?????????????????
????????
留置针?于血管平行但高于穿刺点的位置固定成“?”
字型，可使尾部穿刺点避免因活动后导致血液回流．影响 到留置针的尾部，再次输液、静脉注射或抽血前，只需用 碘酒酒精消毒肝素帽端，再接输液器或注射器即可，形成 一密闭系统。
有顾虑。尤其?组法封管后，套管腔内有回血现象，会使患 者惊慌不安，提出终止置管要求。?组的双重固定脉冲式 正压封管技术恰恰可以遏制回血现象，降低患者由于视 觉刺激而造成对心理上的不良影响，让患者能够放心地 接受治疗。回血现象被阻止，使体内血液无法向体外导管 腔中回溢，不致形成微血凝块阻塞套管，延长了留置时
间?
大大减少了护理工作量。既减少了一次性物品的消 耗，又减少了血源性污染?为患者节约了费用。 结果
回血：?组 例次，?组?例次；静脉炎：?组?例，?组? 例；堵管?组?例，?组?例；病人因不适要求拔管：?组? 例，?组?例。
?减少静脉炎发生??由于老年病人皮肤逐渐失去弹 性，脂肪肌肉层变薄皮下组织松弛，对套管的包裹作用降
低。留置套管反复滑动，在置管期间又会给患者带来日常 活动的不便，更衣、睡眠、洗漱、沐浴时无意中碰撞、牵拉、 磨擦等刺激，均会增加发生机械性血栓性静脉炎的机会，
导致留置时间缩短。应用?组双重固定法，对套管起到了 保护的作用，降低了体外导管与穿刺部位摩擦移动的机
率，减少了病人活动时对静脉内膜的机械性损伤，起到了 保护血管安全留置的作用，静脉炎发生率明显减少，延长 了套管针的留置时间。
讨论
?观察?、?两组病人对留置套管针的反应??主要有回
血、感觉不适要求拔管、静脉炎、堵管。通过比较认为上述 ?项是导致留置时间有差别的主要因素。必须终止置管的 因素则是要求拔管、静脉炎、堵管问题。而?组留置套管针 期间出现回血现象（
例次），不是直接终止置管因素。 ?比较??由于?组采用一次正压封管固定法，使长约
??的套管腔与静脉腔相通。当静脉压升高时，血液自然 回流至套管腔内，形成血液淤滞。老年人血管弹性回缩已 有退行性变，血液多呈高黏滞性，即使套管腔内存有肝素 化溶液，由于黏性淤滞的血液长时间在管腔内聚集，血液 比例过高，抗凝剂相对不足，血浆中出现微凝血块的可能
?留置时间??为了防止药液长期刺激血管造成化学
性静脉炎和小的血凝块进入血管引起堵塞，留置天数最 好不要超过?。置管期间应保持穿刺局部清洁、干燥、密 ［?］
性增加 ［?］ ，容易形成小血栓。套管腔内液体黏稠流通不
闭的固定环境。
【参考文献】
畅，导致堵管，使留置时间缩短。相反，?组采用双重固定 脉冲式正压封管法，无形中减少了套管腔与静脉腔相通 的长度，阻断了血液向延长管根部以下回流的可能。?组 徐竹梅，朱学莲?静脉推药时避免气泡进入头皮针的
方法??实用护理杂志，??，?（?）：? 刘维虹?静脉采血检验结果的影响及控制??中华护
理杂志，??，?（?）：???? 在脉冲式封管后，套管顶端距针翼约
处腔内已呈正
压，当再次推注肝素溶液，延长管至?型肝素帽尾部，即形
成正压下完全死腔的封闭状态。次日打开套管针小夹时， 套管腔内肝素溶液为相对高压状况，使液体畅通无阻。
?优点??老年人由于年龄特点，活动能力差、知识认 知层次低，对留置套管针这一换代技术接受得比较慢，易
吴莹，王子敬，齐长萍，等．无针密闭输液系统在临床 的应用 ．现代护理，??，??：． 戚虹?封闭式留置针在头皮静脉输液中的效果观察 ??护理学杂志，??，?（?）：???
（收稿日期：?????）
（技术方法栏目编辑：苏桂兰）
综述讲座
高钾血症实验动物模型的制备及其应用的进展
董雅洁，卢锴锋，王经纬
（承德医学院，河北承德????）
【关键词】高钾血症；动物模型；应用进展
【中图分类号】?????【文献标识码】
【文章编号】 （??）?????
?????????????????
????????
血清钾浓度的正常范围为 ，当血清
有个体差异，有的动物需注入较多的氯化钾才出现异常 心电图改变，遇到这种情况时，应适当调整注入氯化钾 的浓度和间隔时间，并在心电图出现明显的特征性的异 常改变后，立即停止注射。
钾浓度超过 时称高钾血症。高钾血症是临床 上多种疾病所并发的一种常见病理生理过程，是最易危 及生命的水、电解质紊乱性疾病之一，在临床上属于急 症范畴。高钾血症对机体的影响主要表现为膜电位异常 引发的一系列障碍及酸碱平衡异常，尤其是对心肌的毒 性作用极强，可发生致命性的心室颤动和心脏骤停。因 此，预防高钾血症的发生和采取有效的处理方法一直是 病理生理学研究的热点问题之一。
?评价??该方法简便、准确，为进一步研究高钾血 症，更新诊断技术，开拓新的治疗途径，提供了客观、理 想的动物模型。经耳缘静脉缓慢推注氯化钾溶液后，使 细胞外液中钾浓度急剧升高，心电图出现高尖?波，?波
低平、增宽， 波群低压变宽，室扑或室颤等典型的高
一旦发生高钾血症，预后极差，需要紧急处理。但高 钾血症临床症状常无特异性，易被原发疾病所掩盖，因 钾血症心电图改变。此模型持久、稳定、客观，与人类急 性高钾血症的病理生理过程相比有一致性。但因钾离子 对心肌的毒性作用不仅受到注入钾离子的浓度、剂量的
影响，还受到注入钾离子的速度的影响，当血钾浓度上 升过快时，心肌细胞兴奋性迅速降低，可导致心脏停搏，
动物死亡；而注入钾离子速度过慢，典型的心电图变化 则不易出现，难以把握高钾血症的病理过程。因在复制 高钾血症实验模型时，耳缘静脉注入钾离子的剂量和速 度较难控制，实验的难度加大，是本模型复制方法的不 足之处。 而早期发现尤为重要 。最简便、最有效、最快捷的检 查方法就是心电图检查，因为往往在临床症状表现不明
显时，心电图已出现显著改变，其中?波高尖最早出现， 可并存?波低平、 延长、 波增宽、?段压低及心
律紊乱图形改变。一般而言，心电图异常发生率随血钾
浓度的升高而递增，改变的程度也随之加重。不同程度 的高血钾在心电图上有不同的特征表现，所以，心电图 检查是临床诊断高钾血症的最具重要价值的检查方法， 且具有对假性高血钾的判别作用，比血清钾的测定更为 犬高钾血症动物模型的建立
准确、便捷、无创，且可重复监测 ? 。所以，掌握心电图的高 常用的制备犬高钾血症动物模型的方法是采用静 脉滴注或推注氯化钾溶液。
钾血症特征，结合临床其它症状的改变迅速做出判断， 对临床诊断和治疗具有十分重要的意义。
在高钾血症的研究中，如何复制动物实验模型是一 基本环节，通过开展高钾血症综合性实验，建立理想的 动物模型，观察高钾血症时动物的心电图变化的特征， 对于阐明该病的病因、病变发展规律及有效的防治有重 要意义。本文就几种常用的实验性高钾血症动物模型， 从模型的制作方法、心电图特征及有关机制等方面作一 综述。
?模型的建立??用?戊巴比妥钠溶液（ ）经 前肢头静脉或后肢小隐静脉缓慢推注，全身麻醉后仰卧 位固定于手术台上，行气管插管及一侧股静脉插管，并 与输液装置相连，缓慢输入生理盐水 滴?分?，以维 持输液管道通畅，备输液抢救用。将心电导联线的针型 电极分别插入动物四肢远端显露部位皮下，导联线输入 端接到???生物信号记录分析系统，描记正常麻醉 状态下的Ⅱ导联心电图。经股静脉滴注 氯化钾溶液， 兔高钾血症动物模型的建立
滴速?????，注射氯化钾的过程中，注意观察心电
图波形的变化，在心电图出现明显的特征性的异常改变 后，立即停止注射。
适应力强且相对温顺的兔，在高钾血症模型的建立 中已经得到广泛应用。目前，实验教学中多采用耳缘静 脉推注或滴注氯化钾的方法模拟急性高钾血症 ，借以 ???评价??此方法比较可靠，早期国外多选用犬来建 立实验动物高钾血症模型，主要因为犬体型大，耐受性 较强，血液循环系统比较发达、血管口径粗，操作方便， 与人类急性高钾血症的病理生理过程更为相似，但同时 探讨高钾血症的形成机制及高钾对心肌细胞的影响。
?模型的建立??取家兔?只，称重后用 氨基甲酸 乙酯溶液（???）经耳缘静脉缓慢推注，全身麻醉后仰 卧位固定于兔手术台上，行气管插管及一侧颈外静脉插 有实验成本高、性情凶猛等不足之处。
??
