血液检验
红细胞检验
（一）再生障碍性贫血（AA）
简称再障，是因为化学、物理、生物因素及不明原因使骨髓造血组织减少导致骨髓造血功能衰竭，引起外周血全血细胞减少的一组造血干细胞疾病。
特征是造血干细胞功能障碍和（或）造血微环境功能障碍，造血红髓被脂肪组织所替代（红髓脂肪变），导致全血细胞减少的一类贫血。临床表现为进行性贫血、出血和感染（伴发热），罕有淋巴结核肝脾肿大。
【分型】
国内根据其病程及临床表现和血象、骨髓象特征将AA分为急性和慢性。国外主要注重实验室特征，将AA依据严重程度分为重型（I 型、II 型）和轻型（I 型、II 型）
①急性AA：起病急、进展迅速、病程短。贫血呈进行性（加重），常伴有严重出血，出血部位广泛并常有内脏出血；半数病例起病时即有感染，严重者可并发败血症。治疗效果差，预后不佳，常在一年内死亡。此型又称重型再障- I 型。
②慢性AA：起病缓慢、病程进展慢、病程较长（一般在4年以上）。以贫血为主，出血和感染较轻，经恰当的治疗，病情可缓解或治愈，预后较好。此型又称轻型再障。慢性AA病情恶化，血象和骨髓象转变为急性AA的表现，称为重型AA- II 型。
【检验】
1、血象：以全血细胞减少，网织红细胞绝对值降低为主要特征，三系减少的程度各病例有所不同。贫血多为正常细胞性，少数为轻、中度大细胞性。网织红细胞绝对值明显减少。各类白细胞都减少，其中以中性粒细胞减少尤为明显，而淋巴细胞比例相对增多
血小板不仅数量减少，而且体积小、颗粒减少。急性AA时，网织红细胞＜1%，绝对值＜15×10^9/L；中性粒细胞绝对值常＜0.5×10^9；血小板＜20×10^9/L；慢性再障血红蛋白下降速度较慢，网织红细胞、中性粒细胞和血小板减低，但各指标叫急性再障指标为高，达不到急性再障的程度。
2、骨髓象
①.急性再障：红髓脂肪变是AA的特征性病理改变，骨髓涂片可见脂肪滴明显增多。多部位穿刺结果均显示有核细胞增生减低。造血细胞（粒/红/巨核系细胞）明显减少，早期阶段细胞减少或不见，巨核细胞减少或缺如，无明显的病态造血。非造血细胞（包括：淋巴/浆/肥大细胞等）相对增多，非造血细胞比例增高，大于50%，淋巴细胞比例可增高达80%。如有骨髓小粒，染色后镜下为空网状结构或为一团纵横交错的纤维网，其中造血细胞极少，大多为非造血细胞。
②.慢性再障：病程中骨髓呈向心性损害，骨髓拥有代偿能力仍可有残存散在的增生灶，常因不同的穿刺部位，骨髓象表现不一致，需多部位穿刺或进行骨髓活检，才能获得较明确的诊断。多数患者骨髓增生减低，三系或两系减少，巨核细胞减少明显。非造血细胞比例增加，常＞50%。如穿刺到增生灶，骨髓可表现为增生良好，红系代偿性增生，以核高度固缩的“炭核”样晚幼红细胞多见，粒系减少，主要为晚期及成熟粒细胞。骨髓小粒中非造血细胞增加，以脂肪细胞较多见。
③.骨髓活检：对诊断AA有重要价值。可见骨髓增生减低，造血组织与脂肪组织容积比降低（＜
0.34）。造血细胞减少（特别是巨核细胞减少），非造血细胞比例增加，并可见间质水肿、出血甚至液性脂肪坏死。
【诊断】国内诊断标准
①全血细胞减少，网织红细胞绝对值减少，淋巴细胞相对增多。②骨髓至少一个部位增生低下或重度低下（如增生活跃，须有巨核细胞明显减少及淋巴细胞相对增多），骨髓小粒非造血细胞增多（有条件者应做骨髓活检，显示造血组织减少，脂肪组织增加）。③能除外引起全血细胞减少的其他疾病，如PNH、MDS、自身抗体介导的全血细胞减少、AAH、PMF、急性白血病、恶性组织细胞病等。
再障是一组异质性疾病，不同类型的AA治疗原则和预后不同。诊断为AA后，应再根据患者的临床表现、血象和骨髓象综合分析进行分型：
IDA至今仍是人类最常见的慢性疾病之一，是临床上最常见的一种贫血。在铁的摄入不足、铁的需要增加及失血等情况下，机体出现长期铁的负平衡而导致缺铁。铁缺乏包括：储铁缺乏（ID）、缺铁性红细胞生成（IDE）和缺铁性贫血（IDA）三个连续发展的阶段。
【临床特点】
主要由贫血的常见症状、引起缺铁和贫血的基础疾病的临床表现和缺铁的特殊表现组成。除有乏力、心悸、虚弱等贫血的一般临床表现和体征外，缺铁的临床表现主要有各种含铁酶活性下降而引起的上皮组织的变化，如口角炎、舌炎、舌感觉异常和烧灼感；皮肤干燥，毛发无光泽易折断；指甲无光泽呈条纹隆起，严重时指甲扁平甚至凹陷形成“反甲”。儿童患者可出现注意力不集中、对感觉刺激反应减弱、生长和行为发育迟缓等表现，而异食癖（异嗜症）是儿童IDA的典型表现。约10%的IDA患者有轻度脾大。
【检验】
1、血象：IDA患者为小细胞低色素性贫血。但因缺铁的发展阶段不同，贫血的轻重不一，血象表现不同。早期常无贫血，当缺铁加重时出现轻度正常细胞性贫血，红细胞数可在正常范围，Hb下降，红细胞形态镜下观察已有变化，RDW升高，RDW配合MCV可对IDA进行诊断/鉴别诊断。随着缺铁进展，RBC 和Hb进一步下降，骨髓红系代偿性增生，呈典型的小细胞低色素性贫血，镜下可见红细胞大小形态不等，以小红细胞为主，中心浅染区扩大，甚至呈环形。WBC和PLT计数一般正常，慢性失血者可有PLT 增多，贫血较重的儿童患者可有PLT减少。钩虫病引起的IDA可有嗜酸性粒细胞增多。
Ret检测：大多正常，但急性出血造成的IDA，Ret可明显增高，IDA患者服用铁剂后Ret可迅速升高，常于1周左右达到高峰。Ret是反映骨髓红细胞造血功能的重要指标，进行相关检测可用于IDA与慢性炎症性疾病和血红蛋白病引起的溶血性贫血的鉴别诊断。目前一些血细胞分析仪可通过直接测定或公式推算外周血网织红细胞血红蛋白含量（CHr），其降低对铁缺乏的诊断灵敏性和特异性均较高，对铁缺乏的筛检和IDA的诊断作用均优于传统的血细胞分析仪检测指标。
2、骨髓象： IDA为增生性贫血骨髓象，骨髓有核细胞增生活跃或明显活跃，个别患者减低。主要以红系增生为主，粒红比值降低。增生的红系细胞以中、晚幼红为主，其体积较正常为小，胞质少而着
色偏蓝，边缘不整，呈锯齿状或如破布，显示胞质发育落后，血红蛋白合成不足。胞核小而致密、深染，甚至在核的局部呈浓缩块状；表现为“核老质幼”的核质发育不平衡改变。分裂象易见。
粒细胞比例相对降低，各阶段间比例及形态基本正常；巨核细胞系正常；淋巴/单核细胞正常。骨髓象检查不一定在诊断时需要，但当其与其他疾病鉴别困难时需进行。
骨髓铁染色：IDA患者骨髓单核-巨噬细胞系统的储存铁缺乏，即细胞外铁阴性。铁粒幼细胞（细胞内铁）明显减少或缺如，且颗粒小着色淡。本法是诊断IDA的一种直接而可靠的方法。
3、铁代谢检查：在IDA的诊断和鉴别诊断中起重要作用，IDA时相相关检查主要有：
①.血清铁蛋白（SF）：IDA时SF＜14μg/L（女性＜10μg/L）。但SF为急性时相反应蛋白。
②.红细胞碱性铁蛋白（EF）：IDA时EF＜6.5μg/细胞。
③.血清铁（SI）、总铁结合力（TIBC）及转铁蛋白饱和度（TS）
IDA患者SI 明显减少。血清总铁结合力（TIBC）：IDA时该指标增高。TS是血清或血浆中铁和转铁蛋白浓度的比值，以百分比表示。IDA时该指标降低。
临床上将以上三指标同时检测，对IDA的诊断和与慢性疾病、其他储铁增多的贫血的鉴别诊断有一定临床价值。
