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22外源_淀粉酶对21日龄肉鸡消化器官发育_肠道内源酶活性的影响

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22外源_淀粉酶对21日龄肉鸡消化器官发育_肠道内源酶活性的影响

畜牧兽医学报 2007,38(7):672~677

A ct a V eteri nari a et Zootechnica S i nica

外源α2淀粉酶对21日龄肉鸡消化器官

发育、肠道内源酶活性的影响

蒋正宇,周岩民3,王 恬

(南京农业大学动物科技学院,南京210095)

摘 要:选用1日龄AA肉鸡440羽,随机分成4组,每组5个重复,分别饲喂基础日粮(对照组)和在基础日粮中添加1000U/kg(250mg/kg)、3000U/kg(750mg/kg)、9000U/kg(2250mg/kg)微生物α2淀粉酶的试验日粮,研究添加不同剂量外源α2淀粉酶对肉鸡消化器官发育和内源酶活性变化的影响。结果表明:添加淀粉酶能降低肉鸡21日龄肝脏、肌胃、前肠相对重量和前肠相对长度(P>0105),并提高了肉鸡前肠内容物淀粉酶、总蛋白酶(P< 0105)和胰蛋白酶(P<0105)活性,但未影响脂肪酶活性,高剂量(2250mg/kg)添加组的总蛋白酶(P<0105)和淀粉酶活性呈下降趋势;肉鸡空肠黏膜DNA、RNA浓度及蔗糖酶、麦芽糖酶活性未受淀粉酶水平(250mg/kg和750 mg/kg)影响,但高剂量(2250mg/kg)降低了蔗糖酶和麦芽糖酶活性(P<0105)。

关键词:α2淀粉酶;肉鸡;消化器官;内源酶

中图分类号:S83115 文献标识码:A 文章编号:033626964(2007)0720672206

Influence of Exogenous Alpha2amylase Supplementation on Development of

Digestive Organs and Intestinal E nzyme Activities of212day2old B roilers

J IAN G Zheng2yu,ZHOU Yan2min3,WAN G Tian

(College of A ni m al S cience and Technolog y,

N anj i ng A g ricult ural Uni versit y,N anj i ng210095,Chi na)

Abstract:Four hundred and forty12day2old AA broiler chickens were randomly allocated to four group s for5replicates,and fed a co mmercial starter diet and t he same diet s supplemented wit h 1000U/kg(250mg/kg),3000U/kg(750mg/kg),9000U/kg(2250mg/kg)ofα2amylase preparation up to21day of age to st udy t he effect s of supplementaryα2amylase of different levels on t he develop ment of digestive organs,intestinal enzyme activities1The result s showed t hat rel2 ative weight s of liver,gizzard,anterior intestine and relative lengt h of anterior intestine tended to decrease(P>0105)1The increased activities of amylase,protease(P<0105),and t ryp sin(P< 0105)in anterior intestinal and high2dose2dep ression responses wit h t he amylase supplementation of2250mg/kg were observed1Lipase activity,however,was unaffected by amylase supplemen2 tation of all levels(P>0105)1DNA,RNA concent ration and t he activities of maltase and sucrase wit hin jejunal muco sa were not affected by supplementary amylase of250mg/kg and750mg/kg1 High2do se2dep ression responses were also observed for t he activities of maltase and sucrase(P< 0105)1

K ey w ords:α2amylase;broilers;digestive organs;endogenous enzyme

收稿日期:2006208208

基金项目:国家重点基础研究发展计划(973)(2004CB117500);国家自然科学基金资助(30300251)

作者简介:蒋正宇(19822),男,江苏金湖人,硕士,主要从事动物营养与饲料科学研究,E2mail:jzy22003@https://www.doczj.com/doc/b119026551.html,

3通讯作者:周岩民,Tel:025*********,E2mail:zhouym6308@https://www.doczj.com/doc/b119026551.html,

 7期蒋正宇等:外源α2淀粉酶对21日龄肉鸡消化器官发育、肠道内源酶活性的影响

雏鸡早期发育的研究表明,其消化器官组织形态和消化酶活性随日龄的增长而发生明显变化。Noy等报道,与4日龄相比21日龄仔鸡十二指肠中淀粉酶净分泌活性增加至100倍[1]。采食刺激了雏鸡消化器官的发育和胰腺消化酶的分泌,但由于早期胰腺发育不成熟,胰腺消化酶合成和分泌速率滞后于饲料的消化,限制了养分的消化利用,从而阻碍了早期的生长[2]。因此,在仔鸡日粮中添加适量的外源α2淀粉酶可弥补内源酶的不足,促进仔鸡早期生长。

Ritz等在火鸡玉米2豆粕型日粮中添加淀粉酶试验发现,与对照组相比,胰淀粉酶的活性在7219、22228及31日龄以后的时间内均高于对照组[3]。但Mahagna等报道,在高粱日粮中添加淀粉酶和蛋白酶,降低了小肠内容物中淀粉酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶及胰腺糜蛋白酶活性[4]。淀粉酶对内源酶发育的影响存在争议,这些试验结果的变异可能与动物年龄、日粮类型、外源酶的添加量有关[5~7]。过量或在不同生长阶段添加外源酶,可能会抑制动物消化器官的形态发育和功能成熟,进而影响动物的生长。为此,本试验以单体α2淀粉酶为材料,通过研究添加不同剂量的外源淀粉酶对肉仔鸡前期消化器官生长、小肠内源酶活性的影响,探讨外源消化酶对肉鸡早期消化道发育的影响。

1 材料和方法

111 试验动物与试验设计

试验于2005年5月19日至6月29日在南京康欣禽业有限公司进行。选取1日龄肉鸡440羽,随机分成4组,每组5个重复,每个重复22羽试验鸡,分别饲喂4种日粮:(1)基础日粮(对照组);(2)基础日粮中添加1000U/kg(250mg/kg)α2淀粉酶;(3)基础日粮中添加3000U/kg(750mg/kg)α2淀粉酶;(4)基础日粮中添加9000U/kg(2250 mg/kg)α2淀粉酶,基础日粮配方及养分含量如表1。 AA肉仔鸡由安徽和威集团种禽公司提供。α2淀粉酶由无锡酶制剂厂提供,由B acill us subtilis发酵精制而得,含4000U/g的活性淀粉酶制剂(活性单位由无锡酶制剂厂定义并测定),水分≤8%。

试验肉鸡采用层叠笼饲养,自由饮水,自由采食,24h连续光照,并按常规程序进行严格免疫。112 测定指标与方法

11211 样品采集处理、消化器官重量和肠段长度的测量 试验称重结束,饲喂6h后,每组随机选取21日龄试验肉鸡6羽进行采样分析。用断颈法将试鸡

表1 基础日粮配方及养分含量

T able1 Compositions and nutrients of b asal diets

原料Ingredients组成/%Compositions养分含量Nutrients,calculated

玉米Corn61.5CP/%20.04豆粕Soybean meal33M E/(MJ/kg)11.3

石粉Limestone 1.235Met+Cys/%0.78磷酸氢钙Dicalcium phosphate 1.7L ys/% 1.10 DL2Met0.135钙Calcium/%0.94

L ysine2HCl0.04总磷Total phosphorus0.64

食盐Salt0.25有效磷Available phosphorus/%0.41

EnDOXa0.1

丙酸钙Calcium propionateb,>98%0.1

凹土Attapulgite0.44

砂石Sand0.5

预混料Premixc1

a.抗氧化剂由Kemin工业有限公司提供;b1商用防霉剂;c11%预混料由华牧动物科技研究所提供,为每kg日粮提供:VA 12000IU,VD33000IU,V E20mg,V K3113mg,VB1212mg,VB210mg,Nicotinamide1mg,Choline400mg,Calcium pantotheenate10mg,VB64mg,Biotin0104mg,Fursultiamine1mg,VB1201013mg,Fe80mg,Cu715mg,Mn110mg, Zn65mg,I111mg,Se014mg,Bacitracin Zinc30mg等

a.Provided by Kemin Industries,co.ltd.as antioxidant reagent;

https://www.doczj.com/doc/b119026551.html,ed as a commercial mould inhibitor

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畜 牧 兽 医 学 报38卷 

快速致死后,颈静脉放血,迅速剖开腹腔,取出消化器官,分离肝脏、腺胃、肌胃、胰腺、十二指肠段(U 形弯曲段)、空肠段(至卵黄囊残迹)、回肠(至回盲连结处)、盲肠,分别测定各段肠道自然状态下的长度和各器官重(肠段在挤出内容物后称量);轻轻挤出前肠(十二指肠和空肠)中的内容物,空肠在挤出食糜后被剪开,先用载玻片刮去表层残留的食糜后再用载玻片刮取黏膜,采集的黏膜样品均立即放入液氮中速冻,肠道内容物在-20℃冻存,以备后续测定。

11212 肠道内容物消化酶活性测定 α2淀粉酶活性采用淀粉酶试剂盒(南京建成生化工程研究所)进行测定;总蛋白水解酶活性采用福林酚法测定[8];胰蛋白酶活性测定采用Erlanger等[9]经Iwamori 等[10]改进后的方法进行测定;脂肪酶活性采用比浊法测定[11]。

11213 黏膜生化指标的测定 黏膜麦芽糖酶和蔗糖酶活性参照Dahlqvist等[12]经许梓荣等[13]改进后的方法进行。DNA和RNA浓度用John2Chan2 dler法[14]提取测定。

113 数据统计与处理

试验数据先经Micro soft Excel初步处理后,用SAS910中G L M过程进行分析,Duncan′s法多重比较,酶剂量与器官重之间进行线性回归分析,结果均以平均数±标准差表示。

