临床标本收集及保存 Document serial number【LGGKGB-LGG98YT-LGGT8CB-LGUT-
临床样本的收集与保存
根据研究需要采集治疗前，治疗中及治疗后的空腹外周静脉血。
采集时尽量选择与其他常规检验同时进行分别采集抗凝血（依据研究目的选择抗凝剂）和非抗凝（干燥或促凝）血液样本肿瘤?血液样本采集英确保放/化疗前有进行
血浆样本分离应进行两次离心依据科研需求确定样
本份数。
分离提取血浆、血
清、白细胞层、血凝
块进行分装，每例样
本不少于3份。
血清/血浆：分装3
管，0.5ml/管。
血凝块:分装2管，
1cm^3/管。
EDTA抗凝：用于DNA
提取、淋巴母细胞系
建立和蛋白组学研
究。分装3管、
0.5ml/管
血清：室温血凝后≤
30min内进行分离、
分装；4℃，24h内
进行分离、分装。
血浆：4℃，24h内
进行分离、分装。
全血/血清/血浆/血
凝块≤-80℃长期保
存。
血液样本用EDTA抗凝采集
全血样本采集后应尽快用淋巴细胞分离液分离单个核细胞
分离后的单个核细胞应加入细胞冻存液，并利用程序降温仪或程序降温盒进行梯度降温。
冻存液配置为90%FCS +10%DMSO 依据科研需求确定样
本份数。
水平室温离心分离
PBMC，4℃低温洗
涤。
分离后单个核细胞加
入细胞冻存液，混匀
后进行分装，每管
0.5ml。
单个核细胞：4℃，
24h内进行分离、分
装。
分装后≤-150℃液氮
中保存。
样本采集严禁影响临床病理诊断。肿瘤直径≤1cm^3不建议采集或在病理医生指导下采集，采集部位应与用于石蜡切片相一致。
样本采集应在离体后30min内完成采集，采集时应避免坏死区及纤维化区，肿瘤细胞应>50%。
样本采集时应在洁净环境中操作，保存RNA时应尽量在无菌环境下进行；采集不同样本时应更换采集器材、防止交叉污依据科研需求确定样
本份数。
肿瘤、瘤旁及非瘤
（正常）组织各2-3
份。
石蜡/OCT样本1份或
5张组织切片，用于
形态学对照。
需留取质控样本（）
留取份数依据科研目
的而定）
每份样本应≥
0.5cm^3或300mg或
1*10^7细胞。
石蜡样本不小于
0.5*0.5*0.2cm。
样本/福尔马林液比
例应≥1/5。
样本置于液氮内转
运。
石蜡样本置于中性福
尔马林中常温转运，
尽快制成蜡块。
RNA later样本常温
转运（≤24h），≤-
20℃保存。
OCT样本≤-20℃保
存。
新鲜组织样本置于液
氮中保存。
染。
4.采集顺序：标明“远癌-近癌-癌灶”顺序，正常组织（距癌灶边缘>3cm或最远端）→癌旁组织（距离癌灶边缘<3cm）→癌组织
采集后样本置于液态液氮中应使用内旋式冻存管，置于气相液氮或-80℃冰箱中可使用外旋式冻存管。每份肿瘤样本应有配对的血液样本。
采集容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。
吸出培养皿培养液，用PBS冲洗2次，加入胰蛋白酶37℃消化1min。
除去胰蛋白酶，加入5ml培养液混匀后取出细胞液进行离心。除去上清液后加入细胞保护剂0.5ml，胎牛血清0.5ml及DMSO 0.1-0.2ml混匀放入内旋式冻存管内，进行程序降温。
干细胞保存加入特定细胞培养液及高浓度胎牛血清。依据科研需求确定样
本份数。
每皿细胞对应1个冻
存管保存。
传代细胞建议取处于
指数生长期、较大瓶
皿培养的80%-90%汇
合单层细胞。
收集培养液时，
1000g/min离心5-
10min。
加入胰蛋白酶后需放
入恒温箱37℃恒温
1min。
样本置于液氮内转
运。
≤-150℃长期保存。
采集容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。
进行毒理分析时应使用高密度聚丙烯类容器。
检测特殊分析物时应在分管前加入EDTA 或焦亚硫酸钠等防腐剂。
避免经血、白带、精液、前列腺液、粪便污染。
特殊样本应避光保存建议采集首次晨尿。依据科研需求确定样
本份数。
尿液样本≤100ml。
分装5管，1ml/管。
尿液样本可处理为：
全尿。
常温保存：≤4h
0-4℃≤24h。
全尿≤-80℃长期保
存.
细胞≤-150℃长期保
存。
尿液样本含有细胞碎片等杂质，应进行离心。
尿液内细胞采集/分离方法同血液样本。不同时段尿样研究方向：首次晨尿：白细胞、红细胞和激素浓度较高；随机尿样：适合常规筛查和细胞学检测；分级尿样：适用于分析物浓度；定时尿样：可用于比较生物分子排泄模式。
粪便应取新鲜标本，盛器应洁净，不得混有尿液，不可有消毒剂及污水。
采集标本时应用干净的竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便；外观无异常的粪便需从表面、深处及粪端多处取材，其量至少指头大小。冷冻采集后的样本依据科研需求确定样
本份数。
采集量≥30g。
分装3管，10g/管。
冷冻干燥保存。
2≤-80℃长期保存.