④.血清转铁蛋白（sTF）：IDA时机体sTF明显增高。
⑤.血清可溶性转铁蛋白受体（sTfR）：在IDA早期、其他骨髓增生性贫血（如溶贫）和红细胞增多症时sTfR均可增加。
⑥.红细胞游离原卟啉（FEP）：FEP量的增加可间接反映铁的缺乏，敏感性仅次于SF和EF。
4、其他检验：缺铁性贫血的彻底治疗有赖于去除导致缺铁的原因，查清病因及原发病极为重要，为此还需进行多方面的检查，如粪便的潜血检查（OB）、虫卵检查，尿液的检查，肝肾功能的检查及相应的生化、免疫学检查，胃肠道的X线、胃镜检查等。
【诊断】
IDA的诊断应包括确定是否因缺铁引起的贫血和明确缺铁的原因。诊断常采用检测指标联合应用，以提高诊断的准确率。
1、IDA的诊断标准：符合第①条和②~⑨中任何两条以上者即可诊断为IDA
①小细胞低色素性贫血，男性Hb＜120g/L，女性＜110g/L，孕妇＜100g/L；MCV＜80fl，MCH＜27pg，MCHC＜0.32；红细胞形态可有明显低色素表现；
②有明确的缺铁病因和临床表现；
③血清（血浆）铁＜8.95μmol/L（50μg/dl），总铁结合力＞64.44μmol/L；
④转铁蛋白饱和度＜0.15；
⑤骨髓铁染色显示骨髓小粒可染铁消失，铁粒幼红细胞＜15%；
⑥红细胞游离原卟啉（FEP）＞0.9μmol/L（全血），或血液锌原卟啉（ZPP）＞0.96μmol/L（全血），或FEP/Hb＞4.5μg/gHb；
⑦血清铁蛋白（SF）＜12μg/L（国内诊断缺铁的标准有采用＜14μg/L或＜16μg/L，一般主张将SF ＜12μg/L表示储铁耗尽，SF＜20μg/L表示储铁减少）；
⑧血清可溶性转铁蛋白受体（sTfR）浓度＞26.5nmol/L（2.25mg/L）（R&D systems）；
⑨铁剂治疗有效。
2、鉴别诊断
小细胞低色素性贫血是IDA的形态学特征，应注意与其他小细胞低色素性贫血鉴别
（三）巨幼细胞贫血（MgA）
是由于维生素B12或（和）叶酸缺乏，使细胞DNA合成障碍，导致细胞核发育障碍所致的骨髓三系细胞核浆发育不平衡及无效造血性贫血，也称脱氧核苷酸合成障碍性贫血。
特征：骨髓中粒、红巨核三系细胞出现巨幼变，外周血为大细胞性贫血。其发病原因主要是叶酸缺乏、维生素B12缺乏。在我国以缺乏叶酸导致的营养性MgA多见，因缺乏内因子导致的恶性贫血少见（北欧多见）。维生素B12缺乏所致的MgA的突出特点是出现各种神经系统的症状。
叶酸和（或）维生素B12缺乏导致DNA合成障碍主要引起造血组织的细胞和更新较快的细胞（如胃肠道上皮细胞）出现异常改变，故在临床上常表现为贫血并伴胃肠道症状。
MgA起病隐匿，为慢性进行性贫血，除贫血的一般临床表现外，还可有口腔炎、舌炎、舌乳头萎缩，舌面光滑如镜面（俗称牛肉舌）；食欲缺乏，恶心、腹胀、腹泻、便秘等消化系统症状。维生素B12缺乏时，常出现神经、精神症状，如手足对称性麻木、下肢步态不稳和行走困难，小儿及老年患者常表现为脑神经受损的精神异常，如抑郁、嗜睡和精神错乱。
【检验】
1、血象：外周血象为本病最重要的起始筛选实验，观察血涂片细胞形态对诊断很重要。本病为大细胞正色素性贫血（MCV增高，MCHC正常）。RBC和Hb的下降不平行（RBC的下降更明显）。血涂片上的红细胞形态明显大小不等（RDW增高），形态不规则，以椭圆形大红细胞多见，着色较深
异形红细胞增多，可见巨红细胞、点彩红细胞、豪焦小体（或豪周小体，又称染色质小体，是核碎裂或核溶解后所剩的残余物）及有核红细胞。Ret绝对计数减少。白细胞数正常或减低，中性粒细胞胞体偏大，出现分叶过多的中性粒细胞是MgA的早期征象，分叶可达6~9叶以上，血小板正常或减低，可见巨大血小板。
2、骨髓象：骨髓增生活跃或明显活跃。以三系细胞出现巨幼变为特征
①红细胞系统：红系明显增生伴显著巨幼样变，粒红比值降低或倒置。正常形态的幼红细胞减少或不见，各阶段的巨幼红细胞出现，其比例常大于10%。可见核畸形、碎裂和多核巨幼红细胞。由于发育成
熟受阻，原巨幼红细胞和早巨幼红细胞比例增高，在有的病例中占幼红细胞的比例可高达50%。和分裂象和豪焦小体易见，胞核的形态和“核幼质老”的改变是识别巨幼样变的两大特点；
②粒细胞系统：略有增生或正常，粒系细胞比例相对降低。中性粒细胞自中幼阶段以后可见巨幼变，，以巨晚幼粒和巨杆状核细胞多见，可见巨多核叶中性粒细胞；
③巨核细胞系统：数量正常或减少，可见巨核细胞胞体过大，分叶过多（正常在5叶以下）与核碎裂；胞质内颗粒减少。
骨髓形态学检查对MgA的诊断起决定性作用，特别是发现粒系细胞巨幼变对疾病早期的诊断具有重要价值
3、细胞化学检查：骨髓铁染色显示铁粒幼细胞增多和巨噬细胞含铁量（细胞外铁）增加；糖原染色发现原、幼红细胞阴性，偶见弱阳性。
4、叶酸缺乏的检验
①血清和红细胞叶酸测定：叶酸减少有助于诊断由于叶酸缺乏引起的MgA，还可见于红细胞过度增生，叶酸利用增加（如溶贫、骨髓增生性疾病）。因红细胞不受叶酸摄入情况的影响，能反映机体叶酸的总体水平及组织的叶酸水平，诊断价值更大
②脱氧尿嘧啶核苷酸抑制试验：不正常，可被叶酸纠正的为叶酸缺乏，可被维生素B12纠正的为维生素B12缺乏。
③组氨酸负荷试验：叶酸缺乏时，组氨酸转变为谷氨酸的过程受阻，代谢中间产物亚氨甲基谷氨酸产生增加，大量从尿中排出，尿中含量增高。灵敏度较高，阴性结果对排除诊断很有价值。
④血清高半胱氨酸测定：血清高半胱氨酸水平在叶酸和维生素B12缺乏时升高。
5、维生素B12缺乏的检验
①血清维生素B12测定：血清维生素B12减低对MgA诊断及病因分析有重要价值。
②甲基丙二酸测定：维生素B12缺乏患者血清和尿中该物质含量增高。尿和血清中甲基丙二酸水平升高可早期诊断维生素B12缺乏。
③维生素B12吸收试验：尿中排出量减少，MgA＜7%，恶性贫血＜5%。本试验主要是对维生素B12缺乏的病因诊断而不是诊断是否存在维生素B12缺乏。如内因子缺乏，加入内因子可使结果正常
④血清内因子阻断抗体：内因子阻断抗体能阻断维生素B12与内因子的结合而影响维生素B12的吸收。由维生素B12缺乏引起的MgA、恶性贫血等仍可表现为内因子阻断抗体阳性。
【诊断】
血象、骨髓象检查的形态学特征对对治疗药物的反应有确定诊断的意义。对已确诊为对治疗药物的反应的患者应明确其病因，病因的诊断对于治疗非常重要。其诊断标准如下：
一、叶酸缺乏的对治疗药物的反应
1、临床表现：①一般贫血症状；②常伴消化道症状，如食欲减退、恶心、腹泻等，舌质红，表面光滑。
2、实验室检查：①大细胞性贫血，MCV＞100fl ，多数细胞呈大卵圆形，Ret常减低；②WBC和PLT数可减少，中性分叶核粒细胞分叶过多（5叶者＞5%或6叶者＞1%）；③骨髓增生明显活跃，红系有典型巨幼红细胞生成且＞10%，粒系及巨核系亦有巨型变；④生化检查：血清叶酸测定（放免法）＜
6.91nmol/L（3ng/ml），红细胞叶酸测定（放免法）＜227nmol/L（100ng/ml）
具备上述生化检查，同时具有临床表现，诊断为叶酸缺乏者。叶酸缺乏者如有临床表现加上实验室检查里的①和③或②者，诊断为叶酸缺乏的MgA.
