果蔬中维生素C的提取和定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)

笑笑实验六果蔬维生素C(抗坏血酸)的测定(2,6二氯酚靛酚滴定法)实验六果蔬维生素C(抗坏血酸)的测定(2，6二氯酚靛酚滴定法) 一、实验目的与要求1 目的新鲜食品中的维生素C主要以还原型的形式存在，测定还原型维生素C 可以粗略了解该食品中维生素C的浓度。

2 要求掌握新鲜食品中的维生素C的常规化学测定方法。

二、实验原理还原型维生素C可以还原2，6二氯酚靛酚(蓝色)。

被测样品中维生素C含量与2，6二氯酚靛酚的量呈正比，且2，6二氯酚靛酚在酸性条件下呈粉红色。

当用2，6二氯酚靛酚标定样品溶液时，其终点为被测溶液呈粉红色。

CH2OH还原型维生素CCHHOCHOCHOCHOCO+OH2，6二氯酚靛酚(红色)NClOCl?CH2OH脱氢型维生素CCH2OH脱氢型维生素CCHOCHOCOCOCO+OH2，6二氯酚靛酚(蓝色)NHClOHCl三、实验仪器与试剂1 仪器(1) 公用仪器? 组织捣碎机1台;? 托盘天平1台;? 1000ml烧杯2个;? 250ml烧杯2个;? 20cm镊子1把;? 记号笔1~2个。

(2) 分组及仪器: 2人一组，每组仪器包括:? 100ml具塞量筒2个;? 10ml量筒1个;? 5ml移液管2根;? 酸式滴定管1个;? 50ml烧杯2个;? 50ml三角烧瓶4个;? 漏斗2个;? 漏斗架1个;? 滤纸2张;? 吸耳球1个;玻璃棒1个。

(所有仪器使用前清洗，烘干备用)2 试剂(1) 2，6二氯酚靛酚染料，配制成每毫升所含维生素C的毫克数(T值); (2) 2%草酸2000ml;(3) 1%草酸2000ml。

四、实验步骤1 取300~500g新鲜水果，置于1000ml烧杯内，称重，精确至0.01g。

2 将样品倒入组织捣碎机，加入等量2%草酸(W?V)，加盖旋紧，匀浆2~5min。

3 取出匀浆物质(以上统一进行)。

4 用50ml烧杯称取20g匀浆物质，精确度1%，编号，记录。

5 将称取的匀浆物质倒入具塞量筒，用1%草酸反复洗涤烧杯(3次)，其洗涤液倒入具塞量筒，并用1%草酸定容到100ml。

2,6-二氯酚靛酚滴定法定量测定维生素C目的和要求掌握2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法。

原理维生素C (Vc)又称抗坏血酸(ascorbic acid)。

最初于1928年从牛的肾上腺皮质中提取出结晶物，证明对治疗和预防坏血病有特殊功效。

氧化型2,6-二氯酚靛酚在酸性溶液中呈粉红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色，还原型2,6-二氯酚靛酚无色。

当用此染料滴定含有Vc的酸性溶液时，在Vc 未全部氧化前，滴下的染料立即被还原成无色；一旦溶淀中的Vc全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液显示粉红色，此时即为滴定终点，表示溶液中的Vc刚刚被氧化完全，从滴定时2,6一二氯酚靛酚标准液的消耗量，可以计算出被检物质中Vc的含量。

操作步骤1. 样液制备称取苹果和青椒各5g，分别加少量2%草酸(1%草酸因浓度太低而不能抑制抗坏血酸氧化酶作用)用研钵磨成浆，漏斗(+脱脂药棉)过滤，滤液转入25ml容量瓶后用2%草酸定容。

2. 标准液滴定准确吸取0.1mg/ml的标准抗坏血酸溶液各1.0ml，分置两个100ml锥形瓶中，加入1%草酸9.0ml，用微量滴定管以0.1%的2,6-二氯酚靛酚滴定至淡红色，并保持15s即为终点。

