食用菌常见消毒灭菌方法
食用菌的消毒灭菌
在物品及空气中分布着大量微生物。进行食用菌生产必须树立严格的无菌观念，掌握和运用消毒、灭菌技术，严防杂菌污染，保证菌种优良纯正,使食用菌顺利生长发育，以获得较好的经济效益。消毒灭菌是排除杂菌干扰，为食用菌创造洁净生长环境的重要保证。也是食用菌生产中的一项基本技术。
几个重要概念：
灭菌：是指在一定的范围内用物质物理或化学的方法，彻底杀灭物料、容器、用具和空气中的所有微生物。
消毒：是指用物理或化学的方法，杀灭物料中、物体表面及环境中的一部分微生物，即只能杀死微生物的营养体，不能杀死微生物的休眠体。
防腐：是指用物理学或化学的方法，暂时抑制微生物的生长。
除菌：是一种用机械的方法（如过滤、离心分离、静电吸附等）除去液体或气体中微生物的方法。
1.灭菌
杀死一定环境、物品中的一切微生物（包括芽孢），使一定范围内的微生物永远丧失生长繁殖能力，使之达到无菌程度，是灭菌的目的。经过灭菌的物品称“无菌物品”。灭菌可分为杀菌和溶菌。
杀菌是指菌体失活，但菌形尚存。溶菌是指菌体死亡后发生溶解、消失的现象。
2.消毒：杀死环境、物品中的病原菌（杀不死芽孢）,而对被消毒物品基本无害的方法为消毒。
3.防腐：暂时抑制其生长。使微生物暂时处于不生长、不繁殖、但又未死亡的状态，称为防腐。属于一种抑菌作用。
4.除菌用冲洗、过滤、离心、静电吸附等机械手段，除去微生物的方法为除菌。
消毒灭菌主要利用物理或化学因素。各种理化因子究竟能起到灭菌、消毒、防腐中的哪种效果，主要取决于本身的强度或浓度、作用时间、微生物对理化因子的敏感性及菌龄等综合因素的影响。任何消毒灭菌法的使用，必须达到既杀灭物品中的微生物，又不破坏其固有性质的目的。
物理消毒灭菌
食用菌生产中常用的物理消毒灭菌法是热力灭菌及紫外线灭菌,两者都属于强杀伤力因素。
一、热力灭菌
原理：
高温使菌体蛋白质、核酸、酶等重要细胞物质发生凝固或变性失活。日常生活中的炒、烧、烤、蒸、煮等对微生物都有一种短平快的效果。根据加热方式的不同，可分为干热灭菌和湿热灭菌两类。在实践中，可根据灭菌物品的性质和具体条件选用。
（一）干热灭菌利用火焰、热空气杀死微生物(适于耐烧、耐烤物品),干热灭菌以其快速在灭菌领域占有一席之地，干热灭菌器灭菌范围较窄。
(1)酒精灯烧接种工具、管口、瓶口→烧至红热(冷却用)简、快、彻底
(2)烘烤法(热空气) 适于体积较大的玻璃、金属器皿，试管、培养皿、三角瓶、烧杯、吸管等包装放入烘箱→160-170℃、2h断电→70℃以下取物。注意：升降温勿急；勿超180℃；用时随用随开包。干热灭菌简便易行，能保持物品干燥，但使用范围有限，只适用
于空玻璃、金属器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌。
二、蒸汽湿热灭菌法
湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是药物制剂生产过程中最常用的灭菌方法。湿热灭菌法可分为：煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法、和间歇蒸汽灭菌法。
影响湿热灭菌的主要因素有：微生物的种类与数量、蒸汽的性质、药品性质和灭菌时间等。
（1）煮沸灭菌法：将水煮沸至100摄氏度，保持5-10分钟可杀死细菌繁殖体，保持1-3小时可杀死芽胞。在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氢钠时沸点可达105摄氏度，能增强杀菌作用，还可去污防锈。此法适用于食具、刀箭、载玻片及注射器等。
（2）巴氏消毒法：一种低温消毒法，因巴斯德首创而得名。有两种具体方法，一是低温维持法：62摄氏度维持30分钟；二是高温瞬时法：75摄氏度作用15-30秒。该法适用于食品的消毒。
（3）流通蒸气灭菌法：利用常压下的流通蒸汽进行灭菌。
（4）间歇蒸汽灭菌法
（5）高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3摄氏度，维持15-20分钟。
湿热灭菌法湿热法可在较低的温度下达到与干热法相同的灭菌效果，因为：①湿热中蛋白吸收水份，更易凝固变性；②水分子的穿透力比空气大，更易均匀传递热能；③蒸汽有潜热存在，每1克水由气态变成液态可释放出529卡热能，可迅速提高物体的温度。
湿热灭菌法一般采用121摄氏度，灭菌20-30min，如果是产孢子的微生物则应采用灭菌后适宜温度下培养几小时，再灭菌一次，以用于杀死刚刚萌发的孢子。
三、红外线（infrared）：
是波长为770nm～1000μm的电磁波，以1μm～10μm波长的热效应最强。红外线的热效应只能在照射到的表面产生，不能使物体均匀加热，常用于碗、筷等食具的灭菌；
微波（microwave）：波长为1mm～1000mm的电磁波统称为微波，可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物质，但不能穿透金属表面。微波炉的热效应分布不均匀，灭菌效果不可靠，用于非金属器械及食具消毒。
四、紫外灯灭菌法
紫外线杀菌灯在紫外线UV-C波段内，其中250-270nm范围内杀菌力最强。由于汞的共振谱线为2537A，这种杀菌管能产生253.7nm的紫外线，使细菌和病毒DNA和RNAV发生变性，细胞不能繁殖。紫外线消毒灯对任何细菌或病毒都有效，集中高强度紫外线在短时间内即可杀菌.广泛应用于空气,各类材质表面,水或其它液体的消毒杀菌。
一,使用方法:
按国家卫生部颁布的《消毒技术规范》第3版第2分册（医院消毒规范）规定，室内悬吊式紫外线消毒灯安装数量为平均每立方米不少于1.5Ｗ，并且要求分布均匀、吊装高度距离地面1.8～2.2ｍ，使得人的呼吸带处于有效照射范围。连续照射不少于30min，紫外线的辐射强度与辐射距离呈反比，悬挂太高，影响灭菌效果。如果是物体表面消毒，灯管距照射表面应以1m为宜，杀菌才有效。用于饮水消毒水层厚度不超过2厘米，消毒时环境温度控制在20℃～40℃，湿度40%～60%，温度过高或过低均会影响消毒效果，可适当延长消毒时间，相对湿度大于80%时也适当延长照射时间。
二,注意事项:
1、紫外线对皮肤和眼睛会造成灼伤，请注意防护。避免较长时间对人体的直接照射。
2、紫外线对有机细胞有杀伤作用。请勿对宠物和植物长期照射。
3、注意对室内名贵书画进行遮挡，以防长时间紫外线照射氧化变色。
4、勿将杀菌灯作为照明灯使用。消毒以适度为宜，不提倡长时间开着紫外灯。
5、清洁紫外线灯时，请切断电源，使用干净的软布或酒精轻擦，忌用汽油等有机液擦拭。
6、防止儿童玩耍和接触。
7、对房间消毒完后，请即开窗通风。
五、臭氧
