牛奶中的天然活性营养——乳铁蛋白
你知道乳铁蛋白有什么好处吗？它在巴氏鲜奶中的含量是常温奶的1800倍！
现在市面上的牛奶按品类分主要有两种牛奶，一种是巴氏鲜奶，一种是常温奶（也称纯牛奶）。也许是因为对巴氏鲜奶还不够了解，在中国很大一部分人仍会选择常温奶。那么，到底什么是巴氏鲜奶？它和常温奶又有什么不同呢？
巴氏鲜奶即采用巴氏保鲜工艺加工的牛奶，由于低热加工、全程冷链，巴氏鲜奶最大限度地保留了牛奶中的天然活性营养。而常温奶是采用超高温工艺加工的牛奶，高强度的热处理破坏了牛奶的营养成份，导致乳中珍贵的天然活性营养几乎无存。
以牛奶中最具代表性的一种天然活性营养——乳铁蛋白为例，乳铁蛋白是提升免疫力的重要成分，但它惧怕高温，加热程度越深，损失就越多。乳品专家经过多年测试得出结论：以科学、低热工艺加工的巴氏鲜奶，其乳铁蛋白含量是常温奶的1800倍。常温奶以超高温的加工方式把它破坏掉简直是暴殄天物。
也就是说，喝一杯巴氏鲜奶，光是乳铁蛋白给健康带来的益处就等于1800杯常温奶。当然，对于不同的人群，乳铁蛋白的作用也是不同的。
对于孕产妇来说，乳铁蛋白可以提高其抵抗力，有效预防孕产妇在孕期、哺乳期内细菌、病毒的感染。促进孕产妇对铁的吸收，预防孕产妇贫血。
临床试验证明，对于缺铁性贫血者而言，铁与乳铁蛋白结合后吸收率是单纯补铁的4倍。缺铁性贫血者在补铁时配合摄入乳铁蛋白，可达到减少铁制剂摄入量，增强补铁效果的作用。同时，乳铁蛋白的摄入，可明显缓解铁对肠道的刺激。
而体弱多病者大多抵抗力低下。对于大多数免疫力低下者，乳铁蛋白能够帮助他们激发、建立、修复、完善免疫系统，增强其抗病能力。
孩子是祖国的未来。对于幼儿来说，乳铁蛋白可帮助其抵抗细菌、病毒等有害微生物的侵害，预防病毒引起的呼吸道感染及腹泻等幼儿常见疾病。
乳铁蛋白还具有抗菌、抗病毒的作用，能阻止肠癌细胞扩散，抑制肠癌发生。乳铁蛋白之所以能起到这种作用，是因为它可以阻断肿瘤细胞中一种特有的脂质成分合成，从而抑制癌细胞生长和发展。这种蛋白还可以降解为具有增强免疫机能和抗癌作用的生物活性肽。此外，对于巴氏鲜奶来说，其中含有的多种能增强人体抗病能力的活性免疫球蛋白抗体，也有防癌作用。
乳铁蛋白临床文献 乳铁蛋白的结构、功能和应用（墨西哥奇瓦瓦大学化工科学院） 乳铁蛋白（LF）是一种分子量为80 kDa的铁结合糖蛋白，属于转铁蛋白家族的一员，存在于多种体液组织中，也是哺乳动物体内免疫系统的重要组成部分。乳铁蛋白对机体的预防作用表现在多个方面，首先是直接抑制多种微生物活性，如细菌、病毒、真菌以及寄生虫等；还包括抗炎症以及防癌等功效。乳铁蛋白这些生理活性功能的发挥不仅仅是因为其具有结合铁的能力，也在于他能影响宿主或病菌体内某些重要化学成分的分子机制。本文综述了乳铁蛋白的抑菌机理、临床应用以及外源表达情况。 乳铁蛋白的营养学作用 （美国加利福尼亚大学营养学系）L?nnerdal, Bo 一直以来，膳食中乳铁蛋白的来源主要是母乳中的人乳铁蛋白。目前，通过现代技术从牛奶中分离的牛乳铁蛋白，以及利用基因工程技术获得的重组人乳铁蛋白都已经商业化，且可以作为保健成分添加到食品和临床产品中。本文主要阐述了膳食乳铁蛋白的生理功能。研究发现通过膳食摄入的乳铁蛋白在人体肠道中具有抗菌、抗病毒的功能，这些功能的实现一方面通过乳铁蛋白直接作用于病原菌，另一方面可能通过影响肠道粘膜的免疫功能而实现。通过受体结合被摄入细胞的乳铁蛋白主要通过影响肠道粘膜的免疫功能方式发挥作用，它也能影响细胞内的基因转录。乳铁蛋白一直都被认为能改善婴儿和孕妇的铁缺乏状况，这有可能是通过受体调节的方式实现。此外乳铁蛋白也可以促进肠细胞的增殖和分化，使肠粘膜组织变大从而加强营养的吸收能力。 乳铁蛋白对正常生长新生儿的作用 Artym J, Zimecki M. 初乳及乳汁中，除了含有各种营养成分外，还含有对婴儿生长发育至关重要的各种蛋白质。乳铁蛋白属于铁结合蛋白质家族中的一员，有广泛的抗菌及亲免疫特性。与乳汁当中的其他蛋白质（比如，酪蛋白）相比，乳铁蛋白（LF）能够有效抵抗在消化道内的降解。另外，乳铁蛋白衍生肽还具有很强的抗病毒活性。LF通过结合定位于肠道刷状缘细胞的特异性受体而吸收。口服LF不仅可以刺激局部免疫反应，还可以刺激全身免疫反应。LF在营养素的吸收方面也起着重要作用，它能运载金属离子如铁、锰、锌，并促进糖的吸收。LF还可以刺激肠道内皮细胞的增殖以及肠相关淋巴滤泡的生长，因此，LF可以有效应用于早产儿及肠粘膜损伤病人。LF能够维持正常肠道菌群，从而抑制病原菌的生长，促进非致病性乳酸杆菌及双歧杆菌的增殖。人工喂养新生儿易发展有害微生物（肠球菌、肠杆菌属、类杆菌属、埃希氏菌属）。非致病微生物可以确保肠道低PH值，合成一些维生素，增加NK细胞、淋巴细胞、巨噬细胞的活性，促进保护性免疫蛋白的生成，降低变态反应的风险。大量小鼠实验研究表明，LF是菌血症和内毒素血症的保护因子，这种蛋白质能够刺激网状内皮系统细胞的活性，刺激骨髓组织生成，从而增强对细菌的杀伤和清除作用。对内毒素血症实验模型的研究表明，LF能抑制前炎症细胞因子（一氧化氮和活性氧）的活性。LF能够促进未成熟T、B细胞的分化，增加NK和LAK细胞的活性。LF还能抑制活性氧自由基的毒害作用，这种特性对于含矿物质铁的改良奶粉等婴幼儿食品至关重要，因为这些婴幼儿食品可能是有害自由基的一种来源。总的来说，天然母乳对新生儿而言是最有价值的食物，在人工喂养婴幼儿的
