![【小初高学习]2017-2018学年高中生物 第三章 酶的应用技术实践 第二节 制备和应用固定化酶素](https://img.doczj.com/img47/18d7e4sogcrdgj1urj2rha4bo59sr1a0-71.webp)
![【小初高学习]2017-2018学年高中生物 第三章 酶的应用技术实践 第二节 制备和应用固定化酶素](https://img.doczj.com/img47/18d7e4sogcrdgj1urj2rha4bo59sr1a0-a2.webp)
第二节固定化酶的制备和应用
1．掌握制备固定化酶的常用方法。(重点)
2．掌握酵母菌细胞的固定化技术。(重难点)
1．固定化酶
固定化酶是指用物理学或化学的方法将酶与固相载体结合在一起形成的仍具有酶活性的酶复合物。
2．制备固定化酶的方法
(1)物理吸附法的显著特点是工艺简便且条件温和，在生产实践中应用广泛。
(2)化学结合法是利用多功能试剂进行酶与载体之间的交联，在酶和多功能试剂之间形成共价键，从而得到三维的交联网架结构。
(3)包埋法是将酶包埋在能固化的载体中。
3．固定化酶的优点：在催化反应中，它以固相状态作用于底物，反应完成后容易与水溶性反应物和产物分离，可被反复使用。
[合作探讨]
探讨1：对固定化酶的作用影响最小的固定方法是哪一种？
提示：物理吸附法。
探讨2：为什么固定化酶不适合采用包埋法？
提示：由于酶分子较小，容易在包埋材料中漏出，所以不适合采用包埋法固定化。
探讨3：如果反应物是大分子物质，应该采用哪种方法？
提示：因为大分子物质不容易进入细胞内，应采用固定化酶技术。
[思维升华]
1．制备固定化酶的常用方法可用下图所示：
2．常用的制备固定化酶的方法
1．最广泛的细胞固定化方法
凝胶包埋法是应用最广泛的细胞固定化方法，适用于各种微生物、动物和植物细胞的固定化。所使用的载体主要有琼脂、海藻酸钠凝胶、角叉菜胶、明胶等。
2．优点
(1)无须进行酶的分离和纯化，减少了酶的活力损失，降低了生产成本。
(2)不仅可以作为单一的酶发挥作用，且可以利用细胞中所含的复合酶完成一系列的催化反应。
(3)对于活细胞来说，保持了酶的原始状态，酶的稳定性更高。
3．缺点
(1)固定化细胞只能用于生产细胞外酶和其他能够分泌到细胞外的产物。
(2)由于载体的影响，使营养物质和产物的扩散受到一定的限制。
(3)在好氧性发酵中，溶解氧的传递和输送成为关键性的限制因素。
[合作探讨]
探讨1：固定化细胞为什么只能用于生产胞外酶和其他能分泌到细胞外的产物？
提示：因为固定化细胞固定的是活细胞，细胞膜具有选择透过性，细胞内有用的物质(如胞内酶)是不能自由进出细胞的。
探讨2：能否在刚溶化好的海藻酸钠溶液中加入活化的酵母菌细胞？
提示：不能，因为刚溶化好的海藻酸钠溶液温度较高，会将酵母菌细胞杀死。
探讨3：如果制作的凝胶珠颜色过浅，呈白色，则说明了什么？如果凝胶珠不是圆形或椭圆形，又说明了什么？
提示：如果凝胶珠的颜色过浅，则说明了海藻酸钠溶液的浓度偏低，固定的酵母菌细胞数目较少；如果凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明了海藻酸钠的浓度过高，制作失败。
[思维升华]
1．制备固定化酵母菌细胞的操作流程
准备各种实验药品和器具
↓
制备麦芽汁
↓
活化酵母菌细胞
↓
制备固定化细胞
↓
浸泡凝胶珠，用蒸馏水洗涤
↓
发酵麦芽汁
2．酵母菌细胞的固定化实验需要注意的事项
(1)选用的干酵母要具有较强的活性，而且物种单一。
(2)酵母菌细胞活化时体积会变大，因此活化前应选择体积足够大的容器，防止酵母菌细胞的活化液溢出。
(3)固定化酵母菌细胞时，应将海藻酸钠与酵母菌细胞的混合液用注射器缓慢滴加到0.05 mol/L的氯化钙溶液中，而不是注射，以免影响凝胶珠的形成。
(4)可利用海藻酸钠制成不含酵母菌的凝胶珠，作为对照。
3．检测凝胶珠是否制作合格的方法
(1)机械法：用镊子夹取一个凝胶珠放在实验桌上，用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠制作成功；也可以在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也表明制备的凝胶珠是成功的。
(2)目测法：合格的凝胶珠应是淡黄色，圆形或椭圆形的。如果颜色过浅呈白色，说明海藻酸钠溶液的浓度过低，固定的酵母菌细胞数目较少；如果形成的凝胶珠形状不规则，则说明海藻酸钠的浓度偏高。
微生物实验知识总结与实践应用经过这学期学习和实验操作，我对《微生物实验》有了一些初步的认识，也从中学习到了有用的知识。《微生物学实验》是要求我们掌握实验知识的基本操作和技能训练，初步了解和掌握先进的技术和方法，与迅速发展的科学前沿接轨。微生物：包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它个体微小，却与人类生活关系密切。涵盖了有益有害的众多种类，广泛涉及健康、食品、医药、工农业、环保等诸多领域。我将我这学期学到的微生物学知识，结合生活和工业当中的一些应用，归纳如下：在吾尔恩老师的带领下，我们先从最基本的知识学起。 （1）无菌操作技术：高温对微生物具有致死效应，因此微生物在转接过程中，一般再火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环，已达到灭菌的目的。在做实验时要保持严谨的态度，以后的实验中多数操作都必须再火焰旁进行。 （2）培养基的制备：培养基是人工配置的生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴别微生物或积累代谢产物。自然界中培养基的种类很多，但是不同的培养基中，一般含有水分、碳源、氮源、无机盐和生长因子等，不同类别的微生物对PH值的要求一般不同。 （3）消毒与灭菌：灭菌是用理化方法杀死一定物质中的微生物的微生物学基本技术。灭菌的彻底程度受灭菌时间与灭菌剂强度的制约。微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或
