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BALB c裸鼠

BALB c裸鼠
BALB c裸鼠

BALB/c裸鼠

专业名称:CAnN.Cg-Foxn1nu/CrlVr

近交系(Inbred Mice)

来源:

Charles River Japan(CRJ)公司通过对BALB∕cABon-nu和BALB∕cAnNCrj-nu进行交配和回交得到该品系

1985年CRJ得到了来源明晰的BALB∕cAnNCrj-nu孕鼠,并在同年进行剖腹产

这种小鼠是近交的,遗传监测确证是BALB∕c裸鼠

此小鼠没有胸腺,因此造成T细胞缺陷

2001年维通利华从CRL引入第8代核心群

毛色:无毛,白化背景

特性和用途:

生长发育不良,繁殖力低下,易发生严重感染

胸腺缺失,为第11对染色体隐性遗传

由于无胸腺,仅有胸腺残迹或异常上皮

不能使T细胞正常分化,故T细胞免疫缺陷

B淋巴细胞正常,但功能缺陷,抗体主要为IgM,只有少量IgG

无接触敏感性,无移植排斥反应,因此可广泛用于免疫学、肿瘤学和疾病发生机理的研究

价格

参考数据:

数据来源Charles River

名称:BALB/c小鼠

〖简介〗:1913年,贝格(Bagg)从美国商人欧希尔(Ohio)处购得的白化小鼠原种,以群内方法繁殖。麦克·多威尔(MacDowell)在1923年开始作近交系培育,至1932年达26代,命名为BALB/c 品系。安德尔文特(Andervont)等人使BALB/c广为传播和应用。1985年我国从美国NIH引进到中国医学科学院实验动物研究所,为BALB/c第180代。

毛色:白化。

主要特性:①乳腺肿瘤自然发生率低,但用乳腺肿瘤病毒诱发时发病率高;卵巢、肾上腺和肺的肿瘤在该小鼠有一定的发生率。②易患慢性肺炎。③对放射线甚为敏感。④与其他近交系相比,肝、脾与体重的比值较大。20月龄的雄鼠脾脏有淀粉样变。⑤有自发高血压症,老年鼠心脏有病变,雌雄鼠均有动脉硬化。⑥对鼠伤寒沙门氏菌补体敏感,对麻疹病毒中度敏感。对利什曼原虫属、立克次氏体和百日咳组织胺易感因子敏感。

主要用途:广泛地应用于肿瘤学、生理学、免疫学、核医学研究,以及单克隆抗体的制备等。附图片:

裸鼠前列腺原位肿瘤模型的建立(一)

裸鼠前列腺原位肿瘤模型的建立(一) 作者:罗勇,张林琳,贺大林,李翔,宁亮,侯惠莲 【关键词】,前列腺癌EstablishmentofprostatecancermodelbyorthotopicinjectionofhumanprostatecancercelllineDu145 【Abstract】AIM:Toestablishaprostatecancerorthotopicinjectionmodelinnudemiceandtodiscussitsvalueofappli cation.METHODS:Lowerabdominalincisionwasmadein10malenudemice.Afterthebladderandprost atewereexposed,Du145(6×106)wasinjectedinventralprostatelobesundertheprostaticcapsulebyaTBsyringewitha29gaugeneedleat5 0μLpermouse.Theabdominalwallandskinwerethenclosedwith70surgicalsutureandthevitalsignsoft henudemicewereobserved.Whenthemiceweredying,theyweresacrificed.Afterthemousewaskilled, thetissuesofprostate,bladder,lymphaticnode,lungandliverweretakenout,fixedin40g/Lformaldehyd e,embeddedinparaffin,stainedbyHEandthenobservedmicroscopically.Thebonemetastasiswasobse rvedbyXray.RESULTS:Theincidenceofprimarytumorafterintraprostaticinjectionwas60% (6of10).About14dlater,thereweresmallpalpablenodesinprostateandabout19dlater,cachexiaocc urredinnudemice.Afterdissection,itwasshownthatthediameterofprimarytumorsvariedfrom0.8cmt o1.5cmandtheenvelopeoftheliverbecamecrimpy.Acutehepatitiscouldbeobservedundermicroscop y,whichrepresentedalargescaleofhepatocytedeath,liversinusdilatationandhyperemia,hepaticlobul einfiltratedbylymphocyteandmacrophageandinconspicuoushyperplasia.CONCLUSION:Theorthoto picinjectionmodelisanoptimalanimalmodeltostudytheoccurrenceanddevelopmentofprostatecanc er.Itmimicsthenaturalsituationofhumanprostatecancerandwillhelptounderstandthemechanismsof androgenindependenceandosseousmetastasisandtumorhostdeterminantsofprostatespecificantig en(PSA)expression. 【Keywords】prostateneoplasms;orthotopicinjection;metastasis;nudemice 【摘要】目的:建立一种裸鼠前列腺癌原位模型.方法:在10只裸鼠下腹部切口,显露膀胱和前列腺,用1mLTB针筒、29G针头在其前列腺左右腹侧叶包膜下接种人前列腺癌DU145细胞50μL,共计6×106个,以建立原位肿瘤模型,观察裸小鼠生命体征变化.于濒死状态下处死,并取原位肿瘤、膀胱、盆腔淋巴结、肺脏和肝脏标本,用40g/L甲醛固定、石蜡包埋和HE染色后显微镜下观察,X线照射显示骨骼转移情况.结果:10只裸鼠中有6只模型建立成功.接种后14d左右,可触及前列腺部位有黄豆大小的包块,质硬.19d后出现恶液质,解剖后发现前列腺部位有包块生长,直径约在0.8~1.5cm,其中2例侵及膀胱.肝脏泛黄、被膜皱缩,镜下呈急性重型肝炎的病理改变.结论:小鼠前列腺原位移植瘤模型建立成功. 【关键词】前列腺癌;原位注射;转移;裸鼠 0引言 前列腺癌初诊时大约30%~50%的患者已发生转移〔1〕,而目前针对前列腺癌侵袭和转移的机制及有效的治疗措施研究较少,一个重要原因是缺乏合适的动物模型.为了建立一种更接近于人类肿瘤体内自然生长过程的前列腺癌动物模型,我们通过原位注射人前列腺癌细胞Du145技术建立起BALB/c裸鼠的前列腺癌原位种植瘤模型如下. 1材料和方法 1.1材料 雄性BALB/c裸鼠10只,6wk龄,体质量20g左右,由第四军医大学实验动物中心提供.均在SPF条件下层流架内饲料饮水自由摄入.Du145细胞系由美国ChungLW惠赠.用含100mL/L 胎牛血清(杭州四季青公司)的RPMI1640培养液(美国Gibco公司)在37℃,50mL/LCO2的孵箱内培养,以1.25g/L胰酶和0.2g/LEDTA的混合液消化传代.

