香菇多糖提取工艺的研究
1引言
多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，广泛存在于动物、植物和微生物细胞壁中,是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子,尤其是一类重要的信息分子[1]。到目前为止，已有近300种的多糖化合物从天然产物中分离出来，其中植物提取水溶性多糖最为重要。从植物中提取多糖主要根据不同溶解度来选择溶剂进行。香菇多糖的提取一般有热水提取法、酸提取法、碱提取法、酶提取法和微波助提法等方法[2]，本文进行了浸提香菇多糖的工艺条件研究，以期获得香菇多糖的最佳提取条件，为其产业化生产提供有效的方法和技术参数。本实验采用各种溶剂和酶的处理,提取香菇多糖,保持多糖的生物活性，效果是明显的。
1.1香菇多糖的组成与药理价值
香菇多糖(LentinanLNT) 是一种β—1,3—葡聚糖，系从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖。多糖以甘露糖为主，含少量的葡萄糖、微量的岩藻糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等；肽链由天冬氨酸、组氨酸、丝氨酸、赖氨酸、谷氨酸等18种氨基酸组成。LNT的化学结构是一种以β—D—[1~3]葡萄糖残基为主链，侧链为(1—6)葡萄糖残基的葡聚糖，平均分子量约为50万道尔顿[3]。
香菇多糖1969年在日本首先发现，自此，国内外学者对LNT作了许多深人的研究。近年来，LNT广泛药理作用研究取得了很大进展。主要的药理价值有：免疫调节作用；抗肿瘤作用[4]；抗病毒作用；对寄生虫、霉菌、细菌等感染均有治疗作用；有抗衰老、抗辐射作用，还具有预防实验性高脂血症和高血糖作用。在临床上LNT还用于治疗小儿反复呼吸道感染，糖尿病，寻常型银屑病，硬皮病，面部扁平，尖锐湿疹等。此外，硫酸化香菇多糖具有显著抗HIV作用，香菇多糖在治疗胃
癌、结肠癌、肺癌等方面有良好疗效[5]。作为免疫辅助药物，香菇多糖主要用来抑制肿瘤的发生、发展和转移，提高肿瘤对化疗药物的敏感性，改善患者的身体状况，延长其寿命。香菇多糖有如此神奇的生物活性，科学家们已经开始在基因水平探讨香菇多糖生物活性的机制。总之，香菇多糖具有广泛的药理作用，而且其疗效好，毒副作用小，是一种应用前景广阔的天然药物。
1.2 香菇多糖提取的现状分析
目前国内对香菇多糖的提取分离有了很大发展，主要采用的方法有传统热水提取法、酸提取法、碱提取法，这些方法都有其优点，也有其难以克服的不足之处。传统热水浸提方法存在能耗高，提取时间长的缺点，其工业化应用和发展受到限制。酸碱处理香菇，反应条件剧烈，提取液又需经过中和反应，很可能破坏多糖的结构，会使香菇多糖的分子量降低，致使药用价值下降。
微波辅助提取法具有设备简单、快速、高效、安全等特点，可供选择的溶剂较多。利用微波强化固液浸取过程是颇具发展潜力的一种新型辅助提取技术[6]。微波(Microwave) 是频率介于300MHz 和300GHz 之间的电磁波，频率很高，能够透入物体的深处。微波射线辐射于溶剂并透入细胞内部，可使溶剂及细胞液吸收微波能而温度升高，压力增大。当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，细胞内容物释放出来，转移并溶解于溶剂中，提高了多糖提取率。
近年来生物酶广泛应用于各个领域，在国内也开始将其应用于中草药提取中。多糖通常被包裹在植物细胞壁内，并且多糖往往和蛋白质结合在一起，以蛋白多糖的形式存在。试验发现木瓜蛋白酶能有效酶解与多糖结合在一起的蛋白质，从而将多糖释放出来而提高多糖的得率，同时降低了多糖中蛋白质的含量，提高了多糖的纯度。
1.3 香菇多糖提取的研究意义
多糖是近年来研究最为活跃的高分子化合物，真菌糖由于具有多种生物活性，其研究进展则尤为迅速。目前，从各类生物材料中提取的具
有生物活性的多糖已经成为天然药物的一个新来源。香菇是一种食用和药用真菌，自古以来就被当作健脾益气、调和阴阳、补虚扶正、行气活血的上品。其主要有效成分香菇多糖，经二十多年的研究和应用，证实其具有显著提高免疫力、抗癌、抗病毒、降血脂、防止动脉硬化、抗衰老等多种功能[7]。此外，香菇多糖还具有诱发干扰素和保肝等作用。因此，近年来在国内外形成了一股研发香菇多糖的热潮。
目前，国内的香菇多糖产品有两种，即“口服香菇多糖”和“肌肉注射香菇多糖”，国外的香菇多糖产品有“粉针静脉注射香菇多糖”，由日本独家生产。由于香菇多糖是高分子化合物，分子量大，不易透过血管壁而被吸收，致使口服和肌肉注射的疗效远不如静脉注射。为此，我国和世界其他国家均向日本进口该产品。国内目前有数家单位在致力于静脉注射香菇多糖的开发，虽然现已取得较大进展，但是由于静脉注射香菇多糖要求的纯度高，一般实验室水平达不到要求，因此,研发高效、经济的香菇多糖的提取方法具有重要的现实意义。
1.4 香菇多糖的应用前景
我国是食用菌生产大国, 其中香菇的产量在世界居首位[8]。20 世纪70 年代以来, 食用菌多糖的研究开发进入了一个崭新的发展时期, 香菇多糖的研究已成为一个热点, 但目前主要集中在香菇中β-( 1→3) - D- 葡聚糖的研究上, 而其它多糖组分与生物活性之间的关系还有待进一步的明确。香菇多糖不仅是一种比较理想的药物, 也是一类重要的保健食品功能因子, 具有广阔的应用前景, 是当今医药和食品工业共同关注的焦点。但目前多糖的提取率普遍不高, 因此, 提高香菇多糖的提取率已成为进行多糖产品开发需要解决的关键问题, 不仅可以考虑将多种提取手段结合起来优化提取工艺, 还可以通过遗传育种、基因重组、物种诱变等手段选育出高产多糖的香菇菌株, 提高香菇中的多糖含量, 以提高香菇多糖的提取率, 降低生产成本。
2 实验仪器、材料及试剂
2.1 主要实验仪器
电热恒温水浴锅北京市长风仪器仪表公司
低速自动平衡离心机上海安亭科学仪器厂
电子天平（精确度为0.0001g）北京赛多利斯仪器系统有限公司SHD—Ⅲ型循环水式多用真空泵保定高新区阳光科教仪器厂
电热恒温鼓风干燥箱上海博讯实业有限公司医疗设备厂SP-2100型分光光度计上海光谱仪器有限公司
分析用研磨机德国IKA
Galanz WD800B型微波炉佛山市顺德区格兰仕微波炉电器有限公司2.2 主要实验材料与试剂
干香菇超市95%乙醇溶液分析纯氢氧化钠（NaOH）分析纯浓硫酸（H2SO4）分析纯
葡萄糖（C
6H
12
O
6
）分析纯
盐酸（HCl）分析纯氯仿(CHCl3) 分析纯苯酚分析纯正丁醇分析纯活性炭分析纯木瓜蛋白酶酶活力》50万单位
3 工艺流程及测定方法
3.1 工艺流程
3.1.1微波辅助工艺方法
原料烘干粉碎称重热水抽提
微波辐射
香菇多糖干燥
sevag法脱蛋白醇析、复溶滤液脱色抽滤
3.1.2 采用酶解工艺的改进方法
原料烘干粉碎称重酶水解
活性炭脱色
灭酶
香菇多糖干燥
浓缩复溶滤液醇析抽滤3.2 多糖的提取方法
将干香菇后粉碎，准确称取2克香菇粉加入一定比例的蒸馏水，在一定温度下浸提数小时，用真空泵减压抽滤，将滤液加入乙醇进行沉淀，离心得沉淀物，将沉淀物溶解后脱蛋白，定容，测吸光度值，然后将溶液浓缩，加入一定体积乙醇进行沉淀，离心，烘干，得到香菇多糖粗品。
3.2.1 除蛋白的方法的选择
香菇中除含大量的多糖外，还含有一定量的蛋白质和其他杂质。目前用于多糖除蛋白的方法有Sevag法、三氟三氯乙烷法及三氯乙酸法（TCA），其中前两种方法用于微生物多糖，后一种方法用于植物多糖。另外TCA法与Sevag法比较具有蛋白质去除效果高、多糖损失率低、可同时除去大量色素等优点，所以本研究采用Sevag法除蛋白，即将离心分离得到的粗多糖沉淀溶于适量蒸馏水中，加入20%体积的氯仿和7%体积的正丁醇生成絮状凝聚物，3500r/min离心15min除去沉淀。重
复上述操作，直至无凝聚物生成。
3.2.2 香菇多糖的脱色及测定方法
活性炭为黑色颗粒, 无臭、无味，具有无毒和脱色、脱臭效果良好的特点, 可以反复使用, 成本低, 适合工业化生产的需要。颗粒活性炭具有惊人的比表面积(800～2000m2/g)[9], 当被脱除的有色物质的分子直径小于或等于活性炭孔的入口直径时, 可被活性炭吸附而起到脱色的效果[10]。活性炭的脱色效率高、速度快、成本较低, 但也存在一些问题, 如再生困难、多肽和氨基酸损失率较高。吸附剂是酶解液脱色的主要影响因素，从液体中脱除颗粒活性炭较容易，所以选择颗粒活性炭并优化其脱色工艺。
用SP-2100分光光度计在色素的最大吸收波长处测其吸光度值[11]。分析表明: 香菇多糖酶解液的吸收峰在350-380nm之间, 最大吸收峰360nm, 故选360nm为测定波长。酶解液原色为棕黄色或褐色, 测其在360nm处的吸光度值1.987[12], 记脱色前OD360nm=1.987。
脱色率(%)=(1.987- OD360nm)/1.987×100
3.3 香菇多糖测定方法
