扦插技术注意事项《本文章引用于提供，在此感谢》
花木的扦插养殖。
选择插材：作为采条母体的植株，要求具备品种优良，生长健旺，无病虫危害等条件，生长衰老的植株不能选作采条母体。在同一植株上，插材要选择中上部，向阳充实的枝条，且节间较短，芽头饱满，枝叶粗壮。在同一枝条上，硬枝插选用枝条的中下部，因为中下部贮藏的养分较多，而梢部组织常不充实，但树形规则的针叶树，如龙柏，雪松等，则以带顶芽的梢部为好，以后长出的扦插树干通直，形态美观，带踵扦插，剪去过分细嫩的顶部，而菊花等在扦插时，使用的却正是嫩头。
扦插养殖技术注意事项1插条处理：
扦插应在剪取插条后立即进行，尤其是叶插，以免叶子萎蔫，影响生根。在秋末剪取的月季，木槿，凌霄等插条，由于没有具备立即扦插的温度条件，可以插条剪好后，绑成捆用湿润沙埋在花盆里，放在室内温度保持0-5度的地方。冬季注意不要使沙子太干，等翌年早春再扦插。对于月季花等花木也可冬季在塑料小棚里进行扦插。仙人掌肉质植物的插条，剪取后应放在通风处晾一周左右，待剪口处略有干缩时再扦插，否则容易腐烂。四季海棠，夹竹桃等，插条剪取后可先泡在清水中，等泡出根来即可直接栽入盆中。月季，米兰等，可将插条的下口在维生素B针剂中蘸一下，取出经一两分钟使药液吸进插条后再插入粗沙中，这样处理有促进生根的效果。含水分较多的花卉植株插条，如洋绣球，毛叶秋海棠等，在插条下蘸一些草木灰，可防止扦插后腐烂。
扦插养殖技术注意事项2扦插基质：
除了水插外，插条均要插入一定基质中，基质的种类很多，有园土，培养土，山黄泥，兰花泥，砻糠灰，蛭石，河沙等，它们对环境要求是：渗水性好，有一定的保水能力，升温容易，保温良好。对于较粗放的花卉，一般插入园土或培养土中，喜酸性土的花卉可插入山黄泥或兰花泥，生根较难的花木则宜插在砻糠灰，蛭石或河沙中。
扦插养殖技术注意事项3插后管理：
扦插后要加强管理，为插条创造良好的生根条件，一般花卉插条生根要求插壤既湿润又空气流通，可以扦插盆上或畦上盖玻璃板或塑料薄膜制成的罩子，以保持温度和湿度。罩子下面垫上小砖，使空气流入，夏季和初秋，白天应将扦插盆放在遮阴处，晚上放在露天，早春，晚秋和冬季温度不够时，则可放在暖处或温室中，但必须注意温，湿度的调节。以后根据插条生根的快慢，逐步加强光照。
扦插是植物繁殖的一种重要方法，利用植物的一部分茎、根或叶，扦插在排水良好的壤土、砂土或基质中，长出不定根和不定芽，从而长成完整、独立的新植株，具有生长快、开花早、繁殖数量大及保持植物优良性状等特点。 应用扦插繁殖在植物中主要有枝插和根插两类。枝插又根据插枝的性质不同，分为硬枝扦插（休眠期扦插）和软枝扦插（嫩枝扦插、生长期扦插）。 一、扦插生根的原理 植物的细胞具有全能性，每个细胞都具有相同的遗传物质。在适宜的环境条件下，具有潜在的形成相同植株的能力。同时，植物体具有再生机能，即当植物体的某一部分受伤或被切除而使植物整体受到破坏时，能表现出弥补损伤和恢复协调的功能。 在插枝扦插后的生根过程中，枝插与根插的生根原理是不同的。其中枝插生根是在枝条内的形成层和维管束鞘组织，形成根原始体，从而发育生长出不定根，并形成根系；而根插是在根的皮层薄壁细胞组织中生长不定芽，而后发育成茎叶。 插枝扦插后，通常是在插枝的叶痕以下剪口断面处，先产生愈合组织，而后形成生长点。在适宜的温度和湿度条件下，插枝基部发生大量不定根，地上部萌芽生长，长成新的植株。 按插枝生根的部位来分，有三种生根类型：一是愈合组织生根类型，包括大部分树种；二是皮部生根类型，三是两者兼有类型。 二、扦插成活的条件
扦插后插枝能否生根成活，决定于插枝本身的内在条件和外界环境条件。 1．插枝的内在条件 植物不同种或同一种植物的不同种，扦插成活率不同， 如扦插容易生根的有: 侧柏、杉木、大叶黄杨、夹竹桃、杨、柳、红杉、悬铃木、珊瑚树、榕树、石榴、橡皮树、巴西铁、富贵竹、菊花、大丽花、万寿菊、矮牵牛、香石竹及秋海棠等； 扦插较易生根的有: 山茶、桂花、雪松、火棘、南天竹、龙柏、茉莉、丁香、棕竹、槭及木兰等；扦插难生根的有松、榆树、山毛榉、桃、蜡梅、栎类、香樟、海棠、鹅掌楸、鸡冠花、矢东菊、虞美人、百合、美人蕉及大部分单子叶植物花卉。 植物的不同生育特性，对扦插成活的难易有影响，如灌木比乔木容易生根，匍匐类型比直立类型容易生根；地理分布在高温、多湿地区的树种比低温、干旱地区的树种容易生根；幼龄树上的插枝比老龄树上的扦枝容易生根；根茎上的萌蘗枝比树冠上部的一年生枝容易生根；枝条生长健壮、组织充实、叶芽饱满比营养物质不足的细小枝容易生根等。 此外，扦插用插枝的粗度、长度、生长期、扦插时的留叶量、插枝内部的抑制物质等，对生根与成活率都有一定的影响。 2．外界环境条件
Windows 花卉 期末作业
1 中文名：葱兰 拉丁名：Zephyranthes candida 科属：石蒜科，葱莲属 株高：15-30cm 花期：秋季 光照要求：喜阳光充足，耐半阴 栽培类型：分株和播种为主 园林应用：适用于林下、边缘或半荫处作园林地被植物，也可作花坛、花径的镶边材料，在草坪中成丛散植，可组成缀花草坪，也可盆栽供室内观赏。中文名：一串红 拉丁名：Salvia splendens Ker-Gawler 科属：唇形科鼠尾草属 株高：茎高约80cm 花期：7-10月 光照要求：忌强光直射，可耐半荫 栽培类型：多采用播种法和扦插法 园林应用：常用作花坛、花境的主体材料，在北方地区常作盆栽观赏。
中文名：金盏菊 拉丁名：Calendulaofficinalis 科属：菊科金盏花属 株高：30-60cm 花期：4-6月 光照要求：喜阳光充足 栽培类型：繁殖播种 园林应用：早春园林和城市最常见的草本花卉。盆栽摆放在中心广场、车站、商厦等共用场所；数盆点缀窗台或阳台。栽培得当，可周年开花，是晚秋、冬季和早春的重要花坛、花镜材料，也可作切花栽培。中文名:万寿菊 拉丁名: Tagetes erecta L 科属:菊科万寿菊属 株高：50-150cm 花期：7-9月 光照要求：喜光 栽培类型：播种扦插 园林应用：用来点缀花坛、广场、布置花丛、花境和培植花篱。中、矮生品种适宜作花坛、花径、花丛材料，也可作盆栽；植株较高的品种可作为背景材料或切花。 2