生长曲线的拟合分析

快大黄鸡(肉鸡)的生长曲线拟合分析 表2-1 快大黄鸡(肉鸡)的体重随周龄的变化表周龄01234567 /week 体重/g32.5086.25201.25400.00651.03964.001200.301482.18 表2-2Logistic生长曲线模型参数估计值:表2-3logistic生长曲线模型显著性检验的方差分析表: 表2-4动物常用的三种生长曲线模型注:本次采用第二种分析:logistic曲线模型

增重是一个连续的过程,在正常情况下表现为“S”型曲线,一般用生长曲线来 描述体重随年龄的增加而发生的规律性变化。通常对动物的生长的拟合有3种, 本次这做了logistic曲线,从拟合度可以看出,logistic曲线的拟合度很高。所以没有用其他两种常用的方法进行拟合分析。 拟合图: 分析: 表2-2列出了logistic生长曲线模型的参数估计值、各参数的标准误及参数95% 的置信区间的上下限。可见logistic模型中的A、B和K分别为1743.841、31.353、0.726。将A、B和K值代入方程,得logistic曲线方程: Y=1743.841/(1+31.353e -0.726t) 表2-3为模型的显著性检验的方差分析结果,此处给出了各变异来源的平方和、 2=0.998.可见拟合优度自由度和均方,给出了模型拟合的相关指数(即拟合度)R 达到了令人非常满意的程度。 由表2-4的公式可以计算出: 拐点体重:W=A/2=1743.841/2=871.921(g) 拐点日龄:(lnB)/K=(ln31.353)/0.726=4.745(周) 所以,快大鸡的周龄在4~5周时,出现了拐点,鸡的快大黄鸡的生长由缓慢进 入了快速生长期,因此快大鸡在6~7周的的增重较快,此时是饲养管理的关键

saier 裸鼠肿瘤动物实验

裸鼠肿瘤动物模型 动物实验是生命科学研究中的重要组成部分。天津赛尔生物公司可以为您提供裸鼠肿瘤动物模型及一些常见动物模型的建立服务。保证实验动物品系纯正、实验环境达GLP实验室标准、实验结果可重复性好。截止目前,天津赛尔生物已与国内外多家科研机构和公司建立了长期合作关系,多达100多类合作项目,我们的技术水平,服务质量也同样得到了客户的充分认可与好评。 ?服务特点及内容 ?①客户可无偿使用我公司已有肿瘤细胞,您只需要提供肿瘤细胞的名称,我们即可为您设计及完成实验。 ?②成瘤率高:本公司经长期经验的积累,构建裸鼠肿瘤模型的成功率可高达98%。 ?③裸鼠品系纯正:裸鼠模型所用裸鼠均具有动物产品合格证,保证实验用裸鼠品系的可靠性。 ?④技术力量雄厚:裸鼠模型实验全程(包括细胞培养,细胞接种及肿瘤的观察,测量)均由从事动物实验十余年的博士科研人员完成,保证了实验的高质量进行。科研人员能够完全掌握,包括皮下注射,腹腔注射,尾静脉注射和脾注射等多种注射方式。 ?⑤经验丰富:目前,本公司已成功制备以下肿瘤细胞裸鼠模型。 产品目录裸鼠模型名称收费周期(月)SRNM-001MCF-7细胞人乳腺癌异种移植裸鼠模型500元/只2-3 SRNM-002HT-29细胞人结肠癌异种移植裸鼠模型500元/只2-3 SRNM-003HeLa细胞人子宫颈癌异种移植裸鼠模型500元/只2-3 SRNM-004SW480细胞人结肠癌异种移植裸鼠模型500元/只2-3 SRNM-005SW620细胞人结肠癌异种移植裸鼠模型500元/只2-3 SRNM-007Hep2细胞人喉癌异种移植裸鼠模型500元/只2-3 SRNM-008 A549细胞人肺癌异种移植裸鼠模型500元/只2-3 SRNM-009 ES-2细胞人卵巢癌异种移植裸鼠模型500元/只2-3 SRNM-010 MGC-803细胞人胃癌异种移植裸鼠模型500元/只2-3 SRNM-011 SKOV3细胞人卵巢癌异种移植裸鼠模型500元/只2-3 SRNM-012 PG49细胞人肺腺异种移植裸鼠模型500元/只2-3

新产品生命周期生长曲线研究

新业务产品生命周期研究之 生长曲线预测研究报告 1.绪论 1.1. 研究背景 产品生命周期(Product Life Cycle, PLC)是指产品的经济寿命(也称营销寿命,与产品的自然寿命或使用寿命无关),即一种产品从研发、上市、销售量由少到多又由盛转衰、终至被市场淘汰的全过程。产品生命周期是经济学与营销学中的一个十分重要的概念,当产品处于其生命周期的不同阶段时,企业的投资、生产和营销策略就必须有所不同,因此,产品生命周期理论是企业在经营决策中进行产品研发、市场营销、竞争分析、客户关系管理以及资本运筹与调控等活动的重要支持。产品生命周期概念是产品管理与分析范畴的核心要素,它蕴涵了产品信息管理、协同产品设计、产品绩效评估、产品营销策略、客户需求管理、产品市场竞争等诸多层面的问题,而由其演化而来的所谓的产品生命周期管理(Product Life-cycle Management, PLM)已经成为现代企业的核心管理理念,亦为其信息技术运用的重要组成部分,它能真正提高企业的核心竞争力并成为其重要的智力资产。 “新业务产品生命周期研究”是计费业务中心为配合广东移动在当前激烈的市场竞争环境下,以提升新业务产品(主要指数据业务产品)覆盖面和渗透率作为带动业务保持高速增长的重要手段之一的思路而提出的科技项目,同时这个科技项目的研究成果也将被直接应用到经营分析系统及相关应用当中,在力图为广东移动的新产品开发、营销等整个管理体系提供有力支持的同时,也对即将来临的3G时代中广东移动新业务的开展与产品管理作出有益的探索。

