高效液相色谱法测定蔬菜与水果中拟除虫菊酯类农药残留量
摘要：本实验采用超声分散，液相萃取，柱子吸附分离技术，结合高效液相色谱法测定蔬果中拟除虫菊酯类农药的含量可以取得较满意的结果。此方法操作便捷可广泛应用于蔬果中农药含量的测定。
关键词：拟除虫菊酯高效液相色谱农药含量
引言
农药是当前农业生产用于防治病、虫、杂草对农作物危害不可缺少的物质，对促进农业增产有极重要的作用。随着农业科学技术的发展，化学农药的品种和数量不断增加，已成为防治病虫害的主要手段。农药施用到农作物上以后，一部分因多种原因而转移到环境水体中，对人、畜产生一定的危害。鉴于此，为保障我国人民的身体健康、有效对农药在环境水体中的残留量进行监控，大力开展农药残留量检测技术以及相关的前处理技术的研究是非常必要的。拟除虫菊酯类农药具有高效、低毒以及生物降解快的特点，广泛用于蔬菜、茶叶等农作物种植中害虫的防治。已报道的拟除虫菊酯类农药残留量测定方法主要有气相色谱法( G C ) [ 1 - 4 3 ，由于一些拟除虫菊酯具有热不稳定性，而 G C法需要较高的汽化温度，它们会发生一定的分解，从而对分析产生影响。因此，我们考虑采用高效液相色谱法 ( HP L C ) 分析拟除虫菊酯类农药。
在我国制定的蔬果中拟除虫菊酯类的农药最高残留量国家标准为：氯氰菊酯0.2mg/kg(GB 4829.4-1994);氰戊菊酯0.2mg/kg（ＧＢ14928.5-1994）；溴氰菊酯0.2mg/kg （GB4828.4-1994）本实验直接采集新鲜的的蔬菜与水果样品，样品经过制备提取，净化和浓缩等预处理过程制备成为样品测试液以后，用液相色谱外标法（标准曲线法)测定以上三种拟除虫菊酯类农药的残留量。
正文
1 实验部分
1.1 仪器
高效液相色谱仪，马弗炉，剪刀，电子天平，超声波提取器，离心机，恒温水浴槽。
1.2 试剂
l)有机溶剂:丙酮(农残级)，正己烷(农残级)。
2)层析剂:无水硫酸钠(A. R. )，层析中性氧化铝(A. R.),60~100目佛罗里(Florisil)硅藻土，玻璃棉。以上层析剂均在650℃马弗炉中灼烧4h 后保存在干燥器中备用。
3)农药标准品与纯度:氯氰菊酯(cypermethrin) 96%氰戊菊酯(fenvalerate )94. 3%，溴氰菊酯(deltamethrin)97.5%。
4)农药标准溶液的配制。
①单标准储备液:以市售的氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯农药标准品以正己烷为溶剂配制成适当浓度的单标准储备液。
②单标准中间液:用正己烷将单标准储备液稀释成适当浓度的单标准中间液。
③单标准使用液:用正己烷分别将3个单标准中间液稀释成含氯氰菊酯200μg/mL 。氰戊菊醋100μg/mL 和溴氰菊酯200μg/mL 的单标准使用液。
④混合标准使用液:用正己烷将3个单标准中间液混合稀释成含氯氰菊酯20.0μg/mL,氰戊菊酯10.0μg/mL 和溴氰菊酯20. 0μ5g/mL 的混合标准使用液。
1.3 实验步骤
1.3.1 样品的制备与提取
称取经剪刀绞碎的新鲜蔬菜与水果样品10g 于50mL 带盖塑料离心管
中，根据样品含水量多少加入适量的无水硫酸钠除水。然后向离心管样品中加入13mL 丙酮:正己烷((3:10，体积比)混合溶剂，混匀后在超声波提取器中提取大于10min ，将离心管上层提取液转移至l00mL 烧杯中。逐次向离心管样品残渣中加入5mL,3mL 混合提取剂，重复以上萃取、离心分离操作两次，合并离心管上层提取液至同一烧杯中。若合并提取液中还存在水分，再加适量无水硫酸钠除水。
1.3.2 柱层析净化与浓缩
在30cm(长)X lcm(内径)玻璃管层析柱底部加少许玻璃棉按顺序分别装上无水硫酸钠、中性氧化铝和60~100目佛罗里硅藻土各约1. 0cm 高度，轻轻敲实（也可在实验之前预先做好）先用3 mL 丙酮预洗层析柱，弃掉淋洗液。再将烧杯中的祥品提取液全部转移至柱内用3mL 丙酮:正己烷((1:2，体积比)混合洗脱剂洗脱3次，收集洗脱液于接液管中。
将接液管置于50℃恒温水浴中用氮气吹脱至洗脱液体积少于0. 30mL ，再转移浓缩后的洗脱液至2ml 的样品瓶中，用正己烷定容至1mL ，加盖密封，置于冰箱（0~4℃)中保存。(如果时间比较紧的话，低温保存这一步可以省略）
1.3.3 测定
1）色谱操作条件
色谱柱 ODS-18C （250mm*4.6mm,5L )
检测波长 230nm
流动相 乙腈
流速 1ml/min
进样 20L
并且设位置好其它工作条件还有如柱温，进样口温度，检测其温度，升温速度等。
2）操作方法
?仪器开机预热运行稳定后你，在色谱工作站上设置色谱仪参数空运行一次，待色谱基线平稳后即可进样测定。
?外标法(标准曲线法)系列溶液的测定
在实验前先准备三个标准系列溶液的测定数据，在实验时，再测定本次实验的数据，记下对应时间下的积分面积。
?摇匀待测液体，先用待测液清洗进样器，用进样器吸取10μL的待测液，待色谱就绪后，打开进样阀，将进针头插入进样阀，稳定均匀进样后，拔出针头，扳下进样阀，待绘制完整的色谱图。
3）注意事项
1.新鲜蔬菜与水果样品的含水量较大，因此预处理过程中要注意除水，切不可将含水分的样品制备液进样。
2.在开启色谱仪之前，要先开通载气几分钟。实验结束后要先关仪器，再关闭载气。
2 结果与讨论
2.1数据记录与处理
浓度/10^-7mol/L 保留时间/min 峰面积/A 工作曲线10^5 1.131 26309.9
氯氰菊酯10^3 1.108 1825.10472
正己烷溶液10 1.146 78.71239
根据上表绘制氯氰菊酯（正己烷溶液）的工作曲线
根据上图可知氯氰菊酯（正己烷溶液）的工作曲线方程y=3.9117x-3118
2.2样品数据记录
保留时间min 峰面积A
1.124 1200.5
由工作曲线作图得出线性方程再代入本次试验所得积分面积求得蔬菜中拟除虫菊酯的含量为1.578*10^-4mol/L。（氯氰菊酯分子量：416.32）
2.3小结
经计算，样品中氯氰菊酯的含量为0.0657mg/kg,与我国制定的蔬菜中得氯氰菊酯的最高残留量的国家标准：氯氰菊酯0.20mg/kg(GB 4829.4-1994)相比较，实验测得的样品中的农药残留量小于国家标准值。所以本次实验所用的蔬菜残留量没有超标，符合国家食品安全规定。
我们组的实验得蔬菜中拟除虫菊酯的含量较其他组高，是因为实验中，我们取的近乎都是水果的表皮，而果肉取的较少。
样品的预处理非常重要，其农药残留物的提取效率直接影响到最后测定结果的准确度，比如新鲜蔬菜的含水量较大，因此预处理过程中要注意除水。且净化尽量充分。
3结论
本实验采用高效液相色谱法测定蔬菜中得拟除虫菊酯类农药，且利用线性回归拟合方式处理数据，实验方法方便快捷，具有较高的准确度和精密度。
虽然氯氰菊酯分解快，残留少，但在使用时也应该严格执行农药准则规定的施药量、施药次数及用药浓度、农药安全间隔期，才不会对蔬菜和水果造成农药残留超标、污染。本
实验仅就部分蔬菜中氯氰菊酯残留量进行测定，其他地区、其他蔬菜和农药残留是否存在健康危害，还需要大范围的采样调研和评估才能确定。蔬菜、水果管理部门应加强对外调水果的质量监测，经分析有农药超标的果蔬应禁止调运，确保食用者安全。
4 思考题
1、样品预处理过程非常重要，其农药残留物的提取效率直接影响到最后测定结果的准确度，应该怎样来评估农药残留物的提取效率?