中文名:羽衣甘蓝 拉丁名: Brassica oleracea var. acephala f.tricolor 科属:十字花科芸薹属 株高：1.2m 花期：4～5月 光照要求：喜光 栽培类型：播种 园林应用：在华东地带为冬季花坛的重要材料，北方地区冬季常用的园林花卉。其观赏期长，叶色极为鲜艳，在公园、街头、花坛常见用羽衣甘蓝镶边和组成各种美丽的图案，用于布置花坛，具有很高的观赏效果。其叶色多样，有淡红、紫红、白、黄等，是盆栽观叶的佳品。欧美及日本将部分观赏羽衣甘蓝品种用于鲜切花。中文名:矮牵牛 拉丁名: Petunia hybrida (J. D. Hooker) Vilmorin 科属: 茄科矮牵牛属 株高：10～40cm 花期：5-10月 光照要求：喜光 栽培类型：播种 园林应用：重要的花坛花卉，作盆栽、吊盆、花台及花坛美化，大面积栽培具有地被效果，景观瑰丽、悦目。 3
报批细节 1、技术档案： 技术人员简历表、培训档案、要求有实质性文件如每人的学历证书、上岗证、科研成果（课题）、技术文章、获奖证书等的复印件 2、仪器档案： 实验室所有仪器的购买、使用、校正、放置地点、出厂编号、说明书复印件等 实验室所有仪器维护校正记录如：加样器、温度计、温湿度计需出具计量局校正报告文件（可每种只校正一套作为标准）。 扩增仪需有仪器厂家专业技术人员维护校正报告，和校正后的参数。 加样器的出厂编号、使用时间、校正记录。 5700维护后验证记录—用同一公司或校准试剂或用自制质控血清并记录数值 3、其他细节: 垃圾处理：按生物污染性制品，交医院统一处理。 仪器简单操作流程 标记笔、枪头盒等一些小物品都要标明分区。 仪器的申请、采购、使用、验证程序 样本采集（针对临床医护人员）、运输、收集程序 样品的唯一编号原则—应区分开不同天、不同种类的标本 标本的保存程序—包括处理前、刚处理后、报告发放后的原始标本（原则上至少保留一周）应有专人负责。 检测结果的保存、备份记录、质控记录保存，除电脑记录外应有相应的手抄记录（类似于基因日检测统计表类型的）。 抱怨记录—应有时间、事件（项目）、接待人、处理方法、处理结果、处理人签字确认
注意事项 1、回答任何问题都应与自己写的SOP文件相一致."写你所做的,做你所写的". 2、SOP文件不能写的太虚,无法做到的东西不要写,比如公司版的SOP文件里的加样器的校准一般实验室就做不到.模棱两可也不要写,比如"消毒时间一到两小时"不能这样写,多少就是多少. 3、处理标本要在生物安全柜内,而加样则在柜外. 4、各区门口要贴有各区的工作制度,限入标志.还要准备两个登记本,一个来记录紫外消毒,一个来记录工作人员出入.区内还要有一个工作记录本,用来记录各区每天的工作内容,便于监测每天的工作全过程. 5、每把枪的用途要清楚,不能弄乱.比如稀释阳模的枪和处理标本的枪不可混用. 6、普通离心机处理分泌物标本时应在离心后静置20分钟才能开盖.(许斌这样认为) 7、所有仪器、设备都要有档案卡. 8、所有的清洁消毒要在实验结束后马上进行,尤其是仪器、设备.像扩增仪，每天都要清洁，做完的反应管决对不能留在样品槽内。 9、各区的拖把、抹布不得混用,标记清楚. 10、生物防护意识要强,手套要随时更换.生物防护安全的保证要从三个方面:制 度、硬件、意识。 11、爆管如何处理:立即停止实验,水浴里的水要倒掉,冲洗.所有可能污染的地方 要用消毒液擦洗,紫外照射,通风排风. 12、各区应有日常工作核查表,做为每天工作记录的补充. 13、各区要有泡有消毒液的生物污物桶,用来处理生物垃圾. 14、验收组带来的标本要按平时对待临床标本一样处理,要有接收记录,结果登记 等. 15、拒绝电话或代领等非正常方式发放报告单. 16、存放标本的冰箱要上锁,钥匙及电脑资料的密码要由本科室人员专人保管. 17、报告单上要注明试剂的检测下限,不能写成参考范围.除了有操作者,还要有 核校者,且两者姓名除了电子打印还要用手签.定量结果不能有阴阳性提示,
花卉扦插繁殖方法大全Newly compiled on November 23, 2020
根据插穗材料、扦插条件、扞插时期以及扦插目的的不同，可分为多种扞插方法，现归纳如下： 1.按插穗材料分：有枝插、叶芽插、叶插、根插。 1)枝插：用楦物的枝条作为繁殖材料进行扦插的方法叫枝插，这是应用最普遍的一种方法。其中用草本植物的柔嫩部分作为扦插材料的称为草本插;用木本植物还未完全木质化的绿色嫩枝作为材料的，称为嫩枝插或绿枝插;用木木植物已经充分本质化的老枝怍为材料的，称为硬枝插或熟枝插;用休眠枝扦插称为休眠枝插：用比较幼小还未伸长的芽作为材料的称为芽插;用枝条的先端部分扦插的称为带梢插;用切除先端部分的枝条扦插的则称为正常插或去梢插,这也是最普通的扦插法。 2)叶芽插：用带有腋芽的叶进行扦插，也可看成是介于叶插和枝插之间的带叶单芽插。当材料有限而又希望获得较多的苗木时，可采用这种方法。如印度橡皮树、山荼、大丽花、绿萝等的扞插多用这种方法。对赤松等树种，切除嫩枝顶端部分，促使针叶基部的不定芽活动，形成短枝，然后连同针叶切下进行扦插，即称为叶束插，这也属于叶芽插的一种。 3)叶插：用叶作为材料进行扦插的方法。此法只能应用于能自叶上发生不定芽及不定根的种类，如虎尾兰、毛叶秋海棠、大岩桐等。凡能进行叶插的植物，大都具有粗壮的叶抦、叶脉或肥厚的叶片。 叶插方法常用的有下列几种： 平置法：又称全叶播。先将叶柄切去，然后将叶片平铺在沙面上，用竹针等固定，并使其下面与沙面紧贴。如落地生根可自叶缘处发生幼小植株。秋海棠则自叶片基部或叶脉处发生幼小植株。 直插法：又称叶枘—插。将叶柄插入沙中，叶片立于沙面上，则于叶柄基部发生不定芽。大岩柄的叶插，则先在叶柄基部发生小球茎，而后发生根与芽。 鳞片插：百合鳞片可以剥取进行扦插。百合于7 月开花后，搪起鳞茎，千燥数日后，剥下鳞片插于湿沙中，68周后在鳞片基部可发生小鳞茎。 片叶插：又称分切插。此法是将一个叶片分切为数块，分别进行扞插，使每块叶片都形成不定芽。如虎尾兰、大岩桐、椒草等都可用此法繁殖。 根插：有些植物的根上能产生不定芽而形成幼 株，如腊梅、柿子、牡丹、芍药、补血草等具有肥厚根的种类，可采用根插。一般在秋季或早春移栽时进行，
