第五章糖代谢
I 主要内容
本章主要讲多糖用低聚糖的酶促降解、单糖的分解代谢、双糖及多糖的代谢三方面内容，其中单糖的分解代谢是教学重点。一、多糖和低聚糖的酶促降解
1. 淀粉的酶促水解
淀粉的酶促水解是发生在细胞外的一类淀粉降解作用，主要涉及α-淀粉酶（淀粉液化酶）、β-淀粉酶（淀粉糖化酶）、脱支酶（R- 酶）。
2. 淀粉的磷酸解
以磷酸代替水使淀粉分解形成1-磷酸葡萄糖的过程称淀粉的磷酸解，它是细胞内多糖的主要降解方式。淀粉的磷酸解需要淀粉磷酸化酶、葡聚-1，4-1，4-转移酶和脱支酶，降解的产物是1-磷酸葡萄糖。二、单糖的分解代谢
生物体内单糖的分解代谢途径主要有糖的无氧酵解、糖的有氧分解和磷酸戊糖途径三种途径。
（一）糖的无氧酵解
糖在肌肉组织中经无氧分解形成乳酸的过程，与糖在酵母细胞中形成酒精过程相似，故名糖酵解作用（简称EMP途径）。糖酵解作用发生的部位是细胞质的可溶性部位。化学过程包括已糖磷酸酯的生成（酵解作用的准备阶段）、磷酸丙糖的生成（磷酸已糖的裂解阶段）、丙酮酸的生成（磷酸丙糖的氧化阶段）、丙酮酸的还原四个反应阶段，11步连续的化学反应。在糖酵解过程中，有三个酶催化的是不可逆反应，这三个酶分别是葡萄糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶，因此，这三个步骤是糖酵解过程中的三个调节性反应。糖酵解作为一种原始的糖的代谢形式在生物体的生命活动中有着极为重要的作用：（1）在供氧不足的条件下为机体供能；（2）糖酵解或其它的无氧氧化是某些组织或器官唯一的供能方式；（3）为生物体内其它的物质合成提供前体物质。
（二）糖的有氧氧化
糖的有氧分解是指在有氧的条件下、植物体将糖完全分解氧化形成二氧化碳和水，并放出大量能量的过程。整个代谢过程包括糖酵解、三羧酸循环和电子传递氧化磷酸化三个阶段。有氧分解与无氧分解过程两者相比，两者的区别仅在于丙酮酸及在丙酮酸形成过程中脱下氢的去路不同。
三羧酸循环是生物体细胞在有氧的条件下，将乙酰辅酶A完全氧化成CO2 和水的一个循环途径，由于这个循环途径的第一种中间产物是柠檬酸，并且是一个三羧酸，因此称为三羧酸循环（简称 TCA途径）或柠檬酸循环或Kreb’s循环。三羧酸循环从乙酰辅酶A与草酰乙酸缩合形成柠檬酸开始，一共经历八步反应。三羧酸循环的调控主要有三个部位，分别是柠檬酸合成酶、异柠檬酸脱氢酶和 -酮戊二酸脱氢酶系。
三羧酸循环作为有机物氧化共的代谢过程具有重要生物学意义，主要体现在：（1）为机体的生命活动提供大量能量。一分子葡萄糖经过糖有氧氧化可以净产生36或38分子的ATP，其中，三羧酸循环阶段可以产生30分子ATP，占总产能量的；（2）为体内其它化合物的合成提供原料；（3）三羧酸循环的各种中间物质既是三羧酸循环组成成分，又是植物某些组织或器官中某些成分的生要来源；三羧酸循环是糖、脂、蛋白质三大营养物质完全氧化分解必须经历的最终共同途径。
（三）三羧酸循环的回补反应
由于三羧酸循环的许多中间物如草酰乙酸等可以作为其它物质合成的原料而被消耗，为保证循环正常进行必须随时补充被消耗掉的草酰乙酸等中间物，这种对三羧酸循环中间物的补充反应称为回补反应。
（四）磷酸戊糖途径（PPP或HMP）
磷酸戊糖途径的化学过程从磷酸葡萄糖开始，可以分为氧化脱羧阶段和磷酸戊糖彼此重组形成磷酸己糖的阶段。其中，第一阶段包括三步反应，第二阶段包括四步反应。磷酸戊糖途径作为独立于经典的EMP-TCA途径之外的一条糖的代谢途径有其重要的生物学意义，主要体现在：（1）为生物体内化学反应提供还原剂NADPH；（2）为生物体内其它化学物质的合成提供前体物质；（3）提高植物体的抗病能力，研究结果表明，抗病性强的品种，磷酸戊糖途径的代谢强度就大，主要是因为该途径中形成的4—磷酸赤藓糖及3—磷酸甘油酸可以合成具有抗病作用的绿原酸、咖啡酸等酚类物质；（4）在经典的糖代谢途径供能不足的条件下，可以为机体供能，提高生物体的适应性；（5）在植物体内，可能还与卡尔文循环途径有关。
（五）糖异生作用
生物体由糖的前体物质转变成葡萄糖或其它糖类的化学反应过程称为糖异生作用。糖异生作用的基本过程可能说是糖酵解过程的逆转。
II 习题
一、名词解释：
1．淀粉磷酸解：
2．糖酵解：
3．糖的有氧氧化：
4．PPP途径：
5．糖异生作用：
二、是非题判断下列各句话的正确与否，正确的在题后括号内画“√”，错误的画“×”，如果是错误的，请说明其理由
1．丙酮酸脱氢酶系是由丙酮酸脱羧酶、硫辛酸转乙酰基酶和二氢硫辛酸脱氢酶三种酶分子及CoASH、FAD、NAD+、TPP、硫辛酸等辅助因子组成的。
2．EMP的第一次氧化还原反应是磷酸甘油醛脱氢酶催化的，该酶是双成分酶，辅助为NAD+，同时NAD+也是底物。
3．发酵是在厌氧条件下进行的代谢过程，有氧不能进行发酵。
4. α-淀粉酶在水解淀粉时，反应不久就生成大量的糊精及少量的麦芽糖等，使淀粉粘度迅速下降，呈液化状态，因此生产上称之为液化酶。
5．β-淀粉酶在水解α-1,4-糖苷键时引起葡萄糖分子转位，使α-型麦芽糖变成β-型麦芽糖，所以此酶称β-淀粉酶。
6．在一切需氧生物的各种组织中，EMP－TCA－ETS是葡萄糖氧化分解的最基本的代谢途径，PPP只起辅助作用。
7．维生系B1(硫胺素)缺乏对糖代谢没有影响。
8．磷酸戊糖支路能产生ATP,所以可以代替三羧酸循环,作为生物供能的主要途径。
9．草酸乙酸在三羧酸循环的最后一步由依赖于NAD+的L－苹果酸的氧化作用形成，在没有耗尽羧酸循环中间物时，只使用酶和三羧循环的辅助因子，可从乙酰COA净合成草酰乙酸。
10．降解代谢首先是将复杂的大分子化合物分解为小分子化合物。
11．AMP是1，6-二磷酸果糖磷酸酶变构调节的负效应物。
12．由于激烈的运动，在短时期内肌肉中会积累大量的乳酸。
12．从产生能量的角度来考虑，糖原水解为葡萄糖参加酵解比糖原磷酸解生成1-磷酸葡萄糖更有效。
13．判断下列关于戊糖磷酸途径的论述对或错：
①在这一代谢途径中可生成5-磷酸核糖。
②转醛酶的辅酶是TPP，催化α-酮糖上的二碳单位转移到另一分子醛糖分子上。
③葡萄糖通过这一代谢途径可直接生成ATP。
④这一代谢途径的中间物4-磷酸赤藓糖，是合成芳香族氨基酸的起始物之一。
14．判断下列关于柠檬酸循环的论述对或错：
①此循环的第一个反应是乙酰CoA和草酰乙酸缩合生成柠檬酸；
②此循环在细胞质中进行。
③琥珀酸脱氢酶的辅酶是NAD+。
④该循环中有GTP生成。
15．判断下列关于糖异生的叙述对或错：
①糖异生是酵解的逆转。
②糖异生只在动物组织中发生。
③果糖二磷酸酶催化磷酸果糖水解是糖异生的关键反应。
④凡能转变为丙酮酸的物质都是糖异生的前体。
16．判断下列关于乙醛酸循环的叙述对或错：
①异柠檬酸裂解酶和苹果酸合成酶是乙醛酸循环中的两个关键酶。
②许多植物和微生物能在乙酸环境中生活是因为它们细胞中有乙醛酸循环
③乙醛酸循环中不生成NADH+H+。
④该循环不需要乙酰CoA参加。
17．判断下列关于酵解的叙述对或错：
①在氧气充分的情况下丙酮酸不转变为乳酸。
②从酵解途径中净得ATP的数目来看，糖原磷酸解比糖原水解更有效
③酵解途径就是无氧发酵，只在厌氧生物的细胞内发生。
④酵解过程没有氧参加，所以不能产生ATP。
18．判断下列关于生物能源的叙述对或错：
①在绝大多数细胞中核酸不能作为能源物质。
②作为能源的物质降解的第一步是分解为它们的前体物。
③能源物质只能在柠檬酸循环中释放能量。
④生物所利用的最终能源是太阳光。
三、填空题
1．丙酮酸脱氢酶由三种酶⑴_________________、⑵_______________、⑶__________________和五种辅助因子⑴___________、⑵_____________、⑶______________、⑷___________、⑸______________组成。
2．酵母在厌氧条件下，由糖生成的丙酮酸，经脱羧生_____ _________，后者被NADH还原为____ ______；在有氧条件下，脱羧生成的_______ ______氧化成
_____ _________。
3．EMP的生化历程，可人为地划分为四个阶段，即______________、_________________、________________、_________________。4．由丙酮酸开始的TCA，包括五个氧一还反应，它们的底物分别是：_______________、________________、________________、
_________________、________________。
5．奇数碳原子的脂肪酸降解的最后产物丙酰CoA可转变为，催化该反应的酶是，需要的辅酶
是。
6．柠檬酸循环的关键酶是，和。
7．葡萄糖有氧分解大致经历____ ___________ ____ __________、________ _______三大阶段。8．糖异生的关键酶是，和。
9．分解代谢为细胞提供的三种产物是，和。
10．糖异生的第一步必须在线粒体内进行，是因为酶只存在于线粒体内。
四、选择题
1．EMP中催化不可逆反应的酶是:
A 磷酸果糖激酶；
B 已糖激酶；
C 丙酮酸激酶；
D 烯醇化酶。
2．控制柠檬酸循环第一步的酶是：
A 柠檬酸合成酶
B 丙酮酸脱氢酶系
C 苹果酸脱氢酶
D 异柠檬酸脱氢酶
3．含高能磷酸键的物质是:
A PEP；
B 1,3－二磷酸甘油酸；
C 磷酸肌酸；
D 琥珀酰辅助酶A。
4．影响柠檬酸循环活性的因素是：
A 每个细胞中线粒体数目
B 细胞内[ADP]／[ATP]的比值
C 细胞内核糖体的数目
D 细胞内[cAMP]／[cGMP]的比值
5．糖原降解下来的一个糖基经发酵转变为两分子乳酸可净得ATP的数目是：
A 4
B 3
C 2
D 1
8．EMP的特征为:
A 在厌氧条件下，哺乳动物肌肉中葡萄糖转变成乳酸；
B 在需氧条件下：在酵母中葡萄糖转变成CO2和乙醇；
C 不需氧但可以进行氧化－还原反应。
D 在需氧条件下，每摩尔葡萄糖可生成一摩尔ATP；
9．在TCA中，底物水平磷酸化的步骤是：
A 柠檬酸→α-酮戊二酸；
B α-酮戊二酸→琥珀酸;
C 琥珀酸→延胡索酸；
D 延胡索酸→苹果酸；
10．由两分子乳酸经糖异生生成一分子葡萄糖净消耗的ATP数目是：
A 4
B 5
C 0
D 7
11．下述哪个产能过程不在线粒体内进行?
A TCA;
B EMP;
C ETS; D．氧化磷酸化;
12．人体处于静息状态时，消耗葡萄糖最多的组织是：
A 肝脏
B 肌肉
C 大脑
D 肾脏
13．植物进行光合作用的叶绿素分子中的金属离子是：
A 镁
B 铁
C 铜
D 锌
14．由糖原合成酶催化合成糖原的原料NDP—葡萄糖是指：
A CDP-葡萄糖
B UDP-葡萄糖
C ADP-葡萄糖
D GDP-葡萄糖
15．用葡萄糖作原料，在有氧条件下彻底氧化最多可产生：
A 32个ATP
B 38个ATP
C 30个ATP
D 12个ATP
五、问答与计算
1．假设EMP、TCA、ETS都有活性，下列底物被完全氧化时各净生成多少A TP? ⑴葡萄糖；⑵丙酮酸；⑶NADH＋H+；⑷PEP；
⑸1,6－二磷酸果糖。
2．酵解中生成的NADH如何通过线粒体内膜进入呼吸链?
3．若用丙酮酸作底物，将0.01Ｍol/L丙二酸钠加到正在进行呼吸的线粒体制备液中，呼吸很快停止，且有一代谢中间物积累，问：⑴堆积的中间物是什么? ⑵为什么它会积累?⑶为什么氧耗停止?⑷除了移去丙二酸外，丙二酸盐对呼吸的抑制作用怎样被克服？
4．兔在紧张运动期间所用ATP大部分由EMP产生，假设兔骨骼肌无乳酸脱氢酶，它能进行激烈活动吗？
5．指出下列过程中的P/O理论值:⑴异柠檬酸→琥珀酸；⑵二硝基酚存在时， -酮戊二酸→琥珀酸；⑶琥珀酸-→草酰乙酸.
6．甲醇本身对人体无害，但饮用甲醇可以致命，为什么?对轻度甲醇中毒的患者处理方法之一是让患者喝酒这有什么理论根据?
(提示：因为甲醇在乙醇脱氢酶作用下，生成甲醛产生毒害。乙醇脱氢酶对乙醇的Km值比甲醇低，因此大量乙醇能竞争性抑制甲醇氧化，导致甲醇被排泄出来。)。
7．假如细胞内无6-磷酸果糖激酶存在，葡萄糖可通过哪种途径转变为丙酮酸?写出反应顺序和总反应式。
8．谷氨酸彻底氧化生成C02和H20，可以生成多少ATP?（参考答案：27分子ATP）
9．柠檬酸循环中并无氧参加，为什么说它是葡萄糖的有氧分解途径?
