实验一蛋白质的定量测定
——考马斯亮蓝染色法测蛋白质含量
教学目的：学习考马斯亮蓝染色法测蛋白质含量的原理和方法。进一步掌握分光光度法，
包括确定最大吸收波长，制作标准曲线，准确测定未知样品浓度，正确使用测定仪器等。
教学重点：考马斯亮蓝染色法测蛋白质含量的原理；制作标准曲线，准确测定样品浓度。
教学难点：确定最大吸收波长；正确利用标准曲线求得样品浓度。
教学安排：
时间分配：预习效果检查15分钟；实验讲解15分钟；教师演示10分钟；学生进行实验120分钟；实验讨论20分钟。共4学时。
课堂安排：
第一部分预习效果检查
一、检查预习报告。
二、提问
三、讨论预习思考题
第二部分实验讲解
一、目的要求
二、实验原理
三、实验材料
四、实验方法及注意事项
五、布置实验要解决的问题：样品的蛋白质浓度应该在什么范围才能使用本法
第三部分实验演示
介绍722分光光度计的操作注意事项，演示其操作方法。邀请一个同学操作，教师对其
操作作出点评。
第四部分实验指导
实验过程教师在实验室巡视，学生可随时提问，教师予以解答，同时及时纠正学生的错误操作。
第五部分实验讨论
一、实验总结
1、学生总结
2、教师总结
二、讨论实验操作之前布置的问题
教学参考文献：
1、https://www.doczj.com/doc/f915782697.html,/Index.htm
2、《生物化学实验》，李玉兰主编，中国医药科技出版社2008年出版。
授课教师年月日
教研室主任年月日
实验二Sephadex G-50分离核黄素和丙种球蛋白
教学目的：学习和掌握分子筛凝胶层析法的原理和基本操作。学会使用Sephadex G-50分离核黄素和丙球蛋白。
教学重点：分子筛凝胶层析法的基本原理和操作技术；洗脱曲线的绘制。
教学难点：分子筛凝胶层析法的基本原理和操作技术；洗脱曲线的绘制。
教学安排：
时间分配：预习效果检查15分钟；实验讲解25分钟；教师演示20分钟；学生进行实验200分钟；实验讨论20分钟。共6学时。
课堂安排：
第一部分预习效果检查
一、检查预习报告。
二、提问
三、讨论预习思考题
第二部分实验讲解
一、目的要求
二、实验原理
三、实验材料
四、实验方法及注意事项
五、带着问题做实验
①蓝色葡聚糖除了可以测外水体积，在本实验中还有什么作用？
②可以用哪些方法测定洗脱液中的蛋白质含量以绘制洗脱曲线？本实验选用的方法有何优
缺点？如果不想造成样品的损耗，则应选用哪种方法？
第三部分实验演示
演示装柱、上样、洗脱、卸柱以及分部收集器的使用。邀请一个同学再操作一遍，教师
对其操作作出点评。
第四部分实验指导
1、指导装柱，要求装好的层析主没有气泡、没有断层，不合格则重装。
2、指导平衡过程和洗脱过程，发现问题及时解决。
3、柱床稳定，开始常规洗脱后，穿插介绍与本学科相关的期刊、网站介绍以及文献资料的
检索和运用。
第五部分实验讨论
一、实验总结
1、学生总结
2、教师总结
二、讨论实验操作之前布置的问题
教学参考书：
1、https://www.doczj.com/doc/f915782697.html,/Index.htm
2、《生物化学实验与指导》；韦平和主编；中国医药科技出版社2003年8月出版。
授课教师年月日
教研室主任年月日
实验三凝胶电泳技术—柱式不连续电泳分析丙球蛋白
教学目的：掌握盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理。学习盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的应
用，包括制胶、灌胶、加样、电泳、剥胶、染色及脱色等。
教学重点：盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理及操作技术。
教学难点：盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理及操作技术。
教学安排：
时间分配：预习效果检查15分钟；实验讲解25分钟；教师演示30分钟；学生进行实验360分钟；实验讨论30分钟。共10课时。
课堂安排：
第一部分预习效果检查
一、检查预习报告。
二、提问
三、讨论预习思考题
第二部分实验讲解
一、目的要求
二、实验原理
三、实验材料
四、实验方法及注意事项
五、带着问题做实验
①为何要在塑料套管内加蔗糖溶液？可以换成水吗？
②加完小孔胶及大孔胶之后，为何要加一层水？加水时动作为何要轻？
③样品为何要用蔗糖溶液配制？用水配制可以吗？
第三部分实验演示
演示制胶、灌胶、进样、接线、剥胶等过程（在实验进行的相应的时间段演示）。邀请一个同学再操作一遍，教师对其操作作出点评。