环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的技术。是指用物理或化学的方法杀灭全部微生 物，使之达到无菌保障水平。经过灭菌处理后，未被污染的物品，称无菌物品。经过灭菌处理后，未被污染的区域，称为无菌区域。 （4）平板分离与活菌计数：平板分离计数法是将待测菌液经适当稀释，涂布在平板上。经培养后在平板上形成肉眼可见的菌落。根据稀释倍数和取样量计算出样品中细胞密度。平板分离法主要有：1.平板划线分离法。2.稀释涂布平板法。 （5）革兰氏染色法：革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性细菌（G+）和革兰氏阴性细菌（G-）两种类型。这是两种细菌细胞壁结构和组成的差异决定的。大肠杆菌是革兰氏阴性杆状细菌，金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性细菌，经过革兰氏染色后两者呈现不同的颜色，在显微镜下便于进行观察…… 我们学习微生物实验技术，就是要把微生物的实验技能应用于实践生产，培养繁育细菌收集细菌代谢产物，应用于药业、工业，产生经济利益。制备培养基是微生物实验技术操作的重要环节，按照培养基的功能分类培养基的类型有：1.选择培养基。2.鉴别培养基。在工业生产中常常应用于培养微生物的主要是-发酵罐。我将微生物在生产生活中的应用总结如下： 微生物技术的应用在当今社会中已取得了很大的作用，在工业、农业、医药业、畜牧业等各个行业中都取得了长足的进展，但相对于
天然植物有效成分的提取新技术——生物酶解技术 酶是生物体活细胞产生的，以蛋白质形式存在的一类特殊的生物催化剂。某些酶可以在常温、常压和温和的酸碱条件下，将植物细胞壁分解，较大幅度提高天然植物中有效成分的提取率，改善生产过程中的滤过速度和纯化效果，提高产品纯度和制剂的质量。 生物酶解技术包括酶法提取(又称酶反应提取)和酶法分离精制两方面。该技术是在传统的天然植物成分提取基础上进行的，应用常规提取设备即可完成，操作简便，成本低廉。 1原理 酶法提取是根据植物细胞壁的构成，利用酶反应所具有高度专一性的特点，选择相应的酶，将细胞壁的组成成分(纤维素、半纤维素和果胶质)水解或降解，破坏细胞壁结构，使细胞内的成分溶解、混悬或胶溶于溶剂中，从而达到提取目的，且有利于提高成分的提取率。许多天然植物中含有蛋白质，采用煎煮法时蛋白质遇热凝同，影响提取成分的煎出，如加入蛋白酶，就可以将天然植物中的蛋白质分解析出，如此可提高成分的提取率。 天然植物水提液除了含有提取成分外，还含有淀粉、蛋白质、果胶、树胶、树脂、黏液质等，这些成分的存在往往使提取液呈混悬状态，并影响提取液的滤过速度，为此要实施除杂，常用的方法有离心法、澄清剂法、醇沉法、大孔树脂吸附法、离子交换法、微孑L滤膜滤过法及超滤法。而酶法除杂是分离精制的新方法，此方法是根据天然物提取液中杂质的种类、性质，有针对性地采用相应的酶，将这些杂质分解或除去，以改善液体产品的澄清度，提高产品的稳定性。由于酶反应具有高度的专一性，决定了酶解方法除杂的高效性。 2酶的种类 2．1 用于天然植物细胞破壁的酶 2．1．1 纤维素酶 纤维素是由链状结构的β-D-葡萄糖以β- l，4-葡萄糖苷键结合而成的聚合物，纤维素分子束聚集成为较大的单位——微纤丝，构成了植物细胞壁的框架，在微纤丝之间的空隙中尚有其他物质(角质、木质素、二氧化硅)，形成植物细胞壁的基本结构。在干燥植物中纤维素约占总重的l／3～l／2。 纤维素酶具有分解、软化纤维素、破坏细胞壁、增加植物细胞内容物的溶出量的作用，它是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称，包括内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶、β-葡萄糖苷酶3个组分。最适pH值4～5，最佳作用温度40~60℃。 2．1．2半纤维素酶 半纤维素包括木聚糖、甘露聚糖、阿托伯聚糖、阿拉伯半乳聚糖和木葡聚糖等多种组分，约占植物干重的35％。含量仅次于纤维素。 半纤维素酶由β-甘露聚糖酶、β-木聚糖酶等内切型酶，β-葡萄糖苷酶、β-甘露糖苷酶、β-木糖苷酶等外切型酶以及阿拉伯糖苷酶、半乳糖苷酶、葡萄糖苷酸酶和乙酰木聚糖酶等组成。具有消化植物细胞壁的作用。 2．1．3果胶酶 果胶质属于黏液质类，是植物细胞的正常产物，多见于植物的地下部分及种子中。 果胶酶是分解果胶质的聚糖水解酶、果胶质酰基水解酶的一类复合酶的总称。固体的呈浅黄色，易溶于水；液体的呈棕褐色。最适作用温度45-50 ℃，作用pH值3～6。
生物信息学课后习题及答案 （由10级生技一、二班课代表整理） 一、绪论 1.你认为，什么是生物信息学？ 采用信息科学技术，借助数学、生物学的理论、方法，对各种生物信息（包括核酸、蛋 白质等）的收集、加工、储存、分析、解释的一门学科。2.你认为生物信息学有什么用？对你的生活、研究有影响吗？（1）主要用于： 在基因组分析方面：生物序列相似性比较及其数据库搜索、基因预测、基因组进化和分 子进化、蛋白质结构预测等 在医药方面：新药物设计、基因芯片疾病快速诊断、流行病学研究：SARS 、人类基因组计划、基因组计划：基因芯片。 （2）指导研究和实验方案，减少操作性实验的量；验证实验结果；为实验结果提供更多的支持数据等材料。 3.人类基因组计划与生物信息学有什么关系？ 人类基因组计划的实施，促进了测序技术的迅猛发展，从而使实验数据和可利用信息急剧增加，信息的管理和分析成为基因组计划的一项重要的工作 。而这些数据信息的管理、分析、解释和使用促使了生物信息学的产生和迅速发展。 4简述人类基因组研究计划的历程。 通过国际合作，用15年时间（1990-2005）至少投入30亿美元，构建详细的人类基因组遗传图和物理图，确定人类DNA 的全部核苷酸序列，定位约10万基因，并对其他生物进行类似研究。 1990，人类基因组计划正式启动。 1996，完成人类基因组计划的遗传作图，启动模式生物基因组计划。 1998完成人类基因组计划的物理作图，开始人类基因组的大规模测序。Celera 公司加入，与公共领域竞争启动水稻基因组计划。 1999，第五届国际公共领域人类基因组测序会议，加快测序速度。 2000，Celera 公司宣布完成果蝇基因组测序，国际公共领域宣布完成第一个植物基因组——拟南芥全基因组的测序工作。 2001，人类基因组“中国卷”的绘制工作宣告完成。 2003，中、美、日、德、法、英等6国科学家宣布人类基因组序列图绘制成功，人类基因组计划的.