一、名词解释
分子生物学:分子生物学从广义上讲包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命的现象和生物学规律。狭义上讲，是主要研究基因或DNA结构与功能、复制、转录、翻译和调节控制等的分子过程。
生物大分子：是指生物体内由分子量较低的基本结构单位首尾相连形成的多聚化合物。基本结构单位的排列顺序构成生物大分子一级结构，生物大分子在其一级结构的基础上可形成复杂的空间结构。
核酸：核酸是由许多核苷酸通过磷酸二酯键连接起来的高分子化合物。分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。
蛋白质：蛋白质是由许多氨基酸通过肽键联系起来的高分子化合物。
核酸的一级结构：核酸分子中的核苷酸（或碱基）的排列顺序。
核酸的二级结构：DNA分子的二级结构是指两条DNA单链形成的双螺旋结构、三股螺旋结构以及四股螺旋结构。RNA分子的二级结构为局部发夹结构。
核酸的三级结构：三级结构是指双链DNA进一步扭曲盘旋形成的超螺旋结构。
反义RNA：碱基序列正好与有意义mRNA互补的RNA称为反义RNA,又称调节RNA。
模体：由α-螺旋和（或）β-折叠参与的特定组合称为基序或模体。
分子病：由于基因突变而导致的蛋白质一级结构改变表现出生理功能的异常，使机体出现病态现象，称为分子病。甚至只有一个氨基酸发生变化，即可能影响蛋白质的空间结构，从而使蛋白质的功能发生改变，严重时可导致疾病的发生。
反向重复序列：又称回文序列，指在双链DNA序列中按确定的方向（如5'-3’）阅读双链中每条单链的序列都相同的DNA结构。
蛋白质的一级结构：蛋白质的一级结构是指蛋白质多肽链中氨基酸排列的顺序。
蛋白质的二级结构是指蛋白质分子的一条多肽链中通过氢键形成的一些基本的构象单元，只涉及主链原子的构象，不涉及侧链基团构象。
蛋白质的三级结构：蛋白质三级结构是指蛋白质分子的一条多肽链在二级结构和超二级结构的基础上进一步盘旋和折叠形成的空间结构。
蛋白质的四级机构：蛋白质四级机构指蛋白质分子中亚基的空间排列和相互间的布局，但不包括亚基本身的空间结构。
结构域：超二级结构可形成紧密、稳定而且在蛋白质分子构象上明显可分的区域，称为结构域。结构域一般由连续的40~400个氨基酸残基组成，它们分别担负着蛋白质分子不同的功能，又称为功能域
蛋白质的空间结构：蛋白质的空间结构指蛋白质的二、三、四级结构的总称，又称立体结构、三维结构或构象。
分子杂交：双螺旋结构的各种性质在DNA复性后可得到恢复。利用这一特性可将两个不同来源的互补序列退火形成双链，这个过程称为分子杂交。
核小体：核小体是由200bp的DNA与四种组蛋白构成的八聚体核心颗粒形成的致密结构，组装成核小体后DNA的长度压缩了6~7倍，核小体是真核生物染色质的基本结构单位。
基因：能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列，是决定遗传性状的功能单位。有结构基因和调节基因之分。调节基因控制着结构基因的开关。
基因组：细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。
端粒：以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。
顺反子：一个顺反子就是一段核苷酸序列，能编码一条完整的多肽链。
单顺反子：真核细胞基因是由一个结构基因与相关的调控区组成，其转录生成的mRNA只能翻译成一种蛋白质。
操纵子：是指数个功能上相关的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位，所转录的RNA为多顺反子。
顺式作用元件：是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。
反式作用因子：是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。
基因家族：是真核生物基因组中来源相同，结构相似，功能相关的一组基因。
超基因家族：其各基因序列没有同源性，但其表达产物的功能却相似，它们在整体上有相同的结构特征。
基因簇：是指基因家族中各成员紧密成簇排列成大段的串联重复单位，定位于染色体的特殊区域，它们属同一个祖先的基因扩增产物。基因簇中也包括一些没有生物功能的假基因。通常基因簇内各序列间的同源性大于基因簇间的序列同源性。
Alu序列家族：Alu序列是在人类基因组内重复3*10^5~5*10^5次的中度重复序列，长约300bp，由于在这类序列一般都存在有限制性内切核酸酶Alu酶切位点而得名。
卫星DNA:卫星DNA是一类简单重复序列，由很短的序列重复多次，有数百万个拷贝，串联成长长的一大簇集中在异染色质区，集中在着丝粒和端粒附近，通常不转录。
微卫星DNA：微卫星DNA序列是由更加简单的串状重复单位组成的序列，重复单位仅有2~5bp，如（CA）n、（GT）n等，分散存在于基因组中。
正链/负链RNA病毒：如果病毒的单链RNA基因组直接作为mRNA, 则称为正链RNA，这种病毒称为正链RNA病毒。如果病毒RNA不能直接作为mRNA, 而以互补的RNA链作为mRNA，则称基因组RNA为负链RNA，这种病毒称为负链RNA病毒。
半保留复制：DNA复制时，解开的双链各自作为模板，用以合成新的互补链。在子代DNA双链中，一股链来自亲代，另一股是新合成的。这种复制方式叫半保留复制。
DNA复制：以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程。
冈崎片段：在复制过程中，随从链的合成是分段复制的，这些在复制过程中出现的不连续片段称为冈崎片段。
复制叉(RF)：复制开始后由于DNA双链解开，在两股单链上进行复制，在电子显微镜下可以看见伸展成叉状的复制现象，这一结构称为复制叉。
领头链：指连续合成的子链，其延伸方向与解链方向是相同的。
随从链：指不连续合成的子链，其延伸方向与解链方向是相反的。
半不连续复制：复制时，新合成的两条DNA单链中，一条是连续合成的，另一条是不连续进行的，这种复制方式称为半不连续复制。
端粒酶：端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的酶。在端粒合成过程中，端粒酶以其自身携带的RNA为模板合成互补链。
DNA损伤：复制过程中发生的DNA突变称为DNA损伤。
逆转录：以RNA为模板合成DNA的过程。
RNA复制：RNA复制是指某些病毒在宿主细胞中以自身RNA为模板，以4种NTP为原料合成RNA的过程。
ARS:酵母或其他细菌中有复制能力的DNA片段都含有复制起点，称为自主复制序列（ARS）. OriC:是大肠杆菌E.coli复制起始的最小功能片段长245bp，包含4个9bp的反向重复序列和3个13bp的正向重复序列，称为OriC.
ORC:又称起始识别复合物ORC是启动DNA复制的关键因子，是真核细胞DNA复制的起始蛋白。在翻译起始时，ORC蛋白可与其他蛋白结合
SSB:全称单链DNA结合蛋白，是一类能够选择性结合在DNA单链上，使DNA能以单链形式稳定存在的蛋白质，其功能在于稳定复制时已解开的DNA单链，覆盖在单链上的SSB 蛋白能够阻止单链重新缔合成双螺旋，并保护单链部分不被核酸酶降解。
Klenow：是DNApolⅠ被蛋白酶切开得到的大片段，像一个手型结构，有两个α螺旋的功能区，彼此接近垂直，之间是beta折叠的裂隙区。1个alpha螺旋代表拇指功能区，另一个代表手指功能区，之间的beta折叠区域相当于手掌功能区，手掌功能区为DNA的结合位点和聚合反应催化位点，手掌功能区含有三个天冬氨酸残基，是pol1发挥催化功能所必需的，与镁离子协同催化聚合反应。
PCNA：在真核生物复制时PCNA蛋白与DNA聚合酶δ结合。该蛋白相当于E.coliDNA聚合酶Ⅲ的beta亚基（beta-滑动钳），环绕着复制行进中的DNA模板，增加聚合酶持续合成的能力。
钳装配器DNA复制过程中，由于beta-滑动钳自身不能结合到起始复合体上，需要借助钳装配器，才能将beta-滑动钳装配到起始复合物上。在原核生物中为gamma-复合体。，在真核生物中为RF-C。
回环模型：polⅢ全酶以异二聚体形式存在，同时催化前导链和后随链合成，它们各利用一个催化中心（核心聚合酶）分别聚合DNA。前导链和后随链的3’端生长点分别紧靠polⅢ异二聚体的两个催化中心，beta-滑动钳以循环的方式分别套住DNA模板，后随链的模板环绕其中一个核心聚合酶形成约180°的空间回环，使其延伸方向在环内局部倒向（但生化反应方向不变），于是两条模板链在此处呈相同的3’-5’走向，使前导链和后滞链可同步进行5’-3’方向的合成。当新合成的冈崎片段到达前一个冈崎片段的5’-P端时，后随链模板脱离核心酶，，回环暂时解开，与此同时，在行进中的复制体又寻找新的引发位点起始新引物合成。后随链模板又绕核心聚合酶形成一个新回环，进行下一个冈崎片段合成。在后随链合成冈崎片段过程中，核心聚合酶与beta滑动钳在催化后随链的合成中循环作用。PolⅢ全酶及复制体与模板的结合，beta 滑动钳对钳装配器和核心酶不断发生往复式变化，以及核心聚合酶与DNA之间发生反复性地解离与再结合的过程，至少需要水解两分子ATP，以提供能量。
转录（transcription）：遗传信息从DNA到 RNA的转移。即以双链DNA中的一条链为模板，以4种核苷三磷酸：ATP、CTP、GTP和UTP为原料，在RNA聚合酶催化下合成RNA的过程。
模板链(template strand):可作为模板转录为RNA的那条链，该链与转录的RNA碱基互补（A-U，G-C）。在转录过程中，RNA聚合酶与模板链结合，并沿着模板链的3'→5';方向移动，按照5'→3'方向催化RNA的合成。
编码链encoding strand：双链DNA中，不能进行转录的那一条DNA链，该链的核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致（在RNA中是以U取代了DNA中的T）。
有义链sense strand：DNA双链在转录过程中与转录形成的mRNA序列相同（T对应U）的那条单链叫做有义链或正义链。即编码链。
反义链：在基因的DNA双链中，转录时作为mRNA合成模板的那条单链叫做模板链或反义链（template or antisense strand）。
转录泡：（transcription bubble）转录泡是由RNA聚合酶核心酶、DNA模板链以及转录形成的RNA新链三者结合形成的转录复合物。在转录的延伸阶段，RNA聚合酶使DNA双螺旋解链，暴露出长度约为17bp的局部单链区，因外形酷似泡状结构故称之为转录泡。
追赶模型（hot pursuit）：依赖于ρ因子的终止机制又称追赶模型.在终止过程中需要有ρ因子参与才发挥终止作用。ρ因子参与转录终止有4 步。①ρ因子是个六聚体，先结合在ρ装载位点；②ATPase被激活，推动ρ因子沿RNA5’-3’靠近转录泡，速度比RNApol移动快；③当RNApol 前移到终止子区域，转录产物形成发夹结构导致酶暂停延伸，使ρ因子追上转录泡；④终止子与ρ因子共同作用，其解旋酶活性使转录产物释放，转录终止。
上下游：启动子通常靠近转录起点，起点的核苷酸编号为“+1”，从转录起点沿RNApol移动方向称为下游，核苷酸编号依次是+2、+3……，从起点编号为+1的位点逆RNApol方向逐一阅读的序列称为上游。
核心启动子：指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区。（Hogness区）。
流产性转录产物：转录起始时，RNApol未离开启动子时，就产生了很多小的9~10个核苷酸长度的寡核苷酸链，称为流产性转录产物。
UCE:全称上游控制元件,指在启动子上游存在的TATA框,CAAT框和多个GC框,它们均对启动子的启动过程起调控作用。
CTD又称RNA pol Ⅱ（聚合酶）大亚基羧基末端结构域。由7个氨基酸组成（tyr-ser-pro-thr-ser-pro-ser）。CTD序列的丝氨酸和某些酪氨酸处磷酸化对酶活性是必须的。
PIC:转录起始前复合物(pre-initiation-complex,PIC) 转录起始前复合物是在RNA的转录过程中的起始阶段,真核生物转录因子之间先相互辨认结合,然后以复合体的形式与RNA聚合酶一同结合于转录起始前的DNA区域而成。
UBF:又称上游=结合因子，是一种特异的DNA结合蛋白，可以与UCE（上游控制序列）结合，还可以与核心元件上游的一段序列结合。
TF:全称转录因子，能够结合在某基因上游特异核苷酸序列上的蛋白质，活化后从胞质转位至胞核，通过识别和结合基因启动子区的顺式作用元件,启动和调控基因表达
BRE:又称TFⅡB识别元件，TFⅡB是一个重要的通用转录因子，它与TFⅡD和RNApolⅡ等结合于启动子上，组装成前起始复合物。有些启动子在TATA框上游有一段能促进TFⅡB与DNA结合的元件，称为BRE。
PSE称为近端序列元件。DSE称为远端序列元件
GTF：作用于核心启动子上的蛋白质辅助因子称为通用转录因子或基本转录因子
TBP:转录因子TFⅡD的组分之一。特异地与TATA框结合并指导起始复合体的形成，也可以是与RNA聚合酶Ⅲ（或Ⅰ）共同发挥作用的转录因子之一。即使基因无TATA框，也能通过与TBP 结合因子间相互作用而起调节作用。并起到将RNA聚合酶“束缚”在启动子的作用。
TAFⅡ：TBP偶联因子。HAT:组蛋白乙酰转移酶TRF1：TBP相关因子
Hn-RNA 在真核细胞核内可以分离到一类含量很高，分子量很大但不稳定的RNA，称为核内不均一RNA（heterogenous nuclear RNA,hnRNA）hnRNA的结构有以下特点：
(1) 5′端有帽结构；(2) 3′端有poly（A）尾巴；(3) 帽结构后有3个寡聚U区，每个
长约30nt； (4) 有重复序列，位于寡聚U区后面； (5) 有茎环结构，可能分布于编码区（非重复序列）的两侧； (6) 非重复序列中有内含子区。
SnoRNA和snoRNP:核仁小分子RNA，是一类稳定存在于细胞核核仁内的小分子RNA，与特定蛋白结合，产生核仁小分子核糖核蛋白体（snoRNP）snoRNA参与rRNA高级结构的合成和rRNA前体的甲基化。