2 结果与分析

添加不同水平的外源淀粉酶后,肉鸡肝脏重、肌胃重、前肠长度、前肠重分别减少了415%-1118%、214%-718%、614%-817%、415%-613%(表2),胰腺、腺胃重量略有增加(P>0105),各变化趋势与酶的添加剂量之间无明显线性关系(P>0105)。

表2 添加不同剂量淀粉酶对21日龄肉鸡肠段相对长度和消化器官相对重量的影响

T able2 E ffects of different levels of supplementary amylase on relative length(cm/100g BW)of intestinal sections and relative w eight(g/100g BW)of digestive organs of21d broilers

测定指标Tested indexes

淀粉酶添加量/(mg/kg)

Supplementary amylase levels

P值

P2value 025********Linear

肝脏重Liver weight 4.22±0.38 4.03±0.32 3.85±0.26 3.72±0.360.152

肌胃重G izzard weight 2.96±0.21 2.73±0.24 2.83±0.49 2.89±0.350.407腺胃Proventriculus weight(×10-1) 6.58±0.16a 6.92±0.68ab 6.62±0.36ab7.39±0.41b0.090胰腺Pancreatic weight(×10-1) 3.12±0.32 3.45±0.37 3.55±0.38 3.65±0.330.109前肠长度Anterior intestinal length14.18±1.1013.27±1.0213.40±0.4312.95±1.150.499前肠重Anterior intestinal weight 3.52±0.39 3.30±0.21 3.35±0.33 3.36±0.390.272回肠长度Ileum length9.56±1.259.59±1.409.73±1.119.14±1.070.124

回肠重Ileum weight0.97±0.140.87±0.160.94±0.110.97±0.090.580盲肠长度Caecaum length 2.04±0.27 1.84±0.07 2.01±0.27 1.91±0.180.985盲肠重Caecaum weight0.44±0.070.42±0.070.39±0.050.42±0.090.274同行肩标不同者表示差异显著,P<0105,下同

Means with different superscripts in the same row differ significantly,P<01051The same as below

添加不同剂量的淀粉酶不同程度地提高了肉鸡前肠内容物中淀粉酶、总蛋白酶(P<0105)和胰蛋白酶(P<0105)活性,提高幅度分别为2011%-5417%,1715%-4315%,1410%-3310%(表3);但淀粉酶添加剂量与前肠内容物中酶活性之间无线性关系(P>0105,P值未列出);添加750mg/kg和2250mg/kg外源淀粉酶显著提高了肠道内容物中淀粉酶活性;与750mg/kg剂量组相比, 2250mg/kg剂量组肉鸡前肠内容物总蛋白酶(P< 0105)和淀粉酶活性下降,提示高剂量添加淀粉酶对内容物酶活性可能有抑制作用。脂肪酶活性不受外源淀粉酶的影响(P>0105)。

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 7期蒋正宇等:外源α2淀粉酶对21日龄肉鸡消化器官发育、肠道内源酶活性的影响

表3 添加不同剂量淀粉酶对21日龄肉鸡前肠内容物消化酶活性的影响

T able3 E ffects of different levels of supplementary amylase on activities of

digestive enzymes within anterior intestinal contents(U/mL supernatant)

消化酶Enzymes

淀粉酶添加量Supplementary amylase levels/(mg/kg) 025********

淀粉酶Amylase265.09±33.75a318.27±77.85ab439.29±88.29c357.31±46.17bc 总蛋白酶Protease899.00±96.81a1290.15±156.99b1237.47±126.56b1056.27±186.47ab 脂肪酶Lipase 3.51±0.51 3.37±0.57 3.64±0.13 3.41±0.31

胰蛋白酶Trypsin(×10-1) 2.09±0.18a 2.78±0.26b 2.48±0.15b 2.75±0.30b

外源淀粉酶对空肠黏膜DNA、RNA浓度均无明显影响(表4)。添加250、750mg/kg淀粉酶,蔗糖酶和麦芽糖酶活性有所提高,但均不显著;但与750mg/kg剂量组相比,2250mg/kg剂量组的蔗糖酶和麦芽糖酶活性下降(P<0105),提示高剂量添加淀粉酶对空肠黏膜二糖酶活性可能有抑制作用。

表4 不同剂量淀粉酶对肉鸡空肠黏膜DNA、RNA浓度及酶活性

T able4 E ffects of different levels of supplementary amylase on DNA,RNA concentration and the activities of m altase and sucrase in jejunal mucosa

黏膜生化指标Biochemical indexes

淀粉酶添加量Supplementary amylase levels/(mg/kg) 025********

蔗糖酶Sucrase/(U/g) 1.57±0.09a 1.79±0.23a 1.59±0.14a 1.19±0.21b 麦芽糖酶Maltase/(U/g)12.98±1.49ab13.94±1.64b13.78±0.57b11.52±0.88a DNA浓度/(mg/g) 2.01±0.49 1.92±0.35 2.16±0.77 2.24±0.53 RNA浓度/(mg/g) 2.99±0.30 3.02±0.49 2.61±0.45 3.24±0.39

3 讨 论

Brenes等报道,大麦型日粮中添加酶制剂,降低了肉仔鸡十二指肠、空肠、回肠、结肠相对长度,而在小麦日粮中添加酶则对消化器官发育无明显影响[15]。但Iji等发现,在玉米2豆粕型基础日粮中添加酶制剂对消化器官重量影响较小[16]。酶制剂对消化器官发育的影响可能与饲料类型有关。粘性谷物中富含NSP,可增加食糜粘度,结合养分和酶,抑制酶活,导致消化器官适应性增大,过度增生,添加外源酶可水解NSP,消除其负面作用,减轻消化器官负担。一般认为,玉米基础日粮中NSP含量少,肉鸡的这种适应性变化很小,但添加淀粉酶可协助消化,减轻肉鸡消化负担。对此,本试验结果中肝脏、肌胃、前肠相对重量和前肠相对长度均有所下降(P>0105)亦可予以证实。Swanson等报道,增加小肠内蛋白质流量会引起胰腺重量增加,但添加淀粉会抑制蛋白质流量对胰腺的作用[17]。本试验中胰腺绝对重量(P>0105,数据未给出)和相对重量均增加(P<0105),可能由于添加外源淀粉酶及时水解淀粉,消除了淀粉的这种抑制作用,增强了蛋白质对胰腺重量的调节作用;也有可能添加外源淀粉酶促进胰腺淀粉酶的合成,或抑制淀粉酶的释放,而增加了胰腺的重量,因为淀粉酶在胰腺蛋白含量中占的比例最大(总蛋白的12%[18],酶蛋白的2819%[19])。

研究表明,鸡肠道中的大部分淀粉酶、胰蛋白酶、脂肪酶均分布在十二指肠或空肠[20~22]。因此,本试验以前肠(十二指肠和空肠)消化酶活性作为衡量肠道消化酶活性的指标。添加外源淀粉酶提高了肠道中淀粉酶活性,这与Ritz等[3]的报道相一致, Ritz等认为,淀粉酶活性的提高是外源酶和内源酶的叠加效应[3];但与750mg/kg剂量组相比,添加高剂量(2250mg/kg)外源淀粉酶后,消化道淀粉酶活性有所下降(P>0105),提示肠道中外源酶和内源酶活性之间关系并非简单的叠加作用。由于外源性消化酶与内源酶在消化道内很难分清,酶活性的研究方法又有较大的局限性,因此,外源消化酶与内

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畜 牧 兽 医 学 报38卷 

源酶活性的关系尚难阐明。Owsley等推测,外源酶增加了肠道中进一步分解或吸收的养分量,从而刺激机体消化系统的发育[23]。但刘迎春认为少量添加酶制剂能增强内源酶作用,添加中等剂量外源蛋白酶对内源消化酶有降解作用,再增加外源酶则又显示出正效应[24]。外源酶对内源酶的分泌作用可能是间接通过底物量来进行调控,消化系统有自身的调节机制,肠道内酶的分泌量与底物量密切相关。酶与底物的关系表明,当底物浓度一定时,随着酶浓度增加,酶解速率加快,酶解产物量增加,已消化而未被吸收的养分浓度累积和消化道中酶过量则会抑制内源酶的分泌。Swanso n等研究表明,淀粉和酪蛋白对消化酶分泌和活性存在互作作用,在酪蛋白中添加淀粉降低了胰腺淀粉酶活性和胰蛋白酶活性[17]。添加外源淀粉酶显著提高了前肠中总蛋白酶和胰蛋白酶的活性,这可能是由于淀粉酶协助消化淀粉,减少了淀粉和蛋白的这种互作效应,或者减轻了淀粉大分子空间占位对蛋白质消化的阻隔作用,暴露更多的底物,增加了蛋白水解酶的分泌。脂肪消化是在水脂界面上进行,需要胆盐和辅脂酶参与,可能受淀粉空间位阻作用较小,所以添加外源淀粉酶不影响脂肪酶活性。