3.3.1 香菇多糖提取率的测定方法
本实验采用苯酚硫酸法测定香菇多糖提取率[13]，并在需要的部分做恒重实验，具体做法如下：
称取烘干的香菇粉2克，加水于一定温度下提取若干时间，冷却后减压抽滤，取滤液，加无水乙醇沉降，脱蛋白，然后再次离心分离即为粗多糖，在水中溶解一定倍数后测吸光度查标准葡萄糖曲线即得得率。
恒重法是指[14]，经过提取、醇沉、脱蛋白和离心得粗多糖后，将其洗入蒸发皿中，放入电热恒温鼓风干燥箱中，60℃烘干至恒重，并粗算得率。
3.3.2 标准葡萄糖曲线的绘制
采用苯酚-硫酸比色法，以葡萄糖为标准品。准确移取0.6000 mg/ml 的葡萄糖标准溶液1.5ml、2.5 ml、3.5 ml、4.5 ml、5.5 ml，分别转移到50 ml容量瓶中定容、摇匀得系列对照品溶液。准确移取上述葡萄糖标准溶液2.0 ml置于25ml具塞试管中，加入4.0%苯酚溶液1.0 ml，浓硫
酸4.0 ml 摇匀，沸水浴保温15 min 后放入冷水中冷却。以试剂空白为参比，选用1cm 比色皿在最大吸收波长490 nm 处测定其吸光度[15]，得标准曲线。
图 1 苯酚-硫酸法的葡萄糖标准曲线
用最小二乘法进行回归，得标准曲线方程为：A=0.0076x+0.0105，线性相关系数R=0.9972。 3.3.3 提取率的测定
量取纯化后的定量样品，加无水乙醇离心分离，取沉淀，加蒸馏水溶解后转移至50 ml 容量瓶中定容,再称取1 ml 转移至另一个50 ml 容量瓶中定容。准确移取2.0 ml 于25ml 具塞试管中后按上述方法操作，并根据标准曲线计算多糖提取率。 3.3.4 多糖提取率的计算
多糖提取率(%)＝
待测物克数
多糖克数
×100%
＝
6
10
2500
??待测物克数曲线中所查多糖微克数×0.9×100%
4 实验方法
4.1 微波辅助热水浸提法的单因素实验
称取香菇干粉移入锥形瓶中按一定料液比加水搅匀，在设定温度的水浴锅中恒温浸提设定时间，转入微波专用杯在额定功率一定的微波炉中处理一定时间，将处理液抽滤，滤液浓缩至一定体积，加3倍体积的95%乙醇醇析[16]，待产生的沉淀物沉淀30min后再离心，将沉淀进行溶解测定，测定完后将其粗多糖干燥至恒重。
以下实验分别是就不同因素对香菇多糖提取的影响进行的讨论。4.1.1料液比的选择
香菇多糖提取率随着浸提溶剂的增加呈上升趋势，但是当料液比[香菇干粉质量(g) ：浸提剂体积(ml)]超过1：20时，香菇多糖的提取率增长缓慢。单因素实验中选择料液比水平为1：10、1：15、1：20、1：25、1：30。
4.1.2浸提温度的选择
温度高有利于香菇多糖的浸出，随着温度的升高，提取率增加，但当温度高于80℃时，提取率未见提高；温度高于90℃时，提取率明显降低。这可能是温度过高影响了多糖的溶出，使其得率降低。故单因素实验中选择温度水平为70℃、75℃、80℃、85℃、90℃。
4.1.3 浸提时间的选择
香菇多糖的浸提时间并非越长越好，在一定温度范围内延长浸提时间有利于香菇多糖的浸出。随着提取时间的增加，多糖提取得率也随之增加。但浸提时间大于4h后，提取得率增加不明显，这说明提取4h后溶液中的多糖浓度变小，扩散速度减慢，达到平衡状态。单因素实验中选择时间水平为1h、2h、3h、4h、5h 。
4.1.4微波辐射时间的选择
随微波处理时间的延长，提取率上升，而后又下降。这可能由于岁随微波的辐射时间延长，提取率温度升高，香菇多糖发生变性，提取率降低。单因素实验中选择微波辐射时间水平为1min、2min、3min、4min、5min。
4.2 酶解法的单因素实验
香菇处理物在50℃水中浸泡1小时，加热升温至90℃,提取0.5小时后，降至40℃,加入酶制剂,酶促反应80min，中和，补水至1: 100，升温至90℃灭酶并保温浸提2小时，降至室温，真空抽滤，滤液浓缩，乙醇沉淀。
以下实验分别是就不同因素对香菇多糖提取的影响进行的讨论。4.2.1 浸提温度的选择
当酶解温度不同时酶活力也不同，多糖的提取率也不同，因此实际生产中也可根据需要选择温度。温度太高,就可能使酶蛋白失去活性，降低酶的分解能力。单因素实验中选择温度水平为40℃、45℃、50℃、55℃、60℃。
4.2.2浸提pH值的选择
当酶解pH值不同时酶活力也不同，多糖的提取率也不同，pH值对酶解提取效果有很大影响，pH值在6～7之间时，多糖提取率最高。考虑生产实际，可选用自然条件下的pH值。单因素实验中选择pH值水平为4、5、6、7、8 。
4.2.3 浸提时间的选择
随着酶解时间的延长，多糖提取率逐渐增加，但香菇多糖的提取率并不随酶促反应时间的延长而显著增加。当酶解时间超过60 min时，多糖提取率变化很小。单因素实验中选择时间水平为30 min、60 min、90 min、120 min、150 min 。
4.3 香菇多糖提取工艺参数的优化
4.3.1 微波辅助热水提取法的正交实验
根据微波辅助热水提取法单因素实验的结果，在单因素实验的基础上，设计4因素（料液比、浸提时间、微波处理时间、浸提温度）3水平L9（34）正交实验，考察因素及水平见表1。
表 1 微波辐助热水提取法因素水平表
水平
因素
A料液比
/(g/ml)
B浸提时间
/h
C微波处理时间
/min
D浸提温度
/℃
1 1:15(A1) 2(B1) 2(C1) 75(D1)
2 1:20(A2) 3(B2) 3(C2) 80(D2)
3 1:25(A3) 4(B3) 4(C3) 85(D3)
4.3.2 酶提取法的正交实验
根据酶提取法单因素实验的结果，在单因素实验的基础上，设计3因素（温度、pH值、时间）3水平L9（33）正交实验，考察因素及水平见表2。
表 2 酶提取法因素水平表
水平
因素
A温度（℃）B时间（min） C pH值
1 45(A1) 30(B1) 5.0(C1)
2 50(A2) 60(B2) 6.0(C2)
3 55(A3) 90(B3) 7.0(C3)
5 结果与分析
5.1 单因素实验结果
5.1.1微波辅助热水浸提法的单因素实验结果
5.1.1.1 浸提温度对香菇多糖提取率的影响
料液比对香菇多糖提取率的影响设定料液比分别为1:10、1:15、1:20、1:25、1:30，于80℃水浴锅中浸提4h，然后微波辐射3min，进行抽滤、浓缩、醇析、脱蛋白、测定、干燥至恒重。实验结果如下图2：
图 2 料液比对香菇多糖提取率的影响
由图2看出，随料液比的增大，提取率增加。这可能是因为多糖分散存在于由纤维组成的骨架中，溶剂对多糖的提取必须先使多糖扩散到骨架内部将多糖溶解，然后才能扩散出来。同时，当料液比高于1:20时继续提高料液比，多糖提取率增幅较小，可能是因为多余的提取剂也可以破坏香菇细胞，使得细胞膜受到损害，造成细胞液或者其它的成分溶出，这样溶液的颜色会发生不应该的改变而致使测定结果降低。同时，加水量过大，会使提取液中多糖浓度偏低，而且会增加后续工艺中的提取液的浓缩成本和醇析中的酒精用量，为减轻后续工序负荷，提取剂用量不宜过大，初步选定料液比为1:20。
5.1.1.2 浸提温度对香菇多糖提取率的影响
浸提温度对香菇多糖提取得率的影响设定料液比1:20，浸提时间4h，分别于水浴锅中70℃、75℃、80℃、85℃、90℃下保温浸提，然后微波辐射3min，进行抽滤、浓缩、醇析、脱蛋白、测定、干燥至恒重。实验结果如下图3：
图 3 浸提温度对香菇多糖提取率的影响
由图3看出，随浸提温度升高，提取率增加，随着温度的升高，多糖在溶剂中的溶解度及扩散系数均会增大，也就是说多糖从香菇中被提取出来的速度将变快，这是有利于多糖提取的。但当温度高于80℃时，提取率未见提高；温度高于90℃时，提取率明显降低。由于高温同样会加速多糖的氧化，当浸提温度超过一定值后，扩散速度的增加已经比不上多糖被损害的速度，多糖的提取率反而会随温度升高而下降。因此，浸提温度应选择80℃。
5.1.1.3 浸提时间对香菇多糖提取率的影响
浸提时间对香菇多糖提取率的影响设定料液比1:20，于80℃水浴中分别浸提1h、2h、3h、4h、5h，然后微波辐射3min，进行抽滤、浓缩、醇析、脱蛋白、测定、干燥至恒重。实验结果如下图4：
图 4 浸提时间对香菇多糖提取率的影响
由图4看出，随浸取时间的延长，提取率增大。但浸提时间大于4h 后，提取得率增加不明显。这是因为提取实际上是一个扩散的过程，扩散的原理是梯度差，随着时间的延长这个差也就越来越小，扩散的速度也就越来越慢，所以一定温度范围内延长提取时间有利于多糖的充分浸出。但是因为香菇多糖的还原性又比较强，容易被空气中的氧气氧化，若提取时间过长反而会造成多糖的氧化加重或发生降解反应，导致含量下降，提取出的多糖的量自然也就少了。所以选定最佳浸提时间4h。5.1.1.4 辐射时间对香菇多糖提取率的影响
微波辐射时间对香菇多糖提取得率的影响设定料液比1:20，在80℃恒温水浴锅中浸提4h，转入微波炉中进行辐射处理，时间分别设定为1min、2min、3min、4min、5min，然后进行抽滤、浓缩、醇析、脱蛋白、测定、干燥至恒重。实验结果如下图5：
图 5 微波处理时间对香菇多糖提取率的影响
