动物微生态系统的生物防治和营养免疫作用及微生物饲料添加剂的科学使用
1 重新认识饲用抗生素的利弊和动物微生态系统的重要性
1.1 饲用抗生素的利弊
20世纪中叶，抗生素等的发现以及化学抗菌物质合成的成功，首先在人类投入使用，随后被广泛用作饲料添加剂，在动物保健和畜牧生产中发挥了重要作用。但由于对这些添加剂的长期使用及滥用，其弊端日益得到广泛的认识：①抗生素在畜禽产品肉、蛋、奶、毛、皮中残留，危害人体健康，如产生“三致”、过敏，甚至产生人类目前的科学水平还未能了解的疾病或潜在危害。②导致畜禽体内外的微生物对抗生素产生耐药性或抗药性，药效降低，用药量不断增加，使养殖成本不断增加的同时也使药物残留更为严重，形成恶性循环。③畜禽长期使用或滥用抗生素后，在抑制致病微生物的同时，也杀灭了动物体内正常的有益的微生物菌群，使机体正常微生态体系（医学界称之为“新的生理系统”）失衡，造成动物内源性感染或二重感染。④使畜禽对抗生素产生依赖，抑制动物免疫系统的生长发育或降低了动物的免疫功能，使抗病能力下降。为了克服抗生素等药物添加剂带来的种种弊端，世界各国的科学家努力寻求和开发无毒副作用的新型饲料添加剂。而微生态制剂正以其绿色安全、无毒副作用、无残留的优点逐步成为替代抗生素类添加剂的主力军。同时，我们也要全面认识动物微生态系统和微生态调控的重要作用。
1.2 动物微生态系统（
在猪、家禽、兔等单胃动物的消化道中寄居着大量的活细菌。据Luckey估计，人类消化道中含1014（10万亿）个细菌细胞（而人或动物的体细胞仅为1013个，即1万亿个），不管是单胃哺乳动物（如人、猪、兔）还是禽类，其每克湿粪便中都含有5×109～5×1010个细菌，即粪便湿重的40%以上是细菌细胞。据Gustafsson（1984）研究表明，人体携带的微生物总量约为1 271g，其中肠道占1 000g，肺20g，皮肤200g，口腔20g，阴道20g，鼻10g，眼1g，即胃肠道的微生物占人体总微生物量的78.7%。肠道微生物可分为3类：①共生性细菌：它是主要菌群（>90%），包括球菌、丙酸菌、乳酸菌及双歧杆菌等。这类细菌可以自营，同时又可利它（宿主），细菌将复杂的碳水化合物（纤维素或非淀粉多糖）发酵成为乳酸或挥发性脂肪酸（如丙
酸）。乳酸在肠道形成酸性环境，对其它致病菌可产生“竞争排除作用”，但乳酸堆积多也会刺激肠道蠕动，使肠道内容物排空加快。②机会性细菌：约占10%，包括无病原性的大肠杆菌、链球菌及肠球菌等。这些机会性细菌视肠道环境而改变停留在肠道的数量及时间。③致病性细菌：含量极少（
1.3 长期以来动物防治战略和观念的错误
在畜禽或水产养殖中，之所以对抗生素产生依赖，是人们希望用抗生素来发挥防病保健和提高动物的生产效率。但是在过去的50多年中，人类的防病观念和防病战略存在着严重的片面性或错误，即一味地强
调“抑制或杀灭有害微生物”，大量和长期使用抗生素以至于出现目前抗生素滥用所致的一系列后患和潜在危险，却忽视了由动物的正常菌群、免疫与营养构成的“微生态三角”的防病保健、营养等重要作用。
2 影响微生态制剂功效的因素
影响微生态制剂发挥其功效的因素很多，包括制剂的制备方法、贮藏条件、污染（如杂菌）、存活率、不正确的产品菌种组合方式、肠内菌群的状态、使用剂量和次数、动物（宿主）的年龄、在肠道中的存活率、饲料成分的变化、生理状态等。了解这些因素对微生态制剂功效的影响是非常重要的。
2.1 菌种本身的特性是发挥其效能的关键因素
作为生产用微生态制剂菌株首先必须保证不产生任何内外毒素，无毒、无害、无副作用。由于多数微生态制剂是以活菌形式发挥作用的，如双歧杆菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、酵母菌类，大多数要通过消化道途径发挥作用，这就决定其必须经过胃的酸性环境和十二指肠上部的胆汁分泌区，从筛选的角度考虑，要筛选具有耐受胃酸、胆汁酸等肠内对益生菌不利环境因素的菌株。从剂型角度上，要考虑能保护微生态制剂通过胃酸及胆汁酸的剂型。
微生态制剂菌株必须具有黏附性才能在肠道中生存并发挥作用。因此，对菌株的黏附性应给予足够重视。某些制剂将黏附因子直接加入到制剂中，加强益生菌的黏附作用。如法国的乐托尔，是一种嗜酸乳酸杆菌死菌加发酵液中的黏附因子的冻干物。
对产乳酸益生菌来说，既要有较强的抗胃酸能力，同时也要有自身的产酸能力及产生抗菌活性物质的能力。例如，某些微生态活菌制剂主要是利用乳酸杆菌产酸和过氧化氢发挥其抑制病原菌繁殖的作用。
特别强调，虽然有些微生态制剂所用的菌种“名称”相同，如都是乳酸菌或酵母菌或芽孢杆菌或双歧杆菌，但是由于同名菌种的不同菌株的生理特性（如生长快慢、最佳生长温度、所需生长环境或条件、世代间隔、代谢产物等）和功效存在较大差异，最终表现为微生态制剂的功效也会有明显不同。
2.2 生产和储存条件对益生菌存活性能的影响
生产工艺条件对微生态制剂发挥其功效具有很大影响。如菌株在发酵时的生长条件以及发酵结束的时间，会影响菌体在干燥和贮藏时的存活率。同一益生菌菌株，采用不同的发酵条件生产，如使用嗜酸乳酸杆菌，一种发酵条件是37℃培养12h；另一种发酵条件是32℃培养
48h。同一初始菌株，由于发酵条件不同，其终端代谢产物不同，作为微生态制剂的作用效果也会有很大不同。
生产技术对微生态制剂的功效也有较大的影响，目前常用的发酵技术，主要包括液体深层发酵和固体发酵。利用液体深层发酵技术生产的产品，由于生产过程能够严格控制，一般来说效果比较稳定。用固体发酵的产品，由于灭菌不能彻底，经常有杂菌污染，从而影响了产品的功效，表现为功效不稳定或不明显，甚至无效。
制粒或压片过程的温度和压力对细菌的存活率都有很大影响。
贮存条件是影响益生菌存活率和货架期的关键因素。活菌制剂在贮存过程中最好保持在低温、低湿度、密封、隔氧的条件下，才能使制剂保持较高的存活率和长的货架期。对于一个成功的微生态制剂，在其可以接受的货架期内，具有较高的存活率是绝对不可缺少的。
有些微生态制剂，它的标示菌种与实际不符，有些则根本不存在其标示的菌种，有的制剂在生产过程中对发酵基质不灭菌，杂菌污染严重，产品质量不合格，这样很容易导致负面效果或引起各种各样不利影响，甚至扰乱微生态制剂市场。
2.3 不同类别的微生态制剂的作用特点及效果不同
微生态制剂主要包含以下几种类别：①液剂：单一菌种或混合菌种的发酵液，含有活菌和代谢产物。②发酵冻干制剂：液体发酵后，经浓缩，然后加保护剂冷冻干燥。③普通固体发酵生产的粉剂。④经液体深层发酵和一系列后加工生产的粉剂、片剂、胶囊和微胶囊制剂等。⑤软膏制剂（如牙膏状）。⑥气雾剂等。针对不同对象，可以采用不同的制剂和剂型，如饲料添加主要采用粉剂，包括②、③、④种，如预防治疗动物腹泻、拉稀可用液剂、片剂、胶囊口服、喷雾剂口腔喷雾或软膏口服，如在制粒饲料中添加则宜用微胶囊包被的产品，效果较为理想。另外，对微生态制剂采用微胶囊化制剂工艺可显著提高制品的货架期和抗胃酸
及胆汁酸的能力。国外已有一些产品采用这种剂型，国内中国农业大学饲料生物技术实验室也研发出了此类技术和产品，其货架期可延长到2年。
2.4 宿主因素对微生态制剂性能的影响
2.4.1 宿主动物的年龄或饲养阶段
宿主因素对微生态制剂的影响也是多方面的，宿主的生理性改变如年龄的改变，在幼龄、育成期和老龄期或断奶期和泌乳期等都会影响微生态制剂的应用效果。
2.4.2 宿主动物的饲料成分
饲料成分对微生态制剂发挥其功效也有影响。某些食物成分可以使胃酸或胆汁酸分泌增多，影响微生态制剂在经过胃或十二指肠时的存活率。药物特别是口服对益生菌敏感的抗生素对益生菌具有巨大的杀灭作用，服用微生态制剂时最好不要同时服用抗生素。
2.4.3 宿主动物的生理状态
一些应激因素等可诱使肠道习惯性产生激素，降低肠道黏膜层的厚度，降低益生菌的黏附能力，减弱益生菌发挥其功效水平。
2.4.4 宿主动物的肠道菌群状态
宿主肠内的微生物菌群对益生菌在宿主肠道中发挥作用具有多方面的影响。通常宿主肠道的正常菌群对外来菌群具有强烈的定植抗力，作为非宿主原有正常菌群成员的益生菌很难在宿主肠道中黏附定植。如果宿主处于菌群失调状态，微生态制剂就容易发挥其作用，效果更明显。
2.5 使用方法、剂量等因素对微生态制剂性能的影响
服用剂量和次数可以影响微生态制剂的应用效果。一般认为，在饲料中添加，用于促生长或预防疾病，至少每克饲料应含有106个有效活菌，否则难以发挥明显的功效。
3 微生态制剂的科学合理使用及注意问题