目标全部实现。2004，人类基因组完成图公布。 2.我国自主知识产权的主要基因组测序计划有哪些？水稻（2002），家鸡（2004），家蚕（2007），家猪（2012），大熊猫（2010） 2．第一章 、管路敷设技术通过管线不仅可以解决吊顶层配置不规范高中资料试卷问题，而且可保障各类管路习题到位。在管路敷设过程中，要加强看护关于管路高中资料试卷连接管口处理高中资料试卷弯扁度固定盒位置保护层防腐跨接地线弯曲半径标高等，要求技术交底。管线敷设技术包含线槽、管架等多项方式，为解决高中语文电气课件中管壁薄、接口不严等问题，合理利用管线敷设技术。线缆敷设原则：在分线盒处，当不同电压回路交叉时，应采用金属隔板进行隔开处理；同一线槽内，强电回路须同时切断习题电源，线缆敷设完毕，要进行检查和检测处理。、电气课件中调试对全部高中资料试卷电气设备，在安装过程中以及安装结束后进行 高中资料试卷调整试验；通电检查所有设备高中资料试卷相互作用与相互关系，根据生产工艺高中资料试卷要求，对电气设备进行空载与带负荷下高中资料试卷调控试验；对设备进行调整使其在正常工况下与过度工作下都可以正常工作；对于继电保护进行整核对定值，审核与校对图纸，编写复杂设备与装置高中资料试卷调试方案，编写重要设备高中资料试卷试验方案以及系统启动方案；对整套启动过程中高中资料试卷电气设备进行调试工作并且进行过关运行高中资料试卷技术指导。对于调试过程中高中资料试卷技术问题，作为调试人员，需要在事前掌握图纸资料、设备制造厂家出具高中资料试卷试验报告与相关技术资料，并且了解现场设备高中资料试卷布置情况与有关高中资料试卷电气系统接线等情况，然后根据规范与规程规定，制定设备调试高中资料试卷方案。 、电气设备调试高中资料试卷技术电力保护装置调试技术，电力保护高中资料试卷配置技术是指机组在进行继电保护高中资料试卷总体配置时，需要在最大限度内来确保机组高中资料试卷安全，并且尽可能地缩小故障高中资料试卷破坏范围，或者对某些异常高中资料试卷工况进行自动处理，尤其要避免错误高中资料试卷保护装置动作，并且拒绝动作，来避免不必要高中资料试卷突然停机。因此，电力高中资料试卷保护装置调试技术，要求电力保护装置做到准确灵活。对于差动保护装置高中资料试卷调试技术是指发电机一变压器组在发生内部故障时，需要进行外部电源高中资料试卷切除从而采用高中资料试卷主要保护装置。
2009年高考生物选修1复习资料 【高考要求】 2009年高考生物大纲关于《生物技术实践》的要求 【考点分析】 1 .对葡萄酒有害的微生物 ①产膜酵母：由于产膜酵母是好气性真菌，所以在卫生条件差的情况下，如贮酒容器不满、暴露在空气中的表面积很大时，很容易产生产膜酵母。产膜酵母又叫酒花菌，最初在酒面繁殖时，形成雪花状的斑片，然后连成灰色薄膜，时间长了，就会在酒的液面上形成一个膜盖。产膜酵母能把乙醇分子氧化成乙醛，又把乙醛分子氧化成水和二氧化碳，从而使葡萄酒的酒精含量降低，酒味变淡薄。［来源：学嘶
b5E2RGbCAP ②乳酸菌：葡萄酒里的糖，为大多数细菌的繁殖提供了良好的营养物质，所以含糖的葡萄酒是最容易被细菌感染的。葡萄酒中有一种有害的乳酸菌，它不分解苹果酸，专门分解葡萄酒中的糖、甘油、酒石酸，使优质的葡萄酒完全变质。plEanqFDPw ③醋酸菌：是一种好气性细菌，在有氧的条件下才能进行旺盛的代谢活动。葡萄汁中的糖是醋酸菌重 要的能源。在有氧的情况下，醋酸菌能把葡萄汁中的糖分解成醋酸。在葡萄酒中缺少糖源的情况下，酒精便是醋酸菌的能源，它将乙醇变为乙醛，再变为醋酸。DXDiTa9E3d 2.毛霉 ①毛霉是一种丝状真菌，它的菌丝可分为直立菌丝和匍匐菌丝，繁殖方式为孢子生殖，新陈代谢类型 为异养需氧型，应用于腐乳等发酵工艺。RTCrpUDGiT ②毛霉在腐乳制作中的作用：在豆腐的发酵过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐的蛋白质分 解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。5PCzVD7HxA ③传统腐乳的生产中，豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子，而现代的腐乳生产是在无菌条件 下，将优良毛霉菌种直接接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染，保证产品质量。jLBHrnAILg ④毛霉优良菌种的标准：不产生毒素；生长繁殖快，抗杂菌力强；生长的温度范围大，不受季节的限制；有蛋白酶、脂肪酶、肽酶等酶系；使产品气味正常良好。XHAQX74J0X 3.判断加酶洗衣粉洗涤效果的方法 可在洗涤后比较污物的残留状况，如：已消失、颜色变浅、面积缩小等。 4.酶和细胞的固定化方法 一般来说，酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定，而细胞多采用包埋法固定化。原因是细胞个大，酶分子很小；个大的难以被吸附或结合，个小的酶容易从包埋材料中漏出。LDAYtRyKfE 5?在《酵母细胞的固定化》的操作过程中，应该注意下列问题。 ①酵母细胞的活化。在缺水的状态下，微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重 新恢复正常的生活状态。酵母细胞所需要的活化时间较短，一般需要0.5?1 h ；酵母细胞活化时体积会变 大，因此活化前应该选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。Zzz6ZB2Ltk ②加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，涉及到实验的成败。如果海藻酸钠浓度过高，很难形 成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。dvzfvkwMI1 ③刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格， 可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液 体流出，就表明凝胶珠制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制 备的凝胶珠是成功的。