臭氧在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧气和单个氧原子；后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，将其杀死，多余的氧原子则会自行重新结合成为普通氧原子，不存在任何有毒残留物，故称无污染消毒剂，它不但对各种细菌（包括肝炎病毒，
大肠杆菌，绿浓杆菌及杂菌等）有极强的杀灭能力，而且对杀死霉素也很有效。
1、臭氧的灭菌机制及过程类属于生物化学过程，氧化分解了细菌内部氧化葡萄糖所必须的葡萄糖氧化酶。
2、直接与细菌、病毒发生作用，破坏其细胞器和核糖核酸，分解DNA、RNA，蛋白质、脂质类和多糖等大分子聚合物，使细菌的物质代谢生产和繁殖过程到破坏。
3、渗透胞膜组织，侵入细胞膜内作用于外膜脂蛋白和内部的脂多糖，使细胞发生通透畸变，导致细胞溶解死亡。并且将死亡菌体内遗传基因、寄生菌种、寄生病毒粒子、噬菌体、枝原体及热原（细菌病毒代谢产物、内毒素）等溶解变性灭亡。
综观无菌技术对微生物作用的原理可分为抑菌、杀菌和溶菌三种。应用臭氧作灭菌剂是属于溶菌。所谓溶菌，即可达到“彻底、永久地消灭物体表面所有微生物”的效果。臭氧（O3）是氧的同素异形体，它是一种具有特殊气味的淡蓝色气体。分子结构呈三角形，键角为116°，其密度是氧气的1.5倍，在水中的溶解度是氧气的10倍。臭氧是一种强氧化剂，它在水中的氧化还原电位为2.07V，仅次于氟（2.5V），其氧化能力高于氯（1.36V和二氧化氯（1.5V），能破坏分解细菌的细胞壁，很快地扩散透进细胞内，氧化分解细菌内部氧化葡萄糖所必须的葡萄糖氧化酶等，也可以直接与细菌、病毒发生作用，破坏细胞、核糖核酸（RNA），分解脱氧核糖核酸（DNA）、RNA、蛋白质、脂质类和多糖等大分子聚合物，使细菌的代谢和繁殖过程遭到破坏。细菌被臭氧杀死是由细胞膜的断裂所致，这一过程被称为细胞消散，是由于细胞质在水中被粉碎引起的，在消散的条件下细胞不可能再生。应当指出，与次氯酸类消毒剂不同，臭氧的杀菌能力不受PH值变化和氨的影响，其杀菌能力比氯大
600-3000倍，它的灭菌、消毒作用几乎是瞬时发生的，在水中臭氧浓度0.3-2mg/L时，0.5-1min
内就可以致死细菌。
①病毒
已经证明臭氧对病毒具有非常强的杀灭性，例如Poloi病毒在臭氧浓度为0.05-0.45mg/L 时，2min就会失去活性。
②孢囊在臭氧浓度为0.3mg/L下作用2.4min就被完全除掉。
③孢子由于孢衣的保护，它比生长态菌的抗臭氧能力高出10-15倍。
④真菌白色念珠菌（candida albicans）和青霉属菌（penicillium）能被杀灭。
⑤寄生生物曼森氏血吸虫（schistosoma mansoni）在3min后被杀灭。紫外线是一种低能量的电磁幅射，照射能量能产生激发作用。紫外线照射杀菌是使微生物细胞内核酸、原浆蛋白和酶发生化学变化而死亡。紫外线有广谱杀菌作用，可杀死包括细菌、结核杆菌、芽胞和真菌在内的多种微生物。
从化学角度讲因为乙醇能使蛋白质变性，从而杀死细菌。从生物学角度讲呢是因为高浓度乙
醇可以使细菌质壁分离，严重的质壁分离可以杀死细菌酒精之所以能消毒是因为酒精能够吸收细菌蛋白的水分，使其脱水变性凝固，从而达到杀灭细菌的目的。如果使用高浓度酒精，对细菌蛋白脱水过于迅速，使细菌表面蛋白质首先变性凝固，形成了一层坚固的包膜，酒精反而不能很好地渗入细菌内部，以致影响其杀菌能力。75%的酒精与细菌的渗透压相近，可以在细菌表面蛋白未变性前逐渐不断地向菌体内部渗入，使细菌所有蛋白脱水、变性凝固，最终杀死细菌，酒精浓度低于75%时，由于渗透性降低，也会影响杀菌能力。
由此可见，酒精杀菌消毒能力的强弱与其浓度大小有直接的关系，过高或过低都不行，效果最好的是75%。酒精极易挥发，因此，消毒酒精配好后，应立即置于密封性能良好的瓶中密封保存、备用，以免因挥发而降低浓度，影响杀菌效果。另外，酒精的刺激性较大，粘膜消毒应忌用。
1. 目的：规范消毒灭菌与隔离原则，强调双向防护，减少外源性医院感染，降低医院感染发病率，提升医 院的医疗服务品质。 2. 范围：全院各科室工作人员。 3. 权责： 医院感染管理科负责制度的修订、完善及督查，医务部、护理部、后勤中心等部门参与协作管理。 各部门负责人负责监督制度落实。 工作人员必须认真阅读，全面掌握相关文件及规程。 4. 定义：无。 5. 作业内容： 消毒与灭菌方法 医务人员必须遵守消毒灭菌原则，进入人体无菌组织、器官、腔隙，或接触人体破损皮肤、破损黏膜、组织的诊疗器械、器具和物品应进行灭菌；接触完整皮肤、完整黏膜的诊疗器械、器具和 物品应进行消毒。重复使用的诊疗器械、器具和物品，使用后应行清洁，再消毒或灭菌，所有 医疗器械在检修前应先消毒或灭菌处理。 根据物品性能选用物理或化学方法消毒灭菌。耐热或耐湿物品灭菌首选物理灭菌法：手术器具及物品，各种穿刺针、注射器等首选压力蒸汽灭菌；油、粉、膏等首选干热灭菌。不耐热、不耐湿 的物品如各种导管、精密仪器、人工植入物宜采用低温灭菌方法如环氧乙烷灭菌、过氧化氢低 温等离子体灭菌或低温甲醛蒸汽灭菌等。消毒首选物理方法，不能用物理方法消毒的方选化学 方法。 化学灭菌或消毒可根据不同情况分别选择灭菌、高效、中效、低效消毒剂。使用化学消毒剂必须了解消毒剂的性能、作用、使用方法、影响灭菌或消毒效果的因素等，配制时应注意有效浓度， 并定期监测，记录。更换灭菌剂时，必须对用于浸泡灭菌物品的容器进行灭菌处理。 消毒隔离管理细则 医务人员上班时应着装整洁，一律穿工作服，工作场所不得进食和堆放食物。 手卫生执行卫生部2009年下发的《医务人员手卫生规范》(WS/T 313-2009)。 在实施标准预防的基础上，根据不同情况对感染患者采取相应隔离措施。接触特殊感染和隔离患者前必须戴手套、穿隔离衣并及时更换，严禁将污染手套、隔离衣接触其他物品；离开隔离区 域应使用手消毒剂。 无菌操作前注意周围环境应清洁无尘，洗手、戴口罩帽子、严格遵守无菌操作规程。