微生态制剂具有无毒副作用、促进动物生长、提高饲料转化率、可替代抗生素等优点。但由于存在菌种的筛选、活菌数、菌种的失活、杂菌含量的多少、使用条件等问题而导致微生态制剂活性降低，使用效果的重复性和稳定性较差或时好时坏等。因此在养殖生产或饲料生产中为了确保微生态制剂的使用效果，应科学合理使用，并从以下几方面着手。
3.1 菌种的选择
3.1.1 菌种的来源
在微生物的大家族里，可选作微生态制剂的菌种很多，包括细菌、真菌及多来自土壤、腌制品、发酵食品以及动物消化道和粪便的无毒菌株。美国食品药物管理局（FDA）和美国饲料公定协会（AAFCO）公布了
40余种“可直接饲喂且通常认为是安全的微生物（GRAS）”作为微生态制剂的出发菌株，其中：①乳酸杆菌属（Lactobacilleae）：短乳杆菌（L. Brevis）、嗜酸乳杆菌（L. Acidophilus）、保加利亚乳杆菌（L. Bulgaricus）、干酪乳杆菌（L.Casei）、纤维二糖乳杆菌（L. Cellosus）、弯曲乳杆菌（L. Curvatus）、德氏乳杆菌（L. Delbruekii）、发酵乳杆菌（L. Fermentum）、罗特氏乳杆菌（L. Reuterii）、乳酸乳杆菌（L. lactis）、植物乳杆菌（L. Plantarum）。②双歧杆菌属（Bifidobactirium）：青春双歧杆菌（B. adolescentis）、婴儿双歧杆菌（B. infantis）、动物双歧杆菌（B. animalis）、长双歧杆菌（B. longum）、嗜热双歧杆菌（B. thermophilum）、两歧双歧杆菌（B. bifidum）。③肠球菌属（Enterococcus）：粪肠球菌（E.faecalis）又称粪链球菌（S. faecium）、屎肠球菌（E.faecium）又称屎链球菌（S. faecium）。④链球菌属（Streptococcus）：嗜热链球菌（S. thermophilus）、乳酸链球菌（S. lactis）又称乳酸乳球菌
（https://www.doczj.com/doc/f515912478.html,ctis）、中间型链球菌（S. intermedius）、乳脂链球菌（S. cremoris）、二丁酮链球菌（S. diacetylactis）。⑤芽孢杆菌属（Bacillus）：凝结芽孢杆菌（Bacillu coagulans）、缓慢芽孢杆菌（B. lentus）、枯草芽孢杆菌（B. subtilis）、地衣芽孢杆菌（B. lincheniforms）、短小芽孢杆菌（B. pumilus）。⑥明串珠菌属（Leuconostoc）：肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）。⑦片球菌属（Pediococcus）：乳酸片球菌（Pediococcus acidilacticii）、啤酒片球菌（P. cerecisiae）、戊糖片球菌（P. pentosaceus）。⑧乳球菌属（Lactococcus）：乳酸乳球菌（https://www.doczj.com/doc/f515912478.html,ctis）又称乳酸链球菌（S. lactis）。⑨丙酸杆菌属（Propionibacterium）：谢氏丙酸杆菌（P.shermanii）、费氏丙酸杆菌（P. Freudenreichii）。⑩拟（类）杆菌属（Bacteroides）：猪拟（类）杆菌（B. suis）、瘤胃生拟（类）杆菌（B. ruminocola）、多毛拟（类）杆菌（B. Capillosus）、嗜淀粉拟（类）杆菌（B. amylophilus）。{11}酵母菌属（Yeast）：啤酒酵母或酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）。{12}曲霉菌属（Aspergillus）：黑曲霉（Aspergillus niger）、米曲霉（A. oryzae）。
我国农业部1999年6月公布（105号公告）了干酪乳杆菌、植物乳杆菌、粪链球菌、屎链球菌、乳酸片球菌、枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、乳链球菌、啤酒酵母、产朊假丝酵母和沼泽红假单胞
菌12种可直接饲喂动物、允许使用的饲料级微生物饲料添加剂菌种，并在生产实践中表现出良好的生产性能。此外，在国内外还陆续有新的应用菌种的报道，如环状芽孢杆菌（B.circulans）、坚强芽孢杆菌（B.firmus）、巨大芽孢杆菌（B.megaterium）、丁酸梭菌（Clostridium butyicum）、芽孢乳杆菌（L.sporogenes或sporolactobacillus）等。从动物生产和饲料工业角度来评价，芽孢杆菌类有益微生物较其它微生物具有更多优点，因而对其研究和应用更加广泛。
3.1.2 菌种的安全性
作为微生态制剂，菌种的安全性或非病原性是筛选菌种的首要条件，即使促生长或者其它生产性能再好，病原菌绝对不予考虑。因此，必须确定出发菌株的安全性，并且对该菌种可能的代谢产物进行系统的研究。值得注意的是，一株现在无毒副作用的菌种，将来也可能会因为理化、微生物毒素和菌种本身原因引起负性突变，所以应定期对生产菌种进行安全性检测或评价。
评价菌种的安全性包括致病性、感染性、毒力或毒素、代谢活性以及菌株的遗传特性。国外学者提供了一些评价乳酸菌安全性体外研究的方法，可以借鉴。
3.1.2.1 对益生菌致病性和感染能力的检测
没有致病性、感染性应该是益生菌安全性必须具备的条件。要证明益生菌是否具有感染性很困难，特别是厌氧菌。对弱感染力的细菌，即使给健康动物大量口服也不会引起感染。通常需要多种条件共同参与，才能建立起感染。一般采用抗生素脱污染或口服免疫抑制剂等方法，造成动物的菌群屏障功能和免疫功能丧失，再喂给微生态制剂，检查其是否引起感染。另外，采用无菌动物或悉生动物检查益生菌的感染也是可以使用的方法。有的益生菌可能引起定位转移，也是一种感染的表现，国外有学者将悉生小鼠口服长双歧杆菌BB536菌株2~3d后发现，细菌在肠内容物上的含量是10～100亿个/g。在1～2周后长双歧杆菌发生定位转移到肠黏膜淋巴组织、肝脏、肾脏，4周后全部消失。说明定位转移未能引起任何感染和毒副作用发生。采用悉生动物研究实验方法研究益生菌安全性是评估益生菌安全性和功效原理的有效方法，但这需要良好的试验研究条件，对于一般的用户是难以进行该方面评价的。
3.1.2.2 益生菌代谢活性、有毒物产生的检测
评价微生态制剂安全性的另一个方面是检测益生菌是否产生有毒代谢产
物及有害酶类，如发酵蛋白质产生氨、吲哚、酚、胺基、硫化氢等物质。目前还没有双歧杆菌和乳酸杆菌能够产生有毒物质的报道。检测发现双歧杆菌具有较低的脱胺酶活性和有较高的同化氨的能力，同时对胆汁酸具有较强的脱饱和能力。
检查益生菌毒性的常规方法一般用急性毒性试验（即一次性大剂量口服微生态制剂）和慢性毒性试验（即多次小剂量给试验动物口服微生态制剂）。
作者曾给试验动物大鼠多次皮下注射（左右侧每次各10ml，每月一次）由乳酸菌、酵母菌和芽孢杆菌组成的微生态制剂，历时1年半后，其生理状况十分健康，解剖后未发现任何脏器有异常变化。这也是评价益生菌安全性的方法。
3.1.2.3 血小板凝集活性、黏膜脱落活性
有些细菌产生的血小板凝集反应，被认为是促进感染心内膜炎的因素。有学者检测从心内膜炎感染分离到的5株鼠李糖乳酸杆菌和16株实验室内鼠李糖乳酸杆菌，发现从感染部位分离到的菌株全部具有血小板凝集反应，而实验室菌株只有一半具有此反应。凝集反应与细菌细胞外层蛋白结构有关。由感染部位分离到的菌株比实验室内的鼠李糖乳酸杆菌具有更强的凝集能力。某些菌株可以产生使黏膜细胞表面糖蛋白脱落的糖苷酶（ylycosidases）或芳香氨基酶（arylamidase）而引起感染，检测这些酶即可确定是否具有毒性或感染性。
3.1.2.4 抗生素耐药性
耐药性菌株的产生是人们广为关注的问题，已经发现从感染部位分离到的肠球菌已出现多重耐药性，即同时耐受多种抗生素。菌株耐药性的产生可以由使用抗生素的选择作用而产生，也可以由具有耐药性的细菌转导产生。关于天然具有抗生素耐药性的双歧杆菌和乳酸杆菌已有报道。为了避免具有耐药因子的菌株向肠内细菌转导耐药因子，益生菌株不应携带耐药因子。虽然某些特殊目的的益生菌株可以具有一种或多种抗生素耐药性，但通常情况下不应设计这种具有多重抗药性的菌株。
人们常提到肠球菌的耐药性问题，特别是质粒编码因子能否把耐药因子传给正常菌群或病原菌。有试验表明，罗特乳酸杆菌（L. reuteri）可将耐药因子传给屎肠球菌或粪肠球菌，但是这种传递是在抗生素的选择压力下产生的，不使用抗生素并未发现耐药性质粒的传递。