1.2. 研究思路 本研究项目将围绕产品生命周期这一概念展开,针对特定的新业务产品,通过构建产品生命周期曲线预测模型以着重解决产品生命周期所处阶段的判定问题,并由此试图构建有效识别产品生命周期阶段的指标体系,以期解决不同地市公司之间同一业务发展态势的综合评价问题;作为研究的出发点,本项目将进行初步的产品相关数据组织管理的标准规范工作,而作为研究的最终表现形式,本项目亦将构建基本的相关数据分析型应用以供实际业务管理工作运用借鉴。 本项目本质上是一个实证性的命题研究项目而非传统的信息应用开发项目。 1.3. 研究目的 本研究项目希望能够在如下几个方面对业务决策提供指导: ?既有产品发展态势的评估监控; ?新产品投放的市场效应考察; ?基于产品的营销策略制定; ?基于产品的竞争对策制定; ?基于产品的成本控制。 2.产品生命周期预测中的成长曲线模型方法 2.1. 生长曲线概述 生长曲线(Growth Curve)又称S型曲线,是描述生物生长过程的一种特殊曲线,这种曲线从某个固定点出发,其生长率单调地增加,到达一个拐点后,生长率下降,渐进地趋于某个最后的值。生物的生长过程,一般经历发生、发展、成熟和衰亡四个阶段,这和产品生命周期理论所确立的产品在市场中的成长过程类似,由此生长曲线预测方法是最普遍运用的产品生命周期曲线预测方法。 关于生长曲线预测的一般预测方法可参见冯文权(2002)。 LOGISTIC生长曲线

早产儿生长曲线图

A systematic review and meta-analysis to revise the Fenton growth chart for preterm infants Tanis R Fenton 1,2*and Jae H Kim 3 Background The expected growth of the fetus describes the fastest human growth,increasing weight over six-fold between 22and 40weeks.Preterm infants,who are born during this rapid growth phase,rely on health professionals to assess their growth and provide appropriate nutrition and medical care. In 2006,the World Health Organization (WHO)published their multicentre growth reference study,which is considered superior [1]to previous growth surveys since the measured infants were selected from communities in which economics were not likely to limit growth,among culturally diverse non-smoking mothers who planned to breastfeed [2].Weekly longitudinal measures of the infants were made by trained data collection teams during the first 2years of this study [3].These WHO growth charts,although recommended for preterm infants after term age [4],begin at term and so do not inform preterm infant growth assessments younger than this age. *Correspondence:tfenton@ucalgary.ca 1 Alberta Children ’s Hospital Research Institute,The University of Calgary,Calgary,AB,Canada 2 Department of Community Health Sciences,The University of Calgary,3280Hospital Drive NW,Calgary,AB,Canada Full list of author information is available at the end of the article ?2013Fenton and Kim;licensee BioMed Central Ltd.This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License (https://www.doczj.com/doc/c317716710.html,/licenses/by/2.0),which permits unrestricted use,distribution,and reproduction in any medium,provided the original work is properly cited. Fenton and Kim BMC Pediatrics 2013,13:59 https://www.doczj.com/doc/c317716710.html,/1471-2431/13/59

裸鼠性质及应用

T淋巴细胞功能缺陷的动物有裸小鼠(基因符号nu)和裸大鼠(基因符号rnu)利用育种技术已将裸基因nu或rnu导入其它品系动物,作为背景品系可以是近交系也可以是封闭群,目前nu基因已导入的近交系有数个以上。rnu基因导入的大鼠品系也有10余种。我国使用较多的裸鼠品系BALB/c-nu、NC-nu、Swiss-nu、NIH-nu。1980年和1982年中国药品生物制品检定所分别从瑞士和日本引进裸小鼠,上海中山医院肝癌研究所1983年从美国引进了裸大鼠Rowett。 一、裸小鼠 (一)概念及命名:1962年英国格拉斯医院Grist 在非近交的小鼠中偶然发现有个别无毛小鼠,后来证实是由于基因突变造成的并伴有先天性胸腺发育不良,称为裸小鼠(nude mice),用“nu”表示裸基因符号。裸小鼠是由于染色体上等位基因(第11对染色体上)突变引起的,已失去正常胸腺,原胸腺残留结构部分上皮样细胞呈巢状排列而部分呈外分泌腺结构。裸鼠淋巴结胸腺依赖区的淋巴细胞消失,外周血中淋巴细胞数目减少。1969年丹麦Rygaard 首先将人类结肠腺癌移植裸小鼠成功,为免疫缺陷动物研究和应用开创了新局面。 (二)特性:裸小鼠的主要特征表现为无毛(hair less)和无胸腺(athymus)。随着鼠龄增加皮肤变薄、头颈部皮皱褶、发育迟缓。由于无胸腺,仅有胸腺残迹或异常上皮,这种上皮不能使T细胞正常分化,缺乏成熟T细胞的辅助、抑制及杀伤功能,因而细胞免疫力低下。裸小鼠B淋巴细胞正常,但功能欠正常,免疫球蛋白主要是IgM,只含少量IgG。裸鼠由于T淋巴细胞缺陷,不能执行正常T淋巴细胞功能,在混合淋巴细胞反应中全无有丝分裂反应,也不产生细胞毒效应细胞,对刀豆A或植物凝集素亦无有丝分裂应答,无接触敏感性,无移植排斥,成年裸小鼠(6-8周龄)较普通鼠有较高水平的NK细胞活性,但幼鼠(3-4周龄)的NK细胞活性低下。裸小鼠粒细胞比普通小鼠数量少。由于背景品系不同,不同品系的裸鼠往往具有不同的生物学特征。必须指出,随着裸小鼠年龄增长或有关因素的影响(如病毒感染),裸鼠体内正常T细胞会增加,故接种肿瘤实验一般采用4 ̄8周小鼠。 (三)繁殖:裸小鼠抵抗力差,易患病毒性肝炎和肺炎,因而饲养和繁殖要求条件比较严格,在SPF环境下可生存,所用的笼具、垫料、饲料、饮水等都要求经过严密灭菌消毒并采用隔离器饲养,以保证长期存活并进行繁殖。由于纯合型雌裸小鼠nu/nu 受孕率低,乳腺发育不良且有食仔的习惯,因此生产上一般采用纯合型雄鼠与杂合型雌鼠交配(♂nu/nu×♀nu/+)可获1/2纯合型仔代。 二、裸大鼠 (一)概念及命名:裸大鼠由英国Rowett研究所在1953年发现,基因符号为rnu,属染色体隐性遗传。裸大鼠免疫器官的组织学与裸小鼠极为相似。3 周龄裸大鼠纵膈的连续切片中,只见胸腺残体,未见淋巴细胞,淋巴结副皮质区实际上无淋巴细胞。T 细胞功能丧失。 (二)特征:裸大鼠的一般特征似裸小鼠,但躯干部仍有稀少被毛并非象裸小鼠那样完全无毛,头部及四肢毛更多,繁殖方法与裸小鼠相同。裸大鼠易患呼吸道疾病( 溃疡性气管支气管炎及化脓性支气管肺炎,病因可能与仙台病毒感染有关)。裸大鼠的发现及人癌异种移植成功,给肿瘤免疫研究增添一个新的手段。以裸大鼠代替裸小鼠,具有移植肿瘤大,取血量多,可行某些外科小手术等优点。因此比裸小鼠有一定优越性,其缺点是维持经费比裸SPF 小鼠更高。 三、应用