小肠上皮细胞酶的发育是衡量肠道功能成熟的重要标志。郑祥建报道,与玉米日粮相比,大麦日粮提高了21日龄雏鸡小肠粘膜的麦芽糖酶、蔗糖酶活性,而降低了乳糖酶、海藻糖酶活性,添加β2葡聚糖酶后,粘膜麦芽糖酶、蔗糖酶活性大幅度下降,而乳糖酶和海藻糖酶活性大幅度上升[25]。但Iji等在玉米基础日粮中添加酶制剂(含淀粉酶、蛋白酶和木聚糖酶)未发现对空肠黏膜麦芽糖酶、蔗糖酶和碱性磷酸酶活性有影响[16]。本试验结果表明,在玉米基础日粮中添加250、750mg/kg淀粉酶对肉鸡空肠蔗糖酶和麦芽糖酶活性均无明显影响,但高剂量添加(2250mg/kg)则使蔗糖酶和麦芽糖酶活性显著下降(P<0105);高剂量添加淀粉酶对空肠黏膜二糖酶活性可能有抑制作用,这与小肠内容物淀粉酶活性变化类似。目前,还没有证据表明外源酶对二糖酶活性有直接影响,多数试验者认为底物量调节酶的分泌和活性。Markovic等研究发现,B acill us s ubtilis来源α2淀粉酶,水解淀粉生成产物中,麦芽糖/麦芽三糖比例<1,更多的是麦芽三糖[26];所以,过量添加B acill us subtilis来源α2淀粉酶可能减少了肠腔中麦芽糖量,而增加了麦芽三糖量,引起麦芽糖酶活性下降。已知蔗糖酶活性受S I(蔗糖酶2异麦芽糖酶复合物,EC31211148-10)mRNA表达调控,S I基因在小肠管道的各个部位、不同方向(十二指肠到回肠、绒毛到腺囊)的表达差异很大[27],导致不同肠段二糖酶的酶蛋白合成速率和酶活性有所不同。小鼠试验表明,高直玉米淀粉降低了空肠前段蔗糖酶、麦芽糖酶和异麦芽糖酶活性,但提高了后段的蔗糖酶活性[28]。此外,试验过程黏膜刮取方法和黏膜厚度不同对结果有较大影响,也可能是造成试验结果差异的原因。

肉仔鸡有很高的蛋白质合成率,这与其较快的生长速度是相适应的。二倍体细胞具有较为恒定的DNA含量,因此DNA含量也可作为衡量细胞数量的间接指标,RNA含量可作为衡量细胞功能的指标。但本研究表明,外源淀粉酶对空肠黏膜DNA、RNA浓度均无显著影响。

参考文献:

[1] Noy Y,Sklan D1Digestion and absorption in the

young chick[J]1Poult Sci,1995,74:366~3731 [2] Sklan D,Noy Y1Hydrolysis and absorption in the

small intestines of posthatch chicks[J]1Poult Sci,

2000,79:1306~13101

[3] Ritz C W,Halet R M,Self B B,et al1Endogenous

amylase levels and response to supplementation feed

enzymes in male turkeys f rom hatch to8ws of age

[J].Poult Sci,1995,74(8):1317~13221

[4] Mahagna M,Nir I,Larbier M,et al1Effect of age

and exogenous amylase and protease on development

of the digestive tract,pancreatic enzyme activities

and digestibility of nutrients in young meat2type

chicks[J]1Reprod Nutr Dev,1995,35:201~2121 [5] Bedford M R1Exogenous enzymes in monogastric nu2

trition2their current value and future benefts[J]1

Anim Feed Sci Technol,2000,86:1~131

[6] Acamovic T1Commercial application of enzyme tech2

nology for poultry production[J]1J World Poult Sci,

2001,57:225~2431

[7] Cowieson A J1Factors that affect the nutritive value

of maize for broilers[J]1Anim Feed Sci Technol,

2005,119:293~3051

[8] Anson M L1The estimation of pepsin,trypsin,pa2

pain and cathepsin with hemoglobin[J]1J Gen Phys2

iol,1938,22:79~891

[9] Erlanger B F,K okowski N,Cohen W1The prepara2

676

 7期蒋正宇等:外源α2淀粉酶对21日龄肉鸡消化器官发育、肠道内源酶活性的影响

tion and properties of two new chromogenic sub2

strates of trypsin[J]1Arch Biochem Biophys,1961,

95:271~2731

[10] Iwamori M,Iwamori Y,Ito N1Sulfated lipids as in2

hibitors of pancreatic trypsin and chymotrypsin in ep2

ithelium of the mammalian digestive tract[J]1Bio2

chem Biophys Res Commun,1997,237:262~2651 [11] Verduin P A,Punt J M,Kreutzer H M,et al1Stud2

ies on the determination of lipase activity[J]1Clinica

Chimica Acta,1973,46:11~191

[12] Dahlqvist A1Assay of intestinal disaccharidase[J]1

Analyt Biochem,1968,22:99~1071

[13] 许梓荣,李卫芬,孙建义1猪胃肠道黏膜二糖酶的性

质[J]1动物学报,2002,48(2):202~2071

[14] Johnson L R,Chandler A M1RNA and DNA of gas2

tric and duodenal mucosa in antractomized and gas2

trin2treated rats[J]1Am J Physiol,1973,224:937

~9401

[15] Brenes A,Smith W,Guenter W,et al1Effect of en2

zyme supplementation on the performance and diges2

tive tract size of broiler chickens fed wheat and bar2

ley2based diets[J]1Poult Sci,1993,72:1731~

17391

[16] Iji P A,Khumalo K,Slippers S,et al1Intestinal

f unction and body growth of broiler chickens fed on

diets based on maize dried at different temperatures

and supplemented with a microbial enzyme[J]1Re2

prod Nutr Dev,2003,43:77~861

[17] Swanson K C,Matthews J C,Woods C A1Postru2

minal administration of partially hydrolyzed starch

and casein influences pancreaticα2amylase expression

in calves[J]1J Nutr,2002,2:376~3811

[18] Kulka R G,Duksin D1Patterns of growth andα2am2

ylase activity in the developing chick pancreas[J]1

Biochimica Et Biophysica Acta,1964,91:506~5141[19] Pubols M H1Ratio of digestive enzymes in the chick

pancreas[J]1Poult Sci,1991,70:337~3421 [20] Osman A M,Tanios N I1The effect of heat on the

intestinal and pancreatic levels of amylase and malt2

ase of laying hens and broilers[J]1Biochem&Phys2

io,1983,75A:563~5651

[21] Bird F H1Distribution of tryp sin andα2amylase activ2

ities in the duodenum of the domestic fowl[J]1Brit

Poult Sci,1971,12:373~3781

[22] Rideau N,Nitzan Z,Mongin P1Activities of amyl2

ase,trypsin and lipase in the pancreas and small in2

testine of the laying hen during egg f romation[J]1

Brit Poult Sci,1980:1~81

[23] Owsley W,Forr D E,Tribble L F1Effects of age

and diet on the development of the pancreas and the

synthesis and secretion of pancreatic enzymes in the

young pigs[J]1J Anim Sci,1986,63:497~5041 [24] 刘迎春1饲用复合酶对产蛋鸡低蛋白饲粮氨基酸可

利用率的影响,Ⅱ1粗蛋白水平对产蛋鸡低蛋白饲粮

氨基酸可利用率的影响[D]1南京:南京农业大学,

19991

[25] 郑祥建1家禽强化饲料2大麦基础日粮添加粗酶制剂

若干问题的研究[D]1南京:南京农业大学,19951 [26] Markovic I,Markovic D B,Pavlovic N1The effect of

synergism in decreased hydrolysis of biopolymers

with enzyme overdosage[J]1Process Biochemistry,

2002,38:783~7901

[27] 付亮剑,孙建义,陈 艳,等1影响动物肠道S I基因

表达的因素[J]1浙江农业学报,2004,16(3):167~

1711

[28] G oda T,Urakawa T,Watanabe M,et al1Effect of

high2amylose starch on carbohydrate digestive capa2

bility and lipogenesis in epididymal adipose tissue and

liver of rats[J]1J Nutr Biochem,1994,5:256~

2601

776

商品肉鸡肠道问题剖析

保持肠道健康,是肉仔鸡达到良好生产性能的关键因素。不健康的肠道状况可导致垫料潮湿,饲料转化率差,出栏体重不达标,均匀度差,饮水量增加、拉水样或粘稠粪便、营养吸收不良,引起细菌继发感染等。 一、引起家禽肠道疾病的原因 1、管理因素: ⑴育雏条件⑵饮水管理⑶通风换气条件 2、疾病因素: ⑴菌因素(肠道菌群失调);⑵病毒因素(轮状病毒、呼肠孤病毒)⑶球虫因素; ⑷营养因素。 二、管理因素对雏鸡肠道健康的影响 1、正常肠道的消化与吸收功能 通过检查粪便和垫料, 可以非常容易地评估肠道的功能和健康状况。正常鸡只排出后的粪便呈圆形、棕色, 上部带有典型的尿酸的“白色小帽”,正常鸡只每天排便12~16次。而盲肠内容物则是不连续的深棕色、糊状物, 通常每天排泄 1~2 次。鸡只饮水量不同,粪便的含水量可能也不一样,因此如果饮水量过大, 其结果就是垫料变得潮湿不堪。 2、垫料管理 如果垫料的含水量太高,或者垫料表面板结,鸡只将长期暴露在湿滑和粘稠的垫料上。为了防止潮湿垫料变得更糟, 应经常翻动或更换这些地方的垫料。此外, 必须经常监控鸡舍的温度、湿度和通风情况, 确保对垫料湿度的控制, 确保垫料保持易散状态。在鸡舍内, 必须保持足够的最小通风量,这种最小通风量应能有效防止舍内空气中的二氧化碳和氨气浓度超过有害水平。要避免垫料潮湿和疾病, 舍内相对湿度应控制在70%以下。 2.1潮湿垫料垫料潮湿是一个很普遍的问题,60%的因素是由疾病引起的, 另外40%的因素则由非疾病引起的。疾病因素归结于这几种疾病: 非特异肠炎、球虫病、病毒感染或菌群失调症。在非疾病因素中, 主要与通风、饮水器漏水、不利天气或房顶渗漏有关。 2.2垫料管理的关键点。鸡舍预热有助于排出地面的冷凝水;地面温度应达到29℃;高标准的早期育雏工作—饮水、饲料和正确的环境条件,通风良好, 无贼风 ( 比如门、风机百叶等) , 光照均匀, 促进鸡只均匀分布。高标准的饮水管理—每天记录饮水量, 检查和调整水压, 防止乳头饮水器漏水。 三、帮助雏鸡实现肠道健康 一个正常、功能健全的消化道能有效抵御疾病的侵袭 ,因此雏鸡实现良好、均匀的早期生长是至关重要的。改善雏鸡早期肠道健康问题, 须做到下面几点:

硫酸铜对斑马鱼胚胎发育的影响

中国海洋大学实验报告 年月日姓名:专业年级:同组者: 课程:发育生物学实验题目:硫酸铜对斑马鱼胚胎发育的影响 一.【实验目的】 1、锻炼独立开展科学实验、分析和解决实际问题的能力; 2、加深环境对动物受精及早期发育影响的理解 二.【实验原理】 重金属污染是近年渔业环境污染的公害之一。随着工农业的发展,浓度严重超标的一些重金属离子被排入水体而造成污染,对鱼类有毒害作用。目前水体中的重金属主要有Cd、Cu、Pb、Zn等。其中Cu离子就具有较强的毒性,可以和蛋白质中游离的羧基形成不溶性的盐,使蛋白质变性,因此常被用作杀菌剂。 斑马鱼(Danio rerio)是常见的暖水性(21~32℃)观赏鱼,鲤科,个体小(4~5㎝),常年产卵,鱼卵易收集,性成熟周期短且胚胎透明,便于观察药物对其体内器官的影响。雌性斑马鱼可产卵200枚,胚胎在24小时内就可发育成形,繁殖水温24℃时,受精卵经2~3天孵出仔鱼;水温28℃时,受精卵经36小时孵出仔鱼,这使得生物学家可以在同一代鱼身上进行不同的实验,进而研究病理演化过程并找到病因。由于斑马鱼基因与人类基因的相似度达到87%,这意味着在其身上做药物实验所得到的结果在多数情况下也适用于人体,因此它受到生物学家的重视。 在斑马鱼的整个生活周期中,胚胎期和仔稚幼鱼早期发育阶段对重金属污染最为敏感。据报道,波罗的海春天产卵的鲱鱼,在10 ppb 的Cu2+,水的盐度为5.7条件下即对它的受精和发育有影响。30 ppb的Cu2+引起大西洋鲱鱼(Clupea harengus)卵的死亡,而35 ppb 的Cu2+也使太平洋鲱鱼(C.pallasi)的胚胎发生大量死亡[1]。吴玉霖等1990年依据不同金属对褐牙鲆胚胎的滞育、致畸、成活率及孵化率的综合影响指际,得出5种金属对褐牙鲆胚胎的毒性大小顺序为:Cu2+>Zn2+>Cd2+>Pb2+>Cr3+,对仔鱼的毒性大小顺序为Cu2+>Cd2+>Zn2+>Pb2+>Cr3+ [2]。 三.【实验步骤】 1、实验材料 斑马鱼囊胚、CuSO4为分析纯,充分曝气的去离子水、24孔细胞培养板、恒温培养箱、用充分曝气的蒸馏水配置成浓度为5 mg/L 的CuSO4母液,用时稀释。. 2、实验方法 1)硫酸铜浓度梯度的设定 经查阅文献,确定斑马鱼胚胎发育从受精到孵化出幼鱼过程中的CuSO4半致死浓度和安全浓度范围,设定5个浓度梯度和和1个对照组。 研究表明,Cu2+对大银鱼受精卵的安全浓度为0.00112 mg/L[3],对鮸状黄姑鱼仔鱼的安全浓度为0.006mg/L[4],所以设定对照组CuSO4的浓度梯度分别为0(空白对照),0.001 mg/L,0.01 mg/L,0.1 mg/L,1.0 mg/L,2.0 mg/L。每个浓度组设定4个平行组。使用暴晒后的

家禽主要肠道疾病的防治

家禽主要肠道疾病的防治 抗生素促生长剂被禁用后,兽医必须面对的家禽胃肠道疾病主要有:鸡球虫病,坏死性肠炎和非特异性肠炎(也称为菌落失调症)。 1 鸡球虫病 鸡的胃肠道疾病的防治关键在于控制消化道中球虫以及感染球虫后所引发的肠道病原菌的感染。在家禽养殖业的整个历史上,球虫病一直是全球最普遍和经常报道的影响家禽肠道健康和生长效率的疾病之一。球虫病主要由堆形艾美尔球虫(Eimeria acervulina)(图 1)、巨型艾美尔球虫(E. maxima)、毒害艾美尔球虫(E. necatrix)和柔嫩艾美尔球虫(E. tenella)等7种公认的球虫引起 (Tyzzer, 1929; Tyzzer 等,1932)。虽然在现今的球虫病控制措施下,死亡率高的重症球虫病很少发生,但商品鸡群没有感染过球虫病的也很少见。球虫病还可引发鸡的坏死性肠炎等其它肠道疾病。尽管有控制措施,球虫病仍然会给家禽养殖业造成严重的经济损失。 2 鸡坏死性肠炎 引起坏死性肠炎的因素很多,但产气荚膜梭状芽孢杆菌是导致坏死性肠炎的一种普遍存在的厌氧性微生物。在一定的条件下,这种微生物能在肠道中繁殖,产生毒性较强的α毒素。家禽对α毒素很敏感。产气荚膜梭状芽孢杆菌在肠道中增殖的诱因有: 亚临床的球虫病对粘膜造成损伤,使得梭状芽孢杆菌能够黏附到肠粘膜上并在此繁殖; 饲料中淀粉和蛋白质的含量过高,导致肠道中有未消化的饲料存在; 消化酶的分泌紊乱,使得消化率降低、肠蠕动减慢,因此促进了梭状芽孢杆菌的繁殖; 当使用小麦、大麦和燕麦等作为能量饲料来源时,我们发现坏死性肠炎的发病率要比玉米作为能量饲料高。 在欧洲,兽医观察到家禽临床性坏死性肠炎在肉鸡各日龄段都有发生(图2),最早发病是在14-15日龄,高峰期在25日龄。其主要症状是:家禽精神沉郁、挤成一团、羽毛粗乱、生产性能降低。死亡率高达10%,但2%至6%的死亡率更为普遍。 患临床性或亚临床性坏死性肠炎的家禽还会发现有严重胆管性肝炎的病症。只有在加工生产线上才发现鸡肉颜色差和黄疸、肝肿大,外观呈褐色和表面有结节或斑点、肉质等级明显下降(3%至5%)。梭状芽孢杆菌通常栖息于盲肠,但是如果肠道菌群的平衡发生改变,梭状芽孢杆菌在消化道前段大量增殖,导致坏死性肠炎和鸡的死亡,由于胆管连结着胆囊与肠道,梭状芽孢杆菌可能会转移到肠道上部而进入胆管,随后阻塞胆囊或进入肝脏,导致上述症状。 3 鸡的菌落失调症 菌落失调症是肠道内非特异性细菌积聚而导致家禽腹泻和鸡舍垫料潮湿的病症。鸡群的死亡

我国家禽肠道细菌病流行现状及防控措施

我国家禽肠道细菌病流行现状及防控措施 肠道健康是家禽高效生产、维持高存活率和生产优质产品的重要条件。在限用及禁用抗生素的后抗生素时代,畜禽肠道问题日益突出,尤其在我国家禽养殖环境条件不佳和饲料营养科学性欠缺的条件下,肠道疫病发生率居高不下,而解决家禽肠道健康问题需要多学科理论支撑下的综合技术措施。为此,美国科宝公司全球营养技术总监Steve Bolden、湖北省农业科学院畜牧兽医研究所邵华斌研究员、澳大利亚昆斯兰大学Wayne L. Bryden 教授、澳大利亚南澳研究和发展研究所Valeria A. Torok 博士、加拿大农业与食品科学研究中心Joshua Gong 博士、中国农业大学呙于明教授、美国加州大学戴维斯分校Krik C.Klasing 教授、美国北卡罗来纳州立大学Peter R.Ferket 教授、希腊亚里士多德大学Ilias Giannenas博士及西班牙IRTA 研究中心Joaquim Brufau 研究员分别围绕肠家禽道健康现状、产业发展对肠道健康技术的需求及解决肠道健康的营养技术措施等进行深入探讨。 在每个半天的学术报告之后,大会主办方安排了报告专家、企业技术代表和参会人员的互动环节,利用微信墙实现与会者与专家间的高效互动。本次大会的特邀报告专家均长期从事家禽营养与肠道健康研究,并在该领域享有盛名,使得参会者人数超出预期,并在整个会议期间人数未减少,并积极参与互动,同时也对部分专家的观点提出质疑,如此高质量、“干货”多的会议国内也不多见。 一、我国家禽肠道细菌病流行及防控现状 邵华斌研究员认为我国家禽肠道细菌病具有如下的特征:①我国家禽细菌性病原种类复杂,不仅有常发肠道细菌病病原,如大肠杆菌、沙门菌、葡萄球菌等,新发的空肠弯曲菌、产气荚膜梭菌等肠道病原菌也时有发生,难以控制;②某些细菌毒力增强、致病性增强:病禽脑内细菌分离率升高,研究发现从禽类消化道、呼吸道分离到的致病株的毒力较以前增强;③细菌血清型分布广泛,同一地区细菌优势血清型增多:不同地区的优势血清型差异很大,在同一地区不同养殖场血清型相差也较大,甚至在同一鸡场同一鸡群也可以存在多个大肠杆菌血清型;④多病原混合感染普遍;⑤继发感染严重:禽流感、新城疫特别是禽白血病、鸡传

斑马鱼的胚胎发育与影响因素

鲁东大学生命科学学院学院20 10 -20 11 学年第二学期学院______________ 专业_____________ 年级________ 班________ 学号 _____________姓名______________ 密封线 学生须将文字写在此线以下 《发育生物学》课程论文 课程号:2522080