乳铁蛋白(lactoferrin，LF)是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白 新西兰NBL天然营养食品有限公司，与新西兰设备最先进、技术和科研最完备的新西兰GMP大药厂、新西兰恒天然集团Fonterra Co-operative Group建立了紧密的合作关系，我们对产品进行层层把关，严格按照GMP国际的生产管理标准生产，从而确保我们为广大消费者提供100%新西兰高品质的营养健康产品。 乳铁蛋白（Lactoferrin-LF）：来源主要是从乳清中提取。是一种具有高生物活性的免疫蛋白。 作用：1参与铁代谢，促进铁吸收 2 抗微生物功能3抗病毒作用4免疫调节和抗感染5抗肿瘤6抗氧化作用7作为细胞生长因子8婴儿配方粉9安全食品10奶制品11健康补充剂12功能性食品饮料13防腐剂14口腔维护（口香糖、牙膏15化妆品16食品成分 保健方面： 乳铁蛋白的保健功能包括： 1、抗微生物／抗病毒活性； 2、参与铁代谢； 3、消炎作用； 4、抗氧化功能； 5、抗辐射。 医药方面： 1、作为抗生素，治疗各种感染性疾病； 2、作为抗病毒剂，用于病毒性感染的防治； 3、抗真菌及抗寄生虫药； 4、作为免疫调节剂，应用于自身免疫性疾病、免疫低下或免疫耐受及肿瘤治疗的辅助用药； 5、作为抗肿瘤辅助药物，用于多种肿瘤的治疗； 6、作为补铁剂，用于贫血疾病的防治； 7、作为骨细胞生长因子； 8、其他医学应用：乳铁蛋白在医学方面的应用非常广泛，可用于各 种感染、高血压、冠心病、肿瘤及一些与应激性有关的疾病的预 防和治疗。 ?化妆品中的运用：最新研究发现，乳铁蛋白对青少年的青春痘、粉刺等问题有改善效果。另外，乳铁蛋白还可作为一种抗氧化剂，用于美容保健方面。 ?首先，利用乳铁蛋白的抗微生物活性，作为化妆品的天然防腐剂，抑制有害微生物生长，同时也增强使用者对微生物的抗感染力； ?其次，利用乳铁蛋白具有的抗氧化功能，用于增强化妆品的抗衰老功效。 1孕产妇：孕产妇补充乳铁蛋白，可以提高其抵抗力，有效预防或治疗孕期、哺乳期的细菌、病毒性感染；同时，促进铁吸收，预防孕产妇贫血。 2非母乳喂养、混合喂养的婴幼儿 乳铁蛋白是母乳中的核心免疫蛋白，能帮助婴幼儿抵抗细菌、病毒等有害微生物，预防病毒引起的呼吸道感染及腹泻等婴儿常见疾病；同时还可以促进婴儿的生长发育和增强造血功能，为婴儿构筑起健康成长的第一道防线，“吃母乳的宝宝少生病”正是这个道理。 3缺铁性贫血者 乳铁蛋白能高效促进铁吸收，临床试验证明，铁与乳铁蛋白结合后吸收率是单纯补铁的4倍。缺铁性贫血者在补铁时配合摄入乳铁蛋白，可达到减少铁制剂摄入量，增强补铁效果的作用，同时，由于乳铁蛋白的摄入，还可以明显缓解铁对肠道的刺激。 4免疫力低下者 体弱多病者大多抵抗力低下，乳铁蛋白能够帮助他们激发、建立、修复、完善免疫系统，增强抗病能力 在普通奶粉奶中乳铁蛋白含量很少，只要在一些进口高档奶粉和新兴品牌中才添加乳铁蛋白，一般添加量只有30-50mg/100g，只有极少数的进口高端奶粉添加量达到100毫克。 如果一个宝宝每天吃100克奶粉（大约600ml奶液），按添加量最大的奶粉计，也仅仅摄入了100mg
牛奶中部分成分的分析 1.实验目的 1.1设计合适的实验方法来分析牛奶中蛋白质与钙的含量 1.2学习利用等电点沉淀法从牛奶中制备酪蛋白 1.3熟悉可见光分光光度计的操作。 1.4加强对沉淀、抽滤、溶液配制等基本操作的锻炼。 1.5掌握双缩脲法测定蛋白质的原理和方法。 1.6掌握配位滴定法测定液体食品中钙含量的原理和方法。 1.7通过与牛奶包装上注明的含量比较，学会对自己实验分析结果进行客观评价。 2. 实验原理 牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g·L-1。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。 双缩脲(NH2CONHCONH2)在碱性溶液中与硫酸铜反应生成紫红色化合物，称为双缩脲反应，蛋白质分子中含有许多肽键在碱性溶液中也能与Cu2+反应产生紫红色化合物。在一定范围内，其颜色的深浅与蛋白质浓度成正比。因此，可以利用比色法测定蛋白质浓度。双缩脲法是测定蛋白质浓度的常用方法之一。操作简便、迅速、受蛋白质种类性质的影响较小，但灵敏度较差，而且特异性不高。除-CONH-有此反应外，-CONH2、-CH2NH2、-CS-NH2等基团也有此反应。 钙与身体健康息息相关，钙除成骨以支撑身体外，还参与人体的代谢活动，它是细胞的主要阳离子，还是人体最活跃的元素之一，缺钙可导致儿童佝偻病，青少年发育迟缓，孕妇高血压，老年人的骨质疏松症。缺钙还可引起神经病，糖尿病，外伤流血不止等多种过敏性疾病。补钙越来越被人们所重视。牛奶中含有易被人体吸收得钙，有些牛奶产品中还特地加钙而成为钙奶。对于液体牛奶中钙的含量，可采用EDTA法进行直接测定。考虑到牛奶中含有Fe3+、Al3+等干扰离子，可以加入少量三乙醇胺以消除它们的，调节pH≈12～13，以铬蓝黑R作指示剂，指示剂与钙生成红色的络合物，当用EDTA 滴定至计量点时，游离出指示剂，溶液呈现蓝色。 3. 实验步骤
实验题目：牛奶中酪蛋白的提取与分析实验材料：牛奶 小组成员： 实验时间：
一：实验题目：牛奶中酪蛋白的提取与分析 二：报告撰写者 三、小组成员 实验仪器 温度计、布氏漏斗（*）、pH试纸（*）、抽滤瓶（*）水浴锅、烧杯、量筒、表面皿（*）、电子天平（*）、2个1000ml的容量瓶（*）、2张醋酸纤维薄膜（2cm×8cm 厚度120nm）成品（*）、培养皿9—10cm（*）、毛细管（*）、尺子、铅笔、单面刀片（*）、镊子、普通滤纸（*）、电泳槽、玻璃板8cm ×12cm（*）、752型分光光度计（*）、细布（*）、、、的移液管、试管、试管架、 四、实验材料 牛奶（蒙牛特仑苏和伊利金典） 五、实验试剂 特仑苏400ml、金典200ml、巴比妥（*）、巴比妥钠（*）、氨基黑10B（*）、50ml甲醇AR（*）、100ml冰醋酸AR（*）、95%的乙醇250ml（*)、95%的乙醚100ml（*）、L的乙酸100ml（*）、L的乙酸钠100ml（*）、25g氢氧化钠固体（*）标准酪蛋白、15mg五水硫酸铜（*）、60mg酒石酸钾钠（*）所需试剂配制方法： 乙醇乙醚混合液的配制： 10ml95%的乙醇 10ml95%的乙醚 乙醇钠缓冲液的配制： 配制乙醇乙醚1:1的混