(提示：柠檬酸循环中，有几处反应是底物脱氢生成NADH和FADH2，NADH和FADH2上的氢必须通过呼吸链与氧结合生成水，否则NADH 和FADH2的大量积累，使柠檬酸循环的速度降低，严重时完全停止。)。
第六章新陈代谢总论与生物氧化
I 主要内容
一、生物氧化的概念及特点
生物体是一个开放体系，它需要与周围环境之间不断地进行物质的和能量的交换，以获取所需要的能量和物质，同时将代谢中产生的废物排出，即新陈代谢作用。
糖、脂、蛋白质等有机物质在生物体氧化分解，并释放能量的作用称为生物氧化。生物氧化根据物质氧化过程中，氢或电子直接受体的不同分为有氧氧化和无氧氧化两种类型。生物氧化的本质与体外进行的氧化作用相同，都是脱氢、去电子或与氧化合的过程。生物氧化与体外氧化相比，主要具有三方面特点：
（1）生物氧化是在常温、常压、近中性的pH及有水的环境下进行；（2）生物氧化是在一系列酶的催化下，分步进行的，每一步都释放出一定的能量，但所释放的总能量与体外进行的同类反应相同；（3）生物氧化中释放的能量，除一部分直接以热能形式释放出来外，还有一部分可以化学能的形式贮存在ATP、磷酸肌酸等高能化合物中，并可用于体内的各类需能反应。
二、生物氧化的能量学
1．自由能变化与平衡常数的关系
ΔG0′= -RT1nKeq′= -2.303RTlgKeq′(R：气体常数；K：绝对温度)
R＝8.314J/mol.K K = -273K
2．自由能变化与氧化还原电位势的关系
ΔG0′= -nFΔE′ (n：电子数；F：法拉第常数，F＝96.86KJ/伏)
三、呼吸链(电子传递链)的组成
代谢物上的氢经脱氢酶激活脱落之后，经一系列传递体的传递，最终被传递给分子氧并与之化合水的全部体系称为呼吸链也称呼吸电子传递链。呼吸链根据原初氢受体的不同，分为NADH呼吸链和FADH2呼吸链。
1．呼吸链中传递体的排列顺序
2．呼吸链(电子传递)的抑制剂
I：鱼藤酮，安密妥；II抗霉素A；III：氰化物，一氧化碳
四、氧化磷酸化机制
1．ATP形成的部位和P／O比。
2．氧化磷酸化的机理
化学渗透联学说是英国的P. Mitchell在1961年首次提出，1964年进行修正的一个理论。1978年诺贝尔化学奖。
（1）呼吸链中递氢体和电子传递体间隔交替排列在线粒体内膜的内侧和外侧，两者有其特有的定位。
（2）递氢体起着质子泵的作用，当递氢体从线粒体内膜的内侧接受氢之后，它可以将其中质子送出膜外，电子交给后面的电子传递体继续向后传递。
（3）由于线粒体内膜对质子的非自由通过性，泵出膜外的质子不能自由地返回膜内，从而导致膜外侧的质子浓度高于内侧，形成跨膜的质子电化学梯度。氢或电子在传递过程中所放出的能量即以这种形式存在。
（4）膜外的质子经ATP合成酶的作用，返回内侧，质子在返回内膜内侧的过程中释放的能量直接推动ADP的磷酸化形成ATP。
3．氧化磷酸化的解偶联剂和抑制剂
A．解偶联剂：2，4—二硝基苯酚和质子载体等。
B．抑制剂：寡霉素和各种离子载体。
4．线粒体和线粒体ATPase(F1F0—ATP)的结构
F1：可溶性组分，含有分解和合成ATP的亚基。
F0：与膜结合的脂溶性组分，含有组成质子通道的亚基。
II 习题
一、解释名词
1．生物氧化：
2．有氧呼吸与无氧呼吸： 3．呼吸链
4．氧化磷酸化
5. P/O比
6.末端氧化酶
二、是非题:判断下列每句话的意思正确与否，对的画“√”，错的画“×”，并说明理由。
1．物质在空气中燃烧和在体内的生物氧化的化学本质是完全相同的。
2．生物界NADH呼吸链应用最广。
3．当一个体系的熵值减少到最小时该体系处于热力学平衡状态。
4．在生物氧化体系内，电子受体不一定是氧，只要它具有比电子供体较正的E0′时呼吸作用就能进行。5．各种细胞色素组分，在电子传递体系中都有相同的功能。
6．呼吸链中氧化还原电位跨度最大的一步是在细胞色素aa3-O2之间。
7．呼吸链细胞色素氧化酶的血红素辅基Fe原子只形成5个配位键，另一个配位键的功能是与O2结合。
8．解偶联剂的作用是解开电子传递和磷酸化的偶联关系，并不影响ATP的形成。
9．鱼藤酮不阻止苹果酸氧化过程中形成的NADH+H+通过呼吸链生成ATP
10．寡霉素对氧消耗的抑制作用可被2，4-二硝基苯酚解除。
11．6—磷酸葡萄糖含有高能磷酸基团，所以它是高能化合物。
12．从低等单细胞生物到最高等的人类，能量的释放、贮存和利用都以ATP为中心。
13．ATP虽然含有大量的自由能，但它并不是能量的贮存形式。
14．ATP在高能化合物中占有特殊地位，它起着共同的中间体的作用。
15．有机物的自由能决定于其本身所含基团的能量，一般是越稳定越不活泼的化学键常具有较高的自由能。
16．磷酸肌酸是ATP高能磷酸基的贮存库，因为磷酸肌酸只能通过这唯一的形式转移其磷酸基团。
三、填空题
1．生物体内形成ATP的方式有:⑴__________________、⑵___________________和⑶________________________。
2．代谢物在细胞内的生物氧化与在体外燃烧的主要区别是、和。
3．生物氧化主要通过代谢物的反应实现的，H2O是通过
形成的。
4．化学反应过程中，自由能的变化与平衡常数有密切的关系，ΔG0′＝。
6．在氧化还原反应中，自由能的变化与氧化还原势有密切的关系，ΔG0＝。
7．典型的生物界普遍存在的生物氧化体系是由、和三部分组成的。
8．典型的呼吸链包括和两种，这是根据接受代谢物脱下的氢的不同而区别的。
9．化学渗透学说主要论点认为：呼吸链组分定位于内膜上，其递氢体起
作用，因而造成内膜两侧的差，同时被膜上合成酶所利用、促使ADP磷酸化形成ATP。10．NADH通常转移和给O2，释放能量生成；而NADPH通常转移和给某些氧化态前体物质，参与代谢。
11．线粒体内膜外侧的α-磷酸甘油脱氢酶的辅酶是；而线粒体内膜内侧的α-磷酸甘油脱氢酶的辅酶是。12．NADH脱氢酶是一种蛋白，该酶的辅基是。
13．线粒体ATPase是由和两部分组成。
14．唯有细胞色素和辅基中的铁原子有个结合配位键，它还保留一个游离配位键，所以能和结合，还能和、结合而受到抑制。
15．绿色植物生成ATP的三种方式是、和。
16．在NADH呼吸链中有三个部位可以形成ATP，这三个部位分别是、
和部位之间。
17．NADH呼吸链有三个部位氢或电子的传递可以受到某些化学物质的抑制，这三个部位依次是：、和，其中具有致死性的部位是。
18．在含有糖酵解、柠檬酸循环和氧化磷酸化酶活性的细胞匀浆液中，彻底氧化一摩尔丙酮酸、NADH、葡萄糖和磷酸烯醇式丙酮酸各产生、、、和摩尔ATP。
四、选择题
1．乙酰CoA彻底氧化过程的P／O比值是：
A 1
B 2
C 3
D 4
2．生物体能够利用的最终能源是：
A 磷酸肌酸
B ATP
C 太阳光
D 有机物的氧化
3．在生物化学反应中，总能量变化符合下列哪一项?
A 受反应的能障影响
B 因辅助因子而改变
C 和反应物的浓度成正比
D 与反应机制无关
4．氰化物引起的缺氧是由于
A 中枢性肺换气不良
B 干扰氧的运输
C 微循环障碍
D 细胞呼吸受抑制
5．下列关于生物氧化的叙述正确的是：
A 呼吸作用只有在有氧时才能发生。
B 2，4-二硝基苯酚是电子传递的抑制剂。
C 生物氧化在常温常压下进行。
D 生物氧化快速而且是一次放出大量的能量。
6．胞浆中产生的NADH通过下列哪种穿梭进入线粒体，彻底氧化只能生成2个ATP
A α-磷酸甘油穿梭
B 柠檬酸穿梭
C 苹果酸穿梭
D 草酰乙酸穿梭
7．下列关于电子传递链的叙述正确的是：
A 电子从NADH传至02自由能变化为正 B电子传递的继续进行依赖于氧化磷酸化
C 电子从NADH传至02形成2分子ATP
D 解偶联剂不影响电子从NADH传至02
8．已知AG0 = - 2.303RT1gKeq′，下列反应的自由能是：A + B = C；[A]=[B]=[C]=10mol／L
A 4.6RT
B -4.6RT
C 2.3RT
D -2.3RT
9．琥珀酸脱氢生成延胡索酸(延胡索酸／琥珀酸；E0′＝+0.03V)，假如将琥珀酸加到硫酸高铁和硫酸亚铁(Fe3+／Fe2+；E0′= +0.77V)的平衡混合物中：
A 硫酸高铁的浓度增加
B 硫酸高铁和延胡索酸的浓度增加
C 硫酸高铁和硫酸亚铁的浓度比不变
D 硫酸亚铁和延胡索酸的浓度增加
10．寡霉素存在时，加入2，4—二硝基苯酚下列哪种情况发生：
A 阻断电子传递
B 恢复电子传递
C 合成ATP
D 分解ATP
11．用琥珀酸作呼吸底物和Pi一起加入到线粒体的悬浮液中，下列推断错误的是：
A 若加ADP，则耗氧增加。
B 假如有寡霉素存在，ADP的加入不会使耗氧增加。
C 假如有2，4—二硝基苯酚存在，寡霉素使耗氧增加。
D 假如有2，4—二硝基苯酚存在，ADP不会使耗氧增加。
12．肌肉中能量的主要贮存形式是下列哪一种?
A ATP
B 磷酸烯酵式丙酮酸
C cAMP
D 磷酸肌酸
五、问答与计算
1．什么是生物氧化？生物氧化有什么主要特点？
2．给大白鼠注射2，4—二硝基苯酚，鼠体温升高，为什么?
3．将DCCD加入到线粒体制剂中，ATP合成和电子传递的速度都减少，加入2，4—二硝基苯酚电子传递速度恢复正常，说明这是为什么。
4．指出下列过程中的P/O理论值:⑴异柠檬酸→琥珀酸；⑵二硝基酚存在时， -酮戊二酸-→琥珀酸；⑶琥珀酸-→草酰乙酸.
5．由于超氧基和H 202的形成会破坏细胞膜中的磷脂，在西方国家，有人认为这是导致衰老的因素，为延迟衰老，他们服用超氧化物歧化酶药片以便尽快使这些有害物质转化，你认为这种方法对吗?为什么?
6．pH7.0，25℃时ATP水解成ADP十P l，ΔG0=30.5kJ/mol
(1)计算反应的平衡常数。
(2)在细胞内该反应处于平衡吗?
第七章脂类代谢
I 主要内容
一、脂肪的分解代谢
脂肪作为生物体重要成分，它在细胞构成、机体保护、能量储存及微量活性有机物质的吸收等方面发挥重要作用。作为能量贮存物质
的脂肪，动员时要先经脂肪酶催化水解成脂肪酸和甘油，脂肪酸与血浆白蛋白结合后输送到各组织，主要在肝脏氧化。脂肪酸先激活成脂酰CoA，随后依赖肉毒碱作为载体将脂酰CoA转运到线粒体基质，再循脂肪酸螺旋反复脱氢、加水、脱氢、硫解。每一轮反应切下1个乙酰CoA。脂酰CoA经β-氧化生成的乙酰CoA进入三羧酸循环彻底氧化。脂肪酸的氧化是有氧氧化。甘油则在肝脏异生成糖或氧化。
二、脂肪的合成代谢
（一）饱和脂肪酸的合成
合成脂肪酸的原料来自糖分解而成的乙酰CoA，后者以柠檬酸形式转移到胞浆。合成脂肪酸时乙酰CoA须先羧化成丙二酸单酰CoA，然后乙酰CoA与丙二酸单酰CoA缩合，同时脱酸形成偶数碳原子的中间产物，并反复加氢、脱水、加氢，再与丙二酸单酰CoA缩合直到生成软脂肪酸为止。整个反应均结合于ACP上进行，并无游离中间产物生成。反应由脂肪酸合成酶系催化。软脂肪酸碳链的延长亦在微粒体进行，反应与脂肪酸合成过程相似，但无需ACP，酶也不同。
（二）不饱和脂肪酸的合成
不饱和脂肪酸依双键位置不同分为不同系。不饱和脂肪酸氧化过程与饱和脂肪酸类似，但在氧化到其邻近双键时，需要其他酶参与，加Δ3顺Δ2反脂烯酰CoA异构酶、Δ2、Δ4二脂烯酰CoA还原酶。不饱和脂肪酸的合成主要通过脱饱和酶引入双键，但机体只能合成n-7、n-9系多不饱和脂肪酸，而必须从食物摄入亚油酸(n-6)、亚麻酸(n-9)。
三、脂肪代谢的调节
脂肪动员的关键酶为激素敏感脂肪酶，脂酰CoA进入线粒体需要肉毒碱脂酰转移酶I。胰高血糖素等通过依赖AMP的蛋白激酶使激素敏感脂肪酶激活，而AMP活化的蛋自激酶则抑制其活性。调节脂肪酸合成的关键酶是乙酰CoA羧化酶，柠檬酸是其变构激活剂而脂酰CoA 则有反馈抑制作用。AMP活化的蛋白激酶则使其磷酸化而失活。
II 习题
一、名词解释
1.β－氧化：
2.脂肪酸从头合成途径：
3.柠檬酸穿梭：
二、是非题: 判断下列每句话的意思正确与否，对的画“√”，错的画“×”，并说明理由。
1．脂肪酸合成是脂肪酸β-氧化的逆转。
2．ω－氧化是指发生在脂肪酸第ω位碳原子上的氧化作用。
3．饱和脂肪酸的全过程发生在线粒体内。
4．用乙酰CoA合成一分子软脂肪酸需要消耗8分子ATP。
5．在脂肪酸的合成过程中，脂酰基的载体是ACP而不是CoA。
6．脂肪酸合成的每一步都需要CO2参加，所以脂肪酸分子中的碳都是来自CO2。
7．β-氧化是指脂肪酸的降解，每次都在β和α碳原子之间发生断裂，产生一个二碳化合物的过程。
8．只有偶数碳原子脂肪酸氧化分解产生乙酰CoA。
9．甘油在生物体内可以转变为丙酮酸。
10．不饱和脂肪酸和奇数碳脂肪酸的氧化分解与β-氧化无关。
11．CTP参加磷脂生物合成，UTP参加糖原生物合成，GTP参加蛋白质生物合成。
12．在动、植物体内所有脂肪酸的降解都是从羧基端开始。
13．在动物体内脂肪酸降解产生的乙酰CoA能转变为各种氨基酸的碳骨架。
三、填空题
1．在所有细胞中乙酰基的主要载体是，ACP是，它在体内的作用是。
2．脂肪酸在线粒体内降解的第一步反应是脱氢，该反应的载氢体是。
3．脂酰CoA由线粒体外进入线粒体内需要和转移酶I和II参加。
4.脂肪酸发生β-氧化的四个步骤是_______ 、 ___ _____、和。
5．脂肪酸β-氧化过程中，使底物氧化产生能量的两个反应由和
催化，1摩尔软脂肪酸彻底氧化可生成摩尔ATP。
6．B族维生素 ACP的组成成分，ACP通过磷酸基团与蛋白质分子中的以共价键结合。7．羧基载体蛋白(BCCP)是乙酰辅酶A羧化酶复合物的成分之一，BCCF含有的维生素成分是，BCCP通过与蛋白质分子中的以共价键连接。
8．磷脂酰乙醇胺转变为磷脂酰胆碱过程中的甲基供体是种活性衍生物。
9．脂肪酸合成酶合成脂肪酸的反应程序是:_____________、______________、____________、_____________、______________、
_______________如此反复进行。
10．人类营养必需的脂肪酸是_______ ____和_________ ____。
四、选择题
1．由3－磷酸甘油和脂酰基CoA合成甘油三脂过程中，生成的第一个中间物是下列哪一种？
A 2－甘油－酯； B.1,2－甘油二脂；
C 溶血磷脂酸； D.磷酸脂；
E.酰基肉毒碱。
2．下列关于脂肪酸生物合成的叙述哪项是正确的？
A 不能利用乙酰CoA;
B 仅生成少于十碳的脂肪酸
C 需要生成丙二酸单酰COA;
D 合成部位在线粒体内
3．软脂酰CoA在β-氧化第一次“循环”中以及生成的二碳代谢物彻底氧化时，产生ATP的总量是：
A 3ATP;
B 13ATP;
C 14ATP;
D 17ATP
4．人类营养必需的脂肪酸包括：
A 软脂酸
B 硬脂酸;
C 油酸;
D 亚麻酸.
