《病理医师解读《ASCO/CAP激素受体免疫组化检测指南》
8月17日消息- 乳腺癌组织的激素受体（HR）状态可提供有价值的预后预测信息。美国临床肿瘤学会（ASCO）与美国病理医师学会（CAP）组成的国际专家组，通过进行系统的文献回顾和评估后发现，目前在世界范围内可能有近20%的乳腺癌雌/孕激素受体（ER/PR）免疫组化（IHC）检测存在假阴性和假阳性现象，这主要源于检测分析前操作的差异性以及对阳性值判读标准的分析和解释不同。为了改善乳腺癌ER/PR IHC检测及其作为疗效、预后预测指标应用的准确性，《ASCO/CAP乳腺癌激素受体IHC检测指南》（以下简称《指南》）应运而生，并已于近期发表于《临床肿瘤学杂志》[J Clin Oncol 2010, 28(16): 2784]与《病理学和实验室医学文献》[Arch Pathol Lab Med 2010, 134(6): 930]。
《指南》对最佳ER/PR IHC检测操作方案公布了指导意见：建议对所有浸润性乳腺癌和复发性乳腺癌行ER/PR检测；检测方法应具有准确性和可重复性；当存在恰当的内、外对照反应时，检测标本有1%的肿瘤细胞核着色确定为阳性。
《指南》颁布背景
专家组构成
继2007年发表了人表皮生长因子受体2（HER2）检测相关指南后，ASCO与CAP于2008年决定调查是否有必要颁布ER/PR检测指南，并由ASCO临床实践指南委员会和CAP科学事务委员会共同组织成立了专家组。专家组包含32名HR检测相关临床、基础研究人员，除美国外还纳入了9名国际成员，涵盖肿瘤学、病理学、流行病学、统计学和卫生服务等不同领域的专家，以及学院、社区医院医师和患者代表。此外，美国国立癌症研究所（NCI）、英国国家外部质量评估服务部等国际著名研究和服务机构也有人员参与。美国FDA、医疗保险和医疗救助服务中心作为官方任职成员也参与其中。
商业实验室和检测公司受邀作为客座代表参加了2008年12月在ASCO亚历山大总部为期2天会议的开放部分。6名核心委员负责起草和反复审议，包括ASCO代表、CAP代表、检测评估专家各两名，其中一位检测评估专家正是创建HR奥尔雷德（Allred）评分系统的华盛顿大学医学院著名病理学家Allred教授。
提出问题
主要问题?
确定ER和PR状态的最佳检测方法，即何为可用于ER/PR状态评估的临床认证方法？
何种策略能确保操作、诊断评估及结果报告的准确性？例如：影响检测结果准确性的因素，以及怎样调控这些因素并确保分析结果能正确反映肿瘤的HR状态？在检测中如何适度运用内、外对照？确保HR检测准确性的最佳内部质量管理措施?怎样完善外部调控框架？
特殊问题
对导管原位癌（DCIS）或复发性乳腺癌的标本是否应进行ER/PR IHC检测？
PR表达是否与内分泌治疗选择相关并对其造成影响？
由于IHC从90年代开始得到广泛运用并逐步替代配体结合分析（LBA）生化检测，专家组回顾了1990年以来的文献，筛选内容和引用标准包括IHC质量改善和认证、乳腺癌石蜡组织IHC与其他分析方法的比较、检测结果与临床疗效的相关性等方面，并最终筛选出337篇文献围绕上述问题展开讨论分析，最后给出明确的回答和处理意见。
《指南》主要建议
IHC是确定HR状态最佳方法
资料分析表明，采用IHC检测HR与辅助内分泌治疗疗效之间具有明显相关性，IHC用于预测内分泌治疗反应的作用等同甚至优于LBA。近年来，HR检测还采用过RNA分析方法，21基因复发评分（RS）分析谱中即包含了ER/PR信号。但是有研究表明，ER/PR蛋白逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测与IHC检测结果不相符（阳性率为12%对9%），而且迄今为止尚未见直接针对21基因RS分析中有关ER/PR检测与疗效相关性的研究。因此，目前RNA分析方法尚未被推荐作为HR的标准化检测方法。
专家组通过对不同IHC方法（采用不同抗体和评分系统等）进行讨论分析发现，ER/PR IHC 检测无金标准可供参照。当实验室准备开展或变更检测方法时，应参照经临床验证的方法对拟实施方案进行验证，并要求达到一定的符合率（阳性结果符合率为90%，阴性结果为95%）。
此外，专家组还对适宜测试的人群达成了共识：①所有新诊断的浸润性乳腺癌患者；②对于同时多发性癌，应至少对其中一个病灶进行检测，以最大者为佳；③对复发病例应再行检测，以便验证之前结果的可靠性或评估肿瘤生物学是否发生了变化；④对于新诊断的DCIS，由于最新研究提示采用内分泌治疗可使其发展至浸润癌的危险降低40%～50%，专家组认可对这类患者进行ER状态评估的价值，但不作正式推荐，是否检测由患者和医师决定。
IHC检测阳性、阴性界值更新
有研究表明，ER/PR IHC染色阳性细胞百分比可提供有价值的疗效、预后预测信息。其中，ER水平与总生存（OS）、无病生存（DFS）、无复发生存（RFS）、5年生存率、至治疗失败时间（TTF）、内分泌治疗反应和复发时间呈正相关，PR水平与OS、TTF、内分泌治疗反应和复发时间呈正相关。PR状态可能提供独立于ER外的附加预测价值，尤其是对于绝经前患者。这些研究表明，具有高水平HR表达的患者，其具有阳性转归的可能性很高，因此HR检测结果可影响肿瘤医师和患者的治疗决定。
大规模研究表明，HR水平在肿瘤细胞低水平表达（1%）时即与临床疗效显著相关。基于他莫昔芬和其他内分泌治疗药物在降低死亡率方面的确切作用及其相对低毒的特点，专家组认为，在低水平ER状态下即可考虑采用内分泌治疗，因此将≥1%阳性细胞作为阳性界值（<1%为阴性界值）。专家组意识到，新界值的启用将会使内分泌治疗的应用比例轻度上升，因此同时推荐，对于ER低水平表达（1%～10%弱阳性）的患者，肿瘤医师可与其讨论内分泌治疗的利弊，从而制定最佳的平衡方案。
IHC检测不同阶段的影响因素及标准化控制建议
为了保证检测结果的准确性，《指南》对产生IHC方法差异性的各种影响因素及标准化控制提出了指导意见。
组织处理标准化
组织处理标本离体后应尽快（1小时内）放入10倍体积固定液中，记录标本离体和进入固定的时间，标本须每间隔5 mm切开，以保证固定液的充分渗透。
固定液类型固定液为10%中性缓冲福尔马林（NBF），浓度不能过高或过低，若使用不同固定液，则应对比10%NBF进行认证。
组织固定时间组织固定时间应为6～72小时。
检测标准化
抗体选择严格选择经临床证实具有良好特异性和敏感性的抗体，即染色结果阳性病例与临床内分泌疗效认证分析至少达到90%的符合率，而阴性病例应达到95%的符合率。根据研究报道结果，《指南》推荐可采用的ER抗体包括1D5、6F11、SP1、ER2.123+1D5，PR 抗体包括1294、312以及FDA 510(K)-clear ER/PR kit。