二、维生素B12缺乏的MgA
1、临床表现：①、②与叶酸缺乏的MgA患者表现相同。③神经系统症状（主要为脊髓后侧束变性）表现为下肢对称性深部感觉及振动感消失等，亦可同时出现周围神经病变及精神忧郁。
2、实验室检查：①、②、③与叶酸缺乏的MgA患者表现相同。④生化检查：血清维生素B12测定（放免法）＜74~103pmol/L（100~140ng/ml）；红细胞叶酸测定（放免法）＜227nmol/L
（100ng/ml）。
具备上述生化检查，诊断为维生素B12缺乏，这类患者可同时伴有临床表现①、②、③（或仅③），如加上实验室检查里的①和③或②项者，诊断为维生素B12缺乏的MgA。而检测血清内因子阻断抗体，用放射性核素标记维生素B12进行吸收试验可进行恶性贫血的诊断。
三、鉴别诊断
其他大细胞性贫血、AML-M6（急性红白血病）的红血病期、MDS（骨髓增生异常综合征）、全血细胞减少性疾病。
（四）阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）
是一种获得性造血干细胞基因突变引起红细胞膜缺陷所致的溶血病。典型临床表现：与睡眠有关的阵发性溶血发作，血红蛋白尿，多为慢性血管内溶血，可伴有全血细胞减少和反复血栓形成。但约有30%患者病程中始终无血红蛋白尿出现，常诊断为“贫血待查”，“不典型AA”或“MDS”，因骨髓象常有“病态造血”，应注意鉴别诊断
【检验】
1、血象：贫血为几乎所有患者的表现，呈正色素或低色素性贫血（尿中铁丢失过多时），Ret增高，可见有核RBC及RBC碎片。WBC和PLT常减少，半数患者为全血细胞减少。
2、骨髓象：半数以上的患者三系增生活跃，尤以红系造血旺盛。随病情变化表现不一，不同穿刺部位增生程度可明显差异，故增生低下者应注意穿刺部位，必要时做病理活检。
3、特殊溶血试验
①溶血存在的证据：尿含铁血黄素试验阳性
②补体敏感的RBC存在的证据：蔗糖溶血试验是PNH的筛选试验，PNH患者红细胞溶血。本试验较酸溶血试验敏感，但特异性较差。热溶血试验阳性，其敏感性高，阴性结果一般可排除诊断。
酸化血清溶血试验特异性高，多数患者为阳性，是诊断的重要依据。流式细胞术检测发现CD55或CD59低表达的异常细胞群，支持PNH诊断。本试验是目前诊断PNH特异性和敏感性最高且可定量的方法。
↑流式细胞术检测PNH患者红细胞CD59表达
【诊断】
1、诊断标准：①临床表现符合PNH；②有肯定的血红蛋白尿发作或血管内溶血的直接/间接证据；③实验室检查证明有补体敏感的RBC群存在：（1）蔗糖溶血试验、热溶血试验、Rous试验为PNH筛选试验；（2）标准化的酸溶血试验和检测CD55及CD59这两种常见的血细胞表面锚蛋白相关抗原的表达情况是确诊试验。
2、鉴别诊断：应注意其他溶血性疾病，特别是HS、AIHA、G6PD缺乏症及阵发性冷性血红蛋尿症。全血细胞减少还应与AA区别（通过NAP染色）。
（五）血红蛋白病：是一组由于生成血红蛋白的珠蛋白肽链的结构异常或合成肽链速率的改变，而引起血红蛋白功能异常所致的疾病。主要包括：①珠蛋白生成障碍性贫血；②异常血红蛋白病。
珠蛋白生成障碍性贫血：即地中海贫血/海洋性贫血，是由于基因缺陷导致血红蛋白中至少有一种珠蛋白合成缺乏或不足，引起的贫血或病理状态，是一组常染色体不完全显性遗传性疾病。
根据珠蛋白肽链合成受到抑制的类型，可范围内α珠蛋白生成障碍性贫血、β珠蛋白生成障碍性贫血、δ珠蛋白生成障碍性贫血和γ珠蛋白生成障碍性贫血等。按缺乏的程度分为完全无生成的α°、β°珠蛋白生成障碍性贫血及部分生成的α+、β+珠蛋白生成障碍性贫血。若β和δ两种珠蛋白均缺乏者，则为（βδ）°或部分缺乏者（βδ）+珠蛋白生成障碍性贫血
1、β珠蛋白生成障碍性贫血：即β地中海贫血，是珠蛋白生成障碍性贫血中发病率最高的类型。根据基因突变的情况和临床特征分为：
①轻型杂合子β珠蛋白生成障碍性贫血：多数杂合子患者没有任何症状和贫血，但血涂片中可发现少数靶形RBC，红细胞脆性试验有轻度降低，HbA2轻度增高（＞3.5%）是其特点。
②重型纯合子β珠蛋白生成障碍性贫血：父母双方均为轻型β珠蛋白生成障碍性贫血，（胎儿）出生后贫血进行性加重，临床表现有发热、腹泻。黄疸、肝脾肿大。由于骨髓造血代偿性增生出现地中海贫血面容。相关实验室检查明显异常。
③中间型β珠蛋白生成障碍性贫血：是β珠蛋白生成障碍性贫血纯合子型或双重杂合子型。
2、α珠蛋白生成障碍性贫血：即α地中海贫血，是由于α珠蛋白基因的缺失或缺陷使α珠蛋白链合成速度降低或不能合成而引起的。根据α基因的异常情况分为：
①一个α基因异常：患者无血液学异常出现，仅在出生时脐血或出生八个月内血液中Hb Barts轻度增加（＜2%）；
②两个α基因异常：RBC呈小细胞低色素性改变，称为α+珠蛋白生成障碍性贫血标准型，无症状或轻度贫血，出生时Hb Barts可占5~15 %，但几个月后消失，检测α链和β链合成速度对其有诊断意义；
③三个α基因异常：为α°/α+双重杂合子，有代偿性HA表现，多余的β链聚合成为HbH（β链形成四聚体β4）即HbH病，患者血象可出现小细胞低色素性改变，靶形RBC增多，血红蛋白电泳出现HbH和Barts带，大部分细胞中可见HbH包涵体；
④4个α基因异常：完全无α珠蛋白生成，为α°/α°纯合子，即胎儿水肿综合征，胎儿期无HbF （α2γ2），多余的γ链聚合成Hb Barts（γ链形成四聚体γ4），又称Hb Barts病，胎儿多死于宫内，或产后数小时内死亡，血红蛋白电泳Hb Barts＞90%，有少量HbH，无HbA、HbA2和HbF
【检验】
1、血象：贫血轻重不等，RBC大小不均，常呈小细胞低色素性贫血，可见靶形（上图）、泪滴形（下图）和异性红细胞增多，多大于10%。进行溶血相关检查，红细胞脆性减低。
1.造血：造血器官生成各种血细胞的过程。能够生成并支持造血细胞分化、发育、成熟的组织器官称为造血器官。 2.胚胎期造血分为：中胚叶造血、肝脏造血和骨髓造血；出生后的造血分为:骨髓造血和淋巴造血。 3.髓外造血（EH）：正常情况下，胎儿出生2个月后骨髓以外的组织如肝、脾、淋巴结等不再制造红细胞、粒细胞和血小板，但在某些病理情况下，如骨髓纤维化、骨髓增生性疾病及某些恶性贫血时，这些组织又可重新恢复其造血功能，称为髓外造血。 4.造血微环境（HIM）：由骨髓基质细胞、微血管、神经和基质细胞分泌的细胞因子构成，是造血干细胞生存的场所。 5.造血干细胞（HSC）：由胚胎干细胞发育而来，具有高度自我更新能力和多向分化能力，在造血组织中含量极少，形态难以辨认的类似小淋巴细胞样的一群异质性的细胞群体。 6.CFU-S：能形成脾结节的干细胞称脾集落形成单位。 7.造血祖细胞（HPC）：是指一类由造血干细胞分化而来，但部分或全部失去了自我更新能力的过渡性、增殖性细胞群。也称为造血定向干细胞。 8.骨髓间质干细胞（MSC）：是一种成体干细胞，具有多向分化潜能和高度自我更新能力等干细胞的共性，可在不同环境中分化成不同种类的细胞，如成骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞和血管内皮细胞。 9.细胞凋亡：是细胞死亡的一种生理形式，是调控机体发育、维护内环境稳定、由基因控制的细胞自主的有序死亡，又称为程序性细胞死亡。 10.无效造血：幼红细胞在骨髓内分裂成熟过程中发生的“原位溶血”，或红细胞进入循环后很快被破坏，称无效造血。 11.原始粒细胞：胞体直径10-20微米，圆形或类圆形，胞核较大，圆形或类圆形，居中或略偏位，约占细胞的2/3，核染色质呈细粒状染淡紫红色，排列均匀，平坦如一层薄纱，