刺梨种植技术 发布时间：2015-10-20 22:13:45 来源：黔农网标签：刺梨种植技术 刺梨别称刺酸梨子、木梨子、刺莓果等，为蔷薇科多年生落叶灌木缫丝花的果实，性喜温暖湿润气候，年平均温度12-16℃，年降雨量1000毫米以上地区均可种植，对土壤要求不严，以pH5.5-7的酸性或微酸性土壤为好，下面我们就一起来看一看刺梨的种植技术吧！
刺梨的繁殖方法 1、种子繁殖：分春播和秋播。刺梨种子无明显的休眠期，秋季种子成熟后立即播种，其发芽率及出苗率可达90％以上。秋播，9月上、中旬果实成熟后采种，立即播人苗床，10月中、下旬出苗。第二年3月移栽苗圃，年底可出圃。但在冬季严寒地区需要覆盖塑料薄膜防冻。春播以2月下旬至3月上旬为宜，4月上旬出苗，5月下旬至6月上旬移栽到苗圃。播种前一天将种子放人50-60℃的温水中浸种12-24小时，取出后洗净播种，可提早5天发芽，提高发芽率。 2、扦插繁殖：春、夏、秋三季均可进行，春插将冬季修剪下来的1年生枝条剪成10-12厘米长，下端在芽下方斜剪，上端在芽上方1厘米处斜剪。以100根1捆藏于湿沙中。次年2月上中旬以株行距9x24厘米斜插于苗圃中，露1芽在外，踏实插条周围床土。3月中旬萌芽，成活率90％以上。夏、秋扦插，取1-3年生枝，用ABT生根粉处理插条基部，发根成活率100％。
刺梨的定植方法 1、定植准备：定植前土壤要进行深翻熟化、改良和挖好定植沟或穴。山地建园，土壤耕层薄，有机质少，肥力低，需要进行土壤改良，定植前一般要挖深40厘米、宽或直径60厘米的沟或穴，将表土与农家肥等充分混合回填并用水沉实或边境边踏实。 2、定植密度：对立地条件差或管理粗放的地块，可采用2米×1米或2米×1.5米的行株距，对土壤肥沃、雨水充足的地块，行株距可适当大些，以2.5米×1.5米或2.0米×1.5米较适宜。 3、定植时间：因刺梨喜湿不耐干旱，保护组织又不发达，易蒸腾失水，所以在贵州地区一般于11月下旬到翌年2月上旬刺梨落叶后的休眠期内定植，其他地区可依实际情况酌情而定。 4、定植方法：定植时，先在定植穴上挖大小适宜的坑，将刺梨苗放入坑内，确定好苗木的位置和深度，将根系疏展，填入细土，再将苗木略向上提，使其根系伸展开，然后将士填回，踏实。定植的深度以苗木出圃时的埋土深度为准，在定植穴周围或沟的两侧筑上小土埂，浇透定植水，加强管理，以保成活。
PCR疑难解答 当PCR结果不甚满意时，首先检查以下几方面并遵照执行： 将PCR反应的试管与反应板紧贴。 当酶反应混合物以70℃“热启动”开始循环时，切记在加入酶后稍微振荡一下，因为在0.2-ml 的PCR管中不能均匀传热。 不要随意减少dNTP的用量，它是一个系统的因素，必须与其它成份保持平衡。 对于有问题的PCR反应，例如模板的量少，模板不纯和环状模板等，先尝试加Taq酶前的体系进行预变性，后加模板进行正常PCR扩增。 没有扩增产物： 在提供MgCl2缓冲液中，以0.25mmol/L为梯度增加MgCl2浓度；无MgCl2的缓冲液以0.5 mmol/L为梯度增加MgCl2浓度。 泳道中出现模糊条带，如果DNA模板中存在RNA，则按上述提示浓度补加MgCl2，因为在PCR反应中可能缺少游离的Mg2+。 检查退火温度和变性条件，如果有需要的话，可降低退火温度。 检查模板和引物的用量。 增加循环次数和/或模板DNA的用量。 泳道中出现模糊条带： 减少循环次数或模板DNA的用量。 提高退火温度，但不要超过68℃。 重新设计引物或设计更长的引物。 其他值得注意的条件： 建议使用0.2-ml薄壁管。厚壁管在92℃时不能有效地使模板变性。 最佳反应体积为50ml，推荐用30ml矿物油覆盖（对盖子加热的PCR仪可以不加）。 大多数反应中，0.75ml（0.5~1ml）的酶量在大多数情况下可以得到满意的结果。 建议使用1.75mmol/L MgCl2∶350mmol/L dNTP或2.25mmol/L MgCl2∶500mmol/L dNTP 组合的混合物。然而要得到最佳结果，优化Mg2+的浓度是必需的。 基因组DNA模板的质量显著影响PCR反应。因此推荐使用琼脂糖凝胶电泳来检测DNA的长度。DNA片段长度可以超过50kb，传统的基因组DNA能扩增片段至10kb。 要扩增更长的片段应使用超纯或高分子量的DNA。请查阅高分子量DNA提取操作过程相关文献。 降低二级结构和引物二聚物形成的可能性。进行长片段PCR扩增时，引物长度一般为24~34个核苷酸，溶点在60~68℃间。使用这类引物可提高PCR反应的退火温度来增加反应的特异性。这点非常重要，长片段扩增的效果往往受到非特异性短片段优先扩增的影响。 变性：第一步变性在94℃下进行2分钟。在循环过程中尽可能缩短变性时间（94℃下进行20--30秒），除非模板中富含GC，则95℃下变性30秒。这可以防止DNA脱嘌啉和链断裂，对于所需扩增的基因组DNA片段终长度超过12 kb时，应该尽可能的降低变性温度。 延伸：68--72℃下进行延伸操作。 循环延伸：尽量采用循环延伸的条件，若PCR仪无此功能，则必须增加延伸的时间，例如在扩增10kb片断时，延伸时间用10分钟替代原来的8分钟。 长片断PCR系统扩增的片断其3’-末端带有一个突出的A，因此建议采用T/A克隆。若要进行平端可隆，可用Klenow酶和T4 DNA多聚酶将PCR产物补平后再进行。 测序时因酶的混合物带有3’→5’外切酶活性，用Sanger方法进行测序不能产生均一的（染色体）带型。