由图 5 看出，随微波处理时间的延长，提取率上升，而后又下降。这可能由于随微波辐射时间延长，提取液温度升高，香菇多糖发生变性，提取率降低。因此，微波辐射时间应选择3min。
5.1.2酶提取法的单因素实验结果
5.1.2.1 酶解温度对香菇多糖提取率的影响
不同温度对香菇多糖提取率的影响（pH值为7.0、酶水解90min），实验结果如下图6：
图 6 酶解温度对香菇多糖提取率的影响
由图6可知,当酶解温度在50℃时酶活力较高,多糖的提取率最高，与不加酶的香菇空白相比，多糖提取率增加7.74%。但在45～50℃范围内，提取结果无显著差异，因此实际生产中也可根据需要选择温度。温度过低，生物酶活性较低，温度过高,就可能使生物酶受热变性而使其活性降低,降低酶的分解能力。
5.1.2.2 酶解pH对香菇多糖提取率的影响
不同pH值对香菇多糖提取率的影响（温度50℃、酶水解90min），实验结果如下图7：
图7 酶解pH值对香菇多糖提取率的影响
图7显示，pH值对酶解提取效果有很大影响，这是由于酶对pH值比较敏感，pH值的改变可以改变酶的空间构象而引起酶活性的降低。pH值在6～7之间时，多糖提取率最高。考虑生产实际，可选用自然条件下的pH值。
5.1.2.3 酶解时间对香菇多糖提取率的影响
不同酶解时间对香菇多糖提取率的影响（pH值为7.0、温度50℃），实验结果如下图8：
图8 酶解时间对香菇多糖提取率的影响
由图8可知，随着酶解时间的延长，多糖提取率逐渐增加，但香菇多糖的提取率并不随酶促反应时间的延长而显著增加。当酶解时间超过90 min时，多糖提取率变化很小，因此酶解时间可确定为90 min。
5.2 正交实验确定最佳提取工艺
5.2.1 正交实验确定微波辅助热水浸提法最佳提取工艺
影响微波辅助热水提取香菇多糖提取率的因素主要料液比、浸提时间、微波处理时间、浸提温度等，以下采用正交法确定微波辅助热水提取香菇多糖的最适条件，结果见表3。通过以下正交实验可以得出微波辅助热水浸提法的最佳工艺条件。
表 3 微波辅助热水提取香菇多糖正交实验结果
实验号A料液比
/(g/ml)
B浸提时间
/h
C微波处理时
间/min
D浸提温度
/℃
多糖百分比
(%)
1 1 1 1 1 3.96
2 1 2 2 2 7.56
3 1 3 3 3 4.28
4 2 2 3 1 5.44
5 2 3 1 2 4.36
6 2 1 2 3 5.36
7 3 3 2 1 6.02
8 3 1 3 2 5.74
9 3 2 1 3 4.52
K115.8 15.42 15.06 12.84
K215.16 17.66 17.52 18.94
K316.28 14.16 14.66 15.46
k1 5.27 5.14 5.02 4.28
k2 5.05 5.89 5.84 6.31
k3 5.43 4.72 4.89 5.15
R 0.38 0.75 0.95 2.03
由极差分析结果，影响香菇多糖提取率因素的主次顺序为：D>C>B>A，即浸提温度>微波处理时间>浸提时间>料液比，最优水平为A3B2C2D2。
微波辅助提取香菇多糖的最佳提取条件为：料液比1:25，浸提温度80℃，浸提时间3h，微波辐射3min。在此条件下香菇多糖提取得率可达7.70%。
5.2.2 正交实验确定酶解法最佳提取工艺
影响酶解提取香菇多糖提取率的因素主要是酶解时间、酶解温度、酶解pH值等，以下采用正交法确定酶解提取香菇多糖的最适条件，结果见表4。通过以下正交实验可以得出酶解法提取香菇多糖的最佳工艺条件。
表 4 酶解法提取香菇多糖正交实验结果
实验号A浸提温度
/℃
B 浸提时间
/min
C pH值多糖百分比
(%)
1 1 1 1 2.56
2 1 2 2 4.67
3 1 3 3 3.12
4 2 1 2 3.31
5 2 2 3 6.51
6 2 3 1 2.25
7 3 1 3 5.45
8 3 2 1 4.60
9 3 3 2 3.25
K110.35 11.32 9.41
K212.07 11.11 11.23
K313.30 8.62 13.24
k1 3.45 3.78 3.14
k2 4.02 3.70 3.74
k3 4.43 2.87 4.41
R 0.98 0.91 1.27
根据极差R值大小知，影响木瓜蛋白酶水解工艺各因素的主次顺序为：C＞A＞B，即pH＞温度＞时间，最佳的工艺条件为A2B2C3，而正交的试验最佳工艺条件为A3B1C3，经过验证实验，得出最佳酶解条件为A3B1C3，得率为6.7%。木瓜蛋白酶的最佳酶解条件为：时间30min、温度55℃、pH7.0。
6 讨论
6.1 酶解法与微波辅助热水法的比较
6.1.1 提取率的比较
由正交结果可以看出在最佳工艺条件下两种方法的香菇多糖提取率不同，结果见图9：
图9 不同浓度活性炭对脱色的影响
（图中1表示微波辅助热水法，2表示酶解法）
从图9可知，微波辅助热水法的提取率高于酶解法，可能是因为微波射线辐射于溶剂并透入细胞内部，可使溶剂及细胞液吸收微波能而温度升高，压力增大。当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，细胞内容物释放出来，转移并溶解于溶剂中，提高了多糖提取率。
6.1.2其它方面的比较
虽然微波辅助热水法的提取率高于酶解法，但是微波辅助热水法浸提时间长，耗费的能量较多，且多糖的纯度不高。酶解法不仅可以使可溶性多糖的提取率增加，并且反应条件温和，能保持天然产物的构象，较好地保持了多糖的药用价值。经木瓜蛋白酶作用后，蛋白酶将与多糖结合的蛋白质酶解，将多糖释放出来,在提高多糖的提取率的同时降低了蛋白质的含量。因此该工艺不仅提高了产率，同时增大了多糖的纯度，简化了多糖的纯化工作，大大增大了经济效益。
6.2 活性炭用量对的脱色效果的影响与多糖损失率的研究
由于香菇菌丝体在80℃烘干后颜色加深, 提取到的粗多糖也有较深
的颜色, 因此脱色在多糖的进一步纯化过程中是非常重要的一步。活性炭具有多孔结构, 它能吸附糖液中的色素物质, 具有脱色、脱臭的良好效果。但是, 要得到满意的结果, 必须选择质量好、可溶性灰分和杂质少的试剂, 并注意控制温度、pH值、搅拌与脱色时间等条件。以下讨论活性炭用量对脱色效果的影响。
将香菇多糖酶解液的pH值调至3.5，分别加入不同百分含量的活性炭，在20℃温度下脱色100min，比较活性炭用量对酶解液脱色效果的影响及对多糖含量的影响，结果见图10。
图10 不同浓度活性炭对脱色的影响
较高浓度的活性炭比低浓度的活性炭的脱色效果要好，但是随着活性炭的浓度的升高脱色率提高，但同时香菇多糖的损失率增加。综合考虑，在允许的多糖损失率范围内，所以应选择适当的活性炭浓度范围，大约1%的活性炭用量最为合适。
6.3 香菇粉粒度对提取率的影响
根据提取理论，样品粒度的大小对提取有一定的影响。香菇粉粒度在80～120目和大于200目时，多糖提取率较高。香菇粉粒度在120～200目之间时，提取率反而较低[17]。这可能是由于粒度较小后，由于多糖对样品颗粒的吸附效应增加，导致溶解于溶液中的多糖量减少。当粒度大于200目后，可能由于一部分的样品细胞结构被破坏，使细胞内多糖的
香菇多糖提取工艺的研究进展 香菇多糖提取工艺的研究进展 香菇Lentinusedodes 为担子菌纲伞形科真菌，是世界上第二大食用菌。香菇多糖是香菇中最重要的一种生物活性物质，具有抑制肿瘤、调节免疫、抗病毒和抗氧化等多方面的药理活性，且毒副作用小。香菇多糖的提取常用水提醇沉法、酸碱提取法，但存在提取工艺复杂、溶剂使用量大、时间长等缺点，而且容易造成多糖降解，生物活性降低。本文主要对近年来香菇多糖提取工艺优化研究方面的进展进行阐述。 1.超声波提取 超声波提取法是利用超声波特殊的物理性质，加速介质质点运动、空化作用、振动匀化等以增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂穿透力，从而使药效物质加速融人溶剂提高有效成分的得率。 王恒等用超声波辅助法从香菇中提取香菇多糖，通过实验优化确定出香菇多糖最佳提取工艺为超声功率200W ，料液比 35：1，超声时间40min ，香菇多糖提取率为6.72 ％。王俊颖等采用超声法浸提香菇多糖通过正交试验设计确定的最佳工艺为料水比1 : 25，超声温度60° C超声时间30min , 超声功率300W ，多糖得率为8.72 ％。李宏睿等采用正交试验设计，对香菇多糖的提取条件进行优化，并与单纯的热水浸提进行比较。结果表明，在料水比 l：25 ，超声时间35min ，超声功率105W ，热水浸提温度 90 ％，浸提时间20min 的条件下，提取效果最好，多糖提取率为13.75 ％，比单纯热水浸提法提高6.22％。 2.微波提取 微波辅助提取技术主要是通过调节微波加热的参数，有效地加热物料中的目标成分，对目标成分进行选择性提取。刘小丽等研究微波辅助法提取香菇多糖采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时