管术，并与输液装置相连，缓慢输入生理盐水 滴? 鼠高钾血症动物模型的建立
分?，以维持输液管道通畅，备输液抢救用。将心电导联 线的针型电极分别插入动物四肢远端显露部位皮下，导 联线输入端接到???生物信号记录分析系统，描记 正常麻醉状态下的Ⅱ导联心电图。经耳缘静脉以?? 鼠高钾血症动物模型的建立，多采用大鼠或豚鼠腹 腔注射氯化钾溶液的方法。
?模型的建立??将鼠称重后用 氨基甲酸乙酯溶 液（???）腹腔注射麻醉，仰卧位固定在大鼠手术台 上。将心电导联线的针型电极分别插入动物四肢皮下， 导联线输入端接到???生物信号记录分析系统，描 记正常麻醉状态下的Ⅱ导联心电图。选择鼠下腹部右或
速度缓慢推注 氯化钾溶液（???），每隔?分钟 再推注同等剂量氯化钾，注射氯化钾的过程中，注意观 察心电图波形的变化。因动物对注入氯化钾溶液耐受性
?????????????????
????????
左侧部位注射???生理盐水溶液，首次选择按?
????的剂量注射，观察心电图波形，若注人氯化钾 多个部位的传导阻滞，包括房室传导阻滞和心室的传导
阻滞
??
。当机体血钾浓度急剧增高时，心肌传导性降低
后心电图波形变化不明显，可再注氯化钾 直至出现明显的高钾血症异常心电图波形。
，
引起传导缓慢的同时，有效不应期缩短，因而易形成兴 奋折返，并进而引起包括心室纤维颤动在内的心律失 常。严重高钾血症时，可因重度传导阻滞或心肌兴奋性
?评价??采用鼠腹腔注射氯化钾复制高钾血症动物 模型，比较好地解决了耳缘静脉注入氯化钾溶液的剂量 和速度较难控制这一问题，当氯化钾注入腹腔后，钾离 子通过腹膜自然吸收进入血循环，血钾水平逐渐升高，
消失而引起心搏骤停 ?
?
。由于高钾血症一旦发病，死亡
率极高，使得有必要深入研究其病理生理特点、快速准 确的诊断技术和及时有效的治疗方法。在具体的实验研
究中，需根据实验目的和设计选择适当的实验动物及其 模型的制作方法，以便取得最佳的实验结果。目前，高钾 血症动物模型的研究在制备方法、实验条件的控制等方 这更为接近临床实际情况。实验观察到， 氯化钾溶液
注入腹腔????可出现高钾血症典型的心电图改变，
血钾水平显著升高，模型组动物多在 后因严重心
律失常而死亡 。实验中可以比较方便地观察动物各项 面都取得了很大进展，而且二维（ ）和脉冲多普勒 生理指标的变化，实验进程易于控制。鉴于该模型成功 率高，整体实验效果好，方法简便，且与临床高钾血症的 发生情况更为接近，所以值得推广。
（?）超声心动图等新技术在模型制备的应用，进一步 揭示急性高钾血症对心脏结构和心脏收缩、舒张功能的 影响，在很大程度上促进了高钾血症的研究 ?
?
。高钾血
蛙类高钾血症动物模型的建立
症动物模型的日趋完善，将为人们更深刻认识高钾血症 发病机制，研究新的治疗对策等提供更准确的信息。
蛙类高钾血症动物模型的建立，多采用蟾蜍，经在 体咽淋巴囊注射 氯化钾溶液，使其心肌细胞外液中
【参考文献】
钾浓度急剧升高，复制急性高钾血症 ??
，借以探讨两栖
及心电图变 金惠铭，王建枝．病理生理学 卫生出版社，?????．
．第?版．北京：人民 类动物高钾血症心室肌单向动作电位
化，为可能取代哺乳动物高钾血症及临床诊断提供新的 实验方法和理论依据。
陈小红．心电图对诊断高钾血症的临床价值 ．基 层医学论坛，??， ： ．
胡郁，王建军，陈珍严，等．心电图在高血钾临床诊 ?模型的建立??破坏蟾蜍的脑和脊髓，仰卧位固定
于蛙板上，剪除胸骨，剪开心包，暴露心脏，分离下腔静
断价值中的研究 ．
．临床心电学杂志，??， ： 脉备用。用自制金属针刺人蟾蜍心尖部位记录 ，并
StajerD,Mozina H,Noc M,et al.Correlation betweenQTc
interval duration and left ventricular Systolic dysfunc-
tion in patients with acute myocardial infarctiong [J]. Electrocardiology,1993,26:333.
将心电导联线的针型电极分别插入动物四肢皮下，导联
线输入端接到???生物信号记录分析系统，描记正 常状态下的Ⅱ导联心电图。实验组经蟾蜍咽淋巴囊注射 氯化钾溶液 ， 后观察记录 和心电图 王国英，李崇信．高血钾心电图与血清钾浓度对照
的变化。
分析 ．心电学杂志，??，???：?． Thiel A,Wagner M,Behr R,et al.Anesthesia in familial hyperkalemic periodic paralysis[J]. Anasthesiol IntensivmedNotfallmedSchmerzther,1993,28:125. 崔红，孙玲，王志榕．?例高钾血症临床心电图诊断
?评价??引起机体高钾血症的病因主要是钾储留及
细胞内钾释出过多，本实验经蟾蜍咽淋巴给药，致细胞
外液钾离子浓度急剧增高，所致的急性高钾血症与哺乳
动物高钾血症有相似的心电图改变，且能准确地反映心
室的除极化和复极化过程，尤其是可清楚地显示心肌兴
价值的探讨 ．
．实用心电学杂志，??， ：??
奋与机械收缩之间的时间关系 ，全面反映出高钾血症 ??
施新酞．现代医学实验动物学 出版社，??????． ．北京：人民卫生
对心功能的影响。本实验方法的主要特点是操作简便， 容易掌握，实验结果出现迅速，可重复性强，成功率高。 动物来源广泛，且具有价格低廉且易于饲养的优点，这 为研究高钾血症提供了新的实验方法，在医学院校实验 教学及研究神经递质、药物等对心脏功能影响具有一定
的实用价值。
陆晓华，张根葆，桂常青．大鼠高钾血症实验模型的 复制 ．皖南医学院学报，??，???： ． ??MoserK M,CantorJ P,OlmanM,et al.Chronic pulmonary
thromboembolism in dogs treated with tranexamic acid [J].Circulation,1991,83(4):1371. ??郑先科，李国华，黄碧蓝．机能实验学 京：北京大学医学出版社，????．
．第?版．北
小结
高钾血症是机体钾代谢紊乱并由此引发的一系列
变化的病理生理学过程。高钾血症对心肌及传导系统具
有抑制作用，所致心律失常主要表现为窦性心动过缓和 ??岳春良．简便的在体蛙心单相动作电位与收缩曲线
联合记录方法的研究 ．
．锦州医学院学报，??，?：
承 德 医 学 院 学 报
?????????????????
????????
??李俊贤，闫鲲，雷军荣，等．高钾血症致心律失常临
??丛洪良，王佩显，王小飞，等．高钾血症对实验犬心
脏结构及功能的影响?二维和脉冲多普勒超声心动 床分析 ．第四军医大学学报，??， ：． ??刘仁光，刘爱纯，徐兆龙，等．高钾血症引起复杂心
图观察 ?．
．中国危重病急救医学，??， ： 电图改变 ．锦州医学院学报，??， ： ．
（收稿日期： ）
梅尼埃病诊断学研究进展
印志娴
（天津市环湖医院耳鼻喉科，天津????）
【关键词】梅尼埃病；膜迷路积水；诊断
【中图分类号】 【文献标识码】
【文章编号】
（??）?????