rqyn14ZNXI 6. DNA的粗提取与鉴定过程 提取DNA的第一步是材料的选取，其目的是选取DNA含量较高的生物材料，否则会由于实验过程中或 多或少的损失而造成检测的困难；第二步是DNA的释放和溶解，这一步是实验成功与否的关键，要尽可能 使细胞内的DNA全部溶解；第三步是DNA的纯化，即根据DNA的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性，最大限度地将DNA与杂质分开；第四步是对DNA进行鉴定，这是对整个实验的结果的检测。EmxvxOtOco 7 ?凝胶色谱法分离蛋白质的原理凝胶色谱法也称为分配色谱法，它是根据分子量的大小分离蛋白质的方法之一。所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成，小球体内部有许多贯穿的通道，当一个
菌草酸多酶体反应体生物酶解技术“治疗癌症及延缓衰老的策略” 菌草酸多酶体反应体生物技术（BGA）是一种现代生物制剂高新技术。由林陆山教授发明，1994年在美国获得“克里斯托”发明专利技术金奖，96年正式被列入“国家火炬高新科技计划项目”。 “BGA”是以多种生物酶组合多酶反应体，并在常温常压下，一方面充分分解中草药中的纤维素、半纤维素、木质素、脂肪、蛋白质等生物成分，使水溶性和脂溶性所有有效成分得以充分提取浓缩，另一方面使所有有效成分全部破壁分解，游离出具有细胞活性的小分子活性蛋白，裂解氨基酸的肽链，形成肽物质。整体成分可达150多种，这样的特性在癌症和延缓衰老的治疗中极具价值。 “BGA”制品是以量子生物与中医药理论为基础，和创新性很强的酶工程工艺结合的量子生物制剂。“BGA”制剂原料以中草药为主具有多种药、多组分、采用酶解工艺，制作上混合提取物的模式，因而制品具有多靶点、多途径的药效机理。这样克服了研发集中在单体成分的提取模式可能会掩盖中药中其他有效成分的药理作用。 最近国内，郝海平等2009年“通过多组分、多靶点中药整体代动力学的探索”的研究表明：认为“多靶点、低亲和力、低选择性”药物研发模式将可能成为未来全球畅销创新药物研发 的主体，并取代“单靶点、高亲和力、高选择性”。我们认为“BGA”制品的多组分、多靶点的特点，对多种基因的干预，可能最有效的调控复杂的病理性网络。“BGA”制品不会改变中草药中的生物活性物质的化学结构，而是充分体现药品的药理活性，是实现中药现代化的一项重要的技术革新。具有如下开创性技术特点： 1、通过酶解破壁，有效成分利用率从传统工艺18%提升到80%以上。 2、“BGA”制品具有活性和小分子特点。 3、彻底脱毒，且无任何毒副作用。 4、药效迅速、具有酶类制品的药理特性。 5、具有节省能源，环保。 6、对中药制药工艺进行改革。 多酶体应用于中草药提取制作工艺的研究，已是非常成熟的生物技术，经过国家药检所工艺比对试验，其实际应用价值得到了进一步认证。 下面举出具体实例说明“策略”的正确性实验依据。“BGA”产品之一，“平癌灵辅药一号”。主要原料灵芝孢子粉，采用多酶反应体酶解提取。产品测试：委托农业部食用菌产品质量监督检验测试中心 检验结果NO2011W1584 检测项目单位实例值检测依据 1.多糖% 5.64 NY/TI676-2008 2.三萜% 1.68 NY/SJ339-2001 3.破比率（一次性）72.3 NY/TI677-2008 赵东旭等（2000年5月）对灵芝孢子粉（破壁孢子和未破壁孢子）醇提取物比对实验室证明灵芝孢子破壁后，其醇提取物比未破壁孢子高6倍以上，且破壁孢子的醇提物对Hela细胞细胞有极强毒性，未破壁孢子则无毒性。鲍幸峰等（2001年5月）“赤灵芝孢子粉粉破壁前后多糖释放能力比较研究”证明。多糖释放能力比较未破壁0.92%、破壁1.56%。
第2讲 发酵技术实践 考点一| 果酒、果醋的制作 (对应学生用书第232页) [识记—基础梳理] 1．发酵和发酵技术 (1)发酵的概念：人们把利用微生物的生命活动来制备微生物菌体或其代谢产物的过程。 (2)发酵技术 ①概念：利用微生物的发酵作用，大规模生产发酵产品的技术。 ②应用：广泛应用于生产单细胞蛋白(如酵母菌)、含醇饮料(如果酒、白酒、啤酒)、发酵乳制品(如酸奶、奶酪)、调味品和发酵食品(如味精、醋、腐乳、泡菜)、甜味剂(如木糖醇、糖精)、食品添加剂(如柠檬酸、赖氨酸等) 2．果酒和果醋的制作 (1)果酒的制作 ①概念：以各种果汁为原料，通过微生物发酵而制成的含有酒精的饮料，如葡萄酒、梨酒等。 ②制作原理：酵母菌在厌氧条件下，可以将果汁中的葡萄糖分解并产生酒精，当酒精浓度达到一定的生产要求后，即可得到果酒产品。 (2)果醋的制作原理 醋酸菌在充分供氧的条件下，将酒精转化为醋酸。 (3)果酒、果醋发酵实验流程及注意事项 实验用具消毒 先用温水冲洗，再用体积分数为70%的酒精擦拭消毒 ↓ 挑选葡萄冲洗?????①先冲洗后除枝梗②不能反复冲洗，防止洗去野生 酵母菌 ↓ 榨汁用榨汁机榨取葡萄汁，装入发酵瓶中
↓ 果酒发酵放在18～25 ℃下发酵，发酵过程中要注意排气↓ 取样检测10天～12天取样检测酒精含量，酵母菌镜检 果醋发酵加入醋酸菌后在30～35℃下发酵，需不间断通入氧气 [理解—深化探究] 1．果酒、果醋的原理和条件 (1)各个部件的作用
①因酵母菌的繁殖需要空气，醋酸菌是好氧菌，所以在果酒制作的前期和果醋制作的整个过程中都需氧。因酵母菌产生酒精是在无氧条件下进行的，故应控制充入氧的量，应在充气口设置开关。 ②由于在酒精发酵过程中产生CO2，因此又需设排气口；为防止空气中微生物的污染，排气口应连接一个长而弯曲的胶管。 ③因要对发酵的情况进行及时监测，故应设置出料口便于取料。 (3)该装置的使用方法：使用该装置制作果酒时，应该关闭充气口；制作果醋时，应将充气口连接充气泵，输入空气。 (4)控制好发酵的条件 ①葡萄汁装入发酵瓶时，要留约1/3空间，目的是先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽O2后再进行酒精发酵；防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液溢出。 ②严格控制温度：18～25 ℃利于酵母菌的繁殖和酒精发酵，30～35 ℃利于醋酸菌的繁殖和醋酸发酵。 ③充气：酒精发酵为无氧发酵，需封闭充气口；醋酸发酵为有氧发酵，需适时通过充气口充气。 [运用—考向对练] ◎考向1 果酒、果醋制作流程 1．(2016·天津高考)天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。 淀粉 类原料――→ 糖化葡萄 糖 ―――→ 酒精发酵成熟 酒醅 ―――→ 醋酸发酵成熟 醋醅 ――→ 处理 成品醋 (1)在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶______________________________________________________________。 (2)在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。通气能提高________的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。 (3)在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如下： ①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势如右图。据图分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是_________________
1、史前期（约8000 年前一1676 ) ,各国劳动人民,①未见细菌等微生物的个体；②凭实践经验利用微 生物是有益活进行酿酒、发面、制酱、娘醋、沤肥、轮作、治病等）。 在17世纪下半叶，荷兰学者吕文虎克用自制的简易显微镜亲眼观察到细菌个体之前，对于一门学科来说尚没形成。这个时期称为微生物学史前时期。在这个时期，实际上人们在生产与日常生活中积累了不少关于微生物作用的经验规律，并且应用这些规律，创造财富，减少和消灭病害。民间早已广泛应用的酿酒、制醋、发面、腌制酸菜泡菜、盐渍、蜜饯等等。古埃及人也早已掌握制作面包和配制果酒技术。 这些都是人类在食品工艺中控制和应用微生物活动规律的典型例子。积肥、沤粪、翻土压青、豆类作物与其它作物的间作轮作，是人类在农业生产实践中控制和应用微生物生命活动规律的生产技术。种痘预防天花是人类控制和应用微生物生命活动规律在预防疾病保护健康方面的宝贵实践。尽管这些还没有上升为微生物学理论，但都是控制和应用微生物生命活动规律的实践活动。 2、初创期（1676 一1861 年）,列文虎克,①自制单式显微镜,观察到细菌等微生物的个体；②出于个人 爱好对一些微生物进行形态描述。微生物的形态观察是从安东·列文虎克（Antony Van Leeuwenhock 1632-1732）发明的显微镜开始的，它是真正看见并描述微生物的第一人，他的显微镜在当时被认为是最精巧、最优良的单式显微镜，他利用能放大50～300倍的显微镜，清楚地看见了细菌和原生动物，而且还把观察结果报告给英国皇家学会，其中有详细的描述，并配有准确的插图。1695年，安东·列文虎克把自己积累的大量结果汇集在《安东·列文虎克所发现的自然界秘密》一书里。他的发现和描述首次揭示了一个崭新的生物世界——微生物世界。这在微生物学的发展史上具有划时代的意义。这是首次对微生物形态和个体的观察和记载。随后，其他研究者凭借显微镜对于其它微生物类群进行的观察和记载，充实和扩大了人类对微生物类群形态的视野。但是在其后相当长的时间内，对于微生物作用的规律仍一无所知。这个时期也称为微生物学的创始时期。 3、奠基期（1861 一1897 年）,巴斯德,①微生物学开始建立；②创立了一整套独特的微生物学基本研究方法；③开始运用“实践―理论―实践”的思想方法开展研究；④建立了许多应用性分支学科；⑤进入寻找人类动物病原菌的黄金时期。继列文虎克发现微生物世界以后的200年间，微生物学的研究基本上停留在形态描述和分门别类阶段。直到19世纪中期，以法国的巴斯德和德国的柯赫为代表的科学家才将微生物的研究从形态描述推进到生理学研究阶段，揭露了微生物是造成腐败发酵和人畜疾病的原因，并建立了分离、培养、接种和灭菌等一系列独特的微生物技术。从而奠定了微生物学的基础，同时开辟了医学和工业微生物等分支学科。巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人。(1)巴斯德 巴斯德原是化学家，曾在化学上做出过重要的贡献，后来转向微生物学研究领域，为微生物学的建立和发展做出了卓越的贡献。主要集中在下列三个方面：①彻底否定了“自然发生”学说。“自生说”是一个古老学说，认为一切生物是自然发生的。到了17世纪，虽然由于研究植物和动物的生长发育和生活循环，是“自生说”逐渐消弱，但是由于技术问题，如何证实微生物不是自然发生的仍是一个难题，这不仅是“自生说”
生物酶解壳寡糖 壳寡糖又称壳聚寡糖、低聚壳聚糖、甲壳寡聚糖、氨基寡糖素等，是一种通过降解甲壳素或壳聚糖得到的聚合度在2~20之间的寡糖产品，是甲壳素、壳聚糖产品的升级产品；壳寡糖是自然界中唯一带正电荷阳离子碱性氨基低聚糖，是动物性纤维素。具有分子量低、水溶性好、功能作用大、更易被吸收等特点。 以海洋生物虾、蟹壳为原料，通过脱钙、脱蛋白后获得甲壳素，甲壳素通过酶解或强碱水解后脱去部分乙酰基获得壳聚糖，壳聚糖通过酶解或酸解得到壳寡糖。乐满地生物酶解壳寡糖：采用生物酶解技术制成壳寡糖，具有降解条件温和、无副反应、脱乙酰度高、分子量小，壳寡糖生物活性高等特点。 含量：5%、10% PH 值：6.5-7 分子量：≤ 2000Da 脱乙酰度：≥97% 状态：黄褐色液体 壳寡糖主要特性： 1、改良土壤：壳寡糖能促进有益微生物的生长繁殖，显著减少土壤有害菌及线 虫类，促进土壤团粒结构形成，改善土壤理化性质，增强透气性和保水保肥能力，为根系提供良好的土壤微生态环境。 2、提高肥效：壳寡糖能活化养分，使氮、磷、钾等养分能得到植物充分有效地 吸收，提高养分利用率，提高肥效，减少化学肥料用量；壳寡糖能螯合铁、铜、锌、锰、钼等微量元素，使肥料中微量元素有效态养分增加，同时使土壤中固定的微量元素养分释放出来，容易被作物吸收利用。 3、促进生长：壳寡糖是一种新型的生物刺激素，能促进根系生长，促进根部伤 口愈合及发育，作物根系发达，根毛、须根、次生根数量大大增加，增强植物吸收水肥能力，提高抗旱能力，促使茎秆粗壮，有利于养分供应传输，提高抗倒伏能力。 4、激发作物免疫系统：壳寡糖可诱导植物抗性，增强作物抗病、抗旱、抗冻能 力；壳寡糖可诱导植物产生抵御病原物质的抗性蛋白，抑制病菌的生长，诱导木质素形成，促进伤口愈合，壳寡糖对病害具有广谱性的抵御作用，增强作物对病毒病、真菌、细菌、线虫等病害的抵抗能力，减少农药使用，同时能缓解作物因肥害、药害产生的影响。 5、增产提质：壳寡糖是一种天然的植物营养生长促进剂，能增加营养吸收力， 有效促进植物生长，增加作物产量，壳寡糖能促进钙离子吸收，减少裂果等缺钙症状，提高座果率，促进微量元素吸收，增加甜度、促进早熟、延长保险贮藏期，提升作物品质。