对照设立每批检测均须设立阳性、阴性对照。外对照可采用细胞株或子宫内膜组织，应包括从阴性到强阳性的不同表达水平，尤其应有中度阳性表达对照。阳性内对照为染色标本中的正常乳腺导管上皮细胞，应注意对照细胞必须呈现弱、中、强的不等量、不同程度表达，若仅少数细胞呈均一阳性，则可能由于分析敏感性不足，使肿瘤细胞低至中等表达时不能被检测到而呈现的假阴性现象。阴性内对照可为正常乳腺组织中的肌上皮细胞和间质细胞。
当染色切片中不存在阳性内对照时，病理医师可根据肿瘤细胞的ER/PR表达水平、组织学类型、固定情况和外对照染色情况进行综合判定分析。若内、外对照均未出现应有的反应，则不能报告患者的测试结果，应在标准条件下重新进行测试直至出现良好的对照染色。
结果判读标准化
结果报告IHC检测结果必须报告的内容包括
以下3部分：①关于染色阳性肿瘤细胞的百分比，应观察并通过人工或图像来评估切片所包含的所有肿瘤细胞，而且应计数和评估100个以上的细胞；②应记录和报告染色强度（弱、中、强），并参照阳性对照评估整张切片中阳性细胞的平均着色强度；③在解释结果时，对于可考虑为阳性（阳性肿瘤细胞≥1%）的标本，应避免使用类似“可疑阳性”的术语，而阴性检测结果（阳性肿瘤细胞<1%）的判定应在内外对照良好染色的情况下进行，对于任何缺乏阳性内对照（正常导管上皮细胞）的切片，均应更换蜡块重新染色判定，报告应为“无法判读”，而不是“阴性”，而且无法判读时应特别指出原因。
对于任何不遵照《指南》中标本处理和实验操作规程的结果均不能进行判读。可导致结果无法判读的原因包括酒精固定的穿刺组织、细胞学样本，未使用10%NBF固定液固定的标本，固定时间＜6小时或＞72小时的活检标本，标本离体至放入固定液的时间超过1小时，采用强酸脱钙后的标本，采用的内外对照染色不恰当等。不过，对于这些严格的规定，《指南》又给予了进一步的说明：这些情况并非绝对，因为这还取决于其是否被实验室所验证，以及是否经病理医师甄别判断。
另外，对于一些通常呈HR阳性的组织学类型，如小管癌、小叶癌、黏液癌和诺丁汉（Nottingham）组织学分级为Ⅰ级癌，当检测结果为阴性时，报告应给予特殊提示。
内部质量控制和认证实验室内部应设立质量控制程序，完善的质量控制程序应包括对检测所涉及所有方面的控制以及定期趋势分析等内容，以保障对适度总体阳性率的把握。
IHC检测的外部质量保障
在若干成熟管理体制和框架以及2007年HER2检测相关指南的基础上，《指南》对HR 检测准确性的外部质量控制进行了补充。
实验室认证从2010年起，每个经CAP认证的实验室均须参加ER/PR准确性测试程序，而其他由医疗保险和医疗救助中心认证的组织可进行该项评估。
检测准确性的外部质量保障所有进行ER/PR检测报告的实验室须每年两次参加《指南》贯彻情况的检查，达标率为90%，未达标者须按照要求改进，并重新接受检查直至达标。此外，报名参加这些检查程序为强制性的。为了保证指南的贯彻执行，ASCO和CAP将提供包括印刷品、网络等形式的教育和培训机会，CAP也正在制定针对病理医师的认证计划，评估这些医师遵照HER2和HR检测相关指南内容的情况和资格的认定。
■链接乳腺癌ER和PR免疫组化检测评估示意图
示1例浸润性导管癌ER 免疫组化（IHC）检测结果评估情况，按整张切片平均显色情况确定。图A示完全未见肿瘤细胞着色的阴性反应，右上为同切片中存在的阳性内对照（正常导管上皮细胞）呈现的不同程度反应，间质中大量反应的淋巴细胞阴性。图B为5%肿瘤细胞呈弱阳性（+）反应。图C示70%肿瘤细胞呈中强阳性（++）反应。图D示90%肿瘤细胞呈强阳性（+++）反应。
图2示4例不同乳腺癌组织学类型PR IHC检测结果评估情况，按整张切片平均显色情况确定。图A示浸润性导管癌完全未见肿瘤细胞着色的阴性反应，右上为同切片中存在的阳性内对照（正常导管上皮细胞）呈现的不同程度反应，间质细胞及血管内皮阴性。图B 示黏液腺癌（上部）50%肿瘤细胞呈中强阳性（++）反应，正常内对照（下部）呈不同程度反应。图C示在浸润性小叶癌阴性反应间质中，70%肿瘤细胞呈强阳性（+++）反应，图中上部的两个正常导管上皮细胞呈不同程度反应。图D示在浸润性导管癌标本中90%肿瘤细胞呈强阳性（+++）反应。
植物激素的酶联免疫吸附测定法（ELISA） 免疫测定是利用抗原、抗体特异性反应而建立的，根据可视化方法的不同可分为：酶联免疫、放射免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定、生物发光免疫测定、浊度免疫测定法等。由于酶联免疫吸附分析法（Enzyme-linked Immunosorbent Assays, 简称ELISA）具有灵敏性、特异性高，且方便、快速、安全、成本低廉的特点，而日益被广泛应用于植物激素测定。目前，几大类植物激素IAA,ABA, GA3、GA4、iPA、ZR、DHZR等都建立了相应的ELISA方法并有试剂盒出售。 植物激素的酶联免疫检测方法有两种形式（见下图），一种是在固相载体上直接包被抗体（直接法，先包被二抗，再加一抗），另一种是包被抗原（间接法）。 直接法利用游离抗原和酶标抗原与吸附的抗体进行竞争。间接法利用游离抗原和吸附抗原与游离抗体进行竞争。间接法的原理可用下式表示： Ab+H+HP=AbH+AbHP 其中Ab表示抗体，H表示游离激素，HP表示吸附在板上的激素－蛋白质复合物。根据质量作用定律，当该反应体系中Ab及HP的量确定时，游离H越多，结合物AbH形成的就越多，而AbHP形成的就越少，即结合在板上的抗体就越少，通过酶标二抗检测结合物AbHP的多少，就可以确定游离H 量的多少。 材料、试剂及设备 1 材料 各种新鲜植物材料 2 仪器设备 研钵，冷冻离心机，台式快速离心浓缩干燥器或氮气吹干装置，酶联免疫分光光度计，吸水纸，恒温箱，冰箱，酶标板（40孔或96孔），可调微量液体加样器（10μl，40μl,200μl,1000μl），带盖瓷盘（内铺湿纱布）。 3 试剂 (1) 包被缓冲液：称取１.５g Na2CO3, 2.93g NaHCO3, 0.2g NaN3（可不加）, 用量筒加1 000 ml蒸馏水，pH为9.6. (2) 磷酸盐缓冲液（PBS）：称取8.0g NaCl, 0.2g KH2PO4 , 2.96g Na2HPO4 ·12H2O，用量筒加1 000 ml蒸馏水，pH为7.5。 (3) 样品稀释液：100 ml PBS中加0.1 ml Tween-20，0.1g明胶（稍加热溶解）。 (4) 底物缓冲液：称取5.10g C6H8O7·H2O（柠檬酸）， 18.43g Na2HPO4·12H2O，溶解定容至1 000ml，再加1 ml Tween-20，pH为5.0。 (5) 洗涤液：1000ml PBS加1mlTween-20。 (6) 终止液：2mol/L H2SO4。 （7）提取液：80％甲醇，内含1 mmol/L BHT(二叔丁基对甲苯酚，为抗氧化剂，先用甲醇溶解BHT，在配成80%的浓度))。 （8）激素包被抗原、各激素抗体和标准物。 （9）酶标二抗：辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗兔抗体。
