Celigo细胞成像分析仪的特点和应用
Celigo细胞成像分析仪的特点和应用
上海典奥生物科技有限公司（tekon biotech (Shanghai) Itd）
Celigo细胞成像分析仪可分析生长在微孔板和T-flask中的贴壁和非贴壁（悬浮）细胞，具有超越传统方法的更好的优势。Celigo具有特别一致的，高质量，全孔的明亮视野（brightfield）成像功能，结合强大的分割软件可在5分钟内获得整个微孔板的所有孔中的所有细胞的高质量数据。Celigo具有非破坏性和非侵入性明亮视野分析功能，并有多色荧光功能作补充，使系统适合任何实验室中的基于细胞的广泛的实验。
图1 Celigo细胞成像分析仪
Celigo细胞成像分析仪具有下列特征和优势：
1）可接受T-flask（T-25和T-75）和多数微孔板（1536孔板到6孔板）；
2）可在整个孔的范围内进行准确的明亮视野细胞成像和识别；
3）具有三通道荧光（除了明亮视野功能）：红色荧光、绿色荧光和蓝色荧光；
4）极快速的扫描（扫描整块微孔板大约耗时5-15min）；
5）有直观并易于使用的，功能强大的，软件分割和分类界面；
6）可选择的API软件，可进行机械臂装载整合。
Celigo细胞成像分析仪的杰出的性能主要取决于它的独特的光学通路，此光学通路应用了一个大型的F-theta透镜和检流计镜片来进行大面积快速扫描。与传统的基于显微镜的仪器不同，此系统可扫描整个孔，而无需移动微孔板，并保持一致的亮度对孔边缘的细胞进行准确的细胞识别。
Celigo可检测的细胞分析参数：
1）总细胞数目（Total Cell Number）；2）分类细胞数目（Gated Cell Number）；3）分类细胞百分比（Percentage of Gated Cells）；4）细胞密度（Cell Density）；5）细胞面积（Cell Area）；6）细胞平均强度（Cell Mean Intensity）；7）细胞整体强度（Cell Integrated Intensity）；8）细胞长宽比（Cell Aspect Ratio）；9）细胞形状因子（Cell Form Factor）；10）细胞光滑度（Cell Smoothness）；11）克隆直径（Colony Diameter）；12）克隆周长（Colony Perimeter）。
Celigo细胞成像分析仪的应用
（一）明亮视野无标记实验
1）细胞计数和细胞生长跟踪（Cell Counting & Growth Tracking）
用于进行细胞系特征描述，克隆确认，和基于形态学的筛选。
2）克隆计数：球体分析（Colony Counting: Sphere Analysis）
用于进行EB特征描述和肿瘤球体分析。
3）饱和度（Confluency）
用于细胞系特征描述和侵染性实验。
（二）荧光标记实验
1）细胞计数和细胞生长跟踪（Cell Counting & Growth Tracking）
用于进行细胞系特征描述，克隆确认，和基于形态学的筛选。
2）细胞分泌实验（Cell Secretion Assay）
用于细胞分泌分析。
3）细胞活力（Cell Viability）
用于方法学发展，细胞健康性实验和高通量筛选。
4）DNA合成（DNA Synthesis）
用于细胞周期分析，细胞健康性实验，高通量筛选和细胞增殖实验。
5）表达分析（Expression Analysis）
用于细胞信号，高通量筛选，标记分析和转染优化。
6）磷脂酰丝氨酸外部化（Phosphatidylserine Externalization）
用于方法学发展，细胞健康性实验和高通量筛选。
应用详述：
（一）细胞计数（Cell Counting）
Celigo的细胞计数应用，描述了全孔非标记明亮视野成像的特征，极大地提高了细胞培养物中计数的准确性，并且消除了过去需要分离酶和血细胞计数器才能确定细胞培养密度的状况。Celigo 细胞计数应用的灵活性和易于使用性也可以监控随时间的细胞生长，并方便对培养的日常管理。这个过程的标准化增加了基于细胞的实验的定量的一致性。
用Celigo进行细胞计数应用有如下优势：
1）可进行快速的明亮视野成像和非标记的细胞原位分析；
2）全孔成像的分辨率为1μm/像素；
3）可对多孔微孔板（从1536-孔到6-孔微孔板）和T-flask（T-25和T-75）进行成像；
4）易于使用的界面可对明亮视野中的各种细胞类型进行成像和识别；
5）拥有直接图像分割（segmentation）和细胞识别软件；
6）可用图像和数据报告生长曲线、细胞数目、倍增时间和倍增速度。
图2 用Celigo对贴壁细胞进行细胞计数。上图是用直接细胞计数应用（the Direct Cell Counting application）拍摄的MDA-MB-436，MCF7和MDA-MB-231细胞系的图像，下图是用直接细胞计数应用对其进行分割后的图像。
图3 用Celigo对悬浮细胞进行细胞计数。上图是用直接细胞计数应用（the Direct Cell Counting application）拍摄的CHO，Jurkat和THB-5细胞系的图像，下图是用直接细胞计数应用对其进行分割后的图像。
（二）饱和度计算（Confluency Measurement）
Celigo能对细胞系，包括新建立的、稀有的和不易生长的细胞系，的饱和度和生长特征进行自动的、非标记的、非破坏性的和非侵入性的测定。无需对细胞进行任何操作就可监控样品，使培养物能被原位定量，并可对同一培养物进行随时间的多次准确读取。Celigo提供对快速明亮视野成像、图像分割和分析工具的独特的整合，使研究者能监控细胞培养，生成随时间的生长曲线，确定倍增速度和倍增时间。
Celigo的饱和度应用能提供如下优势：
1）能对多孔微孔板（从1536-孔到6-孔微孔板）和T-flask（T-25和T-75）进行扫描和分析；
2）能对多孔微孔板进行快速扫描和分析（384-孔微孔板的分析耗时＜8min）；
3）能分析T-25和T-75 flask中的细胞生长（T-75 flask的分析耗时大约15min）；
4）易于使用的界面可获取和分析图像；
5）可报告每个孔的饱和度、生长曲线、倍增时间和倍增速度。
图4 用Celigo进行的非标记明亮视野生长分析。上图是在96-孔微孔板中培养数天的贴壁细胞（HeLa）的放大的明亮视野图像，下图是对其进行分析的图像。
图5 用Celigo计算细胞生长特性。上左图表示用饱和度应用（Confluence application）报告的单个孔的非标记生长曲线，上右图表示多孔的缩略图。下左图表示倍增速度，下右图表示倍增时间。
（三）非标记的生长跟踪（Label Free Growth Tracking）/细胞系的特征描述（Cell Line Characterization）
可用Celigo确定原始细胞的生长特性，并在几分钟之内准确分析细胞系。Celigo可为研究者监控细胞生长提供独特的整合的明亮视野成像、图像分割和细胞分析工具。特别地，全孔成像和无标记明亮视野细胞计数使Celigo的用户能得到随时间变化的生长曲线，监控单个孔水平的细胞数目、饱和度、倍增速度和倍增时间。
用Celigo进行直接细胞计数有如下优势：
1）对多孔微孔板进行快速扫描和分析（384-孔微孔板的分析时间＜5min）；
2）易于使用的界面能拍摄和确认明亮视野中的各种不同的细胞；
3）能原位确定细胞的生长特性，直接在它们生长的地方确定；
4）可报告每个孔的生长曲线、细胞数目、饱和度、倍增时间和倍增速度。
5）可分析T-flask（T-25和T-75）中的细胞生长状况，分析T-75的耗时大约是15min。