采集容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。
采集清晨胆汁、采集时尽量选择与其他常规检验同时进行。胆汁保存应加入细胞培养液(RPMI1640)胆汁内细胞采集分离方法同血液样本。
依据科研需求确定样
本份数。
采集量≥10ml。
胆汁/RPMI1640比例为：
1/25。
分装5管，2ml/管。
采集后4℃保存，时
间≤12h内进行分
装。
≤-150℃长期保存。
样本采集后应转入含
有EDTA和氯化钠混
合液中。
2.如果含有红细胞或颗粒物时应低温离心。
3.采集细胞应使用专业采集方法。
4.脑脊液保存应加入保护剂（DMSO）并使用程序降温仪进行梯度降温。
依据科研需求确定样
本份数。
2.采集量≥3ml。
3.分装3管，0.5-1ml/
管。
样本置于液氮内转
运。
2.上清液-80℃长期保
存。
3. 分离细胞≤-150℃长
期保存。
使用蛋白酶抑制剂处理样本依据科研需求确定样
本份数。
样本置于液氮内转
运。
进行离心、分离上清和可能存在物质、采集上清和颗粒物。分装3-5管，0.5ml/
管。
≤-80℃长期保存。
艾滋病筛查实验室标准操作规程血液样本的采集、编号、运 输、处理、保存 sop 版 本号：第五版 标准操作规程（SOP） 编号：DZJY/ZY450-01 题目：血液样本的采集、编号、运输、处理、保存 版本：第五版 作者：曲文才 日期：2010/05/20 页数：３ 联系人：曲文才 SOP 1 版本号：第五版 艾滋病筛查实验室标准操作规程血液样本的采集、编号、运 输、处理、保存sop
版本号：第五版 一、目的 确保样品的采集、运输、处置、保存得到有效的管理, 保证样品的良好、完整、不被 污染、且不污染环境, 样品在检测前保存完好、完整, 编号清晰。保证分析数据、血样 的准确性和具有可追溯性。 二、范围 适用于 HIV实验室样品的采集、运输、处置、保存。 三、责任 操作人员严格按要求执行。 四、定义 无 五、背景 本 SOP 是为配合 HIV实验室检测，现场样品从采集到检测前的工作而制定的, 以确保 检测样品良好、完整、不被污染、且不污染环境。 六、程序 1、采集 (1) 所需材料 : 乳胶手套, 工作服, 帽子, 口罩, 注射器, 止血带, 医用酒精棉球, 无菌棉签, 医用酒精, 碘伏, 采血枕, 一次性纸垫, 试管及试管架。 (2) 采血方法 : ●采血员洗手, 戴手套, 帽子, 口罩。 ●70% 酒精清洁采血工作台面, 铺上一次性纸垫。 ●在采血枕上铺上一次性纸垫。 ●让调查对象坐在凳子上, 露出一只胳膊直至上臂, 袖口不可过紧。 ●将胳膊放在采血枕上, 掌心向上, 用止血带在上臂扎紧, 肘部应低于心脏水平线。 ●在肘前区寻找鼓起的静脉，并且该静脉与周围组织固定良好，触摸该静脉，确认是静 脉。 ●用碘伏成同心圆状向外消毒, 不得用手接触己消毒部位。 ●用酒精成同心圆状向外消毒。 ●待酒精彻底干燥后, 让调查对象用力握拳。 ●沿血流方向, 以与前臂成 150°将针头插入静脉内。 ●血液流入采血管, 松开止血带, 让调查对象慢慢松开拳头, 待血液到达采血量要求 后, 将采血针头拔出的同时用无菌棉球按住采血伤口。 ●采血管编号后直立、按顺序插入试管架内。 ●嘱咐调查对象按住棉球 5 分钟以上, 抬起胳膊使之高于心脏水平 ; 将针头弃入金 属制容器桶, 一次性纸垫等放入垃圾桶。 (3) 血清采集 ●取静脉血3ml，室温放置2小时，待血液凝固、血块收缩后，3000rpm离心15分钟， 吸出血清备用，编号登记。 ●抗凝血样品采集：用注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管内，反复 SOP 2 版本号：第五版
尿液标本的收集、保存与处理 一、尿液标本收集 为保证尿液检查结果的准确性，必须正确留取标本。收集容器要求：①清洁、干燥、一次性使用，有较大开口便于收集；②避免阴道分泌物、月经血、粪便等污染；③无干扰化学物质（如表面活性剂、消毒剂）混入；④有明显标记的如病人姓名、病历号、收集日期等，并必须粘贴在容器上；⑤能收集足够尿液，最少12ml，最好超过50ml，如收集定时尿，容器应足够大，并加盖，必要时加防腐剂；⑥如需培养应在无菌条件下，用无菌容器收集中段尿液。 尿标本收集后应及时送检及检查，以免发生细菌繁殖、蛋白变性、细胞溶解等。尿标本也应避免强光照射，以免尿胆原等物质因光照分解或氧化而减少。 二、尿标本种类 按检查目的，常可采用下列标本： 1．晨尿即清晨起床后的第一次尿标本，为较浓缩和酸化的标本，血细胞、上皮细胞及管型等有形成分相对集中且保存得较好，也便于对比。适用于可疑或已知泌尿系疾病的动态观察及早期妊娠试验等。但由于晨尿在傍胱内停留时间过长易发生变化。因此有人推荐用清晨第二次尿标本检查来取代晨尿。 2．随机尿（随意一次尿）即留取任何时间的尿液，适用于门诊、急诊患者。本法留取尿液方便，但易受饮食、运动、用药等影响，可致使浓度或病理临界浓度的物质和有形成分漏检，也可能出现饮食性糖尿或药物如维生素C等的干扰。 3．餐后尿通常于午餐后2小时收集患者尿液，此标本对病理性糖尿和蛋白悄快活的检查出更为敏感，因餐后增加了负载，使已降低阈值的肾不能承受。此外由于餐后肝分泌旺盛，促进尿胆原的肠肝循环，而餐后机体出现的碱潮状态也有利于尿胆原的排出。因此，餐后尿适用于尿糖、尿蛋白、尿胆原等检查。 4．3h尿收集上午3小时尿液，测定尿液有形成分，如白细胞排出率等。 5．12h尿晚8时排空傍胱并弃去此次的尿液后，留取至次日晨8时夜尿，作为12小时尿有形成分计数，如Addis计数。 6．24h尿尿液中的一些溶质（肌酐、总蛋白质、糖、尿素、电解质及激素等）在一天的不同时间内其排泄浓度不同，为了准确定量，必须收集24小时尿液。于第一天晨8时排空膀胱，弃去此次尿液，再收集至次日晨8时全部尿液，用于化学分的定量。 7．其它包括中段尿、导尿、耻骨上膀胱穿刺尿等。后两种方法尽量不用，以免发生继发感染。尿标本收集的类型、分析项目、应用理由及注意见表5-1。