L 的乙酸51ml L 的乙酸钠49ml 巴比妥钠缓冲液的配制： 巴比妥 巴比妥钠 染色液的配制： 氨基黑10B 50ml 甲醇AR 10ml 冰醋酸AR 漂洗液的配制： 45ml95%乙醇AR 5ml 冰醋酸AR 蒸馏水 透明液的配制： 25ml 的冰醋酸AR 75ml 的无水乙醇AR L 氢氧化钠溶液的配制： 16g 的氢氧化钠固体定容至1000ml 10%氢氧化钠溶液的配制： 5g 的氢氧化钠固体定容至50ml 双缩脲试剂的配制： 15mg 五水硫酸铜 配制巴比妥钠缓冲液（,./L ）, 将上 +40ml 蒸馏水， 混匀既得染 配制的乙酸钠缓冲液（l ） 混匀得染色液 混匀得透明液 溶于5ml 蒸馏水，在搅拌情况下，加入10%氢氧化钠溶液3ml ，用
乳铁蛋白的作用与功效 乳铁蛋白(LF)是一种非常重要的营养物质，在母乳、牛乳等哺乳动物的乳汁当中，乳铁蛋白的含量是很丰富的，所以乳铁蛋白也得到了很广泛的应用。那么乳铁蛋白有哪些作用与功效呢 研究表明，乳铁蛋白是一种多功能蛋白质，具有广谱抗菌，抗病毒感染作用，能调节体内铁的平衡；调节骨髓细胞的生成，促进细胞的生长；调节机体免疫功能，增强机体抗病能力；抑制人体肿瘤细胞的作用；能同多种抗生素及抗真菌制剂协同作用，更有效地治疗疾病。 近年来，随着生物工程技术的不断发展和成熟，越来越多的国家注意到乳铁蛋白的实用价值。科学家们利用分子生物学原理，进行了广泛的临床试验，确定了其对人体所具有的七大功效与作用。 一、乳铁蛋白具有广谱抗菌作用。 乳铁蛋白对革兰阴性菌和阳性菌的抑菌作用首先是由于乳铁蛋白高度结合铁，使细菌失去生长所需的基本养分铁。另外，乳铁蛋白通过氨基未端强阳离子结合区域，增加细菌细胞膜的通透性，使细菌的脂多糖从外膜渗出，达到直接杀菌作用。 二、乳铁蛋白具有抗病毒作用。 乳铁蛋白通过抑制病毒进入细胞，减轻对人体肝细胞的损害。 三、乳铁蛋白具有抗氧化作用。 乳铁蛋白（）能抑制铁诱导的脂质过氧化过程所产生的硫代巴比妥酸和丙二醛的生成。另外，牛乳铁蛋白能降解酵母中的转运RNA，具有核糖果核酸酶的活性，且能抑制超氧离子的形成。所有这些都可降低人体内自由基对动脉血管壁弹性
蛋白的破坏，达到预防和治疗动脉粥样硬化和冠心病的目的。 四、乳铁蛋白具有抗癌作用铁与其他微量元素的平衡。 乳铁蛋白在补充机体缺铁、降低铁在机体内沉积引起的铁过负荷，以及由此引发的一系列临床疾病中均发挥重要的预防和治疗作用。另外，乳铁蛋白对消化道肿瘤，如结肠癌、胃癌、肝癌、胰腺癌，具有化学预防作用，并可抑制由此引发的肿瘤转移。最后，乳铁蛋白在启动宿主防御系统的初始活化反应，调控不同类型淋巴细胞比例的改变对机体免疫反应的影响，提高免疫力和在预防丙型肝炎病毒的感染，治疗慢性肝炎方面都起到了积极作用。 五、乳铁蛋白调节机体免疫反应。 调节机体免疫系统是由于它右抑制作用与乳铁蛋白饱和度有关。另外，经研究显示，乳铁蛋白对抗体生成T细胞成熟、淋巴细胞中自然杀伤细胞比例都具有调节作用。 六、乳铁蛋白调节胃肠道铁的吸收。 乳铁蛋白通过它的氨基和羧基未端两个铁结合区域能高亲和性地，可逆地与铁结合，并维持铁元素在一个较广的PH范围内而完成铁在十二指肠细胞的吸收和利用。 七、乳铁蛋白同药物的协同作用。 乳铁蛋白粉能同多种抗生素和抗病毒药物协同作用，减少药物用量，降低抗生素或抗病真菌制剂对人体肝，肾功能的损害。同时，增强休内微生物对药物的敏感性。 正因为乳铁蛋白所具有的这七大功效，许多科学家和医学家开始把他应用到临床，在预防和治疗疾病芝程中进行了探索，并取得临床医学专家的认可。
牛奶中酪蛋白的提取 与分析
实验题目：牛奶中酪蛋白的提取与分析实验材料：牛奶 小组成员： 实验时间：
一：实验题目：牛奶中酪蛋白的提取与分析 二：报告撰写者 三、小组成员 实验仪器 温度计、布氏漏斗（*）、pH试纸（*）、抽滤瓶（*）水浴锅、烧杯、量筒、表面皿（*）、电子天平（*）、2个1000ml的容量瓶（*）、2张醋酸纤维薄膜（2cm×8cm 厚度120nm）成品（*）、培养皿9—10cm（*）、毛细管（*）、尺子、铅笔、单面刀片（*）、镊子、普通滤纸（*）、电泳槽、玻璃板8cm×12cm（*）、752型分光光度计（*）、细布（*）0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml 的移液管、试管、试管架、 四、实验材料 牛奶（蒙牛特仑苏和伊利金典） 五、实验试剂 特仑苏400ml、金典200ml、1.66g巴比妥（*）、12.76g巴比妥钠（*）、0.5g 氨基黑10B（*）、50ml甲醇AR（*）、100ml冰醋酸AR（*）、95%的乙醇250ml（*)、95%的乙醚100ml（*）、0.2mol/L的乙酸100ml（*）、0.2mol/L 的乙酸钠100ml（*）、25g氢氧化钠固体（*）标准酪蛋白、15mg五水硫酸铜（*）、60mg酒石酸钾钠（*） 所需试剂配制方法： 乙醇乙醚混合液的配制： 10ml95%的乙醇10ml95%的乙醚 配制乙醇乙醚1:1的混合
乙醇钠缓冲液的配制： 0.2mol/L 的乙酸51ml 0.2mol/L 的乙酸钠49ml 巴比妥钠缓冲液的配制： 巴比妥1.66g 巴比妥钠12.76g 染色液的配制： 0.5g 氨基黑10B 50ml 甲醇AR 10ml 冰醋酸AR 漂洗液的配制： 45ml95%乙醇AR 5ml 冰醋酸AR 蒸馏水 透明液的配制： 25ml 的冰醋酸AR 75ml 的无水乙醇AR 0.05mol/L 氢氧化钠溶液的配制： 16g 的氢氧化钠固体定容至1000ml 10%氢氧化钠溶液的配制： 5g 的氢氧化钠固体定容至50ml 双缩脲试剂的配制： 配制巴比妥钠缓冲液 +40ml 蒸馏水，混匀既得染 配制pH4.6的乙酸钠缓冲液 混匀得染色液 混匀得透明液 溶于5ml 蒸馏水，在搅拌情况下，