临床血液学和血液学检查知识点 （一）粒细胞系统 1. 原始粒细胞（myeloblast）：10~18μm，胞体圆或类圆形，核占细胞2/3以上，居中或略偏位，核染色质呈细颗粒状排列均匀，核仁2~5个、较小、清晰；胞浆量少，染天蓝色，有透明感，无颗粒。 2. 早幼粒细胞（promyelocyte）：12~20μm，较原粒细胞大，核染色质较原粒细胞粗糙，染色质颗粒开始有汇集，核仁可见或消失；胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色，含大小不等、形态不一紫红色颗粒（即非特异性颗粒）。 3.中幼粒细胞（myelocyte） ①中性中幼粒（neutrophilic myelocyte）：10~18μm，胞核椭圆形或一侧开始扁平，可有凹陷，其凹陷处约占细胞2/3~1/2，核染色质汇集呈索块状，核仁隐约可见或消失；胞浆量多，染淡红或少数区域略偏蓝，含大小一致红色颗粒、即特异性颗粒（致少有一种区域）。 ②嗜酸性中幼粒（eosinophilic）：15~20μm：核与中性中幼粒相似；胞浆内布满粗大而均匀、排列紧密橘红色特异性嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性中幼粒（basphilic）：10~15μm，核圆形或椭圆形、但经常轮廓不清，核染色质较模糊；胞浆内及核上具有排列零乱、大小不等数量不多紫黑色嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞（metamyelocyte） ①中性晚幼粒（neutropilic metamyelocyte）：10~16μm，核明显凹陷呈肾形，马蹄形，半月形，但其核凹陷限度不超过假设直径一半，核染色质粗糙，排列更紧密，无核仁；胞浆量多，浅红色，布满中性特异性颗粒。 ②嗜酸性晚幼粒（eosinophilic metamyelocyte）：10~16μm，核形及构造与中性晚幼粒相似；胞浆内布满橘红色、大小一致嗜酸性特异性颗粒。 ③嗜碱性晚幼粒（basophilic metamyelocyte）：10~14μm，核固缩呈肾形，轮廓模糊；胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。 5. 杆状核粒细胞（stab granulocyte） ①中性杆状核粒细胞（neutrophilic stab granulocyte）：10~15μm，核凹陷限度超过假设直径一半，
《临床血液学和血液学检验》 实验指导 （供医学检验专业五年制本科使用)
遵义医学院医学检验系组编 ２0０５年12月 第一章血细胞形态（示教） 概念:是指血细胞经瑞氏染色后在光学显微镜下的形态特征。 第一节血细胞多媒体示教２学时 了解：初步认识各种血细胞外形及核的形态、胞浆着色情况、核染色质结构的不同点。 第二节正常血细胞形态(显微镜下示教)4学时 了解:初步认识粒细胞系、红细胞系、淋巴细胞系、单核细胞系、浆细胞系、巨核细胞系的各阶段细胞形态学特征，并画出每一台显微镜下的细胞图像。 （一)粒细胞系统 1.原始粒细胞（ｍyｅloblast）：10～18μm,胞体圆或类圆形,核占细胞的2/3以上,居中或略偏位,核染色质呈细颗粒状排列均匀，核仁2～5个、较小、清楚；胞浆量少,染天蓝色,有透明感,无颗粒。 2. 早幼粒细胞(promｙeｌocｙｔｅ）：12~20μm，较原粒细胞大,核染色质较原粒细胞粗糙，染色质颗粒开始有聚集，核仁可见或消失；胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色,含大小不等、形态不一的紫红色颗粒（即非特异性颗粒）。 3.中幼粒细胞(mｙelocyte) ①中性中幼粒（neuｔrｏｐhilic myｅlocｙｔe）:10~１8μm，胞核椭圆形或一侧开始扁平,可有凹陷,其凹陷处约占细胞的2/3~1／2,核染色质聚集呈索块状,核仁隐约可见或消失;胞浆量多,染淡红或少数区域略偏蓝,含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒（致少有一个区域)。 ②嗜酸性中幼粒（eｏｓiｎoｐhiｌic):15～20μm：核与中性中幼粒相似；胞浆内充满粗大而均匀、排列紧密的橘红色特异性嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性中幼粒（basｐhilｉc):1０~１5μm，核圆形或椭圆形、但常常轮廓不清，核染色质较模糊；胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞（metamyｅlｏcyte）
临床血液学检验 1.骨髓造血:骨髓的造血细胞大部分来源于肝脏，部分来源于脾脏。骨髓是产生红细胞，粒细胞和巨核细胞的主要场所，骨髓也产生淋巴细胞和单核细胞，因此骨髓不仅是造血器官，同时也是一个中枢淋巴器官。 2.髓外造血:正常情况下，胎儿出生2个月后，骨髓以外的组织如肝、脾、淋巴结等不再制造红细胞、粒和血小板，但是在某些病理情况下，这些组织又可从头恢复其造血功能，称为髓外造血。 3.血细胞的分化是指分裂后产生新的子细胞在生物学性状上产生了新的特点，即通过特定基因的表达合成了特定的蛋白质，与原来的细胞有了质的例外。这种分化过程是不可逆的，是血细胞失去某些潜能同时又获得新功能的过程。 4.血象和骨髓象检验是诊断血液系统疾病、观察疗效及病情的严重手段之一。 5.粒细胞系统包括原始粒细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞、杆状粒细胞和分叶核粒细胞，粒细胞是由于胞质中常有许多颗粒而得名的。颗粒从II型原始粒细胞开始出现，称为非特异性颗粒（又称为A颗粒、嗜天青颗粒、嗜苯胺蓝颗粒），从中幼粒细胞开始出现特异性颗粒（即S颗粒），S可以有三种:中性颗粒、嗜酸性颗粒及嗜碱性颗粒。 6.早幼粒细胞其胞体直径12～25um,较原始粒细胞大。 7.骨髓穿刺:最为理想的穿刺部位是髂骨上棘（包括髂骨前、髂骨后上棘） 8.骨髓取材情况判断:（1）取材满意:a.抽吸骨髓液时，患者感到有瞬间的酸痛感（有的患者无这种感觉）；b.抽出的骨髓液中有较多的黄色小粒（多为骨髓小粒，有的是脂肪）；c.显微镜下涂片中可见较多骨髓特有细胞:稚童粒细胞、有核红细胞、巨核细胞、浆细胞、造骨细胞、破骨细胞、脂肪细胞、肥大细胞、组织细胞、吞噬细胞等；d.中性杆状核粒细胞/分叶核粒细胞比值大于外周血中性杆状核粒细胞/分叶核粒细胞比值，有核细胞数大于外周血有核细胞数。（2）取材失败（即骨髓稀释）:如抽吸骨髓液时混进血液，称为骨髓部分稀释；
骨髓增殖性肿瘤（MPN）是以骨髓中分化成熟相对正常的一系或多系髓系（粒系、红系、巨核系）细胞持续异常增殖为特征的一组克隆性造血干细胞疾病。与MDS所见无效造血相反，增殖的细胞分化成熟相对正常。临床一般起病缓慢，有血细胞质和量的改变，肝、脾肿大，常并发出血、血栓及髓外造血。疾病进展到终末期，可出现骨髓纤维化、无效造血，或转化为急性白血病。 本组疾病中典型的4种，除了慢粒还包括真性红细胞增多症、原发性血小板增多症及原发性骨髓纤维化等。 一、原发性血小板增多症（ET） 是一种主要累及巨核细胞系的克隆性骨髓增殖性疾病，以血小板数持续增多，血栓形成和/或出血为特征。 【临床表现】 本病好发于50岁以上，多缓慢起病，部分病人发病时无症状，偶尔因发现血小板增多或脾大或手术后出血不止而确诊。多数病人有出血或血栓形成。出血以胃肠道、鼻出血较常见，皮肤、粘膜出血少见。血栓栓塞以指（趾）小血管、中枢神经血管和肢体血管栓塞为主。脾大见于多数病例，一般为轻到中度肿大，少数病人有肝肿大。 【检验】 （1）血象：血小板计数多在（1000～3000）×10^9/L。MPV增大，血小板比积明显增加。可见巨大型、小型及不规则血小板，常自发聚集成堆。可见巨核细胞碎片。白细胞计数多在（10～30）×10^9/L，偶可达（40～50）×10^9/L。分类以中性分叶核粒细胞为主，偶见幼粒细胞。 （2）骨髓象：有核细胞增生明显活跃，巨核细胞系统增生尤为突出，原始及幼稚巨核细胞的比例增高，部分病例可见到小巨核细胞。巨核细胞形态异常，核质发育不平衡，颗粒稀缺，空泡形成，核分叶过多，血小板生成增多。红细胞和粒细胞系统亦明显增生。 （3）血小板功能检查：多数患者主要表现为对二磷酸腺苷、肾上腺素诱发的血小板聚集功能减低，部分患者又有自发性血小板聚集性增高的现象。 【诊断】 WHO的ET诊断标准： 阳性标准：（1）血小板持续性>600×10^9/L；（2）骨髓活检主要为巨核细胞增生，胞体大而形态成熟的巨核细胞增多。