.关键词:斑马鱼;发育;葡萄糖;溶液浓度;温度;TCDD 一、斑马鱼简介 斑马鱼(zebra fish),又名蓝条鱼、花条鱼、斑马担尼鱼。 斑马鱼是一种常见的热带鱼。斑马鱼体型纤细,成体长3-4cm,对水质要求不高。孵出后约3个月达到性成熟,成熟鱼每隔几天可产卵一次。卵子体外受精,体外发育,胚胎发育同步且速度快,胚体透明。发育温度要求在25-31℃之间。斑马鱼由于个体小,养殖花费少,能大规模繁育,且具许多优点,吸引了众多研究者的注意。经过30多年的研究应用和系统发展,已有约20个斑马鱼品系,斑马鱼基因数据库里有相关 斑马鱼的资料可供查询和下载,方便了研究。斑马鱼的细胞标记技术、组织移植技术、突变技术、单倍体育种技术、转基因技术、基因活性抑制技术等已经成熟,且有数以千计的斑马鱼胚胎突变体,是研究胚胎发育分子机制的优良资源,有的还可做为人类疾病模型。斑马鱼已经成为最受重视的脊椎动物发育生物学模式之一,在其它学科上的利用也显示很大的潜力. 二、斑马鱼的发育过程 1〕卵子的发生 斑马鱼卵子发生过程中乱母细胞的发育是不同步的。在卵子发生早期,核内许多小核仁开始富集,其数目在接下来的时期中可以达到1500个,他们分布在和的外围和靠近内部核膜。 斑马鱼卵子发生过程一般分为5个时期,即StageⅠ-Ⅴ;有时也将StageⅡ和Ⅲ作为一个时期将卵子发生分为4个时期。各个时期的基本特征是: StageⅠ是原始滤泡生长阶段,乱母细胞没有卵黄,是一个有细胞质包围着升值滤泡的圆形球体。其染色体去浓缩并出现灯刷装 状表型,此时DNA高度延伸,形成一个具有典型形态学上的包含RNA和蛋白质的恻环。染色体的这一构型被认为有利于母源性基因的转录激活,其出现与斑马鱼卵母细胞中RNA合成的高速率是一致的。在这时期,卵母细胞和滤泡细胞的微小突起(microvilli)开始伸展并延伸到彼此的区域。一旦形成,这些连接包含粘附连接、细胞桥粒和间隙连接,它们可能与滤泡细胞和卵母细胞间的交流和卵母细胞附近小分子的吸收有关。同时,卵黄膜组分开始在滤泡细胞和卵母细胞之间富集;其他结构,如线粒体、高尔基体和内质网等富集,反映了产生大量产物的需要。 StageⅡ卵母细胞的特点是富集了大量蛋白质和油脂,对于卵子激

我是大医生——肠道健康自测汇总

我是大医生肠道健康自测汇总 《我是大医生》2014-4-1期《识大便观肠癌》 自测项目和题目1 自测是否有“无反应型便秘”及其严重程度 1、一天只吃1-2顿饭 2、肚子咕噜咕噜叫 3、基本上不怎么喝水 4、小腹经常鼓鼓的 5、没有便意 6、不服用泻药就无法排便 7、连续一年以上每天服用泻药 8、不想点办法完全不能排便 9、曾经使用过甘油灌肠 10、不排便,肚子胀时胃部有灼烧感? 自测结果解析 第5项是最重要的,它决定了是否患有无反应型便秘。没有便意就是无反应型便秘。除第5项外的其他项: 符合3项是轻度无反应型便秘 符合4项是中度无反应型便秘 符合5项及以上是重度无反应型便秘 解决办法:断食计划的疗法 备注 内容来自北京卫视《我是大医生》2014-4-1期《识大便观肠癌》 自测项目和题目1 关于肠道健康的测试 1.经常不吃早餐 2.喜欢吃高脂高热的“垃圾食品” 3.喜欢吃肉,不喜欢吃蔬菜 4.常常不吃米饭等主食 5.不怎么吃薯类、豆类、海藻类 6.不注意食品卫生(如经常吃快变质的食品,或者卫生条件差) 7.很少运动 8.精神压力大,容易紧张、烦躁 9.经常熬夜 10.容易便秘、蹲厕时间长 11.经常憋大便 12.经常腹泻

13.大便不健康(如:大便干硬,有恶臭,带粘血,深红色) 14.长期使用抗生素 15.减肥不当(如使用含泻药成分的通便排毒产品) 16.皮肤粗糙或脸色差 17.有口臭 18.经常放很臭的屁 19.经常不吃早餐 20.喜欢吃高脂高热的“垃圾食品” 21.喜欢吃肉,不喜欢吃蔬菜 22.常常不吃米饭等主食 23.不怎么吃薯类、豆类、海藻类 24.不注意食品卫生(如经常吃快变质的食品,或者卫生条件差) 25.很少运动 26.精神压力大,容易紧张、烦躁 27.经常熬夜 28.容易便秘、蹲厕时间长 29.经常憋大便 30.经常腹泻 31.大便不健康(如:大便干硬,有恶臭,带粘血,深红色) 32.长期使用抗生素 33.减肥不当(如使用含泻药成分的通便排毒产品) 34.皮肤粗糙或脸色差 35.有口臭 36.经常放很臭的屁 自测结果解析 0-4个“是”:恭喜您!您的肠胃状况很好!请保持好的生活习惯。 5-12个“是”:请注意了!您已经出现肠道问题了! 13个及以上“是”:您的肠胃问题已经相当严重了!请赶快采取措施! 如果不马上行动,您的肠道问题将越来越严重,肠道里的垃圾和毒素越来越多,身体抵抗力减弱,容易产生各种肠道问题和其他疾病,甚至出现肠癌等严重危险!平时注意调节饮食,注意休息和运动。同时每天坚持喝立健,增殖肠道益生菌,改善胃肠道功能,全面恢复肠道活力! 备注 这是本人在网上找的一套测试题的基础上修改的。 原文链接 自测项目和题目1 测测你的肠子还年轻吗?你是否: 1.喜欢吃肉,厌恶青菜?

肉鸡饲料便和消化道的健康

肉鸡肠道健康与饲料便控制 谢建华1 ,伍庆斌2 (广西参皇养殖集团有限公司,广西玉林市 537000) 摘 要:保持肠道功能的完整性,是提高肉鸡生产性能的关键因素。家禽具有特殊的消化生理特点,对肠道功能失调的反应较为敏感,日粮、疾病、环境和饲养管理等诸多因素都会影响肠道健康。近年来,饲料便问题给我国肉鸡生产造成了很大的经济损失,由于成因复杂,如何控制饲料便的发生成了养鸡行业共同面临的难题。本文就肉鸡肠道健康与饲料便产生的关联进行了阐述,并从改善肉鸡肠道健康的角度提出了控制饲料便的相应措施。 关键词:肉鸡生产;肠道健康;饲料便;综合措施 与哺乳动物相比,家禽的消化生理特点比较特殊。首先胃肠道大小相对于体重的比例较小,但胃液分泌能力及消化道酸度更强,食糜在消化道的停留时间也相对更长。其次,家禽小肠绒毛数目很多,上皮细胞更新率很快(一般48-96小时更新一次),对于炎症的反应很快(一般少于12小时,而哺乳动物需要3-4天),因此家禽对消化吸收功能失调的反应比哺乳动物更为敏感。 肉鸡拥有健康的肠道不仅可以提高饲料营养的消化吸收率,而且能够抵抗肠道致病菌的侵袭,减少因疾病死亡和并发症造成的经济损失,是鸡群发挥良好生产性能的关键因素。 近年来,我国两广地区每到高温高湿季节,黄羽肉鸡饲养过程中都会出现较严重的饲料便现象,给养鸡行业造成了很大的经济损失。所谓饲料便(或称过料症)是指因肠道消化或吸收问题而出现在粪便中的营养流失现象。肉鸡正常的粪便呈圆形、棕色,上部含有典型的白色尿酸盐,而饲料便粪便中含有未消化的饲料或玉米颗粒,或带有桔色或绿色粘液,粪便松软、难以成型。饲料便会导致肉鸡生长不良,出栏体重相对轻100-250克,料肉比提高0.1-0.3,群体均匀度差,有20-30%的鸡无法达到标准出栏重。调查发现,有多种因素会导致肉鸡饲料便的产生[1],但根本的原因还是肠道的完整性受到破坏。 1 影响肉鸡肠道完整性的因素 肠道是家禽机体组织与内腔环境之间的一道选择性屏障,日粮、病原体、环境和管理等许多因素会影响肉鸡肠道屏障功能的完整性,并由此降低饲料营养的利用和肉鸡生长性能的发挥。 1.1 病毒、细菌、寄生虫和饲料毒素 1.1.1 病毒 许多肠道疾病与病毒感染有关,包括轮状病毒、冠状病毒、肠病毒、呼肠孤病毒、腺病毒等。肠道病毒感染可以发生在肉鸡生长的任何阶段,但以幼禽为主[2],感染后会影响鸡群生长、饲料报酬和出栏均匀度[3]。 呼肠孤病毒(REO)感染在我国各地鸡场已经相当普遍,其病毒存在于鸡体的许多组织。小鸡感染呼肠孤病毒通常会导致死亡、病毒性关节炎、肠道疾病等,对生产性能的影响主要包括饲料转化率下降、慢性饲料便、出栏均匀度差,肉鸡销售困难[4]。临床上呼肠孤病毒通常与大肠杆菌、法氏囊病 171