乳铁蛋白复合粉的作用 宝宝在吃母乳的同时，可以适当的吃一些奶粉，乳铁蛋白复合粉就是典型的婴儿食用产品。给婴儿吃的产品，一方面要保证安全，另一方面就是营养成分。刚刚接触乳铁蛋白复合粉的时候，家长肯定关系的作用和功效。那么，乳铁蛋白复合粉的作用是什么？下面咱们就来看看吧。 乳铁蛋白是核心免疫蛋白，在初乳总蛋白中，含量高达20%，成熟乳的乳铁蛋白含量已远不及初乳。将牛奶中的乳铁蛋白有效提取，合理地应用于普通婴幼儿配方奶粉中，既可满足婴儿生长发育的需要，又可保护婴幼儿健康，对非母乳喂养婴幼儿尤为重要。 1、促进肠道有益菌的増长 乳铁蛋白在小肠中的浓度可持续维持，因此促进有益菌如双歧杆菌、乳酸菌的增殖，抑制致病菌的生长，保护肠道不受有害细菌破坏，维持肠道菌群的平衡，构筑起宝宝免疫系统的健康防线。 2、促进铁吸收 铁是血红蛋白的重要组成部分，对于婴儿生长发育具有重要作用。乳铁蛋白可以提高肠道对铁离子的生物利用率，提高铁的
吸收率，增强造血功能，有效预防婴幼儿贫血。 3、调节免疫功能 乳铁蛋白可刺激肠道粘膜细胞的增殖和分化，促进肠道免疫系统的发育和成熟;乳铁蛋白还能促进免疫细胞的成熟与活化，促进抗体生成，提高机体免疫应答，提高免疫力。 4、其他生理功能 乳铁蛋白可促进骨细胞增值，有利骨骼生长。还具有一定的抗氧化作用，抑制脂质过氧化。还可刺激溶酶菌酶再生等。 乳铁蛋白对宝宝有什么好处 0-3岁孩子，自身免疫系统尚未发育完善，而妈妈们多会选择一些免疫产品来提高宝宝的免疫力。市场上不少提高免疫力补充产品只适用于成人。存在营养分子量大、成分复杂和激素超标等安全隐患，不适宜0-3岁宝宝特殊生长发育时期，以及脆弱的肠胃和吸收能力。而乳铁蛋白安全易吸收，提供婴幼儿专属保护。 增强宝宝机体抵抗力 乳铁蛋白在机体防御体系中扮演重要角色。研究表明乳铁蛋白LF是动物初乳中的天然蛋白质，是一种多功能蛋白质，具有广谱抗菌，抗病毒感染作用，能调节宝宝体内铁的平衡;调节宝宝机体免疫功能，增强机体抗病能力。 参与铁的代谢，促进肠道中益生菌的生长 治肠胃炎是乳铁蛋白最重要的功能之一。乳铁蛋白对肠道病原菌的抑制作用主要通过两种途径来实现：抑制细胞细菌的生长;破坏细菌表面的毒力因子功能从而减弱病毒粘附或者侵入哺乳动物细胞的能力。
乳佳贝乳铁蛋白的功效与作用 1.乳佳贝乳铁蛋白具有广谱抗菌作用，乳铁蛋白通过氨基未端强阳离子结合区域，增加细菌细胞膜的通透性，使细菌的脂多糖从外膜渗出，达到直接杀菌作用。 2.乳佳贝乳铁蛋白具有抗病毒作用，乳铁蛋白通过抑制病毒进入细胞，减轻对人体肝细胞的损害，这一结论被日本国立癌症中心研究所和京都大学病毒研究所的科研人员经过动物实验和临床试验在1998年研究成果报告中所证实。 3.乳佳贝乳铁蛋白具有抗氧化作用，研究结果显示，乳铁蛋白能抑制铁诱导的脂质过氧化过程所产生的硫代巴比妥酸和丙二醛的生成。另外，牛乳铁蛋白能降解酵母中的转运RNA，具有核糖果核酸酶的活性，且能抑制超氧离子的形成。所有这些都可降低人体内自由基对动脉血管壁弹性蛋白的破坏，达到预防和治疗动脉粥样硬化和冠心病的目的。 4.乳佳贝乳铁蛋白具有抗癌作用铁与其他微量元素的平衡，在补充机体缺铁、降低铁在机体内沉积引起的铁过负荷，以及由此引发的一系列临床疾病中均发挥重要的预防和治疗作用。另外，乳铁蛋白对消化道肿瘤，如结肠癌、胃癌、肝癌、胰腺癌，具有化学预防作用，并可抑制由此引发的肿瘤转移。最后，乳铁蛋白在启动宿主防御系统的初始活化反应，调控不同类型淋巴细胞比例的改变对机体免疫反应的影响，提高免疫力和在预防丙型肝炎病毒的感染，治疗慢性肝炎方面都起到了积极作用。 5.乳佳贝乳铁蛋白调节机体免疫反应，乳铁蛋白调节机体免疫系统是由于它右抑制作用与乳铁蛋白饱和度有关。另外，经研究显示，乳铁蛋白对抗体生成T细胞成熟、淋巴细胞中自然杀伤细胞比例都具有调节作用 6.乳佳贝乳铁蛋白调节胃肠道铁的吸收，乳铁蛋白通过它的氨基和羧基未端两个铁结合区域能高亲和性地，可逆地与铁结合，并维持铁元素在一个较广的PH范围内而完成铁在十二指肠细胞的吸收和利用。 7.乳佳贝乳铁蛋白同药物的协同作用。研究显示，乳铁蛋白能同多种抗生素和抗病毒药物协同作用，减少药物用量，降低抗生素或抗病真菌制剂对人体肝，肾功能的损害。同时，增强休内微生物对药物的敏感性。 由于乳铁蛋白所具备的上述七大功能，许多科学家和医学家开始把它应有和到临床，在预防和治疗疾病芝程中进行了探索，并取得临床医学专家的认可。 首先，乳佳贝乳铁蛋白对胃幽门螺杆菌感染引起的慢性胃炎十二指肠溃疡、胃癌，对产
牛奶中提取酪蛋白 [目的与要求] 1、了解等电点沉淀法 2、学习从牛奶中制备酪蛋白的方法 3、加深对蛋白质等电点性质的理解 [原理] 蛋白质是一种亲水胶体，在水溶液中蛋白质分子表面形成一个水化层。另外，蛋白质又是一种两性离子，在一定pH溶液能够维持一个稳定的状态。但是调节蛋白质溶液的pH值至等电点时，蛋白质会因失去电荷而变得不稳定，此时若再加脱水剂或加热，水化层被破坏，蛋白质分子就相互凝聚而析出。等电点沉淀法主要利用两性电解质分子在等电点时溶解度最低的原理，而多种两性电解质具有不同等电点而进行分离的一种方法。 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。将牛乳的pH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀，除去脂类杂质后便可得到较纯的酪蛋白。 但单独利用等电点沉淀法来分离生化产品效果并不太理想，因为即使在等电点时，有些两性物质仍有一定的溶解度，并不是所有的蛋白质在等电点时都能沉淀下来，特别是同一类两性物质的等电点十分接近时。生产中常与有机溶剂沉淀法、盐析法并用，这样沉淀的效果较好。 