snRNA和snRNP:核内小分子RNA和核内小分子核糖核蛋白体
IGS:内部引导序列。
CoTC共转录剪切元件，能使聚合中的转录物受到剪切的终止序列。
CTD:羧基末端域
RISC:RNA有道德沉默复合物
Dicer：是一种能将双链RNA切割为短片段的酶。
SPL：Squamosa启动子结合蛋白基因
RNAi:RNA干扰是通过小干扰 RNA ( small interference RNA, siRNA ) 造成目的mRNA特异性降解, 从而使基因转录后沉默的一种现象。
ChIP:染色质免疫沉淀技术（ChromatinImmunoprecipitation，简称ChIP）是研究体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性，可以真实地反映体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。染色质免疫沉淀技术的原理是：在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起，通过超声或酶处理将染色质切为小片段后，利用抗原抗体的特异性识别反应，将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来。染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定，染色质断裂，染色质免疫沉淀，交联反应的逆转，DNA的纯化，以及DNA的鉴定。
ADAR:RNA依赖性腺嘌呤转氨酶,能使腺苷酸转变成次黄嘌呤核苷酸
RLC:RISC装载复合体
FISH:荧光原位杂交技术是利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子或RNA分子杂交，通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号，来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布，或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。
CBC:帽子结合复合物。由两分子帽结合蛋白（CBP）组成
CPSF剪切和多聚腺苷酸化特异性因子
ESE: ESS:外显子剪接沉默子序列。BBP:分支点桥接蛋白
套索结构：外显子当 RNA 分子的一端自身回折成环并与其自身的核苷酸形成共价结合时，便形成了一个套索结构。在内含子的套索结构中的磷酸二酯键很少见。因为它是由核苷酸的 5’和 2’上的碳原子连接起来的。而磷酸二酯键通常是靠相邻的两个核苷酸的 5’和 3’的碳原子连接起来的。剪接增强子序列。
顺式剪接：剪接发生在mRNA前体分子内，以一个mRNA前体为底物，对其确定的内含子3’端5’端进行剪接，这种剪接称为顺式剪接。
反式剪接：在少数情况下，剪接发生在两种mRNA前体分子中，以不同的RNA前体分子为底物，发生剪接，称为反式剪接。
剪接因子：参与剪接的除少数其他蛋白质外，大多数蛋白质是snRNP的组分。统称为剪接因子。剪接体：剪接体是mRNA前体在剪接中组装成的多组分复合物，是由snRNA和蛋白因子组成的snRNP复合体，具有催化内含子切割和外显子连接的功能。
SR蛋白：SR蛋白得名于其氨基酸序列中富含的丝氨酸(S)和精氨酸(R)残基。其共同结构是位于
氨基末端(N末端)的RNA结合结构域(RNA binding domain)，位于梭基末端的含不同丝氨酸
和精氨酸残基数量的RS结构域(RS domain)。 RNA结合结构域也称RNA识别基序(RNA recognition motif, RRM )，是决定SR蛋白识别特异性mRNA前体并与之结合的功能单位。RS 结构域主要参与了SR蛋白的细胞内定位及SR蛋白间、SR蛋白与其他因子间的相互作用。其功能的发挥与其自身的磷酸化紧密相联。 SR蛋白主要与mRNA前体中的特异序列结合，从而帮助其他拼接因子识别正确的拼接点。
转酯反应：在剪接体上完成剪接反应的生化本质是磷酸二酯键的转移反应，又称为转酯反应。选择性剪接：一个基因的初始转录产物在不同的分化细胞，不同的发育阶段、乃至不同的生理状态下可以有不同的剪接方式，得到不同成熟的mRNA和蛋白质，称为选择性剪接。
同源体蛋白：基因转录后经过选择性剪接，得到不同的mRNA，翻译出来的不同的蛋白质即为同源体蛋白。
剪接性核酶：指RNA分子被磷酸二酯键水解切割后，伴随着形成新的磷酸二酯键，即催化磷酸二酯键的转移反应或称转酯反应的酶。剪接性核酶具有序列特异的核酸内切酶，RNA连接酶等多种酶活性。
分支位点：位于内含子内，靠近3’端，后面为多聚嘧啶区，常为A.
RNP:核糖核蛋白，是包含RNA的核蛋白，也可以说是核糖核酸同蛋白质的结合体。常见的有核糖体，端粒酶，snRNP（snRNA 同蛋白质结合形成，用于前RNA的剪切和拼接）。
IF:起始因子eIF：真核起始因子EF-Tu：延伸因子
RF:终止释放因子。EJC:外显子连接处结合位点
tmRNA tmRNA是细菌体内一种代谢上稳定的RNA［1、2］。它的结构独特，其5′和3′末端序列有一个类似丙氨酰tRNA的结构，中间序列编码标记肽(tag peptide)。与其独特的结构相适应，tmRNA兼有tRNA和mRNA的双重功能，在细胞中参与一种特殊的翻译反应——反式翻译反应(trans-translation)，结果形成一个在C-末端接有一个标记肽的嵌合蛋白质。
ORF:开放阅读框是DNA上的一段碱基序列，由于拥有特殊的起始密码子和直到可以从该段碱基序列产生合适大小蛋白才出现的终止密码子，该段碱基序列编码一个蛋白或一段多肽链。
多聚核糖体：多聚核糖体（polyribosome）是指合成蛋白质时，多个甚至几十个核糖体串联附着在一条mRNA分子上，形成的似念珠状结构。肽链合成开始时，在mRNA的起始密码子部位，核糖体亚基装配成完整的起始复合物后，向mRNA的3'端移动，开始多肽链的合成，直到到达终止密码子处。核糖体在mRNA的每一个密码子处便与有与之互补的反密码子的tRNA（携带有相应氨基酸）结合，之后其上的氨基酸便与核糖体上的肽链相连，空的tRNA离去，核糖体前进。多肽链便越来越长。多聚核糖体：结合在一个mRNA分子上的多个核糖体当第一个核糖体离开起始密码子后，起始密码子的位置空出，第二个核糖体的亚基就可以结合上来，装配成完整的起始复合物后，开始另一条多肽链的合成。同样，第三个核糖体、第四个核糖体依次结合到mRNA 上，便形成多聚核糖体。
核糖体循环：是指蛋白质生物合成中肽链延长的过程。有三个步骤：1.进位。2.转肽3.转位。R蛋白：指核糖体蛋白
UTR:即非翻译区，是信使RNA（mRNA）分子两端的非编码片段。 5'-UTR从mRNA起点的甲基
化鸟嘌呤核苷酸帽延伸至AUG起始密码子，3'-UTR从编码区末端的终止密码子延伸至多聚A尾巴（Poly-A）的末端。
PABP: 多聚腺苷酸结合蛋白（PABPs）是一个蛋白家族，其特征是能结合多聚腺苷酸RNA.PABPs 在mRNA循环和参与基因表达的机制中发挥重要的作用。它们结合新合成的多聚腺苷酸或者成熟的mRNA的尾巴，还可作为在多聚腺苷化、输出、翻译和它们结合的转录本的翻转中特定步骤的顺式效应因子。PABPs缺乏任何明显的催化活性
CPE:细胞质多聚腺苷酸元件NLS:核内定位序列
SRP:信号识别颗粒signal recognition particle （SRP）在真核生物细胞质中一种小分子RNA 和六种蛋白的信号识别颗粒复合体，此复合体能识别核糖体上新生肽末端的信号，顺序并与之结合，使肽合成停止，同时它又可和ER膜上的停泊蛋白识别和结合，从而将mRNA上的核糖体，带到膜上。SRP上有三个结合位点：信号肽识别结合位点，SRP受体蛋白结合位点，翻译暂停结构域。SRP既能识别露出核糖体之外的信号肽并与之结合，又能识别内质网膜上的SRP受体。通常SRP与核糖体的亲和力较低，但当游离核糖体合成信号肽后，它便增加了与核糖体的亲和力，并与之结合形成SRP-核糖体复合体，由于SRP占据了核糖体的A位点，使蛋白质合成暂时终止。
IRF:铁离子调节因子。IRE:铁应答元件
ORF:开放阅读框（或开放读码框架，open reading frame，ORF)是DNA上的一段碱基序列，由于拥有特殊的起始密码子和直到可以从该段碱基序列产生合适大小蛋白才出现的终止密码子，该段碱基序列编码一个蛋白。
多聚核糖体：多聚核糖体（polyribosome）是指合成蛋白质时，多个甚至几十个核糖体串联附着在一条mRNA分子上，形成的似念珠状结构。多聚核糖体进行多肽合成的优点即在于：不论多肽相对分子质量的大小或是mRNA的长短如何，单位时间内所合成的多肽分子数目都大体相等。这对mRNA的利用及对其数量的调控更为经济和有效。
核糖体循环：又称蛋白质生物合成的延伸过程。有三个步骤：①进位；②转肽；③转位。
翻译跳跃：通常，核糖体对密码子的识别由ＡＵＧ开始，一个接一个识别，直到终止子，但也有一些例外，翻译中读码框发生了位移，可导致核糖体跳过一端mRNA后继续翻译，这一过程叫翻译跳跃。
启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列。
假基因：是在多基因家族中，某些不能表达有功能产物的基因，用Ψ表示。
增强子：位于真核基因中远离转录起始点，能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列。它可位于被增强的转录基因的上游或下游，也可相距靶基因较远。
基因表达：是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质，进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。
顺式作用元件：是指那些与结构基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列。包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和一些反应元件等。
反式作用因子：是指真核细胞内含有的大量可以通过直接或间接结合顺式作用元件而调节基因转录活性的蛋白质因子。
结构基因：是决定合成某一种蛋白质分子结构相应的一段DNA序列。结构基因的功能是把携带的遗传信息转录给mRNA（信使核糖核酸）,再以mRNA为模板合成具有特定氨基酸序列的蛋白质。
调节基因：是调节蛋白质合成的基因。它能使结构基因在需要某种酶时就合成某种酶,不需要时,
则停止合成，它对不同染色体上的结构基因有调节作用。
操纵基因：于结构基因的一端，是操纵结构基因的基因。当操纵基因“开动”时,处于同一染色体上的，由它所控制的结构基因就开始转录、翻译和合成蛋白质。当“关闭”时，结构基因就停止转录与翻译。操纵基因与一系列受它操纵的结构基因合起来就形成一个操纵子。
阻遏蛋白：是负调控系统中由调节基因编码的调节蛋白，可与辅阻遏物一起结合到操纵基因上，阻遏操纵子结构基因的转录，可被诱导物变构后失活。
辅阻遏物：辅阻遏物通常是所阻遏酶的终末产物。阻遏的结果是使细胞暂时停止与其有关酶的合成。如色氨酸操纵子中，色氨酸与操纵子中的阻遏蛋白结合，使后者表现出结合操纵基因的活性，阻止了RNA聚合酶与色氨酸操纵子上的启动子结合，导致操纵子关闭。
前导肽：当翻译起始于AUG，则产生一个含有14个氨基酸的多肽，称为前导肽。
衰减子：衰减子（attenuator）：细菌E.coli的trp操纵子中第一个结构基因与启动序列P之间有一衰减子区域。Trp操纵子的序列1中有两个色氨酸密码子，当色氨酸浓度很高时，核蛋白体（核糖体）很快通过编码序列1，并封闭序列2，这种与转录偶联进行的翻译过程导致序列3、4形成一个不依赖ρ（rho）因子的终止结构---衰减子。(转录衰减是原核生物特有的调控机制)。正调控系统：正调控系统一般是指转录水平的调控机制，包括可诱导的正控制系统、可阻遏的正控制系统和CAP正控制系统。在可诱导的正控制系统中，调节基因编码的激活蛋白在诱导物的作用下，能够与启动子结合开启操纵子结构基因的转录。在可阻遏的正控制系统中，调节基因编码的激活蛋白可与启动子结合，促进操纵子结构基因的转录。
负调控系统：负调控系统是一种转录水平上的调控机制。由于调控因子的存在使操纵子的结构基因关闭，而当调控因子不存在时，操纵子的的结构基因开启的调控方式称为负调控。
正调控系统：正调控因子能感知代谢必须的物质的缺乏，并能激活操纵子的启动子作出应答，使RNA聚合酶与启动子结合而转录结构基因。
超级调控因子：（p）ppGpp的产生能关闭能关闭许多基因的表达，而且它的作用可影响许多操纵子，故又称为超级调控因子。
信息分子：调节细胞生命活动的化学物质。其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子；而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子。
受体：是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合，进而发生生物学效应的的特殊蛋白质。
绝缘子：绝缘子(insulator)长约几百个核苷酸对，其长度可小至42bp，是一种具有中性调控作用的顺式作用元件，绝缘子是（insulator）位于正调控元件(增强子)（enhancer）或者负调控因子，如异染色质或沉默子（silencer）与启动子（promoter）之间的小段DNA调控序列。绝缘子本身对基因的表达既没有正效应，也没有负效应，其作用只是不让其他调控元件对基因的活化效应或失活效应发生作用。
分子克隆：在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组，将重组分子导入合适宿主，使其在宿主中扩增和繁殖，以获得该DNA分子的大量拷
蛋白激酶：是指能够将磷酸集团从磷酸供体分子转移到底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。蛋白磷酸酶：是具有催化已经磷酸化的蛋白质分子发生去磷酸化反应的一类酶分子，与蛋白激酶相对应存在，共同构成了磷酸化和去磷酸化这一重要的蛋白质活性的开关u、与系统。
基因诊断：是以DNA和RNA为诊断材料，采用分子生物学技术，从基因水平检基因的存在、缺陷或表达异常以及对人体状态或疾病做出诊断的一种方法。