梅尼埃病（Meniere's Disease,MD ）是一种特发性内耳 疾病，典型的临床表现为反复发作的旋转性眩晕、感音神 经性波动性听力损失、耳鸣和耳胀满感。??年，法国医 病理学、免疫学、分子生物学、遗传学、基因学等广泛的 学科领域，为临床诊断治疗的发展提供了可靠的依据。
?听力检查 生 首次报告了该病。??年，匈牙利医生博立茨首 ??纯音测听检查：梅尼埃病的纯音测听检查呈感 音性聋或感音神经性聋，听力图早期为上升型或峰型 （低、高频两端下降，峰值位于??处），晚期呈平坦型 次用梅尼埃病冠名此病，此后临床上常将不明原因的反
复发作性眩晕、感音神经聋、耳鸣伴有耳内胀满感称为梅 尼埃病综合症，并沿用至今。??年，????和???首 先揭示了?的病理变化为膜迷路积水。??年，我国自 然科学名词审定委员会统一称该病为梅尼埃病。一般认 为，微循环障碍、解剖和发育异常、病毒感染、代谢失调、 内分泌紊乱、自身免疫等因素均可导致内淋巴积水，诱发 梅尼埃病四联症。??年，美国哈佛大学医学院的修尼 特教授将梅尼埃病定义为原发的、后天的、有症状的膜迷 路积水症。至今可被视为一种不明原因的、非发育性的具 或下降型 。有学者报道，急性低频感音神经性耳聋 ）是一种具有特征性听 （ 力曲线的疾病，这种特征性的听力曲线又同时提示梅尼 埃病处于早期的内淋巴囊肿胀阶段 。长期发病患者的 平均语言识别率为 ，平均听阈提高 。阈上功能检 查有重振现象，音衰试验正常。 ??中耳压力检查：???? 对 例眩晕患者进 行中耳气压研究发现，其中?例梅尼埃患者与正常对照 组比较，正常对照组气压较低侧的中耳压力为 有梅尼埃症候群的内耳疾病 。流行病学研究发现，发达 国家的梅尼埃病的发病率远高于发展中国家，欧洲白人 梅尼埃病发病率高，非洲土著人梅尼埃病很罕见。我国北 京耳鼻咽喉科研究所统计，该病占耳源性眩晕的??
。提示梅尼埃病的发病率可能与种族有关，还需要进 双耳之间的气压差为 ± 。在梅尼埃病患者中，
气压较低侧的中耳压力为?????双耳之间的气压差 为??±?????双耳间的气压差在???以上时， 其动脉血气分析多为异常（P
一侧的最大顺应值明显小于正常对照组（P ）?双耳 之间的气压差异与正常对照组相比也有显著性差异（ P ）?中耳顺应性较低的 行相关多因素的综合调查和研究 梅尼埃病的诊断标准
。
??年，美国耳鼻咽喉头颈外科学会听力与平衡委 员会提出梅尼埃病诊断标准。??年，上海召开的“全国 梅尼埃病诊断标准及疗效评定标准学术会议”上制定了 梅尼埃病的试行标准。??年，中华医学会耳鼻咽喉科
）， 的患者出现动脉血气异常。提示双侧中耳气 压差对梅尼埃病影响较大，在眩晕的病人中，中耳气压 差还有可能与异常的血气有关。
?内耳功能检查
学分会在贵阳制定了梅尼埃病的诊断依据 。以上诊断 ??眼震检查：梅尼埃病发作高潮时，大多有自发性 眼震出现，呈水平型或水平旋转型，其方向因病程和病 情不同而异，早期向患侧（刺激性眼震），而后转向健侧 （麻痹性眼震），最后又转向健侧（恢复期眼震）。自发性
眼震存在可作为本病的诊断依据之一。由于就诊时病人 眩晕发作的病程不同，不能根据眼震的方向判断何侧为 病耳。 标准相结合，可明确梅尼埃病诊断。对于可疑诊断者，根 据条件可进一步行甘油试验、耳蜗电图、耳声发射及前 庭功能检查。 梅尼埃病的诊断方法
随着耳科诊断技术的发展，梅尼埃病的检查手段日
益完善。在听力检查、眼震检查、前庭功能检查、甘油试 验、耳蜗电图检查、影像超声学检查等方面取得很多研 究成果。近年来，该病的研究已涉及到解剖学、电生理、 ??前庭功能检查：梅尼埃病早期，患耳前庭功能正 常或稍敏感，刚发作不久呈轻度减退。多次发作后可出
[收稿日期]2009-03-17 [基金项目]安徽省教育厅自然科学研究资助项目(K J 2008B 318)[作者单位]蚌埠医学院第一附属医院心内科,233004[作者简介]王 寅(1981-),男,硕士研究生,住院医师. [文章编号]1000-2200(2010)02-0206-03 综 述 慢性心理应激大鼠模型的建立及评价研究进展 王 寅 综述,王洪巨 审校 [关键词]应激,心理学;动物模型;大鼠;综述[中国图书资料分类法分类号]R 395 [文献标识码]A 随着社会环境和生活方式的改变,工作压力增加,生活节奏加快,心理应激因素参与疾病的发生、发展得到广泛重视。心理应激触发机体产生的生理学效应包括急性自主神经功能不全、神经内分泌激活、血流动力学改变和引发炎症反应过程。因此,研究心理因素在疾病发生、发展和康复过程中的作用,具有重要的意义。慢性心理应激动物模型在医学研究领域发挥着越来越重要的作用,大量用于临床药物的筛选和评价,并且通过这些慢性心理应激动物模型了解临床疾病的病理生理机制,发生、发展以及对疾病的预后评估都有不可替代的作用。目前对于心理应激模型还没有统一的标准,现将主要的几类心理应激动物模型及其评价方法作一综述。 1 慢性抑郁型动物模型 抑郁是一种以情绪低落,思维迟钝,行为迟缓为主要症状的精神疾病,同时可伴有睡眠减少,体重降低等躯体症状。1.1 模型制作 1.1.1 慢性温和的不可预知性应激(chron ic m ild stress ,C M S) 由K atz 等 [1] 于1981年创立,但缺点较多,如过强的 应激刺激常导致动物死亡。由W ill ner 等[2-3] 对其进行改 进,是目前应用和研究较多的一种抑郁症模型。让大鼠在2~4周内每天经历一种不愉快的轻度应激,包括冷水游泳(4 ,5m i n),电击(电流强度1.0mA,频率1次/分),热环境(45 ,5m in),日夜颠倒,闪光刺激(频率3次/分),禁食,禁水,夹尾(1m in)等刺激。每种刺激形式不连续2天出现,形成一种CM S ,避免动物对同一种刺激产生适应。1.1.2 束缚应激模型 慢性束缚模型[4-5] 是将动物限制在 一个狭小的容器内(直径5cm ,长20cm ),使动物产生无助 或抑郁,每次刺激时间约1h 。 1.1.3 行为绝望(behav i oural despair ,BD )模型 亦称之为 强迫游泳模型 (f o rced s w i m m i ng test ,F S T ),由Porso lt 等1977年建立,被R enard 等[6-7]应用,是将大鼠(或小鼠)置入盛水的环形玻璃缸内强迫游泳。动物最初在水中拼命游动、挣扎,试图逃脱,随之感到逃脱是不可能的,便不再挣扎和游动,仅将头部露出水面,肢体漂浮,维持一种不动状态,称之为 BD 。由此衍生出小鼠的悬尾模型(tail suspension test ,T ST ),是将小鼠尾部悬挂,悬尾小鼠为克服不正常体位而挣 扎活动,但活动一定时间后,出现间断性不动,显示 绝望 状态[7-8]。 1.1.4 其他类型 如药物诱发的抑郁模型[9],孤养模型[10]等抑郁模型。 1.2 模型行为评分 目前尚无公认的经典测量抑郁情绪的测验,在各种抑郁模型动物中主要通过以下试验测量抑郁水平:多用敞箱试验[1]进行行为测评,表现为大鼠自发性探究行为明显减弱,运动能力降低。体重减轻、性行为减少、血浆中糖皮质激素升高,睡眠周期紊乱。同时发现老鼠天生偏好糖水的兴趣下降,运用糖水消耗试验测定24h 饮用1%蔗糖溶液的量,若糖水消耗显著降低,表示抑郁模型造模成功[2]。1.3 模型评价 上述抑郁模型可用于抗抑郁药物的筛选及抑郁病理生理机制的研究,因其采用的刺激因子类似人在生活中经历的应激事件强度,较好地模拟了人类快感缺乏、兴趣降低这一核心症状,并且模型稳定持久,作为抑郁应激模型是理想的。2 焦虑动物模型 焦虑是事先知道但又不可避免的、即将发生的应激性事件引起的一种预期反应,以恐惧、担心、紧张等精神症状为主要表现,同时伴心悸、多汗、手脚发冷等植物神经功能紊乱,其核心症状为担忧。