由所用染料的体积计算出T值(平均值)，即1ml染料相当于多少mg的Vc。

3. 样液滴定准确吸取已制备的样品滤液各两份，每份10.0ml分别放入两个100ml锥形瓶内，滴定方法同前注意：1. 滴定过程宜迅速，一般不超过2min，因为样品中某些杂质亦能还原二氯酚靛酚，尽管其还原能力较弱且还原速度较Vc更慢2. 滴定所用染料宜控制于1~4ml，如果样品含Vc含量过高/低，可酌量增/减样液3. 样品提取液应避免日光直射，否则会加速Vc氧化计算m = VT /m0 × 100式中m：100g样品中含Vc的质量(mg)V：滴定时所用去染料体积(ml)T：每毫升染料能氧化Vc质量数(mg/ml)m0：10ml样液含样品之质量数(g)试剂和器材试剂1. 2%草酸溶液：草酸2g溶于100ml蒸馏水中。

维生素C的定量测定维生素C的定量测定（2，6-二氯酚靛酚滴定法）一、实验目的：掌握2，6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C的原理和方法二、实验原理1、维生素c又称为抗坏血酸，其还原型能还原染料2，6-二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。

2、在酸性溶液中，2，6-二氯酚靛酚成红色，被还原后变为无色。

因此可用2，6-二氯酚靛酚滴定样品中含有的维生素C，当样品中的维生素C被完全氧化后，在滴加过量的2，6-二氯酚靛酚，溶液变为淡红色，即为终点。

3、如无其他杂质干扰，则样品液所还原的2，6-二氯酚靛酚的量与样品中所含有维生素C的量成正比。

三、实验仪器1、新鲜猕猴桃2、50ml容量瓶3、微量滴定装置4、100ml锥形瓶5、研钵6、漏斗7、吸管四、实验试剂1、2%草酸溶液：草酸2g，溶于100ml蒸馏水2、0.1%2，6-二氯酚靛酚溶液五、实验步骤1.样品中抗坏血酸的提取：1）将猕猴桃去皮，准确称取果肉5.090g，加2%草酸试剂10ml 置研钵中研成浆状；2）将浆状物倒入50ml容量瓶中，用2%草酸溶液稀释并定容，混匀，静止10分钟，过滤（最初数毫升滤液弃去），滤液备用。

2.滴定样品液的滴定：准确吸取滤液两份，每份10ml，分别放入两个100ml 锥形瓶中，用2，6-二氯酚靛酚滴定至淡红色。

滴定终点要保持15秒钟；六、实验结果：已知：1ml2，6-二氯酚靛酚染料相当于1毫克抗坏血酸初始读数/ml 最终读数/ml共用染液/ml抗坏血酸毫克数/mg10ml滤液平均含抗坏血/mg50ml滤液含抗坏血/mg滤液1 0.011 1.604 1.593 1.593 1.589 7.945 滤液2 0.048 1.633 1.585 1.585由上表可知5.090g猕猴桃果肉含7.945mg抗坏血酸素，则100g 猕猴桃果肉中含抗坏血酸素约156.090mg.七、实验结果分析与思考：1.2,6-二氯酚靛酚滴定法测定Vc含量的优缺点?优点：它具有简便易行、快速、比较准确等优点，适用于许多不同类型样品的分析。

至刻度，摇匀过滤。

3.2标准液滴定吸取l0mL滤液放人50mL锥形瓶中，用已标定过的2,6一
二氧靛酚溶液滴定，直至溶液呈粉红色15s不褪色为止。

取浸提液10mL作空白对
照，结果计算。

3.3 维生素C按以下公式计算:
（V-V0）×T×A
维生素 C ( mg/100 g)= ----------------------------×100%
W
式中:
V—滴定样液时消耗染料溶液的体积，mL。