图6 用Celigo进行无标记的细胞生长分析。使用细胞计数应用（the Cell Counting application）得到分割的HeLa细胞的放大的明亮视野图像，上图是分析得到的细胞数目，下图是细胞饱和度。
图7 用Celigo计量细胞的生长特征。直接细胞计数应用（the Direct Cell Counting application）报告了单个孔中的非标记生长曲线（上左图）和多孔微孔板中的生长曲线（上右图）。它也报告了微孔板的每个孔中的倍增时间（下左图）和倍增速度（下右图）。
（四）细胞增殖实验（Proliferation Assay）
评估培养细胞生长的增殖活性是监控细胞的健康和生长速度的基础工具。很多研究者利用基于代谢的定量方法，如MTT或MTS方法来评估和确认化合物对细胞增殖的影响。然而，这些终点法要求研究者将代谢活性的计量作为细胞数目的间接显示，并且实验是破坏性的，每个时间点都需要使用新的样品。Celigo可利用它的细胞计数应用，进行自动化的、非标记的、非破坏性的和非侵入性的增殖实验。
Celigo的细胞计数方法有如下优势：
1）可原位对细胞进行直接成像和计数；
2）非标记的细胞计数无需试剂；
3）可对每个孔的每个细胞进行准确的、全孔的明亮视野成像和分割计数；
4）可对相同样品进行多重读取，降低成本和劳动力；
5）可利用每孔中细胞的确切数目，进行准确的标准化；
6）可进行细胞形态检验和分析。
图8 Celigo和MTT实验方法的对比。Celligo在多个时间点分析细胞，并用实时明亮视野成像方法对细胞进行直接原位计数，来准确计量细胞的增殖情况。MTT法在一个时间点分析细胞，并间接评估细胞的增殖情况。
图9 用Celigo生成的浓度响应曲线。左图和中图表示用Celigo进行的Colo-205细胞对化合物X和5-FU的不同响应的图像分析（细胞计数）。右图表示用MTT法分析Colo-205细胞在某个时间点的响应。
（五）评估细胞健康状况（Cell Health Analysis）
Celigo可用于快速评估细胞的健康状况，该项易于操作的应用可对不同类型的细胞进行简单而快速的细胞活力分析和细胞凋亡分析。细胞活力的应用分别用calcein AM，propidium iodide和H oechst对活细胞、死细胞和所有细胞进行确认和计数。相似地，磷脂酰丝氨酸外部化（Phosphatidylserine Externalization）应用通过分别用annexin V，propidium iodide和Hoechst定量报告凋亡细胞、死细胞和所有细胞的个数，来计算细胞凋亡。
用Celigo分析细胞健康状况有如下优势：
1）易于使用的界面来确认细胞健康状况；
2）快速扫描和分析（用3个荧光通道扫描和分析96-孔微孔板耗时＜12min）；
3）可兼容多种微孔板类型（从1536-孔到6-孔微孔板）；
4）先进的类似流式细胞技术的分类（flow cytometry-like gating）。
图10 用Celigo观察细胞活力。左图是用三种染料得到的典型图像，右图是用过氧化氢处理Hela细胞时的浓度响应曲线。
图11 Celigo的磷脂酰丝氨酸外部化（Phosphatidylserine externalization）应用。左图是用3种染料得到的典型图像，右图是用喜树碱（camptothecin）处理的凋亡的Jurkat细胞。
（六）肿瘤球体分析（Tumor Sphere Analysis）
用Celigo可对悬浮培养的肿瘤球体，如mammospheres和neurospheres进行快速、准确地分析。这种自动化的形态学分析可以显著减少用于定量3D球体关键特性的时间和精力，这种关键特性包括球体的大小、生长、随时间的生长跟踪和对化学治疗剂的反应。对不同癌症细胞系和主要癌症细胞产生的肿瘤球体的分析可用来评估球体形成效率、致肿瘤性和癌症细胞的自我更新能力。用Celigo进行肿瘤球体分析有如下优势：
1）可对与恶性肿瘤行为相关的活球体进行非破坏性定量测定；
2）可对悬浮的球体进行全孔成像（从96-孔到6-孔微孔板）；
3）可进行快速数据分析（扫描和分析整个12-孔微孔板耗时＜15min）；
4）可分析球体数目、大小、形状和随时间的生长动力学数据。
图12 用Celigo进行肿瘤球体分析。从https://www.doczj.com/doc/1410181678.html,细胞（MCF10A细胞系的癌变前克隆）得到的分割后的原始mammosphere的实时图像。
图13 用Celigo分析药物处理过的肿瘤球体。上图是人胶质母细胞瘤，下图是人乳腺癌细胞。
（七）细胞分泌分析（Cell Secretion Analysis）
Celigo可用于快速和准确地监控生物医药细胞系随时间的分泌速率，这在维持细胞系的生产水平方面是十分关键的。Celigo在细胞分泌方面的应用可测量单个细胞的蛋白分泌量，如生产抗体的杂交瘤细胞。这种单个细胞水平的数据不仅可以提供有价值的对整体生产水平的深入了解，还可以提供对细胞系的均一性的深入了解，而均一性是开发新细胞系的重要选择标准。此应用利用Cy ntellect的专利性的分泌分析法来检测和定量荧光标记的目标细胞周围的“分泌环（Secretion Halo）”。
用Celigo检测细胞分泌有如下优势：
1）有易于使用的界面，来确定分泌细胞和报告统计数据；
2）可报告每个孔中的分泌细胞的数量和百分比；
3）可报告细胞分泌信号的平均强度和累积强度；
4）可分析细胞群的均一性；
5）可平行处理大量的样品。
图14 左图是细胞分泌实验的示例。右图显示的是进行细胞分泌实验的形成分泌圈的CHO-S细胞的典型图像。绿色和黄色的荧光表示CHO-S细胞，而外围的红色荧光表示分泌出的蛋白质（IgG）。
图15 左图表示用Celigo进行的细胞分泌分析。右图表示对应的图像分割，绿色分割表示THB-5细胞，黄色分割表示分泌圈。
（八）克隆确认和扩张（Clonal Validation & Expansion）
克隆形成的确认是生物医药细胞系繁殖的关键步骤。具有卓越的明亮视野成像质量，Celigo可以可靠的捕捉到单个孔中的单个细胞，即使此细胞黏附在孔壁上，并确认从此单个细胞可发展成一个克隆。典型的，在多孔板上进行有限稀释，然后在一段时间内用Celigo进行重复拍照。这样，培养几天后，就可观察到克隆的生长，就可能回溯得到克隆由单个细胞生长而得的结论。
用Celigo进行克隆确认有如下优势：
1）能对多孔微孔板进行快速的明亮视野扫描（384-孔微孔板的扫描耗时＜5min）；
2）准确的图像分割，可检测到单个孔中的单个细胞；
3）可对每孔中的细胞数目进行heatmap表达；
4）可生成监控细胞生长的生长跟踪报告；
5）能对图像和数据进行高效的数据库管理。
图16 用Celigo观察克隆扩张。显示的是单个的CHO-S细胞扩展形成克隆的明亮视野图像。
图17 用Celigo自动检测单个的CHO-S细胞。左图是单个细胞分割的典型的明亮视野图像，右图是显示每个孔中的细胞数目的heatmap。
（九）细胞周期分析（Cell Cycle Analysis）
细胞周期分析常用来筛选影响细胞生长和增殖的化合物。Celigo允许用户使用专门为流式细胞技术开发的实验方法进行贴壁细胞的细胞周期分析。Celigo软件的灵活的分类界面被用来确认和定量处于不同细胞周期的细胞的数目。这种分析可使用单一的染料，如DAPI染料，或使用显示DNA合成的第二个标记物，如BrdU染料。此外，还有使用能标记有丝分裂，如组蛋白H3磷酸化的标记物对其进行多元分析的潜能。
用Celigo进行表达分析应用有如下优势：