5．还原NADP+生成NADPH为合成代谢提供还原势，NADPH中的氢主要来自：
A 糖酵解
B 柠檬酸循环
C 磷酸己糖支路
D 氧化磷酸化
6．下列关于脂肪酸合成的叙述正确的是：
A 不能利用乙酰CoA
B 只能合成十碳以下脂肪酸
C 需要丙二酸单酰CoA
D 只能在线粒体内进行
7．脂肪酸合成的限速酶是：
A 柠檬酸合酶
B 脂酰基转移酶
C 乙酰CoA羧化酶
D 水合酶
8．在动物体内脂肪酸的去饱和作用发生在：
A 细胞核
B 内质网
C 线粒体D微粒体
9．下列关于脂肪酸合成的叙述正确的是：
A 葡萄糖氧化为脂肪酸合成提供NADPH。
B 脂肪酸合成的中间物都与CoA结合。
C 柠檬酸可以激活脂肪酸合成酶。
D 脂肪酸的合成过程中不需要生物素参加。
10．下列关于脂肪酸氧化的叙述除哪个外都是对的：，
A 脂肪酸过度氧化可导致酮体在血液中的含量升高。
B 在脂肪酸的β-氧化系统中加入二硝基苯酚，每个二碳彻底氧化只生成一个ATP。
C 脂肪酸的彻底氧化需要柠檬酸循环的参与。
D 脂肪酸进行β-氧化前的活化发生在线粒体内。
五、问答题
1．在线粒体制剂中加入脂肪酸、CoASH、O 2、ADP和Pi，可观察到脂肪酸的氧化。加入安密妥，十六碳脂肪酸彻底氧化为CO2和H2O 可生成多少ATP?为什么?
2．比较脂肪酸每个六碳单位与每个葡萄糖分子完全氧化产生ATP数目的差异，并说明为什么
3．软脂肪酸氧化的反应式：
C16H32O2 + 23O2 + 129Pi + 129ADP 16C02 +145H20 + 129ATP
(1)请说明145个水分子是在哪两个反应中产生的?各产生多少?
(2)这些水分子中多少属于代谢水?代谢水生成的多少有什么生理意义?
4．在正常糖代谢和因长期饥饿糖代谢不正常时，软脂肪酸氧化可获得的能量之比(即相对能量)是多少?
5．哺乳动物的脂肪酸合成速度受细胞内柠檬酸浓度的影响，为什么?
6．脂肪酸氧化生成ATP，但是为什么在无ATP的肝匀浆中不能进行脂肪酸氧化?
7．某病人表现出肌肉逐渐乏力和痉挛，这些症状可因运动、饥饿以及高脂饮食而加重，检验结果表明，患者脂肪酸氧化的速度比正常人慢，给病人服用含肉毒碱的食物，症状消失恢复正常。那么
(1)为什么肉毒碱可以提高脂肪酸氧化的速度?
(2)为什么运动、饥饿以及高脂饮食会使肉毒碱缺乏症患者病情加重?
(3)肉毒碱缺乏的可能原因是什么?
8．脂肪酸的合成在胞浆中进行，但脂肪酸合成所需要的原料乙酰CoA和NADPH在线粒体内产生，这两种物质不能直接穿过线粒体内膜，在细胞内如何解决这一问题?
第八章氨基酸代谢
I 主要内容
一、氨基酸的脱氨
1．氧化脱氨催化氧化脱氨的酶有两大类：
(1)氧化酶：L-氨基酸氧化酶(辅酶是FAD)和D-氨基酸氧化酶。
(2)脱氢酶：L-谷氨酸脱氢酶是生物体内唯一存在的、专一性强和活性高的氨基酸脱氢酶，该酶是以NAD+或NADP+为辅酶，由6个相同亚基组成的6聚体。
2．非氧化脱氨
(1)还原脱氨：在严格无氧的条件下，由氢化酶催化的脱氨方式。
(2)脱水脱氨：由水解酶催化，产生羟基酸并释放氨。
(3)水解脱氨：L-Ser脱水酶和L-Thr脱水酶催化的脱氨。
(4)脱巯基脱氨：L-Cys由脱巯基酶催化的脱氨方式。
(5)氧化-还原脱氨：一个氨基酸氧化，另一个氨基酸还原分别形成相应的α-酮酸和有机酸，以NAD+作为载氢体。
(6)酰氨基脱氨：L-Gln酶和L-Asp酶催化的脱氨方式。
二、转氨和联合脱氨作用
1．转氨作用：由转氨酶催化，在氨基酸和α-酮酸之间发生以磷酸吡哆醛为辅酶，氨基酸生成相应的酮酸，酮酸生成相应的氨基酸，如谷丙转氨酶(GPT)，谷草转氨酶(GOP)。
2．联合脱氨：
(1)以谷氨酸脱氢酶为中心的联合脱氨
氨基酸 +α-酮戊二酸α-酮酸 + 谷氨酸
(2)以腺苷酸循环为主的联合脱氨，发生在骨路肌、心肌、肝脏和脑组织中。
三、尿素(鸟氨酸)循环
1．氨的转运
(1)生成谷氨酰胺：组织中的游离氨，与谷氨酸结合生成中性无毒的谷氨酰胺，通过血液循环到达肝脏。
(2)葡萄糖-丙氨酸循环：肌肉中的游离氨与α-酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶作用下生成谷氨酸，然后与丙酮酸进行转氨，以丙氨酸形式运至肝脏，脱氨重新转变成丙酮酸，后者可通过糖异生作用生成葡萄糖，通过血液循环到肌肉(图10—1)。
2．尿素循环
四、氨基酸脱羧生成相应的胺
如：组胺、色胺、酪胺、y—氨基丁酸等等。
五、氢基酸碳骨架的氧化
1．形成乙酰辅酶A的有：A1a，G1y，Ser，Thr，Cys。
2．由乙酰乙酰辅酶A转变为乙酰辅酶A的有：Phe，Tyr，Leu，Lys，Trp
3．形成α-酮戊二酸的有：Arg，His，Gln，Pro，Glu o
4．形成琥珀酰辅酶A的有：Met，IIe，Val。
5．形成草酰乙酸的有：Asp，Asn。
六、氨基酸的生物台成
七、氨基酸生物合成的调节
II 习题
一、是非题
1．在一般的情况下，氨基酸不用来作为能源物质。
2．组氨酸脱氨产生的组胺可使血管舒张、血压降低。
3．酪氨酸脱羧产生的酪胺可使血管收缩、血压升高。
4．芳香族氨基酸生物合成的前体是酵解和柠檬酸循环途径的中间物。
5．酪氨酸可以由苯丙氨酸直接生成，所以不是必需氨基酸。
6．苯丙氨酸的分解主要是通过酪氨酸分解途径来完成。
7．植物可以直接吸收空气中的氮。
8．所有氨基酸的转氨反应，都需要磷酸吡哆醛作辅酶。
9．必需氨基酸是指在生活细胞中不能合成，需要人工合成的氨基酸。
10．“代谢库”是指细胞、组织或生物个体内储存某种物质储存的总量。
二、填空题
1．A1a、Asp和G1u都是生糖氨基酸，它们脱去氨基分别生成、
和。
2．Trp脱氨后生成，其生理作用是：在脑组织中，在外周组织中。3．分解生成丙酮酸的氨基酸有、、、
和五种。
4．通过生成草酰乙酸进行分解的氨基酸有和两种。
5．谷氨酸脱去羧基后生成，它的生理作用是。
6．腐胺是脱羧后的产物，由腐胺衍生的精胺和亚精胺合称多胺，这是因为。7．人体尿素的合成在脏中进行。
三、选择题
1．在由转氨酶催化的氨基转移过程中，磷酸吡哆醛的作用是
A 与氨基酸的氨基生成SchiH碱
B 与氨基酸的羧基作用生成与酶结合的复合物
C 增加氨基酸氨基的正电性
D 增加氨基酸羧基的负电性
2．肌肉中游离氨基通过下列哪种途径运到肝脏：
A 腺嘌呤核苷酸—次黄嘌呤核苷酸循环
B 丙氨酸—葡萄糖循环
C 鸟嘌呤核苷酸—黄嘌呤核苷酸循环
D 谷氨酸—谷氨酰胺循环
3．动物体内氨基酸分解产生的氨基，其运输和储存的形式是
A 尿素
B 天冬氨酸
C 谷氨酰胺
D 氨甲酰磷酸
4．组氨酸转变为组胺是通过：
A 转氨作用
B 羟基化作用
C 脱羧作用
D 还原作用
5．由甘氨酸转变为丝氨酸需要转移的甲叉基来自：
A S—腺苷蛋氨酸
B 甲叉B12
C N5，N10-四氢叶酸
D 羧基化生物素
6．帕金森氏病(Parkinson’s diseae)患者体内多巴胺生成减少，这是由于：
A 酪氨酸代谢异常
B 蛋氨酸代谢异常
C 胱氨酸代谢异常
D 精氨酸代谢异常
7．多巴胺、去甲肾上腺素和肾上腺素统称儿茶酚胺，合成儿茶酚胺的限速酶是
A 丙氨酸转氨酶
B 酪氨酸羧化酶
C 丝氨酸水化酶
D 苏氨酸异构酶
8．不参加尿素循环的氨基酸是：
A 赖氨酸
B 精氨酸
C 鸟氨酸
D 天冬氨酸
9．氨基酸生物合成的调节主要依靠：
A 氨基酸合成后的化学修饰
B 氨基酸合成后的转氨作用
C 氨基酸合成中酶的别构和阻遏
D 氨基酸合成后的脱氨作用
10．在下列哪种情况下，E.coli细胞内合成ppGpp
A E.coli生长环境中缺乏氮源
B E.coli生长环境中缺乏碳源
C E.coli生长环境的温度太高
D E.coli生长环境的温度太低
11．人体通过α-酮酸正常获得非必需氨基酸由下列哪种酶催化
A 转氨酶
B 脱水酶
C 脱羧酶
D 消旋酶
12．下列关于尿素循环的叙述正确的是：
A 分解尿素提供能量
B 全部在线粒体内发生
C 将有毒的物质转变为无毒的物质
D 用非细胞的能量将人体内的NH4转变成尿素
13．在氮的吸收途径中，氨中的氮原子首先出现在：
A 谷氨酸的氨基氮
B 天冬氨酸的氨基氮
C 谷氨酰氨的酰氨基氮
D 天冬酰胺的酰氨基氮
四、问答与计算
1．当人长期禁食或糖类供应不足时，体内会发生什么变化?
