Y染色体微缺失检测试剂盒
背景介绍
根据国际卫生组织调查数据，约15%育龄夫妇存在生育障碍，其中男性因素引起的生育障碍约占一半。在已知的导致男性不育的遗传学因素中，发病率最高的两种是Y染色体的微缺失和克氏综合症。
Y染色体具有大量重复基因序列及回文结构，这些结构在维持Y染色体进化稳定性的同时也使回文结构内部基因易于丢失，进而导致不育。缺失率最高的三个影响精子发生的区域被命名为AZFa，AZFb和AZFc，它们之中任何一个出现缺失都有可能导致育性下降或不育。Y染色体微缺失在无精症或少精症患者中发病率在10-15%，已成为男性不育患者的常规检查项目。
图1，Y染色体AZF区结构示意图（AZFa区两端有两段原病毒序列、AZFb/c区内部有5个序列高度一致的大的回文结构，这些序列和结构导致相应染色体片段易发生同源重组，造成缺失或复制。）
欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控协作网（EAA/EMQN）2004年发表“Y染色体微缺失分子诊断指导意见”建议通过对各AZF区的共6个STS位点和两个对照位点检测Y染色体微缺失。
产品简介
本剂盒通过“多重定量荧光PCR技术”（Multiplex Quantitative Fluorescent PCR），以一个高度复合的扩增体系中扩增至少15个Y染色体微缺失检测相关的位点，并根据各位点有无扩增产物及扩增产物剂量判断缺失类型。
对于Y染色体微缺失，由于各AZF区片段相对较小，常规核型分析等方法难以发现其缺失。本项目采用的检测方法是：在各AZF区上分别选择具有序列特异性的多个位点，通过多重定量荧光PCR方法检测各位点。根据有无扩增产物判定样本染色体是否包含所检测的序列特异性位点，进而推断样本染色体是否在位点所在AZF区域发生缺失；通过部分位点扩增产物相对剂量确定相关位点拷贝数比例，根据拷贝数比例推断相关位点对应区域是否发生缺失或复制，并对于AZFb和/或AZFc区部分缺失或复制，实现了首次检测。该技术已经申请国家专利。
表1. 试剂盒包括检测位点基本信息
1）操作简便，每个样品只需一个扩增检测反应，适于批量化检测，可以在4-5小时内完成检测；
2）模版需要量低，体系稳定性好，兼容chelex提取方法；
3）检测位点包含EAA/EMQN指导意见中使用的全部6个STR位点和2个对照位点，结果准确性更高，可检测AZFb区、AZFc区各常见部分缺失及复制；
4）体系扩增能力超过同类产品3-4倍，可以在一个反应完成全部扩增；
5）成本低，检测成本140元/人左右，适合批量化检测。
6）可同时对克氏综合症进行检测。
产品应用
1）无精症、少精子症患者病因排查；
2）男性不育症患者选择体外受精（IVF）或单精子卵泡浆内注射（ICSI）生育前；3）精子库对精子进行遗传背景筛查；
4）男性不育伴隐睾和精索静脉曲张或其他原因不明的不育症患者病因排查；4）妻子为不明原因的习惯性流产患者的病因排查。
注：箭头示缺失或比例异常位点。
本项目所研制的检测体系，与目前已有的应用于Y 染色体微缺失检测的体系和产品比较，同样具有显著优势，具体性能比较如下表：
产品信息
相关服务
Y染色体微缺失检测指 导 内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）
Y染色体微缺失是严重少精子或无精子症的重要原因，是导致男性不育的第二大遗传因素，其发生率仅次于Klinefelter综合征(克氏综合征)。从1999年开始，欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控网(EAA/EMQN)为提高诊断质量，出版了Y 染色体微缺失分子诊断指南，并提供了客观的实验质量评价方法。最新版的实验室指南是2013年9月EAA/EMQN根据12年的临床积累和专家共识，在1999版和2004版的基础上修订而成。新指南重点阐明：在少精子症或无精子症男性中发现的Y染色体微缺失区域，主要是无精子因子(azoospermia factor，AZF)区域仅包含AZFa、AZFb、AZFbc、AZFc和AZFabc区，独立的AZFd区并不存在；AZFc区中gr/gr缺失是影响精子生成的一个危险因素，但临床意义尚存争议，不作为常规检查指标；检测位点增加并不能提高检测灵敏度，反而可能使结果复杂化；基于两管多重PCR的检测方法仍适用于整个AZF缺失检测。