基因治疗：是运用分子生物学技术，在基因水平通过在特定靶细胞表达该细胞本来不表达的基
因，或采用特定方式关闭、抑制异常表达的基因，达到治疗疾病目的的一种方法。
基因工程：利用重组DNA技术，在体外对DNA分子按照既定的目的和方案，用工具酶对DNA进行剪切和重新连接，构成重组DNA分子，然后把它导入宿主细胞，扩增所需的DNA片段，表达有关基因产物，制备特定的蛋白质或多肽产物；或定向改造细胞乃至生物个体的特性所用的方法及相关的工作；统称为基因工程。
载体：能在连接酶的作用下和外源DNA片段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA分子。
转化：指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程。
感染：以噬菌体、粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子，在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒，才能感染适当的细胞，并在细胞内扩增。
转导：指以噬菌体为载体，在细菌之间转移DNA的过程，有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程。
转染：指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程。
DNA变性：在物理或化学因素的作用下，导致两条DNA链之间的氢键断裂，而核酸分子中的所有共价键则不受影响。
DNA复性：当促使变性的因素解除后，两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构。
退火：指将温度降至引物的T
值左右或以下，引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交链。
M
筑巢PCR：先用一对外侧引物扩增含目的基因的大片段，再用内侧引物以大片段为摸板扩增获取目的基因。可以提高PCR的效率和特异性。
原位PCR：由PCR技术与原位杂交技术相结合而形成。先通过PCR对切片样品上的组织细胞或染色体上的靶序列进行扩增，使拷贝数增加，再用原位杂交的方法检测，以实现对靶分子的定位及定量分析。
定量PCR：基因表达涉及的转录水平的研究常需要对mRNA进行定量测定，对此采用的PCR技术就叫定量PCR。
基因打靶：是指通过DNA定点同源重组，改变基因组中的某一特定基因，从而在生物活体内研究此基因的功能。
DNA芯片：DNA芯片技术是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后与标记的样品杂交，通过对杂交信号的检测分析，即可获得样品的遗传信息。由于常用计算机硅芯片作为固相支持物，所以称为DNA芯片。错义突变：DNA分子中碱基对的取代，使得mRNA的某一密码子发生变化，由它所编码的氨基酸就变成另一种的氨基酸，使得多肽链中的氨基酸顺序也相应的发生改变的突变。
无义突变：由于碱基对的取代，使原来可以翻译某种氨基酸的密码子变成了终止密码子的突变。同义突变：碱基对的取代并不都是引起错义突变和翻译终止，有时虽然有碱基被取代，但在蛋白质水平上没有引起变化，氨基酸没有被取代，这是因为突变后的密码子和原来的密码子代表同一个氨基酸的突变。
移码突变：在编码序列中，单个碱基、数个碱基的缺失或插入以及片段的缺失或插入等均可以使突变位点之后的三联体密码阅读框发生改变，不能编码原来的蛋白质的突变。
癌基因：是细胞内控制细胞生长的基因，具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性。当癌基因结构或表达发生异常时，其产物可使细胞无限制增殖，导致肿瘤的发生。包括病毒癌基因和细胞癌基因。
细胞癌基因：存在于正常的细胞基因组中，与病毒癌基因有同源序列，具有促进正常细胞生长、
增殖、分化和发育等生理功能。在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因，当其受到某些条件激活时，结构和表达发生异常，能使细胞发生恶性转化。
病毒癌基因：存在于病毒（大多是逆转录病毒）基因组中能使靶细胞发生恶性转化的基因。它不编码病毒结构成分，对病毒无复制作用，但是当受到外界的条件激活时可产生诱导肿瘤发生的作用。
基因诊断：以DNA或RNA为诊断材料，通过检查基因的存在、结构缺陷或表达异常，对人体的状态和疾病作出诊断的方法和过程。
RFLP：即限制性片段长度多态性，个体之间DNA的核苷酸序列存在差异，称为DNA多态性。若因此而改变了限制性内切酶的酶切位点则可导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化，
称为RFLP。
基因治疗：一般是指将限定的遗传物质转入患者特定的靶细胞，以最终达到预防或改变特殊疾病状态为目的治疗方法。
反义RNA：碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA称为反义RNA。可以作为一种调控特定基因表达的手段。
核酶：是一种可以催化RNA切割和RNA剪接反应的由RNA组成的酶，可以作为基因表达和病毒复制的抑制剂。
三链DNA：当某一DNA或RNA寡核苷酸与DNA高嘌呤区可结合形成三链，能特异地结合在DNA 的大沟中，并与富含嘌呤链上的碱基形成氢键。
SSCP：单链构象多态性检测是一种基于DNA构象差别来检测点突变的方法。相同长度的单链DNA，如果碱基序列不同，形成的构象就不同，这样就形成了单链构象多态性。
管家基因：在生物体生命的全过程都是必须的，且在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达的基因。
细胞全能性：指同一种生物的所有细胞都含有相同的DNA，即基因的数目和种类是一样的，但在不同阶段，同一个体的不同组织和器官中基因表达的种类和数目是不同的。
SD序列：转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译，需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌16S rRNA3，末端富含嘧啶的序列互补，是核糖体的识别位点。
反义核酸技术：是通过合成一种短链且与DNA或RNA互补的，以DNA或RNA为目标抑制翻译的反义分子，干扰目的基因的转录、剪接、转运、翻译等过程的技术。
核酸探针：探针是指能与某种大分子发生特异性相互作用，并在相互作用之后可以检测出来的生物大分子。核酸探针是指能识别特异碱基顺序的带有标记的一段DNA或RNA分子。
周期蛋白：是一类呈细胞周期特异性或时相性表达、累积与分解的蛋白质，它与周期素依赖性激酶共同影响细胞周期的运行。
CAP：是大肠杆菌分解代谢物基因活化蛋白，这种蛋白可将葡萄糖饥饿信号传递个许多操纵子，使细菌在缺乏葡萄糖时可以利用其他碳源。
一、问答题
（一）、病毒、原核、真核基因组的特点？
答：1、病毒基因组的特点：
①基因组很小，所含的遗传信息也少；②每种病毒只含有一种核酸；③核酸结构是单链或双链、闭合环状或线状分子；④有基因重叠，即同一个DNA序列可编码两种或两种以上的蛋白质，
使用共同的核苷酸序列，但转录的mRNA有不同的ORF，有些重叠基因使用相同的可读框，但起始密码子或终止密码子不同；基因之间的间隔序列很短；⑤功能上相关的基因集中成簇构成功能单元或转录单元，转录产物一般为多顺反子mRNA;⑥大多数真核细胞的病毒都含有不连续基因，噬菌体基因是连续的⑦除正链RNA病毒外，真核细胞病毒的基因一般先转录成mRNA 前体再经剪接成为成熟的mRNA，所以病毒基因的特性更像真核生物基因。
2、原核基因组的特点：
①通常仅由一条环形或线形双链DNA分子组成；②染色体相对聚集成称为“类核”的致密
区；③只有一个人复制起点；④有操纵子结构，数个相关的结构基因串联在一起受同一调控区调节，合成多顺反子mRNA；⑤编码蛋白质的结构基因为单拷贝，rRNA基因一般是多拷贝；⑥非编码DNA所占比例很少，类似于病毒基因组；⑦基因组DNA有多种调控区，如复制起始区、终止区、转录启动子、转录终止区等特殊序列及重复序列，比基因组复杂；⑧有可移动的DNA序列。
3、真核基因组的特点：
①真核生物基因组远大于原核生物基因组，结构复杂，基因数庞大，具有多个复制起点；
②基因组DNA与蛋白质结合成染色体，储存于细胞核内；③真核基因为单顺反子，而细
菌和病毒的结构基因多为多顺反子；④基因组中非编码区多于编码区；⑤真核基因多为不连续的断裂基因，由外显子和内含子镶嵌而成；⑥存在大量的重复序列；⑦功能相关的基因构成各种基因家族；⑧存在可移动的遗传因素；⑨体细胞为双倍体，而精子和卵子为单倍体。
（二）、乳糖操纵子的作用机制？
答：1、乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列O，一个启动子P和一个调节基因I。
2、阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时，I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶；有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以，乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。
3、CAP的正性调节：在启动子上游有CAP结合位点，当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时，cAMP浓度升高，与CAP结合，使CAP发生变构，CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点，激活RNA聚合酶活性，促进结构基因转录，调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录，对乳糖操纵子实行正调控，加速合成分解乳糖的三种酶。
4、协调调节：乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制，互相协调、互相制约。
（三）、真核生物转录水平的调控机制？
答：真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的，主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程。
1、转录起始复合物的形成：真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的
蛋白质-DNA复合物，只有当一个或多个转录因子结合到DNA上，形成有功能的启动子，才能被RNA聚合酶所识别并结合。
转录起始复合物的形成过程为：T FⅡD结合TATA盒；RNA聚合酶识别并结合T FⅡ
D-DNA复合物形成一个闭合的复合物；其他转录因子与RNA聚合酶结合形成一个开放复合物。
在这个过程中，反式作用因子的作用是：促进或抑制T FⅡD与TATA盒结合；促进或抑制RNA聚合酶与T FⅡD-DNA复合物的结合；促进或抑制转录起始复合物的形成。
2、反式作用因子：一般具有三个功能域（DNA识别结合域、转录活性域和结合其他蛋白结
合域）；能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件；对基因的表达有正性或负性调控作用。
3、转录起始的调控：
⑴反式作用因子的活性调节：①表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性；②
共价修饰——磷酸化和去磷酸化，糖基化；③配体结合——许多激素受体是反式作用因子；④蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成。
⑵反式作用因子与顺式作用元件的结合：反式作用因子被激活后，即可识别并结合上游
启动子元件和增强子中的保守性序列，对基因转录起调节作用。
⑶反式作用因子的作用方式——成环、扭曲、滑动、Oozing。
⑷反式作用因子的组合式调控作用：每一种反式作用因子结合顺式作用元件后虽然可以
发挥促进或抑制作用，但反式作用因子对基因调控不是由单一因子完成的而是几种因子组合发挥特定的作用。
（四）、真核生物转录后水平的调控机制？
答：（1）、5，端加帽和3，端多聚腺苷酸化的调控意义：5，端加帽和3，端多聚腺苷酸化是保持mRNA 稳定的一个重要因素，它至少保证mRNA在转录过程中不被降解。
（2）、mRNA选择性剪接对基因表达调控的作用
（3）、mRNA运输的控制
（九）、分子克隆中常用的工具酶及良好载体的条件？
答：（1）、常用的工具酶
1、限制性核酸内切酶：是细菌产生的一类能识别和切割双链DNA分子内特定的碱基顺序
的核酸水解酶。
2、DNA连接酶：将两段DNA分子拼接起来的酶。
3、DNA聚合酶：催化单核苷酸链延伸。
4、逆转录酶：依赖于RNA的DNA聚合酶，这是一种有效的转录RNA成为DNA的酶，产物
DNA又称互补DNA。
5、末端脱氧核糖核酸转移酶：将脱氧核糖核酸加到DNA的3末端。
6、碱性磷酸酶：催化去除DNA、RNA等的5磷酸基团。
7、依赖DNA的RNA聚合酶：识别特异性启动子，RNA转录。
（2）、良好载体的条件
1、必须有自身的复制子；
2、载体分子上必须有限制性核酸内切酶的酶切位点，即多克隆位点，以供外源DNA插入；
3、载体应具有可供选择的遗传标志，以区别阳性重组子和阴性重组子；
4、载体分子必须有足够的容量；
5、可通过特定的方法导入细胞；
6、对于表达载体还应具备与宿主细胞相适应的启动子、前导顺序、增强子、加尾信号等DNA调控元件。
（十）、蓝-白筛选的原理？
答：某些质粒带有大肠杆菌的半乳糖苷酶基因片段，在半乳糖苷酶基因的基因区外又另外引入了一段含多种单一限制酶位点的DNA序列。这些位点上如果没有克隆外源性DNA片段，在质粒