1）能类似流式细胞技术（flow cytometry）对DNA的含量进行柱状图表达（histogram representation）；
2）能用散点图（scatter plot representation）表达DNA含量vs.DNA合成的色块，以确认细胞周期的每个阶段；3）易于使用的界面能条理化从图像获取到生成多孔板水平数据的应用；
4）能灵活地命名通道，确定分割的特征，进行细胞的分类，从而定制研究者的应用。
三分类血液细胞分析仪与 五分类区别 This manuscript was revised by the office on December 22, 2012
三分类血液细胞分析仪与五分类区别 血液细胞分析仪又名血细胞分析仪，目前市场上的血细胞分析仪主要分为全自动的和半自动的仪器。随着该仪器成为医院临床检验的必备仪器以及近几年来计算机技术的不断发展，产品也从三分群转向五分群，从二维空间转向三维空间，对于三分类血液细胞分析仪与五分类仪器有何区别呢？ 1、仪器检测原理的区别 三分类的仪器大都采用电阻抗检测技术，由信号发生器、放大器、甄别器、阀值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成；五分类的产品大都采用光散射检测技术，主要由激光源（多采用氩离子激光器，以提供单色光）、检测区（主要由鞘流形式的装置构成，以保证细胞混悬液在检测液流中形成单个排列的细胞流）、检测器（散射光检测器系光电二极管，用以收集激光照射细胞后产生的散射光信号；荧光检测器系光电倍增管，用以接受激光照射荧光染色后细胞产生的荧光信号）。 2、白细胞分类方法的区别 三分类产品是将白细胞分为淋巴细胞，单核细胞，粒细胞；五分类的仪器则是将白细胞分为淋巴细胞、单核细胞、粒细胞（中性细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞）。 3、适用客户的区别 三分类血液细胞分析仪主要适用于三甲以下的医院、妇幼保健院、诊所以及社区服务中心等，价格相对要便宜很多；而五分类的产品主要用于三甲以上的医院，价格以及试剂方面要贵很多。 随着当前临床检测的需要，各种血液细胞分析仪不断涌现，小编个人认为产品没有好坏之分，主要是选择合适自己的，客户可根据临床检测样本量的多少以及检测标准来选择
深圳大学实验报告 课程名称：体外诊断仪器原理与实践 实验项目名称：血细胞分析仪 学院：医学院 专业：医疗器械工程 指导教师： 报告人：学号：班级： 实验时间： 2014-05-09 实验报告提交时间： 教务部制
方法、步骤： 实验仪器: 三分类血细胞分析仪: 一、简要操作指南及注意事项 1、开机前的准备 检查试剂是否足量，有无浑浊变质，试剂管道有无扭结，并倒空废液瓶2、开机
综上可知: 不同脉冲波的大小表示细胞体积的不同. 不同脉冲波的数量即为细胞的个数 库尔特原理主要由测量杯、小孔管、内外电极等组成。其中 , 小孔管（主要是红宝石孔）下图 是整个测量系统的主要部分 , 它决定了血球分析仪的测量准确度。小孔越小(大概100
μ米那样) , 测量准确度越高 , 但易造成堵孔 ; 小孔越大 ,测量准确度越低 , 但不易堵孔。目前市场上销售的利用电阻抗法设计的血球分析仪的竞争焦点就在于把小孔做得小而不易堵孔 ,为了实现细胞逐个通过可采用鞘流法,根据两侧鞘流的流速不同使细胞一个个的进入孔内从而不造成堵孔和细胞并排进入的误差的问题(如下图): 其排堵方法大致有反冲法和电灼烧法两种 , 或二者兼而有之。测量系统得到的电平信号经放大、阈值调节、甄别、整形后进行计数 , 得到 RBC、WBC、PLT 的数量。但三者的计数原理又略有不同。白细胞计数时 , 机内微型计算机按体积大小将白细胞从 30～45fl 分为 256 个通道 , 每个通道为1164fl。根据细胞大小被分别放在不同的通道中得到白细胞体积的直方图 , 根据体积大小可分为不同的细胞群 , 第一群主要是淋巴细胞 , 第二群主要是单核细胞 , 第三群为粒细胞 , 这就是“三分群法”也就是常说的三分类。 红细胞计数原理同白细胞计数原理大致相同。在红细胞计数的同时 , 把各脉冲幅度相加 , 得到红细胞的总体积 , 经计算得到红细胞的平均体积。血红蛋白的测量通常用比色法得到。红细胞的平均体积 (MCV) , 红细胞平均血红蛋白含量 (MCH) , 平均血红蛋白浓度 (MCHC) , 红细胞体积分布宽度(RDW) 都是通过计算得来的。血小板计数时 , 微型计算机按体积分成 64 个通道 , 范围为 2～28fl 之间 , 血小板的平均体积(MPV) 是计算得来的
?继续教育园地? 血细胞分析仪检测原理 乐家新 周建山 兰亚婷 传统的血细胞检查完全采用手工方法,不仅操作繁琐费时,而且由于多种原因,计数结果的准确性和精密度难以保证。1958年,库尔特采用电阻率变化与电子技术相结合的方法,发明了性能比较稳定的电阻抗法血细胞计数仪,开创了血细胞分析的新纪元。20世纪90年代以来,随着各种高新技术在血细胞分析仪中的应用,使其检测原理不断完善,检测水平不断提高,测量参数不断增加,各种类型的血细胞分析仪已在国内外各医院广泛使用。但从根本上讲,其检测原理大致分为两部分,即电阻抗法与光散射法。 图1 细胞计数电阻抗原理 作者单位:100853北京,解放军总医院临床检验科 一、电阻抗法血细胞分析技术 (一)电阻抗法白细胞计数和分类原理 电阻抗法白细胞计数原理是根据血细胞非传导性的性质,以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行白细胞计数和体积测定。在等渗电解质溶液(稀释液)中,有一个用于细胞计数的小孔管,其内侧充满了稀释液,并有一个内电极,其外侧细胞悬液(稀释液)中有一个外电极,小孔两侧的电极之间有稳定的电流。细胞为相对不良导体,其导电性质比稀释液低,当有一个细胞通过小孔时,于瞬间引起了电压变化而出现一个脉冲信号。脉冲的数量与细胞的数量成正比,脉冲的高度与细胞的体积成正比。脉冲信号经放大、阈值调节、甄别、整形后,送入计数系统进行处理,得出被测细胞的数量。图1显示出血细胞计数仪应用电阻抗原理进行细胞计数及体积分析的方 法及过程。 目前,许多仪器除给出细胞数外,还同时提供可以表示细胞群体分布情况的图形———直方图。可显示出某一特定细胞群的平均细胞体积、细胞分布情况和是否存在明显的异常细胞群,由脉冲累积得到。如图2所示,左图为示波器显示的所分析细胞的脉冲大小,右图为相应的体积分布直方图,横坐标为体积,纵坐标为相对数量。 在进行白细胞分析时,仪器将体积范围从35～450fl 分为256个通道,每个通道约为1164fl ,并将每个白细胞的脉冲根据其体积大小分类并储存在相应的体积通道中。再由计算机拟合成一条平滑曲线,从而得到白细胞体积分布直方图(见图3),其纵坐标表示白细胞的相对数量(REL No 1),横坐标表示白细胞体积(单位:fl )。 电阻抗法得到的白细胞分类值是根据各群细胞在白细胞直方图上所占面积的大小计算得来的(见图4)。白细胞计数池中除加入一定量的稀释液外还加入了溶血剂,此溶血剂一方面使红细胞溶解;另一方面使白细胞浆经胞膜渗出,胞膜紧裹在细胞核或存在的颗粒周围,使白细胞成为“膜包核”。仪器将体积在35～450fl 的这种颗粒认定为白细胞,并根据其体积大小在直方图上从左至右初步确认其相应的三个细胞群。在正常白细胞直方图上,小细胞群是位于左侧又高又陡的峰,分布在35～90fl 范围,以成熟淋巴细胞(L YM )为主要特征细胞;大细胞群是位于右侧较低且分布宽的峰,