EAA/EMQN 12年国际质量评估计划(EQA计划)的实施表明，参与实验室通过规范实验操作，改善报告质量，可有效降低诊断错误率。Y染色体微缺失在中国不育男性中的发生频率为%，处于较高水平，我们建议将AZF检测作为男性严重少精子或无精子症的常规检测项目，呼吁国内AZF检测实验室加入EQA计划，完善中国Y染色体微缺失检测实验操作规范。Y染色体微缺失分子检测在中国已开展多年，国内专家对AZF缺失模式、检测序列标签位点(sequence–tagged site, STS)的数量、检测方法和内部质量控制等临床问题未达成共识。各实验室的诊断操作方法有很大不同，导致不准确或错误诊断时有发生，迫切需要建立Y染色体微缺失诊断标准和质量控制标准。EAA/EMQN
Y 染色体微缺失是严重少精子或无精子症的重要原因，是导致男性不育的第二大遗 传因素，其发生率仅次于Klinefelter 综合征( 克氏综合征) 。从1999 年开始，欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控网(EAA/EMQN为提高诊断质量，出版了 色体微缺失分子诊断指南，并提供了客观的实验质量评价方法。最新版的实验室指 南是2013年9月EAA/EMQ根据12年的临床积累和专家共识，在1999版和2004 版的基础上修订而成。新指南重点阐明：在少精子症或无精子症男性中发现的 色体微缺失区域，主要是无精子因子(azoospermia factor , AZF)区域仅包含AZFa AZFb AZFbc、AZFc和AZFabc区，独立的AZFd区并不存在；AZFc区中gr/gr 缺失 是影响精子生成的一个危险因素，但临床意义尚存争议，不作为常规检查指标；检 测位点增加并不能提高检测灵敏度，反而可能使结果复杂化；基于两管多重PCR的检测方法仍适用于整个AZF缺失检测。EAA/EMQN2年国际质量评估计划(EQA计划) 的实施表明，参与实验室通过规范实验操作，改善报告质量，可有效降低诊断错误 率。Y染色体微缺失在中国不育男性中的发生频率为%处于较高水平，我们建议将 AZF检测作为男性严重少精子或无精子症的常规检测项目，呼吁国内AZF 检测实验室加入EQA 计划，完善中国Y 染色体微缺失检测实验操作规 范。 Y染色体微缺失分子检测在中国已幵展多年，国内专家对AZF缺失模式、检测序列 标签位点(sequenee - tagged site, STS) 的数量、检测方法和内部质量控制等临床 问题未达成共识。各实验室的诊断操作方法有很大不同，导致不准确或错误诊断时 有发生，迫切需要建立Y染色体微缺失诊断标准和质量控制标准。EAA/EMQ更新的2013版指南对以上问题都给出了明确的专家共识，对我国建立自己的检测指南有重 要的指导意 义。
焦坠匡堂！！！兰生！！旦笙望鲞箜！！塑坐！堕！型塑！尘堕竺！望！！！竺！竺！！！！！ｙ！！垫：塑！！！：文章编号：１６７３－８６４０（２０１４）１２．１２１２＿０３中图分类号：Ｒ４４６．１１文献标志码：ＡＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－８６４０．２０１４．１２．００３ 无精症及严重少精症患者染色体核型和Ｙ染色体微缺失分析 滕贤麟，施金俏，郭辉，周燕霞 （浙江省金华市人民医院检验科，浙江金华３２１０００） 摘要：目的分析男性不育中无精症及严重少精症患者染色体核型和Ｙ染色体微缺失情况及分布特点，为 卵细胞浆内单精子注射术（ＩＣＳＩ）辅助助孕前提供遗传学筛选依据。方法对１５０例无精症及严重少精症患者外周血液采用外周血淋巴细胞培养Ｇ显带方法进行染色体核型分析，采用多重聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合琼脂糖凝胶电泳检测Ｙ染色体微缺失。结果１５０例无精症及严重少精症患者，染色体核型异常１４例，异常率９．３％； Ｙ染色体微缺失１６例，异常率１０．７％。