品 D.冻干品复溶时应剧烈震摇均匀 E. 质控品要与标本在同样条件下测定 20.下列哪项不符合质控品应具有的特征： A.人血清基质 B.无传染性 C.添加剂和调制物的数量少 D.瓶间变异小于5% E.冻干品复溶后应稳定 【A3型题】 (题21-23共用题干) 血液标本在采集前有许多需要注意的事项 21.受性别影响的指标 A生长激素 B骨钙素 C胆固醇 D GLU 22.食物中的香料对测定有影响的是 A GLU B AST C儿茶酚胺代谢物 D胆碱类药 23.强烈运动会造成下列哪个检测指标结果下降A肌酐 B ALT C磷 D 铁 (题24-26共用题干) 血液标本在采集时有许多需要注意的事项， 24.静脉采血的部位，成人多用 A肘前静脉 B腕背静脉 C颈静脉 D股静脉 一、名词解释 1、抗凝剂：应用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子，阻止血液凝固，称为抗凝。阻止血液凝固的化学试剂称为抗凝剂。 2、决定性方法：准确度最高，系统误差最小；经过详细研究未发现产生误差的原因，其测定结果与―真值‖最为接近的方法。主要有重量分析法、中子活化法、同位素稀释-质谱分析法（ID-MS）等。 3、参考方法：是指准确度与精密度已经被充分证实，且经公认的权威机构（国家主管部门、相关学术团体和国际性组织等）颁布的方法。这类方法干扰因素少，系统误差很小，有适当的灵敏度、特异度、较宽的分析范围并且线性良好，重复测定中的随机误差可以忽略不计。 4、常规方法：具有足够的精密度、准确度和特异度，有适当的分析范围，经济实用，其性能指标符合临床或其它目的的需要的方法。 5、标准品：它的一种或几种物理或化学性质已经充分确定，可用以校正仪器和某种测定方法的物质。 6、一级标准品：已经确定的稳定而均一的物质，其数值已由决定性方法确定或由高度准确的若干方法确定，所含杂质已经定量。主要用于校正决定性方法，评价和校正参考方法以及为―二级标准品‖定值。 7、二级标准品：这类标准品可以是纯溶液（水或有机溶剂的溶液），也可以存在于相似基质中。可由实验室自己配制或为商品，其中有关物质的量由参考方法定值或用一级标准品比较而确定。主要用于常规方法的标化和控制物的定值。 8、控制物：控制物用于常规质量控制，以控制病人标本的测定误差。有定值血清和未定值血清两种。控制物不能用于标定仪器或方法。 9、实验误差：简称误差，是量值的给出值与其客观真值之差。 10、系统误差：是指一系列测定值对真值存在同一倾向的偏差。它具有单向性，而没有随机性，常有一定的大小和方向；一般由恒定的因素引起，并在一定条件下多次测定中重复出现。当找到引起误差的原因，采取一定措施即可纠正，消除系统误差能提高测定的准确度。 11、随机误差：是指在实际工作中，多次重复测定某一物质时引起的误差。误差没有一定的大小和方向，可正可负，数据呈正态分布；具有不可预测性，不可避免，但可控制在一定范围内；分析步骤越多，造成这种误差的机会越多；随测定次数增加，其算术均数就越接近于真值。 12、精密度：是表示测定结果中随机误差大小程度的指标。它表示同一标本在一定条件下多次重复测定所得到的一系列单次测定值的符合程度。 13、准确度：是指测定结果与真值接近的程度，一般用偏差和偏差系数表示。 14、特异度：即专一性，是指在特定实验条件下分析试剂只对待测物质起反应，而不与其它结构相似的非被测物质发生反应。分析方法特异度越高，则测定结果越准确。 15、干扰：是指标本中某些非被测物质本身不与分析试剂反应，但以其它形式使待测物测定值偏高或偏低的现象，这些非被测物质称为干扰物。 16、检测能力：即检测限度或检出限，是指能与适当的―空白‖读数相区别的待测物的最小值。 17、回收试验：回收是指候选方法准确测定加入常规分析标本的纯分析物的能力，用回收率表示。回收试验的目的是检测候选方法的比例系统误差。 18、回收率：回收试验中测得的回收浓度占加入浓度的百分比例。 19、允许分析误差：表示95%标本的允许误差限度，或95%的病人标本其误差应小于这个限 20、参考值：从按若干标准规定的参考人群中选定一定数量的参考个体，通过检测所得结果，经统计学处理求得均值（X）和标准差（s），均值（X）即为参考值。 21、参考范围：从按若干标准规定的参考人群中选定一定数量的参考个体，通过检测所得结果，经统计学处理求得均值（X）和标准差（s），上述结果的95%的分布区间（X±2s）即为参考范围。 22、医学决定水平：为对临床病人的诊疗具有医学判断作用的临界分析物浓度。 23、金标准：是指通过活检、尸检、外科手术、随访等所做出的决定性诊断。 一、A型选择题 1．在荧光定量分析法中，下列哪种不是影响荧光强度的因素（） A．荧光物质的浓度 B．溶剂的性质C．荧光物质的摩尔吸光系数 D．温度E．溶液的pH值 2．琼脂糖凝胶电泳用pH8.6的巴比妥缓冲液可以把血清蛋白质分成五条区带，由正极向负极数起它们的顺序是（） A．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白 B．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白 C．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β-球蛋白 D．α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白、白蛋白 E．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、α2-球蛋白 3．在区带电泳中，能产生电荷效应和分子筛效应的固体支持介质有（） A．醋酸纤维素薄膜、纤维素、淀粉B．纤维素、淀粉、琼脂糖 C．硅胶、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶D．淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶 E．