XN-L系列血液分析仪招标参数 1、*检测速度：CBC+DIFF≥70/小时，：CBC+DIFF+RET≥30/小时 2、检测参数：血液报告参数≥35个，体液报告参数≥6个 3、*用血量：全血进样量≤25ul；预稀释模式用血量≤20ul，进样量≤70ul； 4、白细胞计数：应采用先进的激光流式原理及核酸荧光染色技术，使白细胞计数免受难溶红细胞、巨大血小板、血小板簇及细胞碎片等的干扰 5、低值白细胞检测：当遇到低值白细胞样本时，仪器可自动或人工选择转换到低值白细胞检测模式，使白细胞检测颗粒数比普通检测模式增加2倍，结果更准确、可靠。 6、*血小板计数：具有两种方法进行血小板的定量计数 7、网织红细胞检测功能：使用核酸荧光染色及流式细胞技术，具有全自动网织红细胞定量计数和对网织红细胞成熟度的分类。 8、网织红细胞血红蛋白功能：具有定量报告检测网织红细胞血红蛋白含量的功能，为报告参数。 9、体液检测速度：≥30样本/小时; 10、可以对脑脊液、胸水、腹水、关节腔积液等体液进行红细胞和白细胞计数,并对白细胞进行分类； 11、体液检测中具有通过高荧光体液细胞参数对肿瘤细胞进行提示功能； 12、线性范围：全血检测要满足WBC：0-440×10^9/L；RBC：0－8.6×10^12/L；PLT：0-5000×10^9/L 13、*血液质控品：定期提供原厂配套的高、中、低三个水平的质控品，并通过FDA及CFDA注册。质控项目覆盖所有报告参数； 14、*体液质控品：定期提供原厂配套的高、低两个水平的质控品，并通过FDA及CFDA注册。质控项目覆盖所有报告参数； 15、*校准品：定期提供原厂配套的、在中国CFDA注册的校准品。校准品可校准项目包含RBC、WBC、HGB、PLT、HCT、MCV、RET。 16、实时网络通讯系统：具有实时在线网络质控功能，通过室内质控实现实时的室间质评，确保用户的结果质量达到国际质量水准。 17、正确度（静脉血）：白细胞：≤3.0%；红细胞：≤2.0 %；血红蛋白：≤2.0%；血小板：≤5.0 %。 18、具有自动复检功能，并能自动追加自动检测项目；（限XN550） 19、流程控制：附带流程控制软件Labman，含三大功能：复检规则设定、数据统计功能（假阴性、假阳性，复检率等）、复检信息管理功能。
三分类血液细胞分析仪与五分类区别 血液细胞分析仪又名血细胞分析仪，目前市场上的血细胞分析仪主要分为全自动的和半自动的仪器。随着该仪器成为医院临床检验的必备仪器以及近几年来计算机技术的不断发展，产品也从三分群转向五分群，从二维空间转向三维空间，对于三分类血液细胞分析仪与五分类仪器有何区别呢？ 1、仪器检测原理的区别 三分类的仪器大都采用电阻抗检测技术，由信号发生器、放大器、甄别器、阀值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成；五分类的产品大都采用光散射检测技术，主要由激光源（多采用氩离子激光器，以提供单色光）、检测区（主要由鞘流形式的装置构成，以保证细胞混悬液在检测液流中形成单个排列的细胞流）、检测器（散射光检测器系光电二极管，用以收集激光照射细胞后产生的散射光信号；荧光检测器系光电倍增管，用以接受激光照射荧光染色后细胞产生的荧光信号）。 2、白细胞分类方法的区别 三分类产品是将白细胞分为淋巴细胞，单核细胞，粒细胞；五分类的仪器则是将白细胞分为淋巴细胞、单核细胞、粒细胞（中性细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞）。 3、适用客户的区别 三分类血液细胞分析仪主要适用于三甲以下的医院、妇幼保健院、诊所以及社区服务中心等，价格相对要便宜很多；而五分类的产品主要用于三甲以上的医院，价格以及试剂方面要贵很多。 随着当前临床检测的需要，各种血液细胞分析仪不断涌现，小编个人认为产品没有好坏之分，主要是选择合适自己的，客户可根据临床检测样本量的多少以及检测标准来选择购买三分类的还是五分类的产品。现在临床应用而言，三分类的仪器应用更为广泛，目前汉方的血液细胞分析仪均采用三分类的仪器，无论是在价格上、操作方法上，还是在检测结果上都不亚于五分类仪器。
血液细胞分析仪各项分析参数的临床意义 血液细胞分析仪各项分析参数的临床意义--血常规--血细胞分析 (一)红细胞分析参数的临床意义 1.定义及参考值范围 (1)红细胞数量(red blood cells，RBC) (2)血红蛋白浓度(hemoglobin，HGB，Hb) (3)红细胞比积(hematocrit，HCT) (4)平均红细胞体积(mean corpuscular volume，MCV) (5)平均红细胞血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin，MCH) (6)平均红细跑血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin concentration.MCHC) 以上各参数的定义参看红细胞一般检查。 (7)红细胞体积分布宽度(RBC volume distribution width，RDW)是定量反映红细胞体积异质性的参数，以所测红细跑体积大小的变异系数表示。 2.临床意义 (1)RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC各项的I陆床意义见红细胞一般检查。 (2)RDW ①用于缺铁性贫血的诊断和疗效观察，缺铁性贫血时RDW值增大，当给以铁剂治疗有效时RDW值一过性进一步增大，随后逐渐降到正常。 ②对小细胞低色索性贫血的鉴别诊断.缺铁性贫血时RDW值增大而轻型海洋性贫血时RDW值正常。 ③用于对贫血的分类(Bassman MCV/RDW分类法)，根据MCV、RDW值变化共分为六种类型贫血。 A.小细胞均一性贫血：WCV减小，RDW正常，如轻型海洋性贫血。 B.小细胞不均一性贫血：WCV减小，RDW增大，如缺铁性贫血。 C.正细胞均一性贫血：WCV、RDW均正常，如慢性病所致贫血。 D.正细胞不均一性贫血：WCV正常，RDW增大，如早期缺铁性、营养性贫血。 E.大细胞均一性贫血：MCV增大，RDW正常，如再生障碍性贫血。 F.大细胞不均一性贫血WCV、RDW均增大，如巨幼细胞性贫血。 (二)白细胞分析参数的临床意义 1.定义及参考值范围 (1)白细胞数量(white blood cells，WBC) (2)白细胞分类计数.根据溶血剂处理后皱缩白细胞体积的大小分为三类细胞，coulter JT3型血液细胞分析仪将35～90fl大小的定义为淋巴细胞(lymphocytes，Lym)，91～160fl大小的定义为中间细胞(middle cells，Mid.)，161～450fl大小的定义为粒细胞(granulocytes，Gran.)，不同仪器对细胞大小