花卉的繁殖 1、教学目的： 介绍花卉有性繁殖和无性繁殖方法，使学生了解花卉繁殖的各种方法所依据的理论基础，并能根据具体花卉种类和具体条件和生产要求选择不同的繁殖方法，掌握花卉常规繁殖技术并能综合运用。 2、授课的内容纲要： 花卉繁殖是繁衍花卉后代、保存种质资源的手段，只有将种质资源保存下来，繁殖一定的数量，才能为园林应用，并为花卉选种、育种提供条件。不同种或品种的花卉，各有其不同的繁殖方法和时期。对不同种花卉适时地应用正确的繁殖方法，不仅可以提高繁殖系数，而且可使幼苗生长健壮。花卉繁殖的方法较多，可区分为如下几类： 有性繁殖：也称为种子繁殖。花卉(多数为被子植物)在营养生长后期转为生殖期，进行花芽分化和花芽发育而开花，经过双受精后，由合子发育成胚，由受精的极核(中央细胞)发育成胚乳，由珠被发育成种皮即通过有性过程而形成种子。用种子进行繁殖的过程就称为有性繁殖。 无性繁殖：也称营养繁殖。利用花卉营养体(根、茎、叶、芽)的一部分，进行繁殖而获得新植株的繁殖方法。通常又包括分生、扦插、嫁接、压条等方法。 前者繁殖系数大、根系强健，但后代易出现分离现象，可用于花卉选种及育种。后者繁殖系数较小，根系也不及前者，且无主根。可是此法能保持原有的种质特性，仅有少数花卉的性状传递有变化。 如金边虎尾兰(Sansevieriatrifasciata var．Laurentii N.E.Br．)，若用扦插法繁殖则叶片金边消失，欲保持原种特性需用分株法进行繁殖。 孢子繁殖：孢子是由蕨类植物孢子体直接产生的，它不经过两性结合，因此与种子的形成有本质的不同。蕨类植物中有不少种类为重要的观叶植物，除采用分株繁殖外，也可采用孢子繁殖法。 组织培养：把植物体的细胞，组织或器官的一部分，在无菌的条件下接种到一定培养基上，在玻璃容器内进行培养，从而得到新植株的繁殖方法称为组织培养。又称为微体繁殖(Micropropagation)。 第一节有性繁殖 一、花卉种实分类及发芽条件 (一) 花卉种实分类 花卉种类及品种繁多，其种(子)实(果实)的外部形态也是千变万化的。在生产中，采下 果实贮藏备用或进行交换。通常有下述分类法： 1.按粒径大小分类(以长轴为准)： 2.按种实形状分类： 3.按色泽分类： 4.按种皮厚度及坚韧度分类： (二) 花卉种子萌发条件及播种前的处理 播种繁殖，一、二年生花卉应用最多，一些宿根及球根花会再杂交育种工作中，也常采用播种方法进行繁殖。花卉的种实在适宜的水分、温度和氧气的条件下都能顺利萌发；仅有部分花卉的种实要求光照感应或者打破休眠才容易萌发。 1.水分：花卉的生命需要在有水分的条件下才能维持，而种实萌发首先需要吸收充足的水分。
花卉苗木扦插繁殖技术 一、扦插繁殖的的概念、意义 扦插繁殖是用植物营养器官的一部分（如枝、芽、根、叶等）作为插穗、插在土、沙或其它基质中，使其生根发芽、成为完整独立的新植株。这是繁殖观赏灌木、多年生缩根草本、落叶及常绿阔叶及针叶树种的一种最重要的方法。花卉在温室生产中繁殖时也广泛地采用扦插法。 扦插繁殖可以经济利用繁殖材料，可进行大量育苗和多季育苗（如菊花、香石竹1平方米可扦插繁育400—600苗），既经济又简单，不存在嫁接繁殖中砧木影响接穗的的问题；可以保持母体的优良性状：而且成苗迅速根系比实生苗理想；开始结实时间比实生苗早：对不结实的或结实稀少的名贵园林树种是一种切实可行的繁殖方法。如紫薇的播种苗花色混杂，只能靠扦插繁殖保持母本优良性状。如某些月季、葡萄品种、重瓣黄刺玫、不结实或结实很少或不产生有效种子。亦只能用扦插繁殖。扦插繁殖目前不仅在生产上广泛应用，而且在实践中不断积累了许多经验，采用了许多先进技术，解决了许多繁殖困难树种的繁殖问题，对加速花卉苗木的育苗工作起了很大的作用。 二、扦插生根的机理 在扦插育苗时，插条基部切断面上的受伤细胞由于原生质的分解而产生一种创伤激素，并且被内层未受伤的细胞所吸收，使健全细胞的细胞膜木栓化，而将死伤细胞同健全细胞隔离开来。在切口处的创伤激
素和插穗上部由叶、芽转移来的生长激素以及其他生根诱导物质的作用下，切口内层的健全细胞与切断面相平行的分裂，于是形成形成愈伤组织。这种愈伤组织在形成层和筛管部位特别发达，对切口可起一定保护作用。由于植物激素的不断增加，更促进了愈伤组织的细胞分裂，愈伤组织薄壁细胞逐渐开始分化，形成愈伤组织木质部。它先同插穗中水分和养分的通道输导组织连通，再同愈伤组织木质部的外侧相连，而发展成为根原始体，最后长出根来。 三、扦插生根类型 1．潜伏不定根原基生根型离体枝条在脱离母体之前，即已经形成了不定根原基，只要给予适当条件，根原基即可萌发为不定根。如沙地柏、杨树类等。从生理解剖上讲，凡是具有根原基的植物，绝大多数为易生根类型。 2．皮部生根型也是一种易生根类型。有的在1—2周内不定根就可以从皮孔内生出，这些不定根可以暂时维持离体枝，叶的水分代谢，保证离体的存活。待基部不定根形成后，上部的皮部根可逐渐衰退，消失，如一些品种的月季、玫瑰、扶芳藤、地锦等。3．侧芽、潜伏芽基部分生组织生根型这种生根型几乎普遍存在于各种植物中。芽的基部分生组织非常活跃，再生能力强，容易形成根原始体。生产上调整插穗时，下剪口都要选择在侧芽的基部（节间下部）就是缘自于此。 4．愈伤组织生根型离体扦插后，为了生存下来，首先要保护好伤口，形成愈伤组织。在适宜的生根条件下进一步分化，形成根
