重组门冬酰胺酶II的制备,纯化和测定（中国药科大学1044606李于采薇 1044631王沫力）
摘要：L-天冬酰胺酶（L-asparaginase,L-ASP,EC.3.5.1.1）,又名L-门冬酰胺酶或L-天门冬酰胺酶，商品名为左旋门冬酰胺酶。L-天冬酰胺酶具有显著的抗肿瘤作用，尤其是广泛应用于儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的治疗,其作用机制在于它能够降低人体内L-天冬酰胺
和L-谷氨酰胺的浓度，专一催化L 2天冬酰胺水解成天冬氨酸和氨。大肠杆菌产生无活性的天冬酰胺酶I存在于细胞质中，而有抗癌活性的天冬酰胺酶II则分泌到细胞周质中. 临床上和其它药物合用治疗
淋巴母细胞瘤和恶性白血病. 与普通化疗抗癌药相比,L 2天冬酰胺酶既可抑制癌细胞增殖, 又不伤害正常细胞, 有效地实现了酶的特异抗癌作用, 因而倍受关注. 目前, 国内临床上所用注射L 2天冬酰胺酶, 均从日本、美国进口. 因此在获得优良菌种后, 探讨提高酶产量尤为重要.
实验材料:
CPU 210009菌体，1% TrioX-100，2mmol/LTris-HCl PH8.5，2mmol/L EDTA，引物E1E2，Mgcl2, dNTP,Taq DNA聚合酶
pET28a载体，Ncol, Hind I , ddH2O ,T4DNA连接酶，Taq酶，CaCl2, 溶菌酶，硫酸铵，50mmol/L,ph7.0磷酸缓冲液，ph7.6的磷酸缓冲液，50mmol/L，ph5.2的磷酸缓冲液，0.1mol/L硼酸缓冲液,奈氏试剂，蒸馏水等
1．目的基因的制备
1.1制备模板：
用接种环挑取 E.coli CPU210009菌体少许，在裂解液（1% TrioX-100，2mmol/LTris-HCl PH8.5，2mmol/L EDTA）1ml中振散，95℃加热处理10min吸取5uL作为PCR反应模板。
1.2 PCR反应：
用一对与大肠杆菌门冬酰胺酶Ⅱ基因（ＡｎｓＢ）两侧序列互补的寡核苷酸Ｅ１，Ｅ２作引物，以大肠杆菌野生株ＣＰＵ２１０００９的染色体ＤＮＡ为模板，建立PCR反应体系，并进行PCR反应。
Ｅ１：5’- GGCCATGGAGTTTTTCAAAAAGACGGCACTTGC - 3’Ｅ2: 5’- GGAAGCTTAGACTGATTGAAGATCTGCTGG – 3’模板13.5ul
引物I 0.5ul
引物II 0.5ul
10×buffer 2.5ul
25mM Mgcl2 1.2ul
2.5nM dNTP 1.6ul
Taq DNA聚合酶0.7ul
PCR反应条件：(循环28次)
94°C 1min；60°C 2min ；72°C 1min
注意：
1.PCR产物通过核酸电泳进行初步分子量的观测。
2.然后送样测序，与NCBI中基因序列对比后，得到准确的目的基因片段。
2．重组质粒的构建
2.1载体的制备
购得含pET28a的菌种，LB培养基37°C，200rpm过夜培养后，使用质粒小提试剂盒提取pET28a,并通过核酸电泳检测其分子量。
2.2酶切体系：
PCR产物10ul pET28a 37ul 10×Tango 3ul 10×Tango 5ul NcoI 1.5ul NcoI 4ul HindI 1.5ul HindI 4ul
ddH2O 18ul
注意：ddH2O用于补足反应体系，加入量应根据加入的模板DNA的量进行调节
混匀后，瞬时离心，置于37°C中酶切3h。酶切结束后，迅速将反应产物在45°C水浴中放置5min,再于冰上放置2min冷却，可防止自连。对酶切后的PCR产物和pET28a再次进行纯化，并与第一次纯化前的样品，以及酶切后未纯化的样品一起上核酸电泳检测。
2.3连接
PCR产物14ul
pET28a 3ul
10×ligse buffer 2ul
T4连接酶1ul
将上述混匀后，封口，放置过夜。
3.转化
3.1感受态细胞的制备
取保种的E.coli CPU210009菌体至少500ul,接种于10ml LB液体培养基中,37℃下振荡培养12小时至14小时,直至对数生长后期(相当浑浊)取该菌液100ul接种于液体培养基中,37℃振荡培养1.5小时至OD600=0.4左右，将菌液分装于1.5ml EP管中,冰上放置15分钟,后迅速于4℃下5000g离心10分钟,弃去上清,用预冷的的0.1M CaCl2溶液400ul轻轻悬浮细胞,冰上放置30分钟后, 4℃下5000g 离心10分钟,弃去上清，加入预冷的含0.1M 的CaCl2溶液80ul轻轻悬浮细胞，冰上放置5分钟，即成感受态细胞悬液。
3.2将重组质粒转入感受态细胞
取1ml感受态细胞，冰上放置10到15分钟，加入待转化的质粒（每200ul感受态细胞加入质粒体积不超过10ul），轻轻放置45分钟。随后，在42℃水浴中热击90秒，热击后迅速置于冰上冷却5分钟。加入1mlLB液体培养基，混匀后37℃震荡培养1小时后，5000转10分钟离心。将菌液弃去500ul上清，剩余500ul摇匀后，涂布于含氨苄西林的固体LB平板上，要不停涂抹直至菌液完全被吸干，后盖上盖子，培养基面向上，37℃培养12-18小时。通过平板的抗性筛选，得到具有抗性的重组质粒转
化的E.coli CPU210009单菌落。
3.3阳性重组子的筛选
将涂布在含有氨苄青霉素的LB平板上长出的单菌落用牙签逐个挑入方格化的新鲜LB培养基上，为每个克隆编号。平板37°C温箱中过夜，待菌落形成后用灭菌牙签逐个挑选少量菌体，移入预先加有0.1mmol/L硼酸缓冲液（ph 8.4）50ul的酶标板反应孔里，待菌体分散后每孔加入0.04mmol/L天门冬酰胺底物溶液50ul，37°C保温15min，加入奈氏试剂50ul，呈深红棕色孔内相应的单菌落即为阳性转化子。
3.4发酵培养：
配制培养基：
牛肉膏5g
蛋白胨10g
NaCl 5g
琼脂15-20g
水1000ml
PH 7.41
高压蒸汽灭菌20分钟
筛选后呈阳性的重组工程菌于斜面培养基上培养24h,温度保持37℃。
菌种经过斜面培养后，接种到液体培养基中，于37℃、250r/min下摇瓶培养16h。
4.重组酶的分离纯化：
4．1蔗糖溶液抽提
将菌体悬浮于破壁液( 45%蔗糖, 10 mmol/ L EDTA, 200 mg/ L 溶菌酶) 中, 在30℃搅拌70 min 后搅拌下倾入大量水中, 加入MnCl2沉淀菌体碎片和核酸, 离心, 取上清液即得酶提取液。
4.2硫酸铵分级沉淀和乙醇分级沉淀