2．请说明一碳单位的来源、种类、结构及其重要的生理功能。
3．谷氨酸在体内的物质代谢中有什么重要功能?请举例说明。
4．计算谷氨酸彻底氧化生成C02和H2O的过程中能产生多少ATP。
5．简要说明生物体内联合脱氨存在的方式和意义
第九章核酸的生物合成
I 主要内容
一、DNA的半保留复制
复制时DNA的两条链分开，分别作模板合成新链形成两个DNA 新链。
1．复制子和复制方式
基因组中能够独立进行复制的单位称为复制子，每个复制子都含有复制起点和终点。复制方向大多数是定点双向，起点一个或多个，因此在复制的部位形成叉形，称为复制叉。滚筒式复制是单向复制的特殊方式。
2．参与复制的酶和蛋白质因子
（1）DNA聚合酶：①原核细胞：DNA聚合酶I、II和III，其中DNA聚合酶III真正具有合成新链的复制作用。②真核细胞：DNA 聚合酶α、β、γ、δ，其中DNA聚合酶α真正具有合成新链的复制作用。
(2)DNA连接酶：催化双链DNA切口处5′- 磷酸基和3′-羟基生成磷酸二酯键的酶。连接酶作用的过程中，在原核细胞中以NAD+提供能量，在真核细胞中以A TP提供能量。
（3）拓扑异构酶：拓扑异构酶I消除DNA的负超螺旋，改变DNA的超螺旋数；拓扑异构酶II引入负超螺旋，消除复制叉前进带来的扭曲张力。
（4）引物合成酶：催化RNA引物的合成，作用时该酶与另外6种蛋白结合形成引发体。
（5）DNA单链结合蛋白(SSB)：与DNA分开的单链结合防止双链重新结合。
3．复制的方向：5′- 3′
4．复制的过程：双链解开；RNA引物的合成；DNA新生链的延长；切除RNA引物，填补缺口连接相邻的DNA片段；切除与修复错配碱基。
二、DNA的损伤与修复
紫外线、电离辐射和化学诱变剂等理化因素可以导致DNA产生损伤，严重者可以导致生物死亡。DNA损伤的修复方式主要有光复活、切除修复和重组修复和应急反应(SOS)。
三、逆转录酶
逆转录酶是依赖RNA的DNA聚合酶，催化以RNA为模板的DNA合成，是多功酶。
四、RNA的生物合成——转录
1．RNA聚合酶
原核细胞的RNA聚合酶的全酶由五个亚基(α2β2ζ)组成，没有ζ亚基的酶为核心酶。ζ因子的功能是使RNA聚合酶与DNA结合，核心酶可以使已经开始的转录过程完成。真核细胞的RNA聚合酶，根据对α-鹅膏蕈碱的敏感性分为三类：RNA聚合酶A、B和C。A对α-鹅膏蕈碱不敏感，B对低浓度的敏感，C对高浓度的敏感。
2．录启动和终止的调节
启动子和启动因子：从转录起点向上的第十个核苷酸(-10)处有TATAAT保守序列，是RNA聚合酶识别和结合的部位；另一个保守序列TTGACA中心位于-35处，是RNA聚合酶的识别信号。
终止子和终止因子：终止子位于已转录的RNA序列中，它使RNA聚合酶在模板上的移动减慢RNA的合成停止，终止因子有依赖和不依赖ρ因子两种。
3．录的过程和调节。
4．转录后加工：tRNA、mRNA和rRNA的前体通过剪接、拼接和甲基化等方式进行加工。
II 习题
一、解释名词
1．密码子：2．逆转录：3．中心法则：
4．基因重组：5．不对称转录：6．冈崎片段：
二、是非题: 判断下列每句话的意见正确与否，对的画“√”，错的画“×”，并说明理由。
1．所有核酸的复制过程中，新链的形成都必须遵循碱基配对的原则。
2．原核细胞的每一个染色体只有一个复制起点，而真核细胞的每一个染色体就有许多个复制起点。
3．细胞中，DNA链延长的速度随细胞的培养条件而改变。
4．所有核酸合成时，新链的延长方向都是从5′- 3′。
5．抑制RNA合成酶的抑制剂不影响DNA的合成。
6．在E.coli细胞和真核细胞中都是由DNA聚合酶I切除RNA引物。
7．缺失DNA聚合酶II的E.coli突变株，可以正常地进行染色体复制和DNA修复合成。
8．在真核细胞中，三种主要RNA的合成都是由一种RNA聚合酶催化。
9．大多数mRNA 5′-端都是由嘧啶核苷酸起始的。
10．真核细胞的mRNA两个末端都有3- OH基团。
11．无论是在原核或真核细胞中，大多数mRNA都是多顺反子的转录产物。
12．一段人工合成的多聚尿苷酸可自发形成双螺旋。
三、填空题
1. mRNA前体的加工一般要经过、在5′-端和在3′-端
三个步骤。
2．逆转录酶是催化以为模板，合成的一类酶，产物是。
3．核糖体的亚基上含有与mRNA结合的位点。
4．RNA聚合酶复合物中的 因子具有作用。
5．DNA双链中编码链的一段核苷酸顺序是pCpTpGpGpApC，转录的mRNA顺序应该是。
6．每个冈崎片段是借助连在它端的一小段引物，每个冈崎片段的增长都是由端向端延伸。
7．DNA复制时，前导链的合成是的，复制方向与复制叉移动方向，后随链的合成是的，复制方向与复制叉移动的方向。
8．在真核细胞的DNA切除修复过程中，受损伤的碱基可由切除，并由
和共同作用将缺失的碱基补上。
9．在实验室使用的大多数诱变剂都是属于诱变，而大多数致癌物质都是属于诱变。
10．在线粒体中的环状基因组是通过合成方式复制。
四、选择题
1．下列何者是DNA复制的底物?
A ATP
B dUTP Ｃ dTTP Ｄ dGDP
2．下列何者是DNA的基本单位?
Ａ dAMP Ｂ dUTP Ｃ dTTP Ｄ dGDP
3．下列有关DNA聚合酶III的论述，哪一项是错误的?
Ａ是复制酶Ｂ有5′-3′聚合活性
Ｃ有3′-5′外切酶活性Ｄ有5′-3′，外切酶活性
4．下列有关DNA聚合酶I的论述，哪一项是错误的?
Ａ是复制酶，又是修复酶Ｂ有3′-5′外切酶活性
Ｃ有5′一3′聚合活性Ｄ没有5′-3′，外切酶活性
5．下列有关DNA复制的论述，哪一项是正确的?
Ａ领头链是不连续合成的Ｂ随从链是连续合成的
Ｃ新链合成的方向与复制叉前进方向相同者，称领头链
Ｄ新链合成的方向与复制叉前进方向相反者，称领头链
6．下列与DNA解链无关的是：
Ａ单链DNA结合蛋白Ｂ DNA Helicase
Ｃ DNA旋转酶Ｄ DNA酶
7．下列哪一项属于DNA自发损伤?
Ａ DNA复制时碱基错配Ｂ紫外线照射DNA生成嘧啶二聚体
Ｃ x－射线间接引起DNA断裂Ｄ.亚硝酸盐使胞嘧啶脱氨
8．下列哪一项引起DNA移码突变?
Ａ DNA中的腺嘌呤转换为鸟嘌呤Ｂ DNA中的胞嘧啶转换为尿嘧啶
Ｃ DNA中的鸟嘌呤颠换为胸腺嘧啶Ｄ DNA链缺失一个核苷酸
９．下列有关反向转录的论述，哪一项是错误的?
Ａ以DNA为模板合成cDNA Ｂ合成的双链DNA称为前病毒
Ｃ逆转录酶既催化cDNA的合成又催化模板RNA水解
Ｄ引物不是以病毒DNA为模板合成的
10．下列有关真核生物转录的论述，哪一项是正确的?
Ａ利福霉素及利福平可抑制其RNA聚合酶
Ｂ利福平与ζ亚基结合
Ｃ不作为转录模板的DNA链称为编码链
Ｄ启动子通常位于结构基因的下游
11．在E.co1i细胞中DNA聚合酶I的作用主要是：
A DNA复制
B DNA合成的起始
C 切除RNA引物
D 冈崎片段的连接
12．5—氟尿嘧啶是经常使用的诱变剂，它的作用是：
A 在DNA复制时，可引入额外的碱基。
B 取代胸腺嘧啶核苷酸到新合成的DNA分子中，在新链DNA复制时产生错配碱基
C 使腺嘌呤、鸟嘌呤和胞嘧啶脱氨。
D 参入RNA导致密码子错位。
13．小白鼠的基因组比E.co1i的基因组长600多倍，但是复制所需要的时间仅长10倍因为：
A 染色质蛋白加速小白鼠DNA的复制。
B 在细胞中小白鼠基因组不全部复制。
C 小白鼠DNA聚合酶合成新链的速度比E.co1i DNA聚合酶快60倍。
D 小白鼠基因组含有多个复制起点，E.co1i的基因组只含有一个复制起点。
14．细菌DNA复制过程中不需要：
A 一小段RNA作引物
B DNA片段作模板
C 脱氧三磷酸核苷酸
D 限制性内切酶的活性
15．利用逆转录酶进行复制的动物病毒带有：
A 单链线形RNA
B 单链线形DNA
C 双链线形DNA
D 双链共价封闭环形DNA ·
16．下列物质可以作为逆转录病毒进行逆转录引物的是：
A 特异性的寄主tRNA
B 特异性的寄生蛋白
C U6snRNA
D U2snRNA
17．参与DAN复制的酶和蛋白质因子包括：⑴DNA聚合酶III；⑵解链蛋白和解旋蛋白；⑶DNA聚合酶I；⑷RNA聚合酶；⑸DNA连接酶。它按如下顺序工作。
A ⑷、⑶、⑴、⑵、⑸；
B ⑵、⑶、⑷、⑴、⑸；
C ⑷、⑵、⑴、⑸、⑶；
D ⑷、⑵、⑴、⑶、⑸；
E ⑵、⑷、⑴、⑶、⑸。
18．DNA半保留复制时，如果一个完全放射标记的双链DNA分子在不含放射物的溶液中复制两轮，共产生四个DNA分子，其放射性为：
A 半数分子无放射性；
B 所有分子都有放射性；
C 半数分子的两条链有放射性;
D 一个分子的两条链都有放射性；
E 都无放射性。
19．大肠杆菌DNA连接酶的催化活性是：
A.在双螺旋DNA一条链断开处形成磷酸二酯键；
B.催化两条游离的单链DNA分子形成磷酸二酯链；
C.以DNA作能源； D 以ATP作能源。
20．配伍酶促反应：
A DNA聚合酶Ⅲ；
B DNA聚合酶I；
C 引发酶；
⑴引物RNA合成；⑵DNA复制；
⑶切除引物RNA；⑷损伤DNA的暗修复。
五、问答与计算
1．简述原核细胞内DNA聚合酶的种类和主要功能。
2．如何用实验证实在复制叉区域存在许多小片段(Okazaki片段)?
3．每次DNA合成的起始需要一小段RNA作引物，E.co1i RNA聚合酶受利福平的抑制。(1)把利福平加到正在进行对数生长的E.co1i 群体中，对DNA复制会产生什么影响? (2)如果将E.co1i在缺乏某种生长必需因子的培养基中饥饿两小时，然后再加入这种生长必需因子和利福平，对DNA复制会产生什么影响?
5．组织培养产生的哺乳动物细胞系的细胞中，每个DNA长1.2m，这些细胞生长周期中的S期长达5小时，如果这种细胞DNA延长的速度与E.co1i相同，即16μm／min，那么染色体复制时需要有多少复制叉同时运转?
6．如果E.co1i的DNA长度为1100μm，复制一代大约需要40分钟通过一个复制叉完成，求复制体的链增长速度和DNA螺旋的旋转速度是多少(以每分钟的转数表示)
第十章蛋白质的生物合成
I 主要内容
本章重点讲了蛋白质合成组成体系及蛋白质合成机制两方面问题。
基因有两种功能，一个是复制的功能，一个是表达的功能。通过复制，亲代的遗传信息可以传递到子代，使子代获得和亲代完全相同
的遗传信息，而传到子代的遗传信息只有通过基因的表达，才有可能使子代获得和亲代相同的遗传性状。蛋白质的生物合成涉及mRNA、tRNA、rRNA三种RNA分子及许多的蛋白质因子共同作用。
一、mRNA与遗传密码
mRNA分子上特定的核苷酸顺序就是蛋白质合成所需全部信息的直接来源。通常人们将mRNA分子上核苷酸顺序与蛋白质分子中氨基酸排列顺序间的对应关系称为遗传密码，mRNA分子中顺序相连的三个核苷酸可以代表一个特定的氨基酸或其它的含义称密码子或三联体密码。遗传密码具有通用性、兼并性、方向性和无间隔性、专门的起始密码和终止密码等特性。
二、rRNA及核糖体
核糖体是蛋白质合成的部位，它由约60% 蛋白质和40%的RNA组成；核糖体上有许多与蛋白质合成有关的功能部位，主要包括A-位（氨酰-tRNA结合部位）、P-位（起始氨酰-tRNA及正在延长中的肽酰基的结合部位）、肽酰转移酶部位、EF-Tu等功能位点或部位。
三、tRNA
tRNA在蛋白质的合成中起活化氨基酸的载体及遗传密码的解读功能。tRNA上的-CCA部位是氨基酸携带位点，D- 环是氨酰-tRNA 合成酶识别位点，T C- 环是核糖体附着位点，反密码环则是密码子的识别位点。
四、蛋白质生物合成的分子机制
蛋白质的合成过程可以分成AA活化、肽链合成的起始、延长、终止、肽链的合成后加工五个阶段。
（一）氨基酸的活化
（二）核糖体上肽链的合成
肽链合成的起始、延长和终止三个阶段均在核糖体上进行。
1．肽链合成的起始
肽链合成的起始需要70S核糖体、甲酰甲硫氨酰-tRNA fMe t、mRNA、起始因子及GTP参加。
2. 肽链的延长
肽链的延长涉及进位、转肽、移位三个不断重复的反应步骤：（1）进位与A-位密码子对应的氨酰-tRNA进入A-位的作用；（2）转肽位于P-位的甲酰甲硫氨酰基或正在延长之中的肽基会转移到A-位以其羧其和新进入的氨基酸的氨基形成肽键，催化这个反应的酶是肽基转移酶；（3）移位原来位于P位的空载的tRNA从核糖体上释放出来，核糖体在延伸因子G（移位酶）作用下，沿mRNA的5′→3′方向相对移动一个密码子单位。
3．肽链合成的终止和释放
（1）终止密码进入A-位。（2）终止因子进入A位，识别终止密码，RF1识别UAA、UAG，RF2识别UAA、UGA，使肽基转移酶活力转变成酯酶活性，使肽链羧基与tRNA羟基间的酯键水解，释放出来。
（三）多肽的合成后加工
1.多肽合成后的定向运输
蛋白质在核糖体上合成后要根据其需要被运输到相应的部位发挥作用，不同部位的蛋白质可以不同的方式进行合成及运输。
2.蛋白质的合成后加工
许多蛋白在刚由核糖体合成时往往没有活性，还需要有一个合成后加工过程。
蛋白质空间结构的形成主要取决于蛋白质中氨基酸的排列顺序和蛋白质所外的环境条件。除此之外，某些生物体内蛋白质精确空间结构的形成，可能还需要某些蛋白质的辅助作用，这些蛋白质称为分子伴侣或监护蛋白。
（四）GTP在蛋白质合成中的作用及能量消耗
GTP在蛋白质合成中最主要的作用是能量的供应，在蛋白质的合成中，氨基酸活化、进位、移位、肽链合成的起始及终止均需要消耗能量，每加入一个氨基酸活化至少需要消耗4n个高能键。
（五）蛋白质合成的抑制剂
五、真核生物与原核生物蛋白质合成的差异
II 习题
一、名词解释
1．遗传密码： 2．变偶假说： 3.翻译： 4.简并密码：
二、是非题: 判断下列每句话的意见正确与否，对的画“√”，错的画“×”，并说明理由。
1．蛋白质中氨基酸的排列顺序是在合成过程中由氨基酸与mRNA模板上的密码之间的互补作用决定的。
2．mRNA只有当自身完成时，才能指导蛋白质合成，因为起始多肽合成的核糖体结合点总是靠近mRNA最后被合成的那一端。
3.活化一分子氨基酸参入多肽链，需要两个高能键，因为一分子ATP转变成AMP和PPi，PPi水解为2Pi时推动反应向右方进行。
4.密码子AGA突变成CGA将导致错义。
5.蛋氨酸tRNA的密码子既可以是UAU，也可以是CAU。
6.在一个基因内，总是利用同样的密码子编码一个给定的氨基酸。