答首先实验所用的时间不能太长，所制得的待测液，颜色应该比较浅，因为纯粹的该类农药溶液是无色的，颜色越多说明混入的杂质的量越多，虽然大家可能认为只是叶绿素骗多了，但事实上叶绿素的偏多可以间接证明实验操作并不规范，一定还有很多杂质混入，这对结果的影响是很大的，结果图谱中在相应的时间所出的峰越独立，如尖峰是比较好的，如果是没有很多杂质峰连在一起的锯齿状峰，则所造成的误差就很大了。须知，农药的含量本身就是微量，如果与杂质峰相连，那么误差一定很大！这对于要求十分严格的农药测定来说是非常不符要求的。所以操作前提一定要严谨！
2、用外标法一标准曲线法测定蔬菜与水果中菊酷类农药残留量，应特别注意哪些事项?
答外标法一标准曲线法须配制一组不同浓度的标准溶液,分别测出它们的吸收度,然后以标准浓度(C)为横座标,以吸收度(A)为纵座标,即可绘出标准曲线图,如符合朗巴-比尔定律,则工作曲线为一通过原点的直线。供试品亦经过同样处理,测出它的吸收度,即可从标准曲线查出样品的浓度,再由稀释倍数或样品重量求出样品中被测组分的含量。适用于常规分析工作(因工作曲线绘成后,可以较长时间使用.在此期间内测定样品时,无需再配制标准溶液).并且朗白-比尔定律只适用于稀溶液,浓度较大时,吸收度的浓度不成正比。一般情况下,只要工作曲线的重现性好,测定结果较吸收度法准确.
3、如果农药残留物的色谱峰有重叠不能完全分开，可以通过调节哪些参数来改善色谱分离效果?
答峰连在一起的原因有：仪器来来不及检测，相邻的物质性质十分相似等。
除了基本的仪器与处理操作外，可以通过设置扩大进样延迟的时间，降低升温速度，在某一处分比较集中地区域设置停止升温的缓冲时间（程序升温），降低流动速度，降低柱压，另外还有一些非参数调节如更换流动相，换极性不同的管子等。
参考文献：
[1]宋玉峰，高磊等蔬菜中氯氰菊酯残留的风险评估研究农业环境科学学报 2010,29（12）：2293-2298
[2]余正萍水果中氯氰菊酯残留量的测定化学工程与装备2009：11.
[3]范志金，刘丰茂，钱传范。氯氰菊酯的名称和组成及光学异构体 [J].农药科学与管理，1999,20（2）：9-11，17.
[4]国家技术监督局.中华人民共和国国家标准GB/T14929.4-94食品中氯氰菊酯、氰戊菊酯和溴氰菊酯残留量测定方法.
[5]邵华，刘肃，杨锚，等．石墨化碳黑分散固相萃取-气相色谱-质谱法测定蔬菜中农药多残留[J]．农业质量标准，2008，(3)：43-45.
[6]吕进锋．GC/MS外标法检测蔬菜中农药多残留的实验研究[J]．中国卫生检验杂志，2006，16(8)：937-938.
[7]董静，潘玉香，朱莉萍，等．果蔬中54种农药残留的QuEChE RS/GC－MS快速分析[J]．分析测试学报，2008，27(1)：66-69.
[8]佟玲，李重九．含硫蔬菜中50种农药多残留的气相色谱-串联质谱检测技术研究[J]．分析测试学报，2008，27(9)：930-935.
[9]吴岩，杨长志，刘永，等．气相色谱双柱法和气相色谱－质谱法在蔬菜农药多残留检测中的应用[J]．理化检验：化学分册，2007，43(10)：815-817，820.
[10]黄宝勇，潘灿，王一茹，等，气质联机分析蔬菜中农药多残留及基质效应的补偿[J]．高等学校化学学报，2006，27(2)：227-232.
茶鲜叶中拟除虫菊酯类农药残留的检测方法。 侯如燕，宛晓春，朱旭君 （安徽农业大学茶与食品科技学院，教育部、农业部茶叶生物化学与生物技术重点实验室，安徽合肥，２３００３６） 摘要拟除虫菊酯农药用量少，杀虫效果好，广泛应用于茶园害虫的控制．是我国出口茶叶中必检的农药。为 实现茶叶生产危害分析关键控制点（ＨＡＣＣＰ）体系中农药残留的源头控制，提供农残源头监督检验方法依据，避免大量使用农药对茶园土壤环境造成的污染，开发茶鲜叶中菊酯类农药的多残留检测方法有重要的实践意义。 本实验用ｙ（石油醚）：Ｖ（丙酮）一１ ｔ １混合溶剂提取，经弗罗里硅土柱层析净化除去干扰物质，采用气相色谱， 微电子捕获检测器（“ＥＣＤ）测定茶鲜叶中主要的６种拟除虫菊酯类农药残留量。方法最低检出浓度为０．００５～ ０．０１ ｍｇ／ｋｇ；茶鲜叶中拟除虫菊酯农药的添加浓度为０．０５、０．２、１．０ｍｇ／ｋｇ，其回收率在８３．６％～１０４．５％，相 对标准偏差（ＲＳＤ）为２．７％～１０．２％，符合农药残留分析要求。关键词茶鲜叶，拟除虫菊酯农药，多残留分析，气相色谱 茶叶是我国的一种传统出口农产品，当前存在的主要卫生问题是农药残留超标口］。国际上一些茶叶进口国制定了严格的农药残留限量标准，对于超过农药残留
限量标准的茶叶采取就地封存、销毁或退回原产地国的政策，对我国茶叶贸易造成了很大影响。 拟除虫菊酯农药用量少，杀虫效果好，在茶园广泛应用，也是我国出口茶叶中必检的农药。为了监督茶园用药情况，确定合理的采摘时间，以便在源头控制茶叶农药残留问题，把茶叶安全生产的危害分析关键控制点（ＨＡＣＣＰ，ｈａｚａｒｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｃｒｉｔｉｃａｌｃｏｎｔｒｏｌ ｐｏｉｎｔｓ）前移。直接测定茶鲜叶中的农药残留量有着现实意义，可以实现茶叶农药源头控制，有效引导农民合理使用农药，降低茶园农药喷施量，提高饮茶安全性，并且可以减少农药违规使用而对茶园土壤环境造成污染。由于鲜叶中提取物中含有比成茶更多的干扰物质，例如简单儿茶素等多酚类及叶绿醇等色素类，因此文献报道的茶叶中菊酯类农药检测方法［２￣９］不适用于茶鲜叶基质检测，因此有必要建立茶鲜叶农药残留的检测方法。本实验用有机溶剂提取，弗罗里硅土柱层析净化，气相色谱法检测茶鲜叶中６种主要的拟除虫菊酯农药残留量，并通过加标回收实验证明了方法的可行性。 １ 材料与方法 Ｉ．Ｉ仪器与试剂 第一作者：博士研究生，讲师（宛晓春为通讯作者）． ?国家科技部支撑计划资助项目（Ｎｏ．２００６ＢＡＫ０２Ａ２６），安徽省教育厅资助项目（Ｎｏ．２００５ｋ１１７０） 收稿日期：２００８—０２－－２７，改回日期：２００８—０６一０２