最新使用世界卫生组织(WHO)的生长曲线图

使用世界卫生组织(WHO)的生长曲线图 成长不仅是营养的结果,还是遗传因素的结果。种族会影响孩子的成长模式,因此有些国家有他们自己的生长曲线图。不过,世界卫生组织(WHO)的生长曲线图用得最普遍,并被认为是全世界的标准。了解更多关于: ?怎样进行测量 ?怎样将测量应用到生长曲线图中 怎样进行测量 0-24 月龄的孩子进行的典型测量包括: ?头围 ?身长 ?体重 测量应定期进行,以观察可靠的趋势。建议的测量时间间隔包括: ?婴儿(0-12 月龄):每2 个月 ?幼儿:分别在15, 18, 24 和30 月龄 ? 3 岁以上:每年 点击这里获取详细的测量时间表。 头围 头围是在孩子头部最大部分进行的测量。这种测量通常为0-3 岁的孩子进行。测量时应当使用不可拉伸的卷尺。卷尺通常是可弯曲的金属量尺。测量时,卷尺尽可能紧贴着头部最宽围度缠绕。通常,此部位在前额眉毛上方1-2 指宽到后脑勺最突出的部分。测量三次,取精确到0.1 厘米的最大测量值。

在孩子生命的早期,头围是一种很重要的测量,因为它间接地反映大脑尺寸和发育。几乎所有的大脑发育都在两岁以前,因此绘制的头部生长曲线可以作为幼儿大脑健康的通用指标。 了解关于头围-年龄生长曲线图。 身长 身长是为不足24 月龄的婴儿进行的线性测量。24 到36 月龄的孩子,如果无法独立站立,也可以进行身长测量(代替身高)。 身长是在孩子卧位(平躺)时测量的。测量身长最准确的方法是使用校准的身长量板。身长量板应当有一块与板表面垂直的固定头部挡板和一块可移动的足板。测量时,将孩子平放在板上,头靠着固定挡板。确定孩子没有穿鞋或戴帽子。有个助手也许可以帮助保持孩子不动并在板中间。让孩子的腿伸直,调整活动足板,使孩子的脚底靠着足板。精确到0.1 厘米记录身长。

生长曲线的拟合分析精编版.doc

???????????????????????最新料推荐??????????????????? 快大黄鸡(肉鸡)的生长曲线拟合分析 表 2-1 快大黄鸡(肉鸡)的体重随周龄的变化表 周龄0 1 2 3 4 5 6 7 /week 体重 /g 32.50 86.25 201.25 400.00 651.03 964.00 1200.30 1482.18 表 2-2Logistic 生长曲线模型参数估计值: 表 2-3 logistic 生长曲线模型显著性检验的方差分析表: 表 2-4 动物常用的三种生长曲线模型 注:本次采用第二种分析:logistic 曲线模型

增重是一个连续的过程,在正常情况下表现为“S”型曲线,一般用生长曲线来 描述体重随年龄的增加而发生的规律性变化。通常对动物的生长的拟合有 3 种,本次这做了 logistic 曲线,从拟合度可以看出, logistic 曲线的拟合度很高。所以没 有用其他两种常用的方法进行拟合分析。 拟合图: 分析: 表 2-2 列出了 logistic 生长曲线模型的参数估计值、各参数的标准误及参数 95% 的置信区间的上下限。可见 logistic 模型中的 A 、B 和 K 分别为 1743.841、31.353、0.726 。将 A、B 和 K 值代入方程,得 logistic 曲线方程: Y=1743.841/(1+31.353e -0.726t) 表 2-3 为模型的显著性检验的方差分析结果,此处给出了各变异来源的平方和、 自由度和均方,给出了模型拟合的相关指数(即拟合度) R2=0.998.可见拟合优 度达到了令人非常满意的程度。 由表 2-4 的公式可以计算出: 拐点体重: W=A/2=1743 .841 /2=871 .921(g) 拐点日龄:(ln B)/K =(ln31 .353) /0 .726=4 .745(周) 所以,快大鸡的周龄在4~5周时,出现了拐点,鸡的快大黄鸡的生长由缓慢进 入了快速生长期,因此快大鸡在6~7周的的增重较快,此时是饲养管理的关键