V0—滴定空白时消耗染料溶液的体积，mL。

T—2, 6一二氯靛酚染料滴定度，mg/mL。

A—稀释倍数。

W—样品重量。

3.4平行测定的结果，用算术平均值表示，取三位有效数字，含量低的保留小数点后
两位数字。

3,5平行测定结果的相对相差，在维生素C含量大于20mg/l00g时，不得超过2%，
小于20mg /100g时，不得超过5%。

三、实验数据：
第一组第二组第三组组别
体积（ml）
V（滴定样液时消耗染料溶液的体积）ml
V0（滴定空白时消耗染料溶液的体积）ml
V-V0
(体积改变量)ml
100g橙子中Vc含量mg。

维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)一、目的要求:(1)学习并掌握用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。

(2)了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。

(3)熟悉微量滴定法的基本操作过程。

二、实验原理:维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。

维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病，因而维生素C又称为抗坏血酸。

水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源。

不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。

测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。

维生素C具有很强的还原性。

它可分为还原性和脱氢型。

金属铜和酶(抗坏血酸氧化酶)可以催化维生素C氧化为脱氢型。

2,6-二氯酚靛酚(DCPIP)是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。

抗坏血酸具有强还原性，能使2,6-二氯酚靛酚还原褪色，其反应如图:当用2,6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，滴下的2,6-二氯酚靛酚被还原成无色;当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2,6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现红色。

因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。

三、实验材料、主要仪器和试剂:1(实验材料:多种蔬果(西红柿、尖椒、绿豆芽等)2(主要仪器:(1)天平 (2)研钵1(3)容量瓶(50mL) (7)漏斗(4)刻度吸管(5mL，10mL) (8)脱脂纱布(9)滤纸 (5)锥形瓶(100mL)(6)微量滴定管(3mL)3(试剂:(1)2, HCl)标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸(应为洁白色，如变为黄色则不能用)(2 25mg，溶于25ml 4,HCl中，移入50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制，此溶液每ml 中含抗坏血酸0.5mg，。

实验八果蔬中维生‎素C的提取‎和定量测定‎（2,6-二氯酚靛酚‎滴定法）【原理】1.学习并掌握‎定量测定维‎生素C的原‎理和方法。

2.了解蔬菜、水果中维生‎素C含量情‎况。

维生素C是‎人类营养中‎最重要的维‎生素之一，缺少它时会‎产生坏血病‎，因此又称为‎抗坏血酸（ascor‎b ic acid）。

它对物质代‎谢的调节具‎有重要的作‎用。

近年来，发现它还有‎增强机体对‎肿瘤的抵抗‎力，并具有化学‎致癌物的阻‎断作用。

维生素C是‎不饱和多羟‎基物，属于水溶性‎维生素。

它分布很广‎，许多水果、蔬菜中的含‎量更为丰富‎。

维生素C具‎有很强的还‎原性。

还原型抗坏‎血酸能还原‎染料2,6-二氯酚靛酚‎（DCIP），本身则氧化‎为脱氢型。

在酸性溶液‎中，2,6-二氯酚靛酚‎呈红色，还原后变为‎无色。

因此，当用此染料‎滴定含有维‎生素C的酸‎性溶液时，维生素C尚‎未全部被氧‎化前，则滴下的染‎料立即被还‎原成无色。

一旦溶液中‎的维生素C‎已全部被氧‎化时，则滴下的染‎料立即使溶‎液变成粉红‎色。

所以，当溶液从无‎色变成微红‎色时即表示‎溶液中的维‎生素C刚刚‎全部被氧化‎，此时即为滴‎定终点。

如无其它杂‎质干扰，样品提取液‎所还原的标‎准染料量与‎样品中所含‎还原型抗坏‎血酸量成正‎比。

【试剂和器材‎】一、试剂2%草酸溶液: 草酸2g溶‎于100m‎L蒸馏水中‎。

1%草酸溶液: 草酸1g溶‎于100m‎L蒸馏水中‎。

标准抗坏血‎酸溶液（1mg/mL）: 准确称取1‎00mg纯‎抗坏血酸（应为洁白色‎，如变为黄色‎则不能用）溶于1%草酸溶液中‎，并稀释至1‎00mL，贮于棕色瓶‎中，冷藏。