耐药性传递，不仅肠球菌，其它益生菌菌株都可能发生。世界各国生产
的酸奶制品所用的乳酸杆菌、双歧杆菌及链球菌大部分都有耐药性。这些菌是动物和人类长期历史进化过程中形成的正常微生物群落，在自然情况下本来就可以互相转移。如果没有其它选择性压力因素存在，作为益生菌剂传播耐药性的忧虑是没有必要的。目前由益生菌耐药性所导致的危害还未见报道。
3.2 针对不同的畜禽和不同生长阶段，选择使用微生态制剂
在使用微生态制剂的同时要充分考虑到使用对象和目的，对不同的动物要区别对待，不同种类的动物消化系统的特点不同。因正常菌群在动物消化道内定植是通过细菌的粘附作用完成的，这种粘附作用具有种属特性，对某一类动物的消化道上皮表现出较强的粘附性，而对其它动物可能表现出低粘附性或不粘附性。如防治1～7日龄仔猪腹泻首选植物乳酸菌、乳酸片球菌、粪链球菌等产酸的制剂；而促进仔猪生长发育、提高日增重和饲料报酬，则选用双歧杆菌等菌株。因此，在实际生产中应根据不同的需要选择合适的制剂，预防动物常见疾病主要选用乳酸菌、片球菌、双歧杆菌等产乳酸类的细菌，效果会更好；促进动物快速生长、提高饲料效率，则可选用以芽孢杆菌、乳酸杆菌、酵母菌和霉菌等制成的微生态制剂；如果以改善养殖环境为主要目的，应从以光合细菌、硝化细菌以及芽孢杆菌为主的微生态制剂中去选择。
不同的畜禽、不同的生长发育阶段、不同的用途也需要有选择性的添加由不同益生菌组成的微生态制剂，具体参照表1进行。
3.3 微生态制剂的应用条件或环境
如何保持菌种的稳定性是从事微生态制剂研究和生产面临的最实际的问题。对微生态制剂而言，主要指对特定环境的耐受力如温度、湿度、酸度、机械摩擦和挤压以及室温条件下的存贮时间等对微生态制剂活性的影响；而对饲用微生态制剂必须经受饲料加工过程中高温的考验，所以菌种对温度的稳定性显得尤为重要。不同的菌种对高温的耐受力差异较大，芽孢杆菌耐受力最强，100℃下2min只损失5%～10%，而在80℃下5min乳酸杆菌、酵母菌损失70%～80%；95℃下2min损失98%～99%。一般制粒温度80～90℃对芽孢杆菌影响较小，对乳酸杆菌、酵母菌和粪链球菌等影响较大。就耐水性，孢子型细菌耐受性最好，肠球菌次之，乳酸杆菌最差。除耐酸性的芽孢杆菌和乳酸菌外，一般的活菌制剂在胃酸作用下大量被杀死，残存的少量活菌进入肠道后很难形成菌群优势。因此，不耐酸的活菌制剂其含菌量必须达到相当大的浓度才能发挥益生作用。除此以外，饲料的保存时间、饲料中的矿物质（如重金属离子Cu2+、Zn2+、Mn2+、Fe2+等和食盐）、胆碱和不
饱和脂肪酸也会影响益生菌的活力。
为了提高微生态制剂的稳定性和活力，目前国内外采用微胶囊化技术或包衣技术。微胶囊化技术是当今世界发展迅速、用途广泛而又比较成熟的一种技术。制备微胶囊的过程称为微胶囊化（microencapsulation），它是将固体、液体或气体包裹在一个微小的胶囊中。包封用的壁壳称为壁材，被包的囊芯称为芯材，芯材可以是单一的，也可以是复合的。囊壁厚度一般为0.1～200μm之间，微胶囊的粒子大小，因制备工艺及用途不同而不同，理论上可以制成0.01～1 000μm的微胶囊。常用制备微胶囊的方法有：相分离法、界面聚合法、喷雾冷却和喷雾干燥法、挤压法、双重乳状液法。
将乳酸菌或一些低抗逆性的益生菌进行微胶囊化包被的优点在于：①可将菌体与外界的不良环境分开，免受微量元素的损害，减缓制粒过程中温度和压力的影响。②形成固体微颗粒，利于在预混料中的均匀分布，也有利于储存和运输。③采用肠溶性壁材后，还能防止胃液的破坏，从而使尽可能多的菌体到达肠道，真正起到保健和治疗的作用。因此，微胶囊化有望提高乳酸菌在生产、贮存和消费过程中的稳定性，生产出耐贮存、耐高温、耐高压、耐酸性的乳酸菌微生态制剂。中国农业大学饲料生物技术实验室在国家“863”高科技项目和国家“跨越计划”的资助下，成功研发了利用喷雾干燥法制备乳酸菌微胶囊的技术，并申请了国家发明专利。国外进入我国市场的有瑞士的粪链球菌微胶囊“赐美健”、荷兰的“百福菌”等，但是价格很高。因此，研究对乳酸菌等低抗逆性微生物进行微胶囊化包被，并提供一条适用的工业化途径，使其稳定性增强，贮存期延长，使这种低抗逆性微生物添加剂可以与其它饲料原料共存、共用，将有广阔的前景。
3.4 活菌浓度和使用剂量
微生态制剂的功效是通过有益微生物在动物体内的一系列生理活动来实现的。其最终效果同动物食入活菌的数量密切相关。若数量不够，在体内不能形成优势菌群，难以起到益生作用。瑞典规定乳酸菌制剂活菌数要达到2×1010个/g。我国正式批准生产的制剂中，对含菌数量与用量的规定是：芽孢杆菌含量≥5×108个/g；乳酸杆菌≥1×107个/g。德国学者认为，仔猪饲料中加入微生态制剂其含菌量应达到2×105～
5×105个/g；育肥猪饲料中每克加入106个芽孢杆菌，粪中大肠杆菌减少35%，每天添加0.5～0.6g微生态制剂方可起到治疗效果。而乳酸杆菌因制剂不同而有差异，其数量不少于107个/g，每日添加0.1～3g，一般添加量为0.02%～0.2%。若将微生态制剂添加于饲料中，
其目标活菌不应低于109个/kg。但是，关于添加过量的益生菌产生的后果，鲜有报道，根据作者的研究结果，每千克断奶仔猪饲料中添加6×1011个枯草芽孢杆菌，其促生长效果差于最适添加量，但好于不添加组的效果。
3.5 微生态制剂与抗生素的配合应用
由于微生态制剂是活菌制剂，而抗生素具有杀菌作用。因此，一般情况下，在畜禽饲料中不可同时应用，若同时应用时，微生态制剂的功效将大大减弱。但我们仍可以巧妙地利用某些抗生素，如当肠道中存在较多的病原体，而微生态制剂又不能取代肠道微生物时，会降低其抵抗力，或使用某些微生态制剂补充特定的正常菌时，对过盛的种群，可利用窄谱抗生素予以控制。对于肠道菌群紊乱或菌群调整不奏效的病例，可在用抗生素后用微生态制剂，即先选用肠道不吸收的针对性较强的广谱抗生素如新霉素、卡那霉素、制霉菌素口服杀灭或抑制致病微生物的繁殖，控制疾病的蔓延。但抗生素在杀灭致病菌的同时，动物体内的正常菌群也遭到破坏，此时应及时引入微生态制剂，通过其益生作用，使其紊乱的肠道菌群恢复平衡。对于抗生素和微生态制剂的结合使用效果并不能一概而论，两者联合使用时应考虑组成微生态制剂的每个种菌对特定抗生素的敏感性、动物品种及年龄等的影响。只有根据微生态制剂的菌种组合及特性以及抗生素的种类和作用对象进行合理配合，才能达到预期结果。
3.6 使用时间
微生态制剂在动物的整个生长过程中都可以使用，但不同的生长时期其作用效果不尽相同。一般在动物幼龄阶段，体内微生态平衡尚未完全建立，抵抗疾病的能力较弱，此时引入益生菌，可较快地进入体内，占据附着点，效果最佳。如新生反刍动物肠道内有益微生物种群数量的增加不仅可以促进宿主动物对纤维素的消化，而且有助于防止病原微生物侵害肠道。另外在断奶、运输、饲料转变、天气突变和饲养环境恶劣等应激条件下，动物体内微生态平衡遭到破坏，使用微生态制剂对形成优势种群极为有利，因此，把握益生菌的应用时机，尽早并长期饲喂，使其益生菌的功能得到充分体现。
3.7 使用方法
一是连续使用，二是阶段性使用，三是在某些阶段一次性使用。具体使用方法，以中国农业大学国家“863”项目和国家“跨越计划”项目研制的
益生康为例，具体说明见表2。
4 结束语
微生态制剂替代抗生素应用于饲料中,避免了长期使用抗生素的种种副作用,并具有促进动物生长，提高饲料报酬以及防治疾病等功能。但它在实践生产中的使用效果也不完全一致，而是受到许多因素的影响和制约。一方面是因为某些微生态制剂产品本身存在缺陷，质量差、以次充好；另一方面是由于错误的使用方法所致。因此，要正确选择高品质的微生态制剂，了解其特性，掌握科学合理的使用方法，可最大程度地发挥微生态制剂功效和优越性
、填空(每小题1分,共10分) 1.真核微生物核糖体类型为80S(线粒体和叶绿体中的核糖体为70S)。 2.大肠杆菌长为2.0μm,宽为0.5μm,其大小表示为0.5μm x2.0μm 。 3.研究细菌遗传、代谢性能常采用对数生长时期的细胞。 4.酵母菌细胞壁的主要成份葡聚糖和甘露聚糖。 5.侵染寄主细胞后暂不引起细胞裂解的噬菌体称温和噬菌体（溶源性噬菌体）。 6.微生物细胞的主要组成元素是蛋白质，核酸，类脂和碳水化合物。 7.食用菌是由营养菌丝和生殖菌丝组成。 8.用物理或化学方法杀死物品上大部分微生物的过程称灭菌。 9.细菌细胞的碳、氮营养比为6/1。 10.根瘤菌可与豆科植物共生固氮。 二、单项选择(在每小题的四个备选答案中,选出一个正确的答案,并将其码写在题干的○内,每小题1分,共40分)。 1.组成病毒粒子核髓的化学物质是○ ①糖类②蛋白质③核酸④脂肪 2.常用于饮水消毒的消毒剂是○ ①石灰②CuSO4 1③KMnO4 ④漂白粉 3.以高糖培养酵母菌,其培养基类型为○ ①加富培养基②选择培养基③鉴别培养基④普通培养基 4.多数霉菌细胞壁的主要成分为○ ①纤维素②几丁质③肽聚糖④葡聚糖和甘露聚糖 5.属于细菌细胞基本结构的为○