裸鼠肿瘤造模的一点经验分享

1、取5-6周龄裸鼠饲养(此时大小约16-23g。)。虽然此时的裸鼠个头较小,但是,标准的做法与权威的文章都是如此。考虑可能是此时裸鼠个体差异小,对实验数据影响小吧。 2、制备肿瘤细胞悬液,按5×10*6-2×10*7细胞/只(稀释成0.2ml)接种于裸鼠腹腔,形成腹腔种植瘤。(小鼠腹水出现情况一般如下:5~6 d出现腹水,6~8d抽取传代最好,10~12 d出现血性腹水,14~15 d小鼠开始死亡。) 3、取腹水瘤,细胞数5×10*6-2×10*7,稀释成0.2ml接种于裸鼠前腋皮下。 4、加药。根据使用药物的不同,方法各异。时间上可以是24小时,或第1、3、5天等等。给药方式可以是腹腔或鼠尾静脉。注意,由于鼠尾静脉非常细,推药一定要非常慢。药物的量一般根据裸鼠的体重进行调节。当然,最重要的是药物的特性。 4、20-30天处死裸鼠,并进行相关数据的检测(肿瘤大小、重量等。)。注意时间点,可以经常观察,在最能体现你结果的时候将裸鼠处死。 备注: 1、若对照组中20%小鼠的肿瘤小于400mg或平均重量小于1g,均为肿瘤生长不良,实验数据应作废。因为裸鼠比较小,肿瘤生长相对缓慢,因此,时间可以调整以达到要求。 2、如对照组小白鼠肿瘤平均重量小于1g或20%鼠的瘤重小于400mg,大白鼠肿瘤平均重量小于2g,表示肿瘤生长不良。 3、在试验期间给受试物组鼠死亡超过20%,或平均体重(去瘤后)下降(自身对照)超过15%者,表示受试物的毒性反应。应当减少剂量重新试验。但是,肿瘤时间长可导致鼠恶病质,因此,肿瘤生长时间也不能太长,肿瘤不能太大。否则无法判断时恶病质还是药物导致的毒性反应。 4、也可以不使用腹水瘤,直接用培养的细胞接种。但是,细胞数一定要根据自己的需要。一般来说,10*6即可使绝大部分裸鼠成瘤,但要想成瘤率高些,最好达到10*7细胞。接种的时候一定要将细胞摇匀,否则肿瘤大小不一。细胞从制备单细胞悬液到接种时间要尽量短,否则细胞活力受很大影响。但是细胞数是一个非常个体化的东西。如果你要观察血管生成等,最好细胞数低一些,否则很快就生成血管,让你的实验无法进行。此时甚至可以将细胞数降低到10*4。10*4肿瘤细胞即可使部分裸鼠成瘤。当然,成瘤与细胞株的特性也有相当大的关系。不同的细胞可以有一定的差别。 5、细胞消化成单细胞悬液后,可置于冰上保存,这样细胞损伤小。最好用PBS稀释。因为培养液、血清等可能会导致动物的炎症反应。 6、接种部位一般不前腋下,这里血管丰富,易成活。接种于皮下。太浅则因血管少而不易成瘤,太深会在肿瘤长大后与周围的肌肉、结缔组织等相粘连,让你不能很好地分清肿瘤与侵犯的组织;特别是不易观察肿瘤的生长情况。 7、肿瘤生长到一定大小后,一般是大小0.8-1cm后,中心常出现坏死区。在分离时要小心,不要用皮肤镊,夹钳肿瘤要小心,否则常会导致部分肿瘤破溃,使肿瘤大小及重要的的测量结果不准确。

生长发育对照“生长曲线图”

近日,卫生部制定并公布了《中国7岁以下儿童生长发育参照标准》。该标准制定的数据来源于“2005年第四次九市儿童体格发育调查”中城区数据。参照标准主要有体重、身高以及头围等,且配有方便、实用的生长曲线图。 “生长曲线图是家长监测孩子生长发育情况更简单、直观的工具。”省儿童医院儿保科主任刘丽君说,儿童生长指标在上下两实曲线之间都属正常,接近中间的实曲线则为平均水平,接近上下两条虚曲线则说明孩子的指标稍高或稍低于正常范围。 家长判断孩子的生长情况,应该动态地观察不同阶段的数据,把各个阶段监测到的数值连成一条曲线,若这条曲线在正常范围内,且与参考曲线呈大体平行,这说明孩子的生长发育是比较正常的。否则,出现偏高或偏低的情况,应尽早带孩子到医院进行检查。 刘丽君主任指出,在孩童生长发育正常的情况下,1岁之前前6个月每个月到医院监测一次,第9个月和12个月各监测一次;1—3岁之间,则半年监测一次;3—7岁至少每年监测一次。若孩子生长发育出现异常,则需根据医生建议定期监测。 此外,对于头围的监测在囟门未闭合之前显得更为重要,主要在孩童2岁之前。头围的增长代表大脑发育情况,若头围过大,则要警惕有脑积水,头围过小则会增加有小头畸形的可能性。 刘丽君主任指出,从临床上来看,贫血、营养不良、微量元素缺乏、呼吸道疾病、肠道疾病等多发于1—3岁的孩童,从而影响孩子的正常发育水平。这个年龄段,家长们更应该注意孩子的营养状况。 如今,厌食的孩子越来越多,但经医生检查后发现,大多为非疾病性厌食,主要是家长们喂养方式不当造成的情绪厌食症,如有的家长以叫骂方式强迫孩子进食等导致孩子厌食。刘丽君主任建议家长们,应在孩子主动进食的情况下科学合理喂养孩子。而且,孩子的食谱应多样化,给孩子多食用一些含优质蛋白的食物,讲究营养均衡。另外,许多家长认为孩子又白又胖才健康,让孩子过多地进食,实际上孩子的体重不应超出儿童生长发育参照曲线的正常范围。孩童肥胖是成人代谢综合征的高发危险因素,会增加患高血压、高血脂、糖尿病等心脑血管疾病的风险。她主张孩子少吃高糖、高脂以及油炸快餐食品。 □本报记者方素菊.corrTxt_01{border-top:1px dashed #F0C8C8;margin-top:10px;}.corrTxt_01 h3{font-weight:bold;padding:5px 0 0 3px;line-height:25px;margin:0;}.corrTxt_01 ul{padding:0 0 0 18px;}.corrTxt_01 ul li{font-size:14px;line-height:%;}.corrTxt_01 a {text-decoration:none;}> 相关阅读:诠释10-11月龄生长发育规律家长应为孩子制作生长曲线图视频:婴儿生长发育及护理保健视频:2-3岁孩子生长发育指标家长应走出孩子生长发育误区为何5月是儿童生长高峰期?视频:婴儿生长发育知多少早产儿面临三大生长挑战4-5个月婴儿生长发育规律 了解育儿知识,看育儿博文和论坛,上手机新浪网亲子频道