最好临用前‎配制。

0.1% 2,6-二氯酚靛酚‎溶液: 250mg‎2,6-二氯酚靛酚‎溶于150‎m L含有5‎2mg NaHCO‎3的热水中‎，冷却后加水‎稀释至25‎0mL，贮于棕色瓶‎中冷藏（4℃）约可保存一‎周。

每次临用时‎，以标准抗坏‎血酸溶液标‎定。

实验八果蔬中维生素C的提取和定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）【原理】1.学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法。

2.了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。

维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbic acid）。

它对物质代谢的调节具有重要的作用。

近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有化学致癌物的阻断作用。

维生素C是不饱和多羟基物，属于水溶性维生素。

它分布很广，许多水果、蔬菜中的含量更为丰富。

维生素C具有很强的还原性。

还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCIP），本身则氧化为脱氢型。

在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。

因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。

一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。

所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。

如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。

【试剂和器材】一、试剂2%草酸溶液: 草酸2g溶于100mL蒸馏水中。

1%草酸溶液: 草酸1g溶于100mL蒸馏水中。

标准抗坏血酸溶液（1mg/mL）: 准确称取100mg纯抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）溶于1%草酸溶液中，并稀释至100mL，贮于棕色瓶中，冷藏。

最好临用前配制。

0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二氯酚靛酚溶于150mL含有52mg NaHCO3的热水中，冷却后加水稀释至250mL，贮于棕色瓶中冷藏（4℃）约可保存一周。

每次临用时，以标准抗坏血酸溶液标定。

二、材料：水果、蔬菜三、器材研钵，组织匀浆器，吸量管，抽滤设备，离心机，滤纸，容量瓶，滴定管，锥形瓶。

【操作方法】一、提取水洗干净待测的新鲜蔬菜或水果，用纱布或吸水纸吸干表面水分。

维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）一、目的要求:（1）学习并掌握用2，6—二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。

（2）了解蔬菜、水果中维生素C含量情况.（3）熟悉微量滴定法的基本操作过程。

二、实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一,它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性.维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病,因而维生素C又称为抗坏血酸.水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源.不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法,都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。

测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。

维生素C具有很强的还原性。

它可分为还原性和脱氢型。

金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶)可以催化维生素C氧化为脱氢型。

2，6-二氯酚靛酚(DCPIP）是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色,在酸性溶液中呈红色.抗坏血酸具有强还原性,能使2,6-二氯酚靛酚还原褪色，其反应如图：当用2,6—二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，滴下的2,6-二氯酚靛酚被还原成无色;当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2，6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现红色.因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。

三、实验材料、主要仪器和试剂:1．实验材料：多种蔬果（西红柿、尖椒、绿豆芽等）2．主要仪器:（1）天平（2）研钵（3）容量瓶（50mL) （4)刻度吸管(5mL，10mL) (5）锥形瓶(100mL）（6）微量滴定管(3mL) （7）漏斗（8)脱脂纱布(9）滤纸3．试剂：（1)2％ HCl（2）标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸(应为洁白色，如变为黄色则不能用）25mg,溶于25ml 4％HCl中，移入50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制,此溶液每ml 中含抗坏血酸0.5mg，.（3)0.01M 2，6－二氯酚靛酚准确称0。

实验三 维生素C 的定量测定（2，6-二氯靛酚滴定法）一、原理维生素c 又称为抗坏血酸，其还原型能还原染料2，6-二氯靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。

在酸性溶液中，2，6-二氯靛酚成红色，被还原后变为无色。

因此可用2，6-二氯靛酚滴定样品中含有的维生素C ，当样品中的维生素C 被完全还原后，在滴加过量的2，6-二氯靛酚，溶液变为淡红色，即为终点。

如无其他杂质干扰，则样品液所还原的2，6-二氯靛酚的量与样品中所含有维生素C 的量成正比。

二、 实验仪器新鲜水果、吸管、容量瓶、滴定装置、锥形瓶、研钵、漏斗三、实验试剂1、标准抗坏血酸溶液：准确称取50毫克纯抗坏血酸，溶于1%的草酸溶液中，并稀释至500毫升，即浓度为0.1mg/ml ，贮棕色瓶，冷藏保存，最好临用时配制。