酶提取液中加入硫酸铵至55% 饱和度, 离心除去沉淀, 上清液中加入硫酸铵至90%饱和度, 离心收集沉淀, 沉淀物使溶解并透析脱盐。脱盐酶液中加入乙醇至33%( v/ v) , 离心除去沉淀的杂蛋白, 上清液部分加乙醇至40%( v/ v) , 得沉淀A。沉淀A 部分用50 mmol/L PBS( pH6. 4) 悬浮, 离心后于上清液中加乙醇至45%( v/ v) , 得沉淀B, 沉淀B 用5 mmol/L PBS( pH6.4) 溶解即得纯度较高的酶。
4.3 DEAE-纤维素柱层析分离
DEAE-纤维素DE52柱4.5×30 cm, 经5 mmol/L PBS( pH6.4) 平衡后上样, 用相同缓冲液洗涤至基线平稳, 改用50 mmol/L PBS( pH6.4) 洗脱, 收集显示酶活性组分, 冷冻干燥后即得高纯度的L-门冬酰胺酶Ⅱ冻干粉。
离子交换分离条件：在用DEAE-纤维素DE52层析时, 大部分杂质不被交换吸附。只要用5 mmol/ L PBS 洗脱, 就可除去大部分杂质, 被吸附住的杂质用50 mmol/ L PBS难以洗脱, 故可得到高纯度的产品。
5.酶活力测定：
（一）标准曲线的制作：：取6只试管按下表操作：
（二）样品的测定：
1.精确称取样品5mg（如效价高可减少）左右置乳钵中，加5ml （先加少量）PH8.4硼酸-硼酸钠缓冲液研磨至完全溶解。再用上述缓冲液稀释至大约4000倍。
2.取0.04mol/L的L-门冬酰胺1ml，0.1mol/L PH8.4硼酸-硼酸钠缓冲液1ml，酶液0.2ml于试管中，于37℃水浴保温10min，加15%三氯乙酸0.5ml终止反应，经4000r/min离心15min，取上清液1ml，加奈氏试剂2ml和蒸馏水7ml，放置15min后于500nm波长比色测定生成的氨。在上述条件下，每分钟催化L-门冬酰胺水解释放1μmol氨的酶量定义为1个酶活力单位。
酶活力（μ/ml）=【样品的氨浓度（mol/ml）- 对照的氨浓度（mol/ml）】/（3*10^3）
参考文献
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[5]乐薇,孙小梅,李步海, 大肠杆菌的培养及L 2天冬酰胺酶活力的测定,中南民族大学学报2003年9月
中国药科大学药物分析期末试卷（B卷） 2016～2017学年第一学期 专业药学专业药物分析方向班级学号姓名 核分人： 一、选择题（共15分） (最佳选择题) 每题的备选答案中只有一个最佳答案(每题1分) 1. 中国药典主要内容包括：( ) A 正文、含量测定、索引 B 凡例、制剂、原料 C 鉴别、检查、含量测定 D 前言、正文、附录 E 凡例、正文、附录 2. 日本药局方与USP的正文内容均不包括( ) A.作用与用途 B.性状 C.含量规定 D.贮藏 E.鉴别 3. 按药典规定, 精密标定的滴定液(如氢氧化钠及其浓度)正确表示为( ) A.氢氧化钠滴定液(0.1520M) B.氢氧化钠滴定液 (0.1524mol/L) C 氢氧化钠滴定液(0.1520M/L) D. 0.1520M氢氧化钠滴定液 E. 0.1520mol/L盐酸滴定液 4、药物中氯化物杂质检查的一般意义在于它( ) A. 是有疗效的物质 B. 是对药物疗效有不利影响的物质 C.是对人体健康有害的物质 D. 是影响药物稳定性的物质 E.可以考核生产工艺和企业管理是否正常
5. Ag-DDC 法是用来检查 ( ) A. 氯化物 B. 硫酸盐 C. 硫化物 D. 砷盐 E. 重金属 6. 采用碘量法测定碘苯酯含量时，所用的方法为 ( ) A. 直接回流后测定法 B. 碱性还原后测定法 C. 干法破坏后测定法. D. 氧瓶燃烧后测定法 E. 双氧水氧化后测定法 7. 四环素类药物在碱性溶液中，C 环打开，生成 ( ) A. 异四环素 B. 差向四环素 C. 脱水四环素 D. 差向脱水四环素 E. 配位化合物 8. 甾体激素类药物鉴别的专属方法为 ( ) A. UV B. GC C. IR D. 异烟肼法 E. 与浓硫酸反应 9. 药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是 ( ) A ．维生素A B ．维生素B 1 C ．维生素C D ．维生素D 10. 中国药典2000年版测定维生素E 含量的内标物为 ( ) A.正二十八烷 B.正三十烷 C.正三十二烷 D.正三十烷 E.十六酸十六醇酯 11. 加入氨制硝酸银后能产生银镜反应的药物是 ( ) A.地西泮 B.阿司匹林 C.异烟肼 D.苯佐卡因 E.苯巴比妥 12. 坂口(Sakaguchi)反应可用于鉴别的药物为 ( ) A. 雌激素 B. 链霉素 C. 维生素B 1 D. 皮质激素 E. 维生素C 13. 维生素A 采用紫外分光光度法测定含量，计算公式中换算因子为 ( ) A ．效价(IU/g) B ．效价(g/IU) C ．(g/IU)1% cm 1效价E D ．1% cm 1(IU/g)E 效价 E ．(IU/g)1% cm 1效价E
中国药科大学药物分析期末试卷（A卷） 2007-2008学年第一学期 专业药学专业药物分析方向班级学号姓名 人： 得分评卷人一、填空题（每空0.5分，共15分） 1、非盐酸盐药物在生产过程中也可能引入的氯离子，氯离子对人体_______，但它能反映药物的_______及生产过程_______，因此氯化物常作为_______杂质检查。药物中的微量氯化物检查的条件是在______比色管中，在_________条件下与__________反应，生成氯化银胶体微粒而显白色浑浊，与一定量的_____________溶液在相同条件下产生的氯化银浑浊程度比较，判定供试品中氯化物是否符合________规定。比较时，比色管同置______背景上，从比色管__________观察，比较，即得。氯化物浓度以50ml中含_________μg的Cl-为宜，此范围内氯化物所显浑浊度明显，便于比较。供试品溶液如不澄清，应________；如带颜色，可采用____________解决。 2、药品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应检测要求。建立药品质量标准时分析方法需经验证。验证内容有：_________、__________、__________、__________、_________、 _________、_________、_________。HPLC法进行药物分析测定时系统适用性试验的目的是________________；系统适用性试验的常见内容有：_________、__________、___________、___________。 3、砷盐的检查时，有机结合的砷通常须经 ______________________处理：取规定量的供试品与_________或氢氧化钙、硝酸镁共热转化为_________后，依法检查。操作中应注意炽灼温度不宜超过700℃。