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香菇多糖的提取及其抗氧化性和保湿性评价 作者：王玢， 任清， 李奇， 董银卯， 赵云云 作者单位：王玢,赵云云(首都师范大学生命科学学院,北京,100037)， 任清,李奇,董银卯(北京工商大学植物资源研究开发北京市重点实验室,北京,100037) 刊名： 食用菌 英文刊名：EDIBLE FUNGI 年，卷(期)：2008,30(5) 被引用次数：4次 参考文献(11条) 1.李宝良;李书剑香菇多糖苯酚试剂测定研究[期刊论文]-中国卫生检验杂志 2005(11) 2.杨娟;吴谋成;张声华香菇蛋白多糖抗疲劳作用研究[期刊论文]-营养学报 2001(04) 3.周之国;周谟炯;程灵香菇多糖对大鼠血小板聚集功能的影响[期刊论文]-时珍国医国药 1999(04) 4.金道山;韩志涛;王士雯香菇多糖抗衰老作用的实验研究 1994(01) 5.张海岚;周建平;边洪荣香菇有效成分研究综述[期刊论文]-华北煤炭医学院学报 2004(01) 6.刘春如;易诚香菇的营养价值和药用价值[期刊论文]-中国林副特产 2002(01) 7.盛剑秋;杨淑英香菇多糖的免疫调节作用研究进展 1998(01) 8.芮菁香菇多糖的药理作用和临床应用概况 2000(01) 9.杜小豪;徐卫;杜雪洁护肤产品的保湿功能评价[期刊论文]-日用化学工业 2000(03) 10.刘骏结晶紫分光光度法测定Featon反应产生的羟自由基[期刊论文]-武汉工业学院学报 2005(02) 11.卯晓岚中国大型真菌 2000 引证文献(4条) 1.张智.焦春伟.胡惠萍.潘鸿辉食用菌抗衰老研究进展[期刊论文]-微生物学杂志 2010(3) 2.谢瑶.石萌萌.庞欣高效液相色谱及液相色谱-质谱联用技术在保健食品检测中的应用[期刊论文]-化学通报（印刷版） 2010(8) 3.陆娟.武哲斌.屈长青超声波辅助提取香菇多糖的研究[期刊论文]-安徽农业科学 2010(33) 4.郑永飞活性多糖的保健功能及其应用[期刊论文]-粮食与食品工业 2009(4) 本文链接：https://www.doczj.com/doc/298483017.html,/Periodical_syj200805044.aspx
第一部分：野生灵芝菌种的分离、扶壮、保藏和培养 前言 采集吉林长白山野生灵芝，经过菌种分离，鉴定为GANODERMA（英文名称）多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.) Karst．的菌种。经过纯化扶壮培养，成为一支优良的灵芝菌种，为灵芝菌丝体发酵培养和灵芝多糖的提取奠定了基础。 实验室流程：（百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种（恒温培养箱）菌种培养扶壮（恒温恒湿冷藏柜）优良菌种保藏（百级净化超净工作台)菌种分离菌种接种（摇床）发酵菌种摇瓶培养（用于接种菌种罐） 第二部分：灵芝菌丝体液体发酵培养 前言 液体发酵培养不同于灵芝子实体栽培，周期短，产量高，无污染，灵芝多糖含量高，节省木材和耕地。是一种灵芝多糖理想的工厂化现代科技生产方式。经过摇瓶培养的灵芝菌种接种于种子罐，待生长良好，在接种于扩大的发酵罐中，通过通气恒温培养，长成成年灵芝菌丝体，生长完全后，进行离心分离喷雾干燥，就得到相当于灵芝子实体的灵芝菌丝体粉，多糖含量达到15%左右。进一步提取加工得到高含量的灵芝多糖。 灵芝菌丝体发酵工艺流程:（配料罐）培养液的配制（菌种罐）菌种的发酵培养 （发酵罐）灵芝菌丝体发酵培养（离心机）灵芝菌丝体固液分离（浓缩液配制罐)灵芝菌丝体配制成浓缩液（喷雾干燥塔）浓缩液喷雾干燥，得到灵芝菌丝体粉 第三部分：灵芝菌丝体多糖的提取分离 前言 灵芝菌丝体粉，是大部分不溶解于水，食用以后象灵芝子实体一样，只有少部分成分被吸收，通过现代提取手段，将灵芝菌丝体经过提取罐的水提取，经过真空浓缩，在经过醇沉工艺，加工成可以全部被人体吸收，灵芝多糖含量提高到30-40%灵芝菌丝体提取物。极大的提高了功效，减少了服用量。 灵芝多糖提取工艺流程：(提取罐）灵芝菌丝体粉水提取（外循环真空浓缩罐）提取液真空浓缩（醇沉罐）浓缩液乙醇沉淀多糖（离心机）沉淀多糖分离 (浓缩液储罐）沉淀物配制成多糖浓缩液（喷雾干燥塔）灵芝多糖喷雾干燥 （粉碎机）灵芝多糖粉碎到100目（混合机）灵芝多糖粉批量混合（真空包装机）食品塑袋真空包装。灵芝多糖原料成品
香菇多糖提取工艺的研究 1引言 多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，广泛存在于动物、植物和微生物细胞壁中,是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子,尤其是一类重要的信息分子[1]。到目前为止，已有近300种的多糖化合物从天然产物中分离出来，其中植物提取水溶性多糖最为重要。从植物中提取多糖主要根据不同溶解度来选择溶剂进行。香菇多糖的提取一般有热水提取法、酸提取法、碱提取法、酶提取法和微波助提法等方法[2]，本文进行了浸提香菇多糖的工艺条件研究，以期获得香菇多糖的最佳提取条件，为其产业化生产提供有效的方法和技术参数。本实验采用各种溶剂和酶的处理,提取香菇多糖,保持多糖的生物活性，效果是明显的。 1.1香菇多糖的组成与药理价值 香菇多糖(LentinanLNT) 是一种β—1,3—葡聚糖，系从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖。多糖以甘露糖为主，含少量的葡萄糖、微量的岩藻糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等；肽链由天冬氨酸、组氨酸、丝氨酸、赖氨酸、谷氨酸等18种氨基酸组成。LNT的化学结构是一种以β—D—[1~3]葡萄糖残基为主链，侧链为(1—6)葡萄糖残基的葡聚糖，平均分子量约为50万道尔顿[3]。 香菇多糖1969年在日本首先发现，自此，国内外学者对LNT作了许多深人的研究。近年来，LNT广泛药理作用研究取得了很大进展。主要的药理价值有：免疫调节作用；抗肿瘤作用[4]；抗病毒作用；对寄生虫、霉菌、细菌等感染均有治疗作用；有抗衰老、抗辐射作用，还具有预防实验性高脂血症和高血糖作用。在临床上LNT还用于治疗小儿反复呼吸道感染，糖尿病，寻常型银屑病，硬皮病，面部扁平，尖锐湿疹等。此外，硫酸化香菇多糖具有显著抗HIV作用，香菇多糖在治疗胃
香菇多糖的提取纯化方法 吕红常秀莲* （烟台大学生命科学院，烟台264005） 摘要：香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具有生理活性的物质，具有抗病毒、抗肿瘤、增强人体免疫力等多种功能，在保健食品和药品开发方面具有广阔的应用前景。概括介绍当前常用的热水浸提法、酶解法、微波提取法和深层发酵培养法等6种香菇多糖的提取方法。并简单比较香菇多糖提取的这几种方法并介绍了超滤-渗滤法和活性炭联合陶瓷膜超滤法这两种香菇多糖的纯化方法。 关键词：香菇多糖; 提取; 纯化; 抗癌;抗病毒 Extraction and purification of Lentinan Lvhong changxiulian* (Yantai university life academy of sciences, Yantai 26005) Abstract: Lentinan was isolated from mushrooms with an important physiological activity of substances with anti-virus, anti-cancer, enhance immunity and other functions. It has broad application prospect s in health food and drug’s development. Give overview of the current formulation used in hot water, enzymatic method, microwave extraction and deep fermentation method 6 kinds of mushroom polysaccharides method, And Introduced the Ultrafiltration-filtration method and the Activated carbon ceramic membrane joint ultrafiltration method of Lentinan purification. Keywords: Mushroom polysaccharide ; Separation ; cancer ; antiviral 1引言 香菇多糖(Lentinan) 是一种β-1,3-葡聚糖, 是从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖，能治疗癌症, 抗恶性肿瘤, 抗病毒, 抗感染, 提高人体免疫力等多种生理功能。