拟除虫菊酯类农药中毒 【概述】 拟除虫菊酯类农药包括二氯苯醚菊酯（除虫精）、溴氰菊酯（敌杀死）、氯氰菊酯、申西菊酯（多虫畏）、速灭菊酯（速灭杀丁）、百树菊酯、氟氰菊酯等许多品种。它们是一类模仿天然除虫菊素化学结构的人工合成杀虫剂。目前急性中毒以溴氯菊酯、速灭菊酯和二氯苯醚菊酯较为多见。 【病因与发病机制】 致毒机制目前倾向于认为它影响生物膜的功能，使神经膜Na+通道的m闸门频繁开放，关闭延迟，去极化延长，感觉神经和运动终板在一次刺激后可出现重复放电。此外，还有研究认为拟除虫菊酯可作用于Y-氨基丁酸（Y-GABA）受体，使Y-GABA丧失对大脑的抑制性功能，从而使脑的兴奋性相对增高。它还可使血液中肾上腺素和去甲肾上腺素含量增高，致血管收缩性心律失常，对局部存在明显刺激作用。 【诊断要点】 临床表现 1．急性中毒的潜伏期长短不一，经皮吸收短者1h，长者可达24h，平均6h左右；经口中毒多在lh 左右发病。 2．在中毒发作期间，经皮中毒的全身中毒表现较口中毒轻，但粘膜、皮肤的刺激症状明显，如感觉异常、麻木、烧灼感、瘙痒、刺痛等，并常有面红。 3．经口中毒则全身症状明显。消化系统主要表现为恶心、呕吐及腹痛。呼吸系统有气促和呼吸困难，也可发生肺水肿。心血管系统一般是先抑制后兴奋，也可出现各类心律失常。
4．神经系统是这类农药主要的靶组织，可出现头昏、头痛、乏力、多汗、流涎、口唇及肢体麻木、烦躁不安、肌肉颤动和抽搐、意识模糊和昏迷等，其中抽搐常比较突出，可反复发作。 实验室检查 化验检查无特殊指标，必要时可取胃液、血液或尿液等生物材料做毒物及代谢物分析，以取得可靠的诊断依据。 【治疗概述】 药物治疗 1．清洗排毒与其他农药中毒相同，体表或洗胃液均宜首选碱性液体。洗胃后可注入活性炭或吸收解毒剂，以吸附毒物，并可用盐类泻剂导泻。 2．迄今尚无特效解毒药物，有学者曾提出中枢肌松剂麦酚生（mephenesin）对溴氰菊酯有解毒作用，但未获公认。 3．国内曾用中药复方丹参和葛根素及西药舒筋灵做试验性治疗，收效尚佳。 4．含氰基的拟除虫菊酯中毒（溴氰菊酯、氯氰菊酯等），因在体内代谢时可释出氰基，静注硫代硫酸钠（每次1~2g），可能有所裨益。 5．对症治疗，若患者出现肌颤或抽搐，应避免各种刺激（如声响、疼痛等），并给肌注或静注安定5~10mg，必要时可重复给药。也可使用巴比妥类药物。 6．严重中毒如有条件，也可考虑做血液灌流治疗。
农药学
拟除虫菊酯类杀虫剂的发展概况 摘要：天然除虫菊酯虽然具有理想化学农药的一些特性，随着进一步对其化学结构的修饰，该类产品逐渐发展成为一类主要的农药消费品。主要论述了该类农药的发展进程，总结了拟除虫菊酯的应用现状及存在问题，以及一些解决的办法。 关键词：拟除虫菊酯，发展进程，应用现状，存在问题，解决办法 拟除虫菊酯类杀虫剂，本类中包括溴氰菊酯（敌杀死）、氯氰菊酯（兴棉宝）、氰戊菊酯（速灭杀丁）等。其氰基影响机体细胞色素c及电子传递系统，使脊髓神经膜去极期延长，出现重复动作电位，兴奋脊髓中间神经元和周围神经。它对人畜毒性较小。重症中毒者也可使人惊厥、呼吸困难、心悸、血压下降甚至昏迷，可对症治疗。 一、拟除虫菊酯类杀虫剂发展进程 1、天然除虫菊酯杀虫剂的研究 天然除虫菊素具有理想杀虫剂的某些特征,因为它们击倒快,杀虫力强,广谱,低毒,低残留。但它们对日光和空气不稳定,故只能用于家庭卫生害虫的防治,不能经济有效地防治农业和林业害虫。为了克服这一缺陷,人们致力于人工合成除虫菊酯的研究,目的在于寻找结构简单,既能保留除虫菊素的优点,又能克服不适于农业使用的缺点。60年代以来,由于有机氯、有机磷杀虫剂的大量使用,对温血动物高毒和对环境污染等问题日益严重,于是农药界更加重视天然来源杀虫剂的研究。60年代后期,特别是70年代,拟除虫菊酯进入大发展时期。1973
年,第一个对日光稳定的拟除虫菊酯苯醚菊酯开发成功。Elliot合成的二氯苯醚菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯比天然除虫菊酯活性要强,且对日光稳定[1, 2],只要使用有机磷、氨基甲酯10%～20%的药量就能得到很好的防治效果。此后,拟除虫菊酯的开发应用有了迅猛发展。目前,已合成的化合物数以万计,新产品相继投产,拟除虫菊酯类杀虫剂已成为农用及卫生杀虫剂的主要支柱之一[3]。 天然除虫菊酯虽然具有以上许多优点,但作为杀虫剂的缺陷同优点一样明显:A.它在害虫体内十分容易被代谢而迅速失去活性;B.光不稳定性。研究人员已通过在制剂中加入增效剂(如增效醚)阻止天然除虫菊酯被害虫迅速代谢;加入紫外光屏蔽物质(UV-Screens)和抗氧化剂(Anti-Oxidant)可以一定程度改善其光不稳定性[2],但是干花的世界产量远远不能满足实际生产需求,并且大部分提取物都出口到欧美发达国家[3] 2、拟除虫菊酯类杀虫剂研究 拟除虫菊酯类杀虫剂的研究分两个部分：第一个时期研究人员着重研究天然除虫菊酯的化学结构,发现其包括六个有效的活性化合物, 它们的化学结构都由醇部分、酸部分和酯键三部分组成[5,6]。20世纪20年代, Staudinger、Yamamoto以及后来的La Foege等人对除虫菊素活性成分的分离鉴定以及结构的阐明进行了大量的研究工作,为拟除虫菊酯的发展奠定了基础。直到50年代,除虫菊素的化学结构才得以确定。它包括6个成分[7],其中主要的有效成分为除虫菊素Ⅰ(结构如图1)和除虫菊素Ⅱ(结构如图2)。除虫菊素Ⅰ对蚊蝇有很高的杀虫
水果蔬菜中主要营养成分含量测定 学院：生命科学学院 班级： 学号： 姓名：
水果蔬菜中主要营养成分含量测定 摘要：以橘子、猕猴桃两种水果及胡萝卜一种蔬菜为材料，依次测定三种材料的VC含量、蛋白质含量以及可溶性糖的含量。测定VC含量时利用氧化型2,6-二氯酚靛酚（DCPIP）在酸性条件下滴定VC酸性溶液，滴定终点为溶液由无色变为粉红色的那一刻。测定蛋白质含量时采用考马斯亮蓝法在595nm处测其吸光度进而计算含量。测定可溶性糖含量时，则采用蒽酮法进行测定。 关键词：滴定法；分光光度法；蒽酮法；VC含量；蛋白质含量；还原糖含量。 子课题一水果蔬菜中VC提取及含量测定 引言 Vc 是人类膳食营养中非常重要的维生素之一。它分布于水果(柑橘、草莓、山楂、苹果)，蔬菜(辣椒、西红柿)中，部分饮料中也含有水溶性 Vc。人、猴等在肝脏中缺少一个古洛内酯氧化酶，因此，在体内不能合成 Vc，必须从食物中获得。现在很多商家为了增加产品竞争力，提高知名度，在很多饮料产品中也加入部分 Vc，例如脉动、激活、水溶 C100 等。缺乏 Vc 易得坏血病(毛细管脆弱，牙龈发炎出血，肌肉出血)，所以 Vc 又称为抗坏血酸。 1.1实验原理： 天然 Vc 有还原型和氧化脱氢型两种，还原型 Vc 具有很强的还原性。本实验即利用还原型 Vc 还原染料 2,6-二氯酚靛酚的反应来对其含量进行测定。在酸性条件下，氧化型