《临床血液学检验》课程教学大纲 [课程概述] 临床血液学检验是采用各种实验方法和技术分析研究血液和造血器官的病理变化，以阐明血液系统疾病的发生机制，用于造血系统疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后监测的一门科学。血液学检验既属于血液学范畴，又是检验医学的一个分支，是检验医学的主干课程之一。近十年来，血液学基础理论研究随着实验手段的不断更新而迅速发展，而实验性很强的血液学，也越来越多的引进各种新的检验项目或赋予基础检验以新的评价。 作为一门理论与实践相结合的课程，临床血液学检验设置在检验医学专业必修课程中，其目的是使该专业的学生掌握血液学检验的基本理论、基本知识和基本技能，为今后临床工作打下坚实的基础。通过本课程的学习，要求学生能够掌握本门课程的基本理论知识，熟悉临床血液学相关基础知识；同时掌握血细胞的正常形态和常见血液病的检验方法及血液学特点，能对常见血液病作出初步诊断结论。 [课程目标] 设置本课程的具体目标是：临床血液学检验的任务是利用血细胞的检验技术，超微结构技术、病理学技术、生物化学技术、免疫学技术、分子遗传学技术、生物遗传工程、细胞生物学及分子生物学技术以及其他多种技术，对血液系统疾病和非血液系统疾病所致的血液学异常进行基础理论的研究和临床诊治的观察，从而促进血液学和临床血液学的发展和提高，推动了血液病学研究向更高层次迈进。学生需要经过基础医学、临床医学和实验医学的专门学习和培养，不仅要有熟练的实验医学技能，正确掌握各项有关血液病诊断和反映病情的实验；适应血液学的发展，建立有关新实验，还要有一定程度的基础医学和临床医学知识，为血液病做出诊断。 该课程共分四篇：造血细胞及其检验、红细胞疾病及其检验、白细胞疾病及其检验和血栓与止血及其检验。它是以血液学的理论为基础，以检验的实验方法为手段，以临床常见的血液病为主线，创建了一个理论-检验-疾病相结合、紧密联系的新体系，且在实践过程中不断发展、完善和提高。 [使用范围] 检验学专业，本科层次。
《临床血液学与检验》课程教学大纲 课程编号： 课程名称：临床血液学与检验 英文名称：clinical hematology and inspection 课程类型：专业课必修考试 总学时：122 学分：6.5 理论课学时：58 实验课学时：64 适用对象：医学检验专业本科学生 一、课程的性质和地位 临床血液学检验是临床医学中不可缺少的实验性学科，随着分子生物学、物理学、电子学等科学技术的迅速发展，新的检验技术促进了预防医学及临床医学不断前进。临床血液学检验是应用血细胞生理学、血液生化学、血液免疫学、遗传血液学、血液流变学、实验血液学等学科的科学方法，检查造血微环境、造血细胞、骨髓细胞及血栓与止血的各种凝血因子等。因此，临床血液学与检验是以血液学的理论为基础、以检验学的实验方法为手段、以临床血液病为工作对象，创造了一个理论－检验－疾病相互结合、紧密联系的新体系。是医学科学中不可缺少的应用学科，是医学检验专业学生的专业课之一。 通过临床血液学检验的学习，要求学生在理论上弄清实验原理，掌握基本理论和基本技能，以及各类造血细胞的生理、病理形态与各类常见血液病的临床基础及检验技术，能够理论联系实际。结合临床培养有解决问题和分析问题能力及具有初步科研工作能力的医学检验医师。 在临床血液学检验教学中重点讲授造血检验、细胞形态学、细胞组织化学染色、各类贫血、白血病、出凝血疾病等疾病的检查原理、操作方法、评价注意事项及临床意义等。 二、教学环节和教学方法 血液学检验的教学环节包括课堂讲授、实验、考试等。其中课堂是通过教师对指定教材部分章节的讲解，结合多媒体课件及细胞形态的图示以启发式方法教学。实验是教师在实验室里通过指导学生观察实验标本、挂图、图谱等，并结合电化教学、多媒体实验教学、要求学生细胞绘图等手段，强化记忆，并在教学过程中让学生尽早到医学检验室轮流进行实习，更好地配合理论教学。 三、教学内容及要求 第一篇绪论
1. 造血：造血器官生成各种血细胞的过程。能够生成并支持造血细胞分化、发育、成熟的组织器官称为造血器官。 2. 胚胎期造血分为：中胚叶造血、肝脏造血和骨髓造血；出生后的造血分为:骨髓造血和淋巴造血。 3. 髓外造血（EH ）：正常情况下，胎儿出生2个月后骨髓以外的组织如肝、脾、淋巴结等不再制造红细胞、粒细胞和血小板，但在某些病理情况下，如骨髓纤维化、骨髓增生性疾病及某些恶性贫血时，这些组织又可重新恢复其造血功能，称为髓外造血。 4. 造血微环境（HIM ）：由骨髓基质细胞、微血管、神经和基质细胞分泌的细胞因子构成，是造血干细胞生存的场所。 5. 造血干细胞（HSC ）：由胚胎干细胞发育而来，具有高度自我更新能力和多向分化能力，在造血组织中含量极少，形态难以辨认的类似小淋巴细胞样的一群异质性的细胞群体。 6. CFU-S ：能形成脾结节的干细胞称脾集落形成单位。 7. 造血祖细胞（HPC ）：是指一类由造血干细胞分化而来，但部分或全部失去了自我更新能力的过渡性、增殖性细胞群。 也称为造血定向干细胞。 8. 骨髓间质干细胞（MSC ）：是一种成体干细胞，具有多向分化潜能和高度自我更新能力等干细胞的共性，可在不同环境中分化成不同种类的细胞，如成骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞和血管内皮细胞。 9. 细胞凋亡：是细胞死亡的一种生理形式，是调控机体发育、维护内环境稳定、由基因控制的细胞自主的有序死亡，又称为程序性细胞死亡。 10. 无效造血：幼红细胞在骨髓内分裂成熟过程中发生的“原位溶血”，或红细胞进入循环后很快被破坏，称无效造血。 11. 原始粒细胞：胞体直径10-20 微米，圆形或类圆形，胞核较大，圆形或类圆形，居中或略偏位，约占细胞的2/3，核染色质呈细粒状染淡紫红色，排列均匀，平坦如一层薄纱，无浓集，核膜较模糊，核仁2-5 个，较小，清楚，胞质量少，呈水粉画蓝色，绕于核周，一般无颗粒。 12 早幼粒细胞：胞体直径12-25 微米，比原始粒细胞大，园形或椭园形。胞核大，圆形或椭圆形，居中或偏位，核染色质开始聚集，比原始粒细胞粗糙，核仁清晰可见、模糊或消失。胞质量较多，呈淡蓝、蓝或深蓝色，有时在核凹陷处可见淡染或无色区域称初浆。胞质内含有大小、形态、多少不一的紫红色非特异性颗粒，分布不均。 14. 中幼粒细胞：胞体直径10-20 微米，圆形。胞核椭圆形或一侧开始扁平可能出现凹陷，其核凹陷程度与假设圆形和直径之比常小于1/2，核常偏于一侧，占细胞的2/3-1/2，染色质聚集呈索块状，核仁消失。胞质量多，染淡红偏淡蓝色，浆内含中等量细小、大小较一致分布密集的特异性颗粒，呈淡红色或淡紫红色，常在近核处先出现。特异性颗粒和非特异性颗粒可同时存在。 15. 晚幼粒细胞：胞体直径10-16 微米，圆形。胞核明显凹陷呈肾形、马蹄形、半月形，但其核凹现程度一般不超过核假设直径的一半或核凹陷程度与假设圆形核直径之比为1/2~3/4,核常偏于一侧，核染色质粗糙，呈小块状，排列更紧密，出现副染色质，核仁消失。胞质量多，充满特异性颗粒 16. 杆状核粒细胞：胞体直径10-15 微米，圆形，胞核凹陷程度超过核假设直径的一半，横径最窄处大于最宽处的1/3 以上，形态弯曲呈带状、粗细均匀，也可见核呈S”、”U”、”E”型，核染色质粗糙呈块状，核两端钝圆，核仁消失。胞 质量多，充满特异性颗粒 17. 分叶核粒细胞：胞体直径10-14 微米，圆形，胞核分叶状，叶与叶之间有细丝相连或完全断开，或原始粒细胞者虽未断开，但有明显的切迹，核常分2-5 个叶，核染色质浓集或呈较多小块，胞质量较多，充满特异性颗粒。 18. 原始红细胞：胞体直径15-25 微米圆形或椭圆形，边缘常有钝角状或瘤状突起。胞核圆形或椭圆形，占细胞直径的 4/5，居中或略偏位，染色质呈颗粒状，较原始粒细胞粗而密，核仁1-3 个，大小不一,边界不清。胞浆量少，绕于核周，呈深蓝色浓稠不透明，有油画蓝感，近核周围染色较淡，称核周带，呈鱼肚白色。 19. 早幼红细胞：胞体直径15-20 微米，圆形或椭圆形，边缘可有钝角状或瘤状突起，胞核圆形或椭圆形，占细胞直径的2/3 以上，居中或略偏位，核染色质可浓集成粗密的小块，核仁模糊或消失。胞质量较多，呈深蓝色浓稠不透明，其蓝色较原始红细胞深，有油画蓝感，近核周围染色较淡，称核周带，呈鱼肚白色。 20. 中幼红细胞：胞体直径8-15 微米，圆形。胞核圆形，居中，占细胞的1/2，核染色质聚集成索块状或团块状，核染色质呈紫红色，副染色质明显，有碎墨样感，核仁消失。核质量多，胞浆内血红蛋白生成逐渐增多，嗜碱性物质逐渐减少，由于血红蛋白量的不同，胞浆呈嗜多色性。 21. 晚幼红细胞：胞体直径7-10 微米，圆形，胞核圆形，占细胞的1/2 以下，居中或偏位，核染色质聚集成数个紫黑色团块或凝缩成炭块。胞浆量多，呈浅灰色或浅红色。 22..网织红细胞为晚幼红细胞刚脱核向成熟红细胞过渡的中间分化阶段，仍属未成熟红细胞，用煌焦油蓝做活体染色时，可在细胞内看到网状、线状、颗粒状网织结构 23. 红细胞平均直径为7.2 微米，呈双凹圆盘状，无核