7．fMet-tRNAt fMet是由对fMet专一的氨酰tRNA合成酶催化形成的。
8．一条新链合成开始时，fMet-tRNAt fMet与核糖体的A位结合。
9．每一个相应的氨酰-tRNA与A位点结合，都需要一个延伸因子参加并需要消耗GTP。
10．蛋白质合成时从mRNA的5′-3′端阅读密码于，肽链的合成从氨基端开始。
11．tRNAt Met反密码子即可以是pApUpG也可以是pGpUpA。、
12．人工合成一段多聚尿苷酸作模板进行多肽合成时，只有一种氨基酸参入。
13．氨酰-tRNA上的反密码子与mRNA的密码子相互识别，以便把它所携带的氨基酸连接在正确位置上。
14．每个tRNA上的反密码子只能识别一个密码子。
15．蛋白质正确的生物合成取决于携带氨基酸的tRNA与mRNA上的密码子之间的正确识别。
三、填空题
1．在原核细胞中新生肽链N端的第一个氨基酸是，必须由相应的酶切除。
2．当每个肽键形成终了时，增长的肽链以肽酰-tRNA的形式留在核糖体的位。
3．在过程中水解ATP的两个高能磷酸酯键释放出的能量足以驱动肽键的合成。
4．多肽合成的起始氨基酸在原核细胞中是，在真核细胞中是。
5．嘌呤霉素是蛋白质合成的抑制剂，抑制的机制是。
6．蛋白质生物合成的终止密码于有、和。
7．根据摆动假说，一个带有IGC反密码子的tRNA可识别的密码子是、和
。
8．蛋白质生物合成的新生肽链从端开始，在mRNA上阅读，密码子从端至。
9．肽键的形成是由催化，该酶在合成终止时的作用是。
10．氨基酸活化为氨基酰tRNA时，氨基酸的__________与tRNA3'-端OH的__________形成酯键。
四、选择题
1．用人工合成的多聚核苷酸作模板合成一条多肽：Ile-Tyr-11e-Tyr-重复序列，人工模板的核昔酸序列应该是：
A AUUAAUUAAUU…
B AUAUAUAUAUAU…
C UAUUAUUAUUAU…
D AUAAUAAUAA UA…
2．下列氨基酸的变化中，由于密码子中一个碱基的改变产生的是：
A Met转变为Arg
B His转变为G1u
C G1y转变为A1a
D Tyr转变为Val
3．利用基因工程的手段包括基因的定点突变改造蛋白质使其符合人的要求，这种技术和学科被称为：
A 遗传工程
B 蛋白质工程
C 细胞工程
D 染色体工程
4．引起人获得性免疫缺陷症的病毒(HIV)是：
A 单链DNA
B 双链DNA
C 单链RNA
D 双链RNA
5．用[α-32P]dATP标记一个DNA片段需要用：
A DNA聚合酶
B DNA连接酶
C 逆转录酶
D 多核苷酸激酶
6．在蛋白质的生物合成过程中，下列哪一步没有mRNA参与
A 氨酰tRNA识别密码子
B 翻译的模板与核糖体结合
C 起始因子的释放
D 催化肽键的形成
7．氨酰tRNA合成酶可以：
A 识别密码子
B 识别反密码子
C 识别mRNA
D 识别氨基酸
8．下列除哪个外都是原核细胞中蛋白质生物合成的必要步骤：
A 氨酰-tRNA与核糖体的30S亚基结合
B 氨酰-tRNA与核糖体的70S亚基结合
C 氨酰-tRNA合成酶催化氨基酸与核糖体结合
D 70S的核糖体分离形成30S和50S两个亚基
9．下列叙述正确的是：
A tRNA与氨基酸通过反密码子相互识别。
B 氨酰-tRNA合成酶催化氨基酸与mRNA结合。
C tRNA的作用是携带相应的氨基酸到核糖体上，参与蛋白质的合成
D 蛋白质的生物合成发生在线粒体内。
五、问答与计算
1．双链DNA的一条单链的顺序如下：
(5')TCGTCGACGATGATCGGCTACTCGA(3')试写出:
⑴另一条DNA单链的碱基顺序；
⑵从DNA第一条链转录出来的mRNA的碱基顺序；
⑶由此mRNA编码的肽链的氨基酸顺序；
⑷如果DNA的3'端的第二个T缺失，此时氨基酸顺序有何改变？
2．蛋白质的生物合成需要哪些重要物质的参与？这此重要物质在蛋白质合成中的作用是什么？细胞是通过什么方式实现将mRNA分子中的核苷酸顺序转变为蛋白质中的氨基酸顺序的？
3．为什么某种氨基酸的变化，不影响蛋白质的活性，而另一种氨基酸的变化影响其活性?
4．基因内点突变引起该基因编码的蛋白质功能丧失必须具备哪两个条件?
5．假设反应游离氨基酸、tRNA、氨酰-tRNA合成酶、GTP、ATP、核糖体开始，每翻译一次具有104个氨基酸残基的核糖核酸酶的mRNA要用掉多少个高能磷酸键
第十一章代谢的相互关系及调节控制
I 主要内容
本章重点讲了两个方面问题，一是生物体内不同物质代谢的相互联系，二是生物体内物质代谢的调控。
一、物质代谢的相互联系
糖代谢、脂代谢、蛋白质代谢和核酸代谢是广泛存在于各种生物体内的四大物质代谢途径，不同途径之间的相互关系集中体现为各有所重，相互转化，又相互制约的关系。
二、代谢调节的一般原理
代谢的调节控制方式有分子水平调节、细胞水平调节、激素水平调节和神经水平调节四种，其中神经水平调节是高等动物所特有的，细胞水平是所有生物体共有的，各种类型的调节都是由细胞水平来实现的。
细胞水平调控是一切调控的最重要基础，细胞水平调节主要分为酶的区域化分布调节、底物的可利用性、辅因子的可利用性调节、酶活性的调节、酶量调节五种形式。
（一）酶的区域化分布调节
（二）底物的可利用性
（三）辅助因子的可利用性
（四）酶活性调节
酶活性调节是通过对现有酶催化能力的调节，最基本的方式是酶的反馈调节，亦即通过代谢物浓度对自身代谢速度的调节作用，反馈调节作用根据其效应的不同分为正反馈调节和负反馈调节。反馈是结果对行为本身的调节或输出对输入的调节，在物质代谢调节中引用反馈是指产物的积累对本身代谢速度的调节。反馈抵制调节包括顺序反馈调节、积累反馈调节、协同反馈调节和同功酶调节四种。
(五) 酶量的调节
细胞内的酶可以根据其是否随外界环境条件的改变而改变分为组成酶和诱导酶。组成酶是催化细胞内各种代谢反应的酶，如糖酵解、三羧酸循环等。诱导酶则是其含量可以随外界条件发生变化的一些酶类。它的产生或消失可以使细胞获得或失去代谢某一种物质的能力。
1.原核生物基因表达调控
操纵子学说是F. Jacob 和 J. Monod 于1961年首先提出来用于解释原核生物基因表达调控的一个理论。该理论认为一个转录调控单位包括：结构基因、调节基因、启动子和操纵基因四个部分，其中操纵基因加上它所控制的一个或几个结构基因构成的转录调控功能单位称为操纵子。
（1）酶合成的诱导
乳糖操纵子是目前人们研究最清楚的一种酶合成控制方式。当环境中没有乳糖单独存在时，微生物细胞中不产生与乳糖代谢有关的半乳糖通透酶、 -半乳糖苷酶及硫代半乳糖苷转乙酰基酶三种酶。
关于酶合成的诱导应该注意以下几点：
①诱导物是所诱导产生诱导酶的正常底物。酶诱导的结果是使细胞获得代谢某一种物质的能力。
②阻遏蛋白一合成即有和操纵基因结合的能力，阻遏蛋白结合到操纵基因部位可以阻止结构基因的表达。
③诱导物也可以与阻遏蛋白结合，并且两者的亲合力大于阻遏蛋白与操纵基因的亲合力，因此可以将阻遏蛋白从操纵基因部位解离下来，使结构基因可以表达。
④酶合成的诱导，除了需要诱导物存在外，它的作用还需要降解物激活蛋白和cAMP存在，只有CAP和cAMP同时结合在CAP结合位点，才能启动酶的合成。
⑤一旦调节基因或操纵基因突变，使调节蛋白不能结合在操纵基因部位，则可以导致结构基因的永久性表达。
（2）酶合成的阻遏
色氨酸操纵子是一种典型的酶合成阻遏控制方式。该操纵子的调节蛋白单独不具有与操纵基因结合的能力，只有与它的辅阻遏物（正常代谢的终产物结合）后，才有与操纵基因结合的能力，因此，它作用的结果是使细胞暂时停止某些酶的合成，失去合成某些物质的能力。
关于酶合成的阻遏应该注意以下几点：
①辅阻遏物通常是所阻遏酶的终末产物。阻遏的结果是使细胞暂时停止与其有关酶的合成。
②阻遏蛋白单独存在时，不具备和操纵基因结合的能力，只有它和辅阻遏物结合之后，才能获得与操纵基因结合的能力，阻止结构基因的表达。
③一旦调节基因或操纵基因突变，使调节蛋白不能结合在操纵基因部位，则可以导致结构基因的永久性表达（组成型突变）。
2.真核生物基因表达的调控
（六）激素对代谢的调节
激素是由多细胞生物的特殊细胞分泌，经由体液运输到特殊的靶细胞发挥其专有生理作用的微量有机物质。激素根据其化学组成的不同分为氨基酸及其衍生物、肽及蛋白质、固醇类、脂肪酸衍生物四种类型。
激素的调控分为两种基本形式，氨基酸类、多肽及蛋白质类，其作用部位主要在细胞膜上，通过cAMP、cGMP的作用，调节细胞内酶的活性。
固醇类激素主要作用部位在细胞核内，这类激素首先与细胞质中的蛋白质受体结合形成激素受体复合物，此复合物进入核内与DNA分子上特定部位结合，启动特定基因的转录、翻译作用。
（七）神经系统对代谢的调节一、各种物质代谢途径之间的相互关系
II 习题
一、名词解释
1．反馈调节：
2．酶共价修饰调节：
3．操纵子学说
4．诱导酶、组成酶：
5．葡萄糖效应：
6．酶合成的阻遏：
二、是非题
1．某物质的水解产物在280nm处有吸收高峰，地衣酚和二苯胺试验为阴性，由此可以认为此物质不是核酸类物质。
2．多肽类激素作为信使分子必须便于运输，所以都是小分子。
3．反馈抑制主要是指反应系统中最终产物对初始步骤酶活力的抑制作用。
4．肌球蛋白是由相同的肽链亚基聚合而成，肌动蛋白本身还具有A TP酶活力，所以当释放能量时就会引起肌肉收缩。
5．所有跨膜扩散反应的AG0′＝0
6．在许多生物合成途径中，最先一步都是由一种调节酶催化的，此酶可被自身的产物，即该途径的最终产物所抑制。
7．短期禁食时，肝和肌肉中的糖原储备用于为其它组织特别是大脑提供葡萄糖。
8．与乳糖代谢有关的酶合成常常被阻遏，只有当细菌以乳糖为唯一碳源时，这些酶才能被诱导合成。
9．在动物体内蛋白质可转变为脂肪，但不能转变为糖。
10．细胞内代谢的调节主要是通过调节酶的作用而实现的。
11．磷酸化是最常见的酶促化学修饰反应，一般是耗能的。
12．据目前所知非组蛋白在真核细胞基因表达的调控中起重要作用
三、填空题
1．下列过程主要在体内何种组织器官中进行? 乳酸-葡萄糖在；软脂酸-β-羟丁酸在；1，25-二经维生素D，生成在。精氨酸合成在；碘的利用在。（答案：肝脏；肝脏；肝脏及肾脏；肝脏；甲状腺）
2．下列过程发生在真核生物细胞的哪一部分? DNA合成在 rRNA合成在
；蛋白质合成在；光合作用在；脂酸合成在
；氧化磷酸化在；糖酵解在β-氧化在。
3．分子病是指的缺陷，造成人体的结构和功能的障碍，如。
4．生物体内往往利用某些三磷酸核苷作为能量的直接来源，如用于多糖合成，用于磷脂合成，用于蛋白质合成。这些三磷酸核苷分子中的高能磷酸键则来源于。
5．生物选择专一性的立体异构分子作为构成生物大分子的单体，如糖原中的
葡萄糖，蛋白质中的氨基酸，核酸中的核糖或脱氧核糖，脂肪中的
。
6．在糖、脂和蛋白质代谢的互变过程中，和起关键作用的物质。（答案：酮酸、乙酰CoA）
7．生物体内的代谢调节在四种不同水平上进行即，，
和。
8．1961年Monod和Jocob提出了模型。
9．乳糖操纵于的启动，不仅需要有信号分子乳糖存在，而且培养基中不能有，因为它的分解代谢产物会降低细胞中
的水平，而使复合物不足，它是启动基因启动所不可缺少的调节因子。
10．真核细胞基因表达的调控是多级的，有，，，
,和。
11．酶合成的诱导调节中，诱导物多是诱导酶的，作用的结果是使细胞获得分解能力；酶合成的阻遏调节中，附阻遏物多是阻遏酶参与代谢反应的产物，作用的结果是使细胞停止与合成有关酶的合成。
12．是近年来找到的在代谢调控中，有重要作用的多磷酸核苷酸。在E.coli中，它参与rRNA合成的控制。（答案：ppGpp）
四、选择题
1．大肠杆菌内的β-半乳糖苷的主动运输的特点是：
A 需要能源。
B β-半乳糖苷具有一定的饱和浓度，超出此饱和浓度摄取率不可能再加快
C β-半乳糖苷的流速取决于细胞内的β-半乳糖苷浓度。
D β-半乳糖的分子形状。
2．在哺乳动物的组织内，丝氨酸可作为下列哪些物质的合成前体：
A 甲硫氨酸
B 甘氨酸
C 色氨酸
D 胆碱
3．在哺乳动物的组织内，甘氨酸是合成下列哪些物质的前体：
A 血红素
B 肌酸
C 鸟嘌呤
D 胸腺嘧啶
4．体内活泼甲基供体主要是：
A 硫辛酸
B S—腺苷甲硫氨酸
C 甲硫氨酸
D 磷酸肌酸
5．将下列物质加到无细胞质悬浓中会引起cAMP降低的是：
A cAMP磷酸二酯酶
B 腺苷酸环化酶
2020年自考《生物化学及生物化学检验(二)》模拟试题及答案（卷四） 一、A型题 1. 骨矿化的最主要原料是下列哪一种( ) A. 胶原蛋白 B. 羟磷灰石 C. 羟脯氨酸 D. 碳酸钙 E. 柠檬酸钙 2 . 骨有机质中含量最多的是下列哪种成分( ) A. Ⅰ型胶原蛋白 B. 非胶原蛋白 C. 脂类 D. 羟磷灰石 E. 甘氨酸 3. 下列哪种物质是成熟破骨细胞的主要标志( ) A. 骨钙素 B. 骨碱性磷酸酶 C. 抗酒石酸酸性磷酸酶 D. 降钙素 E. Ⅰ型前胶原前肽 4. 骨骼中含量最多的最主要的一种非胶原蛋白质是( ) A. 降钙素
B. 骨钙素 C. 骨碱性磷酸酶 D. 抗酒石酸酸性磷酸酶 E. 基质金属蛋白酶 5. 下列哪一种不是骨形成标志物( ) A. 抗酒石酸酸性磷酸酶 B. Ⅰ型前胶原羧基端前肽 C. 骨碱性磷酸酶 D. 骨钙素 E. Ⅰ型前胶原氨基端前肽 6. 下列哪一种不是骨吸收标志物( ) A. 胶原交联 B. 尿羟脯氨酸 C. 抗酒石酸酸性磷酸酶 D. 尿半乳糖羟赖氨酸 E. 骨钙素 7. 以下是骨形成标志物的是( ) A. 脱氧吡啶酚 B. 骨碱性磷酸酶 C. 尿半乳糖羟赖氨酸 D. A、B、C都是 E. A、B、C都不是
8. 骨钙素由什么细胞合成( ) A. 成骨细胞 B. 破骨细胞 C. 成骨细胞前体细胞 D. 破骨细胞前体细胞 E. 骨细胞 9. 循环中的骨钙素半寿期为( ) A. 5分钟 B. 5小时 C. 5天 D. 5周 E. 5个月 10. 骨碱性磷酸酶在血清中的半寿期为( ) A. 1小时～2小时 B. 1天～2天 C. 1周～2周 D. 1月～2月 E. 1分钟～2分钟 11. C-端前肽、C-端肽、N-端前肽和N-端肽四个指标中，反映骨吸收的标志物是( ) A.C-端前肽和C-端肽 B.N-端前肽和N-端肽