肠道健康对家禽的重要性

肠道健康对家禽的重要性,你懂得吗? 冬季固然是禽呼吸道疾病的高发季节,但肠道性疾病如腹泻等的发病率也是很高的,故不得不慎防。禽的肠道是一个“微生态区”,在正常情况下,肠道菌群是处于一种动态平衡状态,对于机体具有很重要的生理作用。然而,当饲养管理+、营养水平、天气突变等各类应激因素作用于机体,则肠道内环境发生变化,菌群间的动态平衡被打破,致病菌得以滋生,有益菌受到抑制,肠道的吸收功能受阻,肠道负荷增重,肠道性疾病如消化不良、腹泻、肠炎等病症都会发生。 肠道就像一面筛,筛去杂物留下精品 每一只活禽为了维持机体的生理代谢以及生产性能,每天都要采食一定量的饲料,饲料的消化与营养的吸收主要依赖于胃肠道来完成。饲料到达肠道后,肠道便会将有用的营养吸收入血并运送到全身各个器官,剩下的废弃物随着肠道的蠕动被排出体外,完成整个营养吸收过程。但是养殖环境中的病原体无处不在,即使定期使用消毒剂进行消毒,也不可能做到彻底杀灭,所以病原体随时都有可能随着家禽的采食和饮水以及呼吸等活动进入体内,并吸附、定植并繁衍后代,等待时机侵入机体其他器官。其实进入体内的病原体不是进来就可以生存的,胃肠道内分泌的胃酸、溶菌酶以及消化液等都具有保护肠道的作用,能杀灭或降低病原体的活性,阻止病原体的粘附与定植。 肠道是机体特殊的功能性器官,即担任着供给全身营养的重任,又具有阻止肠腔内细菌、毒素等有害物质侵入体内的作用。所以肠道又像是一面筛,筛走进入肠道的废弃物和病原体,留下有用的养分,供自体吸收。 病原入侵机体犹如一场激烈的战争 俗话说“病从口入”,其实这仅是病原入侵的开始。病原体经口进入食道、胃、肠,在胃肠功能健全的情况下病原体会经过胃酸的杀灭作用、胆酸的降解作用、溶菌酶的溶解作用、sIgA的吸附作用、生物种群的竞争作用等等不利于入侵细菌生存作用的洗礼,然后才能穿过肠粘膜方可定植畅道并继续侵入其他组织。病原微生物侵入机体的过程就像是与肠道展开的一场激烈战争,不但要穿过枪林弹雨,还要保持自身的实力,为自己争得一片天下,方能生存下来。 如果肠道粘膜组织受损,分泌等功能减弱,就有可能伤及到肠道中相关的淋巴组织,从而降低了肠道的抗病力,为病原微生物的入侵减少了重重障碍,变相壮大了病原微生物的队伍,病原微生物便可趁机突破肠粘膜屏障发生移位,毒素也可进入血液分布到全身各个器官,发生肠源性的感染,甚至形成全身感染,因此人们已经认识到肠道保健对家禽保护的重要意义。 肠道保健就像是为筛子涂油打蜡,保证筛子不长锈、不断丝,与其连接的周围物体保持稳固关系。所以肠道保健主要以维护肠粘膜结构完整、提高生理功能为原则,培养肠道内共生菌群的竞争优势、促进肠道内分泌性免疫球蛋白sIgA的形成与分泌,创建一道完善的肠道屏障。因此肠道保健也成为家禽健康养殖的第一步。

斑马鱼性腺促熟及早期发育模式

年月日姓名:专业年级:同组者 科目:发育生物学实验题目:斑马鱼性腺促熟及早期发育模式 一【目的要求】 1、通过实验操作掌握斑马鱼性腺促熟和产卵调控技术 2、通过斑马鱼早期发育的观察,巩固对硬骨鱼胚胎发生的认识 二【实验材料】 (一)器材 培养缸、控温棒、解剖镜、显微镜 (二)试剂 经太阳晒过至少一天的自来水 (三)动物 斑马鱼(Danio sp.) 三【实验内容】 (一)亲鱼培育和性腺促熟 挑选体长大于4厘米的斑马鱼放养于鱼缸中,水温保持在28℃左右,放养数量根据鱼缸中水体体积而定,密度5尾\L左右。饲喂亲鱼用的饲料有活性饲料和配合饲料两种,直接购自于观赏鱼市场,要求每天投喂4次,及时清除残饵,隔天换水,快到繁殖季节时将雌雄分养,加强管理。 (三)繁殖 繁殖前一天中午,将雌雄合养于繁殖缸里,要求雌雄比例为2:1。由于斑马鱼有食卵的习性,为防止亲鱼吞噬鱼卵,可用网孔为2-3毫米的网将亲鱼限制在繁殖缸的上半部活动,以防止亲鱼吞吃鱼卵。一般次日凌晨到中午可以产卵和受精,受精卵便沉降于缸底,将繁殖后的亲鱼及时转移至别的培养缸中,吸取缸底受精卵,剔除异物以及眼观有白色小斑点、畸形异常卵。 (三)斑马鱼胚胎发育模式 孵化期间,培养用水温度控制在25-28℃,每天要及时清除败育卵,并换水1-2次。按时观察记录斑马鱼胚胎的早期发育过程,绘制斑马鱼的胚胎发育模式图。 1、受精卵:斑马鱼的卵呈圆球形,橙黄色、微透明,直径0.8-0.9 mm。在水中,受精卵卵膜(壳膜)迅速膨胀,出现透明的卵周隙,在壳膜上可以看到呈漏斗状的卵膜孔。 2、卵裂:卵子受精后,细胞质迅速向动物极流动,并集中形成帽状的胚盘。卵裂即在胚盘范围内进行,卵裂属于不全裂,盘状卵裂。第一次分裂为经裂,分裂沟自上而下,但不到达底部,结果分为两个相等的不完整分裂球。第二次分裂仍为经裂,分裂面与第一次垂直,仍是不完全分裂,于是分成大小相似的四个分裂球。第三次分裂亦为经裂,两个分裂面在第一次分裂面两侧,并与第一次分裂面平行,形成两排,每排四个,共八个分裂球。第四次分裂仍为经裂,两个分裂面在第二次分裂面的两侧,并与第二次分裂面平行,分裂为四排每排有四个分裂球,共形成十六个分裂球。第五次分裂,有经裂也有纬裂,分裂面己不整齐,分裂球大小也不一致。以后几次分裂,分裂球愈分愈小。 3、囊胚期:由于细胞不断分裂,数目增多,细胞体积逐渐变小,分裂球层次增加,同时在胚盘与卵黄之间产生一空腔,即为胚盘下腔,此时称囊胚期,又分为囊胚早期、中期和晚期,也称高囊胚、中囊胚和低囊胚。 4、原肠胚期:囊胚晚期后,细胞逐渐向植物半球下包,胚盘变扁,开始进入原肠期。当胚盘下包到卵黄的一半时,胚环最大,背唇呈新月状,此即胚盾开始,即原肠早期。胚盘继续下包到胚胎的三分之二时,由于细胞不断集中于胚环的一处,致使该处呈一盾状隆起即

肠道健康的重要性

保持肠道健康至关重要 肠道是人体内最大的微生态环境,肠道生态的正常或失调,对人体的健康和寿命有着举足轻重的影响。 婴儿出生一两天内,细菌便乘机进入体内,并在婴儿肠道内“安家落户”,成为人体终生“伴侣”。在婴儿时期,由于食物相对单一,婴 儿肠道内拥有庞大的有益菌群,其中最显著的是双歧杆菌的有益菌群。婴儿开始添加辅食后,肠道中菌群将逐渐发生变化,随着食物的多样化以及人类活动能力的提升,肠道中有益菌群的数量开始慢慢减少,有害菌的数量则日益增加。人体肠道中的生态平衡开始逐渐形成。到青年阶段后,肠道中庞大的菌群(有益菌、有害菌、中性菌)之间已经形成相对依存、相互制约的关系、并处于相对平衡的状态,肠道中维护人体健康的天然防线完全形成。 随着年龄的不断增长,肠道中的有益菌群就会不断地减少,肠道生态的平衡便被打破,种种相应的疾病将接踵而至。而当生命趋于终结时,肠道的有益菌群将消耗殆尽,因此我们应该注重维护肠道生态的平衡,重视肠道中那“微不足道”的有益菌。 肠道内有益菌群的作用很大,它能帮助人体合成B族维生素、维生素K、叶酸等难以通过食物补充的人体必需的维生素;人体肠道中重要的有益菌—双歧杆菌的增殖,不仅能抑制有害菌的生长,维护肠道生态的平衡,而且双歧杆菌在繁殖时能分泌有机酸,有机酸一方面能刺激肠道的蠕动,增加肠道的排便能力,另一方面能促进营养成分在身体中的吸收。而且双歧杆菌在肠道中的增加,能协助增强机体的防御能力,从而

间接提升人体的免疫能力。 肠道老化可危及健康与生命 肠道内微生态环境对人体键康至关重要,科学家经过多年的实验,最终提出了“肠道年龄”的新概念。所谓肠道年龄,实际上就是随着生理年龄的增长,肠道内菌群势力分布变化的阶段反映,并作为一种反映体质状况的健康数据。通过肠道菌群之间的平衡度,人们可判断肠道是否有老化现象。 一些人因工作紧张繁忙,经常参加酒宴应酬,过重的精神压力而产生焦虑,抑制等情绪,导致身体内分泌系统功能失调,肠道生理功能紊乱,使肠道内微生物环境失去平衡,进而造成肠道老化。科学研究证明,当肠道生态出现失衡,肠道吸收功能及排泄功能将受到影响,从而影响到人体营养的吸收和毒素排出,容易造成多种疾病的产生,最终影响人类寿命。 如何让肠道“青春永驻” 1、保持适度的运动锻炼,有利于促进肠道蠕动,加速排出粪便,减少肠道中毒素的累积,防止肠道本身的老化。 2、保持愉悦的情绪。肠道是人的“第二大脑”,学会调控和驾驭自己的情绪,保持一颗淡泊宁静的平常心,对维护肠道内环境稳定大有裨益。 3、合理用药,避免抗生素的滥用。在用药的同时注重对肠道的保护,将有利于保持肠道微生态平衡。 4、关注膳食结构的平衡与合理,保持合理的膳食,使营养素的摄