①荚膜②细胞壁③芽胞④鞭毛 6.酵母菌常用于酿酒工业中,其主要产物为○ ①乙酸②乙醇③乳酸④丙醇 7.土壤中三大类群微生物以数量多少排序为○ ①细菌＞放线菌＞真菌②细菌＞真菌＞放线菌③放线菌＞真菌＞细菌 ④真菌＞细菌＞放线菌 8.噬菌体属于病毒类别中的○ ①微生物病毒②昆虫病毒③植物病毒④动物病毒 9.常用消毒酒精的浓度的○ ①30% ②70%③95% ④100% 10.制备培养基的最常用的凝固剂为○ ①硅胶②明胶③琼脂④纤维素 11.沼气发酵的主要产物为○ ①CO2 ②CH4③NH3 ④H2S 12.酵母菌属于○微生物 ①好氧型②厌氧型③兼性厌氧型④微厌氧型 13.果汁、牛奶常用的灭菌方法为○ ①巴氏消毒②干热灭菌③间歇灭菌④高压蒸汽灭菌 14.加大接种量可控制少量污染菌的繁殖,是利用微生物间的○ ①互生关系②共生关系③竞争关系④拮抗关系 15.菌根是○和植物的共生体 ①细菌②放线菌③真菌④酵母菌
动物微生物与免疫期末答案 问：《自由引导人民》是作者对1830年法国发生的七月革命事件的真实写照。 答：× 问：下列关于华盛顿城市设计描述正确的是()。 答：属于多点辐射城市是一个政治色彩浓厚的城市 问：企业开展目标营销的第二个步骤是（）。 答：目标市场选择 问：林肯纪念馆和华盛顿纪念馆之间的广场有两个纪念碑,分别是()。 答：朝鲜战争纪念碑越南战争纪念碑 问：（）是设计公司的产品和形象，以求在目标顾客心目中占据一个独特位置的行动。 答：市场定位 问：对于渐进式肌肉放松法，下列注意事项正确的是（）。 答：每天做2次这样的练习在一个安静的空间中进行每块肌肉群2-3次对于特别紧张的部位可以多做几次 问：如下图所示的目标市场战略是（）。 https://www.doczj.com/doc/f515912478.html,/star3/375_1024/ec0ecf6b06d24eeee8ffac1ad ef37f27.png 答：无差异市场营销 问：《楚辞》的形式是在（）时期。
答：汉代 问：现今常用的古筝型号是21弦S筝。 答：对 问：（）决定了烧制陶瓷的过程中窑变的效果。 答：B 问：8ECDIS的航行监控可提供偏航报警.转向点提醒等报警或警示，一般还能进行_____以外的报警或辅助计算。 答：油耗计算 问：古琴定型于东汉时期，后经演变而来的古琴有（B）根弦。 答：7 问：《大学》认为明德专属于君主。 答：错误 问：羊毫加健毛笔对于画（）类型的画没有优势。 答：A 问：模版和母版是同一回事 答：× 问：日本歌曲《樱花》应用的是（）音阶 答：都节 问：真正实现全球覆盖的是_____系统。 (130600:第6章 EPIRB-SART设备) (A-0,B-0,C-0,D-0,错误-0) 答：COSPAS/SARSAT 问：孙成要打什么酒？（） 答：老酒
绪论 一、名词解释： 1、微生物：微生物是个体细小、肉眼看不见、必须用光学显微镜才能观察到的一群结构比较简单、繁殖迅速的最微小的生物的总称。它包括细菌、放线菌、真菌、螺旋体、霉形体、立克次氏体、衣原体、病毒等不同类群。 2、微生物学：微生物学是研究微生物的形态、生理、遗传与变异和分类以及与人类、自然界相互关系的一门科学。 二、填空题：1、微生物包括细菌、放线菌、真菌、螺旋体、霉形体、立克次氏体、衣原体、病毒。其中，原核性微生物包括细菌、放线菌、螺旋体、霉形体、立克次氏体、衣原体，真核性微生物包括真菌，非细胞性微生物包括病毒。 三、单项选择题： 1、证明有机物发酵和腐败是由微生物引起的是（ C ）。 A、郭霍 B、列文虎克 C、巴斯德 D、弗莱明 2、病毒由（ B ）发现。 A、郭霍 B、伊凡诺夫斯基 C、巴斯德 D、列文虎克 3、青霉素由（ D ）发现。 A、郭霍 B、列文虎克 C、巴斯德 D、弗莱明 4、微生物由（ B ）发现。 A、郭霍 B、列文虎克 C、巴斯德 D、弗莱明 5、证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则由（ A ）提出。 A、郭霍 B、列文虎克 C、巴斯德 D、弗莱明 四、简答与论述题： １、微生物的特征：个体细小、肉眼看不见、必须用光学显微镜才能观察到，结构比较简单、繁殖迅速，自然界发布广泛。 ２、研究动物微生物的目的意义：研究微生物与畜禽疾病的关系，并利用微生物与免疫学的知识和技能来诊断、防治畜禽的疾病，保障畜牧业的发展，避免农畜产品危害人类的健康。 第一章细菌 一、名词解释： 1、鞭毛：多数弧菌、螺菌、许多杆菌、个别球菌的菌体表面长有一至数十根波状弯曲的丝状物，称为鞭毛。鞭毛长度常是菌体长的几倍。 2、菌毛：大多数革兰氏阴性菌和少数革兰氏阳性菌的菌体上生长有一种比鞭毛数目多、较多、较直、较短的毛发状细丝，称为菌毛，又称纤毛或伞毛。 3、荚膜：某些细菌在其生活过程中可在细胞壁的外周产生一种粘液样的物质，包围整个菌体，称为荚膜。 4、芽孢：某些革兰氏阳性菌在一定的环境条件下，由于细胞质和核质逐渐脱水浓缩，可在菌体内形成一个圆形或卵圆形的休眠体，称为芽孢。 5、菌落：由一个细菌或其他微生物在固体培养基上生长繁殖长成肉眼可见的微生物群体。 6、质粒：除核体DNA外，有些细菌还具有能自行复制、随宿主分裂传给子代菌体、有一定遗传特性的游离小型双股DNA分子，称为质粒。 7、培养基：培养基是人工配制的基质，含有细菌生长繁殖必需的营养物质。
《动物微生物与免疫》课程试卷B卷及答案 一、名词解释（每题2分，共20分） 1.病毒凝集单位 2.异养菌 3.变态反应 4.抗体 5.灭菌 6.拮抗作用 7.干扰素 8.免疫 9.非特异性免疫 10.细菌的呼吸 二、填空题（每空1分，共25分） 1．细菌的特殊构造包括（）、（）、（）、（）。 2．有囊膜的病毒有三类形状，即（）、（）、（）。 3．外毒素主要由革兰氏（）性菌产生，毒性较（）。 4．布氏杆菌为革兰氏（）性菌，炭疽杆菌为革兰氏（）性菌。 5.。湿热灭菌法包括（）、（）、（）、（）。 6。生物制品可分为（）、（）、（）三大类。 7.细菌摄取营养的方式包括（）（）（）（）。 8.细菌的基本形态包括（）（）（）。 三、单选题（每题1分，共10分） （说明：将认为正确答案的序号填在每小题后面的括号内）
1．距土壤表面（）厘米深处，因为有丰富的营养物质，温度适宜，氧气较足，所以微生物较 多。 A 1-5 cm B 10-20cm C 50-80cm D 100-200cm 2．合成能力较强，能以简单的无机碳化物作为碳源，合成菌体所需的复杂的有机物质，这种菌叫（）。 A 厌氧菌 B 异养菌 C 需氧菌 D 自 养菌 3.结核杆菌属于（） A 专性需氧菌 B 兼性厌氧菌 C 厌氧菌 D 专性厌氧菌 4.下列哪种微生物没有细胞结构（） A 细菌 B 病毒 C 立克次氏体 D 真菌 5.大多数细菌生长繁殖所需要的PH值为（） A 8-9 B 4-5 C7.2-7.6 D 10-11 6. 下列不属于主动运输特点的是（） A 逆浓度 B 需要载体 C 不需能量 D 选择性 强 7. 制备培养基的最常用的凝固剂为（） A琼脂B明胶 C 硅胶 D纤维素 8. 干热灭菌法要求的温度和时间为（） A 105℃,2小时B1 21℃,30分钟 C 160℃,2小时 D 160℃,4小时 9. 遗传物质只是DNA或RNA一种核酸的微生物是（） A.细菌 B.支原体 C.立克次体 D.病毒 10. 关于IV型变态反应，下列哪项是正确的（） A 有补体参与 B 属于细胞免疫反应 C 接触变应原后30分钟内发生 D 机制涉及ADCC 四、简答题：（每题5分，共25分） 1．简述柯氏染色法的基本程序。它常用于什么菌的鉴别？ 2.病毒具有哪些基本特性？ 3.免役的功能有哪些？