2.1 模型制作 2.1.1 间氯苯哌嗪(mCPP)诱导焦虑的明暗箱模型 1998 年B ilke -i Go rz 等[11]建立了W istar 大鼠mCPP (2.5m g /kg)诱导焦虑的明暗模型,焦虑症状是通过对动物进入明箱的次数明显减少表现的。谭德讲等[12]用ddy 小鼠取代W i star 大鼠建立mCPP 诱导焦虑的明暗箱模型,是一个简便易行,经济有效的焦虑模型。 2.1.2 V oge l 饮水冲突试验和条件性电击饮水冲突是将动物的饮水行为和不确定的电击结合起来,动物如果想满足饮水的需要就可能受到电击的创伤,由此造成动物在饮水和避免电击之间的冲突,产生焦虑反应[13]。而条件性电击模型中,将某种信号和电击随机结合起来,信号出现后可能会出现电击,也可能不出现电击,动物处于期待性焦虑反应[14]。2.1.3 社会行为模型 该类模型包括天敌暴露[15]、社会隔离、母爱剥夺[16]等。天敌暴露模型是将动物暴露于对其生命有强烈威胁的另一动物面前,天敌就会进行猛烈的进攻, 而造成其焦虑水平的提高。但这一模型往往会对试验动物造成创伤,故多采用可视天敌暴露和天敌气味暴露等模型。2.2 模型行为评分标准 经典的测量动物焦虑反应的方法是高架十字迷宫试验[17]和敞箱试验。高架十字迷宫试验是 206 J Bengbu M ed Co l,l Februar y 2010,Vo.l 35,N o .2
组织研磨管的使用方法 1.作用：只适用于蛋白提取、RNA提取、基因组DNA提取时的组 织裂解，不做他用； 2.组织研磨管：容量为1.5ml, 里面已经提前放置了研磨珠（有时也 不放置），研磨液（Trizol或RIPA裂解液，有时也不放置）一般在取回后才加入，如果已经加入了研磨液，请离心后才拧开管盖，以免研磨液溢出，对皮肤造成伤害，所以操作时，要小心注意！ 3.组织：把收取的组织分切，用生理盐水或PBS缓冲液把分切的组 织上的血液漂洗干净，然后用医用纱布或滤纸把组织表面的水分吸干，然后放入研磨管（组织体积大小为1颗绿豆至2颗黄豆，根据实际情况决定）中，然后把放入的组织尽量剪碎； 4.存放：上述过程应尽量在最短的时间内操作完毕，立即用液氮冻 结，然后置于液氮或-80℃保存； 5.操作事项：操作时间尽可能短，做好一个，立马放置一个；
实验方法总结（3）：动物模型部分 1、研究肿瘤细胞增殖 (2) 2、研究肿瘤细胞转移 (3) 2.1. 体外(浸润模型) (3) 2.2. 体内(转移模型) (3) 3、研究肿瘤细胞耐药 (5) 3.1. 耐药细胞株的建立 (5) 3.2. 裸鼠移植瘤耐药模型的建立 (6) 从肿瘤起源分，肿瘤动物模型的分类如下： 从研究目的来分，可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析： 1、研究肿瘤细胞增殖 细胞准备：GeneA敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。分为：空白对照组、阴性对照组、实验组。 取Balb/c裸鼠，雄性，6周龄，每组10只，适应一周后进行肿瘤细胞注射。
XXX细胞消化离心后制成单细胞悬液，计数后取适量的细胞用PBS悬浮，在Balb/c裸鼠侧腹部皮下接种。每只接种2×106个细胞，注射体积为100 μL。此后，每隔5天测量注射部位肿瘤的体积。30天后裸鼠小鼠腹腔注射80 mg/kg 戊巴比妥钠，小鼠麻醉后置蓝色背景布上拍照（侧卧位，接种部位朝上），小鼠颈椎脱臼处死，取出肿瘤称重，将肿瘤置蓝色背景布上拍照，肿瘤一分为二，一份4%多聚甲醛固定，待后续病理分析，一份-80℃冻存。 2、研究肿瘤细胞转移 肿瘤转移的模型包括两大类：体外(浸润模型)和体内(转移模型)。体外(浸润模型)：了解肿瘤细胞对周围相连组织的侵润性。体内模型主要研究肿瘤细胞的转移性即肿瘤细胞在远端组织形成病灶的能力。 2.1. 体外(浸润模型) 例：浸润型脑胶质瘤动物模型的建立 方法：取若干只Balb/c免疫缺陷裸鼠，将分离和鉴定并转染携带绿色荧光蛋白的脑胶质瘤干细胞立体定向法行小鼠颅内接种，每组10只。小鼠麻醉后头部正中切口，剥离骨膜后钻孔(坐标是冠状缝后0.5 cm，矢状缝右侧2.5 cm) 。取2 μL胶质瘤干细胞以1×104 cells /只小鼠的剂量，经微量注射器缓慢注射入鼠脑纹状体内(深度是2.5 ～3 mm) 。在确定的时间点处死一部分动物进行荧光( 立体荧光显微镜下) 病理证实和比较，同时检查脑胶质瘤干细胞的体内生长特征以及干细胞标志物等。 2.2. 体内(转移模型)
动物氧化应激研究进展 中国农业科学院饲料研究所姚浪群 北京爱绿生物科技有限公司胡红军 随着我国畜牧业特别是现代养殖业集约化程度的提高以及人们对动物福利意识的增强，动物应激医学已成为动物医学的重要组成部分。在动物应激医学研究中，动物氧化应激又逐渐成为国内外学者的热点研究课题。 1 氧化应激概念与起因 1.1 氧化应激概念 动物在正常生理代谢过程中，会产生许多自由基，这些自由基通常不会导致组织细胞的损伤，机体依靠自身体内的抗氧化防御体系，主要包括抗氧化酶类（包括超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px、谷胱甘肽硫转酶GST等）以及非酶类的抗氧化剂（包括维生素C、维生素E、谷胱甘肽、褪黑素、a-硫辛酸、类胡萝卜素、微量元素铜、锌、硒等），可以保护机体组织和细胞防止自由基的损伤。当动物机体细胞内产生的自由基的水平高于细胞的抗氧化防御能力时，氧化还原状态失衡，过量的自由基存在于组织或细胞内，即诱发氧化应激，并导致氧化损伤。因此，氧化应激(Oxidative Stress)是机体应答内外环境，通过氧化还原反应对机体进行多层次应激性调节和信号转导，同时造成氧化损伤的重要生命过程。器官和组织对氧化应激的易感性依赖于它的抗氧化系统的状态和氧化剂与抗氧化之间的动态平衡。 氧化应激可导致细胞膜磷脂过氧化、蛋白质过氧化(受体和酶)以及DNA的氧化损伤。脂质、蛋白质和DNA的氧化会对机体造成不同程度的危害，从而影响机体的生长、发育、衰老等过程。急性和慢性的应激都能通过产生自由基诱导胃肠道、免疫系统等多方面的氧化应激。 1.2 氧化应激的起因 1.2.1 自由基的产生 细胞在正常新陈代谢和先天免疫反应过程中，都会产生活性氧代谢物(ROM)——自由基。首先，肠上皮细胞的主动新陈代谢本身就是ROM的来源，其生成与电子传递链的活性有关。所产生的活性物质包括超氧化物阴离子(O2-)、过氧化氢(H2O2)和羟基自由基(·OH)，它们都是线粒体中氧化磷酸化不可避免的产物。其次，另一个内源性氧化应激源自于肠道先天及获得性免疫系统在与许多共生物和病原微生物反应过程中产生的一氧化氮(NO)，其在食物和水的吸收过程中不可避免的会产生。 当动物遭受应激刺激或患病时，机体代谢出现异常而骤然产生大量自由基，过量的自由基数
实验方法总结：动物模型部分 1、研究肿瘤细胞增殖 (1) 2、研究肿瘤细胞转移 (2) 2.1. 体外(浸润模型) (2) 2.2. 体内(转移模型) (2) 3、研究肿瘤细胞耐药 (4) 3.1. 耐药细胞株的建立 (4) 3.2. 裸鼠移植瘤耐药模型的建立 (5) 从肿瘤起源分，肿瘤动物模型的分类如下： 从研究目的来分，可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析： 1、研究肿瘤细胞增殖 细胞准备：GeneA敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。分为：空白对照组、阴性对照组、实验组。 取Balb/c裸鼠，雄性，6周龄，每组10只，适应一周后进行肿瘤细胞注射。