全自动五分类血细胞分析仪技术参数及规格要求 1、测试参数：不少于31项，可提供23项基本参数WBC、LYMPH%、LYMPH#、NEUT%、NEUT#、 MONO%、MONO#、EO%、EO#、BASO%、BASO#、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV、RDW-SD、PLT、PDW、MPV、PCT及四项研究参数ALY%、ALY#、LIC%、LIC%(异淋和巨大未成熟细胞检测)和WBC/BASO散点图、4DIFF散点图、RBC直方图、PLT直方图。 △2、测量原理：WBC五分类双通道检测，采用半导体激光散射、细胞化学染色检测；无氰溶血剂测HGB。 △3、操作软件：全中文操作，无需外配电脑主机即可实现中文输入。 △4、样本模式：静脉全血、预稀释末梢血；样本量：静脉全血≤200ul，预稀释末梢血≤40ul 。△5、测试速度：不少于80样本/小时；配自动进样器，每次可装载40份标本以上。 △6、工作模式：全自动进样和手动进样兼备，并配有内置稀释器，末梢血预稀释模式无需手工加入稀释液，可用预稀释末梢血模式实现WBC五分类，并有急诊样本优先检测功能。 △7、分析模式：全血CBC模式，全血CBC+5DIFF模式；预稀释末梢血CBC，预稀释末梢血CBC+5DIFF模式。 △8、显示屏：彩色大屏幕TFT全中文触摸屏。 △9、资料储存：不外接电脑，主机可储存不少于40000份的样本完整结果，包括所有中文信息和全部散点图及直方图。 10、定量系统才有陶瓷分血阀装置，并且具备分血阀自动维护程序。 11、试剂：可提供原厂配套试剂，具备试剂预加温功能。 12、数据输出：具备USB接口和网络接口，可支持USB接口打印机、支持101标准键盘、 支持外接条码扫描仪，具备联网功能，可支持激光、喷墨、针式等多种打印机。 13、报告单格式：测量结果必须中文打印，多种报告格式可选。 △14、售后服务：本省有仪器厂家设立的售后服务中心和零配件中心，并有多名专业维修工程师提供服务，实现365天24小时全天候售后服务。 15、运行环境：电压：宽电源设计（100-240V），湿度：10%-90%，温度：10℃-40℃。 注：带“△”为重要技术参数。
血细胞分析仪50年的发展历史和展望 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科张时民 1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜（图1），1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大，后来被列文霍 克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最 原始的显微镜首先观察到了红细胞，他是第一个见到红细胞 的人，开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计 并生产出第一台血细胞计数仪则又过了近100 年。 自从发明了显微镜以后，人们从微观世界中了解和观察到 了血液的组成，并根据他们的特点分别将它们称为红细胞和 白细胞和血小板。在以后的研究中，人们发现许多疾病的发 生和发展与血液中的细胞数量之间存在一定的关系。依据对 疾病诊断的需求，人们开始寻求对血液中细胞的数量进行计数。1852 年就有人开始设计对红细胞的计数办法，1855 年发明了用于计数血细胞的计数板，目前仍然使用的改良Neubauer 计数板就是应用最为广泛和持续时间最为长久的 经典一种，虽然各种类型的血细胞计数仪已在广泛使用，但血细胞计数板法仍然是最为可靠和最为经典的计数技术，它不仅适用于血细胞计数，还可用于其他细胞、动物血细胞、微小粒子及需要在显微镜下计数的各种样品，因此计数板仍然是检验工作者应该掌握的基本技能，是不应该忘记和放弃的手段。 随着对血细胞计数和分析需求的不断增加，对血细胞计数的方法进行改进，实现自动化、高速度、准确性、标准化和智能化的要求也越来越高，现代的血液细胞分析技术与50 年前的发明虽然有着本质上的相同或相似，但已经有了显著的飞跃。作者力图通过有限的资料对细胞计数和分析技术的发展进程进行回顾，并对最新的进展进行介绍和展望，期望对关注这一领域和从事血细胞分析工作的同行有所帮助。 一、血细胞计数仪的发展历史 谈到血细胞计数仪的发展史，在这个领域首开先河的人是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter （图2a，b），他年青时对电子学
血细胞分析仪厂家国内外比较知名的有哪些？ 第一：血细胞分析仪著名厂家介绍 在中国，生产血细胞分析仪的著名厂家有美国贝克曼库尔特、日本希森美康、美国雅培、法国ABX、德国拜耳等，国内的血细胞分析仪产品不多，综合能力还算可以的就剩迈瑞及库贝尔了。前年德国拜耳把诊断业务卖给西门子了，这样做血细胞分析仪的就更少了。 1）美国贝克曼库尔特是由贝克曼仪器公司、库尔特公司于1997年合并成立的，说起库尔特公司，我们自然会想起经典库尔特原理，正是由公司创始人Coulter兄弟发明的。这也决定了贝克曼库尔特成为血细胞分析仪之父、行业鼻祖的地位。再到后来，coulter二弟，乔治库尔特在中国深圳创建了孪生品牌库贝尔icubio，所以，业内知情的人士往往买血球都会优先考虑库贝尔。库尔特能了解的就是这么多，再深入一些就不知情了。 2）日本SYSMEX（希森美康）株式会社是一家跨国企业，创建于1968年，原名为日本东亚医用电子株式会社。它做血细胞分析仪的年代也比较早，上个世纪末正式进入中国市场，2000年1、7月，希森美康医用电子（上海）有限公司和希森美康电脑技术（上海）有限公司的先后成立，以及2001年4月北京、上海、广州、成都、西安、沈阳六处办事处的成立，标志着SYSMEX在中国市场营销服务体系的建立和完善，以贴近市场、贴近用户，进一步拓展业务，更好地为中国用户服务。
3）美国雅培公司是一家全球性的多元化医疗保健公司，一直致力于新药与新技术的研发，如今已有120多年历史，68000名员工，于1995年进军中国市场，在中国的员工2000多名，总公司在上海。雅培公司涉及营养、西药、血糖、诊断等领域，其中诊断产品血细胞分析仪一直以研发技术而闻名于世。 4）国内厂家库尔特的孪生品牌库贝尔（乔治库尔特创始人，但现在库贝尔不太会承认），于2010年成立于深圳，是国家高新技术企业，市政府全力扶持的新兴生物企业，产品主要是生化、血球及试剂产品。有一款微型生化分析仪是诺贝尔医学组委会与库贝尔携手联合开发，用户体验度及性价比非常好，是诺贝尔医学实验室特别定制产品。血球的产品，尤其五分类血球甚至比迈瑞还要颇具优势。技术正宗，稳定性非常好。 5）国内著名厂商迈瑞在1991年成立，是中国领先的高科技医疗设备研发制造厂商，产品涵盖生命信息与支持、临床检验、数字超声、放射影像四大领域，血细胞分析仪产品也是国内血细胞分析仪品中的佼佼者，其生产的心电监护及彩超一直广受好评。 第二：著名厂家代表机型列举 自1953年Coulter兄弟俩设计的世界上第一台血细胞分析仪问世到如今，血细胞分析仪的发展日新月异，半个世纪的时间让血细胞分析仪从最简单的计数发展到如今的全自动五分类，检测速度的加快，
全自动五分类血液细胞分析仪技术参数要求： 1.检测原理：多角度激光散射结合细胞化学染色技术，独立嗜碱性粒细胞检测 通道； 2.*检测项目≥35项； 3.分析模式：CBC,CBC+DIFF； 4.测量模式：全血、预稀释全血、末梢全血； 5.*标本用量：全血模式：CBC≤12ul，CBC+DIFF≤15ul；预稀释全血≤20ul； 6.检测速度：≥60样本/小时； 7.*检测线性范围： WBC：0.00×109/L～400.00×109/L RBC：0.00×1012/L～8.00×1012/L HGB：0 g/L～250g/L PLT：0×109/L～5000×109/L 8.*重复性： WBC≤2.0％ RBC≤1.5% HGB≤1.5% MCV≤1.0% PLT≤4.0% 9.*质控品、校准品：有仪器厂家原厂生产并通过省级SFDA注册的校准品、质 控物，保证仪器检测结果准确性，并提供注册证复印件； 10.*溯源性：投标时需提供五分类血细胞原厂生产校准品的国际溯源性检测报告复印件； 11.*配套试剂：有仪器厂家原厂生产并通过SFDA注册/备案的配套试剂，并提供注册证或备案凭证复印件； 12.*试剂种类：仅需两种溶血剂和一种稀释液和一种清洗液，降低使用成本； 13.显示类型：10寸以上彩色液晶显示屏，同屏显示全部参数，便于基层操作人员使用； 14.数据管理：4个USB接口，支持连接U盘、打印机、鼠标、键盘等；