金刺梨栽培技术 （一）育苗繁殖技术 "金刺梨"的枝条易产生不定根，根易形成不定芽，可采用扦插、分株和压条等繁殖育苗，一般采用扦插育苗。 1、扦插繁殖 扦插，春、夏、秋均可进行，以秋插较多。 （1）苗床准备。选背风稍阴、土壤肥沃、有浇灌条件的沙壤土做苗床，深翻，施足底肥（每平方施用4—5公斤腐熟农家肥、60-70克复混肥），耙平，做宽1米、长度不限的苗床，浇足水覆盖地膜待扦插。或者过筛黄壤沙质细土，每平方施用4—5公斤腐熟农家肥、60-70克复混肥充分拌匀，铺设于苗床或装入营养袋备用。 （2）扦插育苗。秋季全封闭保湿扦插成苗率高，其具体做法是，于10—11月从已经结果的优良母树上剪取已木质化的当年生发育充实、无病虫害、径粗0.4—0.6厘米的枝条，剪除顶梢幼嫩部分不用，然后，剪成长10厘米的插条，插条保证有3个以上芽节，下切口在近节下0.2厘米处，切成斜面。每50根1捆，用生根粉溶液，浸蘸下切口斜面30秒钟，取出晾干后扦插。在整好的苗床上，按7-12厘米×5—7厘米划线打点扦插或插入营养袋，每亩可扦插60000—130000株，可装营养袋150000袋左右。插时，先用1根小木棒在预先铺好薄膜的苗床上打引孔，再将枝条的2/3长度插于孔内，要求有1个芽节露出床面或营养袋。插后随即踩紧、压实土壤，浇一次透水，冬季，床面加盖塑料拱棚增温保湿。到春季3-4月，气温开始回升，高温天气要注意揭膜通风，开始炼苗，并及时进行人工除草，进行中耕除草和肥水管理。可用100
千克水兑3—5千克尿素追施至秋季，追施2-3次。同时，注意观察苗床土壤缺水现白及时浇水，出现病虫害及时加强防治。次年秋冬季即可出圃定植。 2、组织培养 选用优良单株上的茎尖进行培养，将采集来的茎尖用清水冲洗干净，再用75%酒精浸泡半分钟，后用5%次氯酸钠溶液浸泡6—10分钟，或用0.1%的升汞溶液浸泡3—5分钟，最后用无菌水冲洗3—5次，然后在超净工作台上，剪去药液接触过的伤口，保留茎尖0.5—1厘米，插入灭菌后的MS培养基上培养。在温度25±3℃、湿度60%—80%、光照强度2000—3000勒克斯、光照时间12±2小时的培养室条件下培养。 茎尖插到培养基中培养30天左右开始生根，试管苗的根为1—14条，成放射状分布，开始为白色，后逐渐老化变黄，最后变为灰褐色。生根后的茎尖，成为一株完整的试管苗。当试管苗高1.5—3厘米，根长至1.5厘米以上进行第一次移栽。此次移栽是把适合移栽的试管苗假植到装有珍珠岩粉的小钵内，立即浇水后把小钵移入塑料小拱棚内假植10—15天。然后再把珍珠岩粉小钵内的组培苗移栽到铺有经过消毒的腐植土厢床上，浇透水，置于塑料小拱棚内培育10天左右，即可去掉小拱棚，此时要注意厢床的水分管理，晴天阳光过强要用遮阳网遮荫。经过1个月培养，组培苗就可以移栽到苗圃中去。以3—6月和9—11月移栽到露地苗圃最好，移栽成活率高。（二）栽培管理技术 1、建园定植 种植以排水良好，土层深厚、肥沃的壤土为好，土质粘重、易积水、多潮湿的地方不宜种植。选择山地或丘陵地作为园地时，应整水平梯带，或者修建排水沟，沿等高线种植，以免水土流失。在整好的地上，肥力条件较好的园地，按行距4-4.5米、株距
刺梨的栽培技术 分春播和秋播。刺梨种子无明显的休眠期，秋季种子成熟后立即播种，其发芽率及出苗率可达90%以上。秋播，9月上、中旬果实成 熟后采种，立即播人苗床，10月中、下旬出苗。第二年3月移栽苗圃，年底可出圃。但在冬季严寒地区需要覆盖塑料薄膜防冻。春播 以2月下旬至3月上旬为宜，4月上旬出苗，5月下旬至6月上旬移 栽到苗圃。播种前一天将种子放人50℃-60℃的温水中浸种12小时 -24小时，取出后洗净播种，可提早5天发芽，提高发芽率。 刺梨的枝条易产生不定根，根易形成不定芽，可采用扦插、分株和压条等繁殖育苗。 (1)扦插繁殖 刺梨扦插，春、夏、秋均可进行(以秋插为例)。 做床。选背风稍阴、土壤肥沃、有浇水条件的沙壤土做床，深翻，施底肥，耙干，做宽1米、长度不限的插床，浇足水后待扦插。 剪插条。从已经结果的优良母树上剪取已木质化的当年生枝条，剪成长10厘米-15厘米的插条，下剪成马耳形，扦插深度为插条的 2/3，株行距10厘米×25厘米，斜插于苗床上，插完后在苗床上扣 一方形塑料拱棚，并开通风口，上冻后及时将通风口封闭，待第二 年春插穗萌芽时浇一次水，逐渐打开通风口，30天左右撤去薄膜， 秋季即可成苗出圃。 (2)压条繁殖 刺梨采用各种压条方法都易获得良好的效果，水平压条成苗率高，除所压枝条的先端数芽之外，压入土中的每一节都能发根生枝成苗，如为了保持一定的母株数量可用株丛外围枝水平压条，春季压条， 秋季即可切离起苗，一母株可得20株左右的苗。 (3)组织培养
1982年高相福等开始对刺梨组织培养快速繁殖进行了研究，并 在当年培育出第一批刺梨组培苗。现将情况简介如下。 选用优良单株上的茎尖进行培养。将采集来的茎尖，先用清水冲洗干净，去掉大叶片，用0.1%的升汞溶液浸泡3分钟—5分钟;或用 酒精浸泡半分钟再用漂白粉饱和上清液浸泡6分钟一10分钟，用无 菌水冲洗3次—5次，然后在无菌条件下，剪去药液接触过的伤口，保留茎尖0.5厘米—1厘米，插入装在三角瓶内经高压灭菌的MS培 养基上培养。在温度25±3℃、湿度60%一80%、光照强度2000勒 克斯—3000勒克斯、光照时间10±2小时的培养室条件下培养。 (4)培养基成分 培养基的基本成分是(每升含量)：硝酸钾1250毫克，硫酸铵67 毫克，硫酸镁125毫克，磷酸二氢钾75毫克，氯化钙44毫克，硫 酸锌86毫克，硫酸锰22.3毫克，硼酸6.2毫克，氯化钾0.83毫克，氧化钼酸钠0.25毫克，硫酸铜0.025毫克，氯化钴0.025毫克，硫 酸铁13.9毫克，乙二胺四乙酸二钠18.65毫克，盐酸硫胺素10毫克，盐酸吡哆素1毫克，烟酸1毫克，肌醇25毫克，另加适量的萘 乙酸或吲哚乙酸，将pH调至5.8，用0.9%的琼脂固化，装入100毫 升的三角瓶中，每瓶培养液35毫升左右，用0.8千克/平方厘米高 压灭菌20分钟待用。 茎尖插到培养基中培养18±4天开始生根，试管苗的根为1条—14条，成放射状分布，开始为白色，后逐渐老化变黄，变褐，最后 变为灰褐色。生根后的茎尖，成为一株完整的试管苗。当试管苗高1.5厘米—3厘米，根长至1.5厘米以上，尚未老化变色前需进行第 一次移栽。此次移栽是把适合移栽的试管苗假植到装有珍珠岩粉的 小钵内，立即浇水后把小钵移入塑料小拱棚内假植5天—6天。然 后再把珍珠岩粉小钵内的组培苗移栽到装有腐植土的小钵内，浇透水，置于塑料小拱棚内，此为第二次移栽。 经过二次移栽的苗，在小拱棚内培育10天左右，即可去掉小拱棚，处于露地条件，此时要注意小钵的水分管理，上午要浇水，晴 天阳光过强要用遮阳网。去掉小拱棚后经1个月左右，组培苗就可