糖皮质激素的合理使用 糖皮质激素是临床应用最广的药物之一，其具有调节代谢作用，允许作用，抗炎，抗休克，免疫抑制和抗过敏等作用。 糖皮质激素类药物的广泛应用挽救了无数的病人，但与其有关的各种不良作用亦造成不少问题，而且目前滥用严重，因此合理应用糖皮质激素类药物迫在眉睫。 一、糖皮质激素的常见用药误区 （1）把糖皮质激素用作退热药发热是人体针对病毒、细菌感染的防御反应，体温升高在一定范围内(不超过38.5℃)可提高机体的防御功能。 糖皮质激素能抑制下丘脑对致热源的反应并能抑制白细胞致热源的生成和释放，有一定的退热作用，医生为了尽快使患者体温明显降低，多选用激素(多为地塞米松肌肉注射或静脉注射)。然而这种退热作用并不持久，因为绝大部分情况下发热是由于病原体引起的，使用糖皮质激素能削弱机体的抵抗力，促使感染扩散，使病情加重，延长自然病程。在发热原因未明前，不可滥用，以免掩盖症状使诊断发生困难。 （2）用于预防输液反应输液反应主要是由致热源引起，糖皮质激素可抑制PEG的合成与释放，从而防止体温升高，可以有效缓解发冷、寒战、发热、出汗等输液反应。
有些医生为了预防输液反应，经常加入地塞米松、氢化可的松等，如此使用不合理，因为激素本身也有致过敏的可能，并不是对因治疗。 （3）把糖皮质激素用作止痛剂因为激素能降低局部毛细血管的通透性，抑制炎性浸润和渗出，并使细胞间质的水肿消退，缓解红、肿、热、痛等症状，所以有些因风湿病引起腰痛、关节痛的患者，就长期将糖皮质激素当成止痛药，且盲目加量，这是不妥的，因为激素抑制机体防御机能，使自身正常免疫能力降低，易于加重感染，且长期大剂量应用不良反应较多。 （4）其它不合理比如把激素当作抗生素使用、局部滥用、用法不当、配伍不合理、制剂和给药途径不合理、用药剂量不准确等方面。 二、糖皮质激素的合理应用 (一) 严格掌握适应证 1.严重感染与休克。 2.自身免疫性疾病如风湿性疾病，肾病综合征等。 3.过敏性疾病如呼吸系统疾病等。糖皮质激素是当前控制哮喘发作最有效的药物。值得注意的是结核使用糖皮质激素，仅适用于有严重中毒症状时，且必须保证有效抗结核药物治疗。 4.器官移植排斥反应。 5.血液系统疾病多用于治疗儿童急性淋巴细胞性白血病，再生障碍性贫血，血小板减少症和过敏性紫癜，但是停药后易复发。
雌激素的作用机制概述 摘要】经典的雌激素(E2)作用机制是通过雌激素受体ER结合到靶基因启动子区 的雌激素反应元件上来发挥配体依赖的转录调节作用。但许多实验已证明E2也 可以通过特异的膜受体(mER)信号通路发挥调控作用，激活膜受体后能激活许多 蛋白激酶最终影响下游转录因子的活性。另外，膜受体介导的信号通路也可以通 过磷酸化核受体（nER）和其辅因子来调节经典的雌激素受体的核效应。 【关键词】雌激素雌激素核受体雌激素膜受体基因调控 【中图分类号】R335 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）09-0341-02 1 引言 雌激素是生物体内许多生物学过程如生长、发育和复制的关键调节剂，在男 性和女性体内都包括许多雌激素的靶器官如生殖道、乳房组织、骨骼、心血管和 中枢神经系统。雌激素的生物学作用主要是通过雌激素受体ERα和雌激素受体 ERβ来调节的，它们分别由不同的基因编码，属于配体诱导的转录因子，是核受 体家族成员之一。ERα和ERβ的组织分布和结合配体的特征明显不同，主要是由 于雌激素的组织选择性作用。配体结合引起受体构象改变从而促进受体形成二聚 体并结合到靶基因启动子区的雌激素效应元件（ERE）上来发挥受体的核转录活性。雌激素受体也可以不需要结合DNA来调节基因的表达，可与其他启动子结合蛋白相互作用或阻止其他转录因子招募到启动子上[1-3]。 雌激素还可以与膜受体结合诱导快速的细胞内反应，现已证明了雌激素可调 节许多细胞内磷酸化级联途径来发挥非核效应，这些效应包括激活腺甘酸环化酶（AC），MAPK，磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）或增加胞内钙离子浓度等。快速的 信号级联通路最终能影响下游许多转录因子的磷酸化状态。此外，雌激素激活的 信号途径也能影响核受体依赖的转录活性[4,5]。近年来，已有许多实验证明了核 受体非核效应的分子机制，但仍需解决的问题还有很多，如发挥具体非核效应的 受体的性质，在调节细胞信号途径过程中整合激素作用的分子机制及甾体类激素 快速非核效应的生理学作用等。 2 雌激素的核效应 雌激素的核效应是通过核受体家族成员的雌激素受体ERα和ERβ介导的，经 典的ERs效应是作为核受体发挥其核效应：ER结合E2后使ER从抑制性复合体中 释放并形成同源二聚体转入到核中，通过结合到雌激素反应元件（ERE）上并招 募多种辅因子来调节其他转录因子的表达。 胞内信号途径也能调节nER的作用。不同的激酶像PKA、MAPK及A-CDK2可 以磷酸化ERαN端的一些残基如104位、106为的丝氨酸残基，丝氨酸残基磷酸 化后可调节许多受体功能，如通过泛素-蛋白酶体途径下调nER的表达、nER的核 定位、nER的二聚化作用及转录活性等。除了直接作用于nER，这些信号途径还 可通过调节辅因子对nER发挥调节作用[6]。 3 膜受体介导的雌激素效应 雌激素（E2）除了发挥核效应外还可引起膜介导的快速反应。E2处理细胞能 快速引起许多蛋白激酶的激活并调节通过细胞膜的离子流。由于这些瞬时反应并 不会受到蛋白合成抑制剂的抑制，因此可确定mER的参与,并且，使用膜不通透 性雌激素如E2结合牛血清白蛋白（E2-BSA）能模拟E2膜信号转导途径引起的快 速反应。