被导入lac-的大肠杆菌后，质粒携带的半乳糖苷酶基因将正常表达，与大肠杆菌的半乳糖苷酶基因互补，产生有活性的半乳糖苷酶，加入人工底物X-gal和诱导剂IPTG后，出现蓝色的菌落。如果在多克隆位点上插入外源DNA片段，将使lac Z基因灭活，不能生成半乳糖苷酶，结果菌落出现白色。由于这种颜色标志，重组克隆和非重组克隆的区分一目了然。
（十一）SANGER双脱氧链终止法的原理？
答：DNA链中核苷酸以3’,5’-磷酸二酯键连接，合成DNA所用的底物是 2’-脱氧核苷三磷酸。2’,3’ddNTP与普通dNTP不同，它们在脱氧核糖的3’位置缺少一个羟基。在DNA聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中，但由于没有3’羟基，不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键，因此，正在延伸的DNA链不能继续延伸。在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP，链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争，产物是一系列的核苷酸链，其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离。在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP，结果将产生4组寡核苷酸，它们将分别终止于模板链的A、C、G或T位置。（十二）、核酸分子杂交的原理？
答：具有互补序列的两条单链核酸分子在一定的条件下（适宜的温度及离子强度等）碱基互补配对结合，重新形成双链；在这一过程中，核酸分子经历了变性和复性的变化，以及在复性过程中个分子间键的形成和断裂。杂交的双方是待测核酸和已知序列。
（十三）、影响杂交的因素？
答：1、核酸分子的浓度和长度：核酸浓度越大，复性速度越快。探针长度应控制在50-300个碱基对为好。
2、温度：温度过高不利于复性，而温度过低，少数碱基配对形成的局部双链不易解离，适
值低25度。
宜的温度是较T
M
3、离子强度：在低离子强度下，核酸杂交非常缓慢，随着离子强度的增加，杂交反应率增加。高浓度的盐使碱基错配的杂交体更稳定，所以进行序列不完全同源的核酸分子杂交时必须维持杂交反应液中的盐浓度和洗膜液中的盐浓度。
值。它有以下优点：在低温下探针更稳 4、杂交液中的甲酰胺：甲酰胺能降低核酸杂交的T
M
定；能更好地保留非共价结合的核酸。
5、核酸分子的复杂性：是指存在于反应体系中的不同顺序的总长度。两个不同基因组DNA 变性后的相对杂交速率取决于样品浓度绝对一致时的相对复杂性（即DNA中的碱基数）。
6、非特异性杂交反应：在杂交前应对非特异性杂交反应位点进行封闭，以减少其对探针的非特异性吸附作用。
（十四）、探针的种类和优缺点？
答：1、cDNA探针：通过逆转录获得cDNA后，将其克隆于适当的克隆载体，通过扩增重组质粒而使cDNA得到大量的扩增。提取质粒后分离纯化作为探针使用。它是目前应用最为广泛的一种探针。
2、基因组探针：从基因组文库里筛选得到一个特定的基因或基因片段的克隆后，大量扩增、纯化，切取插入片段，分离纯化为探针。
3、寡核苷酸探针：根据已知的核酸顺序，采用DNA合成仪合成一定长度的寡核苷酸片段作为探针。
4、RNA探针：采用基因克隆和体外转录的方法可以得到RNA或反义RNA作为探针。
（十五）、探针的标记法？
答：1、缺口平移法：此法是利用适当浓度的DNase Ⅰ在DNA双链上随机切割单链，造成单链
切口。切口处产生一个5末端和3末端，3末端就可以作为引物，在大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的催化下，以互补的DNA单链为摸板，依次将dNTP连接到切口的3末端的羟基上，合成新的DNA 单链；同时DNA聚合酶Ⅰ的5→3的核酸外切酶活性在切口处将旧链从5末端逐步切除，新合成链不断延伸，从而使原DNA分子上的部分核苷酸残基被标记的核苷酸所取代。
2、随机引物法：随机引物是人工合成的长度为6个寡核苷酸残基的寡聚核苷酸片段的混合物。对于任何一个用作探针的DNA片段，随机引物混合物中都会有一些六核苷酸片段可以与之结合，起到DNA合成引物的作用。将这些引物与变性的DNA单链结合后，以4种dNTP（其中一种是标记物标记的dNTP）为底物，合成与探针DNA互补的切带有标记物的DNA探针。
3、PCR标记法：在PCR反应底物中，将一种dNTP换成标记物标记的dNTP，这样标记的dNTP就在PCR反应的同时掺入到新合成的DNA链上。
4、末端标记法：只是将DNA片段的一端进行标记。
（十六）、PCR的基本原理？
答：PCR是在试管中进行的DNA复制反应，基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理，以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质，人为地控制体外合成系统的温度，以促使双链DNA变成单链，单链DNA与人工合成的引物退火，然后耐热DNA聚合酶以dNTP 为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA。PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的。需要重复进行DNA模板解链、引物与模板DNA结合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高温变性、低温退火、中温延伸３个步骤构成PCR反应的一个循环，此循环的反复进行，就可使目的DNA得以迅速扩增。DNA模板变性：模板双链DNA→单链DNA，94℃。退火：引物＋单链DNA→杂交链，引物的Tm值。引物的延伸：温度至70 ℃左右， Taq DNA聚合酶以４种dNTP 为原料，以目的DNA为模板，催化以引物３’末端为起点的5’→3’DNA链延伸反应，形成新生DNA链。新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR，就是如此反复循环，使目的DNA得到高效快速扩增。
（十七）、PCR引物设计的基本要求？
答：1、引物长度一般为15～30个核苷酸。过短影响PCR的特异性，过长会提高相应退火温度，使延伸温度超过TaqDNA聚合酶最适温度74℃,影响产物的生成。
2、引物的碱基尽可能随机，避免出现嘌呤、嘧啶碱基堆积现象。3’端不应有连续3个G和C。
否则会使引物和模板错误配对。G+C含量一般占45％ -55％。3’端和5’端引物具有相似的Tm值,Tm值计算公式：Tm＝4(G+C)+ 2(A+T)
3、引物自身不应存在互补序列以避免折叠成发夹结构。引物的连续互补序列，一般不超过3bp。
4、两个引物之间不应存在互补序列，尤其应避免3’端的互补重叠。
5、引物与非特异扩增区的序列的同源性不超过70％，引物3’末端连续8个碱基在待扩增区以
外不能有完全互补序列，否则易导致非特异性扩增。
6、引物3’端碱基是引发延伸的起点，因此一定要与模板DNA配对。引物3’端最佳碱基选择
是G和C，形成的碱基配对比较稳定。
7、引物与模板结合时，引物的5’端最多可以游离十几个碱基而不影响PCR反应的进行。
8、引物的5’端可以修饰，如附加限制酶位点，引入突变位点，用生物素、荧光物质、地高辛
标记，加入其它短序列包括起始密码子、终止密码子等。
（十八）、PCR的反应条件？
答：1、PCR反应的缓冲液：
Tris-HCl缓冲液
●KCl 促进引物的退火，浓度太高时会抑制Taq DNA聚合酶活性。
●加入BSA或明胶有利于保护TaqDNA聚合酶活性。
●必要时加入适量二甲基亚砜(DMSO)或甲酰胺利于破坏模板二级结构，提高PCR反应特异
性。
2、镁离子浓度一般用量1.5-2.0 mmol/L，Taq DNA聚合酶活性需要Mg 2+。Mg 2+浓度过
低，会显著降低酶活性。Mg 2+浓度过高又使酶催化非特异性扩增增强。Mg 2+浓度还会影响引物的退火、模板与PCR产物的解链温度，从而影响扩增片段的产率。
3、底物浓度工作浓度20-200umol/L， dNTPs浓度过高可加快反应速度，也增加碱基的错配率和实验成本。降低浓度会导致反应速度下降，可提高反应的特异性。在PCR反应中，4种dNTP必须以等摩尔浓度配制，以减少PCR反应的错配误差并提高使用效率。
4、Taq DNA聚合酶 75-80℃时具有最高的聚合酶活性，150个核苷酸/秒；具有良好的热稳定性，95℃仍有活性，应用浓度一般为1-2.5u/100ul反应体积。
5、引物 0.1-0.5umol/L。引物浓度偏高会引起错配或非特异性扩增、生成引物二聚体，使目的DNA片段产率下降。退火温度与引物Tm值有关，引物Tm值在55-80 ℃范围较为理想。
6、反应温度和循环次数
（十九）、影响大肠杆菌系统外源基因表达的因素？
答：1、启动子的强弱；2、基因的剂量；3、影响RNA转录和翻译效率的因素：SD序列、mRNA；
4、外源基因密码子的选择；
5、表达产物的大小；
6、表达产物的稳定性。
（二十）、大肠杆菌系统表达外源基因必须具备的条件？
答：1、要求外源基因的编码区不能含有内含子；
2、表达的外源片段要位于大肠杆菌启动子的下游，并形成正确的阅读框架；
3、转录出的mRNA必须有与大肠杆菌16S rRNA3，末端相匹配的SD序列，才能被有效的翻译成蛋白质。
4、蛋白产物必须稳定，不易被细胞内蛋白酶快速降解，且对宿主无害。
（二十一）、真核细胞表达外源基因的条件？
答：1、首先必须具备哺乳动物细胞表达的功能元件。要求哺乳动物细胞表达载体带有能在真核细胞中表达外源基因的真核转录调控元件；
2、注意选择转染的受体细胞，不同类型的细胞具有不同的特性；
3、注意选择适当的选择标记。
（二十四）、DNA芯片的原理？
答：DNA芯片技术就是一种大规模的集成的固相核酸分子杂交，以大量已知碱基序列的寡核苷酸片段为探针，检测样品中哪些核酸序列与其互补，然后通过定性定量分析得出待测样品的基因序列及表达的信息。其方法包括芯片的制备、样品的准备、分子杂交和检测分子。
（二十六）、突变类型及其遗传效应？
答：1、突变类型：
①点突变：DNA大分子上一个碱基的变异。分为转换和颠换。
②缺失：一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失。
③插入：一个原来没有的碱基或一段原来没有的核苷酸链插入到DNA大分子中间。
④倒位：DNA链内重组，使其中一段方向倒置。
2、突变的遗传效应：
①遗传密码的改变：错义突变、无义突变、同义突变、移码突变
①对mRNA剪接的影响：一是使原来的剪接位点消失；二是产生新的剪接位点。
②蛋白质肽链中的片段缺失：
（二十七）、基因治疗的策略？
答：1、基因置换或称基因矫正：特定的目的基因导入特定的细胞，通过定位重组，让导入的正常基因置换基因组内原有的缺陷基因，不涉及基因组的任何改变。
2、基因添加或称基因增补：通过导入外源基因使靶细胞表达其本身不表达的基因。
3、基因干预：采用特定的方式抑制某个基因的表达，或者通过破坏某个基因而使之不能
表达，以达到治疗疾病的目的。
4、基因标记：基因标记实验是基因治疗的前奏，并不在于直接治疗疾病而是期望能够提供
有关正常细胞生物学和疾病病理方面的信息。
（二十八）、基因诊断常用的生物学技术。
1、核酸分子杂交
1）斑点印迹杂交：将待检的核酸样品点在NC膜上，变性后与标记的探针进行结合反应，显影或显色后可检测出杂交信号的强度，通过与对照样品比较可确定所检核酸量的高低。
2）组织原位杂交：把组织或细胞适当处理，使通透性增加，使探针进入细胞内与核酸杂交。3）等位基因特异性寡核苷酸杂交技术（ASOH）：根据已知基因突变位点的碱基序列，设计和制备与野生型或者突变型序列互补的两种探针，分别与被检者的DNA分子进行杂交，根据样品与两种探针结合信号的强弱，可以检测出是否存在有基因突变，以及是基因突变的纯合子或杂合子。
2、PCR技术
3、单链构象多态性分析(SSCP):是一种简便的检测核酸序列中点突变的技术。单个或多个碱基
的突变可能影响单链核酸分子的构象，在非变性聚丙烯酰氨凝胶电泳时，不同构象的核酸分子常表现出不同的迁移率，电泳新生条带的出现反映了突变分子的存在。
4、DNA分子多态性分析
5、限制性核酸内切酶酶切图谱分析
6、显微切割技术
7、DNA序列测定
（二十九）、简述重组DNA技术的过程。
1、获取目的基因
2、将目的基因进行必要的改造
3、选择和修饰克隆载体
4、将目的基因和载体连接获得含有目的基因的重组载体
5、将重组载体导入相应细胞
6、筛选出含重组DNA的细胞
（三十）、DNA双螺旋结构有哪些形式？说明其主要特点和区别
DNA双螺旋结构主要有B-DNA,A-DNA,Z-DNA.
1.B-DNA即Watson-Crick模型，其特点为a.主链：脱氧核糖和磷酸基通过3’,5’-磷酸二酯键连接形成螺旋链的骨架。两条主链以反平行的方式围绕同一中心轴相互盘绕，向右旋转形成双螺旋。磷酸与核糖主链处于螺旋的外侧，在磷酸基团上带有一定量的负电荷。碱基平面基本上以垂直横向排列在螺旋的内侧，核糖平面与螺旋轴接近平行。b.碱基配对两条核苷酸链依靠彼此碱基之间的立体化学特性形成氢键。旋转结合。氢键的形成必须是嘌呤与嘧啶相配对，在
A和C,G与T之间不能形成适合的氢键，只有A和T互补配对形成两个氢键；G和C互补配对形成三个氢键，才能保证形成正确的双螺旋结构。C.螺旋参数：双螺旋中的碱基是接近平面的结构，基本与螺旋轴垂直，两个相邻碱基对之间相距0.34nm，两个相邻碱基对之间绕螺旋轴旋转的夹角为36度，每旋转一圈包括10个核苷酸，因此，双螺旋链中任意一条链绕轴旋转一周的螺距为3.4nm。d.在双螺旋的分子表面形成了宽窄不等的大沟（宽为2.2nm）和小沟（宽为1.2nm）。A-DNA也是右手双螺旋，但碱基对与中心轴的倾角为19度，螺体宽而短，每圈螺旋包括11个碱基对，螺旋夹角为32.7度，每个碱基对的轴升为0.23nm，将这种双螺旋称为A型。
Z-DNA的结构特点：a.两条核苷酸链以反向平行排列并互补形成左手螺旋。B.每圈螺旋含12对碱基，螺距4.56nm；c.螺旋扭角为-51度（G-C）和（C-G），碱基对靠近螺旋边缘，螺旋轴位于小沟中；d、G-C碱基对向螺旋边缘伸展，使大沟外凸。
（三十一）什么是DNA的拓扑异构体。.