PCR操作时应注意的事项 PCR检测微量感染因子时，容易因为污染的而导致各种问题，因此，进行PCR操作时，操作人员应该严格遵守一些操作规程，最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。 （1）划分操作区：目前，普通PCR尚不能做到单人单管，实现完全闭管操作，但无论是否能够达到单人单管，均要求实验操作在三个不同的区域内进行，PCR的前处理和后处理要在不同的隔离区内进行： ①标本处理区，包括扩增摸板的制备； ②PCR扩增区，包括反应液的配制和PCR扩增； ③产物分析区，凝胶电泳分析，产物拍照及重组克隆的制备。 各工作区要有一定的隔离，操作器材专用，要有一定的方向性。如：标本制备→PCR 扩增→产物分析→产物处理。 切记：产物分析区的产物及器材不要拿到其他两个工作区。 （2）分装试剂：PCR扩增所需要的试剂均应在装有紫外灯的超净工作台或负压工作台配制和分装。所有的加样器和吸头需固定放于其中，不能用来吸取扩增后的DNA和其他来源的DNA： ①PCR用水应为高压的双蒸水； ②引物和dNTP用高压的双蒸水在无PCR扩增产物区配制； ③引物和dNTP应分装储存，分装时应标明时间，以备发生污染时查找原因。 (3) 实验操作注意事项尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因，样品间的交叉污染也是原因之一。因此，不仅要在进行扩增反应是谨慎认真，在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意： ①戴一次性手套，若不小心溅上反应液，立即更换手套； ②使用一次性吸头，严禁与PCR产物分析室的吸头混用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免气溶胶的污染； ③避免反应液飞溅，打开反应管时为避免此种情况，开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面； ④操作多份样品时，制备反应混合液，先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好，然后分装，这样即可以减少操作，避免污染，又可以增加反应的精确度； ⑤最后加入反应模板，加入后盖紧反应管； ⑥操作时设立阴阳性对照和空白对照，即可验证PCR反应的可靠性，又可以协助判断扩增系统的可信性； ⑦尽可能用可替换或可高压处理的加样器，由于加样器最容易受产物气溶胶或标本DNA的污染，最好使用可替换或高压处理的加样器。如没有这种特殊的加样器，至少PCR 操作过程中加样器应该专用，不能交叉使用，尤其是PCR产物分析所用加样器不能拿到其它两个区； ⑧重复实验，验证结果，慎下结论。 威斯腾生物400 675 6758
根据插穗材料、扦插条件、扞插时期以及扦插目的的不同，可分为多种扞插方法，现归纳如下： 1.按插穗材料分：有枝插、叶芽插、叶插、根插。 1)枝插：用楦物的枝条作为繁殖材料进行扦插的方法叫枝插，这是应用最普遍的一种方法。其中用草本植物的柔嫩部分作为扦插材料的称为草本插;用木本植物还未完全木质化的绿色嫩枝作为材料的，称为嫩枝插或绿枝插;用木木植物已经充分本质化的老枝怍为材料的，称为硬枝插或熟枝插;用休眠枝扦插称为休眠枝插：用比较幼小还未伸长的芽作为材料的称为芽插;用枝条的先端部分扦插的称为带梢插;用切除先端部分的枝条扦插的则称为正常插 或去梢插,这也是最普通的扦插法。 2)叶芽插：用带有腋芽的叶进行扦插，也可看成是介于叶插和枝插之间的带叶单芽插。当材料有限而又希望获得较多的苗木时，可采用这种方法。如印度橡皮树、山荼、大丽花、绿萝等的扞插多用这种方法。对赤松等树种，切除嫩枝顶端部分，促使针叶基部的不定芽活动，形成短枝，然后连同针叶切下进行扦插，即称为叶束插，这也属于叶芽插的一种。
3)叶插：用叶作为材料进行扦插的方法。此法只能应用于能自叶上发生不定芽及不定根的种类，如虎尾兰、毛叶秋海棠、大岩桐等。凡能进行叶插的植物，大都具有粗壮的叶抦、叶脉或肥厚的叶片。 叶插方法常用的有下列几种： 平置法：又称全叶播。先将叶柄切去，然后将叶片平铺在沙面上，用竹针等固定，并使其下面与沙面紧贴。如落地生根可自叶缘处发生幼小植株。秋海棠则自叶片基部或叶脉处发生幼小植株。 直插法：又称叶枘—插。将叶柄插入沙中，叶片立于沙面上，则于叶柄基部发生不定芽。大岩柄的叶插，则先在叶柄基部发生小球茎，而后发生根与芽。 鳞片插：百合鳞片可以剥取进行扦插。百合于7 月开花后，搪起鳞茎，千燥数日后，剥下鳞片插于湿沙中，6?8周后在鳞片基部可发生小鳞茎。 片叶插：又称分切插。此法是将一个叶片分切为数块，分别进行扞插，使每块叶片都形成不定芽。如虎尾兰、大岩桐、椒草等都可用此法繁殖。 根插：有些植物的根上能产生不定芽而形成幼 株，如腊梅、柿子、牡丹、芍药、补血草等具有肥厚根的种类，可采用根插。一般在秋季或早春移栽时进行， 方法是挖取植物的根，剪成4-10厘米的根段，水平状埋植于基质中，也可使根的一端稍微露出地面呈垂直状埋植。 2.按扦插季节分：有春插、夏插、秋插和冬插。 1)舂插：在舂季进行的扦插。主要用老枝或休岷枝作为材料，成活后在当年内生长期较长，适亍各种植物，因此此法应用较普遍。舂插可采用冬季贮藏的穗条。 2)夏插：在夏季空气较湿润的梅雨季节进行，多用当年生绿枝或,绿枝。夏插特别适合于要求髙温 的常绿阔叶树种。