斑马鱼胚胎发育过程中Mef2c的表达

万方数据

复旦学报(医学版)2006年1月,33(1) 脏的发生与发育过程中的作用提供依据。 材料和方法 斑马鱼胚胎固定收集不同发育时期的AB野 生型斑马鱼(购自俄勒冈大学,斑马鱼养殖系统从美国AquaticHabitats公司引进)胚胎:6hpf(hourspost—fertilization,受精后6h)、7、8、9、10、11、12、13、15、17、20、24、36、48hpf,用4%多聚甲醛溶液固定过夜(至少固定12h),保存于甲醇溶液中,置一20℃备用。 引物设计与合成首先根据Genbank数据库查得斑马鱼Mef2ccDNA序列(Genbank:30575),以包含密码子1319~2385位的基因序列为RNA探针序列,探针序列总长1066bp。RNA探针的引物序列(由上海赛百盛生物有限公司合成)为:For—ward:5'-CTCAAATACGGAAAAGCTAC一3 7Reverse:5'-CGCCCGTGGGACTGATGA GAG一3 7。 PCR扩增以斑马鱼基因组总DNA为模板,用以上两条引物特异扩增RNA探针序列。扩增条件为:95℃预变性2min,95℃变性45S,57℃复性45S,72℃延伸2min,重复30个循环,最后72℃延伸7min。1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。 合成反义RNA探针将纯化的扩增产物连接到pGEM—T载体(Promega)中,然后转化到DH5a感受态菌株(博大泰克)中进行克隆。根据Harland的方法[43抽提转染后的连接载体质粒(测序验证质粒中插入序列是否正确),NotI内切酶(NEB)酶切完全,以其为模板转录合成反义RNA探针。 整体原位杂交取不同发育时期的胚胎,用1×PBST溶液洗去多余的甲醇溶液,将胚胎置于65℃水浴进行预杂交3h,然后加入所合成的反义RNA探针65℃水浴杂交过夜。多余的探针用0.2×SSC溶液洗去,加入anti—Dig—AP(Roche)与反义RNA探针结合过夜。未结合的抗体用1XPBST溶液洗去,再加入BCIP/NBT/NTMT溶液显色30min,迅速用1XPBST溶液洗去多余的显色液,在显微镜下观察并记录结果。 结果 探针合成效果琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,本实验中设计的引物能够特异性地扩增目标基因片段。图1A为特异扩增的RNA探针序列电泳检测结果,扩增的RNA探针序列大小约1066bp。图1B为酶切后电泳迁移率的改变,2、3泳道是未被酶切的质粒序列,4、5泳道是酶切后的质粒序列。酶切后质粒电泳速率要比未酶切质粒的速率要快。同时,我们将该序列测序后进一步验证(由上海赛百盛生物有限公司测序),连接至pGEM—T载体中的RNA探针的序列是正确的。 图l凝胶分析PCR结果(A)和质粒酶切结果(B)Fig1GelanalysisPCR(A)andplasmid(B) A:1:marker;2-5;RNAprobe.B:1:marker;2-3:Mef2cRNA—pGEMT; 4-5:Mef2cRNA-pGEMTcutbyNot-1 斑马鱼整体原位杂交在斑马鱼胚胎发育早期,Mef2c在胚体中没有自身的转录产物,仅少许从母体自带的Mef2cmRNA存在,胚体染色呈现为弥散均染状态(图2:a,b见封二)。当胚胎逐步发育到13hpf,Mef2c在体节中开始表达,此时约已形成8个体节,表现为在背侧出现两条条带状的深染部位;同时,在心脏中的表达也开始出现,在靠近头侧部出现有深染的片状区域,代表早期的生心区的细胞中有Mef2c表达(图2:cl,c2见封二)。当胚胎发育至15hpf时,体节以及心脏中Mef2c的表达更加明显,Mef2c在体节的表达表现为各个体节之间能清晰区分,并表现为典型的V型结构;同时,心脏中的表达表现为生心区细胞开始集中,逐步靠近体轴开始形成心管结构,体现出染色更为集中,由片状染色转变成为线状(图2:dl,d2见封二)。随着胚胎进一步发育,体节逐步完善,心管逐步形成,Mef2c仍然保持较高的转录水平,体节中表现为随着体节的增多,V型染色的体节也随之增多;在心脏的表达呈现出明显的线管状结构(图2:e,f见封 --)。斑马鱼的胚胎发育随着时间的进展而逐步完 万方数据

斑马鱼性腺促熟及早期发育模式

斑马鱼性腺促熟和早期发育模式 XXX,YYY,ZZZ 一、目的与要求: 1、掌握斑马鱼性腺促熟和产卵调控技术。 2、加深硬骨鱼早期形态发育模式的理解。 二、实验内容: (一)斑马鱼性腺促熟和产卵调控。 1、斑马鱼特性: 斑马鱼一般4月龄性成熟,5月龄鱼繁殖较好;繁殖周期短,一般7天左右。 雌雄分辨:雌性(偏银灰色,体形丰满,腹部膨大、松软,仰腹可见有明显的卵巢轮廓,手摸富有弹性);雄性(偏柠檬色,腹部扁平,身材显得修长)。【如图一、图二】 图一:雄鱼图二:雌鱼 精、卵体外受精,体外发育,且速度快。发育速度与温度密切相关:在25℃的培养条件下,从受精卵到孵化约需36h;在28℃的培养条件下,从受精卵到孵化约需24h,即胚胎发育成熟。 2、斑马鱼繁殖准备: 将亲鱼雌、雄分开饲喂2~3天(要在饲养箱中加一玻璃隔板,将雌、雄分开,但同时相互之间又要能够看到),繁殖时将雌、雄按1:1或2∶1比例放入产卵池中进行产卵受精。在此过程中一般采用10h光照,14h黑暗的光周期。斑马鱼一般在混合的次日凌晨产卵,为防止亲鱼吞噬鱼卵,可用网孔2~3mm的网将亲鱼限制在产卵池的上半部活动,以防止亲鱼吞吃鱼卵。每条雌鱼可产卵300~1000粒。 (二)斑马鱼早期发育观察: 斑马鱼早期胚胎发育主要有以下七个时期(附有相应的时间): (1)合子期Zygote Period(0-0.75h) (2)卵裂期Cleavage Period(0.75-2.2h) (3)囊胚期Blastula Period(2.25-5.25h) (4)原肠胚期Gastrula Period(5.3-10h) (5)体节期Segmentation Period(10-24h) (6)咽期Pharyngula Period(24-48h) (7)孵化期Hatching Period(48-72h)

改善肉鸡肠道健康的方法

改善肉鸡肠道健康的方法 肉鸡肠道健康是一项复杂的系统工程,肠道微生物菌群的优化对肉鸡的肠道健康至关重要。 肉鸡肠道的不同部位都有特有的微生物区系,其微生物菌群组成的失调会导致动物生产性能的下降。当鸡群肠道健康出现异常时,肠道作为一个重要的免疫器官的作用被削弱,鸡群对各种病源的抵御能力下降,严重影响肉鸡增重、饲料报酬和成活率等反映生产性能的经济指标。 改善肉鸡肠道健康是一项复杂的系统工程,肠道微生物菌群的优化对于肉鸡的肠道健康和机体的健康极其重要。在肉鸡集约化生产中,为肉鸡创造一个舒适的生长环境,提供营养平衡和科学加工的肉鸡日粮,以全视角改善动物肠道健康的理念,通过优化选择包含有蛋白酶、淀粉酶等饲料酶在内的复合酶制剂、益生元和益生菌制剂、植物精油、天然甜菜碱和酸化剂等功能性添加剂,并以科学的方法组合应用,是在集约化条件下让肉鸡发挥最佳生产性能的有效保障。 日粮养分构成对肠道菌群的影响 合理的日粮具有改善肠道完整性的作用,优质的饲料原料含有的较少抗原,较少的抗营养因子,有助于维护肠道健康。日粮中蛋白因各种原因导致的在小肠部位无法有效消化和吸收时,肠道后端的食糜富营养化时,导致后肠部分的条件性致病菌尤如大肠杆菌、产气荚膜梭菌大量增殖,破坏肠道原有相对平衡的菌群生态。另外也有研究结果表明,日粮的物理形态和营养构成会影响鸡的肠道微生物菌群的区系和小肠上皮细胞的完整性。 因此,需根据肉鸡在不同的饲养阶段及不同的日粮结构,针对性的在饲料中添加能提高饲料中养分消化率的饲料用酶,如非淀粉多糖酶,可以降低非淀粉多糖作为抗营养因子的负面影响,蛋白酶可以提高蛋白消化和利用效率,淀粉酶提高植物原料中淀粉的利用效率。当在饲料饲喂以玉米为谷物类原料的肉鸡饲料饲喂时,其肉鸡鸡群发生坏死性肠炎的发生率及发病程度,远远低于饲喂含有以小麦、大麦、DDGS和其他谷物加工副产品的日粮。这类原料能引起肠道内的食糜粘度提高、养分消化效率的下降,在这类日粮中添加非淀粉多糖酶能减少坏死性肠炎的发生率。 复合酶产品中包括了蛋白酶、木聚糖酶、淀粉酶和葡聚糖酶在内的饲料酶,能有效提升包括蛋白、氨基酸、淀粉、脂肪、纤维、矿物质等在内的消化吸收效率,降低麦类及谷物加工副产品原料对肠道微生物区系的变化的负面影响,因此,在很大程度上日粮构成在一定程度上影响了肠道微生物区系的组成。益生菌和益生素产品的科学选用对于肠道菌群控制和肠道发育具有积极作用。 科学合理的优选饲料用酶、益生菌和益生素 饲料中使用酶制剂不仅具有提高肉鸡对养分利用效率的功效,同时也可以改善肉鸡肠道健康,内切性木聚糖酶将日粮中的木聚糖降解为低聚木糖,低聚木塘作为