结论对无精症及严重少精症患者进行染色体核型分析和Ｙ染色体微缺失检测，可为患者在ＩＣＳＩ辅助助孕前提供筛选依据，避免在ＩＣＳＩ治疗中将遗传缺陷传递给子代，同时减少患者精神上和经济上的负担。 关键词：染色体；核型；Ｙ染色体微缺失；无精症；严重少精症 ＡｎａｌｙｓｉｓｏｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｋａｒｙｏｔｙｐｅｓａｎｄＹｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｏｒｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａＴＥＮＧＸｉａｎｌｉｎ，ＳＨＩＪｉｎｑｉａｏ，ＧＵＯＨｕｉ，ＺＨＯＵＹａｎｘｉａ．（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＪｉｎｈｕａＰｅｏｐｌｅ’ＳＨｏｓｐｉｔａｌ，ＺｈｅｊｉａｎｇＪｉｎｈｕａ３２１０００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｋａｒｙｏｔｙｐｅｓａｎｄＹｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎｓａｎｄｔｈｅｉｒｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｏｒｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ，ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｐｒｏｖｉｄｅｔｈｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｇｅｎｅｔｉｃｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ（ＩＣＳＩ）ｂｅｆｏｒｅｐｒｅｇｎａｎｃｙ．ＭｅｔｈｏｄｓＡｔｏｔａｌｏｆ１５０ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｏｒｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｗｅｒｅｅｎｒｏｌｌｅｄ．ＣｈｒｏｍｏｓｏｍｅｋａｒｙｏｔｙｐｅａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｏｎｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓｗｉｔｈＧ－ｂａｎｄｉｎｇ．Ｙｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｅｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｍｕｌｔｉｐｌｅｘｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ（ＰＣＲ）ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈａｇａｒｏｓｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｒｅｗｅｒｅ１４ｃａｓｅｓｏｆａｂｎｏｒｍａｌｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｋａｒｙｏｔｙｐｅｓａｎｄ１６ｃａｓｅｓｏｆＹｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎｓｉｎ１５０ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｏｒｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ，ａｎｄｔｈｅ ａｂｎｏｒｍａｌｒａｔｅｓｗｅｒｅ９．３％ａｎｄ １０．７％．ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓＦｏｒｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａｏｒｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ，ｔｈｅｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｋａｒｙｏｔｙｐｅａｎａｌｙｓｉｓａｎｄＹｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｓｃｏｕｌｄｐｒｏｖｉｄｅｇｅｎｅｔｉｃｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｂｅｆｏｒｅｐｅｒｆｏｒｍｉｎｇＩＣＳＩｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ，ａｖｏｉｄｉｎｇｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｂｅｉｎｇｐａｓｓｅｄｔｏｏｆｆｓｐｒｉｎｇａｎｄｒｅｄｕｃｉｎｇｔｈｅｐａｔｉｅｎｔｓ’ｍｅｎｔａｌａｎｄｅｃｏｎｏｍｉｃｂｕｒｄｅｎｓ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ；Ｋａｒｙｏｔｙｐｅ；Ｙｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｍｉｃｒｏｄｅｌｅｔｉｏｎ；Ａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ；Ｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ 据世界卫生组织调查显示，全世界有１５％的 夫妇患有不孕不育症，其中男性因素占４０％一 ５０％，而３０％的男性不育是由遗传因素引起的生 精障碍¨ｏ，表现为无精或少精。男性不育遗传因 素主要包括三方面：（１）染色体核型异常，如克氏 症４７，ＸＸＹ；（２）Ｙ染色体微缺失，如ＡＺＦｂ缺失； （３）基因突变，如囊性纤维化病等。目前，对无精 症及严重少精症患者辅助生育的有效治疗方法是 卵细胞浆内单精子注射术（ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ＩＣＳＩ），精子的主要来源是精液中排出 的少量精子，也可以通过睾丸细针穿刺术或经皮 附睾穿刺抽吸取精术获取。这些技术的应用，使 自然选择的过程大大减少，增加了将父代的遗传 缺陷垂直遗传给男性子代的风险。因此，精子异 作者简介：滕贤麟，男，１９７８年生，学士，主管技师，主要从事临床检验工作。常的不育患者在ＩＣＳＩ辅助助孕前都应常规进行遗传学筛查，包括染色体核型分析和Ｙ染色体微缺失检测。我们通过对金华地区１５０例无精症及严重少精症患者的染色体核型分析和Ｙ染色体微缺失检测，旨在分析其异常发生的分布和频率，为不育患者在ＩＣＳＩ治疗前提供必要的遗传咨询。 材料和方法 一、材料 １．研究对象２０１０年５月至２０１２年１２月来金华市人民医院生殖中心就诊的１５０例无精症或严重少精症患者（按照世界卫生组织标准连续３次精液常规分析确诊），年龄２５～３８岁；正常对照２０名（年龄２５—３５岁），分别采取２份外周血标 万方数据
Y染色体微缺失基因检测的临床意义 男性严重少弱精子症其中约8%的患者是由于Y染色体微缺失所导致的。过去这类患者常常失去为人父的机会。现代试管婴儿技术让这类患者生育成为可能，但与此同时也可能将本该自然淘汰的遗传缺陷传递给后代。 什么是Y染色体？ 人类有23对染色体，其中1～22对为常染色体，是男性和女性所共有的，第23对为性染色体，男性为XY，女性为XX。Y染色体为男性所特有，虽然它看起来个头比较小，但是功能可不小，它不仅是性别决定的关键因素，同时也在男性精子发生过程中发挥至关重要的作用。 Y染色体分为短臂和长臂两个部分，其中短臂上有一个男性睾丸决定基因，叫SRY基因，它是胚胎向男性发育的关键基因。长臂上有和精子发生至关重要的区域，叫做AZF，可分为AZFa、AZFb、AZFc 三个区域。