实训六药用植物的扦插繁殖技术（金银花） 一、实训目的要求 1.了解药用植物扦插繁殖的理论基础。 2.掌握药用植物枝插、叶插及根插的繁殖技术。 二、实训材料用品 （一）实验材料 根插材料：地下跟，选择一年生充实饱满的根，不宜选择不易发芽的老根和新生根。 枝插材料：植株的半成熟的枝条。 叶插材料：植株生长健壮、充分成熟的叶片。 （二）仪器与用品 枝剪、刀片、育苗盘、移植铲、标签、遮阳网、塑料薄膜。 （三）试剂 萘乙酸、酒精、石蜡 三、实训内容方法 （一）营养土的消毒盒装盘 可选择轻质壤土、江沙、苔藓等作栽培基质。用高压锅进行湿热灭菌 1.5小时，用福尔马林熏蒸或紫外灯对育苗盘进行。将基质平铺于育苗盘上，约10cm 厚，打透底水备用。 （二）生长调节剂溶液的配制 1.500ppm萘乙酸粉剂将1g萘乙酸混于2000g滑石粉中备用。 2.500ppm萘乙酸溶液 1g萘乙酸先溶于少量95%乙醇后，再加水稀释至所需浓度。（三）插穗的剪切 剪插穗的枝剪在每剪一个新插穗前用70%左右的酒精消毒处理。 1.根插穗的剪切 2.枝插穗的修剪 3.叶插穗的修剪 （四）插穗的扦插
将根插法和枝插法及片叶插法的插条各分成6组，每组15枝插穗，分别为：不处理的对照组、上切面不处理及下切面沾500ppm萘乙酸粉剂处理组、上切面不处理及下切面沾500ppm萘乙酸溶剂处理组、上切面封蜡及下切面不处理组、上切面封蜡及下切面沾500ppm萘乙酸粉剂处理组、上切面封蜡及下切面沾500ppm萘乙酸溶液处理组。将处理好的各组插穗分别扦插于铺好扦插基质的育苗盘中，挂好标签，标签上写明扦插时间、扦插方式、处理方式。 将全叶插的插穗分成2组，每组15枝插穗，分别为：不处理的对照组、表面喷洒500ppm萘乙酸溶液的处理组。将处理好的叶片平放于铺好扦插基质的育苗盘中，使叶片背部的叶脉紧贴扦插基质，并在叶脉处用消过毒的小刀划开小切口。之后同样挂好标签，标签上写明扦插时间、扦插方式、处理方式。 （四）插穗苗的管理 （五）插穗苗成活率的调查 插穗半个月后调查插穗的成活率。 各处理的成活率可以按照以下公式计算。 扦插苗成活率=（扦插苗成活株数/扦插苗总株数）x100% 四、实训作业思考 1.书写扦插观察日志。 2.列举三种日常所见的自然营养繁殖实例。 3.人工营养繁殖的意义。
刺梨育苗与栽培研究 摘要：“刺梨种植”是林业经济建设的新项目，研究果蔬产业发展可指导农业经济改革建设。刺梨是林业产业种植近几年主要对象，其不仅可能够带动地方经济快速发展，也能实现产业规划与转型建设，形成更加稳定的经济产业项目。育苗与栽培是刺梨种植业的重点，如何把握育苗及栽培技术应用，将成为提高刺梨产业发展水平的关键。本文分析了刺梨育苗与栽培技术相关问题。 关键词：刺梨；育苗；栽培；技术应用 作为特色果品之一，刺梨在果蔬销售市场逐渐成为关注对象，带动了地区种植行业发展。由于刺梨属于特殊种植品种，实际种植过程中要考虑多种因素，尤其在育苗与栽培技术方面提供多种支撑，解决传统种植模式存在的不足。因而，针对刺梨育苗技术难点，政府及林业部门要做好技术指导工作，把先进的育苗及栽培技术融入种植过程，进一步优化刺梨种植产业结构。 一、刺梨种植产业困境 “刺梨”营养价值极高，在果蔬市场销售中是比较受欢迎的品种，这也增加了地区发展刺梨种植的信心。据统计，到2015年末，仅龙里县刺梨种植规模超过14.5万亩，年产
量超过1.13万吨，为果蔬市场开发创造了有利条件。另一方面，刺梨种植产业发展速度与发展水平不均衡、政府扶持政策不足、产业资金缺失等是农村合作社面临的主要问题，导致这类问题的原因：产业化水平低、缺少技术支撑、配套设施缺乏等，影响了果蔬产业走可持续种植线路。 二、刺梨育苗方法 刺梨的枝条易发生不定根，用枝条扦插容易生根，生产上多用扦插繁殖。实生繁殖的后代变异系数大，生产上不采用。扦插繁殖，春、夏、秋三季都可扦插。以春季发芽前和秋季（9月上旬-10月中旬）为好，枝插繁殖时，插条选择 1-2年生，生长健壮，直径0.8厘米以上的枝条作为插条。扦插繁殖的苗床土壤要肥沃、蔬松、保水性能好，扦插后及时浇水，保持土壤湿润，并加覆盖物，保温保湿，利于发根。 枝条处理：为提高扦插育苗的成活率，现常采用药物处理的方法促其发根。通常是将成捆的扦插条基部1～2厘米用药物进行浸蘸。但切忌使插条顶芽着药。常用的药剂有：吲哚乙酸40-50mg/kg，萘乙酸钠100mg/kg，浸泡12-24小时；吲哚丁酸100mg/kg浸12小时，或200-300mg/kg快速浸蘸，将插条基部浸入药液后立即取出；亦可用萘乙酸 300-450mg/kg快速浸蘸。或用0.2%磷酸二氢钾浸泡枝条的1/3，浸泡48小时，也可提高扦插育苗成活率。 起垄作床：清除地上杂物后，要对土壤深耕30-40厘米
逆转录RT-PCR操作注意事项 RT-PCR操作有三步： 第一，RNA提纯； 第二，RT逆转录； 第三，PCR聚合酶反应 1.做RT前必需测RNA浓度，逆转录体系对RNA量还是有一些要求，常用500ng或1ug。 2.RT按要求做，一般不会出太大问题。 3.PCR，按常规。但如需扩长片段，则对前两步要求较高，需要有完整的cDNA存在，不是单改变Mg2+浓度、退火温度能解决的。 1）RT和PCR时的引物设计有3种方法: a：Random 9mers； b：OligodT-Adaptor Primer； c：特异的下游引物。 如果用a和b方法，是扩增的所有的cDNA（理论上），还要用此产物做PCR 的模板继续扩增。如果用c方法，那么要去那里查它的序列呢？https://www.doczj.com/doc/1215288329.html, 1.RT-PCR有两种做法： 条件具备的话可用kit进行一步法进行；若条件不太好的话可分两步进行逆转录再PCR。