醋酸纤维素薄膜、硅胶、纤维素 4．利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是（） A．凝胶层析法B．吸附层析法C．分配层析法D．亲和层析法 E．离子交换层析法 5．通过在波片或硅片上制作各种微泵、阀、微电泳以及微流路，将生化分析功能浓缩固化在生物芯片上称（） A．基因芯片B．蛋白质芯片C．细胞芯片D．组织芯片E．芯片实验室 6．离心机砖头的旋转速度为20000γ/min的离心为（） A．低速离心B．平衡离心C．高速离心D．超速离心E．等密度离心 7．标本条码下有10个阿拉伯数字，其中第4～5位表示（） A．标本号B．标本类型C．组合号D．月份E．日期 8．由实验室自己配置或为商品，其中有关物质的量由参考方法定值的标准品为（）A．一级标准品B．二级标准品C．控制物D．参考物E．原级参考物 9．经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法为（）A．决定性方法B．推荐方法C．参考方法D．常规方法E．对比方法10．测定恒定误差的试验是（） A．重复性试验B．回收试验C．线性试验D．干扰试验 E．检测能力试验 二．X型选择题 1．酶免疫分析的基本技术组成为（） A．应有高活性的酶和高质量的酶标抗体B．最佳固相载体和抗体包被技术 C．最佳酶作用的底物D．通过电场来精确控制整个分析过程 E．检测放大系统及再生技术 2．免疫比浊测定应注意的事项为（） A．抗原或抗体量不能大大过剩 B．应维持反应管中抗体蛋白量始终过剩 C．高血脂标本易受干扰D．易受环境温度和pH值的影响 E．加入聚合剂可促进免疫复合物的形成 3．流式细胞仪接受并分析的信号主要有（） A．光散射讯号B．光吸收讯号C．荧光讯号D．电流讯号 E．生物发光讯号 4．鉴定纯酶度的常用方法是（） A．比活力测定B．电泳分析C．免疫学分析D．活性浓度测定 E．Km测定 5．影响血标本成份变化的因素有（） 《临床生物化学检验》考试试题与答案 一、名词解释（每小题2分，共10分） 1、临床化学 2、前带效应 3、色素原底物 4、溯源性 5、酶的比活性 二、填空（每空1分，共15分） 1 、翻译下列英文缩写（英译汉）：IFCC 的中文全称为 _______________________________________ ，其中文简称为 _______________________________ 。NCCLS 的中文全称为 _______________________________。PNPP 为_____________________。AMS 为_____________。AChE 为________________________。CRM 为________________。质量保证中的 VIS 为____________________。 2、将十几个步骤简化为样本采集、样本分析、质量控制、解释报告等四个步骤的过程称为病人身边检验 （床边检验），其英文缩写为_____________ 。（中国）实验室国家认可委员会的英文缩写为_________ 。美国临床化学协会的英文缩写为_____________。 3、最早对临床生物化学检验做出开创性研究的我国科学家是_______________。 4、NCCLS的精密度评价试验中，规定合乎要求的批内不精密度CV范围为_______________，批间不精密 度CV变异范围为_______________，其中的EA来源于_______________的规定标准。 三、单选（每小题1分，共30分） 1、连续监测法测定酶活性的吸光度读数次数应不少于（）次 A、2 B、3 C、4 D、7 2、测定待测酶Ex的酶偶联反应A??E?x→B??E?a→C ??Ei→D 之中，关于零级 反应、一级反应的描述正确的是（） A、三个酶催化的都是零级反应 B、Ex和Ea催化的是零级反应，Ei催化一级反应 C、Ex催化的是零级反应，Ea和Ei催化一级反应 D、三个酶催化的都是一级反应 3、测定代谢物Ax的酶偶联反应A B C D Ea Ea Ei x ???→ ???→ ??→ 1 2 之中，关于零级反应、一级反应的描述正 确的是（） A、三个酶催化的都是零级反应 B、Ea1和Ea2催化的是零级反应，Ei催化一级反应 得分 阅卷人 得分 阅卷人 得分 阅卷人 临床生物化学检验技术试题及答案 一选择题（单项选择） 1.下列可降低血糖的激素是 A 胰高血糖素 B 胰岛素 C 生长素 D 肾上腺素 2．长期饥饿后，血液中下列哪种物质含量升高： A 葡萄糖 B 血红素 C 乳酸 D 酮体 3．检测静脉血葡萄糖，如果血浆标本放置时间过长，会造成测定结果： A 升高 B 降低 C 不变 D 无法确定 4．脑组织主要以什么为能源供给： A 葡萄糖 B 氨基酸 C 蛋白质 D 脂肪 5.当血糖超过肾糖阈值时,可出现： A 生理性血糖升高 B 病理性血糖升高 C生理性血糖降低 D 尿糖 6.下列哪种物质不属于酮体： A 丙酮 B 乙酰乙酸 C β-羟丁酸 D 丙酮酸7．正常情况下酮体的产生是在 B脑垂体 C 胰脏 D 肾脏 8．胆固醇可转化为下列化合物，但除外： A 胆汁酸 B 维生素D3 C 雄激素 D 绒毛膜促性腺激素 9．血浆中催化脂肪酰基转运至胆固醇生成胆固醇酯的酶是： A 血浆卵磷脂胆固醇脂酰转移酶 B内质网脂酰COA胆固醇脂酰转移酶 C 天冬氨酸氨基转移酶 D 脂蛋白脂肪酶 10．由胆固醇转变成的维生素是 A VitA B VitB C VitC D VitD 11．蛋白质占人体固体重量的百分率（%）是 A 90 B 45 C 20 D 10 12．蛋白质的元素组成是 A C、P、S、O B C、H、S、O C C、H、O、N D C、P、O、N 13．组成蛋白质基本单位的氨基酸种类有 B 20种 C 21种 D 23种 14．某溶液中蛋白质的含量为50﹪，此溶液的蛋白质氮的百分浓度为： A 9.0﹪ B 8.0﹪ C 8.4﹪ D 9.2﹪ 15．