2、2%草酸溶液：草酸2克，溶于100毫升蒸馏水中。

3、1%草酸溶液：1克草酸溶于100毫升的蒸馏水中。

4、0.01% 2,6-二氯酚靛溶液：溶50毫克2,6-二氯酚靛于300毫升含有104毫克 NaHCO 3的热水中，冷却后加水稀释至500毫升，滤去不溶物，贮于棕色瓶内。

（4℃约可保存1周）每次临用时以标准抗坏血酸溶液标定。

四、实验步骤（一）提取水洗净新鲜的蔬菜（水果），用吸水纸吸干表面水分，然后称取5克剪碎加2%的草酸5毫升，置研钵中研成浆，倒入100毫升的容量瓶内，用2%草酸洗涤数次，最后定容至刻度，充分混匀后过滤。

（二）滴定1、标定2，6-二氯酚靛酚溶液的浓度：量取标准抗坏血酸溶液1ml 和9ml 1%草酸于50ml 锥形瓶1中，同时量取10ml 1%草酸加入另一个50ml 锥形瓶2中作空白对照V 2，用已标定的2，6-二氯酚靛酚滴定至粉红色出现，15秒不退色。

记录所用的毫升数，计算每毫升2，6-二氯酚靛酚所能氧化抗坏血酸的毫克数（K ）。

2、样品的测定：取50ml 锥形瓶2个，分别加入滤液10ml （V 3），用已标定的2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至终点，以微红色能保持15秒不退色为止，整个滴定过程宜迅速，不宜超过2min ，记录两次滴定所得的结果，求平均值V 1。

实验十六维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）（1）学习并掌握用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。

（2）了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。

（3）熟悉微量滴定法的基本操作过程。

维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。

维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病，因而维生素C又称为抗坏血酸。

水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源。

不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。

测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。

维生素C具有很强的还原性。

它可分为还原性和脱氢型。

金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶）可以催化维生素C氧化为脱氢型。

2,6-二氯酚靛酚（DCPIP）是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。

抗坏血酸具有强还原性，能使2,6-二氯酚靛酚还原褪色，其反应如图：当用2,6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，滴下的2,6-二氯酚靛酚被还原成无色；当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2,6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现红色。

因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。

三、1．实验材料：多种蔬果（西红柿、尖椒、绿豆芽等）2．主要仪器：（1）天平（2）研钵1（3）容量瓶（50mL）（7）漏斗（4）刻度吸管（5mL，10mL）（8）脱脂纱布（9）滤纸（5）锥形瓶（100mL）（6）微量滴定管（3mL）3．试剂：（1）2％ HCl（2）标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）25mg，溶于25ml 4％HCl中，移入50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制，此溶液每ml 中含抗坏血酸0.5mg，。

[精品]2,6-二氯酚靛酚滴定法定量测定维生素C维生素C，也被称为抗坏血酸，是人体所需的一种重要营养物质，具有抗氧化、促进铁吸收等重要作用。

由于人体无法自行合成维生素C，因此需要从食物中摄取。

然而，维生素C很容易被氧化破坏，因此在分析检测过程中需要选择一种敏感、精确、简便的方法对维生素C进行定量分析。

2,6-二氯酚靛酚滴定法是一种广泛应用于维生素C分析的方法之一。

下面将介绍这种方法的原理和操作步骤。

原理：2,6-二氯酚靛酚是一种指示剂，可以在酸性条件下呈现红色，而在还原剂作用下会褪色。

维生素C是一种还原剂，可以将2,6-二氯酚靛酚还原成无色的还原物。

因此，在维生素C存在的条件下，将2,6-二氯酚靛酚逐滴加入已知浓度的维生素C溶液中，当维生素C 耗尽时，2,6-二氯酚靛酚不再被还原，呈现出由红色变为无色的转变。