1、菌种：是指能够进一步繁殖的纯的菌丝体。 2、初生菌丝：是由孢子萌发形成的单核菌丝，又称一级菌丝。 3、代料栽培：在食用菌生产中，用农作物秸杆、废料等代替段木进行栽培的一种食用菌栽培形式，如袋 料、畦床栽培。 4、无菌操作：采用物理、化学的方法，将环境、用具中的杂菌彻底杀灭，使之形成无菌的状态，在这种 无菌的条件下进行食用菌生产操作称无菌操作。 5、灭菌：采用物理或化学的方法杀灭所有微生物（杂菌）的操作。 6、大型真菌：真核细胞型微生物，有典型的细胞核和完善的细胞器，不含叶绿素，无根、茎、叶的分化 的菌类。 7、杂菌：指含有对真菌生长有害的其他微生物，如（放线菌、细菌等）。 8、发菌期：从接种到菌丝长满瓶或袋的时间。 3、发菌期：从接种到菌丝长满菌袋或菌瓶的时间。 9、排冷气：在利用高压锅灭菌前更将锅内的冷气排出，可以一次性排气，当气压上升至0.5时当排气阀 打开；也可在先打开排气阀，当温度上升至一定时，再关闭排气阀。 10、常压灭菌：即在常压下，利用常压灭菌锅将培养基内部及表面微生物杀死的一种灭菌方法，一般是 100℃蒸汽蒸制8-12小时。 1、锁状联合:在双核菌丝上的横隔膜处产生的一个具有特征性的侧生突起，它往往发生在菌丝顶部双核细 胞的两核之间。 2、担子果:高等担子菌承载担子及担孢子的一种高度组织化的结构。 3、菌环:内菌幕遗留在菌柄上的环状物，常在菌柄的上部。 4、初生菌丝:担孢子萌发后先形成芽管，继而伸长，生长成为管状的菌丝，并形成隔膜，对于多数食用菌 来说，隔膜使其成为单核的多细胞菌丝，这种单核菌丝就称为初生菌丝。 5、食用菌菌种:在适宜基质上生长良好并已充分蔓延，可用作食用菌生产的种源菌丝体。 6、栽培种:由原种移植到固体或液体培养基上扩大繁殖的菌丝体。 7、代料栽培:利用木屑以及棉籽壳、甘蔗渣、玉米芯、麦麸等农副产品代替段木，以塑料袋、菌种瓶等为 容器栽培食用菌的技术。 8、灭菌:用物理或化学方法杀死物体表面和内部的所有微生物（包括细菌的芽孢），使之达到无菌状态。 9、食用菌的驯化:野生大型可食用真菌经人类引种栽培并不断选择，逐渐成为人类所需的栽培品种的过程。 10、非病原病害:食用菌生长过程中由于受到不适宜的环境条件的刺激而引起的病害。 4.堆料发酵——把料拌好键堆，依靠微生物似的活动发酵，使料堆温度升至60~ 65℃达到杀菌灭虫的目的 5.次生菌丝——由单核菌丝培养转化而成又称双核菌丝 2、母种：用组织分离法得到的第一代菌丝体，又称一级种或试管斜面母种。 4、代料栽培：用锯末、棉子壳、秸杆等代替段木栽培的方法。 5、反季节栽培：不按正常季节进行的栽培。 1、按食用菌的生活方式不同，可将其分为寄生型、腐生型、共生型，三种类型，大部分食用菌属于腐生型。 2、菌种保藏在生产中应用最多的是低温保藏法，保藏温度为0～ 4 ℃度。 3、食用菌的营养物质种类繁多，根据其作用和性质可能分为碳源，氮源，无机盐，生长因子。 4、食用菌菌丝体，生长阶段和子实体生长阶段对环境条件要求呈现出一定规律性，对温度要求一般是前__高__后__低_，对湿度、光线、氧气要求一般是前__少___后__多___。 5、在菌种分离过程中多采用__组织分离法___法，对菌肉肥厚的子实体多采用___子实体（菌内）__组织进行分离进行接种； 1、食用菌菌种的生产，一般需要经过母种、原种和栽培种三级培养过程。 2、在无菌条件下____，进行的菌种移植操作称为无菌操作。 3、食用菌都是__异养型的生物，绝大数为___腐_生，少数为___寄_生或共_生。 4、平菇栽培不需灭菌，这种栽培方式称生料栽培_ 5、菌盖下面片层状的结构称___菌褶 6、营养液中加入1.5%~2%琼脂制成的培养基称____固体培养基_。 7、能够满足食用菌生长、繁殖和完成各种生理活动所需的物质称_营养物质。
消毒管理制度 根据《消毒管理办法》规定，制订本制度： 一、成立消毒管理组织，严格执行国家有关规范、标准和规定，定期开展消毒与灭菌效果检测工作。 二、按照批准的诊疗范围购置必须的消毒、灭菌设施，并保证正常使用。 三、加强对工作人员的消毒技术培训，掌握消毒知识，并按规定严格执行消毒隔离制度。 四、各种注射、穿刺、采血器具应一人一用一灭菌。凡接触皮肤、粘膜的器械和用品必须达到消毒要求。 五、建立并执行进货检查验收制度，采购消毒产品时，应当索取加盖鲜章的《生产企业卫生许可证》、《产品备案表》或者《卫生许可证》复印件。一次性使用的医疗用品用后应当及时进行无害化处理。 六、治疗换药处置工作前后均应洗手，各种治疗护理及换药操作应按清洁伤口、感染伤口、隔离伤口依次进行，感染性敷料应放在黄色防渗漏的污物袋内及时焚烧处理。 七、发现感染性疾病暴发、流行时，及时报告当地卫生局，并采取有效消毒措施。
应急物品保管和请领制度 一、各种物品必须有专人负责保管。 二、各种物品要摆放整齐、醒目。 三、要每日清扫、擦拭各项物品，保证物品清洁。 四、各项物品清洗、消毒后方可入库保管。 五、保管员要认真做好各项物品的请领和发放登记。 六、物品要保证充足，以备所需之用。 七、当物品回收时，一定要清点好数目再放回原处。 八、保管员要掌握每项物品所存放的方位和数量。 九、对损坏的应急物品要及时上报领导，并保存好做好记录，以备替换新的应急物品，保证应急物品的数量充足。
疫苗使用管理制度 一、第一类疫苗、第二类疫苗应到市疾控中心领取。 二、第一类疫苗每月必须下发到各接种单位，以保证应种儿童的正常免疫接种。 三、各种疫苗必须设专人管理、登记、储存、分发。 四、登记包括领取日期、批号、生产厂家、失效日期、领取数量、规格等等。 五、领取或接收第一类疫苗或第二类其它疫苗时，必须尽快装入冰箱内。必须按疫苗规定的温度装入冷冻室、冷藏室或低温冰箱内。 六、装入冰箱的疫苗必须距冰箱内壁5—10cm，不得紧贴冰箱内壁。 七、各种疫苗下发时，必须先下发短效期的，后下发长效期的。 八、下发一类或二类疫苗时，必须有登记，有下发日期、数量、批号、生产厂家、失效日期、经手人签字等。 九、每年的第四季度上报所需第一类疫苗计划。 十、指导与培训全县各级接种单位或接种医生对一类或二类疫苗的使用方法、注意事项、接种部位、剂量、异常反应等相关知识。 十一、冷链设备的管理人员每天应2次（上午和下午各1次）查看并填写温度记录表（双休日除外），随时查看冰箱是否正常运转。
常用的消毒灭菌操作方法附录 4 一、干热灭菌的操作方法 1.装入待灭菌的物品 将待灭菌的物品，如塞上棉塞的试管、锥形瓶、培养皿、吸管等玻璃仪器，用牛皮纸或干净的报纸 包裹严密后，放人干热灭菌箱。注意，物品不要摆得太挤，以免妨碍热空气流通。同时，灭菌物品也不 要与干热灭菌箱内壁的铁板接触，以防包装纸烤焦起火。 2.灭菌 关好干热灭菌箱的箱门，旋动恒温调节器，设定温度为160~170℃。当温度升到150℃左右时，保持 此温度3~4h。由于干热灭菌温度较高，操作时要注意防止烫伤。 3.降温 关掉电源，自然降温。 4.开箱取物 等温度降到70℃以下后，打开箱门，取出灭菌物品。注意温度未降到70℃以前，切勿打开箱门，以 免玻璃器皿炸裂。 二、高压灭菌的操作方法 1.首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架平齐。 2.放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。锥形瓶 与试管口不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而透入棉塞。 3.加盖，并将盖上的排气软管插人内层灭菌桶的排气槽内。