2,6-二氯酚靛酚为红色，还原型 Vc 能将红色的氧化型 2,6-二氯酚靛酚还原成无色的还原型 2,6-二氯酚靛酚，同时还原型 Vc 自身被氧化成脱氢型 Vc。 在酸性条件下，利用氧化型 2,6-二氯酚靛酚滴定 Vc 酸性溶液，当溶液由无色变为粉红色那一刻，即为滴定终点。如无其他杂质干扰，则消耗的染料与样品中还原型 Vc 含量成正比。 1.2材料、仪器与试剂： 材料：橘子、猕猴桃、胡萝卜 仪器：研钵、锥形瓶、微量滴定管等 试剂：(1)2％的草酸溶液；(2)0.2mg/ml 的标准 Vc 溶液(用 2％的草酸溶液配) 。(3)0.1mg/ml 的 2,6 一二氯酚靛酚溶液 (棕色瓶装 4℃保存)。 1.3实验方法： 1.3.1标准液的滴定：（1）取标准 Vc 液 5ml 于锥形瓶中，用 2.6 一二氯酚靛酚滴定至粉红色，15 秒不褪色；（2）取5 ml 2%草酸作空白对照，按以上方法滴定； 1.3.2样品Vc含量的测定：取 1g 水果或蔬菜，加入 2%草酸溶液 3ml 研磨成匀浆，转入10ml 离心管，再用 4ml 2% 草酸溶液分两次冲洗研钵，一并转入离心管中，3000r/min 离心 10 分钟，上清液转入 25ml 容量瓶并定容，取 5ml 溶液立即用 2,6 一二氯酚靛酚滴定至出现粉红色，15 秒不褪色，重复三次。 1.4结果与讨论 1.4.1 标准液滴定 标准 Vc 溶液 0.1mg/ml 滴定时所消耗的染料体积(ml) (滴定标准 Vc 溶液所用染料体积减去滴定空白溶 液所用染料体积) 每 1 毫升染料溶液 所氧化的 Vc 的量 (mg/ml) (T) 5ml 第一次第二次第三次平均 0.0714 7 7 7 7 1.4.2样品滴定 样品名称样品液的总体积 (ml) 滴定时所用样品 液的量 (ml) 滴定样品所用染料量Va(ml) 1 2 3 平均 橘子 25ml 5ml 0.4 0.2 0.4 0.333 猕猴桃 4.8 3.85 3.45 4.033 胡萝卜0.15 0.25 0.2 0.2
食品中总酸的测定 1.实验原理 食品中的酒石酸、苹果酸、柠檬酸、草酸、醋酸等有机酸，其电离常数Ka均大于10^(-8),可以用强碱标准溶液直接滴定试样中的酸，以酚酞为指示剂确定滴定终点。按碱液的消耗量计算食品中的总酸含量。测定结果包括了未离解的酸的浓度和已离解的酸的浓度。 2.仪器与试剂 （1）仪器酸碱滴定装置；分析天平，感量分别为0.0001g及0.001g；组织捣碎机；研钵。 （2）实验用水实验用水应符合GB/T6682规定的二级水规格或蒸馏水，使用前应经煮沸，冷却。 （3）试剂 ①NaOH标准滴定溶液（0.1mol/L） ②1%酚酞溶液称取1g酚酞，溶于60ml95%乙醇中，用水稀释 至100ml。 3.实验步骤 （1）样品预处理 ①固体样品。取有代表性的固体样品至少200g，用捣碎机捣碎 至均匀，置于密闭玻璃容器内。 ②固、液样品。取按比例组成的固、液样品至少200g，用研 钵或组织捣碎机捣碎混匀后置于密闭的玻璃容器内。
③含二氧化碳的液体样品。至少取200g样品至500ml烧杯中置于电炉上，边搅拌边加热至微沸腾，保持2min，冷却，称量，用煮沸过的水补至煮沸前的质量，置于密闭玻璃容器中。 ④不含二氧化碳的液体样品。充分混匀均匀，置于密闭玻璃容器内。 （2）测定试液的制备 ①液体样品。若总酸含量小于或等于4g/kg，将试液用快速滤纸过滤。收集滤液，用于测定。若总酸含量大于4g/kg，称取10~50g 样品，用煮沸过的水定容至250ml，过滤。收集滤液，用于测定。 ②固体、半固体样品。称取均匀样品10~50g，精确至0.001g，置于烧杯中。用约80 煮沸过的水150ml将烧杯中的内容物转移到250ml容量瓶中，置于沸水浴中煮沸30min（摇动2~3次，使试样中的有机酸全部溶解于溶液中），取出，冷却至室温，用煮沸过的水定容至250ml。用快速滤纸过滤。收集滤液，用于测定。 （3）样品测定 ①准确吸取试样滤液25~50ml，使之含0.035~0.07g酸，置于250ml 锥形瓶中，加水40~60ml及0.2 1%的酚酞指示剂，用0.1mol/L NaOH 标准溶液滴定至微红色且30s不褪色。记录消耗0.1mol/L NaOH标准滴定溶液的体积（V1）。同一被测样品须滴定两次。 ②用水代替样品做空白试验，操作相同。记录消耗0.1mol/L NaOH 标准滴定溶液的体积（V2）。 （4）实验数据记录见表
在临床上治疗菊酯类中毒时,也发现一些名曰低毒的农药中毒时出现较严重症状,仍认为是药物毒性大或患者敏感,根本没考虑到其溶剂会有那么大的作用.今天看到CDC中毒控制中心谢立璟张轰顺2位的文章<菊酯类杀虫剂中毒溶剂是帮凶>,茅塞顿开.这里介绍给大家,相信一定会有帮助的. 敌杀死、保得、灭百可等拟除虫菊酯类杀虫剂，是广泛应用于农业生产和日常生活中的一类杀虫剂，具有高效、低毒、广谱的特点，目前的应用量仅次于有机磷杀虫剂。但近年来拟除虫菊酯类杀虫剂的中毒事件发生得较为频繁，应引起人们注意。 在处理拟除虫菊酯类杀虫剂中毒时我们发现，在这些杀虫剂中，虽然多数品种的毒性为低毒或中等毒，且产品中的菊酯类杀虫剂的含量也很低，多数在 2.5％～5％，但此类杀虫剂中毒患者的临床病情却表现得比较严重。另外，许多毒理学研究表明，拟除虫菊酯类杀虫剂对眼睛和皮肤无刺激性或刺激性很小，但临床中毒者的皮肤和眼睛刺激性却很明显。例如2.5％溴氰菊酯乳油，纯品经口、皮肤进入体内，毒性均不是很大，大鼠急性经口LD50为278mg/kg，经皮LD50在2000mg/kg以上，无皮肤刺激性，对眼睛轻度刺激。但临床上个别患者仅口服10ml左右，就可出现昏迷，皮肤和眼睛刺激症状也非常严重。 从我们在有关管理部门得到的材料和从农药厂家了解的情况中发现，拟除虫菊酯类杀虫剂中，乳油制剂的比例很大。这类溶剂的成分主要是甲苯和二甲苯，其中二甲苯占绝大多数。溶剂成分含量可占到乳油制剂总含量的80％以上，而且现今我国农药标签上又未规定必须标明溶剂成分。例如2.5％溴氰菊酯乳油，二甲苯比例高达80％以上。二甲苯是一个被广泛应用的有机溶剂，对中枢神经系统有麻醉作用，对黏膜有刺激作用，有报道说，口服10ml就可致人死亡。其口服中毒主要为中枢神经系统症状，中毒者可出现头痛、头晕、兴奋或酒醉状态、嗜睡等，严重者还会出现抽搐、昏迷。 目前我国菊酯类杀虫剂还是以乳油制剂最常使用。因此，我们建议医务人员在临床遇到拟除虫菊酯类杀虫剂中毒患者时，除了应注意到菊酯本身的毒性，还应该注意溶剂中毒的可能。[中国疾病预防控制中心中毒控制中心谢立璟张宏顺] 氨基甲酸酯类农药中毒 常见的氨基甲酸酯类农药为：呋喃丹、西维因、叶蝉散及以“威”字结尾的灭多威、涕灭威等。多为中等毒或低毒，个别如呋喃丹、灭多威为高毒。 本类农药为可逆性ChE抑制剂，与ChE结合后抑制其活性，但所形成的氨基甲酰化ChE快速水解而自动复能，不存在老化的问题。