第一大题：命名题 第二章 1 CH 3CH(C 2H 5)CH(CH 3)CH 2CH 32 (CH 3)2CHCH 2CH(CH 3)2 3 CH 3CH 2CHCH(CH 3)2 CH(CH 3)2 4 CH 3CH 2CH 2CHCH 2CH 2CHCH 3 5 (C 2H 5)4C 6 CH 3CH 2CH 2CHCHCH 2CH 2CH 2CH 3 CH(CH 3)2 CH 2CH 2CH 2CH 2CH 3 7 CH 3 CH 3CH 2CCH 3 CH 3 8 9 10 Cl 第三章 1 C C (CH 3)2CH CH 3CH 2 H 2CH 2CH 32 C C H C H 3CH 3 CH 2Cl 3 C C CH 3CH 2 H H CH 2CH 2CH 3 4 (CH 3)3CCH CH 2 第四章
1 CH CH 2Br H C 2H 5 2 H Cl C 2H 5 CH 3H CH 2Cl 3 CH 3 Cl H Br C 2H 5 H 4 CH 3 H H H Cl Br Br C 2H 5 1 CH 3CHCHCH 2CH 2CH 3 Br CH 2Cl 2 CH 2CH 2CHCHCHBr 2Br CH 3 CH 3 3 (CH 3)2CHCCH(CH 3)2 CH 3 Cl 4 CH 3 Cl Cl Cl CH 3H 5 Br H 3 6 CH 3 H H Cl Br CH 2CH 2CH 3' 第五章
1 C CH 2CH 2CH 2OH 2 CH 2CHCHCHCH 3 CH 2CH 2CH 3 OH 3 H H OH CH 2CH 3 4 CH 3 OH OH H H CH 2CH 3]5 OCH 2CH CH 2 CH 3 CH 3 6 OH CH 3 CH 3 OH H 5C 2 7 CH 3CH CHCHCHCH 2CH 3 2OH Cl CH 3CH 3 8 CH 2CH 2CHCH 2CH 3OH CH 2OH 1 Cl CH 3CH 3 2 H 3C H 33 CH 3 CH 3 4CH 3 第六章
糖的化学 一、填空题 1．糖类是具有__多羰基醛或多羟基酮___结构的一大类化合物。根据其分子大小可分为____单糖___、_寡糖_____和_多糖____三大类。 2．判断一个糖的D—型和L—型是以__离羰基最远的一个不对称___碳原子上羟基的位置作依据。 3．糖类物质的主要生物学作用为__主要能源物质___、__结构功能___、_多方面的生物活性和功能____。4．糖苷是指糖的___半缩醛或半缩酮羟基__和醇、酚等化合物失水而形成的缩醛(或缩酮)等形式的化合物。5．蔗糖是由一分子__葡萄糖___和一分子_果糖____组成，它们之间通过_α，β-1，2_糖苷键相连。 6．麦芽糖是由两分子_葡萄糖____组成，它们之间通过__ a-1，4___糖苷键相连。 7．乳糖是由一分子___葡萄糖__和一分子_半乳糖____组成，它们之间通过___β—1，4_糖苷键相连。 8．糖原和支链淀粉结构上很相似，都由许多___葡萄糖__组成，它们之间通过_α—1，4和α—1，6____ _二种糖苷键相连。二者在结构上的主要差别在于糖原分子比支链淀粉___分支多__、链短_____和_结构更紧密____。 9．纤维素是由___葡萄糖__组成，它们之间通过β—1，4糖苷键相连。 12．人血液中含量最丰富的糖是___葡萄糖糖原__，肝脏中含量最丰富的糖是__肝糖原___，肌肉中含量最丰富的糖是__肌糖原___。 13．糖胺聚糖是一类含_糖醛酸____和__氨基已糖及其衍生物___的杂多糖，其代表性化合物有_透明质酸__、_肝素_和_硫酸软骨素等。----粘多糖 14．肽聚糖的基本结构是以_ N—乙酰—D—葡糖胺____与_ N—乙酰胞壁酸____组成的多糖链为骨干，并与＿__四__肽连接而成的杂多糖。 15．常用定量测定还原糖的试剂为_菲林____试剂和__班乃德___试剂。 16．蛋白聚糖是由__蛋白质___和_糖胺聚糖____共价结合形成的复合物。 19．脂多糖一般由_外层低聚糖链____、_核心多糖____和__脂质___三部分组成。 20．糖肽的主要连接键有__O-糖苷键___和_N-糖苷键 21．直链淀粉遇碘呈__蓝___色，支链淀粉遇碘呈_紫红____色，糖原遇碘呈_红____色。 二、是非题 1．D-葡萄糖的对映体为L-葡萄糖，前者存在于自然界。 2．人体不仅能利用D-葡萄糖而且不能利用L-葡萄糖。 3．同一种单糖的。α型和β型是异头体(anomer)，它们仅仅是异头碳原子上的构型不同 4．糖的变旋现象比旋光度改变 6．由于酮类无还原性，所以酮糖亦无还原性。 7．果糖是左旋的，因此它属于L－构型。 8，D-葡萄糖，D-甘露糖和D-果糖生成同一种糖脎。--差向异构 9．葡萄糖分子中有醛基，它和一般的醛类一样，能和希夫(Schiff)试剂反应。成半缩醛 10．糖原、淀粉和纤维素分子中都有一个还原端，所以它们都有还原性。分子太大不显还原性，多糖都是非还原性糖 11．糖链的合成无模板，糖基的顺序由基因编码的转移酶决定。 12．从热力学上讲，葡萄糖的椅式构象比船式构象更稳定。 13．肽聚糖分子中不仅有L-型氨基酸，而且还有D-型氨基酸。 14．一切有旋光性的糖都有变旋现象。有α和β异构体的糖才有变旋现象 15．醛式葡萄糖变成环状后无还原性。半缩醛羟基，仍有还原性 16．多糖是相对分子质量不均一的生物高分子。 17．α淀粉酶和β淀粉酶的区别在于α淀粉酶水解α－1，4糖苷键，β—淀粉酶从链的非还原端开始，每次从淀粉分子上水解下两个葡萄糖基，产物为极限糊精和麦芽糖。
分析化学 第一部分误差和分析数据处理 Accuracy:准确度。测最值与真实值接近的程度（用误差表示)。 Precision:精密度：测定条件相同时，一组平行测定值之间相互接近的程度（用偏差来表示）。 偏差：测量值与平均值之差。 Absolute error:绝对误差。测量值与真实值之差。 方法误差：用于不适当的实验设计或所选方法不恰当所引起的误差。 仪器或试剂误差：由于仪器未经过校准或试剂不合规格所引起的误差。 操作误差：由于分析者操作不符合要求所造成的误差。 Relative error:相对误差。绝对误差与以实值的比值。 Systematic error:系统误差。由某种确定原因引起的误差，一般具有固定的方向和大小，重复测定时重复出现。 恒定误差：在多次测定中绝对值保持不变，但相对值随被测组分的含量增大而减少，这种系统误差叫恒定误差。 比例误差：在多次测定中，绝对值随样品量的增大而成比例的增大，但相对值保持不变，这样的系统误差叫做比例误差。 Accidental error:偶然误差。也叫随机误差，是由于偶然的原因引起的误差。 Significant figure有效数字：指在分析工作中实际能测量到的数字（保留1位欠准数字）。 置信区间：在一定置信水平时，以测量结果为中心，包括总体均值在内的可信范围。 相关系数：描述两个变量间相关性的参数。 显著性检验：用于判断某一分析方法或操作过程中是否存在较大的系统误差和偶然误差的检验。包括t检验和F检验。