拧紧固定盖子的螺栓，注意要同时旋紧相 对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，不漏气。 4.加热灭菌锅，打开排气阀，使水沸腾，排除锅内的冷空气。等冷空气完全排尽后，关上排气阀，让 锅内的温度随蒸汽压力增加而逐步上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，按照灭菌所要求的时 间，维持压力。 5.到灭菌时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋 松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。如果提前打开排气阀，锅内压力突然下降，灭菌容器内的液体会冲 出容器，造成污染。 三、紫外线灭菌的操作方法 紫外线只适用于表面灭菌和空气灭菌。以面积为10 m2的普通小型接种室为例，在工作台上方距地面 2m 处悬挂1~2 只30 W 紫外灯，每次开灯照射30 min ，就能达到室内空气灭菌的目的。照射前，适量喷 洒石炭酸等化学抑菌剂，可以加强灭菌效果。
一、检验科消毒隔离制度 一、人员： 1、医务人员衣帽整洁，不戴首饰，不留长指甲。 2、在各种操作前，应用流动水冲洗双手，操作后进行手消毒，可用洁肤柔或75％酒精棉球。 二、环境： 1、保持室内空气新鲜，环境清洁，每天开窗通风并用紫外线照射消毒，同时做好相关监测及登记工作。 2、室内空调定期清洗、消毒、并做好记录。 3、候诊椅、办公桌台面，地面等每日用500mg/L有效氯消毒液擦拭两次。但遇可疑的传染性疾病的病人或其分泌物时，应立即进行消毒。 三、物品： 1、医务人员必须遵守消毒灭菌原则：进入人体组织或无菌器官的医疗用品必须灭菌，各种注射、穿刺、采血器具必须贯彻一人、一用、一灭菌的方针，接触病人皮肤、黏膜的器械和用品必须消毒或灭菌。 2、无菌物品应存放于专柜或专格（抽屉），并保持清洁、干燥、整齐，在有效期范围内；无菌包有效期为半年；消毒包体积应<30×30×25㎝。 3、器材消毒： ⑴玻璃器材：采集标本的器材如玻片、试管要做到一人一用一消毒，污染的试管、滴管、离心管、玻片、玻棒、平皿等，应立即浸入含2000mg/L有效氯消毒液中浸泡1小时，再清洗干净、烘干。 ⑵止血带应一人一用，使用后浸入1000mg/l有效氯消毒液中浸泡1小时，冲净晾干。 ⑶贵重仪器：显微镜、离心机、天秤、细胞计数器械、冰箱等局部轻度污染，可用酒精棉球进行擦拭；若离心时离心管未密闭，试管破裂，液体外溢，应清洗离心机内部，特别是有可能受肝炎病毒等污染时，宜戴上手套用有效氯消毒液进行擦拭消毒，作用30min—60min。 4、医疗废弃物的处置： ⑴分类收集：按感染性、病理性、损伤性、药物性、化学性废物分类收集。 ⑵妥善处置：感染性废弃物置于专用黄色医疗废物包装袋内；安瓿、针尖等置于锐器盒内。 ⑶统一运送：处置好的包装合格的医疗废物由专人运送至中心医疗废物暂贮处，由专门处置公司前来收取。 ⑷遇特殊情况：如处置铜绿假单胞菌、厌氧菌、结核菌等感染伤口，按特殊菌种处理，更换敷料后分类置于双层专用黄色医疗废物包装袋内，按要求标示明显，统一处理。 二、预检、分诊消毒隔离制度 1、医务人员在上岗前必须衣帽整洁，操作前洗手、戴口罩。 2、办公桌面，治疗盘等每日用500mg/L的有效氯消毒液擦拭两次，但遇接诊可疑传染性疾病时，应立即进行消毒。 3、体温表使用后应先用棉球擦拭再浸泡。 4、体温表按要求进行消毒：第一道：2000mg/L有效氯消毒液浸泡5分钟，清水冲洗、擦干、甩表；第二道：2000mg/L有效氯消毒液浸泡30分钟；第三道：用冷开水冲洗后擦干后备用。消毒液每天更换一至二次。盛器加盖，每周总消。 5、按各传染病规定做好个人防护及自身准备工作。 6、按照病人主诉及症状，正确做好分诊工作。对于体温≥38的患者，应详细询问其它症状，发口罩、进行流行病学的相关调查，并做好专册登记。同时引导至发热门诊。对于肠道及肝
工厂化食用菌生产中杂菌污染的危害及消毒灭菌的防控措施 简介 食用菌作为21世纪朝阳产业，具有高蛋白，低脂肪，无污染，无公害。而且食药兼用的优势，被联合国粮农组织推荐为健康食品。已受到世界各国的广大消费者普遍青睐。然而食用菌生产中所涉及到的原料、用水、设备、空气等都有着大量的真菌、细菌、病毒等微生物和虫害，他们无时无刻不在于食用菌争夺养料和侵害食用菌。这些杂菌和病虫害给食用菌生产造成很大危害和损失，所以在食用菌育种和栽培中抑制和消灭有害微生物的活动，对食用菌进行纯培养是很有必要的，因此灭菌、消毒、防腐和除菌在食用菌生产中是非常重要的一环。 食用菌消毒灭菌几个重要概念 灭菌：是指在一定的范围内用物质物理或化学的方法，彻底杀灭物料，容器，用具和空气中的所有微生物。 消毒：是指用物理或化学的方法，杀灭物料中，物体表面及环境中的一部分微生物。即只能杀灭微生物的营养体，不能杀灭微生物的休眠体。 防腐：是指用物理或化学的方法，暂时抑制微生物的生长。 除菌：是一种用机械方法（如奥克泰士冷雾机、奥克泰士气溶胶喷雾器等）除去液体或气体中微生物的方法。 消毒灭菌防腐除菌做为食用菌最重要的环节，它可以： 触及消毒办法及其消毒产品的选用； 触及各种类型消毒产品的功能及其好坏； 触及各种消毒产品的毒性及适用性、可逆性； 触及消毒产品对运用环境的温度、湿度要求，即消毒产品对环境的适应性； 触及消毒的机理与运用注意事项等等一系列问题。 食用菌消毒灭菌的重大意义 笔者经过调查发现有许多直接出产者到安排者直至媒体，从本质上讲对消毒能够说极不注重，许多人只把消毒视为食用菌出产中一种隶属的、非必须的东西来对待。他们在策划、安排食用菌出产时，脑筋里想的是菌种的优选与引入、出产设备的先进性、可靠性这些硬件，而对消毒这一重要问题住往不宵一顾，事到最终才草率的想到消毒的处理。 其实消毒是食用菌出产链中（培养料配比→拌料→装袋（瓶）→灭菌→预冷→冷却→接种（结菌）→排场→出菇→采收）从头到尾极具关鍵含义的环节，在这些环节中，前期比较重要的环节为“接种”。然而自然界里到处有微生物的存在，如空气、所有原料、水以及一切用具和器具的表面，这些微生物对食用菌菌种而言，都属于有害菌，即通常所说的杂菌。而这些“杂菌”在接种环节会大大影响接种成功率及日后食用菌外形长相的美观度，所以必须进行严格消毒灭菌。 消毒剂的选择 目前国内食用菌行业的消毒主要是采用以臭氧、紫外线、甲醛为代表的静态消毒方法，但上述消毒方法的最大缺点是对人体的损害大。如今，食用菌趋向于绿色发展趋势，急需消毒效果好，操作方便的绿色方法。本文笔者通过多年总结及结合食用菌行业特点，总结出消毒剂应具备的特性： 需要具有广谱高效的杀菌效果，一种消毒产品就能杀灭细菌、真菌、霉菌等病原