糖皮质激素临床应用 1、替代疗法 用于急慢性肾上腺皮质功能不全，垂体前叶功能减退和肾上腺次全切除术后的补充替代疗法。 2、严重急性感染或炎症 1）严重急性感染，对细菌性严重急性感染在应用足量有效抗菌药物的同时。配伍GCS，利用其抗炎、抗毒作用，可缓解症状，帮助病人度过危险期。对病毒性感染，一般不用GCS，水痘和带状疱疹患者用后可加剧。但对重度肝炎、腮腺炎、麻疹和乙脑患者用后可缓解症状。 2) 防止炎症后遗症、对脑膜炎、心包炎、关节炎及烧伤等。用GCS 后可减轻疤痕与粘连、减轻炎症后遗症。对虹膜炎、角膜炎、视网膜炎、除上述作用外，尚可产生消炎止痛作用。 3、呼吸疾病 支气管哮喘是由单纯气道平滑肌功能性过度痉挛深化为种气道慢性炎症性疾病的理论。此种炎症是由多种炎性细胞如肥细胞、嗜酸粒细胞、T淋巴细胞参与的。其主要的作用有：抑制花生四烯酸的代谢，减少白三烯和列腺素的合成；促使小血管收缩，增高其内皮的紧密度，减少血管渗漏；抑制炎症细胞的定向移动；活化并提高呼吸道平滑肌β受体的反应性；阻止细胞因子生成；抑制组胺酸脱羧酶，减少组胺的形成等。但不同激素使用疗效差异有显著性。通过以上对照结论表明甲强龙的显效率高于对照组，临床观察引起水钠潴留及下丘脑-垂体-肾上腺素轴（HPA）抑制等不良反应轻。地塞米松虽在临床广泛应
用但起效慢，因在体内由肝脏转化为泼尼松后起效，且半衰期长对HPA抑制作用强而持久，对糖代谢的影响大。故两者比较甲强龙因起效快、半衰期适中、抗炎作用强、疗效显著值得推广使用 4、自身免疫性和过敏性疾病 1）自身免疫性疾病：GCS对风湿热，类风湿性关节炎，系统性红斑狼疮等多种自身免疫病均可缓解症状。对器官移植术后应用，可抑制排斥反应。 2) 过敏性疾病：GCS对荨麻疹、枯草热、过敏性鼻炎等过敏性疾病均可缓解症状。但不能根治。 5、治疗休克： 对感染中毒性休克效果最好。其次为过敏性休克，对心原性休克和低血容量性休克也有效。 6、血液系统疾病： 对急性淋巴细胞性白血病疗效较好。对再障、粒细胞减少、血小板减少症、过敏性紫癜等也能明显缓解，但需长期大剂量用药。 7、皮肤病： 对牛皮癣、湿疹、接触性皮炎，可局部外用，但对天疱疮和剥脱性皮炎等严重皮肤病则需全身给药。 8、恶性肿瘤： 恶性淋巴瘤、晚期乳腺癌、前列癌等均有效。 9、急性淋巴细胞白血病是常见的白血病之一 由糖皮质激素组成的方案是临床上常用的化疗方案，但是应用哪一种
植物激素检测方法 一、什么是植物激素？ 植物激素是植物体内合成的一系列痕量有机化合物，它在植物的某一部位产生，运输到另一个或一些部位，在极低的浓度下便可引发生理反应，几乎参与了调控植物从种子休眠、萌发、营养、生长和分化到生殖、成熟和衰老的每个生命过程，既可调控植物自身的生长发育，又通过与植物所生存的外部环境互相作用调节其对环境的适应。通过调控如细胞分裂素、油菜素内酯和生长素等植物激素的代谢可显著地改良作物的株型结构和产量构成，从而大幅度提高作物产量和品质。 植物激素主要包括生长素(auxin)、赤霉素(gibberellin，GA)、细胞分裂素(cytokinin，CTK)、脱落酸(abscisic acid，ABA)、油菜素甾醇类(brassinosteroids，BRs)、茉莉酸(jasmonic acid，JA)及其甲酯(MeJA)、水杨酸类(salicylic acids，SA)、乙烯(ethylene)和多肽激素(peptide hormones)等。 二、检测方法 科标生物检测中心可以提供各种植物样品检测服务，中心是通过权威认证的第三方机构，检测后出具权威检测报告。 三、主要分析技术 1、生物鉴定法是一类经典的植物激素检测方法，它利用激素作用于植物的组织或器官时产生的特异性反应对植物激素进行测定。 2、免疫检测技术是测定植物激素的常用方法。该方法是基于抗原和抗体的特异性结合，因此有较好的专一性。采用放射性元素标记的方法，即放射免疫分析(radioimmunoassay，RIA)，其检测灵敏度高，重复性好，但对实验条件的要求较高。 3、气相色谱火焰离子化检测法(GC-FID)和气相色谱质谱法(GC-MS)能够对所分析样品进行准确、高灵敏度测量，但由于气相色谱对样品的特殊要求，使得待测组分需具有一定挥发性，因此在植物激素样品的前处理过程中需对样品进行衍生化。 4、高效液相色谱紫外检测法(HPLC-UV)、高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FL)和高效
糖皮质激素用法用量 一般说来糖皮质激素的用法应该根据病人、病情、药物的作用和不良反应特点确定制剂、剂量、用药方法及疗程,下面先介绍糖皮质激素常规用法：?1.大剂量突击疗法用于严重中毒性感染及各种休克。氢化可的松首次剂量可静脉滴注 200~３00mg，一日量可达1ｇ以上,疗程不超过3天。对于休克有人主张用超大剂量，每次静脉注射１g,一日4~6次。 2．一般剂量长期疗法用于结缔组织病、肾病综合征、顽固性支气管哮喘、中心性视网膜炎、各种恶性淋巴瘤、淋巴细胞性白血病等。一般开始时用泼尼松口服10~２0mｇ或相应剂量的其他皮质激素制剂，每日3次,产生临床疗效后,逐渐减量至最小维持量，持续数月。 3.小剂量替代疗法用于垂体前叶功能减退、阿狄森病及肾上腺皮质次全切除术后。一般维持量，可的松每日1２.5~2５mg,或氢化可的松每日１０～2０mg。 4.隔日疗法皮质激素的分泌具有昼夜节律性,每日上午8~10时为分泌高潮(约450nmol/L），随后逐渐下降(下午４时约11０nmol/L）,午夜12时为低潮，这是由ＡCTH昼夜节律所引起。临床用药可随这种节律进行,即长期疗法中对某些慢性病采用隔日一次给药法，将一日或两日的总药量在隔日早晨一次给予，此时正值激素正常分泌高峰,对肾上腺皮质功能的抑制较小。实践证明，外源性皮质激素类药物对垂体-肾上腺皮质轴的抑制性影响,在早晨最小,午夜抑制最大，隔日服药以用泼尼松、泼尼松龙等中效制剂较好。 根据皮质激素的分泌具有昼夜节律性，每日上午8~10时为分泌高潮（约4５０nmol/Ｌ),随后逐渐下降（下午4时约110nmol／L）,午夜12时为低潮,在先天性肾上腺皮质增生症终身激素替代治疗中临床常用清晨.７．5ｍg,睡前２．5mg 这样副作用最少。 宜根据病人,病情，药物的作用和不良反应特点确定制剂，剂量,用药方法及疗程．1．大剂量突击疗法．用于严重中毒性感染和各种休克.氢化可的松200-３0０ｍg静滴,一日量可达1ｇ以上,疗程不超过3天.超大剂量，每次1ｇ静脉注射,一日4-6次. ２.一般剂量长期疗法.用于结缔组织病,肾病综合症,支气管哮喘等.强的松口服１0-2０mg,每日3次,产生临床疗效后,逐渐减量至最小维持量，维持数月.现在主张早晨顿服． 3．小剂量替代疗法.用于垂体前叶功能减退等病．一般维持量可的松每日1２.５-25ｍg.?4．隔日疗法．遵循ＡＣＴH分泌的昼夜规律.长期疗法对某些慢性病采用隔日早晨一次疗法,用量为一日或两日的总药量.?停药方法一定要根据具体疾病,具体病人,具体病情,临床疗效，副作用的影响等全面因素而慎重选择,不可一概而论．当然,医院和医师的个人经验和习惯亦有很大影响.此位战友应该说明什么疾病．也好有的放矢.