第四部分实验指导
1、指导从配胶开始的各个实验环节。
2、电泳稳定地进行之后，穿插通过多媒体演示，介绍生物技术的应用。
第五部分实验讨论
一、实验总结
1、学生总结
2、教师总结
二、讨论实验操作之前布置的问题
教学参考书：
1、https://www.doczj.com/doc/f915782697.html,/Index.htm
2、《生物化学实验与指导》；韦平和主编；中国医药科技出版社2003年8月出版
授课教师年月日
教研室主任年月日
实验四影响酶促反应速度的因素
教学目的：观察和验证温度、pH、激动剂及抑制剂对酶活性的影响。
教学重点：建立考察温度、pH、激动剂及抑制剂对酶活性影响的方法，学会唾液淀粉酶的
提取方法。
教学难点：不同实验者合适的酶浓度的确定。
教学安排：
时间分配：预习效果检查15分钟；实验讲解20分钟；教师演示5分钟；学生进行实验120分钟；实验讨论20分钟。共4课时。
课堂安排：
第一部分预习效果检查
一、检查预习报告。
二、提问
三、讨论预习思考题
第二部分实验讲解
一、目的要求
二、实验原理
三、实验材料
四、实验方法及注意事项
五、带着问题做实验：
①为何制备唾液淀粉酶溶液后还需通过预试选出不同操作者合适的唾液稀释度？
②在“温度对酶促反应速度的影响”实验中，在沸水浴中保温的试管滴加碘液后有何现象？
请对现象进行分析。
第三部分实验演示
演示唾液淀粉酶的提取和白瓷板的使用。邀请一个同学再操作一遍，教师作出点评。
第四部分实验指导
1、指导各个实验环节。
2、穿插介绍生物技术的应用。
第五部分实验讨论
一、实验总结
1、学生总结
2、教师总结
二、讨论实验操作之前布置的问题
教学参考文献：
1、https://www.doczj.com/doc/f915782697.html,/Index.htm
2、《生物化学实验》，李玉兰主编，中国医药科技出版社2008年出版。
授课教师年月日
教研室主任年月日
实验五不同水果中维生素C的提取及含量比较
教学目的：学习维生素C的提取和定量测定的原理和方法，掌握微量滴定法的基本操作过
程，学习以研究性论文的形式完成本次实验报告的方法。
教学重点：定量测定维生素C的原理和方法；滴定法的基本操作技术。
教学难点：研究性论文的书写。
教学安排：
时间分配：预习效果检查10分钟；实验讲解40分钟；教师演示10分钟；学生进行实验100分钟；实验讨论20分钟。共4学时。
课堂安排：
第一部分预习效果检查
一、检查预习报告。
二、提问
三、讨论预习思考题
第二部分实验讲解
一、目的要求
二、实验原理
三、实验材料
四、实验方法及注意事项
五、研究性论文的书写格式
六、带着问题做实验：
①滴定时用的是1％草酸，为什么提取时用2%的草酸溶液？
②为了测得准确的维生素C含量，实验过程中都应注意哪些操作步骤？为什么？
第三部分实验演示
演示组织捣碎机和微量滴定管的操作。邀请一个同学再操作一遍，教师作出点评。
第四部分实验指导
指导各个实验环节，特别检查每组装液后微量滴定管没有气泡，有气泡则重装。
第五部分实验讨论
一、实验总结
1、学生总结
2、教师总结
二、讨论实验操作之前布置的问题
教学参考资料：
《生物化学实验》，李玉兰主编，中国医药科技出版社2008年出版。
授课教师年月日
教研室主任年月日实验六酵母RNA的提取及组分鉴定
教学目的：学习和掌握稀碱法从酵母中提取RNA的原理和操作技术，理解设计思路。正确
使用离心机，掌握上清液和沉淀的取舍。掌握定性鉴定RNA的原理和方法。
教学重点：稀碱法从酵母中提取RNA的原理、操作、设计思路、上清液和沉淀的取舍。
教学难点：稀碱法从酵母中提取RNA的原理、操作、设计思路、上清液和沉淀的取舍。
教学安排：
时间分配：预习效果检查10分钟；实验讲解20分钟；教师演示10分钟；学生进行实验200分钟；实验讨论20分钟。共6学时。
课堂安排：
第一部分预习效果检查
一、检查预习报告。
二、提问
三、讨论预习思考题
第二部分实验讲解
一、目的要求
二、实验原理
三、实验材料
四、实验方法及注意事项
五、带着问题做实验：
①为什么用稀碱溶液可以使酵母细胞裂解？
②上清液和沉淀的取舍依据？
第三部分实验演示
演示配平方法和离心机的操作。邀请一个同学再操作一遍，教师作出点评。
第四部分实验指导
1、指导各个实验环节，特别是离心机的使用。
2、在离心的等待过程中穿插介绍分子生物学的进展。
第五部分实验讨论
一、实验总结
1、学生总结
2、教师总结
二、讨论实验操作之前布置的问题
教学参考资料：
《生物化学实验》，李玉兰主编，中国医药科技出版社2008年出版。
授课教师年月日
教研室主任年月日