消毒灭菌标准操作程序[1].1 消毒灭菌标准操作程序 一、消毒、灭菌基本原则 1、基本要求 (1重复使用的诊疗器械、器具和物品,使用后应先清洁,再进行消毒或灭菌。 (2被朊病毒、气性坏疽及突发不明原因的传染病病原体污染的诊疗器械、器具和物品,应执行本规范第11章的规定。 (3耐热、耐湿的手术器械,应首选压力蒸汽灭菌, 不应采用化学消毒剂浸泡灭菌。 (4环境与物体表面,一般情况下先清洁,再消毒; 当受到患者的血液、体液等污染时,先去除污染物,再清洁与消毒。 (5医疗机构消毒工作中使用的消毒产品应经卫生行政部门批准或符合相应标准技术规范,并应遵循批准使用的范围、方法和注意事项。 二、消毒、灭菌方法的选择原则 1、根据物品污染后导致感染风险高低选择相应的消毒或灭菌方法: (1高度危险性物品,应采用灭菌方法处理;
(2中度危险性物品,应采用达到中水平消毒以上效 果的消毒方法; (3低度危险性物品,宜采用低水平消毒方法,或做清洁处理;遇有病原微生物污染时,针对所污染病原微生物的种类选择有效的消毒方法。 2、根据物品上污染微生物的种类、数量选择消毒或灭菌方法: (1对受到致病菌芽孢、真菌孢子、分枝杆菌和经血传播病原体(乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病病毒等污染的物品,应采用高水平消毒或灭菌; (2对受到真菌、亲水病毒、螺旋体、支原体、衣原体等病原微生物污染的物品,应采用中水平以上的消毒方法; (3对受到一般细菌和亲脂病毒等污染的物品,应采用达到中水平或低水平的消毒方法; (4杀灭被有机物保护的微生物时,应加大消毒剂的使用剂量和(或延长消毒时间。 3、根据消毒物品的性质选择消毒或灭菌方法: (1耐热、耐湿的诊疗器械、器具和物品,应道选压力蒸汽灭菌;耐热的油剂类和干粉类等应采用干热灭菌; (2不耐热、不耐湿的物品,宜采用低温灭菌方法如环氧乙烷灭菌、过氧化氢低温等离子体灭菌或低温甲醛蒸汽灭菌等;
消毒灭菌管理制度 1.医务人员必须树立无菌观念，规范着装，工作时间必须按照标准预防要求，采取必要的防护措施。 2.医务人员必须严格遵守消毒灭菌原则，进入人体无菌组织、器官、腔隙或接触人体破损皮肤、粘膜、组织的诊疗器械、器具和物品必须灭菌：接触完整皮肤、粘膜的诊疗器械、器具和物品必须消毒。 3.重复使用的医疗器械、器具和物品，使用后彻底清洗干净，再消毒或灭菌，其中特殊感染性疾病(病毒、气性坏殖、突发不明原因传染病)病人用过的医疗器械、器具和物品使用后先消毒、彻底清洗干净，再消毒或灭菌； 4.所有医疗器械、器具、仪器设备在检修前必须先清洁，消毒或灭菌处理后再进行检修。 5.医院所有房屋改造、扩建等施工时，施工区域周围搭建适当的屏障物以防止粉尘的扩散。对于可能会产生少量粉尘的短期建设项目可以使用预制的塑料幕布或塑料薄膜；而对于正在进行的、长期的建设项目使用其他耐久、结实的屏障物。 6.根据物品的性能选用物理或化学方法进行消毒灭菌。耐热、耐湿物品灭菌采用压力蒸汽灭菌：不耐热、不耐湿物品采用低温灭菌：不耐热、耐湿物品采用低温灭菌：耐热不耐湿物品采用干熱灭菌。 7.化学灭菌或消毒，可根据不同情况分别选择灭菌、高效、中效、低效消毒剂。使用化学消毒剂必须了解消毒剂的性能、作用、使用方法、影响灭菌或消毒效果的因素等，配制时注意有效浓度，并定期监
测。更换消毒剂时，必须对用于浸泡消毒物品的容器进行灭菌处理， 8.空气消毒采用空气消毒机每日消毒1-2次：床单元采用床单元消毒机进行终末消毒处理。 9.一般诊疗用品的消毒 (1)按触完整皮肤的器具清洁与消毒方法：接触皮肤的一般诊疗用品如血压计袖带、听诊器，保持清洁，若有污染应随时以清洁剂与水清洁。血压计袖带若被血液、体液污染应在清洁的基础上采用含氯消毒剂(500mg/L)浸泡30min后再清洗干净，晾干备用。听诊器可在清洁的基础上选用75% 乙醇擦拭消毒。 (2)接触完整粘膜的器具清洁与消毒方法：接触未破损粘膜的器具如扩阴器、开口器、舌钳、压舌板、口表、肛表等器具，用后应先清洗去污，再消毒：耐高温的器具如扩阴器、开口器、舌钳、压舌板可选用压力蒸气灭菌后于燥保存备用，不耐高温的器具如口表、肛表等可在清洁的基础上采用75%乙醇或采用含氯毒剂(1000mg/L)浸泡30min后，清水冲洗净，擦干，清洁干燥保存备用。 (3)连续使用的氧气湿化瓶、氧气面罩、麻醉面罩及雾化器、早产儿暖箱的湿化器、胃肠减压器、吸引器、引流瓶等器材，必须每日在清洁的基础上，采用含氯消毒剂(500mg/L)浸泡消毒，上述器具的终末消毒耐高温的管道与引流瓶可采用压力蒸气灭菌，不耐高温的部分可清洁后用含氯消毒剂(500mg/L)浸泡30mim后(如遇肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒等感染的病人污染的器具应采用1000mg/L含氯消毒剂浸泡30min-45min)清水冲净,晾干，清洁干燥封闭保存备用。湿
食用菌实习总结 Document number：PBGCG-0857-BTDO-0089-PTT1998
实习总结 实习是事业，其意义在于奉献；实习是科学，其价值在于求真；实习是艺术，其生命在于创新。 实习周里，在唐老师和徐老师的指导下，我与同学们一起参与并顺利完成学院为我们准备的实习计划。在实习过程中两位老师奉行甘为人梯、传承文明、引导未来、为人师表的观念，为我们解答困惑，亲手指导实验操作不辞辛劳，体现他们的优秀教师职业素质。在此总结时向唐玉琴、徐济责两位老师致以由衷的感谢！ 一、学习内容 主要有以下几个部分： 1.对食用菌实验室培养进行培养基配制与灭菌（一级培养基和二级培养 基）； 2.在室外进行食用菌采摘（一次在校园采摘，另一次在锅底山采 摘。）； 3.一级菌种的分离、转管与培养； 4.二级菌种的接种与培养。 灭菌方式： 热力灭菌有湿热灭菌和干热灭菌两种形式。湿热灭菌主要包括高压蒸汽灭菌、常压蒸汽灭菌、沸水灭菌、间歇灭菌等多种方式。 高压蒸汽灭菌步骤： 加水装锅密封加热排放冷空气升压保压出锅斜面摆放 实验设备、工具及药品： 接种箱、超净工作台、酒精灯、接种针、镊子、接种刀、石炭酸 菌种分离方法： 组织分离法、基内菌丝分离法、孢子分离法。组织分离法又分为子实体组织分离法、胶质菌类子实体分离法、菌核组织分离、菌索组织分离 切取组织块接种： 无菌解剖刀从盖与柄中部纵切在无菌区域内接种菇撕成两半用解剖刀在盖与柄交界处刻成田字格用接种针挑取组织块放入斜面培养基中央塞上棉塞贴好标签 附：（PDA培养基配方：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g） 二、实习感悟