Y染色体微缺失的危害 Y染色体内部含有丰富的同源重复序列，在细胞分裂过程中易发生重组，而导致部分基因缺失，不同区域基因的缺失带来的危害程度不同。 SRY基因缺失的男性表现为的女性特征，伴有睾丸发育不良。 AZF不同区域缺失表现各异：（1）AZFa和AZFb区域缺失一般表现为无精子症，睾丸穿刺一般也无活动成熟精子。（2）AZFc缺失的男性患者临床表现存在变异，可表现为无精子症或者严重少弱精子症，而且随着男性年龄的增长症状有加重趋势。 AZF微缺失对后代的影响 AZFa和AZFb缺失个体一般均表现为无精症，仅可通过供精人工授精或供精试管婴儿技术生育后代。 AZFc缺失个体可表现为严重少弱精症，通过单精子卵浆内注射（ICSI）技术能够生育后代。女性宝宝没有Y染色体，所以不会遗传Y染色体上的基因缺陷。男性宝宝的Y染色体只能来自于其父亲，所以AZFc缺失父亲生育的男性宝宝100%遗传AZFc缺失基因缺陷，等将来孩子成人后也会存在相似的生精功能障碍。而且据研究报道，后代中AZF缺失区域还有扩大趋势，也就是说后代的生精功能障碍可能加重，甚至直接表现为无精症而失去生育能力。 胚胎植入前遗传学诊断（PGD）的应用 单精子胞浆注射（ICSI）技术，即“第二代试管婴儿”，虽然解
丫染色体微缺失是严重少精子或无精子症的重要原因，是导致男性不育的第二大 遗传因素，其发生率仅次于Klinefelter综合征（克氏综合征）。从1999年开始，欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控网（EAA/EMQN为提高诊断质量，出版了丫染色体微缺失分子诊断指南，并提供了客观的实验质量评价方法。最新版的实验 室指南是2013年9月EAA/EMQN根据12年的临床积累和专家共识，在1999版和2004版的基础上修订而成。新指南重点阐明：在少精子症或无精子症男性中发现的丫染色体微缺失区域，主要是无精子因子（azoospermia factor，AZF）区域仅包含AZFa AZFb AZFbc AZFc和AZFabc区，独立的AZFd区并不存在；AZFc 区中gr/gr 缺失是影响精子生成的一个危险因素，但临床意义尚存争议，不作为常规检查指标；检测位点增加并不能提高检测灵敏度，反而可能使结果复杂化；基于两管多重PCR的检测方法仍适用于整个AZF缺失检测。EAA/EMQN 12年国际质量评估计划（EQA计划）的实施表明，参与实验室通过规范实验操作，改善报告质量，可有效降低诊断错误率。丫染色体微缺失在中国不育男性中的发生频率为11.5%，处于较高水平，我们建议将AZF检测作为男性严重少精子或无精子症的常规检测项目，呼吁国内AZF检测实验室加入EQA计划，完善中国丫染色体微缺失检测实验操作规范。 丫染色体微缺失分子检测在中国已开展多年，国内专家对AZF缺失模式、检测序 列标签位点（sequenee- tagged site, STS的数量、检测方法和内部质量控制等临床问题未达成共识。各实验室的诊断操作方法有很大不同，导致不准确或错误诊断时有发生，迫切需要建立丫染色体微缺失诊断标准和质量控制标准。EAA/EMQN 更新的2013版指南对以上问题都给出了明确的专家共识，对我国建立自己的检测指南有重要的指导意义。 一、丫染色体微缺失发生频率 丫染色体微缺失在健康人群中发生率约为1/4 000，但在不育男性中显着升高， 微缺失发生频率为2%?10%（甚至更高）。2013版指南指出丫染色体微缺失在中国不育男性中发生频率为11.5%,处于较高水平。2006年朱晓斌等［1］针对中国不育男性染色体的研究表明AZF微缺失在非梗阻性无精子症患者中的发生率为9.94%，严重少精子症患者中发生率为5.82%，与国内外其他学者的研究基本一致。 随着微缺失分子机制的阐明和丫染色体男性特异区域的结构（MSY）测序完成，结合十多年临床数据分析，EAA专家总结沿用Repping等［2］对丫染色体微缺失区域 的定义模式，分为：AZFa区缺失、AZFb区缺失、AZFbc区缺失和AZFc区缺失，认为只有该微缺失模式有明确的临床表现。国内外学者对AZFd区缺失是否存在