蛋白质结构中的α-螺旋属于 A 一级结构 B 二级结构 C 三级结构 D 四级结构 16.酶活性测定中,对米-曼氏常数(Km)的叙述，那一种是不正确的： A ν=Vmax[S] /（Km + [S]） B 反应速度为最大反应速度一半时，Km =[S] C Km对选择底物浓度有重大意义 D Km作为酶的一种特征常数，与酶的性质与浓度有关 17.关于同工酶的叙述正确的是 A 催化相同化学反应 B 不同组织中的含量相同 C分子结构相同 D 理化性质特性相同 18．SI制定义酶活性单位时，代号为： A pmol B U/L 《临床生物化学与检验》教学大纲 一、课程性质和地位 适用专业：医学检验（五年制本科） 课程类别：主干课程 《临床生物化学与检验》是高等医学检验专业的重点课程之一，通过对临床生物化学检验理论与技术的学习可使学生系统掌握人体正常代谢与异常的生物化学指标与临床检测的意义。本大纲为一个学期的理论与实验教学。 本课程将主要给予学生有关临床生物化学的理论知识，着重于对疾病本质的生化机制、体液中生化组分的变化的病理生理学基础以及生化诊断原理的阐述，包括有关方法学应用的基本原理及其临床意义的判断，阐述临床生物化学实验室的检测项目，检测结果数据与临床的联系。 二、教学环节和教学方法 临床生物化学和生物化学检验的教学环节包括课堂讲授、实验、考试等。其中课堂是通过教师对指定教材部分章节的重点讲解，结合CAI课件对板书及其相关的图示以及启发式教学的方法，使学生对理论知识融会贯通。实验是教师在实验室里指导学生通过实际操作、检测原理以及试剂配制等方面，加强对理论的理解。并通过电化教学、多媒体实验教学、要求学生进行实验讨论，强化记忆，在教学过程中为适应科学技术的发展和21世纪医学检验教育的需要，在教学内容上注重突出基本理论、基本知识、基本技能，并且紧密联系学科新进展，动态修订教学大纲，培养学生的创新思维和实践能力。以培养高质量的毕业生作为最终目的。 三、课程总学时 根据教务处下发的教学计划，检验本科临床生化检验实验总学时140，其中理论68学时，实验72学时。 四、教学内容与学时安排 理论内容 第一章绪论目标要求： 1、了解临床生物化学发展简史。 2、熟悉临床生物化学的领域和性质。 3、了解临床生物化学的现状及其作用。 教学内容： 1、临床生物化学发展简史。 临床生物化学检验试题 一选择题（单项选择） 1.下列可降低血糖的激素是 A 胰高血糖素 B 胰岛素 C 生长素 D 肾上腺素 2．长期饥饿后，血液中下列哪种物质含量升高： A 葡萄糖 B 血红素 C 乳酸 D 酮体 3．检测静脉血葡萄糖，如果血浆标本放置时间过长，会造成测定结果： A 升高 B 降低 C 不变 D 无法确定 4．脑组织主要以什么为能源供给： A 葡萄糖 B 氨基酸 C 蛋白质 D 脂肪 5.当血糖超过肾糖阈值时,可出现： A 生理性血糖升高 B 病理性血糖升高 C生理性血糖降低 D 尿糖 6.下列哪种物质不属于酮体： A 丙酮 B 乙酰乙酸 C β-羟丁酸 D 丙酮酸 7．正常情况下酮体的产生是在 A 肝脏 B脑垂体 C 胰脏 D 肾脏 8．胆固醇可转化为下列化合物，但除外： A 胆汁酸 B 维生素D3 C 雄激素 D 绒毛膜促性腺激素 9．血浆中催化脂肪酰基转运至胆固醇生成胆固醇酯的酶是： A 血浆卵磷脂胆固醇脂酰转移酶 B内质网脂酰COA胆固醇脂酰转移酶 C 天冬氨酸氨基转移酶 D 脂蛋白脂肪酶10．由胆固醇转变成的维生素是 A VitA B VitB C VitC D VitD 11．蛋白质占人体固体重量的百分率（%）是 A 90 B 45 C 20 D 10 12．蛋白质的元素组成是 A C、P、S、O B C、H、S、O C C、H、O、N D C、P、O、N 13．组成蛋白质基本单位的氨基酸种类有 A 18种 B 20种 C 21种 D 23种 14．某溶液中蛋白质的含量为50﹪，此溶液的蛋白质氮的百分浓度为： A 9.0﹪ B 8.0﹪ C 8.4﹪ D 9.2﹪ 15．蛋白质结构中的α-螺旋属于 A 一级结构 B 二级结构 C 三级结构 D 四级结构 16.酶活性测定中,对米-曼氏常数(Km)的叙述，那一种是不正确的： A ν=Vmax[S] /（Km + [S]） B 反应速度为最大反应速度一半时，Km =[S] C Km对选择底物浓度有重大意义 D Km作为酶的一种特征常数，与酶的性质与浓度有关 17.关于同工酶的叙述正确的是 A 催化相同化学反应 B 不同组织中的含量相同 C分子结构相同 D 理化性质特性相同 18．SI制定义酶活性单位时，代号为： A pmol B U/L 第十章血浆蛋白质与含氮化合物的代谢紊乱 教学目标与要求 掌握：血浆中几种重要蛋白质的性质及其临床应用；血清蛋白质电泳组分的临床分析；高尿酸血症和痛风的发生机制；血清总蛋白、清蛋白、蛋白电泳的检测方法。 熟悉：血浆蛋白质的种类及生理功能；原发性和继发性氨基酸代谢紊乱的概念；含硫氨基酸检测的临床意义。 了解：苯丙酮酸尿症、酪氨酸血症、嘌呤核苷酸代谢紊乱。 第一节血浆蛋白质及其代谢紊乱 蛋白质是人体中含量和种类最多的物质，蛋白质占人体干重的45％，种类约有10万之多。几乎在所有的生理过程中蛋白质都起着关键作用。血浆蛋白质是血浆固体成分中含量最多的一类化合物，目前已有所了解的血浆蛋白质约有500种。 血浆蛋白的IEF/SDS-PAGE电泳图谱 取一滴血浆在电泳板的左下角点样。 先在水平方向进行等电聚焦电泳（IEF），接着在垂直方向进行SDS-PAGE。 一、血浆蛋白质的种类 盐析法:将血浆蛋白质分为清蛋白和球蛋白两大类。 通过醋酸纤维膜电泳或琼脂糖凝胶电泳将血浆蛋白质分成清蛋白和α1、α2、β、γ-球蛋白等五个主要区带。 二、血清蛋白质电泳组分的临床分析 （一）血清蛋白电泳的正常图谱血清蛋白电泳（serum protein electrophoresis，SPE）正常图谱，由正极到负极可依次分为清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白五个区带。 