《生物化学》题库 习题一参考答案 一、填空题 1蛋白质中的苯丙氨酸、酪氨酸和__色氨酸__3种氨基酸具有紫外吸收特性,因而使蛋白质在 280nm处有最大吸收值。 2蛋白质的二级结构最基本的有两种类型,它们是_α-螺旋结构__和___β-折叠结构__。前者的螺距为 0.54nm,每圈螺旋含_3.6__个氨基酸残基,每个氨基酸残基沿轴上升高度为__0.15nm____。天然 蛋白质中的该结构大都属于右手螺旋。 3氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成__蓝紫色____色化合物,而脯氨酸与茚三酮反应 生成黄色化合物。 4当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以两性离子离子形式存在,当pH>pI时,氨基酸以负 离子形式存在。 5维持DNA双螺旋结构的因素有:碱基堆积力;氢键;离子键 6酶的活性中心包括结合部位和催化部位两个功能部位,其中前者直接与底物结合,决定酶的 专一性,后者是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。 72个H+或e经过细胞内的NADH和FADH2呼吸链时,各产生3个和2个ATP。 81分子葡萄糖转化为2分子乳酸净生成______2________分子ATP。 糖酵解过程中有3个不可逆的酶促反应,这些酶是己糖激酶;果糖磷酸激酶;丙酮酸激酶9。 10大肠杆菌RNA聚合酶全酶由σββα'2组成;核心酶的组成是'2ββα。参
与识别起始信号的是σ因子。 11按溶解性将维生素分为水溶性和脂溶性性维生素,其中前者主要包括V B1、V B2、V B6、 V B12、V C,后者主要包括V A、V D、V E、V K(每种类型至少写出三种维生素。) 12蛋白质的生物合成是以mRNA作为模板,tRNA作为运输氨基酸的工具,蛋白质合 成的场所是 核糖体。 13细胞内参与合成嘧啶碱基的氨基酸有:天冬氨酸和谷氨酰胺。 14、原核生物蛋白质合成的延伸阶段,氨基酸是以氨酰tRNA合成酶?GTP?EF-Tu三元复合体的形式进 位的。 15、脂肪酸的β-氧化包括氧化;水化;再氧化和硫解4步化学反应。 二、选择题 1、(E)反密码子GUA,所识别的密码子是: A.CAU B.UG C C.CGU D.UAC E.都不对 2、(C)下列哪一项不是蛋白质的性质之一? A.处于等电状态时溶解度最小 B.加入少量中性盐溶解度增加 C.变性蛋白质的溶解度增加 D.有紫外吸收特性 3.(B)竞争性抑制剂作用特点是:
《生物化学》练习题及答案 纵观近几年来生化自考的题型一般有四种：(一)最佳选择题，即平常所说的A型多选题，其基本结构是由一组题干和A、B、C、D、E 五个备选答案组成，其中只有一个是最佳答案，其余均为干扰答案。 (二)填充题，即填写某个问题的关键性词语。(三)名词解释，答题要做到准确全面，举个例来说，名解“糖异生”，单纯回答“非糖物质转变为糖的过程”这一句话显然是不够的，必需交待异生的场所、非糖物质有哪些等，诸如此类问题，往往容易疏忽。(四)问答题，要充分理解题意要求，分析综合，拟定答题方案。现就上述四种题型，编写了生物化学习题选，供大家参考。 一、最佳选择题：下列各题有A、B、C、D、E五个备选答案，请选择一个最佳答案。 1、蛋白质一级结构的主要化学键是( ) A、氢键 B、疏水键 C、盐键 D、二硫键 E、肽键 2、蛋白质变性后可出现下列哪种变化( ) A、一级结构发生改变 B、构型发生改变 C、分子量变小 D、构象发生改变 E、溶解度变大 3、下列没有高能键的化合物是( )
A、磷酸肌酸 B、谷氨酰胺 C、ADP D、1，3一二磷酸甘油酸 E、磷酸烯醇式丙酮酸 4、嘌呤核苷酸从头合成中，首先合成的是( ) A、IMP B、AMP C、GMP D、XMP E、ATP 5、脂肪酸氧化过程中，将脂酰～SCOA载入线粒体的是( ) A、ACP B、肉碱 C、柠檬酸 D、乙酰肉碱 E、乙酰辅酶A 6、体内氨基酸脱氨基最主要的方式是( ) A、氧化脱氨基作用 B、联合脱氨基作用 C、转氨基作用 D、非氧化脱氨基作用 E、脱水脱氨基作用 7、关于三羧酸循环，下列的叙述哪条不正确( ) A、产生NADH和FADH2 B、有GTP生成 C、氧化乙酰COA D、提供草酰乙酸净合成 E、在无氧条件下不能运转 8、胆固醇生物合成的限速酶是( ) A、HMG COA合成酶 B、HMG COA裂解酶 C、HMG COA还原酶 D、乙酰乙酰COA脱氢酶 E、硫激酶 9、下列何种酶是酵解过程中的限速酶( )
生物化学实验思考题 Document number：BGCG-0857-BTDO-0089-2022
生物化学实验思考题 1.可用何种颜色反应鉴别酮糖的存在？ 间苯二酚反应，在酸的作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。 2.α—萘酚的反应原理是什么？ 糖在浓的无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及其糠醛的衍生物，后者能与α—萘酚生成紫红色物质。 3.菲林试剂和本尼迪凯特氏法检验糖的原理是什么？ O沉淀。它们都是含有Cu2+的碱性溶液，能使还原糖氧化而本身还原成红色或者黄色的Cu 2 4.何谓纸层析法？ 用滤纸作为惰性支持物的的分层层析法。 5.何谓Rf值？影响Rf值的主要因素是什么？ 纸层析法形成的纸层析图谱上，原点到层析点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值；影响Rf值的因素有：物质的结构、性质、溶剂系统、层析滤纸的质量和层析温度等因素有关。 6.怎样制备扩展剂？ 扩展剂是4份水饱和的和1份醋酸的混合物。将20ml和5ml冰醋酸放入中，与15ml水混合，充分振荡，静置后分层，放出下层水层，漏斗中的则为扩展剂。 7.层析缸中的平衡剂的作用是什么？ 平衡剂起到使纸上吸附的溶剂达到饱和。使物质在展开剂和纸层析上吸附的溶剂中溶解度不同而进行分离。 8.通过蛋白质及氨基酸的呈色反应实验你掌握了几种鉴定蛋白质和氨基酸的方法？他们 的原理是什么？
四种：双缩脲反应；茚三酮反应；黄色反应；考马斯亮蓝反应。 （1）双缩脲在碱性环境中能与Cu2+ 生成紫红色化合物，蛋白质中有肽键，其结构与双缩脲相似，也能发生此反应。（2）除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物质外，所有α—氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应产生蓝紫色物质。（3）含有苯环结构的氨基酸，如酪氨酸、和色氨酸，遇硝酸后，可被硝化成黄色物质，该化合物在碱性溶液中进一步形成橙色的硝醌酸钠。（4）考马斯亮蓝G250有红色和蓝色两种色调。在酸性溶液中，其以游离态存在呈现棕红色；当它与蛋白质通过疏水作用结合后变为蓝色。 9.什么是酶的最适温度及其应用的意义？ 酶活性最高时的温度称为酶的最适温度。可以利用这一原理指导工农业生产，提高生产效益。 10.什么是酶反应的最适PH?对酶的活性有什么影响？ 酶催化活性最高时反应体系的 pH 称为酶促反应的最适 PH。PH过高、过低都会使酶促反应的速率下降。 11.什么是酶的活化剂？ 指能够与分子上的一些结合，使酶活力提高的物质。 12.什么是酶的抑制剂？与变性剂有何区别？本实验结果如何证明酶的专一性？ 指与分子上的一些结合，使酶活力下降，甚至消失，但不使变性的物质。区别：酶的抑制剂不会使酶发生变性，而酶的变性剂会使酶的结构和性质发生改变。酶的专一性证明：实验结果表明通过在淀粉和蔗糖中分别加入有活性的淀粉酶和蔗糖酶后，两者均产生了还原性的糖，与本尼迪凯特试剂反应产生了砖红色沉淀，而其他的条件下均没有还原性糖的的产生，进而说明了酶的专一性。（答题时可以详尽的描述） 13.何谓碘值？有何意义？
生物化学检验试题 一、单选题（本题满分30分，每小题1分） 1. 被大量钙、镁离子污染的玻璃器皿可用下列哪种洗涤剂洗涤（） A、合成洗涤剂 B、铬酸洗液 C、尿素洗液 D、EDTANa2 2. 静脉采血时，止血带压迫时间过长，会导致血清下列哪种物质含量降低（） A、总蛋白 B、胆固醇 C、胆红素 D、钾 3. 参考值范围一般以多少可信限为界（） A、90% B、95% C、98% D、99% 4. 离子强度（I）与电泳速度（V）及分辨力的关系是（） A、I大，V快，分辨力差 B、I小，V快，分辨力好 C、I大，V慢，分辨力好 D、I小，V慢，分辨力差 5. 血清钾的正常参考值是（） A、2.25～2.75mmol/L B、0.96～1.61mmol/L C、3.5～5.4mmol/L D、135～145mmol/L 6. 血液CO2的主要形式是（） A、Hb- NHCOOH B、Pr- NHCOOH C、HCO3－ D、物理溶解 7. 血清尿素测定下列哪一种方法属于直接法（） A、二乙酰一肟法 B、波氏法 C、电量法 D、电极法 8. 胆色素中无色的物质是（） A、胆红素 B、胆绿素 C、胆素原 D、胆素 9. 正常人血液的pH为（） A. 7.3±0.5 B. 7.4±0.5 C. 7.5±0.5 D. 7.6±0.5 10. 血浆阴离子间隙（AG）是指（） A. 血浆阳离子减去阴离子 B. 血浆Na+减去Cl—与HCO3— C. 血浆阴离子减去阳阴离子 D. 血浆Cl—与HCO3—减去Na+ 11. 新购置的玻璃仪器需用下列哪种溶液浸泡2～6h（） A、浓盐酸 B、浓硫酸 C、0.2mol/LHCl D、铬酸洗液 1211. OGTT成人口服葡萄糖量一般为（） A、50g B、75g C、100g D、150g 13. 下列哪型高脂蛋白血症易发生冠心病（） A、Ⅰ型 B、Ⅱa型 C、Ⅲ型 D、Ⅳ型 14. 甲状腺激素中活性最强的是（） A、MIT B、DIT C、T3 D、T4 15. 下列哪种蛋白质的测定对原发性肝癌有诊断价值（） A、Hp B、pA C、AFP D、TRF 16. 采用酶联—紫外连续监测法测定血清ALT活性，所用的工具酶是（） A、AST B、MDH C、LDH D、GLDH 17. 谷胱甘肽过氧化物酶组成的必需微量元素是（） A. 锌 B. 硒 C. 锰 D. 铬 18. 酶法测定血清胆固醇，试剂中加入胆酸钠的作用是（） A、激活CEH B、激活ChOD C、激活POD D、促进胆固醇从脂蛋白中释放 19. 1分子Hb可结合（） A、2O2 B、O2 C、4O2 D、4O 20. 载脂蛋白A1主要存在于（）
生物化学试题库 蛋白质化学 一、填空题 1．构成蛋白质的氨基酸有种，一般可根据氨基酸侧链（R）的大小分为侧链氨基酸和侧链氨基酸两大类。其中前一类氨基酸侧链基团的共同特怔是具有性；而后一类氨基酸侧链（或基团）共有的特征是具有性。碱性氨基酸（pH6～7时荷正电）有两种，它们分别是氨基酸和氨基酸；酸性氨基酸也有两种，分别是氨基酸和氨基酸。 2．紫外吸收法（280nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子中含有氨基酸、氨基酸或氨基酸。 3．丝氨酸侧链特征基团是；半胱氨酸的侧链基团是 。这三种氨基酸三字母代表符号分别是 4．氨基酸与水合印三酮反应的基团是，除脯氨酸以外反应产物的颜色是；因为脯氨酸是α—亚氨基酸，它与水合印三酮的反应则显示色。 5．蛋白质结构中主键称为键，次级键有、、 、、；次级键中属于共价键的是键。 6．镰刀状贫血症是最早认识的一种分子病，患者的血红蛋白分子β亚基的第六位 氨酸被氨酸所替代，前一种氨基酸为性侧链氨基酸，后者为性侧链氨基酸，这种微小的差异导致红血蛋白分子在氧分压较低时易于聚集，氧合能力下降，而易引起溶血性贫血。 7．Edman反应的主要试剂是；在寡肽或多肽序列测定中，Edman反应的主要特点是。 8．蛋白质二级结构的基本类型有、、 和。其中维持前三种二级结构稳定键的次级键为 键。此外多肽链中决定这些结构的形成与存在的根本性因与、、 有关。而当我肽链中出现脯氨酸残基的时候，多肽链的α-螺旋往往会。 9．蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体，其稳定性主要因素有两个，分别是 和。 10．蛋白质处于等电点时，所具有的主要特征是、。 11．在适当浓度的β-巯基乙醇和8M脲溶液中，RNase（牛）丧失原有活性。这主要是因为RNA酶的被破坏造成的。其中β-巯基乙醇可使RNA酶分子中的键破坏。而8M脲可使键破坏。当用透析方法去除β-巯基乙醇和脲的情况下，RNA酶又恢复原有催化功能，这种现象称为。 12．细胞色素C，血红蛋白的等电点分别为10和7.1，在pH8.5的溶液中它们分别荷的电性是、。 13．在生理pH条件下，蛋白质分子中氨酸和氨酸残基的侧链几乎完全带负电，而氨酸、氨酸或氨酸残基侧链完全荷正电（假设该蛋白质含有这些氨基酸组分）。 14．包含两个相邻肽键的主肽链原子可表示为，单个肽平面及包含的原子可表示为。 15．当氨基酸溶液的pH＝pI时，氨基酸（主要）以离子形式存在；当pH＞pI时，氨基酸
生物化学各章练习题及答案
生化练习题 一、填空题： 1、加入高浓度的中性盐，当达到一定的盐饱和度时，可使蛋白质的溶解度__________并__________,这种现象称为 __________。 2、核酸的基本结构单位是_____________。 3、____RNA 分子指导蛋白质合成，_____RNA 分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。 4、根据维生素的溶解性质，可将维生素分为两类，即 ____________和____________。 5、___________是碳水化合物在植物体内运输的主要方式。 6、糖酵解在细胞的_____________中进行 7、糖类除了作为能源之外，它还与生物大分子间识别有关，也是合成__________，___________，_____________等的碳骨架的共体。 8、脂肪是动物和许多植物主要的能源贮存形式，是由甘油与3分子_____________酯化而成的。 9、基因有两条链，作为模板指导转录的那条链称 _____________链。 10、以RNA 为模板合成DNA 称_____________。 二、名词解释 1、蛋白质的一级结构： 2、糖的有氧氧化： 3、必需脂肪酸： 4、半保留复制： 三、问答题 1、蛋白质有哪些重要功能？