血液标本的采集和冻存 一、全血收集 请按照实际使用的收集方法，如注射器收集或真空收集管等，参考相应的厂商提供产品说明进行操作。采集好全血，将采集好的全血转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，可放入液氮。 二、血浆收集为获得血浆进行实验，应使用抗凝管采集全血，并尽快进行血浆分离：1000g离心10分钟，分离血浆和细胞组分。将采集好的血浆转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，可放入液氮。 注：血浆收集应使用抗凝管，抗凝剂可以用柠檬酸钠或EDTA等，但一定不要使用肝素抗凝，因为肝素对RNA实验有较大影响。 三、血清收集为获得血清进行实验，应使用凝血管采集全血，采血后两小时内分离血清。采血后轻轻倒转采血管混合4~5次，直立置于室温待血液完全凝固（一般约一小时），1000g离心10分钟，分离血清。将采集好的血清转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，可放入液氮。 四、血清、血浆和全血样本的保存和运输 → microRNA芯片检测血清、血浆或全血标本约需要1~2ml的量（即每份样品2~4管，每管3-5ml）。→在样品保存及转移的过程中，应避免反复冻融样品。 注：保存血清，血浆或者全血所使用的1.5 ml冻存管或离心管，操作中使用的枪头等必须高温灭菌，装好样品后管口需要以封口膜封好。 五、血细胞采集：因外周血成熟红细胞无细胞核，通常只采集白细胞（主要用于DNA检测），且需用红细胞裂解液裂解或低渗法并去除红细胞，避免其影响结果。（一）低渗法去除红细胞试验步骤： 1、取人肘静脉血5ml，EDTA抗凝，2500rpm离心10min。 2、小心吸取上层血浆，分装到3个0.5ml离心管中。 3、在血细胞中加入3倍体积的溶血液，摇匀，冰浴15min。 4、2500rpm离心10min，弃上清。 5、加入10ml溶血液，摇匀，冰浴15min。 6、3000rpm离心10min，弃上清。 7、倒置离心管，去掉残液。 8、得白细胞，－80C冻存。 试验要求：采血至分离白细胞之间隔时间在室温下放置不超过2h，4℃放置不超过5h，以防白细胞自溶。 （二）裂解液法去除红细胞方法： 1.新鲜抗凝血，离心弃去上清液； 2.取出4℃冰箱预冷的ELS裂解液，按1:6-10的比例向细胞沉淀中加
精心整理 : 系统逐个扫 并按检验项 然后 1.2、验证：进入各实验室的样本在进行操作前,工作人员应再次认真查对姓名,联号,住院号,病区床号,项目等对不符合要求者应作记录,并及时通知采样科室,正确及时地补采样,以免延误病人的检测结果报告,对书写不清楚的申请单,当事者要及时与病房联系(可电话),明确受检者姓名,住院号,性别,年龄,病区,床号和检验项目等。
1.3、转送：在查对过程中一旦发现有其他实验室(包括病理科)或本科各实验室的样本,要提高责任性,及时地转送(可电话通知)有关实验室(尤其是争论急诊项目)切勿延搁样本,延误检测,影响检验结果和报告时间,对人为造成的样本遗失,漏检和由之延误检测违反承诺限时报告引起病人纠纷和投诉,将追究当事者和当事实验室责任。 急诊标本及各病房零散标本：由采血室人员登记并转送相关实验室 1.4、外单位送检：外单位送检的样本,一律登记后,再转交各实验室检测,报告结果由检测者传真发 出或由服务台人员转发。 1.5 收集,对超时样本要求(急诊样本除外), 1.6 ,对采样 困难者要主动跟踪样本, 1.7,要随时登记和交班,以免漏检,遗失和 延误检验,,一律追究责任。对特殊样本或 ,所谓特殊样本是指难于采集的样本,以及特殊病人的样本一律实行"首接"(包括进修生和实习生,违者根据实际情况分别追查当事者或带教老师责任)一旦收到样本后,均须负其责任,不得以任何借口推托,及时和正确保管和转送样本到有关实验室或有关人员,同时作交班记录和双签名。 2、样品使用 2.1.将当天送来的标本，根据编号的基本原则，给当天的标本编好号，每个样本的每个检测项目对应一个唯一的编号。 2.2.每张单和对应的样品管上条码号标记相同。
实用帖｜血液样本的采集与保存 在脊椎动物中，外周血一直被认为是侵害性较小、富有价值的检测样本。在许多生物样本库中，由于血液样本的常规收集、处理及保存方法简便、成本低且富含可利用成分和生物分子，因此是进行多种项目分析的理想实验材料。然鹅，科研僧们历经千辛万苦最后发现获得的血液样本RNA降解了。。。。额，这就很惆怅了。 所以呢，在样本采集、处理及储存过程中必须格外注意，从根本上确保获得高质量的RNA。 今天小编和大家一起来聊一聊在进行RNA实验时血液样本如何进行收集与保存。 血液的组成 首先来熟悉一下血液的组成。 人类的血液由血浆和血细胞组成。其中血浆约占血液的55%，是水，糖，脂肪，蛋白质，钾盐和钙盐等的混合物。血细胞约占血液的45%，主要分为红细胞、白细胞和血小板。而哺乳动物成熟的红细胞和血小板是无核的。
血浆和血清 血浆是离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体，其中含有纤维蛋白原，不含游离的Ca2+，若向血浆中加入Ca2+，血浆会发生再凝固。 血清是离体的血液凝固之后，经血凝块聚缩释出的液体，其中已无纤维蛋白原，但含有游离的Ca2+，血清中少了很多的凝血因子但多了很多的凝血产物。
采血管的选择 采血管，大家都不陌生，去医院抽个血，一定会用到采血管，那么问题来鸟，这么多颜色的采血管，有什么区别呢？下面小编来给大家介绍一下采血管的分类及不同颜色试管帽代表的含义。 1.蓝色头盖管（含有柠檬酸钠抗凝剂的采血管） 2.黑色头盖管(含有 0.109mol/L 柠檬酸钠) 3.紫色头盖管(含有乙二胺四乙酸以及其盐的采血管) 4.绿色头盖管（肝素抗凝管） 5.灰色头盖管(含有草酸钾/氟化钠） 6.橘红色头盖管（促凝管） 7.金黄色头盖管（含有惰性分离胶及促凝剂的采血管）
临床检验标本采集、运输、保存操作规程 目录 第一章、体液标本的采集、运输、保存操作规程 一、尿液标本采集、运输、保存 二、阴道分泌物标本采集、运输 三、精液标本采集、运输、保存 四、粪便采集、运输、保存 第二章、血液一般检验的标本采集、运输、保存操作规程 一、未梢血标本采集 二、静脉血采集、运输、保存 第三章、生化检验标本采集、运输、保存操作规程 前言 在临床工作中，检验标本的分析结果是临床医生诊断疾病、制订治疗方案的重要依据，而标本采集及送检工作的合格与否直接影响检验结果的真实性，进而影响疾病的诊治工作。为了进一步提高检验结果的准确性和可靠性，除了要求检验科提高检验质量水平外，还要求临床医护人员正确采集标本。为确保标本的正确采集、运输和保存，检验科特编写了临床检验标本采集、运输、保存操作规程，要求医护人员严格按操作规程采集、运输和保存标本。 第一章体液标本的采集、运输、保存操作规程 一、尿液标本采集、运输、保存 （一）检查项目 1．尿液干化学测定：尿液比重、pH 值、尿胆原、胆红素、潜血、酮体、蛋白质、白细胞、亚硝酸盐、葡萄糖、抗坏血酸。 2．尿液有形成份检测：包括红细胞及白细胞形态等。