裸鼠荷瘤方法及注意事项

关于肿瘤细胞株的选择,确实是一个很麻烦的问题,各类文献中提到过的细胞株有很多,但是一般而言,我觉得,对于我们做裸鼠肿瘤模型,细胞株的选择应该考虑一下几个方面: 1. 国际公认度,虽然SFDA的指导原则上表示只要是建株细胞株均可以,但是一般来说,还是应该尽量考虑国际上比较公认的细胞株。 2. 体内生长情况,很多细胞株,在文献中有很高的出镜率,但是实际上,基本都是从体外开始有名,所以很多人就硬生生的往体内套,结果就是吃力不讨好,比如楼主提到的A549,还有MCF-7,都是很有名气的细胞株,但是在体内却不是一个好的试验对象,成瘤率低,生长慢,均一度差。现在国内的很多研发单位,特别是一些公司的领导们,缺乏这方面的认识,动不动就把这些著名的细胞株挂在嘴边,硬压着一线的研究人员去花功夫做这些细胞株,作的不好,就怀疑大家的水平如何如何的,奶奶的,对此非常生气! 3. 药物的敏感性,这一点常常被大家忽视,大部分的裸鼠肿瘤模型都是为抗肿瘤药物的筛选以及研究服务的,但是常常大家只考虑了这个细胞株是不是好做,但是没有考虑到细胞株本身对于药物的敏感性,比如Lovo细胞,国际公认度也还可以,体内生长情况也很棒,但是对于药物的敏感性不佳,大部分的常规化疗药物到了它这里,抑瘤率都会下降,显而易见,对于抗肿瘤药物的筛选来说,它不是一个好的选择。 另外说一点,体内与体外的关系,现在做体内的人,常常被体外的人牵着鼻子走,体外做出来什么什么细胞株敏感,体内的人就得吭哧吭哧的去做这个,但是却死活做不好,其实,现在我和一些老前辈们的观点是,体内和体外应该协调好细胞株的选择问题,体外的人手上有大把的细胞株可以选择,如果,体内的人不去和他们协调,那么将永远被牵着鼻子走,受累还不讨好,应该大家坐下来,一起选择20~30种细胞株作为常规的筛选细胞株,这就足够了,细胞株选择的时候考虑好方向(胃癌、肝癌、肺癌什么的)、靶点(EGF、vEGF等等),不能漫无边际的抓着哪个体内就的做哪个,谁也没有这个本事啊。 以下给出一些细胞株供大家参考: 头颈部肿瘤 没有特别好的细胞株,Hep2(喉癌)、CNE(鼻咽癌)凑活,比较慢,但是可以接受。 肺癌 不要和我提什么A549,不好伺候,NCI-H460(大细胞肺癌)还不错,生长速度快,成瘤率好,但是技术不好的话,均一度会差一些,水平过关的话,开始试验的时候SD应该为平均值的1/3,对药物很敏感,特别是紫杉醇,非常敏感。SPC-A-1(肺腺癌),马马虎虎过得去,速度不是很快,但是也还能接受。 胃癌 MNK-45,日本细胞株,公认度也可以,比较好。 BGC-823,很好的公认度,生长有些慢。 食道癌 Eca-109,我们找不到其他的东西,只能用它,一般般,有点不好伺候。 前列腺癌 PC-3、DU-145,都是不错的细胞株,用它们没错的。 结肠癌 HT-29吧,生长还可以,Lovo对药物的敏感性差了点。