Y染色体微缺失是严重少精子或无精子症的重要原因，是导致男性不育的第二大遗传因素，其发生率仅次于Klinefelter综合征(克氏综合征)。从1999年开始，欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控网(EAA/EMQN)为提高诊断质量，出版了Y染色体微缺失分子诊断指南，并提供了客观的实验质量评价方法。最新版的实验室指南是2013年9月EAA/EMQN根据12年的临床积累和专家共识，在1999版和2004版的基础上修订而成。新指南重点阐明：在少精子症或无精子症男性中发现的Y染色体微缺失区域，主要是无精子因子(azoospermia factor，AZF)区域仅包含AZFa、AZFb、AZFbc、AZFc和AZFabc区，独立的AZFd区并不存在；AZFc区中gr/gr缺失是影响精子生成的一个危险因素，但临床意义尚存争议，不作为常规检查指标；检测位点增加并不能提高检测灵敏度，反而可能使结果复杂化；基于两管多重PCR 的检测方法仍适用于整个AZF缺失检测。EAA/EMQN 12年国际质量评估计划(EQA计划)的实施表明，参与实验室通过规范实验操作，改善报告质量，可有效降低诊断错误率。Y染色体微缺失在中国不育男性中的发生频率为11.5%，处于较高水平，我们建议将AZF检测作为男性严重少精子或无精子症的常规检测项目，呼吁国内AZF检测实验室加入EQA计划，完善中国Y染色体微缺失检测实验操作规范。 Y染色体微缺失分子检测在中国已开展多年，国内专家对AZF缺失模式、检测序列标签位点(sequence–tagged site, STS)的数量、检测方法和内部质量控制等临床问题未达成共识。各实验室的诊断操作方法有很大不同，导致不准确或错误诊断时有发生，迫切需要建立Y染色体微缺失诊断标准和质量控制标准。EAA/EMQN更新的2013版指南对以上问题都给出了明确的专家共识，对我国建立自己的检测指南有重要的指导意义。 一、Y染色体微缺失发生频率 Y染色体微缺失在健康人群中发生率约为1/4 000，但在不育男性中显著升高，微缺失发生频率为2%～10%(甚至更高)。2013版指南指出Y染色体微缺失在中国不育男性中发生频率为11.5%，处于较高水平。2006年朱晓斌等[1]针对中国不育男性染色体的研究表明AZF微缺失在非梗阻性无精子症患者中的发生率为9.94%，严重少精子症患者中发生率为5.82%，与国内外其他学者的研究基本一致。 随着微缺失分子机制的阐明和Y染色体男性特异区域的结构(MSY)测序完成，结合十多年临床数据分析，EAA专家总结沿用Repping等[2]对Y染色体微缺失区域的定义模式，分为：AZFa 区缺失、AZFb区缺失、AZFbc区缺失和AZFc区缺失，认为只有该微缺失模式有明确的临床表现。国内外学者对AZFd区缺失是否存在一直存有争议。尽管发现在AZFb与AZFc两区域之间存在新的缺失位点(一些学者认为的AZFd区缺失)，但是该区域缺失没有明确的临床意义，也并非独立存在的缺失模式。所以第四区域AZFd区缺失仍存在较多争议。Müslümanolu 等[3]在2005年的一项研究中指出AZFd缺失可能与精子形成有关，但仍缺乏有力的临床证据。2013年，陈科等[4]在精子正常和轻度少精子症患者中都发现了假定的AZFd区缺失。然而，至今为止AZFd区域尚未发现与精子生成相关的候选基因，其缺失所对应的临床表型还需进一步确认。 二、gr/gr缺失不纳入常规检查项目 研究证实gr/gr缺失属于AZFc部分缺失，是影响精子生成的一个重要因素，但是否需要将其作为常规检查指标尚存争议。尽管gr/gr缺失可导致AZFc区一半以上基因丢失，但其临床意义仍不明确，因为该缺失患者精子生成表型变化多样，从少精到精子数目正常都存在。gr/gr 缺失表型在不同人种和地域间存在差异，已有研究证实在欧洲白种人(除了法国人[5]和德国人[6])和西太平洋居民中，gr/gr缺失是男性生精障碍的高危因素[7]。但在部分亚洲国家如日本和中国[8,9]，gr/gr缺失在健康人群中的概率和在不育患者的概率无显著差别。李铮等[10]
Y染色体微缺失基因检测的临床意义 内部编号：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）