护理专业知识备考材料：化学消毒灭菌法 在日常生活中，我们每天遵照“饭前、便后要洗手”等等关于如何讲卫生的好习惯，目的就是减少进入人体的病原微生物，从而降低感染发生率。同样的工作其实每天都在医院进行着，但是要求却更严格，使用范围也更广，包括操作方法、使用要求、所用制剂都极大不同，这也是医院内感染预防和控制的重点任务。这一内容也是考试中的重点和高频考点。所以小编今天就带领大家一起学习医院内化学消毒灭菌法的相关知识点。 首先在学习之前我们要明确关于清洁、消毒与灭菌的概念，只有这样才能更好的理解接下来的内容。 一、概念 1.清洁：是指用物理方法清除物体表面的污垢、尘埃和有机物，其目的是去除和减少微生物，并非杀灭微生物。 2.消毒：是指用物理、化学或生物的方法清除或杀灭环境中和媒介物上除细菌芽孢以外的所有病原微生物，使其达到无害化。 3.灭菌：是指用物理、化学方法消除或杀灭环境中和传播媒介物上的所有微生物，包括致病的和非致病的，也包括细菌的芽孢。 二、化学消毒灭菌法 1.化学消毒剂的种类 (1)灭菌剂：可杀灭一切微生物，包括细菌芽孢，使物品达到灭菌要求的制剂。如戊二醛、环氧乙烷等。 (2)高效消毒剂：可杀灭一切细菌繁殖体，对细菌芽孢有显著杀灭作用的制剂。如过氧化氢、过氧乙酸、部分含氯消毒剂等。 (3)中效消毒剂：仅可杀灭分枝杆菌、细菌繁殖体、真菌、病毒等微生物，达到消毒要求的制剂。如醇类(乙醇最适宜杀菌的浓度是70%～75%)、碘类、部分含氯消毒剂等。 (4)低效消毒剂：仅可杀灭细菌繁殖体和亲脂病毒，达到消毒要求的制剂。如酚类、胍类、季铵盐类消毒剂等。 2.常用化学消毒剂
(1)2%戊二醛：浸泡精密仪器如纤维内镜，使用前加入0.5%亚硝酸钠，可防锈。 (2)环氧乙烷：医疗器械、书本、棉橡胶制品及一次性使用的医疗用品等。 (3)含氯消毒剂：①0.2%浸泡被乙肝病毒、结核杆菌污染的物品;②擦拭桌椅、墙壁、地面;③排泄物的消毒：排泄物5份加含氯消毒剂1份搅拌，放置2～6小时。 (4)过氧化氢：冲洗外科伤口、漱口。 (5)0.01%～0.1%氯己定：又名洗必泰，冲洗阴道、膀胱及伤口黏膜创面。 (6)苯扎溴铵：属于阳离子表面活性剂，可用于手、皮肤、黏膜、环境及物品消毒，常采用浸泡、擦拭、喷洒等方式。 3.化学消毒剂的使用原则 (1)合理使用，必须用时尽量少用，能采用物理方法消毒灭菌的，尽量不使用化学消毒灭菌法。 (2)根据物品的性能和各种微生物的特性选择合适的消毒剂。 (3)严格掌握消毒剂的有效浓度、消毒时间及使用方法。 (4)消毒剂要定期更换、定期检测，调整浓度，易挥发的要加盖。 (5)待消毒物品必须先洗净、擦干。 (6)消毒剂中不能放入纱布、棉花等物，以防降低消毒效力。 (7)消毒后的物品使用前必须先用无菌生理盐水冲净，以免消毒剂刺激人体组织。 (8)熟悉掌握消毒剂的毒副作用，工作人员做好防护。 4.化学消毒剂的常用方法 (1)浸泡法：注意浸泡前要打开物品的轴节或套盖，管腔内要灌满消毒液。不放置纱布、棉花等物，以免因吸附消毒剂而降低消毒效力。 (2)喷雾法：用于空气、地面、墙壁和物品表面的消毒。 (3)擦拭法：用于物品表面或皮肤、黏膜的消毒。 (4)熏蒸法：常用于室内空气消毒，如纯乳酸(每立方米0.12ml)。 好啦，我们知识点总结就到这里啦，大家一定要掌握上述内容，希望我们总结的知识点能够更好的帮助到大家，祝大家顺利通过考试。
一、名词解释（每题3分，共18分） 1．食用菌：高等真菌中能形成大型肉质或胶质子实体或菌核类组织并能供食用的菌类总称，俗称菇、蕈、耳。 2．菌种：是指以适宜的营养培养基为载体进行纯培养的菌丝体，也就是培养基质和菌丝体的联合体。或者说是指人工培养，并供进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。 3．培养基：根据食用菌对营养、水分、酸碱度的要求，人为配制成的供食用菌生长发育的基质。 4．菌种分离：就是用无菌操作的方法将所需要的食用菌从混杂的微生物群体中单独分离出来的过程。 5．灭菌：是应用物理和化学方法杀灭物品表面和内部所有的微生物，是一种彻底的灭菌方法。 6．消毒：是应用物理和化学方法使欲消毒的物品表面和孔隙内绝大部分微生物致死，是一种不彻底的灭菌方法。 二、填空题（每空0.5分,共20分） 1．无论哪一种食用菌，都是由（菌丝体）和（子实体）两大部分组成。 2．伞状子实体的菌肉可分为两类，即（丝状菌肉）和（泡囊状菌肉）。 3．菌环是由（内菌幕）遗留下来的。 4．菌托是由（外菌幕）遗留下来的。 5．食用菌在生长发育中所需要的营养物质主要有四大类，即（碳源）、（氮源）、（矿质元素）和（生长因素）。 6．制种一般包括四个基本环节，即（配制培养基）、（灭菌）、（接种）和（培养）。 7．对一级菌种培养基通常采用高压蒸汽灭菌，所要求的压力为 （ 1.1kg/cm2），温度为（121℃），时间为（20~30min ）。 8．菌种分离成功的关键是（无菌操作）。
9．接种的设备有（净化工作台）、（接种箱）和（接种室）。10．菌种一般分为三种类型，即（一级菌种）、（二级菌种）、（三级菌种）。 11．一级菌种的容器为（试管），规格为（ 18～20mm×180～200mm）。 12．制作棉塞的棉花应是（普通皮棉）。 13．为判断灭菌是否彻底，灭菌之后一定要（检验灭菌效果）。 15．食用菌在（发菌或菌丝生长）期不需要光照，应避光培养。 16．根据自然状态下食用菌营养物质的来源，一般将食用菌分为三种不同的营养类型，即（腐生性食用菌）、（寄生性食用菌）和（共生性食用菌）。 17．香菇属于（低温变温）结实性菌类。 18．平菇属于（层菌）纲、（伞菌）目、（侧耳）科、（侧耳）属。 19．鸡腿菇菌丝体具有（不覆土）不出菇的特点。 20．代料栽培是指（是指利用农业、林业、工业生产的下脚料（如木屑、棉子壳、稻草、废棉、酒糟等）为主要物质，再加入一定的辅助原料配制成培养料，用来代替传统的段木或原木来栽培各种食用菌的方法） 三、单项选择（多选无分）（每题2分,共10分） 1.下列说法中，正确的是（ C ）。 A．食用菌就是蘑菇。 B．食用菌是能供食用的微生物。 C．食用菌是可供食用的大型真菌的总称。 D．食用菌是可供食用的大型伞菌的总称。 2.绝大多数食用菌喜欢( C )环境。 A．酸性 B．碱性 C．偏酸性 D．偏碱性 3．制二、三级种时，要将培养料放入常压灭菌灶中蒸8-10小时，其目的是（ C ）。 A．将培养料蒸熟，便于菌丝体吸收利用。 B．使培养料软化，同时也可改变其PH值。