血清蛋白电泳的正常组分 各条区带中多个蛋白质组分可有重叠、覆盖；两区带之间也有少量蛋白质；某些蛋白质组份染色很浅。 用醋酸纤维素薄膜电泳测得血清各区带蛋白质的参考值： 清蛋白（Alb）：57％～68％、35～52 g/L α1球蛋白： 1.0％～5.7％、 1.0～4.0 g/L α2球蛋白： 4.9％～11.2％、4.0～8.0 g/L β球蛋白：7％～13％、 5.0～10.0 g/L r 球蛋白：9.8％～18.2％、6.0～13.0g/L 。 琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖(agarose)：从琼脂(agar)中去掉杂质和能沉淀脂蛋白的琼脂果胶(agaropectin)后所得，是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质。 评价：电渗作用小，对蛋白质的吸附极微，分辩率和重现性均较好，电泳图谱清晰。 常用的浓度：0.5～1.0%。 商品化的琼脂糖凝胶板透明度好，散热均匀而且快，电泳重现性好，适当的条件可以保存半年。加之结合半干胶技术，电泳时可以不需要缓冲液，是目前自动化电泳系统最佳的介质。（二）血清蛋白电泳的异常图谱 血清蛋白电泳异常图谱分型 血清蛋白电泳典型异常图谱 浆细胞病与M蛋白 1.血清蛋白电泳异常图谱分型 《临床生物化学与检验》 实验教学大纲 (供检验医学专业本科教学使用) 蚌埠医学院 生物化学与分子生物学教研室制定 二OO八年八月 蚌埠医学院 《临床生物化学与检验》课程实验教学大纲 课程编号： 课程名称：临床生物化学与检验 英文名称：Clinical Biochemistry and Techniques of Biochemistry 课程性质：专业主干课程 适用专业：医学检验本科 考核方式：日常考核、操作考核、提交实验结果。实验成绩的构成是由实验报告成绩、平时成绩、实验考核成绩三部分组成。实验总成绩40分，其中实验报告成绩15分、平时成绩10分、实验考核成绩15分。 课程简介：本课程是医学检验专业本科生的必修课程，临床生物化学和生物化学检验是由生物化学、分析化学、临床医学等学科交叉融合而形成边缘学科，是临床医学的不可分割的重要组成部分，是医学检验专业学生的主干课程之一。临床生物化学和生物化学检验着重阐述了人体疾病发病机制中的生物化学改变，临床生物化学检验方法的原理、方法学评价、检测结果的临床意义和如何按循证医学要求合理选择相关检验指标。 教学大纲要求总学时162学时，其中理论教学68学时、实验教学68学时，实验教学共15实验类别，共计26个实验。 选用教材：钱士匀.主编.临床生物化学与检验实验指导.人民卫生出版社，第三版.2007. 实验一生化实验要求、电教 一、类别：示教性实验 二、实验目的和要求： 【掌握】 1.正确使用玻璃器材。包括：⑴认识玻璃器材。⑵掌握玻璃器材的分类。⑶掌握玻璃器 材的正确使用方法。⑷掌握玻璃器材的正确清洗方法。⑸了解玻璃器材的校准方法。 2.正确使用各种加样器。 【熟悉】 1.实验室的规则。 2.药品和试剂的分级和使用原则。 【了解】检验科临床生化室的基本操作流程及实验室规则。 三、实验内容： 1．介绍实验室的一般规则，包括实验秩序、药品和试剂使用规则。 2．发实验器材。 3．观看电教，熟悉相关器材与仪器的正确使用。 四、学时：4学时 五、主要仪器设备：电视机、放像机、可调微量加样器等。 2012年上半年生化考试复习题 一：单选题 1．琼脂糖凝胶电泳用pH8.6的巴比妥缓冲液可以把血清蛋白质分成五条区带，由正极向负极数起它们的顺序是：（ B ） A．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白 B．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白 C．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β-球蛋白 D．α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白、白蛋白 E．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、α2-球蛋白 2．已经确定的稳定而均一的物质，它的数值已由决定性方法确定，所含杂质也已经定量，该物质为:（ A ） A.一级标准品 B.二级标准品 C.校准品 D.控制物 E.参考物 3．从结构上看能较好的避免交叉污染的自动生化分析仪是:( B ) A.流动式 B.分立式 C.离心式 D.单通道式 E.多通道式 4．临床生物化学检验中应用最广泛的一类分析技术是：（ C ） A.发射光谱分析法 B.散射光谱分析法 C.吸收光谱分析法 D.荧光分光光度法 E.原子吸收分光光度法 5．离心机砖头的旋转速度为20000γ/min的离心为：（ C ） A．低速离心 B．平衡离心 C．高速离心 D．超速离心 E．等密度离心 6．反映神经系统疾病最好的测定标本是：（ C ） A.血清 B.全血 C.脑脊液 D.尿液 E.溶血血清 7．由实验室自己配置或为商品，其中有关物质的量由参考方法定值的标准品为（ B ）A．一级标准品 B．二级标准品 C．控制物 D．参考物 E．原级参考物 8．经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法为（ A ）A．决定性方法 B．推荐方法 C．参考方法 D．常规方法 E．对比方法 9．影响电泳的因素包括：（ D ） A.电场强度 B.电泳缓冲液的PH值 C.电泳缓冲液的离子强度 D.以上都是 E.以上均不是 10.干化学自动生化分析仪的光学系统是：（ B ） A.分光光度计 B.反射光分析仪 C.比色计 D.浊度计 E.原子吸收光谱仪 11.下列哪项不属于NCCLS所规定的纯水等级标准的特性指标：（ C ） A.微生物含量 B.电阻率 C.钙离子 D.PH值 E.硅 12.