动物模型:裸鼠PC-9细胞肿瘤模型

动物模型:裸鼠PC-9细胞肿瘤模型 一、嘉美实验裸鼠PC-9细胞肿瘤模型的构建方法 采用腋窝皮下接种PC-9人肺癌细胞,建立PC-9人肺腺癌细胞裸鼠移植瘤模型并给与药物进 行干预,观察药物对肿瘤的作用。 二、裸鼠PC-9细胞肿瘤模型的构建及后续实验操作 1、25只BALB c裸鼠,适应性饲养一周后,调整制备好的PC-9人肺腺癌细胞单细胞悬液浓度,用1m 1l无菌注射器吸取细胞悬液,于每裸鼠右侧腋下皮下注射0.2mL细胞悬液(接种细丹包量约为1×x102/ml),细胞悬液接种于裸鼠的右侧腋下7-10d后,观察成瘤情况,肿瘤仁 本积大于100m3后,选取肿瘤大小相近的小鼠按肿瘤体积随机分为4组:(1)对照组,5只;(2)高剂量组,7只:(3)中剂量组,7 )顺铂组,6只。当天高剂量组、中剂量组、顺铂组开始给 药其中,高剂量组连续21天每天灌胃给药,顺铂组每三天腹腔注射给药,齐量5m/e次。 每两天测量荷瘤裸鼠体重和冲瘤体积。于第22天停止给药病禁食2h,第再次测量肿瘤体积,计算相对肿瘤体积(RTV),绘制肿瘤生长曲线,毛材当天称量最后一次体重和瘤重计算肿瘤 指数完整剥离瘤块,其中一半瘤块组织于 10%福尔马林中固定,备用;另半肿瘤组织存放 于液氮中冻存。血样用109 mmol/L枸櫞酸钠19抗凝,分离血浆。 2、小鼠接种PC-9人肺腺癌细胞后 9天左右,可观察到裸鼠右侧腋下均现黄豆大小瘤块,于 当天开始测量肿瘤体积并称重。于接种第11天时,测量肿瘤生长指数和体重时发现,各组 荷瘤裸鼠肿瘤体积均值达到100mm3,于当天开始分组给药在给药过程中发现,顺铂组荷瘤 裸鼠的体重下阳夆明显,与对照组相比具有极显著性差异?(P<0.01)高剂量组荷瘤裸鼠的体 重于d7、dI 3、d19天时有显著性差异(P~0.05),其他各组体重与对照组相比均无明显差异。 顺铂组肿瘤体积于d13、d17、dl9、d21 d23时与对照组相比明显减小,并有显著性 差 :(P<0.05),在d15天时有极显著性差?(P<0.01)。高剂量组和中剂量组肿瘤体积也明显小 于对照组,但无显著性差异。血浆中APTT、PT检测结果发现,高剂量组和中剂量组小鼠 血浆中APTT指标明显低于对照组,顺铂组小鼠血浆中APPT指标高于对照组但各组小鼠血 浆中APPT变化均无显著性差异。中剂量组和顺铂组小鼠血浆中PT 肯标明显低于对照组, 并具有极显著性差异。实验过程中,各组未见小鼠死亡。

裸鼠肿瘤接种

裸鼠肿瘤接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式,接种取材有手术活检标本、癌性胸腹水标本和体外培养的细胞系三种。 做体外培养的细胞的裸鼠接种,一般用带6号针头的注射器取适量细胞悬液注射于裸鼠的皮下,部位看试验要求而定,一般在腋下或背部皮下,每个接种部位注射0.1-0.2ml。就是将培养的细胞收集起来调整到适宜浓度重悬于不含血清的培养液或PBS中,放于冰盒中携至动物房,直接注射即可。 是牵涉到细胞株的成瘤性问题,可以通过增大细胞悬液浓度的办法来解决。一般细胞浓度可在1×106到5×107之间,浓度再大就可能打不进去了。具体浓度需要查相关文献。如果成瘤率太低,可以通过把瘤块在裸鼠身上传2—3代的方法提高成瘤率,即将已成瘤鼠的瘤块取出接种于新鼠身上,成瘤后再取出接种新鼠,如此传几代,肿瘤性质稳定后,再将肿瘤取出,剪碎、研磨、匀浆成为细胞悬液后再接种。 一、可移植性肿瘤的建立方法 1.腹水瘤的建立将动物实体瘤细胞注入受体动物腹腔内,或将实体疤移植于受体动物的腹壁内,肿瘤生长后引起腹水,腹水内含高大量瘤细胞可移植传代.即为腹水瘤。 建议腹水瘤初期、腹水往往是血性,多次传代后逐渐变为乳白色的瘤性腹水。腹水如培养基一样供给瘤细胞生长所需的营养。若将腹水瘤细胞注入皮下,又可形成实体瘤。由于瘤细胞游离在腹水内,因此总呈圆形,体积可有大、中、小之分c:r.在一些细胞边缘偶见大小不等的泡状突起,称之为“鼓泡”。一般在接种后第5天时核分裂相达高峰。 偶见三极或四极分裂。 二、肿癌移植方法 1.常规保种传代方法

(1)腹水瘤移植方法:瘤源一般用接种后第5~6天的腹水,抽出的腹水以乳白色为佳。接种应从下腹部注入受体动物腹腔,一般接种0.1- 0.2m1。可在腹水内加适量的抗凝药物。 (2)实体型肿瘤接种法: 1)小块接种法:将瘤取出后,切开,选出生长良好而无变性坏死、呈谈红色、鱼肉状的瘤组织,切成小块(约5×5×5mm);在受体动物腹部外例剪开—个小口,用无钩眼科镊子夹取小块,送入切口内皮下。本法多用于建瘤株的初期及少量的接种。接种部位以腋窝和鼠蹊部为佳,特别是腋窝部皮肤松弛能使瘤结长得较大,宿主寿命也可延长。 2)悬液接种法:将选取的瘤组织用玻璃匀浆器研磨制成悬液,用注射器吸取瘤悬液.先计算活细胞数.再将瘤悬液注射到接种部位(多种丁皮下),细胞数多在1000000~10000000。注射后用小镊夹针孔片刻,可避免注入液外溢。本法适用于成活率高的移植瘤的常规接种或大批接种实验。 做鼠源的肿瘤接种,因为鼠源的肿瘤比较柔软,所以可以用匀浆法匀浆以后接种老鼠,操作过程:先解剖肿瘤种鼠,取下肿瘤块,然后去中间坏死和血管,不用剪碎,直接放入匀浆器中匀浆,按你所需的匀浆比例加PBS,因为由于肿瘤的活性不同,匀浆的比例也不同,(肿瘤活性可以根据你前几代的传代数据中获得),当匀浆到无法在碾磨的时候,即没有柔软组织的时候说明已经匀浆彻底了,最后留在匀浆器里的是肿瘤的包膜,在匀浆过程中可以分批把匀浆好的肿瘤悬液倒出,带有血水是没有关系的,为了保持肿瘤细胞的活性(这个至关重要),尽量在短时间内操作,还有尽量保持环境清洁,最好在超净台中操作,倒出来的细胞悬液无需过滤,直接用7-8号针头的注射器注射接种。 就像楼主所说的,无法计数和堵塞细胞筛(这些我都试过),所以为了保持肿瘤细胞的活性,直接取匀浆液接种即可。

生长曲线的拟合分析

快大黄鸡(肉鸡)的生长曲线拟合分析表2-1 表2-2 Logistic生长曲线模型参数估计值: 表2-3logistic生长曲线模型显著性检验的方差分析表: 表2-4动物常用的三种生长曲线模型 注:本次采用第二种分析:logistic曲线模型