在此过程中记录2,6-二氯酚靛酚的加入量即可计算维生素C的浓度。

操作步骤：1. 器材准备称取约100mg的2,6-二氯酚靛酚，加入100ml的95%乙醇中，摇匀即可得到表现绿色的溶液。

同时准备0.1mol/L的氢氧化钠溶液、2%的硫酸溶液，以及待测样品。

a. 将待测样品取约2g加入研钵中，加入10ml的2%的硫酸溶液，反复挥发至浓缩，使样品保持在干燥状态。

b. 加入20ml的去离子水，研钵放入热水浴中，加热溶解。

c. 实验设一个平衡水平标志线，定量转移10ml溶液到较大的滴定瓶中，加入几滴2,6-二氯酚靛酚溶液，搅拌均匀。

d. 向滴定瓶中逐滴加入氢氧化钠溶液至溶液呈深黄色，为初始色。

e. 开始滴定，滴定钠氢氧化溶液至溶液呈现红色，即为维生素C耗尽时，记录钠氢氧化溶液的滴定量。

f. 重复操作并求得平均数，计算维生素C浓度。

注意事项：1. 滴定瓶上方要留有足够的空间，以免在滴定时水溅出来。

2. 滴定时要缓慢滴加氢氧化钠溶液，以避免过量反应。

3. 滴定时要注意加入2,6-二氯酚靛酚溶液后，溶液会变为紫色，此时需要加入氢氧化钠溶液搅拌均匀使其还原为黄色，然后再开始滴定。

果蔬维生素C含量测定及其分析摘要本次实验我们测定了橘子中的维生素c含量，试验中，通过2,6-二氯酚靛酚对维生素C的滴定从而测定了橘子所含的维生素C含量，我们测得橘子的维C 的含量是20.46mg/100g，相对较低。

经查阅资料，讨论后发现维生素C在空气中易氧化，而且不同成熟程度、品种、新鲜程度、生长地、测定温度等客观因素也会对其有很大的影响。

一、前言实验目的：测定橘子中的维生素c含量，从而进行分析。

实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血病，因此又称为抗坏血酸（ascorbic acid）。

它对物质代谢的调节具有重要的作用。

近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有化学致癌物的阻断作用。

维生素C主要存在于新鲜水果及蔬菜中。

水果中以猕猴桃含量最多，在柠檬、桔子和橙子中含量也非常丰富；蔬菜以辣椒中的含量最丰富，在番茄、甘蓝、萝卜、青菜中含量也十分丰富，野生植物以刺梨中的含量最丰富，每100克中含2800毫克，有“维生素C王”之称。

维生素C为无色晶体，味酸，溶于水及乙醇，不耐热，在碱性溶液中极不稳定，日光照射后易被氧化破坏，有微量铜、铁等重金属离子存在时更易氧化分解，干燥条件下较为稳定。

故维生素C制剂应放在干燥、低温和避光处保存；在烹调蔬菜时，不宜烧煮过度并应避免接触碱和铜器。

维生素C具有很强的还原性。

它可分为还原性和脱氢型。

还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化为脱氢型。

在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。

因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。

一旦溶液中的维生素C已全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。

所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。

如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含还原型抗坏血酸量成正比。

实验六、维生素C的测定——2，6一二氯靛酚滴定法（1）原理还原型抗坏血酸可以还原染料2，6一二氯靛酚。

该染料在酸性溶液中是粉红色（在中性或碱性溶液中呈蓝色），被还原后颜色消失；还原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。