目前国内对香菇多糖的分离有了很大发展，主要采用的方法有传统热水提取法、酸提取法、碱提取法、这些方法都有其优点，也有其难以克服的不足之处。与传统方法相比微波辅助提取法具有设备简单，快速，高效，安全等特点。 2香菇多糖的提取方法 2.1 热水浸提法 这是最早采用的一种传统方法：香菇多糖溶于水，热水浸提时，香菇组织细胞膨胀破裂，多糖成分浸出。 热水浸提香菇多糖，浸提时的料液比、温度、时间、pH、醇析时的乙醇添加倍数及提取次数是影响多糖得率的主要因素。 对料液比而言，若加水太少，提取不彻底；加水太多，容易降低提取液的固形物含量，不利于以后的分离，且加重了工业生产中的后续工艺，一般为1：20左右。对温度来说，随着提取温度的升高，粗多糖得率逐渐升高，在80%一95%时达到高峰，再提高温度时，粗多糖得率升高趋势趋于平缓，考虑到高温会破坏多糖的结构，影响其生物活性，同时高温提取对工业化生产的设备要求更严格。所以，提取温度一般以80 ℃一95 ℃为宜。 随着提取时间的延长，粗多糖得率逐渐增加，0.5 h一3 h之间趋势明显，继续延长提取时间，多糖得率加趋势逐渐趋于平缓，一般浸提时间为8 h一12 h。热水浸提时的pH为自然pH值，大约在6-8之间。而对醇析时提取液的乙醇浓度来说，随着其逐渐升高，多糖得率亦
1.多糖的提取方法 生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3 大类。多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位，决定在提取之前是否做预处理。动物多糖和微生物多糖多有脂质包围，一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂，释放多糖。植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类，在提取前，应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理，目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等。 1．1溶剂法 1．1．1水提醇沉法 水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法。多糖是极性大分子化合物，提取时应选择水、醇等极性强的溶剂。用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提渗滤，然后将提取液浓缩后，在浓缩液中加乙醇，使其最终体积分数达到70 %左右，利用多糖不溶于乙醇的性质，使多糖从提取液中沉淀出来，室温静置5 h，多糖的质量分数和得率均较高。影响多糖提取率的因素有：水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。 水提醇沉法提取多糖不需特殊设备，生产工艺成本低，安全，适合工业化大生产，是一种可取的提取方法。但由于水的极性大，容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来，从而使提取液存放时腐败变质，为后续的分离带来困难，且该法提取比较耗时，提取率也不高。1．1．2酸提法 为了提高多糖的提取率，在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH 值下难以溶解，可用乙酸或盐酸使提取液成酸性，再加乙醇使多糖沉淀析出，也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出。 由于H＋的存在抑制了酸性杂质的溶出，稀酸提取法提取得到的多糖产品纯度相对较高，但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂，且酸会对容器造成腐蚀，除弱酸外，一般不宜采用。因此酸提法也存在一定的不足之处。 1．1．3碱提法 多糖在碱性溶液中稳定，碱有利于酸性多糖的浸出，可提高多糖的收率，缩短提取时间，但提取液中含有其它杂质，使粘度过大，过滤困难，且浸提液有较浓的碱味，溶液颜色呈黄色，这样会影响成品的风味和色泽。 1．1．4超临界流体萃取法 超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新的提取分离技术。超临界流 体是指物质处于临界温度和临界压力以上时的状态，这种流体兼有液体和气体的特点，密度大，粘稠度小，有极高的溶解，渗透到提取材料的基质中，发挥非常有效的萃取功能。而且这种溶解能力随着压力的升高而增大，提取结束后，再通过减压将其释放出来，具有保持有效成分的活性和无溶剂残留等优点。由于CO2的超临界条件（TC＝304．6 ℃，Tp＝7．38 MPa）容易达到，常用于超临界萃取的溶剂，在压力为8～40 MPa 时的超临界CO2足以溶解任何非极性、中极性化合物，在加入改性剂后则可溶解极性化物。 该法的缺点是设备复杂，运行成本高，提取范围有限。 1．2酶解法 1．2．1单一酶解法 单一酶解法指的是使用一种酶来提取多糖，从而提高提取率的生物技术。其中经常使用的酶有蛋白酶、纤维素酶等。蛋白酶对植物细胞中游离的蛋白质具有分解作用，使其结构变得松散；蛋白酶还会使糖蛋白和蛋白聚糖中游离的蛋白质水解，降低它们对原料的结合
香菇多糖提取 提取法： 用物理提取的方法生产精细化学品，即通过将某一种物质按一定的要求从混合物中提取出来从而获得产品的方法。 张杨杨 精化1122 1、认识香菇多糖 (1)香菇多糖结构式 分子式：〔C42H72O36〕n 分子量：〔1152.9995〕n
(2)香菇多糖性质 香菇多糖（l e n t i n a n;L N T）是从香菇中分离纯化的一种葡聚糖，是以增强T细胞和巨噬细胞功能为主的免疫增强剂。 密度：1.88g/c m3；沸点：1472℃a t760m m H g。 溶于碱溶液或甲酸，微溶于热水或二甲亚砜，不溶于冷水、醇、乙醚、氯仿、吡啶或六甲基磷酰胺。对硫酸和盐酸稳定。 (3)香菇多糖的功能 香菇多糖具有激活细胞免疫、调节多种体液免疫因子、诱导α-干扰素生成，调节机体免疫应答反应，诱导白细胞对肿瘤浸润，导致肿瘤部位血管扩张、出血、坏死，阻止病毒与宿主细胞的结合，提高S O D〔超氧化物歧化酶〕活性，抑制M D A〔丙二醛〕生成，抗脂质氧化，降低胆固醇，调节糖代谢、改善糖耐量、扩张胃肠道产生饱腹感而减轻食欲，降低血糖等功能。 【丙二醛】 英文名：M a l o n d i a l d e h y d e;m a l o n i c d i a l d e h y d e;P r o p a n e d i a l 简称：M D A 分子式O H C-C H2-C H O 分子量72.0634 无色针状晶体，熔点72～74℃，一般含两个结晶水，60℃下真空干燥可得无水物，易潮解，纯的丙二醛在中性条件下稳定，但在酸性条件下不稳定。 由乙醛和甲酸乙酯在碱作用下缩合而得，可在高真空下升华精制，主要用于医药中间体、感光色素的原料。与蛋白质不相容，有潜在的致癌性。
超声波法提取香菇多糖 研究背景： 香菇多糖的性质：香菇多糖以β~1，3葡聚糖为主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能 用途：抗肿瘤药。为化、放疗辅助药。主要用于胃癌、肺癌、乳腺癌。 生产技术状况：因为香菇多糖的用途广泛，提取比较方便，越来越多的人投身于这方面的研究，是的提取技术方面的大幅度提升。状况良好。 操作过程： 方案设计：香菇多糖的提取 香菇预先烘干→称取干香菇15克→粉碎→圆底烧瓶→200ml热水70℃→超声波发生器（水预热在60℃左右）→提取45min（中间停顿2次，每次5min）→过滤→滤渣→等滤液体积热水70℃→提取30min（中间超声波停2次，每次5min）→过滤→合并滤液→抽滤→滤液→量体积标识贮藏备用 香菇多糖的测定：1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质：采用氯化钙法：将溶液PH 调节至8---9，加热到85℃，加入氯化钙使浓度达5% (w/v)，搅拌，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液。 2.制作标准曲线：准确吸取1mg/ ml 葡萄糖标准溶液1.0 、2.0 、 3.0 、 4.0 、 5.0ml 置于50ml 容量瓶定容，准确吸取该系列溶液各2ml ，然后加入6%苯酚1.0ml 及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。 3. 样品的测定：取去完蛋白的样液2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度。将吸光度控制在0.2-0.8 人员分工：我们分成两组来完成实验，因为有两组待测夜要进行测定。然后标准溶液是由第一大组完成。由于操作比较简单，我们就一起完成。1人对溶液进行去蛋白，2人制作待测液，1人对待测液进行测定，并记录数据。 实验现象：配置待测液时，加入浓硫酸后溶液变成橙黄色。从而可来额定吸光度。（附照片）总结分析