本实验目的是使学生运用等电点沉淀法制备酪蛋白，从中加深对蛋白质等电点性质的理解。 [方法和步骤] 1、取预先放冰箱中冷却的消毒牛奶6mL，3 000r/min离心10min，除去脂肪层的乳液置50毫升烧杯内，加热至40℃左右，在搅拌下慢慢加入10mL左右预热的醋酸-醋酸钠缓冲液，此时混浊液中有大量絮状物沉下。冷至室温，3 000r/min离心10min，弃去上清液，得酪蛋白粗品。 2、用蒸馏水洗沉淀三次（每次5mL左右），3 000r/min离心10min，弃去上清液。 3、将沉淀置研钵中，研碎后，渐加5mL 95%乙醇，静置片刻，将全部悬浮液转移至布氏漏斗抽滤，抽干后的制品，用乙醇-乙醚混合液洗沉淀二次（每次5mL），最后用无水乙醚洗沉淀二次（每次5mL），抽干。 4、将沉淀摊开在表面皿上，风干，得酪蛋白制品（称重，记录）。 5、酪蛋白溶液的配制：称取酪蛋白0.1g，置10毫升烧杯中，加5mL 0.2mol/L氢氧化钠溶液，搅匀，隔水加热，溶解后转移至10毫升容量瓶中，用少量蒸馏水洗烧杯数次，洗液并入容量瓶中，最后加水至刻度处，摇匀，置冰箱中保存备用。 [结果与计算] 计算酪蛋白含量和得率： 1、含量：酪蛋白克数/100mL牛奶 2、 100 %? = 理论含量 测得含量 得率 式中理论含量3.5g/100mL牛奶
乳铁蛋白的研究现状及展望 姓名：林卓佳学号：1114120317 班级：11生技本2 摘要：乳铁蛋白是一种天然的、具有许多特殊生理功能的糖蛋白，是当今国内外研究的热点之一。本文从乳铁蛋白的分布及含量测定、结构、生物学功能以及应用展望等方面对其近几年来国内外研究进展进行了综述。 关键词：乳铁蛋白；结构与功能；应用 乳铁蛋白(Lactoferrin， LF)是转铁蛋白家族中的一种非血红素类铁结合糖蛋白，广泛存在于生物体的体液和分泌液中，是哺乳类动物自我免疫系统的重要组成部分。1939年，Sorensen M等在首次从牛乳里分离出来的一种红色组分。1960年，Johansson和Groves首次从人乳中分离出这种与铁结合的红蛋白。1961年Blanc和Isliker 从人乳中将其分离出来，并且正式命名为乳铁蛋白，由此正式拉开了对乳铁蛋白研究的序幕。许多研究已经证明，乳铁蛋白是一种具有刺激和强化铁吸收、参与机体抗菌、调节机体免疫及抗炎症的活性、参与细胞繁殖、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性的蛋白质，并已在相关领域被应用[1]。 1.乳铁蛋白的分布及含量测定 1.1乳铁蛋白的分布 乳铁蛋白广泛分布于多种组织，此外还存在于精液、羊水、小肠分泌液、关节液等成分中。在各种体液或分泌物中以乳汁特别是初乳中乳铁蛋白量最高。人乳中的含量比其它哺乳动物要高得多，在泌乳
期间乳铁蛋白含量逐渐下降，而牛在非哺乳期仍然保持较高的含量。血液中乳铁蛋白主要来自中性白细胞，骨髓、子宫内膜及胎盘等也能分泌少量的乳铁蛋白。 1.2乳铁蛋白的含量测定 通常采用色谱法（包括吸附、离子交换、亲和色谱、固定化单抗）、超滤法、盐析法和酸沉降法分离乳铁蛋白，其中超滤法是实现工业化分离乳铁蛋白的合适方法。目前在工业规模上从脱脂乳及乳清中分离牛乳铁蛋白，纯度可达95%以上[2]。 2.乳铁蛋白的结构 乳铁蛋白的等电点约为8.2左右，是一种分子量为80kDa，具有大约700个氨基酸残基序列的单体糖蛋白，并连接1～2个配糖体(配糖体成分约占7%)，属于转铁蛋白家族中的一员。乳铁蛋白的二级结构主要呈“二枚银杏叶型”，分别在分子的N－端和C－端形成2个环状结构，每叶在内部隙缝处都有1个铁结合位点。此二叶具有较高的重叠性，即N－端与C－端的组成成分具有高度同源性，同源性可达34%～41%。牛乳铁蛋白与人乳铁蛋白的三维空间构型非常相似，约70%的氨基酸序列一致。每个结合位点不仅可以结合Fe2+和Fe3+，还能够结合Cu2+、Zn2+、Mn2+等。 3.乳铁蛋白的生物化功能 3.1刺激和强化铁吸收 婴儿可从母乳中吸收完整的乳铁蛋白分子，这有助于对母乳中铁的吸收。新生儿尿液中释放铁的量与乳汁中乳铁蛋白含量和对母乳的
牛奶中酪蛋白的制备 一、实验目的 1. 学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。 2. 掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。 二、实验原理 利用酪蛋白的等点点为4.7，所以调节牛奶的pH4.7使酪蛋白沉淀洗出。等电点是调节溶液的pH,使蛋白质所带的正电荷和负电荷恰好相等，总净电荷为零，以两性离子存在，不想阳极移动也不想阴极移动，此溶液的pH称为蛋白质的等电点。酪蛋白不溶于乙醇、乙醚等试剂。因而加入乙醇乙醚洗涤沉淀物除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。 三、实验材料、试剂与仪器 （一）材料与试剂 95%乙醇、新鲜牛奶、乙醇-乙醚混合液（乙醇：乙醚=1：1） 0.2mol/L pH4.7醋酸-醋酸钠缓冲液 A液：0.2mol/L醋酸钠溶液称NaAC·3H2O 27.22g，定容至1000 mL。 B液：0.2mol/L醋酸溶液，称优纯醋酸（含量大于99.8%）6.0g定容至500 mL。 取A液590mL，B液410mL混合即得pH 4.7的醋酸-醋酸钠缓冲液1000 mL。 （二）器具 离心机、抽滤装置、精密pH试纸、玻璃棒、量筒、恒温水浴 四、实验步骤 （一）酪蛋白的粗提 100mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4.7的醋酸缓冲液100mL，用精密pH试纸或酸度计调pH至4.7。将上述悬浮液冷却至室温。离心15分钟（3000 r /min）。弃去清液，得酪蛋白粗制品。 （二）酪蛋白的纯化 1. 用水洗涤沉淀3次，离心10分钟（3 000r/min），弃去上清液。 2. 在沉淀中加入30mL乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。用乙醇-乙醚混合液30 mL洗沉淀2次。最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。 3. 将沉淀摊开在表面皿上，风干；得酪蛋白纯品。 （三）准确称重，计算含量和得率。