一、名词解释(31个) 1.生物信息学:广义：应用信息科学的方法和技术，研究生物体系和生物过程 息的存贮、信息的涵和信息的传递，研究和分析生物体细胞、组织、器官的生理、病理、药理过程中的各种生物信息，或者也可以说成是生命科学中的信息科学。狭义：应用信息科学的理论、方法和技术，管理、分析和利用生物分子数据。 2.二级数据库：对原始生物分子数据进行整理、分类的结果，是在一级数据库、 实验数据和理论分析的基础上针对特定的应用目标而建立的。 3.多序列比对：研究的是多个序列的共性。序列的多重比对可用来搜索基因组 序列的功能区域，也可用于研究一组蛋白质之间的进化关系。 4.系统发育分析：是研究物种进化和系统分类的一种方法，其常用一种类似树 状分支的图形来概括各种（类）生物之间的亲缘关系，这种树状分支的图形称为系统发育树。 5.直系同源：如果由于进化压力来维持特定模体的话，模体中的组成蛋白应该 是进化保守的并且在其他物种中具有直系同源性。 指的是不同物种之间的同源性，例如蛋白质的同源性，DNA序列的同源性。（来自百度） 6.旁系（并系）同源：是那些在一定物种中的来源于基因复制的蛋白，可能会 进化出新的与原来有关的功能。用来描述在同一物种由于基因复制而分离的同源基因。（来自百度） 7.FASTA序列格式：将一个DNA或者蛋白质序列表示为一个带有一些标记的 核苷酸或氨基酸字符串。 8.开放阅读框（ORF）：是结构基因的正常核苷酸序列，从起始密码子到终止 密码子的阅读框可编码完整的多肽链，其间不存在使翻译中断的终止密码子。（来自百度） 9.结构域：大分子蛋白质的三级结构常可分割成一个或数个球状或纤维状的区 域，折叠得较为紧密，各行其功能，称为结构域。 10.空位罚分：序列比对分析时为了反映核酸或氨基酸的插入或缺失等而插入空 位并进行罚分，以控制空位插入的合理性。（来自百度） 11.表达序列标签：通过从cDNA文库中随机挑选的克隆进行测序所获得的部分 cDNA的3’或5’端序列。（来自文献） 12.Gene Ontology 协会： 13.HMM 隐马尔可夫模型：将核苷酸序列看成一个随机序列，DNA序列的编 码部分与非编码部分在核苷酸的选用频率上对应着不同的Markov模型。14.一级数据库：数据库中的数据直接来源于实验获得的原始数据，只经过简单 的归类整理和注释 15.序列一致性：指同源DNA顺序的同一碱基位置的相同的碱基成员, 或者蛋 白质的同一氨基酸位置的相同的氨基酸成员, 可用百分比表示。 16.序列相似性：指同源蛋白质的氨基酸序列中一致性氨基酸和可取代氨基酸所 占的比例。 17.Blastn：是核酸序列到核酸库中的一种查询。库中存在的每条已知序列都将 同所查序列作一对一地核酸序列比对。（来自百度） 18.Blastp：是蛋白序列到蛋白库中的一种查询。库中存在的每条已知序列将逐 一地同每条所查序列作一对一的序列比对。（来自百度）
第十一单元生物技术实践 学案63 单元测试 一、选择题 1.果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，相关措施正确的是() A.葡萄汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于发酵 B.在葡萄酒发酵过程中，每隔12 h左右打开瓶盖一次，放出CO2 C.果酒发酵过程中温度控制在30 ℃，果醋发酵过程中温度控制在20 ℃ D.在果醋发酵过程中，要适时通过充气口充气，有利于醋酸菌的代谢 2.(2012·深圳模拟)下列关于腐乳制作过程的叙述，不正确的是() A.先将豆腐切成块放在消毒的笼屉中，保持温度在15～18 ℃，并具有一定湿度 B.腐乳制作中盐、卤汤中的酒和香辛料不仅起防腐杀菌的作用，还能调制腐乳的风味 C.卤汤中酒的含量一般控制在12%左右 D.卤汤中香辛料越多，口味越好 3.关于测定亚硝酸盐含量实验操作的有关叙述，正确的是() A.泡菜制作需要配制盐水，其中盐与水的质量比为4∶1 B.在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色染料 C.制备样品处理液，加入氢氧化铝乳液的目的是除去色素等杂质，得到澄清溶液 D.泡菜腌制时间长短会影响亚硝酸盐含量，但温度和食盐的用量不影响其含量 4.(2012·湘潭高三第一次模拟)下列关于果醋制作的说法正确的是() A.醋酸菌是好氧菌，在制作过程中要一直打开发酵瓶 B.在制作葡萄醋的过程中，温度应严格控制在18～25 ℃ C.当糖源不足时，醋酸菌先将酒精转变成乙醛，再将乙醛变为醋酸 D.在糖源和氧气充足时，醋酸菌能将葡萄糖分解成乙醇和二氧化碳 5.在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止微生物污染，下列有关叙述正确的是() A.果醋发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌进入 B.腌制腐乳的卤汤中应含有12%左右的酒精以抑制细菌的增殖 C.利用自然菌种发酵果酒时，将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌 D.将长满毛霉的豆腐放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口部分的盐要铺薄一些 6. 下列关于微生物的培养与应用的叙述错误的是() A.通过消毒不能杀死物体内所有的微生物 B.利用平板划线法可以统计样品中活菌的数目 C.微生物所用的培养基的成分和植物组织培养所用的培养基的成分不同 D.平板划线法和稀释涂布平板法常用于微生物的接种 7．如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是()
