神经干细胞的培养鉴定及分化

神经干细胞的培养鉴定及分化

朱琼1，皋月娟2，高顺记1，陈重1，刘政1，徐亚丽1(1解放军第三军医大学第二附属医院超声科，重庆市400037；2解放军第三○二医院超声科，北京市 100039)

【摘要】摘要

【期刊名称】中国组织工程研究

【年(卷),期】2017(021)017

【总页数】6

【关键词】干细胞；分化；神经干细胞；培养；鉴定；血清；诱导分化；国家自然科学基金

背景：神经干细胞在神经损伤修复和退行性疾病中有广泛的应用前景，体外培养鉴定及促神经元诱导分化是后续研究的基础。

目的：采用悬浮神经球培养法分离培养神经干细胞并对其鉴定，了解生物学特性。

方法：采用悬浮神经球培养法从C57BL/6胎鼠大脑半球分离培养神经干细胞，观察形态特征及超微结构，CCK-8法绘制生长曲线，流式细胞仪检测细胞周期，免疫荧光法检测特异性标志蛋白Nestin的表达；用体积分数为1%和10%的血清诱导分化后，免疫荧光法检测GFAP、βⅢ-tubulin和MBP的表达。

结果与结论：①体外培养得到悬浮生长的神经球，生长曲线和细胞周期表明细胞增殖力强；②透射电镜观察到神经干细胞核浆比高，呈未分化状态；③N estin 免疫荧光阳性；④不同体积分数的血清诱导后均可分化为星形胶质细胞、神经元和少突胶质细胞，体积分数为1%血清能诱导分化得到更多的神经元细