3．其它：尿HCG、尿液红细胞显微镜形态分析。 （二）标本采集 【容器及采样量】 门诊病人由检验科提供专用塑料尿杯，采样量20-30ml。住院病人使用清洁容器取尿，再将尿液倒入专用的试管内，量约5-10ml。24小时尿液收集于清洁容器中，如小的带盖的塑料桶。 【标本种类及适用人群或项目】 （1）晨尿 即清晨起床后的第一次尿标本，为较浓缩和酸化的标本，血细胞、上皮细胞及管型等有形成分相对集中且保存得较好。门诊患者可采集清晨第二次尿标本。适用：住院病人、可疑或已知泌尿系统疾病的动态观察及早期妊娠试验等。 （2）随机尿（随意一次尿） 即留取任何时间的尿液。本法留取方便，但易受饮食、运动、用药等影响，可使低浓度或病理临界浓度的物质和有形成分漏检，也可能出现饮食性糖尿或药物如维生素C等的干扰。适用：门诊和急诊病人。 （3）其他 包括留取中段尿（女病人易受阴道分泌物污染，应采集中段尿）、导尿、耻骨上膀胱穿刺尿等。 【注意事项】 （1）避免阴道分泌物、月经血、粪便等污染，女性病人应采集中段尿，尽量避免经期做尿常规检查； （2）避免干扰化学物质（如表面活性剂、消毒剂）混入； （3）住院病人送检的标本要标上病人姓名，门诊病人的标本和检验申请单放在指定的标本收集盘上。
检验标本采集要求 一、病人准备 1．病人状态 一般需在安静状态下采集标本，因运动能影响许多项目的测定结果。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少；丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响，如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高，有些恢复较慢，如ALT在停止运动1h后测定，其值仍可偏高30％～50％。 2．饮食 多数试验要求在采血前禁食12h，因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。 (1) 餐后血液中ALT、GLU、BNU、Na等均可升高，但空腹达24h以上，可出现低血糖，血中TG、游离甘油及脂肪酸可增高。 (2) 高脂餐后2～4h采血，多数人ALP含量增高，主要来自肠源性同工酶，且与血型有密切关系，O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。 (3) 高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加，但不影响肌酐含量。 (4) 高比例不饱脂肪酸食物，可减低胆固醇含量；香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。 (5) 含咖啡因饮料，可使血浆游离脂肪酸增加，并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。 食物如含有动物血液，可引起粪隐血假阳性。 (7) 饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加，长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高，甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。 吸烟：瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8％，而不吸烟者含量在1％以下。此外，儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高，血液学方面亦有变化，白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。 3．药物 药物对检验的影响非常复杂，在采样检查之前，以暂停各种药物为宜，如某种药物不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。 4．体位 体位影响血液循环，由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变，则细胞成分和大分子物质的改变较为明显，例如由卧位改为站位，血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高；Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的因素，在确立参考值时，应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异，故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。 5．时间 病人准备还应考虑病人的生物钟规律，特别是激素水平分析，如女性生殖激素与月经周期密切相关；胆固醇则在经前期最高，排卵时最低；纤维蛋白原在经前期最高，血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高；血浆蛋白在夜间降低；血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。 二、标本采集
病原微生物检验标本采集、运送操作规程正确的标本采集，运送，保存和处理对于微生物检验工作质量至关重要，为了准确检出病原菌，避免漏检与误诊，临床医护人员和实验室工作人员应掌握微生物标本的选择，采集，运送，保存及处理的一般原则。 一、标本采集的一般原则 1.早期采集 采集时间最好在病程早期，急性期，且必须在使用抗菌药物之前采集，确保病原菌的检出。 2.无菌操作 采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近或皮肤黏膜正常菌群的污染，使病原菌与正常菌群混淆，造成临床误诊。采集的标本应存放在无菌容器内，容器不能使用消毒剂处理，标本中也不能添加防腐剂，以免降低病原菌的检出。 3.适量的标本 标本量过少可能导致假阴性结果。 4.适当的采集方法 对于厌氧菌，需氧菌或兼性厌氧菌的采集方法是不同的，用于厌氧菌培养的标本应尽量用注射器采集抽取物，室温保存，不能冷藏和冷冻。 5.盛放标本的容器 采集标本应存放在无菌，防漏，应带有螺旋盖的容器内。 二、标本的运送 1.标本采集后立即送检，若有延迟也应在2小时内送到实验室，否则会影响病原菌的检出，一般性的细菌培养标本若需延迟送检时，应置于4度冰箱保存，且不能超过24小时。 2.临床标本最佳运送时间取决于标本的量，少量液体（小于1ml）或组织（小于1cm3）应在15~30分钟内送到实验室，较多量的标本置于运送培养基中可放12~24小时，厌氧培养标本原则上是床边接种，如延迟送检，需保存在厌氧运送培养基中，室温保存，不得超过24小时。 三、不同标本的采集，运送 （一）血液标本采集，运送