XXX细胞消化离心后制成单细胞悬液，计数后取适量的细胞用PBS悬浮，在Balb/c裸鼠侧腹部皮下接种。每只接种2×106个细胞，注射体积为100 μL。此后，每隔5天测量注射部位肿瘤的体积。30天后裸鼠小鼠腹腔注射80 mg/kg 戊巴比妥钠，小鼠麻醉后置蓝色背景布上拍照（侧卧位，接种部位朝上），小鼠颈椎脱臼处死，取出肿瘤称重，将肿瘤置蓝色背景布上拍照，肿瘤一分为二，一份4%多聚甲醛固定，待后续病理分析，一份-80℃冻存。 2、研究肿瘤细胞转移 肿瘤转移的模型包括两大类：体外(浸润模型)和体内(转移模型)。体外(浸润模型)：了解肿瘤细胞对周围相连组织的侵润性。体内模型主要研究肿瘤细胞的转移性即肿瘤细胞在远端组织形成病灶的能力。 2.1. 体外(浸润模型) 例：浸润型脑胶质瘤动物模型的建立 方法：取若干只Balb/c免疫缺陷裸鼠，将分离和鉴定并转染携带绿色荧光蛋白的脑胶质瘤干细胞立体定向法行小鼠颅内接种，每组10只。小鼠麻醉后头部正中切口，剥离骨膜后钻孔(坐标是冠状缝后0.5 cm，矢状缝右侧2.5 cm) 。取2 μL胶质瘤干细胞以1×104 cells /只小鼠的剂量，经微量注射器缓慢注射入鼠脑纹状体内(深度是2.5 ～3 mm) 。在确定的时间点处死一部分动物进行荧光( 立体荧光显微镜下) 病理证实和比较，同时检查脑胶质瘤干细胞的体内生长特征以及干细胞标志物等。 2.2. 体内(转移模型)
病理生理学实习指导 一、缺氧模型的实验性复制 ㈠目的与原理 通过给动物低氧环境，影响Hb的带氧能力及使组织不能利用氧等方法，复制不同类型缺氧模型，经呼吸、机能状态、皮肤粘膜颜色等指标，显示了其不同症状与特征，同时对复制模型的方法及原理又有大概的了解，有利于深入和研究各缺氧症的发生、发展和转归的规律。 ㈡实验对象 小白鼠。 ㈢器材与药品 缺氧瓶（装有管道瓶塞的250ml广口瓶），酒精灯，一氧化碳发生器，1ml注射器，5ml 和2ml刻度吸管，粗天平（附砝码），剪刀，普通镊。 钠石灰（氢氧化钠、氧化钙），甲酸，浓硫酸，0.125%氰化钾溶液，1%亚硝酸钠溶液，10%硫代硫酸钠溶液。 ㈣步骤与观察 表8-3-1观察指标 呼吸机能状态皮肤粘膜颜色类型（频率、幅度）（活动度） –––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––– 低张性缺氧 一氧化碳中毒 氰化钾中毒 ⒈低氧性缺氧 ⑴将小白鼠至于250ml广口瓶（内装钠石灰吸收二氧化碳）中观察上述指标。 ⑵将瓶塞紧，同时记录时间，每5min重复观察上述指标一次（如有变化则随时记录）直到动物死亡为止。 ⒉一氧化碳中毒性缺氧 ⑴如图8-3-1装好一氧化碳发生装置。 ⑵将小白鼠一只放入瓶中，观察上述指标。 ⑶取甲酸3ml放入试管内，加入浓硫酸2ml，塞紧。如气泡产生较少，可用酒精灯加热，加速一氧化碳的产生（但不可过热以至液体连续沸腾，因一氧化碳产生过快，动物迅速死亡，血液颜色改变不明显）。 ⑷在整个过程中，注意观察上述指标。 （注）：一氧化碳产生原理： H2SO4 HCOOH CO↑+H2O △ ⒊氰化钾中毒性缺氧 ⑴称小白鼠体重，观察上述指标，预先准备1%亚硝酸钠及10%硫代硫酸钠各10ml·Kg-1，以备急救用。
动物氧化应激研究进展
动物氧化应激研究进展 随着我国 畜牧业 特别是现代养殖业集约化程度的提高以及人们对动物福利意识的增 强，动物 应激医学已成为动物医学的重要组成部分。在动物应激医学研究中，动物氧化应 激又逐渐成为国内外学者的热点研究课题。 1 氧化应激概念与起因 1.1 氧化应激概念 动物在正常生理代谢过程中，会产生许多自由基，这些自由基通常不会导致组织细胞 的损伤，机体依靠自身体内的抗氧化防御体系，主要包括抗氧化酶类(包括超氧化物歧化 酶 SOD 、过氧化氢酶 CAT 、谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-Px 、谷胱甘肽硫转酶 GST 等) 及非酶类的抗氧化剂(包括 维生素 C 、维生素 E 、谷胱甘肽、褪黑素、 a- 硫辛酸、类胡萝 卜素、微量元素 铜、锌、硒等)，可以保护机体组织和细胞防止自由基的损伤。当动物机 体细胞内产生的自由基的水平高于细胞的抗氧化防御能力时，氧化还原状态失衡，过量的 自由基存在于组织或细胞内，即诱发氧化应激，并导致氧化损伤。因此，氧化应激 (Oxidative Stress) 是机体应答内外环境， 通过氧化还原反应对机体进行多层次应激性调节 和信号转导，同时造成氧化损伤的重要生命过程。器官和组织对氧化应激的易感性依赖于 它的抗氧化系统的状态和氧化剂与抗氧化之间的动态平衡。 氧化应激可导致细胞膜磷脂过氧化、蛋白质过氧化 (受体和酶 )以及 DNA 的氧化损伤。 脂质、 蛋白质和 DNA 的氧化会对机体造成不同程度的危害，从而影响机体的生长、发育、 衰老等过程。急性和慢性的应激都能通过产生自由基诱导胃肠道、免疫系统等多方面的氧 化应激。 1.2 氧化应激的起因 1.2.1 自由基的产生 细胞在正常新陈代谢和先天免疫反应过程中， 基。首先，肠上皮细胞的主动新陈代谢本身就是 性有关。所产生的活性物质包括超氧 化物阴离子 ( · OH) ，它们都是线粒体中氧化磷酸化不可避免的 产物。其次，另一个内源性氧化应激源 自于肠道先天 及获得性免疫系统在与许多共生物和病原微生物反应过程中产生的一氧化 氮 (NO) ，其在食物和水的吸收过程中不可避免的会产生。 当动物遭受应激刺激或患病时，机体代谢出现异常而骤然产生大量自由基，过量的自 由基数量 将超过抗氧化体系的还原能力， 使机体处于氧化应激状态， 结果会导致机体损伤。 目前研究表明主要有四种致细胞损伤机制： 1) 对脂类和细胞膜的破坏，从而导致细胞死亡。 2) 对蛋白质、酶的损伤，从而导致蛋白质变性，功能丧失和酶失活。 3) 对核酸和染色体的破坏，从而导致 DNA 链的断裂，染色体的畸变和断裂。 4) 对细胞外基质的破坏，从而使细胞外基质变得疏松，弹性降低。 1.2.2 氧化应激的起因 1.2.2.1 外源性因素 1.2.2.1.1 日粮 营养因素 营养缺乏或不良可能使体内自由基增加，而且还影响抗氧化酶生物合成及 内源性抗氧 都会产生活性氧代谢物 (ROM) ——自由 ROM 的来源，其生成与电子传递链的活 (O2-) 、过氧化氢 (H2O2) 和羟基自由基
二十种常见实验动物模型 一、缺铁性贫血动物模型 缺铁性贫血（iron deficiency anemia，IDA）是体内用来合成血红蛋白（HGB）的贮存铁缺乏，HGB合成减少而导致的小细胞低色素性贫血，主要发生于以下情况：（1）铁需求增加而摄入不足，见于饮食中缺铁的婴幼儿、青少年、孕妇和哺乳期妇女。（2）铁吸收不良，见于胃酸缺乏、小肠粘膜病变、肠道功能紊乱、胃空肠吻合术后以及服用抗酸和H2受体及抗剂等药物等情况。（3）铁丢失过多，见于反复多次小量失血，如钩虫病、月经量过多等。 IDA是一种多发性疾病，据报道，在多数发展中国家，约2/3的儿童和育龄妇女缺铁，其中1/3患IDA，因此，研究IDA的预防和治疗具有重要的意义。在这些研究中，缺铁性贫血的动物模型（Animal model of IDA），又是实施研究的基础工具。常见的IDA动物模型的构建技术如下： 实验动物：一般选用SD大鼠，4周龄，雌雄不拘，体重65g左右，HGB≥130g/L。 建模方法：低铁饲料加多次少量放血法。低铁饲料一般参照AOAC 配方配制，采用EDTA浸泡处理以去除饲料中的铁，饲料中的含铁量是诱导SD大鼠形成缺铁性贫血模型的关键，现有研究表明，饲喂含铁量<15.63mg/Kg的饲料35天，SD大鼠出现典型IDA表现，而饲喂