急性中毒的临床表现与有机磷中毒相似，但潜伏期短、毒性发作快，症状较相等程度的有机磷农药中毒轻。 特效解毒剂为阿托品，使用剂量应比有机磷农药中毒小，经口中毒单次用量为：轻度中毒－1-2mg,中度2-3mg，重度3-5mg；重复用药间隔时间为：轻度－30min，中度15-30min，重度10-15min。轻、中度可肌注给药，且不需阿托品化，重度必须静脉注射，酌情给予阿托品化，但病情好转即应减量和延长间隔时间，禁盲目大量给药，以免阿托品过量中毒。维持量为：轻、中度中毒每4－6h 0.5-1mg，重度中毒每2-4h给1-2mg，大部分维持24h即可，一般不超过48h。一般禁用肟类复能剂，因肟类与氨基甲酰化ChE结合后，反而防碍其自动水解活化。国内有呋喃丹、西维因、与兹克威中毒，经用阿托品治疗中毒症状缓解，加用解磷定或氯磷定后死亡的教训。 拟除虫菊酯类农药 拟除虫菊酯类杀虫剂是模仿天然除虫菊酯的化学结构，人工合成的一类农药，我国目前使用十分广泛。常见的拟除虫菊酯类农药有：溴氰菊酯（敌杀死、凯素灵）、氰戊菊酯（速灭杀丁、来福
拟除虫菊酯类杀虫剂的研究进展 摘要：拟除虫菊酯类农药自20世纪70年代发展至今已成为三大农药之一。拟除虫菊酯是一类重要的合成杀虫剂,具有高效、广谱、低毒和能生物降解等特性。本文简要评述了拟除虫菊酯的研究进展。 关键词：拟除虫菊酯类；杀虫剂；研究进展 Abstract: Pyrethroid pesticides had became one of the three major kinds of pesticides which were widely used throughout the world since 1970s. Pyrethroids are one kind of effective synthetic pesticides,which have been widely used in agriculture andpublic health.The progress on their synthesis and application were reviewed. The progress on their synthesis and application were reviewed. Key words: Pyrethroid; insecticide; research advance 拟除虫菊酯类（pyrethroid）是在天然除虫菊酯化学结构研究的基础上发展起来的，因其广谱高效的生物活性、较高的环境相容性等特点而被广泛应用于农业害虫、卫生害虫防治及粮食贮藏中[1]。目前与有机磷、氨基甲酸酯类农药并称为使用最广的三大农药，使用范围仅次于有机磷杀虫剂，位居杀虫剂市场第2位[2]。由此看来，拟除虫菊酯类杀虫剂在市场占有巨大的份额，所以对拟除虫菊酯类杀虫剂的研究进展进行综述是很有必要的。 1 拟除虫菊酯类农药 1.1背景 除虫菊作为农药至今已有110年以上的历史。到20 世纪80年代，英国的Elliott以天然除虫菊素为先导物，合成了世界第一个拟除虫菊酯类杀虫剂。之后Elliott在1972年又开发了第一个对光稳定的此类杀虫剂氯菊酯，继而日本住友化学公司开发了氰戊菊酯，并于1976年商品化。由此揭开了全球农药科技工作者对拟除虫菊酯的研究和开发。历程40余年，全球共开发了近80个拟除虫菊酯类杀虫剂[3]。 1.2研究进展 1.2.1第一代拟除虫菊酯类农药 第一代拟菊酯类农药的化学结构和理化性质与天然除虫菊素的十分接近,尤
实训一:水果中总酸度的测定 一、目的要求： 1.学会水果样品的预处理方法 2.掌握用酸碱滴定法测水果样品中总酸度的原理和方法 3、学会合理制定分析项目的顺序，做到合理安排分析时间，合理处理样品。 4、能熟练制备实训过程中所需要的标准溶液。 5、能规范记录数据并进行数据处理。 二、实训原理： 1. NaOH标准溶液的标定 NaOH易吸收水分及空气中的CO2，因此，不能用直接法配制标准溶液。需要先配成近似浓度的溶液，然后用邻苯二甲酸氢钾为基准物进行标定。以酚酞为指示剂，当滴定至终点溶液呈浅红色，且30S不褪色时。反应如下： KHC8H4O4+NaOH=KNaC8H4O4+ H2O 2.水果总酸度的测定 根据酸碱中和原理，用碱标准溶液滴定试样液中的酸时，以酚酞威指示剂。当滴定至终点溶液呈浅红色，且30S不褪色时，根据滴定时消耗的标准NaOH溶液的体积，可算出试样中的总酸度。其反应如下： HAC+NaOH→NaAc+H2O 三、实训所需仪器、试剂：洗仪器：袁驰 仪器：酸碱式滴定管、锥形瓶、移液管、量筒、烧杯、容量瓶、胶头滴管、洗耳球、水浴锅、铁架台、电子天平、玻璃棒、小纸片、干燥的纱布、试剂： 0.1000mol/LNaOH溶液、邻苯二甲酸氢钾、酚酞指示剂、水果试样、的蒸馏水、 无水CO 2 四、实验步骤： 1. 0.1000mol/LNaOH标准溶液的配制和标定配制：马佳红 称取固体NaOH约2g放置在500ml的烧杯中，先加入100ml少溶解，再加水稀释成500ml溶液，混匀，放入烧杯中，待标定。标定：曹芬芳用减量法准确称取0.41～0.45g邻苯二甲酸氢钾3份，分别放入250ml锥形瓶中，加25mL无CO2蒸馏水溶解。
学号姓名 实验三食品中总酸的测定（滴定法） 一、实验原理 果汁具有酸性反应，这些反应取决于游离态的酸以及酸式盐存在的数量。总酸度包括未解离酸的浓度和已解离酸的浓度。酸的浓度以摩尔浓度表示时，称为总酸度。含量用滴定法测定。果蔬中含有各种有机酸，主要有苹果酸、柠檬酸、酒石酸、草酸……。果蔬种类不同，含有机酸的种类和数量也不同，食品中酸的测定是根据酸碱中和的原理，即用标定的氢氧化钠溶液进行滴定。 二、材料、仪器与试剂 （一）材料：西红柿、苹果、果汁等 （二）仪器：碱式滴定管（20mL）、容量瓶（100mL）、移液管（10mL）、烧杯（100mL）、研钵或组织捣碎机、100ml量筒(量酒精)、1%酚酞指示剂、胶头滴管/滴瓶、容量瓶（1000mL）、布氏漏斗+滤纸、天平、三角烧瓶、洗瓶、活性炭（脱色）、和板、蒸馏水。 （三）试剂 1）．0.1mol/L氢氧化钠：称4.0g氢氧化钠定容至1000mL，然后用0.1mol/L邻苯二甲酸氢钾标定，若浓度太高可酌情稀释。 2）．1%酚酞指示剂：称1.0g酚酞，加入100mL50%的乙醇溶解。 三、操作步骤 1）0.1mol/L NaOH标准溶液的标定：将基准邻苯二甲酸氢钾加入干燥的称量瓶内，于105-110℃烘至恒重，用减量法准确称取邻苯二甲酸氢钾约0.6000克，置于250 mL锥形瓶中，加50 mL无CO2蒸馏水，温热使之溶解，冷却，加酚酞指示剂2-3滴，用欲标定的0.1mol/L NaOH溶液滴定，直到溶液呈粉红色，半分钟不褪色。同时做空白试验。 2）样品的处理与测定：准确称取混合均匀磨碎的样品10.0g（或吸10.0mL样品液），转移到100mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度、摇匀。用滤纸过滤，准确吸取滤液20mL放入100mL 三角瓶中，加入1%酚酞2滴，用标定的氢氧化钠滴定至初显粉色在0.5min内不褪色为终点，记下氢氧化钠用量，重复三次，取平均值。 四、实验结果 式中：V——样品稀释总体积（mL）V1——滴定时取样液体积V2——消耗氢氧化