1.血培养指针征 当患者出现：发热（大于38度）或低温（小于36度），寒战，白细胞增多,皮肤黏膜出血，休克，多器官衰竭，血压降低，c反应蛋白升高及呼吸加快，血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等，具备上述一种或几种体征时，临床怀疑菌血症应采集血液标本进行血培养，对入院危重感染患者应在未使用抗菌药物治疗前，及时做血培养。 2.对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用抗菌药物之前，应立即采集血培养标本。必须同时或间隔短时间内采集２套以上血培养标本。成年患者：推荐同时采集２－３套（不同部位）血培养标本（即双瓶双臂同时采集血培养标本），采血量每瓶不少于5ml;婴幼儿患者：推荐同时采集２次（不同部位）血培养标本,采血量每瓶不少于2ml。（少于病人总血容量的1%）.在采取血培养后的2—5天内，无需重复采取血培养。两个例外：细菌性心内膜炎和金黄色葡萄球菌菌血症。? 3.血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。 检出率与采血量成比例增长，每增加1ml的血液，病原菌的检出率就会相应增加。儿童患者血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人。采用一对（需氧瓶+厌氧瓶）组合，比采用二个需氧瓶的组合可检出更多的葡萄球菌、肠杆菌科细菌和厌氧菌。采血量不能满足推荐的量时，应首先满足需氧瓶的需要。? 推荐从外周静脉采集血液标本,不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判读。 4.血标本采集的注意事项 在采血之前，血培养瓶的橡皮塞需使用75%酒精消毒并干燥。然后再进行穿刺部位的皮肤消毒。严格按照“酒精、含碘消毒剂、酒精”的消毒步骤操作，并等待足够的消毒时间。严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手接触静脉，除非带有无菌手套.不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头;采集后的血培养瓶应在1小时之内送往实验室,血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻。 (二)痰培养标本采集，运送 1.痰培养指征 上呼吸道感染包括咽炎，喉炎，会咽炎等都可采集鼻，鼻咽，口咽拭子标本培养。下呼吸道感染：凡是咳嗽，咳痰，痰呈脓性，粘稠或血性等都可采集痰标本。
生物化学检验室标本处理与保存 一、ISO15189相关条款： 5.4 检验前程序 5.4.5 原始样品应可追溯到具体的个体（通常由检验申请表）。实验室不应接受或处理缺乏正确标识的原始样品。 若原始样品识别方式不确定或原始样品中的被分析物不稳定（如脑脊液、活检标本等），及原始样品不可替代或很关键，实验室可选择先处理样品，待申请医师或采集原始样品者承担识别和接受样品的责任和/或提供适当的信息后再发布结果。这种情况下，负责识别原始样品者宜在申请表上签字或可被追溯至申请表。无论何种原因，若在无法满足上述要求的情况下进行了检验，宜在报告上明确责任人。留待进一步检验（如病毒抗体，与临床症状有关的代谢产物）的样品也宜同样标识。 5.4.6 实验室应监控样品运送到实验室的过程，样品运送应符合如下要求： a) 根据申请检验项目的性质和实验室相关规定在一定时间内运达； b) 在原始样品采集手册规定的温度范围内运送并使用指定的保存剂以保证样品的完整性； c) 应以确保对运送者、公众及接收实验室安全的方式运送，并应遵守国家、区域和地方法规的要求。 5.4.7 应在接收记录簿、工作记录单、计算机或其他类似系统中对收到的所有原始样品进行记录。应记录收到样品的日期和时间，同时应记录样品接收者的标识。 5.4.8 应制定有关接受或拒收原始样品的标准并文件化。如果接受了不合格原始样品，应在最终报告中说明问题的性质，如果适用，在解释结果时也应说明。 5.4.9 实验室应定期评审静脉穿刺取血（及取其他样品如脑脊液）所需的样品量，以保证采样量既不会不足也不会过多。 5.4.10 被授权者应对申请和样品系统地评审，并决定所做检验项目及所用检验方法。 5.4.11 如适用，实验室应对接收、标记、处理和报告其所收到的有特殊紧急标记的原始样品的程序文件化。程序应包括对申请表和原始样品上所有特殊标记的详细说明、原始样品送达实验室检验区的机制、应用的所有快速处理模式和所有应遵循的特殊报告标准。 5.4.12 取自原始样品的部分样品应可追溯至最初的原始样品。 5.4.13 实验室应有针对口头申请检验的书面政策。 5.4.14 样品应于规定的一定时间内在保证其性状稳定的条件下保存，以能在出具结果报告后复检或做附加检验。 二、程序文件 JY/CX/022 样本管理程序 【标本的接收和拒收】 4.6 合格标本 4.6.1 合格标本条件包括但不限于以下方面：①检验申请明确，内容完整：检验申请必须符合JY/CX/020《检验申请单管理程序》要求，同时必须有采样者签名。②标识清楚正确：有双标识及采样时间；标识粘贴端正；标本标识内容与申请单符合。③标本送达时间：采样后在规定时间内送检，采样后必须立即送检的常规项目：血氨、血气分析、乳酸以及各种细菌培养；采样后0.5小时内送检的常规项目：血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、真菌、疟原虫检查等。
微生物标本采集、送检及处理原则 一、标本采集的一般原则： 1、病程早期、急性期或症状典型时，使用抗生素前。 2、无菌采集应无污染，严格进行无菌操作。 3、根据目的菌的特性用不同的方法采集适量标本，采集量不应过少。 4、注意在不同病程采集不同部位标本。 5、采集标本时要防止传播和自身感染。 二、标本的处理： 1、标本保存在4℃环境中，在2h之内送检。脑脊液则要在25 ℃保存，用于细菌培养的标本保存时间不应超过24h。对环境敏感的细菌应保温并立即送检。 2、标本中可能含有致病菌，必须注意安全防护。切勿污染环境。对于烈性传染病标本运送时更要由专人运送，严格按规定包装。 3、厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送。 Ⅰ血液及骨髓标本： 血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血症的基本方法。如从患者血液中检出细菌，一般应视为病原菌。 常见的病原菌主要有金黄色或表皮葡萄球菌、链球菌（A、B群、肺炎链球菌等）、肠球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、伤