必修三第3章植物的激素调节 一、单项选择题 1、向光性实验中在纸盒上打一个小孔的目的是 A．便于观察胚芽鞘生长 B．通风 C．形成单侧光 D．测量胚芽鞘的高度 2、植物产生向光性的原因是 A．茎的向光一侧生长素分布多，生长快 B．茎的背光一侧生长素分布多，生长快 C．茎的向光一侧温度高，生长快 D．茎的背光一侧温度高，生长快 3、正确反映一株白玉兰树上各部分生长素浓度大小的是 A．顶芽＞侧芽老根＞分生区B．顶芽＜侧芽老根＜分生区 C．顶芽＜侧芽老根＞分生区D．顶芽＞侧芽老根＜分生区 4、用燕麦胚芽鞘做向光性实验，发现植物生长素产生的部位、感光刺激的部位、向光弯 曲的部位分别是 A．胚芽鞘尖端；尖端下面一段；向光一面 B．胚芽鞘；胚芽鞘尖端；尖端下面一段C．胚芽鞘尖端；胚芽鞘尖端；尖端下面一段 D．胚芽鞘尖端；胚芽鞘；尖端下面一段5、飞行于太空中的宇宙飞船里，放置一株水平方向的幼苗，培养若干天后，根茎生长方 向是 A．根向下生长，茎向上生长 B．根向上生长，茎向下生长 C．根水平方向生长，茎向上生长 D．根和茎都向水平方向生长 6、关于植物激素的叙述，正确的是 A．植物激素是由植物体内的内分泌腺合成、分泌的微量有机物 B．植物的向光性可以说明生长素能促进植物的生长 C．乙烯能促进果实的成熟，所以在幼嫩的果实中含量较多 D．细胞分裂素能促进细胞的分裂和细胞的伸长，所以在茎尖、根尖含量较多 7、如右图所示，用燕麦胚芽鞘进行实验，一段 时间后，会引起弯曲现象的是 A．④⑤ B．①②③ C．①③④ D．①④ 8、将植物横放，测量根和茎生长素浓度与其生长状况的关系如甲图所示，则曲线上P点最可能对应于乙图中的位置是 A．a B．b C．c D．d
什么叫雌激素受体 什么叫雌激素受体?患有乳腺癌的每个病人，有一项检查是必须要做的，那就是雌激素受体，听到这个词，大家都很陌生，也不理解是什么来的，其实，雌激素受体是一个正常人的乳腺细胞里边含有一种能与雌激素结合的糖蛋白，这就是雌激素受体(ER)，下面我们具体来了。 雌激素受体(以下简称ER)是细胞内能与雌激素结合的一种特殊的糖蛋白，当乳腺细胞恶变时，这种受体可以保留或消失。如受体保留的，叫激素依赖性肿瘤，如果不保留则叫非激素依赖性肿瘤。实验证实有50%～70%的乳腺癌细胞内含有数量不等的ER。受体较多分布在绝经后、高龄、早期的病人。 雌激素就相当于一把钥匙，而位于乳腺组织内的ER就相当于锁。这把锁一般位于乳腺细胞的核内，当雌激素进入乳腺细胞的核以后，钥匙与锁相结合，就可以发生一系列的反应促进癌细胞增殖，使病情发展。 临床上，医生们都很关注乳腺癌患者ER的表达情况，因为它与患者的治疗方案以及将来的病情发展密切相关。如果乳腺
癌细胞内含有ER，医学上就称为ER阳性;反之，则叫做ER阴性。 一般来讲，ER阳性的肿瘤分化比较好，这样的患者预后相对好一些，如果采用内分泌治疗措施效果也比较好。而ER阴性的肿瘤相对分化差一些，预后也可能较差，对于这些患者，采用内分泌治疗的疗效可能并不理想。 目前，对于乳腺癌患者ER的检测，一般由病理科医生在取得癌组织以后采用免疫组化法来判断。接下来，临床医生们会结合患者的年龄、肿块的大小、淋巴结是否有转移以及ER的状况来决定患者术后的综合治疗。 以上是什么叫雌激素受体的相关介绍，看了以上的介绍大家是否对于这个如此陌生的词有了一些认识了呢，如果难理解的话，我们可以简单的记住：雌激素受体是每个正常女性朋友的乳腺细胞里应有的一种元素，一旦患有乳腺癌，这种也许有保留也许会消失。
糖皮质激素临床应用管理规 第一糖皮质激素临床应用管理 一、用药监管 1.格限制没有明确适应证的糖皮质激素的使用，如不能单纯以退热和止痛为目的使用糖皮质激素。 2.冲击疗法需具有主治医师以上专业技术职务任职资格的医师决定。 3.长程糖皮质激素治疗案，需由相应学科主治医师以上专业技术职务任职资格的医师制定。先天性肾上腺皮质增生症的长程治疗案制订需三级医院分泌专业主治医师以上专业技术职务任职资格的医师决定。随访和剂量调整可由分泌专业主治医师以上专业技术职务任职资格的医师决定。 4.紧急情况下临床医师可以高于上条所列权限使用糖皮质激素，但仅限于3天用量，并格记录救治过程。 二、落实与督查 1.各级各类医疗机构必须加强糖皮质激素临床应用的管理，根据《指导原则》结合本机构实际情况制订“糖皮质激素类药物临床应用实施细则”（简称“实施细则”）。建立、健全本机构促进、指导、监督糖皮质激素临床合理应用的管理制度，并将糖皮质激素合理使用纳入医疗质量和综合目标管理考核体系。 2.各级各类医疗机构应按照《医疗机构药事管理规定》和《处管理办法》规定，药事管理专业委员会要履行职责，开展合理用药培训与教育，督导本机构临床合理用药工作。依据《指导原则》和“实施细则”，定期与不定期进行监督检查，容包括：糖皮质激素使
用情况调查分析，医师、药师与护理人员糖皮质激素知识调查。对不合理用药情况提出纠正与改进意见。 三、医院制定糖皮质激素类药物临床合理使用评价案 我院根据卫生部2011年2月16日颁布的《糖皮质激素类药物临床应用指导原则》及医院实际情况制定了临床合理使用评价案（详见附件一）。
第二主要疾病糖皮质激素的合理使用 ※肾科肾脏疾病糖皮质激素的合理使用 一、适应证： 1. 肾病综合征 2. 自身免疫性疾病（SLE，类风湿性关节炎，皮肌炎/肌炎） 3. 系统性血管炎 4. 过敏性紫癜性肾炎 5. 各种肾小球肾炎 6. 部分间质性肾炎 7.器官移植抗排斥反应 二、剂量 小剂量：自身免疫性疾病（如类风湿性关节炎、狼疮性肾炎、原发性肾脏疾病）、器官移植的维持治疗，泼尼松剂量不大于10mg/d。 中等剂量：泼尼松或泼尼松龙30-45mg/d（0.5-0.75mg/kg.d），治疗4-8后逐渐减量，长期使用易出现糖皮质激素的不良反应。 大剂量（用于治疗肾病综合征、重症自身免疫性疾病、急性变态反应、器官移植排斥反应等）：泼尼松或泼尼松龙1mg/kg.d，成人最大剂量60mg/d，儿童最大剂量80mg/m2.d；肝功能有异常时，以泼尼松龙为主（0.8mg/kg.d）；诱导治疗时间不超过8，不宜长时间使用。 大剂量冲击疗法（肾移植急性排斥反应，肾移植围手术期，重症获得性系统性红斑狼疮如狼疮性肾炎、重系统损坏、心包炎、肺出血及狼疮性脑病，新月体肾炎，重症过敏性紫癜性肾炎，系统性血管炎，新月体型IgA肾病等）：泼尼松龙500mg-1000mg/d，连续3d，可根据病情重复1-2个疗程。 三、使用法： 1、每天给药：自身免疫性疾病和肾脏疾病，诱导期和维持治疗期，每天1次顿服。 隔天疗法：维持期治疗，可有效减轻糖皮质激素的副作用和对HPA轴的抑制作用。 冲击治疗：静脉给药，起效快，作用持久。 四、糖皮质激素的应用 （一）肾病综合征需要根据病理类型制订免疫治疗案。 1.微小病变肾病：糖皮质激素对微小病变肾病治疗效果较好。 儿童患者，推荐泼尼松（龙）口服60 mg/m2.d (不超过80 mg/d)，4～6后约90%的患者尿蛋白可转阴，改为隔日泼尼松（龙）40mg/m2，标准疗程是8，但停药后易复发。为减少复发率，可在隔日疗法4后，每月减少总剂量的25%，总疗程持续6个月以上。