补充益生元 改善肠道健康

补充益生元改善肠道健康越来越多的人了解到肠道健康的重要性,并通过改变不健康饮食习惯,调整自己的肠胃健康。但据调查,“不运动”仍是许多人的常态,尤其是办公室人群。而“不运动”这一项,恰恰也是决定人们肠道健康状态的关键因素之一。 不锻炼让多数人“饭后不舒服” 与肠道息息相关的因素,除了饮食之外,运动也是影响肠道健康的关键因素,而这一因素被很多人忽略。 立健肠道专家介绍,长时间坐在电脑前,缺乏运动会让肠道老化。许多白领、宅男、宅女,通常都是便秘和皮肤粗糙的高发人群。因为不走路、不运动会让肠道蠕动变慢,加重肠道毒素排出的负担,让有害物质长时间残留在体内,造成肠道老化。

这一点在媒体的调查中得到了印证。媒体调查发现,近七成网友表示自己平时“每天坐8小时,从不锻炼”或“除了走路,没有锻炼”。而这一选择带来的后果则是,近六成参与调查者表示,饭后肠胃会出现“经常腹胀、打嗝,感觉不舒服”和“偶尔不舒服”的情况。并且,有五成多参与调查的人表示“面色不正常”,会出现“面色不佳、尤显苍老”的情况,有的甚至“脸色蜡黄”。 排便问题成为多数人的困扰 肠道是否健康,除了会反映在面色之外,还有一个更为直接的指征,那就是一个人的排便情况。 如今餐桌上的食物越来越精致,但体力活动量却越来越小,这些都使便秘成了越来越多现代人的难言之隐。便秘不仅严重影响生活质量,增加精神烦恼,而且还与部分肛肠疾病(如痔疮、肛裂)有关,在结肠癌、肝性脑病、乳腺疾病和老年痴呆等疾病的发生中,便秘也有很大影响。尤为严重的是,在患有基础疾病的情况下,便秘还是急性心肌梗死、中风等症的常见诱发因素之一。 据了解,多数健康人排便习惯多为每天1-2次或每1-2天1次,粪便多为成型或软便;少数健康人排便次数可达每天3次或每3天1次,粪便半成型或呈腊肠样硬变。排便间隔时间太长(超过3天),或粪便太硬并伴有排便困难,就是便秘了。 调查发现,排便方面有困扰的人越来越多。在排便规律方面,仅一半参与调查人群表示可以每天定时排便,其他人则表示“排便时间无法固定”或“三四天便一次”。此外,近四成参与调查者表示排便“有困难”。

三种不同益生元改善肠道健康作用比较研究

Hans Journal of Food and Nutrition Science 食品与营养科学, 2018, 7(2), 145-151 Published Online May 2018 in Hans. https://www.doczj.com/doc/b119026551.html,/journal/hjfns https://https://www.doczj.com/doc/b119026551.html,/10.12677/hjfns.2018.72017 Comparative Studies of Three Different Prebiotics on Intestinal Health Hongwei Hao, Rui Ma, Shijie Wang, Hong Zhu* Shijiazhuang Junlebao Dairy Industry Co. Ltd., Shijiazhuang Hebei Received: May 13th, 2018; accepted: May 22nd, 2018; published: May 29th, 2018 Abstract Objective: To compare three different prebiotics on intestinal health. Methods: To evaluate intes-tinal condition by “Assessment Questionnaire on Intestinal Microenvironment Change” with 30 volunteers. There are three groups: the first group of natural inulin P90; the second group of iso-maltooligosaccharide and the third group is compound of galactooligosaccharides and isomaltoo-ligosaccharide, three groups for 14 days. Results: The three prebiotics have different degrees of the role on intestinal health, especially the second group on the key indicators of stool frequency have significant difference (P< 0.05). Conclusion: Isomaltooligosaccharide is the best effect to im-prove intestinal health. Keywords Prebiotics, Intestinal Health, Defecation 三种不同益生元改善肠道健康作用比较研究 郝红伟,马蕊,王世杰,朱宏* 石家庄君乐宝乳业有限公司,河北石家庄 收稿日期:2018年5月13日;录用日期:2018年5月22日;发布日期:2018年5月29日 摘要 目的:对三种不同益生元的肠道健康作用进行比较。方法:应用“肠道改善表观评价调查表”对30名合格志愿者的肠道状况进行评价,试验共设三个试饮组:第一组天然菊粉P90试饮组、第二组低聚异麦芽*通讯作者。

ptges3a基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达

文章编号:1000 5404(2011)04 0389 03 论著 ptges3a 基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达 韩勇军,吴新荣 (510010广州,广州军区广州总医院药剂科) [摘要] 目的 克隆斑马鱼前列腺素E 合酶3a(pro stag land i n E synthase 3a ,pt ges3a)基因,研究其在斑马鱼胚胎早期 发育中的表达情况。方法 提取斑马鱼胚胎的总RNA,制备D I G 标记的ptges3a RNA 反义探针,整胚原位杂交研究ptges3a 在斑马鱼胚胎早期发育过程的表达。结果 ptges3a 在sh i e l d 期前普遍性表达,10体节期在后脑神经龙骨处有特异性表达,18体节期在后脑有特异性表达,在26hpf 时期头部表达较多,并且在肾小管有特异性表达,36hpf ptges3a 在头部较高表达。结论 ptges3a 可能参与了脑部发育和肾小管形成。 [关键词] 斑马鱼;前列腺素E 合成酶;胚胎发育 [中图法分类号] R 321;R345;R 394.2[文献标志码] A [通信作者] 吴新荣,E m a i :l gzwxrong @y a hoo .co m Expression of ptges3a duri ng early develop m ent in zebrafi sh H an Yong j u n,W u X i n rong (D epart m ent of Phar m acy ,G uang zhou G eneral H o spita l o f G uang zhou M ilita ry Co mm and ,G uangzhou ,G uangdong P rov i nce ,510010,Ch i na) [Abstract ] Obj e cti v e To clone prostag land i n E synthase 3a (ptges3a)gene and investigate its te m pora l and spati a l expression pattern i n zebrafish duri n g earl y deve l o pm en.t Methods The to ta l RNA of different phases of zebrafish e m br yos w as ex tracted .D igox i n labe led RNA probe o f ptges3a w as prepared .W ho le e mbryo m ount in situ hybridization w as e mp loyed to investi g ate the expressi o n patter n of ptges3a during zebrafish e mbryogenesis .Results ptges3a transcri p t w as d istri b uted ub i q u itously before sh ield stage .A t 10 so m ite there w ere detectab le expression o f ptges3a gene in the hindbra i n neural kee,l and at 18 so m ite it w as expressed in the h i n dbra i n .Fro m 26to 36h after post fertilizati o n (hp f),h i g h expressi o n o f ptges3a w as found i n the brai n .ptges3a w as a lso detectab le i n the rena l tubule at 26hp.f C onclusi o n The expression patter n of ptges3a during zebrafish e m bryogenesis suggests that it m ay be critical for the developm ent of bra i n and rena l t u bule .Further i n vestigation on the functi o n of ptges3a is needed . [Key words ] zebrafish;prostaglandin E synthase 3a ;e m bryonic developm ent C orrespond i ng au t hor :W u Xi n rong ,E m ai:l gz w xrong @yahoo .co m 前列腺素(prostag land i n ,PG )E 2是一种重要的前列腺素类物质,参与机体多种生理及病理过程,前列腺素E 合成酶(prostaglandin E synthase 3,ptges3)是PGH 2转化为PGE 2过程中的重要终端限速酶。多项研究[1-3] 结果显示,ptges3在结肠癌、肺癌、头颈部肿瘤、乳腺癌和胃癌中过表达,且与肿瘤的发生、发展密切相关。缺失ptges3的小鼠可以消除炎症,类似于非甾体抗炎药(non steroida l anti i n fla mm atory drug ,NSA I D )作 用的效果[4] ,动脉粥样硬化患者的巨噬细胞中ptges3 有高表达,可诱导血小板破裂[5] 。ptges3可能成为用于治疗疾病和筛选药物的潜在靶点。斑马鱼是近几十年出现的新型模式生物,它有许多优点:个体小、喂养费用便宜;早期胚胎透明,易于观察和操作;产卵多,繁殖周期短。通过序列比对和进化树分析发现斑马鱼ptges3a 与小鼠、人的ptges3具有高度同源性。整胚原 位杂交技术是研究斑马鱼发育相关基因的功能和表达 模式的一种重要手段。本研究通过整胚原位杂交方法分析了ptges3a mRNA 在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达情况,为深入研究这一基因的功能提供基础依据。1 材料与方法1.1 材料 斑马鱼Tubingen 野生型,总RNA 提取试剂盒RNA queous 4PCR K it(Amb i on 公司),PCR 引物由上海生工生物工程有限公司合成,琼脂糖凝胶DNA 回收试剂盒、大肠杆菌DH 5 感受态细胞、普通质粒小提取试剂盒(T i angen 公司),T 4DNA 连接酶、p GM T easy 载体、D IG RNA L abe li ng M i x (R oche 公司),SP 6RNA Po l ym erase(P ro m ega 公司),限制性内切酶Ap a 、Ex T aq 聚合酶(T a K aRA 公司),A nti D i gox i g en i n A P 、染色剂:NBT 和BC I P (R oche 公司)。 1.2 方法 1.2.1 人、小鼠和斑马鱼的ptges3基因进化树分析 从生物技术信息网页(http ://www .ncb.i nl m .n i h .gov /guide /)获取 389 第33卷第4期 2011年2月28日 第 三 军 医 大 学 学 报ACTA ACADEM I AE M EDIC I NAE M ILI TARIS TERTI AE V o.l 33,No .4 Feb .28 2011

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