物理消毒灭菌法 （一）物理消毒灭菌法 1.热力消毒灭菌法：利用热力作用破坏微生物的蛋白质、核酸、细胞壁、细胞膜，导致其死亡，可分为 干热法和湿热法。 （1）燃烧法：属于干热法，是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法。 1)用途：①无保留价值的污染物品②金属器械及搪瓷类物品急用，或无条件消毒时，锐利刀剪 除外，以免锋刃变钝。 2)方法：①金属器械可在火焰上烧20秒②搪瓷类容器可倒入少量95%乙醇 (2)干烤法：利用特制的烤箱，热力通过空气对流和介质传导进行灭菌，效果可靠。 （3）煮沸消毒法：属于湿热法，用于耐湿、耐高温的搪瓷、金属、玻璃，橡胶类物品，不能用于外科手术器械的灭菌。从水煮开始计时，5-10分钟可杀灭繁殖体，15分钟可将多数细菌芽胞杀灭，如破伤风杆菌芽胞需煮60分钟才可杀灭，在水中加入碳酸氢钠，配成浓度为1%-2%的溶液时，沸点可达105度，即可增强杀菌作用，又可去除防锈。 注意事项：①物品需全部侵入在水中，物品盖子打开，轴节打开，空腔导管预先灌水，各种大小及形状相同的容器不能重叠②玻璃类物品需用纱布包裹，并在冷水或温水中放入③橡胶类物品需用纱布包好，水沸后放入④如中途加入其它物品，需等再次水沸后开始计时⑤高原地区气压低，沸点低，需适当延长煮沸时间，一般海拔每增高300m，煮沸时间延长2分钟。 （4）压力蒸汽灭菌法：属于湿热法，是一种临床上应用最广泛，效果最为可靠的首选灭菌方法 2.光照消毒法（又称辐射消毒）主要是通过紫外线的杀菌作用，使菌体蛋白发生光解、变性，导致细菌死亡。 （1）日光暴晒法：利用日光的热、干燥、紫外线的作用来杀菌，将床垫、毛毯、书籍、衣服等放在阳光下直射，暴晒6小时可达到消毒效果，中间要定时翻动。 （2）紫外线灯管消毒法：紫外线属于电磁波辐射，常用于空气、物品表面的消毒，杀菌最强的波长范围250-270nm从灯亮5-7分钟开始计时。①空气消毒：有效距离不超过2m，照射时间20-30分钟②物品消毒：有效距离不超过25-60cm，照射时间20-30分钟。 3)注意事项：①保持室内清洁、干燥，室内温度20-40度，相对湿度40%-60%时，紫外线消毒最为宜 ②保持紫外线灯管清洁，一般每2周用无水乙醇擦拭1次，发现有污洉应随时擦拭③保护眼睛和皮肤：紫外线对眼睛和皮肤有刺激作用，易引起眼炎、皮炎且臭氧对人体不利，因此一般不在有人的环境中使用，必须使用时应带防护镜，穿防护衣，或用被单遮盖肢体④紫外线穿透力较差，消毒时物品应摊开或挂起，且定时翻动及保证各表面均受到直接照射⑤如需再次开启，应间隔3-4分钟⑥定期检测紫外线灯管照射强度，一般每隔3-6个月1次，或建立登记卡，使用时间超过1000小时应予以更换⑦定期做空气培养检测消毒效果 (3)臭氧灭菌消毒法：利用臭氧强大的氧化作用进行杀菌。 1)用途：主要用于空气、医院污水、诊疗用水、物品表面的消毒。 2)方法:使用时应关闭门窗，人员离开房间，消毒结束后30分钟方可进入。 3．电离辐射灭菌法(又称冷灭菌)适用于不耐热的物品消毒，如橡胶、塑料、高分子聚合物(一次性注射器、输液输血器等)、紧密医疗仪器、生物医学制品、节育用具及金属等。 4．微波消毒灭菌法微波可杀灭细菌繁殖体、真菌、病毒、细菌芽胞、真菌孢子等各种微生物。常用于食品、餐具的处理，化验单据、票证的消毒，医疗药品、耐热非金属材料及器械的消毒灭菌。不能用于金属物品的消毒。 化学消毒灭菌法 化学消毒灭菌法是利用液体或气体的化学药物渗透到菌体内，使菌体蛋白凝固变性，细菌酶失去活性，导致微生物代谢障碍而死亡，或破坏细胞膜结构，改变其通透性，导致细胞膜破裂、溶解，以达到消毒灭菌的目的。
清洗消毒及灭菌技术操作规范 昭平县中医院院感科 1、范围本标准规定了各级各类医院消毒供应中心central sterile supply department ,CSSD的诊疗器械、器具和物品处理的基本原则、操作流程和被朊毒体、气性坏疽及突发原因不明的传染病病原体污染器械、器具和物品的处理流程。本标准适用于医院的CSSD和为医院提供消毒灭菌服务的社会化消毒灭菌机构。暂未实行消毒供应工作集中管理的医院其手术部室的消毒供应工作应执行本标准。已采取污水集中处理的其他医疗机构可参照使用。 2、规范性引用文件下列文件的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是标注日期的引用文件其随后所有的修改不包括勘误内容或修订版均不适用于本标准然而鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可适用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件其最新版本适用于本标准。GB/T 5750.5 生活饮用水检验标准方法无机非金属指标GB/T 19633 最终灭菌医疗器械的包装WS 310.1 医院消毒供应中心第1部分管理规范WS 310.3 医院消毒供应中心第3部分清洗消毒及灭菌效果监测标准消毒技术规范卫生部 3、术语和定义下列术语和定义适用于本标准。 3.1 清洗cleaning 去除医疗器械、器具和物品上污物的全过程 流程包括冲洗、洗涤、漂洗和终末漂洗。 3.1.1 冲洗flushing 使用流动水去除器械、器具和物品表面污
物的过程。 3.1.2 洗涤washing使用含有化学清洗剂的清洗用水去除器械、器具和物品污染物的过程。 3.1.3 漂洗rinsing 用流动水冲洗洗涤后器械、器具和物品上残留物的过程。 3.1.4 终末漂洗end rinsing 用软洗、纯化水或蒸馏水对漂洗后的器械、器具和物品进行最终处理的过程。 3.2 超声波清洗器ultrasonic cleaner 利用超声波在水中振荡产生“空化效应”进行清洗的设备。 3.3 清洗消毒器washer-disinfector 具有清洗与消毒功能的机器。3.4 闭合closure 用于关闭包装而没有形成密封的方法。例如反复折叠以形成一弯曲路径。 3.5 密封sealing 包装层间链接的结果。注密封可以采用诸如粘合剂或热熔法。 3.6 闭合完好性closure integrity 闭合条件能确保该闭合至少与包装上的其他部分具有相同的阻碍微生物进入的程度。 3.7 包装完好性package integrity 包装未受到物理损坏的状态。3.8 植入物implantable medical device 放置于外科操作造成的或者生理存在的体腔中留存时间为30d或者以上的可植入型物品。 3.9 湿热消毒moist heat disinfection 利用湿热使菌体蛋白质变性或凝固酶失去活性代谢发生障碍致使细胞死亡。包括煮沸消毒法、巴斯德消毒法和低温蒸汽消毒法。