银耳多糖的提取工艺 李帅涛 摘要：国内常用的银耳多糖提取方法有热水提取法，酸碱提取法和酶解提取法等，其中酶解提取法具有提取时间短，条件温和等优点。本试验选取了酶解时间和提取时间作为研究对象，探讨了不同条件下银耳多糖的收率，由试验结果表明，解法提取银耳多糖的最适条件为：银耳与水的比例为1g:50ml,加入果胶酶浓度为1%，酶解时间45min,提取时间60min。 关键词：银耳多糖；酶解法；提取工艺 引言：我国银耳资源丰富，为开发应用银耳多糖提供了有利条件。近年来，有关银耳多糖的研究越来越多，但这些研究多为银耳多糖的化学特性和药理作用方面的研究，少有关于银耳中提取银耳多糖的研究。目前银耳多糖的提取方法多为热水浸提法或酸碱法提取，但热水浸提法耗时过长，且收率较底，费时费力，因此不适合大规模的工业生产，而酸碱法提取虽然提取时间较短，却会破坏银耳多糖立的生物活性，使提取到的银耳多糖药用效果大大下降。本试验主要研究使用果胶酶酶解银耳，热水提取的技术来提取银耳多糖的方法。而如今生物工程工艺发展迅速，生物制品价格不断下降，这为用酶解法提取银耳多糖提供了可行性。用酶解法提取银耳多糖不仅能缩短单纯用热水法提取的时间，还不会像酸碱法那样破坏银耳多糖的生物活性。 材料与设备: ①实验材料：银耳;葡萄糖(分析纯):取1g葡萄糖加入1000ml容量瓶中，定容至1000ml;果胶酶：按100ml:1g加入果胶酶;苯酚（分析纯）;精确量取6ml苯酚放入100ml容量瓶中，定容至100ml;浓硫酸(发烟硫酸) ②实验设备：101型电热鼓风干燥；YP202N型电子天平；HH系列恒温水浴锅；电子万用炉;TDZ5-WS型台式低俗离心机；722E型可见分光光度计 分离与纯化：取市售银耳适量，洗净，70℃烘干后，破碎成粉末状，称取粉末0.5g（2%），果胶酶0.25g（1%），同时加入蒸馏水25mL，迅速置于45℃水浴锅中酶解，3个样品为一组，第一组酶解30min，第二组酶解45min，第三组酶解60min。酶解后迅速升温至98℃将酶灭活，然后每组样品分别于98℃水浴中保温浸提30min,45min,60min，浸提完成后置于冷水中冷却至室温，然后于4500rpm离心分离10min，最后取上清液待用。 含糖量测定：银耳浸提液离心后，分别取上清液1ml,加水19ml,即稀释20倍，取银耳浸提稀释液1mL于一洁净试管中，再加入苯酚试液1.0mL，浓硫酸5mL，混匀，室温放置30min，冷却后，于490nm处测定吸光度。 结果与分析：本试验采用果胶酶酶解银耳的方法提取银耳多糖。试验讨论了不同酶解时间与不同提取时间对提取效果的影响，最终确定最佳提取工艺为：在45℃下，用1%果胶酶酶解，水与银耳比例为100ml:1g,酶解时间为45min，然后于98℃热水浴中浸提60min。用此法提取银耳多糖，提取率可达40% ，远高于传统的银耳多糖提取工艺。相比传统工艺，果胶酶提取银耳多糖不仅有较高的提取率，还可以明显缩短提取的时间。银耳多糖的生物活性在长时间高温环境和酸碱性条件下容易受到破坏，酶解法提取环境温和，且提取时间较短，能较好的保留银耳多糖的生物活性。固定酶解时间时，提高提取时间可显著提高提取效果，改变酶解时间时，提取效果有提高，但不大，且从45min 增加到60min增加不显著。
香菇多糖的提取纯化及其理化性质的研究3 张 欣 吕作舟 (华中农业大学 武汉 430070) 摘要 本研究以香菇菌盖、菌柄、菌丝体为试材,采用水浸法、碱浸法提取香菇多糖。并且,从香菇菌盖中提取纯化得到两种新多糖:香菇多糖A(水浸物)和香菇多糖B(碱浸物)。 关键词 香菇 菌盖 多糖 提取 纯化 理化性质 香菇(Lentinula edodes)不仅是一种美味佳肴,也是一种著名的药用菌。我国历代的医药学家对香菇的药性及功能均有著述,如《日用本草》认为香菇“益气、不饥、治风、破血”〔1〕。现代研究结果表明,香菇中含有能降低血浆胆固醇的香菇嘌呤〔2〕,含有诱生干扰素的双链核糖核酸〔3〕,且含有抗肿瘤活性物质———香菇多糖及香菇糖肽〔4,5〕。 1970年G oro Chihara首先从香菇子实体中浸提出6种香菇多糖,并证明其中一种具有明显的抗肿瘤作用,定名为Lentinan〔5〕。自此,世界各地掀起了一股从大型真菌中寻找抗肿瘤药物的热潮。有关香菇多糖的研究尤其活跃,包括提取工艺及分离纯化研究,香菇多糖理化性质及药用价值研究〔6,7,8〕。但对多糖理化性质、结构、药效、药理等方面仍无定论,仍须继续深入研究。 本研究以香菇的菌盖、菌柄、菌丝体为试材,分别采用水浸法、碱浸法提取香菇多糖,检测分析了粗多糖、多糖、蛋白质与原材料之间量的关系,并且,从香菇菌盖中提纯了两种新多糖,对其理化性质和结构进行了初步研究,为进一步对香菇多糖的结构分析、药效、药理实验提供参考。 本研究主要结果如下: 11以香菇菌盖、菌柄、菌丝体为试材,采用水浸法、碱浸法提取香菇多糖。粗多糖、多糖得率都以菌盖的水浸物为最高,而以菌丝体的碱浸物为最低。蛋白质得率以菌柄水浸物为最高,以菌丝体的碱浸物为最低。 21氨基酸自动分析仪的分析结果表明:香菇菌盖水浸物、碱浸物中氨基酸含量丰富,其中包括人体必需氨基酸。水浸物主要含天门冬氨酸、谷氨酸;碱浸物主要含天门冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸。 31采用水浸法、碱浸法从香菇菌盖中提取粗多糖,然后经乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白、CT AB (十六烷基三甲基溴化铵)络合沉淀、氨化钠溶液溶解、透析,得到两种多糖:香菇多糖A(水浸物)和香菇多糖B(碱浸物)〔9〕。这种纯化方法具有简便、经济的特点。 41多糖的纸层析结果表明:多糖A、多糖B均仅为一个斑点,R f值分别为0152,0120。多糖的PAGE电泳结果表明:多糖A,B均为紫红色的单一谱带,R f值分别为0151,0162;它们均从负极向正极移动,表明它们是酸性多糖。紫外光谱分析结果表明:多糖A、多糖B均未发现核酸(260nm)和蛋白质(280nm)特征吸收峰〔10〕。组分含量分析表明:多糖A、多糖B均无含氮物质存在,但含少量灰分和水分。以上对多糖的鉴定结果表明:多糖A、多糖B均一性高,多糖A的纯度为7911%,多糖B的纯度为8312%,符合化学定性定量标准;它们是酸性多糖。 51多糖A,B均为灰白色粉未。多糖B不溶于稀酸。多糖A,B均溶于水、稀碱,尤易溶于热水,不溶于乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯等有机溶剂,其水溶液透明粘稠状,可被5%CT AB络合沉淀。旋光计测得多糖A的旋光率为〔α〕D25℃+ 4311°(水),多糖B的旋光率为〔α〕D25℃+2513°(水)。采用改良型膜渗透压法测得香菇多糖A的数均分量为8131×104,香菇多糖B为9140×104。 61红外光谱分析结果表明,多糖A、多糖B具类似结构,但不属同一种物质。两种多糖在890cm-1均具吸收峰,在840cm-1均无吸收峰,表明它们为β-糖苷〔11〕;多糖A,B都含有-C OO-基团。因此,香菇多糖A、香菇多糖B均是β-酸性异多糖。 71纸层析结果表明:多糖A,B均由葡萄糖(G lc)、半乳糖(G al)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(X yl)、鼠李糖(Rha)构成。用正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶5)为展开剂,以葡萄糖的R f值为1100,则它们的R f值之比为,G lc∶G al∶Ara∶X yl∶Rha= 1100∶1117∶1152∶1176∶2117。气相色谱检测多糖的单糖组成及摩尔比,多糖A为Ara∶Rha∶X yl∶G al∶G lc= 4136∶2103∶1100∶5164∶13180;多糖B为Ara∶Rha∶X yl∶G al∶G lc=9137∶1100∶1164∶7119∶23136。 3 湖北省重点科技计划项目。收稿日期 1999—07—20 43中国食用菌 E DI BLE FUNGI OF CHI NA V ol118,N o16