临床血液学检验考试题 姓名：学号：班级： 一、单项选择题 A型题（每题1分，共10分） 1、带3蛋白是红细胞膜中含量最多的一种（D） A、锚蛋白 B、收缩蛋白 C、肌动蛋白 D、跨膜糖蛋白E肌球蛋白 2、影响DNA合成的常见因素（ E ） A、丙酮酸激酶缺乏 B 、铁缺乏 C 、维生素C缺乏 D 、微量元素缺乏E、叶酸和维生素B12(vitamin B12)缺乏 3、早期诊断缺铁性贫血的主要指标是（ A ） ` A、血清铁蛋白降低 B 、血清铁降低 C 、转铁蛋白饱和度降低 D 、总铁结合力升高 E 、铁粒幼细胞增多 4、PAS染色对下列哪项最有意义: （A） A、巨贫与红血病的鉴别 B、急淋与急非淋的鉴别 C、PNH与再障的鉴别 D、外周血象检查 E、以上均不正确 5、活化蛋白C可灭活下列哪些因子（C） A、因子Ⅹa、Ⅺa B、因子Ⅶa、Ⅹa C、因子Ⅴa、Ⅷa D、因子Ⅹa、Ⅸa E、AT、HCⅡ 6、关于NAP的临床意义，哪项是错误的（ C ） A、慢性粒细胞白血病时NAP活性降低，而类白血病反应时则增强 B、{ C、化脓性感染时NAP活性增加，而病毒感染时则无变化 D、急性淋巴细胞白血病时NAP活性降低，而急性粒细胞白血病时则增强 E、慢性粒细胞白血病患者急性变时NAP活性增强 F、再生障碍性贫血患者NAP活性增强，PNH时则降低 7、下列哪项符合血管外溶血的实验室指标（ B ） A、血浆中出现高铁血红素 B、血浆血红素结合蛋白下降 C、尿中含铁血黄素试验阴性 D、尿中出现游离血红蛋白 E、血浆游离血红蛋白增高 8、急性粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病的鉴别依据是（D） A、巨核细胞受抑、血小板减少 B、原始细胞形态差别显著 C、骨髓增生明显活跃 [ D、POX染色 E、胞质中可见Auer小体 9、由可溶性纤维蛋白单体形成交联性纤维蛋白的过程中，参与的凝血因子有（ C ） A、因子ⅩⅢ B、因子ⅩⅢa C、因子ⅩⅢa 、Ca2+ D、因子Ⅹ E、因子Ⅹa、Ca2+ 10、下列检查哪项改变与溶血无关（ B ）
临床免疫学检验 1、免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能 2、免疫防御（对外）；免疫自稳（防自身免疫病）；免疫监视（防肿瘤）。 3、中枢免疫器官：骨髓、胸腺；外周免疫器官：淋巴结、脾脏（最大）、黏膜相关淋巴组织 4、B细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导体液免疫；B细胞受体=BCR=mIg 表面标志：膜免疫球蛋白（SmIg）、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体。 成熟B细胞：CD19、CD20、CD21、CD22 （成熟B细胞的mIg主要为mIgM和mIgD）同时检测CD5分子，可分为B1细胞和B2细胞。 B细胞功能检测方法：溶血空斑形成试验（体液免疫功能）。 5、T细胞：介导细胞免疫。共同表面标志是CD3（多链糖蛋白）；辅助T细胞的标志是CD4；杀伤T细胞的标志是CD8；T细胞受体=TCR。 T细胞和NK细胞的共同表面标志是CD2（绵羊红细胞受体）； CD3＋CD4＋CD8－ = 辅助性T细胞（Th） CD3＋CD4－CD8＋ = 细胞毒性T细胞（Tc或CTL）（T细胞介导的细胞毒试验） CD4＋CD25＋ = 调节性T细胞（Tr或Treg） T细胞功能检测：植物血凝素（PHA）刀豆素（CONA）刺激T细胞增殖。增殖试验有：形态法、核素法。 T细胞亚群的分离：亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法 *E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验； 6、NK细胞：具有细胞介导的细胞毒作用。直接杀伤靶细胞（肿瘤细胞和病毒感染的细胞） 表面标志：CD16（ADCC）、CD56。 测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株，而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。 7、吞噬细胞包括：单核-吞噬细胞系统（MPS，表面标志CD14，包括骨髓内的前单核细胞、外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞）和中性粒细胞。（表达MHCⅡ类分子） 8、人成熟树突状细胞（DC）（专职抗原呈递功能）：表面标志为CD1a、CD11c和CD83。 9、免疫球蛋白可分为分泌型（sIg，主要存在于体液中，具有抗体功能）及膜型（mIg，作为抗原受体表达于B细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白） 10、免疫球蛋白按含量多少排序：IgG＞IgA＞IgM＞IgD＞IgE五类（按重链恒定区抗原性（CH）排序） 免疫球蛋白含量测定：单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。 11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于恒定区（CH、CL） 12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和VL（高变区）是抗原结合部位。
（一）粒细胞系统 1. 原始粒细胞（myeloblast）：10~18μm，胞体圆或类圆形，核占细胞的2/3以上，居中或略偏位，核染色质呈细颗粒状排列均匀，核仁2~5个、较小、清楚；胞浆量少，染天蓝色，有透明感，无颗粒。 2. 早幼粒细胞（promyelocyte）：12~20μm，较原粒细胞大，核染色质较原粒细胞粗糙，染色质颗粒开始有聚集，核仁可见或消失；胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色，含大小不等、形态不一的紫红色颗粒（即非特异性颗粒）。 3.中幼粒细胞（myelocyte） ①中性中幼粒（neutrophilic myelocyte）：10~18μm，胞核椭圆形或一侧开始扁平，可有凹陷，其凹陷处约占细胞的2/3~1/2，核染色质聚集呈索块状，核仁隐约可见或消失；胞浆量多，染淡红或少数区域略偏蓝，含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒（致少有一个区域）。 ②嗜酸性中幼粒（eosinophilic）：15~20μm：核与中性中幼粒相似；胞浆内充满粗大而均匀、排列紧密的橘红色特异性嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性中幼粒（basphilic）：10~15μm，核圆形或椭圆形、但常常轮廓不清，核染色质较模糊；胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞（metamyelocyte） ①中性晚幼粒（neutropilic metamyelocyte）：10~16μm，核明显凹陷呈肾形，马蹄形，半月形，但其核凹陷程度不超过假设直径的一半，核染色质粗糙，排列更紧密，无核仁；胞浆量多，浅红色，充满中性特异性颗粒。 ②嗜酸性晚幼粒（eosinophilic metamyelocyte）：10~16μm，核形及结构与中性晚幼粒相似；胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。 ③嗜碱性晚幼粒（basophilic metamyelocyte）：10~14μm，核固缩呈肾形，轮廓模糊；胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。 5. 杆状核粒细胞（stab granulocyte） ①中性杆状核粒细胞（neutrophilic stab granulocyte）：10~15μm，核凹陷程度超过假设直径的一半，核径最窄处大于最宽处1/3以上，呈带状弯曲，核染色质粗糙呈块状；胞浆充满中性颗粒。 ②嗜酸性杆状核粒细胞（eosinophilic stab granulocyte）：11~16μm，核与中性杆状相似；浆内充满嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性杆状核粒细胞（basophilic stab granulocyte）：10~12μm，核呈模糊杆状；胞浆内及核上分布有少量嗜碱性颗粒。 6. 分叶核粒细胞（segmented granulocyte） ①中性分叶核粒细胞（neutrophilic segmented granulocyte）：10~14μm，核呈分叶状，叶与叶之间有细丝相连或全断开，常分2~5叶，核染色质已浓集呈粗的小块状，染深紫红色；胞浆丰富，内含淡红色均匀细小颗粒。