生物酶解堵技术的研究与应用 1、概述 濮城油田现处于开发后期，各种各样的问题都在一定程度上制约着油田的持续发展，其中油井因为地层堵塞，造成产量下降也是原因的一部分。对历年堵塞情况进行统计，发现造成油井堵塞的主要原因有三个方面，一是蜡质、沥青质沉积在出油通道的岩石内壁上，造成在近井地带出油通道堵塞，这种情况占45%；二是由于原油中固相微粒体积增大，从而造成地层出油孔道的堵塞，这种情况占37%；三是由于地层中泥质含量较高，因水化膨胀而降低了地层的渗透率，这种情况占12%。通常解决此类问题的办法是酸化，经过多年的现场实施证明酸化对于以上三种情况造成的堵塞都不能达到预期的效果，且造成一定的环境污染。生物酶解堵技术是近几年发展起来的一项新技术，解决了油田生产中很多难以解决的复杂问题，2010年，濮城油田通过推广实施生物酶解堵技术，取得了良好的增油效果，并见到了较大的经济效益和社会效益。 2、生物酶解堵机理及性能特点 2.1生物酶的基本组成 生物酶解是从自然界生物中提取产生，以酶为主导的多种生物化合物组成。主要成分：蛋白质-复合酶、复合生物活性物、生物活性物、异化菌、天然生物提取物等，有可靠的安全性和生物分解性。 2.2 解堵机理[1] 生物酶是一种水溶性产品，它与堵塞物的反应过程是一个生物反应过程。对于储层岩石表面的堵塞，能够改变储层岩石表面的润湿性，从油湿转换为水湿，从而改变储层岩石的润湿状态，降低油～岩层间的界面张力，释放储层岩石颗粒表面碳氢化合物，清洁油岩，使原油易于从岩石表面剥离下来。对于固体颗粒沉淀造成的堵塞，其解堵过程中生物酶与地层水配成溶液注入污染地层，它与堵塞物进行生物反应，生成酶与油的中间体和表面上吸附有酶的固体堵塞物，然后在采出过程中酶与油分离，固体堵塞物因表面吸附有酶，而改变其表面性能具有亲水性，在生产过程中可以采出，以达到油井解堵的目的。对于蜡质、沥青质造成的堵塞，生物酶具有非常高的释放储层岩石颗粒表面碳氢化合物的能力，它直接作用于堵塞物且不会改变原油的特性，不会生成新的衍生物，与碳氢化合物不会形成乳化作用，可以解除因蜡质、沥青质沉积造成的地层堵塞。生物酶在洗油过程完成后，生物酶还原为原始状态，吸附在固体上的可使固体改为亲水性，生物酶不受温度、压力、酸、碱、水矿化度的影响，具有较强的适应性及可控制性，从理论上讲，它不会被消耗掉。对于低渗透空隙孔隙，生物酶解堵剂成分可以渗流进去，通过渗流作用进入微小孔道，将原油剥落降粘带出孔隙，并将岩心转变为水湿，具有良好的的降粘降解作用，包括将饱和蜡选择性降解为不饱和烯烃的能力，降低原油粘度，从而降低了原油在地层孔隙中的流动阻力，通过改善粘度比和提高流速，将孤立原油降粘稀释，阻止沥青质、胶质、石蜡等重质组分沉积，提高了压力梯度和导流能力，使原油容易从四周流向井筒，从而达到稳定油藏结构，提高保护油藏的效果，达到增产增油的效果。
课时分层集训训(三十五) (建议用时：45分钟) A组基础达标 1．(2018·广东惠州模拟)日前微博传言手机细菌比马桶多。如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题： (1)该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、______________。 (2)据图，两电视台均采用____________法接种，该方法需要________(多选)。 A．接种环 B．酒精灯C．移液管D．涂布器E．无菌水 (3)通过观察菌落的________，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是：__________________________。 (4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10 mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1 mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为________个/平方厘米。该实验对照组该如何设置______________________。 [解析](1)微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。(2)根据图形分析，该实验的接种方法为稀释涂布平板法，该方法用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等。(3)不同的菌落形态、大小不同，图示两个电视台调查的手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌落，即存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，可能是因为手机的取样和马桶的取样都不相同。(4)根据提供的数据进行计算，某手机屏幕的细菌数＝(48＋50＋52)÷3×102÷0.1×10÷(5×5)＝2×104(个/平方厘米)。 [答案](1)氮源和无机盐 (2)稀释涂布平板BCDE (3)形态、大小手机的取样和马桶的取样都不相同 (4)2×104取培养基涂布0.1 mL无菌水进行培养 2.如图是某细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。回答下列问题。 (1)在________(填图中编号)区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是________个细菌。据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是________(用编号表示)。