香菇是我国传统的药食两用食品，含有多种有效药用成分。尤其是香菇多糖,是一种宿主免疫增强剂,具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能。医学研究证明,它是通过刺激机体的免疫系统使机体的免疫功能得到恢复和提高,由机体本身的抵抗力去杀死肿瘤细胞。它的作用是间接的，毒副作用小,在临床上具有很好的应用前景[1-2]。香菇多糖在日本已生产并外销。但因工艺复杂,收率低,成本高,普通肿瘤病人无法接受。为此,我们对香菇多糖的提取工艺进行研究,初步探讨出较为理想的浸提工艺,希望为其工业化生产提供一定的理论参考。 1材料与方法 1.1材料与试剂 香菇：购自西安市农贸市场；D318型阴离子交换树脂,LX-200型阴离子交换树脂，D201×7型阴离子交换树脂，LX-67型阴离子交换树脂：均购自西安蓝深公司;葡萄糖,苯酚,浓硫酸,无水乙醇,考马斯亮蓝G-205等均为分析纯。 1.2主要仪器设备 752型紫外可见分光光度计：上海光谱仪器有限公司；WP700TL23-K5微波炉：格兰仕电器有限公司；电热恒温水浴锅：北京长源实验设备厂；80-2B台式低速离心机：湖南星科科学仪器有限公司；Delta320pH 计：梅特勒－托利多仪器（上海）有限公司。 1.3提取工艺[3-4] 干香菇→粉碎→加水浸泡20min→微波辐射→热水浸提30min→离心取上清液→浓缩→加乙醇沉淀多糖→离心分离多糖→多糖粗品制成溶液→上树脂柱去除杂蛋白→流出液真空干燥得香菇多糖产物试验中均以1g干香菇粉为提取对象。 1.4检测方法 香菇多糖含量测定：采用苯酚硫酸法[5]。测得标准 微波辅助法提取香菇多糖的工艺 刘小丽，黄晋杰 （长安大学环境科学与工程学院，陕西西安710054） 摘要：研究微波辅助法提取香菇多糖并用离子交换树脂去除杂质蛋白的工艺方法。采用单因素试验对固液比、微波辐射功率、辐射时间、乙醇用量以及杂蛋白的去除条件分别进行了考察。试验结果表明最佳提取工艺条件为:固液比1g∶20mL,微波辐射功率为280W，辐射时间5min，乙醇与多糖提取液体积比为4∶1，香菇多糖提取率可达到9.46%； 采用LX-67阴离子交换树脂在料液pH9时可有效去除蛋白质杂质，多糖纯度可达到85%。 关键词：香菇多糖；微波；离子交换树脂 Study on Microwave-assisted Extraction of Lentinan from Mushroom LIU Xiao-li，HUANG Jin-jie （College of Environmental Science and Engineering，Chang＇an University，Xi'an710054,Sh a anxi，China）Abstract:The methods of extracting lentinan from mushroom with micowave assisting were studied.The ratio of solid to water（g/mL）,microwave power,microwave extraction time,the usage of ethanol,and the remove of protein were studied respectively by the single factor test.The results showed that the optimum conditions of extraction were as follows:the ratio of material to liquid of1g∶20mL,microwave radiation power of280W,the radiation time for5min,the volume ratio of ethanol to liquor of4∶1,under this conditions the extraction rate of polysaccharide can get9.46%.The LX-67negative ion exchange resins were used to remove protein from the rude lentinan with the liquor at pH9,and the purity of lentinan can get85%. Key words:lentinan；microwave；ion exchange resins 作者简介：刘小丽（1975—），女（汉），讲师，在读博士，研究方向：食 品和药物中有用成分提取与分离。
一、植物多糖的提取 1 溶剂提取法 1．1 水提法 水对植物组织的穿透力强，提取效率高，在生产上使用安全、经济。用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提。一般植物多糖提取采用热水浸提法，该法所得多糖提取液可直接或离心除去小溶物；或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，沉淀提纯多糖；但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离；还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离；其中，以乙醇沉淀最为普遍。但以根茎为主的植物体,细胞壁多糖含量高,热水直接提取率不高。此时为破坏细胞壁,增加多糖的溶出，有两种处理方法:一为酶解,二为弱碱溶解。 1．2酸碱提法 有些多糖适合用稀酸提取，并且能得到更高的提取率。但酸提法只在一些特定的植物多糖提取中占有优势，目前报道的并不多。而且即使有优势，在操作上还应严格控制酸度，因为酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂。 有些多糖在碱液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。采用的稀碱多位为0．1mol／L氢氧化钠、氢氧化钾，为防止多糖降解，常通以氮气或加入硼氢化钠或硼氢化钾。同样，碱提优势也是因多糖类的不同而异。与
酸提类似，碱提中碱的浓度也应得到有效控制，因为有些多糖在碱性较强时会水解。另外，稀酸、稀碱提取液应迅速中和或迅速透析，浓缩与醇析而获得多糖沉淀。
1．4 生物酶提取法 酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶，纤维素酶，果胶酶等。 1．5 超声提取法 超声波是一种高频率的机械波，其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏，有利用植物有效成分的释放，而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流，有效地减小、消除与水相之间的阻滞层，加大了传质效率，有助于溶质的扩散。另外，超声波的热效应使水温基本在57℃，对原料有水浴作用。超声波提取与传统的提取方法相比，有提取效率高、时间短、耗能低等优点。超声提取的影响因素有：超声时间、超声频率（一般低频中提取效率高，但也有例外）、料液比和温度等。 1．6 微波提取 微波是频率介于300MHz和300GHz之间的非电离电磁波，微波提取的原理是微射线辐射于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部，由于溶剂及细胞液吸收微波能细胞内部温度升高，压力增大，当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来，传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。微波技术应用于植物细胞破壁，有效地提高了收率。具有穿透力强、选择性高、加