一、实验目的 1、掌握一种提取蛋白的方法。 2、掌握一种检测牛乳质量的方法。 二、实验原理 酪蛋白是乳蛋白质中最丰富的一类蛋白质，约占乳蛋白的80~82%，酪蛋白不是单一的蛋白质，是一类含磷的复合蛋白质混合物，以一磷酸酯键与苏氨酸及丝氨酸的羟基相结合。它还含有胱氨酸和蛋氨酸这两种含硫氨基酸，但不含半胱氨酸。它在牛乳中的含量约为35g/L，比较稳定，利用这一性质，可以检测牛乳中是否掺假。 酪蛋白在其等电点时由于静电荷为零，同种电荷间的排斥作用消失，溶解度很低，利用这一性质，经牛乳调到pH4.6，酪蛋白就从牛乳中分离出来。酪蛋白不溶于乙醇，这个性质被利用来从酪蛋白粗制剂中将脂类杂质除去。 三、仪器和试剂 仪器：温度计、布氏漏斗、pH 试纸、抽滤瓶、电炉、烧杯、量筒、表面皿、天平等。 试剂： 1. 95%乙醇、乙醚 2. pH4.6乙酸钠缓冲液0.2mol/L 3. 乙醇、乙醚混合液：乙醇∶乙醚=1∶1（体积比） 4. 市售牛乳 四、实验步骤 1.酪蛋白等电点沉淀 将100ml牛乳放到500ml烧杯中，加热至40℃左右的乙酸钠缓冲液，直到pH达4.6左右，用pH试纸或酸度计调试。将上述悬浮液冷却至室温，然后放置5min，用细布过滤，收集沉淀。 2.除脂类杂质 将上述沉淀用少量水洗数次，然后悬浮于30ml95%的乙醇中。将此悬浮液倾于布氏漏斗中，抽滤除去乙醇溶液，再倒入乙醇—乙醚混合液洗涤沉淀两次，最后再用一米洗涤沉淀两次，抽干。将沉淀从布氏漏斗中移去，在表面皿上摊开以除去乙醚，干燥后得到的是酪蛋白纯品。准确称重后，计算出每100ml牛乳所制备出的酪蛋白数量（g%），并与理论产量（3.5g%）相比较，求出实际获得百分率。 一、实验目的 酶是植物体内具有催化作用的蛋白质，植物体内的生化反应，一般都是在酶的作用下进行的，没有酶的催化反应，植物的生命也就停止了，因此对酶的研究是阐明生命现象本质中十分重要的部分。为要研究酶首先要将酶从组织中提取出来，加以分离、纯化，不同的研究目的对酶制剂的纯度要求也不相同，有些工作只需要粗的酶制剂即可，而有些工作则要求较纯的酶制剂，需根据不同情况区别对待。在酶的提取和纯化过程中，自始至终都需要测定酶的活性，通过酶活性的测定以监测酶的去向。 二、实验原理 （一）酶的提取 1.酶的存在位置? 存在于动植物以及微生物的细胞的各个部位。 2.如何将酶从细胞中分离? 从高等植物中提取酶常遇到一些实际问题，首先是细胞中含有许多种酶，每种酶的浓度又很低，只占细胞总蛋白质中的极小部分（叶中的双磷酸核酮糖羧化酶除外），而许多植物组织中蛋白质的含量又很低。此外，各种酶的存在状态不同，有在细胞外的外酶，在细胞内的内酶，内酶中又有与细胞器一定结构相结合的结合酶，也有的存在于细胞质中，提取时都应区别对待，作不
牛奶中部分成分的分析 一、实验目的 （1）学习利用等电点沉淀法从牛奶中制备酪蛋白 （2）掌握双缩脲法测定蛋白质的原理和方法 （3）熟悉可见光分光光度计的操作 （4）加强对沉淀、抽滤、溶液配制等基本操作的锻炼 （5）分析牛奶中蛋白质与钙的含量。 （6）掌握配位滴定法测定液体食品中钙含量的原理和方法 （7）通过与牛奶包装上注明的含量比较，对实验分析结果进行客观评价 二、实验原理 牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，加入醋酸将牛乳的pH调至4.7时，使酪蛋白沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质，抽滤、纯化后便可得到纯酪蛋白。 双缩脲(NH2CONHCONH2)在碱性溶液中与硫酸铜反应生成紫红色化合物，称为双缩脲反应，蛋白质分子中含有许多肽键在碱性溶液中也能与Cu2+反应产生紫红色化合物。在一定范围内，其颜色的深浅与蛋白质浓度成正比。因此，可以利用比色法测定蛋白质浓度。双缩脲法是测定蛋白质浓度的常用方法之一。操作简便、迅速、受蛋白质种类性质的影响较小，但灵敏度较差，而且特异性不高。除-CONH-有此反应外，-CONH2、-CH2NH2、-CS-NH2等基团也有此反应。 钙与身体健康息息相关，钙除成骨以支撑身体外，还参与人体的代谢活动，它是细胞的主要阳离子，还是人体最活跃的元素之一，缺钙可导致儿童佝偻病，青少年发育迟缓，孕妇高血压，老年人的骨质疏松症。缺钙还可引起神经病，糖尿病，外伤流血不止等多种过敏性疾病。补钙越来越被人们所重视。牛奶中含有易被人体吸收得钙，有些牛奶产品中还特地加钙而成为钙奶。