《动物微生物及检验》试题 名词解释 1．菌落 2．纯培养 3．包涵体 4．噬菌体 5．干扰素 6．病毒的血凝现象 7．感染性病原真菌 8．中毒性病原真菌 9．莱姆病 10．细螺旋体 11．消毒 12．灭菌 13．防腐 14．无菌 15．无菌操作 16．正常菌群 17．微生物的致病性 18．毒力 19．侵袭力 20．半致死量 21．半感染量 22．传染 23．外毒素 24．类毒素 25．免疫 26．中枢免疫器官 27．免疫活性细胞 二、填空题 1．微生物共有八大类：包括细菌、病毒、 2．细菌大小的表示以为单位，可以在下观察；病毒以及为单位，必须在下观察。 3．细菌的基本结构由外到内分别是、、、。 4．有些细菌有特殊构造，如：、、、。 5．用革兰染色法将细菌分为和两大类，前者染成色，后者染成色。 6．细菌在生长过程中需要从外界摄取的营养物质有、、、、。7．培养基的类型按物理性状分为、、三种类型。 8．细菌的生长过程有一定的规律性，一般分为四个时期：、、、。9．根据细菌生长繁殖对氧的需求程度，将细菌呼吸类型分为三类：、、。10．病毒属于型微生物，必须在内生存，对抗生素。
11．有囊膜病毒对剂敏感，用其处理后病毒失去活性称为。 12．培养病毒的方法主要有、、等。 13．干扰素的主要功能有、、等。 14．结核分枝杆菌常用的鉴别染色法是，本菌呈色。 15．牛放线菌在病灶脓汁中可形成，将其压征镜检时呈。16．猪肺炎支原体引起猪。 17．支原体又称，是介于和之间、营独立生活的最小单细胞微生物。18．湿热消毒灭菌法包括、、和。 19．高压蒸汽灭菌法压力为，温度达，维持时间为，可杀死所有的微生物。 20．生石灰可用于和的消毒。 21．酚类消毒剂包括和。 22．具有黏附作用的细菌结构有、。 23．具有抗吞噬作用的细菌结构有等。 24．类毒素是由经甲醛处理制备而成，可刺激机体产生。 25．内毒素是由类脂A、和组成。 26．传染发生的条件包括、和。 27．非特异性免疫是特异免疫的和。 28．免疫分子包括、和。 29．免疫系统由、和组成。 30．监视和清除体内出现的肿瘤细胞是免疫的功能，清除体内衰老的自身细胞是免疫的功能，抗传染免疫是免疫的功能。 三、判断题 1．在动物机体内，致病性炭疽杆菌是有荚膜的。 2．在动物体内培养的炭疽杆菌带有芽胞。 3．肉毒梭菌致病的主要因子是内毒素。 4．肉毒梭菌是寄生性病原微生物。 5．破伤风梭菌需严格需氧培养。 6．仔猪黄痢和仔猪白痢都是由大肠杆菌引起的。 7．鸭疫里氏杆菌原名鸭疫巴氏杆菌，是雏鸭传染性浆膜炎的病原体。 8．口蹄疫病毒可以感染猪、牛、羊和马。 9．禽流感病毒是正粘病毒科的成员。 10．马立克病病毒能导致鸡发生肿瘤。 11．鸡传染性法氏囊病病毒能导致感染鸡发生免疫抑制。 12．猪瘟病毒可以导致猪、野猪和家兔发生猪瘟。 13．新城疫病毒可以引起鸡、鸭、鹅的毒血症。 14．兔出血症病毒在自然条件下只感染年龄较大的家兔。 15．犬瘟热病毒侵入敏感细胞后，在胞浆和胞核内复制，并在胞浆或胞核内形成包涵体。 四、问答题 1．简述黄曲霉毒素的毒性作用。
微生物与免疫学名词解 释 Company number：【WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998】
《医学免疫学》与《医学微生物学》名词解释 1.抗原：能刺激机体的免疫系统发生免疫应答，并能与免疫应答产物发生特异性结合的物质。 2.表位（抗原决定簇）：抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。 3.异嗜性抗原：存在于人、动物、微生物等不同种属之间的共同抗原。 4.抗体：免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞或记忆B细胞增殖分化成的浆细胞所产生 的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 5.免疫球蛋白：血清中一类主要的蛋白，由α1、α2、β和γ球蛋白组成。 6.抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（ADCC）：抗体Fab段结合病毒感染的细胞或肿瘤细 胞表面的抗原表位，其Fc段与杀伤细胞表面的FcR结合，介导杀伤细胞直接杀伤靶细胞。 7.补体：正常人或动物体液中存在的一组与免疫有关，并具有免疫活性的免疫球蛋白。 细胞因子：由免疫细胞及组织细胞分泌的具有生物学活性的小分子蛋白。 8.主要组织相容性复合体（MHC）：某一染色体上的一群紧密连接的，决定移植组织是否 相容，与免疫应答有关的基因群。 9.人类白细胞抗原（HLA）：人的MHC。 10.B细胞受体（BCR）：表达于B细胞表面的免疫球蛋白。 细胞受体（TCR）：表达于T细胞表面的免疫球蛋白。
12.抗原提呈细胞（APC）：能够摄取、加工、处理抗原，并以抗原肽—MHC 分子复合物的形式将抗原肽信息提呈给T细胞的一类细胞。 13.免疫耐受：免疫活性细胞接触某种抗原性物质时所表现的一种特异性无应答状态。 14.超敏反应：机体受到某些抗原刺激时，出现生理功能紊乱或组织细胞损伤等异常的适应 性免疫应答。 L型细菌：细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素直接破坏或合成被抑制后的细菌，在高渗环境下仍可存活，这种细胞壁受损后，仍能够生长和分裂的细菌称为细胞壁缺陷型或L型细菌。 质粒：染色体外的遗传物质，存在于细胞质中。为闭合环状的双链DNA，控制细菌某些特定的遗传特性。 荚膜:某些细菌如肺炎球菌、炭疽杆菌等在细胞外面有一层较厚的粘液性物质，称为荚膜。 鞭毛:有些杆菌、弧菌及螺形菌的菌体上具附有细长、弯曲的丝状物，称为鞭毛。它是细菌的运动器官。 芽胞:某些菌在一定的环境条件下，细胞质脱水、浓缩，在菌体内形成折光性强、不易着色的圆形或卵圆形的小体，称为芽胞。 菌落：单个细菌经一定时间培养后形成的一个肉眼可见的细菌集团。 消毒：杀灭物体上的病原微生物，但不一定能杀死芽胞的方法。 灭菌：杀灭物体上所有微生物，包括病原微生物、非病原微生物和芽胞的方法。
动物微生物试题库
《动物微生物》试题库 一、名词解释 1、生物制品： 2、免疫： 3、抗体： 4、类毒素： 5、干扰素： 6、菌落： 7、消毒： 8、血清学检验：9、抗原：10、培养基：11、ADCC作用：12、微生物：13、芽孢： 14、立克次氏体：15、侵袭力：16、非特异免疫：17、病原微生物：18、包涵体 19、凝集反应：20、半抗原：21、灭菌：22、衣原体：23、细菌：24、病毒血凝现象：25、体液免疫：26、变态反应：27、病毒干扰现象：28、支原体：29、间歇灭菌法： 30、假菌丝：31、免疫应答32、侵袭力:33、CPE：34、质粒：35、抗原决定簇: 36、LD50: 37、革兰染色法： 38、微生态制剂： 二、填空题 1、细菌是一类具有细胞壁的单细胞微生物，根据单个细菌的形态，可以把细菌分为，和三类。 2、细菌的特殊结构有、、和。 3、病毒主要由和构成，有的病毒还具有囊膜与纤突。 4、微生物可粗略地分为八大类，包括，，，，， ，，。 5、常用的湿热消毒或灭菌法有，，，。 6、免疫有、、的功能。 7、免疫球蛋白分为，，，，五类。 8、常见的微生物变异现象有、、、、。 9、干热灭菌法包括，。 10、细菌的生长曲线分为四个时期，分别为、、、。 11、微生物中原核型的包括，，，，，。 12、口蹄疫病毒主要有、、、、、、 7个血清型。 13、变态反应分为，，和。 14、酚类消毒剂包括和。 15．病原体一般感染途径有___ 、___ ___、__ _、