寒及副伤寒沙门菌和厌氧菌等。 1、采血时间及次数 2、抽血部位及抽血量 3、报告方式：培养5d无菌生长者报告“培养5d无菌生长”。 查见细菌报告菌名和药敏结果。 4、菌血症、败血症的诊断标准：1）两次培养均出现同一种细菌（可排除污染）； 2）发病星期后血中抗体滴度上升。 Ⅱ脑脊液标本： 脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的诊断有重要价值。正常人的脑脊液是无菌的，检出细菌提示有细菌性（急性化脓性、结核性等）脑膜炎。 常见的病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、链球菌（A、B群和肺炎链球菌）、葡萄球菌、产单核细胞李斯特菌、结核分枝杆菌等。 1、涂片检查： (1) 一般细菌涂片检查：例如：革兰阴性、凹面相对的球菌，可能是脑膜炎奈瑟菌；链状排列的革兰阳性球菌；长丝状等多形态性的革兰阴性杆菌，可能是流感嗜血杆菌。 (2)结核分枝杆菌涂片检查 (3)新生隐球菌涂片检查
标本采集、送检、运送、接收、处理、保存和销毁 规程 1、目的 保证标本采集到贮存过程符合本实验室检测及法律法规的要求,保证标本质量。 2、适用范围 本站血液检测标本、检测留样标本及临床送检标本。 3、职责 采血人员或相关工作人员负责标本的采集、送检、运送和交接;血库工作人员负责血液检测样本的临时接收和暂存;检验人员负责标本的接收、处理、保存和销毁;办公室负责组织检验科业务人员对标本采集人员进行相关培训。 4、作业步骤 4.1样本采集要求: 4.1.1:知情同意:标本采集应征得献血者知情同意,内容包括:告知采集(留取)标本量,以及用途(仅用于本站血液检测)。 4.1.2:采集: a.初筛检测样本:采集前严格核对献血者和登记表,抽取1-2ml 的献血者血液于含饱和EDTA-Na2 /K2抗凝剂50ul的普通塑料试管中或含有抗凝剂的真空管中。贴好与献血者登记表一致的献血序列码。 b.献血后血液检测样本:
(1)留取要求:献血者献血后采集人员从血袋/留样袋中留取双份 血样用于实验室的一检和二检,两支血样试管,一支为含分离胶的促 凝真空管(黄盖),应先留取(不能混入血袋中保养液),另一支为EDTAK2抗凝真空管(紫盖),每支试管留取3-5ml血液,留取后立即轻轻上下颠倒至少3次与抗凝剂/促凝剂充分混匀,贴上与献血登记表、血袋标识条码一致校验码为07的献血序列码。 (2)序列码粘贴要求:序列码粘贴不歪斜、无褶皱,沿负压管盖下竖直粘贴,血型标识向上,条码清晰; (3)校对要求:一次只对一袋血液和同源样本进行贴签留样;所留 标本必须按规程进行操作,并经过Spring采血管理模块对采血袋、登记表和标本管三个序列号一致后方可进入下一流程。 (4)临时储存:血液标本留取结束后及时放在2-10℃环境中保存。 c.临床送检标本要求: (1)疑难血型鉴定及交叉配血:使用一次性真空采血管采集受检者血样6-10ml,一支EDTA-K2抗凝,另一支未抗凝,每支3-5ml。标识清楚,贴有与申请单一致的序列码,申请单注明被检者姓名、性别、年龄、临床诊断,病史及检测项目等信息,48h内采集。 (2)新生儿溶血病检查样本:使用一次性真空采血管采集母亲和新生儿血样各1-2ml,EDTA-K2抗凝(紫盖)。标识清楚,贴有与申请单一致的序列码,申请单注明被检者姓名、性别、年龄、临床印象及住院号床号等信息。于4℃保存72小时内检测。 4.2运输要求:
标本采集、运送、保存成序 1.目的 规范标本采集程序，保证实验室检测前标本质量。 2. 范围 微生物标本。 3. 职责 3.1 医护人员和检验人员负责指导病人如何正确留取标本。 3.2 标本运输人员负责收取标本和运输标本至微生物室。 4. 程序 4.1 采集标本前，采样人员根据检验申请单检验项目的要求，确认采样计划并进行适当的准备工作，包括核对遗嘱、打印条形码、选择合适的标本容器、粘贴条形码及指导病人做好采样前的准备工作等。 4.2 认真核对病人、标本容器和检验申请单是否一致，严防差错。 4.3 标本送到微生物室，标本运输人员必须与微生物室标本接收人员对标本进行核收登记并签名 4.4 所有标本必须记录采样时间并立即送检，一般不得超过2h. 5 采集方法 5.1 血液及骨髓 5.1.1 血液 5.1.1.1采血时间：①在抗菌药物治疗前；②尽可能在患者寒战开始时、发热高峰前30-60分钟内采血；③如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养；④同时或短时间内完成几套血
培养采集，除非怀疑存在持续性菌血症时（如亚急性感染性心内膜炎1-2小时从不同部位采集3套标本） 5.1.1.2采血量：成人一次采血5～10ml,儿童2～5 ml婴幼儿为1～2ml。（附注：儿童的采血量不能超过其总血容量的1%）。 5.1.1.3采血方法：①成年病人，推荐同时在不同部位采集2～3套（每套包括一瓶需氧瓶、一瓶厌氧瓶）；对于感染性心内膜炎和真菌血症则应多次采集；对于婴幼儿病人，推荐同时在不同部位采集2～3瓶。因为儿童患者很少见厌氧菌感染，因此推荐仅使用需氧瓶而不常规推荐同时做厌氧培养。②采血量充足时，应先注入厌氧瓶，后注入需氧瓶；采血量不足时，应先注入需氧瓶，后注入厌氧瓶。 5.1.2 骨髓标本用骨髓穿刺针从髂骨采集。 5.1.3 标本保存：采集标本后立即送到实验室，不能及时送检可置于室温，切勿放入冰箱。冬季血培养瓶在送检过程中应采取一定的保暖措施。 5.2 脑脊液标本：由临床医师以无菌要求做腰椎穿刺，抽取脑脊液2～3ml,盛于无菌容器中送检。脑膜炎奈瑟菌离体后能产生自酶，会迅速自溶，肺炎链球菌及流感嗜血杆菌离体后也易死亡，因此，脑脊液无论图片或培养，必须于采集后立即送检。 5.3 上呼吸道标本 5.3.1 鼻咽标本：将鼻咽拭子缓缓地伸进鼻孔直至鼻咽喉部（注意：不可用力），轻轻转动，并于该深度停留20～30s,然后迅速地抽出（注意：避免受口或咽部中细菌的污染）。
血液标本的收集和保存方法 说明：一般建议用新鲜的血液标本进行实验。如果标本已经保存较长时间，请联系康成公司技术部，以确认样本是否适合进行实验。 一、 全血收集 请按照实际使用的收集方法，如注射器收集或真空收集管等，参考相应的厂商提供产品说明进行操作。采集好全血，将采集好的全血转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，请放入液氮。 二、 血浆收集 为获得血浆进行实验，应使用抗凝管采集全血，并尽快进行血浆分离：1000g离心10分钟，分离血浆和细胞组分。将采集好的血浆转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，请放入液氮。 图片来源：Exiqon ‘ Quantification of MicroRNA expression in Blood Plasma/Serum Samples’ 注意：血浆收集应使用抗凝管，抗凝剂可以用柠檬酸钠或EDTA等，但一定不要使用肝素抗凝，因为肝素对RNA实验有较大影响 三、 血清收集 为获得血清进行实验，应使用凝血管采集全血，采血后两小时内分离血清。采血后轻轻倒转采血管混合4~5次，直立置于室温待血液完全凝固（一般约一小时），1000g离心10分钟，分离血清。将采集好的血清转移至单独的冻存管，按照每400~500ul/管分装好。短期保存，可放入- 20°C 或- 70°C冰箱。长期保存，请放入液氮。 四、 血清、血浆和全血样本的保存和运输 → microRNA芯片检测血清、血浆或全血标本约需要1~2ml的量（即每份样品2~4管）。 →在样品保存及转移的过程中，应避免反复冻融样品。 →运输过程必须使用足量干冰保证始终低温。干冰量至少为8公斤（足量），且运输用厚壁泡沫箱，且需用封箱带密封。 注： 保存血清，血浆或者全血所使用的1.5 ml冻存管或离心管，操作中使用的枪头等必须高温灭菌，装好样品后管口需要以封口膜封好。