有关比浊测定法的描述哪项是错误的：（ D ） A.比浊法不是比色分析 B.比浊法分为化学比浊法和免疫比浊法 C.免疫比浊法分为透射比浊法和散射比浊法 D.分立式自动生化分析仪不能做散射比浊分析 Ｅ.干片式生化分析仪不能做比浊分析 13.临床生化实验室用水一般采用：（ B ） A.一级水 B.二级水 C.三级水 D.次级水 E.自来水 14. 生化质控目的是:（ E ） A.使随机误差逐渐缩小 B.消灭随机误差 C.使随机误差得到监测和及时发现 汉译英： 低糖血症hypoglycemia 高糖血症hyperglycemia 果糖胺fructosamine 同工酶isoenzyme 胰岛素 insulin 线性范围Linear range 初始速率The initial rate 甘油三酯Triglyceride 胆固醇Cholesterol 阴离子间隙Anion gap 尿酸Uric acid 胆红素Bilirubin 黄疸Jaundice 胆色素Bile pigment 肿瘤标志物Tumor markers 醛固酮Aldosterone TDM (治疗药物检测) Therapeutic drug monitoring 名解： 1.阳性似然比（positive likelihood ratio，+LR）：是指用诊断试验检测患病人群的.阳性率与非患病人群的阳性率之间的比值，即真阳性率与假阳性率之比。 2.系统误差（systematic error，SE）：是指一系列测定值对存在同一倾向的偏差。 3.精密度（precision）：表示同一标本在一定条件下多次重复测定所得到的一系列结果的彼此符合程度，表示测定结果中随机误差（RE）大小程度的指标。 4.灵敏度（sensitivity）：只在患者中用诊断试验检出的阳性百分率，表示诊断试验查出患者的能力，又称真阳性率。 5.内生肌酐清除率（endogenous reatinine clearcmce，Ccr）：是指单位时间内，肾脏将多少毫升血浆中肌酐清除由尿排泄。 6.肾清除率（Cx）：肾脏在单位时间内（每分钟)将多少毫升血浆中某物质全部清除由尿排出。 7.血气分析：指通过血气分析直接测定血液中的三项指标（PH,PO2 ,PCO2），利用公式推算出其他指标，由此对酸碱平衡及呼吸功能进行判断的分析技术。 8.血氧饱和度：是指血液在一定的PO2下，氧合血红蛋白（HbO2）占全部Hb的百分比。 9.工具酶：通常把酶学分析中作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶称为工具酶。 10.胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）：是指单位浓度的胰岛素细胞效应减弱，即机体对正常浓度胰岛素的生物反应性降低的现象。 11.室间质量评价（external quality assessment，EQA）：是指多家实验室分析同一样本，由外部独立机构收集，分析和反馈实验室检测结果，评定实验室常规工作的质量，观察试验的准确性，建立起各实验室分析结果之间的可比性。12.室内质量评价（internal quality control，IQC）：是实验室的工作人员采用一系列统计学的方法，连续的评价本实验室测定工作的可靠程度，判断检验报告是否可发出，以及排除质量环节中导致不满意因素的过程。 13.逆向转运胆固醇：即将肝外组织细胞内的胆固醇，通过血循环转运到肝，在肝内转化为胆汁酸后排出体外。 14.黄疸：胆红素是金黄色的色素，在组织细胞内沉积而造成的黄染现象称为黄疸。 临床生物化学检验技术试题及答案 一、名词解释 1.临床检验生物化学(Clinical Biochemistry) 2.组合试验(profile tests) 二、问答题 1.试述临床检验生物化学的研究领域。 2.试述临床检验生物化学在医学中的地位及应用。 3.简述临床检验生物化学的进展及发展趋势。 第一章绪论答案 一、名词解释 1. 临床检验生物化学(Clinical Biochemistry): 临床检验生物化学是在人 体正常生物化学基础上，研究病理状态下生物化学改变，寻找这些改变的 特征性标志并建立可靠实用检测方法，通过对这些特征性标志物的检测， 为健康评估、疾病预防、诊断、治疗、病情和预后判断等提供生物化学信 息和决策依据的一门学科。 2. 组合试验(profile tests): 在循证检验医学基础上，将某些疾病或器官 系统功能的有关检验项目，进行科学合理的组合，以便获取更全面完整的 病理生物化学信息的方法。如了解肝脏功能的组合试验。 二、问答题 1. 试述临床检验生物化学的研究领域。 临床检验生物化学的学科领域主要包括以下三方面： 1. 揭示有关疾病的病理生物化学改变，从本质上阐明疾病发生、发展、转归的生物化学机制，为疾病的预防、诊断、疗效及预后评估，提供理论基础。 2. 在上述研究基础上，寻找具有疾病特异性的生物化学标志物，并建立特异度、灵敏度高，简便而高性价比的检测方法，从而在临床开展有关项目的检测，提供反映这些标志物改变的客观数据。 3. 将检测项目的数据，转化为预防、诊断和疗效及预后评价信息。 2. 试述临床检验生物化学在医学中的地位及应用。 在医学中，临床生物化学是阐明疾病发生、发展及转归的分子机制，从本质上认识病变准确部位及具体环节，为寻找有效的预防和治疗靶点，疾病的诊断及病情和预后判断，提供理论基础的一门重要病理学学科。 其在医学中的应用主要包括：1. 揭示疾病发生的分子机制。2.通过对有关疾病生物化学改变的特征性生物标志检测方法的建立和实施，为判断有无及何种疾病提供客观依据。而动态观察这些标志物的改变，可对病情发展、转归、预后及治疗方案的制定和效果判断，提供依据。3. 临床检验生物化学技术，涵盖了当前医学研究中常用的主要方法技术。因此，也是医学特别是临床医学各个领域研究的一门共同性工具学科。 3. 简述临床检验生物化学的进展及发展趋势。 ①分子诊断学迅速发展，代表了的发展方向；②深入寻找高诊断特异性和灵敏性的新生物化学标志，提高诊断性能；③检测技术和方法的更新完善，更加及时、准确地提供检验结果；④全程质量管理；⑤以循证检验医学为基础，科学评价有关检测项目的诊断性能，合理有效地开展临床生物化学检验。 一、单项选择题(A型题) 1．转氨酶的辅酶是 A．磷酸吡哆醛 B．NADPH C．NADH D．FAD E．FMN 2．SI制中酶活性单位为 A．U/L B．Katal C．g/L D．ml/L E．pmol 临床生物化学与检验》实验教学大纲（本科） 实验指导书：《临床物化学与检验实验指导》，钱士匀主编，第三版，人民卫生出版社，2009 编写单位：临床生物化学实验室 临床生物化学及检验》实验教学大纲 课程编码： 课程名称：临床生物化学和生物化学检验实验指导书：临床生物化学与检验实验指导（第三版）参考教材：临床生物化学与检验（第四版）总学时：120 学时 理论学时：60 学时 实验学时：60 学时适应专业：医学检验专业一、实验教学目的与基本要求临床生物化学与检验是化学、生物化学与临床医学相结合的一门边缘应用学科。临床生物化学与检验是将化学的原理和技术应用于生物体液成分的测定，为临床提供客观的诊断依据，并为监测疾病的发展和治疗效果提供可靠的指标。临床生物化学及生物化学检验是医学检验专业的主干课程。 开设实验课的目的： 1、加深学生对临床生化检验领域的理解，使学生将理性知识与感性知识有机的结 合； 2、通过教师启发式的教学，培养学生严谨的工作态度，仔细和正规的操作方法，科学和敏捷的操作思路，为今后的临床生产实习打下扎实的基础。 3、通过实验以及对实验结果地评价和分析培养学生分析问题和解决问题地能力。 4、通过实验课树立学生提高临床诊断水平，为临床服务的意识，加强学生能力的培养及创新思维和能力的训练。 本实验课的基本要求： 1、使学生掌握临床生化检验中常用的技术、检测指标数据的处理和分析方法及与临床的关系。 2、掌握常见的临床生化检验项目测定的原理、操作要求、注意事项、方法学评价及临床意义。包括：蛋白类、糖类、无机离子、酶类、肝功能、非蛋白含氮化合物、血脂、血气及酸碱分析等。 生化检验习题 第一章临床生物化学实验室基本技术与管理 一、A型选择题 1．在荧光定量分析法中，下列哪种不是影响荧光强度的因素（） A．荧光物质的浓度B．溶剂的性质C．荧光物质的摩尔吸光系数 D．温度E．溶液的pH值 2．琼脂糖凝胶电泳用pH8.6的巴比妥缓冲液可以把血清蛋白质分成五条区带，由正极向负极数起它们的顺序是（） A．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白 B．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白 C．白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、γ-球蛋白、β-球蛋白 D．α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白、白蛋白 E．白蛋白、β-球蛋白、α1-球蛋白、γ-球蛋白、α2-球蛋白 3．在区带电泳中，能产生电荷效应和分子筛效应的固体支持介质有（） A．醋酸纤维素薄膜、纤维素、淀粉B．纤维素、淀粉、琼脂糖 C．硅胶、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶D．淀粉、琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶 E．醋酸纤维素薄膜、硅胶、纤维素 4．利用流动相中的离子能与固定相进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的方法是（） A．凝胶层析法B．吸附层析法C．分配层析法D．亲和层析法 E．离子交换层析法 5．通过在波片或硅片上制作各种微泵、阀、微电泳以及微流路，将生化分析功能浓缩固化在生物芯片上称（） A．基因芯片B．蛋白质芯片C．细胞芯片D．组织芯片E．芯片实验室 6．离心机砖头的旋转速度为20000γ/min的离心为（） A．低速离心B．平衡离心C．高速离心D．超速离心E．等密度离心7．标本条码下有10个阿拉伯数字，其中第4～5位表示（） A．标本号B．标本类型C．组合号D．月份E．日期 8．由实验室自己配置或为商品，其中有关物质的量由参考方法定值的标准品为（）A．一级标准品B．二级标准品C．控制物D．参考物E．原级参考物9．经过详细的研究，没有发现产生误差的原因或在某些方面不够明确的方法为（）A．决定性方法B．推荐方法C．参考方法D．常规方法E．对比方法10．测定恒定误差的试验是（） A．重复性试验B．回收试验C．线性试验D．干扰试验E．检测能力试验二．X型选择题 1．酶免疫分析的基本技术组成为（A B C E ） A．应有高活性的酶和高质量的酶标抗体B．最佳固相载体和抗体包被技术 C．最佳酶作用的底物D．通过电场来精确控制整个分析过程 E．检测放大系统及再生技术 2．免疫比浊测定应注意的事项为（A B C D E ） A．抗原或抗体量不能大大过剩B．应维持反应管中抗体蛋白量始终过剩 C．高血脂标本易受干扰D．易受环境温度和pH值的影响 E．加入聚合剂可促进免疫复合物的形成 临床生物化学与检验 1、糖酵解：指从葡萄糖至乳糖的无氧分解过程，可生成2分子ATP。 2、糖异生：非糖物质转为葡萄糖。 3、血糖受神经，激素，器官调节。升高血糖激素：胰高血糖素（A细胞分泌），糖皮质激素，生长激素，肾上腺素。降低血糖激素：胰岛素（B细胞分泌） 4、糖尿病分型：1.1型：内生胰岛素或C肽缺，易出酮症酸中毒，高钾血症，多发于青年人。2.2型：多肥胖，具有较大遗传性，病因有生物活性低，基因突变，分泌功能障碍。3.特异型 4.妊娠期糖尿病。 5、LPL（脂蛋白脂肪酶）活性依赖胰岛素/胰高血糖素比值。 6、慢性糖尿病人可有：A－晶体蛋白糖基化而眼白内障，并发血管病变以心脑肾最重。 