第二部分容量分析法 Titer滴定度:指每毫升标准溶液相当于的待测组分的质量。 酸碱：凡能给出质子的物质是酸，能接受质子的物质是碱。 酸的浓度：在一定体积的溶液中含某种酸溶质的量称为酸的浓度。 碱的浓度：在一定体积的溶液中含某种碱溶质的量称为碱的浓度。 酸度：溶液中氢离子的浓度，严格讲是氢离子的活度，用pH表示。 碱度：溶液中氢氧根离子的浓度，严格讲是氢氧根离子的活度，用pOH表示。 电荷平衡：指在一个化学平衡体系中正离子带电荷总和与负离子带电荷总和相同，即溶液是电中性的。material balance质量平衡：也称为物料平衡，是指在一个化学平衡体系中某一组分的分析浓度等于该组分各种存在型体的平均浓度之和。 电荷平衡式：是指在一个化学平衡体系中正离子带电荷总和与负离子带电荷总和的数学表达式。 质量平衡式：是指在一个化学平衡体系中某一组分的分析浓度等于该组分各种存在型体的平均浓度之和的数学表达式。 Autoprolysis reaction溶剂的质子自递反应：在溶剂分子间发生的质子转移反应。 酸碱滴定曲线：在酸碱滴定中，以滴定过程中溶液的pH的变化对滴定剂消耗的体积（或滴定体积百分数）作图即酸碱滴定曲线。 缓冲溶液：由弱酸及其共轭碱或由弱碱及其共轭酸组成的具有一定PH范围缓冲能力的溶液。 分布系数:溶液中某种酸碱组分的平衡浓度占其总浓度的分数。 副反应系数：每种物质存在型体浓度占各种物质存在型体浓度总和比值的倒数，称为副反应系数。Proton balance equation质子条件式：酸碱反应达到平衡时，酸失去的质子数等于碱得到的质子数。Acid-base indicator酸碱指示剂；是一些有机弱酸和弱碱及其共轭酸与其共轭碱具有不同的结构，显现不同的颜色。 Colour change interval 指示剂的变色范围：酸碱指示剂的变色范围指酸碱指示剂发生颜色突变的pH 范围。 酸碱滴定突跃和突跃范围：在酸碱滴定过程中，溶液PH值的突变称为滴定突跃，突跃所在的PH范围为突跃范围。 反滴定法：又称剩余滴定法或回滴定法，当反应速度较慢或者反应物是固体的情形，滴定剂加入样品后反应无法在瞬间定量完成，此时可先加入一定量的过量标准溶液，待反应定量完成后再用另一种标准溶液作为滴定剂滴定剩余的标准溶液，称为反滴定法。 置换滴定法：对于不按照确定化学计量关系反应的物质（如有副反应），有时可通过其他化学反应间接进行滴定，即加入适当试剂与待测物质反应，使其被定量的置换出另外一种可直接滴定的物质，用标准溶液滴定此生成物，称为置换滴定法。 Stoichiometric point化学计量点：当化学反应按计量关系完全反应，即滴入标准溶液物质的量与待测组分物质的量恰好符合化学反应式所表示的计量关系，称反应达到了化学计量点.。 滴定终点：滴定分析中，借助指示剂变色来确定化学计量点到达，故指示剂的变色点称为滴定终点.。标定：用配置溶液滴定基准物质来计算其准确浓度的方法称为标定。 对标：用另外一种标准溶液滴定一定量的配制溶液或用该溶液滴定另外一种标准溶液来确定其浓度的方法。 Titration error滴定误差：由滴定终点与化学计量点不相符合引起的相对误差。 Nonaqueous titrations:非水滴定法。在非水溶剂中进行的滴定分析法称为非水滴定法。 Protonic solvent:质子溶剂。能给出质子或接受质子的溶液称为质子溶剂。 Aprotic solvent:非质子溶剂。分子中无转移性质子的溶剂称为非质子溶剂。
《药物色谱分析》复习重点 第三章 气相色谱法 1. 了解气相色谱法的特点及分类； 2. 气相色谱的固定液 （1）对固定液的要求 （2）样品组分与固定液之间的分子作用力的种类 （3）固定液的极性与分离特性评价，主要掌握Rohrschneider 常数，了解McReynolds 常数 （4）固定液的分类，掌握几种常见固定液如聚二甲基硅氧烷类、聚苯基甲基硅氧烷类、氰烷基聚硅氧烷类和聚乙二醇的特点及使用分析对象。 （5）气相色谱中如何选择固定液 3、气-液色谱柱气相色谱法 （1）气-液色谱柱气相色谱法中对担体的要求； （2）使用前担体的表面处理的原因及方法，其中担体表面处理时釉化的目的是什么？ （3）填充柱的老化的目的、方法及注意事项 4.气-固色谱与气-液色谱的特点比较 5. 毛毛细细管管柱柱气气相相色色谱谱法法 （1）毛细管柱的柱管使用聚酰亚胺涂层的原因及作用 （2）交联毛细管柱的特点及常用交联方法，毛细管气相色谱柱交联引发剂主要有哪些？
（3）毛细管柱进样方式，掌握分流及吹尾气目的。 （4）分流比及测定方法；线性分流与非线性分流及影响样品失真的因素。 （5）分流进样法的优缺点。 第四章气相色谱检测器 气相色谱检测器的种类及其原理、性能特点（主要FID、 ECD、NPD） 第五章气相色谱相关技术 1.程序升温色谱法 （1）特点 （2）主要方式及适用对象 2.顶空气相色谱法 （1）特点、分类 （2）静态顶空分析的原理及影响静态顶空气相色谱分析的因素 （3）动态顶空分析的原理及动态顶空法操作条件选择 第六章GC在药物分析中的应用 1. 如何判断待测物是否可以直接进行GC分析 2. 哪些化合物经过衍生化后可以进行GC分析