在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准染料液的量，与样品中抗坏血酸含量成正比。

（2）试剂①1%草酸溶液（m/V）②2%草酸溶液（m/V）③抗坏血酸标准溶液准确称取20mg抗坏血酸，溶于1%草酸溶液，并稀释至100ml，置冰箱中保存。

用时取出5ml，置于50ml容量瓶中，用1%草酸溶液定容，配成0.02mg／ml 的标准使用液。

标定吸取标准使用液 5ml于三角瓶中，加入6%碘化钾溶液 0.5ml、1%淀粉溶液 3滴，以 0.001mol/L碘酸钾标准溶液滴定，终点为淡蓝色。

计算 c＝088.021VV式中 c——抗坏血酸标准溶液的浓度，mg/ml；V1—一滴定时消耗0.001mol/L碘酸钾标准溶液的体积，ml；V2—一滴定时所取抗坏血酸的体积，ml；0.088—一1ml 0.001mol/L碘酸钾标准溶液相当于抗坏血酸的量，mg/ml④2，6-二氯靛酚溶液称取 2，6-二氯靛酚50mg，溶于200ml 含有 52mg碳酸氢钠的热水中，待冷，置于冰箱中过夜。

次日过滤于 250ml棕色容量瓶中，定容，在冰箱中保存。

每星期标定一次。

标定取 5ml已知浓度的抗坏血酸标准溶液，加入1%草酸溶液 5rnl，摇匀，用 2，6-二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色，在15s不褪色为终点。

计算：T＝21V Vc式中 T—一每毫升染料溶液相当于抗坏血酸的毫克数，mg/ml；c—一抗坏血酸的浓度，mg/ml；V1－一抗坏血酸标准溶液的体积，ml；V2——消耗2，6-二氯靛酚的体积，ml。

⑤ 0.000167mol／L碘酸钾标准溶液精确称取干燥的碘酸钾0.3567g，用水稀释至100ml，取出 lml，用水稀释至100ml，此溶液 lml相当于抗坏血酸 0.088mg。

果蔬维生素C的提取剂条件及含量比较李慧婧，苏 畅，马 锐（西北民族大学 实验教学部，甘肃兰州 730000）摘 要：目的：测定4种不同种类果蔬中的维生素C含量，比较不同提取剂条件对测定结果的影响。

方法：采用2,6-二氯靛酚钠滴定法测定不同果蔬中维生素C的含量。

结果：草酸、盐酸和醋酸均在浓度为2%时维生素C提取量最高，草酸的提取效果最佳；果蔬中维生素C的最佳提取温度为25 ℃。

最适提取条件下青椒、橘子、青提和上海青油菜的维生素C含量分别为58.87 mg/100 g、26.88 mg/100 g、15.36 mg/100 g、40.32 mg/100 g。

结论：2,6-二氯靛酚钠滴定法测定维生素C的含量具有终点易于判断、操作简便等优势，可作为测定不同果蔬中维生素C含量的方法。

关键词：维生素C；果蔬；2,6-二氯靛酚钠滴定法；提取剂Extraction Conditions and Content Comparison of Vitamin Cin Fruits and VegetablesLI Huijing, SU Chang, MA Rui(Experimental Teaching Department, Northwest Minzu University, Lanzhou 730000, China) Abstract: Objective: To determine the content of vitamin C in four different types of fruits and vegetables, and compare the effects of different extraction conditions on the determination results. Method: The content of vitamin C in different fruits and vegetables was determined using 2,6-dichloro indophenol sodium titration method. Result: When the concentration of oxalic acid, hydrochloric acid and acetic acid was 2%, the extraction amount of vitamin C was the highest, and the extraction effect of oxalic acid was the best; the optimal extraction temperature for vitamin C in fruits and vegetables is 25 ℃. The optimal extraction conditions for vitamin C in green pepper, orange, green extract, and Shanghai green rapeseed are 58.87 mg/100 g, 26.88 mg/100 g, 15.36 mg/100 g, and 40.32 mg/100 g, respectively. Conclusion: The 2,6-dichloro indophenol sodium titration method for determining the content of vitamin C has the advantages of easy endpoint determination and simple operation, and can be used as a method for determining the content of vitamin C in different fruits and vegetables.Keywords:vitamin C; fruits and vegetables; 2,6-dichlorophenol sodium titration; extractant维生素C是一种己糖醛基酸，具有抗坏血病的作用，故又称抗坏血酸，是一种小分子有机化合物，在新鲜蔬菜、水果中广泛存在。