乳铁蛋白生物学功能及其作用机理 近十几年来，世界各地的实验室对乳铁蛋白功能，特别是生物学功能进行了广泛研究，许多新的功能正不断被发现，许多体内、外试验证明，乳铁蛋白确实具有抗微生物、免疫调节、抗感染和抑制肿瘤生长等功能，乳铁蛋白可能具有的生物学功能见下图。 目前已被证实的生物学功能可归纳为以下几方面： 一、参与铁代谢，促进铁吸收 乳铁蛋白可提高肠细胞对铁的生物利用率，并稳定还原状态的铁离子，减少铁离子对胃肠道的刺激作用。乳铁蛋白能根据机体对铁的需求，通过调节肠黏膜细胞对铁的吸收，保持体内铁的平衡状态。 1．运载及促进铁离子吸收。在生理pH条件下形成的三价铁离子(Fe3+)不溶于水，很难被动物和其他生物体利用，乳铁蛋白通过结合Fe3+，改变其化学形式促进机体细胞对Fe3+吸收，乳铁蛋白促进Fe3+吸收的作用，主要与其结合铁的高溶解性和肠绒毛细胞对Fe-LF中铁的特殊吸收机制有关。 2．提高铁的生物利用率，减轻补铁负面效应。在补充铁时，结合使用乳铁蛋白可明显减缓铁离子对动物肠道的刺激作用。这是因为乳铁蛋白螯合了铁，避免了铁离子对肠道的直接刺激作用；同时，进食乳铁蛋白可以减少无机铁离子的摄人量，从而增强铁的实际吸收量和生物利用率，有效降低铁的使用量，减少铁离子对机体造成的不利影响。因此，乳铁蛋白可作为一种很好的补铁剂。 二、抗微生物功能 在乳铁蛋白的诸多生物学功能中，抗微生物活性最引人注目，乳铁蛋白对许多微生物，包括G+和G-需氧菌和厌氧菌及一些真菌，都具有不同程度的抑制和杀伤作用。其作用机制主要有以下几点： (1) 不饱和乳铁蛋白极强的铁结合性，通过夺去微生物生长环境中的铁离子，使细菌因失去生长所需的基本元素铁而停止生长甚至死亡，或使微生物由于缺乏铁离子而不能形成致病性生物膜，降低细菌浓度，减少发病率。乳铁蛋白属于广谱抑菌剂，既抑制革兰氏阴性菌如大肠菌群、克雷白氏杆菌、沙门氏菌和志贺氏菌等，也抑制革兰氏阳性菌，如金黄色葡萄球菌、杆菌和产单细胞李斯特菌，对引起胃炎或胃溃疡等上消化道疾病的幽门螺旋杆菌也具有抗菌作用。
竭诚为您提供优质文档/双击可除酪蛋白的制备实验报告 篇一：酪蛋白的制备----生化实验 酪蛋白的制备 一、目的 1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。 2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。 二、原理 牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的ph调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。 三、材料、试剂与器具 （一）材料 新鲜牛奶 （一）试剂 1、95%乙醇1200mL
2、无水乙醚1200mL 3、0.2mol/Lph4.7醋酸——醋酸钠缓冲液300ml先配A液与b液 A液：0.2mol/L醋酸钠溶液称naAc·3h2o54.44g，定容至2000ml。b液：0.2mol/L醋酸溶液，称优纯醋酸（含量大于99.8%）12.0g定容至1000ml。 取A液1770ml，b液1230ml混合即得ph4.7的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml。 4、乙醇——乙醚混合液 乙醇：乙醚=1：1（V/V） （二）器具 1、离心机 2、抽滤装置 3、精密ph试纸或酸度计 4、电炉 5、烧杯 6、温度计 四、操作步骤 （一）酪蛋白的粗提 100mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、ph4.7的醋酸缓冲液100mL.用精密ph试纸或酸度计调ph至4.7。 将上述悬浮液冷却至室温。离心15分钟（3000r/min）。弃去清液，得酪蛋白粗制品。 （二）酪蛋白的纯化 1、用水洗涤沉淀3次，离心10分钟（3000r/min），弃
去上清液。 2、在沉淀中加入30mL乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次。最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。 3、将沉淀摊开在表面上，风干；得酪蛋白纯品。 （三）准确称重，计算含量和得率。 含量：酪蛋白g/100mL牛乳（g%） 式中理论含量为3.5g/100mL牛乳。 五、注意事项 1、由于本法是应用等电点沉淀法来制备蛋白质，故调节牛奶液的等电点一定要准确。最好用酸度计测定。 2、精制过程用乙醚是挥发性、有毒的有机溶剂，最好在通风橱内操作。 3、目前市面上出售的牛奶是经加工的奶制品，不是纯净牛奶，所以计算时应按产品的相应指标计算。 六、实验报告 1、根据实际操作，以流程图形式总结酪蛋的制备方法。 2、合理分析实验所得率 七、思考题 1、制备高产率纯酪蛋白的关键是什么？ 2、试设计另一种提取酪蛋白的方法？ 篇二：实验四、酪蛋白的制备
2008～2009学年第二学期 实训一牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备（6学时） 一、目的和要求 1、掌握盐析法的原理和操作； 2、掌握等电点沉淀法的原理和基本操作。 二、实验原理 牛奶中主要的蛋白质是酪蛋白，乳蛋白素是一种广泛存在于乳品中，合成乳糖所需要的重要蛋白质。酪蛋白在pH4.8左右会沉淀析出，但乳蛋白素在pH3左右才会沉淀。利用此一性质，可先将pH降至4.8，或是在加热至40℃的牛奶中加硫酸钠，将酪蛋白沉淀出来。酪蛋白
不溶于乙醇，这个性质被利用来从酪蛋白粗制剂中除去脂类杂质。将去除掉酪蛋白的滤液的pH调至3左右，能使乳蛋白素沉淀析出，部分杂质即可随澄清液除去。再经过一次pH沉淀后，即可得粗乳蛋白素。 三、实验材料 1、材料 脱脂牛乳或低脂牛乳（50ml）、蒸馏水 2、器材 100ml量筒、100ml烧杯（2个）、250ml烧杯、水浴锅、玻璃棒、布氏漏斗、滤纸、抽滤瓶、真空泵、pH计、pH试纸、离心机、离心管、磁力搅拌器 3、试剂 无水硫酸钠、无水乙醇、浓HCl、NaOH 0.1mol/L HCl溶液配制：用洁净的量杯（或量筒）量取9mL浓盐酸，注入盛有1000mL水的试剂瓶中，盖上玻璃塞，摇匀。 （一般来讲最浓的浓盐酸质量分数是37.5%，量浓度约是12mol/L，密度1.183g/cm3左右。） 0.1mol/L NaOH溶液配制：称取4克氢氧化钠固体，用少量蒸馏水溶解，将溶液转移到1L的容量瓶中，定容，摇匀。 四、实验步骤 1、盐析沉淀法制备酪氨酸 （1）将50ml牛乳倒入100ml烧杯中，于40℃水浴中加热并搅拌。