选择题Ⅰ： 1. 下面四个同分异构体中哪一种沸点最高? (A) 己烷 (B) 2-甲基戊烷 (C) 2,3-二甲基丁烷 (D) 2,2-二甲基丁烷 2. 下列环烷烃中加氢开环最容易的是: (A) 环丙烷 (B) 环丁烷 (C) 环戊烷 (D) 环己烷 3. 光照下,烷烃卤代反应的机理是通过哪一种中间体进行的? (A) 碳正离子 (B) 自由基 (C) 碳正离子 (D) 协同反应,无中间体 4. 1-甲基-4-异丙基环己烷有几种异构体? (A) 2种 (B) 3种 (C) 4种 (D) 5种 5. 在下列哪种条件下能发生甲烷氯化反应? (A) 甲烷与氯气在室温下混合 (B) 先将氯气用光照射再迅速与甲烷混合 (C) 甲烷用光照射,在黑暗中与氯气混合 (D) 甲烷与氯气均在黑暗中混合 6. 下列一对化合物是什么异构体? (A) 非对映体 (B) 构型异构体 (C) 对映体 (D) 构造异构体 7. 与 相互关系是: (A) 对映体 (B) 非对映体 (C) 构型异构体 (D) 构造异构体 8. 下列化合物中哪些可能有顺反异构体? (A) CHCl =CHCl (B) CH 2=CCl 2 (C) 1-戊烯 (D) 2-甲基-2-丁烯 9．构造式为CH 3CHClCH =CHCH 3 的立体异构体数目是: (A) 2种 (B) 4种 (C) 3种 (D) 1种 10．下列化合物中哪些可能有E ,Z 异构体? (A) 2-甲基-2-丁烯 (B) 2,3-二甲基-2-丁烯 (C) 2-甲基-1-丁烯 (D) 2-戊烯 11．实验室中常用Br 2的CCl 4溶液鉴定烯键,其反应历程是: (A) 亲电加成反应 (B) 自由基加成 (C) 协同反应 (D) 亲电取代反应 12．(CH 3)2C =CH 2: (A) (CH 3)2CHCH 2Cl (B) (CH 3)2CClCH 3 (C) CH 3CH 2CH 2CH 2Cl (D) CH 3CHClCH 2CH 3 13． CF 3CH =CH 2: (A) CF 3CHClCH 3 (B) CF 3CH 2CH 2Cl (C) CF 3CHClCH 3 与 CF 3CH 2CH 2Cl 相差不多 (D) 不能反应 14．CH 3CH =CH 2 + Cl 2 + H 2: (A) CH 3CHClCH 2Cl + CH 3CHClCH 2OH (B) CH 3CHOHCH 2Cl + CH 3CHClCH 2Cl (C) CH 3CHClCH 3 + CH 3CHClCH 2OH (D) CH 3CHClCH 2Cl 15．某烯烃经臭氧化和还原水解后只得 CH 3COCH 3,该烯烃为: (A) (CH 3)2C =CHCH 3 (B) CH 3CH =CH 2 (C) (CH 3)2C =C(CH 3)2 (D) (CH 3)2C =CH 2 16．CH 3CH =CHCH 2CH =CHCF 3 + Br 2 (1 mol) 主要产物为: (A) CH 3CHBrCHBrCH 2CH =CHCF 3 (B) CH 3CH =CHCH 2CHBrCHBrCF 3 (C) CH 3CHBrCH =CHCH 2CHBrCF 3 (D) CH 3CHBrCH =CHCHBrCH 2CF 3 17．异戊二烯经臭氧化,在锌存在下水解,可得到哪一种产物? (A) HCHO + OHCCH 2CHO (B) HCHO + HOOCCH 2COOH (C) HCHO + CH 3COCHO (D) CH 3COCHO + CO 2 + H 2O 18．下列化合物中哪一个能与顺丁烯二酸酐反应,生成固体产物? (A) 萘 (B) CH 3CH 2CH =CH 2 (C) (D) 对二甲苯 19．二氯丙烷可能的异构体数目有多少? (A) 2 (B) 4 (C) 6 (D) 5 H CH 3CH 3 H H CH 3CH 3CH 3CH 3H CH H CH 3
选择题出题点： 20种氨基酸各自的特点和碱基 蛋白质，核酸变性的特点 测定蛋白质含量与分子量的方法原理 各类连接键，结构稳定的键 二级结构特点 PI的计算，氨基酸解离分析 分析方法原理：凝胶层析，电泳，离子交换等 单抗，多糖，疾病原因 酶活力，比活力，Km，(非)竞争性抑制动力学效应 代谢：限速酶，场所，转运，重要联系点代谢物 抑制剂，呼吸链，限速酶 过程：EMP,TCA,尿素循环，β氧化 血浆脂蛋白种类作用 名词解释 蛋白质等电点蛋白质变性核酸的增/减色效应 Tm α螺旋β折叠DNA双螺旋结 构tRNA的三叶草结构碱基互补原则 蛋白质的结构域蛋白质的超二级结构米氏常数米氏方程变构酶变构效酶活 力固定化酶同工酶酶的活性中心 必需基团酶的竞争性抑制生物氧化呼吸链氧化磷酸化底物水平磷酸化粘多 糖TCA循环乳酸循环糖异生作用 酮体必需脂肪酸必需氨基酸β氧化尿素循环转氨基作用联合脱氨基作用一碳单位半保留复制遗传中心法则 遗传密码冈崎片断转录逆转录基因表达核蛋白体循环抗代谢物基因工程药物生物技术药物生物药物 单克隆抗体基因文库cDNA文库核酸的杂交分子病基因敲除DNA芯片核酸复性蛋白质印迹亲和层析 离子交换层析凝胶过滤 问答（有些和名解重复） 蛋白质的二级结构 DNA的双螺旋结构 固定化酶的概念制备方法及优点 β氧化与脂肪酸合成的比较 乙酰CoA的来源去路及在细胞内的定位 青霉素的抗菌机制 磺胺药与抗菌增效剂的抗菌机制 现代生物技术的定义主要内容及在新药研究开发中的应用 哪些生化研究成果应用于新药设计研究 酶催化高效率的因素及基本原理 糖在体内主要代谢途径及生理意义 糖酵解与糖异生的比较 酮体的生成利用及意义 尿素循环过程，特点及意义 大肠杆菌DNA复制过程 RNA转录过程 重组DNA技术概念过程及应用
中国药科大学药物化学考研药物化学药物化学 精编 Document number：WTT-LKK-GBB-08921-EIGG-22986
中国药科大学2006年药物化学期末试卷 一、名词解释（每小题4分，共12分） 1.抗高血压药 2.抗代谢抗肿瘤药 3.四环素类抗生素 二、填空题(每空1分，共16分) 1.卡托普利的结构式为_____化学名是_____其主要用途为 __________。 2.镇静催眠药按化学结构的不同,可分为_____类_____类和 其他类型。 3.对乙酰氨基酚的结构式是_____。 4.吗啡分子结构中因具有_____及_____,因而显酸碱两性。 5.盐酸麻黄碱的主要用途是_____。 6.顺铂临床用于__________。 7.环磷酰胺临床使用的剂型为_____。 8.林可霉素的主要用途是__________。 的结构式为_____。 10.孕甾烷的基本结构式是_____。 11.对氨基水杨酸钠临床用途是_____。 12.克霉唑的临床用途为_____。
三、单项选择题(在每小题的五个备选答案中，选出一个正 确答案，并将正确答案的序号填在题干的括号内。每小题2分，共36分) 1.可与吡啶-硫酸铜试液作用显绿色的药物是( )。 A.苯巴比妥 B.苯妥英钠 C.硫喷妥钠 D.氯丙嗪 E.安定 2.下列药物中哪一个具有吩噻嗪环结构( ) A.氨甲丙二酯 B.舒宁 C.苯巴比妥 D.氯丙嗪 E.安定 3.苯巴比妥的化学名是( )。 乙基-6-苯基-2，4，6-嘧啶三酮 氯-5-甲基-1-甲酰胺 乙基-5-苯基-2，4，6-（1H，3H，5H）嘧啶三酮 氯-5-甲基-1-哌嗪乙醇 ，5-二苯基-2，4-咪唑烷二酮钠盐 4.在阿司匹林合成中产生的可引起过敏反应的副产物是 ( )。 A.乙酰水杨酸酐 B.吲哚 C.苯酚 D.水杨酸苯酯