食用菌母种1级种培养基、 食用菌原种2级种培养基 简法生产与灭菌创新技术 湖北省宜都市湾市食用菌天麻繁育场的科技人员经过多年探索实践，研究成功食用菌母种1级种试管培养基、食用菌原种2级种培养基简法灭菌创新技术。其技术涵盖了食用菌菌种母种1级种试管培养基简法复制生产创新技术及简法灭菌创新技术和食用菌菌种原种2级种培养基简法复制生产创新技术及简法灭菌创新技术。现将其技术要点介绍如下： 1. 食用菌菌种母种1级种试管培养基简法生产与复制创新技术 该技术采用湖1北3省8宜72都市52湾市33食用58菌天麻繁育场技术总监胡文华发明的“广谱通用型食用菌菌种培养基生产技术”。这种广谱通用型食用菌菌种培养基以颗粒型谷物为原料，谷粒、麦粒、玉米粒均可，简称颗粒培养基（下同），又称天然无公害培养基。这种颗粒培养基制作方法特别简单，取谷粒、麦粒、玉米粒一种或多种，与胡文华发明的食用菌种包衣剂混合均匀后，就可以分装试管了。1支试管（18毫米×180毫米玻璃试管）装入颗粒培养基约10克，成本不足1角钱，棉花塞堵封试管口。一次可根据生产需要，制作分装试管500支～1000支。 2. 食用菌菌种原种2级种培养基简法生产与复制创新技术 该技术同样采用湖1北3省0宜85都市16湾市86食用16菌天
麻繁育场技术总监胡文华发明的“广谱通用型食用菌菌种培养基生产技术”。这种广谱通用型食用菌菌种培养基以颗粒型谷粒、麦粒、玉米粒为原料。取谷粒、麦粒、玉米粒一种或多种，与胡文华发明的食用菌种包衣剂混合均匀即可。盛装原种2级种培养基的容器为250毫升输液瓶即生理盐水瓶。1瓶装入颗粒培养基约100克，成本不足5角钱，棉花塞堵封瓶口。一次可根据生产需要，制作分装100瓶～500瓶。 3. 母种培养基和原种培养基简法灭菌创新技术 3.1 灭菌设备： 母种培养基和原种培养基简法灭菌创新技术选用的灭菌设备为“苏泊尔”压力锅，即家庭做饭用的压力锅，又称家用高压锅。 3.2 灭菌操作： 向“苏泊尔”压力锅内注水5厘米深，将制备好的食用菌母种、原种培养基分别直立于压力锅内，盖上锅盖，生火灭菌40分钟～50分钟即可。 小结：该技术突破了传统方法需要用牛皮纸包扎试管口或瓶口棉花塞，全封闭高压灭菌却仍不能保证100%不湿棉花塞的难题，达到了不用专用高压灭菌锅，不用高档灭菌设备，不包扎棉花塞全裸露灭菌却100%不湿棉花塞的理想效果。其突出的特点是灭菌设备为家用炊具，可一锅多用，且价廉易购，灭菌方法简单实用，灭菌效果好。彻底解决了食用菌母种和原种制作难、消毒灭菌更难的技术难题，为食用菌种简法生产开拓出新天地。
严格的消毒灭菌对细胞与胚胎工程研究与应用工作极为重要，直接影响着整个实验能否顺利进行。 (一)消毒灭菌方法 目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法（消毒剂、抗生素）两大类。 1．干热灭菌法 是利用恒温干燥箱内120 oC～150 oC的高热，并保持90～120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。 2．湿热灭菌法 压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0～1.1 kg/cm2，维持20～30 min即可达到灭菌效果。 3．射线灭菌法 利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。紫外线是一种低能量的电磁辐射，可以杀灭多种微生物。紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。灭菌时间为30 min。用紫外线杀菌时应注意，不能边照射边进行实验操作，因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害，而且对培养物及一些试剂等也会产生不良影响。 4．过滤除菌法 是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤，使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留，从而达
医院消毒灭菌管理制度 为做好医院消毒灭菌与隔离管理，减少医院感染，根据《医院感染管理办法》、《医疗机构消毒技术规范》和《医疗机构隔离技术规范》要求，制定本制度。 一、管理要求： 1、各科室根据工作特点制定本科室消毒灭菌与隔离管理制度，科室医院感染管理小组长负责督促本科室人员执行消毒隔离制度，医院感染管理科负责对全院消毒灭菌与隔离工作的监督和指导。 2、医院所有消毒器械、消毒剂，均应符合卫生部《消毒管理办法》要求，物资采购部门负责审查相关证件（卫生许可证、卫生安全评价报告等），负责对产品检查验收。 二、基础措施： (一) 布局流程应遵循洁污分开的原则，诊疗区、污物处理区、生活区等区域相对独立，布局合理，标识清楚，通风良好，设有流动水洗手设施或备有手消毒设施。 (二) 医护人员上岗应衣帽整洁，无菌操作应戴帽子、口罩，禁止穿工作服去食堂或医院以外的地方。严格遵守无菌操作规程及医务人员手卫生规范，掌握七步洗手法和手消毒的操作步骤和指征。手消毒剂应注明开启日期，易挥发性的醇类产品开瓶后的使用期不超过30天，不易挥发的产品开瓶后的使用期不超过60天，应在有效期内使用。 (三) 环境清洁消毒要求： 1、空气净化与消毒：医院现采用自然通风、紫外线灯照射空气消毒方
法，一般不使用化学法消毒空气。紫外线消毒：一般每天下班后或上班前进行空气消毒60分钟，室内有人时不能使用。在用于物体表面照射消毒时有效距离不宜超过1米，消毒有效区域为灯管周围1.5-2米，照射时间1小时。每周用75%乙醇棉球擦拭灯管，每半年对灯管进行照射强度监测，辐照强度达不到要求时应及时更换；并有相应的照射、擦拭、监测记录。 2、地面、物体表面的清洁与消毒： (1) 保持环境清洁干燥。普通科室病房、门诊的地面、物体表面无明显污染时，每日湿式清洁2次。对治疗车、床栏、床头柜、门把手、灯开关、水龙头等频繁接触的物体表面应每天清洁、消毒。人员流动频繁、拥挤的诊疗场所应每天在工作结束后进行清洁、消毒。感染高风险部门（病房手术室、外科门诊手术室、妇科门诊手术室、供应室、检验科、口腔科、急诊室、发热门诊、肠道门诊）等的地面和物体表面在清洁的基础上，每天消毒1次。当受到血液、体液等明显污染时，先用吸湿材料去除可见的污染物，再清洁和消毒。消毒方法：用500mg/L含氯消毒剂擦拭，作用30min。 (2) 病床应湿式清扫，一床一套（巾），床头柜应一桌一抹布；患者的床单、被套、枕套等应一人一更换，住院时间长者，每周更换，遇污染随时更换消毒。禁止在病房、走廊清点更换的衣物。病人出院、转科或死亡后，床单元必须进行终末消毒处理。 (3) 擦拭布巾、拖布应分区使用，标记明确。使用后先清洗干净，用500mg/L含氯消毒剂浸泡30分钟，冲净消毒液，向下悬挂晾干备用。如物表和地面被血液、体液和排泄物污染，先用1000mg/L含氯消毒剂倒于污染处再用拖布清洗干净，用后的布巾和拖布1000mg/L含氯消毒剂浸泡30分