含铁40.30mg/Kg的饲料SD大鼠出现缺铁，但并不表现贫血症状。建模时一般采用去离子水作为动物饮水，以排除饮水中铁离子的影响。少量多次放血主要用于模拟反复多次小量失血导致的铁丢失，还可以加速贫血的形成。放血一般在低铁饲料饲喂2周后进行，常用尾静脉放血法，1～1.5ml/次，2次/周。 模型指标：（1）HGB≤100g/L；（2）血象：红细胞体积较正常红细胞偏小，大小不一，中心淡染区扩大，MCV减小、MCHC降低；（3）血清铁（SI）降低，常小于10μmol/L，血清总铁结合力（TIBC）增高，常大于60μmol/L。 需要指出的是，以上模型不能用于铁吸收不良相关IDA的防治研究。根据具体的研究需要，也可以适当调整建模方法。 二、白血病动物模型 用免疫耐受性强的人类胎儿骨片植入重症联合免疫缺陷病(SCID)小鼠皮下，出于人类造血细胞与造血微环境均植入小鼠，建立具有人类造血功能的SCID小鼠模型称为SCID－hu小鼠。再将髓系白血病患者的骨髓细胞植入SCID－hu小鼠皮下的人类胎儿骨片内，植入的髓系白血病细胞选择性生长在SCID－hu小鼠体内的人类造血微环境中，即为人类髓系白血病的小鼠模型。SCID小鼠是由于其scid所致。T、B淋巴细胞功能联合缺陷，这种小鼠能接受人类器官移植物。 造模方法：
用一次性纸杯做可爱的小企鹅 材料准备： 一次性纸杯、卡纸、颜料、画笔、活动眼珠、白胶、剪刀 步骤： 1）将纸杯倒扣在卡纸上，沿杯口画圈，并贴着圆边外添画一对脚丫子，剪下，作为企鹅的底座，备用。 小贴士：对小年龄的孩子，也可以先将圆剪下，再另外剪一对脚丫子贴上去。 2）将白胶涂抹在纸杯口上，将带脚丫子的底座粘贴到纸杯口上。 小贴士：注意保持按压一小会固定住。 3）将翅膀画在纸上，并剪下。 小贴士：注意不要太宽。 4）将嘴巴画在纸上，并剪下。 小贴士：注意不要太宽。 5）将翅膀和嘴巴各折叠一小条边，用白胶粘贴到纸杯上适当的位置。 小贴士：注意保持按压一小会固定住，同时保持纸杯一直按压在底座上。 6）给企鹅身体上色，小心空出嘴巴和脚丫子。 小贴士：注意保持纸杯一直按压在底座上。 7）给企鹅的翅膀和嘴巴上色。 8）待全部干透，最后粘贴眼睛和白肚子。 彩色小刺猬 材料：彩色卡纸鞋盒双面胶 先在鞋盒上面画出小刺猬的形状，剪下来备用。彩色卡纸剪成三角形，比平时的稍长一些~~小刺猬最麻烦的就是剪这个三角形，冰冰剪了好多都不管用，太短了~ 我们贴的都是用我剪的三角形，剪了足够多的时侯就可以贴了，用胶水也可以，
我觉得干的慢，所以用的双面胶~双面胶选择用的宽的，省事~~往上贴的时候用手划一下~让三角形出来弧度就可以贴了，这样贴来立体感强~
猫头鹰 材料：黑色卡纸彩纸 黑色卡纸用圆规画个大大的圆型剪下来，再把彩纸剪成长的半圆型~~剪好后直接往黑色卡纸上贴就行了~ 看看猫头鹰头上的白色两道了没，是冰用橡皮擦的，上面原来有些小白点，不擦还看不出来呢，擦完就成这样了
小熊 材料：彩纸 把一个长方形的纸对折剪成椭圓型~ 再把中间剪开，用长纸条一上一下的穿过去~~ 这个小熊我们做了五六个~剪的纸条太多了~嘿~`
一. 背景： 本次动物实验相关疾病介绍、国内外相关治疗及研究的现状及结果（含临床、基础）、相关引文摘要等。 二、实验所用器械简介： 三、实验目的 1、使用猪或其他适宜动物为实验模型, 按照临床要求对产品进行模拟 使用，对* *器械的* *性能、* *效应进行测试。 2、通过动物实验取得数据和经验, 以便为产品的临床使用撰写详尽的使 用指南。 3、确定* * 器械置入猪后的最长可回收天数, 以便为临床使用的最长 可回收时间提供参考。 4、研究* *器械置入* *天后的可回收性, 以回答以往实验中未能解决 的* * 器械在置入* * 天后是否可取出的问题。 四、实验模型和材料 1、实验模型 （1）.动物模型：猪，体重：25?35KG （2）.体外模型：拟采用透明塑料软管作成的20mm 25mm两 种直径的下腔静脉模型。 2、材料： （1）* *器械采用XX公司研发生产的器械。 （2）其他手术配套器械采用临床通用器械。 3.过程要求：
本实验开始前必须取得动物道德委员会的许可（注：国外 有此要求，国内仅少数几家大医院有动物伦理委员会） 五.实验设计 动物数量及分组方法：实验动物共22头，在置入器械后分为A和B两组.A组动物采用介入方法取出滤器，B组动物采用外科方法经腹切开方法取出滤器.下腔静 脉滤器置入后饲养观察时间为7、10、12、14、16、20、30、60和90天，具体分组方法见下表。 分组（头） 时间（天）- A B 7 1 1 10 1 1 12 3 1 14 3 1 16 1 1 20 3 1 30 0 2 60 0 1 90 0 1 六、实验方法： 1、随机选取实验动物以1:1的比例进行* *实验，并记录* * 总结出的操作要求。7?20天实验用以观察器械置入后的可回收期，30、60、90天实验用以观察器械置入后的长期通畅情况。 2、所有动物器械取出前应造影复查，并与器械置入时的资料进行对比，判断器
在动物模型的制备中如何选择动物 摘要：实验动物是活的仪器[1]，是生命科学实验研究中的重要组成部分。医学中的动物实验模型，为现代医学的发展作出了贡献，可以说每一种新的药物的出现和每一种新疗法的诞生，都离不开动物实验模型。动物模型避免了在人身上进行实验所带来的风险，可以严格控制实验条件，增强实验材料的可比性，简化实验操作和样品收集，有助于更全面地认识疾病的本质。要合理正确选择实验动物，了解它们的局限性。为学习研究提供更广阔的思路。 关键词：医学，动物实验，实验动物，动物模型 引言：实验动物学在发展中已形成如下学科：实验动物生物学，实验动物遗传育种学，实验动物环境生态学，实验动物微生物学和寄生虫学，实验动物营养学，实验动物医学，比较医学，中医实验动物学等学科。[2]动物实验的特点是可由实验者根据不同的课题选择动物。制成动物模型，需要作严密的设计，包括目的、对象、方法、对照、随机分组、设定数量、指标、原始记录和统计方法等。医学中的动物实验为现代医学的发展作出了贡献，可以说每一种新的西药的出现和每一种新疗法的诞生，都离不开动物实验。同样，动物实验也为中医、针灸学的发展带来了新的希望。但是，动物实验有它的局限性，不是所有医疗技术都需要进行动物实验，那些已经被临床实验证明有效的医疗方法，就没有必要再用动物实验来证实。由于很多高级动物在生理和病理方面与人类有近似之处，因此可以通过动物实验寻找新的药物和新的疗法。但是人和动物毕竟存在很大差异，动物实验的结果，只能给临床作为参考，而不能代替临床实践。一般情况下，一种新药或新的疗法，能否试用于临床，必须有足够的动物实验依据，但判断这种新药或新疗法是否真正有效，能否推广使用，还必须经受临床实践的检验。通常情况下，动物实验有效，临床实践也有效，但有时两者并不一致。一种疗法，如动物实验证明有效，而临床实践证明无效，就应否定。反过来，临床实践证明有效，而动物实验却无效，自然还应肯定。只是在现代医学当中，大多是动物实验在先，临床实验在后，如动物实验无效的方法和药物几乎都不可能再用于临床实践，而凡能用于临床的药物和方法自然都能得到动物实验的验证。从而给人们造成一种假