第十二章原子吸收分光光度法 一、填空题 1、外层电子；第一激发态；共振吸收线；共振线； 2、32S1/2；32P1/2，32P3/2； 3、光源、原子化器、单色器和检测系统； 4、共振线； 5、电离干扰、物理干扰、光学干扰和化学干扰。 6、主量子数n、角量子数l、自旋量子数n、内量子数j。 7、频率、半宽度、强度。 二、选择题 AAB AAB 三、简答题 1、主要有Doppler线宽、Lorentz线宽、Holtsmark线宽和自然宽度。在通常的原子吸收分光光度法条件下，吸收线线宽主要由Doppler变宽和Lorentz变宽控制，当局外元素浓度很小时，吸收线线宽主要由Doppler变宽控制。 2、特点：灵敏度高。选择性好。精密度高。测量范围广。 局限性：标准曲线的线性范围窄。测一种元素要使用一种元素灯，使用不方便。 3、（1）锐线光源、（2）发射线最大发射波长和吸收线的最大吸收波长必须重叠。 第十三章红外分光光度法 第十四章核磁共振波谱法 一、填空题 1、ν 照 = ν 进 △m=+ 1 2、一级；高级；△ν/J > 10 3、化学位移，偶合常数 4、局部抗磁屏蔽；磁各相异性 5、自旋－自旋偶合；偶合常数 6、2 7、3 8、无线电波、核自旋能级分裂、1/2 9、7.17 10、中心位置，峰裂距 11、屏蔽效应，各向异性效应，氢键
12、2 13、氢分布； 质子类型； 核间关系 二、选择题 ACCDD DBACB CD 三、简答题 1、所谓磁全同质子是指这些质子化学位移、与组外任何一核的偶合强弱相同，它们在核磁共振谱上不产生分裂 ，例如： 2、烯烃处于C=C 双链的负屏蔽区，δ增大。炔烃处于C ≡C 地正屏蔽区，δ减小 3、（1） 12个氢处于完全相同的化学环境，只产生一个尖峰； （2）屏蔽强烈，共振频率最小，吸收峰在磁场强度高场，与有机化合物中的质子峰不重迭； （3）化学惰性；易溶于有机溶剂；沸点低，易回收。 四、解谱题 1、 CH3COCH2COOCH2CH3 2、 3、C 6H 5-C(CH 3)=CH-COOH 4、 偶合系统为： AMX3系统 可能结构为：CH3–CH CH-COOH 5、 CH H 3C CH 3 6、CH 3CH 2I 7、 C C C H H H H H H O (1)(2)(3)(4)(5)(6) C O H H 3C O
中国药科大学研究生入学考试药物分析复试题汇总 A.10年药分复试 共十道大题，考3h 1.为什么要进行砷盐检查？砷盐检查方法有哪些及装置 2.复方。。包括丹参、冰片、三七，及各自特征成分及如何进行质量控制？含量测定 3.光谱题：苯佐卡因，画出氢谱和碳谱 二维谱中HMBC、HMQC 、NOESY、ROESY 名词解释 4.色谱分析，确定所用色谱分析方法（多为书中例题)，考过 二甲双胍、硝酸异山梨酯、好像还有个多糖 5.质谱离子化方法有哪些，各自特点，有哪些质谱仪（）如离子肼 6.好像还有个关于青霉素杂质的检查 实验与专外 1.配流动相 2.画下FID检测器及气化室 3.阿司匹林分析挑错，水解后剩余滴定法。 4.英文翻译（）基本都为药物分析方向期末考试所用专外书上内容 B.08年药分复试 一、单选 二、多选 三、问答题 1.盐酸伪麻黄碱的质量控制项目应有哪些，各自目的，并各自简述一种合适的控制方法及简要步骤、 2.抗生素类药物的分类，其含量测定方法与化学分析方法有何区别 3.按色谱条件选对应物质 条件一：ODS柱...，流动相：庚烷磺酸钠的磷酸缓溶液：水（）2:98） 条件二：ODS柱....，流动相：甲醇：水：冰醋酸，254nm; 条件三：ODS柱....，流动相：乙腈：水 （72:28）; 条件四：ODS柱....，流动相：甲醇：水（20:80）； 物质：柴胡皂苷，二氟尼柳，醋酸甲地孕酮，CH3N(CH3)2RCOO 4.(1)盐酸普萘洛尔含量测定方法？方程式？滴定度
（2）用ODS柱时拖尾的原因？解决方法？ （3）盐酸普萘洛尔，...普萘洛尔,.......普萘洛尔出峰顺序。 5.尼可刹米 （1） （2）IR峰归属，振动形式，3032cm 1,2975,1685,1589,1570,1465,1210,1120,711(3)NMR峰归属 偶合裂分原因，图中化学位移：9.0；7.0；3.0；1.0；0； （4）C13谱：10个峰，a j,J=0 指出对应C，及原因 （5）质谱：m/z 178;177;163;150;28;51;78;106（基峰），裂解方程式 6.什么是GC衍生化？特点（目的）？写出三种衍生化方程式 7.系统适应性试验包括？各自标准。计算公式 8.（1）上海华联制药厂 （2）欣弗 （3）梅花K （4）齐二药 以上各自事件的药物？原因，谈谈对药物质量控制的具体措施。 C.07年药物分析复试题 一、选择题（20'） 二、克伦特罗相关问题（60’） 三、克伦特罗的作用（0结构式已给出） 请推测克伦特罗的紫外吸收的特征峰位？ 请画出克伦特罗的大概的H NMR和C NMR 请推测克伦特罗的红外光谱的主要峰归属 请推测克伦特罗的主要质谱裂解方式 三、其他（70） 制剂分析的检查项目 多种药物色谱条件的选择？包括柠檬烯、龙脑、依那普利、VE以及二甲双胍。只需写出是采用GC还是LC，以及检测方式。为什么 色谱适应性考察项目有哪些 还不全，就记得这么多了10年药分复试 共十道大题，考3h 1.为什么要进行砷盐检查？砷盐检查方法有哪些及装置 2.复方。。包括丹参、冰片、三七，及各自特征成分及如何进行质量控制？含量测定 3.光谱题：苯佐卡因，画出氢谱和碳谱 二维谱中HMBC、HMQC
第一章测试 1 【单选题】(10分) 现在的有机化合物指的是含（）的化合物，大部分还含有氢和其它一些常见元素。 A. O B. N C. C D. S 2 【单选题】(10分) 以下哪条是常见有机化合物的特性： A. 熔点高 B. 极性大 C. 水溶性好 D. 反应速度慢
3 【单选题】(10分) 以下哪个分子中存在非极性共价键： A. N2 B. H2O C. NH4+ D. NaCl 4 【单选题】(10分) 下列哪个分子是非极性分子： A. 氯仿 B. 四氯化碳 C. 水 D. 氨
5 【单选题】(10分) 决定一类化合物典型性质的原子团被称为： A. 取代基 B. 定位基 C. 官能团 D. 配基 6 【单选题】(10分) 碳原子基态电子排布为： A. 1s42s12p1 B. 1s22s22p2 C. 1s22s02p4 D.