微生物应用技术答案B 一、填空题（每空0.5分，共15分） 1、互生、共生、拮抗 2、有机质化、无机质化 3、共代谢作用、唯一碳源和能源 4、侵染性、专一性、有效性 5、生物体、生理活性物质 6、微生物杀菌剂、微生物除草剂、微生物植物生长调节剂 7、白色农业 8、乳酸菌、肠道细菌 9、同型乳酸发酵菌株、异型乳酸发酵菌株和兼性异型乳酸发酵菌株。 10、酵解、磷酸己糖、三羧酸循环 11、感官鉴定、化学鉴定、物理指标、微生物检验 12、防腐剂保藏法、辐照食品保藏法 二、名词解释（每题5分，共30分） 1、微生物拮抗关系：是指一种微生物在其生命活动过程中，产生某种代谢产物或改变环境条件，从而抑制其他微生物的生长繁殖，甚至杀死其他微生物的现象。 2、微生物肥料：微生物肥料是指一类含有活的微生物并在使用后能获得特定肥料效应，能增加植物产量或提高产品质量的微生物制剂。 3、微生物农药：是指由“微生物”（包括细菌、真菌、病毒、原生动物、线虫或基因修饰的微生物）及其代谢产物和由它加工而成的具有杀虫、杀菌、除草、杀鼠或调节植物生长等具农药活性的物质。 4、微生物饲料：微生物饲料是指利用微生物个体繁殖或其新陈代谢活动来生产和调制的饲料，包括提供反刍动物能量的青贮饲料、提供各种动物蛋白质的单细胞蛋白、作为动物饲料添加剂使用的微生物酶制剂及益生菌剂等。 5、菌群演替：在一个生态区域中，原有的微生物菌群经过一般的发展时期后，由于某种内外环境因素的改变，原有的微生物菌群被另一种新的微生物菌群所取代。
6、食品的腐败变质：是指食品在一定的环境因素影响下，由微生物为主的多种因素作用下所发生的有害的变化，即造成其原有化学性质或物理性质和感观性状发生变化，降低或失去其营养价值和商品价值的过程 三、写出下列英文缩写的中文全称（每空1分，共10分） 根土比（R/S）五日生化需氧量（BOD5） 根圈促生细菌（PGPR）苏芸金芽孢杆菌（B.t.) 菌体蛋白（SCP）光合细菌（PSB） 乳酸菌（LAB）超高温瞬时灭菌法（UHT） 水分活度（Aw）糖酵解途径（EMP） 四、简答题(每题9分，共45分) 1、试述微生物在碳循环中的作用。 微生物在碳循环中的作用：微生物在碳素循环中具有非常重要的作用，它们既参与固定CO2光合作用，又参与再生CO2的分解作用。 （1）光合作用：参与光合作用的微生物主要是藻类，蓝细菌和光合细菌，它们通过光合作用，将大气中和水体中的CO2合成为有机碳化物。特别是在大多数水生环境中，主要的光合生物是微生物，在有氧区域以蓝细菌和藻类占优势；而在无氧区域则以光合细菌占优势。 （2）分解作用：自然界有机碳化物的分解，主要是微生物的作用。 陆地和水域的有氧条件中，通过好氧微生物分解被彻底氧化为CO2；在无氧条件中，通过厌氧微生物发酵被不完全氧化成有要酸、甲烷、氢和CO2。 2、简述根瘤的形成过程（主要步骤）。 特定的根瘤菌与相应的豆科植物相互辩认使根瘤菌特异地吸附在根毛上→二者相互作用使根毛变形，主要表现卷曲或分枝→细菌进入根内→形成侵入线→侵入线发展，进入根皮层后导致一部份细胞转化为分生组织，细胞分裂和分化，根瘤开始发育→根瘤菌从侵入线内释放到根瘤细胞中繁殖，而后转化成类菌体形态→豆血红蛋白出现，固氮作用开始。 3、微生物农药的优缺点（与化学农药相比）。 优点： 1、无污染，不积累 2、微生物农药对防治对象不产生抗性 3、对害虫天敌危害小 4、持效期长 5、刺激植物生长 6、取材容易，费用低廉 7、操作简单，安全可靠 缺点： 1、药效发挥缓慢 2、制剂成分复杂，活性成分易分解
思考题 名词解释 应用微生物学、 微生物：微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物，个体微小，结构简单，通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物，统称为微生物。微生物包括细菌、病毒、霉菌、酵母菌等。（但有些微生物是可以看见的，像属于真菌的蘑菇、灵芝等。）、 细菌：广义的细菌即为原核生物是指一大类细胞核无核膜包裹，只存在称作拟核区（nuclear region)(或拟核)的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌（eubacteria）和古生菌（archaea）两大类群。人们通常所说的即为狭义的细菌，狭义的细菌为原核微生物的一类，是一类形状细短，结构简单，多以二分裂方式进行繁殖的原核生物，是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者。 放线菌：放线菌（Actinomycete）是原核生物的一个类群。大多数有发达的分枝菌丝。菌丝纤细，宽度近于杆状细菌，约0.5～1微米。可分为：营养菌丝，又称基质菌丝，主要功能是吸收营养物质，有的可产生不同的色素，是菌种鉴定的重要依据；气生菌丝，叠生于营养菌丝上，又称二级菌丝。、 酵母菌：子囊菌、担子菌等几科单细胞真菌的通称。可用于酿造生产，有的为致病菌。是遗传工程和细胞周期研究的模式生物。 霉菌：是丝状真菌的俗称，意即"发霉的真菌"，它们往往能形成分枝繁茂的菌丝体，但又不象蘑菇那样产生大型的子实体。在潮湿温暖的地方，很多物品上长出一些肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状的菌落，那就是霉菌。 微生物培养基：通常只人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养物质。广义上说，凡是支持微生物生长繁殖的介质或材料均可以作为微生物的培养基。培养基种类繁多。 微生物农药：直接利用细菌、真菌和病毒等产生的天然活性物质或生物活体本身开发的，对植物病虫草害进行防治的农药。 群体生长：一个微生物细胞在合适的外界环境条件下，不断吸收营养物质并进行新陈代谢。如果同化作用速度超过了异化作用，则其原生质总量不断增加，于是出现个体生长现象。如果这是平衡生长，即各个细胞组分是按恰当比例增长时，到达一定程度就会发生繁殖，从而引起个体数目增加，这时原有的个体已经发展为一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长。在微生物的研究和应用中，只有群体生长才有实际意义。 分批培养：一个微生物细胞在合适的外界环境条件下，不断吸收营养物质并进行新陈代谢。如果同化作用速度超过了异化作用，则其原生质总量不断增加，于是出现个体生长现象。如果这是平衡生长，即各个细胞组分是按恰当比例增长时，到达一定程度就会发生繁殖，从而引起个体数目增加，这时原有的个体已经发展为一个群体。随着群体中各个个体的进一步生