DNA不同的空间分子构象又称DNA拓扑异构体，其拓扑学特性可用连环数、盘旋数、超螺旋周数描述。
（三十二）简述组蛋白有哪5个方面的特点。1
1.进化上极为保守组蛋白在同一生物的不同组织中完全一样，在不同真核生物中也很相似。
2.有组织特异性目前仅发现鸟类，鱼类及两栖类红细胞染色体不含H1而带有H5，精细胞染色体的组蛋白是鱼精蛋白这两个例外。
3.肽链上的氨基酸分布不对称5种组蛋白中，除H1的N端富含疏水氨基酸，C端富含碱性氨基酸外，其余的组蛋白，N端大多是Arg和Lys，而C端富含疏水氨基酸。
4.组蛋白有被修饰的现象组蛋白易被甲基化、乙基化、磷酸化及ADP核糖基化等。
5.组蛋白H5富含Lys。
（三十三）染色体上的非组蛋白都包括哪些种类？简述之。
非组蛋白包括酶类，如RNA聚合酶、与细胞分裂有关的收缩蛋白、骨架蛋白、核孔复合物蛋白及肌动蛋白、肌球蛋白、微管蛋白、原肌蛋白等，是染色体的结构成分。一般有以下几类：1.电泳高迁移率蛋白2.DNA结合蛋白3.A24非组蛋白。
（三十四）简述细胞内RNA的结构特点以及与DNA的区别。
1碱基组成和含量不同RNA分子主要是A/G/C/U,而DNA中以T替代U。RNA分子中有许多稀有碱基或微量碱基、修饰碱基，而DNA分子中除个别外，不存在稀有碱基。
2.RNA分子中的核糖都是D-核糖，而DNA中都是D-2-脱氧核糖。
3.RNA分子中的碱基不严格遵守Chargaff规则。
4.绝大多数RNA分子都是多聚核苷酸单链，细胞内几乎不存在其互补链，但由于分子内的部分互补核苷酸之间能通过氢键配对形成双链区，故存在着局部的双螺旋，并与邻近非配对单链区形成发夹结构。
5.在碱性溶液中RNA分子较敏感，易被水解为2’,3’-环状单核苷酸，进而水解为2’-核苷酸和3’-核苷酸。DNA分子由于不能形成2’,3’-环状单核苷酸磷酸酯，故对碱性溶液比较稳定，不易被水解。
6 由于RNA分子内只有部分双链，它们的Tm大大低于DNA，由此产生的增色效应不如DNA 明显，加热也能使RNA变性，但变性后黏度及浮力密度小于DNA.
7.根据中心法则，RNA是遗传信息的传递者和表达者，在大多数情况下，遗传信息都是从DNA 到RNA,最终传递给蛋白质，表达为生物体内各种结构性的、功能性的蛋白质或催化性的酶，使生物体表现了千差万别的生命特性。
8.某些RNA病毒，如多种致癌RNA病毒，是以RNA作为遗传信息的载体，即RNA分子携带和储存遗传信息。当感染宿主细胞后通过病毒自身的逆转录酶，以病毒RNA为模板合成DNA 使遗传信息由RNA传给DNA.
9某些RNA的特殊结构具有催化功能，能催化它自身或其他RNA分子进行多种类型的反应，这些RNA称作核酶。
（三十五）什么是miRNA，有什么作用。
MicroRNA又称微小RNA,是指植物和动物细胞中自然产生的一类长度为18~25bp的小分子RNA。MiRNA在哺乳动物体内的功能是与特异性mRNA的翻译来沉默基因而不表达，或导致目标mRNA降解。
（三十六）写出DNA复性必须满足的两个条件。影响DNA复性速度的因素包括哪些。
DNA的复性有两个必要条件，1一定的离子强度，用以削弱两条链中磷酸基团之间的排斥力，通常使用0.15~0.50mmol/LNaCl:2.较高的温度，用以避免随机形成的无规则氢键，但不能太高，否则不能形成有效的氢键以维持稳定的双链。影响DNA复性速度的因素有DNA片段的长度，阳离子浓度，DNA序列的复杂度，同种DNA分子浓度，温度。
（三十七）DNA复性实验的标准条件是什么；复性程度怎样检测。
复性实验的标准条件是400核苷酸长度，Tm-25℃的温度，阳离子强度0.18mmol/L。可以通过下列三种方法检测DNA序列复性的程度：1.测定减色效应，在复性过程中可跟踪测定A260的光吸收值。2.测定抗S1核酸酶水解DNA的量，S1核酸酶只催化单链DNA的水解，不能作用于双链DNA,因此将样品限定水解后测定抗S1核酸酶水解的双链DNA量。3.羟基磷灰石层析，羟基磷灰石是一种磷酸钙盐，经过一定的处理后，具有吸附双链DNA的能力，洗脱时只允许单链通过，从而可以计算出剩余双链DNA的量。
（三十八）什么是顺反子？分子生物学中顺反子与基因关系如何？
一个顺反子就是一个基因，基因既是遗传的功能单位，同时也是交换单位和突变单位。
（三十九）基因编码的主要产物是什么;。
基因的主要编码产物是多肽链，另外还包括许多编码RNA的基因，如rRNA基因，tRNA基因以及其他小分子RNA。
（四十）什么是C值和C值矛盾？主要表现有哪些。
真核生物单倍体基因组所包含的全部DNA含量称为该物种的C值，以皮克表示，不同物种的C 值相差很大。C值矛盾是指真核生物中DNA含量的反常现象，表现为：1.C值不随生物的进化程度和复杂性而增加；2.关系密切的生物C值相差很大，3.真核生物DNA的量远大于编码蛋白等物质所需的量。
（四十一）什么是断裂基因，断裂基因的共同特点，外显子和内含子的概念及它们的关系如何，内含子的作用和功能，蛋白质结构域与基因的外显子/内含子的关系，外显子和内含子间连接点的特点。
基因内部插入不编码序列使一个完整的基因分隔成不连续的若干区段的基因称为不连续基因或断裂基因。
断裂基因的共同特点：1外显子在基因中的排列顺序与它在成熟mRNA产物中的排列顺序相同。
2.某种断裂基因在所有组织中都具有相同的内含子成分；3在内含子上发生的突变不影响蛋白质的结构，所以其突变往往对四五天没有影响。例外的是，某些发生在内含子上的突变可通过抑制外显子的相互剪接，干扰正确的信使RNA产生。
在断裂基因中有编码功能的区段称外显子，无编码功能区段称内含子。
外显子和内含子的关系：不连续基因序列一般都保持不变，但其内部的外显子和内含子数目、位置和长度是可变的。有些基因缺乏与蛋白质表达之间的线性关系，从同一基因序列可转录得到一种以上的mRNA。通过mRNA的选择性剪接可产生多个蛋白质的同源体，实际上使基因成了一个复杂的转录单位，转录和加工出与原基因编码序列有较大差异的大量蛋白质产物，以适应细胞、组织和发育特异性的需要。
内含子的作用和功能：促进重组；增加基因组的复杂性；含有ORF;产生核仁小RNA；含有部分剪接信号；基因组中外显子和内含子是相对的；内含子对基因表达有影响。
在蛋白质高级结构中一个外显子对应于一条多肽链折叠而成的结构域。外显子边界序列能精确地与结构域之间的铰链区，外显子序列间的重组也易造成蛋白质结构域的重新组合，即基因通过外显子的重新组织和排列能产生具有新功能的蛋白质。
外显子与内含子间的连接点有两个特点：1.有很短的保守序列，为剪接反应所必需；2.内含子两端无序列同源性或互补性。内含子和外显子5’端和3’端连接处有强规律性。由RNApolⅡ转录的基因中内含子左侧与外显子右侧连接点均有GT共同序列；内含子右侧与外显子左侧连接点左侧连接点均有AG共同序列。即：5’端（左）外显子-AGGTAA T-内含子-Py10CAG-外显子3’端（右），称GT-AG规律。
（四十一）简要叙述真核生物DNA序列的几种类型。
根据C0t曲线，可以把真核生物基因组的DNA分为四种类型：1.单拷贝的DNA序列，单拷贝序列一般都是蛋白质具有。2.低度重复序列，有2~10个拷贝数，低度重复序列往往也是一些蛋白质的基因，但由于一些序列或可读框的差异，成为编码同种类蛋白质的不同基因，即在基因家族中的不同成员。中度重复DNA序列，有几十至几千个拷贝数，主要是Alu家族，Kpn家族等序列。高度重复序列，重复次数上万至数百万次，主要指卫星DNA。
（四十二）细胞内染色体外的遗传因子包括哪些？何谓严紧控制和松弛控制的的质粒？
染色体外的遗传因子，包括细菌的质粒、真核生物的细胞器以及细胞内共生或寄生的生物DNA,它们的复制或是受染色体复制的控制，与染色体复制同步；或不受其控制，在细胞增殖周期中随时进行复制。严紧控制的质粒，每个细胞只有一个或少数几个拷贝，松弛控制的质粒，每个细胞通常含有20个以上的拷贝。
（四十三）简述滚环复制过程？
1.首先，核酸内切酶在双链复制型DNA分子的正链上产生一个缺口，使5’和3’-OH端游离出来，（+）链的5’端与双链解离。
2以负链DNA为模板。，正链3’-OH端为引物，从正链3’-OH端渗入Dntp,3端不断延伸，取代原有的正链，被取代的正链5’端不断从负链上被牵引置换出来。
3持续进行复制，好像负链按逆时针方向滚动，正链5’形成越来越长的尾巴，接近于原长的2倍。
4.当置换出的正链DNA达到单位长度时被内切核酸酶切离后，环化为环形DNA。
5继续从1-4的循环复制，该过程重复发生，以此产生许多环形正链的拷贝。
（四十五）什么是DnaA蛋白？DnaA蛋白有哪三个作用。
DnaA蛋白是起始因子，它参与DNA复制的起始有三个作用：只与处于负超螺旋的DNA分子结合，在A TP参与下，结合于OriC中的4个九聚体形成起始复合物；2促使OriC中的三个富含A T的13聚体重复序列的稳定性重复序列区解链，也需A TP参与，HU对此过程有促进作用；引导DnaB-DnaC复合物进入局部解链区，形成引发前体复合物。
（四十六）DNA复制一般采取哪些方式？
根据复制方向分为相向复制，单向复制，双向对称复制。根据复制方式分为θ形复制，滚环式复制，D-环复制。
（四十七）列出原核生物DNA复制的酶和蛋白因子体系。
DNA复制的酶体系包括DNA聚合酶（DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ）DNA连接酶，DNA 拓扑异构酶Ⅰ，解旋酶，RNA聚合酶，DNA甲基化酶。蛋白因子有DnaA/B/C/G，HU,Tus。（四十八）原核、真核生物复制的异同点？
原核生物与真核生物复制的过程及其异同点。
原核生物与真核生物复制的过程大体上均分为复制的起始、DNA链的延伸和复制的终止三个过程。
原核生物DNA的复制过程（以大肠杆菌为例）：
复制起始：OriC 起始位点由四个9个核苷酸（9-mer）的重复序列和三个13个核苷酸（13-mer）的重复序列组成。DnaA蛋白结合到9-mer结构上，使DNA形成一个环。结果，双链DNA在富含A-T碱基的13-mer区域分开成为单链。随后，DnaB-DnaC复合体结合到复制起始点上，形成预引发复合物。然后，DnaB利用其解旋酶的活性使解链部分延长，并激发DnaG引发酶，进而形成一段RNA引物，起始DNA的复制（DNA聚合酶只能从3’羟基端起始复制）。
DNA链的延伸：DNA链一般形成两个复制叉进行双向复制。DNA链的复制是半不连续复制，以3’-5’方向DNA链为模板合成的子链为前导链，另一条为后随链，后随链的合成以合成冈崎片段的方式进行。延伸过程主要依靠DNA聚合酶III（核心酶由α、θ、ε构成），DNA聚合酶III靠其β夹钳牢固地结合在DNA链上并延DNA链移动。冈崎片段一端的引物由DNA聚合酶I以切口平移的方式去除，然后由DNA连接酶连接为一体。复制叉前进时由解旋酶依靠水解A TP的能量（一个A TP一个碱基）打开双链，单链与SSB结合并保持稳定。DNA拓扑异构酶去除正超螺旋。
复制的终止：复制叉前行，当遇到22个碱基组成的重复性终止子序列（Ter）时，Ter-Tus复合物使DnaB停止解链，复制叉前移停止，等相反方向复制叉到达后，由修复方式填补两个复制叉间的空缺。随后，在DNA拓扑异构酶IV的作用下复制叉解体，释放子链DNA。
真核生物DNA的复制：
真核生物DNA的复制过程与原核生物DNA的复制过程大体相同。
复制的起始：真核生物DNA复制从成百上千个起始位点上开始，形成多个复制叉。真核生物DNA复制只发生在S期。真核生物复制起始位点难以确定，酵母中称为自主复制序列（ARS）。起点识别复合体（ORC）与ARS结合后又与前复制复合体（pre-RC）结合，进而吸引Cdc6和Cdt1两个蛋白以及解旋蛋白Mcm2-7形成完整的复合体。pre-RC只在G1期合成，在S期时Cdc45结合到复合体上，激活Mcm2-7，在DNA聚合酶作用下使pre-RC启动复制。DNA聚合酶α合成由10bpRNA和20-30bpDNA构成的引物（iDNA）。
DNA链的延伸：前导链由DNA聚合酶δ合成，DNA聚合酶δ是有高度前进能力的酶，其前进能力来自于RF-C蛋白和PCNA蛋白的相互作用，两者分别相当于大肠杆菌中γ夹钳装载机和β前进亚基的作用。DNA聚合酶δ的前进能力是由PCNA维持的。后随链的冈崎片段由DNA 聚合酶δ或DNA聚合酶ε合成。冈崎片段之间的引物由核算外切酶MF1去除，之间的缺口由DNA连接酶I连接。
复制的终止：随着复制，各复制叉相互接到一起。5’端的空缺由端粒酶补齐。端粒酶中含有一段RNA序列，可以作为模板合成互补的DNA序列以补齐空缺。
原核生物与真核生物DNA复制共同的特点：
2012年公务员个人工作总结范文2011年在领导和全体同志的关怀、帮助、支持下，紧紧围绕中心工作，充分发挥岗位职能，不断改进工作方法，提高工作效率，以“服从领导、团结同志、认真学习、扎实工作”为准则，始终坚持高标准、严要求，较好地完成了各项工作任务。我始终把学习放在重要位置，努力在提高自身综合素质上下功夫。 在政治学习方面，通过学习邓小平理论及“三个代表”、胡总书记的“科学发展观”的重要思想，尤其是学习十七大精神和十七届三中全会精神，进一步增强了党性，提高了自己政治洞察力，牢固树立了全心全意为人民服务的宗旨和正确的世界观、人生观、价值观。 一年来，在局党委政府的正确领导下，在所的支持帮助下，我发挥自身特长，认真做好农村公路工作，积极为民办事，努力在政府和农民间架起贴心的桥梁，取得了一些成绩，经受了基层锻炼，收获良多，感触良多。 1年来，我主要的工作职责是配合单位共同来完成全年各项建设工作目标，做好上情下达，将上级及领导指示及会议精神及时传达贯彻，对出现的问题及时整理和上报，完成局党委、本单位需写的文字材料，完成上级部门交办的各项工作和任务。现将一年来的工作情况总结如下： 一、抓学习、强自身。针对自已的工作特点，主要学习党的各种全会精神，中央1号文件，政策法规的学习，参加专家辅导专题学习。自觉深入学习实践科学发展观;通过认真学习，深入实践，我对科学发展观有了更加明晰更加深刻的认识。坚持以人为本，全面、协调、可持续的发展观，是我们党以邓小平理论和“三个代表”重要思想为指导，从新世纪新阶段党和国家事业发展全局出发提出的重大战略思想。这个重要思想不仅对我们国家的经济建设有宏观指导意义，对社会全方位发展都具有重要意义。通过学习，不仅提高了认识，进一步丰富了理论知识，理清了工作思路，增强了自身素质，也为做好今后工作，奠定了良好的基础。 二、强化职能，做好本职工作。我负责本单位的文书制作、农村公路路政管理和农村公路养护等工作;工作中，我注重把握根本，努力提高工作服务水平。在人手少，工作量大的情况下，我都积极配合做好各项工作，与同事心往一处想，劲往一处使，不会计较干得多，干得少，只希望把工作圆满
分子生物学试题及答案