摘要 目的研究17-β-雌二醇对人胃癌细胞增殖周期的影响，探讨胃肠道肿瘤的内分泌治疗的可能性. 方法采用人胃癌SGC-7901细胞株，免疫组化染色证实其雌激素受体为阳性，在细胞培养期间，分别给予雌二醇10-7 mol/L及雌二醇加三苯氧胺1mcg/ml处理12h，流式细胞仪检测各期细胞数目的相对比例和增殖指数. 结果细胞增殖指数在雌二醇组、对照组和三苯氧胺处理组分别为0.5705，0.4787和0.4830. 当用雌二醇处理后其S期细胞数目明显增加. 结果显示雌二醇可刺激该细胞的生长，而三苯氧胺可抑制这种作用. 结论雌二醇对雌激素受体阳性的胃癌细胞有增殖营养效应，这种作用可为雌激素受体抑制剂三苯氧胺所阻断，可用来控制胃癌的生长. 关键词胃肿瘤; 雌二醇; 雌激素拮抗剂 谭端军, 王慧蓉, 汪鸿志, 刘成贵.雌激素及其受体抑制剂对胃癌细胞增殖的影响.新消化病学杂志，1996；4(2)：64-65 近年来有学者发现患同样肿瘤的患者，性别不同其预后也不同，乳腺癌等性激素靶器官肿瘤常在其发生前后或同时并发胃肠道肿瘤，并陆续有在胃肠道肿瘤中发现雌激素受体(estrogen receptor, ER)的报道，因此推测机体内性激素环境也同样影响了一些消化道肿瘤的自然发展历程[1，2]。然而，究竟体内性激素对于胃肠肿瘤通过何种机制，产生何种效应?尚无统一的看法。为此本实验以雌激素受体阳性的体外传代胃癌细胞系为模型，采用流式细胞仪分析雌激素及其受体抑制剂对胃癌细胞增殖动力周期的影响，从分子水平探讨雌激素对胃癌细胞的促分化作用，为临床消化道肿瘤的内分泌治疗提供依据。 1 材料和方法 1.1 实验分组Ⅰ组：空白对照组；Ⅱ组：加入17-β-雌二醇10-7mol/L(德国MERCH公司)；Ⅲ组：雌二醇10-7mol/L及三苯氧胺1mcg/L(上海十二制药厂)均为终浓度。每组各检测6个样本。 1.2 细胞培养雌二醇采用乙醇溶解(乙醇终浓度<0.1%)，然后用Hanks液稀释至工作浓度。小牛血清用活性碳10g/L，葡聚糖T70 1g/L，50℃搅拌30min以清除游离雌激素。人胃低分化腺癌SGC-7901细胞(免疫荧光染色法证实细胞株雌激素受体为阳性)采用RPMI-1640培养基加1%已清除游离雌激素的小牛灭活血清，青霉素100kU/L和链霉素10mg/L，然后分别向各培养瓶中加入受试物，于37℃，含5%二氧化碳温箱培养12h后收集细胞，数目在105以上，70%冷乙醇固定24h。实验过程中用光镜观察细胞形态学变化[2-5]。 1.3 细胞DNA染色及FCM测定上机前经400目铜网过筛，低速离心5min，弃乙醇，每个样品加RNase A25μg，震荡混匀，37℃搁置30min，以去除RNA，然后加入碘化丙啶
植物激素测定方法述评 鲁 哲,邹振华,路 婧,王若仲* (湖南农业大学植物激素与生长发育湖南省重点实验室,长沙410128) 摘 要:分析了传统植物激素测定的方法,提出了新的技术发展下,对植物激素快速、原位实时、高灵敏、高通量检测的必要性,对植物激素测定方法的前沿技术做出分析,并初步探讨了植物激素测定技术的未来趋势。 关键词:植物激素;测定方法;原位实时;生物传感器 中图分类号:Q94-331 文献标识码:A 文章编号:1001-5280(2011)05-0531-04 DOI:10.3969/j.issn.1001-5280.2011.05.28 Research Progress on Determination of Phytohormones LU Zhe,ZOU Zhen-hua,LU Jing,WAN G Ruo-zhong* (Hunan Pr ov incial Key L abo rat or y o f Phyt ohor mo nes and G r ow th Develo pment, Hunan A g ricultural U niv ersit y,Chang sha,Hunan410128,China) Abstract:In this ar ticle,the tr aditional methods for deter mination o f phy toho rmo nes w er e analy zed,and the necessity of rapid,in situ real-t ime,hig h sensitivit y and hig h thro ughput detectio n of phy to ho rmo nes w as put fo rw ar ded under co nditio n of the development of new techniques.A t the sam e time,the fr ontier techniques fo r det erminat ion of phy toho rmo nes w er e a nalyzed,and t he developmental trend of determinatio n techniques o f phyt ohor mo nes w as discussed. Key words:P hyto hor mones;Det erminat ion metho d;Situ and r eal-time;Biosensor 植物激素是植物体内合成的对植物生长发育有显著作用的微量物质。目前,植物激素有六大类,即生长素类(Auxins)、赤霉素类(GAs)、细胞分裂素类(CTKs)、脱落酸(abscisicacid,A BA)、乙烯(ethyne, ETH)和油菜素甾醇(Brassinosteroids,BR)[1]。植物激素作为植物体内的微量信号分子,调节植物几乎所有的生长发育过程。长期以来,植物激素与植物生长调节剂一直是生物学和农学领域的研究热点,其成果为农业科技进步做出了巨大的贡献。例如,各种植物生长调节剂的广泛使用,已成为实现农作物高产优质的重要措施之一,在推动“绿色革命”、大幅度提高作物产量和保证国家粮食安全方面发挥了不可替代的作用[2]。由于植物激素在植物体内含量极低(一般每克植物组织鲜样中的含量为1～100ng),易被光解、热解和氧化,因此,如何对微量植物激素进行简便、快速和准确的定量分析,一直是植物激素研究领域的难题之一。近年 收稿日期:2011-03-23 作者简介:鲁 哲(1984-),男,内蒙古赤峰人,硕士研究生。*通讯作者。 基金项目:湖南省科研条件创新专项重点项目(2010T Y1004);教育部新世纪优秀人才支持计划项目(NCET-10-0143)。来,随着功能基因组学、代谢组学(m etabolom ics)等整体性“组学”方法的提出以及生物学研究对活细胞单分子行为测定的日益关注,对植物激素等重要代谢调节物的测定技术提出了更高的要求。同时植物激素的生理功能具有时空特异性,植物激素作用机理和信号转导等前沿领域更是迫切需要对微量植物样品的超微量植物激素进行高灵敏、原位、实时测定。研究植物激素在植物组织或细胞中的分布特点及消长规律,目前常采用化学手段对内源激素水平进行检测,但测定结果的准确性较差[3],而且无法对激素进行定位研究,因为许多激素引起的很多生理反应常发生在激素受体分布的细胞器内[2],因此对植物激素的高灵敏、高通量、原位实时测定新技术提出了迫切要求。 传统植物激素和植物生长调节剂测定方法主要有以早期简单的小麦胚芽鞘切段伸长法为代表的生物测定法[4]、以气相色谱法[5](Gas Chro matography,GC)和高效液相色谱法[6](Hig h Performance Liquid Chr omatogr aphy,HPLC)为代表的理化测定法,及以酶联免疫吸附法[7](Enzy me Linked Immune sorbent Assays,ELISA)为代表的免疫测定法。传统植物激素和植物生长调节剂测定方法各有优缺点,下面分别进行评述。