川芎等9种药材中拟除虫菊酯类农药残留的检测 更新日期： 06-07 作者：刘旭，钟怀宁，游文玮，易容，杨雪梅 【关键词】川芎 摘要：目的考察9种药材中氯氰菊酯、氰戊菊酯的残留量。方法利用气相色谱(GCECD)分析方法测定药材中除虫菊酯类农药的残留量。结果川芎等8种药材中除虫菊酯类农药的残留量较低，低于相关农药的含量标准。结论测定结果表明该法操作简便，分离效果好，符合农药残留分析要求。 关键词：药材；除虫菊酯类农药残留；气相色谱法 Determination of the Residues of Cypermethrin and Fenvalerate in Nine Medical Materials Abstract：ObjectiveTo determine the residues of cypermethrin and fenvalerate in nine medical materials. MethodsThe contents of residue of cypermethrin and fenvalerate were determined by gas chromatography. ResultsThe contents of residue in eight medical materials were very low，which is fit for relative standard of residue of pesticides. ConclusionThis method has easy operation, high sensitivity and selectivity. Key words：Medical material; Pyrethroid pesticides residue; GCECD 中药材及其制剂的农药残留问题近年来逐渐引起人们的重视，中药材在栽培过程中，需施用化学农药以防止病虫害的侵蚀，由此引起了药材的农药污染问题，尽快建立中药中农药残留量的检测方法及限量标准，对保证人们用药安全具有积极的意义。拟除虫菊酯类农药是一类具有良好杀虫效果的广谱性农药，在药材种植中被广泛应用，然而它存在一定的异构体，这就导致了建立其残留测定方法的困难性。尽管在农产品中其残留测定方法已有报道［1］，但因中药成分复杂，其中农药残留量属超痕量范畴，这样使得农药的提取、分离、净化与富集的难度加大，现有文献中有关药材中拟除虫菊酯类农药检测较少［2］。本文运用了毛细管气相色谱法对川芎等9种药材中氯氰菊酯、氰戊菊酯的残留量进行了检测。 1 仪器与试药 1.1 仪器HP6890气相色谱仪；电子捕获检测器（uECD）；玻璃层析柱(10mm×21cm)；旋转蒸发器；减压、恒温水浴（SEASTAR R系列）；高速组织捣碎机（DS1）；高速分散均质机（FJ200）。 1.2 试剂与标准品氟罗里硅土（Florisil,60～80目），中性氧化铝（层析用、MERCK）；SPEFlorisil (JW, ACCUBOND, 0.5，1.0 g)；丙酮、乙腈、二氯甲烷、石油醚、无水硫酸钠均为分析纯，丙酮、正己烷、醋酸乙酯、甲醇为HPLC级（用于标准溶液、样品最终的定容，供检测器检测用）；除虫菊酯类农药标准品从有关标准机构获得，用正己烷/醋酸乙酯配制混合标准品溶液。 2 方法与结果 2.1 提取将药材切碎，充分混合均匀，或干燥，粉碎过筛。精密称取80.0 g样品于三角瓶中，加200 ml丙酮，浸泡4 h，振荡30 min，用装有石英砂的抽滤漏斗抽滤，吹去大量丙酮。 2.2 净化 2.2.1 液－液分配萃取丙酮提取液加50 ml饱和氯化钠溶液，用150 ml二氯甲烷经2次萃取，二氯甲烷萃取液经无水硫酸钠脱水，用少量二氯甲烷洗涤无水硫酸钠，合并萃取液，用旋转蒸发器在减压条件浓缩至少许(2～3 ml)。 2.2.2 层析柱净化制备混合吸咐剂层析柱，分别称取3 g氟罗里硅土、1 g中性氧化铝和0.5 g活性炭，按干法依次装入一玻璃层析柱中，在吸咐剂层的上下两端各加约1 cm的无
Keywords: Pyrethrin；colorimetry；fast measure 拟除虫菊酯类农药是20世纪70年代研发成功的一类仿生杀虫剂,具有性质稳定,不易光解,无特殊臭味及安全系数高,使用浓度低,触杀作用强,灭虫速度快,残效时间长等优点,被称为是杀虫剂农药的一个新的突破；是杀虫剂历史上的第三个里程碑。目前,人工合成的拟除虫菊酯类化合物数以万计,新产品相继投产,销售猛增,迄今已商品化的拟除虫菊酯类有50多种，现已占世界农药市场的1/4。拟除虫菊酯类杀虫剂已成为农用及卫生杀虫剂的主要支柱之一。 高毒有机磷农药被禁止使用后,拟除虫菊酯类杀虫剂便有了更广泛的使用空间,同时也带来了环境污染和食品安全等问题。氰戊菊酯是中国广为应用的一种拟除虫菊酯类农药。又由于拟除虫菊酯类杀虫剂残留期较长,对某些非目标生物如蜜蜂、家蚕及天敌昆虫毒性较大,对鱼、虾、蟹、贝类等水生生物毒性也很高。随着人们生活水平的不断提高，食品的安全性也越来越受到重视，故对农药最高残留限量的要求也日益严格。因此，建立一套高效、快速、准确的测定食品中的拟除虫菊酯类农药残留速测方法迫在眉睫。 目前国内外对常规拟除虫菊酯类农药的残留分析方法包括分光光度法、色谱法、免疫分析法等等。但这几种分析方法各有利弊,都仍需改进和研究。色谱法和免疫分析法具有特异性强,灵敏度高等优点,但其仪器价格昂贵，开发难度大,且只适用于单一化合物或结构相似的化合物,应用具有局限性。分光光度法的主要优点是简便快捷,设备简单便宜,但灵敏度和精确度都较低，因此我们针对此方法，了硫化二钠显色以测定丙烯菊酯等拟除虫菊酯类农药的残留量[1]和将样品用石油醚提取后加85 %磷酸和醋酸乙酯（4∶1）加热显色测定拟除虫菊酯类农药的残留量[2]两篇论文，开发出了一种能够简单快速准确检测食品中拟除虫菊酯类农药残留量的速测方法。 