__ __和_____ ___ 16、免疫系统包括___ __、___ ___和___ ___。 17、免疫应答的基本过程包括_ ___、__ ___和___ ___三个阶段。 18、在补体结合试验中，无溶血现象出现称补体结合试验___ ___，说明样品中__ __抗原存在。 19、抗体是由_ __合成并分泌的免疫球蛋白。 20、常见的G+无芽胞杆菌类细菌的代表菌有____ __ ____，_____ _____等。 21、螺旋菌与螺旋体的主要区别是: 前者以________ 运动，后者以_________ 运动。 22、革兰氏阳性细菌细胞壁独有的化学成分是 __________，而革兰氏阴性细菌细胞壁独有的化学成分是 __________。 23、病毒核酸存在的主要类型___ _、___ ____、___ ___和____ __4种。 24、病毒是严格的_ _,它只能在__ ___内繁殖,其繁殖过程可分为 __ _、___ ___、___ __、___ ___和__ ___五个阶段。 25、细菌荚膜的功能有： （1）________________________________________________________。 （2）________________________________________________________。 （3）________________________________________________________。 26、支原体的菌落形态为 ___________________。 27、微生物对人类的危害主要表现在__________、__________、__________、__________。 28、微生物学的发展简史可分为 ______ ________、_____ __________ 、_______________________、现处于 _____ ____________。 29、细菌是 __________ 微生物，一般球菌的直径为__________，杆菌的宽度为__________，长度为 __________。 30、动物微生物包括、和三大部分 31、经革兰染液染色后，被染成紫色的是菌，被染成红色的是菌。 32、半固体培养基多用于检测细菌 33、细菌生长繁殖的条件包括充足的、适宜的、合适的酸碱度和必需的气体环境。 34、细菌色素分为和两种 35、影响化学消毒剂消毒效果的因素主要有、、和等。 36、吞噬细胞包括、、等。 37、狭义的生物制品指，和， 38、常用的培养基按其用途可分为、、、 和五大类。
《动物微生物及免疫学》复习题 一、多选题 1.中枢免疫器官有ABD A 胸腺 B 腔上囊 C 脾脏 D 骨髓 2.中枢免疫器官的特点有ACD A 胚胎早期出现 B 胚胎晚期出现 C 控制机体免疫反应 D 能诱导淋巴细胞分化 3.抗原具有BD A 特异性 B 免疫原性 C 专一性 D 反应原性 4.抗原按性质分为AC A 完全抗原 B 自身抗原 C 不完全抗原 D 异嗜抗原 5. 全菌抗原或整个病毒粒子抗原所制备的血清为C A 多联血清 B 单价血清 C多价血清D --- 6.免疫球蛋白的种类有ABCD A IgG B IgM C IgA D IgE 7.单克隆抗体的特点ABCD A纯度高 B专一性强 C 重复性好 D能在动物体内外持续产生同质性抗体 8.抗体具有亲细胞性质，能与下列细胞结合ABC A 肥大细胞 B T细胞 C B细胞 D 神经细胞 9. 血清学反应的类型有ABCD A 凝集反应 B 沉淀反应 C 中和反应 D 补体结合反应 10.沉淀反应的类型有ABC A 电泳 B 琼脂扩散试验 C 环状沉淀试验 D ELISA 11.试管凝集的特点有ACD A 方法简单 B 特异性不强 C 可定性 D 可定量 12.常用于检测炭疽病的实验方法是B A 琼脂扩散试验 B 环状沉淀反应 C 对流免疫电泳 D 血凝试验 13.间接凝集反应的类型有AD A 乳胶凝集 B 试管凝集 C 平板凝集 D 间接血凝 14.补体结合实验中，如果最终出现溶血现象，其结果应为C A 阳性 B 不确定 C 阴性 D A或B 15.血清学反应的一般特点 AC A 特异性强 B 特异性不强 C 抗原间血缘越近交叉程度越高 D 不会出现带现象 16.免疫原性:能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞的特性 17.下列有关非特异性免疫应答说法正确的有AC A 先天的,遗传的 B 作用慢,范围窄 C 为第一线防御作用 D 有再次反应的能力,有记忆 18.干扰素的特性有AC A 可溶性蛋白 B 对热不稳定 C 对酶敏感 D 对病毒种类有特异性 19.非特异性免疫的防御屏障有BD A 血脑屏障 B 皮肤 C 胎盘屏障 D 黏膜 20.影响非特异性免疫的因素有ABCD A 遗传 B 年龄 C 环境（温度、湿度） D 动物种类 二、名词解释
一．名词解释（每小题 2分共20分） 1．微生物：是个体细小、肉眼看不见、必须用光学或电子显微镜才能观察到的（1分）一群结构比较简单、繁殖迅速的最微小的生物总称。（1分） 回答不完全者适当扣分 2.菌落与菌苔：单个或多个细菌接种在固体培养基上，在适宜条件下，经过一定时间培养后形成的单个，肉眼可见的细菌细胞集聚体称为菌落。（1分）菌落彼此相连形成片叫菌苔（1分） 回答不完全者适当扣分 3．IMVIC试验：是一组区别大肠杆菌和产气杆菌的生化试验（1分），I——吲哚试验，M—M.R（甲基红）试验，VI—二乙酰试验，C—枸橼酸盐试验（1分）。 回答不完全者适当扣分 4．免疫活性细胞：在免疫细胞中，受抗原刺激后，能特异地识别抗原决定基（1分），并能分化增殖，发生特异性免疫应答，产生抗体或淋巴因子的细胞。（1分） 回答不完全者适当扣分 5. 巴氏消毒法：是以较低温度杀灭液体食品及物品内的病原菌或特定微生物（1分），而又不破坏其营养成分及有效成分的消毒方法。因为这种方法是由巴斯德创立的，故称为巴氏消毒法。（1分） 回答不完全者适当扣分 6．单克隆抗体：是由淋巴细胞杂交瘤产生的（1分），只针对复合抗原分子上某一单个抗原决定基的特异性抗体。（1分） 回答不完全者适当扣分 7．正常微生物群：是指微生物与其宿主在共同历史进化过程中形成的生态系，这个生态系是由微生物和宏生物共同组成的，其中微生物群称为正常微生物群。 回答不完全者适当扣分 8．灭活疫苗：又称死苗。用物理的或化学的方法将病原微生物杀死后，病原微生物仍保持其抗原成分的免疫原性。（1分）用物理的或化学的方法将病原微生物杀死,并用其制成的疫苗,称灭活苗。（1分） 回答不完全者适当扣分 9．抗原：是一类能刺激机体的免疫系统（使之发生免疫应答）产生抗体或致敏淋巴细胞，（1分）并能与相应抗体或致敏淋巴细胞在体内或体外发生特异性反应的物质。（1分） 回答不完全者适当扣分 10．外毒素与内毒素：前者由某些病原菌在新陈代谢过程中产生，并分泌到菌体外环境中的一类毒性代谢产物。（1）后者是一类由革兰氏阴性菌在正常代谢过程中产生，在细菌生活状态下不释放或不分泌到外界环境中去，只有菌体细胞自溶、死亡崩解，或人工方法(超声波处理、反复冻融、研磨等)破坏其细胞的完整性时，才释放出来的毒素。。（1） 回答不完全者适当扣分 二．填空题（每小题2分共20分） `1.微生物的主要类群包括：细菌、放线菌、真菌、螺旋体、霉形体、立克次氏体、衣原体、病毒和少数藻类。（每少一项扣0.5，错6项扣完） 2．动物的胸腺是中枢免疫器官，脾脏是外周免疫器官。 3．细菌特殊结构包括荚膜、芽孢、鞭毛、纤毛等。（每错一项扣0.5） 4．机体对结核分枝杆菌免疫的特点是细胞免疫、带菌免疫与变态反应同时存在两大特点 5．培养细菌常用的培养基可分为基础培养基、鉴别培养基、选择培养基、营养培养基、厌氧培养基五种。 6．变态反应的类型包括Ⅰ型（过敏型）、Ⅱ（细胞毒型）、Ⅲ（免疫复合物型）、Ⅳ（迟发型）型。
动物微生物学习题A 一、单项选择 1、一般用于表示细菌大小的单位是（ 4 ）。 ① cm ② mm ③ nm ④μm 2、高压蒸汽灭菌法常用的温度及时间是（ 4 ）。 ① 100℃持续2小时②160℃持续2小时③121℃持续1小时④121℃持续20分钟 3、霉菌的核是（ 1 ）。 ① 核②原核③无核膜，有核仁④无核膜，无核仁。 4、构成病原微生物毒力的因素有（ 2 ）。 ① 生物数量与侵袭力②侵袭力与毒素③毒素与传染力④微生物数量与传染力 5、细菌对物质摄取方式中，哪种方式不需要能量（ 1 ）。 ①单纯扩散②逆浓度扩散③主动输送④基团转位 6、下列哪种细菌属于革兰氏阴性杆菌（ 4 ）。 ①魏氏梭菌②猪丹毒杆菌③结核杆菌④布氏杆菌 7、疯牛病的病原是（ 1 ）。 ①朊病毒②猪瘟病毒③牛瘟病毒④牛白血病病毒 8、禽流感病毒属于（ 1 ）。 ①正粘病毒科②副粘病毒科③冠状病毒科④动脉炎病毒科 9、中枢免疫系统包括以下哪些器官（ 1 ）。 ①骨髓与胸腺②淋巴结与脾脏③淋巴结与胸腺④脾脏与腔上囊 10、半抗原指（ 2 ）。 ①有免疫原性与反应原性的物质②只有反应原性物质 ③只有免疫原性物质④无免疫原性与反应原性的物质。 二、双项选择题 1、细菌的特殊结构有（ 1 2 ）。 ①质粒②菌毛③核质④核糖体⑤细胞膜 2、疑为炭疽死亡的动物尸体严禁剖检的原因是（1 2 ）。 ①炭疽杆菌在体外形成芽胞②炭疽杆菌芽胞对外界环境有很强的抵抗力 ③炭疽杆菌在体外形成荚膜④炭疽杆菌在体外很快死亡⑤炭疽杆菌在体外形成鞭毛 3、下列属于免疫原性细胞是（ 1 4 ） ①T细胞②K细胞③NK细胞④B细胞⑤呑噬细胞 4、 IV型变态反应发生（2 3 ） ①快②慢③无抗体参与④有抗体参与⑤与B细胞有关 5、巴氏杆菌的特点是（ 1 3 ） ①瑞氏染色为两极着色②瑞氏染色为大杆菌③血平板生长良好 ④普通平板生长良好⑤对外界抵抗力强 6、猪瘟病毒具有（ 1 ）。 ①RNA ②DNA ③有疫苗控制④无疫苗使用⑤不能通过垂直传播 7、黄曲霉菌引起动物发病的原因是（ 1 3 ）。 ①在体外产生毒素②在体内产生毒素③毒素耐高温 ④毒素不耐高温⑤黄曲霉在干澡、低温环境下产生毒素。 8、在正常动物体内哪些器官微生物含量最多（ 2 4 ）。 ①胃②瘤胃③肺内④大肠⑤肾脏 9、以下哪些属于被动免疫（ 1 3 ）。 ①注射高免疫血清②注射正常血清③注射蛋黄液④注射死苗⑤注射弱毒苗 10、霉形体的特征是（ 2 4 ）。 ①有细胞核②无细胞核③有细胞壁④无细胞壁⑤不能在无细胞培养基上生长 三、名词解释（本大题共10 小题，每小题 2 分，共 20 分。） 1、病毒 2、芽胞 3、消毒 4、抗体 5、培养基 6、抗原决定簇 7、人工主动免疫 8、凝集反应9、基因突变（动医做）10、毒力11、单细胞蛋白（动科做） 四、填空题（本大题共 5 小题，每小题 2 分，共 10 分。） 1、类毒素是将细菌的经作用脱毒而成的。
微生物试题 一、写出下列名词解释的中文翻译及作出解释（每个２分，共１０分） 1.Gram positive bacteria 2.parasporal crystal 3.colony 4.life cycle 5.capsule 二.选择题（每个2分，共20分） 1、组成病毒粒子衣壳的化学物质是（） A、糖类 B、蛋白质 C、核酸 D、脂肪 2、属于细菌细胞特殊结构的为（） A、荚膜 B、细胞壁 C、细胞膜 D、核质体 3、噬菌体属于病毒类别中的（） A、微生物病毒 B、昆虫病毒 C、植物病毒 D、动物病毒 4、半固体培养基中，琼脂使用浓度为（）。 A、0 B、0.3—0.5% C、1.5—2.0% D、5% 5、以芽殖为主要繁殖方式的微生物是（） A、细菌 B、酵母菌 C、霉菌 D、病毒 6、土壤中三大类群微生物以数量多少排序为（）。 A、细菌＞放线菌＞真菌 B、细菌＞真菌＞放线菌 C、放线菌＞真菌＞细菌 D、真菌＞细菌＞放线菌
7、加大接种量可控制少量污染菌的繁殖，是利用微生物之间的（）。 A、互生关系 B、共生关系 C、竞争关系 D、寄生关系 8、下列孢子中属于霉菌无性孢子的是（） A、子囊孢子 B、孢囊孢子 C、卵孢子 D、接合孢子 9、霉菌适宜生长的PH范围为（） A、中性 B、中性偏碱性 C、中性偏酸性 D、酸性 10、放线菌属于（） A、病毒界 B、原核原生生物界 C、真菌界 D、真核原生生界 三.是非题（共10分。只需注明“对”或“错”） 1.大多数嗜热菌的G-C含量高于中温菌。 2.大肠杆菌属低等原核生物，所以其遗传物质只是一条松散的环状双链DNA，不存在DNA高级结构。 3.当菌体生长、氧吸收和糖利用的比速度下降时，青霉素的合成达到最高值。 4.初生F’菌株和次生F’菌株都属于部分二倍体。 5.分批培养时，细菌首先经历一个适应期，此期间细胞处于代谢活动的低潮，所以细胞数目并不增加。 6.渗透酶(permease)属于诱导酶，而其它种类的酶往往属于组成酶。 7.恒化培养与恒浊培养的区别在于前者的培养物群体始终处于对数生长期。 8.将HR病毒的外壳蛋白与TMV病毒的RNA混合，去感染烟草，则
四川农业大学 动物微生物及免疫学（实践教学） 实验报告 组长：********** 组员：********** 二零一二年四月
一、实验目的 （一）掌握一般培养基的制备原理及要求，掌握培养基酸碱度的测定，熟悉一般培养基的制备过程和各种器皿灭菌方法。 （二）掌握细菌分离培养的基本要领和方法，掌握细菌抹片的制备方法和革兰氏染色法及油镜的使用方法，并认识革兰氏染色的反应特性。（三）掌握学习用微生物学原理诊断疾病的一般方法及步骤。 二、实验用品 （一）器材 量筒、烧杯、电子天平、漏斗、三角烧瓶、空试剂瓶、玻璃棒、玻璃平 皿、刻度吸管、pH试纸、纱布、脱脂棉、天平、电炉、试剂瓶瓶塞、扎 绳、放大镜、包装纸、洗耳球、酒精灯、载玻片、火柴、吸水纸、剪 刀、记号笔、接种环、注射器、镊子、钳子、毫米尺、培养箱、水浴培 养箱、高压蒸汽灭菌锅、油镜 （二）试剂及材料 肘胨、蛋白胨、猪胆盐、氯化钠、琼脂、乳糖、0.01%结晶紫水溶液、 0.5%中性红水溶液、血清、胰化蛋白胨、酵母提取物、氢氧化钠、盐 酸、牛血清、革兰氏染色液、蒸馏水、小白鼠、病猪内脏 三、实验步骤 （一）培养基的制备 （所有用到的器皿都已121℃高压灭菌15~30min，倾注平板在无菌操作台内完成，并放在无菌操作台内） 1、麦康凯培养基 （1）组成：蛋白胨17g、肘胨3g、猪胆盐5g、氯化钠5g、琼脂17g、乳糖10g、0.01%结晶紫水溶液10ml、0.5%中性红水溶液5ml、蒸馏水1000ml
（2）方法：将蛋白胨、肘胨、猪胆盐和氯化钠溶解于400ml蒸馏水中，调节pH至7.2。将琼脂加入600ml蒸馏水中，并加入乳糖，加热熔化。将两 液混合，分装于烧瓶内，用纱布、扎绳等捆好后，121℃高压灭菌 15~30min。待冷却至50 ~ 55℃时，加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。 注：结晶紫和中性红水溶液配好后需经高压灭菌。 2、血清平板 （1）组成：营养琼脂、牛血清 （2）方法：将灭菌的营养琼脂加热熔化，冷却至45~50℃时，加入牛血清，并混匀，倾注平板。 注：不得将牛血清一并加入后再灭菌。 3、LB培养基 （1）组成：胰化蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g、琼脂15g （2）方法：在950ml蒸馏水中加入胰化蛋白胨、酵母提取物、琼脂和氯化钠，调节pH至7.4，加热熔化，分装于瓶中，用纱布、扎绳等捆好后，121℃高压灭菌15~30min。待冷却至50 ~ 55℃时，倾注平板。 4、液体培养基（在LB培养基的基础上，装入大试剂瓶中，不加琼脂，不分 装） （二）病料取材 在病猪死亡后，首先用显微镜检查其末梢血液膜片中是否有炭疽杆菌存 在，未发现，则立即用消毒的器械对其进行生理解剖，观察其病理特征 现象，取出病猪的十二指肠、胃、肝脏三处的组织物，并注意组织的完 整性，用储物袋密封保存。 （三）细菌粗培养
名词解释（20分） 病毒：一类结构简单、只含有一种核酸（DNA或RNA）、对抗生素不敏感、营严格寄生生活、有遗传、自我复制等生命特征的非细胞形态微生物的总称。 遗传：系亲代与子代的相似性，它是物种存在的基础，具有稳定性。 致病性：是指一定种类的病原微生物，在一定的条件下，能在特定的宿主体内寄生繁殖并引起疾病的特性。 侵袭力：是指病原微生物突破宿主皮肤、粘膜生理屏障等免疫防御机制，侵入机体活组织并在其内定居、繁殖和扩散的能力。包括菌体表面结构和侵袭性酶。 原代细胞：以无菌手续采动物等的组织切碎洗净之后用胰蛋白酶消化得分散的单个细胞，加培养液在细胞瓶内培养所获得的单层贴壁细胞。 免疫应答：抗原进入机体后，刺激免疫系统所发生的一系列复杂反应的过程。包括免疫活性细胞识别抗原，产生应答并将抗原破坏或清除的过程。 免疫活性细胞：在免疫细胞中，受抗原刺激后，能特异的识别抗原决定簇，并能通过分化增值，发生特异性免疫应答，产生抗体或淋巴因子的细胞。 衣原体：一类形态相似，能通过过滤器、应严格细胞内寄生生活，有独特生活周期的革兰氏阴性的原核生物。 病原微生物：凡能引起人和动植物发病的微生物称为病原微生物。 抗原：凡能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞,并能与之结合引起特异性免疫反应的物质 单克隆抗体：是由淋巴细胞杂交瘤产生的，只针对复合抗原分子上某一单个抗原决定簇的特异性抗体。 灭菌：利用理化方法杀灭物体中所有微生物，包括病原微生物、非病原微生物及其芽孢、霉菌孢子等，使物体表面或内部无任何活微生物的过程。 质粒：是核体以外的遗传物质，为环状闭合的双股DNA，带有遗传信息，控制细菌某些特定的遗传性状，能自我复制。 类毒素：外毒素经%—%甲醛37度处理一定时间后，毒性完全丧失，但仍保留良好的抗原性，称为类毒素。 巴氏消毒法：是以较低温度杀灭液体食品及物品内的病原菌或特定微生物，而又不破坏其营养成分及有效成分的消毒方法，因为这种方法是巴斯德创立的，故称巴氏消毒法。 芽孢：某些G+在一定条件下，胞浆和核质脱水浓缩，在菌体内形成一个折光性强，通透性低的圆形或椭圆形的休眠体。 抗体依赖细胞介导的细胞毒作用：指具有杀伤活性的细胞通过其表面表达的FcR识别包被于靶抗原上抗体的Fc段，直接杀伤靶细胞 菌落：单个或多个细菌接种在固体培养基上，在适宜条件下，经过一段时间的培养后形成单个、肉眼可见的细胞集聚体