15.质控方式：L-J质控和X-B浮动均值法质控； 16.工作环境：温度：10-30℃，湿度：20%-85%，气压：70kPa-106kPa； 17.中文软件与细胞分析仪同一品牌（或同一厂家），并提供证明材料。 18.*生产厂家具有血液分析标准化实验室（非检测中心），并且获得CNAS（中国合格评定国家认可委员会）颁发的标准化实验室认可证书，确保血液分析系统的溯源有效性和检测质量； 19*质评报告：投标设备系列产品参加安徽省临床检验中心室间调查，PT评价合格，并提供医院安徽省临床检验中心室间调查报告复印件； 20.售后：生产厂家在安徽省境内设有常驻办事处和维修点，并提供证明材料； 21.*售后服务人员：提供5名以上厂家售后服务工程师的本地社保证明（包括：社保卡正反面复印件及在合肥社保局查询截图），真实有效； 22.投标系列产品通过FDA认证。 参数说明： *项为关键项参数，每一*项不符合将导致废标；非*号项参数每三项（含三项）以上将导致废标；
血细胞分析仪 血细胞分析仪 血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着近几年计算机技术的日新月异的发展，血细胞分析的技术也从三分群转向五分群，从二维空间进而转向三维空间，而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非常先进的流式细胞仪相同的技术，如散射光检测技术、鞘流技术、激光技术等等。本文重点就五分群血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以阐述。 检测方法 1．体积、电导、激光散射法（VCS） 这是Beckman－Coulter公司生产的血细胞分析仪所采用的经典分析方法，它集三种物理学检测技术于一体，在细胞处于自然原始的状态下对其进行多参数分析。该方法也称为体积、电导、激光散射血细胞分析法。此技术采用在
标本中首先加入红细胞溶血剂溶解掉红细胞，然后加入稳定剂来中和红细胞溶解剂的作用，使白细胞表面、胞浆和细胞体积保持稳定不变。然后应用鞘流技术将细胞推进到流动细胞计数池（Flowcell）中，接受仪器VCS三种技术的检测。 V代表体积（Volume）测量法，是采用经典的库尔特专利技术，用低频电流准确分析细胞体积。体积是区分白细胞亚群的一个重要的参数，它可有效区分体积大小差异显著的淋巴细胞和单核细胞。 C代表高频电导性（Conductivity），采用高频电磁探针原理测量细胞内部结构间的差异，也是该公司的专利技术。细胞膜对高频电流具有传导性，当电流通过细胞时，细胞核的化学组份可使电流的传导性产生变化，其变化量可以反映出细胞内含物的信息。该参数可用来区分体积相近而内部性质不同的细胞群体，如淋巴细胞和嗜碱性粒细胞，由于它们的细胞核特性不同而在传导性参数上有所区别。 S代表激光散射（Scatter）测量技术，采用氦氖激光源发出的单色激光扫描每个细胞，收集细胞在10°～70°角度内出现的散射光(MALS)信号。该激光束可穿透细胞，探测细胞内核分叶状况和胞浆中的颗粒情况，提供有关细胞颗粒性的信息，可以区分出颗粒特性不同的细胞群体。例如细胞内颗粒粗的要比颗粒细的散射光更强，因此可以用于区分粒细胞中的嗜中性、嗜酸性和嗜碱性三种细胞。
血细胞分析仪五分类检测技术与原理 血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着近几年计算机技术的日新月异的发展，血细胞分析的技术也从三分类转向五分类，从二维空间进而转 向三维空间，而且我们也注意到现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了和当今非 常先进的流式细胞仪相同的技术，如散射光检测技术、鞘流技术、激光技术等等。本 文重点就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以阐述 1、电阻抗、高频电导及激光散射联合检测法 这是Coutler公司1987年推出的新技术，血球悬浮在电解液中，用一定的电流通过传感器的内外两个电极，由于血细胞电阻抗很大，当血细胞通过两个 电极时，电极间阻抗瞬间增大，形成幅度与血细胞体积成正比的电脉冲，根据 脉冲的大小可测出细胞的体积。在测量红细胞时，利用一个脉冲甄别器，将幅 度较小的血小板脉冲去掉，保留红细胞和白细胞脉冲，因血液中白胞的数量不 及红细胞的1/500，故其总数据近似认为是对红细胞计数。在测量白细胞时， 利用溶血素，使红细胞溶解，再对剩下的白细胞计数。在对血小板计数时，调 低脉冲甄别器的阈值，计出总数，再减去红细胞的计数（其中已包括白细胞的 计数），即为血小板计数。由于不同类型但体积相同的细胞产生的脉冲幅度相 同，故仅靠体积是不能完全区分，利用高频电导法和激光散射分析白细胞内部 结构可以弥补这一缺陷。虽然细胞壁不能使低频电流通过，但能通过高频电流，细胞核的大小和密度不同，它们对高频电流的阻抗也不同，因此可以用来区分 白细胞。激光散射技术主要用来检查细胞膜表面特征和内部结构。激光散射对 细胞颗粒的结构和密度的区分能力强，粗颗粒产生的光散射比细颗粒强，借此 可将粒细胞区分开来，美国COULTER公司的STKS、MAXM系列血细胞分 析仪五分类就是利用电阻法、高频电导及激光散射联合检测法 2、光散射和细胞化学染色联合检测法 它利用激光散射和过氧化物酶染色技术进行细胞分类。嗜酸性粒细胞有很强的过氧化氢酶活性，中性粒细胞浆内含有较为丰富的过氧化氢酶，单核细胞 次之，原始细胞则极少，而淋巴细胞和嗜碱性细胞则缺管此酶。使用微量血液 经与含有清洗剂和甲醛的高渗液体进行适当稀释并孵育几十秒钟，此时细胞被 清洗剂所破坏，白细胞浆内酶固定，此后继续再进行第二次反应，加入过氧化 氢和四氢一萘酚加热，此时待测细胞中过氧化氢酶分解过氧化氢产生氧，后者 使四氯一萘酚显色并沉淀定位于含酶的颗粒中，此类细胞经激光束，由于光散 射及细胞大小不同而被分类。显然暑碱性细胞、淋巴细胞、原始细胞由于不含
五分类全自动血细胞分析仪 1、白细胞五分类全自动血细胞分析仪，检测速度CBC/Diff ≥59 标本/小时。 2、测定参数包括细胞计数，细胞分类，幼稚细胞，异型淋巴细胞等，不少于26项, 其中研究用参数不得少于6项。 ★3、血小板检测要求有脉冲编辑、重叠校正、两次计数等至少3项技术确保检测准确 4、要有嗜碱细胞的检测通道 ★5、能用末梢全血检测白细胞五项分类，所需试剂种类为5种 6、CBC+Diff分析全血进样量要求：≤53 L 7、有废液报警功能 ★8、要求有原厂生产的校准品和质控品，要求校准品有溯源性，并提供溯源性证明文件。★9、免费提供的实验室质量保证活动（IQAP），达到实验室与国际接轨。 ★10、CAP认可的免日常维护，操作简便。 ★11、精密度要求达到 WBC <2% (10X103细胞/μl) RBC <2% (5X106细胞μl) Hgb <1% (15g/dl) HCT <2% (45%) PLT <5% (300X103细胞/μl) ★12、厂家在河南省有独立注册的服务机构（提供营业执照） ★13、中标单位须在中标通知书下发三日内，携带中标通知书与厂家授权书（或代理商授权书）与用户签订合同。