多糖的提取和纯化目前，真菌多糖的提取可从子实体和采用深层培养发酵液的菌丝中分离获得，但以从子实体中提取多糖为主。首先是将子实体粉碎，加入甲醇或乙醇乙醚1:1混合液，水浴加热搅拌1一3小时除去表面脂肪。其次是用残渣提取多糖，常用的方法有不同温度下的水提法、稀酸提法、冷热稀碱提法。水提法采用的较多，适合于提取水溶性多糖。稀酸提取法适用于提取酸溶性多糖、时间宜短，温度不超过50℃，以防止糖昔键断裂。稀碱法适合于提取碱溶性糖。然后除去小分子杂质，常采用透析法，将多糖提取液置于半透膜透析袋中，逆向流水透析1一3天。第四步是沉淀多糖。大部分多糖在有机溶剂中的溶解度极小，所以可用有机溶剂来沉淀。常用4一5倍低级醇、丙酮，一般在pH=7.0左右沉淀多糖，制得粗多糖。最后是除去蛋白质。除去多糖中的蛋白质常用的方法是三氯醋酸法。得到的溶液基本上是没有蛋白质与小分子杂质的多糖混合物或单一多糖。 多糖的纯化是将多糖混合物分离为单一的多糖。纯化方法很多，主要纯化方法有:(l)分步沉淀法根据不同多糖在不同浓度的低级醇或酮中具有不同溶解度的性质，逐次按比例由小而大加入这些醇或酮分步沉淀。此法适用于分离各种溶解度相差较大的多糖。(2)盐析法根据不同多糖在不同浓度盐中具有不同溶解度而分离。 纯度鉴定和分子量测定多糖纯度标准不能用通常化合物纯度标准来衡量，因为我们所说的多糖纯品实质上是一定分子量范围内的均一组成。因此，测得的分子量一般为平均分子量。过去常用粘度法、蒸气压渗透计法、沉降法、超速离心法、光散射法等测定高分子化合物分子量的方法测定真菌多糖的分子量，但由于这些方法测定起来比较麻烦，且误差较大，现多数已不采用。目前实验室常用的方法为凝胶过滤法和高压液相色谱法，对于分子量小于1百万的多糖用高压液相法为最好。 1.2.1发酵、提取 取香菇465菌株斜面菌种接人摇瓶培养基中振荡培养，逐级扩大培养至10O0L，25℃下通 气培养72h，压滤，得香菇深层培养菌丝体。 上述菌丝体经水洗涤后，用3倍量热水(90一100℃)浸取3h，浸取液经浓缩加3倍量95肠乙 醇，离心得乙醇沉淀物一Le[‘’。 1.2。2分离、纯化 取Le上样于DEAE一纤维素柱上，用O。Olmol/L pH 6.95 Tris-HCI缓冲液洗脱，洗脱液分 部收集，分别用UV(280nm)和酚硫酸法测定其吸收值(A值)，合并吸收峰重叠的洗脱液，经浓 缩、透析、冻干得淡黄色絮状物Le一2· Le一2进一步用DEAE一纤维素(DE52型)分离，先用pH7.8的0.oosmol/L硼酸缓冲液洗脱， 后用含lmol/L NaCI的o.Zmol/L硼酸缓冲液洗脱.各洗脱液按上法用UV230nm和酚硫酸法 检测，分别收集既含肤又含糖的洗脱液.用o.005mol/L硼酸缓冲液洗脱的组分为Le一2一1，用含 lmol/L NaCI的硼酸缓冲液洗脱的组分称Le一2一2o 1.2.3鉴定 1.2.3.1纯度 (l)HPLC法将样品配成1%浓度后进样.进样量20召L。流动相:0.002mol/L NaAc;
香菇多糖的提取技术 作者：唐庆菊学号：19 摘要：香菇多糖是香菇中分离出的一种重要的具有生理活性的物质，具有抗病毒、抗肿瘤、增强人体免疫力等多种功能，在保健食品和药品开发方面具有广阔的应用前景，本综述通过对当前常用的热水浸提法、酶解法、微波提取法和深层发酵培养法等6种香菇多糖的提取方法进行概述，具体的阐述了深层发酵液中香菇胞内、胞外多糖的提取、香菇多糖的微波提取法。并展望了其今后研究方向及其开发应用前景。 关键词：香菇多糖、提取 1 引言 多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分,广泛存在于动物,植物和微生物细胞壁中,是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子.,尤其是一类重要的信息分子.到目前为止,已有近300种的多糖化合物从天然产物中分离出来,其中植物提取水溶性多糖最为重要.从植物中提取多糖主要根据不同溶解度来选择溶剂进行。香菇多糖的提取方法一般有热水提取法,酸提取法,碱提取法,酶提取法和微波助提法等方法.. 1．1.香菇多糖的组成及理化性质 香菇多糖又称香蕈、椎耳、香信、冬菰、厚菇、花菇，英文名：Lentinan。香菇是我国传统的著名食用菌，在世界上最早人工驯化栽培。香菇营养丰富，味道鲜美，被视为“菇中之王。
香菇多糖(LentinanLNT) 是一种β—1,3—葡聚糖,是从担子菌纲伞菌科真菌香菇子实体中提取分离纯化获得的均一组分的多糖.多糖以甘露糖为主,含少量的葡萄糖,微量的岩藻糖,半乳糖,木糖,阿拉伯糖等;肽链由天冬氨酸,组氨酸,丝氨酸,赖氨酸,谷氨酸等18种氨基酸组成.LNT的化学结构是一种以β—D—[1~3]葡萄糖残基为主链,侧链为(1—6)葡萄糖残基的葡聚糖,平均分子量约为50万道尔顿。 香菇多糖成品为白色粉末状固体，对光和热稳定。在水中溶解度为3g/L；能溶解于0.5mol/L氢氧化钠，溶解度可达50g/L-100g/L；不溶于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂中。香菇多糖具有吸湿性，在相对湿度为92.5%，温度为25摄氏度的环境中放置15天，吸水量可达40%。 1.2营养价值 香菇含有的10余种氨基酸，其中有异亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、缬氨酸等7种人体必需的氨基酸及维生素B1、B2、PP及矿物盐和粗纤维等。 香菇中含不饱和脂肪酸甚高。除了含有还含有麦角甾醇（ergosterol）外，还有菌甾醇(fungi sterol)，尤其所含大量麦角甾醇可转变为维生素D，有增强人体抗疾病和预防感冒的功效； 香菇中还有腺嘌呤（eriadenine）和胆碱，可预防肝硬化和血管硬化； 香菇中又含酪酸氧化酶，有降低血压的功效。 香菇中还分离出降血清胆固醇的成分（C6H11O4N5,C9H11O3N5） 香菇多糖能提
中药多糖提取工艺的研究进展 于红梅 （聊城大学农学院，山东，聊城，252059） 摘要：中药对动物免疫功能具有多方面的影响。近年来，大量研究结果表明，中药可促进免疫器官的发育，提高机体的免疫力，并通过激活单核巨噬细胞和天然杀伤细胞、促进T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖、分化和免疫球蛋白的产生，增强机体的抗病力；中药的活性有降低肿瘤细胞端粒酶活性的作用，表明中药在抗肿瘤方面具有一定潜力。 关键词：中药；提取；方法 中药化学成分复杂，药材往往需要经过提取、纯化处理。中药提取即利用现代技术最大限度提取其中的有效成分，尽可能避免或减少杂质类的溶出，并在一定程度上降低毒副作用，提高中药材资源的附加值。 中药提取在我国已有悠久的历史，春秋战国时期的《黄帝内经》是我国现存最早的医学药典之一，其已记载了经过简单提取的汤、丸、膏、药酒等药物剂型。东汉著名的医学家张仲景编著的《伤寒杂病论》中也有经过提取的煎剂、浸剂、软膏剂等。东汉时期成书的《神农本草经》，是我国现存最早的药物学专著，书中记载“药性有宜丸者，宜散者，宜水煮者，宜酒渍者，宜膏煎者，亦有一物煎煮者，亦有不可入汤、酒者，并随药性，不得违越”。 清明时期，伟大的医学家、药学家李时珍著作的《本草纲目》中，记载了当时我国的中药提取，已不限于一些简单的提取制剂，出现了一些提纯品，书中还记载了蒸馏、结晶、升华、沉淀、干燥等现代化学中应用的一些操作方法[m]。 新中国成立以来，随着现代科学技术的发展，为了进一步开大利用中药材，提取中草药有效提取物在中药生产过程中所占比例越来越重，由于中药材药性、有效成分的不同，中药提取应根据中药材以及目标产物的特性，选择不同的提取方法及提取工艺条件进行提取，中药提取纯化方法为中药实现生产向专业化和现代化方向迈进。 1水提取法 水提取法即以水为溶剂，将药材一定温度加热，煎煮一定时间，将有效成分提取出来的一种常用方法，是我国最为传统的提取方法，对有效成分尚未清楚的药材或方剂进行剂型改进时，通常先采用水提取粗提。水提法是中药制剂生产中首选的提取方法，也是多糖提取最为常用的提取方法。徐青梅[]应用水提取法提取黄芪多糖，通过单因素实验和正交实验设计优化实验得到黄芪多糖提取的最佳提取条件。实验结果表明，黄芪多糖最佳提取条件为：提
多糖的生物活性及制备工艺研究 摘要：多糖是一种自然界中含量丰富的生物大分子，其具有复杂的结构及多方面的生物活性功能。本文综述了多糖的一些主要生物活性，如抗炎、抗病毒、抗肿瘤、降血糖、抗补体等药理作用，以及多糖的提取、分离纯化等制备工艺的研究。其大致流程包括活性成分的确定、对原料药物的预处理、最佳提取分离工艺的选择、对粗品的提纯及纯化、精制多糖成品、多糖组分分析等。虽然近几十年来多糖研究取得了很大进步，由于其结构的复杂性增加了研究的难度，因此多糖的分离纯化方法发展依然缓慢，很多技术环节仍有待发展。 关键词：多糖；生物活性；制备工艺；提取；分离纯化 多糖是一类由酮糖或者醛糖通过糖苷键连接而成的，为一种天然高分子多聚物，其在自然界含量丰富。多糖及其复合物是来自于高等植、动物细胞膜和微生物细胞壁中的自然界含量丰富的天然大分子物质之一，与人类生活紧密相关，对维持生命活动起着至关重要的作用"和蛋白质、核酸、脂类构成了最基本的4类生命物质[1]。本文就国内外多糖的提取工艺方面作一综述，为进一步研究其生物活性奠定基础。 1 多糖的生物活性 1.1抗肿瘤作用 具有抗肿瘤活性的多糖大多是无毒性且具有诸如诱导细胞分化、刺激造血、抗转移[2]、抗新生血管生成[3]和诱导NO产生[4]等生物活性。它们大多不直接作用于肿瘤细胞，而是通过激活机体的免疫系统起作用,即促进淋巴细胞、巨噬细胞和自然杀伤细胞的成熟、分化和繁殖[5]，同时活化网上内皮系统和补体，促进各种细胞因子的生成[6]，最终抑制肿瘤细胞的生长或导致肿瘤细胞的凋亡。 1.2 抗病毒作用 20世纪70年代以后发现有些多糖具有抗疱疹病毒及流感病毒作用，特别是80年代发现多糖具抗艾滋病病毒(HIV)作用。 1.3 降血糖作用 多糖是有10个以上单糖缩合去水，以糖苷键形式结合形成的多聚糖。它与单糖、寡糖的性质不同，不但不会使血糖升高,而且能降低血糖。有望成为一类新的降血糖药物。 1.4 抗补体作用