分子生物学试题及答案一、名词解释 1．cDNA与cccDNA：cDNA是由mRNA通过反转录酶合成的双链DNA；cccDNA是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形DNA。 2．标准折叠单位：蛋白质二级结构单元α－螺旋与β－折叠通过各种连接多肽可以组成特殊几何排列的结构块，此种确定的折叠类型通常称为超二级结构。几乎所有的三级结构都可以用这些折叠类型，乃至他们的组合型来予以描述，因此又将其称为标准折叠单位。3．CAP：环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMP activated protein ） 4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互补序列，常是限制性酶切位点。 5．micRNA：互补干扰RNA或称反义RNA，与mRNA序列互补，可抑制mRNA的翻译。 6．核酶：具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。 7．模体：蛋白质分子空间结构中存在着某些立体形状和拓扑结构颇为类似的局部区域 8．信号肽：在蛋白质合成过程中N端有15~36个氨基酸残基的肽段，引导蛋白质的跨膜。
除了5’ 3’外切酶活性 19．锚定PCR：用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。 20．融合蛋白：真核蛋白的基因与外源基因连接，同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。 二、填空 1． DNA的物理图谱是DNA分子的（限制性内切酶酶解）片段的排列顺序。 2． RNA酶的剪切分为（自体催化）、（异体催化）两种类型。3．原核生物中有三种起始因子分别是（IF-1）、（ IF-2 ）和（IF-3 ）。4．蛋白质的跨膜需要（信号肽）的引导，蛋白伴侣的作用是（辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质）。 5．启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。 6．分子生物学的研究内容主要包含（结构分子生物学）、（基因表达与调控）、（ DNA重组技术）三部分。 7．证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是（肺炎球菌感染小鼠）、（ T2噬菌体感染大肠杆菌）这两个实验中主要的论点证据是：（生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能）。 8．hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点：（ hnRNA在转变为mRNA 的过程中经过剪接，）、
福建师范大学分子生物学期末考试试题（第一套） 一、名词解释（15分，每小题3分） 1、中心法则：遗传信息沿着从DNA到RNA，RNA到蛋白质的方向进行传递。反转录的发现，是对中心法则的完善。 2、复性：变性的DNA在一定的条件下恢复成天然结构的现象。 3、卫星DNA：在高度重复的序列中，常有一些AT含量很高的简单高度重复序列，例如螃蟹DNA含有AT的简单重复序列，有时在30个左右的碱基对中，才插有一个GC对，因而AT含量高达97%。由于AT浮力密度较小，因而在将DNA切断成数百个碱基对的片段进行超速离心时，常会在主要的DNA带的上面有一个次要的带相伴随，这条次要的带称为卫星DNA。 4、聚合酶链反应：利用与DNA模板序列的两端互补的一对寡聚核苷酸引物来扩增一段DNA 序列。由一种热稳定的DNA聚合酶经过三步反应即变性、引物退火和聚合的循环从两个引物来相对延伸。 5、操纵子：一个或几个结构基因与一个调节基因和一个操纵基因，加上启动子构成一个操纵单元，这个单元称为操纵子。在操纵子中，结构基因产生mRNA并作为模板合成蛋白质；而调节基因则产生一种阻遏蛋白与操纵基因相互作用；阻遏蛋白与操纵基因结合从而阻碍了结构基因转录成为mRNA；在诱导过程中，诱导物通过与阻遏蛋白相结合而阻止阻遏蛋白与操纵基因结合。 二、填空（10分，每空1分） 1、Southern blotting用于鉴别----DNA -------。 2、原始转录物的一些序列被-----更改---------，叫做RNA编辑。 3、------颠换-----是由嘧啶变为嘌呤或由嘌呤转变为嘧啶。 4、大肠杆菌RNA聚合酶的-----核心酶-----为α2ββ’。 5、同一氨基酸具有多个密码子，编码同一氨基酸的密码子称为------- -同义密码子---------。 6、数个生化反应可由-------核酶---------催化，这种具有催化功能的RNA可以剪切自身或其它的RNA分子，或者完成连接或自身剪接反应。 7、在质粒DNA的制备中，用酚或酚-氯仿混合液抽提以除去碱裂解液中残余----蛋白质------。 8、--------开放的阅读框-------是指新测DNA序列中，由计算机辨认出的可能编码区域，它是从起始密码子起到终止密码子止的一段连续的密码子区域。 9、噬菌体φX174基因组只有-----5386----个核苷酸，却编码11种蛋白。 10、转录是以DNA一条链为模板的RNA的酶促合成。我们把模板链称为-----反义链-----。 三、选择题（共25分，每题1分） 1、在DNA组成中符合当量定律，即A=T,G=C,A+G=T+C;这就是----------定则。 A Chargaff B Watson-Crick C van de Waal D S-D 2、DNA的复制方向只能以----------方向复制。 A 2’—3’ B 5’—2’ C 3’—5’ D 5’—3’ 3、在原核生物mRNA起始密码子AUG上游的8-13个核苷酸有一段可受核糖体结合、保护和富含嘌呤的3-9个核苷酸的共同序列，一般为5’AGGAGGU3’,称为---------序列。 A S-D B Hogness D sextama D pribnow 4、细菌蛋白质合成的起始因子有------------------。
结合着下载的资料复习吧~~~~ 绪论 分子生物学的发展简史 Schleiden和Schwann提出“细胞学说” 孟德尔提出了“遗传因子”的概念、分离定律、独立分配规律 Miescher首次从莱茵河鲑鱼精子中分离出DNA Morgan基因存在于染色体上、连锁遗传规律 Avery证明基因就是DNA分子，提出DNA是遗传信息的载体 McClintock首次提出转座子或跳跃基因概念 Watson和Crick提出DNA双螺旋模型 Crick提出了“中心法则” Meselson与Stah用N重同位素证明了DNA复制是一种半保留复制 Jacob和Monod提出了著名的乳糖操纵子模型 Arber首次发现DNA限制性内切酶的存在 Temin和Baltimore发现在病毒中存在以RNA为模板，逆转录成DNA的逆转录酶 哪几种经典实验证明了DNA是遗传物质? (Avery等进行的肺炎双球菌转化实验、Hershey 利用放射性同位素35S和32P分别标记T2噬菌体的蛋白质外壳和DNA) 第二章染色体与DNA 第一节染色体 一、真核细胞染色体的组成 DNA：组蛋白：非组蛋白：RNA = 1：1：(1-1.5)：0.05 （一）蛋白质（组蛋白、非组蛋白） （1）组蛋白：H1、H2A、H2B、H3、H4 功能：①核小体组蛋白（H2A、H2B、H3、H4）作用是将DNA分子盘绕成核小体
②不参加核小体组建的组蛋白H1，在构成核小体时起连接作用 （2）非组蛋白：包括以DNA为底物的酶、作用于组蛋白的酶、RNA聚合酶等。常见的有（HMG蛋白、DNA结合蛋白） 二、染色质 染色体：分裂期由染色质聚缩形成。 染色质：线性复合结构，间期遗传物质存在形式。 常染色质（着色浅） 具间期染色质形态特征和着色特征染色质 异染色质（着色深） 结构性异染色质兼性异染色质 （在整个细胞周期内都处于凝集状态）（特定时期处于凝集状态）三、核小体 由H2A、H2B、H3、H4各2 分子组成的八聚体和绕在八聚体外的DNA、一分 子H1组成。八聚体在中央，DNA分子盘绕在外，由此形成核心颗粒。,H1结合在核心颗粒外侧DNA双链的进出口端，如搭扣将绕在八聚体外DNA链固定，核心颗粒之间的连接部分为连接DNA。 核小体的定位对转录有促进作用
2012年县志办工作总结及2013年工作打算 回顾XX年度工作，在中共xx县委、县人民政府的正确领导下，在州人民政府研究室的具体指导下，通过全体干部职工共同努力，完成了全年各项工作任务，现将主要工作总结如下： 一、XX年度主要工作 (一)加强学习，全面提高干部职工政治和业务素质 XX年度，我室注重干部职工的学习，每周星期五为学习日，主要组织学习中央、省、州和县级文件、材料，学习时事政治、阅读党风廉政刊物;学习《地方志工作条例》;不断完善和健全各种规章制度，并认真贯彻落实了《四项制度》、《党风廉政建设责任制量化考核责任书》、《安全生产责任状》等。学习贯彻党的xx大精神，深入学习实践科学发展观活动，培养了干部职工自觉学习的良好习惯，牢固树立了终身学习的思想。在抓政治学习的同时，进一步加强干部职工的业务素质教育。通过党的方针、政策、法律、法规的学习，促进干部职工政治素质和业务素质进一步提高，达到了教育党员干部职工明确方向、增强能力、服务群众的目的。 (二)全面做好二轮修志工作 按照《xx县第二轮地方志编纂工作规划》要求，XX年二轮修志主要工作任务是完成总纂、县级评审，报送州级评审。县委政府对此高度重视，保障了修志队伍和修志资金。XX年5月，全面完成总纂工作，10月，完成县志总稿改稿工作，形成县级评审稿，11月，完成县级评审工作，年内上报州级评审。 (三)全面开展深入学习实践科学发展观活动 按照县委的要求和统一安排部署，我室从XX年4月2日起全面深入开展学习实践科学发展观活动。在县委第五指导检查组的具体指导下，通过全体干部职工历时3个多月的共同努力，XX年7月初完成了学习实践科学发展观活动前2个阶段的各项工作任务。
《分子生物学》期末试卷（C） 一、术语解释（20分，每题2分） 1、操纵子 2、增强子 3、启动子 4、内含子 5、外显子 6、顺式作用元件 7、反式作用因子 8、转录因子 9、单顺反子mRNA 10、多顺反子mRNA 二、选择题（20分） 1.指导合成蛋白质的结构基因大多数为: ( ) A.单考贝顺序 B.回文顺序 C.高度重复顺序 D.中度重复顺序 2. 下列有关Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)的叙述中错误的是: ( ) A.在mRNA分子的起始密码子上游7-12个核苷酸处的顺序 B.在mRNA分子通过 SD序列与核糖体大亚基的16s rRNA结合 C.SD序列与16s rRNA 3'端的一段富含嘧啶的序列互补 D. SD序列是mRNA分子结合核糖体的序列 3.原核生物中起始氨基酰-tRNA是: ( ) A.fMet-tRNA B.Met-tRNA C.Arg-tRNA D.leu-tRNA 4.下列有关TATA盒 (Hognessbox)的叙述,哪个是错误的: ( ) A. 保守序列为TATAAT B.它能和RNA聚合酶紧密结合 C. 它参与形成开放转录起始复合体 D.它和提供了RNA聚合酶全酶识别的信号 5. 一个mRNA的部分顺序和密码的编号是 140 141 142 143 144 145 146 CAG CUC UAU CGG UAG AAC UGA 以此mRNA为模板,经翻译生成多肽链含有的氨基酸为: ( ) A.141 B.142 C.143 D.144 6. DNA双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确：( ) A.腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数 B.同种生物体不同组织中的DNA碱基组成极为相似 C.DNA双螺旋中碱基对位于外侧 D. 维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆集力。 7． DNA聚合酶III的描述中哪条不对：( ) A.需要四种三磷酸脱氧核苷酸作底物 B.具有5′→3′外切酶活性 C. 具有5′→3′聚合活性 D. 是DNA复制中链延长反应中的主导DNA聚合酶
Section A 细胞与大分子 简述复杂大分子的生物学功能及与人类健康的关系。 Section C 核酸的性质 1.DNA的超螺旋结构的特点有哪些？ A 发生在闭环双链DNA分子上 B DNA双链轴线高卷曲，与简单的环状相比，连接数发生变化 C 当DNA扭曲方向与双螺旋方向相同时，DNA变得紧绷，为正超螺旋，反之变得松弛为负超螺旋。自然界几乎所有DNA分子超螺旋都为负的，因为能量最低。 2.简述核酸的性质。 A 核酸的稳定性：由于核酸中碱基对的疏水效应以及电荷偶极作用而趋于稳定 B 酸效应：在强酸和高温条件下，核酸完全水解，而在稀酸条件下，DNA的核苷键被选择性地断裂生成脱嘌呤核酸 C 碱效应：当PH超出生理范围时（7-8），碱基的互变异构态发生变化 D 化学变性：一些化学物质如尿素，甲酰胺能破坏DNA和RNA二级结构中的 而使核酸变性。 E 粘性：DNA的粘性是由其形态决定的，DNA分子细长，称为高轴比，可被机械力和超声波剪切而粘性下降。 F 浮力密度：1.7g/cm^3,因此可利用高浓度分子质量的盐溶液进行纯化和分析 G 紫外线吸收：核酸中的芳香族碱基在269nm 处有最大光吸收 H 减色性，热变性，复性。 思考题：提取细菌的质粒依据是核酸的哪些性质？ 质粒是抗性基因，，在基因组或者质粒DNA中用碱提取法。 Sectio C 课前提问 1.在1.5mL的离心管中有500μL，取出10 μL稀释至1000 μL后进行检测，测得A260=0.15。 问（1）：试管中的DNA浓度是多少？ 问（2）：如果测得A280=0.078, .A260/A280=？说明什么问题？ (1)稀释前的浓度：0.15/20=0.0075 稀释后的浓度：0.0075/100=0.75ug/ml （2）0.15/0.078=1.92〉1.8，说明DNA中混有RNA样品。 2.解释以下两幅图
2013年工作总结 2013年即将过去，这一年来主要监理的工程是锦东新区1、2拆迁安置楼装饰阶段和山水钢板仓库建设。诚然，监理工作主要是控制工程的质量、进度与安全方面的，只有在保障工程质量与安全的前提上才能进一步讲工程的进度，而且在监理过程中不断学习充实提高自身素质，在这四方面做好的情况下注意协调工作的运用，就自然而然的控制了工程各方面的问题。我就这一年的工作做以下总结： 一、严格监理，优质髙效抓质量 质量是工程的生命和灵魂，是监理工作的生命线，也是监理工作永恒的主题，我始终把质量控制作为一切监理工作的重中之重，坚持“百年大计，质量第一”的原则，“严”字当头，狠抓落实，狠抓过程控制，事前控制，加强现场监理，杜绝工程质量事故的发生，使工程圆满达到了预期目标。 二、科学组织，计划切实，确保工期 制定科学管理、切实可行的施工计划，并能保证落实，是工程能否顺利完成的前提。为实现这一目标，我要求施工单位要根据工程内容、主次工程、关键内容，结合当地气候特点，制定详尽的总体计划，并监督施工单位落实到位。为落实的和施工单位查找原因，优化下阶段进度计划，尽可能把工期赶上。 三、安全生产常抓不懈 抓好工程质量，加快工程进度的同时，要始终把安全生产当作工程建设的重要组成部分，把安全施工要放在首位，切实做到“安全第一、质量第一”要落实各项安全施工措施，查找不安全因索，把安全工作落实到具体人员。切实做好安全生产工作,杜绝安全事故发生。 四、积极学习新知识 我们知道，工程建设监理是以协助业主圆满实现投资目的为已任，力求在预定的投资、进度、质量目标内建成工程项目。当今的工程项目规模越来越庞大，功能、标准要求越来越高，新技术、新工艺、新材料不断进入建筑领域，参建的单位和专业越来越多，市场竟争日益激烈，风险日渐增加。不言而喻，工程建设监理工作也会越来越复杂、难度越来越大。面对这样的形势，作为监理只有不断地学习新的科学知识，提高自身技术水平和管理能力，采用新的更加科学的思想、理论、方法、手段才能驾驭工程项目的建设，协助业主又好又快地实现其投资目标，同时也使自己的企业在市场竟争中处于优势地位。