1、蛋白质的一级结构：指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，以及二硫键的位置。 2、糖的有氧氧化：糖的有氧氧化指葡萄糖或糖原在有氧条件下氧化成水和二氧化碳的过程。是糖氧化的主要方式。 3、必需脂肪酸：为人体生长所必需但有不能自身合成，必须从事物中摄取的脂肪酸。在脂肪中有三种脂肪酸是人体所必需的，即亚油酸，亚麻酸，花生四烯酸。 4、半保留复制：双链DNA 的复制方式，其中亲代链分离，每一子代DNA 分子由一条亲代链和一条新合成的链组成。 三、问答题 2、DNA 分子二级结构有哪些特点？ 答：按Watson-Crick 模型，DNA 的结构特点有：两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互绕；碱基位于结构的内侧，而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧，通过磷酸二酯键相连，形成核酸的骨架；碱基平面与轴垂直，糖环平面则与轴平行。两条链皆为右手螺旋；双螺旋的直径为2nm，碱基堆积距离为0.34nm，两核酸之间的夹角是36°，每对螺旋由10 对碱基组成；碱基按A=T，G=C 配对互补，彼此以氢键相连系。维持DNA 结构稳定的力量主要是碱基堆积力；双螺旋结构表面有两条螺形凹沟，一大一小。 3、怎样证明酶是蛋白质？ 答：（1）酶能被酸、碱及蛋白酶水解，水解的最终产物都是氨基酸，证明酶是由氨基酸组成的。 （2）酶具有蛋白质所具有的颜色反应，如双缩脲反应、茚三酮反应、米伦反应、乙醛酸反应。 （3）一切能使蛋白质变性的因素，如热、酸碱、紫外线等，同样可以使酶变性失活。
生物化学实验理论考试题答案 1.醋酸纤维薄膜电泳时点样端应靠近电极的哪一端，为什么？ 答；电泳时点样端应靠近负极，因为血清中各种蛋白质在PH为8.6的环境中均带负电，根据同性相吸，异性相斥原理，点样端在负极时蛋白质向正极泳动从而实现蛋白质分离。 2.用分光光度计测定物质含量时，设置空白对照管的作用,为什么？ 答；空白对照是为了排除溶剂对吸光度的影响。溶液的吸光度表示物质对光的吸收程度，但是作为溶剂也能吸收，反射和透射一部分的光，因此必须以相同的溶剂设置对照，排除溶剂对吸光度的影响。 3.简述血清蛋白的醋酸纤维薄膜的电泳原理？ 答；血清蛋白中各种蛋白质离子在电场力的作用下向着与自身电荷相反的方向涌动，而各种蛋白质等电点不同，且在PH为8.6时所带电荷不同，分子大小不等，形状各有差异，所以在同一电泳下永动速度不同从而实现分离。 4.何谓Rf值？影响Rf值的因素？ 答;Rf是原点到层析中心的距离与原点到溶剂前沿的距离之比。Rf的大小与物质的结构，性质，溶剂系统，层析滤纸的质量和层析温度有关，对同一种物质来讲Rf是一个常量。 5.什么是盐析？盐析会引起蛋白质的变性吗？一般用什么试剂? 答;盐析是指当溶液中的中性盐持续增加时，蛋白质的溶解度下降，当中性盐的浓度达到一定程度的时候，蛋白质从溶液中析出的现象。盐析不会引起蛋白质的变性，因为蛋白质的结构并未发生改变，去掉引起盐析的因素蛋白质仍能溶解；一般用饱和硫酸铵溶液进行盐析 6.简述DNS法测定还原糖浓度的实验原理？ 答;还原糖与DNS在碱性条件下加热被氧化成糖酸，而DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内还原糖的量与3-氨基-5硝基水杨酸颜色的深浅成正比，用分光光度计测出溶液的吸光度，通过查对标准曲线可计算出3-氨基-5硝基水杨酸的浓度，从而得出还原糖的浓度。 7.影响蛋白质沉淀的因素是什么？沉淀和变性有什么联系？ 答;水溶液中的蛋白质分子由于表面形成水化层和双电层从而形成稳定的亲水胶
生物化学试题库及其答案——糖类化学 一、填空题 1.纤维素是由________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 2.常用定量测定还原糖的试剂为________________试剂和 ________________试剂。 3.人血液中含量最丰富的糖是________________,肝脏中含量最丰富的糖是 ________________,肌肉中含量最丰富的糖是________________。 4.乳糖是由一分子________________和一分子________________组成,它们之间通过________________糖苷键相连。 5.鉴别糖的普通方法为________________试验。 6.蛋白聚糖是由________________和________________共价结合形成的复合物。 7.糖苷是指糖的________________和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛(或缩酮)等形式的化合物。 8.判断一个糖的D-型和L-型是以________________碳原子上羟基的位置作依据。 9.多糖的构象大致可分为________________、________________、 ________________和________________四种类型,决定其构象的主要因素是 ________________。 二、是非题 1.[ ]果糖是左旋的，因此它属于L-构型。 2.[ ]从热力学上讲,葡萄糖的船式构象比椅式构象更稳 定。 3.[ ]糖原、淀粉和纤维素分子中都有一个还原端,所以它们都有还原性。 4.[ ]同一种单糖的α-型和β-型是对映体。 5.[ ]糖的变旋现象是指糖溶液放置后,旋光方向从右旋变成左旋或从左旋变成右旋。 6.[ ]D-葡萄糖的对映体为L-葡萄糖,后者存在于自然界。 7.[ ]D-葡萄糖,D-甘露糖和D-果糖生成同一种糖脎。 8.[ ]糖链的合成无模板,糖基的顺序由基因编码的转移酶决定。 9.[ ]醛式葡萄糖变成环状后无还原性。 10.[ ]肽聚糖分子中不仅有L-型氨基酸,而且还有D-型氨基酸。 三、选择题
生化练习题 一、填空题： 1、加入高浓度的中性盐，当达到一定的盐饱和度时，可使蛋白质的溶解度__________并__________,这种现象称为__________。 2、核酸的基本结构单位是_____________。 3、____RNA 分子指导蛋白质合成，_____RNA 分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。 4、根据维生素的溶解性质，可将维生素分为两类，即____________和____________。 5、___________是碳水化合物在植物体内运输的主要方式。 6、糖酵解在细胞的_____________中进行 7、糖类除了作为能源之外，它还与生物大分子间识别有关，也是合成__________，___________，_____________等的碳骨架的共体。 8、脂肪是动物和许多植物主要的能源贮存形式，是由甘油与3分子_____________酯化而成的。 9、基因有两条链，作为模板指导转录的那条链称_____________链。 10、以RNA 为模板合成DNA 称_____________。 二、名词解释 1、蛋白质的一级结构： 2、糖的有氧氧化： 3、必需脂肪酸： 4、半保留复制： 三、问答题 1、蛋白质有哪些重要功能 2、DNA 分子二级结构有哪些特点 3、怎样证明酶是蛋白质 4、简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其个性 5、什么是必需氨基酸和非必需氨基酸 6、遗传密码如何编码有哪些基本特性 简答： 2、DNA 分子二级结构有哪些特点 3、怎样证明酶是蛋白质 4．简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其个性 5、什么是必需氨基酸和非必需氨基酸 6．遗传密码如何编码有哪些基本特性 一、 1、减小；沉淀析出；盐析 2、核苷酸 3、m ; t 4、水溶性维生素；脂溶性维生素 5、蔗糖 6、细胞质 7、蛋白质；核酸；脂肪 8、脂肪酸 9、有意义链 10、反向转录 1、蛋白质的一级结构：指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序，以及二硫键的位置。 2、糖的有氧氧化：糖的有氧氧化指葡萄糖或糖原在有氧条件下氧化成水和二氧化碳的过程。是糖氧化的主要方式。 3、必需脂肪酸：为人体生长所必需但有不能自身合成，必须从事物中摄取的脂肪酸。在脂肪中有三种脂肪酸是人体所必需的，即亚油酸，亚麻酸，花生四烯酸。 4、半保留复制：双链DNA 的复制方式，其中亲代链分离，每一子代DNA 分子由一条亲代链和一条新合成的链组成。 三、问答题 2、DNA 分子二级结构有哪些特点
实验一胆固醇的提取2012-11-15 16:20:00 生物师范班题目 1.比色法测定样品的理论基础是什么？ 被测样品必须要有颜色。 2. 胆固醇含量在多少范围时，与值呈良好的线性关系？ 在400mg/ml范围内。 3.在提取胆固醇的过程中，为什么要加无水乙醇？ 促使蛋白质沉淀。 4.在试管中加入1ml磷硫铁试剂，会产生什么现象？（至少写2点） 产生紫红色化合物。产生热量。 5.在无水乙醇中加磷硫铁试剂时，正确的加法是什么？将产生什么现象？请准确描述 该现象。 沿管壁慢慢加入。溶液分层。上层是无水乙醇，下层是磷硫铁试剂。 1. 胆固醇提取过程中，无水乙醇为什么要分两次加入？ 目的是使蛋白质以分散很细的沉淀颗粒析出。 2.我们用比色法测定胆固醇含量的仪器名称是什么？ 分光光度计 3. P-S-Fe试剂配置时，能用稀硫酸吗？为什么？ 不能。因为FeCl3本身是亲水性物质，稀硫酸中含有水，会降低P-S-Fe试剂的浓度，从而导致反应不能发生。 4.请简述移液枪的使用步骤。 根据所要吸取的溶液的体积选定合适量程的移液枪。 调好量程。 插枪头。 吸取液体。 将移液枪的量程调至最大。 5. 请简述0.08mg/ml胆固醇标准溶液的配置方法。 准确称取胆固醇80mg，溶于无水乙醇，定容至100ml 将贮液用无水乙醇准确稀释10倍既得。
实验二总糖和还原糖测定2012-11-15 16:20:00 生物师范班 1. 请写出还愿糖与非还原糖结构的不同之处 拥有自由的醛基和酮基 2. 对没有还原性的糖，用什么方法进行糖含量的测定？ 酸水解的方法将非还原性的糖降解呈还原糖。 3. DNS之所以能和还原糖反应，是因为其结构中含有__________? 硝基 4. 如果将DNS和其与还原糖反应的产物同时进行比色，谁的A值更大？为什么？ 产物的更大，因为产物生成棕红色，颜色越深，吸光度越高。 5. 还原糖提取过程中，为什么要离心两次？ 因为这样可以更好地将还原糖全部提取出来。第二次洗涤沉淀。 海洋技术班 1.单糖都是还原糖吗？为什么？ 是的，因为有自由醛基和酮基 2.为什么能用比色法测定还原糖的量？ 因为还原糖的量与光吸收值呈线性关系。 3.DNS的全称是？ 3,5-二硝基水杨酸 4.总糖提取过程中，碘液的作用是什么？ 确认淀粉水解完全。 5.请简述标准曲线的作用。 通过标准曲线来算出未知样品的浓度。
生物化学检验技术试卷3 一、以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。请从中选择1个最佳答案，并在答题卡上将相应题号的相应字母所属于的方框涂黑 1．下列关于电泳的支持介质，叙述错误的是 A．对支持介质的基本要求是有化学惰性B．支持物应有一定的坚韧度并适于保存 C．电渗作用越小越好D．电渗方向与电泳方向一致时，则电泳速度加快E．电渗方向与电泳方向相反时，则电泳速度加快 2．下列对血清酶活力测定的描述哪一项是错误的 A．可测定产物生成量B．可测定底物的消耗量C．需最适pH D．需最适温度E．与底物浓度无关3．体内生物转化作用最强的器官是 A．肾脏B．心脏C．肝脏D．胃肠道E．脾脏 4.血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳从正极到负极各组份的先后顺序 A．A1b.α1.α2.β.γ B．γ. β. α1.α2.A1b C．β.A1b. γ.α1.α2D．α1.α2.β.γ.A1b E．A1b. β.γ.α1.α2. 5．下列哪项不是非蛋白含氮化合物 A．尿素B．肌酐C．尿酸D．肌酸E．乳酸 6．1，4-糖苷酸是下列那种物质分子中的主要化学键 A．蛋白质B．脂肪C．氨基酸D．淀粉E．核糖核酸 7．血清蛋白电泳时通常用pH8.6缓冲液，此时各种蛋白质带有的电荷为 A．白蛋白带正电荷，其他蛋白带负电荷B．白蛋白带负电荷，其他蛋白带正电荷C．白蛋白和其他蛋白均带负电荷D．白蛋白和其他蛋白均带正电荷
E．xx和其他蛋白均不带电荷 8．血气分析仪直接测定的三项指标是： A. PH、PCO2、TCO2 B. PH、PO2、AB C. PH、PO2、PCO2 D..PH、SB、AB E. TCO2、SB 、PCO2 9．以下说法错误的是 A．干化学分析是用反射式光度计测定的B．离心式自动生化分析仪可有单通道和多通道之分C．床旁分析多用专用分析仪测定D．多数自动生化分析仪使用的程序可以修改E．自动生化分析仪需做日保养，周保养，月保养和年保养，其保养的内容是不同的10．常用于清洗蛋白质污染的洗涤液是 A．铬酸洗液B．乙二胺四乙酸二钠洗液C．硼酸洗液D．合成洗涤液E．7.5mol/L尿素洗液 11.反映肾小球滤过功能的试验为 A.BSP排泄试验 B.内生肌酐清除率 C.肾浓缩稀释试验 D.PAH清除率 E.ICG排泄试验 12．正常人血中胆红素主要来源于 A．胆汁B．胆汁酸盐C．细胞色素氧化酶D．肌红蛋白 E．衰老红细胞释放的血红蛋白 13.尿液常规分析若不能及时检查，标本应冷藏于 A．4℃冰箱B．0℃冰箱C．-2℃冰箱D．-20℃冰箱E．-80℃冰箱 14．内生肌酐清除率的参考值为 A.120—150 ml/min B.80—120 ml/min C.50—80 ml/min D.30—50 ml/min E.10—30 ml/min