动物微生物检验及免疫检测技术 牧医1302李光明 微生物概念 及分类 微生物是广泛存在于自然界中的一群肉眼看不见的 必须借助光学显微镜观察或电子显微镜才能观察到的微小生物总称 分 类 形态 球形菌 杆菌 螺旋菌 基本结构 细胞壁 细胞膜 细胞质 核质（核区） 细胞质 特殊结构 荚膜（ 抵抗吞噬 增强侵袭力 提供营养 水分 用于鉴定 具有抗原性） 鞭毛 （运动）牙孢（抵抗外界不良环境的休眠体）菌毛的作用 普通菌毛粘附力 性菌毛 传递质粒 耐药性有关 革兰氏染色把细菌分为革兰氏阳性（蓝紫色）阴性（红色） 病毒概念 及 特点 寄生于活细胞内的非细胞型微生物 形态微小 能通过细菌滤器 需借助电子显微镜观察 只有一种核酸(DNA 或RNA) 只能寄生于活细胞内 繁殖方式复制 对抗生素不敏感 对干扰素敏感 单位nm 纳米 光学显微镜 10乘以100能看清细菌 细菌单位微米μm 光学 真菌400倍 免疫概念 是机体识别 自身 于非自身物质 消灭非自身物质的一种生理机能 免疫的功能 （基本生理机能） 1抵抗感染2免疫监视 3自身稳定 中枢免疫器官 免疫细胞分化成熟的场所 B 细胞 骨髓中分化成熟 T 骨髓 或法氏囊 （禽 免疫活性细胞包括 T 淋巴细胞 B 淋巴细胞 完全抗原 同时具有免疫原性 和反应原性的 物质称完全抗原 抗原构成的条件 1异源性((异物性) ①异种物质②同种异体物质③自身组织 2分子大小 3化学组成和成分结构的复杂性 \ 4抗原的物理状态 抗原的特异性由决定簇决定
抗体概念 抗体是有抗原进入机体后刺激B细胞分化增殖为浆细胞进而合成并分泌的一类能与相应抗原发生特异性结和并产生免疫效应的免疫球蛋白 根据免疫球蛋白的化学结构及其抗原性差异可分为 免疫应答过程 识别阶段 抗原进入机体后被巨噬细胞吞噬加工处理呈递给T 细胞 B细胞 反应阶段 T胞活化增殖一小部分分化为t记忆细胞绝大部分分化为致敏T 细胞最终产生直接杀伤性细胞和淋巴因子 B细胞活化增殖一小部分化为B细胞绝大部分分化为浆细胞最终产生抗体 效应阶段 直接杀伤性细胞在淋巴因子帮助下杀灭抗原 抗体和抗原结婚激活K NK 细胞（或补体）消灭 血清学实验概念 抗原和与相应的抗体无论在体内还是体外均能发生特异性结合反应并表现出特定的现象 人工主动免疫注射疫苗 细菌吸收营养物质的方式 被动扩散 促进扩散
微生物试题 62.设计一个酿酒酵母营养缺陷型的科研方案，并加以必要的说明。（要求写出酿酒酵母的基本培养基和完全培养基） 22.微生物按能源和基本碳源来分，可将微生物分为哪四种类型？你们感分析它们各自的能源、氢供体和基本碳源分别是什么？ 59.简述革兰氏阳性细菌和阴性细菌在细胞壁的结构和化学组成上的异同点，并指出与此相关的主要特性。 63.简述微生物细胞膜的组成、结构与功能。 82.试述革兰氏染色的机制及其重要意义。 80.单细胞微生物的典型生长曲线可分为几期？如何缩短延滞期？ 86.微生物生长需要哪些基本条件？ 135. 简述微生物营养类型及其特点。 187. 水在微生物细胞中的生理功能。 223. 试述比较单纯扩散、协助扩散、主动运输和基团转位四种运输营养物质方式的异同点。 229. 描述并分析生长曲线，并说明生长曲线对科研和生产的意义。 241. 试拟一个实验，证明在噬菌体侵染细菌过程中决定遗传的物质基础是DNA。 二,简答题 1,试述微生物与当代人类实践的重要关系 2,简述革兰氏染色的机制 3.微生物有哪五大共性其中最基本的是哪一个为什么 三,填空(每空1分,共15分) 1.真核微生物核糖体类型为 _______ .. 3.研究细菌遗传,代谢性能常采用 _____ 时期的细胞. 4.酵母菌细胞壁的主要成份_____和_______. 5.侵染寄主细胞后暂不引起细胞裂解的噬菌体称 ________ . 6.微生物细胞的主要组成元素是______,_____,_______和_______. 7.食用菌是由 ______和 ____ 组成.. 9.细菌细胞的碳,氮营养比为______. 10.根瘤菌可与 _________共生固氮 微生物学试题(一)答案: 一,1,革兰氏阳性菌:细菌经革兰氏染色染色后最终染成紫色的菌 2,伴胞晶体:少数芽孢杆菌,在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形,方形,或不规则形的碱溶性蛋白质晶体称为半胞晶体 3,菌落:当单个细菌细胞或者一小堆同种细胞接种到固体培养基表面,当它占有一定的发展空间并处于适宜的培养条件下时,该细胞就会迅速生长繁殖并形成细胞堆,此即菌落. 4,生命周期:指的是上一代生物个体经过一系列的生长,发育阶段而产生下一代个体的全部过程. 5,荚膜:包被于某些细菌细胞壁外的一层厚度不定的透明胶状物质 6,芽孢:某些细菌在其生长发育的后期,在细胞内形成的一个圆形或椭圆形,厚壁,含水量低,抗逆性强的休眠构造. 二,1,①在微生物与工业发展的关系上,通过食品罐藏防腐,酿造技术的改造,纯种厌氧发酵的建立,液体深层通气搅拌大规模培养技术的创建以及代谢调控发酵技术的发明,使得古老的酿造技术迅速发展成工业发酵新技术; ②微生物在当代农业生产中具有十分显著的作用,例如,以菌治害虫和以菌治植病的生物防治技术;以菌增肥效和以菌促生长的微生物增产技术;以菌做饲料和以菌当蔬菜的单细胞蛋白和食用菌生产技术;以及以菌产沼气等生物能源技术. ③微生物与环境保护的关系越来越受到当代全人类广泛的重视.微生物是占地球面积70%以上的海洋和其他水体中光合生产力的基础;是一切食物链的重要环节;是污水处理中的关键角色;是生态农业中最重要的一环;是自然界重要元素循环的首要推动者;以及是环境污染和监测的重要指示生物;等等. ④微生物与在食品上的应用.调味品,发酵食品,酸乳,蔬菜加工.
1 病例标本送检，一般常规进行的检验包括 A. 直接涂片镜检，分离培养，生化反应和血清学试验 B. 药敏试验，动物实验，生化反应和血清学试验 C. 直接涂片镜检，分离培养，药敏试验，动物试验 D. 直接涂片镜检，药敏试验，动物试验和血清学试验 E. 染色镜检，药敏试验，动物试验和血清学试验 答案: A 解析: 2 医疗机构污水微生物样品应采集 A. 各科室冲洗流入下水道的污水 B. 患者使用后流入的污水 C. 污水贮存池内的污水 D. 该机构污水最终排放口的污水 E. 手术室流出的污水 答案: D 解析: 3 能形成草绿色溶血环的细菌是 A. 甲型溶血性链球菌 B. 表皮葡萄球菌 C. 炭疽杆菌 D. 丙型溶血性链球菌 E. 嗜血杆菌 答案: A 解析: 4 同一水源，同一时间采集多类检测指标的水样时，应先采集哪项指标的水样 A. 挥发性酚 B. 金属 C. 有机物 D. 微生物 E. 放射性 答案: D 解析: 5 用于PCR实验的仪器称为 A. 色谱仪 B. 质谱仪 C. 酶标仪 D. 紫外透射仪 E. DNA扩增仪 答案: E 解析: 6 PCR是 A. 补体结合试验 B. 血凝抑制试验
C. 聚合酶链反应 D. 酶联免疫吸附分析 E. 肥达反应 答案: C 解析: 7 不会使医疗机构污水中总游离余氯结果偏低的因素是 A. 水样经强光照射 B. 水样经过振荡 C. 水样经过高温 D. 水样立即检测 E. 水样放置一段时间后检测 答案: D 这是2013年微生物检验技术考试原题，因为时间匆忙，刚刚整理完50道题，请考生关注我的空间或者百度“新浪博客卫生资格考试”，另有复习指导书电子版免费赠！ 8 游泳池水细菌总数培是 A. 36℃，24h B. 37℃,48h C. 28℃,24h D. 28℃,48h E. 44℃,24h 答案: B 解析: 9 醋酸纤维膜电泳主要用于 A. 小分子多肽分离 B. 抗原或抗体分离 C. 免疫球蛋白分离 D. 盐的分离 E. 糖的分离 答案: C 解析: 10 生活饮用水采样后如不能立即检验，其保存温度和时间为 A. ﹣2℃,4h B. ﹣4℃,6h C. 0℃,4h D. 2℃,4h E. 4℃,4h 答案: E 解析: 11 在做证实试验时，挑取蜡样芽胞杆菌在选择性培养基上的典型菌落的数目为 A. 5个 B. 10个