选择题 1．证明DNA 是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是（C ）。 A．从被感染的生物体内重新分离得到DNA 作为疾病的致病剂 B．DNA 突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA 是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子 E．真核心生物、原核生物、病毒的DNA 能相互混合并彼此替代 2.1953 年Watson 和Crick 提出（A ）。 A．多核苷酸DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA 的复制是半保留的，常常形成亲本-子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是DNA 而非RNA E．分离到回复突变体证明这一突变并非是一个缺失突变 3．DNA 双螺旋的解链或变性打断了互补碱基间的氢键，并因此改变了它们的光吸收特性。以下哪些是对DNA 的解链温度的正确描述？（C,D ） A．哺乳动物DNA 约为45℃，因此发烧时体温高于42℃是十分危险的 B．依赖于A-T 含量，因为A-T 含量越高则双链分开所需要的能量越少 C．是双链DNA 中两条单链分开过程中温度变化范围的中间值 D．可通过碱基在260nm 的特征吸收峰的改变来确定 E．就是单链发生断裂（磷酸二酯键断裂）时的温度 4．Watson和Crick提出的经典DNA双螺旋结构属于(B) A．A型B．B型C．Z型 5．多种密码子编码一个氨基酸的现象，称为密码子的(B) A．连续性B．简并性C．通用性D．摆动性 6．真核基因经常被断开（B,D,E ）。 A．反映了真核生物的mRNA 是多顺反子 B．因为编码序列外显子被非编码序列内含子所分隔 C．因为真核生物的DNA 为线性而且被分开在各个染色体上，所以同一个基因的不同部分可能分布于不同的染色体上 D. 表明初始转录产物必须被加工后才可被翻译 E．表明真核基因可能有多种表达产物，因为它有可能在mRNA 加工的过程中采用不同的外显子重组方式 7．选出下列所有正确的叙述。（A,C ） A．外显子以相同顺序存在于基因组和cDNA 中 B．内含子经常可以被翻译 C．人体内所有的细胞具有相同的一套基因 D．人体内所有的细胞表达相同的一套基因 E．人体内所有的细胞以相同的方式剪接每个基因的mRNA 8．下列哪些基因以典型的串联形式存在于真核生物 基因组？（B,C ） A．珠蛋白基因B．组蛋白基因 C．rRNA 基因D．肌动蛋白基因 9．细胞器基因组（ A ）。
武汉大学 2001 年攻读硕士学位研究生入学考试试题 一、解释概念(20 分,每个4分) 1. Satellite DNA-卫星DNA,又称串联重复序列，由2~6个核苷酸组成的重复单位组成的串联重复。 2. Replisome-复制体,是指由多种复制相关蛋白组成的复合物。 3.逆转座子，指另一类能够通过逆转酶和整合酶共同作用介导转座的转座子 4. 反式激活因子，一类能结合到顺式作用元件上形式激活作用的蛋白质 5. 衰减子，原核生物操纵子上一段能够显著减弱或终止转录作用的核苷酸序列 衰减作用，指原核生物中根据底物浓度变化来调控基因转录进程的中断与否的一种调控机制。 三、问答题(50 分) 1.说出双链DNA 复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15 分) 2.简述增强子的特点和性质及作用机制。(10 分) 3.简述真核RNA 聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15 分) 4.DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌(E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII 等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DNA段克隆到pUC 质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R
菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10 分) 武汉大学 2002 年攻读硕士学位研究生入学考试试题 三、问答: 1、简述(或绘图说明)真核细胞RNA 聚合酶II 转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15 分) 2、简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分) 3、在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分) 4、你正在进行Southern blot 分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH 溶液中使DNA 变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA 从胶上转到硝酸纤维
现代分子生物学总结(朱玉贤、最新版)
一、绪论 两个经典实验 1、肺炎球菌在老鼠体内的毒性实验：先将光滑型致病菌（S型）烧煮杀活性以后、以及活的粗糙型细菌（R型）分别侵染小鼠发现这些细菌自然丧失了治病能力；当他们将经烧煮杀死的S型细菌和活的R型细菌混合再感染小鼠时，实验小鼠每次都死亡。解剖死鼠，发现有大量活的S型细菌。实验表明，死细菌DNA 进行了可遗传的转化，从而导致小鼠死亡。 2、T2噬菌体感染大肠杆菌：当细菌培养基中分别带有35S或32P标记的氨基酸或核苷酸，子代噬菌体就相应含有35S标记的蛋白质或32P标记的核酸。分别用这些噬菌体感染没有放射性标记的细菌，经过1~2个噬菌体DNA 复制周期后进行检测，子代噬菌体中几乎不含带35S标记的蛋白质，但含30%以上的32P 标记。说明在噬菌体传代过程中发挥作用的可能是DNA而不是蛋白质。 基因的概念：基因是产生一条多肽链或功能RNA分子所必需的全部核苷酸序列。
二、染色体与DNA 嘌呤嘧啶 腺嘌呤鸟嘌呤胞嘧啶尿嘧啶胸腺嘧啶 染色体 性质：1、分子结构相对稳定；2、能够自我复制，使亲、子代之间保持连续性；3、能指导蛋白质的合成，从而控制生命过程；4、能产生可遗传的变异。 组蛋白一般特性：1、进化上极端保守，特别是H3、H4；2、无组织特异性；3、肽链上氨基酸分布的不对称性；4、存在较普遍的修饰作用；5、富含赖氨酸的组蛋白H5 非组蛋白：HMG蛋白；DNA结合蛋白；A24非组蛋白
真核生物基因组DNA 真核细胞基因组最大特点是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能蛋白质所隔开。人们把一种生物单倍体基因组DNA的总量称为C值，在真核生物中C 值一般是随着生物进化而增加的，高等生物的C 值一般大于低等动物，但某些两栖类的C值甚至比哺乳动物还大，这就是著名的C值反常现象。真核细胞DNA序列可被分为3类：不重复序列、中度重复序列、高度重复序列。 真核生物基因组的特点：1、真核生物基因组庞大，一般都远大于原核生物的基因组；2、真核基因组存在大量的的重复序列；3、真核基因组的大部分为非编码序列，占整个基因组序列的90%以上，这是真核生物与细菌和病毒之间的最主要的区别；4、真核基因组的转录产物为单顺反之；5、真核基因组是断裂基因，有内含子结构；6、真核基因组存在大量的顺式元件，包括启动子、增强子、沉默子等；7、真核基因组中存在大量的DNA多态性；8、真核基因组具有端粒结构。
分子生物学期末考试试题 一、名词解释 1、反式作用因子：能直接或间接地识别或结合各类顺式作用元件核心序列，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 2、基因家族： 3、C值矛盾：C值是指真核生物单倍体的DNA含量，一般的，真核生物的进化程度越高，C值越大，但在一些两栖类生物中，其C值却比哺乳动物大的现象。原因是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能DNA所隔开。 4、核型：指一个物种所特有的染色体数目和每一条染色体所特有的形态特征。 5、RNA editing：转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。 二、判断： 1、真核生物所有的mRNA都有polyA结构。（X ） 组蛋白的mRNA没有 2、由于密码子存在摇摆性，使得一种tRNA分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的密码子。（√ ） 3、大肠杆菌的连接酶以ATP作为能量来源。（X ） 以NAD作为能量来源 4、tRNA只在蛋白质合成中起作用。（X ） tRNA还有其它的生物学功能，如可作为逆转录酶的引物
5、DNA聚合酶和RNA聚合酶的催化反应都需要引物。（X ） RNA聚合酶的催化反应不需要引物 6、真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲酰甲硫氨酸（X ） 真核生物蛋白质合成的起始氨基酸是甲硫氨酸 7、质粒不能在宿主细胞中独立自主地进行复制（X ） 质粒具有复制起始原点，能在宿主细胞中独立自主地进行复制 8、RNA因为不含有DNA基因组，所以根据分子遗传的中心法则，它必须先进行反转录，才能复制和增殖。（X ） 不一定，有的RNA病毒可直接进行RNA复制和翻译 9、细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和ρ因子组成。（X ） 细菌的RNA聚合酶全酶由核心酶和σ因子组成 10、核小体在复制时组蛋白八聚体以全保留的方式传递给子代。（√ ） 11、色氨酸操纵子中含有衰减子序列（√ ） 12、SOS框是所有din基因（SOS基因）的操纵子都含有的20bp的lexA结合位点。（√ ） 三、填空： 1、原核生物的启动子的四个保守区域为转录起始点、-10区、-35区、-10区与-35区的距离。
南昌大学医学院分子生物学试题 姓名______________ 成绩__________ 一、单项选择题（每小题1分，共20分） 1．用于DNA鉴定的技术是（ C ） A. Northern blot B. Eastern blot C. Southern blot D. Western blot 2．影响酶促反应速度的因素不包括（ D ） A. 底物浓度 B. 酶的浓度 C. 反应温度 D. 酶原的浓度 3．下列氨基酸中含有羟基的是（ A ） A. 丝氨酸 B. 亮氨酸 C.甘氨酸 D. 色氨酸 4．治疗艾滋病的AZT是 A、DNA类似物 B、RNA类似物 C、核苷类似物 D、蛋白酶抑制剂5．四环素抗菌作用的原理是（ C ） A.抑制氨基酰-tRNA进位 B.抑制转肽酶 C.抑制转位酶 D.与核糖体小亚基结合 6．原核生物中参与转录起始的酶是（D） A. 解链酶 B.引物酶 C. RNA聚合酶全酶 D. RNA聚合酶核心酶7．核酸中核苷酸之间的连接方式是（ B ） A. 2’3’-磷酸二酯键 B. 3’5’-磷酸二酯键 C. 2’5’-磷酸二酯键 D. 肽键 8．目前认为基因表达调控的主要环节是（） A. 翻译起始 B. 转录起始 C. 转录后加工 D.基因活化 9．与DNA损伤修复过程缺陷有关的疾病是（） A.黄嘌呤尿症 B. 痛风 C. 卟啉病 D. 着色性干皮病 10．糖复合物不包括下列哪种物质（） A. 糖蛋白 B. 蛋白聚糖 C. 脂聚糖 D. 糖原 11．有关一个DNA分子的Tm值，下列哪种说法正确（） A. G+C比例越高，Tm值也越高 B. A+T比例越高, Tm值也越高 C. Tm值越高，DNA越易发生变性 D. Tm值越高，DNA越不稳定12．有机磷农药中毒时，下列哪一种酶受到抑制？（） A.已糖激酶 B. 碳酸酐酶 C. 胆碱酯酶 D.乳酸脱氢酶13．绝大部分膜受体的化学物质为（） A.糖脂 B. 糖蛋白 C. 脂蛋白 D. 类固醇 14． G蛋白是指（） A. 蛋白激酶C B.蛋白激酶G C.鸟苷酸环化酶 D.鸟苷酸结合蛋白15．依赖钙离子的蛋白激酶是( ) A. PKA B. PKC C. PKG D. TPK