【血液学检验】知识点整理 （一）粒细胞系统 1. 原始粒细胞（myeloblast）：10~18μm，胞体圆或类圆形，核占细胞的2/3以上，居中或略偏位，核染色质呈细颗粒状排列均匀，核仁2~5个、较小、清楚；胞浆量少，染天蓝色，有透明感，无颗粒。 2. 早幼粒细胞（promyelocyte）：12~20μm，较原粒细胞大，核染色质较原粒细胞粗糙，染色质颗粒开始有聚集，核仁可见或消失；胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色，含大小不等、形态不一的紫红色颗粒（即非特异性颗粒）。 3.中幼粒细胞（myelocyte） ①中性中幼粒（neutrophilic myelocyte）：10~18μm，胞核椭圆形或一侧开始扁平，可有凹陷，其凹陷处约占细胞的2/3~1/2，核染色质聚集呈索块状，核仁隐约可见或消失；胞浆量多，染淡红或少数区域略偏蓝，含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒（致少有一个区域）。 ②嗜酸性中幼粒（eosinophilic）：15~20μm：核与中性中幼粒相似；胞浆内充满粗大而均匀、排列紧密的橘红色特异性嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性中幼粒（basphilic）：10~15μm，核圆形或椭圆形、但常常轮廓不清，核染色质较模糊；胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞（metamyelocyte） ①中性晚幼粒（neutropilic metamyelocyte）：10~16μm，核明显凹陷呈肾形，马蹄形，半月形，但其核凹陷程度不超过假设直径的一半，核染色质粗糙，排列更紧密，无核仁；胞浆量多，浅红色，充满中性特异性颗粒。 ②嗜酸性晚幼粒（eosinophilic metamyelocyte）：10~16μm，核形及结构与中性晚幼粒相似；胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。 ③嗜碱性晚幼粒（basophilic metamyelocyte）：10~14μm，核固缩呈肾形，轮廓模糊；胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。 5. 杆状核粒细胞（stab granulocyte） ①中性杆状核粒细胞（neutrophilic stab granulocyte）：10~15μm，核凹陷程度超过假设直径的一半，核径最窄处大于最宽处1/3以上，呈带状弯曲，核染色质粗糙呈块状；胞浆充满中性颗粒。 ②嗜酸性杆状核粒细胞（eosinophilic stab granulocyte）：11~16μm，核与中性杆状相似；浆内充满嗜酸性颗粒。
脑脊液部分 脑脊液（CSF）：是存在于脑室、蛛网膜下腔和脊髓中央管中的无色透明液体。主要由脑室脉络丛主动分泌。 作用：①缓冲、减轻或消除外力对脑组织和脊髓的损伤；②调节颅内压；③供给中枢神经系统营养物质，并运走代谢产物；④调节神经系统碱储量，维持脑脊液pH在7.31~7.34；⑤转运生物胺类物质，参与神经内分泌调节。 【参考值】 健康人脑脊液总量约120ml~180ml，约占体液总量的1.5% 颜色 正常无色透明。新生儿由于胆红素移行，可呈黄色。当中枢系统有炎症、损伤、肿瘤或梗阻时，破坏了血脑屏障，使成分发生改变，而导致其颜色发生变化。 （1）红色：常见于各种原因的出血，特别是穿刺损伤的出血、蛛网膜下隙或脑室出血。 除此以外，脑脊液中黄色素、胡萝卜素、黑色素、脂色素增高时，也可使脑脊液呈黄色。 （2）黄色：脑脊液黄色称为黄变症，可由出血、黄疸、淤滞、梗阻等引起。 ①出血性黄变症：见于陈旧性蛛网膜下隙出血或脑出血，由于红细胞释放出血红蛋白，胆红素增加。出血4～8h后脑脊液即可呈黄色，48h颜色最深，并可持续21d左右。 ②黄疸性黄变症：见于重症黄疸性肝炎、肝硬化、钩端螺旋体病、胆管梗阻、新生儿溶血症等，由于脑脊液中胆红素增高，而使其呈黄色。 ③淤滞性黄变症：由于颅内静脉、脑脊液循环淤滞时，红细胞从毛细血管内渗出，导致脑脊液中胆红素增高，从而使脑脊液呈黄色。 ④梗阻性黄变症：见于髓外肿瘤等所致的椎管梗阻，导致脑脊液中蛋白质含量显著增高。当蛋白质超过1.5g/L时，可使脑脊液呈黄色。黄色的程度与脑脊液蛋白质含量呈正比，且梗阻部位越低，黄色越明显。 （3）白色：多因脑脊液中白细胞增多所致，常见于脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌、溶血性链球菌引起的化脓性脑膜炎。 （4）绿色：多见于铜绿假单胞菌性、急性肺炎双球菌性脑膜炎。
第十章白细胞检验的临床应用 二、名词解释 1. 白血病： 2. 急性白血病： 3..急性白血病复发： 4. 部分缓解： 5. 微量残留白血病： 6. 柴捆细胞： 7. 非红系计数：。 8. 白细胞不增多性白血病： 9. MICM分型： 10. FAB分型： 11．Ph染色体 12．全髓白血病 13．无效性红细胞生成 14．尿本-周蛋白 15．类白血病反应 16．R－S细胞 17．反应性组织细胞增多症 18、M蛋白 19、重链病 20、类脂质沉积病 21、血清β2-微球蛋白 三、问答题 1. FAB分型中的急性淋巴细胞白血病三种亚型的形态特点各如何 2．我国急性髓细胞白血病的诊断标准（1986年天津会议）是什么 3．急性白血病的完全缓解标准是什么 4．根据细胞系列将急性白血病分为哪两大类细胞免疫分型时所用的一线单抗和二线单抗各有哪些 5．M3的实验室检查主要特点有哪些 6．慢性粒细胞白血病加速期的诊断要点。 7．慢性淋巴细胞白血病的临床分期及其标准。 8．简述霍奇金氏淋巴瘤诊断时需要进行的检查及其鉴别诊断。 9．试述国内多发性骨髓瘤的诊断标准。 10．试述原发性血小板增多症与继发性血小板增多症的鉴别要点。 11．什么叫嗜酸性粒细胞增多症其程度如何区分 答案 二、名词解释 1．是一组起源于造血干细胞恶性变的一种恶性肿瘤，其特点为骨髓中有不能控制的白血病细胞大量增生、分化成熟障碍、调亡减少，同时浸润其他组织和脏器，并进入外周血中。主要临床表现有四大症状即贫血、发烧、出血及浸润。 2．指起病急、病程短，未经治疗其自然病程一般少于6个月的白血病，其骨髓髓中以原始及幼稚白血病细胞
第二篇临床血液学检验 第一单元造血与血细胞分化发育 第一节造血器官及造血微环境 表2-1-1 造血器官和造血微环境（掌握） 第二节造血干细胞分化与调控 造血干细胞分化与调控（掌握） 1．定义：造血干细胞是最早具有高度自我更新、多向分化能力的造血细胞。 2．特点：①多数处于G0期或静止期；②大多数CD34＋Thy-1＋；③低表达或不表达CD38和HLA-DR；④缺乏表面系列抗原表面标志。 3．造血祖细胞：由造血干细胞分化而来，但部分或全部失去了自我更新能力的过渡性、增殖性细胞群，又称造血定向干细胞。
第三节血细胞的增殖、发育与成熟 表2-1-2 血细胞发育成熟中的形态演变规律（掌握） 第四节细胞凋亡 表2-1-3 细胞凋亡和细胞坏死的区别（掌握）