生物化学练习题 （供五年制临床医学、口腔、麻醉及影象等专业使用） 第一章蛋白质的结构与功能 一、A型题（每小题1分） 1．有一混合蛋白质溶液，各种蛋白质的pI分别为4.6、5.0、5.3、6.7、7.3。电泳时欲使其中4种泳向正极，缓冲液的pH应该是(D) A．5.0 B．4.0 C．6.0 D．7.0 E．8.0 2．下列蛋白质通过凝胶过滤层析柱时最先被洗脱的是(B) A．血清清蛋白(分子量68 500) B．马肝过氧化物酶(分子量247 500) C．肌红蛋白(分子量16 900) D．牛胰岛素(分子量5 700) E．牛β乳球蛋白(分子量35000) 3．蛋白质分子引起280nm光吸收的最主要成分是(D) A．肽键 B．半胱氨酸的-SH基 C．苯丙氨酸的苯环 D．色氨酸的吲哚环 E．组氨酸的咪唑环 4．含芳香环的氨基酸是(B) A．Lys B．Tyr C．Val D．Ile E．Asp 5．下列各类氨基酸中不含必需氨基酸的是(A) A．酸性氨基酸B．含硫氨基酸C．支链氨基酸 D．芳香族氨基酸E．碱性氨基 6．变性蛋白质的特点是(B) A．黏度下降B．丧失原有的生物活性C．颜色反应减弱 D．溶解度增加E．不易被胃蛋白酶水解 7．蛋白质变性是由于(B) A．蛋白质一级结构改变B．蛋白质空间构象的改变 C．辅基的脱落D．蛋白质水解E．以上都不是 8．以下哪一种氨基酸不具备不对称碳原子(A) A．甘氨酸B．丝氨酸C．半胱氨酸D．苏氨酸E．丙氨酸 9．下列有关蛋白质β折叠结构的叙述正确的是（E） A．β折叠结构为二级结构B．肽单元折叠成锯齿状C．β折叠结构的肽链较伸展 D．若干肽链骨架平行或反平行排列，链间靠氢键维系E．以上都正确 10．可用于蛋白质定量的测定方法有（B） Ａ．盐析法Ｂ．紫外吸收法C．层析法D．透析法E．以上都可以11．镰状红细胞贫血病患者未发生改变的是（E） Ａ．Hb的一级结构Ｂ．Hb的基因Ｃ．Hb的空间结构 Ｄ．红细胞形态Ｅ．Hb的辅基结构 12．维系蛋白质一级结构的化学键是（B）
生物化学实验习题及参 考答案 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】
生物化学实验习题及解答 一、名词解释 1、pI； 2、层析； 3、透析； 4、SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳； 5、蛋白质变性； 6、复性； 7、Tm 值； 8、同工酶； 9、Km值； 10、DNA变性；11、退火；12、增色效应 二、基础理论单项选择题 1、用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键（ ） A、双缩脲反应 B、凯氏定氮 C、紫外吸收 D、羧肽酶法 2、下列哪组反应是错误的（） A、葡萄糖——Molish反应 B、胆固醇——Libermann-Burchard反应 C、色氨酸——坂口（Sakaguchi）反应 D、氨基酸——茚三酮反应 3、Sanger试剂是（） A、苯异硫氰酸 B、2，4-二硝基氟苯 C、丹磺酰氯 D、-巯基乙醇 4、肽键在下列哪个波长具有最大光吸收（） A、215nm B、260nm C、280nm D、340nm 5、下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收（） A、色氨酸的吲哚基 B、酪氨酸的酚环 C、苯丙氨酸的苯环 D、半胱氨酸的硫原子 6、SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子量是根据各种蛋白质（） A、在一定pH值条件下所带的净电荷的不同 B、分子大小不同 C、分子极性不同 D、溶解度不同 7、蛋白质用硫酸铵沉淀后，可选用透析法除去硫酸铵。硫酸铵是否从透析袋中除净，你选用下列哪一种试剂检查（） A、茚三酮试剂 B、奈氏试剂 C、双缩脲试剂 D、Folin-酚试剂 8、蛋白质变性是由于（） A、一级结构改变 B、亚基解聚 C、空间构象破坏 D、辅基脱落 9、用生牛奶或生蛋清解救重金属盐中毒是依据蛋白质具有（） A、胶体性 B、粘性 C、变性作用 D、沉淀作用 10、有关变性的错误描述为（）
《临床生物化学检验》考试试题与答案 一、名词解释（每小题2分，共10分） 1、临床化学 2、前带效应 3、色素原底物 4、溯源性 5、酶的比活性 二、填空（每空1分，共15分） 1 、翻译下列英文缩写（英译汉）：IFCC 的中文全称为 _______________________________________ ，其中文简称为 _______________________________ 。NCCLS 的中文全称为 _______________________________。PNPP 为_____________________。AMS 为_____________。AChE 为________________________。CRM 为________________。质量保证中的 VIS 为____________________。 2、将十几个步骤简化为样本采集、样本分析、质量控制、解释报告等四个步骤的过程称为病人身边检验 （床边检验），其英文缩写为_____________ 。（中国）实验室国家认可委员会的英文缩写为_________ 。美国临床化学协会的英文缩写为_____________。 3、最早对临床生物化学检验做出开创性研究的我国科学家是_______________。 4、NCCLS的精密度评价试验中，规定合乎要求的批内不精密度CV范围为_______________，批间不精密 度CV变异范围为_______________，其中的EA来源于_______________的规定标准。 三、单选（每小题1分，共30分） 1、连续监测法测定酶活性的吸光度读数次数应不少于（）次 A、2 B、3 C、4 D、7 2、测定待测酶Ex的酶偶联反应A??E?x→B??E?a→C ??Ei→D 之中，关于零级 反应、一级反应的描述正确的是（） A、三个酶催化的都是零级反应 B、Ex和Ea催化的是零级反应，Ei催化一级反应 C、Ex催化的是零级反应，Ea和Ei催化一级反应 D、三个酶催化的都是一级反应 3、测定代谢物Ax的酶偶联反应A B C D Ea Ea Ei x ???→ ???→ ??→ 1 2 之中，关于零级反应、一级反应的描述正 确的是（） A、三个酶催化的都是零级反应 B、Ea1和Ea2催化的是零级反应，Ei催化一级反应 得分 阅卷人 得分 阅卷人 得分 阅卷人
生物化学试题（1） 第一章蛋白质的结构与功能 [测试题] 一、名词解释：1．氨基酸 2．肽 3．肽键 4．肽键平面 5．蛋白质一级结构 6．α-螺旋 7．模序 8．次级键 9．结构域 10．亚基 11．协同效应 12．蛋白质等电点 13．蛋白质的变性 14．蛋白质的沉淀 15．电泳 16．透析 17．层析 18．沉降系数 19．双缩脲反应 20．谷胱甘肽 二、填空题 21．在各种蛋白质分子中，含量比较相近的元素是____，测得某蛋白质样品含氮量为15.2克，该样品白质含量应为____克。 22．组成蛋白质的基本单位是____，它们的结构均为____，它们之间靠____键彼此连接而形成的物质称为____。 23．由于氨基酸既含有碱性的氨基和酸性的羧基，可以在酸性溶液中带____电荷，在碱性溶液中带____电荷，因此，氨基酸是____电解质。当所带的正、负电荷相等时，氨基酸成为____离子，此时溶液的pH值称为该氨基酸的____。 24．决定蛋白质的空间构象和生物学功能的是蛋白质的____级结构，该结构是指多肽链中____的排列顺序。25．蛋白质的二级结构是蛋白质分子中某一段肽链的____构象，多肽链的折叠盘绕是以____为基础的，常见的二级结构形式包括____，____，____和____。 26．维持蛋白质二级结构的化学键是____，它们是在肽键平面上的____和____之间形成。 27．稳定蛋白质三级结构的次级键包括____，____，____和____等。 28．构成蛋白质的氨基酸有____种，除____外都有旋光性。其中碱性氨基酸有____，____，____。酸性氨基酸有____，____。 29．电泳法分离蛋白质主要根据在某一pH值条件下，蛋白质所带的净电荷____而达到分离的目的，还和蛋白质的____及____有一定关系。 30．蛋白质在pI时以____离子的形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以____离子形式存在，在pH 生物化学复习 一、单选题： 1. 能出现在蛋白质分子中的下列氨基酸，哪一种没有遗传密码E.羟脯氢酸 2. 组成蛋白质的基本单位是α-氨基酸 3. 蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定C.溶液PH值等于PI 4. 下列关于对谷胱甘肽的叙述中，哪一个说法是错误的C.是一种酸性肽 5. 核酸对紫外线的吸收是由哪一结构所产生的C.嘌呤、嘧啶环上的共轭双键 6. 核酸分子中储存、传递遗传信息的关键部分是B.碱基序列 7. 镰刀型红细胞患者血红蛋白β-链第六位上B.缬氨酸取代谷氨酸 8. 酶加快化学反应速度的根本在于它E.能大大降低反应的活化能 9. 临床上常用辅助治疗婴儿惊厥和妊娠呕吐的维生素是C.维生素B6 10. 缺乏下列哪种维生素可造成神经组织中的丙酮酸和乳酸堆积D. 维生素B1 11. 关于蛋白质分子三级结构的描述，其中错误的是B.具有三级结构的多肽链都具有生物学活性 12.下列哪种因素不能使蛋白质变性E.盐析 13. 蛋白质与氨基酸都具有A A.两性 B.双缩脲胍 C.胶体性 D.沉淀作用 E.所列都具有 14. 天然蛋白质中不存在的氨基酸是C A.甲硫氨酸 B.胱氨酸 C.羟脯氨酸 D.同型半胱氨酸 E.精氨酸 15. 镰刀型红细胞患者血红蛋白β-链第六位上B A.赖氨酸取代谷氨酸 B.缬氨酸取代谷氨酸 C.丙氨酸取代谷氨酸 D.蛋氨酸取代谷氨酸 E.苯丙氨酸取代谷氨酸 16. 关于竞争性抑制剂作用的叙述错误的是D A.竞争性抑制剂与酶的结构相似 B.抑制作用的强弱取决与抑制剂浓度与底物浓度的相对比例 C.抑制作用能用增加底物的办法消除 D.在底物浓度不变情况下，抑制剂只有达到一定浓度才能起到抑制作用 E.能与底物竞争同一酶的活性中心 17. 下列关于酶的活性中心的叙述正确的是A A.所有的酶都有活性中心 B.所有酶的活性中心都含有辅酶 C.酶的必须基团都位于活性中心之内 D.所有抑制剂都作用于酶的活性中心 E.所有酶的活性中心都含有金属离子 18. 下列关于酶的变构调节，错误的是C A.受变构调节的酶称为变构酶 B.变构酶多是关键酶(如限速酶)，催化的反应常是不可逆反应 C.变构酶催化的反应，其反应动力学是符合米-曼氏方程的 D.变构调节是快速调节 E.变构调节不引起酶的构型变化 生物化学实验 一、名词解释： 分配层析法电泳同工酶酶活性分光光度法层析技术比活力 二、填空题： 1. 测定蛋白质含量的方法有，，和。 2. CAT能把H2O2分解为H2O和O2，其活性大小以来表示，当CAT与H2O2反应结束，再用测定未分解的H2O2。 3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳是以作为载体的一种区带电泳，这种凝胶是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成。化学聚合法一般用来制备_____________胶，其自由基的引发剂是，催化剂是______________；光聚合法适于制备大孔径的_________________胶，催化剂是______________。 4.层析技术按分离过程所主要依据的物理化学性质进行分类，可分成以下几种：_______________，_______________，_______________，_______________和________________。 5. 使用离心机离心样品前，必须使离心管__________且对称放入离心机。 6. 米氏常数可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，表示E对S的亲合力愈，Km愈大，表示E对S 的亲合力愈。 7. 分光光度计在使用之前必须预热，注意预热及样品槽空时必须_________（打开、合上）样品池翻盖。 8. CAT是植物体内重要的酶促防御系统之一，其活性高低与植物的密切相关。 9. 纸层析实验中，____________形成固定相，____________流动相。 10. 聚丙烯酰胺凝胶是是由和交联剂在催化剂作用下聚合而成的，在具有自由基团体系时，两者就聚合。引发产生自由基的方法有两种：和。11. 层析技术按按固定相的使用形式进行分类，可分成以下几种：_______________，_______________，_______________和________________。 三、问答题： 1、简述4种测定蛋白质含量的方法及其原理。 2、简述不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳中的三个不连续及三种物理效应。 3、试分析影响电泳的主要因素有哪些？ 参考答案： 生物化学实验 一、名词解释： 1、电泳：指带电粒子在电场中向与其自身所带电荷相反的电极方向移动的现象。 2、同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。 3、分配层析法：用物质在两种或两种以上不同的混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离目的的一种实验方法。生物化学复习题及答案
生物化学实验练习题及参考答案[1]
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