肺功能检查仪检测(便携式） 一、检测项目： 用力肺活量(FVC)、肺年龄、静息肺活量(SVC)、最大通气量(MVV)、支气管扩张试验（BD）、支气管激发试验(PC20) 二、测量指标： 1、FVC(用力肺活量）：FVC、PEF、FEV0.75、FEV1、FEV3、FEV6、FEV0.75/FVC、FEV1/FVC、FEV3/FVC、FEV6/FVC、FEV0.75/FEV6、FEV1/FEV6、EVE、LUNG AGE 2、流速容积曲线：PIE、FIVC、FIV1、FIV1/FIVC 3、呼吸峰流速：PEFT、MEF75、MEF50、MEF25、FEF75、FEF50、FEF25、MMEF、FET25、FET50、MIF75（FIF75)、MIF50(FIF50)、MIF25(FIF25)、FEF50/FIF50（R50） 4、肺龄、肺器官年龄损害程度 5、VC/SVC(静息肺活量）：VC/SVC、ERV、IRV、TV、IC、IVC 6、MVV（最大肺通气量）：MVV、MVVF、MRF 7、支气管扩张试验（BD）：VC/SVC，FVC，MVV 8、支气管激发试验：PC20 三、技术性能/指标： ★1、全中文操作界面及可选不同格式的打印报告，方便各级医院，特别是基层医护人员操作使用 ★2、采用可调彩色6英寸触摸屏，薄膜按键方便选择、快捷操作 3、最新的LILLY型压差式双向流速传感器，测试精确度高重复性好 ★4、传感器采用航天纳米UM薄膜过滤技术，耐用且防止交叉感染，方便更换、清洗、消毒。★5、内置自动BTPS传感器，实时调整环境数据，实时校对传感器有效保障测试数据的精准度 ★6、专门设有特殊人群测试指导卡通动画，提高老龄及幼龄受测者的测试质量。 ★7、专门设有激发试验，扩张试验规程菜单，按不同测试要求自行编辑药物名称和剂量，检查结果自动计算，结果用不同颜色曲线标识，清晰明了，无需额外高额购买激发升级软件，检测质量稳定，性价比高，准确安全 ★8、全面的肺通气功能检查和一口气用力肺活量检查可供选择，医护人员可因临床检查或大规模体检的要求相互切换，提高工作效率。更适合体检中心与疾控中心
迈瑞血细胞分析仪 Document number：WTWYT-WYWY-BTGTT-YTTYU-2018GT
BC-3000PLUS血细胞分析仪工作原理及故障分析 摘要：本文主要介绍了BC-3000PLUS血细胞分析仪的工作原理和其常见的一些故障分析与处理方法。 前言 目前我国大型医院在血常规检查时多采用五分类血球仪，但其机器及试剂成本过高，在医院大型体检和乡镇医院，三分类的血细胞分析仪任占有不可取代的地位，迈瑞BC-3000PLUS血细胞分析仪以其价格合理，性能稳定，重复性好等优势，成为市场上占有率最高的三分类血球仪。现将其工作原理和使用过程中可能遇到的问题与分享，介绍如下。 工作原理：该仪器采用库尔特.贝克曼原理对血液中的WBC、RBC、PLT进行计数，并对WBC分类，利用朗伯.比尔定律对HGB进行测量。 常见故障：该血球仪常见的故障主要分为机械故障、液路故障、结果异常等 一机械故障 BC-3000PLUS机械运动部分主要有采样针组件，用其实现标本采集、稀释、混匀等功能；注射器及注射器电机组件，用其实现样本和试剂的定量及机器管路的清洗； 1升降/偏转电机故障 BC3000PLUS血细胞分析仪采用德国进口步进电机，（）上下各一个，上面的控制升降，下面的控制偏转，在工作时，功率驱动板接受CPU板的控制信号，给电机提供驱动电压，带动采样针的上下左右的动作。在特定的位置，装有光耦，用来确定采样针的位置，上面一个长线的为升降电机光耦，下面两个短线
的为偏转电机光耦。若在规定的时间，光耦没有被触发，或者光耦没在规定时间就被触发，则机器报相对应的电机故障。 故障处理方法：若出现这样的报警，先进入服务菜单进行自检，其步骤如下，“菜单——服务——系统检测——升降/偏转电机检测”，如果结果正常，则故障消除。若故障无法消除，检测1温度是否太低2丝杆脏，阻力大3运动过程中是否有东西阻挡运动部件4上下光耦故障5电机故障6驱动板坏。另外，由于升降电机的运动优先于偏转电机，当升降电机故障时可能会导致机器报“偏转电机故障”的警。 维修案例 现象采样针无法正确偏转到计数池上方机器，机器报“偏转电机故障” 处理过程及故障分析进入维修菜单，做偏转电机自检，正常，但是再做标本，故障依旧。因为可以完成自检过程，而且上下左右的运动都比较流畅，可以排除电机自身故障、阻力过大故障、阻挡、驱动板供电不足故障，而且光耦能传递位置信号。再仔细观察计数过程，发现给偏转定位并控制采样针搅拌的那个小孔（在偏转电机上方的一个两层塑料环上）通过右光耦时机器没能控制偏转电机停下，判定是该光耦的问题，拆下擦拭后机器正常。 2注射器电机故障 BC-3000PLUS一共有三个注射器、两个电机，其中10ml注射器由一个电机推动、另外50ul和的注射器由同一个电机推动。电机工作原理跟升降/偏转电机原理相同，每个电机对应一个光耦。当光耦没有按规定被触发时，机器报相应的电机故障。
北京协和医院检验科张时民 血细胞分析技术已经进入自动化时代，而具有白细胞五分类或更多分析参数的仪器也普遍的应用于国内各级医院实验室中，为临床诊断和治疗服务。而具有18项参数带有白细胞三分群功能的血细胞分析仪也已经普及进入到基层医院和社区医疗中心，在许多大型医院中已不占主流位置，因此可以说目前在较大医院的检验科，常规血细胞分析仪已经进入全自动化和白细胞五分类的时代。 本文主要介绍全自动血细胞分析仪在白细胞五分类上的原理和散点图分布特点。此类仪器在红细胞、血红蛋白、血小板和计算参数上一般会采用类似的测定原理和计算方法，此类仪器的进展和其功能特点可参考作者撰写的其它文章（见参考文献）。具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器是指通过各种物理和化学技术对白细胞进行分析，以获得外周血液中白细胞的五种常见类型，嗜中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞，淋巴细胞和单核细胞的百分率和绝对值的测定结果，此外还应该具有对出现异常白细胞的提示或初步分类功能。目前国内外具有开发研制白细胞五分类法仪器的主要为欧美和日本生产厂商，比较著名的欧美厂家有Beckman-Coulter；ABBOTT；Siemens（Bayer）；ABX；日本有Sysmex和Nihon Kohdon。在国内已经有迈瑞（MINDRAY）公司生产几个型号的五分类血细胞分析仪器投入医疗市场。 一简要发展史 1974年，一种名为HEMALOG D的具有初步白细胞分类功能的白细胞分析仪问世。 1982年，Technicon公司生产了H6000型血液细胞分析仪器，应该是首款具有白细胞五分类能力的仪器。同时代日本日立公司推出图像分析法的白细胞分析仪HITACHI 8200型，仅仅是用于完成白细胞血片分类的仪器，没有其他血细胞计数分析能力。 Technicon 公司1985 年开发了比较成熟的具有白细胞五分类功能的Technicon H1 型血液细胞分析仪，随后升级为H2型和H3型。 COULTER公司在1987 年开发研制其经典VCS技术，并推出持续具有多年影响力的、具有白细胞五分类功能的血液细胞分析仪MAXM 型。 1990年前后，欧洲和日本许多厂家都陆续推出了各种类型的具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器。各厂家设计生产的此类血细胞分析仪，其在白细胞分类技术上原理各不相同，分析测定项目略有不同，且形式多样，结构复杂，试剂种类和成分也趋于复杂。不断改进和升级的新产品使得仪器在白细胞分类技术上更加成熟和可靠。而技术的提高也带来了仪器和消耗品（试剂）价格的增加。 二仪器原理和散点图特点 1 体积、电导和激光散射原理 这是Beckman－Coulter公司生产的血细胞分析仪所采用的经典分析方法，他集三种物