微生物标本采集及保存要求 一、总则：用于培养的标本在收集时应注意严格无菌操作和及时送检，检测后标本应妥善保存。 二、临床标本的采集 （一）下呼吸道分泌物（痰液） 令患者早上起床后用清水濑口，不要刷牙，立即从下部呼吸道咳出第一口痰，吐在无菌塑料痰盒中，及时送检。 （二）、尿液（中段尿） 护理人员协助采取中段尿约3ml入无菌试管中，及时送检。 （三）、粪便：取有粘液、脓血部分的粪便置玻璃大便专用管中，如为稀水便，可直接收集于玻璃管中，及时送检。 （四）、眼、耳、鼻、喉拭子：将棉拭子沾取少许无菌生理盐水（如沾取的太多，可在无菌生理盐水瓶壁上挤去多余的水份），然后采取可疑部位的分泌物，倒悬于无菌试管内,及时送检。 （五）、脓液：用沾有生理盐水的棉拭子沾取脓液，要尽量多取一些，然后将棉拭置于无菌试管中，及时送检。 （六）、： 1、凡怀疑菌血症和败血病的患者，采血培养时，应尽量在未使用抗菌素前采血，如已使用抗菌素，应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血，应在病人第二次使用抗菌素之前采集血培养标本。当然在病人发热或寒颤时采集也可。 2、成人每次采血5—10ml，小儿采血2—3ml； 3、严格消毒病人采血部位和血培养瓶口，抽一定量血液后，无菌注入血培养瓶内，轻轻摇匀， 4、从抽血到接种入瓶，动作要快，防止血液凝固，同时要及时送检。 （七）、穿刺液：胸腹水、心包液、关节腔液、鞘膜积液： 严格无菌抽取后，注入含肝素抗凝的无菌试管中，轻轻颠倒试管10余次，使肝素与穿刺液混匀达到抗凝的目的，或直接无菌注入血培养瓶内及时送检。 （八）、胆汁：由专科医生以无菌方法取引流液10ml注入无菌试管。 （九）、脑脊液：以无菌方法取脑脊液3-5ml，置无菌试管内，常温保存送检，如只做培养可直接无菌注入血培养瓶内，及时送检。 （十）、生殖器官标本：阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医师采集，收集于无菌试管内送检。如疑为淋病奈瑟菌感染，做培养检查时，采集的标本应床旁接种并及时放入孵箱培养。（十一）、烧伤标本：以无菌棉拭子直接采取多个部位创面的脓汁分泌物放入无菌试管中. （十二）、支原体（解脲、人型）培养+药敏的标本采集 1、支原体对干、热抵抗力差，标本采集后应尽快接种支原体运送培养基送检。 2、男性：用细的无菌棉拭子沾取无菌盐水少许深入尿道口内2.5-3cm。 三、临床标本的保存 细菌室标本原则上要求及时送检、及时处理，不得保存。
一、操作目的 本程序用于有效地保障临床输血相容性检验标本的正确采集、接收、保存及销毁，使标本中的待检成分尽可能不受影响，保证临床输血相容性试验结果准确可靠。 二、适用范围 ABO血型鉴定，RH血型鉴定，红细胞不规则抗体筛查，特殊介质交叉配血（卡氏配血法）实验的血液标本采集。 三、操作步骤 （一）申请单的填写 1. 临床医生须熟知采供血机构所提供的血液及其成分的规格、性质、适应症，剂量及用法。应完整填写输血申请单各项内容，包括患者姓名、性别、出生日期/年龄、科别、床号、门诊/住院号、申请序号、标本类型、临床诊断或主要症状、孕产史、输血史、预定输血日期、预定输血成分、预定输血量、ABO血型、RH血型、血红蛋白值、HCT、血小板、采集标本者、采集标本日期和时间、送标本者、送标本时间、接收标本日期和时间及特殊说明，如应用的药物等。 2. 临床医护人员必须根据检验申请单所需检验项目，做好患者准备和标本采集。 3. 输血科人员必须等收到临床医生书面或电子检验申请单时，才可接收标本进行检验。特殊情况，在临床医生电话说明下，可在收到检验申请单之前先接受标本进行检验。 4. 输血申请单必须清洁、完整，不得被标本污染，重要信息不得涂改。
（二）患者准备 1. 临床医护人员必须对患者讲清楚输血目的，安慰患者，努力减轻患者的疑虑和恐惧心理。标本采集前应征得受血者知情同意。 2. 常见的引起抗球蛋白试验阳性的药物有: ①奎尼丁可与患者血清中抗(IgM)及补体形成免疫复合物附着于红细胞表面；②大剂量青霉素与血清抗体(IgG)结合附着于红细胞表面；③头孢菌素与抗体（(IgG、IgA或其他非特异性抗体)反应，使红细胞膜变形，但不发生溶血；④α-甲基多巴所致自身免疫性反应。可引起抗球蛋白试验阳性的药物的有：解热镇痛剂、抗生素（头孢菌素、硫胺、四环素、链霉素、异烟肼）、心血管药物（普鲁卡因酰胺、肼苯哒嗪、双氢克尿噻、甲基多巴），其他如氯丙嗪。 3. 交叉配血用血标本的采集时，前次输血3-14天，本次交叉配血标本应在输血前24h内采集；前次输血15天以上，本次配血标本应在72h内采集；长期重复性输血患者不要求每天采集血标本，但72h至少进行一次红细胞不规则抗体筛选。 （三）静脉血液标本采集的技术要点 1. 准备好标本采集所用的容器（枸橼酸钠抗凝真空管-蓝色帽管）、器材等，应在容器上注明：患者姓名、住院号等信息。注意：标签粘贴不可将标本完全遮盖，应在容器上保留观察窗，以便检验人员对标本是否合格进行判断。 2. 采血时患者应松弛，环境温暖，防止静脉痉挛，止血带的压力应尽可能小，止血带压迫时间不应超过2min，否则可造成局部血液的