1s22s42p0 7 【单选题】(10分) 烷烃中，碳原子采取的杂化形态是： A. sp B. 不杂化 C. sp2 D. sp3 8 【单选题】(10分) 有机化合物中，碳原子一般为： A. 二价 B. 不定 C. 三价
D. 四价 9 【单选题】(10分) 烷烃分子中，各共价键之间的夹角一般最接近于: A. 180° B. 109.5° C. 90° D. 120° 10 【判断题】(10分) 共价键的键长越长，键能越高，键越牢固。 A. 错 B. 对
第二章测试1 【单选题】(10分) A. 碳架异构 B. 官能团异构 C. 位置异构 D. 互变异构 2 【单选题】(10分) A. 2,4,4-三甲基己烷
一、选择题（单项选择题） 1．下列哪一个化合物的名称与所给出的维生素名称不符? ( ) A．α－生育酚一维生素E B．硫胺素一维生素B， C．抗坏血酸一维生素C D．氰钴胺素一维生素B12 E．吡哆醛一维生素B2 2．下列哪一个辅酶不是来自维生素 ( ) A．CoQ B．FAD C．NAD＋ D.pLp E．Tpp 3．分子中具有醌式结构的是 ( ) A．维生素A B．维生素B1 C．维生素C D．维生素E E．维生素K 4．具有抗氧化作用的脂溶性维生素是 ( ) A．维生素C B．维生素E C．维生素A D．维生素B1 E．维生素D 5．下列维生素中含有噻唑环的是 ( ) 丸维生素E2 B．维生素B1 C．维生素PP D．叶酸 E．维生素B7 6．成人及儿童因缺乏哪种维生素而导致干眼病? ( ) A．维生素]35 B．叶酸 C．维生素A D.维生素B3 E．维生素B6 7．下列哪种维生素可转化为甲基和甲酰基载体的辅酶? ( ) A. 硫胺素 B．叶酸 C.维生素A D．泛酸 E．核黄素 8．下列关于维生素C结构和性质的叙述，哪一项是错误的? ( ) A. 维生素C是含六个碳原子骨架的化合物 B．维生素C具有酸性是因为一COOH释放质子 C．还原型维生素C为烯醇式，而氧化型维生素C为酮式 D．还原型维生素C的元素组成为C：H：O=6：8：6 E．维生素C是一种内酯化合物 9．下列哪一种维生素或辅酶不含环状结构 ( ) A.烟酸 B．四氢叶酸 C．维生素D3 D．泛酸 E．生物素 10．下列哪一种辅酶能与焦磷酸硫胺素一起在丙酮酸转变为乙酰辅酶A的过程中起重要作用 ( ) A．维生素B3 B‘硫辛酸 C．维生素A D．维生素C E．NADP 11．泛酸是CoA的组成成分，后者在糖、脂和蛋白质代谢中起 ( ) A．脱羧作用 B．酰基转移作用 C.脱氢作用 D．还原作用 E．氧化作用12．下列哪个不是丙酮酸脱氢酶系的辅助因子? ( ) A．pLp B．Tpp C．硫辛酸 D．FAD E．CoA 13．下列哪一个反应需要生物素 ( ) A．羟化作用 B．羧化作用 C．脱羧作用 D．脱水作用 E．脱氨基作用 14．转氨酶的辅酶是下列化合物中的哪一个? ( ) A. 尼克酸 B．泛酸 C．硫胺素 D．磷酸吡哆醛 E．核黄素 15．下列哪一种化合物由谷氨酸、对氨基苯甲酸和蝶呤啶组成 ( ) A. 维生素B12 B．氰钴胺素 C．叶酸 D．生物素 E．CoA 16．除CoA可以作为酰基载体之外，下列哪种物质也可以传递乙酰基 ( ) A. 生物素 B．叶酸 C. Tpp D．硫辛酸 E．维生素B12 17．来自于食物的抗生物素蛋白不影响哪一种酶的催化反应? ( ) A．琥珀酸脱氢酶 B．丙酰辅酶A羧化酶
中国药科大学药物化学试卷（B） 一、根据下列药物的结构，写出其药名及主要临床用途（20分）二、写出下列药物的化学结构及临床主要用途（20分，每题2分） 1、阿苯达唑 2、棒酸3、磺胺醋酰钠 4、甲氧苄啶5、诺氟沙星 6、炔诺酮 7、氟康唑 8、氯霉素9、氨苄青霉素 10、顺铂三、合成题（20分） 1、益康唑 2、己烯雌酚 3、氟尿嘧啶 4、环丙沙星 四、写出下列词头（尾）的药物作用靶位及主要临床用途（10分） 作用靶位主要临床用途（1） cef- ______________ ______________ （2） -conazole ______________ _______ ________ （3） -cillin _______________ _______________ （4） -oxacin _______________ _______________ （5）–vir _______________ ______________ 五、（10分） 1、写出下列药物不稳定性的分解产物 2、写出下列药物的代谢产物 六、简答题（20分） 1、试述磺胺类药物及其抗菌增效剂的作用机制。 2、试解释氨基糖甙类抗生素的耐药机制。 3、奥格门汀有哪两种药物组成？说明其合用理由。 4、为什么维生素C在生产贮存过程中易产生变色？ 2002—2003学年第二学期（2000级） 一、解释下列名词：（20分） 1、前药（Prodrug） 2、软药（Softdrug） 3、硬药（Harddrug） 4、生物电子等排（Bioisosterism） 二、巴比妥类药物5位取代基结构类型的不同对药物体内代谢和药物的作用产生较大影响，请解释之。并从药物设计的角度可得到什么启发？（10分） 三、药物的活性构象对药物的生物活性影响较大，以三环类抗精神病药物为例说明药物活性构象研究的基本原理（10分）。四、通过拟肾上腺素药物沙丁胺醇的发现，讨论该类药物设计的主要原理。（10分）。五、局部麻醉药利多卡因在临床应用时会产生中枢神经系统的副作用，解释其原因（10分）六、以镇痛药物和局部麻醉药物为例，总结由天然活性成分出发进行新药研究的基本原理和方法（15分） 七、手性药物的对映异构体之间活性的差异主要有那几种类型?根据已学的知识举例说明.（10分）。八、给出下列药物合理的合成路线（15分） 盐酸普鲁卡因枸橼酸芬太尼三唑仑 药物化学期末考试试卷理科基地班 一、试从“肾素－血管紧张素－醛固酮”系统的原理出发，简述作用于该系统抗高血压药物的结构类型，并举例说明。（20分）二、以合成抗菌药物喹诺酮药物的发现过程为例，认识定量构效关系（QSAR）在新药发现和研究中的作用(不需要写详细过程)。（20分）三、以H-2受体拮抗剂抗溃疡药物的研究为例，思考如何在新药研究中做到“me-too, me-better”（20分）四、什么是类型衍化方法?举例说明其在新药研究中的意义和作用?（10分）。五、简述核苷类抗病毒药物设计和研究的思路（10分）。六、给出下列药物合理的合成路线（20