增重是一个连续的过程,在正常情况下表现为“S”型曲线,一般用生长曲线来描述体重随年龄的增加而发生的规律性变化。通常对动物的生长的拟合有3种,本次这做了logistic曲线,从拟合度可以看出,logistic曲线的拟合度很高。所以没有用其他两种常用的方法进行拟合分析。 拟合图: 分析: 表2-2列出了logistic生长曲线模型的参数估计值、各参数的标准误及参数95%的置信区间的上下限。可见logistic模型中的A、B和K分别为1743.841、31.353、0.726 。将A、B和K值代入方程,得logistic曲线方程: Y=1743.841/(1+31.353e -0.726t) 表2-3为模型的显著性检验的方差分析结果,此处给出了各变异来源的平方和、自由度和均方,给出了模型拟合的相关指数(即拟合度)R2=0.998.可见拟合优度达到了令人非常满意的程度。 由表2-4的公式可以计算出: 拐点体重:W=A/2=1743.841/2=871.921(g) 拐点日龄:(lnB)/K=(ln31.353)/0.726=4.745(周) 所以,快大鸡的周龄在4~5周时,出现了拐点,鸡的快大黄鸡的生长由缓慢进入了快速生长期,因此快大鸡在6~7周的的增重较快,此时是饲养管理的关键

时期,应当注意调理鸡的肠道菌落和鸡的球虫病的控制,以保证鸡的采食量,保证鸡的生长发育,创造更高的经济效益。鸡的累积生长曲线一般也呈“S”型曲线,但鸡的不同品种生长曲线也有差异,上表及上图是通过spss软件处理得到的。时间是1-7周龄,对于快大型的肉鸡来说,7-8周龄正是鸡的快速发展阶段。快大黄公鸡一般在45-50天出栏,母鸡一般在50-55天出栏。(即公鸡6-7周龄,母鸡7-8周龄)。因为呈“S”型曲线生长,7~8周过后,鸡的生长转慢,这时采食多,增重少,料肉比大,没有经济效益,所以,养殖户都选择在最适合的时机出栏。

裸鼠移植瘤方法建立

裸鼠移植瘤方法建立 SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#

1.细胞准备: 用 PBS 清洗细胞两遍,加入胰酶消化,吹打离心,无血清培养基清洗两次, 然后用无血清培养基将细胞重悬,进行细胞计数,使得 200μL 悬浮液里面含有 1×107个细胞。总共需要细胞: 18(只)*200ul*=×107个,将混合好的细胞放于4°C冰盒运至动物房。 2.裸鼠准备: 3周龄小鼠饲养一周后,每只于右侧腋腹壁皮下接种MDA-MB-231和MCF-7细胞 1×107/200μ L。每日观察肿瘤生长情况, 待出瘤后使用游标卡尺测量肿瘤体积, 肿瘤体积=(D×d 2 )/2(D表示肿瘤的长径, d表示肿瘤的短径)。(注射器型号BD一次性使用无菌胰岛素注射器规格:1ml 25G) 当肿瘤体积约为80 mm 3 时(100至150左右),将裸鼠进行随机分成3 组(肿瘤大小,体重尽量接近),每组3只。对照组,TO901317组,DADS组。 每天(每天给药会不会太频繁可以查阅相关类似成药的半衰期或综合国外文献的数据)将实验组灌胃TO901317,剂量为25mg/kg/d,将粉末状的 TO901317 溶解到蓖麻油(或芝麻油以及生理盐水)里,每只裸鼠注射含有 TO901317 的蓖麻油 200μL;对照组注射等体积的蓖麻油。连续注射两周。(12号灌胃针头,每次用后一定要煮沸消毒)(灌胃进针时针头偏右,一般就不会进肺了) 腹腔注射DADS,剂量为50mg/kg (含10%小牛血清的D ME M培养液(最好使用生理盐水))每次注射200 μL , 隔日注射, 连续7次给药。 每2~3d观察测量1次, 计算肿瘤相对体积(RTV)。以每组动物移植瘤体积的平均值, 绘制移植瘤生长曲线。实验结束时在超净工作台上对裸鼠进行拍照,完整剥离肿瘤,用游标卡尺对肿瘤的大小进行测量,用电子天平称量移植瘤重量,用手术剪取出肿瘤,拍照。照相结束后,用剪刀将每个肿瘤分成 3 份,一份用来提取总 RNA,一份用来提取组织内总蛋白质,这两份组织放到冻存管里,冻于液氮罐中,第三份用来做免疫组化,因此,该样本须置于 4%的多聚甲醛(有毒,小心配置)固定剂中进行固定。 备注: 1. 裸鼠饲养情况裸鼠有专门的SPF饲养动物房,买裸鼠前动物住的盒子、垫料、水和饲料要消毒。提前准备好,一般送裸鼠的单位会配备专门的SPF箱子,接到裸鼠后在专门裸鼠动物房进行交接。这个有个通风台也要提前消毒预备好。裸鼠到达目的饲养地后一般是饲养1-2周才开始试验,这也是国际上的通行规定。盒子要每2-3天消毒一次,根据裸鼠的排泄情况而定,所以要有替换的盒子。一般来说各个医院的动物房这些盒子比较紧缺,需要提前计算好。别到时候需要更换的时候找不到盒子。 2.动物接种数量根据你离心后的数量。然后是用多少的液体稀释,一般是PBS。如果你培养后经过离心收集到的细胞总数是1*108次方。也就是10*107次方/5×106个= 20个。那你可以稀释到4ml,每次给予,正好可以接种20只裸鼠。根据肿瘤细胞的类型和你所给予的干预情况,一般接种3周瘤子可以达到左右。 用左手揪起来一块皮,然后在揪起来的皮和身体之间那里注射,就是皮下而不是皮内了先把针头插进去,然后挑起来,看清楚不是体内而是皮下,也没有戳穿皮肤,然后再开始注射 裸鼠的皮皱皱的,很容易揪起来一块,如果不麻醉就是用手拎着注射针头很容易戳到别的地方

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