7、糖尿病急性代谢并发症有：酮症酸中毒（DKA，高血糖，高酮血症，代谢性酸中毒），高渗性糖尿病昏迷（NHHDC肾功能损害，脑血组织供血不足），乳酸酸中毒（LA）。 8、血浆渗透压=2（Na＋K）＋血糖浓度。 9、静脉血糖〈毛细血管血糖〈动脉血糖。 10、血糖检测应立即分离出血浆（血清），尽量早检测，不能立即检查应加含氟化钠的抗凝剂。 11、肾糖阈：8.90～10.0mmol/L。 12、糖耐量试验：禁食10～16h，5分钟内饮完250毫升含有75g无水葡萄糖的糖水，每30分钟取血一次，监测到2h，共测量血糖5次（包括空腹一次）。 13、糖化蛋白与糖尿病血管合并症有正相关。糖化血红蛋白：可分为HbA1a，HbA1b，HbA1c（能与葡萄糖结合，占绝大部分），测定时主要测HbA1组份或HbA1c（4%～6%），反映前6～8周血糖水平，主要用于评定血糖控制程度和判断预后。 14、糖化血清蛋白：类似果糖胺，反映前2～3周血糖水平。 15、C肽的测定可以更好地反映B细胞生成和分泌胰岛素的能力。 临床生物化学实验原理、分析方法及检测技术 中国中医研究院广安门医院临床检测中心 生物化学实验——是把化学(分析技术)和生物化学(实验反应原理)的方法应用于疾病的诊断、治疗、监控的实验分支。 一个生化实验的最后测定结果应包括四大部分来完成。 一、实验反应原理及分析方法（理论依据） 二、实验检测技术（手段）生化仪的分析技术。 三、质量控制程序（质量保证）室内质控、室间质评、仪器、试剂、人员五要素。 四、临床意义（目的）咨询服务、异常结果的解释。 实验反应原理及分析方法(理论依据) 一个生物化学实验的反应原理设计，首先要找出所检测的化学特性，如测定体液（首先是血液）中酶的含量血液中除少数酶（如凝血溶血酶、铜氧化酶及假性胆碱脂酶等）含量较多外，血液正常生理状况下含量微乎其微。一般每毫升含微微克（Pg）水平，要直接测定如此微量物质是相当困难的。用免疫化学方法可测定全部酶蛋白分子含量（不论其有无活性）而用化学方法测定只能测定酶的催化活性，间接计算出酶的含量。目前利用酶具有催化活性这一特性，在临床上已普遍应用测定酶蛋白，同时还可以测定三大代谢的产物，如糖、脂类、蛋白质、这样也就建立起利用酶促反应的一级反应测定代谢物的方法。一级反应—反应速度与底物浓度成正比，因此只有当酶反应为一级反应时，才能准确测定底物含量，（如测定血糖、总甘油三脂、总胆固醇等）。从此在临床试剂盒的方法中出现了以酶为试剂测定各种代谢产物。 临床化学方法的分类 特别是自动生化仪方法的特点 以往临床化学实验都采用比色法进行各个项目的测定，这是因为比色法具有微量、迅速、准确的优点，特别适合于微量的生物体体液中各项物质测定。 在一般比色法中，手工使用比色计或分光光度计可以测定各种反应溶液的吸光度，但由于很难控制测定时间和反应温度，很难准确记录反应过程中吸光度变化，因此，毫不奇怪在很长一段时间内我们所使用的方法，都是在呈色反应达到完全或者反应达到平衡时，吸光度达到稳定时才进行测定。即所谓平衡法或终点法。 但自从自动生化仪出现后，从根本上改变了上述情况。通过各项先进技术，人们可以精确测定反应的动态过程。并可以准确计算任何一段反应时间内的反应速率，这样大大开阔了临床化学家对方法选择。除经典的终点法外还可以进行动态测定。这样不仅缩短了操作时间，大大提高了工作效率，还可进行一些用常规比色方法不能进行的测定。如测定酶反应的初速 度（V o ）等等。测酶初速度（V o ）只能用分光光度法。 因此，用好自动生化仪一个重要前提必须对自动生化仪可以提供的测试方法类型有所了解。 生化自动分析仪特点： 1 精确测定反应的动态过程； 2 准确计算任何一段反应时间内的反应速率； 3 除经典的终点法外还可以进行动态测定。 分析方法的分类 2020智慧树，知到《临床生物化学检验技术》章节测试完整答案 第一章单元测试 1、单选题： 临床生物化学是 选项： A:化学、生物化学与临床医学的结合，目前已发展成为一门成熟的独立学科 B:一门独立学科 C:研究器官、组织、人体体液的生物化学过程 D:以化学和医学知识为主要基础 答案: 【化学、生物化学与临床医学的结合，目前已发展成为一门成熟的独立学科】 2、判断题： 临床生物化学主要以体液为检测对象。 选项： A:错 B:对 答案: 【对】 3、判断题： 临床生物化学检验技术主要研究与疾病诊断、治疗和预防相关的生物化学标志物及其检测技术和方法。 选项： A:对 B:错 答案: 【对】 4、多选题： 目前临床检测标本包括： 选项： A:骨骼 B:脱落细胞 C:血液 D:尿液 答案: 【骨骼 ;脱落细胞 ;血液 ;尿液 】 5、多选题： 目前临床监测对象包括： 选项： A:妊娠期体内胎儿 B:出生后的病人 答案: 【妊娠期体内胎儿 ;出生后的病人 】 6、多选题： 目前临床生物化学检验包括 : 选项： A:急诊生化检验 B:普通生化检验 C:床旁生化检验 D:特殊生化检验 答案: 【急诊生化检验 ;普通生化检验 ;床旁生化检验 ;特殊生化检验 】 7、判断题： 根据不同的疾病，对检验项目进行合理的组合，有利于疾病的诊断、提高疗效和预后评估 选项： A:错 B:对 答案: 【对】 8、判断题： 急诊生化检验;开展临床紧急需求的、小规模的检验项目，能迅速地汇报检验结果. 选项： A:对 B:错 答案: 【对】 9、判断题： 床旁生化检验:一些小型的生化分析仪放置在病人床旁或医疗现场 ,使得能快捷、方便地得到检验结果 选项： A:错 B:对 答案: 【对】 10、多选题： 临床生物化学检验实验室需要： 选项： A:建立行之有效的临床生物化学实验室质量管理体系 B:增强与临床的沟通及开展临床生物化学检验咨询 C:为疾病的诊断、治疗和疾病的预防提供重要的信息答案: 【建立行之有效的临床生物化学实验室质量管理体系 ;增强与临床的沟通及开展临床生物化学检验咨询 ;为疾病的诊断、治疗和疾病的预防提供重要的信息 习题： 一、名词解释 1.临床检验生物化学(Clinical Biochemistry) 2.组合试验(pro) 二、问答题 1.试述临床检验生物化学的研究领域。 2.试述临床检验生物化学在医学中的地位及应用。 3.