第二单元骨髓细胞学检查的临床意义 第一节骨髓检查的内容与方法 骨髓细胞学检查（掌握） 1．适应证：①外周血细胞成分及形态异常；②不明原因发热，肝、脾、淋巴结肿大； ③不明原因骨痛、骨质破坏；④血液系统疾病定期复查；⑤微生物及寄生虫检查。 2．禁忌证：①凝血功能障碍（如血友病）；②妊娠晚期妇女。 3．采集部位：髂骨后上棘，此处骨皮质薄、骨髓液丰富、进针容易，为首选穿刺部位。 4．取材满意指标：①患者抽取时有特殊的疼痛感；②可见骨髓小粒及少量脂肪滴，镜下可见巨核细胞、浆细胞、组织细胞、成骨细胞、破骨细胞等骨髓特有细胞；③骨髓中性杆状核与分叶核细胞比值大于外周血中的比值。 5．骨髓细胞学检查：①低倍镜下判断骨髓片质量、增生程度、有无较大或成堆异常细胞；②选取满意涂片，油镜下观察200～500个细胞；③骨髓增生程度分级标准中增生极度活跃、增生明显活跃、增生活跃、增生减低、增生极度减低时，成熟红细胞和有核细胞比值依次为1:1、10:1、20:1（正常骨髓象）、50:1和200:1。 6．诊断意见：①肯定性诊断疾病：各种白血病、巨幼细胞性贫血、多发性骨髓瘤、骨转移癌、戈谢病、尼曼-匹克病等；②支持性诊断疾病：缺铁性贫血、再生障碍性贫血、溶血性贫血等；③可疑性诊断疾病：难治性贫血等；④排除性诊断疾病：ITP。 7．正常骨髓象：①骨髓增生程度：有核细胞增生活跃，粒/红细胞比值（2～4）:1；②粒细胞占有核细胞40%～60%；③幼红细胞约占有核细胞的20%；④淋巴细胞约占20%，小儿可达40%；⑤单核和浆细胞均＜4%；⑥通常在1.5cm×3cm片膜上，可见巨核细胞7～
临床血液学检验（一） 姜春辉
目录 第一章 绪论 第二章 造血与血细胞分化发育 第三章 骨髓细胞学检查的临床意义 第四章 血细胞化学染色的临床应用 第五章 血细胞超微结构检查的临床应用第六章 血细胞染色体检查的临床应用
第一章 绪论 一、概念 血液学 它的研究对象是血液和造血组织。 血细胞形态学：研究血液中有形成分形态； 血细胞生理学：研究细胞来源、增殖、分化和功能； 血液生化学：研究血细胞组成、结构、代谢和血浆成分； 血液免疫学： 研究血细胞免疫和体液免疫； 遗传血液学： 研究血液病遗传方式和信息传递； 血液流变学 ：研究血液流动性和血细胞变形性； 实验血液学： 研究实验技术和建立实验方法的等。 2014-10-31
临床血液学 以疾病为研究对象，包括来源于血液和造血组织的原发性血液病以及非血液病所致的继发性血液病。 临床血液学检验 以血液学的理论为基础，以检验学的实验方法为手段，以血液病为工作对象。 2014-10-31
二、血液学与临床的关系 1.血液学与疾病的关系 1）血液病合并非血液系统疾病 例如：骨髓瘤患者会因为肾衰竭就诊于肾病科；粒细胞缺乏症和白血病同时会出现严重喉头感染和水肿急诊入住五官科等等 2）非血液系统疾病合并血液病 许多非血液系统疾病都会有血液病的并发症：红细胞增高、贫血、白细胞减少等 3）血液制品的临床应用 例如：对于急性失血的患者输注全血、红细胞悬液或血浆等。 2.血液学与检验的关系 2014-10-31
第二章 造血与血细胞分化发育 第一节 造血器官与造血微环境 能够生成并支持造血细胞分化、发育、成熟的组织器官称为造血器官。造血器官生成各种血细胞的过程称为造血。 一、胚胎期造血器官 分三个期：中胚叶造血期（卵黄囊造血）、肝脏造血期、骨髓造血期 2014-10-31
血液检验 红细胞检验 （一）再生障碍性贫血（AA） 简称再障，是因为化学、物理、生物因素及不明原因使骨髓造血组织减少导致骨髓造血功能衰竭，引起外周血全血细胞减少的一组造血干细胞疾病。 特征是造血干细胞功能障碍和（或）造血微环境功能障碍，造血红髓被脂肪组织所替代（红髓脂肪变），导致全血细胞减少的一类贫血。临床表现为进行性贫血、出血和感染（伴发热），罕有淋巴结核肝脾肿大。 【分型】 国内根据其病程及临床表现和血象、骨髓象特征将AA分为急性和慢性。国外主要注重实验室特征，将AA依据严重程度分为重型（I 型、II 型）和轻型（I 型、II 型） ①急性AA：起病急、进展迅速、病程短。贫血呈进行性（加重），常伴有严重出血，出血部位广泛并常有内脏出血；半数病例起病时即有感染，严重者可并发败血症。治疗效果差，预后不佳，常在一年内死亡。此型又称重型再障- I 型。 ②慢性AA：起病缓慢、病程进展慢、病程较长（一般在4年以上）。以贫血为主，出血和感染较轻，经恰当的治疗，病情可缓解或治愈，预后较好。此型又称轻型再障。慢性AA病情恶化，血象和骨髓象转变为急性AA的表现，称为重型AA- II 型。 【检验】 1、血象：以全血细胞减少，网织红细胞绝对值降低为主要特征，三系减少的程度各病例有所不同。贫血多为正常细胞性，少数为轻、中度大细胞性。网织红细胞绝对值明显减少。各类白细胞都减少，其中以中性粒细胞减少尤为明显，而淋巴细胞比例相对增多
血小板不仅数量减少，而且体积小、颗粒减少。急性AA时，网织红细胞＜1%，绝对值＜15×10^9/L；中性粒细胞绝对值常＜0.5×10^9；血小板＜20×10^9/L；慢性再障血红蛋白下降速度较慢，网织红细胞、中性粒细胞和血小板减低，但各指标叫急性再障指标为高，达不到急性再障的程度。 2、骨髓象 ①.急性再障：红髓脂肪变是AA的特征性病理改变，骨髓涂片可见脂肪滴明显增多。多部位穿刺结果均显示有核细胞增生减低。造血细胞（粒/红/巨核系细胞）明显减少，早期阶段细胞减少或不见，巨核细胞减少或缺如，无明显的病态造血。非造血细胞（包括：淋巴/浆/肥大细胞等）相对增多，非造血细胞比例增高，大于50%，淋巴细胞比例可增高达80%。如有骨髓小粒，染色后镜下为空网状结构或为一团纵横交错的纤维网，其中造血细胞极少，大多为非造血细胞。 ②.慢性再障：病程中骨髓呈向心性损害，骨髓拥有代偿能力仍可有残存散在的增生灶，常因不同的穿刺部位，骨髓象表现不一致，需多部位穿刺或进行骨髓活检，才能获得较明确的诊断。多数患者骨髓增生减低，三系或两系减少，巨核细胞减少明显。非造血细胞比例增加，常＞50%。如穿刺到增生灶，骨髓可表现为增生良好，红系代偿性增生，以核高度固缩的“炭核”样晚幼红细胞多见，粒系减少，主要为晚期及成熟粒细胞。骨髓小粒中非造血细胞增加，以脂肪细胞较多见。
1蛋白C系统的组成包括：凝血高调节蛋白（TM）、蛋白C（PC）、蛋白S（PS）、内皮细胞蛋白C受体（EPCR） 2骨髓增殖性疾病包括：慢性粒细胞白血病，真性红细胞增多症、原发性血小板增多症，原发性骨髓纤维化 3血细胞化学染色的临床应用①辅助判断急性白血病的细胞类型。②辅助血液系统等疾病的诊断和鉴别诊断。③观察疾病疗效和判断预后，探讨发病机制。 4同时参与细胞抗凝与体液抗凝的因子有：AT-肝素，蛋白C系统，TFPI。 5骨髓检查诊断意见：肯定性诊断提示性诊断符合性诊断可疑性诊断排除性诊断形态学描写 6胚胎期造血可分为：中胚叶造血期，肝造血期,骨髓造血期. 出生后造血：骨髓，胸腺，脾，淋巴结 7各种血细胞都是起源于：造血干细胞 8判断骨髓增生程度一般均以有核细胞与成熟红细胞之比来进行。 9骨髓增生程度通常分成增生极度活跃,增生明显活跃,增生活跃,增生减低,增生极度减低五级。 10 FAB分类法将急性淋巴细胞白血病分为L1, L2, L3 11中性粒细胞的毒性变化常见：毒性颗粒，空泡形成，退行性变，大小不均，杜勒小体 12成熟红细胞染色异常有：卡波环，嗜碱性带奴才，豪焦小体 13 我国急性非淋巴细胞白血病分类法：M1急性髓系白血病未分化型，M2急性髓系白血病伴成熟型，M3急性早幼粒白血病，M4急性粒单核细胞白血病，M5急性单核细胞白血病，M6红白血病，M7急性巨核细胞白血病。 14 异性淋巴细胞：1浆细胞型,2单核细胞型3幼淋巴细胞型。 15骨髓检查诊断的肯定性诊断：白血病、巨幼细胞性贫血、多发性骨髓瘤、骨髓转移癌、戈谢病、尼曼--匹克病等. 16血小板的止血功能粘附功能，聚集功能，释放反应，凝血反应，促凝作用，血块收缩 # 17凝血因子：维生素K依赖的凝血因子：7，9，10。接触激活因子：，PK。促凝辅因子：5,8，vWF,HK 18细胞化学染色临床上常用于：①辅助判断急性白血病的细胞类型。②辅助血液系统等 疾病的诊断和鉴别诊断。③观察疾病疗效和预后。④发病机制的探讨 19贫血的分类：增生性贫血，增生不良性贫血，骨髓红系成熟障碍性贫血 Auer小体:是白血病细胞中的棒状小体。瑞氏染色呈紫红或红色，由嗜天青颗粒融合而 成，含核糖核酸及脂类，过氧化物酶阳性暗影。这种小体出现在急性粒细胞白血病、急 性单核细胞白血病等急非淋巴细胞白血病中，不出现在急性淋巴细胞白血病中，对急性 白血病的诊断及急性非淋巴细胞白血病的鉴别诊断具有重要意义。 白血病：是造血干细胞克隆性疾病，是白血病细胞异常增生，分化成熟障碍，并伴有凋 亡减少的一组高异质性的恶性血液病。 血栓形成：在某些因素的作用下，在活体的心脏或血管腔内，血液发生凝固或有沉积物 形成的过程。 DIC:弥散性血管内凝血是一种由于多种因素引起的机体微血管内广泛地发生凝血，伴以 继发性纤溶亢进的微血栓病性凝血障碍，为获得性全身性血栓-出血综合征。DIC是止血 病理生理改变的一个中间环节，其特点是体内血小板聚集，内外源凝血途径激活，病理 性凝血酶生成，纤维蛋白在微血管沉积，形成广泛性微血栓；消耗大量凝血因子和血小