1 试验部分 1.1 仪器和试剂 仪器：YN-CLVI农药残留检测仪（河南农大迅捷测试技术有限公司）、KQ2200E 型超声波振荡器（昆山市超声波仪器有限公司）、恒温水浴槽（YN-CLVI农药残留检测仪配带）。 试剂（主要药剂均为分析纯））：硫化钠、硫酸钠、氢氧化钾、硅藻土、四氯化碳、乙醇、石油醚、乙腈； 显色剂：准确称量5.6gKOH溶于适量无水乙醇中，加入0.25gNa S，用无水 2 乙醇定容至100mL刻度线。 氰戊菊酯储备液（1000ppm）:吸取20%氰戊菊酯0.5ml于100ml容量瓶中，用石油醚（沸程60-90）定容至100ml刻度线。 氰戊菊酯标准液（10ppm）:吸取0.25ml氰戊菊酯储备液于25ml的容量瓶中，用石油醚（沸程60-90）定容至25ml刻度线。 1.2 样品前处理
实训一：水果总酸度的测定 一、实验目的 1、学会水果样品的预处理方法 2、掌握用酸碱滴定法测定水果样品中总酸度的原理和方法 3、学会合理指定分析项目的顺序，做到合理安排分析时间，合理处理样品。 4、能熟练纸杯实过程中所需要的标准溶液。 5、能规范记录数据并进行数据处理。 二、实验原理 ? 1. NaOH标准溶液的标定 NaOH易吸收水分及空气中的CO2，因此，不能用直接法配制标准溶液。需需要先配成近似浓度的溶液，然后用邻苯二甲酸氢钾为基准物进行标定。以酚酞为指示剂，当滴定至终点溶液呈浅红色，且30S不褪色时。反应如下：?KHC8H4O4+NaOH=KNaC8H4O4+ H2O ? 2.水果总酸度的测定 根据酸碱中和原理，用碱标准溶液滴定试样液中的酸时，以酚酞为指示剂。当滴定至终点溶液呈浅红色，30s不褪色时，根据滴定时消耗的标准碱溶液的体积，可算出试样中的总酸度。其反应如下： ?HAc+NaOH →NaAc+H2O 三、实验仪器及试剂 ?试剂：0.1000mol/LNaOH标准溶液、邻苯二甲酸氢钾、酚酞指示剂、无CO2的蒸馏水、水果试样（梨） ?仪器：洗耳球、玻璃棒、量筒、移液管、电子天平、 ?水浴锅、锥形瓶、容量瓶、酸碱滴定管、烧杯、小纸片、胶头滴管、干燥的纱布、铁架台 四、实验步骤 ?1、0.1000mol/LNaOH标准溶液的标定：（顾嘉俊王英权） ?0.1000mol/lNaoH标准溶液已经配制好，待标定。 ?用减量法准确称取0.4—0.45g邻苯二甲酸氢钾三份，分别放入250ml锥形瓶中，加25ml无CO2的蒸馏水溶解。 ?然后加1—2d 酚酞指示剂，用NaOH溶液滴定至终点（至粉红色，并保持30s不褪色为终点）。 ?记录每次消耗NaOH溶液的体积。 ?2、试样的处理：（朱方灵、陈鹏）
安全管理编号：LX-FS-A52021 拟除虫菊酯类农药中毒的危害及预 防标准范本 In the daily work environment, plan the important work to be done in the future, and require the personnel to jointly abide by the corresponding procedures and code of conduct, so that the overall behavior or activity reaches the specified standard 编写：_________________________ 审批：_________________________ 时间：________年_____月_____日 A4打印/ 新修订/ 完整/ 内容可编辑
拟除虫菊酯类农药中毒的危害及预 防标准范本 使用说明：本安全管理资料适用于日常工作环境中对安全相关工作进行具有统筹性，导向性的规划，并要求相关人员共同遵守对应的办事规程与行动准则，使整体行为或活动达到或超越规定的标准。资料内容可按真实状况进行条款调整，套用时请仔细阅读。 1．概述 拟除虫菊酯类农药是一类模拟天然除虫菊酯素的化学结构而合成的农药，亦称仿生合成农药。具有杀虫谱广、药效高、对哺乳类动物毒性一般较低、环境残留时间短特点，同时还有杀螨、杀菌和抑制霉菌作用。在我国使用的有20多种，如氰戊菊酯、氯氰菊酯和溴氰菊酯等。拟除虫菊酯类农药多为黏稠油状液体，为黄色或黄褐色，易溶于有机溶剂，难溶于水，多不易挥发，在酸性溶液中稳定存在，遇碱分解失
土壤中多种拟除虫菊酯类农药残留的提取与检测方法 发表时间：2019-04-11T15:08:34.547Z 来源：《基层建设》2019年第2期作者：谢新华[导读] 摘要：拟除虫菊酯曾一度被人们认为低毒、使用安全的拟除虫菊酯类农药，近年来相关研究表明，此类农药有蓄积毒性，人长期接触会引起慢性疾病，有致癌、致畸、致突变的危险。 身份证号码：45212219880415XXXX 摘要：拟除虫菊酯曾一度被人们认为低毒、使用安全的拟除虫菊酯类农药，近年来相关研究表明，此类农药有蓄积毒性，人长期接触会引起慢性疾病，有致癌、致畸、致突变的危险。本次研究重点土壤中多种拟除虫菊酯类农药残留的提取与检测方法，希望能够为白蚁的防治提供参考。 关键词：拟除虫菊酯；土壤；气相色谱检测；提取拟除虫菊酯类农药是根据天然除虫菊酯的化学结构仿制而成的一类含有苯氧基的环丙烷酯类物质，因其具有高效、低毒和代谢迅速等特点，在农作物灭虫和卫生害虫防治中得到越来越广泛的使用[1]。然而，由于拟除虫菊酯类农药具有一定的蓄积性，该类农药的广泛使用带来了土壤和水体等的环境污染问题以及农产品的农药残留问题。同时，毒理学研究发现，拟除虫菊酯对一些非目标生物如蜜蜂、家蚕、鱼、虾、蟹、贝等的毒性较高，且部分种类对人体具有致畸、致突变和内分泌干扰作用，因此，拟除虫菊酯类农药在环境中的残留问题受到人们日益广泛的关注。 1.白蚁的防治现状 白蚁是一种危害性很大的昆虫，主要表现为对房屋建筑及江河堤坝的破坏。目前白蚁防治仍以化学防治为主，使用药剂包括拟除虫菊酯类药剂和杂环类药剂，剂型包括液剂、粉剂和饵剂等。 联苯菊酯用于白蚁防治具有较强的驱避性，在土壤中稳定性较好、持效期较长、对哺乳动物低毒等一系列优点，是目前国内使用最多的一类白蚁防治剂。近年来，对应不同的应用领域，开发了许多不同浓度和不同剂型的农药产品，防治效果较为理想。施药方法包括土壤处理(喷洒)和木材处理(喷洒、涂刷、浸渍)[2]。 吡虫啉对白蚁具有触杀和胃毒作用，是一类毒性低、作用缓慢、环境安全的新型白蚁防治药剂，具有较好的发展前景。