简述临床检验生物化学的进展及发展趋势。 第一章绪论答案 一、名词解释 1. 临床检验生物化学(Clinical Biochemistry): 临床检验生物化学是在人体正常生物化 学基础上，研究病理状态下生物化学改变，寻找这些改变的特征性标志并建立可靠实用检测方法，通过对这些特征性标志物的检测，为健康评估、疾病预防、诊断、治疗、病情和预后判断等提供生物化学信息和决策依据的一门学科。 2. 组合试验(pro): 在循证检验医学基础上，将某些疾病或器官系统功能的有关检验项 目，进行科学合理的组合，以便获取更全面完整的病理生物化学信息的方法。如了解肝脏功能的组合试验。 二、问答题 1. 试述临床检验生物化学的研究领域。 临床检验生物化学的学科领域主要包括以下三方面： 1. 揭示有关疾病的病理生物化学改变，从本质上阐明疾病发生、发展、转归的生物化学机制，为疾病的预防、诊断、疗效及预后评估，提供理论基础。 2. 在上述研究基础上，寻找具有疾病特异性的生物化学标志物，并建立特异度、灵敏度高，简便而高性价比的检测方法，从而在临床开展有关项目的检测，提供反映这些标志物改变的客观数据。 3. 将检测项目的数据，转化为预防、诊断和疗效及预后评价信息。 2. 试述临床检验生物化学在医学中的地位及应用。 在医学中，临床生物化学是阐明疾病发生、发展及转归的分子机制，从本质上认识病变准确部位及具体环节，为寻找有效的预防和治疗靶点，疾病的诊断及病情和预后判断，提供理论基础的一门重要病理学学科。 其在医学中的应用主要包括：1. 揭示疾病发生的分子机制。2.通过对有关疾病生物化学改变的特征性生物标志检测方法的建立和实施，为判断有无及何种疾病提供客观依据。而动态观察这些标志物的改变，可对病情发展、转归、预后及治疗方案的制定和效果判断，提供依据。3. 临床检验生物化学技术，涵盖了当前医学研究中常用的主要方法技术。因此，也是医学特别是临床医学各个领域研究的一门共同性工具学科。 1.急性时相反应蛋白：在炎症性疾病如手术、创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等情况下，血浆中一系列浓度发生变化的蛋白质的总称，其中大部分蛋白质如AAT、AAG、Hp、Cp、CRP、C3和C4等浓度升高，PA、Alb和TRF等浓度下降。这些血浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白． 2.苯丙酮酸尿症：苯丙酮酸尿症是由于苯丙氨酸羟化酶先天性缺乏所致，属常染色体隐性遗传，因患儿尿液中排出大量苯丙酮酸等代谢产物而得名。 3.双缩脲反应：血清中蛋白质中相邻的肽键（- CO -NH -）在碱性溶液中能与二价铜离子作用产生稳定的紫色络合物。此反应和双缩脲在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似，因此将蛋白质与碱性铜的反应称为双缩脲反应。 4.痛风：痛风是一组嘌呤代谢紊乱所致的疾病，由于遗传性和（或）获得性的尿酸排泄减少和（或）嘌呤代谢障碍，导致高尿酸血症及尿酸盐结晶形成和沉积，从而引起特征性急性关节炎、痛风石、间质性肾炎，严重者呈关节畸形及功能障碍；常伴尿酸性尿路结石。 5.糖尿病：是一组由胰岛素分泌不足和（或）作用缺陷所引起的以慢性血糖水平增高为特征的代谢性疾病。 6.胰岛素抵抗：是指胰岛素作用的靶器官（主要是肝脏、肌肉和脂肪组织）对正常浓度的胰岛素不能产生正常的生物学反应，即组织对胰岛素敏感性降低。 7.代谢综合征.：是与代谢异常相关的心血管病多种危险因素在个体内聚集的状态。MS的基础是IR,其主要组成成分是肥胖症尤其是中心性肥胖、2型DM或糖调节受损、血脂异常和高血压。 8.空腹血糖：是指8 ~10h内无任何热量摄入时检测的静脉血浆葡萄糖水平。 9.糖化血红蛋白：是葡萄糖或其他糖与血红蛋白的氨基发生非酶催化反应的产物(一种不可逆的糖化蛋白)。 10.低血糖症：是指血糖浓度低于参考值水平下限，临床出现以交感神经兴奋和脑细胞缺糖为主要特点的综合征。一般以血浆葡萄糖浓度低于2. 8mmol/L时作为低血糖症的标准。 11.载脂蛋白:脂蛋白中的蛋白质具有运脂质的作用故被称为载脂蛋白。 12.LDL受体途径：LDL或其他含ApoB100的脂蛋白如VLDL与LDL受体结合后，内吞入细胞，经溶酶体酶作用，胆固醇酯水解成游离，后者进入胞质的代谢库，供细胞膜等膜结构利用的代谢过程。 13.RCT：HDL将外周细胞中过剩的胆固醇移出并转运至肝脏进行转化和清除。 14.高脂血症：指血浆中胆固醇和（或）甘油三酯水平升高。 15.血脂：指血浆中所含的脂类，包括甘油三酯和少量甘油二酯、甘油一酯、磷脂、胆固醇、胆固醇酯、游离脂肪酸。 16.血浆脂蛋白：血浆中的脂类与载脂蛋白组成的一类水溶性的复合物，是血脂的存在及运输形式。 17.水平衡：水平衡是指每天进入机体的水，经机体代谢在体液间转移交换，最后等量地排出体外，使各部分体液保持动态平衡的过程。 18.血气分析( blood gas analysis)：血气分析( blood gas analysis)是通过血气分析仪直接测定血液的酸碱度、二氧化碳分压、氧分压三项指标，利用公式推算出其他标，由此对酸碱平衡及呼吸功能进行判断的分析技术。 19.实际碳酸氢盐（actual. bicarbonate,AB）：实际碳酸氢盐(actual bicarbonate，碱中毒的重要指标，但也受呼吸因素影响而继发改变。4.标准碳酸氢盐（standa:rd bicar:bonate,SB）20.标准碳酸氢盐（standard bicarboSB)指在37℃时用PC02为40mmHg及P02为100mmHg 的混合气体平衡后测定的血浆HC03的含量，是反映代谢性酸碱中毒的重要指标。 21.缓冲碱（buffer base,BB）：缓冲碱（buffer base,BB）指血液中具有缓冲氢离子作用的阴临床生化检验试题库
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