1、建立动物模型 实验组：采用腹腔注射法定期注射定量抗生素到5只大鼠体内，，然后每只大鼠注射等量的LPS到体内，注射一周后观察大鼠体征（体重、食欲、运动情况），检测肠道菌群和SYN。 对照组：采用腹腔注射法定期注射定量抗生素到5只大鼠体内，确保肠道无菌，然后每只大鼠注射等量的安慰剂到体内，注射一周后观察大鼠体征（体重、食欲、运动情况），检测肠道菌群和SYN。 2、观察动物体征 体重：每天称量每一只大鼠的体重，并记录，进行横纵比较。 食欲：每只给相同足量食物，计量每只老鼠的摄入量，记录进行横纵比较。 运动情况：在固定时间给予相同刺激，观察每只老鼠的反应情况和运动能力。 3、肠道菌群检测 肠道菌群失调检测： 早期诊断菌群失调是正确有效治疗的前提。 菌群失调的诊断包括三部分： ①有无菌群失调。②菌群失调的程度。③菌群失调的诱因。 菌群失调患者常表现为严重腹泻或慢性腹泻，在应用抗生素治疗过程中，如突然发生腹泻，或原有腹泻加重，即有可能已发生了菌群失调。 菌群失调的程度可分为三度: Ⅰ度（轻度）为可逆性轻度菌群失调，去除致病因素后即可恢复好转，症状消失，临床上多见于急性疾病引起的肠道功能紊乱； Ⅱ度（中度）菌群失调较重，去除病因常不能恢复，多有慢性肠道症状； Ⅲ度（重度）菌群失调，表现为菌群交替或二重感染。详细地了解粪便性状并结合实验室检查可以确定一些有特异性诱因的菌群失调，如志贺菌、沙门菌、空肠弯曲菌、艰难梭菌和轮状病毒感染等。 粪便切片观察： 4、syn检测 利用免疫荧光手段，通过激光扫描共焦显微镜检测了过表达α-syn各片段后与线粒体分布情况。结果证明，α-synN端能够与线粒体共定位；JC1染色流式细胞术检测结果提示，该组细胞线粒体存在膜电位降低趋势。同时被截去N末端的突触核蛋白不会形成高分子量复合体，也不会影响线粒体功能。
自我给药训练程序 1、静脉插管手术 大鼠经2%戊巴比妥钠（腹腔给药）麻醉，将静脉插管置于右侧颈静脉，插管尖端位于右心房开口处。静脉插管固定后经皮下穿过耳后置于颅骨上方，与静脉自我给药套管相连，用牙科水泥固定于颅骨上，水泥凝固后手术完毕。术后当天静脉给于%的肝素钠只抗凝。将大鼠单笼饲养，术后大鼠体重恢复至手术前即可进行实验。每天静脉注射青霉素20万单位/只以防止静脉给药套管堵塞或发生感染。 2、自我给药训练 大鼠进行10天的自我给药训练，每天3小时，每小时之间暂停5分钟。训练在大鼠的夜间周期进行。训练采用FR1强化程序，每次给药之间有40秒的不应期，每次给药伴随有5秒的声音及灯光线索。每个训练期以笼灯开启为信号，动物触碰有效鼻触后笼灯关闭，不应期结束后笼灯再次开启。为防止动物给药过量发生死亡，每小时给药次数被限制在一定次数。 3、消退训练 根据不同的点燃方式选择相应的消退程序。在由给药相关线索点燃的消退训练过程中，笼灯关闭，动物触碰有效或无效鼻触均不引起给药或条件相关线索（灯光－声音）或者药物。动物进行消退训练直至触碰有效鼻触的次数降低到基线值的20％以下（基线值为自我给药训练最后3天的均值），且维持至少2天。在由药物本身点燃的消退训练过程中，笼灯开启，动物触碰有效或无效鼻触均不引起给药，但是伴有与自我给药训练期间相同的条件相关线索（灯光－声音）。动物进行消退训练直至触碰有效鼻触的次数降低到基线值的20％以下（基线值为自我给药训练最后3天的均值），且维持至少2天。 4、复燃测试 点燃方式可分为训练期间给药伴随相关线索点燃与药物本身点燃。当动物的觅药行为消退至达到上述标准后，对动物进行给药相关线索复燃测试时，除了触碰有效鼻触不引起给药外，测试时的条件与训练期间相同，测试时间为30分钟，并由电脑同步记录测试期间动物触碰有效或无效鼻触的次数。对动物进行药物本身的复燃测试时，根据药物的起效时间，选择恰当的给药途径提前给与点燃剂量的药物。除了触碰有效鼻触不引起给药外，测试时的条件与训练期间相同，并由电脑同步记录测试期间动物触碰有效或无效鼻触的次数。 自身给药训练注意事项 1.训练前清洁训练箱；
疼痛实验动物模型 科研探索2007-04-25 23:11:36 阅读147 评论0 字号：大中小订阅 疼痛是机制非常复杂的神经活动。疼痛研究已经成为当前神经科学研究的重要课题之一。由于疼痛机制的复杂性，使得在患者身上研究与疼痛有关的神经机制成为不可能的事。因而，我们的研究需要相应的动物模型。本章介绍了在现代神经科学研究中常用的疼痛动物模型。在概要介绍了疼痛研究的意义及其现状之后，重点介绍了在生理痛研究和急性、慢性病理痛研究中所应用的动物模型。生理痛的模型即常用的动物伤害性感受阈测定法；急性病理痛的模型则主要是各种急性炎症模型模型；慢性病理痛的模型则包 括慢性炎症模型和慢性神经损伤模型。 前言 疼痛(pain)是人们一生中经常遇到的不愉快的感觉。它提供躯体受到威胁的警报信号，是生命不可缺少的一种特殊保护功能。另一方面，它又是各种疾病最常见的症状，也是当今困扰人类健康最严重的问题之一。近年来，仅在美国就有三至四千万人患有慢性痛。据估计，美国每年用于治疗慢性痛的费用约为400~600亿美元；澳大利亚每年用于治疗疼痛的费用占全部医疗费用的40%。随着医学的进步和人类生活水平的提高，烈性传染病逐渐得到控制，疼痛在人的身心痛苦和医疗费用消耗上的相对地位将越来越重要。 由于难以在人体对疼痛进行深入的机制研究，有必要建立疼痛的动物模型。但疼痛是是包括性质、强度和程度各不相同的多种感觉的复合，并往往与自主神经系统、运动反应、心理和情绪反应交织在一起，它既不是简单地与躯体某一部分的变化有关，也不是由神经系统某个单一的传导束、神经核和神经递质进行传递的，所以很难将某种客观指标与疼痛直接联系起来。因而，我们只能根据模型动物对伤害性刺激的 保护反应和保护性行为来推测它们的疼痛程度。 伤害性感受(nociception)和痛觉是两个有密切关系但又不相同的概念。前者是指中枢神经系统对由于伤害性感受器的激活而引起的传入信息的加工和反应，以提供组织损伤的信息；痛觉则是指上升到感觉水 平的疼痛感觉。两者之间有时并没有严格的相关性。 生理痛模型与常用的痛阈测定法 概述 为了能够对痛觉现象及其机制作深入细致的观察，特别是在中枢神经系统的形态学、细胞生物学和分子生物学水平研究痛觉机制，必须建立动物的痛觉模型。又由于痛觉是意识水平的感觉，我们无法确定动物是否具有痛觉，只能观察其对伤害性刺激的行为反应。因而在下文的描述中有时用伤害性感受阈 (nociceptive threshold)取代痛阈(pain threshold)。 正常情况下，疼痛是机体对外界伤害性刺激的感受，它是一种报警系统，提示实存的或潜在的组织损伤的可能性。如果这种伤害性刺激是可以回避的，那么痛觉就是一种具有完全的积极意义的感觉形式，称为生理痛。这种意义上的疼痛模型实际上就是对伤害性感受阈的测量。它是通过观察动物对伤害性温度 和机械刺激的逃避反应实现的。 如果动物遇到无法逃避的伤害性刺激，就会引起它的情绪反应，发出嘶叫声。这是需要高级神经中枢配合的反应，并且不受局部运动功能的影响。因而，在伤害性刺激下引起的嘶叫反应也可以作为伤害性 感受阈的测量指标。 热辐射-逃避法 这是最常见的伤害性感受阈测量方式。最常用的有热辐射-甩尾法、热辐射-甩头法和热辐射-抬足法。
在动物模型的制备中是如何选择动物
在动物模型的制备中如何选择动物 摘要：实验动物是活的仪器[1]，是生命科学实验研究中的重要组成部分。医学中的动物实验模型，为现代医学的发展作出了贡献，可以说每一种新的药物的出现和每一种新疗法的诞生，都离不开动物实验模型。动物模型避免了在人身上进行实验所带来的风险，可以严格控制实验条件，增强实验材料的可比性，简化实验操作和样品收集，有助于更全面地认识疾病的本质。要合理正确选择实验动物，了解它们的局限性。为学习研究提供更广阔的思路。 关键词：医学，动物实验，实验动物，动物模型 引言：实验动物学在发展中已形成如下学科：实验动物生物学，实验动物遗传育种学，实验动物环境生态学，实验动物微生物学和寄生虫学，实验动物营养学，实验动物医学，比较医学，中医实验动物学等学科。[2]动物实验的特点是可由实验者根据不同的课题选择动物。制成动物模型，需要作严密的设计，包括目的、对象、方法、对照、随机分组、设定数量、指标、原始记录和统计方法等。医学中的动物实验为现代医学的发展作出了贡献，可以说每一种新的西药的出现和每一种新疗法的诞生，都离不开动物实验。同样，动物实验也为中医、针灸学的发展带来了新的希望。但是，动物实验有它的局限性，不是所有医疗技术都需要进行动物实验，那些已经被临床实验证明有效的医疗方法，就没有必要再用动物实验来证实。由于很多高级动物在生理和病理方面与人类有近似之处，因此可以通过动物实验寻找新的药物和新的疗法。但是人和动物毕竟存在很大差异，动物实验的结果，只能给临床作为参考，而不能代替临床实践。一般情况下，一种新药或新的疗法，能否试用于临床，必须有足够的动物实验依据，但判断这种新药或新疗法是否真正有效，能否推广使用，还必须经受临床实践的检验。通常情况下，动物实验有效，临床实践也有效，但有时两者并不一致。一种疗法，如动物实验证明有效，而临床实践证明无效，就应否定。反过来，临床实践证明有效，而动物实验却无效，自然还应肯定。只是在现代医学当中，大多是动物实验在先，临床实验在后，如动物实验无效的方法和药物几乎都不可能再用于临床实践，而凡能用于临床的药物和方法自然都能得到动物实验的验证。从而给人们造成一种假象，动物实验依据第一重要。然