电阻抗法血液分析仪检测原理 电阻抗 电阻抗法血液分析仪检测原理 2009-8-7 9:52 【大中小】电阻抗法血细胞计数原理又名库尔特原理。 1. 红细胞检测原理：将等渗电解质溶液稀释的细胞悬液置入不导电的容器红细胞检测原 理中，将小孔管（也称传感器）插进细胞悬液中。小孔管内充满电解质溶液，并有一个内电极，小孔管的外侧细胞悬液中有一个外电极。当接通电源后，位于小孔管两侧电极产生稳定电流，稀释细胞悬液从小孔管外侧通过小孔管壁上宝石小孔（直径 <100um，厚度约75um）向小孔管内部流动，使小孔感应区内电阻增高，引起瞬间电压变化形成脉冲信号，脉冲振幅越高，细胞体积越大，脉冲数量越多，细胞数量越多，由此得出血液中血细胞数量和体积值。 三分类血球分析仪工作原理示意图 2. 白细胞分类计数原理根据电阻抗法原理，经溶血剂处理的、脱水的、不同体积的白细胞通过小孔时，脉冲大小不同，将体积为35～450fl 白细胞，分为256 个通道，其中，淋巴细胞为单个核细胞、颗粒少、细胞小，位于35～90fl 的小细胞区，粒细胞（中性粒细胞）的核分多叶、颗粒多、胞体大，位于160fl 以上的大细胞区，单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、原始细胞、幼稚细胞等，位于90～160fl 的单个核细胞区，又称为中间型细胞。仪器根据各亚群占总体的比例，计算出各亚群细胞的百分率，医学教育网整理并同时计算各亚群细胞的绝对值，显示白细胞体积分布直方图。 3.血红蛋白测定原理当稀释血液中加入溶血剂后，红细胞溶解并释放出血红蛋白，血红蛋白与溶血剂中的某些成分结合形成一种血红蛋白衍生物，在特定波长（530～550nm）下比色，吸光度变化与稀释液中Hb 含量成正比，最终显示Hb 浓度。不同类型血液分析仪，溶血剂配方不同，所形成血红蛋白衍生物不同，吸收光谱不同，如含氰化钾的溶血剂，与血红蛋白医学教育网整理作用后形成氰化血红蛋白，其最大吸收峰接近540nm。
血细胞分析仪五分类检测技术及原理 血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着科学技术日新月异的发展，血细胞分析的技术也从几年前的三分类转向现在的五分类，从二维空间进而转向三维空间，同时现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了先进的技术，如鞘流技术、激光技术等。下面就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以说明。 1 采用阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法 直流电阻抗法（DC）用于测量细胞体积大小。激光散射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况（细胞核以及颗粒情况），侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的含量，特有的嗜酸性粒细胞检测溶血剂Str-matolyzer-EO可将除了嗜酸细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜酸细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。在嗜碱细胞通道中，使用特殊溶血剂Strmatolyzer-BA可将除了嗜碱细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜碱细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。幼稚细胞检查通道（IMI）可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有脂质较少的现象，在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多，对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解，而幼稚细胞不易被破坏，可通过电阻法检测出来。综合各个测量方法，得到白细胞五分类的图形和数据。这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析仪中。 2 电阻抗和射频电导联合检测法 这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类型的细胞:（1）淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解，而使白细胞保持完整，细胞浆及核形态近似于生理状态，当这些细胞通过检测系统时，对白细胞进行电阻抗法（测量细胞体积）和射频电导法（检测细胞核和颗粒密度）的联合检测，结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。（2）嗜酸性细胞和嗜碱性细胞两种检测系统:在细胞悬浮液中加入特殊的溶血剂，除嗜酸性细胞和嗜碱性细胞外，其他细胞均被溶解或萎缩，再对保持完整的嗜酸性细胞或嗜碱性细胞进行计数。（3）幼稚细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，结合在幼稚细胞的氨基酸比成熟细胞多，且对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂时，成熟细胞被溶解，只保留着可能存在的幼稚细胞用来计数。目前日本东亚公司的NE1500、SYSNEX公司的SE9000血细胞分析仪就是采用这种方法进行五分类的。 3 多角度激光偏振光散射检测法
全自动五分类血细胞分析仪参数 1.仪器类型：全自动五分类血细胞计数仪 2.检测原理：WBC五分类双通道检测，采用半导体激光散射，流式 细胞术，细胞化学染色，实现白细胞的准确五分类。 3.检测参数：测试参数不少于23项。 4.DIFF激光通道：对嗜酸性粒细胞进行特异性染色，使淋巴细胞， 单核细胞，嗜酸性粒细胞和中性粒细胞完全区分开来。 5.WBC/BASO通道:保存完整的嗜碱性粒细胞，实现嗜碱性粒细胞和 WBC总数的精确检测。 6.利用特异性的细胞差别溶解修饰技术，可有效排除难溶性红细胞， 巨大血小板，血小板聚集等因素对嗜碱细胞等计数结果的影响。 7.检测速度：≥40样本/小时。 8.激光装置：信号稳定，使用寿命长的半导体激光器。 9.检测模式：静脉全血模式，微量全血模式，预稀释模式 10.分析模式：大于等于四种，预稀释末梢血CBC, 预稀释末梢血 CBC+5DIFF，全血CBC，全血CBC+5DIFF。 11.报告图形显示：3个直方图，3个散点图（含研究界面2个散点 图） 12.异常信息报警功能：具备未成熟细胞和异常淋巴细胞等报警功能。 13.末梢血分析：静脉全血测定≤15μL，血液预稀释测定≤20μL。 15μL末梢血即可得到准确的白细胞五分类和全血细胞计数，满足门急诊病人、儿童患者、血液病人等特殊患者采血的需要。 14.预稀释重测功能：具备预稀释重测功能，避免二次采血。 15.试剂恒温系统：采用螺旋式恒温技术，完全避免环境温度变化对 检测结果的影响，提供照片或者验机。 16.RBC/PLT通道：采用双向立体后漩流液路结构，完全避免细胞残 留，重叠现象对细胞检测的影响。 17.抗干扰技术：采用独特的电气隔离技术。 18.HGB检测采用无氰试剂检测，避免环境污染。 19.排堵方式：高压灼烧、正反冲清洗。