血液标本的采集方法及注意事项 生化检验用的血液标本可来自于静脉、动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本，静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采血主要用于儿童，血气分析多使用动脉血。 （一）静脉采血法 1.采血步骤 采血前要核对病人姓名、年龄、性别、编号及检验项目等，按试验项目要求，准备好相应的容器，如空白试管、抗凝管或促凝管等。病人应取坐位或卧位，采血部位通常是前臂肘窝的正中静脉。若用普通采血法，采血后应取下针头，将血液沿管壁缓慢注入试管内。 2.注意事项 （1）很多生化成分受膳食影响，因此，采血前要确认病人是否空腹。 （2）避免充血和血液浓缩：采血时应动作迅速，尽可能缩短止血带使用时间。用止血带压迫时间最好不超过半分钟，否则将使生化结果升高或下降。 （3）若病人正在进行静脉输液，不宜在输液同侧手臂采血；若女性病人做了乳腺切除术，应在手术对侧手臂采血。 （4）采血的体位：体位改变可引起一系列的生理变化，使血液中的许多指标发生改变。一般采取直立位采血，其二标本的测定值比卧位高5％～15％。因此，采血时要注意保持正确的体位（坐位或卧位），以及体位的一致性。 （5）采血时只能向外抽，决不能向静脉内推，以免注入空气，形成气栓而造成严重后果。 （6）防止溶血：造成溶血的因素有注射器和容器不干燥、不清洁；穿刺不顺利，组织损伤过多；淤血时间过长；抽血速度太快；血液注入容器时未取下针头或注入速度过快产生大量泡沫；震荡过于剧烈等。若用普通注射器采血后，未取针头直接将血注入真空管内，也易造成溶血。体内溶血属合格标本，但应在报告单上注明。 （二）动脉采血法 肱动脉、股动脉、桡动脉以及其它任何部位的动脉都可以作为采血点，但多选择肱动脉和桡动脉。在摸到明显搏动处，按常规消毒，左手固定搏动处，右手持注射器，针头成60°角刺入，血液将自动进入注射器内。 （三）真空采血法 双向针一端插入真空试管内，另一端在持针器的帮助下刺入静脉，血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血，避免了血液外溢引起的污染，并有利于标本的转运和保存。标准真空采血管采用国际通用的头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和试验用途。
临床细菌检验标本的采集、运送、保存和处理 正确的标本采集、运送、保存和处理对于保证临床细菌室的工作质量非常重要，应予高度重视。实验室有责任将标本选择（包括时间和解剖部位）、收集、保管、运送、接受和安全等 关键性信息，用户里手册的形式提供给各临床部门参考。 一、标本管理的安全警示 1．所有标本的采集、运送和处理应在无菌操作，防止污染的原则下认真进行。 2．已采集原始标本都应置于防漏、密封的无菌容器中运送。 3．带针头的注射器运送标本时用无菌试管或防护装置套住注射针，再置于防漏塑料袋中运送至检验科。 4．采集足够量标本，材料不足可能导致假阴性。 5．每份标本都应标记患者姓名、送检号码、标本来源、具体部位、日期、时间及相关临床信息。 6．常规性细菌学检验的标本，采集后不能超过１小时送至检验科，4℃保存也不能超过24小时，怀疑厌氧菌感染的标本应在半小时内送至检验科（不能及时运送组织标本必须在 厌氧环境中25℃不超过24小时）。 7．脑脊髓液、生殖道、眼睛、内耳标本应立即送检，绝不可冷藏。 二、标本的处理和要求 1．血液和骨髓： 1）急性脑膜炎、骨髓炎、关节炎、细菌性肺炎、肾盂肾炎发热患者，应在抗生素治疗或更换前，从不同部位采集血液标本，做2次血液培养，分别接种于各种培养瓶中 立即送检置于孵箱内培养 2）疑似心内膜炎患者：急性病例在抗生素治疗或更换前1—2小时，从不同部位采集血液标本，做3次血液培养 3）亚急性病例：第一天24小时内，相隔1小时连续采集3次血液做培养，若24—48小时全部阴性，再采集2—3次血液做培养 4）若已经抗生素治疗患者，连续3天，每天取2次血液做培养 5）严格无菌技术采集血液血培养瓶后立即送检，切不可放冰箱暂存。 2．脑脊液： 脑脊液采集后，置于无菌试管中，15分钟内送检，绝不可冷藏。每种检验最小需 要量：细菌培养≥1ml,真菌≥2ml,抗酸杆菌≥2ml. 3．尿液： 1）中段尿采集：清洁外阴及尿道口周围，自然排尿，让尿流不间断，截留中段尿，，置于无菌尿杯中立即送检。尿量不少于1ml. 2）直接插导管采尿：一般插入导管后先让尿流弃15ml再留取培养标本。尽量不采用此法，极易将尿道细菌丛进入膀胱增加医源性感染危险。 3）滞留导管采集尿：用75%酒精消毒导管口，用针筒抽取5—10ml尿置于无菌容器中立即送检，滞留导管会使膀胱带有细菌，尽可能不采用。 4）尿液采集后2小时内必须送检，立即处理。规定每日一次。 5）若同一份标本检到3种以上不同细菌则认为标本污染。一般认为革兰氏阴性杆菌菌落计数大于105cfu/ml,革兰氏阳性球菌菌落计数大于104cfu/ml,方有诊断意义。 4．痰液： 1）先用冷开水漱口清洗咽喉，用力咳出痰液置于无菌容器中立即送检，2小时内接种。 2）符合要求的痰液应在低倍镜视野中鳞状上皮≤10个，白细胞≥25个。
临床常见的标本有血清（浆）、全血、分泌物、棉拭子、脓液、体液、新鲜组织、石蜡切片等，这些临床标本的处理和保存方法各有不同。 临床标本的处理 血清（浆）标本 一些病原体，如乙肝病毒（HBV）、丙肝病毒（HCV）、人类免疫缺陷病毒（HIV）等的PCR检测常采用血清或血浆标本。 HBV： 标本通常由医护人员采集，应注意避免溶血，如为血浆标本注意抗凝剂的选择，一般用EDTA-Na2或枸橼酸纳，不可使用肝素。标本为全血时，及时分离出血浆，提取病毒DNA进行检测。 HCV： 检测RNA病毒。由于RNA极易降解，标本的制备和保存方式往往可以影响测定结果。若用血浆标本，应使用EDTA抗凝。严禁使用肝素，因其对PCR扩增有抑制作用,且无法在核酸提取过程中去除。抗凝后6小时内分离血浆。如用血清标本，则应尽快（2小时内）分离血清进行检测，或-20oC保存。 全血标本 通常用来提取外周血单个核细胞核酸： 如基因组DN A、线粒体DN A、总RNA等。 抗凝剂： 一般使用EDTA-Na 2、枸橼酸xx，不使用肝素。
1）加适量的红细胞裂解液（破膜液），裂解全血中的红细胞。 2）再加适量的细胞核裂液（破核液），裂解白细胞中的细胞核，使核内DNA释放出来。 3）然后再加SDS（十二烷基硫酸钠）等去污剂，溶解脂蛋白，解聚核蛋白。 SDS可与蛋白质结成复合物，使蛋白质变性沉淀，但SDS在以后的核酸提取过程中必须除去。 痰标本 痰属于分泌物，临床上常用作结核杆菌DNA测定样本，由于痰标本中含大量粘蛋白和杂质，故在核酸提取时，一定要对标本进行前处理，即用4%NaOH 液化，去除粘蛋白，然后用煮沸或蛋白酶、酚/氯仿等经典法提取DNA。 具体方法： 用无菌平皿取患者肺深部咳出的痰液1-3ml，↓加入4倍体积4%NaOH，摇匀，室温下放置30分钟左右液化↓取 1.5ml EP管，加 0.5ml液化痰液，再加 0.5ml 4%NaOH室温放10分钟↓ 12000 rpm，离心15分钟↓弃上清，加无菌生理盐水1 ml，混匀，12000rpm离心5分钟↓弃上清，沉淀物用于DNA提取 棉拭子 用PCR方法检测性病病原体时（衣原体、支原体、淋球菌、梅毒螺旋体、人乳头状瘤病毒等），临床标本一般为棉拭子。标本取材是关键，衣原体等病原体感染上皮细胞，因此取材一定要取到细胞。