（2）向上述烧杯中缓缓加入（约10min内分次加入）10g无水硫酸钠，再继续搅拌10min。 （或者是书中所讲述的部分----------） （3）将溶液用布氏漏斗过滤，分别收集沉淀和滤液。沉淀悬浮于30ml乙醇中，倾于布氏漏斗中过滤除去乙醇溶液，抽干。将沉淀从布氏漏斗中移出，在表面皿上摊开以除去乙醇，干燥后得到的是酪蛋白。准确称重。 2、等电点沉淀法制备乳蛋白素 （1）将制备酪蛋白操作步骤（3）所得滤液置于100ml烧杯中，一边搅拌，一边利用pH计以浓盐酸调整pH至3±0.1。 （2）将溶液倒入离心管中，6000r/min离心15min，倒掉上层液。（3）在离心管内加入10ml去离子水，振荡，使管内下层物重新悬浮，并以0.1mol/L氢氧化钠溶液调整pH至8.5～9.0，此时大部分蛋白质均会溶解。 （4）将上述溶液以6000r/min离心10min，上层液倒入50ml烧杯中。 （5）将烧杯置于磁搅拌加热板上，一边搅拌，一边利用pH计以0.1mol/L盐酸调整pH至3±0.1。 （6）将溶液倒入离心管中，6000r/min离心10min，倒掉上层液。取出沉淀干燥，并称重。 五、注意事项 离心机的使用安全：
乳铁蛋白的研究进展 摘要：乳铁蛋白是一种具有多种生理功能的铁结合糖蛋白，是当今乳品界和 食品界最为关注的“热点”之一。本文综述了乳铁蛋白的基本结构、理化性质、生理功能、制备方法及应用前景。 关键词：结构、理化性质、生理功能、制备、应用 乳铁蛋白是一种主要存在于大多数哺乳动物乳汁中的铁结合糖蛋白[1]，属于转铁蛋白家族[2]。1960年首先由Groves从牛乳当中分离获得，因与铁结合呈红色，故又被称为“红蛋白”[3]。大量研究表明LF具有促进铁吸收、广谱抗菌、增强免疫、抗病毒、抗癌等生物学功能；还具有DNA酶、RNA酶、低聚寡糖水解酶、ATP酶以及磷酸酯酶等多种酶的活性。LF 多种功能的发现，使其研究非常活跃，已成为食品界和乳品行业关心的热点问题。 1 乳铁蛋白的基本结构 乳铁蛋白由转铁蛋白演变而来。转铁蛋白包括一大族生物糖蛋白(主要有3种) ，即：血清转铁蛋白，存在于血清和其它胞外液(如乳、脊髓液、精液)中；乳铁蛋白存在于乳汁、泪液、唾液、汗液等分泌液中; 卵转铁蛋白存在于爬行类动物和鸟类的蛋清中。 乳铁蛋白是一种铁结合性糖蛋白, 它的分子主体是一个大约有700个氨基酸残基构成的多肽链,相对分子量约为80 ku。该多肽链可以折叠成两个球状叶,一端是氨基末端叶,一端是羧基末端叶,每一叶状结构都含有一个Fe3+和一个碳酸氢阴离子结构部位,每一叶都能高亲和性地可逆的与铁结合。其中, Fe3+结构位于一个很深的裂缝中,当铁离子缺乏时,每一片叶片可以曲折, 使裂缝打开或关闭, 但当多肽链已同铁离子结合时则裂缝处于闭锁状态[4] 。 2 乳铁蛋白的理化性质 2.1 乳铁蛋白的糖基化反应 乳铁蛋白中糖基成分约占7%~11.5%, 天冬酰胺残基可与糖基相连, 由唾液酸与果糖、甘露糖、岩藻糖、半乳糖形成聚—N一乙酰乳糖胺多糖与之相连, 脱去糖基并不影响乳铁蛋白与受体的结合[5]。牛乳铁蛋白的N133,281,368,476,545位点可以进行糖基化反应, 人乳铁蛋白有2个糖基化位点。这些糖化位点都具有异质性, 是由唾液酸的成分及与之相连的糖链大小所引起的。 乳铁蛋白中糖链的作用尚不十分明确, 可能与乳铁蛋白的功能活性、构象稳定性有关, 也可能与免疫原性、微生物结合识别位点有关, 或是与细胞膜上接触信号有关。 2.2乳铁蛋白的配基作用 乳铁蛋白可与多种小分子及生物大分子结合, 如苔盼蓝、免疫球蛋白、血清
实验5 酪蛋白的制备 一、目的 1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。 2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。 二、原理 牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。 三、材料、试剂与器具 （一）材料 新鲜牛奶 （一）试剂 1、95%乙醇 1 200mL 2、无水乙醚 1 200mL 3、0.2mol/L pH4.7醋酸——醋酸钠缓冲液300ml 先配A液与B液 A液：0.2mol/L醋酸钠溶液称NaAC·3H2O 54.44g，定容至2000ml。 B液：0.2mol/L醋酸溶液，称优纯醋酸（含量大于99.8%）12.0g定容至1000ml。 取A液1770ml，B液1230ml混合即得Ph4.7的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml。 4、乙醇——乙醚混合液 乙醇：乙醚=1 ：1（V/V） （二）器具 1、离心机 2、抽滤装置 3、精密pH试纸或酸度计 4、电炉 5、烧杯 6、温度计 四、操作步骤 （一）酪蛋白的粗提 100mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4.7的醋酸缓冲液100mL.用精密pH试纸或酸度计调pH至4.7。 将上述悬浮液冷却至室温。离心15分钟（3000 r /min）。弃去清液，得酪蛋白粗制品。（二）酪蛋白的纯化 1、用水洗涤沉淀3次，离心10分钟（3 000r/min），弃去上清液。 2、在沉淀中加入30mL乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次。最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。 3、将沉淀摊开在表面上，风干；得酪蛋白纯品。 （三）准确称重，计算含量和得率。 含量：酪蛋白g/100 mL牛乳（g%）