Y染色体微缺失基因检测的临床意义男性严重少弱精子症其中约8%的患者是由于Y染色体微缺失所导致的。过去这类患者常常失去为人父的机会。现代试管婴儿技术让这类患者生育成为可能，但与此同时也可能将本该自然淘汰的遗传缺陷传递给后代。 什么是Y染色体？ 人类有23对染色体，其中1～22对为常染色体，是男性和女性所共有的，第23对为性染色体，男性为XY，女性为XX。Y染色体为男性所特有，虽然它看起来个头比较小，但是功能可不小，它不仅是性别决定的关键因素，同时也在男性精子发生过程中发挥至关重要的作用。 Y染色体分为短臂和长臂两个部分，其中短臂上有一个男性睾丸决定基因，叫SRY基因，它是胚胎向男性发育的关键基因。长臂上有和精子发生至关重要的区域，叫做AZF，可分为AZFa、AZFb、AZFc三个区域。 Y染色体微缺失的危害 Y染色体内部含有丰富的同源重复序列，在细胞分裂过程中易发生重组，而导致部分基因缺失，不同区域基因的缺失带来的危害程度不同。 SRY基因缺失的男性表现为的女性特征，伴有睾丸发育不良。 AZF不同区域缺失表现各异：（1）AZFa和AZFb区域缺失一般表现为无精子症，睾丸穿刺一般也无活动成熟精子。（2）AZFc缺失的男性患者临床表现存在变异，可表现为无精子症或者严重少弱精子症，而且随着男性年龄的增长症状有加重趋势。 AZF微缺失对后代的影响 AZFa和AZFb缺失个体一般均表现为无精症，仅可通过供精人工授精或供精试
管婴儿技术生育后代。 AZFc缺失个体可表现为严重少弱精症，通过单精子卵浆内注射（ICSI）技术能够生育后代。女性宝宝没有Y染色体，所以不会遗传Y染色体上的基因缺陷。男性宝宝的Y染色体只能来自于其父亲，所以AZFc缺失父亲生育的男性宝宝100%遗传AZFc缺失基因缺陷，等将来孩子成人后也会存在相似的生精功能障碍。而且据研究报道，后代中AZF缺失区域还有扩大趋势，也就是说后代的生精功能障碍可能加重，甚至直接表现为无精症而失去生育能力。 胚胎植入前遗传学诊断（PGD）的应用 单精子胞浆注射（ICSI）技术，即“第二代试管婴儿”，虽然解决了AZF缺失导致的严重少弱精症患者的生育问题，但是会将生精功能障碍缺陷遗传给自己的儿子。所以，在进行辅助生殖技术前，夫妇应当充分遗传咨询，了解其风险，知晓其男性后代亦存在生精功能障碍，甚至有无精症可能。 为了预防这种出生缺陷在家族中遗传，可以通过胚胎植入前遗传学诊断（PGD）技术，即“第三代试管婴儿”，选择生育女孩，从而阻断缺陷基因传递给儿子。 总之，通过现代辅助生殖技术可以帮助Y染色体微缺失导致的严重少弱精子症男性生育自己的后代，结合PGD技术的应用，同时可以预防生精缺陷基因传递给后代。
中国人Y染色体微缺失分子诊断指南（草案） 2005.4 上海 前言 在精子发生障碍引起的男性不育患者中，Y染色体微缺失的发生率仅次于Klinefelter’s syndrome(克氏综合征)，是居于第二位的遗传因素。Y染色体微缺失已成为男性不育患者的常规检查项目。欧洲男科学协会和欧洲分子遗传实验质控协作网为提高诊断质量，在1999年和2004年先后发布了第一版和第二版Y染色体微缺失分子诊断指南。经过多年的临床实践证明该指南准确、灵敏和易于操作。2005年4月在上海召开了中国人Y 染色体微缺失分子诊断的研讨会，成立了Y染色体微缺失分子诊断协作网。会议在欧洲指南的基础上起草了符合目前我国男性不育诊疗现状，并反应最新生物技术发展的中国人Y染色体微缺失分子诊断指南。本指南重点讨论Y染色体微缺失分子诊断具体实施时的标准化和规范化，推荐的相关方法和设计是根据欧洲指南和我国已有的实验研究基础上综合而成。对机理研究和背景知识介绍部分在本指南中不再详细讨论。 男性不育症患者Y染色体微缺失分子筛查适应症 常规检测的适应症： 1、男性不育症患者选择单精子卵泡浆内注射（ICSI）或体外受精（IVF）生育子代前； 2、非梗阻性无精子症患者； 3、严重少精子症患者（精子数目少于5×106/ml）； 4、无精子症患者进行睾丸活检术前； 5、男性不育症患者（如精索静脉曲张）手术前； 6、原因不明的男性不育症患者用药前。 推荐检测的适应症： 1、少精子症患者（精子数目少于20×106/ml）； 2、精子密度正常，但原因不明的男性不育症患者； 3、男性不育伴隐睾和精索静脉曲张的患者； 4、妻子有不明原因习惯性流产的患者。