分子生物学 第一章绪论 分子生物学研究内容有哪些方面？ 1、结构分子生物学； 2、基因表达的调节与控制； 3、DNA重组技术及其应用； 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 2、DNA复性：变性DNA在适当条件下，分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、Tm(熔链温度)：DNA加热变性时，紫外吸收达到最大值的一半时的温度，即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度） 4、退火：热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，称为退火 5、假基因：基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致，称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座：可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子：染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分 9、DNA二级结构的特点：1）DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成；2）DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在外侧；3）DNA分子表面有大沟和小沟；4）两条链间存在碱基互补，通过氢键连系，且A=T、G ≡ C（碱基互补原则）；5）螺旋的螺距为3.4nm，直径为2nm，相邻两个碱基对之间的垂直距离为0.34nm，每圈螺旋包含10个碱基对；6）碱基平面与螺旋纵轴接近垂直，糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构：编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列，包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。 特点：1）真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp；2）单顺反子（单顺反子：一个基因单独转录，一个基因一条mRNA，翻译成一条多肽链；）3）基因不连续性断裂基因（interrupted gene）、内含子(intron)、外显子(exon)；4）非编码区较多，多于编码序列(9:1) 5）含有大量重复序列 11、Histon(组蛋白)特点：极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成：由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制：转座时发生的插入作用有一个普遍的特征，那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复制，使插入的转座子位于两个重复的靶序列之间。 复制型转座：整个转座子被复制，所移动和转位的仅为原转座子的拷贝。 非复制型转座：原始转座子作为一个可移动的实体直接被移位。 第三章DNA Replication and repair 1、半保留复制：DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱
2012年年终工作总结报告 ——2013年我（们）的目标 今年，在公司的正确领导下，项目部全体员工统一思想认识，明确责任目标，强化现场管理，各项工作取得了质的飞跃，工作质量得到了进一步提高，较好地完成了本年度工作目标和领导布置的各项任务。现从以下几方面对市政工程部今年工作总结如下； 一、个人职责 1．在项目负责人和施工负责人领导下，负责所承担的作业区，段内的施工织安排和施工管理工作。 2．负责管沟内的测量工作，协助测量员的放线工作。3．作好管沟内的技术、安全、质量工作，履行签认手续，并对规程、措施、交底要求执行情况经常检查，随时纠正违章作业。做好施工队伍技术指导。 4．随时掌握所管辖施工队或作业组在施工过程中的操作方法，严格过程控制。 5．按工程质量评定验收标准，经常检查自己管辖施工队或作业组的施工质量。并搞好自检、互检和工序交接检。 发现不合格及时纠正或向施工负责人汇报。 6．负责分管区、段内的施工准备，保护好测量标志。7．严格监督、检查、进入施工区的材料、帮助装卸、检查方法是否合理，防止损坏和影响工程质量。 8．按时填写各种有关施工测量记录、做到准确无误。
9．计量。积累原始资料，提供变更。 10. 测量的资料和原始记录应真实可靠 11. 认真做好测量仪器的维修和保管工作，定期进行校 验，以保证测量仪器的精准度 12. 坚持测量工作的自检、互检制度，杜绝重大质量事故的 发生 13. 施工时跟班检查控制桩（点）情况，发现异常及时复测、 矫正。浇砼前提 标高控制点，并及时作好测量资料 14.按设计图纸、施工方案和施工规范、规程、施 工措施等向作业队进行书面技术交底并在实施过程中认真检查和贯彻 二、加强工程周边相关单位的协调工作 为加快推进工程进度，我部打破部门职责的限制，积极参与了与工程周边单位的协调工作并亲自落实如；与恒邦集团相互协调用电、工作测量，路缘石、平石的安装工作。与领地集团相互协调暂时用地，用水，等工作。 三、与领导之间的沟通 认真完成领导交给的工作任务，遇到不明情况，不懂的，都及时向领导汇报，会及时的为我讲解，指导我们工作，让我们在工作有困难的时候，送来了温暖，让自己更加有了前进动力。
习题2 一、比较下列概念 2．转录和翻译 3．RNA聚合酶和引物酶 4．启动子和增强子 5．同源重组和位点特异性重组 6. 密码子和遗传密码 7. 基因内抑制突变和基因间抑制突变 8 SD序列和Kozak序列 9．密码子和反密码子 10．同义密码子和偏爱密码子
11．-10序列（ Pribnow box ）和TATA框（Goldberg-Hogness box） 二、填空 1．位点特异性重组的结果与重组位点的位置和方向有关。如果重组位点以相反方向存在于同一DNA分子上，重组结果发生；重组位点以相同方向存在于同一DNA分子上，重组发生。重组位点在不同DNA分子上，重组发生。 2. 1956年，Crick提出了遗传信息传递的途径，称为，其内容概括为 3．被转录的ＤＮＡ链称为模板链，又称链, 它与转录出来的ＲＮＡ序列，非模板的DNA链为编码链，又称链；它与转录生成的ＲＮＡ序列，不过在ＲＮＡ中含有Ｕ而不含Ｔ。 4. 大肠杆菌中DNA指导的RNA聚合酶全酶的亚基组成为，去掉因子后剩 下的部分称为核心酶，这个因子使全酶能辩认DNA上的位点。 5. 利福平抑制细菌中转录的起始，因为。 6. 原核细胞中各种RNA是催化生成的。而真核细胞核基因的转录分别由 种RNA聚合酶催化，其中rRNA基因由转录，hnRNA基因由转录，各类小分子量RNA则是的产物。 7.在真核生物中，转录mRNA基因的酶是_____；转录tRNA基因的酶是____；转录18S和28S rRNA基因的酶是__________。 8. 一个转录单位一般应包括序列、序列和序列。 9.真核细胞每个mRNA一般只带一种蛋白质编码信息，是 mRNA; 原核细胞每个mRNA 分子常带有多个功能相关蛋白质的编码信息,是 mRNA 。 10.真核细胞中编码蛋白质的基因多为。编码的序列被保留在成熟mRNA中的 是，编码的序列在前体分子转录后加工中被切除的是。 11在基因中 ______被_____分隔开，而成熟的mRNA中序列被拼接起来。
一.解释概念(20分,每个4分) 卫星DNA 复制体逆转座子反式激活因子衰减子与衰减作用 三、问答题(50分) 1. 说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。(15分) 2. 简述增强子的特点和性质及作用机制。(10分) 3. 简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15分) 4. DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌 (E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DN**段克隆到pUC质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?为什么?(10分) 武汉大学2002分子生物学 三.问答: 1.简述(或绘图说明)真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15分) 2.简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分) 3.在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?可用什么术语来描述这一类基因家族(5分) 4. 你正在进行Southern blot分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA 从胶上转到硝酸纤维素膜上,你将标记好的探针与膜杂交,却发现放射自显影结果是一片空白,哪里错了呢?(5分)
一、下列名词翻译成中文，并简要解释 1、Domains and motifs 2、Alternative splicing 3、Reporter genes 4、The PCR cycle 5、Restriction mapping 6、Multiple cloning sites 7、DNA libraries 8、Proteomics 9、Replicon 10、Semi-conservative replication 二、简答题(共5题,每题8分,共40分) 1、请列举三种以上蛋白质纯化技术,并说明不同纯化技术的简单原理。 2、简述DNA损伤与DNA突变之间的区别与相互关系。 3、简述密码的简并性(degeneracy)和同义密码子(synonymous codon)及其在生物学上的重要性。 4、简述原核生物转录起始与转录终止过程中所涉及的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。 5、简述cDNA文库的构建过程。 三、论述题(共5题,1-4题每题15分,第5题10分,共70分) 1、人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么？ 2、什么是操纵子(operon)？试说明色氨酸操纵子(Trp operon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。 3、请简要解释顺式作用元件与反式作用因子,并举二例加以说明它们的相互作用方式。 4、试说明真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异,表现在哪些方面？ 5、限制性核酸内切酶有哪几种类型？哪一种类型的限制酶最适合于基因工程,为什么？请简要说明其理由。
分子生物学总结完整版 1、结构分子生物学； 2、基因表达的调节与控制； 3、DNA重组技术及其应用； 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。 2、 DNA复性：变性DNA在适当条件下，分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、 Tm(熔链温度)： DNA加热变性时，紫外吸收达到最大值的一半时的温度，即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度） 4、退火：热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，称为退火 5、假基因：基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、 C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致，称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座：可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子：染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分
9、 DNA二级结构的特点：1）DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成；2）DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接，排在外侧，构成基本骨架，碱基排列在外侧；3）DNA分子表面有大沟和小沟；4）两条链间存在碱基互补，通过氢键连系，且A=T、G ≡ C（碱基互补原则）；5）螺旋的螺距为 3、4nm，直径为2nm，相邻两个碱基对之间的垂直距离为0、34nm，每圈螺旋包含10个碱基对；6）碱基平面与螺旋纵轴接近垂直，糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构：编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列，包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。特点：1）真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp；2）单顺反子（单顺反子：一个基因单独转录，一个基因一条mRNA，翻译成一条多肽链；）3）基因不连续性断裂基因（interrupted gene）、内含子(intron)、外显子(exon)；4）非编码区较多，多于编码序列(9:1) 5）含有大量重复序列1 1、Histon(组蛋白)特点：极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成： 由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制：转座时发生的插入作用有一个普遍的特征，那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复
2012年度工作小结 2012年，我在中心领导的关心和同志们的帮助支持下，认真学习政治理论和业务知识，学习十八大报告。作风踏实，积极肯干，较好地完成了年度目标任务。回顾这一年来的思想、工作、学习和生活情况，总觉收获大于付出、喜悦多于泪水。 在“德”方面，本人觉得德是反映一个人的思想觉悟、工作作风和道德品质。我作为一名老新闻工作者，不管在什么时候，遇到什么情况，都能认真努力工作，不断加强学习。并且还能时刻立足行业自律，尽职尽责完成领导交办的各项工作。在平时的工作中，还能时刻坚守新闻工作者的职业道德，坚持新闻的真实性。在选用、编辑稿件时，处处用正确的政治纪律、组织纪律和新闻纪律来严格要求自己。在空余时间还能通过各种学习，不断加强自身世界观、人生观和价值观的改造。不断了解我党最新的政策方针和政治决策，从而让正确的舆论导向来引领自己的工作。在工作和事业面前还能始终坚持顾全大局，不争名夺利，不计较个人得失，经常自省自励，开展批评与自我批评。在外还能严格约束自己的一言一行和一举一动，时刻树立新闻工作者的良好形象。 在“能”方面，本人觉得：作为一名党报编辑，必须提高自己的政治能力、业务能力、创新能力和从业能力，只有这样，工作的基础才能扎实。政治理论水平和新闻素养才能提高。所以我在平时的工作中，能充分利用空余时间和多种渠道进行理论知识和业务知识的学习，不断提高自身本领。 在“勤”方面，我是这样理解的。俗话说，“勤能补拙”、“一分耕耘一分收获”。一个人不管怎么，只有做到全心全力付出，才会达到理想的收获。所以我不管在任何时候，都能做到手勤、嘴勤、腿勤、脑勤。平时总是向身边的同行学习，向外地的同行学习，向其它媒体学习。 在“绩”方面，我在2012年中，时刻树立认真负责的态度，任劳任怨，责任心较强。为了提高版面质量，增强版面品味，通过绞尽脑汁，推出全新的副刊和博客视窗版面，全年共编排版面288个，其中89个副刊版面未出现一次较大差错。并且还利用空余时间主动撰写各类稿件102篇、计52757个字。 另外，我在生活中，还能时刻拥有良好的社会公德意识和道德素养，尊重他人，谦逊礼让，以诚待人，乐于助人；遵纪守规，不做有损单位和自身形象的事，不参与小搞搞之类的游戏。同事间和睦相处，求同存异，