实验方法总结（3）：动物模型部分 1、研究肿瘤细胞增殖 (1) 2、研究肿瘤细胞转移 (2) 2.1. 体外(浸润模型) (2) 2.2. 体内(转移模型) (2) 3、研究肿瘤细胞耐药 (4) 3.1. 耐药细胞株的建立 (4) 3.2. 裸鼠移植瘤耐药模型的建立 (5) 从肿瘤起源分，肿瘤动物模型的分类如下： 从研究目的来分，可以从增殖、转移、耐药三个角度来分析： 1、研究肿瘤细胞增殖 细胞准备：GeneA敲减慢病毒感染细胞扩增至需要的细胞量。分为：空白对照组、阴性对照组、实验组。 取Balb/c裸鼠，雄性，6周龄，每组10只，适应一周后进行肿瘤细胞注射。
XXX细胞消化离心后制成单细胞悬液，计数后取适量的细胞用PBS悬浮，在Balb/c裸鼠侧腹部皮下接种。每只接种2×106个细胞，注射体积为100 μL。此后，每隔5天测量注射部位肿瘤的体积。30天后裸鼠小鼠腹腔注射80 mg/kg 戊巴比妥钠，小鼠麻醉后置蓝色背景布上拍照（侧卧位，接种部位朝上），小鼠颈椎脱臼处死，取出肿瘤称重，将肿瘤置蓝色背景布上拍照，肿瘤一分为二，一份4%多聚甲醛固定，待后续病理分析，一份-80℃冻存。 2、研究肿瘤细胞转移 肿瘤转移的模型包括两大类：体外(浸润模型)和体内(转移模型)。体外(浸润模型)：了解肿瘤细胞对周围相连组织的侵润性。体内模型主要研究肿瘤细胞的转移性即肿瘤细胞在远端组织形成病灶的能力。 2.1. 体外(浸润模型) 例：浸润型脑胶质瘤动物模型的建立 方法：取若干只Balb/c免疫缺陷裸鼠，将分离和鉴定并转染携带绿色荧光蛋白的脑胶质瘤干细胞立体定向法行小鼠颅内接种，每组10只。小鼠麻醉后头部正中切口，剥离骨膜后钻孔(坐标是冠状缝后0.5 cm，矢状缝右侧2.5 cm) 。取2 μL胶质瘤干细胞以1×104 cells /只小鼠的剂量，经微量注射器缓慢注射入鼠脑纹状体内(深度是2.5 ～3 mm) 。在确定的时间点处死一部分动物进行荧光( 立体荧光显微镜下) 病理证实和比较，同时检查脑胶质瘤干细胞的体内生长特征以及干细胞标志物等。 2.2. 体内(转移模型)
第章实验动物模型 第一节实验动物选择的原则 第二节生物科学研究中的动物模型
实验动物模型 选择什么样的实验动物作实验是生物医学研究工作中一个重要环节，不能随便选用一种实验动物来作科学研究，因为在不适当的动物身上进行实验，常可导致实验结果的不可靠，甚至使整个实验徒劳无功，直接关系到科学研究的成败和质量。事实上，每一项科学实验都有其最适宜的实验动物。
第一节实验动物选择的原则 ?科学研究工作中实验动物的选择，首先应根据实验目的和要求来选择，其次再参考是否容易获得、是否经济，是否容易饲养和管理等情况。 ?在实验动物选择上必须注意三点，即实验动物的种类（Species）；品种（Breed）或品系（Strain）；质量和实验动物的健康状态。
尽量选择与研究对象的机能、代谢、结构及疾病特点相似的实验动物； ?生物医学研究的根本目的是要解决人类疾病的预防和治疗问题。因此，在选择实验动物时应优先考虑的问题是动物的种系发展阶段。在可能的条件下，尽量选择那些机能、代谢、结构和人类相似的实验动物作实验。一般来说，实验动物愈高等，进化愈高，其机能、代谢、结构愈复杂，反应就愈接近人类，猴、狒狒、猩猩、长臂猿等灵长类动物是最近似于人类的理想动物。
第二节生物科学研究中的动物模型 一、动物模型的意义和优越性 ?生物科学研究的进展常常依赖于使用动物模型作为实验假说和临床假说二者的试验基础。人类各种疾病的发生发展是十分复杂的，要深入探讨其疾病的发病机理及疗效机理不能也不应该在病人身上进行。可以通过对动物各种疾病和生命现象的研究，进而推用到人类，探索人类生命的奥秘，以控制人类的疾病的衰老，延长人类的寿命。
痔疮动物模型制作方法的研究<文献综述> 贺鹏程 （商丘师范学院生命科学系 080911-2 班 080911011） 摘要：痔疮是临床最常见的疾病之一，痔的发生，主要是由于静脉壁的薄弱，失去了正常弹性，临床表现为局部炎症、肿痛、便血、脱出等症状。随着痔疮药物的深入研究，动物模型有很好发展和应用，本文分别从痔疮的疼痛、出血、肿胀、炎症等几个方面综述了痔疮动物模型制作方法研究进展，以供参考选用。 关键词：痔疮、模型、小鼠、肿胀、炎症、醋酸、感染 一、关于痔疮 痔疮是临床最常见的疾病之一，痔的发生，主要是由于静脉壁的薄弱，失去了正常弹性，兼因饮食不节，燥热内生，下迫大肠以及久坐、负重、远行等，致使血行不畅，血流淤积，结滞不散而成。临床表现为局部炎症、肿痛、便血、脱出等症状[1]。 痔疮分为内痔、外痔及混合痔三种类型。目前，肛垫滑动学说已被医学专家们接受。即痔的发生，主要是由于静脉壁的薄弱，失去了正常弹性，兼因饮食不节，燥热内生，下迫大肠以及久坐、负重、远行等，致使血行不畅，血流瘀积，结滞不散而成。 随着对“痔是肛垫的病理性肥大和移位”的新认识，越来越多的学者赞同痔的治疗原则是解除症状，而不是消除痔体。因此，痔的现代概念给痔非手术疗法展现了新的运用前景。祖国医学认为，痔病的发生多由饮食不节、风湿热邪下迫大肠，热毒壅结，血热肠燥，结聚不散而成。 近来创建的一批实用性痔疮动物模型具有较多优点，本文简要介绍制备原理和方法，以供参考选用。 二、大鼠巴豆油肛门肿胀模型 巴豆油是一种常用的致炎剂，巴豆油混合液用1份蒸馏水、4份吡啶、5份乙醚和1O 份6％巴豆油乙醚溶液配制。制作模型时把浸吸0．16 mL巴豆油混合液的棉球插入用乙醚浅麻醉的6周龄大鼠肛门内10 S，6 h后放血处死，检测指标：①直肠肛门湿重，切取从肛门皮毛边缘起13—15 mm长的直肠肛门部称湿重，并置于8O℃干热16 h后称取干重，计算直肠肛门系数作为炎症程度指标；②血管通透性，动物处死前30 min静脉注射1％伊文氏兰生理盐水20 mg／kg，测定直肠肛门组织中的伊文氏兰含量，计算占注入量的％，作为评价血管通透性指标。③组织学观察[2]。 该模型对巴豆油混合液用量、棉球插入肛门留置时间、大鼠周龄等致炎条件及致炎后不同时间的指标测定进行动态观察，结果表明，巴豆油涂敷后直线上升的炎症高峰在8 h，直肠肛门湿重与干重呈直线增加，此后至24 h增加减缓。巴豆油涂敷前(即无处理对照)的平均湿重为140 nag，涂敷6 h、24 h后分别增加至340 mg、476 mg，24 h达最高值。涂敷6 h后的湿重为最高时的6o％。探讨巴豆油0．1 mL或0．16 mL的最适起炎时间，用巴豆油0．1 mL 时，随插入时间延长，直肠肛门干、湿重增加，插入60 s重量达最高；用0．16 mL时，插入10 s引起的干湿重达最大值，延长时间反而下降。比较0．1 mL和0．16 mL两种用量时得到的最高重量，与用0．1 mL与60 s相比，用0．16 mL与10 s的刺激条件可达到最高值，故以10 s为最适刺激时间[3]。比较巴豆油0．10 0．19 mL的致炎效果，以0．16 mL