中国药科大学分析化学（一）期末试卷（A 卷） 一、填空题（每空╳分，共30 分） 1、定量分析中，___________ 误差影响测定结果的准确度，___________ 误差影响测定结果的精密度。 2、0.05020是___________位有效数字，2.30 x 10 -4 是___________位有效数字。 3、滴定分析的化学反应必须具备的条件是___________、___________、___________。 4、C mol/L的Ag(NH3)2 + 溶液的质量平衡式是___________ 。 5、酸碱指示剂的变色范围大约是___________个pH 单位，变色范围与pKHIn 的关系是___________。 6、已知MNaOH=40.00g/mol,0.60g/LNNaOH溶液的pH＝___________。 7、根据酸碱质子理论，___________为碱，___________为酸。 8、配位滴定中，准确滴定的条件为___________. 9、直接碘量法要求溶液的pH值___________，间接碘量法要求溶液的酸度是___________。 10、影响沉淀的主要因素是___________、___________。 11、永停滴定法中使用的电极是___________，是以___________判断终点。 12、E-V 曲线及ΔE/ΔV –V曲线中___________对应的是化学计量点的体积。 13、玻璃电极转换系数S 的表示形式是___________。 14、Lambert-Beer 定律是描述___________与___________和___________的关系，它的数学表达形式是___________。 15、可见紫外分光光度计的光源，可见光区用___________，吸收池可用___________材料的吸收池，紫外光区光源用___________，吸收池必须用___________材料的吸收池。 得分评卷人二、选择题（每小题╳分，共25分） （从A、B、C、D 四个选项中选择正确答案填入空格中） 1、从精密度好即可推出分析结果可靠的前提条件是（） A . 偶然误差小B.系统误差小 C. 标准误差小 D.平均误差小 2、在定量分析中，精密度与准确度的关系是（） A.精密度高，准确度必然高 B.准确度高，精密度必然高 C.精密度是保证准确度的前提 D.准确度是保证精密度的前提 3、NH3 的共轭酸是（） A. NH2 - B. NH2OH 2- C. NH4 + D. NH4OH 4、下列说法不正确的是（） A. 苯甲酸在水溶液中酸性较强 B. 苯甲酸在乙二胺中可提高酸性 C. 在水溶液中不能用NaOH 滴定苯甲酸 D. 在乙二胺中可用氨基乙醇滴定甲酸 5、以EDTA为滴定剂，以铬黑T为指示剂，不会出现封闭现象的离子是（） A. Fe 3+ B. Al 3+ C. Cu 2+ D. Mg 2+ 6、用Na2C2O4 标定KMnO4 溶液浓度时，溶液的酸度过低，会导致测定结果（） A. 偏高 B. 偏低 C. 无影响 D. 视当时情况 7、以某吸附指示剂(pKa ＝2.0) 作银量法的指示剂，测定的pH 应控制在（） A. pH<2 B. pH>2 C. pH>10 D. 2 中国药科大学 药物分析 期末试卷（A 卷） 学年第一学期 一、选择题（共50分） (一)A 型题(最佳选择题) 每题的备选答案中只有一个最佳答案(每题1分) 1．硫喷妥钠在吡啶溶液中可与铜盐反应，所呈的颜色为 ( ) A ．紫色 B ．红色 C ．绿色 D ．玫瑰红色 E ．紫堇色 2．雌激素的特有反应为 ( ) A ．麦芽酚反应 B ．硅钨酸反应 C ．硫色素反应 D ．Kober 反应 E ．坂口反应 3．四环素类药物中存在异四环素杂质是由于药物发生了 ( ) A ．差向异构化 B ．酸性降解 C ．碱性降解 D ．脱水反应 E ．光反应 4．维生素A 采用紫外分光光度法测定含量，计算公式中换算因子为 ( ) A ．效价(IU/g) B ．效价(g/IU) C ．(g/IU)1%cm 1效价E D ．1%cm 1(IU/g) E 效价 E ．(IU/g)1%cm 1效价E 5．薄层色谱法可用于检查药物中的杂质，如 ( ) A ．氯化物 B ．挥发性杂物 C ．有关物质 D ．硫化物 E ．硫酸盐 6．药物中砷盐检查采用古蔡氏法测定时，必须加入 ( ) A ．三氯化铁 B ．氯化亚汞 C ．氯化亚铁 D ．亚硝酸钠 E ．氯化亚锡 7．中国药典2000年版测定维生素E 含量采用GC 法，所用内标物质为 ( ) A ．正二十烷 B ．正二十二烷 C ．正三十烷 D ．正三十二烷 E ．正四十烷 8．酸性染料比色法中，水相的pH 值过小，则 ( ) A．能形成离子对B．有机溶剂提取能完全C．酸性染料以阴离子状态存在D．生物碱几乎全部以分子状态存在E．酸性染料以分子状态存在9．亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是( ) A．添加Br-B．生成NO＋Br-C．生成HBr D．生成Br2 E．抑制反应进行 10．头孢呋辛酯中应检查的杂质是( ) A．异烟肼B．甲醇C．丙酮D．异构体E．游离肼 11．中国药典（2000年版）采用双相滴定法测定苯甲酸钠的含量，其所用的溶剂体系为( ) A．水-乙醚B．水-冰醋酸C．水-氯仿D．水-乙醇E．水-丙酮12．药物纯度合格是指( ) A．含量符合药典的规定B．符合分析纯的规定C．绝对不存在杂质D．对病人无害E．不超过该药物杂质限量的规定 13．药物中氯化物杂质检查的一般意义在于( ) A．它是有疗效的物质B．它是对疗效有不利影响的物质 C．它是对人体健康有害的物质D．可以考核生产工艺中容易引入的物质E．检查方法比较方便 14．测定卤素原子与脂肪碳链相连的含卤素有机药物（如三氯叔丁醇）的含量时，通常选用的方法是( ) A．直接回流后测定法B．直接溶解后测定法C．碱性还原后测定法D．碱性氧化后测定法E．原子吸收分光光度法 15．各国药典对甾体激素类药物常用HPLC或GC法测定其含量， 主要原因是( ) A．它们没有特征紫外吸收，不能用紫外分光光度法 B．不能用滴定分析法进行测定 C．由于“其它甾体”的存在，色谱法可消除它们的干扰 D．色谱法比较简单，精密度好 E．色谱法准确度优于滴定分析法 16．下列药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是( ) A．维生素A B．维生素B1C．维生素C D．维生素D E．维生素E 17．两步滴定法测定阿司匹林的含量时，每1ml氢氧化钠溶液（0.1/mol/L）相当中国药科大学 药物分析 期末试卷(A卷) (3)
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