但后来发现两步法的结果更加理想，条带特异性强且无拖尾现象，我推测是体系更加单一比较利于PCR的进行，当然也可能是我买的kit不太好。（promega）。 2.RT-PCR应具备的条件 高质量的RNA（保留后可做5'，3'RACE）；引物的（最好产物短点）；若涉及粗略定量的话还应考虑RNA的浓度或是cDNA的浓度（如果由内标分子更好，但我发现其实很不容易将RNA的浓度以及内标分子的表达量调整的完全一样）；体系的均一性等。 3.RACE 我做过RACE（3'RACE是宝生物的Kit；5'RACE是Gibico），但现在再进行另一个同源基因的3'RACE时却怎么也P不出来，这两个基因是由同一对引物扩增出来的，其中一个已经获得了全序列（RACE的方法），而另一个基因的3'UTR却怎么也扩不出来，我推测是不是该基因的3'UTR太长的缘故，我都快绿了，有无RT-PCR的常用内标b－actin 和GAPDH的使用有选择性吗？比如不同的细胞，不同的刺激。 有关内参的几点建议： 一定要做内参的，每一次，我想。不作内参的结果是不可信的。 （1）半定量和定量RT-PCR做的都是基因相对表达量，不是绝对表达量；
刺梨的种植技术 刺梨别名酸梨子、木梨子，是一种比较稀有的果实，它富含维生素c，有滋补健身的作用。此外它好具有极高的药用价值，能增强机体的抵抗力，有防癌抗癌、治疗坏血病的作用。下面让我们一起来看看它的种植技术。 1、种植条件 刺梨性喜温暖湿润的气候，在年平均温度在12-16左右，年降水量1000毫升以上的地区皆可种植。它对土壤的要求不严，但以肥沃疏松、排水良好的酸性或微酸性土壤为好，这样有利于它的生长发育以及产量和品质。 2、繁殖方法 刺梨的繁殖方法主要有播种和扦插两种，播种可秋播和春播，它的种子无明显休眠期，成熟后即可播种，成活率达90%以上。播种前将种子放入温热水中浸泡 12-24小时后在播种，这样既可提前发芽，还能提高发芽率。扦插处理冬季外，其余季节皆可进行，将生长健壮的种植上当年生的枝条剪下，剪成10-12cm的一段，下端在芽下房斜剪，而上方在芽上放斜剪。将枝条插入土壤中，露出一芽即可，踩实土壤，约一月后即可成活，也可以加插入部分涂抹生根粉，提高成活率。 3、定植 定植的时间宜选择在12-2月时，定植前要对定植地进行整地施肥，再按1.5×2米的株行距挖定植穴，穴规格要求长宽深各50cm。定植前每穴要施入基肥以及少量的钙、镁、磷肥，栽种时将根系伸展开，不要扭曲在一起，填土一般时，将幼苗往上提一提，使根系舒展开，在覆土踩实，浇足定植水。 4、田间管理 在定植后要根据植株的生长状况，合理的浇水施肥，干旱时要及时浇水，雨季要记得排水，以免积水过多导致根系受到影响，并要做好中耕除草，使植株生长健
壮。还要注意病虫害危害，刺梨的主要病虫害有白粉病、蚜虫、刺蛾、避债蛾、黑刺粉虱及食心虫等，它们都会影响到植株的生长，轻则生长弱势，重则造成死亡，所以要做好病虫害防治工作。
PCR 一、PCR的原理 PCR，Polymerase Chain Reaction，聚合酶链式反应，由Kary Mullis博士在1985年于美国的PE-Cetus公司工作期间发明。该技术基本原理如下： 在模板DNA、primers和4种dNTPs存在下，依赖于DNA polymerase的酶促合成反应。DNA polymerase以单链DNA为模板，借助一小段双链DNA来启动合成，通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。在适宜的温度和环境下，DNA聚合酶将脱氧单核苷酸加到引物3′-OH末端(退火),并以此为起始点，沿模板5′→3′方向延伸，合成一条新的DNA互补链的过程并依次循环。 1.PCR反应的基本成分 包括：Templates DNA(待扩增DNA)、Primers、4种脱氧核苷酸(dNTPs)、DNA聚合酶和适宜的Buffer(对于高GC含量的模板有时加入3% DMSO)。类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。 2.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成： ①.模板DNA的变性：模板DNA经加热至94℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应做准备； ②.模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃或60℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合； ③.引物的延伸：DNA模板--引物结合物在Taq DNA聚合酶或Phusion DNA聚合酶或Pfu DNA聚合酶的作用下，以dNTPs为原料，靶序列为模板，按碱基互补配对半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链，新链又可成为下次循环的模板。 3.PCR的反应动力学 PCR的三个反应步骤反复进行，使DNA扩增量呈指数上升。反应最终的DNA 扩增量可用Y＝(1＋X)n计算。Y代表DNA片段扩增后的拷贝数，X表示实际扩增效率，平均约为75%，n代表循环次数。平均扩增效率的理论值为100%，但在实际反应中平均效率达不到理论值。如果进行30个Cycles，实际扩增倍数往往为106-107（理论上以Y=2n计算，为109）。反应初期，靶序列DNA片段的增加呈指数形式，随着PCR产物的逐渐积累，被扩增的DNA 片段不再呈指数增加，而进入线性增长期或静止期，即出现“停滞效应”，这种效应称平台期。PCR 扩增效率及DNA聚合酶、PCR的种类和活性及非特异性产物的竟争等因素与之都有