2013级全科九班李安虎学号：320130916971 糖皮质激素的临床应用原则 一、糖皮质激素治疗性应用的基本原则 糖皮质激素在临床广泛使用，主要用于抗炎、抗毒、抗休克和免疫抑制，其应用涉及临床多个专科。应用糖皮质激素要非常谨慎。正确、合理应用糖皮质激素是提高其疗效、减少不良反应的关键。其正确、合理应用主要取决于以下两方面：一是治疗适应证掌握是否准确；二是品种及给药方案选用是否正确、合理。 （一）严格掌握糖皮质激素治疗的适应证。 糖皮质激素是一类临床适应证尤其是相对适应证较广的药物，但是，临床应用的随意性较大，未严格按照适应证给药的情况较为普遍，如单纯以退热和止痛为目的使用糖皮质激素，特别是在感染性疾病中以退热和止痛为目的使用。糖皮质激素有抑制自身免疫的药理作用，但并不适用于所有自身免疫病治疗如慢性淋巴细胞浸润性甲状腺炎（桥本病）、1型糖尿病、寻常型银屑病等。 （二）合理制订糖皮质激素治疗方案。 糖皮质激素治疗方案应综合患者病情及药物特点制订，治疗方案包括选用品种、剂量、疗程和给药途径等。本《指导原则》中除非明确指出给药途径，皆为全身用药即口服或静脉给药。 1.品种选择：各种糖皮质激素的药效学和人体药代动力学(吸收、分布、代谢和排出过程)特点不同，因此各有不同的临床适应证，应根据不同疾病和各种糖皮质激素的特点正确选用糖皮质激素品种。 2.给药剂量：生理剂量和药理剂量的糖皮质激素具有不同的作用，应按不同治疗目的选择剂量。一般认为给药剂量（以泼尼松为例）可分为以下几种情况：（1）长期服用维持剂量：2.5~15.0 mg/d；（2）小剂量：<0.5mg〃kg-1〃d-1；（3）中等剂量：0.5~1.0 mg〃kg-1〃d-1；（4）大剂量：大于 1.0 mg〃kg-1〃d-1；（5）冲击剂量：（以甲泼尼龙为例）7.5~30.0 mg〃kg-1〃d-1。 3.疗程：不同的疾病糖皮质激素疗程不同,一般可分为以下几种情况： （1）冲击治疗：疗程多小于5天。适用于危重症病人的抢救，如暴发型感染、过敏性休克、严重哮喘持续状态、过敏性喉头水肿、狼疮性脑病、重症大疱性皮肤病、重症药
生命科学 Chinese Bulletin of Life Sciences 第22卷 第1期2010年1月 Vol. 22, No. 1 Jan., 2010 文章编号 ：1004-0374(2010)01-0036-09 收稿日期：2009-08-03 基金项目：国家自然科学基金项目(90717002; 20805001)*通讯作者： E-mail: yu.bai@https://www.doczj.com/doc/eb10727610.html, 植物激素检测技术研究进展 白 玉，杜甫佑，白 玉*，刘虎威 (北京大学化学与分子工程学院，北京 100871) 摘 要：植物激素是植物体内合成的一系列痕量有机化合物，它们在植物的生长发育和环境应答过程中 具有非常重要的作用，其超微定量及原位测定技术仍是制约植物激素研究的瓶颈问题之一。该文着重介绍了近年来茉莉酸及其甲酯、脱落酸、生长素、赤霉素和多肽激素等植物激素分析检测技术的最新研究进展，并对植物激素超微量、高灵敏检测技术研究中存在的问题和发展前景进行了简要的讨论。关键词：植物激素；分析检测；进展 中图分类号：Q946.855；Q94-334 文献标识码：A Recent development in determination of plant hormones BAI Yu, DU Fu-you, BAI Yu*, LIU Hu-wei (College of Chemistry and Molecular Engineering, Peking University, Beijing 100871, China) Abstract: Phytohormones, a series of trace organic compounds synthesized in plants, play important roles in plant growth, development and environmental response. The ultrasensitive and in-situ detection of phytohormones has been a crucial issue in the plant research. This paper mainly presents the recent development in determina-tion of jasmonic acid, methyl jasmonate, abscisic acid, auxin, gibberellin and peptide hormones, and discusses the challenges and prospects in this topic. Key words: phytohormones; determination; progress 植物激素是植物体内合成的一系列痕量有机化合物，它在植物的某一部位产生，运输到另一个或一些部位，在极低的浓度下便可引发生理反应，几乎参与了调控植物从种子休眠、萌发、营养、生长和分化到生殖、成熟和衰老的每个生命过程，既可调控植物自身的生长发育，又通过与植物所生存的外部环境互相作用调节其对环境的适应[1, 2]。通过调控如细胞分裂素、油菜素内酯和生长素等植物激素的代谢可显著地改良作物的株型结构和产量构成，从而大幅度提高作物产量和品质[3,4]。因此，国家自然科学基金委员会按照国家粮食发展需要、中长期科学和技术发展规划以及我国在植物激素研究方面所具有的知识积累和坚实的工作基础，在1997年启动了“植物激素作用的分子机理”重大研究计划，其中“植物激素成分分析、超微定量检测和原位检测”成为该重大研究计划中的六个核 心科学问题之一[5]。 植物激素主要包括生长素(a u x i n )、赤霉素(gibberellin, GA)、细胞分裂素(cytokinin, CTK)、脱落酸(abscisic acid, ABA)、油菜素甾醇类(brassinosteroids,BRs)、茉莉酸(jasmonic acid, JA)及其甲酯(MeJA)、水杨酸类(salicylic acids, SA)、乙烯(ethylene)和多肽激素(peptide hormones)等，它们在植物体内的含量极低(通常在ng/g ，甚至pg/g 水平上)，且周围共存的基体成分非常复杂，几乎不可能同时分析所有植物激素[6, 7]。此外，多数植物激素的性质不稳定，对温度等外界条件敏感，在各器官中呈现一定的动态分布。因此，如何精确可靠地对超微量的植物激