施药方法包括土壤处理(喷洒)和木材处理(喷洒、涂刷、浸渍)，使用浓度500～1000ppm，使用剂量3～5L/m2。 氟虫腈是一种全新的苯基吡唑类杀虫剂，杀虫谱广，具有触杀、胃毒和内吸传导作用。对白蚁无驱避作用，白蚁虽然可取食药物处理过的木材或经过药物处理带，但却毫无感觉，最后导致整个白蚁群体死亡。目前已开发了不同浓度的悬浮剂、粉剂等剂型，用于白蚁预防和灭治工作。施药方法包括土壤处理(喷洒)和木材处理(喷洒、涂刷、浸渍)，喷粉处理(喷粉球喷粉)。依维菌素是阿维菌素的衍生物，是新型的广谱、高效、低毒抗生素类杀虫剂。是通过阻断神经信号的传递，最终神经麻痹，使肌肉细胞失去收缩能力，从而导致白蚁死亡。目前产品有3%粉剂用于喷粉处理，0.3%乳油施药方法包括土壤喷雾、木材浸泡。 2.土壤中多种拟除虫菊酯类农药残留的提取 2.1主要仪器设备、试剂 气相色谱仪(Varian，CP3800)，配有荧光检测器(FLD)；超声清洗仪(KQ-250)；旋转蒸发仪(RE-52，上海亚荣)、玻璃层析柱(内径0.6cm，长18cm)。石油醚、乙酸乙酯和丙酮均为分析纯；正己烷为色谱纯；2%硫酸钠水溶液；无水硫酸钠为500℃烘烤4h；硅胶(100目~200目)130℃烘4h；超纯水(18.2MΩcm，Millipore)。 2.2农药标准品 联苯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯、顺式氯菊酯、反式氯菊酯、三氟氯氰菊酯标准液，浓度均为100mgL-1，纯度≥99%，购于农业部环境保护科研监测所(天津)。 混合标准液:分别准确吸取上述8种100mgL-1标准液0.1ml于50ml容量瓶中，用正己烷定容，得到浓度为0.2mgL-1的8种农药混合标准液，配置好的标样置于4℃冰箱中保存备用。 2.3土壤样品提取和净化 称取5~10g土壤样品置于150ml具塞三角瓶中，加入30ml石油醚/丙酮(v/v，2∶1)作为提取剂，浸泡过夜后，超声萃取20min，静置分层后，将上清液转移至125ml分液漏斗中，再用20ml石油醚/丙酮(v/v，2∶1)重复超声提取2次，将上清液合并，向分液漏斗中加入50ml2%硫酸钠水溶液并手动振摇200次，收集上层有机相。无水硫酸钠干燥后，旋转蒸发浓缩至1ml，待净化。 实验采用湿法装柱]，将预先经过石油醚活化的硅胶转移至层析柱中，硅胶长度约为10cm，两端分别装有长度约1cm的无水硫酸钠，敲实[3]。待无水硫酸钠表面刚露出液面时，将1ml拟除虫菊酯混合标准溶液转移到层析柱中，当浓缩液下降到无水硫酸钠表面时，向柱内加入石油醚/乙酸乙酯(v/v，9∶1)洗脱液累积24ml，考察每个8ml淋洗液洗脱出的拟除虫菊酯类物质的含量，收集洗脱液，并于常温下旋转蒸发近干，用正己烷重新溶解定容至1ml，待测。 2.4色谱分析条件 色谱柱为DB-5MS(30m×0.32mm×0.25μm)，检测器为电子捕获检测器ECD，柱前压为50kPa，载气为99.999%高纯氮气，流速40mlmin-1，进样口和检测器的温度分别为270℃和320℃。柱一级升温程序:初始温度210℃，保持1min，以10℃min-1升至285℃，保持10min。进样方式采用恒压方式，不分流进样，进样量为1μl。 2.5线性关系试验 取混合标准液(0.2mgL-1)10ml、5ml、2.5ml、0.5ml和0.25ml于10ml容量瓶中，用正己烷定容，配制成0.2mgL-1、0.1mgL-1、0.05mgL- 1、0.01mgL-1和0.005mgL-1的标准溶液。按上述色谱条件进行分析，得出各种农药不同浓度所对应的峰值和峰面积。 2.6回收率和精密度实验 对未检出8种拟除虫菊酯类农药的土壤样品，分别添加配置浓度水平分别为0.005mgkg-1、0.01mgkg-1、0.05mgkg-1和0.1mgkg-1的8种农药，每个水平作4次平行实验，按上述1.4和1.5中所述方法进行提取、净化和检测，计算本方法的回收率和精密度。 3.拟除虫菊酯农药的检测技术
水果中总酸度的测定 一、目的要求： 1.学会水果样品的预处理方法 2.掌握用酸碱滴定法测水果样品中总酸度的原理和方法 3、学会合理制定分析项目的顺序，做到合理安排分析时间，合理处理样品。 4、能熟练制备实训过程中所需要的标准溶液。 5、能规范记录数据并进行数据处理。 二、原理： ，因此，不能用直接法配制标准1. NaOH标准溶液的标定 NaOH 易吸收水分及空气中的 CO 2 溶液。需要先配成近似浓度的溶液，然后用邻苯二甲酸氢钾为基准物进行标定。以酚酞为指示剂，当滴定至终点溶液呈浅红色，且 30S不褪色时。反应如下： KHC8H4O4+NaOH=KNaC8H4O4+ H2O 2.水果总酸度的测定根据酸碱中和原理，用碱标准溶液滴定试样液中的酸时，以酚酞威指示剂。当滴定至终点溶液呈浅红色，且 30S不褪色时，根据滴定时消耗的标准 NaOH 溶液的体积，可算出试样中的总酸度。其反应如下： HAC+NaOH→NaAc+H2O 三、所需仪器、试剂： 仪器：酸碱式滴定管、锥形瓶、移液管、量筒、烧杯、容量瓶、胶头滴管、洗耳球、水浴锅、铁架台、电子天平、玻璃棒、小纸片、干燥的纱布 的蒸试剂： 0.1000mol/L NaOH 溶液、邻苯二甲酸氢钾、酚酞指示剂、水果试样、无CO 2 馏水 四、实验步骤： 1. 0.1000mol/LNaOH 标准溶液的配制和标定 称取固体NaOH约2g放置在500mL的烧杯中，先加入100ml溶解，再加水稀释成 500mL 溶液，混匀，放入烧杯中，待标定。 用减量法准确称取0.41～0.45g邻苯二甲酸氢钾3份，分别放入250mL锥形瓶中，加25mL 无CO2蒸馏水溶解。然后加1~2滴酚酞指示剂，用 NaOH 标准溶液滴定至终点（至粉红色，并保持30s不褪色为终点）。记录每次消耗 NaOH 溶液的体积。 2.试样处理： 取水果试样，需去皮、去柄、去核，切成块状，置于搅拌机中捣碎并混匀。准确移取 25mL 水果试样，加100mL无CO 的蒸馏水，稀释定容为250mL溶液。然后倒入烧杯中在 75～80℃ 2 水浴上加热30分钟。冷却后过滤，滤液倒入容量瓶中备用。 3.滴定： 准确吸取20mL滤液三份于250mL锥形瓶中，各加25mL水稀释。加1-2滴酚酞指示剂，用NaOH标准溶液滴定至终点，至粉红色30S不褪色。记录NaOH消耗量的体积，平行三次。 五、计算公式 C NaOH=m KHC8H4O4/（V NaOH×M KHC8H4O4）X1000 ρHAc=（C NaOH×V NaOH×M Hac×10-3)/(20.00/250.0×25.00)