雌二醇的合成主要在颗粒中合成，孕酮主要由黄体产生。 雌激素的生理作用 促进雌性生殖器官的发育和维持女性第二特征，对代谢也有影响。 1．促进和保持第二性征 维持性器官的正常功能促进子宫内膜和肌层的代谢，使内膜增生加厚，阴道上皮增生，表层细胞发生角化， 增强子宫活动，提高子宫平滑肌对催产素的敏感性。 2．小剂量雌激素，有促进性腺激素释放，促进乳腺导管和腺泡生长发育的作用； 大剂量雌激素则有抑制促性腺激素作用、抑制催乳素作用、抑制排卵以及对抗雄激素的作用。 3．代谢促进水钠潴留、骨钙沉积、弱的同化代谢、提高血清TG和HDL和降低LDL水平、降低糖耐量等作用。 4．增加血凝度在应用较高含量的雌激素避孕药丸时有增加血栓发生的可能性，低含量雌激素避孕丸则不会发生。 雌激素用途 1．补充女性激素分泌不足 卵巢发育不全或功能低下,人工月经周期。 功能性子宫出血(雌激素分泌不足者） 2．绝经期综合征面颊红热、出汗、恶心、失眠、肥胖和情绪不安等。 适量补充雌激素，可反馈抑制GnRH、FSH和LH分泌，减轻症状。 3．避孕大剂量雌激素可抑制FSH分泌。 4．乳腺癌大剂量雌激素能抑制促性腺激素分泌，使内源性雌酮减少，用于绝经后5年以上晚期乳腺癌患者。 5．前列腺癌大剂量雌激素抑制促性腺激素分泌，拮抗雄激素的作用。 6．预防心血管疾病通过对脂蛋白代谢的影响和直接对血管的作用。绝经期后应用雌激素心血管疾病的发生可减少35％～50％。也有报告认为可增加血栓发生率。 7．其他 老年性骨质疏松、痤疮（粉刺）：增加骨骼钙沉积 可与雄激素合用白细胞降低症（放射线）升高白细胞 延缓阿尔茨海默病对老年人有学习记忆增强作用 孕激素的生理作用 主要做用于子宫内膜和子宫平滑肌，以适应受精卵的着床和妊娠，孕酮能抑制新颗粒的发育。1．生殖系统主要为助孕、安胎作用。 月经周期的后期，在雌激素使子宫内膜增生的基础上，孕激素则进一步使子宫内膜腺体生长与分支，内膜充血、增厚，由增殖期转变为分泌期，为受精卵着床和胚胎发育做好准备，有利于着床后胚泡继续发育。 经期，可使子宫内膜全部脱落，避免因脱落不全造成的出血。 妊娠期，能降低子宫肌对垂体后叶缩宫素的敏感性，抑制子宫活动，使胎儿安全生长。2．乳腺促进腺泡生长，为哺乳做准备。 3．神经内分泌
第三章植物的激素调节测试题 ）A．用图1中①②两个装置进行实验，可探究出植物的弯曲生长只与单侧光有关B．若将图1中装置④放在匀速旋转器的圆心上，植物茎将弯向小窗生长C．图2曲线上C点表示既不促进生长也不抑制生长，g是促进茎生长的最适生长素浓度D．据图2分析，若图1中装置①内茎的背地侧生长素浓度为m，则近地侧生长素浓度在m和2m之间3．油菜素内酯（BR）是一种植物激素，主要分布在植物生长旺盛的部位，其生理作用是促使细胞壁松弛，进而促进细胞伸长和细胞分裂。表中所示是相关研究的实验结果，下列分析错误的是（）编号123456油菜素内酯浓度/（mg?L-1）00．10．20．30．40．5芹菜幼苗平均株高/（cm）162038514220A．该实验的自变量是不同浓度的BRB．该实验的无关变量有芹菜幼苗的生长状况、培养幼苗的各种条件等C．由表中数据可知，促进芹菜幼苗生长的最适BR浓度一定在0．2～ 0．3mg?L-1之间D．在调节芹菜幼苗生长的过程中，与BR生理作用类似的激素可能是细胞分裂素4．研究发现不同干旱处理后某植物叶片内源激素中赤霉素（GA3）、生长素（IAA）、乙烯（Z）和脱落酸（ABA）的含量变化如图所示。据此判断，下列叙述不正确的是（）A．随着失水率的升高，乙烯的含量先增加后减少B．干旱环境下脱落酸的含量升高，植物的生长缓慢C．干旱环境中生长素减少与其光合作用减弱相适应D．重度干旱下，叶片中大
量减少的激素只有赤霉素和生长素5．某研究小组探究两种生长素类似物对月季插条生根的影响，得到右图所示实验结果。相关判断错误的是（）A．实验自变量是生长素类似物的种类和浓度B．实验中“对照组”插条处理溶液可能是蒸馏水C．结果显示等浓度的IBA对生根促进作用比NAA强D．结果表明NA A、IBA对生根的作用具有两重性6．图甲为燕麦胚芽鞘的向光性实验，图乙为水平放置于地面的幼苗根与茎的生长情况，图丙为生长素浓度与根（或芽、茎）生长的关系。下列分析合理的是（）A．单侧光照使甲图中背光侧生长素接近丙图中D浓度B．乙图中生长素对2处与3处的生长都是起抑制作用C．甲、乙两图中植物的生长情况是生长素作用具有两重性的结果D．不同浓度的生长素对同种植物同一器官生长的促进作用可能相同7．为了探究生长素的作用，将去尖端的玉米胚芽鞘切段随机分成两组，实验组胚芽鞘上端一侧放置含有适宜浓度IAA的琼脂块，对照组胚芽鞘上端同侧放置不含IAA的琼脂块，两组胚芽鞘下段的琼脂块均不含IAA。两组胚芽鞘在同样条件下，在黑暗中放置一段时间后，对照组胚芽鞘无弯曲生长，实验组胚芽鞘发生弯曲生长，如图所述。根据实验结果判断，下列叙述正确的是（） A、胚芽鞘b侧的IAA含量与b＇侧的相等 B、胚芽鞘b侧与胚芽鞘c侧的IAA含量不同 C、胚芽鞘b＇侧细胞能运输IAA而c＇侧细胞不能
植物激素及其检测技术 什么是植物激素？ 植物激素是植物合成的一类痕量有机化合物，他们在极低的浓度下就能引发生理反应，在植物的生长发育和环境应答中具有非常重要的作用。他们几乎参与了植物的每个生命过程，包括种子休眠、萌芽、营养、生长、分化、生殖、成熟和衰老。1928年，温特证实了首个植物内源激素——生物素的存在，随后其他植物激素陆续被科学家发现。以前，人们将植物内源激素分为五大类：生长素（auxins）、赤霉素（gibberellins）、细胞分裂素（cytokinins）、乙烯（ethylene）、脱落酸（abscisic acid）。前三类激素能促进植物的生长发育，乙烯主要促进植物器官成熟，而脱落酸抑制生长发育。水杨酸（salicylic acid）油菜素内酯（brassinosteroids）、茉莉酸（jasmonic acid，JA）、多胺（polyamines）、酚类（phenolic compounds）、独角金内酯（Strigolactones）等植物激素陆续被发现。 图1. 植物激素。 表1. 主要的植物激素及其代表化合物的分子结构、名称及含量范围（李艳华2011）。
为什么要检测植物激素？ 一方面，植物激素对于植物生长、发育和对环境响应起着非常重要的调控作用。另一方面，植物作为重要的农业产品、园艺产品等，植物激素（如细胞分裂素、生长素、油菜素内酯）能显著调节植物的株型结构和产量构成，从而大幅提升作物的产量和品质，茉莉酸、水杨酸、
油菜素内酯等多种激素在植物对抗病虫害中发挥重要作用。因此植物激素的定性、定量在研究植物激素作用机理、植物生命过程、提高农产品/园艺植株质量、和人类定向植物改造方面起到重要作用。 但是植物激素检测具有以下几个难点： 1、作为植物的次生代谢产物，含量极低。1g鲜样中的通常为ng级植物激素，甚至pg级； 2、不同样本含量差异大；样本越新鲜越好。 3、基质效应干扰严重。基质是样品中分析物以外的组分，常对分析物的分析鉴定产生干扰，影响结果的准确性，这种干扰被称为基质效应。 如何检测植物激素？ 目前，主要有以下几个检测植物激素的方法： 生物鉴定法：这是最早用于植物激素检测的方法，根据待测定的激素特性进行植物激素检测。比如1928年，温特利用生长素能使燕麦胚芽鞘弯曲的特性来鉴定生长素浓度。该方法对样本的纯度要求高，分辨率不高，重复性差，所以应用少。 免疫检测法：，该技术基于抗原与抗体的特异性结合，是比较常用的方法，具有较高的专一性。免疫检测方法又可以分为放射免疫分析（RIA）和酶联免疫吸附分析（ELISA）。RIA的检测灵敏度高，重复性好，但是对实验条件要求高。ELISA相比而言，更简单易行，因此使用更为广泛。 生物传感器：基于生物传感器的方法允许连续、直观的激素水平监测，主要分为电化学生物传感器、免疫传感器和遗传编码传感器。电化学生物传感器利用酶促氧化还原反应，并由转